Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia nowych pochodnych tiazolidymy o ogólnym wzorze 1, w którym Ar oznacza grupe 2-£urylowa, albo grupe femylowa, naftykawa lub pkydylowa, ewentualnie podstawiona jednym lub wieksza licz¬ ba takich podstawników jak atom chlorowca, gru¬ pa /Ci—C4/ alkilowa, grupa /Ci—C4/Halkoksylowa, grupa chlorowco-/Ci—C4/^alkoiksylowa, grupa dwu- lub trójdhlorowcometylowa, grupa hydroksylowa i^lub grupa nitrowa, albo grupa o wzorze 2, Y oznacza atom azotu lub grupe CH i Z oznacza grupe cyjanowa lub karbaimoilowa, gdy Y oznacza atom azotu, zas gdy Y oznacza grupe CH, wów¬ czas Z oznacza grupe nitrowa.Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wyna¬ lazku sa cennymi srodkami przeciwko wrzodom, a mianowicie, sa wysoce skuteczne przy traktowa¬ niu wrzodów zoladkowo-jelitowych i stanowia sub¬ stancje czynna wielce przydatnych srodków far¬ makologicznych. Ich znaczenie w lecznictwie jest basdzo duze, gdyz liczba ludzi cierpiacych na wrzody zoladka i dwunastnicy wzrasta stale i to zarówno w liczbach bezwzglednych, jak i wzgled¬ nych. Aczkolwiek liczne srodki farmakologiczne sa stosowane do zwalczania wrzodów, to jednak z grupy zwiazków 4,5-dihydrottazolowych dotych¬ czas jako majace dzialanie przeciwwrzodowe wy¬ mieniano jedynie 4-aryilo-4-hydroksy-4,5Hdihydro- tca&ole, znane z opisu patentowego St. Zj. Am. 10 15 20 25 30 nr 4143148, rózniace sie znacznie budowa od zwiazków o wzorze 1.Znane srodki ptflzeawwrzodowe róznia sie znacz¬ nie swym mechanianem dzialania. Ostatnio odkry¬ te zwiazki, bedace antagonistami receptorów Ht histaminy, takie jak cymetydyna, to jest N-cyja- nonN'-metylOnN"-2[/5-metylodmidazolilo-4/-metylo- tio]-etylotioguanidyna, tworza jednolita grupe i ce¬ chuje je to, ze selektywnie hamuja wydzielanie kwasu zoladkowego, powodowane przez histamine.Z trójpiersccentawych 6npirydCHfo3-b] [1,4] benzo- dwuazepiin znana jest pyrenzepina, to jest 5,1-di- hydro-11-[/4-metylo-l-piperazynylo/-acetylo]-6H-pi* rydo-fz,3-b] [1,4] benzodwuazepinon-6, jako srodek przeciwdzialajacy powstawaniu wrzodów w tafcto zakresie jak atropina, ale nie powodujacy innych objawów przeciwcholenergiiczDych, jak np. hamo¬ wania ruchu robaczkowego, zaburzen w akomoda- cji oka czy hamowania wydzielania sliny. Stoso¬ wane sa równiez srodki praeciwifcwaeowe, które nie hamuja nadmiernego wydzielania kwasu zo¬ ladkowego, a tylko wiaza nadmiar wydzielonego kwasu.Zwiazki o wyzej opisanym wzorze 1 maja sze¬ roki zakres dzialania, totez nadaja sie do zwalcza¬ nia wrzodów zoladkowo-jelitowych, wywolanych przez rózne dzialania chorobotwórcze, a miedzy in¬ nymi moga byc skutecznie stosowane przeciwko owrzodzeniom spowodowanym przez nie-steroido- we srodki przeciwzapaleniowe. 142 749142 749 3 Niektóre z tych zwiazków dzialajacych przeciw- wrzodowo, np. 3-benzylo-2-cyjanoiimiinotiazolidyna, maja poza tym te cenna zalete, ze w odróznieniu od wielu znanych antagonistów receptorów H2 hi¬ staminy nie zawieraja funkcjonalnych grup, z któ¬ rych w organizmie moglyby sie wytwarzac rako¬ twórcze zwiazki N-niitrozowe.Nowe zwiazki o wzorze 1 moga tez byc inaczej zaklasyfikowane zgodnie z chemiczna klasyfikacja.Wedlug nomenklatury z Chemical Absfiracts zwiaz¬ ki te moga byc uwazane za podstawione pochod¬ ne kwasu weglowego, np. za zwiazki cyjano-ami- dowe, moczniki i inne, zawierajace jako podstaw¬ nik .grupe heterocykliczna. Z drugiej zas strony, sa tez zwiazki, np. zwiazki zawierajace podstaw¬ nik =C—NO* w pozycji 2, w których grupa hete¬ rocykliczna powinna byc uwazana za podstawo¬ wy element strukturalny, do którego jest dolaczo¬ ny np. lancuch boczny jako podstawnik. W celu zachowania jednolitosci, wszystkie zwiazki o wzo¬ rze 1 sa ponizej okreslane jako pochodne tiazoli- dyny, z wyraznym wskazaniem nienasyconego cha¬ rakteru lancucha bocznego w pozycji 2, np. cy- janoimino-, nitirometyleno- itp.Cecha sposobu wedlug (wynalazku jest to, ze podstawiona przy atomie azotu pochodna 1-amino- tiolu-2 o wzorze 3, w którym Ar ma wyzej poda¬ ne znaczenie, poddaje sie reakcji ze zwiazkiem o wzorze 4, w którym Y i Z maja wyzej podane znaczenie, a L oznacza grupe ulegajaca odszcze- piieniiu, korzystnie grupe CHt-S-.Zgodnie ze sposobem wedlug wynalazku proces prowadzi sie w srodowisku rozpuszczalnika, przy czym postep reakcji mozna sledzic obserwujac wy¬ wiazywanie sie gazu. W zaleznosci od rozpuszczal¬ nosci skladników reakcji stosuje sie rózne roz¬ puszczalniki, korzystnie wode i ewentualnie wodne roztwory nizszych alkoholi, aceton, eter, acetóni- tryl, weglowodory lub chlorowane weglowodory.Temperatura reakcji moze sie zmieniac w szero* kich granicach, w zaleznosci od reagentów i roz¬ puszczalnika. W celu zapewnienia wlasciwej pred¬ kosci reakcji stosuje sie korzystnie temperature okolo 40—80°C. Produkt uboczny powstajacy w czasie reakcji zalezy od rodzaju grupy ulegajacej odszczepieniu i korzystnie jest nim metamotiol, który uchodzi z srodowiska reakcji w postaci opa¬ rów. Zadany produkt wyodrebnia sie z mieszani¬ ny reakcyjnej np. przez odsaczenie, gdy jest on produktem stalym, albo przez odparowanie mie¬ szaniny reakcyjnej.Drugorzedowe merkaptoalkilo^arylometyloaminy o wzorze 3, stosowane jako zwiazki wyjsciowe, mozna wytwarzac np. przez reakcje odpowiednie¬ go oksozwiazku (aldehyd lub keton) ze zwiazkiem l-aminotiolowym-2 i redukcje wytworzonej po¬ chodnej tiazolidyny za pomoca kompleksowego wo¬ dorku metalu (patrz J. Org. Chem. 27, 4712 (1963)).Korzystnym przedstawicielem zwiazków o wzo¬ rze 1 jest 3-benzylo-2-cyjanoiniincrtiazolina, zwana dalej zwiazkiem A.Ponizej podano wyniki prób przeprowadzonych z tym zwiazkiem, ale nalezy zaznaczyc, ze inne zwiazki o wzorze 1 wykazuja równiez silna akty¬ wnosc. 4 Dzialanie farmakologiczne nowych zwiazków wy¬ twarzanych sposobem wedlug wynalazku prowa¬ dzono nizej opisanymi metodami.Wrzód Shay'a. Metode te opisano pierwszy raz 5 w publikacji Shay'a i innych w roku 1945 (Ga- stroenterology 56, 5—13, 1945). Samice szczura H-Wistar (120—150 g) przeglodzono w ciagu 24 go¬ dzin, podajac im dowolna ilosc wody, po czym pod lekka narkoza eterowa podwiazywano im odz- io wiernik i podczas tej operacji podawano zwierze¬ tom badany lek. Po uplywie 4 godzin zabijano szczury zwiekszajac nadmiernie dawke eteru, wy¬ cinano zoladek i przecinano go wzdluz krzywizny, mierzono objetosc i wartosc pH tresci zoladko- 15 wej, a w niektórych przypadkach oznaczano przez miareczkowanie ilosc wytworzonego kwasu.Wrzód zoladka wywolany aspiryna. Wiadomo, ze niesteroidowe srodki przeciwzapalendowe wywoluja w pewnym stopniu owrzodzenie zoladkowo-jelito- 20 we {Drugs and Peptic Ulcer, Bd. Pfeiffer, CRC Press, Nowy Jork 1982).Do badania zwiazków o dzialaniu przeciwwrzo- dowym czesto stosuje sie próbe zwana próba z wrzodami wywolanymi przez aspiryne. Samice 25 szczura H-Wistar, wazace 120—150 g, przegladza sie w ciagu 24 godzin, umozliwiajac dowolne pi¬ cie wody.Wrzód zoladka wywoluje sie podajac doustnie aspiryne (w zawiesinie w Tween 80) w ilosci 30 100 mg/kg i równoczesnie podaje sie doustnie ba¬ dany srodek. Po uplywie 4 godzin od tego zabiegu zabija sie zwierzeta duza dawka eteru, wycina zo¬ ladek i przecina wzdluz duzej krzywizny. Tresc zoladka przemywa sie nieco i liczy krwotoczne 35 uszkodzenia powierzchni gruczolowej. Wyniki prób ustala sie liczac wrzody w 1 zoladku i zwierzeta nie majace wrzodów.Owrzodzenia jelitowe wywolywane przez indo- metacyne. Z grupy niesteroidowych srodków prze- 40 ciwzapaleniowyoh indometacyna ma jako ubocz¬ ne dzialanie nie tylko wywolywanie wrzodów zo*- ladka, ale moze tez powodowac powazne owrzo¬ dzenia jelitowe, przy czym, w zaleznosci od dawki, moga one miec skutki smiertelne, z powodu zapa- 45 lenia otrzewnej, wywolanego przedziurawieniem jelit. a) Smiertelne w skutkach owrzodzenia jelitowe, wywolane indometacyna.Nie przeglodzonym samicom szczura H-Wistar, 50 wazacym po 120—150 g, podaje sie doustnie imdo- metacyne (zawiesina w Tween 80) w dawkach 15 mg/kg, a nastepnie podaje sie doustnie zwierze¬ tom badane srodki. W tych warunkach, owrzodze¬ nie jelitowe mozna wykryc po uplywie okolo 55 43—72 godzin. Aby ocenic rozwój wrzodów jelito¬ wych stosuje sie tak zwana metode nadmuchiwa¬ nia, lOpracowana przez Ezer i Szporny {J. Phanm.Pharmacol. 27, 866, 1975).Metoda ta umozliwia jakosciowe sledzenie po^ 60 stepu powstawania wrzodów. Wytrzymalosc scian-r ki jelita na rozciaganie, [wyrazona w jednostkach cisnienia], maleje stopniowo w miare postepu owrzodzenia. b) Niesmiertelne w skutkach owrzodzenia jeli- 65 towe, wywolane idnometacyna.142 749 6 Szczurom H-Wistar, wazacym po 120—150 g, nie poddanym przeglodzendiu, podawano doustnie indo¬ metacyne w dawkach 7,5 mg/kg, w celu wywola¬ nia niesmiertelnego w skutkach owrzodzenia jeli¬ towego. Nastepnie, po uplywie, 4, 24 lub 48 godzin, szczurom podawano doustnie badany srodek i za¬ bijano zwierzeta po uplywie 24 godzin od ostat¬ niego zabiegu, to jesit po uplywie 72 godzin od po¬ dania indometacyny powodujacej owrzodzenia.Owrzodzenia oceniano metoda nadmuchiwania.Martwica zoladka wywolana absolutnym alko¬ holem. Metode te wprowadzil A. Robert (Gastro- enterology, 77, 433 (1979) razem z okresleniem „ochrona komórek". Samice szczura H-Wistar, wa¬ zace po 120—150 g, przegladza sie w ciagu 24 go¬ dzin, zezwalajac na dowolne picie wody. Badane zwiazki podaje sie doustnie 30 minut przed poda¬ niem przez rurke 0,5 ml absolutnego alkoholu na 100 g ciala. Po uplywie 2 godzin zwierzeta zabija sie duza dawka eteru, usuwa zoladki i otwiera je wzdluz glównej krzywizny. Uszkodzenia wywola¬ ne przez etanol wystepuja w korpusie zoladka w postaci licznych, liniowych pasm krwiotwórczych w martwiczej tkance. Dlugosc uszkodzen mierzy sie w milimetrach (Derelamko and Long, Proc.Soc. Exp. Biol. and Med. 166, 394 (1981)), okresla¬ jac przecietna dlugosc dla kazdego zoladka. Sto¬ pien ochrony komórek wyraza sie w procentach w porównaniu z próba kontrolna.Badania, prowadzone wyzej opisanymi metodami farmakologicznymi, wykazaly, ze 3-benzylo-2-cyja- noiminotiazolidyna (Zwiazek A), bedaca korzyst¬ nym przedstawicielem zwiazków o wzorze 1, wy¬ twarzanych zgodnie z wynalazkiem, dziala bardzo skutecznie przeciwko wrzodom, co potwierdzily wyniki kazdej z tych prób. Zwiazek ten hamuje wydzielanie kwasu zoladkowego u szczurów Shay podawany w malych dawkach i przy podawaniu dootrzewnowym ED60 = 5,3 rnglkg. Powstawanie wrzodów zoladka, wywolywanych przez aspiryne, •zwiazek A podawany równoczesnie doustnie zapo¬ biega równiez i ED50 = 2,1 mg/kg.Zwiazek A dziala tez skutecznie w próbie z martwica, wywolana przez alkohol absolutny, która to próbe wprowadzili niedawno Robert i wspólpracownicy (Gastroenteralogy, 77, 433—443 (19T9)). Nalezy w szczególnosci zaznaczyc, ze zwia¬ zek A, podawany równoczesnie z indometacyna, hamuje owrzodzenia jelitowe powodowane przez 10 15 20 25 35 40 45 indometacyne. Ma to szczególne znaczenie, ponie- wanz cymetydyna, bedaca jednym z najskuteczniej dzialajacych srodków przeciwko wrzodom, nie ha¬ muje owrzodzen jelitowych, powodowanych przez ten lek (Ezer and Szporny, J. Pharm. Pharmacol., 38, 250—251 (1981); Der Soldarto i inni, Brit.J. Pharmacol., 67, 33—37 (1977) i G. L. Kauffman i inni, Proc. Soc. Exp. Biol., 161, 512—514 (1970)).Potwierdzaja to badania kliniczne, przeprowa¬ dzone przez Mitchell i Sturrock (Brit. Med. J. 284, 731 (1982)), które wykazaly, ze wynikiem równo¬ czesnego podawania cymetydyny i indometacyny chorym cierpiacym na gosciec i równoczesnie owrzodzenia jelitowe sa przebicia jelit. Zwiazki przeciwcholenergiczne, np. Propanthelin i Gastri- xon, równiez nie zapobiegaja owrzodzeniom jelit, powodowanym przez indometacyne.Wyniki opisanych wyzej badan zestawiono w tablicach 1—6. Skróty stosowane w tych tablicach maja nastepujace znaczenie: n oznacza liczbe ba¬ danych zwierzat; cc. oznacza ciezar ciala zwie¬ rzecia; w.r oznacza wytrzymalosc na rozciaganie Dane zawarte w tablicy 1 wykazuja, ze zwiazek ma zalezne od wielkosci dawki dzialanie hamuja¬ ce proces wydzielania kwasu zoladkowego. Duze znaczenie ma fakt, ze zwiazek A skuitecznie ha¬ muje wydzielanie kwasu zoladkowego równiez wtedy, gdy jest podawany doustnie, jak to wyka¬ zuje próba ze szczurami Shay, której wyniki za¬ wiera tablica 2.Zwiazek A podawany równoczesnie z aspiryna hamuje, zaleznie od wielkosci .dawki, powstawanie owrzodzen pod wplywem aspiryny. Hamuje on równiez skutecznie wrzody zoladkowe, wywolane przez doustna dawke indometacyny 20 mgflgg. Wy¬ niki podano w tablicy 3. W tablicy 4 zilustrowano przeciwdzialanie smiertelnym owrzodzeniom jeli¬ towym, spowodowanym przez doustne podanie in¬ dometacyny w dawce 15 mgikg.Zwiazek A hamuje, zaleznie od wielkosci dawki, rozwój owrzodzen jelitowych, spowodowanych przez doustne podanie indometacyny w idawce 15 mg/kg.Duze znaczenie maja wyniki prób prowadzonych w przypadku tak zwanych modelowych, nie smier¬ telnych owrzodzen jelitowych. W próbach tych badany srodek podaje sie poczawszy od 4 godzin od wywolania lownzodzen przez doustne podanie indometacyny w ilosci 7,5 mg/kg. Badany zwiazek Tablica 1 Hamowanie wydzielania kwasu zoladkowego przez zwiazek A u szczurów Shay (podwiazanie odzwiernika: 4 godziny) Zabieg Próba kontrolna 1 Zwiazek A Zwiazek A Zwiazek A Zwiazek A t Zwiazek A n 20 5 10 10 20 5 Dawka dojeli- towa mg/kg 1,25 2,5 5,0 10,0 25,0 Wydzielanie kwasu [xmole HCl/ /100 g cc. 429 436 358 301 0 0 Zahamowanie % , 0 17 30 100 100 Uwagi ED50 = 5,3142 749 7 8 Tablica 2 Hamowanie wydzielania kwasu zoladkowego przez zwiazek A podawany róznymi drogami (Szczury Shay, 4 godziny) Droga podawania Dootrzewnowo, 15 minut przed | zabiegiem [ Podskórnie, 15 minut przed za- | biegiem 1 Doustnie, 15 minut przed za- f biegiem f Próba kontrol- | na n 5 5 5 5 Dawka mg/kg 10 10 10 — Wydzielanie kwasu zoladkowego | ml/100 cc. 2,5 2,8 2,3 4,3 hamowanie obj. 42% 35% 47% — Wartosc pH | 3,7 1,5 4,1 1 Tablica 3 Hamowanie wrzodów zoladka powodowanych przez aspiryne za pomoca równoczesnego podawania zwiazku A Zabieg Aspiryna (pró- 1 ba kontrolna) Aspiryna + + zwiazek A Aspiryna + + zwiazek A Aspiryna + [ + zwiazek A t Aspiryna + + zwiazek A [ Aspiryna + + zwiazek A n 20 10 17 17 14 17 Dawka doustna mg/kg 100 100+1,5 100+ 3,0 100+ 6,0 100+12,0 100+25,0 Liczba wrzodów na 1 zoladek 15,7+3,0 9,5** 6,8* 4,7* 2,2* i 2,3* Hamowanie owrzodzenia % 40 57 71 86 85 Zwierzeta wol¬ ne od wrzo¬ dów % 0 0 23 29 66 41 **) p < 0,05 ED50 -r- 2,1 *) P < 0,1 Tablica 4 Hamowanie przez zwiazek A podawany równoczesnie z indometacyna jelitowych owrzodzen, powodowanych przez indometacyne, w zaleznosci od wielkosci dawki zwiazku A.Zabieg | Nie traktowano Indometacyna Indometacy- cyna + zwia¬ zek A Indometacy¬ na + zwia¬ zek A Indometacy¬ na + zwia¬ zek A Indometacy- ca + cymety- dyna Indometacy¬ na + salicy¬ lan sodu Indometacy¬ na + salicylan sodu n 30 16 10 10 20 10 10 10 Dawka doustna mg/kg 15 15+15 15+25 15 + 50 15+150 15+25 15 +50 W.r. scianki jeli¬ towej w KPa po uplywie 72 go¬ dzin po zabiegu (231 +5)-0,13 (46+12)-0,13 (120+20) 0,13 (192+18) 0,13 (225+6) 0,13 (47+25)-0,13 (132+17) 0,13 (231+ 5) 0,13 Wytrzymalosc scianki jelitowej w % wytrzyma¬ losci normalnej 100 20 52 83* 97* 21 57* 100* Uwagi * p < 0,01 w odniesieniu 1 do grupy indo- l metacyny | ED100 = 50 i ED100 = 50 }142 749 10 Tablica 5 Rozwój powodowanych przez indometacyne niesmiertelnych owrzodzen jelitowych w przypadku pózniejszego podawania cymetydyny i zwiazku A Zabieg po uplywie 4,24 lub 48 godzin od podania indometa- cyny Zwierzeta nie poddane zabie¬ gom | Indometacyna | Indometacyna + cymetydyna | Indometacyna + cymetydyna | Indometacyna + zwiazek A | Indometacyna + zwiazek A n 30 32 12 12 10 10 Dawka doustna mg/kg 7,5 7,5+ 3x50 7,5+ 3x100 7,5+3x25 7,5+3x50 W.r. scianki jelitowej po uplywie 72 godzin od po¬ dania indometacyny KPa (231 + 5) 0,13 (185+11) 0,13 (184+7) • 0,13 (197+10) 0,13 (176+20) • 0,13 (249+4) • 0,13 = . Grupa A B C D F G A B B — — B c, G D, F P< N.S.P< 0,05 0,01 Tablica 6 Dzialanie zwiazku Zabieg | Próba kontrolna | Zwiazek A | Zwiazek A | Zwiazek A | Zwiazek A | Zwiazek A | Cymetydyna | Cymetydyna 1 Cymetydyna | Cymetydyna | Cymetydyna A jako chroniacego komórki przed martwica zoladka wywolana pod wplywem absolutnego alkoholu n 112 6 12 12 13 6 5 5 10 15 12 Dawka doustna mg/kg 1,5 3,0 6,0 12,0 25,0 6,0 12,0 25,0 50,0 100,0 Srednia dlugosc uszkodzenia mm/zoladek 82,4+5 52,5+19 34,8+10 29,9+9 1 32,9±5 18,0+8 46,0+10 63,0+18 55,0+12 34,0+10 47,0+16 Ochrona komó¬ rek % 37* 58* 64* 60* 78* 44* 24 33 59* J 43* Uwagi ED.0 = 2,8 EDB0 nie moi- 1 na obliczyc | *) p < 0,01 w stosunku do próby kontrolnej. podaje sie po uplywie 4, 24 i 48 godzin od po¬ dania indometacyny.Dane zawarte w tablicy 5 wykazuja, ze cymety¬ dyna jest w tej próbie bezskuteczna, natomiast zwiazek A moze w zaleznosci od jego dawki utrzymac nrmalna wytrzymalosc scianki jelitowej na rozerwanie.Zwiazek A jest skutecznym srodkiem takze i przeciw martwicy wywolanej przez absolutny alkohol. Dane w tablicy 6 swiadcza o tym, ze ta ochrona komórek zalezy od wielkosci dawki zwiaz¬ ku A.Wyniki badan farmakologicznych swiadcza o tym, ze zwiazek A dziala w szerszym zakresie niz np. cymetydyna. Mechanizm jego dzialania jest zlo¬ zony, czego dowdem jest fakt, ze dziala on sku¬ tecznie w przypadkiu 3 róznych typów wrzodów, które cechuja rózne mechanizmy chorobotwórcze, a mianowicie (1) w przypadku wrzodu zoladka wywolanego przez aspiryne, (2) w przypadku owrzodzen jelitowych spowodowanych przez indo- metacyne oraz (3) w przypadku martwicy zolad¬ kowej wywolanej przez absolutny alkohol.Zwiazek A podawany doustnie jest dobrze ab¬ sorbowany przez organizm, o czym swiadczy po- 45 50 55 równanie tych danych z odpowiednimi danymi dla podawania dootrzewnowego i podskórnego. Badania toksykologiczne zwiazku A wykazuja, ze ma on wysoki wskaznik leczniczy.Badania toksykologiczne. Zwiazek jest nieroz¬ puszczalny w wodzie, totez do podawania do- otrzewnego i doustnego stosuje sie go w postaci zawiesin w Tween 80, a do podawania dozylnego rozpuszcza sie go w dwumetyloformaimidzie. 1. Dawka zwiazku A 100 mg/kg powoduje obja¬ wy chorobowe u badanego zwierzecia, ale w ciagu 3 dni nie powoduje smierci. 2. Po podaniu 250 mg/kg nie zaobserwowano w ciagu 2 tygodni przypadku smiertelnego, nato¬ miast po podaniu 1500 mg/kg dcotrzewinowo smierc zwierzat nastapila w ciagu 30 minut. 3. Doustne podanie zwiazku A 1500 mg/kg spo¬ wodowalo w ciagu 24 godzin smierc 3 sposród 10 zwierzat, ale w ciagu nastepnego tygodnia nie zaobserwowano dalszych przypadków Smiertelnych i zwierzeta zachowywaly sie i pobieraly pozywie¬ nie normalnie.Wynalazek ilustruja nastepujace przyklady.Przyklad I. 3-benzylo-2-cyjanoiminotiazolfc dyna 2,21 g (13,2 inmola) N4)enzylocysteamMiy142 749 li 12 {temperatura wrzenia 90°C (27 Pa) i 1,93 g (13,5 mmola) estru dwiumetylowego kwasu cyjano- iminodwutioweglowego w 10 ml etanolu utrzymuje sie w stanie wrzenia, przy czym silne wydzielanie sie gazu ustaje po uplywie 15 minut. Mieszanine 5 utrzymuje sie w temperaturze 0°C w ciagu nocy i nastepnie odsacza, otrzymujac 2,57 g (89,fPk wy¬ dajnosci teoretycznej) zwiazku podanego w tytule o temperaturze topnienia 102—104°C.Analiza. Wzór CiiHnN,S (217,29) 10 •/ PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL PL