FI79843C

FI79843C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara tiazolidinderivat.

Info

Publication number: FI79843C
Application number: FI841066A
Authority: FI
Inventors: Elemer Ezer; Kalman Harsanyi; Gyoergy Domany; Laszlo Szporny; Judit Matuz; Katalin Pallagi; Istvan Szabadkai; Peter Tetenyi; Bela Hegedues
Original assignee: Richter Gedeon Vegyeszet
Priority date: 1983-03-16
Filing date: 1984-03-16
Publication date: 1990-03-12
Also published as: GB8406790D0; DK143284A; ES8604179A1; JPS59196877A; FR2542740A1; US4616025A; PT78260B; ES544286A0; IL71249A0; DK143284D0; DD216929A5; GR81883B; IL71249A; AU2583384A; PL142909B1; FR2542740B1; ZA841938B; SE455945B; NO841002L; NO162858B

Description

79843

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten tiatsoli-diinijohdannaisten valmistamiseksi Tämän keksinnön kohteena on menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten tiatsolidiinijohdannaisten valmistamiseksi. Etenkin keksinnön kohteena on uusien kaavan (I) ^CH2-Ar

-N

I

mukaisten tiatsolidiini-johdannaisten valmistaminen, jossa kaavassa

Ar merkitsee 2-furyylimetyyliryhmää, fenyyliryhmää tai halogeenilla tai hydroksyylillä ja/tai nitrolla tai Ci_4-alkoksilla tai Ci_4-alkyylillä substituoitua fenyyliä, Y on =N tai =CH ja Z edustaa nitroa tai syanoa, jolloin kun Y on =N niin Z on syano, ja kun Y on =CH niin Z on nitro.

Uudet yhdisteet ovat arvokkaita haavautumia ehkäiseviä aineita, so. erittäin tehokkaita hoidettaessa maha-suoli-haavautumia.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat terapeuttisesti hyvin tärkeitä, koska mahahaavasta ja pohjukaissuolihaavautumasta kärsivien ihmisten lukumäärä on jatkuvasti kasvamassa sekä absoluuttisissa että suhteellisissa suhteissa, vaikka on olemassa lukuisia farmaseuttisia koostumuksia, joita käytetään haavautumien terapiassa, 4,5-dihydrotiatsoleista tähän mennessä pelkästään 4-aryyli-4-hydroksi-4,5-dihydrotiatso-leilla (US-patenttijulkaisu 4,143,148), jotka rakenteellisesti olennaisesti poikkeavat esillä olevista yhdisteistä, on esitetty olevan haavaa ehkäisevä aktiivisuus.

2 79843

Mitä tulee niiden toimintamekanismiin, tunnetut haavaa ehkäisevät aineet ovat hyvin moninaisia. Äskettäin löydetyt histamiinin ^-antagonistit, kuten simetidiini (N-syano-N1-metyyli-N1'-2-[(5-metyyli-imidatsol-4-yyli)-metyylitio]-etyyli-guanidiini) muodostavat yhtenäisen ryhmän ja niille on tunnusomaista, että ne estävät histamiinin aiheuttaman vatsahapon erityksen selektiivisesti. Trisyklinen 6H-pyrido-[2,3-b][1,4]bentsidiatsepiineistä pirentsepiini, joka on (5,ll-dihydro-11-[(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-asetyyli]-6H-pyrido[2,3-b][1,4]bentsodiatsepiini-6-oni, on tullut tunnetuksi aineena, joka estää haavautuman muodostumisen samassa määrin kuin atropiini, mutta jolla ei ole muita antikoliner-gisiä vaikutuksia (esim. peristaltiikan esto, silmän akkomo-daatiohäiriöt, syljenerityksen esto). Yleiseen käyttöön on myös tullut erilaisia happoasitovia aineita, jotka eivät estä vatsahapon ylituotantoa vaan pikemminkin sitovat hapon ylimäärän.

Yllä määritellyillä kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on laaja aktiivisuusspektri ja tästä syystä ne sopivat sellaisten maha-suoli-haavautumien hoitoon, jotka ovat peräisin erilaisista tautimekanismeista ja mm. niitä voidaan käyttää onnistuneesti jopa sellaisten haavaumien hoidossa, jotka aiheutuvat ei-steroidaalisista anti-inflammatoorisista aineista. Näiden haavaumaa ehkäisevien yhdisteiden määrätyillä parhaimpina pidetyillä edustajilla, esim. 3-bentsyyli-2-sya-no-imino-tiatsoliinilla on edelleen se edullinen etu, että päinvastoin kuin tunnetut histamiinin H2-reseptoriantagonis-tit, ne eivät sisällä funktionaalista ryhmää, josta voisi muodostua ei-toivottuja karsinogeenisiä N-nitroso-yhdisteitä organismissa.

Keksinnön mukaisten uusien yhdisteiden kemialliselle luokitukselle on useita vaihtoehtoisia mahdollisuuksia. Chemical Abstract'in nimistön mukaisesti näiden yhdisteiden voidaan katsoa olevan substituoituja karboksyylihappojohdannaisia, esim. syaaniamidi-, urea- jne. yhdisteitä, jotka sisältävät 3 79843 heterosyklisen osan substituenttina. Toisaalta on olemassa yhdisteitä, esimerkiksi sellaiset, jotka sisältävät =C-NC>2-substituentin 2-asemassa, ja joissa heterosykliä tulisi pitää perusrakenne-elementtinä, johon esimerkiksi yllä mainittu sivuketju on liitetty substituenttina. Yhdenmukaisuuden vuoksi luokittelemme kaikki kaavan (I) mukaiset yhdisteet tiatsolidiini-johdannaiseksi, mikä selvästi osoittaa sivuketjun tyydyttämättömän luonteen 2-asemassa (esim. syaani-imino, nitrometyleeni jne.).

Edellä määritellyt kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa vaihtoehtoisilla menetelmillä: a) Kaavan (III) HS-CH2-CH2-NH-CH2-Ar (III) mukainen N-substituoitu l-amino-2-tioli-johdannainen, jossa Ar merkitsee samaa kuin yllä, saatetaan reagoimaan kaavan (IV) C = Y-Z (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, jossa kaavassa Y ja Z merkitsevät samaa kuin yllä, ja L on poistuva ryhmä, tai b) kaavan (V) -1 H _ _N, ’ I jl ( v )

H

mukainen 2-substituoitu tiatsolidiini-johdannainen, jossa kaavassa Y ja z merkitsevät samaa kuin yllä, N-alkyloidaan kaavan (VI) ----- L__ 4 79843

Ar-CH2-X ( Vi) mukaisella yhdisteellä, jossa kaavassa Ar merkitsee samaa kuin yllä, ja X on halogeeni tai reaktiivinen esteriryhmä, tai c) kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Y merkitsee typpeä, Z on syano ja Ar merkitsee samaa kuin yllä, kaavan (VII) /-CH2-Ar

-N

(VII)

\ l i H

mukainen yhdiste, jossa kaavassa Ar merkitsee samaa kuin yllä, saatetaan reagoimaan syaanin tai bromin kanssa.

Kaavan (I) mukaisessa yhdisteessä, jossa kaavassa Ar, Y ja Z merkitsevät samaa kuin yllä, voidaan edelleen jokin substi-tuentti muuntaa toiseksi substituentiksi tässä esitetyn määritelmän puitteissa sinänsä tunnetulla tavalla.

Keksinnön mukainen menetelmä a) suoritetaan liuottimien läsnäollessa, reaktion etenemistä voidaan tarkkailla valvomalla kaasunkehitystä.Liuottimena voidaan käyttää aina käytettyjen lähtöaineiden liukenevuuden mukaisesti sopivimmin vettä tai valinnaisesti alempien alkoholien vesiliuoksia, asetonia, eetteriä, asetonitriiliä, hiilivetyjä tai kloorattuja hiilivetyjä. Reaktiolämpötila voi vaihdella laajoissa rajoissa, ja se on lähtöaineiden ja käytetyn liuottimen funktio. Sopivan reaktionopeuden varmistamiseksi reaktio suoritetaan mieluummin noin 40 - 80eC:ssa. Reaktiossa muodostunut sivutuote riippuu lähtöryhmästä ja se on edullisesti metyylimerkaptaa-ni, joka poistuu reaktioseoksesta kaasuna, haluttu tuote voidaan helposti eristää reaktioseoksesta esim. suodattamalla, jos tuote kiteytyy, tai haihduttamalla reaktioseos.

5 79843 Lähtöaineena käytetyt kaavan (III) mukaiset sekundääriset merkaptoalkyyli-aryylimetyyli-amiinit voidaan valmistaa esimerkiksi saattamalla vastaava okso-yhdiste (aldehydi tai ketoni) reagoimaan l-amino-2-tioli-yhdisteen kanssa ja pelkistämällä saatu tiatsolidiini-johdannainen kompleksisella metallihydridillä (ks. J. Org. Chem. 27, 4712 (1963)).

Keksinnön mukainen menetelmä b) suoritetaan yleensä orgaanisessa liuottimessa, mieluummin metanolissa, etanolissa, asetonissa, eetterissä, esim. dioksaanissa tai asetonitriilis-sä, ja happoasitovana aineena voidaan käyttää esimerkiksi alkalimetallihydroksideja, -karbonaatteja tai -alkoholaatte-ja tai orgaanisia emäksiä, esimerkiksi kvartäärisiä am-moniumyhdisteitä. Reaktio suoritetaan yleensä käytetyn liuottimen kiehumispisteessä; saostuneen suolan suodattamisen jälkeen tuote eristetään kiteyttämällä tai haihduttamalla reaktioseos ja haluttaessa se alistetaan lisäpuhdistukseen tavanomaisilla menetelmillä.

Suoritettaessa keksinnön mukaista menetelmää c) kaavan (VII) mukainen lähtöyhdiste vapautetaan mieluummin tuoreeltaan sen happoadditiosuolasta, joka on vakaampi kuin vapaa emäs, ja orgaaniseen liuottimeen liuotettu emäs saatetaan reagoimaan bromisyaaniliuoksen kanssa, joka on valmistettu kaliumsyani-' din ja bromin vesipitoisesta liuoksesta välittömästi ennen reaktiota.

6 79843

Toisena esimerkkinä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden määrättyjen substituenttien muuntamiseksi toisiksi substituenteik-si mainittakoon Ar-ryhmän vaihtoehtoisten substituenttien muunto, joka suoritetaan tunnetuilla menetelmillä. Siten metoksiryhmä kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä, joissa Ar merkitsee nietoksilla substituoitua fenyyliryhmää, voidaan muuntaa hydroksyyliryhmäksi saattamalla yhdiste reagoimaan booritribromidin kanssa orgaanisessa liuottimessa ja alka-loimalla reaktioseos. Samoin hydroksyyliryhmä kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä voidaan muuntaa toisiksi substituen-teiksi yllä esitetyn määritelmän puitteissa tunnetuilla menetelmillä.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden eräs parhaimpana pidetty edustaja on 3-bentsyyli-2-syanoimino-tiatsolidiini (yhdiste A). Seuraavassa esitetään tulokset tällä yhdisteellä suoritetuista farmakologisista kokeista, mutta on kuitenkin huomattava, että muilla kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on myös merkittävä aktiivisuus.

Niinpä esimerkin 7 mukaisella yhdisteellä, 2-nitrometyleeni- 3-bentsyylitiatolidiinilla, on mahahapon eritystä estävä vaikutus pylorussidotuilla rotilla (ED50 21 mg/kg p.o.). Aspiriinin aiheuttamat haavautumat mahalaukussa voidaan estää annosriippuvasti (ED50 5,6 mg/kg p.o.). Yhdisteellä on edelleen pitkäaikainen solusuojavaikutus happaman etanolin aiheuttamia mahahaavautumia vastaan (tämä vaikutus on pitempi kuin aineiden PGF2 ja sukralfaatti solusuojavaikutus ) ja koirien kohdalla sen on todettu olevan tehokas ato-fäänin aiheuttamia mahahaavautumia vastaan. Äkillinen LD5Q-arvo: 1000 mg/kg p.o. rotilla.

Uusien yhdisteiden farmakologista aktiivisuutta tutkittiin seuraavilla menetelmillä: 7 79843 S hay-ha av auma

Menetelmän ovat esittäneet ensiksi Shay et ai. vuonna 1945 (Gastroenterology 5_6, 5-13, 1945). Naaraspuolisten H-Wistar-rottien (120-150 g) annettiin paastota 24 tuntia, vettä annettiin ad libitum. Eläinten pylorus (mahaportti) sidottiin kevyessä eetterinarkoosissa. Testilääkkeet annettiin leikkauksen aikana. 4 tuntia käsittelyn jälkeen eläimet tapettiin eetterin yliannoksella. Mahalaukku poistettiin ja leikattiin laajaa kaarretta pitkin. Sisältöjen tilavuus ja pH määriteltiin, määrätyissä tapauksissa HCl-tuotanto määritettiin titraamalla.

Aspiriinilla aiheutettu mahalaukun ulkus

On tunnettua, että ei-steroidaaliset anti-inflammatoriset aineet aiheuttavat maha-suoli-haavaumaa määrätyissä määrin (Drugs and Peptic Ulcer, Ed. Pfeiffer, CRC Press, New York, 1982). Haavaumaa estävien yhdisteiden testaamiseksi käytetään laajalti niin kutsuttua aspiriinilla aiheutettua haa-vaumamallia. Naaraspuolisten H-Wistar-rottien, jotka painoi-vat 120-150 g, annettiin paastota 24 tuntia. Vettä annettiin ad libitum. Mahalaukun haavauma saatiin aikaan antamalla oraalisesti 100 mg/kg Aspiriinia (Tween 80-suspensiossa). Testilääkkeet annettiin oraalisesti samanaikaisesti kuin aspiriini. Eläimet tapettiin eetterin yliannoksella 4 tuntia käsittelyn jälkeen. Mahalaukku poistettiin ja leikattiin laajaa kaarretta pitkin. Sisällöt pestiin hieman ja laskettiin hemorragiset vauriot rauhaspinnalla. Arvioitaessa testituloksia määritettiin haavaumien määrä mahalaukkua kohden tai haavaumasta vapaat eläimet.

Indometatsiinilla aiheutettu intestinaalinen haavautuma

Ei-steroidaalisista anti-inflammatorisista aineista indometatsiinilla ei ole ainoastaan mahahaavaa aikaansaava sivuvaikutus, vaan se voi aiheuttaa myös vakavaa suolen eli in- --— _ ® 79843 testinaalista haavautumista. Riippuen annoksesta intestinaa-linen haavautuminen voi olla kuolettava, intestinaalisen puhkeaman aiheuttama peritoniitti tappaa eläimet.

a) Indometatsiinilla aiheutettu kuolettava intestinaa-linen haavautuma

Paastoamattomia naaraspuolisia H-Wistar-rottia, jotka pai-noivat 120-150 g, käsiteltiin oraalisesti 15 mg/kg:n annoksella indometatsiinia (Tween 80-suspensiossa). Testimateri-aalit annettiin oraalisesti indometatsiinin antamisen jälkeen. Näissä olosuhteissa kestää noin noin 48 - 72 tuntia intestinaalisen haavautuman havaitsemiseksi.

Intestinaalisten haavaumien arvioimiseksi käytettiin niin kutsuttua pumppuamistekniikkaa (Ezer ja Szporny, J. Pharm. Pharmacol. 2^7 . 866 (1975 )). Tällä menetelmällä voidaan tarkkailla kvantitatiivisesti haavautumisnopeutta. Suolen seinämän vetolujuus ilmaistuna mmHg:nä heikkenee asteittain rinnan haavautumisnopeuden kanssa.

b) Indometatsiinilla aiheutettu ei kuolettava haavautuma

Paastoamattomille H-Wistar-rotille, jotka painoivat 120-150 g, annettiin oraalisesti 7,5 mg/kg indometatsiinia ei-kuolettavan intestinaalisen haavautuman aiheuttamiseksi.

4, 24 ja vastaavasti 48 tuntia indometatsiini-käsittelyn jälkeen eläimiä käsiteltiin oraalisesti testiaineella. Eläimet tapettiin 24 tuntia viimeisen käsittelyn jälkeen ja vastaavasti 72 tuntia indometatsiinilla suoritetun haavauman aiheuttamisen jälkeen. Haavautuminen arvioitiin pumppuamis-tekniikalla.

9 79843

Absoluuttisen alkoholin aiheuttama vatsakuolio Tämän menetelmän on ottanut käyttöön A. Robert (Gastroenterology, 77, 433 (1979)) yhdessä käsitteen solusuoja kanssa. Naaraspuolisten, H-Wistar-rottien, jotka painoivat 120-150 g, anneettiin paastota 24 tuntia. Vettä annettiin ad libitum. Testattavat yhdisteet annettiin oraalisesti, 30 minuuttia ennen kuin annettiin 0,5 ml/ruumiinpainon 100 g kanyylillä. Kaksi tuntia myöhemmin eläimet tapettiin eetterin yliannostuksella. Mahalaukut poistettiin ja avattiin suurta kaarretta pitkin. Etanolin aiheuttamat vauriot sijaitsivat mahalaukun rungossa moninkertaisina lineaarisina hemorragi-sina kuoliokudoksen kaistoina. Vaurioiden pituudet mitattiin millimetreinä (Derelanko ja Long, Proc. Soc. Exp. Biol. and med. 166, 394 (1981)), ja keskimääräisten vaurioiden pituus mahalaukkua kohden esitettiin. Solusuojan määrä ilmaistiin %:eina suhteessa kontrolliin.

Yllä esitetyillä farmakologisilla menetelmillä suoritetut tutkimuksemme osoittivat, että 3-bentsyyli-2-syaani-imino-tiatsolidiini (yhdiste A), joka on parhaimpana pidetty edustaja keksinnön mukaisista kaavan (I) yhdisteistä, osoittautui hyvin tehokkaaksi haavaumaa estäväksi yhdisteeksi jokaisessa farmakologisessa testissä. Tämä yhdiste estää vatsahapon erityksen Shay-rotissa alhaisella annoksella (ED50) = 5,3 mg/kg ip.). Aspiriinilla aiheutetut mahalaukun ulkukset estettiin myös yhdisteellä A, joka annettiin samanaikaisesti per os (ED50 = 2,1 mg/kg po.). Yhdiste A on tehokas myös absoluuttisen alkoholin kuoliotestissä, jonka ovat äskettäin ottaneet käyttöön Robert et ai (Gastroenterology ΊΊ_, 433-443 (1979)). On erityisesti huomattava, että yhdisteen A samanaikainen antaminen estää indometatsiinilla aiheutetun suolen haavautumisen. Tämä tulos on tärkeä, koska simetidiini, joka on eräs tehokkaimmista haavaumaa ehkäisevistä aineista, ei voi estää indometatsiinin aiheuttamaa intestinaalista suolihaavautumaa (Ezer ja Szporny, J. Pharm. Pharmacol. 33, 250-251 (1981); Der Soldato et ai, Brit. J. Pharmacol. 67, ------ L_______ ίο 79843 33-37 (1979); G.L. Kauffman et al, Proc. Soc. Exp. Biol.

161, 512-14 (1970). Tätä tukevat Mitchellin ja Sturrockin kliiniset tulokset (Brit. Med. J. 284, 731 (1982)), jotka osoittivat, että simetidiinin ja indometatsiinin samanaikainen antaminen aiheutti puhkeamia reumaattisissa potilaissa, joilla oli samanaikaisesti haavautumista. Antikolinergiset yhdisteet (esim. Propanthelin, Gastrixon) eivät voi myöskään estää indometatsiinin aiheuttamia intestinaalisia haavautu--mia.

Yllä olevien tutkimusten tulokset on esitetty taulukoissa 1-7. Otsikoissa käytetään seuraavia lyhennelmiä: n = testieläinten määrä b.w. = ruumiin paino t.s. = vetolujuus 11 79843 ro m • Il e O o 3 m a q w <T3 0C w 03 4-> <D ΙΟ-Γ'ΟΟΟ in tn in i-i ro o o

en W ·· H H

•H C» 4-1 0

M

>1 S

3 Λ X1 en tr in tn 3 >43 4J - 4-10

3 03 -HiH

-¾ ·-< •H jj Q3rH (JIIDOOHÖÖ (O e OU es ro m o > 3 Pfr Tf «sr ro ro rH 4J ft :o3 3ft

O > «r a O

a :3 £ a 4J ·· a in to

X 0) 4J

D C

<£ :3 O

Eh 4J T3 O) ft >i in ft jj in •h 3 in ft m U U O in in o o o <U o e tn i - * - - ^ r-ι c.a H (N in o m

C >, <C\ ft CN

O ft ir

ft - E

(0 a (0 in 4J e o m o o o m

3 (N Η H (N

> < c >1 -h <<<;<;<

a) ft rH

a; a) I—I o) n) m (u cu

4J 4J O4J4J4J-U+J

in -P p in in in in in

-rH ft 4j -rH -H -H -rH -H

Ό in C 3 3 3 3 3 .C :3 0£43i:££ >4 a «> > > >H >4 12 79843

UO X

K

Oi ro rH ^ I—ι O

tn x >i en X φ df> dP <#>

-ρ n in f' I

ρ · ·** ro tn n) x 3 ·Ρ -Ρ C pi 3 Ο

M CU

•Ρ rt ·

to χ S

> rt tn χι

:rt X

> m :rt > σ' -P O in oo ro ro tn o *· - » «.

Φ rP (M CM (N

\ trt rp

-H E

tn >1

-P

··—l ρ Φ tn en ~ o λ;

e ro e \ O O O I

cno-p e tr x x x

a mj < E

O rt e ί<ί X 3 ^ rt 4-1 3 tn X 4-1 ^ !3 rt e m in in un <C > *· &4 X__ C rt · · 4-i cu υ · co · · o 0) ρ -p tn · <u i a 4-) >i rt rt tn rt -P +j rt •p x tn en x rti en 3 3 tn x rt rt 3 >ι rt

M M

e -ρ ·ρ ϋ 3 φ φ ·ρ X X X φ

Φ X

e cc e <D Φ e rt e e Φ

C C C

:rt Φ a> e -ρ x φ x •ρ φ · · x ai -ρ e e e o x X ·ρ ·ρ -ρ p o E ε E 4-> •ρ x e

P e tn in in O

W <C i—I X i—I

13 79843 +j

tO

<0 a to 4-) > φ tn B oonmtod 3 t4 <#> cn cn o h>

.V :t0 rH rH

D 0) c d)

P O

L0 OJ I OhrMDtn :t0 3 to c#> h· in oo oo r4 Λί α>

ιΗ I—I

:t0 D

e ω

rH O

Qi \ P

4-1 :t0 Λί ro 4-J :t0 M \

•h E 3 +) X W W

to (0 X X X X X

:t0 c h r-' in äo r- <n ro λ; tu to 4J .c m eri m -o· cn cn O cn nj <h p p e ω .x \ (D r—( :t0 D »4 mc m o o o o 0) »»·».*» O -i-i h n to ts in

XS O HtN

Xh i> D 3 to O' + + + + + P (0 O M · D jC C \ O oooooo < to c cn · oooooo

E-h jC H H I—Ir-li—I I—I

(0 I—! e

CN

C

0) C oor^r^Tj-r- II

*1 1 <0 CN r—t f—( r—I I—I ι—I

3 o 4-) :t0 in

4-) »H Q

α> -π w 4-id) -><<<<«;

3d) -H

d>4-> h a; m © m a)

.C CO H +) 4J 4J 4J 4J

•P *H o ID tn tfl <0 ID

3 03 >4 -Η -Η ·γ4 ·γ4 **4

.C OOOOOO

(0 >i 033333 rH O 1>1 ϊ>( N in

ι-H C M OH

Η -H >1 --+ + + + + - -

G (0 rH O O

PM d) cccccc

PM 4-> -P -P -P -P -P -H V V

4 Λ) 4-> 14 4 4 4 4 4 h e ·ρ ·ρ ή ή ή ·η ·ρ a a ac to a a a a a a

tn -h :3 to to to to to tn XX

r<>4 x; <<<<<<; x '4 79843

H (O O O

o cn l c in m • *· tn to :tö S o Q) -u :to n n O V Q) a) £ 3 Qi + £ X O o K \ x o >1 o o

X 3 03 )H H I—I

(0 C ·Η q q

•h G w H

cn >1 >i to

C > C (D :t0 -H

in + d) •H cn ·· w \ \

H (I) # X X X X

03 * OO m ro H C^ o

(0 G O (N in 00 On CN in O

G C H rH H

ή :(0 H 4J g Id en :t0 to

d) C E

4-1 -H H

C <D 0 to h m C

4-1 cn a)

W C

* in >i

0 3 H

C 3 d) C '1 i 4-4 :(0 (0 C 3 + in

0) r—I Ή CO

C < cn Otn·· m cn o oo ie m r- in

<D -H4-):t0Cn rH CN H CN H

in :tC r—I d) * ffi

ή 4-4 (0>S -H-H -H +1 -H -H -H -H

£ 4-) (0 (0 E

3d) GC-H (—I id O CN in C-~ CN H

4-)4-) *H :t0 4-) C Η Ν' CN CTl Γ4 Η* ro cn

3in + E C d> cn I—I I—I CN) ι-H CN

(0 -H cn :c0 3 0) > Ό d) C 4-) *

(OX 4-) Ή i—I

(0 >1 C d) CN :<0 X h en r- -n

•H

G 4-1 Φ in en d) o •Hen in m o m m o n* h h cn cn HNitiH (N in (0 G O * · 0(0.* G\0 in + + ++ + + N3 C -H C cn · I Ή fc<-H(0 <CSD< in in m in m in

O 4-) G rH I—I rH I—! I—I rH

1-4 cn (0

d cd E

< +(0 E-tcen c ovo oooooo

•H rn ,—I Hi—I CN I—li—I H

(0 e en h

3 en e I I

+ 01 <C < < < η >ι ΪΗ CL) (0 h cn cn

+ + 0) ¢) 0) φ Ό H H

3+ 4-)++ + -H H H

d)d) cncncntn+(0(0 X e -h h h h d) in in

•h c Ό ΌΌΌ g I I

(003 XXXX-HtOdJ

en 23 2

03 O

I—) + ++ + + + + + h cn e *H d) :0 Ή H ·Η ·ιΗ -H H H Ή

G +GCCCGGCC

•H G ϊ(0 H H Ή H H -H **H Ή

H QJ £ H *»H -H -H ·ιΗ "H ·Η *H

en e >i (Dcncncncnincntncn (0 *H H i—I 03 (0 (0(0(0(0(0 (0 + 03 d) d) + + + + + + + + d)> + +0)0) <U <U 4) 0) 0) H Q) h g3 + + ε ε εεεεε+ε+ O Cu h h 00 00000+0 + no-h en en Ό3 Ό OOTJOO (0¾ 0)

G H :rd «CC CCGCCtOCoJ

HU fai b<3 H H ΗΜΗΗΗΗΗΗ 15 79843 fΟ t(0 CO E _

c w 43 < (OUDfcO

d> d) >1 w tn « P Λί .H 3 tö (0

(0 CU I

C tö O C

•P 44 Ό >1

44 C »H

WC I -P d) 0) >i C 3 44 44 i—I (U rP to -P ~

Cd) 1» Ο'Η ·Η tJl •p v -h 4-> +) m te 4-1 r-ι d) e :tc g C -p to > 3 M 1 (0 W (0 44 -P w >!t0 CC C LT) rH Γ- O O P-

tö X -P t(0 <N -P C rP r-t (N

4-) -P 4-> £ r- -P Q)

4J ^ WttO en (U -H +I-H-H-H-H

d) rP d) C W t0 M

rH :t0 4-)-P3-PrP rH 1Π H* VD (H

0 *n Cd)3d):<0 ro co co cr> r-' n·

3 H 0) -Γ-l g ·η CM rPrPrPrPCM

M C

P e <D d) d) o o m o ^4-) in o cm Ln

• W rH

O *p

• Ό X X X X

CU 43 en m >i 0Λί· mennen en C \ O in O .X <0 C tn · l *+ + + + x; \ -n < E a t- X5 Cji in in in in O g C * *· *· ‘ j -p r—- r— r~— t— tCD m e

<0 ·> -P

E-tt"--P C O CM CM CM C) O

Ό mmrPrHrHfP

C 4-> -P -P

3d) CC

4-i £ -P -P *£ <3

d) *P *P *P

4->W ΌΌ d) d) in rH

3 -P -p 4J 4-) o o d)w I p p tn tn - 43 >i -P d) d) -P -P o o p P äo e 6 g Ό Ό

(0 -p ·*Τ -P C P ·Ρ £ £ V en V

43 -P d) 4P W W >1 >i · tod) 'Wd) :to az a PX H· (d X g + + + + rP CM 4-) rH to

*P C d) ttO 4-) ·Ρ ·Ρ ·Ρ "P *P

Cd) - £ -rn 4-) CCCCC

•p en o :t0 -p -h -p ·ρ -p p *p 'O C £ ·ρ ·ρ "P *p *p tn£ >i e >i dJtntncncnw cp

eO 3 H'PH fp tOtOtOtOtO

44 44 d)d> d) P P P P P P

<1)3 4Pt04P 4Jd)d)d)d)d)d) o gtö PPP 4J £ £ £ £ £ £ O > p Pp -p -P 0 O O O O *·

T3 <0 tn C tn tn ttO Ό Ό Ό Ό Ό CQUO

CtO :<0 3 :t0 :<0 rH C C C C C Iti M 43 Xi 44 .X X5 Q) H M M H M <CQffl --- L- η 79843 in oo (0 nj * i—I in

<N W

Ή -M

II QJ > * 3

£ O OC

O m me 3 Q DO) 33 W W Λί

C

•H

t—! o rtj X ·π 0 0 WWW w

-¾ 3- X X X X X X XX

Ή Me#3 IMD^'OCO'f'fn ®r<i ifl 3--- 1/1¾1

r-H

c o 0) U3 in

•H

hj 4-1 ~ 3 c in 3 3 0 3Λ! rH in 3ϋ Ο -h 4-> 3 muioounoooooiN oio

m ϊίΰ -H (¾ »—I r-H I—H r~H f-H t—I r-H

X Vh ti,—i

<3 :r3 (Tj -H-H-H-H-HHH-H-H-H-H-H

:ifl C _c vd inc g o id srmoooooooo oo 3 (3 *H -H £ - — O -O cö .X e \ Noi^oMNcoionin X3 3 4-> ai 3 £ ιοιηιηΜΠιΗ^ιοιη oa ^

x: M tn ai 3 S

CO -H (0 X5 > ^ C

it3 ^ Ή 13 > Ή

<C ITj r-H

E-l C -H rH

(1) in O

co VH

-HO 4J

> e c h Mi m en o

•H Q) o -X · M

-cc e \ o inooooooo oo X O C oi · I *»··-»»>».* - - (0 O Or <£Oi r-HroommiocMinoo in +j ft H IN r-H IN m o in

O id r-H <D

Vh .C (D

Qr (0 H-) Öin iNioiNCNroioininoincN £3 -O-C C I—|r—It—It—I I—I r—I I—I 3 >i <0 I—I in in >

iH

^r HJ -H -H -H -H -H O

fö c c c c c

C £ >1 -H <C <<;<!< -H -H -H -H -H O

3) Π3 r—H t—l -Η -Η Ή -Η -H

01-C <D ΗΦΟΙΟΟΟΌΙΟΌΌΌ V

-C -C H-l o -C -C -C -C -C -H -H -H -H -H

m3 4-) VHinintnintn4-»4-)4->4->4-) 0< Ή Ο -H 4-) -Η -Η -Η -Η -H 3) (1) Ο 0) (ΙΪ Ό X m cDflODtl E E g ££

X -H :irj O X X X X X -H -H -H -H -H

>-)<o x; x;>H>H>H>H>Hcnc/3cn wco X

17 79843

Taulukon 1 arvot osoittivat, että yhdisteillä A on annoksesta riippuvainen vatsahapon eritystä vähentävä vaikutus. On hyvin tärkeää, että yhdiste A estää tehokkaasti vatsahapon erityksen myös silloin, kun sitä annetaan oraalisesti, kuten on esitetty Shay-rotilla saaduilla arvoilla ja esitetty taulukossa 2.

Yhdiste A estää aspiriinin aiheuttaman mahahaavan muodostumisen samanaikaisesti annettuna riippuen käytettävästä annoksesta. Samoin estetään tehokkaasti mahahaavat, jotka on aiheutettu antamalla 20 mg/kg oraalisesti indometatsiinia. Tulokset on esitetty taulukossa 3.

Taulukossa 4 on esitetty yhdisteen A kyky estää oraalisesti annetun indometatsiinin (15 mg/kg) aiheuttamaa kuolettavaa intestinaalista haavautumista.

Yhdiste A osoittaa annoksesta riippuvaista estovaikutusta intestinaaliseen haavautumiseen, joka on aiheutettu indome-tatsiinilla (15 mg/kg p.o.). Niin kutsutussa ei-kuolettavan intestinaalisen haavautumisen mallissa saatuja tuloksia on pidettävä erittäin tärkeinä. Näissä tutkimuksissa käsittely aloitettiin 4 tuntia sen jälkeen, kun indometatsiinilla (7,5 mg/kg p.o.) oli aiheutettu haavautuma. Siten jälkikäsittely suoritetaan 4, 24 ja 48 tuntia indometatsiinikäsittelyn jälkeen. Taulukon 5 arvot osoittavat, että simetidiini ja ranitidiini ovat tehottomia tässä kokeessa, kun taas yhdiste A voi normalisoida intestinaalisen seinämän vetolujuuden riippuen käytetystä annoksesta.

Yhdiste A on tehokas myös absoluuttisen alkoholin aiheuttamaa vatsakuoliota vastaan. Taulukossa 6 esitettyjen arvojen mukaisesti solusuoja on annoksesta riippuvainen.

Farmakologisten arvojen perusteella yhdisteellä A on laajempi aktiivisuusspektri kuin esimerkiksi simetidiinillä. Sillä on yhdistetty toimintamekanismi, jonka osoittaa se seikka.

---—--- - l. _ ____ ie 79843 että tämä yhdiste on tehokas kolmessa erilaisessa haavautu-mismallissa, jotka ovat tunnusomaisia kolmelle täysin erilaiselle tautimekanismille: (1) aspiriinin aiheuttama mahahaava, (2) indometatsiinin aiheuttama suolihaavautuman malli, (3) absoluuttisen alkoholin aiheuttama vatsakuolion malli.

yhdisteellä A on hyvä oraalinen absorptio, kuten on esitetty i.p.-, s.c.- ja p.o.-arvojen vertailulla.

Ensimmäisten toksikologisten tutkimusten mukaisesti yhdisteellä A on korkea terapeuttinen indeksi.

Toksikologiset tutkimukset

Yhdiste A on veteen liukenematon, mistä syystä käytettiin i.p.- ja oraaliseen antoon tämän yhdisteen Tween 80:ssa olevaa suspensiota. Intravenöösistä antoa varten yhdiste liuotettiin dimetyyliformamidiin.

1. 100 mg/kg:n annos tuotti testieläinten sairastumisen, mutta ne eivät kuolleet (3 päivän aikana).

2. 250 mg/kg:n annoksen jälkeen mitään kuolleisuutta ei havaittu 2 viikon aikana, kun taas 1500 mg/kg:n i.p. annoksen jälkeen eläimet kuolivat 30 minuutissa.

3. 1500 mg/kg:n oraalinen annos aiheutti kolmen eläimen kuoleman 10 eläimestä 24 tunnin kuluessa, muita kuolemia ei todettu seuraavalla viikolla, eläinten käyttäytyminen ja ruuan kulutus oli normaali.

Keksinnön muita yksityiskohtia havainnollistetaan seuraavil-la esimerkeillä, jotka eivät rajoita keksinnön laajuutta.

Esimerkki 1 3-bentsyyli-2-syaani-imino-tiatsolidiini a) kiehuvaan seokseen, jossa on 1,27 g (10 mmoolia) 2-syaani-imino-tiatsolidiiniä (2-tiatsolidinylideenisyaani- 19 79843 amidi), 25 ml asetonia ja 1,52 g vedetöntä kaliumkarbonaattia, lisätään tipoittain 1,3 ml (11 mmoolia) bentsyylibromi-dia. Seosta keitetään 4 tuntia, suola suodatetaan pois ja asetoniliuos haihdutetaan. Kiteinen jäännös trituroidaan eetterillä ja suodatetaan, jolloin saadaan 2,03 g (93,5 %) otsikkoyhdistettä, joka sulaa 102 - 104°C:ssa. Tuotteen uudelleenkiteytys ei muuta sulamispistettä.

Analyysi yhdisteelle C11H11N3S (217,29): laskettu: C 60,80, H 5,10, N 19,34, S 14,76 %; löydetty: C 60,98, H 5,02, N 19,57, S 14,96 %.

IR spektri (kBr): 2190 cm-1 -C=N

1570 cm-1 =C=N- (leveä) NMR spektri (CDC13): 3,38 ppm m(2) -S-CH2- 3,85 ppm m(2) =N-CH2~ (heterosyklinen) 4,65 ppm S(2) =N-CH2~ (fenyyli)

7,38 ppm S(5) -Ar-H

b) 2,21 g (13,2 mmoolia) N-bentsyylikysteamiinia (kiehumispiste: 90 ®C/0,2 mmHg) ja 1,93 g (13,5 mmoolia) syaani-iminoditiokarboksyylihappo-dimetyyliesteriä keitetään 10 ml:ssa etanolia. Voimakas kaasunkehitys päättyy 15 minuutissa. Seos pidetään yön yli 0°C:ssa ja sen jälkeen se suodatetaan, jolloin saadaan 2,57 g (89,6 %) otsikkoyhdistettä, jolla on sama sulamispiste ja spektriarvot kuin kohdassa a). Tuote, kun se sekoitetaan vaiheen a) tuotteen kanssa, ei laske sulamispistettä, ja näitä kahta tuotetta ei voida erottaa kerroskromatografiällä. Siten kahdella erilaisella menetelmällä valmistetulla tuotteella molemmissa on bentsyyliryhmä endosyklisessa typessä.

c) 2 ml:aan bromia lisätään 1 ml vettä voimakkaasti sekoittaen ja jäähdyttäen suolajäällä, kunnes syntyy ruskea väri. Saatuun bromisyaaniliuokseen lisätään liuos, joka on valmistettu uuttamalla emäksen vesiliuos, joka on vapautettu 6,37 20 79843 g:sta (23,33 mmoolia) 3-bentsyyli-2-iminotiatsolidiini-hydrobromidia 30 ml:11a 10 %:sta natriumhydroksiliuosta, kloroformilla. Kaksifaasista reaktioseosta sekoitetaan 10 tuntia, faasit erotetaan, orgaaninen faasi haihdutetaan, jäännös kiinteytetään sekoittamalla siihen eetteriä ja kiinteää raakatuotetta keitetään etyyliasetaatin kanssa. Tuloksena 3-bentsyyli-2-syaani-imino-tiatsolidiini liukenee. Etyyliasetaattiliuos haihdutetaan osittain, jolloin saadaan kiteinen tuote. Saadaan 1,75 g (35 %) 3-bentsyyli-2-syaani-imino-tiatsolidiinia, joka sulaa 100-101°C:ssa. Aine, joka pysyy liukenemattomana raa'an tuotteen etyyliasetaattiuutta-misen ajan, on varsinaisesti 3-bentsyyli-2-imino-tiatsoli-diini-lähtömateriaalin hydrobromidi (1,97 g; 32,34 %).

Lähtömateriaalina käytetty 3-bentsyyli-2-imino-tiatsolidii-ni-hydrobromidi (sulamispiste 190-191°C) valmistetaan saattamalla 2-aminotiatsolidiini reagoimaan bentsyylibromidin kanssa asetonitriilissä.

Esimerkki 2 2-syaani-imino-3-(4-klooribentsyyli)-tiatsolidiini 3,82 g (30 mmoolia) 2-syaani-imino-tiatsolidiiniä, 4,9 g (30 mmoolia) 4-klooribentsyylikloridia ja 4,3 g vedetöntä kaliumkarbonaattia keitetään 100 ml:ssa asetonia 5 tuntia. Epäorgaaninen suola suodatetaan pois ja asetoninen liuos haihdutetaan. Jäännös kiteytetään 40 ml:ssa isopropanolia, jolloin saadaan 6,26 g (83 %) 2-syaani-imino-3-(4-kloori-bentsyyli)-tiatsolidiiniä, joka sulaa 131-133°C:ssa. Tuote eristetään suodattamalla.

Analyysi yhdisteelle C11H10ClN3S (251,74): laskettu: C 52,48 %, H 4,00 %, N 16,69 %; löydetty: C 52,72 %, H 4,18 %, N 16,49 %.

IR spektri (KBr): 2185 cm-1 -C=N

1560 cm"1 =C=N-1092 cm-1 -Ar-cl 21 79843 NMR spektri (CDC13 + DMSO-de) 3,3 ppm m(2) -S-CH2- 3,8 ppm m(2) =N-CH2 (hetero- sykli) 4,50 ppm S(2) =N-CH2-(C6H4-C1) 7,12 ppm S(4) - Ar-H.

Esimerkki 3 2-syaani-imino-3-(3,4-diklooribentsyyli)-tiatsolidiini 3,82 g (30 mrnoolia) 2-syaani-imino-tiatsolidiinia saatetaan reagoimaan 3,4-diklooribentsyylikloridin (6 g, 31 mrnoolia) kanssa edellisessä esimerkissä esitetyllä tavalla, ja haihdutus jäännös kiteytetään uudelleen 50 mlrsta etanolia, jolloin saadaan 6,8 g 2-syaani-imino-3-(3,4-diklooribentsyyli)-tiatsolidiiniä,joka sulaa l30-132°C:ssa.

Analyysi yhdisteelle CxiHgCl2N3S (286,18) laskettu: C 46,16 %, H 3,17 %, S 11,21 %; löydetty: C 46,12 %, H 3,18 %, S 11,22 %.

IR spektri (KBr): 2190 cm-1 1570 cm-1 =C=N-1060 cm-1 -Ar-Cl NMR spektri (CDCl3): 3,4 ppm m(2) -S-CH2_ 3,7 ppm m(2) =N-CH2- (heterosyklinen) 4,56 ppm s(2) =n-CH2-(3,4-dikloori- fenyyli) 6,9-7,5 ppm m(3) -Ar-H.

Esimerkki 4 2-syaani-imino-3-(4-nitrobentsyyli)-tiatsolidiini 2,54 g (20 mrnoolia) 2-syaani-imino-tiatsolidiinia, 3,43 g nitro-bentsyylikloridia ja 2,95 g vedetöntä kaliumkarbonaattia saatetaan keitetään 80 ml:ssa asetonia 6 tuntia. Muodostunut suola suodatetaan pois, liuos haihdutetaan ja jään- 22 79843 nös kiteytetään 30 ml:sta asetonitriiliä. Saadaan 3,66 g (70 %) 2-syaani-imino-3-(4-nitrofenyyli)-tiatsolidiiniä, joka sulaa 171°C:ssa.

Analyysi yhdisteelle C11H10N4O2S (262,29): laskettu: C 50,37 %, H 3,84 %, N 21,36 %; löydetty: C 50,36 %, H 3,94 %, N 21,46 %.

IR spektri (KBr): 2190 cm-1 -C^N

1575 cm"1 =C=N-1505, 1343 cm-1 -NO2 NMR spektri (CDCI3 + DMSO-dg): 3,4 ppm m(2) -S-CH2- 3,8 ppm m(2) =N-CH2~ 4,65 ppm s(2) =N-CH2-CgH4~p-N02 7,35 ppm d (2) -Ar-H (2,6) 8,05 pprn d (2) -Ar-H (3,5)

Esimerkki 5 2-syaani-imino-3-(2-hydroksyyli-5-nitrobentsyyli)-tiatsoli-diini 3,82 g.(30 mmoolia) 2-syaani-imino-tiatsolidiiniä, 5,63 g (30 mmoolia) 2-hydroksi-5-nitro-bentsyylikloridia ja 4,3 g vedetöntä kaliumkarbonaattia keitetään 100 ml:ssa asetonia 6 tuntia, seos jäähdytetään ja sakka suodatetaan pois. Saadaan 9,85 g raakaa tuotetta, joka liuotetaan sitten 600 ml:aan kuumaa vettä, epäpuhtaudet suodatetaan pois, pH säädetään arvoon 3, seos jäähdytetään, suodatetaan ja sakka kuivataan. Saadaan 5,1 g 2-syaani-imino-3-(2-hydroksi-5-nitrobentsyy-li)-tiatsolidiiniä, joka sulaa 253-255°C:ssa pyridiinistä suoritetun kiteytyksen jälkeen.

Analyysi yhdisteelle C11H10N4O3S (278,29): laskettu: C 47,47 %, H 3,62 %, N 20,13 %; löydetty: C 47,78 %, H 3,71 %, N 20,01 %.

23 79843

IR spektri (KBr): 3100 cm-1 (leveä) -OH

2190 cm-1 -C=N-1575 cm-1 =C=N-1522, 1338 cm-1 -N02 NMR spektri (CDC13 + DMSO-dg): 3,4 ppm m(2) -S-CH2- 3,8 ppm m(2) =N-CH2 (hetero- syklinen) 4,54 ppm s(2) =N-CH2-(2-OH, 5-N02- -c6h3) 6,88 ppm t(l) -Ar-H(3) 8,00 ppm m(2) -Ar-H(4,6) 5-9 ppm b(1) -OH.

Esimerkki 6 2-syaani-imino-3-(3-hydroksibentsyyli)-tiatsolidiini 3,82 g (30 moolia) 2-syaani-imino-tiatsolidiinia, 7,10 g (30 mmoolia) m-kresyyli-bromidiasetaattia ja 4,30 g vedetöntä kaliumkarbonaattia keitetään 100 mlrssa asetonia 6 tuntia. Sakka suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan kuiviin. Saadaan 8,75 g öljyistä ainetta, joka hydrolysoidaan 50 ml:11a 2 N natriumhydroksidia fenyyliesteriryhmän poistamiseksi. Tehtäessä jälleen happameksi öljyinen tuote saostuu ja se kiteytetään uudelleen asetonitriilistä ja tämän jälkeen 50 %:sesta asetonista, jolloin saadaan 1,98 g 2-syaani-imino-3-(3-hydroksibentsyyli)-tiatsoliiniä, joka sulaa 126-128eC:ssa.

Analyysi yhdisteelle C11H11N3OS (233,29) laskettu: C 56,63 %, H 4,75 %, S 13,75 %, N 18,02 %; löydetty: C 56,70 %, H 5,07 %, S 13,75 %, N 17,83 %.

IR spektri (KBr): 3260, 1230 cm-1 -OH

2190 cm-1 -C=N 1570 cm-1 =C=N- --—--- - L..

2* 79843 NMR spektri (CDC13 + DMSO-d6): 3,3 ppm m(2) -S-CH2- 3,7 ppm m(2) =N-CH2-(hetero- syklinen) 4,48 ppm s(2) =N-CH2-(hydrok- sifenyyli)

6,5-7,4 ppm m(4) -Ar-H

8,6 b(1) -OH.

Esimerkki 7 3-bentsyyli-2-nitrometyleeni-tiatsolidiini 3,34 g (20 mmoolia) N-bentsyyli-kysteamiinia ja 3,3 g 1,1-bis-metyylitio -2-nitro-etyleeniä keitetään palautus-jäähdyttäen 50 ml:ssa etanolia tunnin ajan. Kaasun kehitys päättyy 20 minuuttia kestävän keittämisen jälkeen. Seos jäähdytetään ja saostunut tuote eristetään suodattamalla. Saadaan 4,52 g 3-bentsyyli-2-nitrometyleeni-tiatsoliinia, joka sulaa 136-138eC:ssa. Tuotteen kiteytys 140 ml:sta etanolia tuottaa 4,08 g puhdistettua tuotetta, joka sulaa 139°C:ssa.

Analyysi yhdisteelle CnH12N2°2s (236,30): laskettu: C 55,91 %, H 5,12 %, N 11,86 %; löydetty: C 55,81 %, H 4,99 %, N 11,89 %.

IR spektri (KBr): 1633 cm-1 =C=C= 1535, 1354 cm"1 -N02 NMR spektri (CDCl3): 3,1 ppm t -S-CH2- 3,8 ppm t =N-CH2- (heterosyklinen) 4,43 ppm s =N-CH2-(C6H5) 6,97 ppm s -CH=

7,0-7,3 ppm m -Ar-H

25 79843

Esimerkki 8 2-syaani-imino-3-(4-metoksibentsyyli)-tiatsolidiini 3,65 g (23,5 mmoolia) syaani-imino-ditiokarboksyylihappo-metyyliesteriä (puhtaus: 94 %) ja 5,91 g (30 mmoolia) N-(4-metoksibentsyyli)-kysteamiinia keitetään 30 ml:ssa etanolia, kunnes metyylimerkaptaanin kehitys päättyy. Reaktioseos haihdutetaan ja kiteinen jäännös kiteytetään uudelleen 15 mlrsta isopropanolia. Saadaan 5,35 g (92 %) 2-syaani-imino-3-(4-metoksibentsyyli)-tiatsoliiniä, joka sulaa 99-102°C:ssa.

Analyysi yhdisteelle C12H13N3OS (247,31): laskettu: C 58,28 %, H 5,30 %; löydetty: C 58,35 %, H 5,17 %.

IR spektri (KBr): 2840 cm-1 -O-CH3

2185 cm-1 -C=N

1570 cm-1 =C=N- 1608, 814 cm-1 -Ar NMR spektri (CDCI3): 3,3 ppm m -S-CH2- 3,7 ppm m =N-CH2~ 3,75 ppm s -O-CH3 4,43 ppm s =N-CH2-C6H5)

6,9 ppm q -Ar-H

N-(4-metoksibentsyyli)-kysteamiini, jota käytettiin lähtöaineena, valmistetaan saattamalla 4-metoksibentsaldehydi reagoimaan kysteamiinin kanssa ja pelkistämällä 2-(4-metoksi-fenyyli)-tiatsolidiini (sp. 93-94eC isopropanolista suoritetun kiteyttämisen jälkeen), joka on saatu boorihydrin kanssa isopropanolissa (J. Org. Chem. 2_7, 4712 (1962)).

N-(4-metoksibentsyyli)-kysteamiini on öljy, joka kiehuu 120-125°C:ssa/0,4 mmHg.

-- L_ 26 79843

Esimerkki 9 2-syaani-imino-3-(2-furyylimetyyli)-tiatsolidiini 1,82 g (11,8 mmoolia) syaani-imino-ditiokarboksyylihappo-dimetyyliesteriä (puhtaus: 94 %) ja 2,36 g (15 mmoolia) N-(2-furyylimetyyli)-kysteamiinia keitetään palautusjäähdyt-täen 20 mlrssa metanolia 2 tuntia (metyylimerkaptaanin kehitys päättyy 70 minuutin kuluttua). Reaktioseos haihdutetaan ja kiinteä jäännös kiteytetään 8 ml:sta isopropanolia. Saadaan 1,98 g (87,5 %) otsikkoyhdistettä, joka sulaa 124-125 °C:ssa.

Analyysi yhdisteelle C9H9N3OS (207,25): laskettu: N 20,28 %, S 15,47 %; löydetty: N 20,38 %, S 15,44 %.

IR spektri (KBr): 2185 cm-1 -C=N

1570 cm-1 =C=N-1238 cm-1 =C-0-C=

795 cm-1 -Ar-H

NMR spektri (CDCl3): 3,3 ppm m -S-CH2- 3,7 ppm m =N-CH2~(heterosyk- linen) 4,57 ppm S =N-CH2“Ar

6.3 ppm d -Ar(3,4)H

7.3 ppm m -Ar(5)H

N-2-(furyylimetyyli)-kysteamiini on valmistettu esimerkissä 8 esitetyn menetelmän mukaisesti pelkistämällä 2-(2-furyyli)-tiatsolidiini natriumborohydridillä. Kiehumispiste: 72-75°C/0,3 mmHg.

27 7 9 8 4 3

Esimerkki 10 2-syaani-imino-3-(4-metyylibentsyyli)-tiatsolidiini 3,65 g (23,5 mmoolia) syaani-imino-ditiokarboksyylihappodi-metyyliesteriä (puhtaus: 94 %) ja 5,43 g (30 mmoolia) N-(4-metyylibentsyyli)-kysteamiinia keitetään 30 ml:ssa etanolia, kunnes metyylimerkaptaanin kehitys päättyy (noin 2 tuntia). Reaktioseos haihdutetaan ja kiteinen jäännös kiteytetään uudelleen 6 mlrsta isopropanolia. Saadaan 4,65 g (85,5 %) 2-syaani-imino-N-(4-metyylibentsyyli)-tiatsolidii-niä, joka sulaa 102-104°C:ssa.

Analyysi yhdisteelle C12H13N3S (231,31): laskettu: C 62,26%, H 5,66%, N 13,85%; löydetty: C 62,16%, H 5,52%, N 13,96%.

IR spektri (KBr): 2190 cm"1 -C=N

1590 cm-1 =C=N- 1260 cm-1 -S-CH2- 792 cm-1 -Ar NMR spektri (CDCI3): 2,31 ppm s -CH3- 3,3 ppm m -S-CH2- 3,7 ppm m =N-CH2~(heterosyklinen) 4,54 ppm s =N-CH2~(fenyleeni)

7,10 ppm s -Ar-H

N-metyylibentsyyli)-kysteamiini, jota käytetään lähtömateriaalina, valmistetaan julkaisun J. Org. Chem. 27, 4712 (1962) mukaisesti: 2-(4-metyylifenyyli)-tiatsolidiini (sp. 92-93°C isopropanolista suoritetun uudelleenkiteyttämisen jälkeen), joka on saatu saattamalla 4-metyylibentsaldehydi reagoimaan kysteamiinin kanssa, pelkistetään natriumborohydridillä isopropanolissa. N-(4-metyylibentsyyli)-kysteamiini on öljyinen tuote, jonka kiehumispiste on 96-98°C/0,2 mmHg.

____ - l 28 79843

Esimerkki 11 3-(2-furyylimetyyli)-2-nitrometyleeni-tiatsolidiini 3,82 g (24,3 mmoolia) N-(2-furyylimetyyli)-kysteamiinia ja 4 g (24,2 mmoolia) 1,l-bis-metyylitio-2-nitroetyleeniä keitetään 80 mlrssa etanolia 1½ tuntia (kaasun kehitys päättyy noin puolessa tunnissa). Reaktioseoksen annetaan seistä jääkaapissa yön yli, minkä jälkeen saostunut tuote eristetään. Saadaan 4,76 g (86,7 %) 3-(2-furyylimetyyli)-2-nitrometylee-ni-tiatsolidiiniä, joka sulaa nitrometaanista suoritetun uu-deleenkiteyttämisen jälkeen.

IR spektri (KBr): 1543, 1340 cm'1 -NO2 1640 cm-1 =C=C=

3130, 757 cm-1 furaani =C-H

1243, cm-1 =C-0-C= furaanirengas NMR spektri (CDCI3): 3,7 ppm t -S-CH2- 4.6 ppm t -N-CH2- 5.7 ppm s >N-CH2-(C4H3O) 6,3 ppm b =CH-N02

6.5 ppm m furaani 3,4 H

7.5 ppm n furaani 5 H

Esimerkki 12 2-syaani-imino-3-(4-hydroksibentsyyli)-tiatsolidiini 0,49 g (2 mmoolia) 2-syaani-imino-3-(4-metoksibentsyyli)-tiatsolidiiniä liuotetaan 12 ml:aan dikloorimetaania ja siihen lisätään tipoittain argonilmakehässa liuos, jossa on 3,01 g (1,14 ml, 13 mmoolia) booritribromidia 5 ml:ssa dikloorimetaania. Seosta sekoitetaan 12 tuntia ja sitten se alkaloidaan ammoniumhydroksidin vesiliuoksella sekoittaen ja jäähdyttäen. Faasit erotetaan ja orgaaninen faasi haihdutetaan. Saadaan 0,22 g 2-syaani-imino-3-(4-hydroksibentsyyli)-tiatsolidiiniä valkoisessa kiteisessä muodossa, sp. 175-177 °C.

29 79843

IR spektri (KBr): 2190 cm-1 -C^N

1570 cm-1 =C=N-

3210 cm-1 -OH

1610, 840 cm-1 -Ar NMR spektri (CDC13): 3,4 ppm m -S-CH2- 3,7 ppm m =N-CH2~ 4,5 ppm s -Ar-CH2“

6,9 ppm q -Ar-H

9,47 ppm s -CH

Claims

1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan (I) ^Η2-Αγ -N (I) mukaisten tiatsolidiinijohdannaisten valmistamiseksi, jossa kaavassa Ar merkitsee 2-furyylimetyyliryhmää, fenyyliryhmää tai halogeenilla tai hydroksyylillä ja/tai nitrolla tai Ci_4-alkoksilla tai C]._4-alkyylillä substituoitua fenyyliä, Y on =N tai =CH ja Z edustaa nitroa tai syanoa, jolloin kun Y on =N niin Z on syano, ja kun Y on =CH niin Z on nitro, tunnettu siitä, että a) kaavan (III) HS-CH2-CH2-NH-CH2-Ar (III) mukainen N-substituoitu l-amino-2-tiolijohdannainen, jossa Ar merkitsee samaa kuin yllä, saatetaan reagoimaan kaavan (IV) C=Y-Z (IV) mukaisen yhdisteen kanssa, jossa kaavassa Y ja Z merkitsevät samaa kuin yllä, ja L on poistuva ryhmä, tai b) kaavan (V) 31 79843 ----UH I-N S 1 L \s ^ ^ Y-Z H mukainen 2-substituoitu tiatsolidiinijohdannainen, jossa kaavassa Y ja Z merkitsevät samaa kuin yllä, N-alkyloidaan kaavan (VI) Ar-CH2-X (VI) mukaisella yhdisteellä, jossa kaavassa Ar merkitsee samaa kuin yllä, ja X on halogeeni tai reaktiivinen esteriryhmä, tai c) kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, jossa kaavassa Y merkitsee typpeä, Z on syano ja Ar merkitsee samaa kuin yllä, kaavan (VII) >CH0-Ar -N d (VII) mukainen yhdiste, jossa kaavassa Ar merkitsee samaa kuin yllä, saatetaan reagoimaan bromisyaanin kanssa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, muunnelma a), tunnettu siitä, että käytetään lähtöaineena kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa L on CH3S-ryhmä ja Y on =N-.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, muunnelma a), tunnettu siitä, että käytetään lähtöaineena kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa L on CH3S-ryhmä, Y on =CH-ja z merkitsee nitro-ryhmää. 32 79843

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että valmistetaan - 3-bentsyyli-2-syanoiminotiatsolidiini tai - 2-nitrometyleeni-3-bentsyylitiatsolidiini. Il 33 79843