JPS60145092A - Ｗｓ７７３９物質およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は薬理活性を有する新規物質、以下ＷＳ７７３
９物質と呼称、その製造法およびそれを含有する医薬組
成物に関する。

さらに８了シ＜は、この発明は薬理活性を有するＷＳ　
７７３９−Ａ物質およびＷＳ７７３９−Ｂ物狛、それら
の製造法、およびそれらを含有する医薬組成物に関する
。

従って、この発明の目的の１つは、薬理活性をイコする
新規なＷＳ　７７３９物質を提供することにある。

この発明の別の目的は、発酵によるＷＳ７７３９物質の
生産方法を提供すると吉にある。

さらにもう１つの目的はＷＳ　７７３９物質を含イ〕す
る医薬組成物を提供することにある。

ＷＳ　７７３９物質の製造に使用した菌の特性を以下説
り」する。

菌 菌株第７７３９号は島根県松江市で得られた土壊試料か
ら分離された。

この分類学上の研究には主としてシャーリングおよびゴ
ツトリープにより記載されている方法［イー・ビー・シ
ャーリングおよびティー・ゴツトリープ：「メソッズ・
フォー・キャラクテリゼーション・オブ・ストレプトマ
イセス・スペ／−ス」インターナショナル・ジャーナル
・オブ・システマチック譬パクテリオロジー（Ｅ、Ｂ、
Ｓｈｉｒｌｉｎｇａｎｄ　Ｄ、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　：　
Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉ　−Ｚ
ａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　５ｐｅ
ｃｉｅｓ、　Ｉｎｔ、　Ｊ、５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌ、　１６．　３１３〜３４０．　１９６６）］を
用いた。形態学的観察は、イースト・マルトエキス寒天
、オートミール寒天またはスクーチ無機塩寒天上、３０
°Ｃで１４日間生育した培養物について、顕微鏡および
電子顕微鏡を用いて行なった。

成熟胞子はらせん状を形成する３０個を超える数の胞子
鎖として生じだ。胞子は電子顕微鏡観察によれば円筒状
捷だは卵型であり、大きさは０．７〜ＩＸ０．６〜０．
７５μｍであった。胞子の表面は平滑であった。

培養上の特徴は、シャーリングおよびゴツトリープによ
り記載されている培地［イー・ビー・シャーリングおよ
びティー・ゴツトリープ＝「メソソズ・）−一・キャラ
クテリゼーション・オブ・ストレプトマイセス・スペツ
トス」インターナショナル・ジャーナル・オグ・システ
マチック・バタテリオロジー（Ｅ、Ｂ、Ｓｈｉｒｌｉｎ
ｇ　ａｎｄ　Ｄ、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ：　Ｍｅｔｈｏｄｓ
　ｆ’ｏｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ
　Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｍｙｃｅｓ　５ｐｅｃｉｅｓ、　Ｉ
ｎｔ、　Ｊ、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ。

１６、　３１３〜３４０．　１９６６）］、およびソク
スマシにより記載されている培地［ニス・ニー・ソクス
マン：ザ・アクヂノミセーテス、第２巻：クラシフィケ
ーション・アイテシティフィケーショノ・アンド・テス
クリプジョン・オブ・ジェネラ・アンド・スペシイース
。クィリアムズ・アンド・ウィルギンス社発行、パルヂ
モア、１９６１年（Ｓ、／−６Ｖ／ａｋＳｎｌａ、ｔｌ
　：　’１１．’ｈｅ　ａ、ｃｔｌｌ］ｏＩｎｙＣｅｔ
ｅ８＋　ＶＯ２，２Ｃ，１ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ、
　１ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａ、ｎｄ　ｄｅｓｃ
　−ｒｉｐｔｉ、ｏｎ　ｏｆ　ｐ；ｅｎｅｒａ、　ａ、
ｎｄ　５ｐｅｃｉｅｓ、Ｔｈｅ　Ｗｉｌｌ−ｊａ、ｍｓ
　ａｎｄ　Ｗｉ、１．ｋｉｎｓ　Ｃｏ、　Ｂａｌｔｉｍ
ｏｒｅ＋　１９６１　）１０種類について観察した。

培養は３０℃で１４日間行なった。この研究に使用した
色名は日本色彩株式会社発行の色名帖を基にした。オー
トミール寒天、イースト・・マルトエキス寒天およびス
ターチ・無機塩寒天」二で生育した場合、集落は灰色系
の色を呈した。可溶性色素はイースト・マルトエキス寒
天およびその他の培地において生成しなかった。結果を
第１表に示す。

細胞壁分析をベラカー等［ビー・ベラカー、エム・ピー
・レジグアリヤー、アール・イー・ゴートンおよびエッ
ヂ・ニー・レジグアリヤー：「ラビッド・ティフェレン
ジエーション・ビトウィーン・７カルテイア・アンド・
ストレプトマイセス・パイ・ペーパー・クロマトグラフ
ィー・オプ・ボ又ルーセル・ハイドロリゼーソ」、アプ
ライド・マイクロバイオロジー（Ｂ、　Ｂｅｃｋｅｒ、
Ｍ、　Ｐ。

Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ、Ｒ，Ｅ、　Ｇｏｒｄｏｎ　ａ
ｎｄ　Ｈ，Ａ、　Ｌｅｃｈｅ−ｖａ、］、ｉｅｒ　：　
Ｒａｐｉｄ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔ
ｗｅｅｎＮｏｃａｒｄｉａ　ａｎｄ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ　ｂｙ　ｐａｐｅｒ　ｃｈｒｏ−ｍｓ、ｔｏｇ
ｒａ、ｐｈｙ　ｏｆ　ｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ　ｈｙｄｒ
ｏｌｙｓａｔｅｓ　：Ａｐｌ）１．　Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
］、、１２．　４２１〜４２３．　１９６４）　］のノ
ｊ法および山口［山口：「コンパリシン・オブ・ザ・セ
ル・りＡ−ル・コンポジション・副グ・モルフォロギカ
リー・ティスティンクト・アクヂノマイセッツ」、ジャ
ーナル・オブ・バクテリオロジー（’ｌ’、Ｙａｍａｇ
ｕｃｈｉ　：　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅｃ
ｅｌｌ−ｗａ、］、ｌ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ
　’ｍｏｒｐｂｏｌｏｇｉｃａｌｌｙｄｉｓｔｉｎｃｔ
　ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　：　Ｊ、Ｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌ。

８９、　４４４〜４５３；　１９６５）］の方法により
実施した。

第７７３９号菌株の全細胞加水分解物を分析した結果は
、ＬＬ−ジアミノピメリン酸が含まれていたことを示し
た。すなわち、この菌株の細胞壁はＩ型であると考えら
れた。

菌株第７７３９号の生理学的性質を第２表に示す。生育
温度範囲およＯ・生育至適温度は、イースト・マルトエ
キス寒天上、温度勾配インキュベーター（東洋化学産業
社製）を用いて測定した。生育温度範囲は７°Ｃ〜３８
℃、至適温度は２７°Ｃ〜３２℃であった。スクーチ加
水分解、メラニン色素の産生、ゼラチン液化およびフレ
アの加水分解は陽性であった。

第２表、菌株第７７３９号、ストレプトマイセス・オリ
グオクロモジェンスＩＦＯ３２９２およびストレプトマ
イセス・フ１エオファシエンスエＦＯ１３３７２の生理
学的性質 炭素源の資化性をプリドハムおよびゴツトリープの方法
［ティー・ジー・プリドハムおよびティー・ゴツトリー
プ：［ザ・ユーティライセーション争乞）・カーボン０
コンバウンズ・パイ・サム・アクチノマイセタールズ・
アズ・アシ・エイド・フォー・スペシーズ・デクーミネ
ーション」、ジャーナル・オプ・バクテリオロジ−（Ｔ
、Ｇ、Ｐｒ１ｄ　−ｈａｍ　ａｎｄ　Ｄ、Ｇｏｔｔｌｉ
ｅｌ）　：　Ｔｈｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆｃ
ａｒｂｏｎ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｂｙ　ｓｏｍｅ　ａ
ｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓａｓ　ａｎ　ａｉｄ　ｆｏｒ
　５ｐｅｃｉｅｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　：Ｊ
、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｙ　５６．　１０７〜１１４．　
１９４８　）　］に従って試験をした。結果を３０℃で
１４日間インキュヘート後に測定した。セルロースおよ
びキチンを除いてほとんどすべての炭素源が資化された
。

この菌株の炭素源資化性を捷とめて第３表に示す。

第３表、菌株第７７３９号、ストレプトマイセス・オリ
グオクロモジェンスＩＦＯ３２９２およびストレフトマ
イセス・フ鐸オファシエンスＩＦ’０１３３７２の炭素
源資化性 記号、＋：良く資化する。　±二弱く資化する。

−二資化しない この菌株の顕微鏡観察および細胞壁組成分析は、この菌
株がストレプトマイセス属・ワクスマンおよびヘン９９
１９４３年（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｗａｋｓ　−
ｍａｎ　ａｎｄ　Ｈｅｎｒｉｃｉ　１９４３　）に属し
ていることを示している。従ってこの菌株を、発表され
ている文献記載〔イー・ビー・シャーリングおよびティ
ー・ゴツトリープ＝「コーペレティプ・テスクリプジョ
ン・オブ・タイプ・カルチャー・オプ・ストレプトマイ
セス　２：スペシーズ・テスクリプジョンズ・クロム・
ファースト・スタテイ−」、インターナショナル・ジャ
ーナル・オグ・システマチック・バクテリオロジー（Ｅ
、Ｂ、Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　ａｎｄＤ、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ
　：　Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏ
ｎ　ｏｆｔｙｐｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ、　２：　５ｐｅｃｉｅｓｄｅｓｃｒｉ
ｐｔｉｏｎｓ　ｆｒｏｍ　ｆｉｒｓｔ　５ｔｕｄｙ、’
　Ｉｎｔ、Ｊ。

５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　、１８．６９〜１８
９＋　１９６８　）　；イー・ビー・シャーリングおよ
びティー・ゴットリーブ：１コーベレテイブ・テスクリ
プジョン・オグ・タイプ・カルチャーズ・オブ・ストレ
プトマイセス　３：アティショナル・スペシーズ・テス
クリプジョン・クロム・ファースト・アンド・セカンド
・スフティース゛」、インターナショナル・ジャーナル
・オプ・システマチック・バクテリ副ロジー（Ｅ、Ｂ、
　Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　ａｎｄ　Ｄ、　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ
　：Ｃｏｏ丁＋ｅｒａｔｉｖｅ　ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏ
ｎ　ｏｆ　ｔｙｐｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆＳｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃ’ｅｓ、　３　：　Ａｄｄｉｔｉｏｎａｌ　
５ｐｅｃｉｅｓｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｆ
ｉｒｓｔ　ａｎｄ’　５ｅｃｏｎｄ　５ｔｕｄｉｅｓＩ
ｎｔ、　、Ｔ、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　
１８．　２７９〜３９２．１９６８）；イー・ビー・シ
ャーリングおよびティー・ゴツトリーブ：１−コーペレ
ティブ・デスクリプジョン・オプ・タイプ・カルヂャー
ズ・オブ・ストレプトマイセス。４：スペシーズ・テス
クリプジョン・フロム・ザ・セカンド・サード・アンド
・フォース・スクティーズ」、インターナショナル・ジ
ャーナル・オプ・システマチック・バクテリオロジ−（
Ｅ、　Ｂ、　Ｓｈｉｒｋｉｎｇ　ａｎｄ　Ｄ、　Ｇｏｔ
ｔｌｉｅｂ　：　Ｃｏｏｐｅ−ｒａｔｉｖｅ　ｄｅｓｃ
ｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｙｐｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ　
ｏｆＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　４　：　５ｐｅｃｉｅ
ｓ　ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆｒｏｍ　ｔｈｅ　５ｅｃ
ｏｎｄ、ｔｈｉｒｄ　ａｎｄ　ｆｏｕｒｔｈ　５ｔｕｃ
］ｉｅｓ。

Ｉｎｔ、Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、１９，３
９１〜５ｉ２．１９６９）およびアール・イー・ブチャ
ナンおよびエヌ・イー・ギボンズ：パージエイズ・マニ
ュアル・オブ・テクーミネイティブ・バクテリオロジー
第８版、ザ・クィリアムス・アンド・クィルキンス社発
行、パルチモア、１９７４年（Ｒ，Ｅ、　Ｂｕｃｈａｎ
ａｎ　ａｎｄＮ、　Ｅ、　Ｇｉｂｂｏｎｓ　：　Ｂｅｒ
ｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅ’ｒ　−ｍ
ｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ＋　８ｔｈ
　ｅｄｉｔｉｏｎ、　ＴｈｅＷｉｌｌｉａｍｓ　ａｎｄ
　Ｗｉｌｌｋｉｎｓ　Ｃｏ、　＋　Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ
＋１９７４）］の種々のストレプトマイセス種と比較し
た。菌株第７７３９号はストレプトマイセス・オリグオ
クロモジェンス・ワクスマン１９２３．ワクスマンおよ
びヘンリシ１９４８およびストレプトマイセス・フ？Ｌ
オファシェンス・前田、岡見、田谷および悔涙１９５２
に類似していると考えられる。これらの２種は第７７３
９号と下記の点で異なっていた。

ストレプトマイセス・オリク゛メタロモジェンスＩＦＯ
３２９２ ストレプトマイセス・オリヴＡりロモジェンスの気菌糸
の色は、閑株第７７３９号とグルコース・アスパラギン
寒天」―、グリセリン・アスパラギン寒天トおよびポテ
ト・デキストロース寒天上で異なる。ストレプトマイセ
ス・オリク゛メタロモジェンスの集落裏面の色は菌株第
７７３９号の集落裏面の色とグルコース・アスパラギン
基天上、グリセリン・アスパラギン寒天」二およびポテ
ト・デキストロース寒天」二で異なる。ミルクの凝固、
ミルクのペプトン化および７％ＮａＣｌ＋ＴｉＪ性が陽
性である。ストレプトマイセス・オリグオクロモジェン
スｄシュークロース、Ｄ−キシロース、Ｄ−フラクトー
ス、ラムノース、イノシトール、Ｄ−マシニットール、
イヌリン、サリシン、クエン酸ナトリウムおよびＦｉｔ
酸ナトリクムを同化しえない。

ストレプトマイセス・ファエオファシエンスＵＦＯ１３
３７２ ストレプトマイセス・ファエオファシエンスの培養上の
特徴は菌株第７７３９号に類似している。

硝酸塩の還元およびミルクのペプトン化は陽性である。

スターチの加水分解およびゼラチンの液化は陰性である
。ストレプトマイセス・ファエオファシエンスはシュー
クロース、ラフィノース、イヌリンおよび酢酸ナトリウ
ムを同化しえない。

菌株第７７３９号の培養上の特徴はストレプトマイセス
・ファエオファシエンスと良く一致している。し＾・し
ながら、菌株第７７３９号の生理学的性質および炭素源
の資化性は幾つかの点でストレプトス、イセス・ファエ
オファシエンスと異なる。

これらの差異はこの発明者等には、菌株第７７３９号ヲ
ストレプトマイセス・ファエオファシエンスと区別する
のには不十分であると見なされた。従って菌株第７７３
９号はストレプトマイセス・ファエオファシエンスの新
亜種であるさ考えられたので、菌が分離され・だ松江型
で得られた土壌にちなんで、この菌株をストレプトマイ
セス・ファエオファシエンス・サブスペシイース・マツ
エネンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｐｈａｅｏｆ
ａｃｉｅｎｓ’５ｕｂｓｐ。

ｍａｔｓｕｅｎｅｎｓｉ、ｓ　）と命名した。

ストレプトマイセス・ファエオファシエンス参月３ｊ日
付で寄託されている。

この発Ｉ叫のＷＳ７７３９物旨は、ストレプトマイセス
属に属するＷ８７７３．９物質産生菌株、例乏−はスト
レプトマイセス・ファユオファシエンス・ザブスペシイ
ース・マツエネンシスＮｏ、７７３９を、同化しうる炭
素源および窒素源を含む栄養培地中、例えば振とう培養
、深部培養等の好気）（１１条件トに生育せしめる場合
に産生さ７する。

栄養培地中の好捷しい炭素源はグルコース、フラクトー
ス、シュークロース、グリセリン、スターチ勢のような
炭水化物である。そのＩヨか炭素源として含捷れてもよ
いものには、ギシロース、ガラクトース、マルトース、
テキストリン、ラクトース等がある。

好ましい市素源はイーストエキス、ペプトン、グルテン
粉、綿実粉、大豆粉、コーン・ステイープ・リカー、乾
燥イースト、小麦胚等、ならびに例えば硝酸アンモニウ
ム、硫酸アンモニウム、燐酸アシモニクム等のアンモニ
ウム塩類、尿素、アミノ酸□等のような無機および有機
窒素化合物である。

炭素源および窒素源は組合わせて使用すると有利である
が、生育因子を痕跡含み、無機質をかなりの量含むもの
であれば、純度の低い物質で〈使用に適するので、純粋
な形で使用する必要はない。

所望の場合には、培地に炭酸カルシウム、燐酸ナトリウ
ム捷たは燐酸カリウム、塩化ナトリウム捷たは塩化カリ
ウム、硫酸マグネシウム、銅塩等を加えてもよい。必要
に応じで、特に培養培地が激しく発泡する場合には液状
パラフィン、脂肪油、植物油、鉱物油またはシリコンを
加えてもよい。

これとは別の生物学的活性物質の大量生産に使用される
好ましい方法の場合と同様に、深部好気性培養条件がＷ
Ｓ７７３９物質の大量生産には奸計ｌ〜い。少［ｉ；生
産の場合にはフラスコ捷たはび４中、振とう培養または
表面培養か行なわれる。さらに丑だ、大型タンク内で菌
を生育せしめる場合Ｋｌ１、ＷＳ７７３９物質の生産工
程における生育ＪＹ４１〔を回避するために、生産タン
クに閾を接種するのには菌を生育している形で使用する
のが好ましい。すなわち、比較的少−皐の培養培地に菌
の胞１’ｔ：たは菌糸体を接種することにより菌の生育
接種体を寸ず生産じてその接種培地を培養し、次いて培
養した生育接種体を無菌状態で大型タンクに移１〜変え
る。生育接種体が生産される培地は、ｗ３７７３９物質
の生産に使用する培地とは実質的に回じであるか寸たは
異なる。

培養混合物の撹拌および通気ｌ／ｉ種々の方法で行なえ
ばよい。撹拌はプロペラ捷たはこれに類似する機械撹拌
装置、醗酵器を回転捷だは振とうするツノ法、種々のポ
ンプ装置による方法、または滅菌空気を培地中を通過さ
せる方法により行なえばよい。撹拌は醗酵混合物中を滅
菌空気を通過させると吉により効果的に行なわれる。

醗酵は通常約２０〜４０°Ｃ１好捷しくは２５〜３５°
Ｃの温度範囲で、約５０〜１５０時間行なわれる。

このようにして生産されたＷＳ７７３９物質は、その他
の公知の生物学的活性物質の回収に通常使用される常法
により培養培地から回収することができる。

一般的には生産されたＷＳ７７３９物質の大部分は培養
ブロス中に見出され、従ってＷＳ　７７３９物質は培養
ブロスの濾過または遠心分離によって得られたｒ液から
、減圧濃縮、凍結乾燥、ｐＨ調整、樹脂処理、例えば陰
イオン交換樹脂甘だは陽イオン交換樹脂、非イオン吸着
樹脂による処理、常用の吸着剤処理、例えば活性炭、ケ
イ酸、シリカゲル、セルロース、アルミナによる処理、
ゲル濾過、結晶化等のような常法で分肉１〔することが
できる。

前記製造法に従って得られたＷＳ７７３９物質は下記の
物理化学的性質を有する。

■ＷＳ７７３９−Ａ物質 １）形態および色調 うす黄色の粉末 ２）呈色反応 硫酸セリクム反応、沃素反応、エール１ルンヒ反応、ド
ラーゲンドルフ反応および燐モリブテン酸反応に陽性 ニンヒドリン反応に陰性 ３）溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチルに可溶 ベンゼンに難溶 ヘキサン、水に不溶 ４）融点 １００〜１０５°Ｃ ５）比旋光度 ［α］　２”　−十９８．０°　（Ｃ＝　１．０　、Ｃ
ＨＣｌ３）６）紫外部吸収スペクトル λメクノーノ’　＋　ＨＣｅ　＝　２５２，３３２　ｎ
ｍｍａχ ７）赤外吸収スペクトル ０Ｈ”！−３３８０，３０００，２９３０，１７００（
ｓｈ）。

ν ａＸ １６７５、　１６１５．　１５９５．　１５００．　１
４７５゜１４５０、　１３８０．　１３５５．　１３１
０．　１３００゜１１３０、　１０９５．　１０２０．
ｃｍ−１８）分子量 ＥＩＭＳ　：　ｍ／ｚ　４１３　（Ｍ”）′ｇ）　＋３
ｃ核磁気共鳴スペクトル（ＣＤＣＩ！３）δ（ｐｐｍ）
：　２０６．１．　１７６．１．　１６８．１．　１５
１．２゜１４４．４．　１２８．４．　１２７．３．　
１２３．２．　１２３．１゜１０８．５．１０５．４．
　５６．４．　５４．５．　４６．１．４４．５゜３９
．３．　３９．３．　２８．９．２６．２．　２１．３
．　１６．８゜１２．８ １０）”Ｈ核磁気共鳴スペクトル（ＣＤＣｊ’３）δ（
ｐｐｍ）＋　１０．３（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝５Ｈｚ）、７
．３８（ＩＨ，ｄ。

Ｊ＝４．６Ｈｚ’）、７．３２（ＩＨ，ｂｒ、　ｔ、　
Ｊ＝７．５Ｈｚ　）。

７、１３　（Ｉ　Ｈｌｄ、Ｊ＝７．５　Ｈｚ　）、７−
０８　（Ｉ　Ｈ９＋−ｒ　Ｊ＝７．５Ｈｚ）、６．８７
（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、４．５３（ｌ　Ｈ，ｄ
ｄ、　Ｊ’＝１０および４．６Ｈｚ）、４．２５（ＩＨ
，ｍ）。

３．９３（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝４Ｈｚ）、３．２２（３Ｈ，
ｓ）、３．１１（ＬＨ，ａ、ａ、　Ｊ＝４４および４Ｈ
ｚ）、３．００（ＩＩ（、ｄｄ、＞１４および７．３Ｈ
ｚ）、２．９８（ＩＨ，ｍ）、２．６３（ＩＨ。

ｍ）、２．５３（ＩＨ，ｍ）、２．３８−２．３２（２
Ｈ，ｍ）。

２．２３（３Ｈ，ｓ）、１．９０（ＩＨ，ｍ）、１．８
３（ＩＨ，ｍ）。

（１，７２（３Ｈ，ｄ、Ｊ−−６，８Ｈｚ）（２）　Ｗ
　Ｓ　７７３９−　Ｂ物質 １）形態および色調 うす黄色の粉末 ２）元素分析値 Ｃ：６３．２２・易、Ｈ：６．１ｏチ、Ｎ：９．９７％
、Ｓ：８．３０係３）呈色反応 硫酸セリウム反応、沃素反応、エールリッヒ反応、ドラ
ーゲンドルフ反応およびリンモリブデン酸反応に陽性 ニンヒドリン反応に陰性 ４）溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、１１２エヂルにｉ
’＋Ｊ溶 ベンゼンに難溶 ヘキサン、水に不溶 ５）融点 １１２〜１２０°Ｃ ６）比旋光度 ［α］　２３＝　＋９７．０°（Ｃ＝　０．５　、　Ｃ
ＨＣｌ３）７）紫外部吸収スペクトル ＝　３４７　ｎｍ　（Ｅ’％−３４７）ａ λ１り／−ル　＋　ＨＣ１！　＝　２４６．　３４７　
□□ａＸ λ１クツー”　＋　ＮａＯＨ＝＝　２９５＋　３３０　
ｎｍａＸ ８）赤外吸収スペクトル ν０Ｈ”＝　３３５０．３０００．２９００．　１６７
０゜ａＸ １６１０、　１５９５．　１４９０．　１４７０．　１
４４５゜１３８０、　１３５０．　１３４０．　１３１
０．　１２９７゜１２２０、　１１２０．　１１１０．
　１０Ｂ５．　１０２０゜９２０　ｃｍ　’ ９）分子量 ＥＩＭＳ：　ｍｅｚ　４１１　（Ｍ　）１（１）　１３
Ｃ核磁気共鳴吸収スペクトル（ＣＤＣｊ’：＋）δ（ｐ
ｐｍ）：　１９６．８．　１７６．１．　１６８．１．
　１５１．０゜１５０．１．　１４４．４．、１３６．
３．　１２８．４．　１２７．３゜１２３．２．　１２
３．１．　１０８．４．　１０４．９．　５６．８゜５
４．９．　４６．０．　４４．２．　３９．２．　３４
．．５．　２６．２゜１６、９．　）３．２ １１）’Ｈ核磁気共鳴吸収スペクトル（ｃＤＣ１３）δ
（ｐｐｍ）：　７．４−７．２（２Ｈ，ｍ）、７．１８
　’７．０４（３Ｈ。

ｍ）、６．８．７（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．
３４（ＩＨ，ｔ。

ｄ、Ｊ＝５．９　および　２．０Ｈｚ）、４．５０（Ｌ
Ｈ，ｄｄｄ。

Ｊ＝ｌ　Ｏ，２，４，６および　１．４Ｈｚ）、４．３
３（ＩＨ，ｔ、ａ。

Ｊ４７．０および４−５　Ｈｚ　）、１９７　（Ｌ　Ｈ
＋　ｄ　、Ｊ＝３−９　Ｈｚ　）。

３．２４（３Ｈ，ｓ）、３．２２（２Ｈ，ｍ）、３．１
３（ＩＨ，ｄ。

Ｊ’＝４．６Ｈｚ　）、　、ａ、１０（ＩＨ，ｄ、　Ｊ
＝７．３Ｔ（ｚ）、３．０（２Ｈ。

ｍ）、　’　２．２７（３Ｈ，ｓ）、　０．７２（３Ｈ
，ｄ、　Ｊ’＝６．８Ｈｚ）ＷＳ７７３９物質の生物学
的性質 ＷＳ７７３９物質は喘息、血栓症等の治療に有用である
。

そのような薬理活性を示すだめの例として、薬理試験結
果数例を以下に示す。

試験１ 血小板凝集阻止 体重２．５〜３　ｋｇの雄日本白兎の頚動脈にポリエチ
レンカテーテルを挿入して血液を採取した。血液を９容
の血液に対して１容の３．８％クエン酸ナトリウムによ
り凝固防止処理した。血液を室温、１５０ｙで１０分間
遠心分離して、血小板に富むＩｆＩＩ漿（ＰＲＰ）を調
製した。さらに血液を１０００２で２０分間遠心分離し
て得た血小板に乏しい血漿でＰＲＰを希釈した。血小板
数は５ＸＩＯ５個／π♂であった。血小板凝集法は血小
板凝集剤により、ＮＫＫヘマ−）レーサー（Ｈｅｍａ　
Ｔｒａｃｅｒ）［ニコ・バイオサイエンス社製（Ｎｉｋ
ｏ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ工ｎＣ，月中、３７°Ｃで、
ＰＲＰと試薬との合計容量０．３　ｍｅを用いてシリン
ダー状ガラスセル中、電磁撹拌棒による１１０００ｒｐ
の一定の撹拌下に行なった。

血小板凝集を濁度法により、凝集中のＰＲＰの光透過度
の変化を記鎌することによって測定した。

阻止剤の活性を工Ｃ５ｏ値、すなわち血小板凝集応答５
０％阻止に必要な濃度として表わした。アラキドン酸を
１５０，４Ｍの終濃度で使用した。血小板活性化因子（
以下ＰＡＦと略）およびトロンビンの終濃度は、通常は
それぞれ２０．１Ｍおよび０．８ｕ／　ｍｅであるが、
近似的に最高凝集７５％誘起するように選択した。

その結果を第４表に示す。

第４表、ＷＳ７７３９物質の鬼面小板凝集に対すＺ試験
２ 体重３００〜５００ｙのハートレー系雄モルモットを使
用した。これらのモルモットをガラミントリエチオグイ
ド２０ｍｇ／ｋｑを腹腔内投与して麻酔した。気管にカ
ニユーレ挿入し、動物を陽圧ポンプにより５−／行程、
６０行程／分で人工通気した。気管カニユーレからの側
管をバイオクイジオグラフ１８０システム（三栄機器社
製）と組合わせた圧力変換器に接続して圧力変化を測定
した。

薬物を投与するだめにカテーテルを右頚静脈に挿入した
。静脈内注射した合成ｐ　Ａ　Ｆ　１　ｐｙ／ｋｙによ
って誘起された肺圧の増加を測定し、薬物の効力を圧力
増加の阻止百分率として第５表に示した。

薬物はＰＡＦ注射１０分前に静脈内注射により投与した
。

嚢　：Ｐ＜０．００１ 試験３ ラッ１−における静脈置注ＩＪＸＪＰＡＦ誘起血圧低下
作用の阻止 生後７週齢のスプラグ−ドーリ−系ラットをウレタン７
００　ｍｙ／ｋｑの腹腔内注射により麻酔した。

動脈圧測定のためおよび薬物投与のために、カテーテル
を大腿動脈および大腿静脈にそれぞれ挿入した。バイオ
クイジオグラフ１８０システム（三栄機器社製）と組合
わせだ変換器を用いて、血圧を大腿動脈から記録した。

試験薬物の阻止活性を合成Ｐ　Ａ　Ｅ’　ｍ起血圧低下
Ｆ■止百分率として第６表に示した。ｉＪＡ’ｌ・゛は
１　ｐｙ　／　ｋｙの投与餡て静脈内投Ｊｊシた。薬物
はＰＡＦ’注躬３分前に静脈内投与し７だ。

この発明の医薬組成物は、例えは外部適用、内部適用ま
たは非経口適用に適した有機もしくは無機担体もしくは
賦形剤と混合してＷＳ７７３９物質を有効成分として含
有する固体状、半固体状または液状の医薬製剤の形で使
用することができる。

有効成分は、例えば錠剤、ペレット、カプセノベ坐剤、
溶液、エマルジョン、懸濁液および使用に適するその他
のあらゆる網形用の、通常の無毒性の、医薬上して許容
される担体上混合すればよい。

使用できる担体は水、グルコース、ラクトース、アラヒ
アゴム、ゼラチン、マンニラトール、スターチ・ペース
ト、マグネシウムトリシリケート、クルク、コーン・ス
ターチ、ケラチン、コロイドシリカ、ポテト・スターチ
、尿素およびその他の固体状、１′固体状寸たは液状の
、製剤の製造における使用に適しだ担体であり、さらに
助剤、安定前、濃厚化剤、着色別ならびに芳香剤を使用
してもよい。［ｉ的とする活性化合物は、疾患の過程せ
たｌｌｑｊ条件に従って所望の効果を発揮するのに十分
な［ｊ１医薬組成物中に含有せしめる。

この組成物を人に適用する場合、経１コ投与により適用
１′るのが好捷しい。ＷＳ　７７３９物餉の投り）ＩＩ
まだは治療に有効な隼は、治療すべきそれぞｉｔ個々の
患者の年齢と条件とによって変化するが、疾患の治療の
ために有効成分は一般的に１日当り、人の体重ｋｇに対
して約０．１〜１００　ｍｇ、好捷しくけ０５〜５　ｍ
ｇの投与用で投与され、通常平均１回Ｊ’＜　ＩＸｉ吊
約５　ｍｙ、１０　ｍｇ、５０ｒ＋＋ｙ、１００〃ｙ、
２５０ｎｒｑおよび５　（ｌ　Ｏｍｆｌが投与される。

以下この発明を実施例に従って説明する。

実施例１ 醗酵 コーン・スターチ（１％）、グリセリン（１％）、グル
コース（０，５％）、乾燥イースト（０，５％）、コー
ン・ステイープ・リカー（０，５％）、綿実粉（１％）
を含む種培地（８０ｍｅ）（６ＮＮａＯＨでｐＨ６，５
に調整）および炭酸カルシウム（ｏ、２％）ヲ、２５０
　ｍｅのエルレンマイヤーフラスコ２５個中にそれぞれ
注ぎ、１２０°Ｃで３０分間滅菌した。

ストレプトマイセス・ファエオファシェンス・サブスペ
シイース・マツェネンシスＮｏ、　７７３９の斜面培養
物の１白金耳をそれぞれの培地に接種し、３０℃で回転
振とり器上、行程３インチ、　２２Ｏｒｐｍで７２時間
培養した。この種培養物を予しめ１２０°Ｃ１３０分間
滅菌しておいた２００１の鋼製醗酵器中の、グリセリン
（１％）、グルテン粉（０，７％）、塩化アンモニウム
（０，１％）、硫酸マグネシウム・７水化物（００５％
）、炭酸カルシウム（０，２％）、塩化コバルト・６水
化物（４ｐｙ　／ｍｅ　）　オヨヒ沃化ナトリ！７　ム
（０，５ｐｙ　７ｍｌ　）を含む生産培地（１６０／？
）に接種し、３０°Ｃで１６（１／？／分で通気しなか
ら２００　ｒｐｍの撹拌下に９６時間培養した。

分前 このようにして得られる培養ブロスを珪藻土を用いて涙
膜しだ。涙液（１６０１）をｐＨ７，０に調整し、次い
でＨＩ・酸エチル（１６０＃）で抽出した。

抽出液を減圧濃縮した。得られる物質をシリカゲル（］
、、５１を使用するカラムクロマトグラフィーに伺し、
カラムを７２−ヘキサンアセトン混液（］：１）で溶出
した。活性化合物を含む両分を大きさＢのすタロブレプ
Ｓ　ｉ　６０　（Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ　Ｓ　ｉ６０５
ｉｚｅ　Ｂ、メルク社製）を予じめ充填しだカラムに適
用し、タロロボルムーメタノール混液（１０（１：１．
）で溶出した。

ＷＳ　７７３９−ＡＩ＃Ｊ質はＷＳ　７７３９−Ｂ物質
に先立って溶出される。ＷＳ　７７３９−Ａ物質を含有
する有効両分を同条件で予じめ充填したカラムにより再
度クロマトグラフィーに伺す。有効画分を減圧濃縮して
、ＷＳ７７３９−Ａ物質（２３０■）の純物質を粉末と
して得た。

実施例２ 醗酵 コーン・スクーチ（１％）、クリセリン（１％）、グル
コース（０，５％）、乾燥イースト（０，５％）、コー
ン・ステイープ・リカー（０，５％）、綿実粉（１％）
を含む種培地（８０ｒｎｌ　）　（６ＮＮａＯＨでｐＨ
６，５に調整）および炭酸カルシウム（０，２％）を、
２５０ｍｇのエルレンマイヤーフラスコ２５個中にそれ
ぞれ注ぎ、１２０°Ｃで３０分間滅菌した。

ストレプトマイセス・ファエオファシエンス・サブスペ
シイース・マツエネンシスＮｏ、　７７３９の斜面培養
物の１白金耳をそれぞれの培地に接種し、３０°Ｃで回
転振とう器」二、行程３インチ、２２０ｒｐｍて７２時
間培養した。この種培養物を予じめ１２００Ｃ，３０分
間滅菌しておいた２００１の鋼製醗酵型中の、グリセリ
ン（１％）、グルテン粉（０，７％）、−塩化アンモニ
ウム（０，１％）、硫酸マグネシウム・７水化物（０，
０５％）、炭酸カルシタム（０２係）、塩化コバルト・
６水化物（４７ｙ　／ｍｅ　）および沃化ナトリ！７　
ム（０，５／’ｆ／ｍｅ　）　ヲ含む生産培地（１６０
１！　）に接種し、３０　’Ｃで１６０／？／分で通気
しなから２００　ｒｐｍの撹拌下に９６時間培養した。

分１ｌｕｆｆ このようにして得られる培養ブロスを珪藻土を用いて沖
過した。炉液（１６０１）をｐＩ（７，ＯＫ副調整、次
いでＦ！ｉ′１：酸エチル（１６０ｆｆ）で抽出した。

抽出液を減圧濃縮した。得られる物質をシリヵゲ＃（１
，！Ｗ？）を使用するカラムクロマトグラフィ。

−に伺し、カラムをｎ−ヘキサンアセトン混液（１：１
）で溶出した。活性化合物を含む両分を大きさＢのすタ
ロプレプＳ　ｉ、　６０　（Ｌｉｃｈｒｏｐｒｅｐ　Ｓ
　１（ｉ（ｌ　５ｉｚｅ　Ｂ、メルク社製）を予じめ充
填したカラムＫ　適用シ、タロロボルムーメタノール混
液（１００：　、１　）で溶出し／ζ０ ＷＳ７７３９−Ｂ物質はＷＳ７７３９−Ａ４Ｉ！７Ｊ質
に続いて溶出される。ＷＳ７７３９−Ｂ＊質を含イＪす
る有効画分を同条件で予じめ充填したカラムによシ再度
タロマドグラフィーに付した。有効画分を減圧濃縮して
ＷＳ７７３９−Ｂ物質（３００ｍｇ　）の純物質を粉末
として得だ。

出願人　藤沢薬品工業株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）それぞれが下記の理化学的性質を有するＷＳ７７
   ３９−Ａ物質まだはＷＳ７７３９−Ｂ物質から選ばれた
   ＷＳ７７３９物質。 Ｑ）ＷＳ７７３９−Ａ物質 】）形１島および色調 うす黄色の粉末 ２）呈色反応 （１４を酸ヤリラム反応、沃素反応、エールリッヒ反応
   、ドラーゲンドルフ反応および燐モリブテン酸反応に陽
   性 ニンヒドリン反応に１雲性 ３）溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸ユチＪしに０
   １溶 ベンゼンに難溶 ヘキサン、水に不溶 ４）融点 １００〜１０５°Ｃ ５）比旋光度 ［α］２３＝＋９８．０°（Ｃ＝１．０　、　ＣＨＣｌ
   ３　）６）紫外部吸収スペクトル ７）赤外吸収スペクトル Ｕ”””＝　３３８０．　３０００．　２９３０．　１
   ７００（ｓｈ）。 ａＸ １６７５、　１６１５．　１５９５．　１５００．　１
   ４７５゜１４５０、　１３８０．　１３５５．　１３１
   ０．　１３００゜１１３０、　１０９５．　１０２０　
   ｃｍ’−’８）分子量 Ｅ工ＭＳ：ｍ／、ｚ　４１３　（Ｍ”）ｇ）１８０核磁
   気共鳴スペクトル（ｃＤｃｅ３）δ（ｐｐｍ）＋　２０
   ６．１．　１７６．１．　１６８．１，１５１．２゜１
   ４４．４．　１２８．４．　１２７．３．　１２３．２
   ．　１２３．１゜］０８．５＋　１０５．４＋　５６．
   ４＋５４．５＋　４６．１＋　４４．５＋３９．３．　
   ３９．３．　２８．９．　２６．２．　２１．３．　１
   ６．８゜１２．８ １０）　’　Ｈ核磁気共鳴スペクトル（ＣＤＣｅ３）δ
   （ｐｐｍ）：　１０．３（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝５Ｈｚ）、
   ７．３８（ＩＨ，ｄ。 Ｊ＝４．６Ｈｚ）、７．３２（ＩＨ，ｂｒ、ｔ、　Ｊ＝
   ７．５Ｈｚ）。 ７．１３（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝７．５Ｈｚ）＋　７．０．
   ８（ＩＨ，ｔ＋　Ｊ＝７．５Ｈｚ）。 ６．８７（ＬＨ，’ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、４．５．３
   （ＬＨ，ｄｄ、Ｊ’＝１．０および４．６１Ｊｚ）、４
   ．２５（ＩＨ，ｍ）、３．９３（ＬＨ，ｄ、。 、’ｒ−、−４１４ｚ）、３．２２（３Ｈ，ｓ）、３．
   １１（ＬＨ，ｄｄ、、Ｊ＝１４および４Ｈｚ）、’　３
   ．００（ＩＨ，ｄｄ、ＪＪ４および７．３１４ｚ）。 ２．９８（ＩＨ，ｍ）、２．６３（、ＬＨ，ｍ）、２．
   ５３（ＩＨ，ｍ）。 ２．３８２．３２（２Ｈ，ｍ）、２．２３（３Ｈ，ｓ）
   、１．９０（’ｌａｍ）、１．８３（ＩＨ，ｍ）、０．
   ７２（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．８Ｈｚ）（２）ＷＳ７７３
   ９−Ｂ物質 １）形褥および色調 うす黄色の粉末 ２）元素分析値 Ｃ：　６３．２：ＩＭ、Ｈ：　６．１０％、’　Ｎ　：
   　９．９７％、Ｓ、：８．３０％３）呈色反応 硫酸セリクム反応、沃素反応、エールリッヒ反応、ドラ
   ーゲンドルフ反応および燐モリブテン酸反応に陽性 ニンヒドリン反応にＩ陰性 ４）溶解性 メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチルに可溶 ベンゼンに難溶 ヘキサジ、水に不溶 ５）融点 １１２〜１２０８Ｃ ６）比旋光度 ［α］　”３−＋９７．０°　（ｃ　＝　ｏ、ｓ　、　
   ｃＨｃ１３）７）紫外部吸収スペクトル λ１タノー”＝　２４６’　ｎｍ　（Ｅ”　＝　３６２
   ）ｍａｘ　１　ａｍ ＝　３４７　ｎｍ　（Ｅ１％＝　３４７）ｃｒｎ ８）赤外吸収スペクトル ”１１０’　＝　３３５０．　３（１００，２９００，
   １６７０゜１Ｇ］、０．　１５９５．　１，４９０．　
   １４７０．　１，４４５゜１３８０、　１３５０．　］
   、３４０．　１．３］、０．　１２９７゜１２２０、　
   １１２０．　１１１０．　１０８５．　１０２０゜９２
   ０　ｃｍ　’ ９）分子用 ＥＩＭＳ：　ｍ／ｚ　４１１　（Ｍ＋）１（＋）　１３
   ０核磁気共鳴吸収スペクトル（ＣＤＣ／、）δ（ｐｐｍ
   ）：　１９６．８．　１７６．１．　１６８．１．　１
   ５１．０゜１５０、．１．、　１４４゜４．　１３６．
   ３．　１２８．４．　１２７．３゜１２３．２．　１２
   ３．１．　１０８．４．　１０４．９．　５６．８゜５
   ４．９．　４６．０．　４４．２．　３９．２．　３４
   ．５．、２６．２゜１６．９．　１３．２ １１）’Ｈ核磁気共鳴吸収スペクトル（Ｃ’ＤＣＩ３）
   δ（ｐｐｍ）：　７．４−７．２（２Ｈ，ｍ）、７．１
   ８−７．０’４（３Ｈ，ｍ）。 ６．８７（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．３４（
   ＩＨ，ｔ、　ａ、　Ｊ＝５９および２．０Ｈｚ）、４．
   ５０（１Ｂ、、　ｄｄｄ、　Ｊ　＝１０．２゜４６およ
   び１．４Ｈｚ）、４．３３（ＬＨ，ｔ、ｄ、　Ｊ＝７．
   ０および４．５Ｈｚ）、３．９７（ＬＨ，ｄ、Ｊ＝３．
   ９Ｈｚ）。 ３．２４（３Ｈ，ｓ）、３．２２（２Ｈ，ｍ）、３．１
   ３（Ｈ（、ｄ。 Ｊ＝４．６Ｈ，ｚ）、３．１０（ＬＨ，ｄ、、Ｊ＝７．
   ３Ｈｚ）、３．０（２Ｈ，ｍ）、２．２７（３Ｈ，ｓ）
   、０．７２（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．８Ｈｚ）（２、特許
   請求の範囲第１項に記載のｗｓ　７７３９−Ａ物質。 （３）特許請求の範囲第１項に記載のＷＳ７７３９−Ｂ
   物質。 し、得られる培養物からＷＳ　７７３９物質を分離採収
   することを特徴とするＷＳ　７７３９物質の製造法。 （５）　ストレプトマイセス・ファエオファシエンス・
   サブスペシイース・マツエネンシス（Ｓｔｒｅｐｔｏ−
   ｍｙｃｅｓ　ｐｈａｅｏｆａｃｉｅｎｓ　５ｕｂｓｐ、
   　ｍａｔｓｕｅｎｅｎｓｉｓ）ｌ！１７７３９゜ ＋６）　ＷＳ７７３９物質を有効成分とする喘息捷だは
   血栓症の治療剤。