KR920006504A - 프리프로인슐린을 인슐린으로 전환시키기위한 효소적 방법 - Google Patents

프리프로인슐린을 인슐린으로 전환시키기위한 효소적 방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

프리프로인슐린을 인슐린으로 전환시키기위한 효소적 방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음

Claims (9)

  1. 프리프로인슐린을 클로스트리파인 존재하에 가수분해 하고, 경우에 따라 카복시펩티다제 B를 사용하여 상응하는 인슈린으로 전환시킴을 특징으로 하여, 하기 일반식(Ⅰ)의 프리프로인슐린의 아미노산 쇄를 가수분해하는 방법.
    상기식에서, R1은 0또는 1개의 아미노산이며, R2는 수소, 화학적 또는 효소학적으로 절단될 수 있는 아미노산이거나, 2 내지 30개의 아미노산 잔기를 포함하는 펩티드이며, R3는 하이드록실 그룹, 이미노산 또는 2내지 10개의 아미노산을 포함하는 펩티드이고, X는 L-아르기닌 또는 2내지 45개의 아미노산을 포함하며 C-말단 및 N-말단 L-아르기닌 잔기를 갖는 펩티드 이며, Y는 유전학적으로 암호화 가능한 아미노산이고, Z는 유전학적으로 암호화 가능한 아미노산이며, A1 내지 A20또는 B2 내지 B29는 천연적이거나 하나 이상의 아미노산 잔기로 치환되어 변형된 사람 또는 동물 인슐린의 아미노산 서열이다.
  2. 제1항에 있어서, R1이 Phe이고, R2가 수소, 천연 아미노산 또는 2내지 30개의 천연 아미노산을 포함하며 말단에 C-말단 L-아르기닌을 갖는 펩티드 이며, R2가 하이드록실 그룹, 천연 아미노산 또는 2내지 10개의 천연아미노산을 포함하는 펩티드이고, X는 L-아르기닌 또는 사람이나 동물 프로인슐린의 C-쇄이며, Y는 Thr, Ala 또는 Ser로 이루어진 그룹중에서 선택된 아미노산이고, Z는 Asn Gln, Asp, Glu, Giy, Ser, Thr, Als 또는 Met로 이루어진 그룹중에서 선택된 아미노산이며, A1 내지 A20 또는 B2 내지 B29는 사람 또는 동물 인슐린의 아미노산 서열인 일반식(Ⅰ)의 프리프로인슐린이 사용되는 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1이 phe이고, R2는 수소이거나 2내지 30개의 천연 아미노산을 포함하며 C-말단 L-아르기닌을 갖는 펩티드이며, R3는 하이드록실 그룹, 천연 아미노산 또는 2내지 10개의 천연 아미노산을 포함하는 펩티드이고, X는 L-아르기닌이거나 사람, 돼지 또는 소 프로인슐린의 C쇄이며, Y는 Thr이고, Z는 Asn이며, A1내지 A20 또는 B2 내지 B29는 사람, 돼지 또는 소 인슐린의 아미노산 서열인 일반식(Ⅰ)의 프리프로인슐린이 사용되는 방법.
  4. 제1항 내지 제3항중 어느 한 항에 있어서, pH 4내지 12, 바람직하게는 6내지 9에서 수행하는 방법.
  5. 제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 일반식(Ⅰ)의 프리프로인슐린 농도가 0.01mg/ml 내지 100mg/ml, 바람직하게는 0.1mg/ml 내지 10mg/ml인 방법.
  6. 제1항 내지 제5항중 어느 한항에 있어서, 프리프로 인슐린/클로스트리파인 비(mg:유니트)가 1:0.01 내지 1:1,000, 바람직하게는 1:0.1 내지 1:50인 방법.
  7. 제1항 내지 제6항중 어느 한항에 있어서, 반응온도가 0℃내지 +80℃, 바람직하게는 +20℃ 내지 +40℃인 방법.
  8. 제1항 내지 제7항중 어느 한항에 있어서, 카복시펩티다제 B가 동시에 존재하거나 클로스트리파인을 사용하여 절단한 후 사용되는 방법.
  9. 제1항 내지 제8항중 어느 한항에 있어서, 클로스트리파인 및/또는 카복시펩티다제 B가 부동형으로 존재하는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개되는 것임.
KR1019910015314A 1990-09-05 1991-09-03 프리프로인슐린을 인슐린으로 전환시키기 위한 효소적 방법 KR100188800B1 (ko)

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