KR910700262A - 사람 인슐린 유사체 - Google Patents

사람 인슐린 유사체

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KR910700262A
KR910700262A KR1019900701869A KR900701869A KR910700262A KR 910700262 A KR910700262 A KR 910700262A KR 1019900701869 A KR1019900701869 A KR 1019900701869A KR 900701869 A KR900701869 A KR 900701869A KR 910700262 A KR910700262 A KR 910700262A
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요르겐 파일가아르트 브랑게 옌스
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안네 제케르
노보 노르디스크 아크티에 셀스카브
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Abstract

내용 없음.

Description

사람 인슐린 유사체
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 발현 플라스미드 pYGABA 14276을 나타내고,
제2도는 효모 벡터 pAB24를 나타내며,
제3도는 플라스미드 pKFN-864로부터의 0.4kb EcoRI-Xbal 단편의 DNA 서열을 나타낸다.

Claims (48)

  1. 위치 B28, 즉 〔GlyB20〕으로부터 계산하여 B- 사슬의 제8위치에 양성으로 하전된 아미노산 잔기, Lys 또는 Arg를 가지며, 위치 B29에 Pro이 없을 때 임의로 B- 사슬의 C- 말단에서 〔PheB24〕로부터 C- 말단아미노산 잔기로 또한 변형되고, 임의로 A21 및/또는 B3가 Asn과는 상이한 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유사체.
  2. 다음 식을 가지는 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유도체.
    상기 식에서 X1, X2, X3, X5, Y1및 Y2는 자연적으로 발생하는 모든 아미노산 잔기이며, X4는 Lys 또는 Arg이고, X6은 C- 말단히드록시기 또는 -OH를 운반하는 모든 자연 발생 아미노산 잔기이며, 또는 X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성한다.
  3. 제2항에 있어서, X5가 Pro를 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유사체.
  4. 제2항 또는 제3항에 있어서, Y1및 Y2가 Asn을 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유사체.
  5. 제2항에 있어서, X1은 Phe, Ala, His, Thr, Ser, Asn 또는 Tyr로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X2는 Tyr, Thr, Glu, Asp, Ala, His, Ser 또는 Phe로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X3은 Pro, Glu, Asp, Ser, Thr 또는 His로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5는 Lys, Thr, Ser, Ala, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X6은 Thr-OH, Ser-OH, Ala-OH, Asp-OH, Glu-OH 또는 -OH로 이루어지는 군으로부터 선택되며, 또는 X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성하고, Y1은 Asn, Asp, Gly, Ser, Glu 또는 Ala로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Glu 또는 Asp로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  6. 제2항에 있어서, X1은 Phe, Ala, His, Thr, Ser, Asn 또는 Tyr로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X2는 Tyr, Thr, Glu, Asp, Ala, His, Ser 또는 Phe로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X3은 Pro, Glu, Asp, Ser, Thr 또는 His로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5는 Lys, Thr, Ser, Ala, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X6은 -OH이며, Y1은 Asn, Gly, Ser, Glu 또는 Ala로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Glu 또는 Asp로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  7. 제2항에 있어서, X1은 Phe, Ala, His, Thr, Ser, Asn 또는 Tyr로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X2는 Tyr, Thr, Glu, Asp, Ala, His, Ser 또는 Phe로 이루어지눈 군으로부터 선택되고, X3은 Pro, Glu, Asp, Ser, Thr 또는 His로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성하고, Y1은 Asn, Asp, Gly, Glu, Ser 또는 Ala로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Glu 또는 Asp로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  8. 제2항에 있어서, X1은 Phe이고, X2는 Tyr이며, X3은 Pro이고, X5은 Lys이며, X6은 Thr-OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  9. 제2항에 있어서, X1은 Tyr이고, X2는 Thr이며, X3은 Pro이고, X6은 Thr이며, X6은 -OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  10. 제2항에 있어서, X1은 Phe이고, X2는 Thr이며, X3은 Pro이고, X6은 Thr이며, X6은 -OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  11. 제2항에 있어서, X1은 Phe이고, X2는 Tyr이며, X3은 Pro이고, X6은 -OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 사람 인슐린 유사체.
  12. 제2항에 있어서, 상기 X1아미노산은 전하를 띄고 있지 않으며, sp2-혼성궤도를 이루고 있는 감마-위치에 탄소원자를 가지고 있고, X6은 -OH인 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유사체.
  13. 제12항에 있어서, Y1과 Y2는 Asn을 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5는 Thr를 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유사체.
  14. 제12항에 있어서, X5와 X6이 함께 -OH를 형성하는 것을 특징으로 하는 사람 인슐린 유사체.
  15. 다음 식을 가지는 사람 인슐린 유사체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과 약학적으로 허용 가능한 담체로 이루어지는 약학 조성물.
    상기 식에서 X1, X2, X3, X5, Y1및 Y2는 자연적으로 발생하는 모든 아미노산 잔기이며, X4는 Lys 또는 Arg이고, X6은 C- 말단히드록시기 또는 -OH를 운반하는 모든 자연 발생 아미노산 잔기이며, 또는 X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성한다.
  16. 제15항에 있어서, 상기 인슐린 유사체가 pH 7.3에서 낮은 용해도를 나타내는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  17. 제16항에 있어서, 상기 인슐린 유사체가 본질적으로 단량체인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  18. 제15항에 있어서, 상기 약학 조성물이 수용액으로서 제형되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  19. 제15항에 있어서, 상기 약학 조성물이 수성 현탁액으로서 제형되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  20. 제15항에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 담체가 수성 등장 용액인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  21. 제18항, 19항 또는 20항에 있어서, 상기 수용액, 수성 현탁액 또는 수성 등장용액이 또한 아연 이온 및/또는 완충제, 예컨대 아세트산염 또는 시트르산염 및/또는 보존제, 예컨대 m-크레졸, 메틸파라벤 또는 페놀을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  22. 제15항에 있어서, 상기 약학 조성물이 하나 이상의 인슐린 유사체를 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  23. 제15항에 있어서, 상기 약학 조성물이 점막 또는 경과 투여용으로 제형되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  24. 제15항에 있어서, 상기 약학 조성물이 비경구 투여용으로 제형되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  25. 제15항에 있어서, X5가 Pro를 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  26. 제15항 또는 25항에 있어서, Y1및/또는 Y2가 Asn을 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  27. 제15항에 있어서, X1은 Phe, Ala, His, Thr, Ser, Asn 또는 Tyr로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X2는 Tyr, Thr, Glu, Asp, Ala, His, Ser 또는 Phe로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X3은 Pro, Glu, Asp, Ser, Thr 또는 His로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5는 Lys, Thr, Ser, Ala, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X5는 Thr-OH, Ser-OH, Ala-OH, Asp-OH, Glu-OH 또는 -OH로 이루어지는 군으로부터 선택되며, 또는 X5와 X5은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성하고, Y1은 Asn, Asp, Gly, Ser. Glu 또는 Ala로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Glu 또는 Asp로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  28. 제15항에 있어서, X1은 Phe, Ala, His, Thr, Ser, Asn 또는 Tyr로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X2는 Tyr, Thr, Glu, Asp, Ala, His, Ser 또는 Phe로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X3은 Pro, Glu, Asp, Ser, Thr 또는 His로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5는 Lys, Thr, Ser, Ala, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X5는 -OH이며, Y1은 Asn, Asp, Gly, Ser. Glu 또는 Ala로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Glu 또는 Asp로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  29. 제15항에 있어서, X1은 Phe, Ala, His, Thr, Ser, Asn 또는 Tyr로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X2는 Tyr, Thr, Glu, Asp, Ala, His, Ser 또는 Phe로 이루어지는 군으로부터 선택되고, X3은 Pro, Glu, Asp, Ser, Thr 또는 His로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5와 X5는 함께 히드록시기를 형성하고, Y1은 Asn, Asp, Gly, Glu, Ser 또는 Ala로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Gln, Glu 또는 Asp로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  30. 제15항에 있어서, X1은 Phe이고, X2는 Tyr이며, X3은 Thr이고, X5는 Lsy이며, X6은 Thr-OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  31. 제15항에 있어서, X1은 Tyr이고, X2는 Thr이며, X3은 Pro이고, X5는 Thr이며, X6은 -OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  32. 제15항에 있어서, X1은 Phe이고, X2는 Tyr이며, X3은 Pro이고, X5는 Thr이며, X6은 -OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  33. 제15항에 있어서, X1은 Phe이고, X2는 Tyr이며, X3은 Pro이고, X5는 Thr이며, X6은 -OH이고, Y1은 Asn, Asp, Ser 또는 Gly로 이루어지는 군으로부터 선택되며, Y2는 Asn, Gln, Asp 또는 Glu로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  34. 제15항에 있어서, 상기 X1아미노산은 전하를 띄고 있지 않으며, sp2-혼성궤도를 이루고 있는 감마-위치에 탄소원자를 가지고 있고, X6은 -OH인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  35. 제34항에 있어서, Y1과 Y2을 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되며, X5는 Thr를 제외한 모든 자연 발생 아미노산 잔기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  36. 제34항에 있어서, X5와 X6이 함께 -OH를 형성하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  37. 다음식 :
    (상기 식에서 X1, X2, X3, X5, Y1및 Y2는 모든 자연발생 아미노산 잔기이며, X4는 Lys 또는 Arg이고, X6은 C- 말단히드록시기 또는 -OH를 운반하는 모든 자연 발생 아미노산 잔기이며, 또는 X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성한다.)을 가지는 사람 인슐린 유사체 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염과 약헉적으로 허용가능한 담체로 이루어지는 약학 조성물을 당뇨병의 영향하에 있는 개체에 제공하는 것으로 이루어지는 당뇨병의 치료방법.
  38. 제37항에 있어서, 상기 인슐린 유사체가 pH 7.3에서 낮은 용해도를 나타내는 것을 특징으로 하는 방법.
  39. 제38항에 있어서, 상기 인슐린 유사체가 본질적으로 단량체인 것을 특징으로 하는 방법.
  40. 제37항에 있어서, 상기 약학 조성물이 수용액으로서 제형되는 것을 특징으로 하는 약학 방법.
  41. 제37항에 있어서, 상기 약학 조성물이 수성 현탁액으로서 제형되는 것을 특징으로 하는 방법.
  42. 제37항에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 담체가 수성 등장 용액인 것을 특징으로 하는 방법.
  43. 제40항, 41항 또는 42항에 있어서, 상기 수용액, 수성 현탁액 또는 수성 등장용액이 또한 아연 이온 및/또는 완충제, 예컨대 아세트산염 또는 시트르산염 및/또는 보존재, 예컨대 m-크레졸, 메틸파라벤 또는 페놀을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
  44. 제37항에 있어서, 상기 약학 조성물이 하나 이상의 인슐린 유사체를 포함하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  45. 제37항에 있어서, 상기 약학 조성물이 점막용 또는 경피 투여용으로 제형되는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  46. 제37항에 있어서, 상기 약학 조성물이 비경구 투여용으로 제형되는 것을 특징으로 하는 방법.
  47. 다음식을 가지는 사람 인슐린 유사체의 제조방법으로서,
    (상기 식에서 X1, X2, X3, X5, Y1및 Y2는 모든 자연발생 아미노산 잔기이며, X4는 Lys 또는 Arg이고, X6은 C- 말단히드록시기 또는 -OH를 운반하는 모든 자연 발생 아미노산 잔기이며, 또는 X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성한다.) 당해 인슐린 유사체의 전구체를 코드화하는 DNA 서열을, 효모에 전달되었을 때 〔Lys B28〕,〔Arg B28〕, 〔Lys B29〕 또는 〔Arg B29〕가 펩티드 결합 또는 다음식 III의 펩티드; -R(n)-R(1)- (상기 식에서, R은 n개의 아미노산 잔기를 가지는 펩티드 사슬이고, n은 0 내지 33의 정수이며, R(1)은 적당한 영양 배지에서 형질전환된 효모 균주가 배양될 때 Lys 또는 Arg이다.)에 의하여 GlyAl에 연결되어 있는 인슐린 유사체의 전구체를 발현 및 분비할 수 있는 적당한 효모 발현 비히클에 삽입시키는 단계, 전구체를 배양 브로스로부터 회수한 후 다음식 IV Q-QR″ (상기 식에서, Q는 단일한 아미노산 잔기이고 R″은 메틸 또는 tert-부틸 같은 카르복시 보호기이다.)의 아미노 화합물과, 촉매로서 트립신 또는 트립신-유사효소를 사용하여 물과 유기 용매와의 혼합물중에서 반응시키는 단계, 그리고 카르복시 보호기를 제거하고 인슐린 유사체를 반응혼합물로부터 분리시키는 단계로 이루어지거나, 또는 C-말단 아미노산이 Lys 또는 Arg과 상이하고, Lys과 Arg으로 이루어지는 군으로부터 선택된 한쌍의 염기성 아미노산으로 된 가교를 C- 말단과 GlyA사이에 가지고 있는 인슐린 유사체 전구체를 분리한 후 트립신 및 카르복시 펩티다제 B를 사용하여 효소적 처리에 의하여 인슐린 유사체로 전환시키는 것으로 이루어지는 방법.
  48. 다음식을 가지는 사람 인슐린 유사체의 제조방법으로서,
    (상기 식에서 X1, X2, X3, X5, Y1및 Y2는 모든 자연발생 아미노산 잔기이며, X4는 Lys 또는 Arg이고, X6은 C- 말단히드록시기 또는 -OH를 운반하는 모든 자연 발생 아미노산 잔기이며, 또는 X5와 X6은 함께 C- 말단 히드록시기를 형성한다.) des(B23-B30)-사람 인슐린이 인슐린을 트립신으로 처리함에 의하여 (B23-B30)-아미노산이 절단됨으로써 제조되는 단계, 5 내지 7개의 아미노산으로 된 소망하는 펩티드를 합성하는 단계, 그 펩티드를 des(B23-B30)- 사람 인슐린에 커플시키는 단계, 그리고 그 결과 형성된 인슐린 유사체를 반응 혼합물로부터 분리하는 단계를 이루어지는 방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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