KR20170078810A - 관찰 장치 및 관찰 방법 - Google Patents

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KR20170078810A
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신타로 다카하시
다다시 히라타
야스노부 이가
신이치 다키모토
다카시 미요시
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올림푸스 가부시키가이샤
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Abstract

장치를 대형화시키지 않고, 세포 등의 피사체를 표지하지 않고 관찰할 수 있는 관찰 장치 및 관찰 방법을 제공한다. 시료(X)의 하방에서 상방을 향하여 조명광을 사출하는 광원부(5)와, 해당 광원부(5)로부터 사출된 조명광이 시료(X)의 상방에서 반사되어 시료(X)를 투과한 투과광을 집광하는 대물 렌즈(4)를 갖고, 해당 대물 렌즈(4)에 의해 집광된 투과광을 시료(X)의 하방에서 촬영하는 촬영 광학계(6)를 구비하는 관찰 장치(1)를 제공한다.

Description

관찰 장치 및 관찰 방법{OBSERVATION DEVICE AND OBSERVATION METHOD}
본 발명은 관찰 장치 및 관찰 방법에 관한 것이다.
종래, 세포 등의 피사체를 표지하지 않고 관찰하는 장치로서, 위상차 관찰법이나 미분간섭 관찰법을 이용한 관찰 장치가 알려져 있다(예를 들어, 특허문헌 1 참조).
일본 특허 공개 (평)7-261089호 공보
그러나, 특허문헌 1의 관찰 장치는, 피사체를 사이에 두고 촬영 광학계와 조명 광학계를 배치할 필요가 있어서, 장치가 대형화, 복잡화한다는 불편함이 있다.
본 발명은 상술한 사정을 감안하여 이루어진 것으로, 장치를 대형화시키지 않고, 세포 등의 피사체를 표지하지 않고 관찰할 수 있는 관찰 장치 및 관찰 방법을 제공하는 것을 목적으로 하고 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 이하의 수단을 제공한다.
본 발명의 일 형태는, 시료의 하방으로부터 상방을 향하여 조명광을 사출하는 광원부와, 해당 광원부로부터 사출된 조명광이 상기 시료의 상방에서 반사되어 상기 시료를 투과한 투과광을 상기 시료의 하방에서 촬영하는 촬영 광학계를 구비하는 관찰 장치를 제공한다.
본 형태에 따르면, 광원부에서 나온 조명광은 시료의 하방에서 상방을 향하여 사출된 후, 시료의 상방에서 반사되어 시료를 상방에서 하방으로 투과시킨다. 시료를 투과한 투과광은, 시료의 하방에 배치되어 있는 촬영 광학계에 의해 촬영된다. 광원부 및 촬영 광학계의 양쪽을 시료의 하방에 배치했으므로, 장치를 대형화시키지 않고, 투과광을 촬영함으로써 세포 등의 피사체를 표지하지 않고 관찰할 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 촬영 광학계가, 상기 시료를 투과한 투과광을 집광하는 대물 렌즈를 구비하고, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 직경 방향의 외측으로부터 상기 시료의 상방으로 조명광을 사출해도 된다.
이와 같이 함으로써, 시료의 하방에 배치된 대물 렌즈의 직경 방향 외측에 배치된 광원부로부터 시료의 상방을 향하여 사출된 조명광이, 시료의 상방에서는 반사되어, 대물 렌즈의 광축에 대해 비스듬히 상방으로부터 시료에 입사하고, 시료를 투과한 투과광이 촬영 광학계에 의해 촬영된다. 시료에 대한 입사 각도를 적절하게 설정함으로써, 시료의 상에 명암을 형성할 수 있고, 세포 등의 투명한 피사체에 대해서도 보기 쉬운 상을 취득할 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 직경 방향으로 상이한 위치로부터 독립적으로 조명광을 사출 가능해도 된다.
이와 같이 함으로써, 광원부로부터 사출되는 조명광의 직경 방향 위치를 상이하게 함으로써, 시료의 상방에 배치된 동일한 반사면에 의해 반사된 반사광의 시료에 대한 입사 각도를 변화시킬 수 있다. 즉, 대물 렌즈의 직경 방향의 가까운 위치로부터 사출된 조명광의 반사광은, 광축에 대해 작은 각도를 이루고 시료에 입사하는 한편, 대물 렌즈의 직경 방향으로 먼 위치로부터 사출된 조명광의 반사광은, 광축에 대해 큰 각도를 이루어 시료에 입사한다. 이에 의해, 대물 렌즈의 도입각보다 작은 입사각의 경우는, 조명 불균일이 적은 명시야 조명으로 하고, 또한 대물 렌즈의 도입각보다 큰 입사각의 경우에는, 미세 구조가 강조되는 암시야 조명으로 하고, 또한 대물 렌즈의 도입각과 동등한 입사각의 경우는, 시료가 입체적으로 보이는 편사 조명으로 할 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 주위 방향으로 상이한 위치로부터 동시에 조명광을 사출 가능해도 된다.
이와 같이 함으로써, 대물 렌즈의 주위 방향으로 복수 위치로부터 동시에 조명광이 조사되어, 조명 불균일을 저감시킬 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 주위에 배열되어, 독립적으로 점등 가능한 복수의 광원을 구비하고 있어도 된다.
이와 같이 함으로써, 복수의 광원 중의 어느 것을 점등시킴으로써, 조명광의 주위 방향 위치를 결정할 수 있다. 그리고, 점등시키는 광원의 주위 방향 위치를 전환함으로써, 상이한 방향으로부터 조명된 시료의 상을 촬영할 수 있다. 특히, 상기 편사 조명의 상에서는, 상이한 음영 부여 방식의 상을 촬영할 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 광원부가, 상기 시료의 하방에 배치되는 광원과, 해당 광원으로부터의 조명광 중 특정 직경 방향 위치의 조명광만을 투과시키는 개구부를 갖는 차광 부재를 구비하고 있어도 된다.
이와 같이 함으로써, 광원으로부터의 조명광이 차광 부재에 의해 차단되고, 개구부를 통과하는 조명광만이, 시료의 상방에서 반사되어 시료에 입사하게 된다. 따라서, 광원의 점등 위치를 전환하지 않고, 차광 부재의 개구부 위치를 조절함으로써, 시료에 입사시키는 반사광의 방향 혹은 각도를 변화시킬 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 광원부가, 조명광을 확산시키는 확산판을 구비하고 있어도 된다.
이와 같이 함으로써, 확산판에 의해 균일하게 확산된 조명광을 시료에 조사시킬 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 시료가, 광학적으로 투명한 재질을 포함하는 용기 내에 수용되어, 상기 조명광이 상기 시료의 상방에 배치되어 있는 상기 용기의 천장판 내면에 의해 반사되어도 된다.
이와 같이 함으로써, 내부에 시료를 수용한 천장판을 갖는 용기를 광원부 및 촬영 광학계의 상방에 배치하기만 하면, 광원부로부터 사출된 조명광을 용기의 천장판 내면에서 반사시키고, 용기 내의 시료에 조사시킬 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 조명광이, 상기 시료의 상방에 배치된 반사 부재에 의해 반사되어도 된다.
이와 같이 함으로써, 샤알레(덮개 없음)와 같이 천장판을 갖지 않는 용기나 세포 배양 백 내에 수용된 시료를 관찰하는 경우에 있어서, 시료의 상방에 반사 부재를 배치함으로써, 광원부로부터 사출된 조명광을 반사 부재에 있어서 반사시켜, 용기 내의 시료에 조사시킬 수 있다.
상기 형태에 있어서는, 상기 시료가, 용액 내에 침지되어 있고, 상기 조명광이, 상기 용액 상방의 액면에 의해 반사되어도 된다.
이와 같이 함으로써, 천장판을 갖지 않는 용기나, 반사 부재를 배치할 수 없는 용기 내에 수용된 시료를 관찰하는 경우에 있어서, 광원부로부터 사출된 조명광을 용액의 액면에 있어서 반사시키고, 용기 내의 시료에 조사시킬 수 있다.
본 발명의 다른 형태는, 시료의 하방에서 상방을 향하여 조명광을 사출하는 사출 스텝과, 해당 사출 스텝에 의해 사출된 조명광을 상기 시료의 상방에서 반사하는 반사 스텝과, 해당 반사 스텝에 의해 반사된 조명광을 상기 시료에 투과시키는 투과 스텝과, 해당 투과 스텝에 의해 상기 시료를 투과한 투과광을 상기 시료의 하방에서 촬영하는 촬영 스텝을 포함하는 관찰 방법을 제공한다.
본 발명에 따르면, 장치를 대형화시키지 않고, 세포 등의 피사체를 표지하지 않고 관찰할 수 있다는 효과를 발휘한다.
도 1은 본 발명의 일 실시 형태에 관한 관찰 장치를 나타내는 부분적인 종단면도.
도 2는 도 1의 관찰 장치의 광원부에 있어서의 LED 광원의 배치의 일례를 나타내는 평면도.
도 3은 도 1의 관찰 장치의 변형예이며, 차광 부재에 의해 조명광을 제한하는 경우를 나타내는 부분적인 종단면도.
도 4a는 도 3의 차광 부재의 예이며, 원형의 단일의 개구부를 갖는 경우를 나타내는 평면도.
도 4b는 도 3의 차광 부재의 예이며, 개구부의 직경 방향 위치가 도 4a와는 상이한 경우를 나타내는 평면도.
도 4c는 도 3의 차광 부재의 예이며, 개구부를 2개 구비하는 경우를 나타내는 평면도.
도 5a는 도 3의 차광 부재의 다른 예이며, 부채 형상의 개구부를 갖는 경우를 나타내는 평면도.
도 5b는 도 3의 차광 부재의 다른 예이며, 원환상의 개구부를 갖는 경우를 나타내는 평면도.
도 6은 도 1의 관찰 장치의 다른 변형예를 나타내는 부분적인 종단면도.
도 7은 도 1의 관찰 장치의 다른 변형예를 나타내는 부분적인 종단면도.
도 8은 도 1의 관찰 장치의 다른 변형예를 나타내는 부분적인 종단면도.
도 9는 도 1의 관찰 장치의 다른 변형예를 나타내는 부분적인 종단면도.
본 발명의 일 실시 형태에 관한 관찰 장치(1)에 대해 도면을 참조하여 이하에 설명한다.
본 실시 형태에 관한 관찰 장치(1)는, 도 1에 도시된 바와 같이, 시료 X를 수용한 용기(2)를 적재하는 스테이지(3)와, 해당 스테이지(3)의 하방에 배치되어, 스테이지(3)를 상방에서 투과해 오는 광을 집광하는 대물 렌즈(4)를 구비하고, 시료 X를 투과한 광을 촬영하는 촬영 광학계(6)와, 대물 렌즈(4)의 직경 방향 외측에 배치되고, 스테이지(3)를 투과하여 상방으로 조명광을 사출하는 광원부(5)를 구비하고 있다.
스테이지(3)에는, 대물 렌즈(4) 및 광원부(5)의 상방을 덮도록, 광학적으로 투명한 재질, 예를 들어 유리판(3a)이 배치되고, 용기(2)는 유리판(3a)의 상면에 적재되도록 되어 있다.
용기(2)는, 예를 들어 천장판(2a)을 갖는 세포 배양 플라스크이며, 전체적으로 광학적으로 투명한 수지에 의해 구성되어 있다.
광원부(5)는, 도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이, 대물 렌즈(4)의 주위에, 주위 방향 및 직경 방향으로 간격을 두고 복수 배치된 LED 광원(광원)(7)과, 각 LED 광원(7)에 대응하여 배치되어, 각 LED 광원(7)에 있어서 발생한 조명광을 집광하는 복수의 집광 렌즈(8)와, 해당 집광 렌즈(8)에 의해 집광된 조명광을 확산시키는 확산판(9)을 구비하고 있다.
광원부(5)는, 특정의 LED 광원(7)을 독립적으로 점등시킬 수 있게 되어 있다(도 1 및 도 2는, 점등하고 있는 LED 광원(7)을 해칭에 의해 도시하였음).
즉, 대물 렌즈(4)의 직경 방향으로 상이한 위치의 LED 광원(7)만을 점등시킴으로써, 도 1에 실선으로 나타내는 바와 같이, 유리판(3a) 및 용기(2)의 저면(2b)을 아래에서 위를 향해 투과한 후, 용기(2)의 천장판(2a) 내면에서 반사하여, 비스듬히 상방으로부터 시료 X, 용기(2)의 저면(2b) 및 유리판(3a)을 투과하여 대물 렌즈(4)에 입사하는 조명광의 각도를, 점선으로 나타내는 바와 같이 전환할 수 있게 되어 있다.
대물 렌즈(4)의 주위 방향으로 특정 위치의 LED 광원(7)만을 점등시킴으로써, 시료 X에 대해 주위 방향 중 특정 방향으로만 조명할 수 있게 되어 있다. 도 2에 도시된 바와 같이, 대물 렌즈(4)의 주위 방향으로 2 이상의 방향, 특히, 대물 렌즈(4)의 광축 S에 대해 축 대칭의 방향으로 배치된 LED 광원(7)을 점등시킴으로써, 조명 불균일을 저감시킨 조명광을 시료 X에 대해 조사할 수 있게 되어 있다.
이와 같이 구성된 본 실시 형태에 관한 관찰 장치(1)를 사용한 관찰 방법에 대해, 이하에 설명한다.
본 실시 형태에 관한 관찰 장치(1)를 사용하여 세포와 같이 투명한 시료 X의 관찰을 행하기 위해서는, 도 1에 도시된 바와 같이, 시료 X를 용기(2) 내에 수용하고, 저면(2b)에 접착시킨 상태에서, 용기(2)를 저면(2b)이 하측이 되도록 스테이지(3)의 유리판(3a) 위에 적재한다.
그리고, 이 상태에서, 광원부(5)의 어느 LED 광원(7)을 작동시켜 조명광을 발생시킨다. LED 광원(7)에 있어서 발생한 조명광은, 해당 LED 광원(7)에 대응해서 배치되어 있는 집광 렌즈(8)에 의해 집광되어, 확산판(9)에 의해 확산된 상태로, 유리판(3a) 및 용기(2)의 저면(2b)을 아래에서 위를 향해 투과해(사출 스텝), 용기(2)의 천장판(2a) 내면에서 반사하여 시료 X에 대해 비스듬히 상방으로부터 조사된다(반사 스텝).
시료 X에 조사된 조명광 중 시료 X를 투과한 조명광의 투과광이 용기(2)의 저면(2b) 및 유리판(3a)을 위에서 아래를 향해 투과하고, 대물 렌즈(4)에 입사한다(투과 스텝). 이 때, 조명광은 시료 X의 형상이나 굴절률에 의해 굴절, 산란되거나, 혹은, 시료 X의 투과율에 의해 감광됨으로써, 시료 X의 정보를 게재한 투과광이 되고 대물 렌즈(4)에 의해 집광되어, 도시되지 않은 촬상 소자에 의해 촬영된다(촬영 스텝).
이와 같이, 본 실시 형태에 관한 관찰 장치(1)에 의하면, 시료 X의 하방에 광원부(5) 및 대물 렌즈(4)를 포함하는 촬영 광학계(6)를 배치하고 있으므로, 종래, 시료를 사이에 두고 양측에 광원부와 촬영 광학계를 배치하고 있던 투과광의 관찰 장치와 비교하면, 시료 X의 편측에만 광원부(5) 및 촬영 광학계(6)를 집약하고, 장치를 박형화할 수 있다는 이점이 있다. 그렇게 박형화된 관찰 장치(1)에서도, 투과광을 촬영함으로써 세포 등의 피사체를 표지하지 않고 관찰할 수 있다는 이점이 있다.
광원부(5)로부터의 조명광은, 대물 렌즈(4)의 직경 방향 외측으로부터 사출되어 용기(2)의 천장판(2a) 내면에서 반사함으로써, 시료 X에 대해 비스듬히 상방으로부터 조사되어 대물 렌즈(4)에 의해 집광되므로, 시료 X에 대한 입사 각도를 적절하게 설정함으로써, 시료 X의 상에 명암을 형성할 수 있고, 세포 등의 투명한 피사체에 대해서도 보기 쉬운 상을 취득할 수 있다는 이점이 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 광원부(5)가, 대물 렌즈(4)의 주위에 직경 방향으로 배열되어, 독립적으로 점등 가능한 복수의 LED 광원(7)을 구비하고 있으므로, 도 1에 점선으로 나타내는 바와 같이, 점등하는 LED 광원(7)의 직경 방향 위치를 상이하게 함으로써, 시료 X에 입사하는 조명광의 조사 각도를 변화시킬 수 있다. 이에 의해, 대물 렌즈(4)의 도입각보다 작은 입사각의 경우에는, 조명 불균일이 적은 명시야 조명으로 하고, 또한 대물 렌즈(4)의 도입각보다 큰 입사각의 경우에는, 미세 구조가 강조되는 암시야 조명으로 하고, 또한 대물 렌즈(4)의 도입각과 동등한 입사각의 경우에는, 시료 X가 입체적으로 보이는 편사 조명으로 할 수 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 광원부(5)가, 대물 렌즈(4)의 주위에 주위 방향으로 배열되어, 독립적으로 점등 가능한 복수의 LED 광원(7)을 구비하고 있으므로, 점등하는 LED 광원(7)의 주위 방향 위치를 상이하도록 함으로써, 시료 X에 입사하는 조명광의 조사 방향을 변화시킬 수 있다. 이에 의해, 형성되는 시료 X의 상의 음영 방향을 변화시켜, 보이는 방식을 변경할 수 있다.
도 2에 도시된 바와 같이, 주위 방향으로 상이한 위치의 복수의 LED 광원(7)을 동시에 점등시킴으로써, 특히, 축 대칭으로 배치되는 복수의 LED 광원(7)을 동시에 점등시킴으로써, 조명 불균일을 저감시켜 불균일이 적은 시료 X의 상을 취득할 수 있다는 이점이 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 각 LED 광원(7)에 대응하여 확산판(9)이 구비되어 있으므로, LED 광원(7)에서 나온 조명광이 균일하게 확산되어, 조명 불균일이 적은 균일한 강도의 조명광을 시료 X에 조사할 수 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 복수의 LED 광원(7)을 어레이 형상으로 배열하고, 독립적으로 점등시킴으로써, 조명광의 조사 각도나 조사 방향 등을 전환하는 것으로 했지만, 이것에 대신하여, 도 3 내지 도 5b에 도시된 바와 같이, 광원부(5)가, 대물 렌즈(4)의 주위에 배치되는 광원(7)과, 해당 광원(7)의 상방에 배치되어, 광원(7)으로부터의 조명광을 차폐하는 차광 부재(10)를 구비하는 것으로 해도 된다.
즉, 차광 부재(10)에는 그의 주위 방향의 일부 혹은 직경 방향의 일부에 개구하는 개구부(11)와, 용기(2)의 천장판(2a) 내면에서 반사하여 시료 X를 투과한 광을 투과시키는 투과 구멍(12)이 형성되어 있고, 차광 부재(10)를 교체함으로써, 개구부(11)의 위치를 조절하여, 조명광의 조사 각도나 조사 방향을 변경할 수 있다. 이 경우에는, 광원부(5)로서는, 상기와 마찬가지로 어레이 형상으로 배열된 LED 광원(7), 집광 렌즈(8) 및 확산판(9)을 구비하는 것이어도 되지만, 조명광의 발광 위치를 전환하는 기능은 불필요해서, 개구부(11)보다 넓은 범위로부터 조명광을 사출 가능한 광원이면, 임의의 광원을 구비하는 것을 채용해도 된다.
도 4a 내지 도 4c는 원형의 개구부(11)를 갖는 예이며, 직경 방향이나 개구부(11)의 개수가 상이한 예를 나타내고 있다. 도 5a는 개구부(11)가 부채꼴인 경우, 도 5b는 개구부(11)가 원환형인 경우를 각각 나타내고 있다. 개구부(11)의 크기, 위치 및 형상은 임의의 것을 채용할 수 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 세포 배양 플라스크와 같은 천장판(2a)을 갖는 용기(2) 내에 시료 X를 수용하고, 용기(2)의 천장판(2a) 내면에서 조명광을 반사시키는 것으로 했지만, 이것으로 한정되는 것은 아니다. 예를 들어, 용기(2)로서, 샤알레(덮개 없음)와 같이 천장판(2a)을 갖지 않는 용기(13)에 시료 X를 수용한 경우에는, 도 6에 도시된 바와 같이, 샤알레의 상방 개구를 폐색하는 위치에 미러와 같은 반사 부재(14)를 배치해, 반사 부재(14)에 의해 저면(13b)을 아래에서 위를 향해 투과한 조명광을 반사하는 것으로 해도 된다. 반사 부재(14)는, 직선 구동에 의해 혹은 요동에 의해 시료 X의 상방 위치에 삽입 탈거 가능하게 설치되어 있어도 된다.
용기(2)로서, 샤알레(덮개 없음)와 같이 천장판(2a)을 갖지 않는 용기(13)에 시료 X를 수용한 경우에는, 도 7에 도시된 바와 같이, 용기(13) 내에 용액(예를 들어, 배양 배지나 인산 완충액 등) L을 넣어서 시료 X를 용액 내에 침지하고, 용액 상방의 액면에 의해 저면(13b)을 아래에서 위를 향해 투과한 조명광을 반사하는 것으로 해도 된다. 천장판(2a)을 갖는 용기(2)에 시료 X를 수용한 경우도, 용기(2) 내에 용액(예를 들어, 배양 배지나 인산 완충액 등) L을 넣어서 시료 X를 용액 내에 침지해도 된다.
본 실시 형태에 있어서는, 도 8에 도시된 바와 같이, 천장판(2a)의 상방에 광을 차폐하는 재질을 포함하는 차광 부재(15)를 구비하고 있어도 된다.
이와 같이 함으로써, 외부로부터의 외광이 차광 부재(15)에 의해 차폐되기 때문에, 외광이 천장판(2a)으로부터 용기(2) 내에 입사하는 것을 억제하고, 효율적으로 관찰을 행할 수 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 광원부(5)로서, LED 광원(7), 집광 렌즈(8) 및 확산판(9)을 유리판(3a)에 따르도록 대략 수평으로 배치한 것을 예시했지만, 이 대신에, 도 9에 도시된 바와 같이, LED 광원(7), 집광 렌즈(8) 및 확산판(9)을 광축 S를 향해 기울여 배치해도 된다.
이와 같이 함으로써, LED 광원(7)에서 나오는 조명광의 손실을 억제하고, 효율적으로 조명광을 시료 X에 조사할 수 있다.
본 실시 형태에 있어서는, 광원부(5)로서, 확산판(9)을 구비하는 것을 예시했지만, 확산판(9)을 구비하지 않아도 된다.
1: 관찰 장치
2: 용기
2a: 천장판
4: 대물 렌즈
5: 광원부
6: 촬영 광학계
7: LED 광원
9: 확산판
10: 차광 부재
11: 개구부
14: 반사 부재
X: 시료

Claims (11)

  1. 시료의 하방으로부터 상방을 향하여 조명광을 사출하는 광원부와,
    해당 광원부로부터 사출된 조명광이 상기 시료의 상방에서 반사되어 상기 시료를 투과한 투과광을 상기 시료의 하방에서 촬영하는 촬영 광학계
    를 구비하는, 관찰 장치.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 촬영 광학계가, 상기 시료를 투과한 투과광을 집광하는 대물 렌즈를 구비하고,
    상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 직경 방향 외측으로부터 상기 시료의 상방으로 조명광을 사출하는, 관찰 장치.
  3. 제2항에 있어서, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 직경 방향으로 상이한 위치로부터 독립적으로 조명광을 사출 가능한, 관찰 장치.
  4. 제2항에 있어서, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 주위 방향으로 상이한 위치로부터 동시에 조명광을 사출 가능한, 관찰 장치.
  5. 제3항 또는 제4항에 있어서, 상기 광원부가, 상기 대물 렌즈의 주위에 배열되어, 독립적으로 점등 가능한 복수의 광원을 구비하는, 관찰 장치.
  6. 제2항에 있어서, 상기 광원부가, 상기 시료의 하방에 배치되는 광원과, 해당 광원으로부터의 조명광 중 특정 직경 방향 위치의 조명광만을 투과시키는 개구부를 갖는 차광 부재를 구비하는, 관찰 장치.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 광원부가, 조명광을 확산시키는 확산판을 구비하는, 관찰 장치.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 시료가, 광학적으로 투명한 재질을 포함하는 용기 내에 수용되고,
    상기 조명광이 상기 시료의 상방에 배치되어 있는 상기 용기의 천장판 내면에 의해 반사되는, 관찰 장치.
  9. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조명광이, 상기 시료의 상방에 배치된 반사 부재에 의해 반사되는, 관찰 장치.
  10. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 시료가, 용액 내에 침지되어 있고,
    상기 조명광이, 상기 용액 상방의 액면에 의해 반사되는, 관찰 장치.
  11. 시료의 하방으로부터 상방을 향하여 조명광을 사출하는 사출 스텝과,
    해당 사출 스텝에 의해 사출된 조명광을 상기 시료의 상방에서 반사하는 반사 스텝과,
    해당 반사 스텝에 의해 반사된 조명광을 상기 시료에 투과시키는 투과 스텝과,
    해당 투과 스텝에 의해 상기 시료를 투과한 투과광을 상기 시료의 하방에서 촬영하는 촬영 스텝
    을 포함하는, 관찰 방법.
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