MXPA02001029A - Composicion para el cuidado de la piel. - Google Patents
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Abstract
Una composicion topica que comprende: a) acido petroselinico y/o derivados del mismo; b) un compuesto fenolico y/o mezclas del mismo; y c) un vehiculo dermatologicamente aceptable. El producto es particularmente util para tratar arrugas y calmar piel sensible.
Description
COMPOSICIÓN PARA EL CUIDADO DE LA PIEL
CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a composiciones tópicas para aplicación a la piel humana y a su uso para mejorar la condición y apariencia de la piel.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La piel es sometida a deterioro a través de desórdenes dermatológicos, abuso ambiental (viento, aire acondicionado y calefacción central) o a través del proceso de envejecimiento normal (cronoenvejecimiento), el cual puede ser acelerado por exposición de la piel al sol (fotoenvejecimiento). En años recientes, ha crecido enormemente la demanda de composiciones cosméticas y métodos cosméticos para mejorar la apariencia y condición de la piel. Los consumidores han buscado cada vez más productos cosméticos anti-envejecimiento que traten o retarden los signos visibles de piel cronoenvejecida y fotoenvejecida, tales como arrugas, líneas, colgajos, hiperpigmentación y manchas de la edad. Los consumidores también buscan frecuentemente otros beneficios de productos cosméticos además de anti-envejecimiento. El concepto de piel sensible también a elevado la demanda del consumidor de productos cosméticos que mejoren la apariencia y condición de piel sensible, seca y/o reseca y para calmar piel roja y/o irritada. Los consumidores también desean productos cosméticos que tengan un efecto de control de aceite/sebo.
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Muchas personas están preocupadas por el grado de pigmentación de su piel. Por ejemplo, personas con manchas de la edad o pecas pueden desear que tales manchas pigmentadas sean menos pronunciadas. Otros pueden desear reducir el obscurecimiento de la piel provocado por exposición a la luz solar o para aclarar su color de piel natural. Para satisfacer esta necesidad se han hecho muchos intentos para desarrollar productos que reducen la producción de pigmento en los melanocitos. Sin embargo, las substancias hasta ahora identificadas tienden a tener efectos laterales no deseables, por ejemplo irritación de la piel . En consecuencia, tales substancias no son adecuadas para uso cosmético, o pueden ser aplicadas solamente a una concentración a la cual su efecto aclarador de la piel es menor al deseado. Puede considerarse que usar una combinación de diferentes substancias aclaradoras de la piel reduce los efectos laterales adversos, pero existe un riesgo substancial que al usar tal combinación, la aclaración de la piel es reducida también debido a efectos de competencia. Por lo tanto, existe la necesidad de una mejora en la efectividad de productos cosméticos aclaradores de la piel, en particular de manera que no irriten la piel. J07277939 describe una composición para el cuidado de la piel para mejorar el envejecimiento de la piel y la inflamación de la piel, que contiene (A) Flor de Manita y (B) al menos 1 de activo seleccionado de removedores de oxígeno, antioxidantes, activadores de células, anti- ^nflamatorios, inhibidores de tirosinasa y agentes de retención de humedad. Entre las muchas opciones de ingredientes descritas para el
H- i .
componente B se encuentran quercetina, quercitolina, catequina, ácido gállico, ácido gamma-Mnolénico y ácido eicosapentaenoico. J05271046 describe una composición aclaradora de la piel, que contiene un ácido graso ¡nsaturado teniendo 1 8 a 22 carbonos y dos o má« enlaces insaturados, tales como ácido linoleico y araquidónico, y un polifenol. El uso de aceites ricos en ácido petroselínico' en composiciones para el cuidado de la piel como un agente humectante ha sido descrito en EP A 0709084. Es conocido el uso de ácidos grasos, incluyendo ácido petroselínico, en formulaciones cosméticas para tratar el cabello. EP-A-1 16439 describe tónicos para el cabello, los cuales incluyen ácidos grasos, (tales como ácido petroselínico, paa aliviar la caspa y comezón y para estimular el crecimiento del cabello. Sin embargo, la técnica discutida antes no describe la combinación si nérgica específica de ácido petroselínico con un compuesto fenólico ni el uso de tal combinación específica para tratar arrugas, piel sensible, piel seca, controlar secreción de aceite/sebo, o aclarar la piel. Hemos encontrado ahora que el tratamiento y prevención efectivos de condiciones de la piel normales (pero cosméticamente no deseables) debido al cronoenvejecimiento o fotoenvejecimiento, tales como arrugas, l íneas, colgajos, hiperpigmentación y manchas de la edad, pueden obtenerse a través de la aplicación de composiciones cosméticas a la piel, las cuales comprenden un ácido graso específico - ácido petrosélínlco y/o derivados del mismo, en combinación con un com puesto fenólico. También
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hemos encontrado que el uso de tales composiciones cosméticas proporciona ventajosamente además, beneficios para la piel además de anti-envejecimiento, tal como calmar piel sensible y/o irritada, controlar la secreción de aceite/sebo y aclarar la piel.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona una composición tópica que comprende: (a) ácido petroselínico y/o derivados del mismo; (b) un compuesto fenólico y/o mezclas de los mismos; y (c) un vehículo dermatológicamente aceptable. De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un método cosmético para proporcionar al menos un beneficio para el cuidado de la piel seleccionado de: tratar/prevenir arrugas, colgajos, piel seca, envejecida y/o fotodañada; reforzar la deposición de colágeno en la piel, reforzar la producción de decorina en la piel, intensificar la reparación de tejido; calmar piel irritada, roja y/o sensible; mejorar la textura, suavidad y/o firmeza de la piel; aclarar la piel; controlar la secreción de aceite/sebo, comprendiendo el método aplicar a la piel una composición tópica como se describe antes. La presente invención también abarca el uso de las composiciones inventivas para proporcionar al menos un beneficio para el cuidado de la piel seleccionado de tratar/prevenir piel arrugada, colgada, envejecida y/o fotodañada; reforzar la deposición de colágeno en la piel , reforzar la producción de decorina en la piel, intensificar la reparación de tejido;
calmar piel irritada, roja y/o sensible; mejorar la textura, suavidad y/o firmeza de la piel; aclarar la piel; y controlar la secreción de aceite/sebo. De acuerdo todavía con un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de ácido petroselínico y/o derivados del mismo en combinación con un compuesto fenólico y/o mezclas del mismo en una composición tópica cosmética para proporcionar al menos un beneficio cosmético para el cuidado de la piel seleccionado de tratar/prevenir piel arrugada, colgada, envejecida y/o fotodañada; reforzar la deposición de colágeno en la piel, reforzar la producción de decorina en la piel, intensificar la reparación de tejido; calmar piel irritada, roja y/o sensible; mejorar la textura, suavidad y/o firmeza de la piel; aclarar la piel; y controlar la secreción de aceite/sebo. Las composiciones inventivas, métodos y usos, proporcionan de esta manera, beneficios anti-envejecimiento, los cuales resultan en la promoción de piel suave y flexible con elasticidad mejorada y una aparición reducida o retardada de arrugas y piel envejecida, con color de piel mejorado. Se logra una mejora general en la apariencia, textura y condición, en particular con respecto a la apariencia radiante, clara y joven general de la piel. Las composiciones inventivas, métodos y usos también son benéficos para calmar y apaciguar piel sensible y/o irritada, para aclarar la piel y para controlar la secreción de aceite/sebo. De esta manera, la presente invención proporciona ventajosamente un amplio rango de beneficios para el cuidado de la piel . El término "tratar", como se usa en la presente, incluye dentro de su alcance reducir, retardar y/o prevenir las condiciones normales de la piel
í*í*í t jjt- »i3faj .j. ^ tena,.
antes mencionadas, tales como piel arrugada, envejecida y/o fotodañada, y/o piel irritada e intensificar de manera general la calidad de la piel y mejorar su apariencia y textura al prevenir o reducir irritación, arrugado y aumentar la flexibilidad, firmeza, suavidad y elasticidad de la piel. Las composiciones, métodos y usos de acuerdo con la invención pueden ser útiles para tratar piel, la cual ya está en una condición arrugada, envejecida, fotodañada, irritada o para tratar piel joven para prevenir o reducir aquéllos cambios no deseables antes mencionados debido al proceso de envejecímiento/fotoenvejecimiento normal.
DESC RIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN El ácido petroselínico (de aquí en adelante referido como PA) es un ácido graso de cadena larga (C1 8), monoinsaturado, teniendo la fórm ula CH3(CH2)10CH = CH(CH2)4COOH . La invención también incluye derivados del ácido libre, los cuales comprenden así porciones de ácido petroselínico. Los derivados preferibles incluyen aquéllos derivados de substitución del grupo carboxilo del ácido, tal como esteres (por ejemplo, esteres de triglicéridos, esteres de monoglicéridos, esteres de diglicéridos, fosfoésteres), amidas (por ejemplo, derivados de ceramida), sales (por ejemplo, sales de metales alcalinos y metales alcalino-térreos, sales de amonio) , y/o aquéllos derivados de substitución de la cadena de carbono de C 1 8, tal como derivados alfa hidroxi y/o beta hidroxi. En el caso de derivados de esteres de triglicéridos, todos los isómeros posicionales de substituyentes de PA en el esqueleto de glicerol
iai-At ^" están incluidos. Los triglicéridos deben contener al menos una porción de PA. Por ejemplo, de las tres posiciones esterificables en el esqueleto de glicerol, las posiciones 1 y 2 pueden ser esterificadas con PA y por otro lípido en la posición 3 o como una alternativa, el esqueleto de glicerol 5 podría ser esterifícado por PA en las posiciones 1 y 3 con otro lípido en la posición 2. De esta manera, los aceites que son ricos en triglicérido de ácido petroselínico también son adecuados para usarse en la presente invención. Tales aceites están comercialmente disponibles e incluyen aceite de
10 semilla de perejil, aceite de semilla de zanahoria, aceite de fruto de hinojo, aceite de semilla de chiviría, aceite de semilla de cilantro, aceite de semilla de perifollo, aceite de planta de alcaravea y aceite de semilla de apio. Donde sea que el término "ácido petroselínico" o "PA" se use en esta
15 especificación, se entenderá que los derivados del mismo comprendiendo porciones de PA también están incluidos. Las "porciones de PA" se refieren a porción o porciones de acil graso de PA de un derivado de PA. El PA, a ser empleado de acuerdo con la presente invención, está presente en la composición tópica en una cantidad efectiva. Normalmente, 0 la cantidad total del activo está presente en una cantidad entre 0.0001 % y 50% en peso de la composición. Más preferiblemente, la cantidad es desde 0.01 % hasta 10% y muy preferiblemente desde 0.1 % hasta 5%, con el fin de maximizar los beneficios a un costo mínimo.
Ü-tu 1 * ¿.a. i . t Compuestos fenólicos Los compuestos fenólicos pueden dividirse e<? •=! t i diferentes dependiendo de su estructura química <*.? ,0,?, incluyen fenoles simples (C6), benzoquinonas (C ¡ Í acetofenonas (C6-C2), ácidos fenilacéticos (C3-C3), - - o (C6-C3), cromonas (C6-C3), naftoquinonas (C6-C4), xa, c . estilbenos (C6-C2-C6), flavonoides (C6-C3-C6), lignanos, r; • - C3)2 y ligninas (C6-C3)n. El término flavonoides representa un grupo r J - , ( ' compuestos que consiste de dos anillos aromáticos ¿^ de tres carbonos, por ejemplo, C6-C3-C6. La fami'i . _ ¡ isoflavonoides, flavonoles monoméricos, dihidroflavono : .. r .- A. riias, epicatequinas (por ejemplo, lauronas), c. proantocianadinas, antocíanadinas, flavonas, fiavr n.,,. dihidrocalconas, isoflavonas, neoflavonas, auronas, flav.- . <..< , ÍH /on 3 oles y antrocianinas. El término isoflavanc zes íamoien incluye isoflavonas, pterocarpanos, ¡soflavononas, retenoides. ¡soflavenos e isoflavanoles. Los compuestos fenólicos preferidos para '.s^ . las composiciones de la presente invención son flavtr. J v - r.cio flavononas, tales como naringenina, flavonoles, taies ce- .. - >•; , catequina (por ejemplo, epigallocatequingallato, EGC3 '. r.vc -3, tales como daidzeína, genisteína, licetina y también z , . como ácido gállico y los polifenoles de té verde
iat tttíí ?.?*l. ?t? La quercetina, naringenina, daidzeína, genisteína, EGCG y polífenoles de té verde pueden ser obtenidos de Sigma. Los extractos de plantas conteniendo los compuestos fenólicos también son adecuados para usarse en la presente invención. Por ejemplo, rutin, hierba del asno, cebolla, especie de cítrico, contienen quercetína y naringenina, la soya contiene daidzeína y genisteína y variedades de té verde, tales como Camellia sínensís y assamica contienen EGCG y polifenoles de té verde. El compuesto fenólico o mezclas del mismo es empleado en la composición inventiva en una cantidad desde aproximadamente 0.01 % hasta aproximadamente 10% , de preferencia en una cantidad desde aproximadamente 10% hasta aproximadamente 1 %, muy preferiblemente en una cantidad desde aproximadamente 0.1 % hasta aproximadamente 5%.
Vehículo dermatológicamente aceptable La composición usada de acuerdo con la invención también comprende un vehículo dermatológica/cosméticamente aceptable para actuar como un díluyente, dispersante o portador para los activos. El vehículo puede comprende materiales comúnmente empleados en los productos para el cuidado de la piel, tales como agua, emolientes líquidos o sól idos, aceites de silicón, emulsificantes, solventes, humectantes, espesantes, polvos, propulsores y similares. El vehículo usualmente formará desde 5% hasta 99.9%, de preferencia desde 25% hasta 80% en peso de la composición, y puede, en la ausencia de otros auxiliares cosméticos, formar el resto de la composición.
Materiales de beneficio para la piel opcionales v auxiliares cosméticos Además de los activos, también pueden incluirse otros activos de beneficio para la piel específicos, tales como bloqueadores solares, otros agentes aclaradores de la piel, agentes bronceadores de la piel. El veh ículo también puede incluir además auxiliares tales como perfumes, opacantes, conservadores, colorantes y amortiguadores.
Preparación, forma, uso y empaque del producto Para preparar la composición tópica usada en el método de la presente invención , puede emplearse la manera usual para preparar productos para el cuidado de la piel. Los componentes activos generalmente son incorporados en un portador dermatológica/cosméticamente aceptable en una manera convencional. Los componentes activos pueden ser disueltos o dispersados primero convenientemente en una porción del agua u otro solvente o líquido a ser incorporado en la composición. Las composiciones preferidas son emulsiones aceite-en-agua, agua-en-aceite o agua-en-aceite-en-agua. La composición puede estar en la forma de productos para el cuidado de la piel convencionales, tales como una crema, gel o loción, cápsulas o similares. La composición también puede estar en la forma de un producto así llamado de "lavado", por ejemplo, un gel para tina o regadera, conteniendo posiblemente un sistema de entrega para los activos para promover la adherencia a la piel durante el enjuague. Muy preferiblemente, el producto es un producto "que se deja puesto"; un
Ij- -J-j-h-L-É- , 1 *_.
producto a ser aplicado a la piel sin un paso de enjuague deliberado poco después de su aplicación a la piel. La composición puede ser empacada en cualquier manera adecuada, tal como en un tarro, botella, tubo, bola giratoria o similar, en la manera convencional. También se prevee que las composiciones inventivas podrían empacarse como un conjunto de dos composiciones separadas, una conteniendo el ácido petroselíníco y la segunda conteniendo el compuesto fenólico, a ser aplicado a la piel de manera simultánea o consecutiva. La composición de acuerdo con la presente invención también puede ser formulada en una forma adecuada para ingestión oral, tal como una tableta, cápsula o similar. El método de la presente invención puede ser realizado una o más veces al día para la piel que requiere tratamiento. La mejora en la apariencia de la piel usualmente se volverá visible después de 3 a 6 meses, dependiendo de la condición de la piel , la concentración de los componentes activos usados en el método inventivo, la cantidad de composición usada y la frecuencia con la cual se aplica. En general, una pequeña cantidad de la composición, por ejemplo, de 0.1 a 5 ml es aplicada a la piel a partir de un recipiente o aplicador adecuado, y se esparce sobre y/o frota en la piel usando las manos, dedos o un dispositivo adecuado. Un paso de enjuague puede seguir de manera opcional, dependiendo de si la composición es formulada como un producto "para dejarse puesto" o "de enjuague" .
Con el fin de que la presente invención pueda entenderse más fácilmente, los siguientes ejemplos están dados a manera de ilustración solamente.
5 EJEMPLOS Eiemplo 1 Procedimiento para medir la síntesis de procolágeno-l y decorina en fibroblastos dérmicos humanos
10 Preparación de medio acondicionado de fibroblastos dérmicos Los fibroblastos de prepucio humano primarios en el paso 2 (P2) fueron sembrados enr placas de 12 cavidades a 1 0000 células/cm2 y se mantuvieron durante 24 horas en una atmósfera de 5% de dióxido de carbono y 4% de oxígeno en medio Eagles modificado de Dulbeccos
15 (DMEM) complementado con 1 0% de suero de ternera fetal. Después de este tiempo, las células se lavaron con DMEM libre de suero y entonces se incubaron en DMEM libre de suero fresco durante unas 60 horas adicionales. Las monocapas de fibroblastos se lavaron entonces nuevamente con DMEM libre de suero. Los reactivos de prueba y
20 controles de vehículo fueron adicionados a las células por triplicado en un volumen final de 0.4 ml/cavídad de DMEM libre de suero fresco y se incubaron durante unas 24 horas adicionales. Este medio acondicionado de fibroblasto fue ya sea analizado inmediatamente o congelado por chasquido en nitrógeno líquido y se almacenó a -70°C para análisis futuro.
-&&>_ li ii áii t tur3**'»»-*-"' IMÉÍ HITG nr"— ' • • — —" j* - •> -* **-* . ..»> ».— ~r., — *_..« ***r**..* ^^^ * ^«¿-..A^.. jum.t .L?t Las células fueron contadas entonces y los datos del análisis de dot-blot fueron estandarizados subsecuentemente a número de células.
Eiemplo 2 Ensayo de dot-blot para proteína de procolágeno-l y decorina en medio acondicionado de fibroblastos dérmicos Las muestras de medio acondicionado de fibroblastos dérmicos tratados con vehículo (como un control) o reactivos de prueba, fueron complementados con ditiotreitol 20 mM (dilución 1 : 10 de solución madre
200mM) y 0.1 % de dodeciisulfato de sodio (dilución 1 : 1 00 de solución m í<adre 1 0%), se mezclaron bien y entonces se incubaron a 75°C durante 2 m íiinutos. Se generó un estándar para el ensayo mediante dilución serial de medio acondicionado de fibroblastos puro a partir de fibroblastos sembrados a 10000 células/cm2 en un matraz de 175 cm2 y se mantuvieron en DMEM libre de suero como se describe antes. Las muestras de ensayo fueron aplicadas subsecuentemente por triplicado a una hoja prehumedecida de membrana de transferencia I mmobilon-P usando el aparato Bio-Dot de 96 cavidades de Bio-Rad, como se describe en las líneas de guía de los fabricantes. Aproximadamente 200 µl de medio se aplicaron por cavidad. Se permitió que el medio se filtrara a través de la mem brana bajo gravedad (30 minutos), después de lo cual se lavó dos veces la membrana con PBS (200 µl) . Se permitió que estos lavados de PBS se filtraran a través de la membrana bajo gravedad (2x15 minutos). Entonces se unió el aparato Bio-Dot a un colector de vacío y se realizó un tercer y último lavado con PBS bajo succión. El
AA? M.*.é*?*á . . * *** A * *** , .. , , -^^H aparato fue desmontado, la membrana se removió y se cortó rápidamente según se requería antes de ser colocada en amortiguador de bloqueo durante la noche a 4°C. Las membranas preparadas para análisis de decorina se bloquearon con 3% (p/v) de BSA/0.1 % (v/v) de Tween 20 en PBS , mientras que aquéllas para análisis de procolágeno-l se bloquearon con 5% (p/v) de lecho deshidratada descremtada en polvo/0.05% de Tween 20 en PBS. El día siguiente, las membranas fueron sondeadas con dilución 1 : 1 0000 de anticuerpos primarios a ya sea procolágeno-l humano (MAB 191 2; monoclonal de rata; Chemicon I nt. Inc. , Temecula, CA) o decorina humana (policlonal de conejo; Biogénesis) durante 2 horas a temperatura ambiente. Las membranas se lavaron subsecuentemente con TBS/0.05% de Tween 20 (3 x 5 minutos) y entonces se incubaron con dilución 1 : 1 000 de fragmentos F(ab')2 anti-rata o anti-conejo 125l-conjugados (Amersham) seg ún se requiere durante 1 hora a temperatura ambiente. Siguiendo esto, las tiras de Immobilon fueron lavadas nuevamente con TBS/Tween 20 (3 x 5 minutos) antes de permitir que se secaran en aire a temperatura ambiente. Las membranas secas se envolvieron en celofán y se expusieron a una pantalla de fósforo de almacenamiento Molecular Dynam ics durante 1 6-1 8 horas. Al final de este tiempo, la pantalla expuesta se exploró mediante un formador de imágenes de fósforo (Molecular Dynamics Phosphorimager SF) usando el programa de cómputo l mageQuantMR. La intensidad de puntos se valoró mediante análisis de imágenes asistido por computadora usando las herramientas de cuantificación en lmageQuantMR, estandarizada a número de células y los
l?»k,iá.M J.,+ ,m**** .. : ******** -«.- ,. , A. JJ HIA-J- efectos de varios reactivos de prueba en la síntesis de decorina y procolágeno-l se determinaron en relación a un valor de control tratado con vehículo de 1 00 unidades arbitrarias.
Ejemplo 3 PRUEBAS La tabla 1 más adelante indica el efecto sinérgico de ácido petroselínico en combinación con los compuestos fenólicos gallato ' de epigallocatequina (EGCG), ácido gállico, diadzeína, genesteína, quercetina en la síntesis de procolágeno-l y/o decorína en fibroblastos dérmicos humanos, y las cantidades en las cuales los activos fueron aplicadas. Con el fin de normalizar los resultados, los efectos de las substancias de prueba fueron determinados en relación a un valor de control tratado con veh ículo de 100 unidades arbitrarias. Las concentraciones de reactivos usadas en los ensayos no tuvieron influencia en la viabilidad celular. Las diferencias en los valores en porcentaje para 0.01 micromolar de ácido petroselínico observadas entre experimentos, refleja la variación normal entre experimentos, incluyendo aquéllas que surgen del uso de líneas de células diferentes.
Jtit L«ü. *í^?-A \ * áá. á ^í á **? * *s..^^. -**»- -~-f TABLA 1
- 1 *- * - • TABLA 1 (continuación)
Los resultados en la tabla 1 indican que la combinación de ácido petroselínico con un compuesto fenólico, sobre-regula de manera sinérgica la síntesis de procolágeno-l y/o decorina en fibroblastos dérmicos humanos. El nivel de decorina en la piel está asociado con una condición y apariencia mejorada de la piel. Aumentar el nivel de decorina en la piel es importante para la deposición controlada y correcta de colágeno en la piel, el cual está asociado con muchos beneficios para la piel, tal como borradura de arrugas y reparación dérmica de piel fotodañada.
Ejemplo 4 Este ejemplo demuestra el efecto sinérgico de la combinación específica de ácido petroselínico y un compuesto fenólico al reducir la respuesta inflamatoria de fibroblastos dérmicos.
Ensayo de PGE? e ICAM de fibroblastos La producción de PEG2 y moléculas de adhesión intracelular (ICAM) por fibroblastos de piel humana, puede inducirse mediante el estímulo inflamatorio de PMA (miristato acetato de forbal) PMA representa un
tensor externo, el cual induce tensión oxidante y respuestas inflamatorias en células. Este modelo es usado para modelar la inflamación in vivo. Se sembraron fibroblastos de prepucio humano primario en el paso 2 (P2) en placas de 96 cavidades a 10000 células/cavidad y se mantienen durante 24 horas en una atmósfera de 5% de dióxido de carbono en medio Eagles modificado de Dulbeccos (DMEM) complementado con 10% de suero de ternera fetal. Las substancias de prueba como se indica en la tabla 2 a continuación, se adicionaron a medios de células frescos (DMEM, complementado con 1 0% de suero de ternera fetal) en dimetiisulfóxido y concentración final de etanol <1 % por triplicado y se incubaron durante unas 24 horas adiconales. El miristato acetato de forbal (PMA) (Sigma) se adicionó 1 0 nM al medio y las células se incubaron durante unas 24 horas adicionales. El control solo contenía el vehículo, no contenía ningún compuesto de prueba o PMA. Los fibroblastos/medio fueron analizados entonces como se describe más delante de manera inmediata o se congelaron de golpe en nitrógeno líquido y se almacenan a -70°C para análisis futuro. Las células se contaron entonces y los datos del análisis dot-blot fueron estandarizados subsecuentemente al número de células.
Ensayo de prostaglandina E2 (PGE2): Se tomaron volúmenes de 50 µl para ensayo de PGE2 después de agitar suavemente la placa de cultivo. Los niveles de PGE2 en el medio fueron determinados con un conjunto de inmunoensayo de PGE2 Biotrak (Amersham , UK). El ensayo se basa en la competencia entre PG E2 sin marca en la muestra y una cantidad fija de PGE2 marcada con peroxidasa
de rábano picante para una cantidad limitada de anticuerpo específico de PGE2 fija. Las concentraciones de PGE2 de muestra sin marca se determinaron de acuerdo con una curva estándar, la cual se obtuvo al mismo tiempo. 5 Ensayo de ICAM-1 : Se desecharon los medios y las células se lavaron con PBS de Dulbecco. A las células lavadas, se adicionaron 1 50 µl de Tritón X-100 al 0.1 % (Sigma) durante 3 minutos para extraer ICAM de la membrana
10 celular. Los extractos fueron transferidos a tubos de centrífuga Eppendoff y se centrifugaron a 1 000 g durante 2 min para remover los desechos celulares. Se usó un volumen de 1 00 µl de sobrenadante para el ensayo de ICAM. Se valoró ICAM-1 soluble con el conjunto de ensayo inmunoenzimométrico comercialmente disponibles (R&D Systems). Las
15 concentraciones de ICAM-1 en las muestras se determ inaron en base a una curva estándar que corre paralela. Los resultados que fueron obtenidos del ensayo de PGE2 e ICAM se resumen en la tabla 2 a continuación.
^^^Bií ^?^ m, l ' -1 -- -» ***«"' • - *. *"* * « *•* *- - ~- ..*«*. . * , Tabla 2
Los resultados anteriores muestran que las células de reto con un estímulo inflamatorio, tal como PMA (miristil acetato de forbol) provoca un aumento en la respuesta inflamatoria como se mide por la producción de prostaglandina E2 (PGE2). La combinación específica de ácido petroselínico y compuesto fenólico reduce, de manera sinérgica, la respuesta inflamatoria como se mide por la producción de PGE2. Los resultados demuestran así, que las combinaciones específicas de activos dentro del alcance de la presente invención exhiben actividad antiinflamatoria sorprendentemente sinérgica.
Izi?ii *k ?, t ?^ .?** . ..*. ,.
Los resultados anteriores también demuestran que las células de reto con PMA provocan un incremento en la producción de I CAM . Tratar las células con una combinación de ácido petrosel ínico con compuesto fenólico disminuye de manera sinérgica, la producción de molécula de adhesión intracelular (ICAM), la cual es otro marcador de inflamación. Estos resultados demuestran, de esta manera, que las combinaciones específicas de activos dentro del alcance de la presente invención, exhiben una actividad anti-ínflamatoria buena y sorpendentemente sinérgica.
Eiemplo 5 La formulación a continuación describe una crema de aceite en agua adecuada para los métodos y usos de acuerdo con la presente invención. Los porcentajes indicados están en peso de la composición.
ta -».. .t A., ..^-JJ... - -*-**"'- -- *Brij 56 es alcohol cetílico POE (1 0) Alfol 16RD es alcohol cetílico
Ejemplo 6 La formulación a continuación describe una crema de emulsión de acuerdo con la presente invención.
.?,?^t **~**A* i r i nteHUHiBitiiii - -*••* •* -rr, - r-tft? — - — -
Tanto las composiciones tópicas anteriores del ejemplo 5 y 6 proporcionan un tratamiento cosmético efectivo para mejorar la apariencia de piel arrugada, envejecida, fotodañada y/o iritada, cuando se aplican a piel normal que se ha deteriorado a través del envejecimiento o fotoenvejecimiento, o cuando se aplican a piel joven para ayudar a prevenir o retardar tales cambios deterioradores. Las composiciones también son efectivas para calmar piel irritada, acondicionar piel seca,
l¿jLA¿i-^*t- aclarar el color de la piel y reducir las secreciones de aceite y sebo. Las composiciones pueden ser procesadas de manera convencional. JiJ- -Á? *,.* . :*-.:* ..
Claims (9)
1 . Una composición tópica que comprende: (a) ácido petroselínico y/o derivados del mismo; (b) un compuesto fenólico y/o mezclas del mismo; y (c) un vehículo dermatológica y/o cosméticamente aceptable.
2. Una composición tópica de acuerdo con la reivindicación 1 , en donde el compuesto fenólico es seleccionado de fenoles simples (C6), benzoquinonas (C6), ácidos fenólicos (C6-C? ), acetofenonas (C6-C2), ácidos fenilacéticos (C6-C2), ácidos hidroxicinámicos (C6-C3), fenilpropenos (C6-C3) , cumarinas, isocumarinas (C6-C3), cromonas (C6-C3), naftoquinonas (C6-C4), xantonas (Cß-Ci-Ce) , estilbenos (C6-C2-C6) , flavonoides (C6-C3-C6) , lignanos, neolignanos (C6-C3)2 y ligninas (C6-C3)n.
3. Una composición tópica de acuerdo con la reivindicación 1 o reivindicación 2, en donde el compuesto fenól ico es seleccionado del grupo que comprende ácidos fenólicos, flavonoides o isoflavonoides, o derivados de los mismos o mezclas de los mismos.
4. Una composición tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el compuesto fenólico es gallato de epigallocatequina, naringenina, quercitina . catequina, daidzeína , genisteína, licetina, ácido gállico o un fenol de té verde.
5. Una composición tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicacaciones precedentes, en donde el compuesto fenólico está presente a un nivel de 0.01 a 1 0% en peso de la composición . **jJ .~JtÍitáei?"*- - - - ** ****
6. Una composición tópica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición es una composición que se deja puesta.
7. Un método cosmético para proporcionar al menos un beneficio cosmético para el cuidado de la piel seleccionado de: tratar/prevenir piel arrugada, colgada, seca, envejecida y/o fotodañada; reforzar/mantener los niveles de colágeno en la piel, reforzar/mantener los niveles de decorína en la piel, intensificar la reparación de tejido; calmar piel irritada, roja y/o sensible; mejorar la textura, suavidad y/o firmeza de la piel; aclarar la piel; controlar la secreción de aceite/sebo; comprendiendo el método aplicar a la piel una composición tópica como se reclama en cualquier reivindicación precedente.
8. El uso de una composición cosmética como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para proporcionar al menos un beneficio cosmético para el cuidado de la piel seleccionado de tratar/prevenir piel arrugada, colgada, envejecida, seca y/o fotodañada; reforzar/mantener los niveles de colágeno en la piel, reforzar/mantener los niveles de decorina en la piel, intensificar la reparación de tejido; calmar piel irritada, roja y/o sensible; mejorar la textura, suavidad y/o firmeza de la piel ; aclarar la piel; controlar la secreción de aceite/sebo.
9. El uso de ácido petroselínico y/o derivados del mismo en combinación con un compuesto fenólico y/o mezclas del mismo en una composición cosmética tópica para proporcionar al menos un beneficio cosmético para el cuidado de la piel, seleccionado de tratar/prevenir piel arrugada, colgada, envejecida y/o fotodañada; reforzar la deposición de colágeno en la piel, reforzar la producción de decopna en la piel, intensificar la reparación de tejido; calmar piel irritada, roja y/o sensible; mejorar la textura, suavidad y/o firmeza de la piel, aclarar la piel; controlar la secreción de aceite/sebo. RESUM EN Una composición tópica que comprende: a) ácido petroselínico y/o derivados del mismo; b) un compuesto fenólico y/o mezclas del mismo; y c) un vehículo dermatológicamente aceptable. El producto es particularmente útil para tratar arrugas y calmar piel sensible. -i- -t,j-?.-trj-á¿-<l-l .. . . „-...-. ¡_ . -. ?a-t .¿jai, -.^i-.A
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