NO840244L - Fremgangsmaate for fremstilling av aminerte derivater av pyridazin. - Google Patents

Description

Den foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av aminerte derivater av pyridazin med formel:

hvor:

R 1 betegner en 2-tienyl, 3-tienyl eller cykloheksyl-gruppe;

1*2 representerer en lavere alkyl-gruppe (1 til 4 karbonatomer) eller et hydrogenatom. ;Den foreliggende oppfinnelse vedrører også tilleggsalter som fåes ved hjelp av forbindelsene (I) med de farmasøytisk akseptable uorganiske eller organiske syrer. ;Den inkluderer også en fremgangsmåte for fremstilling av forbindelser med formel (I) så vel som anvendelsen av disse i terapeutiske midler. ;Forbindelsene i henhold til forbindelsen fåes fra et passende substituert 3-kloropyridazin 1 ved virkning av aminet ; i henhold til reaksjonsskjemaet: ; Reaksjonen mellom det klorinerte derivat 1 og amin 2 blir ;utført ved å varme det opp i et passende løsningsmiddel slik som en alkohol, oftest ved løsningsmidlets koketemperatur. Reaksjonen blir utført i nærvær av en hydracidakseptor som har til hen-sikt å fiksere det dannete hydrogenklorid; et overskudd av amin 2 brukes oftest som det. ;Produkt (I) blir isolert ved fortynning av reaksjonsblandin-gen med vann og ekstrahering med et passende løsningsmiddel slik som etylacetat eller eter. ;Forbindelsene (I) kan saltgjøres på konvensjonell måte ved virkning av syre i en sterk løsning av basen, idet løsnings-midlet blir valgt slik at saltet krystalliserer ved avkjøling eller ved tilsetning av et annet løsningsmiddel. ;De klorinerte derivater 1 kan fremstilles i henhold til kjente metoder, spesielt i henhold til det følgende reaksjons-skj erna: ; som består i å kondensere ketonet -CO-CH^ med a-ketosyren R2-CO-COOH for å få den tilsvarende a-hydroksygammaketonsyre. Ved virkning av hydrazin fører den sistnevnte til det tilsvarende 3-pyridazon som, videre, ved virkning av fosforoksygenklorid gir 3-kloropyridazinet 1. ;De følgende ikke-begrensende eksempler er gitt for å illu-strere den foreliggende oppfinnelse. ;Eksempel 1;3- morfolinoetylamino- 4- metyl- 6-( 2- tienyl) pyridazin, dihydroklorid; ( CM 30387) ; ; a) 2- hydroksy- 2- metyl- 3-( 2- tenoyl) propanoisk syre;70,4 g pyrodruesyre blir nøytralisert med en 20% kalium-hydroksydløsning under røring og avkjøling, så blir 101 g<*>2-acetyltiofen tilsatt. En løsning av 56 g kaliumhydroksyd i 1600 ml metanol, blandingen blir så satt bort i kjøleskap i 4 dager.

Løsningen blir gjort sur med 10N svovelsyre opp til pH 3-4. Presipitatet av kaliumsulfat blir filtrert av og metanolen blir avdampet på vannbad under vakuum. Den gjenværende løsning blir gjort sur med 10N svovelsyre, og vann blir tilsatt for å løse opp kaliumsulfaten. Blandingen blir ekstrahert med eter, og eter-fasen blir vasket to ganger med 100 ml vann. Den organiske løs-ningen blir ekstrahert med en vandig 10% kaliumbikarbonatløsning. Den vandige fase blir skilt fra og ekstrahert med litt eter, blir så gjort sur ved tilsetning av 1 ON svovelsyre.

Den forventede syre krystalliserer; den blir filtrert av

og vasket med litt isopropyleter. Den blir brukt slik i det følgende skritt.

b) 4- metyl- 6-( 2- tienyl)- 3- pyridazon

20 g av syren fått ovenfor blir løst i 200 ml butanol, så

blir 7 g hydrazinhydrat tilsatt.

Blandingen blir tatt under tilbakeløp, idet man langsomt destillerer av den dannete butanol-vannazeotrop. Når dannelsen av vann har tatt slutt, er ca. 160 ml butanol destillert og set-tes bort for å krystallisere under avkjøling.

Krystallene blir filtrert av og omkrystallisering finner sted i edikksyre. Vekt: 14,5g; smeltepunkt: 236°C.

c) 3- kloro- 4- metyl- 6-( 2- tienyl) pyridazin

Blandingen av 14 g pyridazon fått ovenfor og 90 ml fosforoksygenklorid blir varmet i vannbad i 3 timer.Blandingen blir helt over knust is og blir gjort alkalisk med en 20% natriumhyd-roksyd-løsning.

Det faste stoffet blir filtrert av og omkrystallisering finner sted i metanol. Vekt: 10,5 g; smeltepunkt: 146°C.

d) CM 30387

En blanding av 10,11 g av kloropyridazinet fått ovenfor og

18,9 g 2-morfolinoetylamin i 150 ml butanol blir varmet under tilbakeløp i 3 dager.

Løsningen blir helt i vann og gjort alkalisk med en natrium-hydroksyd-løsning. Blandingen blir ekstrahert med eter, tørket over natriumsulfat og konsentrert til tørrhet i vakuum.

Resten krystalliserer og blir omkrystallisert i etylacetat. Vekt: 9g; smeltepunkt: 132°C.

Dihydroklorid

Til en løsning på 8,9 g av basen ovenfor i 50 ml isopropanol blir det tilsatt 5,5 ml av en vandig løsning av konsentrert hydrogenklorid. Det faste stoffet som dannes blir filtrert av og omkrystallisert i absolutt etanol. Vekt: 10,6 g; smeltepunkt: 234°c.

Eksempel 2

3- morfolinoetylamino- 4- metyl- 6-( 3- tienyl)- pyridazin, dihydroklorid; ( CM 30388)

Ved å arbeide som i eksempel 1, men erstatte 2-acetyltiofen med 3-acetyltiofen, fåes det følgende suksesivt: -2-hydroksy-2-metyl-6-(3-tenoyl)propanoinsyre; -4-metyl-6-(3-tienyl)-3-pyridazin; smeltepunkt: 246°C (edikksyre) -3-kloro-4-metyl-6-(3-tienyl)pyridazin;

smeltepunkt: 171°C (dioksan);

-CM 30388

Base: smeltepunkt: 56°C (etylacetat - petroleumeter) Dihydroklorid: smeltepunkt: 152°C (absolutt alkohol).

Eksempel 3

3- morfolinoetylamino- 4- metyl- 6- cykloheksyl- pyridazin;

dihydroklorid; CM 30390

Ved å arbeide som i eksempel 1, men erstatte 2-acetyltiofen med cykloheksylmetylketon, fåes det følgende i rekkefølge: -2-hydroksy-2-metyl-6-cykloheksyl-propanoinsyre; -4-metyl-6-cykloheksyl-3-pyridazon; smeltepunkt: 173°C (isopropanol-isopropyleter); -3-kloro-4-metyl-6-cykloheksyl-pyridazin kromatografert over silisiumgel, idet man eluerer med etylacetat-heksan (25-75 vol/ vol);

CM 30390

Base: gul olje

Dihydroklorid: smeltepunkt: 237°C (isopropanoleter).

Produktene av oppfinnelsen ble underlagt farmakologiske forsøk med henblikk på å bestemme deres virkning på sentral-nervesystemet. De forskjellige forsøk som produktene ble utsatt for vil angis heretter.

I - Antidepressiv virkning.

- Antagonisme til ptosis indusert ved reserpin

Dette forsøk beskrevet av GOURET (Journal de Pharmacologie, Paris 1973, 4 (1), 105-128), ble utført på hunmusCDI (Charles River) som veide 20 - 1 g. Reserpin induserer ptosis 1 time etter intravenøs administrering; noen antidepressiva motvirker denne ptosis.

Det følgende skjema ble valgt.

Stoffene som skulle studeres, ble administrert i.p.

Reserpin ble administrert på samme tid via intravenøs vei i en dose på 2 mg/kg. 1 time etter administrering av reserpin ble antall dyr som ikke viste ptosis notert.

Dette forsøk ble utført på grupper av 10 mus, og prosenten av mus som ikke viste ptosis ble bestemt. Resultatene er uttrykt i effektiv dose 50 (ED5Q) eller dose som hindrer ptosis i 50% av de behandlede dyr.

- Potensialisering av hoderykninger indusert ved 5- hydroksytryptofan

5-hydroksytryptofan, forløper for 5-hydroksytryptamin, induserer i mus en typisk oppførselkarakterisert vedplutselige hoderykninger. Molekylene som aktiverer den sentrale serotoni-nerge transmisjon øker antall hoderykninger, mens de tricykliske antidepressiva er inaktive.

Ved tid null blir produktet som skal studeres administrert via intraperitoneal vei, så, 1 time etterpå blir en enkelt dose (200 mg/kg) av 1-5-hydroksytryptofan i suspensjon i destillert vann videre administrert via samme vei. Hvert dyr (hunmus CD1 Charles River som veier fra 22 til 24 g) blir umiddelbart plassert i et sylindrisk glassbeger. Antall hoderykninger blir talt i 20 minutter.

For hver dose av produktet som skal testes blir det gjort forsøk på grupper av 10 mus, i sammenligning med en kontroll-gruppe som mottar bare bæreren.

Resultatene er uttrykt i % i forhold til gjennomsnitts-skåringer fått i kontrollmus.

- Måling av MAO A virkning in vitro

Den inhibitoriske virkning av monoaminoksydase A blir ut- prøvd i henhold til metoden beskrevet av KAN et al. (Life Sciences 26, 2165-2171, 1980), idet striatum fra rotte brukes som enzymkilde.

Etter disseksjon blir vevene homogenisert i 16 volumdeler (vekt pr. volum) nediset fosfatbuffer (0,1 M, pH=7,40). Fraksjo-ner på 0,1 ml blir inkubert i 10 minutter i nærvær av 5-hydroksytryptamin merket med karbon-14 (sluttkonsentrasjon 480 ymol) og av variable konsentrasjoner av produktet som skal testes; slutt-volumet for inkubering er 0,5 ml. Syremetabolittene blir ekstrahert i 7 ml toluen/etylacetat (1:1, vol/vol) blanding, blir så talt ved væske-scintillasjon. Konsentrasjonen av det testede produkt som inhiberer kontrollvirkningen ved 50% (I.C.^q) blir bestemt grafisk.

II - Dopaminerg virkning

Dette ble studert ved analyse av rotasjonsoppførsel i mus etter unilateral lesjon av striatum (P. Protais og al., J. Phar-macol., 1 976, 7, 251 ) .

Hunmus Charles River CD1 som veide fra 20 til 24 g ble på forhånd underlagt en unilateral lesjon av striatum ved stereotok-sisk injeksjon av 6-hydroksydopamin i en mengde på 8 meg pr. dyr. En uke etter denne utførelse ble produktene som skulle studeres administrert intraperitonealt til grupper på 7 mus. 1 time etter aadministrering av et produkt blir antall rotasjoner bestemt over en periode på 2 minutter. Rotasjonene ispilateralt med hen-syn på lesjonen blir talt positivt og de kontralaterale rotasjoner blir talt negativt.

Den algebraiske sum av rotasjonene for en gruppe behandlete dyr, blir sammenlignet med summen fra gruppen av kontrolldyr som har mottatt bare bæreren (fysiologisk serum).

Resultatene er uttrykt i % variasjon av rotasjoner i de behandlete dyr i forhold til kontrolldyrene.

III - Cholinerg virkning

De cholinerge reseptorer av muskarin type kan bli merket

in vitro ved tritiert quinuklidinyl-benzylat (QNBl<3>h]). Slik merking blir utført i henhold til teknikken beskrevet av YAMAMURA og coil. (Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 71 , 1 725 - 9 , 1 974 ) .

Rottehjerner hvorfra cerebellum er blitt fjernet blir homogenisert i 10 volumdeler (vekt pr. volum) av 0,32 M sukrose, så sentrifugert ved 1000 x g i'10 minutter. Konsentratet blir fjernet, og supernatentedelen blir rehomogenisert.

Alikvote seksjoner på 0,1 ml blir inkubert ved 25°C i 1

time i 2 ml fosfatbuffer (0,05 M, pH=7,4) som inneholder variable konsentrasjoner av produktet som skal testes og 0,05 nM av QNB

( 3H) .

Prøvene blir så filtrert på Whatman GF/B-filtere under redu-sert trykk, blir så vasket med inkuberingsbufferen. Radioakti-viteten som er absorbert på filtrene blir talt ved hjelp av væske-scintillasj on.

Uspesifik fiksering blir bestemt i nærvær av 100 uM oksotre-morin. verdiene blir bestemt grafisk.

Resultatene fått med produktene av oppfinnelsen er vist i

tabellen under.

Denne tabellen viser også resultatene for de samme forsøk med et produkt av tidligere produksjon som hører til den kjemiske familie pyridaziner, betegnet under navnet Minaprin (DC1) og svarende til formel:

Resultatene oppnådd med produktene av oppfinnelsen viser at: som antidepressiva viser de en bedre serotoninomimetisk virkning (5-HTP test) og en bedre monoamin oksydase inhibitorisk virkning enn referanseproduktet;

de er mere virksomme som cholinomimetriske stoffer (binding med<3>H-QNB) enn referanseproduktet;

i motsetning til referanseproduktet, er de berøvet enhver dopaminomimetisk virkning.

Videre er produktene i henhold til oppfinnelsen av lav toksisitet og kan derfor brukes i human-medisin til behandling av depresjoner og depressive tilstander av hvilken som helst art.

Disse produkter kan administreres via oral, rektal eller injiserbar vei. De farmasøytiske sammensetninger som inneholder dem kan være faste stoffer eller væsker i form av tabletter, kapsler, granula, stikkpiller eller injiserbare preparater.

Doseringen kan variere i stor grad tavhengig av administra-sjonsmåten og typen og alvoret av lidelsen som skal behandles.

Hos voksen via oral vei er den oftest mellom 0,010 og 0,500 g, hvis mulig spredt ut over flere doser.

Som eksempel kan det følgende galeniske preparat angis:

Claims (5)

1. En fremgangsmåte for fremstilling av aminerte derivater av pyridazin med formel:

hvor:R-j betegner en 2-tienyl-, 3-tienyl- eller cykloheksyl-gruppe; R2 representerer en lavere alkyl-gruppe (1 til 4 karbonatomer) eller et hydrohenatom så vel som saltene av de nevnte derivater med syrene, karakterisert ved de trinn hvor man får et klorinert derivat med formel:

hvor R^ og R2 er som definert ovenfor, til å reagere med et amin med formel:

idet reaksjonen blir utført i et løsningsmiddel slik som en alko hol, aktiv i nærvær av en hydracidakseptor, og eventuelt å omdanne det således oppnådde derivat til et farmasøytisk akseptabelt salt.

2. Fremgangsmåte i henhold til krav 1, karakterisert ved at det klorinerte derivat fåes ved kondensering av keton R-^-CO-CH3 med a-ketoacidet med formel R^ CO-COOH, ved reaksjon med den således oppnådde a-hydroksygammaketonsyre med hydrazinet NH^-NH^ som gir det tilsvarende 3-pyrldazon, og ved reaksjon mellom sistnevnte og fosforoksygenklorid.

3. Fremgangsmåte i henhold til krav 1, karakterisert ved at det som klorert derivat anvendes 3-klor-4-metyl-6-(2-tienyl)pyridazin og som amin 2-morfolinoetylamin.

4. Fremgangsmåte i henhold til krav 1, karakterisert ved at det som klorert derivat anvendes 3-klor-4-metyl-6-(3-tienyl)pyridazin og som amin 2-morfolinoetylamin.

5. Fremgangsmåte i henhold til krav 1, karakterisert ved at det som klorert derivat anvendes 3-klor-4-metyl-6-cykloheksyl pyridazin og som amin 2-morfolinoetylamin.