KR870009020A - 하이브리드 인터페론 및 그의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제 1도는 parpATER 33의 구성 개요도.
제 2도는 pRHW 14의 구성 개요도.
제 4도는 pRH 72의 구성 개요도.
제 5도는 pRH 78r 및 pRH 78f의 구성 개요도.
Claims (63)
- X―인터페론 일부 및 오메가―인터페론 일부로 이루어진 하이브리드 인터페론, 그의 N―말단 Met 또는 N―포르밀―Met 유도체 및 하이브리드 인터페론의 펩타이드 서열이 글라이코실화 부위를 함유할 경우에는 그의 N-글라이코실화된 유도체.
- 제 1항에 있어서, 일반식(1)의 Bgl II 하이브리드 인터페론, 그의 N―말단 Met 또는 N―포르밀 ―Met 유도체 및 하이브리드 인터페론의 펩타이드 서열이 글라이코실화 부위를 함유할 경우에는 그의 N―글라이코실화된 유도체.상기 식에서,Bgl II는 α1―, α2― 및 오메가―인터페론의 공통적인 Bgl II 제한부위를 가리키고,R1은 Bgl II 절단부위 앞에 위치하는 α1― 또는 α2― 인터페론의 DNA서열에 의해 암호화된 α1― 또는 α2―인터페론의 펩타이드 서열이며, R2가 Bgl II 절단부위 다음에 위치하는, 오메가 인터페론의 DNA 서열에 의해 암호화된 오메가 인터페론의 펩타이드 서열이거나, 또는R1은 Bgl II 절단부위 앞에 위치하는, 오메가 인터페론의 DNA 서열에 의해 암호화된 오메가 인터페론의 펩타이드 서열이고, R2가 Bgl II 절단부위 다음에 위치하는 α1― 또는 α2― 인터페론의 DNA 서열에 의해 암호화된 α1― 또는 α2― 인터페론의 펩타이드 서열이다.
- 제 2항에 있어서, IFN―α2(Arg)를 α―인터페론으로 사용하고 오메가 1(Glu) 또는 오메가 1(lGy) 인터페론을 오메가 인터페론으로 사용함을 특징으로 하는 Bgl II 하이브리드 인터페론, 그의 N―말단 Met 또는 M―포르밀―Met 유도체 및 그의 M―글라이코실화된 유도체.
- 제 3항에 있어서, 하기 서열의 IFN―α2/오메가 1(Bgl II) 하이브리드 인터페론, 그의 N―말단 Met 또는 N―포르밀―Met 유도체 및 그의 N―글라이코실화된 유도체.상기 서열에서,X는 Gly 또는 Glu를 나타낸다.
- 제 3항에 있어서, 하기 서열의 IFN―오메가 1/α2(Bgl II) 및 그의 N―말단 Met 또는 N―포르밀―Met 유도체.
- 제 1, 2, 3 또는 5항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 함유하는 약제학적 조성물.
- 제 3 또는 5항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 함유하는 약제학적 조성물.
- 바이러스성 질환 치료용 약제학적 조성물을 제조하기 위한 제 1, 2, 3 또는 5항에서 청구한 하이브리드 인터페론의 용도.
- 제 1, 2, 3 또는 4항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 통상적인 담체와 결합시킴을 특징으로 하여 바이러스성 질환치료에 적합한 약제학적 조성물을 제조하는 방법.
- 시험동물을 면역화하고 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론, α― 및 오메가―인터페론에 대한 모노클로날 항체를 제조하기 위한 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론의 용도.
- 제 1항 내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 신규의 하이브리드 인터페론을 암호화하는 서열을 함유하는 제조합 DNA 분자.
- 하기 서열의 제 4항에 청구한 IFN-α2/오메가1(Bgl II) 하이브리드 인터페론의 암호화 DNA분자. 및 그의 축퇴성(degenerate)변형체.상기 서열에서,Y는 뉴클리오타이드 G 또는 A를 나타낸다.
- 하기 서열의 제 3 또는 5항에 청구한 IFN-α2/오메가1(Bgl II) 하이브리드 인터페론의 암호화 DNA분자. 및 그의 축퇴성변형체.
- 제 11, 12 또는 13항에서 청구한 제조합 DNA 분자를 함유함을 특징으로 하는 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 암호화하는 벡터.
- 제 14항에 있어서, 제 12 또는 13항에서 청구한 제조합 DNA 분자를 함유함을 특징으로 하는 벡터.
- 제 14 및 15항 중 어느 한 항에 있어서, 발현에 필요한 리플리콘(replicon)과 제어 서열, 및 임의로 par―유전자좌를 추가로 함유함을 특징으로 하는 발현플라스미드.
- 제 16항에 있어서, 발현에 필요한 리플리콘과 제어 서열이 플라스미드 PER 103으로부터 유래되고 하기 서열 또는 trp프로모터 활성을 보유하는 그의 변형 서열을 가짐을 특징으로 하는 발현플라스미드.
- 제 16항에 있어서, par―유전자좌가 플라스미드 pPM31로부터 유래하고 하기 서열 또는 그의 작용성 변형체를 특징으로 발현 플라스미드.상기 서열에서,Z는 뉴클리오타이드 G 또는 C를 나타내고,W는 뉴클리오타이드 G를 나타내거나 또는 뉴클리오타이드가 없음을 나타낸다.
- 제 14내지 18항중 어느 한 항에 있어서, 플라스미드 pAT 153에서 BamH I ― Pst I 단편을 플라스미드 parpER 33, BamH I ― Pst I 단편으로 대치시킴을 특징으로 하고, 하기의 제한지도록 특징지워지는 발현플라스미드 pRH 72.
- 제 14내지 18항중 어느 한 항에 있어서, Bgl II로 선형화한 플라스미드 pPH77에 플라스미드 parpATER33의 263bp 길이의 Sph I ― Bgl II 단편을 이용함을 특징으로 하고, 하기의 제한지도록 특징지워지는 발현 플라스미드 pRH 78r.
- 제 11내지 13항중 어느 한 항에 따른 유전정보를 함유하는 형질 전환된 숙주 유기체.
- 제 21항에 있어서, 형질 전환된 숙주 유기체가 원핵생물 또는 진핵생물임을 특징을 하는 숙주 유기체.
- 제 21항에 있어서, 유전정보가 복제에 필요한 리플리콘 및 제어서열을 함유하는 벡터에 함유됨을 특징으로 하는 숙주 유기체.
- 제 21항에 있어서, 유전정보가 적절한 숙주에서 복제될 수 있는 제 14내지 20항중 어느 한항에 따른 벡터에 함유됨을 특징으로 하는 숙주 유기체.
- 제 24항에 있어서, 숙주가 콜라이 HB 101임을 특징으로 하는 숙주 유기체.
- 제 25항에서 청구한 숙주 유기체를 후처리하여 수득함을 특징으로 하는 제 11,12 또는 13항에서 청구한 DNA 서열의 제조 방법.
- 제 26항에서 청구한 플라스미드 parpATER 33을 Bgl II 및 Sph I으로 분해하여 수득한 큰 단면을, 제 41항에서 청구한 플라스미드 pRHW 14를 Bgl II 및 Sph I로 분해하여 수득한 작은 단편에 연결하고 계속해서 복제를 위해 이.콜라이 HB 101을 수득된 플라스미드로 형질전환시킴을 특징으로 하여 제 19항에서 청구한 발현 플라스미드 pRH 72를 제조하는 방법.
- 제 61항에서 청구한 플라스미드 pRH 77을 Bgl II로 절단하고, 제 59항에 따른 플라스미드 parpATER 33을 Bgl II 및 Sph I으로 분해하여 수득한 263bp 길이의 단편에 연결한 다음, 계속해서 복제를 위해 이.콜라이 HB 101을 수득된 플라스미드로 형질전환시킴을 특징으로 하여 제 20항에서 청구한 발현 플라스미드 pRH 78r을 제조하는 방법.
- 세균 숙주를 제 14내지 20항중 어느 한 항에서 청구한 플라스미드로 형질 전환시킴을 특징으로 하여, 제 22내지 25항 중 어느 한 항에서 청구한 형질 전환된 숙주 유기체를 제조하는 방법.
- 적절한 세균 숙주 유기체를 제 1 내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 암호화하는 유전정보로 형질전환시키고, 이 유전정보를 발현시키며, 생성된 하이브리드 인터페론을 숙주 유기체로부터 단리시킴을 특징으로 하여 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 제조하는 방법.
- 제 30항에 있어서, 숙주 이.콜라이 HB 101을 제 14내지 20항중 어느 한 항에서 청구한 발현 플라스미드로 형질 전환시킴을 특징으로 하는 방법.
- α―인터페론의 일부 및 오메가 인터페론의 일부로 이루어진, 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론에 대한 모노클로날 항체를 함유하는 항체 친화성 컬럼을 사용하여, 제조합 방법으로 제조한 오메가―인터페론을 특징으로 하기 서열의 순수한 오메가 1 인터페론을 제조하는 방법.상기 서열에서,위치 111의 X는 Glu 또는 Gly을 나타낸다.
- 제 32항에 있어서, 재조합 방법에 의해 제조된 오메가―인터페론을, 제 39내지 41항 중 어느 한항에서 청구한 플라스미드 또는 그의 축퇴성 변형체로 형질 전환시킨 세균 숙주에 의해 제조함을 특징으로 하여 순수한 오메가 인터페론을 제조하는 방법.
- 제 33항에 있어서, 사용된 숙죽가 이.콜라이 세균, 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis), 종 세라티아 마르세슨스(Serratia marcescens) 또는 슈도모나스(Pseudomonas)의 세균과 같은 장내세균임을 특징으로 하는 방법.
- 제 33항에 있어서, 이.콜라이 HB 101을 세균 숙주로 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 제 33항에 있어서, 제 53항에서 청구한 항체를 담체와 공유결합된 항체로 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 제 32항에 있어서, 활성화된 세파로스를 담체로서 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 제 32항에 있어서, Mono―S 크로마토그래피컬럼을 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 플라스미드 parpATER 33에서 Hind III―BamH I 단편을 플라스미드 pRHW 11 또는 pRHW 12의 Hind III―BamH I 단편으로 대치시킴을 특징으로 하고, 하기 제한지도록 특징지워지는 오메가 1―인터페론의 발현 플라스미드.상기 제한지도에서,IFNα1은 IFN―오메가 1(Gly) 또는 IFN―오메가(Glu)을 암호화하는 DNA서열을 나타낸다.
- 제 39항에 있어서, 오메가 1―인터페론 유전자가 하기의 DNA서열 또는 그의 축퇴선 변형서열을 함유함을 특징으로 하는 발현 플라스미드 pRHW 13 또는 pRHW 14.상기 서열에서,Y는 뉴클리오타이드 A 또는 G를 나타낸다.
- 제 39 또는 40항에 있어서, Y가 뉴클리오타드 G를 나타냄을 특징으로 하는 발현 플라스미드 pRHW14
- parpATER 33의 약 3750bp 길이의 Hind III―BamH I 단편을, 오메가 1 인터페론을 암호화하는 플라스미드를 Hind III 및 BamH I 으로 분해하여 수득한 약 800bp 길이의 단편에 연결시킴을 특징으로 하여 제 39, 40 또는 41항에서 청구한 발현 플라스미드를 제조하는 방법.
- 플라스미드 pRHW 11로부터 단리한 오메가 1(Glu)인터페론 유전자를 유전자로서 사용함을 특징으로하여 발현 플라스미드 pRHW 13을 제조하는 방법.
- 플라스미드 pRHW 12로부터 단리한 오메가 1(Gly)인터페론 유전자를 유전자로서 사용함을 특징으로 하여 발현 플라스미드 pRHW 14를 제조하는 방법.
- 제 39, 40, 41, 59 또는 61항에서 청구한 발현 플라스미드로 형질 전환시킨 세균 숙주.
- 제 39, 40, 41, 59 또는 61항에서 청구한 발현 플라스미드로 형질 전환시킨 이콜라이 세균.
- 제 39, 40, 41, 59 또는 61항에서 청구한 발현 플라스미드로 형질 전환시킨 이.콜라이 HB 101.
- 상응하는 세균 숙주를 제 39, 40, 41, 59 또는 61항에서 청구한 발현 플라스미드로 형질 전환시킴을 특징으로 하여 제 45, 46 또는 47항에서 청구한 세균 숙주를 제조하는 방법.
- 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론으로 면역화한 마우스로부터의 비장 세포를 골수종 세포와 세포 융합시켜 하이브리드 세포주를 수득하고, 수득한 하이브리드 세포주가 이들 하이브리드 인터페론에 대한 항체를 생산함을 특징으로 하는 시험관내 및 생체내 배양할 수 있는 하이브리드 세포주.
- 제 49항에 있어서, 사용된 비장 세포를 BALB/C 마우스로부터 취하고 사용된 골수종 세포가 P3-X-63Ag 8-653주의 것임을 특징으로 하는 하이브리드 세포주.
- 제 49 및 50항중 어느 한 항에 있어서, 제2, 3, 4 또는 제 5항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 면역화용으로 사용함을 특징으로 하는 하이브리드 세포주.
- 제 49, 50 및 51항중 어느 한 항에 있어서, 제 5항에서 청구한 하이브리드 인터페론을 면역화용으로 사용하고 그것이 구성적으로 OMG-2 항체를 합성함을 특징으로 하는 하이브리드 세포주 OMG-2.
- 타이프 α2, 오메가 1 및 제 5항에서 청구한 하이브리드 인터페론의 사람 인터페론의 사람 인터페론활성을 전체적으로 또는 부분적으로 중화시킴을 특징으로 하는 모노클로날 항체.
- IgG-항체 생성 하이브리드 세포주를 세포융합에 의해 제조하고, 아클론화시키며, 세포 성장후 항-인터페론 특이성이 있는 IgG항체를 단리시킴을 특징으로 하여, 제 53항에서 청구한 항―사람 인터페론―α2, ―오메가 1 및 항―하이브리드 인터페론 특이성이 있는, 마우스로부터의 신규한 IgG―항체를 제조하는 방법.
- 제 54항에 있어서, 제 5항에서, 청구한 하이브리드 인터페론에 대해 면역화된 마우스로부터의 비장 세포 및 골수종 세포를 세포 융합에 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 제 55항에 있어서, 세포주 P3―X―63 Ag 8―653을 골수종 세포로 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 제 54항에 있어서, 제 5항에서, 청구한 하이브리드 인터페론에 대해 면역화된 BALB/C 마우스로부터의 비장세포를 사용함을 특징으로 하는 방법.
- 제 53항에서 청구한 모노클로날 항체를 활성화된 담체와 공유적으로 결합시킴을 특징으로 하여 항체 친화성 담체를 제조하는 방법.
- 플라스미드 pAT 153에서 BamH I ―Pst I 단편을 플라스미드 parpER 33의 BamH I ―Pst I 단면으로 대치시키고, 하기의 제한지도로 특징지워지는 플라스미드 parpATER33.
- 플라스미드 parpER 33을 BamH I 및 Pst I 으로 분해하여 수득한 작은 단편을, 플라스미드 pAT153을 BamH I 및 Pst I 으로 분해하여 수득한 큰 단편에 연결시켜 수득함을 특징으로 하는 제 59항에서 청구한 플라스미드 parpATER 33의 제조방법.
- 플라스미드 pRHW 14에서 큰 Sph I ―Bgl II 단편을 플라스미드 parpATER 33의 작은 Sph I ― Bgl II 단편으로 대치시키고, 하기의 제한지도록 특징지워지는 발현 플라스미드 pRH77.
- 제 41항에 따른 플라스미드 pRHW 14를 Bgl II 및 Psh I 으로 분해하여 수득한 큰 단편을, 제 59항에 따른 플라스미드 parpATER 33을 Bgl II 및 Sph I 으로 분해하여 수득한 것으로 IFN-α2(Arg)의 C 말단을 암호화하는 작은 단편에 연결시키고, 계속해서 세균 숙주를 수득된 플라스미드로 형질전환시킴을 특징으로 하여, 제 61항에서 청구한 발현 플라스미드 pRH 77을 제조하는 방법.
- 제 1내지 5항중 어느 한 항에서 청구한 하이브리드 인터페론, IFN―α2 또는 IFN―오메가 1의 정제를 위한 제 53항에서 청구한 모노클로날 항체의 용도.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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