JP4638102B2 - スキンケア組成物 - Google Patents

Description

【０００１】
（発明の分野）
本発明は、ヒトの皮膚に適用するための局所組成物及び皮膚の状態及び外観の改善における前記組成物の使用に関する。
【０００２】
（発明の背景）
皮膚は、皮膚障害、環境的酷使（風、エアコンディショニング及びセントラルヒーティング）、または皮膚の日光への露呈（光線老化）により加速され得る通常の老化過程（時間老化）により悪化する。最近、皮膚の外観及び状態を改善するための化粧品組成物及び化粧方法に対する要求が非常に大きくなってきた。
【０００３】
消費者は、皺、筋、たるみ、色素沈着過度や老人斑のような時間老化や光線老化した皮膚の目に見える兆候を処置または遅らす「老化防止」化粧品をますます求めている。
【０００４】
消費者はしばしば、老化防止に加えて他の効果をも化粧品から求めている。「敏感皮膚」の概念から、敏感、乾燥及び／またはざらざらした皮膚の外観及び状態を改善し、赤くなった及び／または炎症状態の皮膚を和らげる（無痛化する）化粧品に対する消費者の要求が持ち上がってきた。消費者は油／皮脂の分泌のコントロール効果を有する化粧品も望んでいる。
【０００５】
多くの人は、そのような皮膚の色素沈着度を気にしている。例えば、老人斑またはそばかすのある人はその色素沈着した斑を目立たなくすることを望んでいる。他の人は、日光露呈に起因する皮膚のくすみを抑えたり普段の皮膚の色を明るくすることを望んでいる。これらの要求を満たすために、メラノサイトにおける色素産生を抑える製品の開発が多く試みられてきた。しかしながら、今までに同定された物質は望ましくない副作用を受ける、例えば皮膚を刺激する傾向にある。
【０００６】
よって、上記物質は化粧用として適さないか、または所望通りに皮膚の色を明るくする効果が得られない濃度でしか適用せざるを得ない。皮膚の色を明るくする物質を複数組合せて使用すると副作用が低減すると考えられ得るが、前記組合せを使用すると競合作用のために皮膚の色を明るくする効果が減るという実質的な弊害がある。従って、特に皮膚を刺激しないように皮膚の色を明るくする化粧品の効果を改善することが必要である。
【０００７】
特開平７−２７７９３９号公報は、（Ａ）フローデマニータ、及び（Ｂ）酸素除去剤、酸化防止剤、細胞賦活剤、消炎剤、チロシン阻害剤及び保湿剤から選択される少なくとも１つの活性成分を含む皮膚老化及び皮膚炎症を改善するためのスキンケア組成物を記載している。成分Ｂについて記載されている成分の中には、クエルセチン、クエルシトリン、カテキン、没食子酸、γ−リノレン酸及びエイコサペンタエン酸がある。
【０００８】
特開平５−２７１０４６号公報は、２個以上の不飽和結合を有する炭素数１８〜２２の不飽和脂肪酸（例えば、リノール酸及びアラキドン酸）及びポリフェノールを含む皮膚の色を明るくする組成物を記載している。
【０００９】
ペトロセリン酸を多く含む油をスキンケア組成物中のモイスチャライザーとして使用することは欧州特許出願公開第０７０９０８４号明細書に記載されている。
【００１０】
毛髪を処置するための化粧品組成物中にペトロセリン酸を含めた脂肪酸を使用することは公知である。欧州特許出願公開第１１６４３９号明細書は、ふけやかゆみを軽減するため及び毛髪成長を刺激するために（ペトロセリン酸のような）脂肪酸を含むヘアトニックを記載している。
【００１１】
しかしながら、上で検討した従来技術はペトロセリン酸とフェノール化合物の特定の相乗的組合せを開示していないし、皺、敏感皮膚や乾燥皮膚の処置、油／皮脂分泌のコントロール、または皮膚の色を明るくするために前記の特定組合せを使用することも開示していない。
【００１２】
本発明者らは、時間老化または光線老化に起因する正常であるが美容上望ましくない皮膚状態、例えば皺、筋、たるみ、色素沈着過度及び老人斑の効果的な処置及び予防が特定の脂肪酸であるペトロセリン酸及び／またはその誘導体をフェノール化合物と組合せて含む化粧品組成物を前記皮膚に適用することにより得られ得ることを今回知見した。本発明者らは、前記化粧品組成物を使用すると、老化防止に加えて更なるスキンケア効果、例えば敏感及び／または炎症状態の皮膚を和らげ、油／皮脂の分泌をコントロールし、皮膚の色を明るくする効果が有利に得られることも知見した。
【００１３】
（発明の要旨）
本発明の第１の態様によれば、（ａ）ペトロセリン酸及び／またはその誘導体、（ｂ）フェノール化合物及び／またはその混合物、及び（ｃ）外皮用として許容され得るビヒクルを含む局所組成物を提供する。
【００１４】
本発明の第２の態様によれば、皺のある、張りのない、乾燥した、老化した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の処置／予防；皮膚におけるコラーゲン沈着の増加、皮膚におけるデコリン産生の増加、組織修復の強化；炎症状態、赤くなった及び／または敏感な皮膚の無痛化；皮膚テクスチャー、滑らかさ及び／または引き締めの改善；皮膚の色の明るさの向上；油及び／皮脂の分泌のコントロールから選択される少なくとも１つのスキンケア効果を与える化粧方法を提供し、その方法は前記皮膚に対して上記の局所組成物を適用することを含む。
【００１５】
本発明は、皺のある、張りのない、老化した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の処置／予防；皮膚におけるコラーゲン沈着の増加、皮膚におけるデコリン産生の増加、組織修復の強化；炎症状態、赤くなった及び／または敏感な皮膚の無痛化；皮膚テクスチャー、滑らかさ及び／または引き締めの改善；皮膚の色の明るさの向上；油及び／皮脂の分泌のコントロールから選択される少なくとも１つのスキンケア効果を与えるための本発明組成物の使用も包含する。
【００１６】
本発明の更に別の態様によれば、皺のある、張りのない、老化した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の処置／予防；皮膚におけるコラーゲン沈着の増加、皮膚におけるデコリン産生の増加、組織修復の強化；炎症状態、赤くなった及び／または敏感な皮膚の無痛化；皮膚テクスチャー、滑らかさ及び／または引き締めの改善；皮膚の色の明るさの向上；油及び／皮脂の分泌のコントロールから選択される少なくとも１つの化粧上のスキンケア効果を与えるための化粧品局所組成物におけるペトロセリン酸及び／またはその誘導体とフェノール化合物及び／またはその混合物の併用を提供する。
【００１７】
従って、本発明の組成物、方法及び使用は老化防止効果を与え、よって弾性が改善され、皺のある老いた皮膚が現れないか現れにくく、改善された皮膚の色を有する滑らかでしなやかな皮膚が形成される。外観、テクスチャー及び状態、特に皮膚の色の明るさ、透明さ及び一般的な若々しい外観に関する全体的な改善が得られる。本発明の組成物、方法及び使用は敏感及び／または炎症状態の皮膚を和らげて鎮痛するために、皮膚の色を明るくするため、及び油／皮脂の分泌をコントロールするためにも効果的である。このように、本発明は有利には広範囲のスキンケア効果を与える。
【００１８】
本明細書中、用語「処置する」には上記した正常な皮膚状態、例えば皺のある、老化した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の低下、遅延及び／または予防、並びに刺激、皺形成を予防または低下させ、皮膚の柔軟さ、引き締め、滑らかさ、しなやかさ及び弾性を増加させることにより皮膚の品質を向上させると共にその外観及びテクスチャーを改善することが含まれる。本発明の組成物、方法及び使用は、既に皺のある、老化した、光線ダメージを受けた、炎症状態の皮膚を処置するために、または通常の老化／光線老化過程のための上記した望ましくない変化を予防または低下させるために若々しい皮膚を処置するためにも有用であり得る。
【００１９】
（発明の詳細説明）
ペトロセリン酸
ペトロセリン酸（以下、ＰＡと称する）は、式ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１０ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ_２）_４ＣＯＯＨを有するモノ不飽和長鎖（Ｃ１８）脂肪酸である。
【００２０】
本発明は、ペトロセリン酸部分を含む遊離酸の誘導体も含む。好ましい誘導体には、酸のカルボキシル基を置換して誘導されるもの、例えばトリグリセリドエステル、モノグリセリドエステル、ジグリセリドエステル、ホスホエステルのようなエステル；セラミド誘導体のようなアミド；アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩のような塩、及び／またはＣ１８炭素鎖を置換して誘導されるもの、例えばα−ヒドロキシ及び／またはβ−ヒドロキシ誘導体が含まれる。
【００２１】
トリグリセリドエステル誘導体の場合、グリセロール骨格上にＰＡ置換基を有するすべての位置異性体を含む。トリグリセリドは少なくとも１つのＰＡ部分を含んでいなければならない。例えば、グリセリド骨格の３つのエステル可能位置のうちの１及び２位をＰＡでエステル化し、３位を別の脂質でエステル化してもよく、或いはグリセロール骨格の１及び３位をＰＡでエステル化し、２位を別の脂質でエステル化してもよい。
【００２２】
ペトロセリン酸トリグリセリドを多く含む油も本発明で使用するのに適している。前記油は市販されており、パセリ種子油、ニンジン種子油、フェンネル果実油、パースニップ種子油、コリアンダー種子油、チャービル種子油、カラム植物油及びセロリー種子油が含まれる。
【００２３】
本明細書において用語「ペトロセリン酸」または「ＰＡ」を使用するときにはいつも、ＰＡ部分を含むその誘導体も含まれると理解されたい。「ＰＡ部分」はＰＡ誘導体のＰＡ脂肪アシル部分を指す。
【００２４】
本発明で使用されるＰＡは局所組成物中に有効量存在する。通常、活性成分の総量は組成物の０．０００１〜５０重量％の量で存在する。最低コストで最大の効果を得るためのより好ましい量は０．０１〜１０重量％、最も好ましい量は０．１〜５重量％である。
【００２５】
フェノール化合物
フェノール化合物は、基本化学構造によって少なくとも１０種類に分類され得る。前記化合物には単純フェノール（Ｃ_６）、ベンゾキノン（Ｃ_６）、フェノール酸（Ｃ_６−Ｃ_１）、アセトフェノン（Ｃ_６−Ｃ_２）、フェニル酢酸（Ｃ_６−Ｃ_２）、ヒドロキシケイ皮酸（Ｃ_６−Ｃ_３）、フェニルプロペン（Ｃ_６−Ｃ_３）、クマリン、イソクマリン（Ｃ_６−Ｃ_３）、クロモン（Ｃ_６−Ｃ_３）、ナフトキノン（Ｃ_６−Ｃ_４）、キサントン（Ｃ_６−Ｃ_１−Ｃ_６）、スチルベン（Ｃ_６−Ｃ_２−Ｃ_６）、フラボノイド（Ｃ_６−Ｃ_３−Ｃ_６）、リグナン、ネオリグナン（Ｃ_６−Ｃ_３）_２及びリグニン（Ｃ_６−Ｃ_３）_ｎが含まれる。
【００２６】
用語「フラボノイド」は、Ｃ_６−Ｃ_３−Ｃ_６のような２つの芳香族環が３炭素原子単位により結合されている多数の化合物を表す。フラボノイド類にはイソフラボノイドモノマーフラボノール類、ジヒドロフラボノイド類、カテキン類、エピカテキン類（例えば、ラウロン）、ロイコアントシアナジン類、プロアントシアナジン類、アントシアナジン類、フラボン類、フラボノン類、カルコン類、ジヒドロカルコン類、イソフラボン類、ネオフラボン類、アウロン類、フラバン３オール類、フラボン３オール類及びアントロシアニン類が含まれる。用語「イソフラボノイド」にはイソフラボン類、プテロカルパン類、イソフラボノン類、レテノイド類、イソフラバン類及びイソフラバノール類が含まれる。
【００２７】
本発明の組成物に使用するための好ましいフェノール化合物は、フラボノイド類、例えばフラボノン（例えば、ナリンゲニン）、フラボノール（例えば、クエルセチン）、カテキン（例えば、没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ））、イソフラボノイド（例えば、ダイゼイン、ゲニステイン、リセチン）、フェノール酸（例えば、没食子酸）、緑茶ポリフェノールである。
【００２８】
クエルセチン、ナリンゲニン、ダイゼイン、ゲニステイン、ＥＧＣＧ及び緑茶ポリフェノールはＳｉｇｍａから入手し得る。フェノール化合物を含有する植物抽出物も本発明で使用するのに適している。例えば、ルチン、メマツヨイグサ、タマネギ、柑橘類はクエルセチン及びナリンゲニンを含有し、大豆はダイゼイン及びゲニステインを含有し、Ｃａｍｅｌｌｉａ ｓｉｎｅｎｓｉｓやａｓｓａｍｉｃａのような緑茶種はＥＧＣＧ及び緑茶ポリフェノールを含有する。
【００２９】
フェノール化合物またはその混合物は本発明組成物中に約０．０１〜約１０％の量、好ましくは約１０〜約１％の量、最も好ましくは約０．１〜約５％の量で使用される。
【００３０】
外皮用として許容され得るビヒクル
本発明で使用される組成物は、活性成分の希釈剤、分散剤または担体として機能する外皮用及び／または化粧用として許容され得るビヒクルをも含む。前記ビヒクルはスキンケア製品に通常使用されている物質、例えば水、液体もしくは固体皮膚緩和薬、シリコーン油、乳化剤、溶媒、保湿剤、粘稠剤、粉末、噴射剤等を含み得る。
【００３１】
ビヒクルの量は通常組成物の５〜９９．９重量％、好ましくは２５〜８０重量％であり、他の化粧品助剤が存在しないときには組成物の残部である。
【００３２】
任意の皮膚有効物質及び化粧品助剤
前記活性成分の他に、他の特定の皮膚有効成分、例えば日焼け止め剤、皮膚の色を明るくする物質、皮膚日焼け剤をも配合してもよい。前記ビヒクルは更に酸化防止剤、香料、増白剤、保存剤、着色剤及び緩衝剤のような助剤をも含み得る。
【００３３】
製品製造、形態、使用及び包装
本発明の方法で使用される局所組成物を製造するためには、一般的なスキンケア製品の製造方法を使用し得る。通常、活性成分を外皮用／化粧用として許容され得る担体中に通常通り配合する。活性成分をまず組成物に配合する水または他の溶媒もしくは液体の一部に溶解または分散してもよい。好ましい組成物は水中油型、油中水型、または水中油中水型エマルションである。
【００３４】
本発明の組成物はクリーム、ゲル、ローション、カプセル等の慣用のスキンケア製品の形態をとり得る。前記組成物は、場合によりリンス中皮膚への付着を促進させるために活性成分に対するデリバリー系を含む所謂「ウォッシュ−オフ(wash off)」製品、例えばバスまたはシャワーゲルの形態であってもよい。最も好ましくは、皮膚に適用後すぐに意図的にリンスすることなく皮膚に適用される製品である「リーブ−オン(leave-on)」製品である。
【００３５】
前記組成物はジャー、ビン、チューブ、ロールボール等のような適当な容器に通常通り包装され得る。本発明の組成物を、皮膚に対して同時にまたは連続して適用するように片方にはペトロセリン酸、他方にはフェノール化合物を含有する２つの別個の組成物のキットとして包装することも考えられる。
【００３６】
本発明の組成物はカプセル、錠剤等のような経口するのに適した形態で処方してもよい。
【００３７】
本発明の方法は、処置を要する皮膚に１日に１回以上実施してもよい。皮膚外観の改善は、皮膚の状態、本発明の方法で使用する活性成分の濃度、使用する組成物の量及び使用頻度に応じて通常３〜６ヶ月後に現れてくるようになる。通常、少量（例えば、０．１〜５ｍｌ）の組成物を適当な容器またはアプリケータから皮膚に適用し、手、指または適当な器具を用いて皮膚に広げたり及び／または擦りこんだりする。組成物を「リーブ−オン」または「リンス−オフ」製品として処方するかに応じてその後リンスしてもよい。
【００３８】
本発明をより簡単に理解し得るように、下記実施例を例として提示する。
【００３９】
（実施例）
実施例１
ヒト皮膚線維芽細胞におけるＩ型プロコラーゲン及びデコリン合成の測定方法
ヒト線維芽細胞ならし培地の作成：
第２経代（Ｐ２）の一次ヒト包皮線維芽細胞を１０，０００細胞／ｃｍ^２の割合で１２ウェルプレートに接種し、１０％ウシ胎仔血清を補充したダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）において二酸化炭素５％及び酸素４％の雰囲気下で２４時間維持した。その後、細胞を無血清ＤＭＥＭで洗浄し、次いで新しい無血清ＤＭＥＭにおいて更に６０時間インキュベートした。その後、線維芽細胞単層を再び無血清ＤＭＥＭで洗浄した。テスト試薬及びビヒクル対照を０．４ｍｌ／ウェルの最終容量で３回細胞に添加し、更に新しい無血清ＤＭＥＭにおいて２４時間インキュベートした。この線維芽細胞ならし培地を直ちに分析するか、または液体窒素中で素早く冷凍し、更なる分析のために−７０℃で保存した。次いで、細胞を計数した後、ドットブロット分析から得たデータを細胞数に標準化した。
【００４０】
実施例２
皮膚線維芽細胞ならし培地におけるＩ型プロヒラーゲン及びデコリンタンパク質についてのドットブロットアッセイ
（対照としての）ビヒクルまたはテスト試薬で処理した皮膚線維芽細胞由来のならし培地のサンプルに２０ｍＭ ジチオトレイトール（２００ｍＭ ストック溶液の１：１０希釈物）及び０．１％ ドデシル硫酸ナトリウム（１０％ ストック溶液の１：１００希釈物）を補充し、十分に混合した後、７５℃で２分間インキュベートした。上記したように１７５ｃｍ^２容量のフラスコで１０，０００細胞／ｃｍ^２の割合で接種し、無血清ＤＭＥＭにおいて維持した線維芽細胞由来のニートな線維芽細胞ならし培地を系列希釈することにより、アッセイの標準を作成した。
【００４１】
次いで、アッセイサンプルを、Ｂｉｏ−Ｒａｄの９６ウェルＢｉｏ−Ｄｏｔ装置を製造業者のガイドラインに記載されているように用いてＩｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐ転移膜の予湿潤シートに３回適用した。１ウェルあたり約２００μｌの培地を適用した。培地を重力下で膜を介して濾過し（３０分間）、その後膜をＰＢＳ（２００μｌ）で２回洗浄した。ＰＢＳ洗浄液を重力下で膜を介して濾過した（２×１５分間）。次いで、Ｂｉｏ−Ｄｏｔ装置を真空マニホールドに取付け、第３及び最終のＰＢＳ洗浄を吸引しながら実施した。装置を分解し、膜を外し、所要のように素早くカットした後、ブロック緩衝液に４℃で一晩放置した。デコリン分析のために作成した膜はＰＢＳ中３％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ／０．１％（ｖ／ｖ）ツイーン２０でブロックし、Ｉ型プロコラーゲンのために作成した膜はＰＢＳ中５％（ｗ／ｖ）脱脂粉乳／０．０５％ ツイーン２０でブロックした。翌日、膜をヒトＩ型プロコラーゲンに対する一次抗体（ＭＡＢ１９１２；ラットモノクローナル；カリフォルニア州テメクラに所在のＣｈｅｍｉｃｏｎ Ｉｎｔ．Ｉｎｃ．）またはヒトデコリンに対する一次抗体（家兎ポリクローナル；Ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）の１：１０，０００希釈物を用いて室温で２時間プローブした。
【００４２】
次いで、膜をＴＢＳ／０．０５％ ツイーン２０（３×５分間）で洗浄し、所要により^１２５Ｉ−コンジュゲートした抗−家兎または抗−家兎Ｆ（ａｂ’）２断片（Ａｍｅｒｓｈａｍ）の１：１０，０００希釈物と室温で１時間インキュベートした。その後、Ｉｍｍｏｂｉｌｏｎストリップを再びＴＢＳ／ツイーン２０（３×５分間）で洗浄し、室温で風乾した。乾燥させた膜をセロファンで包み、Ｍｏｌｅｅｃｕｌａｒ Ｄｙｎａｍｉｃ貯蔵リンスクリーンに１６〜１８時間かけた。この後、前記スクリーンをＩｍａｇｅＱｕａｎｔ（商標）ソフトウェアを用いて燐イメージャー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｙｎａｍｉｃｓ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｍａｇｅｒ ＳＦ）によりスキャンした。ドット強度をＩｍａｇｅＱｕａｎｔ（商標）の定量化ツールを用いてコンピュータ補助イメージ分析により評価し、細胞数に標準化し、デコリン及びＩ型プロコラーゲン合成に対する各種テスト試薬の影響をビヒクル処置対照の値を１００として表した。
【００４３】
実施例３
テスト
下表１は、ヒト皮膚線維芽細胞におけるＩ型プロコラーゲン及び／またはデコリン合成に対するペトロセリン酸とフェノール化合物、すなわち没食子酸エピガロカテキン（ＥＧＣＧ）、没食子酸、ダイゼイン、ゲニステイン、クエルセチンの相乗効果及び活性成分の適用量を示す。結果を正規化するために、テスト物質の効果をビヒクル処置対照の値を１００として表した。トライアルで使用した試薬の濃度は細胞の生存率に影響を与えなかった。実験間で認められた０．０１μＭ ペトロセリン酸についての％値の差は各種細胞系の使用により生ずるものを含めた実験間の正規変動を反映している。
【００４４】
【表１】

【００４５】
表１の結果は、ペトロセリン酸とフェノール化合物の組合せはヒト皮膚線維芽細胞におけるＩ型プロコラーゲン及び／またはデコリンの合成を相乗的に上向きに調節することを示す。
【００４６】
皮膚中のデコリンレベルは皮膚の改善された状態及び外観に関連している。皮膚中のデコリンレベルの増加は皮膚にコラーゲンを適切なコントロール量沈着させるために重要であり、そうした沈着は皺を目立たないようにするとか光線ダメージを受けた皮膚を修復するといった多くのスキンケア効果に関連する。
【００４７】
実施例４
本実施例は、ペトロセリン酸とフェノール化合物の特定組合せの皮膚線維芽細胞に対する炎症応答の低下に対する相乗効果を示す。
【００４８】
線維芽細胞ＰＧＥ _２ 及びＩＣＡＭアッセイ
ヒト皮膚線維芽細胞による細胞内接着分子（ＩＣＡＭ）及びＰＥＧ_２産生は炎症刺激物質ＰＡＭ（ホルボールミリステートアセテート）により誘発され得る。ＰＭＡは、細胞において酸化ストレス及び炎症応答を誘発する外部ストレッサーである。このモデルはインビボで炎症をモデルするために使用される。
【００４９】
第２経代（Ｐ２）の一次ヒト包皮線維芽細胞を１０，０００細胞／ウェルの割合で９６ウェルプレートに接種し、１０％ウシ胎仔血清を補充したダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）において二酸化炭素５％の雰囲気下で２４時間維持した。下表２に示すテスト物質をジメチルスルホキシド及びエタノール最終濃度＜１％で新鮮な細胞培地（１０％ウシ胎仔血清を補充したＤＭＥＭ）に３回添加し、更に２４時間インキュベートした。培地にホルボールミリステートアセテート（ＰＭＡ）（Ｓｉｇｍａ）を１０ｎＭ添加し、細胞を更に２４時間インキュベートした。ビヒクルのみを含有する対照にはテスト化合物もＰＭＡも含有させなかった。次いで、線維芽細胞／培地を直ぐ下に記載するように分析するか、または液体窒素中で素早く冷凍し、更なる分析のために−７０℃で保存した。次いで、細胞を計数し、ドットブロット分析から得たデータを細胞数に標準化した。
【００５０】
プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ_２）アッセイ：
培養プレートをやさしく振盪した後、培養培地５０μｌ容量をＰＧＥ_２アッセイのために取った。培地中のＰＧＥ_２レベルをＢｉｏｔｒａｋ ＰＧＥ_２イムノアッセイキット（英国のＡｍｅｒｓｈａｍ）を用いて測定した。アッセイは、固定ＰＧＥ_２特定抗体の一定量についてサンプル中の非標識ＰＧＥ_２と一定量のホースラディッシュペルオキシダーゼ標識ＰＧＥ_２の競合に基づく。非標識サンプルＰＧＥ_２の濃度を同時に作成した標準曲線に従って求めた。
【００５１】
ＩＣＡＭ−１アッセイ：
培地を捨て、細胞をダルベッコＰＢＳで洗浄した。洗浄した細胞に対して０．１％ トリトンＸ−１００（Ｓｉｇｍａ）１５０μｌを３分間添加して、ＩＣＡＭを細胞膜から抽出した。抽出物をＥｐｐｅｎｄｏｆｆ遠心管に移し、１，０００×ｇで２分間遠心して、細胞破片を除去した。上清１００μｌ容量をＩＣＡＭアッセイに使用した。可溶性ＩＣＡＭ−１を市販されている免疫酵素測定アッセイキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）で評価した。サンプル中のＩＣＡＭ−１濃度を平行して作成した標準曲線に基づいて求めた。
【００５２】
ＰＧＥ_２及びＩＣＡＭアッセイから得た結果を下表２に要約する。
【００５３】
【表２】

【００５４】
上記結果は、細胞をＰＭＡ（ホルボールミリスチルアセテート）のような炎症刺激物質を用いて攻撃するとプロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）産生により測定した炎症応答が高まることを示す。ペトロセリン酸とフェノール化合物の特定組合せは、ＰＥＧ_２産生により測定した炎症応答を相乗的に低下させる。よって、上記結果から、本発明の範囲内の活性成分の特定組合せは驚くほど相乗的な消炎活性を示すことが立証される。
【００５５】
上記結果から、細胞をＰＭＡで攻撃するとＩＣＡＭ産生が増加することも立証される。細胞をペトロセリン酸とフェノール化合物の組合せで処置すると、炎症の別のマーカーである細胞内接着分子（ＩＣＡＭ）の産生が相乗的に低下する。これらの結果から、本発明の範囲内の活性成分の特定組合せが良好で驚くほど相乗的な消炎活性を示すことが更に立証される。
【００５６】
実施例５
下記組成物は、本発明の方法及び使用のために適した水中油型クリームである。記載のパーセンテージは組成物の重量基準である。
【００５７】
【表３】

【００５８】
実施例６
下記組成物は、本発明のエマルションクリームである。
【００５９】
【表４】

【００６０】
実施例５及び６の上記局所組成物はいずれも、老化または光線老化により悪化している正常な皮膚に対して適用したとき、または前記した悪化を予防または遅らすのを助けるために若々しい皮膚に対して適用したときに皺のある、老化した、光線ダメージを受けた及び／または炎症状態の皮膚の外観を改善するための効果的な化粧上の処置を与える。前記組成物は、炎症状態の皮膚の無痛化、乾燥皮膚のコンディショニング、皮膚の色の明るさの向上、油及び皮脂の分泌の低下のためにも有効である。前記組成物は従来と同様に処理され得る。

Claims (5)

1. （ａ）ペトロセリン酸及び／またはその誘導体、
   （ｂ）０．０１〜１０重量％のフェノール化合物及び／またはその混合物、及び（ｃ）外皮用及び／または化粧用として許容され得るビヒクル
   を含むことを特徴とし、
   該ペトロセリン酸の該誘導体が、ペトロセリン酸のエステル、アミドまたは塩であり；且つ
   該フェノール化合物が没食子酸エピガロカテキン、ナリンゲニン、クエルセチン、カテキン、ダイゼイン、ゲニステイン、リセチン、没食子酸または緑茶フェノールである；
   ことを特徴とする局所組成物。
2. 組成物がリーブ−オン組成物であることを特徴とする請求項１に記載の局所組成物。
3. 皺のある、張りのない、乾燥した、老化した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の処置／予防；皮膚のコラーゲンレベルの増加／維持、皮膚のデコリンレベルの増加／維持、組織修復の強化；炎症状態、赤くなった及び／または敏感な皮膚の無痛化；皮膚テクスチャー、滑らかさ及び／または引き締めの改善；皮膚の色の明るさの向上；油及び／皮脂の分泌のコントロールから選択される少なくとも１つの化粧上のスキンケア効果を与える化粧方法であって、前記皮膚に対して請求項１又は２に記載の局所組成物を適用することを特徴とする前記方法。
4. 皺のある、張りのない、老化した、乾燥した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の処置／予防；皮膚のコラーゲンレベルの増加／維持、皮膚のデコリンレベルの増加／維持、組織修復の強化；炎症状態、赤くなった及び／または敏感な皮膚の無痛化；皮膚テクスチャー、滑らかさ及び／または引き締めの改善；皮膚の色の明るさの向上；油及び／皮脂の分泌のコントロールから選択される少なくとも１つの化粧上のスキンケア効果を与えるための請求項１又は２に記載の化粧品組成物の使用。
5. 皺のある、張りのない、老化した及び／または光線ダメージを受けた皮膚の処置／予防；皮膚におけるコラーゲン沈着の増加、皮膚におけるデコリン産生の増加、組織修復の強化；炎症状態、赤くなった及び／または敏感な皮膚の無痛化；皮膚テクスチャー、滑らかさ及び／または引き締めの改善；皮膚の色の明るさの向上；油及び／皮脂の分泌のコントロールから選択される少なくとも１つの化粧上のスキンケア効果を与えるための化粧品局所組成物におけるペトロセリン酸及び／またはその誘導体とフェノール化合物及び／またはその混合物の併用であって、該ペトロセリン酸の該誘導体が、ペトロセリン酸のエステル、アミドまたは塩であり、且つ、該フェノール化合物が没食子酸エピガロカテキン、ナリンゲニン、クエルセチン、カテキン、ダイゼイン、ゲニステイン、リセチン、没食子酸または緑茶フェノールである併用。