KR840006014A - 간염 b비루스 백신의 제조방법 - Google Patents

간염 b비루스 백신의 제조방법 Download PDF

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Abstract

내용 없음

Description

간염 B비루스 백신의 제조방법
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 pRIT 10601의 제한 엔도뉴클레아제 분열지도.
제2도는 pRIT 10616의 제한 엔도뉴클레아제 분열지도.
제3도는 pMC 200의 제한 엔도뉴클레아제 분열지도.

Claims (30)

  1. HBsAg에 대하여 코드화 될 수 있는 뉴클레오티드 서열과 이스트agr 3유전자로 부터 유도한 조절부분을 융합시킴을 특징으로 하여, HBsAg에 대하여 코드화 할 수 있으며 이스트에 있어서 형질발현할 수 있는 뉴클레오티드 서열을 함유한 재결함체 DNA 분자를 제조하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 조절부분에 대하여 HBsAg 서열의 형질발현으로 합성된 HBsAg가 외부 아미노산 잔기가 결여되도록 한 위치에서 HBsAg 서열이 융합되도록 한 방법.
  3. 제1항에 있어서, 조절부분이 pYerua 3 arg 3을 제한 엔도뉴클레아제롤 분해시켜 유도된 방법.
  4. 제1항에 있어서, pYEura 3 arg 3을 HindⅢ 제한 엔도뉴클레아제로 분해시켜 |arg 3유전자에 대한 3300bp 이스트 DNA 프라그먼트를 제조하여 조절부분을 유도하는 방법.
  5. 제1항에 있어서, HBsAg 서열 및 조절부분을 벡타에 삽입함을 특징으로 하는 방법.
  6. 제1항에 잇어서, HBV DNA를 BamHI 제한 엔도뉴클레아제로 처리하여 HBsAg 서열을 제조함을 특징으로 하는 방법.
  7. 제5항에 있어서,adw혈청형의 덴(Dane) 입자에서 추출한 HBV DNA의 BamHI 프그라그먼트를 벡타에 미리 삽입한 조절부분의 HindⅢ 프라그먼트의 BgⅡ 부위에 삽입함을 특징으로 하는 방법.
  8. 제5항에 잇어서, ayw 혈청형의 덴(Dane) 입자에서 추출한 HBV DNA의 BamHI 프그라그먼트의 융합된 쌍(pair)에서 유도한 Hhal 프라그먼트를, 조절부위를 함유하며 한쪽 말단에 EcoRl 부위를 가지고 다른쪽 말단은 5700bp 프라그먼트에서 Xbal 부위의 DNA 폴리메라제 재짝지움(repair)후에 pMC 200의 5700bp Xbal-FcoRI 프라그먼트에 융합된 블런트(blunt)-말단인, 3'T잔기에서 종료되는 pMC 200의 1480bp 프라그먼트인 벡타의 Xbal부위에 삽입함을 특징으로 하는 방법.
  9. 제6항에 있어서, adw 혈청형의 덴 입자에서 추출한 HBV DNA의 BmaHI 프라그먼트를 조절부분에 융합시킴을 특징으로 하는 방법.
  10. 제6항에 있어서,adw혈청형의 데 입자에서 추출한 HBV DNA의 BamHI 프라그먼트를 융합된 쌍에서 유도한 Hhal 프라그먼트를 조절부분에 융합시킴을 특징으로 하는 방법.
  11. 제7항에 있어서, HindⅢ 프라그먼트가 미리 pBR 322에 삽입되는 방법.
  12. 제7항에 있어서, HBsAg 삽입부 및 조절부분을 함유한 HindⅢ 프라그먼트를 HindⅢ 으로 처리하여 유리시키고 HindⅢ 프라그먼트를 이스트벡타에 삽입함을 특징으로 하는 방법.
  13. 제8항에 있어서, 융합된 1480bp-5700bp 프라그먼트를 HindⅢ으로 처리하여 HBsAg서열 및 조절부분을 운반하는 HindⅢ 프라그먼트를 절단하고, HindⅢ 그라그먼트를 이스트벡타에 삽입함을 특징으로 하는 제조방법.
  14. 제9항에 있어서, BamHI 프라그먼트를 조절부위를 BgIⅡ 부위에 삽입함을 특징으로 하는 방법.
  15. 제10항에 있어서, Hhal 프라그먼트를, 조절부위를 함유하며 한쪽말단에 EcoRI 부위를 가지고 다른쪽 말단은 5700bp 프라그먼트에서 Xbal 부위의 폴리메라제의 재짝지음 후에 pMC 200의 5700bpxbal EcoRI 프라그먼트에 융합된 말단인 3'T잔기에서 종료되는 pMC 200의 1480bp 프라그먼트의 Xbal 부위의 조절부분에 융합시킴을 특징으로 하는 방법.
  16. 제 11항에 있어서, HindⅢ으로 처리하여 HBsAg 서열 및 조절부분을 함유한 HindⅢ 프라그먼트를 유리하고, HindⅢ 프라그먼트를 이스트벡타에 삽입함을 특징으로 하는 방법.
  17. 제13항에 있어서, 이스트벡타가 HindⅢ 프라그먼트를 절단하여 미리 수정한 YEp 13인 방법.
  18. 제16항에 있어서, 이스트벡타가 HindⅢ 프라그먼트를 절단하여 미리 수정한 YEp 13인 방법.
  19. HBsAg에 대하여 코드화 할 수 있고 이스트에서 HBsAg 서열의 모사에 영향을 줄 수 있는 이스트arg 3유전자에서 유도한 조절부분을 함유하는 재결합체 DNA 분자를 이스트세포에 삽입하고, 이스트를 배양시켜 생선된 HBsAg를 모으는 것을 특징으로 하는 HBsAg의 제조방법.
  20. 제19항에 있어서, 조절부분에 대하여 HBsAg 서열이 HBsAg 서열의 형의 발현으로 합성된 HBsAg가 외부 아미노산 잔기가 결여 되도록 위치하는 방법.
  21. 제1항에 있어서, HBsAg 서열이adw혈청형의 덴입자에서 추출하여 이스트조절부분의 Bg1H 부위에 삽입한 HBV DNA의 BamHI 프라그먼트인 방법.
  22. 제1항에 있어서, HBsAg가ayw혈청형의 덴입자에서 추출한 HBV DNA의 BamHI 프라그먼트의 융합된 쌍에서 유도하여 5700bp 프라그먼트에서 Xbal 부위의 폴리 메타제의 재짝지움 후에 pMC 200의 5700bp bal-EcoRI 프라그먼트에 융합된 1480 프라그먼트를 가지는 분자의 Xbal 부위에 삽입한 Xhal 프라그먼트이며, 여기에서 조절부위는 한쪽 말단에 EcoRI 부위를 가지며 블런트-말단인 다른쪽 말단은 3'T 잔기에서 종료되는 pMC 200의 1480bp 프라그먼트인 방법.
  23. 제19항에 있어서, 이스트가 에스 세레비시아에 균주 DC5 또는 lcl 697d인 방법.
  24. 제20항에 있어서, 이스트가 에스 세레비시아에 균주 DC5 또는 lcl 697d인 방법.
  25. 제21항에 있어서, 이스트가 에스 세레비시아에 균주 DC5 또는 lcl 697d인 방법.
  26. 제21항에 있어서, 알기닌 생합경로가 이스트에서 탈억제되는 방법.
  27. 제22항에 있어서, 알기닌 생합경로가 이스트에서 탈억제되는 방법.
  28. 제22항에 있어서, 이스트가 에스, 세레비시아 균주 lcl 697d인 방법.
  29. 한쪽 말단에 EcoRI 부위를 가지며 브런트-말단인 다른쪽 말단은 3'T잔기에서 종료되는 pMC 200의 1480bp 프라그먼트인 조절부부분을 5700bp 프라그먼트에서 Xbal 부위의 폴리메라제의 재짝지움후에 pMC 200의 5700bp Xbal-EcoRI 프라그먼트에 융합시킴을 특징으로 하여 제한부위에 삽입된 코딩서열의 형질발현으로 합성된 단백질이 외부 아미노산 잔기가 결여되도록 한 이스트arg 3조절부분 및 인접 제한 부위를 함유한 벡타의 제조방법.
  30. HBsAg가 제19 내지 29항중 어느 하나에 따라 제조된 간염 B비루스 백신의 제조방법.
    ※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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