NO165200B - Fremgangsmaate for fremstilling av arfamenin ved dyrking av mikroorganismestammen chromobacterium violaceum bmg 361-cf4. - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av arfamenin ved dyrking av mikroorganismestammen chromobacterium violaceum bmg 361-cf4. Download PDFInfo
- Publication number
- NO165200B NO165200B NO832046A NO832046A NO165200B NO 165200 B NO165200 B NO 165200B NO 832046 A NO832046 A NO 832046A NO 832046 A NO832046 A NO 832046A NO 165200 B NO165200 B NO 165200B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- arfamenin
- cultivation
- culture
- liters
- culture medium
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 16
- 241000588879 Chromobacterium violaceum Species 0.000 title claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 27
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 13
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 claims description 7
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 4
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 34
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 25
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 17
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 16
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 16
- 102100032126 Aminopeptidase B Human genes 0.000 description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 108090000449 aminopeptidase B Proteins 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 12
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 11
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 11
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 11
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 8
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 8
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 8
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 8
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 7
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 7
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 7
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 7
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 7
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 7
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 6
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 6
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- HJRJRUMKQCMYDL-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2,4,6-trinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 HJRJRUMKQCMYDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- -1 N-Z-amine Substances 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 5
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 5
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 5
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 4
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 4
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 241000588881 Chromobacterium Species 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 3
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 238000001429 visible spectrum Methods 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000124825 Chromobacterium lividum Species 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000001103 continuous-wave nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000002434 immunopotentiative effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- XAPNKXIRQFHCHN-QGOAFFKASA-N violacein Chemical compound O=C\1NC2=CC=CC=C2C/1=C(C(=O)N1)/C=C1C1=CNC2=CC=C(O)C=C21 XAPNKXIRQFHCHN-QGOAFFKASA-N 0.000 description 2
- LEJQUNAZZRYZKJ-UHFFFAOYSA-N violacein Natural products Oc1ccc2NCC(C3=CC(=C4/C(=O)Nc5ccccc45)C(=O)N3)c2c1 LEJQUNAZZRYZKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 101100005767 Arabidopsis thaliana CDF2 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N D-melezitose Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIWBPDUYBMNFTB-UHFFFAOYSA-N Ethyl hydrogen sulfate Chemical compound CCOS(O)(=O)=O KIWBPDUYBMNFTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000269851 Sarda sarda Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- VXAUWWUXCIMFIM-UHFFFAOYSA-M aluminum;oxygen(2-);hydroxide Chemical compound [OH-].[O-2].[Al+3] VXAUWWUXCIMFIM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 201000002628 peritoneum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001057 purple pigment Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N ribitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- IBUIVNCCBFLEJL-UHFFFAOYSA-M sodium;phosphoric acid;chloride Chemical class [Na+].[Cl-].OP(O)(O)=O IBUIVNCCBFLEJL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/005—Amino acids other than alpha- or beta amino acids, e.g. gamma amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
- C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
- C07C279/12—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for frem-
stilling av arfamenin ved å dyrke mikroorganismestammen Chromobacterium violaceum BMG 361-CF4.
Det er funnet at stoffet arfamenin, som henviser til arfame-
nin A eller arfamenin B (slik som forklart nedenunder) eller begge av disse arfameninene generelt eller en blanding som omfatter begge arfameninene, oppviser en virkning ved å
øke celle-formidlet immunitet og anti-cancer-virkning. Det er spesielt funnet at stoffet er virksomt til å inhibere dekomponeringen av arginin-S-naftyl-
amid ved hjelp av aminopeptidase B.
Stoffet arfamenin har den følgende formel
hvor R er et hydrogenatom i tilfelle av arfamenin A eller en hydroksylgruppe i tilfelle av arfamenin B, eller disses salter.
Som de senere gjengitte eksemplene vil vise, kan
både arfamenin A og B erholdes som fargeløst pulver ved frak-
sjonering av filtratet fra et dyrkingsmedium etter dyrking av en arfamenin-produserende bakterie. Fraksjoneringen kan utføres ved kromatografi på CM-"Sephadex", etc. Egenskapene til fraksjonene som oppnås omtales nedenunder.
Arfamenin A har et smeltepunkt på 117 - 119°C og
en molekylvekt, bestemt ved hjelp av massespektrometri, på
320. Elementæranalyseverdiene er C 53,45%, H 7,11%, N 14,91%, O 14,20%, Cl 10,49%, hvilket indikerer molekylformel C,.HC1. Det ultra fiolette absorbsjonsspekteret for lb Zh 4 j
en vandig oppløsning som inneholder 100 yg/ml arfamenin A
er tegnet opp i fig. 1, som viser en absorbsjon med A maks på 2547 nm (£ 180). Det infrarøde absorbsjonsspekteret for arfamenin A ved KBr-metoden er vist i fig. 2, som viser karakteristiske absorbsjonsbånd ved 3370, 3170, 2950, 1730, 1670, 1560, 1460, 1410, 1320, 1190, 1110, 760 og 710 cm"<1>. Ab-sorbs jonsspekteret for kjernemagnetisk, resonans ("''H-NMR)
(oppløsning i tungt vann, 6 , 100 MHz) er gjengitt i fig. 3 og viser absorbsjoner ved 2,04-2,33 (CH2>, 2,35-2,72 (CH2), 3,34-3,69 (CH2 x 2), 3,69-3,84 (CH, CH2), 4,83 (CH),og 7,82-8,00 (C,HC)6.
Arfamenin B har et smeltepunkt på 118 - 120 C og
en molekylvekt bestemt ved hjelp av massespektrometri på
336. Elementæranalyseveridene er C 49,30%, H 6,88%, N 13,77%, 0 20,82% og Cl 8,73% hvilket indikerer molekylformelen C16H24N4°4"HC1*H20' Det ultrafiolette absorbsjonsspekteret for en vandig oppløsning som inneholder 100 yg/ml arfamenin B er gjengitt i fig. 4 som viser absorbsjoner ved \ maks på 275 nm (c 1040) og X maks på 222 nm ( z 5500) . Det infrarøde absorbsjonsspekteret for arfamenin B ved KBr-metoden er vist 1 fig. 5 som viser karakteristiske absorbsjonsbånd ved 3370, 3180, 2960, 1730, 1670, 1560, 1520, 1460, 1420, 1330, 1250, 1180, 1110 og 840 cm<-1>. Absorbsjonsspekteret for kjernemagnetisk resonans (oppløsning i tungt vann, 6 , 100 MHz) er åpenbart i fig. 6 og viser absorbsjoner ved'. 1,87-2,30 fcCH )■ , 2 ,30-2,62 (CH2) , 3,14-3,54 ({C'H2 x 2) , 3,54-3,78 (CH, CH2), 4,75 (CH), 7,30-7,67 (CgH4) 6.
Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for å fremstille en forbindelse med formel (I)
hvor R er hydrogen eller en hydroksylgruppe, kjennetegnet ved at man dyrker mikroorganismen Chromobacterium violaceum BMG-CF4 i nærvær av kjente næringsstoffer og utvinner forbindelsen med formel (I) fra kulturmediet.
En arfamenin-produserende mikroorganisme er en mikroorganisme som er istand til å produsere arfamenin A eller arfamenin B eller begge disse arfameninene. Et eksempel på mikroorganismen er Chromobacterium violaceum BMG361-CF4, en stamme som ble isolert fra jord samlet opp i Poropinai ved bredden av Lake Shikotsu, Hokkaido, Japan. Denne stammen ble deponert 4. mai 1982 ved the Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry of Japan under deponeringsnr. 6521 (FERM P-6521).
De mikrobiologiske kjennetegnene til den ovenfor nevnte stamme er som følger:
(a) Morfologiske kjennetegn
(1) Cellens form og størrelse: stavform, ca. 0,8 - 1,0 ym x 2,0 - 4,0 ym.
(2) Pleomorfisme: ikke-pleomorf.
(3) Bevegelighet/flagelldannelse: bevegelige/polare og laterale flageller.
(4) Sporedannelse: ikke-sporulerende.
(5) Gram-farging: negativ.
(6) Syrefasthet: negativ.
(b) Dyrkingskjennetegn på forskjellige media (dyrking ved 27°C, 20°C og 30°C bare for stykkultur i næringsgelatin)
(1) Platekultur på næringsagar:
Dyrkede kolonier var noe forhøyet semisfærisk, og kantene var glatte og sirkulære. Overflatene var glatte og glisende. Etter ca. 17 timers dyrking var koloniene gjennomskinnelige, men ble gradvis opake og oppviste et gummiaktig utseende. Rundt den andre dyrkingsdagen skiftet koloniene over til purpurfarge, men produserte ingen diffuserbare pig-menger.
(2) Stikkultur i næringsagar:
Koloniene vokste enhetlig langs inokuleringslinjene. Overflatene var glatte og skinnende, og kantene var glatte. Rundt den andre dyrkingsdagen utviklet koloniene nederst på overflaten av stikkagaren en purpurfarge, men ingen oppløselige pigmenter ble ob-servert .
(3) Næringsvæskekultur:
Rundt den andre dyrkingsdagen ble det dannet purpurfargede, ringformede kolonier på overflaten av mediet. Etter ca. 40 timer med dyrking økte an-tallet celler på bunnen av prøverøret. Cellene skiftet over til purpurfarge rundt den tredje dyrkingsdagen . (4) Stikkultur i næringsgelatin: Når dyrkingstemperaturen var'30°C, vokste cellene langs stikklinjen. Rundt den tredje dyrkingsdagen begynte mediet å bli flytende og det flytende om-rådet hadde en rørform. I tilfellet med dyrking ved 20<°C oppsto f ly tendegj øringen på den 6. dyrkingsdagen.
(5) BCP-melkekultur:
Etter 3 dager med dyrking skiftet BCP over til blått og mediet koagulerte. På den 5. dyrkingsdagen var koaguleringen fullstendig og umiddelbart begynte peptonisering. Peptoniseringen var fullstendig i løpet av ca. 2 uker. (c) Fysiologiske egenskaper (dyrkingstemperaturene var alle 27°C med mindre annet er angitt) (1) Reduksjon av nitrater: dannelse av nitritter fra nitrater. (2) Denitrifikasjon (fremgangsmåten til Komagata et al.; Edited by Takeharu Hasegawa: Classification and Identification of Microorganisms, side 223, Tokyo University Publisher, 1975) : positiv, ingen gene-rering av gasser.
(3) MR-prøve: positiv.
(4) VP-prøve: negativ.
(5) Produksjon av indol: negativ.
(6) Produksjon av hydrogensulfid (TSI-agarmedium, et produkt fra Eiken, Japan): negativ.
(7) Hydrolyse av stivelse: negativ.
(8) Utnyttelse av sitronsyre: positiv på et Koser-medium og et Christensen-medium. (9) Utnyttelse av uorganisk nitrogenkilde (natriumsulfat, ammoniumsulfat og natriumglutamat): enhver uorganisk nitrogenkilde ble utnyttet til veksten. (10) Fremstilling av pigment (King A-og B-raedia, produk-ter fra Eiken): små mengder av et gult oppløselig pigment ble dannet på hvert medium. (11) Urease (Ureamedium, et produkt fra Eiken): negativ.
(12) Oksydase: positiv.
(13) Katalase: positiv.
(14) Temperatur- og pH-områder for vekst: vekst ved 12 - 37°C, fortrinnsvis ca. 27 - 30°C. Vekst ved en pH på 5,0 - 9,6, fortrinnsvis 6,0 - 7,8.
(15) Oksygenfordring: Aerob (fakultativ anaerob).
(16) O-F-prøve (i henhold til fremgangsmåten til Hugh &
Leifson): fermentativ.
(17) Dannelse av syrer og gasser fra sakkarider (en Hugh
& Leifson-kultur): syrer ble dannet fra D-glukose, D-fruktose og trehalose. Ingen syrer ble dannet fra de følgende 19 sakkarider: L-arabinose, D-xylose, D-mannose, D-galaktose, maltose, sukrose, laktose, D-sorbitol, D-mannitol, inositol, glycerin, stivelse, adonitol, cellobiose, dulcitol, inulin, melibiose,
melezitose og raffinose.
Ingen av sakkaridene dannet gasser.
(18) Hydrolyse av kasein: mikroorganismen ble strek-dyrket på en kasein-agarplate (pH 7,4) fremstilt ved å tilsette sterilisert skummet melk til en næringsagar til en konsentrasjon på 5% og la blandingen størkne. Etter 24 timer med dyrking ble kasein brutt ned og dens hydrolyse var fullført på den 8. dyrkingsdagen.
(19) Måling av synlig spektrum på purpurpigment:
De purpurfargede cellene dyrket i skrå-næringsagar ble ekstrahert med etanol og ekstraktet ble målt med hensyn på dets synlige spektrum. Maksimum absorbsjon ble funnet ved 573 nm og minimum absorbsjon ved 43'0 nm.
Når pigmentet ble oppløst i 10% etanolsulfat, dannet det en grønn oppløsning med maksimum absorbsjon ved 69 3 nm. De-tte faktum viste at det purpurfargede
pigmentet var et violacein-pigment (se Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, 8. utgave, side 354).
En oppsummering av de ovenfor nevnte kjennetegnene viste at BMG361-CF4 var en gram-negativ, fakultativ, anaerob bacillus med polare og laterale flageller. Dens kolonier inneholdt et purpurfarget pigment som ble påvist å være violacein ved måling av dets synlige spektrum. Utforskning av disse egenskapene ble utført ved henvisning til Bergey's Manual of Determinative Bacteriology 8. utgave, og ut fra resultatene antas BMG361-CF4-stammen å tilhøre slekten Chromobacterium. Chromobacterium omfatter de to artene C. violaceium og C. lividum. BMG361-CF4-stammer innehadde egenskaper som var svært like egenskapene til de tidligere kjente artene. Nærmere bestemt ble stamme BMG361-CF4 klart sjeldnet fra C. lividum ved hensyn til vekst ved 37°C, spor av syredannelse fra sakkarider (syreproduksjon fra trehalose, ingen syreproduksjon fra arabinose eller xylose), hydrolyse av kasein, etc. Følgelig ble stamme BMG361-CF4 identifisert som Chromobacterium violaceum BMG361-CF4.
Fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse vil bli beskrevet i detalj nedenunder. Kjente næringsstoffer for bakterier kan, om ønsket, brukes til å dyrke den arfamenin-produserende mikroorganismen ved utførelsen av fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse. Eksempler på karbonkilder er fettstoffer og karbohydrater som er tilgjengelige i handelen, slik som glycerin, glukose, laktose, sukrose, stivelse, maltose og molasser. Eksempler på nitrogenkilder omfatter markedsførte varer slik som pepton, kjøttekstrakt, maisstøpevæske, bomullsfrømel, peanøttmel, soyabønnemel, maisglutenmel, fiskemel, gjærekstrakt, N-Z-amin, kasein, natriumnitrat, ammoniumnitrat og ammoniumsulfat. Eksempler på uorganiske næringsstoffer er natriumkloridfosfater, kalr siumkarbonat og magnesiumsulfat. Spormengder av andre metall-salter kan, om ønsket, tilsettes,
Ethvert av disse nevnte materialene kan brukes så lenge som de kan utnyttes av den arfamenin-produserende mikroorganismen og de vil ikke forhindre produksjonen av foreliggende forbindelse.
Hvilke som helst kjente materialer for bakterie-dyrking kan brukes. Særlig foretrukne bestanddeler av kulturmedier er karbonkilder slik som glycerin og oppløselig stivelse, og nitrogenkilder slik som soyabønnemel, fiskemel og maisglutenmel. Eksempler på foretrukne kulturmedier er et medium som inneholder 1,5% glycerin, 1,5% oppløselig stivelse, 0,5% "Prorich", 1,5% fiskemel og 0,2% kalsiumkarbonat og et medium som inneholder 3% oppløselig stivelse, 0,5% "Prorich", 1,2% maisglutenmel og 0,2% kalsiumkarbonat.
Væskekultur er fortrukket til masseproduksjon av arfamenin. Dyrkingstemperaturen kan velges innenfor et område som tillater den arfamenin-produserende mikroorganisme å vokse og produsere arfamenin. Den særlig foretrukne temperatur er 25 - 35°C. Dyrkingen utføres vanligvis til en til-strekkelig mengde av stoffet er akkumulert i dyrkingsmediet.
F.eks. ble et dyrkingsmedium som inneholdt 3% opp-løselig stivelse, 0,5% "Prorich", 1,2% maisglutenmel og 0,2% kalsiumkarbonat sterilisert og deretter inokulert med en løkkefull av en skråkultur av den arfamenin-produserende mikroorganisme. Inokulumet ble aerobt rystedyrket ved 27°C. Etter 8-52 timers dyrking akkumulerte arfamenin. Arfamenin ble produsert tilfredsstillende ved dyrking i en tank likeså vel som ved rystekultur. F.eks. ble 300 liter av mediet plassert i en 570 liters dyrkingsbeholder sterilisert og dyrkingen ble utført med omrøring ved 190 omdr./min. under lufting med 300 l/min. sterilisert luft. Under disse betingelser nådde produksjonen av det foreliggende stoffet sitt maksimumsnivå i løpet av 23 timer.
Kontroll av arfamenin under dens fremstilling
ved dyrking og rensing ble utført ved å måle den inhiberende virkning mot aminopeptidase B på følgende måte: Den aminopeptidase B-inhiberende virkning av arfamenin ble målt ved hjelp av en modifikasjon av fremgangsmåten beskrevet ifølge V.K. Hoppusu, K.K. Makinen & G.G. Glenner, Archives cf Biochemistry and Biophysics 114, 557, 1966), Nærmere bestemt ble 0,5 ml av 0,1 M tris-hydrokloridbuffer-oppløsning (pH 7,0) og o,25 ml av en oppløsning som inneholdt prøven, tilsatt til 0,25 ml av 0,002 M arginin-3-naftyl-amid. Den blandede oppløsning ble oppvarmet ved 3 7°C i 3 minutter. Til den oppvarmede oppløsning ble det tilsatt 5 pl av en oppløsning av aminopeptidase B som var blitt ren-set med DEAE-cellulose i henhold til den enzym-rensende tek-nikken til Hoppusu et al. Blandingen ble omsatt i 30 minutter ved 37°C etterfulgt av tilsetning til reaksjonsbland-
Arfamenin foreligger i dyrkningsmedier og celler fra den arfamenin-produserende mikroorganisme etter dyrking. Oppfinnelsen omfatter videre at man anvender et flytende kulturmedium, og at forbindelsene med formel (I) utvinnes fra kulturmediet ved adsorbering av et filtrat av kulturmediet på et vanlig adsorberingsmiddel og isolering av de ønskede forbindelsene fra adsorbatet. Eksempler på adsorb-eringsmidlet omfatter organiske adsorberingsmidler slik som aktivt kull, "Amberlite XAD-4" og "Diaion HP-20", ione-bytterharpikser, aluminiumdioksyd og silikagel. F.eks. adsorberes arfamenin til "Amberlite XAD-4" og elueres med en vandig oppløsning av aceton. Nærmere bestemt pakkes en passende kolonne med "Amberlite XAD-4" i en mengde på
1/10 av filtratmengden fra kulturmediet etter dyrking. Filtratet som inneholder arfamenin sendes gjennom kolonnen
og adsorberes til denne. "Amberlite XAD-4"-kolonnen
vaskes med vann og elueres med en 50% vandig oppløsning av aceton i en mengde på 2 - 4 ganger til "Amberlite XAD-4". Eluatet inneholder mer enn 70% av den arfamenin som foreligger i kulturfiltratet. Det således erholdte eluatet opp-konsentreres til tørrhet ved redusert trykk for å få et råpulver av arfamenin.
Kromatografi på en ionebytterharpiks kan også brukes til rensingen. Særlig er kromatografi på "CM-Sephadex" effektivt idet den gjør det mulig å adskille arfameninene A og B fra hverandre ved hjelp av en gradienteluering under anvendelse av vandig oppløsning av natriumklorid. F.eks. underkastes det rå pulveret som er erholdt ved adsorbsjon til "Amberlite XAD-4" og eluering med en vandig oppløsning av aceton, kromatografi på "CM-Sephadex". Kolonnen elueres med en vandig oppløsning av salt slik som natriumklorid for å samle opp en fraksjon som inneholder arfamenin A og en fraksjon som inneholder arfamenin B. hver for seg. Deretter isoleres arfamenin A og B fra hver av disse.
Sluttrensingen av det foreliggende stoffet kan ut-føres ved å avsalte med "Sephadex LH-20".
Arfamenin ble under-søkt med hensyn på farmakologiske virkninger. Det foreliggende stoffet ble funnet å potensiere celle-formidlet immunitet og inneha en anti-cancer-virkning.
De biologiske virkningene av arfamenin A og B
er beskrevet i de følgende eksperimentelle eksempler.
1. Virkning på celle- formidlet immunitet hos normale mus
Virkningene av arfamenin A og B på celle-formidlet immunitet ble undersøkt ved å bruke som en indeks hypersen-sitivitet av forsinket type (forkortet D.T.H.) fremstilt ved å inokulere røde blodceller fra saud (forkortet SRBC) i fotputene hos mus som et antigen (se J. Exp. Med. 139, 1529 - 1539, 1974).
En suspensjon av 10 o SRBC i 0,05 ml fyiologisk saltvannsoppløsning ble inokulert subkutant i én av fotputene til CDF^-mus (hunnkjøn, 8 uker gamle). Samtidig ble en vandig oppløsning som inneholdt 5, 0,5, 0,05 eller 0,005 mg/kg arfamenin A eller B administrert oralt i en enkelt dose.
4 dager etter administrering ble en suspensjon av 10 Q SRBC
i 0,05 ml fysiologisk saltvannsoppløsning administrert subkutant til den andre fotputen for å forårsake en andre sen-sitiviser ing . 24 timer senere ble svelling av fotputen (økt tykkelse på fotputen) målt med et skyvelær. Hos kontrolldyr som var subkutant injisert med SRBC i fysiologisk saltvanns-oppløsning uten administrering av prøveforbindelsen, ble den økte tykkelse av fotputen verdsatt til 100%. Den økte tykkelse av fotputen hos de behandlede dyrene ble sammenlignet med den hos de ubehandlede dyrene for å beregne forholdet mellom den førstnevnte verdien og den sistnevnte verdien (100%), og derved bestemme den celle-formidlede immunitets-potensierende virkning av prøveforbindelsen. Resultatene er gjengatt i de følgende tabeller:
2. Virkning på celle- formidlet immunitet hos mus med kreft (1) Fremgangsmåter hvor det brukes SRBC som antigen Hevelse av fotputen hos mus ble undersøkt på samme måte som i eksperimentelt eksempel 1, med ^ unntak av at CDF-.i-mus ble inokulert intraperitonealt med 10 celler av Ascites Sarcoma 180 og at arfamenin A ble administrert intreperitone-alt én gang daglig i 4 på hverandre følgende dager, idet man
begynte på dagen for sensitivisering av SRBC, og 2 dager senere ble SRBC gitt for å forårsake en andre sensitivisering. Resultatene er vist i tabell 3. (2) Fremgangsmåte ved anvendelse av pikrylklorid som antigen Hos mus med Ascites Sarcoma 180 ble virkningen av arfamenin A på celle-formidlet immunitet undersøkt på føl-gende måte hvor man observerte D.T.H.-reaksjon frembragt ved bruken av pikrylklorid som antigen. 10^ celler av Ascites Sarcoma 180 ble transplantert intraperitonealt til. 12 uker gamle CDF^-mus av hunnkjønn (6 mus pr. gruppe). Transplantasjonsdagen ble betegnet som 0. dag. På 1. dag ble et bar-bert område (25 mm x 15 mm) av buken sensitivisert med 0.6 ml av en 6% etanoloppløsning av pikrylklorid absorbert til et stykke absorbent-bomull (20 mm x 20 mm x 2 mm). På 8. dag ble tykkelsen av ørene på begge sider målt med et mikrometerur for å få en grunnverdi (a). Deretter ble begge ørene sensitivisert med en 1% olivenoljeoppløsning av pikrylklorid absorbert til et stykke absorbent-bomull med størrelse 10 mm x 4 mm x 1 mm. På den 9. dag ble hevelsen av de sensi-tiviserte ørene målt med et mikrometerur for å få en verdi (b). Grunnverdien (a) ble trukket fra verdien (b) for å bestemme en økning i tykkelse av ørene (b-a) i kontrollgruppen.
Hver for seg ble 0,5, 0,05 eller 0,005 mg/kg av prøveforbindelsen som var oppløst i fysiologisk saltvannsopp-løsning, administrert oralt 6 ganger pr. dag i på hverandre følgende dager fra og med 1. dag til og med 8. dag, og pikryl-kloridsensitivisering ble utført på samme måte som i kontrollgruppen. Økningen i tykkelse for begge ørene (b<1> - a') i denne behandlede gruppen ble bestemt på samme måte som i kontrollgruppen.
Forholdet mellom slik økning hos den behandlede gruppen og hos kontrollgruppen ble beregnet fra den følgen-de ligning
idet verdien for kontrollgruppen var satt til 100%, og derved bestemme prøveforbindelsens aktivitet til å potensiere celle-formidlet immunitet. Resultatene er vist i tabell 4.
Resultatene ovenfor viser at det ble erholdt en signifikant aktivitet til å potensiere celle-formidlet immunitet i gruppen som mottok 0,05 mg/kg arfamenin A.
Forsøkseksempel 3
Antitumor- virkning av argamenin mot Ehrlich fast tumor
3 x 10^ celler av Ehrlich bukhulekreft ble transplantert subkutant i siden på 8 uker gamle ddY-mus av hunn-kjønn (5 mus pr. gruppe). Transplantasjonsdagen ble betegnet som 0. dag. Deretter ble 0,5, 0,0 5 eller 0,0 5 mg/kg av prøve-forbindelsen oppløst i fysiologisk saltvannsoppløsning administrert oralt hver annen dag over ialt 7 ganger inntil 15. dag, idet man begynte på 1. dag. På 30. dag ble størrelsen (kor-teste diameter 2x lengste diameter/2) og vekten av tumoren målt. Resultatene i denne behandlede gruppen ble sammenlignet med resultatene i kontrollgruppen for å beregne tumor-inhiberingsforholdet (TIR, %) fra den følgende ligning:
hvor C er størrelsen eller vekten av tumor i kontrollgruppen og T er størrelsen eller vekten av tumor i den behandlede gruppen.
Resultater for TIR (%), en indeks for antitumor-virkning av prøveforbindelsen, er vist i den følgende tabell:
Resultatene ovenfor viser at administreringen i mengder på hhv. 0,05 og 0,005 mg/kg arfamenin A ga en verts-formidlet antitumor-virkning med hensyn til tumorstørrelse og tumorvekt.
Arfameninene A og B viser seg således å forsterke celle-formidlet immunitet hos normale dyr, modulere ceile-formidlet immunitet som er dempet av kreft, og oppviser en verts-formidlet antitumorvirkning.
Prøver på akutt toksisitet hos mus har vist at ingen dødsfall forårsakes av arfamenin A ved en intravenøs dose på 250 mg/kg eller arfamenin B ved en intravenøs dose på 150 mg/kg. Arfamenin anses således for å være et sikkert stoff.
Som beskrevet ovenfor øker arfameninene A og B imunitet og oppviser en verts-formidlet carcinostatisk virkning når de administreres hver for seg. Disse forbindelsene er derfor nyttige som immunopotensierende midler og antitumor-immunomodulerende midler eller som hjelpestoffer i forskjellige kjemoterapeutiske midler for anvendelse ved behandlingen av kreft.
De nevnte legemidler som inneholder arfamenin som aktiv bestanddeler kan fremstilles ved å blande arfamenin A eller B eller begge arfameninene A og B eller deres farma-søytisk akseptable salter med bærere som er i vanlig bruk, og om ønsket, videre med forskjellige kjemoterapeutiske midler. Eksempler på arfameninsaltene omfatter salter dannet gjennom reaksjonen mellom karboksylgruppen i arfamenin og farmasøytisk akseptable kationer, slik som ammoniumioner, og kationer av alkalimetaller slik som natrium og kalium, og kationer av jordalkalimetaller slik som kalsium og magnesium (dvs. karboksylater av arfamenin). Ytterligere eksempler omfatter syreaddisjonssalter dannet gjennom reaksjonen mellom guanidyl- eller aminogruppen av arfamenin og farmasøytisk akseptable uorganiske syrer slik som saltsyre, eller organiske syrer slik som eddiksyre.
Forbindelsene eller legemidlene kan administreres som orale preparater, injeksjoner eller reaktale suppositorier. Lyofiliserte injeksjonsløsninger kan fremstilles ved å tilsette pH-justeringsmidler, buffere, stabilisatorer og bindemidler til forbindelsene som omfatter de aktive bestanddelene, og deretter frysetørke blandingene på vanlige måter. Injek-sjonsoppløsninger for subkutan, intramuskulær eller intra-venøs administrering kan fremstilles ved å tilsettes pH-justeringsmidler, buffere, stabilisatorer, isotoniserings-midler og lokalanestetiske midler til forbindelsene som inneholder den aktive bestanddel, og deretter ved å anvende vanlig brukte fremgangsmåter.
Ved fremstillingen av faste stoffer for oral administrering, kan formingsstoffer, og om ønsket, bindemidler, oppsmuldringsmidler, smøremidler, fargestoffer, korreksjons-midler for smak og lukt tilsettes til forbindelsene som inneholder den aktive bestanddel, hvoretter blandingen formes
til tabletter, overtrukne tablett, granulater, pulvere og kapsler ved hjelp av vanlige fremgangsmåter.
Ved fremstillingen av væsker for oral administrering kan korreksjonsstoffer for smak, buffere, stabilisatorer og korreksjonsstoffer for lukt tilsettes til forbindelsene som inneholder den aktive bestanddel, og deretter fremstilles blandingene som siruper og tørre siruper ved hjelp av vanlige fremgangsmåter.
For å fremstille rektale suppositorier, kan formingsstoffer og om øsket overflateaktive midler tilsettes til forbindelsene som inneholder den aktive bestanddel hvoretter blandingene fremstilles som suppositorier ved hjelp av vanlig teknikk.
Dosen av arfamenin kan varieres avhengig av symp-tomer, men den vanlige dosering for en voksen person er 0,02 200 mg arfamenin én gang daglig. Når samtidig terapi med andre kjemoterapeutiske midler mot kreft eller andre immunopotensierende midler skal opprettes, kan arfamenin i det nevnte doseringsområd-t kombineres med disse andre legemidlene i deres vanlige doseringer.
Fremstillingen av arfamenin ifølge foreliggende oppfinnelse skal beskrives i nærmere detalj under henvisning til de følgende utførelseseksemplene. Den foreliggende oppfinnelse er imidlertid ikke på noen måte begrenset til disse eksemplene ettersom de fysikalsk-kjemiske egenskapene til arfamenin og teknikkene for dens fremstilling og rensing som tydelig er beskrevet av oppfinnerne, ville gjør det lett for enhver å modifisere fremgangsmåtene i henhold til det som er åpenbart gjennom den foreliggende beskrivelse.
Eksempel 1
En løkkefull celler ble tatt fra en skråkultur av den arfamenin-produserende mikroorganismen Chromobacterium violaceum BMG361-CF4 (deponeringsnr- 6 521 ved the Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry of Japan).
Cellene ble inokulert i et dyrkingsmedium som inneholdt 3% oppløselig stivelse, 0,5% "Prorich", 1,2% maisglutenmel og 0,2% kalsiumkarbonat. Kulturmediet var blitt sterilisert ved 120°C i 20 minutter og fordelt i mengder på 110 ml i 500 ml roterende kolber. Inokulumet ble dyrket ved 27°C ved 180 omdr./min. og arfameninutskillelsen ble under-søkt etter hvert som tiden forløp. Arfameninutskillelsen var maksimal etter 32 timer med dyrking. Da 36 timer hadde passert etter oppstarting av dyrkingen, avtok arfameninkonsen-trasjonen bestemt ved hjelp av anti-aminopeptidase B-aktivi-teten gradvis.
pH i dyrkingsmediet under dyrkingen var 7,4 ved opp-startingen av dyrkingen, 7,8 etter 8 timer, 7,6 etter 16 timer, 7,85 etter 24 timer, 8,1 etter 32 timer, 8,1 etter 36 timer og 8,4 5 etter 52 timer.
Eksempel 2
Stammen Chromobacterium violaceum BMG361-CF4 ble dyrket under de samme betingelser ved å bruke det samme dyrkingsmediet som i eksempel 1. 9,5 liter av dyrkingsmediet erholdt etter dyrkingen ble justert til en pH på 2 med saltsyre og sugefiltrert ved hjelp av en filterinnretning ("Hyflo Super Cell") hvorved man fikk 9 liter av et filtrat. Filtratet hadde en aminopeptidase B-inhiberende virkning UC50) på 0,05 yl/ml.
Eksempel 3
9 liter av filtratet erholdt i eksempel 2 ble justert til en pH på 5 med natriumhydroksyd og adsorbert på en 1 liter stor kolonne med "Amberlite XAD-4". Adsorbatet ble vasket med vann og deretter eluert med en 50% vandig oppløs-ning av aceton. 2,3 liter av den virksomme fraksjonen ble oppkonsentrert og tørket under redusert trykk, hvorved man fikk 19,6 g av et rått pulver. Råpulveret hadde en inhiberingsaktivitet for aminopeptidase B (IC^n) på 0,2 yg/ml. Deretter ble det rå pulveret oppløst i en passende mengde av en 0,05 M vandig oppløsning av natriumklorid og adsorbert på 500 ml "CM-Sephadex C-25". Adsorbatet ble vasket med 1,5 liter av 0,05 mol vandig oppløsning av natriumklorid og 1 liter 0,05 M sitratbufferoppløsning (pH 4,5), og underkastet gradienteluering med 2,5 liter av den samme bufferoppløsning sammen med 2,5 liter av den samme bufferoppløsning inneholdende 0,55 M natriumklorid. I overensstemmelse med denne fremgangsmåten ble eluatet samlet som 18 ml store fraksjoner. Arfamenin A ble erholdt i fraksjonene nr. 39 - 59,
mens arfamenin B ble erholdt i fraksjonene nr. 60 - 89. De respektive fraksjonene ble avsaltet med "Amberlite XAD-4" og deretter frysetørket hvorved man fikk 188 mg av et rått arfamenin A-pulver (inhiberingsaktivitet overfor aminopeptidase B IC^q = 0,0065 yg/ml) fra arfamenin A-fraksjonene.
Fra arfamenin B-fraksjonene ble det erholdt et rått arfamenin B-pulver i et utbytte på 79 mg (inhiberingsaktivitet overfor aminopeptidase B IC,-q = 0,0023 yg/ml).
Eksempel 4
188 mg av det rå arfamenin A-pulveret erholdt i eksempel 3 ble oppløst i en passende mengde av en 0,05 M vandig oppløsning av natriumklorid og justert til en pH på 2,3 med IN saltsyre. Oppløsningen ble adsorbert på en 80 ml kolonne med "CM-Sephadex C-25" og vasket med 100 ml av en 0,07 M vandig oppløsning av natriumklorid. Adsorbatet ble så underkastet gradienteluering ved å bruke 300 ml av en
0,07 M vandig oppløsning av natriumklorid og 300 ml av en 0,05 M vandig oppløsning av natriumklorid. Dette rensetrin-net ga fraksjoner (8 ml hver) og man fikk arfamenin i fraksjonene nr. 11 - 34. Fraksjonene nr. 11 - 30 ble oppkonsentrert og justert til en pH på 2,3 ved hjelp av IN saltsyre. Konsentratet ble eluert med vann på en 500 ml kolonne med "Sephadex LH-20" for å avsalte det. Den avsaltede oppløs-ning av arfamenin ble justert til en pH på 5 med "Dowex WGR" og frysetørket, hvorved man fikk 94 mg arfamenin A som et hvitt pulver (inhiberingsvirkning overfor aminopeptidase B IC50 = 0,0054 yg/ml).
Eksempel 5
79 mg av arfamenin B-fraksjonen erholdt i eksempel
3 ble oppløst i en passende mengde av en 0,05 mol vandig opp-løsning av natriumklorid. Oppløsningen ble justert til en pH på 2,3 ved hjelp av IN saltsyre og adsorbert på en 100 ml kolonne av "CM-Sephadex C-25". Adsorbatet ble vasket med 100 ml av en 0,15 M vandig oppløsning av natriumklorid og deretter underkastet gradienteluering ved å bruke 350 ml av en 0,15 M vandig oppløsning av natriumklorid og 350 ml av en 0,6 M vandig oppløsning av natriumklorid. I henhold til dette ren-setrinnet ble eluatet erholdt som 11 ml store fraksjoner og man fikk arfamenin B i fraksjonene nr. 17 - 30. Disse fraksjonene ble oppkonsentrert og eluert med 0,01N saltsyre på
en 500 ml stor kolonne av "Sephadex LH-20" for å avsalte konsentratet. Den avsaltede fraksjonen med arfamenin B ble justert til en pH på 4 med "Dowex WGR" og frysetørket hvorved
man fikk 32 mg arfamenin B som et hvitt pulver. Dette pro-duktet hadde en inhiberingsvirkning overfor aminopeptidase B IC5Q på 0,0020 yg/ml.
Eksempel 6
En 500 ml Sakaguchi-kolbe ble fylt opp med 80 ml av et dyrkingsmedium omfattende 1,5% glycerin, 1,5% oppløselig stivelse, 0,5% "Prorich", 1,5% fiskemel, 0,2% kalsiumkarbonat og 0,05% antiskummemiddel ("KM-72"). Dyrkingsmediet ble sterilisert i 15 minutter ved 120°C, avkjølt og inokulert med en løkkefull Chromobacterium violaceium BMG361-CF4 (deponeringsnr. 6 521 ved the Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry of Japan) oppdyrket ved hjelp av skråkultur. Inokulumet ble rystedyrket ved. 28°C i 24 timer med 13 5 frem- og tilbakegående bevegelser pr. minutt for å lage et første inokulum.
En 100 liter stor tank ble påfylt 50 liter av et dyrkingsmedium omfattende 1,5% glycerin, 1,5% oppløselig stivelse og 0,5% "Prorich", 1,74% bonittekstrakt, 0,2% kalsiumkarbonat og 0,05% antiskummemiddel ("KM-72"). Dyrkingsmediet ble sterilisert ved 120°C i 30 minutter, av-kjølt og inokulert med 80 ml av det første inokulumet. Det inokulerte mediet ble dyrket i 24 timer ved 28°C med omrør-ing ved 20 0 omdr./min. under tilførsel av sterilisert luft 1 en hastighet på 50 l/min., hvorved et andre inokulum ble fremstilt.
300 liter av et dyrkingsmedium som omfattet 3,0% oppløselig stivelse, 0,5% "Prorich", 1,2% maisglutenmel, 0,2% kalsiumkarbonat og 0,05% antiskummemiddel ("KM-72") ble tilført en 570 liter stor tank, dyrkingsmediet ble sterilisert ved 120°C i 30 minutter, avkjølt og inokulert med 6 liter av det andre inokulumet. Inokulumet ble dyrket ved 28°C i 24 timer med omrøring ved 190 omdr./min. under til-førsel av 300 liter luft pr. minutt. Etter dyrkingen ble dyrkingsmediet justert til en pH på 2 med svovelsyre og sugefiltrert under anvendelse av en filterinnretning ("Hyflo Super Cell"). Filtratet ble justert til en pH på 6 med natriumhydroksyd og sugefiltrert på nytt, hvorved man fikk 185 liter av et filtrat. Filtratet hadde en inhiberingsaktivitet overfor aminopeptidase B IC^^ på 0,17 yl/ml.
10 liter aktivkull for kromatografibruk ble tilsatt til 185 liter av filtratet og blandingen ble omrørt i 2 timer. Aktivkullet ble fraskilt fra blandingen gjennom en 200 mesh sikt. Aktivkullet ble så vasket med 50 liter vann og tilsatt til 80 liter en 50% vandig oppløsening av aceton justert til en pH på 2 med saltsyre. Blandingen ble omrørt i 2 timer for ekstrahering. Aktivkullet ble fjernet ved hjelp av en kurvsentrifuge og ekstraktet ble konsentrert hvorved man fikk 3,54 liter av et konsentrat. Inhiberingsaktiviteten overfor aminopeptidase B UC5g) nos konsentratet var 0,0063 yl/ml.
Eksempel 7
3.54 liter av konsentratet erholdt i eksempel 6 ble nøytralisert med 2N natriumhydroksyd til 5,35 liter av en væske. Væsken ble adsorbert på en 1,7 liters kolonne med "Amberlite XAD-4" og vasket med vann. Kolonnen ble eluert med 12 liter av en 50% vandig oppløsning av aceton og 7 liter av den virksomme fraksjonen ble konsentrert under redusert trykk, hvorved man fikk 280 ml av et konsentrat. Inhiberingsaktiviteten overfor aminopeptidase B (IC^q) av konsentratet var 0,01 yl/ml. Deretter ble konsentratet adsorbert på en 1,7 liters kolonne med "CM-Sephadex" og vasket med 6 liter av en 0,0 5 M vandig oppløsning av natriumklorid og 2 liter med 0,05 M sitratbufferoppløsning (pH 4,5). Det vaskede adsorbatet ble gradienteluert med 6 liter av den samme bufferoppløsning og 6 liter av den samme bufferoppløs-ningen inneholdende 0,6 M natriumklorid. I henhold til denne fremgangsmåten ble eluatet samlet opp som fraksjoner på 200 ml hver. Arfamenin A fremkom i fraksjonene nr. 30 - 39 og arfamenin B i fraksjonene nr. 42 - 52. De respektive fraksjonene ble oppkonsentrert og avsaltet med "Amberlite XAD-4" hvorved man fikk 85 ml av en arfamenin A-fraksjon (IC^q = 0,00058 yl/ml) og 43 ml av en arfamenin B-fraksjon (IC50 = 0,00031 yl/ml).
Ek sempe 1 8
85 ml av arfamenin A-fraksjonen erholdt i eksempel 7 ble adsorbert på en 240 ml kolonne med "Biogel P-2"
(et produkt fra Bio-lad). Kolonnen ble vasket med 2,5 liter vann og 1 liter av en 20% vandig oppløsning av metanol, og eluert med en 0,001 M vandig oppløsning av natriumklorid. Eluatet ble samlet opp som fraksjoner på 18 ml hver. Arfamenin A fremkom i fraksjonene nr. 7 - 81. Disse fraksjonene ble oppkonsentrert, avsaltet med "Amberlite XAD-4" og fryse-tørket, hvorved man fikk 1,48 g arfamenin A som et lysegult pulver. Dette pulveret ha^åde en inhiberingsaktivitet overfor aminopeptidase B UC5Q) på 0,030 yg/ml.
Eksempel 9
43 ml av arfamenin B-fraksjonen erholdt i eksempel 7 ble adsorbert på en 240 ml kolonne med "Biogel P-2"
(Bio-lad's produkt). Kolonnen ble vasket med 2 liter vann og 1 liter av en 20% vandig oppløsning av metanol, fulgt av å eluere den med en 0,00 5 M vandig oppløsning av natriumklorid. Eluatet ble samlet opp som fraksjoner på 18 ml hver og arfamenin B fremkom i fraksjonene 6 - 25. Disse fraksjonene ble oppkonsentrert, avsaltet med "Amberlite XAD-4" og frysetørket. Det ble erholdt 1,89 g arfamenin B som et lysegult pulver. Inhiberingsaktiviteten overfor aminopeptidase B (IC5Q) av pulveret var 0,019 ug/ml.
Kort beskrivelse av tegningene:
Fig. 1 viser det ultrafiolette absorbsjonsspekteret for
arfamenin A ifølge foreliggende oppfinnelse.
Fig. 2 viser det infrarøde absorbsjonsspekteret for arfamenin A.
Fig. 3 viser NMR-absorbsjonsspekteret for arfamenin A.
Fig. 4 viser det ultrafiolette absorbsjonsspekteret for
arfamenin B ifølge foreliggende oppfinnelse.
Fig. 5 viser det infrarøde absorbsjonsspekteret for arfamenin B.
Fig. 6 viser NMR-absorbsjonsspekteret for arfamenin B.
Claims (2)
1.
Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel (I)
hvor R er hydrogen eller en hydroksylgruppe, karakterisert ved at man dyrker mikroorganismen Chromobacterium violaceum BMG 361-CF4 i nærvær av kjente næringsstoffer og utvinner forbindelsen med formel (I) fra kulturmediet.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1 , karakterisert ved at man anvender et flytende kulturmedium, og at forbindelsene med formel (I) utvinnes fra kulturmediet ved adsorbering av et filtrat av kulturmediet på et vanlig adsorberingsmiddel og isolering av de ønskede forbindelsene fra adsorbatet.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57096276A JPS58212791A (ja) | 1982-06-07 | 1982-06-07 | 新生理活性物質アルフアメニン及びその製造法 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO832046L NO832046L (no) | 1983-12-08 |
| NO165200B true NO165200B (no) | 1990-10-01 |
| NO165200C NO165200C (no) | 1991-01-16 |
Family
ID=14160605
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO832046A NO165200C (no) | 1982-06-07 | 1983-06-06 | Fremgangsmaate for fremstilling av arfamenin ved dyrking av mikroorganismestammen chromobacterium violaceum bmg 361-cf4. |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4595698A (no) |
| EP (1) | EP0096356B1 (no) |
| JP (1) | JPS58212791A (no) |
| KR (1) | KR900008247B1 (no) |
| AT (1) | ATE37393T1 (no) |
| CA (1) | CA1201992A (no) |
| DE (1) | DE3378058D1 (no) |
| DK (1) | DK257083A (no) |
| ES (1) | ES523022A0 (no) |
| FI (1) | FI71765C (no) |
| HU (1) | HU191849B (no) |
| NO (1) | NO165200C (no) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS606647A (ja) * | 1983-06-17 | 1985-01-14 | Microbial Chem Res Found | アルフアメニン及びその関連化合物と合成法 |
| JPS6034190A (ja) * | 1983-08-05 | 1985-02-21 | Microbial Chem Res Found | アルフアメニンの高収率製造法 |
| JPS61204170A (ja) * | 1984-09-03 | 1986-09-10 | Microbial Chem Res Found | アルフアメニン関連化合物と免疫賦活剤 |
| JPH05279374A (ja) * | 1992-03-31 | 1993-10-26 | Sawao Murao | スイダトレスチン及びその製造方法 |
| JPH06247964A (ja) * | 1993-02-22 | 1994-09-06 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 新規生理活性物質ｈｓ−１及びその製造方法 |
| WO2011110932A1 (en) | 2010-03-12 | 2011-09-15 | Council Of Scientific & Industrial Research | Process for the production of violacein and its derivative deoxyviolacein containing bioactive pigment from chromobacterium sp. (mtcc 5522) |
| CN112430633B (zh) * | 2020-11-02 | 2023-05-09 | 新疆阜丰生物科技有限公司 | 一种利用流加培养液发酵生产精氨酸的工艺 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3824267A (en) * | 1971-08-19 | 1974-07-16 | Ono Pharmaceutical Co | Thiolesters of guanidino organic acids |
| DE2359544A1 (de) * | 1973-11-29 | 1975-10-30 | Hoechst Ag | Cephemderivate und verfahren zu ihrer herstellung |
| US3994965A (en) * | 1974-08-09 | 1976-11-30 | Pfizer Inc. | D-N-(guanylureidoacetyl)-α-aminophenyl acetic acid and D-N-(guanylureidoacetyl)-α-aminophenyl acetyl chloride |
| US4105789A (en) * | 1976-05-10 | 1978-08-08 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Carboxyalkylacylamino acids |
| JPS6026099B2 (ja) * | 1977-09-21 | 1985-06-21 | 財団法人微生物化学研究会 | ペプチド、その酸附加塩およびその製造法 |
| JPS5832592B2 (ja) * | 1979-01-31 | 1983-07-14 | 財団法人微生物化学研究会 | 新抗生物質バクトロポンおよびその製造法 |
-
1982
- 1982-06-07 JP JP57096276A patent/JPS58212791A/ja active Granted
-
1983
- 1983-06-01 AT AT83105416T patent/ATE37393T1/de active
- 1983-06-01 DE DE8383105416T patent/DE3378058D1/de not_active Expired
- 1983-06-01 EP EP83105416A patent/EP0096356B1/en not_active Expired
- 1983-06-02 CA CA000429549A patent/CA1201992A/en not_active Expired
- 1983-06-02 US US06/500,396 patent/US4595698A/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-06-02 KR KR1019830002470A patent/KR900008247B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1983-06-03 FI FI832007A patent/FI71765C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-06-06 NO NO832046A patent/NO165200C/no unknown
- 1983-06-06 DK DK257083A patent/DK257083A/da not_active Application Discontinuation
- 1983-06-06 HU HU832020A patent/HU191849B/hu unknown
- 1983-06-06 ES ES523022A patent/ES523022A0/es active Granted
-
1985
- 1985-12-16 US US06/809,215 patent/US4859593A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE37393T1 (de) | 1988-10-15 |
| ES8503029A1 (es) | 1985-02-01 |
| US4859593A (en) | 1989-08-22 |
| JPS58212791A (ja) | 1983-12-10 |
| KR840005169A (ko) | 1984-11-05 |
| EP0096356B1 (en) | 1988-09-21 |
| US4595698A (en) | 1986-06-17 |
| EP0096356A3 (en) | 1985-06-12 |
| FI71765C (fi) | 1987-02-09 |
| DK257083A (da) | 1983-12-08 |
| FI832007A0 (fi) | 1983-06-03 |
| KR900008247B1 (ko) | 1990-11-06 |
| JPH022593B2 (no) | 1990-01-18 |
| FI71765B (fi) | 1986-10-31 |
| CA1201992A (en) | 1986-03-18 |
| EP0096356A2 (en) | 1983-12-21 |
| ES523022A0 (es) | 1985-02-01 |
| FI832007L (fi) | 1983-12-08 |
| NO832046L (no) | 1983-12-08 |
| DE3378058D1 (en) | 1988-10-27 |
| DK257083D0 (da) | 1983-06-06 |
| HU191849B (en) | 1987-04-28 |
| NO165200C (no) | 1991-01-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU562202A3 (ru) | Способ получени производных аминосахаров | |
| EP0182315A2 (en) | Novel antibiotic NK84-0218 pharmaceutical compositions containing it and process for the production of the same | |
| KR870001373B1 (ko) | 항생물질 BMG 162-aF2의 제조방법 | |
| NO165200B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av arfamenin ved dyrking av mikroorganismestammen chromobacterium violaceum bmg 361-cf4. | |
| JP2802097B2 (ja) | 新規な制癌抗生物質ｍｉ４３―３７ｆ１１及びその製造法 | |
| KR950005134B1 (ko) | 펩타이드 항생제 | |
| JPS61236792A (ja) | 新規アントラサイクリン抗生物質 | |
| KR920001448B1 (ko) | Bbm-2478 항생제 착화합물 | |
| CA1103179A (en) | Antibiotics phosphonic acid derivatives and production and use thereof | |
| JPS61134398A (ja) | 新生理活性物質プリパスタチン及びその製造法 | |
| EP0236110B1 (en) | Animal growth promoting agents | |
| AU597340B2 (en) | Efomycin G, its preparation and its use as a yield promoter in animals | |
| JPH0341477B2 (no) | ||
| US4898940A (en) | Peptide antibiotics | |
| US4833076A (en) | Peptide antibiotics | |
| KR830002817B1 (ko) | 생물학적으로 활성인 fr-900156물질의 제조방법 | |
| US5021549A (en) | Physiologically active substances, probestin and prostatin and production thereof | |
| JP2592468B2 (ja) | 新規抗生物質ベナノマイシンａおよびｂならびにその製造法 | |
| IE882541L (en) | Phenanthridine derivatives, process for the preparation thereof, and compositions containing them | |
| JPH0479354B2 (no) | ||
| KR830001068B1 (ko) | 아미노당 유도체의 제조방법 | |
| JPS63101336A (ja) | 新規物質ｄｃ―１０２ | |
| JPS60145092A (ja) | Ｗｓ７７３９物質およびその製造法 | |
| JPH03240791A (ja) | 新規免疫抑制抗生物質ｍ１９５１―６２ｆ２物質およびその製造方法 | |
| JPS5932120B2 (ja) | ９−β−Ｄアラビノフラノシル・アデニンの製造法 |