NL8004024A - Nieuwe gesubstitueerde alkyloximeverbindingen van 7-(2-amino-4-thiazolyl) aceetamidocefalosporaan- zuur, hun bereiding, hun toepassing als geneesmiddelen en samenstellingen, die deze verbindingen bevatten. - Google Patents

Description

-/ V 1 803179/Ar/mk -1-

Korte aanduiding:"Nieuwe gesubstitueerde alkyloximeverbindingen van 7-(2-amino-^-thiazolyl)aceetamidocefalosporaanzuur, hun bereiding, hun toepassing als geneesmiddelen en samenstellingen, die deze verbindingen bevatten." 5

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe gesubstitueerde alkyloximeverbindingen van 7-(2-amino-4-thiazolyl)aceetamidocefalosporaan-zuur, hun bereiding, hun toepassing als geneesmiddelen en samenstellingen, die deze verbindingen bevatten.

10 De uitvinding heeft betrekking op verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad in de vorm van het syn-isomeer, waarin R gelijk is aan Ra, waarbij Ra een groep -(0^^-5-22 voorstelt, waarin R2 de groep met formule 7 of de groep met formule 8 voorstelt, waarbij deze groepen eventueel in geprotoneerde vorm kunnen zijn, en n 15 een geheel getal is van 1 tot *l·, - of R gelijk is aan Rb, waarbij Rb een groep -(CH^^-S-CN, waarin n een geheel getal van 1 tot b is, of een groep -CHFg voorstelt, - R^ een waterstofatoom, een chlooratoom, een methoxygroep, een alkyl-, cycloalkyl- of alkylthiogroep met ten hoogste 5 koolstofatomen, een groep 20 -GHg-S-R’, waarin R' een al dan niet gesubstitueerde, stikstof-bevattende hetero-cyclische groep of een acylgroep met 2-4 koolstofatomen voorstelt, een acetoxymethylgroep, een carbamoyloxymethylgroep, een groep met formule 9 van het formuleblad, waarin Alk 1-4 koolstofatomen bevat, of een asido-methylgroep voorstelt, en A een waterstofatoom of een gemakkelijk af te 25 splitsen estergroep voorstelt, of wanneer R gelijk is aan Ra, de groep CO^A tevens het anion -CO^” kan voorstellen, of wanneer R gelijk is aan Rb A tevens een alkalimetaal-, aardalkalimetaal-, magnesium-, ammonium- of organische stikstofbase-equivalent kan voorstellen, alsmede de additie-zouten van de verbindingen met formule 1 met organische of anorganische 30 zuren.

Als betekenissen van R^ kunnen genoemd worden de methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, butyl-, isobutyl-, tert.butyl-, pentyl-, sec.pentyl-, tert.pentyl-, cyclopropyl-, cyclobutyl- en eyclopentylgroep.

Als betekenissen van R^ kunnen tevens genoemd worden de 35 methylthio-, ethylthio-, propylthio-, isopropylthio-, butylthio-, isobutyl thio- en tert.butylthiogroep.

Voorts kunnen als betekenissen van R^ genoemd worden de 800 4 0 24 1 ( -2- groepen -CI^-S-R’, waarin R' de 1,2,3-» 1,2,5-, 1,2,4- of 1,3,4-thiadia-zolylgroep, 1-H tetrazolylgroep, 1,3-thiazolylgroep, 1,2,3-, 1,2,4- of 1,3,4-triazolylgroep, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5- of 1,3,4-oxadiazolylgroep voorstelt, waarbij deze groepen al dan niet gesubstitueerd kunnen zijn 5 door één of meer groepen, gekozen uit de methyl-, ethyl-, propyl-, isopropyl-, methoxy-, ethoxy-, propyloxy-, isopropyloxy-, amino-, hydroxy-carbonylmethyl-, diaethylaminoethyl- en diethylaminoethylgroep. R' kan tevens een acetyl-, propionyl- of butyrylgroep voorstellen.

Als betekenissen van R^ kunnen tevens genoemd worden de 10 aceetamido-, propionylamido-, butyrylamido-, isobutyrylamido- en valeryl-amidogroep.

Als gemakkelijk te splitsen esters kunnen genoemd worden d^faethoxymethyl-, ethoxy-methyl-, isopropoxy-methyl-, oc-methoxyethyl-, ac-ethoxyethyl-, methylthiomethyl-, ethylthiomethyl-, isopropylthiomethyl-, 15 pivaloyloxymethyl-, acetoxymethyl-, propionyloxymethyl-, isobutyryloxy-methyl-, isovaleryloxymethyl-, propionyloxyethyl-, isovaleryloxyethyl-, 1-acetoxyethyl-, 1-acetoxypropyl-, 1-acetoxybutyl-, 1-acetoxyhexyl- en 1-acetoxyheptylesters·

Als zouten kunnen genoemd worden natrium-, kalium-, 20 lithium-, calcium-, magnesium- en ammoniumzouten. Tevens kunnen de zouten genoemd worden, die gevormd zijn met organische basen zoals trimethylamine, diethylamine, triethylamine, methylamine, propylamine, N,N-dimethyl-ethanolamine, tris(hydroxymethyl)aminomethaan, ethanolaaine, pyridine, picoline, dicyclohexylamine, N',Ν'-dibenzylethyleendiamine, morfoline, 25 benzylamine, procaine, lysine, arginine, histidine en N-methylglucamine.

De bovengenoemde verbindingen met formule 1 kunnen de vorm bezitten van zouten van organische of anorganische zuren, aangezien deze verbindingen tenminste één in een zout om te zetten aminogroep bevatten.

30 Als zuren, waarmee de verbindingen met formule 1 omgezet kunnen worden in zouten, kunnen onder andere genoemd worden azijnzuur, trifluorazijnzuur, maleinezuur, wijnsteenzuur, methaansulfonzuur, benzeen-sulfonzuur, p-tolueensulfonzuur, zoutzuur, broomwaterstofzuur, joodwater-stofzuur, zwavelzuur en fosforzuur.

35 De uitvinding heeft in het bijzonder betrekking op de verbindingen met formule 1, waarin R^ een waterstofatoom, een groep -OH^-Si-R", waarin R" een 1-methyl-1 (H) tetrazolylgroep of 2-methyl-1,3,4-thiadiazolylgroep voorstelt, een acetoxymethylgroep of een azidomethyl- 800 4 0 24 -* * -3- ’ ; groep voorstelt, alsmede de additiezouten daarvan met organische of anorganische zuren·

De uitvinding heeft zeer in het bijzonder betrekking op de verbindingen met formule 1, waarin R een groep met formule 10 van het 5 formuleblad eventueel in geprotoneerde vorm, of een groep -CHF^ voorstelt en een waterstofatoom, een 1-methyl-l(H)tetrazolyl-thiomethyl-, 2-methyl-1,3,^-thiadiazolylthiomethyl-, acetoxymethyl- of azidomethylgroep voorstelt·

De uitvinding heeft in het bijzonder betrekking op de 10 in de voorbeelden beschreven verbindingen en met name 3-acetoxymethyl-7-/72-( 2-aminothiazol-^-yl) -2-/2-( amino-iminomethylthio )7ethoxyimino7aceet-amido7cef-3-em-^—carbonzuur, syn-isomeer, in de vorm van het inwendige zout of het zout met een anorganisch of orgaisch zuur en de esters met gemakkelijk te splitsen groepen daarvan en op 3-acetoxymethyl-7-/”/2-(2-15 amino-thiazol-4-yl)2-difluormethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, de zouten met alkalimetalen, aardalkalimetalen, magnesium, ammonium en organische stikstofbasen en de esters met gemakkelijk te splitsen groepen daarvan, alsmede de zouten met anorganische of organische zuren daarvan· 20 De verbindingen met formule 1 kunnen bestaan in de door formule 1 weergegeven vorm of in de vorm van verbindingen met formule 1z van het formuleblad.

De uitvinding heeft tevens betrekking op een werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met formule 1, die daardoor geken-25 merkt is, dat men een verbinding met formule 2 van het formuleblad, waarin 3*2 een waterstofatoom of een beschermende groep van de aminogroep en een waterstofatoom of een gemakkelijk te splitsen estergroep voorstelt, R^ de eerdergenoemde betekenissen bezit en R^ een waterstofatoom of R^' voorstelt, waarin R^' een groep -(CHg^-Hal voorstelt, waarin n een geheel 30 getal is van 1 tot 4 en Hal een halogeenatoom voorstelt, ofwel, wanneer R^ een waterstofatoom voorstelt, behandelt met een verbinding Hal^-CïD^, waarin Hal^ een chloor- of broomatoom voorstelt, onder vorming van een verbinding met formule 3 van het formuleblad, waarin , R^ en R2 de eerdergenoemde betekenissen bezitten, 35 ofwel, wanneer R^ gelijk is aan R^’, behandelt met thioureum of een verbinding met formule 11 van het formuleblad, waarin R^ een beschermende groep van de aminogroep voorstelt, of met een verbinding met de formule N&-S-R-, waarin R_ een ammoniumgroep of een alkalimetaalatoom voorstelt, 5 5 -4-

* I

onder vorming van een verbinding met formule 3' van het formuleblad, waarin E2 en de eerdergenoemde betekenissen bezitten en Rc een groep met formule 7, een groep met formule 12, of een nitrilgroep voorstelt, verbindingen met formule 3» waarin R2 en elk een waterstofatoom voor-5 stellen en verbindingen met formule 3', waarin R., en A^ elk een waterstofatoom voorstellen, en R verschillend is van de groep met formule 12, ver- c bindingen overeenkomende met verbindingen met formule 1, waarin A een waterstofatoom voorstelt en R niet de groep met formule 8 voorstelt, die men desgewenst veresterd of omzet in een zout met een base of een zuur en ver-10 bindingen met formule 3 of 3‘, waarin tenminste één van de groepen R2 of A^ verschilt van een waterstofatoom en verbindingen met formule 3' waarin R de groep met formule 12 voorstelt, die men behandelt met één of meer middelen, gekozen uit hydrolysemiddelen, hydrogenolysemiddelen, en thio-ureum onder vorming van verbindingen met de algemene formule 1' van het 15 formuleblad, waarin R en R^ de eerdergenoemde betekenissen bezitten, overeenkomende met een verbinding met formule 1, waarin A een waterstofatoom voorstelt, die men desgewenst veresterd of omzet in een zout met behulp van een base of een zuur.

In de verbinding met formule 2 kan de door R2 voorge-20 stelde beschermende groep van de aminogroep bijvoorbeeld een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen, bij voorkeur de tert.butylgroep of tert.amylgroep en tevens een alifatische acylgroep, een aromatische of heterocyclische acylgroep of een carbamoylgroep zijn.

Als alifatische acylgroepen kunnen genoemd worden de 25 lagere alkanoylgroepen, zoals bijvoorbeeld de formyl-, aeetyl-, propionyl-, butyryl-, isobutyryl-, valeryl-, isovaleryl-, oxalyl-, succinyl-, en piva-loylgroep, alsmede de lagere alkoxy- of cycloalkoxycarbonylgroepen, zoals bijvoorbeeld de methoxycarbonyl-, ethoxycarbonyl-, propoxycarbonyl-, 1-cyclopropylethoxycarbonyl-, isopropoxycarbonyl-, butoxycarbonyl-, tert.

30 butoxycarbonyl-, pentyloxycarbonyl-, tert.pentoxycarbonyl- en hexyloxy-carbonylgroep.

Als aromatische acylgroepen kunnen genoemd worden de benzoyl-, toluoyl-, nafthoyl-, ftaloyl-, mesyl-, alsmede de fenylacetyl-en fenylpropionylgroep en arylalkoxycarbonylgroepen zoals de benzyloxy-35 carbonylgroep.

De acylgroepen kunnen gesubstitueerd zijn door bijvoorbeeld een chloor-, broom-, jodium- of fluoratoom, zoals bijvoorbeeld de chlooracetyl-, dichlooracetyl-, trichlooracetyl-, trifluoracetyl- of broom-acetylgroep.

800 4024 1 1 -5- « 4

De groep R., kan tevens een lagere aralkylgroep, zoals de benzyl-, 4-methoxybenzyl-, fenylethyl-, trityl-, 3,^-dimethoxybenzyl-of benzylhydrylgroep voorstellen.

De groep R2 kan tevens een halogeenalkylgroep, zoals de 5 trichloorethylgroep voorstellen.

Voorts kan de groep R2 een chloorbenzoyl-, paranitro-benzoyl-, paratert.butylbenzoyl-, fenoxyacetyl-, caprylyl-, n-decanoyl-, of acryloylgroep voorstellen.

De groep R2 kan tevens een methylcarbamoyl-, fenylcar-10 bamoyl- of nafthylcarbamoylgroep alsmede de overeenkomstige thiocarbamoyl-groepen voorstellen.

De bovengenoemde lijst is niet uitputtend. Het spreekt vanzelf, dat andere beschermende groepen van aminogroepen, in het bijzonder op het gebied van de peptidechemie bekende groepen, eveneens kunnen 15 worden toegepast.

Als betekenissen van -C0^^ kunnen in het bijzonder genoemd worden de met alkylgroepen gevormde esters, zoals de butyl-, iso-butyl-, tert.butyl-, pentyl-, en hexylester.

Voorts kunnen genoemd worden de acetoxymethyl-, propion-20 yloxymethyl-, butyryloxymethyl-, valeryloxymethyl-, pivaloyloxymethyl-, 2-acetoxyethyl-, 2-propionylethyl- en 2-butyryloxyethylester.

Verder kunnen genoemd worden de 2-mesylethyl-, 2-jood-ethyl-, p , p , P -trichloorethylr, vinyl-, allyl-, ethynyl-, propynyl-, benzyl-, 4-raethoxybenzyl-, ^-nitrobenzyl-, fenylethyl-, trityl-, difenyl- « 25 methyl- en 3,^-dimethoxybenzylester.

Daarnaast kunnen genoemd worden de fenyl-, ^-chloorfenyl-j tolyl- en tert.butylfenylester.

Het door Hal voorgestelde halogeenatoom is bij voorkeur het broom- of jodiumatoom.

30 De inwerking van een verbinding met formule Hal^Cffi^ op een verbinding met formule 2, waarin R^ een waterstofatoom voorstelt, wordt bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een base zoals natrium-hydroxyde, kaliumhydroxyde, natrium- of kaliumcarbonaat of natrium- of kaliumbicarbonaat·

Men werkt bijvoorbeeld in een organisch > oplosmiddel 35 zoals watervrije ethanol, dioxan, methanol, isopropanol, tetrahydrofuran of een mengsel van deze oplosmiddelen.

De door R^ voorgestelde beschermende groep van de amino-groep kan gekozen worden uit de eerder voor R2 genoemde groepen.

O Λ Λ L ft O Z

-6-

De reactie van thioureum, een verbinding met formule 11 van het formuleblad of een verbinding N^C-S-R^ met een verbinding met formule 2, waarin R_ een groep -(CH_) -Hal voorstelt, wordt bij voorkeur 3 & n uitgevoerd in een organisch oplosmiddel zoals hexamethylfosfortriamide, 5 chloroform, dimethylformamide, aceton of dioxan.

Men kan tevens werken in aanwezigheid van een base. In afwezigheid van een base verkrijgt oen in hoofdzaak een verbinding met formule 3' in de vorm van een hydrohalogenide van het zuur H-Hal overeenkomende met het door de groep Hal voorgestelde halogeen.

10 De omzetting van de verbindingen met formule 3 en 3'i waarin tenminste één van de groepen βη A-| een verwijderbare groep voorstelt, alsmede van de verbindingen met formule 3'» waarin R ,een groep c met formule 12 voorstelt, heeft ten doel om de groepen R^, en R^ te verwijderen.

15 De verwijdering van de groepen Rg en R^ wordt bijvoor beeld uitgevoerd door hydrolyse.

De hydrolyse kan een zure of baeische hydrolyse zijn of uitgevoerd worden met behulp van hydrazine.

Bij voorkeur past men zure hydrolyse toe voor de verwij-20 dering van de eventueel gesubstitueerde alkoxycarbonyl- of cycloalkoxy-carbonylgroepen zoals de t-perrfyloxycarbonylgroep of t-butyloxycarbonyl-groep, de eventueel gesubstitueerde arylalkoxycarbcnylgroepen zoals de benzyloxycarbonylgroep, de trityl-, tert.butyl-, of ^-methoxybenzylgroep.

Het bij voorkeur toegepaste zuur kan gekozen worden uit 25 zoutzuur, benzeensulfonzuur, of paratolueensulfonzuur, mierezuur of tri-fluorazi jnzuur·

Men kan echter gebruik maken van andere anorganische of organische zuren.

De basische hydrolyse wordt bij voorkeur toegepast voor 30 de verwijdering van acylgroepen zoals de trifluoracetylgroep.

De bij voorkeur toegepaste base is een anorganische base zoals een alkalimetaalhydroxyde, bijvoorbeeld natriumhydroxyde of kalium-hydroxyde.

Men kan tevens gebruik maken van magnesiumoxyde of barium-35 oxyde of een alkalimetaal-carbonaat of -bicarbonaat zoals natrium* of kaliumcarbonaat of -bicarbonaat.

Men kan tevens gebruik maken van natriumacetaat of kaliumacetaat. Andere basen kunnen echter ook toegepast worden.

800 4 0 24 • i -7- 1 1

De hydrolyse met behulp van hydrazine wordt bij voorkeur uitgevoerd voor de verwijdering van groepen zoals de fthaloylgroep.

De groepen R^ en R^ kunnen tevens verwijderd worden met behulp van het zink-azijnzuursysteem (bijvoorbeeld de trichloorethylgroep).

5 De benzyhydryl- en benzyloxycarbonylgroepen worden bij voorkeur verwijderd met behulp van waterstof in aanwezigheid van een katalysator·

De chlooracetylgroep wordt verwijderd door inwerking van thioureum in een neutraal of zuur milieu volgens het door Masaki 10 (JACS, 90, ^508. 1968) beschreven reaetietype.

Men kan tevens gebruik maken van andere uit de literatuur bekende middelen voor het verwijderen van beschermende groepen van aminogroepen·

De uitvinding heeft in het bijzonder betrekking op de 15 eerderbeschreven werkwijze, waarbij men verbindingen toepast, waarin een trityl-, chlooracetyl-, tert.pentyloxycarbonyl-, tert.butyloxycarbonyl- of benzyloxycarbonylgroep voorstelt.

De verwijdering van de groep A^, wanneer deze verschilt van een waterstofatoom, wordt uitgevoerd onder soortgelijke omstandigheden 20 als eerder beschreven voor de verwijdering van R^ of R^. Men kan ondere andere gebruik maken van zure of basische hydrolyse. Bij voorkeur past oen zure hydrolyse toe voor de verwijdering van groepen zoals eventueel gesubstitueerde alkyl- of aralkylgroepen·

Bij voorkeur gebruikt men een zuur, gekozen uit zoutzuur, 25 oierezuur, trifluorazijnzuur of p-tolueensulfonzuur· De andere groepen, die door A^ voorgesteld kannen worden, worden volgens bekende methoden verwijderd.

Men werkt bij voorkeur onder gematigde omstandigheden, dat wil zeggen bij kamertemperatuur of onder zacht verwarmen.

30 Vanzelfsprekend kan men, wanneer R£, R^ en A^ bijvoor beeld tot verschillende typen behorende verwijderbare groepen zijn, op de verbindingen met formule 3 of 3* verscheidene van de eerdergenoemde middelen laten inwerken·

Bij de eerder beschreven reacties kan een gedeelte van 35 de verkregen produkten bestaan uit cef-2-em-verbindingen.

In dat geval gaat men over tot de omzetting van de verbindingen in Λ. ^-verbindingen. Men werkt dan volgens een uit de literatuur bekend schema voor verbindingen met een cefem-kern.

* I

-8-

Het schema is als volgt: het produkt, dat gedeeltelijk bestaat uit Λ2-verbindingen1 wordt geoxydeerd ter verkrijging van het overeenkomstige sulfoxyde. Men gebruikt bij voorkeur een perzuur zoals metachloorperbenzoëzuur. De omzetting van het l\ 2»eulfoxyde in het A.^-5 sulfoxyde vindt plaats in aanwezigheid van een hydroxylgroepen bevattend oplosmiddel of water.

De reductie van het Δ^-sulfoxyde wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een zuur halogenide of fosfortrichloride.

Dit type omzetting van 2~verbindingen in A^-verbin-10 dingen is bijvoorbeeld beschreven door: KAISER et Coll. J. Org. 35, 2^30 (1970) SPRY et Coll. J. Org. kO, 2<f11 (1975), of in het Amerikaanse octrooischrift 3«705.897 of het Duitse octrooischrift 1.937.016.

15 De omzetting van de verbindingen met formule 1', waarin R gelijk is aan R^, in zouten, kan uitgevoerd worden volgens gebruikelijke methoden.

De omzetting kan bijvoorbeeld tot stand gebracht worden door op deze zuren of op een solvaat (bijvoorbeeld het ethanol-solvaat) 20 of een hydraat van deze zuren een anorganische base zoals natriumhydroxyde of kaliumhydroxyde, natrium- of kaliumcarbonaat of natrium- of kaliumbi-carbonaat te laten inwerken· Men kan tevens gebruik maken van de zouten van anorganische zuren zoals tri-natriumfosfaat. Voorts kan men gebruik maken van zouten van organische zuren.

25 Als zouten van organische zuren kunnen bijvoorbeeld ge noemd worden de natriumzouten van al dan niet vertakte, verzadigde of onverzadigde alifatische carbonzuren met 1-18 en bij voorkeur 2-10 koolstof-atomen. Deze alifatische ketens kunnen onderbroken zijn door één of meer heteroatomen zoals zuurstof of zwavel, of gesubstitueerd zijn door aryl-30 groepen zoals bijvoorbeeld de fenyl-, thienyl- of furylgroep, of door één of meer hydroxylgroepen of één of meer halogeenatomen zoals fluor, chloor -of broom, bij voorkeur chloor, één of meer carboxylgroepen of lagere al-koxycarbonylgroepen, bij voorkeur de methoxycarbonyl-, ethoxycarbonyl- of propyloxycarbonylgroep, of één of meer aryloxygroepen, bij voorkeur de 35 fenoxygroep.

Bovendien kan men als organische zuren gebruik maken van voldoende oplosbare aromatische zuren, zoals bijvoorbeeld gesubstitueerde benzoëzuren, bij voorkeur gesubstitueerd door lagere alkylgroepen.

Als voorbeelden van dergelijke organische zuren kunnen 800 40 24 » * -9- s l genoemd worden mierezuur, azijnzuur, acrylzuur, boterzuur, adipinezuur, isoboterzuur, n-capronzuur, ieocapronzuur, chloorpropionzuur, crotonzuur, fenylazijnzuur, 2-thienylazijnzuur, 3-thienylazijnzuur, 4-ethylfenylazijn-zuur, glutaarzuur, de monoethylester van adipinezuur, hexaanzuur, heptaan-5 zuur, decaanzuur, oliezuur, stearinezuur, palmitinezuur, 3-hydroxypropion-zuur, 3-methoxypropionzuur, 3-methylthioboterzuur, 4-chloorboterzuur, 4-fenylboterzuur, 3-fenoxyboterzuur, 4-ethylbenzoëzuur en 1-propylbenzoezuur.

Bij voorkeur gebruikt men echter als natriumzouten natriumacetaat, natrium-2-ethylhexanoaat of natrium-diethylacetaat.

10 De omzetting in een zout kan tevens tot stand gebracht worden door inwerking van een organische base, zoals triethylamine, di-methylamine, trimethylamine, propylamine, Ν,Ν-dimethylethanolamine of tris(hydroxymethyl)aminomethaan. De omzetting kan tevens uitgevoerd worden door inwerking van arginine, lysine, methylamine, ethanolamine, pyridine, 15 picoline, dicyclohexylaoine, procaine, histidine, N methylglucamine, mor-foline of benzylamine.

Deze omzetting wordt bij voorkeur uitgevoerd in een oplosmiddel of een mengsel van oplosmiddelen zoals water, ethylether, methanol, ethanol of aceton.

20 De zouten worden verkregen in amorfe of kristallijne' vorm afhankelijk van de toegepaste reactieomstandigheden,

De kristallijne zouten worden bij voorkeur bereid door de vrije zuren te laten reageren met één van de eerdergenoemde zouten van alifatische carbonzuren, bij voorkeur met natriumacetaat· 25 De omzetting van de verbindingen met formule 1' in zouten met behulp van een anorganisch of organisch zuur kan uitgevoerd worden volgens gebruikelijke methoden·

Men kan op de verbindingen met formule 1* één van de eerdergenoemde anorganische of organische zuren laten inwerken, 30 De eventuele verestering van de verbindingen met formule 1' wordt uitgevoerd onder gebruikelijke omstandigheden, In het algemeen laat men het zuur met formule 1· reageren met een verbinding met formule Z-Rg, waarin Z een hydroxylgroep of een halogeenatoom zoals fluor, chloor, broom of jodium en Rg de in te voeren estergroep voorstelt, waarvan een 35 aantal voorbeelden eerder zijn genoemd.

De uitvinding heeft tevens betrekking op een werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met de algemene formule 1, waarbij men een verbinding met formule k van het formuleblad, waarin R^ een water-

onn a η 9A

-10- stofatoom of een beschermende groep van de aminogroep en R^ een waterstofatoom of de groep R'^ voorstelt, waarbij R’^ een groep -(CHg^-Hal is, waarin Hal een halogeenatoom en n een geheel getal van 1 tot k voorstelt, ofwel, wanneer R^ een waterstofatoom voorstelt, behandelt met een verbin-5 ding Hal1-CHF2, waarin ïïal^ een chloor- of broomatoom voorstelt, onder vorming van een verbinding met formule 5 van het formuleblad, waarin R^ de eerdergenoemde betekenissen bezit, ofwel, wanneer R^ gelijk is aan R'^, behandelt met thioureum of een verbinding met de formule 11 van het formuleblad, waarin R^ een beschermende 10 groep van de aminogroep voorstelt, of met een verbinding met de formule ΝΞο-S-R^, waarin R^ een ammoniumgroep of een alkalimetaalatoom voorstelt, onder vorming van een verbinding met formule 5' van het formuleblad, waarin R- de eerdergenoemde betekenissen bezit en R de groep met formule 7» de groep met formule 12 of een nitrilgroep voorstelt, en de verbindingen 15 met formule 5 en 5' als zodanig of in de vorm van funktioneel derivaat laat reageren met een verbinding met formule 6 van het formuleblad, waarin een waterstofatoom of een gemakkelijk af te splitsen estergroep voorstelt en R^ de eerdergenoemde betekenissen bezit onder respektievelijke vorming van de verbindingen met formule 3 en 3'» die men desgewenst volgens 20 de eerderbeschreven werkwijze behandeld.

De inwerking van de verbindingen met formule Hal^-CHF^ op de verbindingen met formule k waarin R^ een waterstofatoom voorstelt en de inwerking van thioureum, verbindingen met formule 11 en verbindingen met de formule nSj-S-R,. op de verbindingen met formule 4, waarin R^ een 25 groep -(CH2)n-Hal voorstelt, wordt onder dezelfde omstandigheden uitgevoerd als eerder beschreven voor de inwerking van dezelfde verbindingen op de overeenkomstige verbindingen met formule 3·

Het funktionele derivaat van de verbinding met formule 5 of 5' kan een halogenide, een symmetrisch of gemengd anhydride, een 30 amide of een geaktiveerde ester zijn.

Als voorbeelden van een gemengd anhydride kunnen bijvoorbeeld de met isobutylchloorformiaat of tosylchloride gevormde anhydriden genoemd worden. Als voorbeelden van geaktiveerde esters kunnen de met 2,^f-dinitrofenol of 1-hydroxybenzo/”l7triazool gevormde esters genoemd worden. 35 Als voorbeelden van halogeniden kunnen het chloride of bromide genoemd worden.

Voorts kunnen het zure azide of zure amide toegepast a worden.

800 40 24 -11-

Het anhydride kan in situ gevormd worden door inwerking van Ν,Ν-digesubstitueerde carbodiimiden, bijvoorbeeld N, N-dicyclohexylcar-bodiimide.

De acyleringsreactie wordt bij voorkeur uigevoerd in 5 een organisch oplosmiddel zoals methyleenchloride. Men kan echter andere oplosmiddelen gebruiken zoals tetrahydrofuran, chloroform of diraethylfor-mamide.

Wanneer men gebruik maakt van een zuur halogenide of een door inwerking van isobutylchloorformiaat gevormd gemengd anhydride, 10 voert men de acyleringsreactie bij voorkeur uit in aanwezigheid van een base zoals natriumhydroxyde, kaliumhydroxyde, natrium- of kaliumcarbonaat of -bicarbonaat, natriumacetaat, triethylaraine, pyridine, morfoline of N-methylmorfoline·

De reactietemperatuur is in het algemeen lager dan of 15 gelijk aan kamertemperatuur.

De omzetting van de verbindingen met formules 3 en 5' in overeenkomstige verbindingen met formule 1 wordt uitgevoerd onder de eerderbeschreven omstandigheden.

De uitvinding heeft in het bijzonder betrekking op de 20 eerder beschreven werkwijze, waarbij men gebruik maakt van verbindingen, waarin de groep gekozen wordt uit de trityl-, chlooracetyl-, tert.pen-tyloxycarbonyl-, tert.butyloxycarbonyl- en benzyloxycarbonylgroep.

De verbindingen met de algemene formule 1 en hun additie-zouten met anorganische of organische zuren bezitten een zeer goede anti-25 biotische werking op grampositieve bacteriën, zoals Staphylococcen, Strep-tococcen en in het bijzonder tegen penicilline-resistente Staphylococcen. Him werkzaamheid op gramnegatieve bacteriën, in het bijzonder coliforme bacteriën, pseudomonas, is bijzonder opmerkelijk.

Deze eigenschappen maken deze produkten geschikt voor 30 toepassing als geneesmiddelen bij de behandeling van aandoeningen met gevoelige kiemen, in het bijzonder Staphylococciën, zoals door staphylococcen veroorzaakte septikemiën, kwaadaardige staphylococciën van het gezicht of de huid, pyodermitis, septische of etterende wonden, antrax, flegmonen, erysipelas, spontane-' of na griep optredende acute staphylococciën, 55 bronchopneumonie en longetteringen.

Deze produkten kunnen tevens toegepast worden als geneesmiddelen bij de behandeling van colibacillosen en daarmee gepaard gaande infecties, infecties met proteus, Klebsiella, Salmonella en Pseudomonas en andere door gram-negatieve bacteriën veroorzaakte aandoeningen.

-12-

De uitvinding heeft derhalve tevens betrekking op de eerderbeschreven verbindingen met formule 1 alsmede hun zouten met farmacologisch aanvaardbare anorganische of organische zuren als geneesmiddelen en in het bijzonder als antibiotische geneesmiddelen.

5 De uitvinding heeft in het bijzonder als geneesmiddelen en met name antibiotische geneesmiddelen betrekking op de verbindingen met formule 1, waarin een waterstofatoom, een groep -CH2-S-R", waarin R" een 1-methyl-l(H)tetrazool- of 2-methyl-1,3, *f-thiadiazolylgroep voorstelt,'een acetoxymethylgroep of een azidomethylgroep voorstelt, alsmede 10 hun additiezouten met farmacologisch aanvaardbare anorganische of organische zuren, alsmede de verbindingen met formule 1, waarin R een groep met formule 10, eventueel in geprotoneerde vorm, of een groep -CHFg en R^ een waterstofatoom, een 1-methyl-l(H)tetrazolylthiomethyl-, 2-methyl- 1,3,^-thiadiazolylthiomethyl-, acetoxymethyl- of azidomethylgroep voor-15 stelt.

De uitvinding heeft meer in het bijzonder als geneesmiddelen betrekking op 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)2-/2-(amino-iminomethylthio)7ethoxy-imino7aceetamido7cef-3-em-^-carbonzuur, syn-isomeer, in de vorm van het inwendige zout of een zout met een orga-20 nisch of anorganisch zuur en de farmacologisch aanvaardbare esters met gemakkelijk af te splitsen groepen daarvan, en 3-acetoxymethy1-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)2-difluormethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, de zouten met alkalimetalen, aardalkalimetalen, magnesium, ammonium en organische stikstofbasen, en de esters met gemakkelijk te 25 splitsen estergroepen alsmede de zouten met farmacologisch aanvaardbare anorganische of organische zuren.daarvan.

De uitvinding heeft eveneens betrekking op farmaceutische samenstellingen, die als werkzaam bestanddeel tenminste één van de eerdergenoemde geneesmiddelen bevatten.

30 Deze samenstellingen kunnen oraal, rectaal, parenteraal of plaatselijk door aanbrengen op de huid en de slijmvliezen toegediend worden.

De samenstellingen kunnen vast of vloeibaar zijn en op het gebied van de geneeskunde gebruikelijke farmaceutische vormen bezitten, 35 zoals bijvoorbeeld tabletten, dragees, capsules, korrels, suppositoria, injectiepreparaten, zalven, crèmes, geleien en worden bereid volgens gebruikelijke methoden. Het werkzame bestanddeel of de werkzame bestanddelen kunnen erin opgenomen worden met gewoonlijk in farmaceutische samenstellingen toegepaste excipientia, zoals talk, arabische gom, lactose, zetmeel, 800 4 0 24 -13- magnesiumstearaat, cacaoboter, al dan niet waterige dragers, vette stoffen van dierlijke of plantaardige oorsprong, paraffinederivaten, glycolen, verschillende bevochtigingsmiddelen, dispergeermiddelen of emulgatoren en conserveermiddelen· 5 De samenstellingen kunnen eveneens de vorm bezitten van een poeder, dat vlak voor het gebruik opgelost wordt in een geschikte drager, bijvoorbeeld pyrogeen-vrij steriel water*

De toegediende dosis hangt af van de behandelde aandoening, de patiënt, de wijze van toediening en het betreffende produkt. De 10 dosis kan bijvoorbeeld tussen 0,250 en k g per dag bij orale toediening aan mensen in het geval van het in Voorbeeld I of IX beschreven produkt of tevens tussen 0,500 en 1 g, driemaal per dag bij intramusculaire toediening bedragen*

De verbindingen met formule 1 en hun zouten kunnen even-15 eens toegepast worden als desinfecterende middelen voor chirurgische instrumenten.

De uitvinding heeft tenslotte als nieuwe industriële produkten en in het bijzonder als tussenprodukten, die noodzakelijk zijn voor de bereiding van de verbindingen met formule 1, betrekking op de 20 verbindingen mét formule 5a van het formuleblad, in de vorm van het syn-isomeer, waarin en A^ de eerder genoemde betekenissen bezitten en E^' een beschermende groep van de aminogroep voorstelt, verbindingen met formule 3'a van het formuleblad, in de vorm van het syn-isomeer, waarin n,

Rc, R^ en A^ de eerder genoemde betekenissen bezitten en R'2 een bescher-25 mende groep van de aminogroep voorstelt, verbindingen met formule 5 van het formuleblad, inde vorm van het syn-isomeer, waarin <*e eerder genoemde betekenis bezit en de verbindingen met formule 5' van het formuleblad, in de vorm van het syn-isomeer, waarin n, R2 en R de eerder genoemde betekenissen bezitten* 30 De als uitgangsverbindingen toegepaste verbindingen met formule 2 kunnen bijvoorbeeld op de volgende wijze worden verkregen: a) verbindingen met formule 2, waarin R^ een waterstofatoom voorstelt.

Men behandelt een verbinding met formule A van het for-35 muleblad, die bijvoorbeeld beschreven is in het Franse octrooischrift 2.383*188, met 2-methoxypropeen onder vorming van een verbinding met formule B van het formuleblad, die men bijvoorbeeld in de vorm van een funk-tioneel derivaat zoals het symmetrisch anhydride laat reageren met een verbinding met formule C van het formuleblad, onder vorming van een ver- -14- binding met formule D van het formuleblad, die men behandelt met een waterig anorganisch zuur zoals verdund zoutzuur onder vorming van een verbinding met formule 2a van het formuleblad, die overeenkomt met een verbinding met formule 2, waarin R^ een waterstofatoom voorstelt.

5 b) De verbindingen met formule 2, waarin R^ een groep -(CH_) -Hal voorstelt, worden verkregen door reactie van een verbinding 2 n met de formule Hal-CCH^) -Hal met de eerdèr genoemde verbinding met formule 2a.

De verbindingen met formule 4, waarin R^ de groep 10 -^H^-Hal voorstelt, worden verkregen door reactie van een verbinding met formule Hal-CCHg) -Hal met een verbinding met formule A.

Naast de hierna volgende voorbeelden, die de uitvinding toelichten zonder haar te beperken, vormen de verbindingen met formule 13 van het formuleblad, waarin A de eerder genoemde betekenissen bezit en R 15 een groep met formule 14 of een groep met formule 15 van het formuleblad voorstelt, eveneens verbindingen, die volgens de uitvinding kunnen worden verkregen.

VOORBEELD I : Trifluoracetaat van 3-aceto3cymethyl-7-/72-(2-amino-thiazol-4-yl)-2-/2-(amino-iminomethylthio)ethoxy7imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbon-20 zuur, syn-isomeer.

Trap A : 2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-2-/T2-amino-iminomethylthio)ethoxy-imino7azijnzuur, syn-isomeer (in de vorm van het inwendige zout).

Men roert 27 uren bij kamertemperatuur en onder uitsluiting van licht 4,6 g 2-(2-joodethoxy)imino-2»»(2-tritylamino-thiazol-4-yl) 25 azijnzuur, syn-isomeer, gesolvateerd met dichloorethaan, 1 g thioüreum en 20 cm3 hexamethylfosfortriamide. Men giet het mengsel in 320 cm3 isopropyl-ether. Men neemt de verkregen neergeslagen gom op in isopropylether en vervolgens in water. Men zuigt af, wast met water, droogt en verkrijgt 3,59 g produkt met een smeltpunt van 260°C.

30 NMR-Spectrum (CF^ CO^ D) -CHgS- ί triplet met centrum bij 3,57 p.p.m. J = 6 Hz -N-O-CH^ : triplet met centrum bij 4,72 p.p.m. J = 6 Hz

Trap B ; Joodhydraat van 3-acetorymethyl-7-/7^-(2-tritylaaino-thiazol-4-lllzlzC '(2-amino-iminomethylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-car-35 bonzure. dry lest er.

Men roert 10,63 g van het in de voorgaande trap verkregen produkt, 4,14 g pyridine-joodhydraat, 8,24 g dicyclohexylcarbodiimide, 7 g benzhydryl-7-amino-3-acetoxymethyl-cef-3-em-4-carboxylaat en 60 cm3 watervrije dimethylformaraide» Na 25 minuten bij 15°c en 10 minuten bij 800 40 24 -15- kamertemperatuur zuigt oen het reactiemengsel af en wast de onoplosbare stof met methyleenchloride· Men verwijdert het methyleenchloride uit het filtraat onder verminderde druk bij maximaal if5°C* giet het vloeibare residu in 1 liter isopropylether en roert 20 minuten. Men decanteert, ver-5 wijdert de bovenstaande vloeistof, neemt het precipitaat op in isopropylether en roert de suspensie 20 minuten. Na decanteren lost men de onopgeloste stof op in methanol. Men precipiteert met ethylether, roert 70 minuten, zuigt af, wast met ether, droogt en verkrijgt 18,2 g produkt met een smeltpunt van ongeveer 194°C (onder ontleding).

10 Trap C : Trifluoracetaat van 3-acetoxymethyl-7-/7^-(2-amino-thiazol-if-yl) 2-/2-(amino-iminomethylthio)ethoxy7ifflino7aceetainido7cef-3-em-4-carbonzuur, (syn-isomeer)_.

Men roert 7,5 g van het in de voorgaande trap verkregen produkt en 75 g trifluorazijnzuur 5 minuten bij kamertemperatuur, zuigt 15 de onopgeloste stof af en neemt het filtraat op in 1,2 liter ijskoude ether. Na 15 minuten bij kamertemperatuur zuigt men het gevormde precipitaat af, lost het op in methanol en slaat opnieuw neer door toevoeging van ether, roert 15 minuten, zuigt af, wast met ether, droogt en verkrijgt 2,19 g van het gewenste produkt met een smeltpunt van 256°C (onder ontleding).

20 NMR-SPECTRUM (C^^SO

-0AC : 2,02 p.p.m. singulet N-O-CHg- : 25 p.p.m.

Hj. thiazool : 6,78 p.p.m. singulet I.B.-SPECTRUM (nujol) 25 $ -lactam : 1768 cra”^

Amide II + heteroring : 1538 cm UV-SPECTRUM (EtOH, HCI N/10) max. 262 nm E^ : 291

Het als uitgangsverbinding in Voorbeeld I toegepaste 30 2-(2-joodethoxyimino)2-(2-tritylamino-thiazol-if-yl)azijnzuur, syn-isomeer is beschreven in het Belgische octrooischrift 875*217· VOORBEELD IIi Trifluoracetaat van 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-amino-thiazol-if yl)-2-/2-(2-aminoiminomethylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-if-carbon-zuur, syn-isomeer.

35 Trap A ; Joodhydraat van 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-tritylaminothiazol-if-yl) 2-/** ( 2-aminoiminomethylthio) ethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-if-carbonzure benzhydrylester·

Men roert gedurende 32 uren 870 mg 3-acetoxymethyl-7-/7S-(2-tritylaainothiazol-if-yl)-2-/*(2-joodethoxy)imino7aceetamido7cef-3- -16- em-if-carbonzure benzyhydrylester, 131 mg thioureum ea 1,7 cm3 watervrij hexamethylfosfortriamide. Men voegt onder roeren 75 cm3 isopropylether en vervolgens na decanteren if5 cm3 ethylether toe en zuigt af, waarbij men 1,229 g gesolvateerd produkt met een smeltpunt van ongeveer 100°C verkrijgt. 5 NMR-SPECTRUM. (C DC1 ) O.A.C. : 2,0 p.p.m. singalet C^S : van 3,33 tot 3,83 p.p.m.

0CH2 · if,5 p.p.m.

CH2 OAC : if,88 - if,98 p.p.m.

10 H op plaats 6 : doublet p.p.m. J = 5 Hz H op plaats 7 · 5*83 - 6,08 p.p.m.

H op plaats 5 : (thiazool : syn) 6,78 p.p.m. singulet Trap B : Trifluoracetaat van 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol-if-yl) -2-/2-(aminoiminomethylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-if-carbonzuur 15 (syn-isomeer).

Men roert 3 minuten bij kamertemperatuur if50 mg van het in de voorgaande trap verkregen produkt en if,5 cm3 trifluorazijnzuur, zuigt de onopgeloste stof af, neemt het filtraat op in if5 cm3 ijskoude ethylether en roert 15 minuten. Men zuigt af, wast met ether en neemt het 20 precipitaat op in 0,8 cm3 methanol, voegt 8 cm3 ether toe, roert 15 minuten, zuigt af, wast met ether, droogt en verkrijgt 100 mg produkt met een smeltpunt van 256-258°C (onder ontleding).

NMR-SPECTRUM (C D^ SO OAC : 2,02 p.p.m. singulet 25 proton op plaats 5 van thiazool : 6,77 p.p.m. singulet IR-SPECTRUM (nujol) β -lactam 1769 cm «1

Amide II + heteroring : 153**· cm" UV-SFECTRUM (EtOH HC1 N/10) 30 Max. 259 nm E^j = 327

De benzhydrylester van 3-acetoxymethyl-7-/75-(2-trityl-amino-thiazol-if-yl )2-/“( 2-joodethoxy) imino7acetyl7amino7cef-3-em-if-carbon- zuur, syn-isomeer is beschreven in het Belgische octrooischrift 875*217· VOORBEELD III; 3-acetoxymethvl-7-/75-(2-aminothiazol-if-yl)-2-/5-aminoimino-35 methylthio)ethoxy7imino7aceetamido7cef-3-em-if-carbonzuttr (in de vorm van het joodhydraat).

Gedurende 3½ uren roert men bij kamertemperatuur 130 mg van het trifluoracetaat van 3-acetoxymethyl»7-/75-(2-aminothiazol-if-yl)- 2-( 2-joodethoxy) imino7aceetamido7cef-3-«m-if-carbonzuur, 28 mg thioureum en 800 4024 ' 1 -17- 0,37 cm3 dimethylformamide· Men precipiteert de oplossing met 3 iso-propylether, decanteert, neemt de gevormde gom op in isopropylether, vervolgens in ethylether en tenslotte in ethylacetaat. Men zuigt af, wast met ethylacetaat, droogt en verkrijgt 133 mg produkt, dat men zuivert in 5 ethylacetaat· Men verkrijgt 85 mg van het gewenste produkt met een smeltpunt van ongeveer 250°C.

NMR-SPECTRUM (C Dj„S0 ————— ^ <2 OAC : 2,02 p.p.m. singulet N-O-C^- : triplet 4,28 p.p.m. J = 6 Hz 10 H op plaats 6 : doublet 5i16 p*p.m. J = 5 Hz H op plaats 7 ·’ 5»68 - 5»88 p.p.ffl.

Proton op plaats 5 van thiazool : 6,82 p.p.m· singulet UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Maximum bij 220 nm e!J = 444 E 29.800 13 Buiging bij 255 nm = 262 £17.600

Het trifluoracetaat van 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-amino-thiazol-4-yl)2-/”(2-joodethoxy)imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isoraeer is beschreven in het Belgische octrooischrift 875.217· VOORBEELD IV: 3-/**(1-methyl-1H-tetrazol-5-yl)thiomethy17-7-/72-(2-amino-20 thiazol-4-yl)-2-/~(2-aminoiminome thylthio)ethoxy7imino7aceetamido7cef-3- em-4-carbonzuur (in de vorm van het inwendige zout).

Trap_A : 3/“(l-met]ffil-1H-tetrazol-5-yl)thiomethyl7-7-/72-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-2-/“(2-aminoiminomethylthio)ethoxy7imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur^ (in de vorm van het inwendige zout).

25 Men mengt 660 mg 7-amino-3-/*Tl-methyl-!lH-tetrazol-5-yl) thiomethyl7cef-3-em-4-carbonzuur en 10 cm3 watervrije dimethylformamide, roert 10 minuten, koelt tot 15°C en voegt in gedeelten in 5 minuten onder roeren 260 mg triethyleendiaaine toe. Na 3 minuten voegt men snel 1,68 g pyridine-joodhydraat toe, roert 2 minuten, voegt 1,06 g 2-(2-tritylamino-30 thiazol-4-yl)-2-/“(2-aminoiminomethylthio)ethoxyimino7azijnzuur toe, roert 5 minuten en voegt bij 15°C in één keer 840 mg dicyclohexylcarbodiimide toe. Men zuigt het mengsel na 45 minuten af en giet het filtraat in 250 cm^ ijswater. Men roert een half uur, zuigt af, en wast met water, droogt en verkrijgt 1,338 g amorf produkt. Men roert een half uur 1,23 g van dit 35 produkt met 10 cm3 methyleenchloride, zuigt de onopgeloste stof af, behandelt het filtraat met aktieve kool, zuigt af, concentreert het filtraat tot droog en verkrijgt 857 mg produkt.

800 4024 * , -18-

NMR-SPECTRUM (C D^SO

-N-CH^ : 3,9 p.p.m.

Protonen van de tritylgroep : 7,3 p.p.m·

IR-SPECTRUM (CHClJ

" J _-i 5 ' -lactam : 1769 cm

Amide : 167½ cm”1 - -1 -1 CO” + aromatisch : : 1600 cm , 1^93 cm ^ -1

Amide II + heteroring : 1525 cm UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10) 10 Max. 271 nm E1 = 230

Trap B : 5-/”C1 -methyl-1H-tetrazol-5-^l)thiometh^l777~/7^~(2-aminothiazol·· 4-yl)-2-/~(2-aminoiminometh^lthio)ethox^7imino7aceetaaido7cef-3-em'-^-____ carbonzuur (in de vorm van het^inwendige zont).

Men lost 800 mg van het in de voorgaande trap verkregen 15 produkt op in 8 cm3 92#'s waterige azijnzuur onder verwarming op *f8-50°C en handhaaft deze temperatuur gedurende 2£ uren. Men zuigt de onopgeloste stof af en voegt aan het filtraat 150 cm3 isopropylether toe, roert een half uur, laat 1 uur staan, zuigt af, wast met isopropylether en vervolgens met ethylether, droogt en verkrijgt 537 mg produkt. Men roert het 20 produkt een half uur met 2 cm3 ethanol en vervolgens met 2,5 cm3 water en neemt de verkregen 325 mg produkt tenslotte op in 2 cm3 azijnzuur. Men voegt druppelsgewijs 20 cm3 methanol en k cm3 water toe. Na roeren gedurende een half uur zuigt men af en behandelt het filtraat met aktieve kool, zuigt af, dampt in en verkrijgt een residu, dat men verscheidene malen 25 opneemt in ethanol. Men verkrijgt 175 mg wit produkt met een smeltpunt van ongeveer 258°C.

NMR-SPECTRUM (C D,)_S0 ""~ i ^

Proton op plaats 5 van thiazool (syn) : 6,82 p.p.m. singulet N-CH^ : 3,92 p.p.m.

30 N-OCHg en CH2 -S- : *f,33 p.p.m.

Η ap plaatsen 6 en 7 H van het £ -lactam : 5-5,83 p.p.m.

IR-SPECTRUM (nujol) f> -lactam 1766 cm" 35 C amide 1667 cm”1

It 0 C02ö 1597 cm”1 Amide II :1533 cm"1 800 4024 1 1 -19- ÏÏV-SPBCTRUM (EtOH HC1 N/10)

Buiging 223 nm E = 338

Max. 263 nm E^J = 295 €* 17.700

Buiging 280 nm E1 = 255 5 VOORBEELD V : 3-azidomethyl-7-/T2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-/2-(aminoimino-methylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-5-em-4-carbonzuur (in de vorm van het inwendige zout).

Trap 3-azidomethyl-7-/72-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-/"(2-aminoimino- methylthio)ethoxy7imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur (in de vorm van 10 het inwendige zout).

Men roert gedurende 15 minuten 255 mg 7-amino-3-azido-methyl-cef-3-em-4-carbonzuur met 3 cm3 watervrije formamide en voegt in gedeelten 168 mg triethyleendiamine toe. Aan de verkregen oplossing voegt men 412 mg pyridine-joodhy^draat toe en koelt het mengsel tot 15°C alvorens 15 in één keer de volgende oplossing toe te voegen: 532 mg 2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-2-/“(2-aminoiminomethylthio)ethoxyimino7azijnzuur, 207 mg pyridine-joodhydraat en 3 cm3 dimethylformamide. Men voegt direkt 412 mg dicyclohexylcarbodiimide toe en roert 20 minuten bij 15°C, vervolgens 40 minuten bij 20°C en zuigt af. Men voegt aan het filtraat 100 cm3 water toe 20 en roert een half uur, laat een half uur staan, zuigt af, wast met water, droogt en verkrijgt 437 mg ruw produkt. Men zuivert 432 rag van dit produkt door een half uur roeren met 8,6 cm3 chloroform, Men zuigt af, behandelt het filtraat met aktieve kool, zuigt af, dampt het oplosmiddel af en verkrijgt 350 mg produkt.

25 IR-SPECTRUM (CHC1 ) “ 5 azide : 2160 cm —1 ft -lactam : 1769 cm amide : 1670 cm" CO ® : 1600 cm"1 30 Amide II : 1521 cm"1

Trap B : 3-azidomethyl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)-2-/2-(aminoimino- methylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3»em^4-carbonzuur (ig.de_vorm_van het inwendige zout. . , —-—- trap verkrege n

Men verwarmt 344 mg van het in de voorgaande/produkt en 35 3,5 cm3 92#'s azijnzuur 2 uren en een kwartier op 46-50°C. Men behandelt met aktieve kool en verwarmt nog 30 minuten, zuigt warm af en voegt 80 cm3 ethylether aan het filtraat toe. Na 15 minuten ruet zuigt men af, wast met ether en verkrijgt 159 mg produkt met een smeltpunt van ongeveer 238°C.

Λ Λ Λ L A 01 -20- NMR-SPECTRUM (CgD )^0

Proton op plaats 5 van thiazool : 6,8 p.p.m. singulet H op plaats 6 : doublet 5»06 p.p.m. J = 5 Hz H op plaats 7 : na behandeling met 2Η^0 5 doublet 5»67 p«p»m· J = 5 Hz IR-SPECTRUM (nujol) $ -lactam 1770 cm"1 -1 C amide 1667 cm I! 0 10 en C0& 2102 cm"1 C=C I6OO-I535 cm"1 ÏÏV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Buiging : 222 nm E1 = 325 Max. : 261 nm E1 = 319 15 Buiging : 280 nm E1 = 271 VOORBEELD VI: 3-/“(2-methyl-1,3,thiadiazol-5-yl) thiomethyl7-7-/7^-(2-aminothiazol-4-yl)-2-/"(2-aminoiminomethylthio)e'6Dxy7imino7aceetamido7 cef-3-em^4-carbonzuur, (inwendig zout).

Trap^A : 5-/"(2-methyl-1,3, A-thiadiazol-5-yl)thiomethy17-7-/72-(2-trityl-20' aminothiazol-4-yl)-2-/r2-aminoiminomethylthio)ethoxy7imino7aceetamido7 22£“2leE!“!ilcarbonzuur ^ inyggdig_zout).

Men roert gedurende een half uur 207 mg 7-amino-3-/C2-methyl-1,3, ^-thiadiazol-^-yl) thiomethyl7cef-3-«m-^-carbonzuur en 1,8 cm3 dimethylformamide, voegt bij 15°C en in gedeelten 90 mg triethyleendiamine 25 en vervolgens 252 mg pyridine-joodhydraat toe. Aan dit mengsel voegt men snel de oplossing toe, die verkregen is door roeren van 318 mg 2-(2-tri-tylaminothiazol-4-yl)-2-/"(2-aminoiminomethylthio)ethoxyimino7azi jnzuur, 252 mg pyridine-joodhydraat en 1,8 cm3 dimethylformamide en vervolgens direkt 252 rag dieyclohexylcarbodiimide· Men roert 15 minuten bij 15°C en 30 30 minuten bij 20°C en zuigt de onopgeloste stof vervolgens af. Aan het filtraat voegt men 120 cm3 water toe, roert 15 minuten, zuigt af, wast met water en droogt. Men verkrijgt 361 mg ruw produkt, dat men een half uur roert met 20 cm3 methyleenchloride. Men zuigt af en dampt het filtraat in tot droog. Men neemt het residu op in chloroform, behandelt met aktieve 35 kool en zuigt af. Men dampt het filtraat in tot droog onder argon en verkrijgt 171 mg produkt.

800 4024 -21- IR-SPECTRUM (nu.iol) " * (b -lactam : 176^ cm amide : 1667 cm aromatisch en COJ^ : 1599 cm , 1^97 cm” ^ «1 5 Amide II + heteroring : 1526 cm , 1511 cm UV-SPECTRÏÏM (EtOH HC1 N/10)

Max. 271 nm E1 = 227 = 19.500

Trap B : 3-/~(2-methyl-1,3i^-^iadiazol-5-yl)thiomethyl7~7~/72-(2-amino-thiazol-4-yl) -2-/"( 2-aminoiminomethylthio) ethoxyjimino7aceetamido7cef-3-10 em-4-carbonzuur (in de vorm van het inwendige zont).

Men verwarmt gedurende 2¾ uren op ^8-50°C onder roeren 171 mg van het in de voorgaande trap verkregen produkt en 1,71 cm3 92#'s azijnzuur. Men filtreert de oplossing, voegt aan het filtraat 30 cm^ iso-propylether toe, roert 15 minuten, zuigt af na 15 minuten laten staan, 15 wast met isopropylether en vervolgens met ethylether, droogt en verkrijgt 93 mg produkt met een smeltpunt van ongeveer 260°C.

NMR-SPECTRUM )£Q

CH_-C^ , . : 2,67 p.p.m. singulet -=*3 plaats N-OCHg en CH2S (op/3): 4,33 p.p.m.

20 H op plaatsen 6 en 7 5*0 - 5»83 p.p.m.

van thiazool : 6,78 p.p.m. singulet IR-SPECTRUM (nujol) -lactam 1760 cm

A

amide 1660 cm" 25 CO ^ 1613-1595 cm"1 ^ -1 amide II + heteroring 1531 cm UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Buiging 220 nm E,j = 312

Max 265 nm E1 = 307 30 Buiging 28Ο nm E^ = 278 VOORBEELD VII: 3-acetoxymethvl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-thiocyana-to-ethoxy)imino7aceetamido7cef-5-em-4-carbonzuur.

Trap A ; 2-(2-tritylaraino-thiazol-4-yl)2-(2-thiocyanato-ethoxy-imino)-azijnzuur.

35 Gedurende 139 uren roert men bij 15°C onder uitsluiting van licht 6,83 g 2-(2-joodethoxy)imino-2-(2-tritylaminothiazol-if-yl)azijn-zuur, syn-isomeer, gesolvateerd met dichloorethaan, 7*61 g ammoniumthio-cyanaat en 35 cm3 dimethylaceetamide. Men koelt de oplossing in een ijs-waterbad en voegt kOO cm3 gedestilleerd water en vervolgens 150 cm^ van

0ΛΠ AΛ OL

-22- een verzadigde natriumchlorideoplossing toe. Men roert 2 uren, zuigt af, wast met water, droogt en verkrijgt 4,55 g ruw produkt. Na twee herkris-tallisaties in ethylacetaat verkrijgt men 3,44 g van het gewenste produkt met een smeltpunt van 194°C.

5 ϊΕ^Ε-Β-1-ΖΐΕ22ί22ΞΞ2ίίί2ΐζΖζ^ΖΗζ1-Ζί£ίίΣί5ΞΞΞ2ίίίΞΕ52ίζ!ίζΣί2ζ-Ζ^Ζ1-Ζ',:-ΐ2Ζ cyanato-ethox^)imino7aceet^ido7cef-3-em-4-carbonzure benzhgdrylester.

Men mengt 1,69 g van het in de voorgaande trap verkregen produkt, 0,685 g pyridine-joodhydraat, 1,16 g 7-amino-3-acetoxymethyl-cef- 3-em-4-carbonzure benzhydrylester en 1,36 g dicyclohexylcarbodiimide. Men 10 voegt direkt 17 cm3 dimethylformamide toe, koelt gedurende 30 minuten op 16°C, zuigt de onopgeloste stof af, voegt aan het filtraat 400 cm3 ethyl-ether toe, roert 5 minuten en laat een uur staan. Na decanteren wast men de verkregen gom met ether, voegt vervolgens 50 cm3 ether toe en kneedt tot het vast wordt. Men zuigt af, wast met ether, droogt en verkrijgt 15 1,92 g ruw produkt, dat men zuivert door chromatografie op siliciumoxyde onder toepassing van een chloroform-acetonitrilmengsel (91-9) als elutie-middel.

Men verkrijgt 790 mg amorf produkt.

NMR-SPECTRUM (CgDCl^) 20 OAC : 2,0 p.p.m. singulet CH2-S : 3,17 - 3,65 p.p.m.

N-O-CHg : triplet 4,58 p.p.m. J = 6 Hz CH2-0AC : 4,65 - 4,87 p.p.m. en 4,98 - 5,2 p.p.m.

H,_ thiazool, syn : 6,77 p.p.m. singulet 25 IR-SPECTRUM (CHCl ) C=N : 2156 cm”1 p -lactam : 1793 cm”1 ester + OAC ; 1739-1733 cm”1 amide : 1689 cm 30 UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Max. 267 nm E1 = 209 Z 19.540

Trap C : 3-acetoxymethyl-7-/7^-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-thiocyanato-etoxy)imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur.

Men roert 445 mg van het in de voorgaande trap verkregen 35 produkt en 4,4 cm3 trifluorazijnzuur 3 minuten bij kamertemperatuur, voegt 44 cm3 ijskoude isopropylether toe, roert 5 minuten, zuigt af, wast met een mengsel van isopropylether en ethylether (1-1) en vervolgens met ethyl-ether. Men lost het produkt op in 0,8 cm3 methanol, slaat neer door toevoeging van 8 cm3 ethylether, roert 10 minuten, zuigt af, wast met ether, * s -23- droogt en verkrijgt 199 mg produkt met een smeltpunt van ongeveer 200°C (onder ontleding)· NMR-SPECTRUM (CJi )£0 OAC : 2,03 p*p.m· singulet 5 CH2S : 3,17 - 3,83 p.p.m.

thiazool, syn : 6,82 p.p.m. singulet IR-SPECTRUM (nu.jol) S-θΞΝ : 2153 cm“1 j* -lactam : 1781 cm 10 ÏÏV-SPBCTRÏÏM (EtOH HC1 N/10)

Max. 264 nm % 18,900 VOORBEELD VIII : 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)2-(2-imino-hydrazinomethylthio)ethoxyiaino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur (in de vorm van het inwendige zout).

15 Trap A : 2-(2-tritylamino-thiazol-4-yl)-2-/2-(tritylhydrazinoiminomethyl-thio)ethoxyimino7azijnzuur_in_de vorm van het inwendige zout.

Men lost 7,5 g net dichloorethaan gesolvateerd 2-(2-joodethoxy)imino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)azijnzuur, syn-isomeer, en 13,5 g N-tritylthiosemicarbazide op in 45 cm3 watervrije dimethylformamide. 20 Men verwarmt de oplossing op 30-32°C onder uitsluiting van licht gedurende 65 uren, giet uit in 900 cm3 water, roert 10 minuten, voegt 60 cm3 verzadigde natriumchloride-oplossing toe en zuigt na een half uur af, wast met water, droogt en verkrijgt 18,14 g ruw produkt. Men zuivert 5 g van dit produkt door chromatografie op siliciumoxyde onder toepassing van een 25 chloroform-methanolmengsel (85-15) als elutiemiddel, neemt op in iso- propylether, droogt en verkrijgt 1,44 g produkt met een smeltpunt van ongeveer 200°C.

NMR-SPECTRUM (CJSC1,) H,_ thiazool ·' 5,87 p.p.m. singulet 30 N-0-CH2 : 4,33 p.p.m.

H van de tritylgroepen : 7,18 - 7,35 p.p.m.

H beweeglijk : 5,42 p.p.m.

IR-SPECTRUM (CHClJ NH : 3 392 cm"1 35 UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Max. 278 nm E^J = 180 -24-

Trap B : Joodhydraat van 5-acetoxymethyl-7“/72-‘(2-tritylamino-thiazol-4- ιίίύ -(2-tritylhydrazino-iminomethylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3-em- 4-carbonznre benzhydr^lester·

Men roert 20 minuten bij kamertemperatuur 513 mg van 5 het in de voorgaande trap verkregen produkt, 154 mg pyridine-joodhydraat, 268 mg dicyclohexylcarbodiimide, 227 mg 7-amino-3-acetoxymethyl-cef-3-em- 4-carbonzure benzhydrylester en 3 cm3 watervrij dimethylformamide· Men voegt 10 cm3 methyleenchloride toe, zuigt het gevormde dicyclohexylureum af, dampt het filtraat onder verminderde druk in, roert het residu 5 10 minuten met 40 cm3 isopropylether en decanteert· Men neemt het verkregen hars op in 40 cm3 van een mengsel van isopropylether en ethylether (1-1), wrijft fijn, roert 20 minuten, zuigt af, wast met isopropylether en droogt·

Men verkrijgt 680 mg produkt met een smeltpunt van 162°C (onder ontleding)· IR-SPECTRUM (CHCl^) 15 NH : 3391 cm"1 C=0 : 1782 cm"1

Ester van OAC : 1736-1730 cm"1 »1 «1

Aromatisch : 1594 cm , 1576 cm" , 1496 cm”

Trap C : 3"acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-iminohydrazino-20 methylthio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3»em-4-carbonzuur (in de vorm van h.et_inwend±ge_zotit22.

Men roert gedurende 45 minuten bij 50°C 0,94 g van het in de voorgaande trap verkregen produkt, 9,4 cm3 mierezuur en 4,7 cm3 water. Men koelt tot kamertemperatuur, zuigt af, en dampt het filtraat in 25 tot droog. Men neemt het residu op in 9 cm3 trifluorazijnzuur en roert 4 minuten· Men zuigt de onopgeloste stof af, voegt 90 cm3 isopropylether aan het filtraat toe, roert 5 minuten, zuigt het neerslag af, wast het met isopropylether, neemt op in een minimale hoeveelheid methanol en slaat neer door toevoeging van ethylether. Men verkrijgt 282 mg ruw produkt.

30 Men suspendeert 558 mg op de bovenbeschreven wijze bereid produkt in 7 cm3 water en voegt pyridine toe tot een pH van 6,6 is verkregen. Men filtreert de lichte onopgeloste stof af en dampt het filtraat onder verminderde druk in tot droog. Men neemt het residu op in 5 cm3 ethylether en wrijft fijn.

Men zuigt het verkregen neerslag af, wast met ether en 35 verkrijgt 500 mg produkt, dat men 10 minuten roert in 5 cm3 methanol. Men zuigt de onopgeloste stof af, wrijft fijn met ethylether en verkrijgt 96 mg produkt met een smeltpunt van 210°C (onder ontleding).

Uit de moederlogen wint men 66 mg van het zelfde produkt.

800 40 24 -25- NMR-SPECTRUM (CgD )2S0 OAC : 2,03 ppm singulet N-0-CH2 : 4,25 p.p.m.

van thiazool : 6,78 p.p.m· singulet 5 UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Max. 262 nm =301 l = 16 800

Het als uitgangsverbinding in dit voorbeeld toegepaste tritylthiosemicarbazide wordt op de volgende wijze bereid:

Men voegt snel onder roeren 100 cm3 dimethylaceetamide 10 toe aan 9,11 g thiosemicarbazide en 27,9 g tritylchloride. Men houdt de temperatuur op 15°C, voegt druppelsgewijs 13 cm3 triethylamine toe, laat de oplossing 1 uur bij 15°C staan, brengt de pH op ongeveer 7 met behulp van triethylamine en giet vervolgens uit in 2 liter van een water-i jsmeng-sel. Na een half uur roeren zuigt men af, wast met water, droogt onder 15 verminderde druk bij 50°C en verkrijgt 31,3 g produkt met een smeltpunt van 19^°C.

Men roert gedurende een half uur 29,3 g van het produkt met 90 cm3 ethylacetaat, zuigt af, wast met ethylacetaat en droogt. Men verkijgt 25,05 g produkt met een smeltpunt van 208°C.

20 NMR-SPECTRUM (C DCl^) H beweeglijk : 5,08 p.p.m., 6,92 p.p.m., 6,33 p.p.m.

H van de tritylgroep : 7,33 p.p.m.

IR-SPECTRUM (CHCl^) =C=NH2 3505 cm-1 25 UV-SPECTRUM (EtOH.HCl N/10)

Max. 2k5 nm E^ = k05 VOORBEELD IX : 3-acetoxymethy1-7-/72-(2-amino-thiazol-4-yl)2-difluor-methoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Trap A : ethyl-2-(2-tritylamino-thiazol^f-yl)-2-(difluormethoxyimino) 30 acetaat, syn-isomeer.

Men roert gedurende 5 minuten 3 g ethyl-2-hydroxyimino- 2-ί2-tritylaminothiazol-4-yl)acetaat-chloorhydraat, syn-isomeer, 20 cm3 2N natriumhydroxyde en 20 cm3 100^’s ethanol. Het natriumzout slaat neer. Men voegt 60 cm3 dioxan toe om het op te lossen en laat 30 minuten onder 35 goed roeren monochloordifluormethaan doorborrelen. Men voegt dan 20 cm3 2N natriumhydroxyde, 20 cm3 100#'s ethanol en 60 cm3 dioxan toe en laat nog 30 minuten doorborrelen. Vervolgens voegt men 6,7 g natriumbicarbonaat toe en roert 15 minuten bij kamertemperatuur. Men zuigt een lichte onopgeloste stof af en dampt het filtraat onder verminderde druk in bij een -26- temper a tuur van ten hoogste 40°C en tot de consistentie van een stroop.

Men verdunt met chloroform, decanteert, wast eenmaal met water en vervolgens met een verzadigde waterige natriumchloride-oplossing, droogt, dampt in tot droog en onderwerpt het residu aan chromatografie op siliciumoxyde 5 onder toepassing van benzeen als elutiemiddel. Men verkrijgt 652 mg wit hars.

NMR-SPECTRUM (C^l ) CH F2 : 5,55 - 6»75 - 7,95 p*p*m.

thiazool syn : 6,77 p.p.m. singulet 10 UV-SPECTRUM (EtOH)

Max. 308 nm i]=80 i= 4100

IR-SPECTRUM

C=N0R : 1141 cm"1 CHF2 : 1145 cm”1 - 1117 cm’1 15 Trap B : 2-(2-trityl^ino-thiazol^4^1)-2-(difluormetho^rimino)azijn2niur, syn-igameer._

Men roert 5*1 mg van het in de voorgaande trap verkregen produkt, 0,05 cm3 dioxan, 0,35 cm3 10056’s ethanol en 0,1 cm3 1N natrium-hydroxyde. Er vormt zich een licht gom, dat men oplost in 0,1 cm3 100$'s 20 ethanol. Men sluit hermetisch af en verwarmt 2-J uren op 40°C. Men laat één nacht onder goed roeren bij kamertemperatuur staan. Men zuigt het gevormde neerslag af en wast met enkele druppeltjes van een dioxan-ethanol-mengsel (1—7) en vervolgens met ether en verkrijgt 25 mg van het natrium-zout, dat men opneemt in 1 cm3 chloroform en 1 cm3 water en voegt 1N zout-25 zuur toe tot een pH van 2 is verkregen. Men roert krachtig, decanteert de chloroform, wast met water, droogt, dampt in tot droog en verkrijgt 16 mg wit hars.

NMR-SPBCTRUM ^DCl^ CHF2 : 5Λ - 6*6 - 7,8 p.p.m.

30 H thiazool syn : 6,72 p.p.m. singulet 5 OH en NH : 9,33 en 10,25 p.p.m.

Trap C ; 3“acetoxymethyl-7-/7S-(2-tritylaminothiazol-4-yl)2-difluormethoxy-imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzure tert.butylester.

In een ijsbad roert men 820 mg van het op de wijze van 35 Trap B verkregen produkt, 492 mg 3-acetoxymethyl-7-amino-cef-3-em-4-car-bonzure tert.butylester en 16 cm3 chloroform. Men voegt druppelsgewijs 2 cm3 van een oplossing van 309 mg dicyclohexylcarbodiimide in chloroform toe. Men laat anderhalf uur staan bij kamertemperatuur en zuigt vervolgens het gevormde dicyclohexylureum af. Men dampt het filtraat onder verminderde 8004024 -27- druk in, onderwerpt het residu aan chromatografie op siliciumoxyde onder toepassing van een mengsel van methyleenchloride en ethylacetaat (9^-6) als elutiemiddel en verkrijgt 57^ mg wit hars· NMR-SPECTRUM (^DCl^) 5 tert.butyl : 1,5^ p.p.m. singulet OAC : 2,0 p.p.m. singulet CHF2 : 5,6-6,8-8,0 p.p.m.

thiazool syn : 6,92 p.p.m. singulet UV-SPECTRÏÏM (EtOH HC1 N/10) 10 Max. 262 nm E1 =217

Trap D : 5-acetoxymethyl-7-/7^-(2-aminothiazol-4-yl)2-difluormethoxyiiaino7 aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Men roert 3 minuten bij kamertemperatuur 0,32 g van het in de voorgaande trap verkregen produkt en 1,6 cm3 zuiver trifluorazijn-15 zuur. Men giet uit in 16 cm3 van een ijskoud mengsel van isopropylether en ethylether (1-1) en roert 15 minuten. Men zuigt af, wast met het ether-mengsel en vervolgens met zuivere ethylether en verkrijgt 130 mg wit produkt met een smeltpunt van ongeveer 176°C (onder ontleding). NMR-SPECTRUM (C^^SO 20 OAC : 2,03 p.p.m. singulet CH F2 : 5,95 - 7,13 8,23 p.p.m.

H_, thiazool syn : 7,05 singulet UV-SPECTRUM (EtOH HC1 N/10)

Max 278 nm E1 = 265 25 IR-Snectrum (nujol) ji -lactami 1777 cm”1 OAC : 1726 cm”1 -C=N0E : 1031 cm”1 VOORBEELD X : Men bereidt preparaten voor injectie door vermenging van 30 de onderstaande bestanddelen: A - 3-acetoxymethyl-7-/75-(2-araino-thiazol-it-yl)2-/5-(amino-iminomethyl-thio)ethoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer..500 mg - Vaterig steriel excipiens voldoende voor ....................... 5 cm3 B - 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol*4-yl)-2-difluormethoxyimino7 35 aceetamido7cef-3**em-^-carbonzuur, syn-isomeer ··.··.............500 mg

Waterigfe^cipiens voldoende voor............................... 5 cm3 VOORBEELD XI : Men bereidt op op zichzelf bekende wijze capsules onder toepassing van de volgende bestanddelen: —28·· A - 3-acetoxymethyl-7-/72-(2-amino-thiazol-4-yl)2-/2-(aminoimino-methylthio) ethoxy-imino7aceetamido7cef-3**em-4-carbonzuur, syn-isomeer ...··.··..........................................250 mg

Excipiens voldoende voor een capsule van.....................400 mg 5 B - 3-acetoxymethyl-7-/T2-(2-amino-thiazol-4-yl)2-difluormethoxy- imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer ..........250 mg

Excipiens voldoende voor een capsule van .....................400 mg PHARMACOLOGISCH ONDERZOEK VAN DE VERBINDINGEN VOLGENS DE UITVINDING.

I - WERKZAAMHEID IN VITRO. METHODE VAN DE VERDUNNINGEN IN VLOEIBAAR MILIEU. 10 Men prepareert een reeks buisjes, waarin men eenzelfde hoeveelheid steriel voedingsmedium verdeelt. Men verdeelt in elk buisje toenemende hoeveelheden van het te onderzoeken produkt en ent vervolgens elk buisje met een bacteriestam· Na incubatie van 24 of 48 uren in een stoof bij 37°C wordt de remming van de groei gewaardeerd door doorlichten, 15 hetgeen het mogelijk maakt om de minimale remmende concentraties in A g/ cm3 te bepalen.

De verkregen resultaten zijn vermeld in de hierna volgende tabellen.

20 • 800 4 0 24 -29-

PRODÏÏKT VAN DE VOORBEELDEN I, II en III

nmnntT1., Minimale remmende concentratie ________2^ uur__48 uur

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 Ρθηχσΐΐΐ,χηβ—geY°el±g .................._______JL-___________________

Staphylococcus aureus UC 1 128 ^Penicilline-resistent _______2________________3______

Staphylococcus a^eus_ex^_no._5^_1^6_»<_______2_______________2________

Streptococcus pyogenes A 561 .......... ___ _____2l2-____J

i _Bacillus_ subtilis_ATCC_é__633_ · ...·.. lil________1_______I______2

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig _ATCC ________1________ _____1_______

Escherichia Coli Tetracycline-resistent ! _ATCC 21-222-111111111111111111111111111-1______2i-25____________0,05_____:

Escherichia Coli Exp. TO^gBg .......... 0,5 0,5 J

Escherichia Coli Gentamycine, Tobra- | ..!i?££-5-Z£®iË-iSn-.....* ♦ «· · ♦_______0^5_____________0,5_____

Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145 ^ ^0^5^

Klebsiella pneumoniae 2 536 Gentamycine j _resistent_......... mu 111111 ___2_________;______2

Proteus mirabilis (indool-) A_235_..... ____0^1______________2l2^ _Salmonella_typhimurium_|f20 ............________0,5______|_______0_,5______ JSnterobacter cloacae_68l_.............. 2 __ ____ 2 ______ -Providencia. Du 48 ·····.··.··.···.··..· __ 2 ^ ^ ______3_

Pseudomonas 8951 Gentamycine Tetracy- _cline-resistent ....................... 20 20

Serratia Gentamycine-resistent 2 532 .. 0,5 0,5 STAMMEN Minimale remmende concentratie 2b uur 48 uur -30-

PR0DUKT VAN VOORBEELD IV

Staphylococcus aureus ATCC 6 538

Penicilline-gevoelig_·· . · · · · . . 1 --- .J

Staphylococcus aureus UC 1 128 ^enicdJline-resistent^......... 2 ........... 2

Staphylococcus aureus exp, no« 5^,____________^2^ ^Streptococcus pyogenes A 5§1_.._........________0^05__________2l22_____ ^Bacillus subtilis ATGG_6^635_«»»«»»^««»_______0^5______ 2,,

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig _ATCC_9_637_............................______2___________2_____

Escherichia Coli Tetracycline-resistent 11 303_...................................0i2__________0Z2_____

Escherichia Coli Exp. TO^gBg .......... 1 1

Escherichia Coli Gentamycine, Tobramy- cine-resistent R 55^123^^............. 1 1

Klebsiella pneumoniaejjjxp. 52_145 ··.··__ 1 1________

Klebsiella pneumoniae 2 536 Gentamycine resistent .....5 _______5 JProteus mirabilis (indool-) A 235_..... __ 0^2 _____ 0,5 _____

Salmonella typhimurium 420 ............ ^2.................. _

Enterobacter cloacae 681 ............ 3 3_____

Pseudomonas 3935 Exp. Gentamycine-ge- _voelig_................................ 10 20

Providencia Du 48 ..................... _ 5 10 __

Serratia Gentaaycine-resistent 2 532 ·· 1 1 «00 40 24 -31-

PRODÜKT VAN VOORBEELD V

Minimale remmende concentratie STAMMEN ------------------------ 24 uur 48 uur

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 _Penicilline-gev°elig ..........................1________________1___

Staphylococcus aureus UC 1 128 ^Penicilline^resistent^......».........________1________________2______

Staphylococcus aureus exp. no. 54 146..________1__.................2

Streptococcus pyogenes A 561 ^^„„„$.9^?-.___________-2i2Ë____ ^Bacillus subtilis ATGG^6_633 ·.··..·.··________2________________3_______

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig _______2________________2_______

Escherichia Coli Tetracycline-resistent _atcc_ii 303 ........._______2a2______________2i2_____

Escherichia Coli Exp. ^26^6 ····*····· 0,5 0,5

Escherichia Coli Gentamycine, Tobramy- cyne-resistent R 55 123............ _ I,,.,,,....,,. ..,--1-,-

Klebsiella pneumoniae_Exn._52 lA-5^^.________1________________1_____ |

Klebsiella pneumoniae 2 536 Gentamycine resistent .............2 _ __________^ —-r _Proteus mirabilis (indool-)_A 235 · · · · · ^ 2’?- - _0,2 ^Salmonella typhimurium 420 ......... _1___ _ 1

Enterobacter_cloacae 681 3 _ 3 ___ _Prqvidencia Du 48 ................_____10.__ _ _ _10_ __

Serratia Gentamycine-resistent 2 532 ..1 1 -32-

PRODÏÏKT VAN VOORBEELD VI

Minimale remmende concentratie

STAMMEN _______^g/rol_______________I

24 uur 48 uur |

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 ^Penicilline-gevoelig^... ........... „„„„„„.I—.——— 2

Staphylococcus aureus UC 1 128 _Penicilline-resistent .................______^_2_____________2___|___ _Staphylococcus aureus exp._no. 54 146.. 2 ____________________2 ____j

_ I

I Streptococcus pyogenes A 561 . _0,05 — Q;Q5 >

Bacillus subtilis ATCC 6 633 .......... 1______ _ _ __iL——

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig _________5______________5_______ i i Escherichia Coli Tetracycline-resistent L4rccjl.303_.«.................................2j.2____________2il___

Escherichia Coli Exp. TC^gBg.......... 2 2

Escherichia Coli Gentamycine, Tobramy- _cine-resistent R 55 123 D ____1 .... .....

^Klebsiella pneumoniae Exp, 52 145 ..... 1 1 , „

Klebsiella pneumoniae 2 536 Gentamycine _resistent_...·^·11111111111111111111111- 5 5

Proteus mirabilis (indool-) A 235 ..... 1 1

Salmonella typhimurium420_............ 2 3______

Enterobacter_cloacae_6Sl__..______10____ 10_____

Serratia Gentamycine-resistent 2 532 .· 2 3 800 4 0 24 -33-

PRODIJKT VAN VOORBEELD VII

Minimale remmende concentratie STAMMEN --------yS&fïïi—j------------- 24 uur 48 uur

Staphylococcus aureus ATCC 6 538

Penicilline~gevoelig_....«,.._______________________1________

Staphylococcus aureus ÜC 1 128

Penicilline-resistent ..»»»«»»»._______l_11 ___ ^ _______1_______

Staphylococcus aureus exp. No. 45 146.._______1_______________2________

Streptococcus pyogenes A 561 .......... 0,02_ ______0,02 ^Bacillus subtilis ATCC 6^633 ^1^^ m_ i _ __ i _ _ 2

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig ________5_______________5________

Escherichia Coli Tetracycline-resistent ATCC 11 503 ...................................0,2______________0j2_____

Escherichia Coli Exp. TO^gBg *········· 2 2

Escherichia Coli Gentamycine, Tobramy- cine-resistent R_55_J23_D_.«........... 1 ^1 ^Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145 ..... _ _0^5______________0_,5_____

Klebsiella pneumoniae 2 536 Gentamycine resistent ........·.. · 5 _______ 5__ „

Proteus mirabilis (indool-) A 235 ·>..· __ 0,2 (3,5

Salmonella typhimurium 420^............ 1_ __ __ __Providencia_Du 48 ..................... ..,. 10,. „, ..ωtj, 10

Serratia Gentamycine-resistent 2 532 .. 2 3 a no i o 24

Minimale remmende concentratie STAMMEN ------7------------ 2k uur 1+8 uur -3fr-

PRODUKT VAN VOORBEELD VIII

Staphylococcus aureus ATCC 6 538

Penicilline-gevoelig_ ....... 1 ______2______

Staphylococcus aureus ÜC 1 128

Penicilline-resistent_.................___ 2____________2______

Staphylococcus aureus e3^.jio._45_1|f6. ·_______________2_______

Strentococcus pyogenes^A^^él...______0_,02____________0_,05_____

Bacillus subtilis ATCC_6 β33_·........ 1 ____3________

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig ATCC 9 657 ............................ 2______________2_______

Escherichia Coli Tetracycline-resistent _________o£___________oz5_____

Escherichia Coli exp. TO^Bg........... 1 1

Escherichia Coli Gentamycine, Tobramy- _cine-resistent RJ?5 123_P_.............__ 1 ____ 1_______ _Klebsiella pneumoniae Exp. 32,1^5,,«»««* 1 1

Klebsiella pneumoniae 2 536 Gentamycine resistent ... . ............... . * ·"·„ , „..π ——22——— _^7^e11f_??:^bilis (indool-) A 235 ..... ______0^2_____

Salmonella typhimurium 420 ............____ 1___________2______

Serratia Gentamycine-resistent 2 532 ..1 2

V

800 4 0 24

Minimale remmende concentratie STAMMEN -------------------- 24 uur 48 uur -35-

PRODUKT van VOORBEELD IX

Staphylococcus aureus ATCC 6 538

Penicilline-gevoelig_.. ...... ·········;_.. 1 .... T.

Staphylococcus aureus ÜC 1 128 _Penicilline-resistent .................________1_______________2_______ » _Staphylococcus aureos exp._no· 54_146..________1________________2______

Streptococcus pyogenes A 561 .......... ......2l92______!______0,05____

Streptococcus faecalis 5 432 ···*······______'5 .... J______-_______

Bacillus subtilis ATCC 6 633^......... ____lu.2_____

Escherichia Coli Tetracycline-gevoelig ATCC 9 637 ..................................0,5_______;_______2_______

Escherichia Coli Tetracycline-resistent | ATCC 11 303 ...........................j_________________0,1_____

Escherichia Coli Exp. TO^gBg........... 0,2 0,2 i

Escherichia Coli Gentamycine, Tobramy- j cine-<resistent_R^55 123_D^.«._______0^,2______'______0,2_____ _Klebsi ella_pneumoniae_Exp._52_l45_. ___ 0,05_____j_______0,05

Klebsiella pnuemoniae 2 536 Gentamycine j jresistent............................. ..^_0_,5__________0^5____ Γ _Proteus mirabilis (indool-)_A 235^»··;«^ ___ 0,05 i 0,05

Salmonella typhimurium 420 ............ ___ 0,5 __ _ 0,5

Providencia Du 48..................... 2 2 T“ ”

Serratia Gentamycine-resistent 2 532 ·· | 0,5 0,5 800 4 0 24 -36-

II - WERKZAAMHEID IN VIVO

A) Proefondervindelijke infectie met Escherichia Coli TQ^gBg

De werking van de verbinding van Voorbeeld I is bestudeerd bij proefondervindelijke infectie van muizen met Escherichia Coli.

5 Groepen van tien mannelijke muizen met een gemiddeld gewicht van 21,5 g werden geïnfecteerd door intraperitoneale injectie van 0,5 cm3 van een kweek van 22 uren in een voedingsmedium van de stam Escherichia Coli TO^gBg van het Pasteur-Instituut, verdund tot 1/5de met gedestilleerd water.

Eén uur, vijf uren en vierentwintig uren na de injectie 10 werd een bepaalde hoeveelheid van het te onderzoeken produkt door subcu-tane injectie toegediend.

Gedurende 8 dagen werd de sterfte nagegaan.

De verkregen resultaten zijn vermeld in onderstaande tabel.

15 ___ DOSERING Γ_ STERFTE NA _ __ Levende muizen op 7uur 7u.15 21u.3Q 2^uur 28 uur 36 uur de 8ste dag

Blanco_________1____1_______8__________________________0/10______ 0,1_mg______________________1_____1_______1____1____6/10______ 20 [o,25 mg Γ T T T__[__10/10___ B) Proefondervindelijke infectie met Proteus Mirabilis

De werking van de verbinding van Voorbeeld I is bestudeerd bij proefondervindelijke infectie van muizen met Proteus Mirabilis.

Groepen van 10 muizen met een gemiddeld gewicht van 21,5 25 g werden geïnfecteerd door intraperitoneale injectie van 0,5 cm3 van een kweek van 22 uren in een oxoid-milieu van de stam Proteus Mirabilis A 235t verdund tot 1/10.

Eén uur, vijf uren, en vierentwintig uren na de injectie werd een bepaalde hoeveelheid van het te onderzoeken produkt door subcu-30 tane injectie toegediend· De resultaten zijn vermeld in onderstaande tabel.

DOSERING STERFTE NA Levende muizen op de 21u15 23u^5 25 uur 31 uur 8ste dag

Blanco 9^ 0/10 35 0,025 mg_____________1_____1____1_______7/10_____ 0,05 mg______________________ 10/10________ 0,1 mg_______________________________10/10______ 0,25 mg______________________________10/10_____ 0.5 mg 10/10 800 4 0 24 -37- C) Proefondervindelijke_infectie_met^Proteus_Morganii_A236

De werking van de verbinding van Voorbeeld I is onderzocht bij proefondervindelijke infectie van muizen met Proteus Morganii A 236. Groepen van 10 muizen met een gemiddeld gewicht van 20,5 g werden 5 geïnfecteerd door intraperitoneale injectie van 0,5 cm3 van een kweek in een milieu met pil 7» verdund tot 1/10.

Eén uur, vijf uren en vierentwintig uren na de injectie werd een bepaalde hoeveelheid van het te onderzoeken produkt door subcu-tane injectie toegediend.

10 De resultaten zijn vermeld in ondertstaande tabel.

DOSERING ^STERFTE NA ___ Levende muizen op de b uur 6uur 6u15 21u10 *f5u20 8ste dag Blanco 12 — _ 0/10 *

15 0,05 mg__________1_____2____1______3______1____________2/10___________I

'O^ljng_____________ ___________________________________10/10_________: :0,25 jnge____l_____T_________________________________10/10__________; |0,5 mg | | _10/10_i 20 D) Proefondervindelijke injectie met Klebsiella pneumoniae.

De werking van de verbinding van Voorbeeld I is onderzocht bij een proefondervindelijke infectie van muizen met Klebsiella Pneumoniae No. 52 1^5. Groepen van 10 muizen met een gemiddeld gewicht van 21 g werden geïnfecteerd door intraperitoneale injectie van 0,5 cm3 van 25 een kweek met pH 6, verdund tot 1/1500.

Eén uur, vijf uren, en vierentwintig uren na de injectie werd een bepaalde hoeveelheid van het te onderzoeken produkt door subcu-tane injectie toegediend.

De resultaten zijn vermeld in onderstaande tabel.

30 ___ DOSERING __ __^JTERFTE^NA^__ ____Levende muizen op de sa $\ iP j 5 6 8 8ste dag o iR iR ; § dagen dagen dagen dagen

Blanco_____ljö_ jJ 1,.,.1_____________________________0/10__________ 35 0,1 _mg________]_J________1______1_____1______1________6/10________ 0,25 mg_____L_j___!______1_________1_________8/10__________ 0,5_mg________S _ !________________1____________9/10________ 1 mg_______l_ I ____________________________10/10____ 1,5 mg 10/10 80040 24

Claims (12)

1. Verbindingen met de algemene formule 1 van het formuleblad, in de vorm van het syn-isoraeer, waarin R gelijk is aan R , waarbij

5 R& een groep -(CI^^-S-R^ voors^e^^i waarin R2 een groep met formule 7 of een groep met formule 8 voorstelt, welke groepen eventueel in geprotoneer-de vorm kunnen zijn, en n gelijk is aan een geheel getal van 1-4, of R gelijk is aan R^, waarbij R^ een groep -(CI^^-S-CN waarin n een geheel getal van 1-4 is, of een groep -CHF^ voorstelt, R^ 10 een waterstofatoom, een chlooratoom, methoxygroep, een alkyl-, cycloalkyl-of alkylthiogroep met ten hoogste 5 koolstofatomen, een groep -CH^-S-R*, waarin R' een al dan niet gesubstitueerde, stikstofbevattende heterocyclische groep of een acylgroep met 2-4 koolstofatomen voorstelt, een acetoxymethylgroep, een carbamoyloxymethylgroep, een groep met formule 9 15 van het formuleblad, waarin Alk 1-4 koolstofatomen bevat, of een aZido-methylgroep voorstelt en A een waterstofatoom of een gemakkelijk af te splitsen estergroep voorstelt, ofwel, wanneer R gelijk is aan R , de groep C0_A tevens het anion -C02" kan voorstellen, ofwel, wanneer R gelijk is aan R^, 20 A tevens een alkalimetaal-, aardalkalimetaal-, magnesium-, ammonium- of organische stikstofbase-equivalent kan voorstellen, alsmede de additie-zouten van de verbindingen met formule 1 met organische of anorganische zuren.

2. Verbindingen met formule 1 volgens conclusie 1, waarin 25 R^ een waterstofatoom, een groep -OH^-S-R", waarin R" een l-methyl-l(H)- tetrazolyl- of 2-methyl-1,3,4-thiadiazolylgroep voorstelt, een acetoxymethylgroep of een azidomethylgroep voorstelt, alsmede de additiezouten met organische of anorganische zuren daarvan.

3· Verbindingen met formule 1 volgens conclusie 1, waarin 30. een groep met formule 10 van het formuleblad, eventueel in geprotoneer-de vorm, of een groep -£HF2 voorstelt en R1 een waterstofatoom, een 1-methyl-1(H)-tetrazolylthiomethyl-, 2-methyl-1,3»4-thiadiazolylthiomethyl-, acetoxymethyl- of een azidomethylgroep voorstelt· 4. 3*acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)2-/5-(amino- 35 iminomethylthio )7ethoxy-imino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur, (syn-iso- meer) in de vorm van het inwendige zout of een zout met een anorganisch of organisch zuur en esters met gemakkelijk af te splitsen groepen daarvan· 5. 3-Acetoxymethyl-7-/72-(2-aminothiazol-4-yl)-2-difluor-methoxyimino7aceetamido7cef-3-em-4-carbonzuur (syn-isomeer), de zouten 800 4024 * h. -39- met alkalimetalen, aardalkalimetalen, magnesium, ammonium en organische stikstofbasen en esters met geraakkelijk af te splitsen groepen, alsmede de zouten met anorganische of organische zuren daarvan.

6. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen met formule 5. volgens conclusie 1 en hun additiezouten met organische of anorganische zuren, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 2 van het formuleblad, waarin een waterstofatoom of een beschermende groep van de aminogroep en een waterstofatoom of een gemakkelijk af te splitsen estergroep voorstelt, R^ de in conclusie 1 genoemde betekenissen 10' bezit en R^ een waterstofatoom voorstelt of gelijk is aan R’^, waarbij R'^ een groep -(CH^^-Hal voorstelt, waarin n een geheel getal van 1-Λ en Hal een halogeenatoom voorstelt, ofwel, wanneer R^ een waterstofatoom voorstelt, behandelt met een verbinding met de formule Haljj-CHF^, waarin Hal^ een chloor-15 of broomatoom voorstelt, onder vorming van een verbinding met formule 3 van let formuleblad, waarin A^, R^ en de eerdergenoemde betekenissen bezitten, ofwel, wanneer R^ gelijk is aan R’^, behandelt met thio-ureum of een verbinding met formule 11 van het formuleblad, waarin R^ een 20 beschermende groep van de aminogroep voorstelt, of een verbinding met de formule nSï-S-R^, waarin R<- een ammoniumgroep of een alkalimetaalatoom voorstelt, onder vorming van een verbinding met formule 3' vanhet formuleblad, waarin R^, en A^ de eerdergenoemde betekenissen bezitten en Rq een groep met formule 7, een groep met formule 12 of een nitrilgroep voor-25 stelt, verbindingen met formule 3» waarin Rg en A^ elk een waterstofatoom voorstellen en verbindingen met formule 3’» waarin R^ en A^ elk een waterstofatoom voorstellen en R verschillend is van de groep met formule 12, v verbindingen overeenkomende met verbindingen met formule 1, waarin A een waterstofatoom voorstelt en R niet de groep met formule 8 voorstelt, die 30 men desgewenst verestert of ontzet in een zout met een base of een zuur en verbindingen met formule 3 of 3', waarin tenminste één van de groepen of A^ verschillend is van een waterstofatoom en verbindingen met formule 3', waarin Ro de groep met formule 12 van het formuleblad voorstelt, die men behandelt met één of meer middelen gekozen uit hydrolysemiddelen, 35 hydrogenolysemiddelen en thioureum onder vorming van verbindingen met de algemene formule 1'van het formuleblad, waarin R en R^ de in conclusie 1 genoemde betekenissen bezitten, welke verbindingen overeenkomen met een verbinding met formule 1, waarin A een waterstofatoom voorstelt, en deze verbindingen met formule 1' desgewenst verestert of omzet in een zout met 800 4 0 24 -4o- een base of een zuur.

7. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen met de algemene formule 1 volgens conclusie 1,met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 4 van het formuleblad, waarin R2 een water- 5 stofatoom of een beschermende groep van de aminogroep en R^ een waterstofatoom voorstelt of gelijk is aan R'^, waarbij R'^ een groep -(CH^^-Hal voorstelt, waarin Hal een halogeenatoom en n een geheel getal van 1-4 voorstelt, ofwel, wanneer R^ een waterstofatoom voorstelt, behan-10 delt met een verbinding met de formule Hal1-CHF2, waarin Hal^ een chloor-of broomatoom voorstelt, onder vorming van een verbinding met formule 5 van het formuleblad, waarin R^ de eerdergenoemde betekenissen bezit, ofwel, wanneer R^ gelijk is aan S’^, behandelt met thio-ureum of een verbinding met formule 11, waarin R^ een beschermende groep 15 van de aminogroep voorstelt, of een verbinding met de formule N=C-S-R^, waarin R,- een ammoniumgroep of een alkalimetaalatoom voor-stelt, onder vorming van een verbinding met formule 5'. van het formuleblad, waarin R2 de eerdergenoemde betekenissen bezit en R een groep met formule 7» een groep met formule 12 of een nitrilgroep voorstelt, en de verbindingen met 20 formules 5 en 5' als zodanig of in de vorm van een funktioneel derivaat laat reageren met een verbinding met formule 6 van het formuleblad, waarin een waterstofatoom of een gemakkelijk af te splitsen estergroep voorstelt en R^ de in conclusie 1 genoemde betekenissen bezit, onder respek-tievelijke vorming van de verbindingen met formules 3 en 3', die men des-25 gewenst behandelt volgens de in conclusie 6 beschreven werkwijze.

8. Werkwijze volgens conclusie 6 of 7, met het kenmerk, dat men gebruik maakt van verbindingen, waarin de groep R2 een trityl-, chlooracetyl-, tert.pentyloxycarbonyl-, tert.butyloxycarbonyl- of benzyloxycarbonylgroep voorstelt· 30 9· Als geneesmiddelen, de farmacologisch aanvaardbare ver bindingen volgens conclusie 1-3·

10. Als geneesmiddelen, de farmacologisch aanvaardbare verbindingen volgens conclusie 4.

11. Als geneesmiddelen, de farmacologisch aanvaardbare ver-35 bindingen volgens conclusie 5·

12. Farmaceutische samenstellingen, die als werkzaam bestanddeel tenminste één van de geneesmiddelen volgens conclusies 9-11 bevatten.

13. Als nieuwe industriële produkten, de verbindingen met formule 3a van het formuleblad in de vorm van het syn-isomeer, waarin R^ 800 4 0 24 4 κ -41- en de in conclusie 6 genoemde betekenissen bezitten en E'^ een beschermende groep van de aminogroep voorstelt, en de verbindingen met formule 3. van het formuleblad in de vorm van het syn-isomeer, waarin n, R , R. O I en de in conclusie 6 genoemde betekenissen bezitten en een bescher-3 mende groep van de aminogroep voorstelt.

14. A^s nieuwe industriële produkten de verbindingen met formule 5 van het formuleblad in de vorm van het syn-isomeer, waarin de in conclusie 6 genoemde betekenissen bezit, en de verbindingen met formule 5’ van het formuleblad in de vorm van het syn-isomeer, waarin Rg 10 en ï?c de in conclusie 6 genoemde betekenissen bezitten. 80040 24