KR20140099449A

KR20140099449A - 피롤로벤조디아제핀

Info

Publication number: KR20140099449A
Application number: KR1020147012411A
Authority: KR
Inventors: 필립 윌슨 하워드; 아르노드 티베르기앵; 스콧 제프리; 패트릭 버크
Original assignee: 스피로즌 살; 시애틀 지네틱스, 인크.
Priority date: 2011-10-14
Filing date: 2012-10-12
Publication date: 2014-08-12
Also published as: CA2850103C; EA028457B1; AU2012322934A1; MX2014004557A; BR112014008888A2; JP2014528467A; CN103998450B; EP2751111A1; SG11201401021TA; US9399073B2; AU2012322934B2; US20140274907A1; EP2751111B1; WO2013053873A1; CA2850103A1; KR101891859B1; JP6170497B2; EA201490535A1; MX341523B; CN103998450A

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물이다:
화학식 I

상기 식에서,
R²는 하기 화학식 II의 구조를 가지며:

상기 식에서,
X는 OH, SH, CO₂H, COH, N=C=O, NHNH₂, CONHNH₂,

및 NHR^N을 포함하는 군으로부터 선택되며, 여기서 R^N은 H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R^C1, R^C2 및 R^C3은 독립적으로 H 및 비치환된C₁ _-2 알킬로부터 선택되고;
R¹²는 하기로 이루어진 군으로부터 선택되며:
(ia) 할로, 니트로, 시아노, 에테르, C₁ _-7알킬, C₃ _-7 헤테로시클릴 및 비스-옥시-C₁ _-3알킬렌을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환된 C₅ _-10 아릴기;
(ib) C₁ _-5비치환된 지방족 알킬;
(ic) C₃ _-6치환된 시클로알킬;
(id) R²¹, R²² 및 R²³ 각각은 독립적으로 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되며, 여기서 R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자는 5를 초과하지 않는 것인

;
(ie) R^25a 와 R^25b 중 어느 하나는 H이며 다른 하나는 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인

;
(if) R²⁴ 는 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐, 시클로프로필, 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인

;
R⁶ 및 R⁹는 독립적으로 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로로부터 선택되고;
여기서, R 및 R'는 독립적으로 선택적 치환된 C₁ _-12 알킬, C₃ _-20 헤테로시클릴및 C₅ _-20 아릴기에서 선택되며;
R⁷은 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NHRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로로부터 선택되고;
(a) R¹⁰은 H이고, R¹¹은 OH 또는 OR^A (여기서, R^A는 C₁ _-4 알킬임)이거나; 또는
(b) R¹⁰ 및 R¹¹은 이들이 결합된 질소 원자와 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나; 또는
(c) R¹⁰은 H이고, R¹¹은 SO_zM (여기서, z는 2 또는 3이고, M은 1가의 약학적으로 허용가능한 양이온임)이고;
R"는 사슬에 하나 이상의 헤테로 원자, 예컨대 O, S, NR^N2(여기서 R^N2는 H 또는 C₁ _-4 알킬임) 및/또는 방향족 고리, 예컨대 벤젠 또는 피리딘이 개재할 수 있는 C_3-12 알킬렌기이며;
Y 및 Y'는 O, S 또는 NH로부터 선택되며;
R^6', R^7', R^9'는 각각 R⁶, R⁷ 및 R⁹와 동일한 기로부터 선택되고, R^10' 및 R^11'는 R¹⁰ 및 R¹¹과 동일하며, 여기서 R¹¹ 및 R^11'가 SO_zM일 경우, M은 2가의 약학적으로 허용가능한 양이온을 나타낼 수 있다.

Description

피롤로벤조디아제핀{PYRROLOBENZODIAZEPINES}

본 발명은 피롤로벤조디아제핀(PBD), 특히 C2 위치에 C2-C3 이중 결합 및 아릴기를 갖는 하나의 단량체 단위 및 C2 위치에 C2-C3 이중 결합 및 치환된 프로필렌기를 갖는 다른 단량체 단위를 갖는 피롤로벤조디아제핀 이량체, 및 표적된 접합체 내의 이의 혼입(inclusion)에 관한 것이다.

일부 피롤로벤조디아제핀(PBD)은 DNA의 특이적인 서열을 인지하고 이에 결합하는 능력을 가지며, 바람직한 서열은 PuGPu이다. 제1 PBD 항종양 항생제인 안트라마이신은 1965년에 발견되었다[문헌(Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795 (1965); Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793(1965))]. 그 이후로, 다수의 천연 생성 PBD가 보고되었으며, 다양한 유사체에 대한 많은 합성 경로가 개발되었다[문헌(Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994)); Antonow, D. and Thurston, D.E., Chem . Rev . 2011 111 (4), 2815-2864)]. 패밀리 멤버는 아베마이신[문헌(Hochlowski, et al., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987))], 치카마이신[문헌(Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984))], DC-81[문헌(일본 특허 58-180 487; Thurston, et al., Chem. Brit., 26, 767-772 (1990); Bose, et al., Tetrahedron, 48, 751-758 (1992))], 마제트라마이신[문헌(Kuminoto, et al., J. Antibiotics, 33, 665-667 (1980))], 네오트라마이신 A 및 B[문헌(Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976))], 포로트라마이신[문헌(Tsunakawa, et al., J. Antibiotics, 41, 1366-1373(1988))], 프로트라카르신[문헌(Shimizu, et al, J. Antibiotics, 29, 2492-2503(1982); Langley and Thurston, J. Org. Chem., 52, 91-97 (1987))], 시바노미신(DC-102)[문헌(Hara, et al., J. Antibiotics, 41, 702-704 (1988); Itoh, et al., J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988))], 시비로마이신[문헌(Leber, et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993(1988))] 및 토마마이신[문헌(Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972))]을 포함한다. PBD는 하기의 일반적인 구조를 갖는다:

이들은 이의 방향족 A 고리 및 피롤로 C 고리에서의 치환기의 수, 유형 및 위치가, 그리고 C 고리의 포화도가 상이하다. B 고리에는 DNA의 알킬화를 담당하는 친전자성 중심인 N10-C11 위치에 이민(N=C), 카르비놀아민(NH-CH(OH)) 또는 카르비놀아민 메틸 에테르(NH-CH(OMe))가 존재한다. 공지된 천연 생성물 모두는 C 고리로부터 A 고리를 향해 볼 때 이를 오른쪽으로 비틀어지게 하는 키랄 C11a 위치에서의 (S) 배치를 갖는다. 이는 B형 DNA의 작은 홈(minor groove)를 갖는 이소나선성(isohelicity)에 적절한 3 차원 형상을 제공하여 결합 부위에 적절히 맞도록 한다[문헌(Kohn, In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11 (1975); Hurley and Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986))]. 작은 홈에서 부가물을 형성하는 PBD의 능력은 이것이 DNA 프로세싱(processing)을 방해할 수 있게 하여 항종양제로서 사용 가능하게 한다.

이들 분자의 생물학적 활성은 가요성 알킬렌 링커를 거쳐 이의 C8/C'-하이드록실 작용기를 통해 2개의 PBD 단위를 함께 결합함으로써 가능해 질 수 있음이 이전에 개시되었다[문헌(Bose, D.S., et al., J. Am. Chem. Soc., 114, 4939-4941 (1992); Thurston, D.E., et al., J. Org. Chem., 61, 8141-8147 (1996))]. PBD 이량체는 생물학적 활성을 주로 담당하는 것으로 여겨지는 재발성 5'-Pu-GATC-Py-3' 가닥간(interstrand) 가교[문헌(Smellie, M., et al., Biochemistry, 42, 8232-8239 (2003); Martin, C., et al., Biochemistry, 44, 4135-4147)]와 같은 서열 선택적 DNA 병변을 형성하는 것으로 여겨진다. PBD 이량체의 일례인 하기 화학식의 SG2000(SJG-136)이 최근 종양학 분야에서 II기 임상 시험에 들어갔다[문헌(Gregson, S., et al., J. Med. Chem., 44, 737-748 (2001); Alley, M.C., et al., Cancer Research, 64, 6700-6706 (2004); Hartley, J.A., et al., Cancer Research, 64, 6693-6699 (2004))].

더욱 최근에, 본 발명자들은 이전에 WO 2005/085251에서 하기 화학식의 SG2202(ZC-207)와 같은 C2 아릴 치환기를 갖는 이량체 PBD 화합물, 그리고 WO2006/111759에서 이러한 PBD 화합물의 비설페이트, 예컨대 하기 화학식의 SG2285(ZC-423)를 개시하였다.

이들 화합물은 매우 유용한 세포 독성제인 것으로 밝혀졌다[문헌(Howard, P.W., et al., Bioorg. Med. Chem. (2009), 19 (22), 6463-6466, doi: 10.1016/j.bmcl.2009.09.012)].

이러한 매우 효능있는 화합물이 DNA 가교에서 작용하는 방식으로 인해, 이들 분자는 대칭적으로 제조되었다. 이미 형성된 이량체 결합을 동시에 갖는 PBD 부분을 구성하거나, 또는 이량체 결합 기를 갖는 이미 구성된 PBD 부분을 반응시켜, 이것이 직접적인 합성을 제공한다.

WO 2010/043880은 각각의 단량체의 C2 위치에 아릴기를 갖는 비대칭 이량체 PBD 화합물을 개시하는데, 이들 아릴기 중 하나는 다른 부분에 상기 화합물을 결합시키기 위한 앵커(anchor)를 제공하도록 설계된 치환기를 갖는다. WO 2011/130616로서 2011년 4월 15일자로 출원된, 동시-계류중인 국제 특허 출원 PCT/US2011/032668은 다른 부분에 화합물을 결합시키기 위한 앵커를 제공하도록 설계된 치환기를 갖는 하나의 단량체의 C2 위치에 아릴기를 갖는 비대칭 이량체 PBD 화합물을 개시한다. 표적된 접합체 내의 이들 화합물의 혼입이 또한 개시된다.

본 발명자들은 앵커를 갖는 아릴기의 필요성을 제거시키는, 표적된 접합체에서 혼입을 위한 추가의 비대칭 이량체 PBD 화합물을 개발하였다. 본 발명에서 다른 부분에 화합물을 결합시키기 위한 앵커를 제공하도록 설계된 치환기를 갖는 C2기는 프로필렌기이다. 이들 화합물은 합성이 용이할 수 있고, 이들의 용도, 특히 이의 생물학적 특성 및 접합체의 합성, 및 이들 접합체의 생물학적 특성에서 장점을 가질 수 있다.

본 발명은 하기 화학식 I를 갖는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함한다:

화학식 I

상기 화학식에서,

X는 OH, SH, CO₂H, COH, N=C=O, NHNH₂, CONHNH₂,

및 NHR^N을 포함하는 군으로부터 선택되며, 여기서 R^N은 H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;

R^C1, R^C2 및 R^C3은 독립적으로 H 및 비치환된C₁ _-2 알킬로부터 선택되고; 또한:

R¹²는 하기로 이루어진 군으로부터 선택되며:

(ia) 할로, 니트로, 시아노, 에테르, C₁ _-7알킬, C₃ _-7 헤테로시클릴 및 비스-옥시-C₁ _-3알킬렌을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환된, C₅ _-10 아릴기;

(ib) C₁ _-5비치환된 지방족 알킬;

(ic) C₃ _-6치환된 시클로알킬;

(id) R²¹, R²² 및 R²³ 각각은 독립적으로 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되며, 여기서 R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자는 5를 초과하지 않는 것인,

;

(ie) R^25a와 R^25b 중 어느 하나가 H이며 다른 하나가 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시에서 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐에서 선택되는 것인,

;

(if) R²⁴가 H; C₁ _-3 포화된 알킬; C₂ _-3 알케닐; C₂ _-3 알키닐; 시클로프로; 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인,

;

R⁶ 및 R⁹는 독립적으로 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로로부터 선택되고;

여기서, R 및 R'는 독립적으로 선택적 치환된 C₁ _-12 알킬, C₃ _-20 헤테로시클릴및 C₅ _-20 아릴기로부터 선택되며;

R⁷은 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NHRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로에서 선택되고;

(a) R¹⁰은 H이고, R¹¹은 OH 또는 OR^A (여기서, R^A는 C₁ _-4 알킬임)이거나; 또는

(b) R¹⁰ 및 R¹¹은 이들이 결합된 질소 원자와 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나; 또는

(c) R¹⁰은 H이고, R¹¹은 SO_zM (여기서, z는 2 또는 3이고, M은 1가의 약학적으로 허용가능한 양이온임)이고;

R"는 사슬에 하나 이상의 헤테로 원자, 예컨대 O, S, NR^N2(여기서 R^N2는 H 또는 C₁ _-4 알킬임) 및/또는 방향족 고리, 예컨대 벤젠 또는 피리딘이 개재할 수 있는 C_3-12 알킬렌기이며;

Y 및 Y'는 O, S 또는 NH로부터 선택되며;

R^6', R^7', R^9'는 각각 R⁶, R⁷ 및 R⁹와 동일한 기로부터 선택되고, R^10' 및 R^11'는 R¹⁰ 및 R¹¹과 동일하며, 여기서 R¹¹ 및 R^11'가 SO_zM일 경우, M은 2가의 약학적으로 허용가능한 양이온을 나타낼 수 있다.

본 발명의 제2 측면은 증식성 질환의 치료를 위한 약제의 제조에서의 본 발명의 제1 측면의 화합물의 용도를 제공한다. 제2 측면은 또한 증식성 질환의 치료에 사용하기 위한 본 발명의 제1 측면의 화합물을 제공한다.

당업자는 후보 접합체(conjugate)가 임의의 특정 세포 유형에 대한 증식성 병태를 치료하는지 여부를 용이하게 결정할 수 있다. 예를 들어, 특정 화합물에 의해 제공된 활성을 분석하는 데에 편리하게 사용될 수 있는 분석이 하기 실시예에 기재된다.

본 발명의 제3 측면은 하기 화학식 II의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 포함한다:

화학식 II

상기 화학식에서,

R²는 하기 화학식 II의 구조를 가지며:

상기 화학식에서,

X는 OH, SH, CO₂H, COH, N=C=O, NHNH₂, CONHNH₂,

,

및 NHR^N을 포함하는 군으로부터 선택되며, 여기서 R^N은 H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고,

R¹²는 하기로 이루어진 군으로부터 선택되며:

(ib) C₁ _-5비치환된 지방족 알킬;

(ic) C₃ _-6치환된 시클로알킬;

(id) R²¹, R²² 및 R²³ 각각이 독립적으로 H, C₁ _-3 포환된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되며 - R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자는 5를 초과하지 않는 것인,

;

(ie) R^25a와 R^25b 중 어느 하나가 H이며, 다른 하나가 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인,

; 및

(if) R²⁴가 H, C₁ _-3 포화된 알킬; C₂ _-3 알케닐; C₂ _-3 알키닐; 시클로프로필; 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인,

;

R⁷은 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NHRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로로부터 선택되고;

(a) R¹⁰은 카르바메이트 질소 보호기이고, R¹¹은 O-Prot^O이고, 여기서 Prot^O는 산소 보호기이거나; 또는

(b) R¹⁰은 헤미아민(hemi-aminal) 질소 보호기이고, R¹¹은 옥소기이며;

R"는 사슬에 하나 이상의 헤테로 원자, 예컨대 O, S, NR^N2(식 중, R^N2는 H 또는 C₁ _-4 알킬임) 및/또는 방향족 고리, 예컨대 벤젠 또는 피리딘이 개재할 수 있는 C_3-12 알킬렌기이고;

Y 및 Y'는 O, S 또는 NH로부터 선택되고;

R^6', R^7', R^9'는 각각 R⁶, R⁷ 및 R⁹와 동일한 기로부터 선택되고, R^10' 및 R^11'은 R¹⁰ 및 R¹¹과 동일하다.

본 발명의 제4 측면은 이민 결합의 탈보호에 의해 화학식 II의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물로부터 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 제조하는 방법을 포함한다.

본 발명의 비대칭 이량체 PBD 화합물은 대칭 이량체 PBD 화합물의 제조에 이전에 이용되었던 것들과는 상이한 전략에 의해 제조된다. 특히, 본 발명자들은 개별 방법의 단계에서 각각의 C2 치환기를 대칭 PBD 이량체 코어에 첨가하는 것을 포함하는 방법을 개발하였다. 따라서, 본 발명의 제5 측면은 하기 기재된 방법의 단계 중 적어도 하나 이상을 포함하는, 본 발명의 제1 또는 제3 측면의 화합물의 제조 방법을 제공한다.

제6 측면에서, 본 발명은 표적 제제에 연결된 PBD의 이량체를 포함하는 접합체에 관한 것이며, 여기서 PBD 이량체는 화학식 I, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물의 이량체이다(상기).

일부 실시양태에서, 접합체는 하기 화학식 III 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 갖는다:

여기서 L은 리간드 단위(즉, 표적화 제제)이며, LU는 링커 단위이고 D는 PBD 이량체인 약물 단위이다(하기 참조). 아래첨자 p는 1부터 20까지의 정수이다. 따라서, 접합체는 링커 단위에 의해 적어도 하나의 약물 단위에 공유결합으로 연결된 리간드 단위를 포함한다. 하기에 더욱 자세히 기술되는, 리간드 단위는 표적 부분에 결합하는 표적화 제제이다. 리간드 단위는 예를 들어, 구체적으로 세포 성분(세포 결합제) 또는 관심의 다른 표적 분자에 결합할 수 있다. 따라서, 본 발명은 예를 들어, 다양한 암 및 자가 면역 질환의 치료를 위한 방법을 또한 제공한다. 이들 방법은 리간드 단위가 표적 분자에 특이적으로 결합하는 표적화 제제인 접합체를 사용하는 것을 포함한다. 리간드 단위는 예를 들어, 항체, 항체의 항원-결합 단편과 같은 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드, 또는 Fc 융합 단백질과 같은 다른 결합 제제일 수 있다.

본 발명의 접합체에서, PBD 이량체 D는 X가 *-O-⁺, *-S-⁺, *-CO₂-⁺, *-CO-⁺, *-NH(C=O)-⁺, *-NHNH-⁺, *-CONHNH-⁺,

를 포함하는 군으로부터 선택되는 것을 제외하고, 화학식 I, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물의 것이며, 여기서 R^N은H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고, 별표는 약물 단위의 나머지에 부착 지점을 나타내며, 물결선 또는 ⁺는 링커 단위에 부착 지점을 나타낸다.

약물 로딩은 리간드 단위(예컨대 항체) 당 약물 분자의 수인 p로 나타낸다. 약물 로딩은 리간드 단위(예컨대 Ab 또는 mAb) 당 1 내지 20개 범위의 약물 단위(D)일 수 있다. 조성물에서, p는 조성물 중 접합체의 평균 약물 로딩을 나타내며, p는 1 내지 20의 범위이다.

일부 실시양태에서, p는 리간드 단위 당 약 1개 내지 약 8개의 약물 단위이다. 일부 실시양태에서, p는 1이다. 일부 실시양태에서, p는 2이다. 일부 실시양태에서, p는 리간드 단위 당 약 2개 내지 약 8개의 약물 단위이다. 일부 실시양태에서, p는 리간드 단위 당 약 2개 내지 약 6개, 2개 내지 약 5개, 또는 2개 내지 약 4개의 약물 단위이다. 일부 실시양태에서, p는 리간드 단위 당 약 2개, 약 4개, 약 6개 또는 약 8개의 약물 단위이다.

접합 반응 유래의 조제물 중 리간드 단위 당 약물 단위의 평균 수는 질량 분석, ELISA 분석, 및 HPLC와 같은 통상적인 수단으로 특성화할 수 있다. p에 관한 접합체의 정량적 분포도 또한 결정할 수 있다. 일부 경우에, 다른 약물 로딩을 갖는 접합체로부터, p가 특정 값인 균질한 접합체의 분리, 정제 및 특성화는 역상 HPLC 또는 전기영동과 같은 수단으로 달성할 수 있다.

제7 측면에서, 본 발명은 링크 단위에 연결된 PBD의 이량체(상기 참조)를 포함하는 링커-약물 화합물(즉, 약물-링커)에 관한 것이다. 이들 약물-링커는 표적화 제제에 연결된 PBD의 이량체를 포함하는 접합체의 합성을 위한 중간체로서 사용될 수 있다.

이들 약물-링커는 하기 화학식 V 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 갖는다:

상기 식에서,

LU는 링커 단위이고, D는 PBD 이량체인 약물 단위이다.

본 발명의 약물-링커에서, PBD 이량체 D는 X가 *-O-^q, *-S-^q, *-CO₂-^q, *-CO-^q, *-NH(C=O)-^q, *-NHNH-^q, *-CONHNH-^q, 화학식 I,

를 포함하는 군으로부터 선택되는 것을 제외하고, 화학식 I, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물의 것이며, 여기서 R^N은H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고, 별표는 약물 단위의 나머지에 부착 지점을 나타내며, 물결선 또는 ^q는 링커 단위에 부착 지점을 나타낸다.

정의

약학적으로 허용가능한 양이온

약학적으로 허용가능한 1가 및 2가 양이온의 예는 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌[Berge, et al ., J. Pharm . Sci ., 66, 1-19 (1977)]에 논의되어 있다.

약학적으로 허용가능한 양이온은 무기 또는 유기 양이온일 수 있다.

약학적으로 허용가능한 1가 무기 양이온의 예는 Na⁺ 및 K⁺와 같은 알칼리 금속 이온을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 약학적으로 허용가능한 2가 무기 양이온의 예는 Ca² ⁺ 및 Mg² ⁺와 같은 알칼리 토금속 양이온을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 약학적으로 허용가능한 유기 양이온의 예는 암모늄 이온(즉, NH₄ ⁺) 및 치환된 암모늄 이온(예컨대 NH₃R⁺, NH₂R₂ ⁺, NHR₃ ⁺, NR₄ ⁺)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 일부 적절한 치환된 암모늄 이온의 예는 에틸아민, 디에틸아민, 디시클로헥실아민, 트리에틸아민, 부틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진, 벤질아민, 페닐벤질아민, 콜린, 멜구민 및 트로메타민 뿐 아니라, 리신 및 아르기닌과 같은 아미노산으로부터 유도된 것들이다. 통상적인 4차 암모늄 이온의 예는 N(CH₃)₄ ⁺이다.

치환기

본 명세서에서 사용된 바와 같은 표현 "선택적으로 치환된"은 비치환될 수 있거나 또는 치환될 수 있는 모 기(parent group)에 관한 것이다.

달리 명시되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 용어 "치환된"은 하나 이상의 치환기를 갖는 모 기에 관한 것이다. 용어 "치환기"는 본 명세서에서 통상적인 의미로 사용되며, 모 기에 공유 결합되거나 또는 적절한 경우 모 기에 융합된 화학적 부분을 지칭한다. 매우 다양한 치환기가 공지되어 있으며, 이를 형성시키는 방법 및 다양한 모 기에 도입하는 방법도 또한 잘 알려져 있다.

치환기의 예를 하기에 더욱 상세히 설명한다.

C₁ _-12 알킬: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₁ _-12 알킬"은 지방족 또는 지환족일 수 있고 포화 또는 불포화(예컨대 부분 불포화, 완전 불포화)될 수 있는, 1 내지 12 개의 탄소 원자를 갖는 탄화수소 화합물의 탄소 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "C₁ _-4 알킬"은 지방족 또는 지환족일 수 있고, 포화 또는 불포화(예컨대 부분 불포화, 완전 불포화)될 수 있는, 1 내지 4개 탄소 원자를 갖는 탄화수소 화합물의 탄소 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이다. 따라서, 용어 "알킬"은 하기에 논의되는 하위 부류 알케닐, 알키닐, 시클로알킬 등을 포함한다.

포화 알킬기의 예는 메틸(C₁), 에틸(C₂), 프로필(C₃), 부틸(C₄), 펜틸(C₅), 헥실(C₆) 및 헵틸(C₇)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포화 선형 알킬기의 예는 메틸(C₁), 에틸(C₂), n-프로필(C₃), n-부틸(C₄), n-펜틸(아밀)(C₅), n-헥실(C₆) 및 n-헵틸(C₇)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포화 분지쇄형 알킬기의 예는 이소-프로필(C₃), 이소-부틸(C₄), 섹(sec)-부틸(C₄), 터트(tert)-부틸(C₄), 이소-펜틸(C₅) 및 네오-펜틸(C₅)을 포함한다.

C₂ _-12 알케닐: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₂ _-12 알케닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 알킬기에 관한 것이다.

불포화 알케닐기의 예는, 에테닐(비닐, -CH=CH₂), 1-프로페닐(-CH=CH-CH₃), 2-프로페닐(알릴, -CH-CH=CH₂), 이소프로페닐(1-메틸비닐, -C(CH₃)=CH₂), 부테닐(C₄), 펜테닐(C₅), 및 헥세닐(C₆)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

C₂ _-12 알키닐: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₂ _-12 알키닐"은 하나 이상의 탄소-탄소 삼중 결합을 갖는 알킬기에 관한 것이다.

불포화 알키닐기의 예는 에티닐(-C≡CH) 및 2-프로피닐(프로파르길, -CH₂-C≡CH)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

C₃ _-12 시클로알킬: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₃ _-12 시클로알킬"은 역시 시클릴기인 알킬기; 환식(cyclic) 탄화수소(환식탄소) 화합물의 지환족 고리 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이며, 즉 상기 부분은 3 내지 7 개의 고리 원자를 비롯한, 3 내지 7 개의 탄소 원자를 갖는다.

시클로알킬기의 예는 하기로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다:

포화 단환식 탄화수소 화합물: 시클로프로판(C₃), 시클로부탄(C₄), 시클로펜탄(C₅), 시클로헥산(C₆), 시클로헵탄(C₇), 메틸시클로프로판(C₄), 디메틸시클로프로판(C₅), 메틸시클로부탄(C₅), 디메틸시클로부탄(C₆), 메틸시클로펜탄(C₆), 디메틸시클로펜탄(C₇) 및 메틸시클로헥산(C₇);

불포화 단환식 탄화수소 화합물: 시클로프로펜(C₃), 시클로부텐(C₄), 시클로펜텐(C₅), 시클로헥센(C₆), 메틸시클로프로펜(C₄), 디메틸시클로프로펜(C₅), 메틸시클로부텐(C₅), 디메틸시클로부텐(C₆), 메틸시클로펜텐(C₆), 디메틸시클로펜텐(C₇) 및 메틸시클로헥센(C₇); 및

포화 복소환식 탄화수소 화합물: 노르카란(C₇), 노르피난(C₇), 노르보르난(C₇).

C₃ _-20 헤테로시클릴: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₃ _-20 헤테로시클릴"은 복소환식 화합물의 고리 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이며, 부분은 1 내지 10 개가 고리 헤테로 원자인 3 내지 20 개의 고리 원자를 갖는다. 바람직하게는, 각각의 고리는 1 내지 4 개가 고리 헤테로 원자인 3 내지 7 개의 고리 원자를 갖는다.

본 문맥에서, 접두사(예컨대 C₃ _-20, C₃ _-7, C₅ _-6 등)는 탄소 원자던지 헤테로 원자던지 간에 고리 원자의 수 또는 고리 원자의 수의 범위를 지칭한다. 예를 들어, 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₅ _- ₆헤테로시클릴"은 5 또는 6 개의 고리 원자를 갖는 헤테로시클릴기에 관한 것이다.

단환식 헤테로시클릴기의 예는 하기로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다:

N₁: 아지리딘(C₃), 아제티딘(C₄), 피롤리딘(테트라하이드로피롤)(C₅), 피롤린(예컨대, 3-피롤린, 2,5-디하이드로피롤)(C₅), 2H-피롤 또는 3H-피롤(이소피롤, 이소아졸)(C₅), 피페리딘(C₆), 디하이드로피리딘(C₆), 테트라하이드로피리딘(C₆), 아제핀(C₇);

O₁: 옥시란(C₃), 옥세탄(C₄), 옥솔란(테트라하이드로푸란)(C₅), 옥솔(디하이드로푸란)(C₅), 옥산(테트라하이드로피란)(C₆), 디하이드로피란(C₆), 피란(C₆), 옥세핀(C₇);

S₁: 티이란(C₃), 티에탄(C₄), 티올란(테트라하이드로티오펜)(C₅), 티안(테트라하이드로티오피란)(C₆), 티에판(C₇);

O₂: 디옥솔란(C₅), 디옥산(C₆) 및 디옥세판(C₇);

O₃: 트리옥산(C₆);

N₂: 이미다졸리딘(C₅), 피라졸리딘(디아졸리딘)(C₅), 이미다졸린(C₅), 피라졸린(디하이드로피라졸)(C₅), 피페라진(C₆);

N₁O₁: 테트라하이드로옥사졸(C₅), 디하이드로옥사졸(C₅), 테트라하이드로이속사졸(C₅), 디하이드로이속사졸(C₅), 모르폴린(C₆), 테트라하이드로옥사진(C₆), 디하이드로옥사진(C₆), 옥사진(C₆);

N₁S₁: 티아졸린(C₅), 티아졸리딘(C₅), 티오모르폴린(C₆);

N₂O₁: 옥사디아진(C₆);

O₁S₁: 옥사티올(C₅) 및 옥사티안(티옥산)(C₆); 및

N₁O₁S₁: 옥사티아진(C₆).

치환된 단환식 헤테로시클릴기의 예는 환식 형태의 당류로부터 유도된 것들, 예를 들어 아라비노푸라노오스, 릭소푸라노오스(lyxofuranose), 리보푸라노오스 및 크실로푸란스 같은 푸라노오스(C₅), 및 알로피라노오스, 알트로피라노오스, 글루코피라노오스, 만노피라노오스, 글루오피라노오스, 이도피라노오스, 갈락토피라노오스 및 탈로피라노오스와 같은 피라노오스(C₆)를 포함한다.

C₅ _-20 아릴: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₅ _-20 아릴"은 방향족 화합물의 방향족 고리 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이며, 상기 부분은 3 내지 20 개의 고리 원자를 갖는다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "C₅ _-7 아릴"은 1가 부분이 5 내지 7 개의 고리 원자를 갖는 방향족 화합물의 방향족 고리 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이며, 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "C₅ _-10 아릴"은 1가 부분이 5 내지 10 개의 고리 원자를 갖는 방향족 화합물의 방향족 고리 원자로부터 수소 원자를 제거하여 얻어진 1가 부분에 관한 것이다. 바람직하게는, 각각의 고리는 5 내지 7 개의 고리 원자를 갖는다.

본 문맥에서, 접두사(예컨대 C₃ _-20, C₅ _-7, C₅ _-6,C₅ _-10 등)는 탄소 원자이던 헤테로 원자이던 간에 고리 원자의 수 또는 고리 원자의 수의 범위를 지칭한다. 예컨대, 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₅ _-6 아릴"은 5 또는 6 개의 고리 원자를 갖는 아릴기에 관한 것이다.

고리 원자는 "카르보아릴기"에서와 같이 모두 탄소 원자일 수 있다.

카르보아릴기의 예는 벤젠(즉, 페닐)(C₆), 나프탈렌(C₁₀), 아줄렌(C₁₀), 안트라센(C₁₄), 페난트렌(C₁₄), 나프타센(C₁₈) 및 피렌(C₁₆)으로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

적어도 하나가 방향족 고리인 융합 고리를 포함하는 아릴기의 예는 인단(예컨대 2,3-디하이드로-1H-인덴)(C₉), 인덴(C₉), 이소인덴(C₉), 테트랄린(1,2,3,4-테트라하이드로나프탈렌)(C₁₀), 아세나프텐(C₁₂), 플루오렌(C₁₃), 페날렌(C₁₃), 아세페난트렌(C₁₅) 및 아세안트렌(C₁₆)으로부터 유도된 기를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

대안적으로, 고리 원자는 "헤테로아릴기"에서와 같이 하나 이상의 헤테로 원자를 포함할 수 있다. 단환식 헤테로아릴기의 예는 하기로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다:

N₁: 피롤(아졸)(C₅), 피리딘(아진)(C₆);

O₁: 푸란(옥솔)(C₅);

S₁: 티오펜(티올)(C₅);

N₁O₁: 옥사졸(C₅), 이속사졸(C₅), 이속사진(C₆);

N₂O₁: 옥사디아졸(푸라잔)(C₅);

N₃O₁: 옥사트리아졸(C₅);

N₁S₁: 티아졸(C₅), 이소티아졸(C₅);

N₂: 이미다졸(1,3-디아졸)(C₅), 피라졸(1,2-디아졸)(C₅), 피리다진(1,2-디아진)(C₆), 피리미딘(1,3-디아진)(C₆)(예컨대 사이토신, 티민, 우라실), 피라진(1,4-디아진)(C₆);

N₃: 트리아졸(C₅), 트리아진(C₆); 및

N₄: 테트라졸(C₅).

융합 고리를 포함하는 헤테로아릴의 예는 하기를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다:

벤조푸란(O₁), 이소벤조푸란(O₁), 인돌(N₁), 이소인돌(N₁), 인돌리진(N₁), 인돌린(N₁), 이소인돌린(N₁), 푸린(N₄)(예컨대 아데닌, 구아닌), 벤즈이미다졸(N₂), 인다졸(N₂), 벤즈옥사졸(N₁O₁), 벤즈이속사졸(N₁O₁), 벤조디옥솔(O₂), 벤조푸란(N₂O₁), 벤조트리아졸(N₃), 벤조티오푸란(S₁), 벤조티아졸(N₁S₁), 벤조티아디아졸(N₂S)로부터 유도된 C₉(2개의 융합 고리를 가짐);

크로멘(O₁), 이소크로멘(O₁), 크로만(O₁), 이소크로만(O₁), 벤조디옥산(O₂), 퀴놀린(N₁), 이소퀴놀린(N₁), 퀴놀리진(N₁), 벤족사진(N₁O₁), 벤조디아진(N₂), 피리도피리딘(N₂), 퀴녹살린(N₂), 퀴나졸린(N₂), 신놀린(N₂), 프탈라진(N₂), 나프티리딘(N₂), 프테리딘(N₄)으로부터 유도된 C₁₀(2개의 융합 고리를 가짐);

벤조디아제핀(N₂)으로부터 유도된 C₁₁(2개의 융합 고리를 가짐);

카르바졸(N₁), 디벤조푸란(O₁), 디벤조티오펜(S₁), 카르볼린(N₂), 페리미딘(N₂), 피리도인돌(N₂)로부터 유도된 C₁₃(3개의 융합 고리를 가짐); 및

아크리딘(N₁), 크산텐(O₁), 티오크산텐(S₁), 옥산트렌(O₂), 페녹사티인(O₁S₁), 페나진(N₂), 페녹사진(N₁O₁), 페노티아진(N₁S₁), 티안트렌(S₂), 페난트리딘(N₁), 페난트롤린(N₂), 페나진(N₂)으로부터 유도된 C₁₄(3개의 융합 고리를 가짐).

상기 기들은 단독이던지 또는 다른 치환기의 일부이던 간에 그 자체로 선택적으로 그 자신 및 하기 열거한 추가의 치환기로부터 선택되는 하나 이상의 기로 치환될 수 있다.

할로: -F, -Cl, -Br 및 -I.

히드록시: -OH.

에테르: -OR, 여기서 R은 에테르 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기(하기 논의되는 C₁ _-7 알콕시기로도 지칭됨), C₃ _-20 헤테로시클릴기(C₃ _-20 헤테로시클릴옥시기로도 지칭됨) 또는 C₅ _-20 아릴기(C₅ _-20 아릴옥시기로도 지칭됨), 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임.

알콕시: -OR, 여기서 R은 알킬기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기임. C₁ _-7 알콕시기의 예는 -OMe(메톡시), -OEt(에톡시), -O(nPr)(N-프로폭시), -O(iPr)(이소프로폭시), -O(nBu)(N-부톡시), -O(sBu)(sec-부톡시), -O(iBu)(이소부톡시) 및 -O(tBu)(터트-부톡시)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아세탈: -CH(OR¹)(OR²), 여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아세탈 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기, 또는 "환식" 아세탈기의 경우, R¹ 및 R²는 이들이 부착된 2개의 산소 원자 및 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 4 내지 8 개의 고리 원자를 갖는 복소환식 고리를 형성함. 아세탈기의 예는 -CH(OMe)₂, -CH(OEt)₂ 및 -CH(OMe)(OEt)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

헤미아세탈: -CH(OH)(OR¹), 여기서 R¹은 헤미아세탈 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 헤미아세탈기의 예는 -CH(OH)(OMe) 및 -CH(OH)(OEt)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

케탈: -CR(OR¹)(OR²), 여기서 R¹ 및 R²는 아세탈에 대해 정의된 바와 같고, R은 수소 이외의 케탈 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 케탈기의 예는 -C(Me)(OMe)₂, -C(Me)(OEt)₂, -C(Me)(OMe)(OEt), -C(Et)(OMe)₂, -C(Et)(OEt)₂ 및 -C(Et)(OMe)(OEt)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

헤미케탈: -CR(OH)(OR¹), 여기서 R¹은 헤미아세탈에 대해 정의된 바와 같고, R은 수소 이외의 헤미케탈 치환기, 예컨대 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C_5-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 헤미아세탈기의 예는 -C(Me)(OH)(OMe), -C(Et)(OH)(OMe), -C(Me)(OH)(OEt) 및 -C(Et)(OH)(OEt)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

옥소(케토, -온): =O.

티온(티오케톤): =S.

이미노(이민): =NR, 여기서 R은 이미노 치환기, 예를 들어 수소, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 수소 또는 C₁ _-7 알킬기임. 에스테르기의 예는 =NH, =NMe, =NEt 및 =NPh를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포르밀(카르발데하이드, 카르복스알데하이드): -C(=O)H.

아실(케토): -C(=O)R, 여기서 R은 아실 치환기, 예컨대 C₁ _-7 알킬기(C₁ _-7 알킬아실 또는 C₁ _-7 알카노일로도 지칭됨), C₃ _-20 헤테로시클릴기(C₃ _-20 헤테로시클릴아실로도 지칭됨) 또는 C₅ _-20 아릴기(C₅ _-20 아릴아실로도 지칭됨), 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 아실기의 예는 -C(=O)CH₃(아세틸), -C(=O)CH₂CH₃(프로피오닐), -C(=O)C(CH₃)₃(t-부티릴) 및 -C(=O)Ph(벤조일, 페논)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

카르복시(카르복실산): -C(=O)OH.

티오카르복시(티오카르복실산): -C(=S)SH.

티올로카르복시(티올로카르복실산): -C(=O)SH.

티오노카르복시(티오노카르복실산): -C(=S)OH.

이미드산: -C(=NH)OH.

하이드록삼산: -C(=NOH)OH.

에스테르(카르복실레이트, 카르복실산 에스테르, 옥시카르보닐): -C(=O)OR,여기서 R은 에스테르 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 에스테르기의 예는 -C(=O)OCH₃, -C(=O)OCH₂CH₃, -C(=O)OC(CH₃)₃ 및 -C(=O)OPh를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아실옥시(역 에스테르): -OC(=O)R, 여기서 R은 아실옥시 치환기, 예를 들어 C_1-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 아실옥시기의 예는 -OC(=O)CH₃(아세톡시), -OC(=O)CH₂CH₃, -OC(=O)C(CH₃)₃, -OC(=O)Ph 및 -OC(=O)CH₂Ph를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

옥시카르보일옥시: -OC(=O)OR, 여기서 R은 에스테르 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 에스테르기의 예는 -OC(=O)OCH₃, -OC(=O)OCH₂CH₃, -OC(=O)OC(CH₃)₃ 및 -OC(=O)OPh를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아미노: -NR¹R²,여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아미노 치환기, 예를 들어 수소, C₁ _-7 알킬기(C₁ _-7 알킬아미노 또는 디-C₁ _-7 알킬아미노로도 지칭됨), C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 H 또는 C₁ _-7 알킬기이거나, 또는 "환식" 아미노기의 경우, R¹ 및 R²는 이들이 부착되는 질소 원자와 함께 4 내지 8 개의 고리 원자를 갖는 복소환식 고리를 형성함. 아미노기는 1차(-NH₂), 2차(-NHR¹) 또는 3차(-NHR¹R²)일 수 있고, 양이온 형태에서는 4차(-⁺NR¹R²R³)일 수 있다. 아미노기의 예는 -NH₂, -NHCH₃, -NHC(CH₃)₂, -N(CH₃)₂, -N(CH₂CH₃)₂ 및 -NHPh를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 환식 아미노기의 예는 아지리디노, 아제티디노, 피롤리디노, 피페리디노, 피페라지노, 모르폴리노 및 티오모르폴리노를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아미도(카르바모일, 카르바밀, 아미노카르보닐, 카르복사미드): -C(=O)NR¹R², 여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기임. 아미도기의 예는 -C(=O)NH₂, -C(=O)NHCH₃, -C(=O)N(CH₃)₂, -C(=O)NHCH₂CH₃ 및 -C(=O)N(CH₂CH₃)₂ 뿐 아니라, R¹ 및 R²가 이들이 부착된 질소 원자와 함께 예를 들어 피페리디노카르보닐, 모르폴리노카르보닐, 티오모르폴리노카르보닐 및 피페라지노카르보닐에서와 같이 복소환식 구조를 형성하는 아미도기도 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

티오아미도(티오카르바밀): -C(=S)NR¹R²,여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기임. 아미도기의 예는 -C(=S)NH₂, -C(=S)NHCH₃, -C(=S)N(CH₃)₂ 및 -C(=S)NHCH₂CH₃을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아실아미도(아실아미노): -NR¹C(=O)R², 여기서 R¹은 아미드 치환기, 예를 들어 수소, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 수소 또는 C₁ _-7 알킬기이고, R²는 아실 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _- ₂₀아릴기, 바람직하게는 수소 또는 C₁ _-7 알킬기임. 아실아미드기의 예는 -NHC(=O)CH₃, -NHC(=O)CH₂CH₃ 및 -NHC(=O)Ph를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. R¹ 및 R²는 함께 예를 들어 숙신이미딜, 말레이미딜 및 프탈이미딜에서와 같이 환식 구조를 형성할 수 있다:

아미노카르보닐옥시: -OC(=O)NR¹R², 여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기임. 아미노카르보닐옥시기의 예는 -OC(=O)NH₂, -OC(=O)NHMe, -OC(=O)NMe₂ 및 -OC(=O)NEt₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

우레이도: -N(R¹)CONR²R³,여기서 R² 및 R³은 독립적으로 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기이고, R¹은 우레이도 치환기, 예를 들어 수소, C₁ _-7 알킬기, C_3-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 수소 또는 C₁ _-7 알킬기임. 우레이도기의 예는 -NHCONH₂, -NHCONHMe, -NHCONHEt, -NHCONMe₂, -NHCONEt₂, -NMeCONH₂, -NMeCONHMe, -NMeCONHEt, -NMeCONMe₂ 및 -NMeCONEt₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

구아니디노: -NH-C(=NH)NH₂.

테트라졸일: 4개의 질소 원자 및 1개의 탄소 원자를 갖는 5원 방향족 고리.

이미노: =NR, 여기서 R은 이미노 치환기, 예를 들어 수소, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 H 또는 C₁ _-7 알킬기임. 이미노기의 예는 =NH, =NMe 및 =NEt를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아미딘(아미디노): -C(=NR)NR², 여기서 각각의 R은 아미딘 치환기, 예컨대 수소, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 H 또는 C₁ _-7 알킬기임. 아미딘기의 예는 -C(=NH)NH₂, -C(=NH)NMe₂ 및 -C(=NMe)NMe₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

니트로: -NO₂.

니트로소: -NO.

아지도: -N₃.

시아노(니트릴, 카르보니트릴): -CN.

이소시아노: -NC.

시아네이토: -OCN.

이소시아네이토: -NCO.

티오시아노(티오시아네이토): -SCN.

이소티오시아노(이소티오시아네이토): -NCS.

설프하이드릴(티올, 머캅토): -SH.

티오에테르(설피드): -SR, 여기서 R은 티오에테르 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기(C₁ _-7 알킬티오기로도 지칭됨), C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. C₁ _-7 알킬티오기의 예는 -SCH₃ 및 -SCH₂CH₃을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

디설파이드: -SS-R, 여기서 R은 디설파이드 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C_3-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기(본 명세서에서는 C_1-7 알킬 디설파이드로도 지칭됨)임. C₁ _-7 알킬 디설파이드기의 예는 -SSCH₃ 및 -SSCH₂CH₃을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설핀(설피닐, 설폭시드): -S(=O)R, 여기서 R은 설핀 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설핀기의 예는 -S(=O)CH₃ 및 -S(=O)CH₂CH₃을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설폰(설포닐): -S(=O)₂R, 여기서 R은 설폰 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C_3-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 예를 들어 플루오르화 또는 퍼플루오르화 C_1-7 알킬기를 포함하는 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설폰기의 예는 -S(=O)₂CH₃(메탄설포닐, 메실), -S(=O)₂CF₃(트리플일), -S(=O)₂CH₂CH₃(에실), -S(=O)₂C₄F₉(노나플일), -S(=O)₂CH₂CF₃(트레실), -S(=O)₂CH₂CH₂NH₂(타우릴), -S(=O)₂Ph(페닐설포닐, 베실), 4-메틸페닐설포닐(토실), 4-클로로페닐설포닐(클로실), 4-브로모페닐설포닐(브로실), 4-니트로페닐(노실), 2-나프탈렌설포네이트(납실) 및 5-디메틸아미노-나프탈렌-1-일설포네이트(단실)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설핀산(설피노): -S(=O)OH, -SO₂H.

설폰산(설포): -S(=O)₂OH, -SO₃H.

설피네이트(설핀산 에스테르): -S(=O)OR, 여기서 R은 설피네이트 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설피네이트기의 예는 -S(=O)OCH₃(메톡시설피닐; 메틸 설피네이트) 및 -S(=O)OCH₂CH₃(에톡시설피닐; 에틸 설피네이트)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설포네이트(설폰산 에스테르): -S(=O)₂OR, 여기서 R은 설포네이트 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설포네이트기의 예는 -S(=O)₂OCH₃(메톡시설포닐; 메틸 설포네이트) 및 -S(=O)₂OCH₂CH₃(에톡시설포닐; 에틸 설포네이트)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설피닐옥시: -OS(=O)R, 여기서 R은 설피닐옥시 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설피닐옥시기의 예는 -OS(=O)CH₃ 및 -OS(=O)CH₂CH₃을포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설포닐옥시: -OS(=O)₂R, 여기서 R은 설포닐옥시 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설포닐옥시기의 예는 -OS(=O)₂CH₃(메실레이트) 및 -OS(=O)₂CH₂CH₃(에실레이트)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설페이트: -OS(=O)₂OR, 여기서 R은 설페이트 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C_3-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설페이트기의 예는 -OS(=O)₂OCH₃ 및 -SO(=O)₂OCH₂CH₃을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설파밀(설파모일; 설핀산 아미드; 설핀아미드): -S(=O)NR¹R², 여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기임. 설파밀기의 예는 -S(=O)NH₂, -S(=O)NH(CH₃), -S(=O)N(CH₃)₂, -S(=O)NH(CH₂CH₃), -S(=O)N(CH₂CH₃)₂ 및 -S(=O)NHPh를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설폰아미도(설핀아모일; 설폰산 아미드; 설폰아미드): -S(=O)₂NR¹R², 여기서 R¹ 및 R²는 독립적으로 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기임. 설폰아미도기의 예는 -S(=O)₂NH₂, -S(=O)₂NH(CH₃), -S(=O)₂N(CH₃)₂, -S(=O)₂NH(CH₂CH₃), -S(=O)₂N(CH₂CH₃)₂ 및 -S(=O)₂NHPh를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설파미노: -NR¹S(=O)₂OH, 여기서 R¹은 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기임. 설파미노기의 예는 -NHS(=O)₂OH 및 -N(CH₃)S(=O)₂OH를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설폰아미노: -NR¹S(=O)₂R, 여기서 R¹은 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기이고, R은 설폰아미노 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설폰아미노기의 예는 -NHS(=O)₂CH₃ 및 -N(CH₃)S(=O)₂C₆H₅를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

설핀아미노: -NR¹S(=O)R, 여기서 R¹은 아미노기에 대해 정의된 바와 같은 아미노 치환기이고, R은 설핀아미노 치환기, 예를 들어 C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기임. 설핀아미노기의 예는 -NHS(=O)CH₃ 및 -N(CH₃)S(=O)C₆H₅를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포스피노(포스핀): -PR₂, 여기서 R은 포스피노 치환기, 예를 들어 -H, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 -H, C₁ _-7 알킬기 또는 C_5-20 아릴기임. 포스피노기의 예는 -PH₂, -P(CH₃)₂, -P(CH₂CH₃)₂, -P(t-Bu)₂ 및 -P(Ph)₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포스포: -P(=O)₂.

포스피닐(산화포스핀): -P(=O)R₂, 여기서 R은 포스피닐 치환기, 예를 들어 C_1-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 C₁ _-7 알킬기 또는 C_5-20 아릴기임]. 포스피닐기의 예는 -P(=O)(CH₃)₂, -P(=O)(CH₂CH₃)₂, -P(=O)(t-Bu)₂ 및 -P(=O)(Ph)₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포스폰산(포스포노): -P(=O)(OH)₂.

포스포네이트(포스포노 에스테르): -P(=O)(OR)₂, 여기서 R은 포스포네이트 치환기, 예를 들어 -H, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 -H, C₁ _-7 알킬기 또는 C₅ _-20 아릴기임. 포스포네이트기의 예는 -P(=O)(OCH₃)₂, -P(=O)(OCH₂CH₃)₂, -P(=O)(O-t-Bu)₂ 및 -P(=O)(OPh)₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

인산(포스포노옥시): -OP(=O)(OH)₂.

포스페이트(포스포노옥시 에스테르): -OP(=O)(OR)₂, 여기서 R은 포스페이트 치환기, 예를 들어 -H, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 -H, C₁ _-7 알킬기 또는 C₅ _-20 아릴기임. 포스페이트기의 예는 -OP(=O)(OCH₃)₂, -OP(=O)(OCH₂CH₃)₂, -OP(=O)(O-t-Bu)₂ 및 -OP(=O)(OPh)₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

아인산: -OP(OH)₂.

포스파이트: -OP(OR)₂, 여기서 R은 포스파이트 치환기, 예를 들어 -H, C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 -H, C₁ _-7 알킬기 또는 C_5-20 아릴기임. 포스파이트기의 예는 -OP(OCH₃)₂, -OP(OCH₂CH₃)₂, -OP(O-t-Bu)₂ 및 -OP(OPh)₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포스포르아미다이트: -OP(OR¹)-NR² ₂, 여기서 R¹ 및 R²는 포스포르아미다이트 치환기, 예를 들어 -H, (선택적으로 치환된) C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C₅ _-20 아릴기, 바람직하게는 -H, C₁ _-7 알킬기 또는 C₅ _-20 아릴기임. 포스르아미다이트기의 예는 -OP(OCH₂CH₃)-N(CH₃)₂, -OP(OCH₂CH₃)-N(i-Pr)₂ 및 -OP(OCH₂CH₂CN)-N(i-Pr)₂를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

포스포르아미데이트: -OP(=O)(OR¹)-NR² ₂,여기서 R¹ 및 R²는 포스포르아미데이트 치환기, 예를 들어 -H, (선택적으로 치환된) C₁ _-7 알킬기, C₃ _-20 헤테로시클릴기 또는 C_5-20 아릴기, 바람직하게는 -H, C₁ _-7 알킬기 또는 C₅ _-20 아릴기이다. 포스포르아미데이트기의 예는 -OP(=O)(OCH₂CH₃)-N(CH₃)₂, -OP(=O)(OCH₂CH₃)-N(i-Pr)₂ 및 -OP(=O)(OCH₂CH₂CN)-N(i-Pr)₂이다.

알킬렌

C₃ _-12 알킬렌: 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "C₃ _-12 알킬렌"은 지방족 또는 지환족일 수 있고 포화, 부분 불포화 또는 완전 불포화될 수 있는, (달리 명시되지 않는 한) 3 내지 12 개의 탄소 원자를 갖는 탄화수소 화합물의 동일한 탄소 원자로부터 둘 모두, 또는 2개의 상이한 탄소 원자 각각으로부터 하나씩, 2개의 수소 원자를 제거하여 얻어진 이좌의(bidentate) 부분에 관한 것이다. 따라서, 용어 "알킬렌"은 하기 논의되는 하위 부류인 알케닐렌, 알키닐렌, 시클로알킬렌 등을 포함한다.

선형 포화 C₃ _-12 알킬렌기의 예는 -(CH₂)_n- (여기서 n은 3 내지 12의 정수임), 예컨대 -CH₂CH₂CH₂-(프로필렌), -CH₂CH₂CH₂CH₂-(부틸렌), -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-(펜틸렌) 및 -CH₂CH₂CH₂CH-₂CH₂CH₂CH₂-(헵틸렌)를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

분지쇄형 포화 C₃ _-12 알킬렌기의 예는 -CH(CH₃)CH₂-, -CH(CH₃)CH₂CH₂-, -CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂-, -CH₂CH(CH₃)CH₂-, -CH₂CH(CH₃)CH₂CH₂-, -CH(CH₂CH₃)-, -CH(CH₂CH₃)CH₂- 및 -CH₂CH(CH₂CH₃)CH₂-를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

선형 부분 불포화 C₃ _-12 알킬렌기(C₃ _-12 알케닐렌 및 알키닐렌 기)의 예는 -CH=CH-CH₂-, -CH₂-CH=CH₂-, -CH=CH-CH₂-CH₂-, -CH=CH-CH₂-CH₂-CH₂-, -CH=CH-CH=CH-, -CH=CH-CH=CH-CH₂-, -CH=CH-CH=CH-CH₂-CH₂-, -CH=CH-CH₂-CH=CH-, -CH=CH-CH₂-CH₂-CH=CH- 및 -CH₂-C≡C-CH₂-를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

분지쇄형 부분 불포화 C₃ _-12 알킬렌기(C₃ _-12 알케닐렌 및 알키닐렌 기)의 예는 -C(CH₃)=CH-, -C(CH₃)=CH-CH₂-, -CH=CH-CH(CH₃) 및 -C≡C-CH(CH₃)-을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

지환족 포화 C₃ _-12 알킬렌기(C_3-12 시클로알킬렌)의 예는 시클로펜틸렌(예컨대 시클로펜트-1,3-일렌) 및 시클로헥실렌(예컨대 시클로헥스-1,4-일렌)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

지환족 부분 불포화 C₃ _-12 알킬렌기(C_3-12 시클로알킬렌)의 예는 시클로펜테닐렌(예컨대 4-시클로펜텐-1,3-일렌), 시클로헥세닐렌(예컨대 2-시클로헥센-1,4-일렌; 3-시클로헥센-1,2-일렌; 2,5-시클로헥사디엔-1,4-일렌)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

산소 보호기: 용어 "산소 보호기"는 히드록시기를 차폐하는 부분을 지칭하고, 이들은 당업계에 잘 알려져 있다. 다수의 적절한 기는 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌(Greene, T.W. and Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999)의 23 내지 200 페이지에 기재되어 있다. 특별히 원하는 부류는 실릴 에테르(예컨대 TMS, TBDMS), 치환된 메틸 에테르(예컨대 THP) 및 에스테르(예컨대 아세테이트)를 포함한다.

카르바메이트 질소 보호기: 용어 "카르바메이트 질소 보호기"는 이민 결합 내 질소를 차폐하는 부분에 관한 것이며, 이들은 당업계에 잘 알려져 있다. 이들 기는 하기 구조를 갖는다:

여기서 R'¹⁰은 상기 정의된 바와 같은 R이다. 다수의 적절한 기는 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌(Greene, T.W. and Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999)의 503 내지 549 페이지에 기재되어 있다.

헤미아민 질소 보호기: 용어 "헤미아민 질소 보호기"는 하기 구조를 갖는 기에 관한 것이다:

여기서 R'¹⁰은 상기 정의된 바와 같은 R이다. 다수의 적절한 기는 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌(Greene, T.W. and Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999)의 633 내지 647 페이지에 아미드 보호기로서 기재되어 있다.

접합체

본 발명은 링커 단위를 통해 리간드 단위에 연결된 PBD 이량체를 포함하는 접합체를 제공한다. 일 실시양태에서, 링커 단위는 신장 단위(Stretcher unit)(A), 특이성 단위(Specificity unit)(L¹), 및 스페이서 단위(Spacer unit)(L²)를 포함한다. 링커 단위는 일 말단에서 리간드 단위(L)에 연결되고 다른 말단에서 PBD 이량체 화합물(D)에 연결된다.

일 측면에서, 이러한 접합체는 하기 화학식 IIIa 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물로 나타낸다:

상기 식에서,

L은 리간드 단위이고;

-A¹ _a-L¹ _s-L² _y-는 링커 단위(LU)이며,

여기에서,

-A¹-은 신장 단위이고,

a는 1 또는 2이며,

L¹-은 특이성 단위이고,

s는 0 내지 12 범위의 정수이며,

-L²-는 스페이서 단위이고,

y는 0, 1 또는 2이며;

-D는 PBD 이량체이고;

p는 1 내지 20이다.

다른 측면에서, 이러한 접합체는 하기 화학식 IIIb 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물로 나타낸다:

또한 하기 화학식 IIIb로서도 도시된다:

상기 식에서

L은 리간드 단위이고;

-A¹ _a-L¹ _s-(L² _y)-는 링커 단위(LU)이며,

여기에서,

-A¹-은 신장 단위(L²)에 연결된 신장 단위이고,

a는 1 또는 2이며,

L¹ -은 신장 단위(L²)에 연결된 특이성 단위이고,

s는 0 내지 12 범위의 정수이며,

-L²-는 스페이서 단위이고,

y는 0, 1 또는 2이며;

-D는 PBD 이량체이고;

p는 1 내지 20이다.

바람직한 것

하기 바람직한 것은 상기 설명한 바와 같은 본 발명의 모든 측면에 적용될 수 있거나, 또는 단일 측면과 관련될 수 있다. 이 선호는 임의의 조합으로 함께 조합될 수 있다.

일 실시양태에서, 접합체는 하기 화학식 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 갖는다:

또는

상기 식에서, L, A¹, a, L¹ _, s, L², D, y 및 p는 상기 기재된 바와 같다.

일 실시양태에서, 리간드 단위 (L)은 표적 세포의 표면 상에서 표적 분자에 특이적으로 결합하는 세포 결합제(CBA)이다. 예시적인 화학식을 하기에 도시한다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위 (D)에 대한 부착 지점을 나타내고, CBA는 세포 결합제이며, L¹은 특이성 단위이고, A¹은 세포 결합제에 L¹을 연결하는 신장 단위이며, L²는 공유 결합이거나 자가-희생 기(self-immolative group)이거나 또는 -OC(=O)-와 함께 자가-희생 기를 형성하는 스페이서 단위이고, L²는 선택적이다. -OC(=O)-는 필요에 따라, L¹ 또는 L²의 일부인 것으로 간주될 수 있다.

다른 실시양태에서, 리간드 단위 (L)은 표적 세포의 표면 상에서 표적 분자에 특이적으로 결합하는 세포 결합제(CBA)이다. 예시적인 화학식을 하기에 도시한다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위 (D)에 대한 부착 지점을 나타내고, CBA는 세포 결합제이며, L¹은 특이성 단위이고, A¹은 세포 결합제에 L¹을 연결하는 신장 단위이며, L²는 공유 결합이거나 자가-희생 기인 스페이서 단위이고, a는 1 또는 2이며, s는 0, 1 또는 2이고, y는 0 또는 1 또는 2이다.

상기 예시된 실시양태에서, L¹은 절단가능한 특이성 단위일 수 있고, 절단되는 경우, 자가-희생 기(들)이 존재할 때, 자가-희생 기(또는 자가-희생 기들) L²를 활성화하는 "기폭제(trigger)"로서 언급될 수 있다. 특이성 단위 L¹이 절단되거나, 또는 L¹ 및 L² 사이의 결합(즉, 공유 결합)이 절단되는 경우, 자가-희생 기가 약물 단위 (D)를 방출한다.

상기 식에서, 별표는 약물 단위 (D)에 대한 부착 지점을 나타내고, CBA는 세포 결합제이며, L¹은 L²에 연결된 특이성 단위이고, A¹은 세포 결합제에 L²를 연결하는 신장 단위이며, L²는 자가-희생 기이고, a는 1 또는 2이며, s는 1 또는 2이고, y는 1 또는 2이다.

본 명세서에서 논의되는 다양한 실시양태에서, L¹ 및 L²의 특성은 광범위하게 변화할 수 있다. 이들 기는 접합체가 전달되는 부위에서의 조건에 의하여 일부 영향을 받을 수 있는 이들의 특성에 기초하여 선택한다. 특이성 단위 L¹이 절단가능한 경우, L¹의 구조 및/또는 서열은 표적 부위(예컨대 표적 세포)에 존재하는 효소의 작용으로 절단되도록 선택한다. pH의 변화(예컨대 산 또는 염기 불안정성), 온도의 변화 또는 빛 조사 시(예컨대 감광)에 절단가능한 L¹ 단위를 또한 사용할 수 있다. 환원 또는 산화 조건 하에 절단가능한 L¹ 단위를 또한 접합체에 사용할 수 있다.

일부 실시양태에서, L¹은 하나의 아미노산 또는 아미노산의 연속 서열을 포함할 수 있다. 아미노산 서열은 효소에 대한 표적 기질일 수 있다.

일 실시양태에서, L¹은 효소의 작용에 의해 절단가능하다. 일 실시양태에서, 효소는 에스터라제 또는 펩티다제이다. 예를 들어, L¹은 카텝신과 같은 리소좀 프로테아제에 의해 절단될 수 있다.

일 실시양태에서, L²는 존재하고 -C(=O)O-와 함께 자가-희생 기 또는 자가-희생 기들을 형성한다. 일부 실시양태에서, -C(=O)O-는 또한 자가-희생 기이다.

일 실시양태에서, L¹이 효소의 작용에 의해 절단가능하고 L²가 존재하는 경우, 효소는 L¹ 및 L² 사이의 결합을 절단하며, 이에 따라 자가-희생 기(들)가 약물 단위를 방출한다.

존재하는 경우, L¹ 및 L²는 하기로부터 선택되는 결합으로 연결될 수 있다:

-C(=O)NH-,

-C(=O)O-,

-NHC(=O)-,

-OC(=O)-,

-OC(=O)O-,

-NHC(=O)O-,

-OC(=O)NH-,

-NHC(=O)NH, 및

-O- (글리코시드 결합).

L²에 연결하는 L¹의 아미노기는 아미노산의 N-말단이거나 또는 예를 들어, 리신 아미노산 측쇄와 같은 아미노산 측쇄의 아미노기로부터 유래할 수 있다.

L²에 연결하는 L¹의 카르복실기는 아미노산의 C-말단이거나 또는 예를 들어, 글루탐산 아미노산 측쇄와 같은 아미노산 측쇄의 카르복실기로부터 유래할 수 있다.

L²에 연결하는 L¹의 히드록시기는 예컨대 세린 아미노산 측쇄와 같은 아미노산 측쇄의 히드록시기로부터 유래할 수 있다.

일 실시양태에서, -C(=O)O- 및 L² 는 함께 하기의 기를 형성한다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 L¹에 대한 부착 지점을 나타내며, Y는 -N(H)-, -O-, -C(=O)N(H)- 또는 -C(=O)O-이고, n은 0 내지　3이다. 페닐렌 고리는 본 명세서에 기재된 바와 같은 1개, 2개 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된다.

일 실시양태에서, Y는 NH이다.

일 실시양태에서, n은 0 또는 1이다. 바람직하게는, n은 0이다.

Y가 NH이고 n이 0인 경우, 자가-희생 기는 p-아미노벤질카르보닐 링커(PABC)로서 언급될 수 있다.

자가-희생 기는 하기에 나타낸 라인(n=0의 경우)에 따라 진행되어, 링커 내 원격(remote) 부위가 활성화되는 경우 약물 단위(즉, 비대칭 PBD)의 방출을 가능하게 할 것이다:

상기 식에서, 별표는 약물에 대한 부착을 나타내고, L^*는 링커의 나머지 부분의 활성화된 형태이며, 방출된 약물 단위는 나타내지 않았다. 이들 기는 약물로부터 활성화 부위를 분리시키는 장점을 갖는다.

다른 실시양태에서, -C(=O)O- 및 L²는 함께 하기로부터 선택된 기를 형성한다:

상기 식에서 별표, 물결선, Y 및 n은 상기 정의된 바와 같다. 각각의 페닐렌 고리는 본 명세서에 기재된 바와 같은 1개, 2개 또는 3개의 치환기로 선택적으로 치환된다. 일 실시양태에서, Y 치환기를 갖는 페닐렌 고리는 선택적으로 치환되고 Y 치환기를 갖지 않는 페닐렌 고리는 비치환된다.

다른 실시양태에서, -C(=O)O- 및 L² 는 함께 하기로부터 선택된 기를 형성한다:

상기 식에서, 별표, 물결선, Y 및 n은 상기 정의된 바와 같고, E는 O, S 또는 NR이며, D는 N, CH, 또는 CR이고, F는 N, CH, 또는 CR이다.

일 실시양태에서, D는 N이다.

일 실시양태에서, D는 CH이다.

일 실시양태에서, E는 O 또는 S이다.

일 실시양태에서, F는 CH이다.

바람직한 실시양태에서, L¹ 및 L² 사이의 공유 결합은 카텝신 불안정성(예컨대, 절단가능한) 결합이다.

일 실시양태에서, L¹은디펩티드를 포함한다. 디펩티드 내의 아미노산은 천연 아미노산 및 비-천연 아미노산의 임의의 조합일 수 있다. 일부 실시양태에서, 디펩티드는 천연 아미노산을 포함한다. 링커가 카텝신 불안정성 링커인 경우, 디펩티드는 카텝신-매개 절단의 작용 부위이다. 이때 디펩티드는 카텝신의 인지 부위이다.

일 실시양태에서, 디펜티드 -NH-X₁-X₂-CO- 내의 -X₁-X₂- 기는 하기로부터 선택된다:

-Phe-Lys-,

-Val-Ala-,

-Val-Lys-,

-Ala-Lys-,

-Val-Cit-,

-Phe-Cit-,

-Leu-Cit-,

-Ile-Cit-,

-Phe-Arg-, 및

-Trp-Cit-;

상기에서, Cit는 시트룰린이다. 이러한 디펩티드에서, -NH-는 X₁의 아미노기이고, CO는 X₂의 카르보닐기이다.

바람직하게는, 디펩티드 -NH-X₁-X₂-CO- 내의 -X₁-X₂- 기는 하기로부터 선택된다:

-Phe-Lys-,

-Val-Ala-,

-Val-Lys-,

-Ala-Lys-, 및

-Val-Cit-.

가장 바람직하게는, 디펩티드 -NH-X₁-X₂-CO- 내의 -X₁-X₂- 기는 -Phe-Lys-, Val-Cit 또는 -Val-Ala-이다.

관심의 다른 디펩티드 조합은 하기를 포함한다:

-Gly-Gly-,

-Pro-Pro-, 및

-Val-Glu-.

본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌[Dubowchik et　al.]에 기재된 것들을 포함하여, 다른 디펩티드 조합이 사용될 수 있다.

일 실시양태에서, 아미노산 측쇄는 필요에 따라 화학적으로 보호된다. 측쇄 보호기는 하기에서 논의되는 바와 같은 기일 수 있다. 보호된 아미노산 서열은 효소에 의해 절단 가능하다. 예를 들어, Boc 측쇄-보호된 Lys 잔기를 포함하는 디펩티드 서열이 카텝신에 의해 절단 가능하다.

아미노산 측쇄를 위한 보호기는 당업계에 잘 알려져 있으며, 노바바이오켐 카달로그(Novabiochem Catalo)에 기재되어 있다. 추가적인 보호기 전략(strategy)은 Protective groups in Organic Synthesis, Greene and Wuts에 기재되어 있다.

반응성 측쇄 작용기를 갖는 이들 아미노산을 위한 가능한 측쇄 보호기를 하기에 나타낸다:

Arg: Z, Mtr, Tos;

Asn: Trt, Xan;

Asp: Bzl, t-Bu;

Cys: Acm, Bzl, Bzl-OMe, Bzl-Me, Trt;

Glu: Bzl, t-Bu;

Gln: Trt, Xan;

His: Boc, Dnp, Tos, Trt;

Lys: Boc, Z-Cl, Fmoc, Z;

Ser: Bzl, TBDMS, TBDPS;

Thr: Bz;

Trp: Boc;

Tyr: Bzl, Z, Z-Br.

일 실시양태에서, -X₂-는 약물 단위에 간접적으로 연결된다. 이러한 실시양태에서, 스페이서 단위 L² 가 존재한다.

일 실시양태에서, 디펩티드는 자가-희생 기(들)(스페이서 단위)와 조합하여 사용된다. 자가-희생 기(들)는 -X₂-에 연결될 수 있다.

자가-희생 기가 존재하는 경우, -X₂-는 자가-희생 기에 직접적으로 연결된다. 일 실시양태에서, -X₂-는 자가-희생 기의 Y 기에 연결된다. 바람직하게는 Y가 NH인 경우, -X₂-CO- 기는 Y에 연결된다.

일 실시양태에서,-X₁-은 A¹에 직접적으로 연결된다. 바람직하게는 NH-X₁- 기(X₁의 아미노 말단)는 A¹에 연결된다. A¹은 작용기 -CO-를 포함하며, 따라서 -X₁-과 함께 아미드 결합을 형성할 수 있다.

일 실시양태에서, -OC(=O)-와 함께 L¹ 및 L²는 -X₁-X₂-PABC- 기를 포함한다. PABC 기는 약물 단위에 직접적으로 연결된다. 일례로, 자가-희생 기 및 디펩티드는 함께, 하기에 예시되는, -Phe-Lys-PABC- 기를 형성한다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 L¹의 나머지 부분에 대한 부착 지점 또는 A¹에 대한 부착 지점을 나타낸다. 바람직하게는, 물결선은 A¹에 대한 부착 지점을 나타낸다.

대안적으로, 자가-희생 기 및 디펩티드는 함께, 하기에 예시되는, -Val-Ala-PABC- 기를 형성한다:

상기 식에서, 별표 및 물결선은 상기에서 정의된 바와 같다.

다른 실시양태에서, L¹ 및 L²는 -OC(=O)-와 함께 하기를 나타낸다:

또는

상기 식에서, 별표는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 A¹에 대한 부착 지점을 나타내며, Y는 공유 결합 또는 작용기이고, E는 절단에 민감하여 자가-희생 기를 활성화하는 기이다.

E는 예컨대 빛 또는 효소 작용에 의한, 절단에 민감하도록 선택한다. E는 -NO₂ 또는 글루쿠론산(예컨대 β-글루쿠론산)일 수 있다. 전자는 니트로리덕타제의 작용에 민감할 수 있고, 후자는 β-글루쿠로니다제의 작용에 민감할 수 있다.

Y 기는 공유 결합일 수 있다.

Y 기는 하기로부터 선택되는 작용기일 수 있다:

-C(=O)-

-NH-

-O-

-C(=O)NH-,

-C(=O)O-,

-NHC(=O)-,

-OC(=O)-,

-OC(=O)O-,

-NHC(=O)O-,

-OC(=O)NH-,

-NHC(=O)NH-,

-NHC(=O)NH,

-C(=O)NHC(=O)-,

SO₂, 및

-S-.

Y 기는 바람직하게는 -NH-, -CH₂-, -O-, 및 -S-이다.

일부 실시양태에서, L¹ 및 L²는 -OC(=O)-와 함께 하기를 나타낸다:

또는

상기 식에서, 별표는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 A에 대한 부착 지점을 나타내며, Y는 공유 결합 또는 작용기이고, E는 글루쿠론산(예컨대 β-글루쿠론산)이다. Y는 바람직하게는 -NH-로부터 선택되는 작용기이다.

일부 실시양태에서, L¹ 및 L²는 함께 하기를 나타낸다:

또는

상기 식에서, 별표는 L²의 나머지 또는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 A¹에 대한 부착 지점을 나타내며, Y는 공유 결합 또는 작용기이고, E는 글루쿠론산(예컨대 β-글루쿠론산)이다. Y는 바람직하게는 -NH-, -CH₂-, -O-, 및 -S-로부터 선택되는 작용기이다.

일부의 추가 실시양태에서, Y는 상술한 바와 같은 작용기이고, 상기 작용기는 아미노산에 연결되며, 아미노산은 신장 단위 A¹에 연결된다. 일부 실시양태에서, 아미노산은 β-알라닌이다. 이러한 실시양태에서, 아미노산은 동등하게 신장 단위의 일부로 여겨진다.

특이성 단위 L¹ 및 리간드 단위는 신장 단위를 통해 간접적으로 연결된다.

L¹ 및 A¹은 하기로부터 선택되는 결합에 의해 연결될 수 있다:

-C(=O)NH-,

-C(=O)O-,

-NHC(=O)-,

-OC(=O)-,

-OC(=O)O-,

-NHC(=O)O-,

-OC(=O)NH-, 및

-NHC(=O)NH-.

일 실시양태에서, A¹기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6이다. 일 실시양태에서, n은 5이다.

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 8, 바람직하게는 4 내지 8, 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, 리간드 단위 및 A¹ 사이의 연결은 리간드 단위의 티올 잔기 및 A¹의 말레이미드 기를 통한다.

일 실시양태에서, 리간드 단위 및 A¹ 사이의 연결은 하기와 같다:

상기 식에서, 별표는 A¹, L¹, L² 또는 D의 나머지 부분에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위의 나머지 부분에 대한 부착 지점을 나타낸다. 이 실시양태에서, S 원자는 전형적으로 리간드 단위로부터 유래한다.

상기 각각의 실시양태에서, 대안적인 작용기가 하기에 나타낸 말레이미드-유래 기 대신에 사용될 수 있다:

상기 식에서, 물결선은 이전과 같이 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 별표는 A¹ 기의 나머지 부분, 또는 L¹, L² 또는 D에 대한 결합을 나타낸다.

일 실시양태에서, 말레이미드-유래 기는 하기 기로 대체된다:

상기 식에서, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 별표는 A¹ 기의 나머지 부분, 또는 L¹, L² 또는 D에 대한 결합을 나타낸다.

일 실시양태에서, 말레이미드-유래 기는, 선택적으로 리간드 단위(예컨대 세포 결합제)와 함께, 하기로부터 선택되는 기로 대체된다:

-C(=O)NH-,

-C(=O)O-,

-NHC(=O)-,

-OC(=O)-,

-OC(=O)O-,

-NHC(=O)O-,

-OC(=O)NH-,

-NHC(=O)NH-,

-NHC(=O)NH,

-C(=O)NHC(=O)-,

-S-,

-S-S-,

-CH₂C(=O)-

-C(=O)CH₂-,

=N-NH-, 및

-NH-N=.

이들 중 -C(=O)CH₂- 는 특히 카르보닐기가 NH-에 결합되는 경우 바람직할 수 있다.

일 실시양태에서, 말레이미드-유래 기는, 선택적으로 리간드 단위와 함께, 하기로부터 선택되는 기로 대체된다:

상기 식에서, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점 또는 A¹ 기의 나머지 부분에 대한 결합을 나타내고, 별표는 리간드 단위에 대한 다른 부착 지점 또는 A¹ 기의 나머지 부분에 대한 결합을 나타낸다.

일 실시양태에서, 신장 단위 A¹은 존재하고, 특이성 단위 L¹은 존재하며 스페이서 단위 L²는 존재하지 않는다. 따라서, L¹ 및 약물 단위가 결합을 통해 직접적으로 연결된다. 동등하게 이 실시양태에서, L²는 결합이다.

L¹ 및 D는 하기로부터 선택되는 결합으로 연결될 수 있다:

-C(=O)N<,

-C(=O)O-,

-NHC(=O)-,

-OC(=O)-,

-OC(=O)O-,

-NHC(=O)O-,

-OC(=O)N<, 및

-NHC(=O)N<,

상기 식에서 N< 또는 O-는 D의 일부이다.

일 실시양태에서, L¹ 및 D는 바람직하게는 하기로부터 선택되는 결합으로 연결된다:

-C(=O)N<, 및

-NHC(=O)-.

일 실시양태에서, L¹은 디펩티드를 포함하고 디펩티드의 일 말단은 D에 결합된다. 상술한 바와 같이, 디펩티드 내의 아미노산은 천연 아미노산 및 비-천연 아미노산의 임의의 조합일 수 있다. 일부의 실시양태에서, 디펩티드는 천연 아미노산을 포함한다. 링커가 카텝신 불안정성 링커인 경우, 디펩티드는 카텝신-매개 절단을 위한 작용 부위이다. 이경우 디펩티드는 카텝신을 위한 인식 부위이다.

일 실시양태에서, 디펩티드 -NH-X₁-X₂-CO- 내의 -X₁-X₂- 기는 하기로부터 선택된다:

-Phe-Lys-,

-Val-Ala-,

-Val-Lys-,

-Ala-Lys-,

-Val-Cit-,

-Phe-Cit-,

-Leu-Cit-,

-Ile-Cit-,

-Phe-Arg-, 및

-Trp-Cit-;

-Phe-Lys-,

-Val-Ala-,

-Val-Lys-,

-Ala-Lys-, 및

-Val-Cit-.

가장 바람직하게는, 디펩티드 -NH-X₁-X₂-CO- 내의 -X₁-X₂- 기는 -Phe-Lys- 또는 -Val-Ala-이다.

원하는 다른 디펩티드 조합은 하기를 포함한다:

-Gly-Gly-,

-Pro-Pro-, 및

-Val-Glu-.

일 실시양태에서, L¹-D는 하기 식이다:

상기 식에서, -NH-X₁-X₂-CO는 디펩티드이고, -N<는 약물 단위의 일부이며, 별표는 약물 단위의 나머지에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 L¹의 나머지 부분에 대한 부착 지점 또는 A¹에 대한 부착 지점을 나타낸다. 바람직하게는 물결선은 A¹에 대한 부착 지점을 나타낸다.

일 실시양태에서, 디펩티드는 발린-알라닌이고 L¹-D는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표, -N< 및 물결선은 상기에서 정의한 바와 같다.

일 실시양태에서, 디펩티드는 페닐알라닌-리신이고 L¹-D는 하기 식이다:

일 실시양태에서, 디펩티드는 발린-시트룰린이다.

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6이다. 일 실시양태에서, n은 5이다.

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 8, 바람직하게는 4 내지 8, 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 7, 바람직하게는 3 내지 7, 가장 바람직하게는 3 또는　7이다.

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 8, 바람직하게는 4 내지 8, 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, S는 리간드 단위의 황(sulfur) 기이며, 물결선은 리간드 단위의 나머지에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6이다. 일 실시양태에서, n은 5이다.

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, S는 리간드 단위의 황 기이며, 물결선은 리간드 단위의 나머지에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6이다. 일 실시양태에서, n은 5이다.

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, S는 리간드 단위의 황 기이며, 물결선은 리간드 단위의 나머지에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 8, 바람직하게는 4 내지 8, 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위의 나머지에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6이다. 일 실시양태에서, n은 5이다.

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위의 나머지에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 8, 바람직하게는 4 내지 8, 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, L- A¹-L¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, 신장 단위는 하기 화학식을 갖는 아세트아미드 단위이다:

상기 식에서, 별표는 신장 단위의 나머지, L¹ 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타낸다.

링커-약물

다른 실시양태에서, 링커-약물 화합물은 리간드 단위에 대한 접합을 위하여 제공된다. 일 실시양태에서, 링커-약물 화합물은 세포 결합제에 대한 연결을 위하여 설계된다.

일 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위(D, 상기 정의한 바와 같음)에 대한 부착 지점을 나타내고, G¹은 리간드 단위에 결합을 형성하기 위한 신장 기(A¹)이며, L¹은 특이성 단위이고, L²(스페이서 단위)는 공유 결합이거나 -OC(=O)-와 함께 자가-희생 기(들)를 형성한다.

다른 실시양태에서, 약물 링커 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위(D)에 대한 부착 지점을 나타내고, G¹은 리간드 단위에 결합을 형성하기 위한 신장 단위 (A¹)이며, L¹은 특이성 단위이고, L²(스페이서 단위)는 공유 결합이거나 자가-희생 기(들)이다.

L¹ 및 L²는 상기에서 정의한 바와 같다. A¹에 대한 연결에 관한 언급은 본 명세서에서 G¹에 대한 연결을 언급하는 것과 같이 해석될 수 있다.

일 실시양태에서, L¹이 아미노산을 포함하는 경우, 그 아미노산의 측쇄는 보호될 수 있다. 임의의 적절한 보호기가 사용될 수 있다. 일 실시양태에서, 측쇄 보호기는, 존재하는 경우, 화합물 내의 다른 보호기로 제거 가능하다. 다른 실시양태에서, 보호기는 존재하는 경우, 분자 내의 다른 보호기에 대해 직각일 수 있다

아미노산 측쇄를 위한 적절한 보호기는 노바바이오켐 카달로그 2006/2007에 기재된 기들을 포함한다. 카텝신 불안정성 링커에 사용하기 위한 보호기는 또한 문헌[Dubowchik et al]에 기재되어 있다.

본 발명의 특정한 실시양태에서, L¹ 기는 Lys 아미노산 잔기를 포함한다. 이 아미노산의 측쇄는 Boc 또는 Alloc 보호기로 보호될 수 있다. Boc 보호기가 가장 바람직하다.

G¹ 작용기는 리간드 단위(예컨대 세포 결합제)와 반응하여 연결기를 형성한다.

일 실시양태에서, G¹ 작용기는 리간드 단위 상에서 적절한 기와 반응하기 위한 아미노, 카르복실산, 히드록시, 티올, 또는 말레이미드 기이거나 또는 이를 포함한다. 바람직한 실시양태에서, G¹은 말레이미드 기를 포함한다.

일 실시양태에서, G¹ 기는 알킬 말레이미드 기이다. 이 기는, 세포 결합제에 존재하는, 예를 들어 항체에 존재하는, 티올 기, 특히 시스테인 티올 기와 반응하기에 적합하다.

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L¹, L² 또는 D에 대한 부착 지점을 나타내고, n은 0 내지 6이다. 일 실시양태에서, n은 5이다.

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지　30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 2, 바람직하게는 4 내지 8, 및 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지　30이다. 바람직한 실시양태에서, n은 1이고 m은 0 내지 10, 1 내지 8, 바람직하게는 4 내지 8, 및 가장 바람직하게는 4 또는　8이다.

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

일 실시양태에서, G¹ 기는 하기 식이다:

상기 각각의 실시양태에서, 대안적인 작용기가 하기에 나타낸 말레이미드 기 대신에 사용될 수 있다:

상기 식에서, 별표는 G 기의 나머지 부분에 대한 결합을 나타낸다.

일 실시양태에서, 말레이미드 기는 하기로부터 선택되는 기로 대체된다:

-C(=O)OH,

-OH,

-NH₂,

-SH,

-C(=O)CH-₂X, 여기에서 X는 Cl, Br 또는 I임,

-CHO,

-NHNH₂

-C=CH, 및

-N₃ (아지드).

이들 중, -C(=O)CH-₂X는 특히 카르보닐기가 -NH-에 결합하는 경우 바람직할 수 있다.

일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 -NH₂, -NHMe, -COOH, -OH 또는 -SH이다.

일 실시양태에서, L¹은 존재하는 경우, G¹은 -NH₂ 또는 -NHMe이다. 어느 하나의 기가 L¹ 아미노산 서열의 N-말단일 수 있다.

일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 -NH₂이며, L¹은 상기에서 정의한 바와 같은 아미노산 서열 -X₁-X₂-이다.

일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 COOH이다. 이러한 기는 L¹ 아미노산 서열의 C-말단일 수 있다.

일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 OH이다.

일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 SH이다.

G¹ 기는 하나의 작용기로부터 다른 작용기로 전환 가능할 수 있다. 일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 -NH₂이다. 이 기는 말레이미드 기를 포함하는 다른 G¹ 기로 전환 가능하다. 예를 들어, -NH₂ 기는 산, 또는 상기에 나타낸 말레이미드를 포함하는 G¹ 기의 활성화된 산(예컨대 N-숙신이미드 형태)과 반응할 수 있다.

따라서 G¹ 기는 리간드 단위와 반응하기에 더욱 적합한 작용기로 전환될 수 있다.

상기에서 지적한 바와 같이, 일 실시양태에서, L¹은 존재하고, G¹은 -NH₂, -NHMe, -COOH, -OH 또는 -SH이다. 추가의 실시양태에서, 이들 기는 화학적으로 보호된 형태로 제공된다. 따라서 화학적으로 보호된 형태는 작용기에 제공되는 링커에 대한 전구체이다.

일 실시양태에서, G¹은 화학적으로 보호된 형태의 -NH₂이다. 기는 카르바메이트 보호기로 보호될 수 있다. 카르바메이트 보호기는 하기로 이루어진 기로부터 선택될 수 있다:

Alloc, Fmoc, Boc, Troc, Teoc, Cbz 및 PNZ.

바람직하게는 G¹이 -NH₂인 경우, 이는 Alloc 또는 Fmoc 기로 보호된다.

일 실시양태에서, G¹이 -NH₂인 경우, 이는 Fmoc 기로 보호된다.

일 실시양태에서, 보호기는 캡핑기의 카르바메이트 보호기와 동일하다.

일 실시양태에서, 보호기는 캡핑기의 카르바메이트 보호기와 동일하지 않다. 이 실시양태에서, 보호기는 캡핑기의 카르바메이트 보호기를 제거하지 않는 조건 하에서 제거 가능한 것이 바람직하다.

화학적 보호기는 리간드 단위에 대한 연결을 형성하기 위한 작용기를 제공하기 위하여 제거될 수 있다. 선택적으로, 이 작용기는 그 후 상기에 기재된 바와 같은 또 다른 작용기로 전환될 수 있다.

일 실시양태에서, 활성기는 아민이다. 이 아민은 바람직하게는 펩티드의 N-말단 아민이고, 본 발명의 바람직한 디펩티드의 N-말단 아민일 수 있다.

활성기는 리간드 단위에 대한 연결을 형성하도록 의도되는 작용기를 수득하기 위하여 반응할 수 있다.

다른 실시양태에서, 링커 단위는 활성기를 갖는 링커 단위의 전구체이다. 이 실시양태에서, 링커 단위는 보호기를 통해 보호되는 활성기를 포함한다. 보호기를 제거하여 활성기를 갖는 링커 단위를 제공할 수 있다.

활성기가 아민인 경우, 보호기는 문헌[Green and Wuts]에 기재된 것들과 같은 아민 보호기일 수 있다.

보호기는 바람직하게는, 존재하는 경우, 링커 단위 내의 다른 보호기에 대해 직각이다.

일 실시양태에서, 보호기는 캡핑기에 대해 직각이다. 따라서, 활성기 보호기는 캡핑기를 유지하면서 제거 가능하다. 다른 실시양태에서, 보호기 및 캡핑기는 캡핑기를 제거하는데 사용되는 것과 동일한 조건 하에서 제거 가능하다.

일 실시양태에서, 링커 단위는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 적용가능한 경우 링커 단위의 나머지 부분에 대한 부착 지점 또는 G¹에 대한 부착 지점을 나타낸다. 바람직하게는 물결선은 G¹에 대한 부착 지점을 나타낸다.

일 실시양태에서, 링커 단위는 하기 식이다:

상기 식에서, 별표 및 물결선은 상기에서 정의한 바와 같다.

L¹과 세포 결합제 사이의 연결을 형성하는데 사용하기에 적절한 다른 작용기는 WO　2005/082023에 기재되어 있다.

리간드 단위

리간드 단위는 임의의 종류일 수 있고, 표적 분자에 특이적으로 결합하는 단백질, 폴리펩티드, 펩티드 및 비-펩티드성 제제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 리간드 단위는 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드일 수 있다. 일부 실시양태에서, 리간드 단위는 환형 폴리펩티드일 수 있다. 이들 리간드 단위는 항체 또는 적어도 하나의 표적 분자-결합 부위를 포함하는 항체의 단편, 림포카인, 호르몬, 성장 인자, 또는 표적에 특이적으로 결합할 수 있는 임의의 다른 세포 결합 분자 또는 물질을 포함할 수 있다. 리간드 단위는 또한 "결합제" 또는 "표적화 제제"로서 본 명세서에 지칭된다.

용어 "특이적으로 결합하는" 및 "특이적 결합"은 미리 결정된 분자(예컨대 항원)에 대한 항체 또는 다른 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드의 결합을 지칭한다. 전형적으로, 항체 또는 다른 분자는 적어도 약 1x10⁷ M^-1의친화성으로 결합하고, 항체 또는 다른 분자는 미리 결정된 분자 또는 가까이-관련된 분자외의 다른 비-특이적 분자(예컨대, BSA, 카세인)에 결합하는 친화성에 비해 적어도 2배 더 큰 친화성으로 미리 결정된 분자에 결합한다.

리간드 단위의 예는 본 명세서에서 인용하는 WO　2007/085930에 사용하기 위해 기재된 제제들을 포함한다.

일부 실시양태에서, 리간드 단위는 세포 상에서 세포외 표적에 결합하는 세포 결합제이다. 이러한 세포 결합제는 단백질, 폴리펩티드, 펩티드 또는 비-펩티드성 제제일 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포 결합제는 단백질, 폴리펩티드 또는 펩티드일 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포 결합제는 환형 폴리펩티드일 수 있다. 세포 결합제는 또한 항체 또는 항체의 항원-결합 단편일 수 있다. 따라서, 일 실시양태에서, 본 발명은 항체-약물 접합체(ADC)를 제공한다.

일 실시양태에서, 항체는 단일클론 항체; 키메라 항체; 인간화 항체; 완전한 인간 항체; 또는 단일 사슬 항체이다. 일 실시양태에서, 항체는 생물학적 활성을 갖는 이들 항체들 중 하나의 단편이다. 이러한 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')₂ 및 Fv 단편을 포함한다.

항체는 디아바디(diabody), 도메인 항체(DAB) 또는 단일 사슬 항체일 수 있다.

일 실시양태에서, 항체는 단일클론 항체이다.

본 발명에 사용하기 위한 항체는 본 명세서에서 인용하는 WO　2005/082023에 기재된 항체들을 포함한다. 특히 바람직하게는 종양-연관 항원을 위한 항체이다. 당업계에 알려진 이들 항원의 예는 WO　2005/082023에 기술된 종양-연관 항원을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 예를 들어, 페이지 41-55를 참고한다.

일부 실시양태에서, 접합체는 세포 표면 항원을 통해 종양 세포를 표적화하도록 설계된다. 항원은 비정상적인 시간 또는 세포 타입에서 과다 발현되거나 또는 발현되는 세포 표면 항원일 수 있다. 바람직하게는, 표적 항원은 증식성 세포(바람직하게는 종양 세포) 상에서만 발현되나; 그러나 이는 실제로 드물게 관찰된다. 그 결과, 표적 항원은 일반적으로 증식성 조직 및 건강한 조직 사이의 상이한 발현에 기초하여 선택된다.

항체가 하기를 포함하는 표적 특이적 종양 관련 항원에 대해 생성되었다:

크립토(Cripto), CD19, CD20, CD22, CD30, CD33, Glycoprotein NMB, CanAg, Her2 (ErbB2/Neu), CD56 (NCAM), CD70, CD79, CD138, PSCA, PSMA(전립선 특이 막 항원), BCMA, E-셀렉틴, EphB2, 멜라노트랜스페린, Muc16 및 TMEFF2.

리간드 단위는 링커 단위에 연결된다. 일 실시양태에서, 리간드 단위는 존재하는 경우 링커 단위의 A에 연결된다.

일 실시양태에서, 리간드 단위와 링커 단위 사이의 연결은 티오에테르 결합을 통한다.

일 실시양태에서, 리간드 단위와 링커 단위 사이의 연결은 디설파이드 결합을 통한다.

일 실시양태에서, 리간드 단위와 링커 단위 사이의 연결은 아미드 결합을 통한다.

일 실시양태에서, 리간드 단위와 링커 단위 사이의 연결은 에스테르 결합을 통한다.

일 실시양태에서, 리간드 단위와 링커 사이의 연결은 리간드 단위의 시스테인 잔기의 티올 기와 링커 단위의 말레이미드 기 사이에 형성된다.

리간드 단위의 시스테인 잔기는 연결을 형성하기 위한 링커 단위의 작용기와의 반응에 이용가능할 수 있다. 다른 실시양태에서, 예를 들어 리간드 단위가 항체인 경우, 항체의 티올 기는 사슬간 디설파이드 결합에 관여할 수 있다. 이들 사슬간 결합은 링커 단위의 작용기와의 반응전에 예컨대 항체를 DTT로 처리함으로써 유리(free) 티올 기로 전환될 수 있다.

일부 실시양태에서, 시스테인 잔기는 항체의 중쇄 또는 경쇄 내로 도입된다. 항체 중쇄 또는 경쇄 내 치환에 의한 시스테인 삽입의 위치는 본 명세서에서 인용하는 미국 공개 특허 제2007-0092940호 및 국제 특허 공개 WO2008070593에 기술되어 있는 것들을 포함한다.

치료 방법

본 발명의 화합물은 치료요법의 방법에서 사용될 수 있다. 치료적 유효량의 화학식 I의 화합물을 치료를 필요로 하는 개체에 투여하는 것을 포함하는 치료 방법이 또한 제공된다. 용어 "치료적 유효량"은 환자에게 유익을 보여주기에 충분한 양이다. 이러한 유익은 적어도 한가지 이상의 증상의 적어도 개선일 수 있다. 실제 투여량 및 투여의 속도 및 시간에 따른 과정은 치료되는 질병의 상태 및 중증도에 따라 달라질 것이다. 치료의 처방, 예컨대 투여량에 대한 결정은 일반 개원 의사 및 다른 의사의 책임 범위 내에 있다.

화합물은 치료되는 병태에 따라 단독으로 또는 다른 치료와 조합하여 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 치료 및 치료용법의 예는 화학요법(예컨대 약물; 수술; 및 방사선 요법을 포함하는 활성제의 투여)를 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다.

본 발명 따른 약학적 조성물 및 본 발명에 따라 사용하기 위한 약학적 조성물은 활성 성분, 즉 화학식 I의 화합물 외에 약학적으로 허용가능한 부형제, 담체, 완충제, 안정제 또는 당업자에게 공지된 다른 물질을 포함할 수 있다. 이러한 물질은 비-독성이여야하며 활성 성분의 효능을 방해하지 않아야 한다. 담체 또는 다른 물질의 정확한 성질(nature)은 경구 또는 주사, 예컨대 피부, 피하 또는 정맥내 주사일 수 있는 투여의 경로에 따라 의존할 것이다.

경구 투여용 약학적 조성물은 정제, 캡슐, 분말 또는 액체 형태일 수 있다. 정제는 고형 담체 또는 보조제를 포함할 수 있다. 액상 약학적 조성물은 일반적으로 물, 석유, 동물성 또는 식물성 오일, 광유 또는 합성 오일과 같은 액상 담체를 포함한다. 생리 식염수 용액, 덱스트로스 또는 다른 당류 용액 또는 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 글리콜이 포함될 수 있다. 캡슐은 젤라틴과 같은 고형 담체를 포함할 수 있다.

정맥내, 피부 또는 피하 주사 또는 병이 있는 부위에의 주사에 있어서, 활성 성분은 무-발열(pyrogen-free)이고 적절한 pH, 등장성 및 안정성인 비경구로 허용 가능한 수용액의 형태로 존재할 수 있을 것이다. 당해 분야의 기술자는 예를 들어, 염화나트륨 주사액, 링거액, 락테이트 링거액과 같은 등장성 비히클을 사용하여 적절한 용액을 잘 제조할 수 있다. 보존제, 안정화제, 완충제, 산화 방지제 및/또는 다른 첨가제도 필요에 따라 포함될 수 있다.

화합물 및 접합체는 증식성 질환 또는 자가면역 질환을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 용어 "증식성 질환"은 시험관내 또는 생체내에서 신생 또는 과다형성 성장과 같은 바람직하지 않은 과도하거나 비정상적인 세포의 원하지 않거나 조절되지 않는 세포 증식에 관한 것이다.

증식성 병태의 예는 신생물 및 종양(예컨대 히스토사이토마, 신경아교종, 별아교세포종, 골종), 암(예컨대 폐암, 소 세포 폐암, 위장관암, 장암, 대장암, 유방암종, 난소암종, 전립선암, 고환암, 간암, 신장암, 방광암, 췌장암, 뇌암, 육종, 뼈육종, 카포시 육종, 흑색종), 백혈병, 건선, 뼈 질환, 섬유증식성 장애(예컨대 연결 조직의), 및 죽상동맥경화증을 포함하지만, 이로 제한되는 않는, 양성, 전-악성, 및 악성 세포 증식을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 원하는 다른 암은 혈액학; 백혈병 및 비-호지킨 림프종, 및 DLBCL, 변연부, 외투층, 및 소포, 호지킨 림프종와 같은 하위부류와 같은 림프종과 같은 악성 종양, 및 B 또는 T 세포 기원의 다른 암을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.

자가면역 질환의 예는 하기를 포함한다: 류마티스 관절염, 자가면역 수초탈락성 질환(예컨대 다발성 경화증, 알레르기성 뇌척수염), 건선성 관절염, 내분비샘 눈병증, 포도막망막염, 전신성 홍반성 루푸스, 중증 근무력증, 그레이브스병, 사구체신염, 자가면역 간장 장애, 염증성 장 질환 (예컨대, 크론병), 아나필락시스, 알레르기 반응, 쇼그렌 증후군, 제 I형 당뇨병, 원발성 답증성 간병증, 베게너 육아종증, 섬유근육통, 다발성근염, 피부근염, 복합 내분비 손상, 쉬미트 증후군, 자가면역 포도막염, 애디슨병, 부신염, 갑상샘염, 하시모토 갑상샘염, 자가면역 갑상선 질환, 악성 빈혈, 위선 위축, 만성 간염, 루푸스 간염, 죽상동맥경화증, 아급성 피부 홍반성 루푸스, 부갑상선기능저하증, 드레슬러 증후군, 자가면역 혈소판감소증, 특발성 혈소판 감소성 자반증, 용혈성 빈혈, 용혈성 빈혈, 천포창, 포진성 피부염, 원형 탈모증, 유사천포창, 강피증, 진행성 전신 경화증, CREST 증후군(석회증, 레이노 증후군, 식도 기능장애, 수지경화증, 및 모세혈관확장증), 남성 및 여성 자가면역 불임, 강직 척추염, 궤양 대장염, 혼합 결합 조직병, 결절다발동맥염, 전신 괴사성 혈관염, 아토피성 피부염, 아토피성 비염, 굿파스츄어 증후군, 샤가스병, 유육종증, 류머티스성 열, 천식, 습관성 유산, 항-인지질 증후군, 농부폐병, 다형 홍반, 심장절개수술후 증후군, 쿠싱 증후군, 자가면역 만성 활동성 간염, 새-사육가 폐병, 독성 표피 괴사, 알포트 증후군, 폐포염, 알레르기성 폐포염, 섬유성 폐포염, 간질성 폐 질환, 결절성 홍반, 괴저성 농피증, 수혈 부작용, 타까야수동맥염, 다발성 근육통, 측두 동맥염, 주혈흡충증, 거대 세포 동맥염, 회충증, 아스페르질루스증, 샘프터 증후군(Sampter's syndrome), 습진, 림프종양육아종증, 베체트병, 카플란 증후군, 카와사키 병, 뎅기, 뇌척수염, 심내막염, 심내막심근성섬유증, 내안구염, 장기 융기성 홍반, 건선, 태아적모구증, 호산구성 근막염, 셜먼 증후군, 펠티 증후군, 사상충증 , 섬모체염 , 만성 섬모체염, 홍채이색 섬모체염, 푸츠 섬모체염(Fuch's cyclitis), IgA 신장병, 헤노흐-쉔라인 자반증(Henoch-Schonlein purpura), 이식편 대 숙주병, 이식 거부, 심근증, 이튼-람베르트 증후군, 재발성 다발 연골염, 한랭글로불린혈증, 발덴스트롬 마크로글로불린혈증, 에반 증후군, 및 자가면역 생식샘 부전을 포함하지만, 이로 제한되지 않는다.

일부 실시양태에서, 자가면역 질환은 B 림프구 장애(예컨대, 전신 홍반성 루푸스, 굿파스튜어 증후군, 류마티스 관절염 및 제 I형 당뇨병), Th1-림프구(예컨대, 류마티스 관절염, 다발성 경화증, 건선, 쇼그렌 증후군, 하시모토 갑상샘염, 그레이브스병, 원발성 답증성 간병증, 베게너 육아종증, 결핵, 또는 이식편 대 숙주병), 또는 Th2-림프구(예컨대, 아토피성 피부염, 전신 홍반성 루푸스, 아토피성 천식, 비결막염, 알레르기성 비염, 오멘 증후군, 전신성 경화증, 또는 만성 이식편 대 숙주병)이다. 일반적으로, 수지상 세포 관련 장애는 Th1-림프구 또는 Th2-림프구의 장애에 관련한다. 일부 실시양태에서, 자가면역 장애는 T 세포-매개 면역학적 장애이다.

일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.01 내지 약 10 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.01 내지 약 5 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.05 내지 약 5 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.1 내지 약 5 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.1 내지 약 4 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.05 내지 약 3 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.1 내지 약 3 mg/kg 범위이다. 일부 실시양태에서, 투여되는 접합체의 양은 투여량 당 약 0.1 내지 약 2 mg/kg 범위이다.

다른 형태 포함

달리 명시하지 않는 한, 이들 치환기의 잘 알려진 이온, 염, 용매화물 및 보호된 형태가 상기에 포함된다. 예를 들어, 카르복실산(-COOH)에 대한 지칭은 이의 음이온(카르복실레이트) 형태(-COO^-), 염 또는 용매화물 뿐 아니라, 통상적인 보호된 형태도 포함한다. 유사하게, 아미노기에 대한 지칭은 아미노기의 양성자화된 형태(-N⁺HR¹R²), 염 또는 용매화물, 예를 들어, 염산염 뿐 아니라 아미노기의 통상적인 보호된 형태를 포함한다. 유사하게, 히드록실기에 대한 지칭은 이의 음이온 형태(-O^-), 염 또는 용매화물 뿐 아니라 통상적인 보호된 형태도 포함한다.

염

활성 화합물의 대응하는 염, 예를 들어 약학적으로 허용가능한 염을 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 또는 바람직할 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염의 예는 문헌[Berge, et al., J. Pharm . Sci ., 66, 1-19 (1977)]에 논의되어 있다.

예를 들어, 화합물이 음이온이거나 또는 음이온일 수 있는 작용기를 갖는 경우(예컨대 -COOH는 -COO^-일 수 있음), 적절한 양이온으로 염을 형성할 수 있다. 적절한 무기 양이온의 예는 Na⁺ 및 K⁺과 같은 알칼리 금속 이온, Ca² ⁺ 및 Mg² ⁺과 같은 알칼리 토금속 양이온, 및 Al⁺³과 같은 다른 양이온을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 적절한 유기 양이온의 예는 암모늄 이온(즉, NH₄ ⁺) 및 치환된 암모늄 이온(예컨대 NH₃R⁺, NH₂R₂ ⁺, NHR₃ ⁺, NR₄ ⁺)을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 일부 적절한 치환된 암모늄 이온의 예는 하기로부터 유도된 것들이다: 에틸아민, 디에틸아민, 디시클로헥실아민, 트리에틸아민, 부틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진, 벤질아민, 페닐벤질아민, 콜린, 메글루민 및 트로메타민 뿐 아니라, 리신 및 아르기닌과 같은 아미노산. 통상적인 4차 암모늄 이온의 예는 N(CH₃)₄ ⁺이다.

화합물이 양이온이거나 또는 양이온일 수 있는 작용기를 갖는 경우(예컨대 -NH₂는 -NH₃ ⁺일 수 있음), 적절한 음이온으로 염을 형성할 수 있다. 적절한 무기 음이온의 예는 하기 무기 산으로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산, 아황산, 질산, 아질산, 인산 및 아인산.

적절한 유기 음이온의 예는 하기 유기산으로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 2-아세티옥시벤조산, 아세트산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤조산, 캠퍼설폰산, 신남산, 시트르산, 에데트산, 에탄디설폰산, 에탄설폰산, 푸마르산, 글루쳅톤산, 글루콘산, 글루탐산, 글리콜산, 히드록시말레산, 히드록시나프탈렌 카르복실산, 이세티온산, 락트산, 락토비온산, 라우르산, 말레산, 말산, 메탄설폰산, 점액산, 올레산, 옥살산, 팔미트산, 팜산, 판토텐산, 페닐아세트산, 페닐설폰산, 프로피온산, 피루브산, 살리실산, 스테아르산, 숙신산, 설파닐산, 타르타르산, 톨루엔설폰산 및 발레르산. 적절한 중합체 유기 음이온의 예는 하기 중합체 산으로부터 유도된 것들을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다: 타닌산, 카르복시메틸 셀룰로오스.

용매화물

화합물의 대응하는 용매화물을 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 또는 바람직할 수 있다. 용어 "용매화물"은 본 명세서에서 용질(예컨대 활성 화합물, 활성 화합물의 염) 및 용매의 복합체(complex)를 지칭하기 위해 통상적인 의미로 사용된다. 용매가 물인 경우, 용매화물은 편리하게 수화물, 예를 들어 일수화물, 이수화물, 삼수화물 등으로 지칭할 수 있다.

카르비놀아민

본 발명은, PBD 부분의 이민 결합을 거쳐 용매가 첨가되는 화합물을 포함하며, 이것은 하기에 도시되며 여기서 용매는 물 또는 알콜(R^AOH, 여기서 R^A는 C₁ _-4 알킬임)이다 :

이들 형태는 PBD의 카르비놀아민 및 카르비놀아민 에테르 형태로 지칭할 수 있다. 이들 평형의 균형은 화합물이 발견되는 조건 뿐 아니라 이의 부분의 성질에 따라 달라진다.

이들 특정의 화합물은 예를 들어, 동결 건조에 의해 고체 형태로 분리할 수 있다.

이성체

특정의 화합물은 시스 및 트랜스 형태; E 및 Z 형태; c, t 및 r 형태; 엔도 및 엑소 형태; R, S 및 메소 형태; D 및 L 형태; d 및 l 형태; (+) 및 (-) 형태; 케토, 에놀 및 에놀레이트 형태; syn- 및 anti-형태; 양쪽 경사(synclinal) 및 반대 방향 경사(anticlinal) 형태; α 및 β 형태; 축 및 적도선상(equatorial) 형태; 보트, 의자, 트위스트, 봉투 및 반의자 형태; 및 이의 조합[이하, 이들을 "이성체"(또는 "이성체 형태")로 총칭함]을 포함하나 이에 한정되지 않는 하나 이상의 특정한 기하 이성체, 광학 이성체, 거울상 이성체, 부분 입체 이성체, 에피머, 아트로프(atropic), 입체 이성체, 호변 이성체, 입체(conformational) 또는 아노머 형태로 존재할 수 있다

하기에서 호변 이성체 형태에 대해 논의되는 것을 제외하고는, 본 명세서에서 사용된 바와 같은 용어 "이성체"로부터 구조(또는 구성) 이성체(즉, 공간에서 원자의 위치에 의해서만이 아니라 원자 사이의 연결이 상이한 이성체)는 특히 배제된다. 예를 들어, 메톡시기 -OCH₃에 대한 지칭은 이의 구조 이성체인 히드록시메틸기 -CH₂OH에 대한 지칭으로 이해되어서는 안 된다. 유사하게, 오르토-클로로페닐에 대한 지칭은 이의 구조 이성체인 메타-클로로페닐에 대한 지칭으로 이해되어서는 안 된다. 그러나, 구조의 부류에 대한 지칭은 부류 내에 들어가는 구조 이성체 형태를 완전히 포함할 수 있다(예컨대 C₁ _-7 알킬은 n-프로필 및 이소프로필을 포함하고; 부틸은 n-, 이소-, 세크- 및 터트-부틸을 포함하며; 메톡시페닐은 오르토-, 메타- 및 파라-메톡시페닐을 포함함).

상기 배제는 예를 들어 하기 호변 이성체 쌍에서와 같은 호변 이성체 형태, 예를 들어 케토, 에놀 및 에놀레이트 형태에 관한 것은 아니다: 케토/에놀(하기 도시됨), 이민/엔아민, 아미드/이미노 알콜, 아미딘/아미딘, 니트로소/옥심, 티오케톤/엔티올, N-니트로소/히드록시아조 및 니트로/아시-니트로(aci-nitro).

하나 이상의 동위 원소 치환을 갖는 화합물이 용어 "이성체"에 특히 포함된다. 예를 들어, H는 ¹H, ²H(D) 및 ³H(T)를 포함하는 임의의 동위 원소 형태로 존재할 수 있고; C는 ¹²C, ¹³C 및 ¹⁴C를 포함하는 동위 원소 형태로 존재할 수 있으며; O는 ¹⁶O 및 ¹⁸O를 비롯한 임의의 동위 원소 형태로 존재할 수 있는 것 등이다.

달리 명시하지 않는 한, 특정 화합물에 대한 지칭은 이의 (전부 또는 부분) 라세미 및 다른 혼합물을 비롯한 모든 이러한 이성체 형태를 포함한다. 이러한 이성체 형태의 제조(예컨대 비대칭 합성) 및 분리(예컨대 분별 결정 및 크로마토그래프 수단) 방법은 당업자에게 공지되어 있거나, 또는 공지된 방식으로 본 명세서에 교시된 방법 또는 공지된 방법을 적용함으로써 용이하게 얻어진다.

일반적인 합성 경로

PBD 화합물의 합성은 하기 참고 문헌에 광범위하게 논의되어 있으며, 이들 논의를 본 명세서에서 참고로 인용한다:

a) WO 00/12508(페이지 14 내지 30);

b) WO 2005/023814(페이지 3 내지 10);

c) WO 2004/043963(페이지 28 내지 29); 및

d) WO 2005/085251(페이지 30 내지 39).

합성 경로

본 발명의 화합물 - 여기서 R¹⁰ 및 R¹¹은 이들이 결합되는 질소 원자와 탄소 원자 사이에서 질소-탄소 이중 결합을 형성함 - 은 표준 방법에 의해 이민 결합을 탈보호함으로써 하기 화학식 2의 화합물로부터 합성될 수 있다:

화학식 2

상기 식에서,R², R⁶, R⁷, R⁹, R^6', R^7', R^9', R¹², X, X' 및 R"는 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같고, Prot^N은 합성을 위한 질소 보호기이며, Prot^O는 합성을 위한 보호된 산소기 또는 옥소기이다.

제조된 화합물은 사용된 용매에 따라 이의 카르비놀아민 또는 카르비놀아민 에테르 형태로 존재할 수 있다. 예를 들어, Prot^N이 Troc이고 Prot^O가 합성을 위한 산소 보호기인 경우, Cd/Pb 커플을 사용하여 탈보호를 실시하여 화학식 I의 화합물을 얻는다. Prot^N이 SEM 또는 유사 기이고 Prot^O가 옥소기일 경우, 옥소기는 환원에 의해 제거될 수 있으며, 이에 따라 보호된 카르비놀아민 중간체가 생성되고, 그 다음 이를 처리하여 SEM 보호기를 제거한 후 물을 제거할 수 있다. 화학식 2의 화합물의 환원은 예를 들어, 예컨대 리튬 테트라보로하이드라이드에 의해 달성할 수 있으며, SEM 보호기를 제거하기 위한 적절한 수단은 실리카 겔을 사용한 처리이다.

화학식 2의 화합물은 유기 붕소 유도체와 같은 R¹²를 포함하는 유기 금속 유도체를 커플링함으로써 하기 화학식 3a의 화합물로부터 합성될 수 있다:

화학식 3a

상기 식에서, R², R⁶, R⁷, R⁹, R^6', R^7', R^9', X, X' 및 R"는 화학식 2의 화합물에 대해 정의된 바와 같다. 유기 붕소 유도체는 보로네이트 또는 보론산일 수 있다.

화학식 2의 화합물은 유기 붕소 유도체와 같은, R² ^,또는 이의 전구체를 포함하는 유기 금속 유도체를 커플링함으로써 하기 화학식 3b의 화합물로부터 합성할 수 있다:

화학식 3b

화학식 3a 및 3b의 화합물은 약 1 당량(예컨대 0.9 또는 1 내지 1.1 또는 1.2 당량)의, R² 또는 R¹²를 포함하는 유기 붕소 유도체와 같은 유기 금속 유도체를 커플링함으로써 하기 화학식 4의 화합물로부터 합성할 수 있다:

화학식 4

상기 화학식에서, R², R⁶, R⁷, R⁹, R^6', R^7', R^9', X, X' 및 R"는 화학식 2의 화합물에 대해 정의된 바와 같다.

상기 기술한 커플링은 팔라듐 촉매, 일반적으로 예를 들면 Pd(PPh₃)₄, Pd(OCOCH₃)₂, PdCl₂, Pd₂(dba)₃과 같은 팔라듐 촉매의 존재 하에 실시한다. 커플링은 표준 조건 하에서 실시할 수 있거나, 또는 마이크로파 조건 하에서 실시할 수도 있다.

2 가지 커플링 단계를 일반적으로 순차적으로 실시한다. 이들은 2 가지 단계 사이에 정제를 실시하거나 실시하지 않고 실시할 수 있다. 정제를 실시하지 않을 경우, 2 가지 단계를 동일한 반응 용기에서 실시할 수 있다. 정제는 일반적으로 제2 커플링 단계 후에 필요하다. 원하지 않는 부산물로부터의 화합물의 정제는 컬럼 크로마토그래피 또는 이온 교환 분리에 의해 실시할 수 있다.

화학식 4 - 여기서, Prot^O는 옥소기이고, Prot^N은 SEM임 -의 화합물의 합성은 본 명세서에서 참고로 인용하는 WO 00/12508에 상세히 설명되어 있다. 특히, 페이지 24의 반응식 7을 참조하며, 여기서 상기 화합물은 중간체 P로서 지정되어 있다. 이 합성 방법은 WO 2004/043963에도 기술되어 있다.

화학식 4 - 여기서, Prot^O는 합성을 위한 보호된 산소기임 - 의 화합물의 합성은 WO 2005/085251에 기술되어 있으며, 이 합성은 본 명세서에서 참고로 인용한다.

R¹⁰ 및 R^10'가 H이고, R¹¹ 및 R^11'이 SO_zM인 화학식 I의 화합물은 적절한 비설파이트 염 또는 설피네이트 염의 첨가 후 적절한 정제 단계에 의해 R¹⁰ 및 R¹¹이 이들이 결합되는 질소 원자와 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하는 화학식 I의 화합물로부터 합성할 수 있다. 추가의 방법은 본 명세서에서 참고로 인용하는 GB 2 053 894에 기술되어 있다.

합성을 위한 질소 보호기

합성을 위한 질소 보호기는 당업계에 잘 알려져 있다. 본 발명에서, 특히 원하는 보호기는 카르바메이트 질소 보호기 및 헤미아민 질소 보호기이다.

카르바메이트 질소 보호기는 하기 구조를 갖는다:

상기 식에서, R'¹⁰은 상기 정의된 바와 같은 R이다. 다수의 적절한 기가 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌[Greene, T.W. and Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999]의 503 내지 549 페이지에 기재되어 있다.

특히 바람직한 보호기는 Troc, Teoc, Fmoc, BOC, Doc, Hoc, TcBOC, 1-Adoc 및 2-Adoc을 포함한다.

다른 가능한 기는 니트로벤질옥시카르보닐(예컨대 4-니트로벤질옥시카르보닐) 및 2-(페닐설포닐)에톡시카르보닐을 포함한다.

팔라듐 촉매화에 의해 제거될 수 있는 이러한 보호기, 예컨대 Alloc은 바람직하지 않다.

헤미아민 질소 보호기는 하기 구조를 갖는다:

상기 식에서, R'¹⁰은 상기 정의된 바와 같은 R이다. 다수의 적절한 기가 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌[Greene, T.W. and Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999]의 633 내지 647 페이지에 아미드 보호기로서 기재되어 있다. 본 명세서에 개시된 기를 본 발명의 화합물에 적용할 수 있다. 이러한 기의 예는 SEM, MOM, MTM, MEM, BOM, 니트로 또는 메톡시 치환된 BOM, Cl₃CCH₂OCH₂-를 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.

합성을 위한 보호된 산소기

합성을 위한 보호된 산소기는 당업계에 잘 알려져 있다. 다수의 적절한 산소 보호기가 본 명세서에서 참고로 인용하는 문헌[Greene, T.W. and Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, John Wiley & Sons, Inc., 1999]의 23 내지 200 페이지에 기재되어 있다.

특히 원하는 부류는 실릴 에테르, 메틸 에테르, 알킬 에테르, 벤질 에테르, 에스테르, 아세테이트, 벤조에이트, 카르보네이트 및 설포네이트를 포함한다.

바람직한 산소 보호기는 아세테이트, TBS 및 THP를 포함한다.

약물 접합체의 합성

접합체는 앞서 기술된 바와 같이 제조할 수 있다. 말레이미드기(A), 펩티드기(L¹) 및 자가-희생기(L²) 를 갖는 링커는 본 명세서에 참조로 인용되는 미국 특허 제 6,214,345호에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다. 말레이미드기(A), 펩티드기(L¹)를 갖는 링커는 본 명세서에 참조로 인용되는 WO 2009/0117531호에 기재된 바와 같이 제조할 수 있다. 다른 링커는 본 명세서에 인용되거나 숙련가에 공지된 참고 문헌에 따라 제조할 수 있다.

링커-약물 화합물은 당업계에 공지된 방법에 따라 제조할 수 있다. 링커 단위의 활성기에 (PBD 이량체 약물 단위의)아민-기반 X 치환체의 결합은 일반적으로 미국 특허 제6,214,345호 및 제7,498,298호; 및 WO 2009-0117531호에 기재된 바의 방법 또는 다른 경우 숙련가에게 공지된 바의 방법에 따라 수행될 수 있다.

항체는 문헌 [Doronina et al., Nature Biotechnology, 2003, 21, 778-784]에 기재된 바와 같은 링커-약물 화합물에 접합될 수 있다. 요약하면, pH 7.4에서 50 mM의 소디움 보레이트를 함유하는 PBS 중 항체(4-5 mg/㎖ )를 37℃에서 트리스(카르복시에틸)포스핀 하이드로클로라이드(TCEP)로 환원시킨다. 사슬간 디설파이드를 환원하는 반응 과정은 5,5'-디티오비스(2-니트로벤젠산)과 반응시키고 바람직한 수준의 티올/mAb를 수득할때까지 반응을 지속시킴으로써 모니터링된다. 그후 환원된 항체는 0℃로 식히고, 항체 티올 당 말레이미드 약물-링커의 1.5 당량으로 알킬화시킨다. 1 시간 후, 반응을 5 당량의 N-아세틸 시스테인을 첨가함으로써 퀀칭한다. 퀀칭된 약물-링커를 PD-10 컬럼에 걸쳐 겔 여과함으로써 제거한다. ADC는 그 후 0.22 ㎛ 시린지 필터를 통해 멸균-여과시킨다. 단백질 농도는 280 nm에서 약물 흡광도의 기여에 대한 교정을 통해, 각각 280 nm 및 329 nm에서 스펙트럼 분석에 의해 측정할 수 있다. 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 항체 응집의 정도를 측정할 수 있으며, RP-HPLC를 사용하여 남아있는 NAC-퀀칭된 약물-링커의 수준을 측정할 수 있다.

도입된 시스테인 잔기를 갖는 항체는 본 명세서에 포함된 국제특허공개 WO2008/070593에 기술된 바와 같은 또는 하기와 같은 링커-약물 화합물에 접합될 수 있다. 중쇄 내 도입된 시스테인 잔기를 함유하는 항체는 10 당량의 TCEP 및 1 mM EDTA를 추가하고, 1M Tris 완충제(pH 9.0)를 이용해 pH를7.4로 조정함으로써 완전히 환원된다. 37℃에서 1시간 인큐베이션 후, 반응물을 22℃로 냉각시키고, 30 당량의 디히드로아스코르브산을 첨가하여 본래의 디설파이드를 선택적으로 재산화시키면서, 도입된 시스테인은 환원된 상태로 남겼다. pH를 1M Tris 완충액(pH 3.7)을 이용하여 6.5로 조정하고 상기 반응을 22℃에서 1 시간 동안 진행하였다. 그후 상기 용액의 pH를 1 M Tris 완충액(pH 9.0)을 첨가하여 다시 7.4로 향상시켰다. DMSO 중 3.5 당량의 PBD 약물 링커를, 상기 반응물에 첨가하기 전에, 프로필렌 글리콜로 희석하기에 적합한 용기에 넣었다. PBD 약물 링커의 가용성을 유지하기 위하여, 항체 자체를 먼저 프로필렌 글리콜로 33%의 최종 농도로 희석시켰다(예를 들어, 항체 용액이 60 mL 반응 부피인 경우, 30 mL의 프로필렌 글리콜을 첨가함). 그 다음 이러한 동일한 부피의 프로필렌 글리콜(본 실시예에서는 30 mL)을 희석제로서 PBD 약물 링커에 첨가하였다. 혼합 후, 프로필렌 글리콜 중 PBD 약물 링커의 용액을 상기 항체 용액에 첨가하여 접합을 달성하였다; 프로필렌 글리콜의 최종 농도는 50%이었다. 상기 반응을 30 분 동안 진행한 다음 5 당량의 N-아세틸 시스테인을 첨가하여 퀀칭시켰다. 그 다음 ADC를 30 kD 막을 통해 한외여과하여 정제하였다. (반응에 사용된 프로필렌 글리콜의 농도는 임의의 특정 PBD를 위해 줄일 수 있으며, 이의 단 하나의 목적은 수성 매질 중에서 약물 링커의 용해도를 유지하기 위함임을 주지한다.)

할로 아세트아미드-기반의 약물 링커를 위하여, 접합은 일반적으로 하기와 같이 수행할 수 있다: 10 mM Tris (pH 7.4), 50 mM NaCl, 및 2 mM DTPA 중 (중쇄 내 도입된 시스테인을 갖는) 환원 및 재산화된 항체의 10 mg/mL 용액에 0.5 부피의 프로필렌 글리콜을 첨가하였다. 디메틸아세트아미드 중 아세트아미드-기반 약물 링커의 10 mM 용액을 접합 직전에 제조하였다. 상기 항체 용액에 첨가된 바와 같은 당량의 프로필렌 글리콜을 6-배 몰의 과량의 약물 링커에 첨가하였다. 상기 묽은 약물-링커 용액을 항체 용액에 첨가하고 1 M Tris(pH 9)를 이용하여 pH를 8.0-8.5로 조정하였다. 접합 반응을 37℃에서 45 분 동안 진행하였다. 접합은 역상 PLRP-S 크로마토그래피를 환원 및 변성시킴으로써 확인하였다. 과량의 약물 링커를 Quadrasil MP 수지(시그마 알드리치; 제품 번호 679526)로 제거하고 완충액을 PD-10 탈염 컬럼(지이 헬쓰케어; 제품 번호 17-0851-01)을 이용하여 10 mM Tris(pH 7.4), 50 mM NaCl, 및 5% 프로필렌 글리콜로 교환하였다.

약물 링커에 대한 예시적 합성 반응식

하기 반응식은 약물 링커를 합성하기 위한 경로를 예시하며 - PBD 이량체는 특이적 치환체, 이량체 링크를 갖는 것으로 나타나지만, 이들은 본 발명의 범주 내에서 다양할 수 있다.

반응식 A

글루쿠로나이드 링커 중간체 S1(참조: Jeffrey et al., Bioconjugate Chemistry, 2006, 17, 831-840)을 -78℃에서 디클로로메탄 중 디포스겐으로 처리하여 글루쿠로나이드 클로로포르메이트를 얻을 수 있고, 이를 나중에 적가로 CH₂Cl₂ 중 용해된 PBD 이량체 S2와 반응 반응시킨다. 반응물을 2시간에 걸쳐 0℃로 가온시킨 후, 추출에 의해 화합물 S3을 얻을 것이다. MeOH, 테트라하이드로푸란, 및 물(0℃로 냉각됨)의 동량 용매 혼합물 중 S3의 용액을 4시간 동안 리튬 히드록사이드 모노하이드레이트로 처리한 후, 반응물을 냉 아세트산으로 처리하여 화합물 S4를 얻을 것이다. 말레이미도카프로일 NHS 에스테르를 DMF 중 S4의 용액에 첨가한 후, 디이소프로필에틸아민을 첨가하고, 2시간 동안 질소 하에 상온에서 교반시킴으로써 소정의 약물 링커 S5를 얻을 것이다.

반응식 B

말레이미도카프로일 N-히드록시숙신이미드 및 H-Val-Ala-OH를 반응시켜 합성될 수 있는 말레이미드 링커 S6는 무수 디클로로메탄 중 EEDQ의 존재 하에 예시적인 화합물 S2에 연결될 수 있다.

반응식 C

링커 S8은 5% 메탄올/디클로로메탄 중 EEDQ의 존재 하에 예시적인 화합물 S2에 연결될 수 있다. S9의 탈보호는 무수 디클로로메탄 중 Ph₃P, 피롤리딘 및 테트라키스 팔라듐의 사용에 의해 수행될 수 있다. S10은 DMF 중 DIPEA의 존재 하에 말레이미도카프로일-NHS 에스테르의 첨가에 의해 소정의 생성물로 전환될 수 있다.

추가의 바람직한 것

하기 바람직한 것은 상술한 바와 같은 본 발명의 모든 측면에 적용될 수 있거나, 또는 단일 측면과 관련될 수 있다. 이 선호를 임의의 조합으로 함께 조합할 수 있다.

일부 실시양태에서, R^6', R^7', R^9', R^10', R^11' 및 Y'는 바람직하게는 각각 R⁶, R⁷, R⁹, R¹⁰, R¹¹ 및 Y와 동일하다.

이량체 결합

Y 및 Y'는 바람직하게는 O이다.

R"는 바람직하게는 치환기가 없는 C₃ _-7 알킬렌기이다. 더욱 바람직하게는, R"는 C₃, C₅ 또는 C₇ 알킬렌이다. 가장 바람직하게는, R''는 C₃ 또는 C₅ 알킬렌이다.

R ⁶ 내지 R ⁹

R⁹는 바람직하게는 H이다.

R⁶은 바람직하게는 H, OH, OR, SH, NH₂, 니트로 및 할로로부터 선택되고, 더욱 바람직하게는 H 또는 할로이고, 가장 바람직하게는 H이다.

R⁷은 바람직하게는 H, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NRR' 및 할로로부터 선택되고, 더욱 바람직하게는 독립적으로 H, OH 및 OR, - 여기서 R은 바람직하게는 선택적으로 치환된 C₁ _-7 알킬, C₃ _-10 헤테로시클릴 및 C₅ _-10 아릴기로부터 선택됨 - 로부터 선택된다. R은 더욱 바람직하게는 치환 또는 비치환될 수 있는 C₁ _-4 알킬기일 수 있다. 원하는 치환기는 C₅ _-6 아릴기(예컨대 페닐)이다. 특히 바람직한 7 위치의 치환기는 OMe 및 OCH₂Ph이다. 특별히 원하는 다른 치환기는 디메틸아미노(즉, NMe₂); -(OC₂H₄)_qOMe, - 여기서, q는 0 내지 2임 -; 모르포리노, 피페리디닐 및 N-메틸-피페라지닐을 포함하는 니트로젠-함유 C₆ 헤테로시클릴이다.

이들 바람직한 것은 각각 R^9', R^6' 및 R^7'에 적용된다.

R ²

R^C1, R^C2 및 R^C3는 독립적으로 H 및 비치환된 C₁ _-2알킬로부터 선택된다. 일부 바람직한 실시양태에서, R^C1, R^C2 및 R^C3은 모두H이다. 다른 실시양태에서, R^C1, R^C2 및 R^C3은 모두 메틸이다. 특정한 실시양태에서, R^C1, R^C2 및 R^C3은독립적으로 H 및 메틸로부터 선택된다.

X는 하기를 포함하는 리스트로부터 선택되는 기이다: OH, SH, CO₂H, COH, N=C=O, NHNH₂, CONHNH₂,

, 및 NHR^N, 여기서 R^N은 H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된다. X는 바람직하게는 OH, SH, CO₂H, -N=C=O 또는 NHR^N이고, 더욱 바람직하게는 OH, SH, CO₂H, -N=C=O 또는 NH₂이다. 특히 바람직한 기는 OH, SH 및 NH₂를 포함하며, 가장 바람직한 기는 NH₂이다.

R ¹²

R¹²는 하기 (a) 내지 (f)로부터 선택된다:

(a) 할로, 니트로, 시아노, 에테르, C₁ _-7알킬, C₃ _-7 헤테로시클릴 및 비스-옥시-C₁ _-3알킬렌을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환된, C₅ _-10 아릴기;

(b) C₁ _-5 포화된 지방족 알킬; C₃ _-6 포화된 시클로알킬;

(c) C₃ _-6 포화된 시클로알킬;

(d) R²¹, R²² 및 R²³ 각각이 독립적으로 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되며, 여기서 R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자가 5를 초과하지 않는 것인,

;

(e) R^25a와 R^25b 중 어느 하나가 H이며 다른 하나가 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시에서 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐에서 선택되는 것인,

;

(f) R²⁴가 H; C₁ _-3 포화된 알킬; C₂ _-3 알케닐; C₂ _-3 알키닐; 시클로프로; 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인,

.

R¹²가C₅ _-10아릴기인 경우, 이는C₅ _-7아릴기일 수 있다. C₅ _-7 아릴기는 페닐기 또는 C₅ _-7헤테로아릴기, 예를 들면, 푸라닐, 티오페닐 및 피리딜일 수 있다. 일부 실시양태에서, R¹²는 바람직하게는 페닐이다. 다른 실시양태에서, R¹²는 바람직하게는 티오페닐, 예를 들면 티오펜-2-일 및 티오펜-3-일이다.

R¹²가C₅ _-10아릴기인 경우, 이는C₈ _-10아릴기, 예를 들면 퀴놀리닐 또는 이소퀴놀리닐 기일 수 있다. 퀴놀리닐 또는 이소퀴놀리닐 기는 임의의 이용 가능한 고리 위치를 통해 PBD 코어에 결합될 수 있다. 예를 들면, 퀴놀리닐은 퀴놀린-2-일, 퀴놀린-3-일, 퀴놀린-4-일, 퀴놀린-5-일, 퀴놀린-6-일, 퀴놀린-7-일 및 퀴놀린-8-일일 수 있다. 이들 중에서, 퀴놀린-3-일 및 퀴놀린-6-일이 바람직할 수 있다. 이소퀴놀리닐은 이소퀴놀린-1-일, 이소퀴놀린-3-일, 이소퀴놀린-4-일, 이소퀴놀린-5-일, 이소퀴놀린-6-일, 이소퀴놀린-7-일 및 이소퀴놀린-8-일일 수 있다. 이들 중에서, 이소퀴놀린-3-일 및 이소퀴놀린-6-일이 바람직할 수 있다.

R¹²가C₅ _-10아릴기인 경우, 이는 임의의 수의 치환기를 가질 수 있다. 이는 바람직하게는 1 내지 3 개의 치환기를 가질 수 있으며, 1 및 2 개가 더욱 바람직하고, 단일 치환된 기가 가장 바람직하다. 치환기는 임의의 위치에 존재할 수 있다.

R¹²가C₅ _-7아릴기인 경우, 단일 치환기는 바람직하게는 화합물의 나머지에 대한 결합에 인접하지 않은 고리 원자 상에 존재한다. 즉, 이것은 바람직하게는 화합물의 나머지에 대한 결합에 대해 β 또는 γ 위치에 존재한다. 따라서, C₅ _-7 아릴기가 페닐일 경우, 치환기는 바람직하게는 메타 또는 파라 위치에 존재하고, 더욱 바람직하게는 파라-위치에 존재한다.

R¹²가 C₈ _-10 아릴기, 예를 들면 퀴놀리닐 또는 이소퀴놀리닐일 경우, 이는 퀴놀린 또는 이소퀴놀린 고리의 임의의 위치에 임의의 수의 치환기를 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 이는 1, 2 또는 3 개의 치환기를 가지며, 이들은 근위 및 원위 고리 상에 또는 양쪽 상에(1 이상의 치환기의 경우) 존재할 수 있다.

R ¹² 가 C ₅ _-10 아릴기일 때, R ¹² 치환기

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때 R¹² 상의 치환기가 할로인 경우, 이는 바람직하게는 F 또는 Cl, 더욱 바람직하게는 F이다.

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때 R¹² 상의 치환기가 에테르인 경우, 이는 일부 실시양태에서 알콕시기, 예를 들면 C₁ _-7 알콕시기(예컨대 메톡시, 에톡시)일 수 있거나, 또는 이는 일부 실시양태에서 C₅ _-7 아릴옥시기(예컨대 페녹시, 피리딜옥시, 푸라닐옥시)일 수 있다. 알콕시기는 그 자체로 예를 들면 아미노기(예컨대 디메틸아미노)로 추가로 치환될 수 있다.

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때 R¹² 상의 치환기가 C₁ _-7 알킬인 경우, 이는 바람직하게는 C₁ _-4 알킬기(예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 부틸)일 수 있다.

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때 R¹² 상의 치환기가 C₃ _-7 헤테로시클일인 경우, 이는 일부 실시양태에서 C₆ 질소 함유 헤테로시클일기, 예컨대 모르폴리노, 티오모르폴리노, 피페리디닐, 피페라지닐일 수 있다. 이들 기는 질소 원자를 통해 PBD 부분의 나머지에 결합될 수 있다. 이들 기는 예컨대 C₁ _-4 알킬기로 추가로 치환될 수 있다. C₆ 질소 함유 헤테로시클일기가 피페라지닐일 경우, 상기 추가의 치환기는 제2 질소 고리 원자 상에 존재할 수 있다.

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때 R¹² 상의 치환기가 비스-옥시-C₁ _-3 알킬렌인 경우, 이는 바람직하게는 비스-옥시-메틸렌 또는 비스-옥시-에틸렌이다.

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때, 특히 바람직한 치환기는 메톡시, 에톡시, 플루오로, 클로로, 시아노, 비스-옥시-메틸렌, 메틸-피페라지닐, 모르폴리노 및 메틸-티오페닐을 포함한다. 다른 R¹²에 대한 특히 바람직한 치환기는 디메틸아미노프로필옥시이다.

R¹²가C₅ _-10아릴기일 때, 특히 바람직한 치환된 R¹² 기는 4-메톡시-페닐, 3-메톡시페닐, 4-메틸페닐, 4-에톡시-페닐, 3-에톡시-페닐, 4-플루오로-페닐, 4-클로로-페닐, 3,4-비스옥시메틸렌-페닐, 4-메틸티오페닐, 4-시아노페닐, 4-페녹시페닐, 퀴놀린-3-일 및 퀴놀린-6-일, 이소퀴놀린-3-일 및 이소퀴놀린-6-일, 2-티에닐, 2-푸라닐, 메톡시나프틸 및 나프틸을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다. 다른 가능한 치환된 R¹² 기는 4-니트로페닐이다.

R¹² 가 C₁ _-5 포화된 지방족 알킬인 경우, 이는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸 또는 펜틸일 수 있다. 일부 실시양태에서, 이는 메틸, 에틸 또는 프로필(n-펜틸 또는 이소프로필)일 수 있다. 이들 실시양태의 일부에서, 이는 메틸일 수 있다. 다른 실시양태에서, 이는 직쇄 또는 분지쇄형일 수 있는 부틸 또는 펜틸일 수 있다.

R¹² 가 C₃ _-6 포화된 시클로알킬인 경우, 이는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 또는 시클로헥실일 수 있다. 다른 실시양태에서, 이는 시클로프로필일 수 있다.

R¹² 가

인 경우,각각의R²¹, R²² 및 R²³ 는 독립적으로 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되며, R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자는 5를 초과하지 않는다. 다른 실시양태에서, R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자는 4를 초과하지 않거나 3을 초과하지 않는다.

다른 실시양태에서, R²¹, R²² 및 R²³ 중 하나는H이며, 이때 다른 두 기는 H, C_1-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐 및 시클로프로필로부터 선택된다.

다른 실시양태에서, R²¹, R²² 및 R²³ 중 둘은H이며, 이때 다른 기는 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐 및 시클로프로필로부터 선택된다.

다른 실시양태에서, H가 아닌 기는 메틸 및 에틸로부터 선택된다. 이들 실시양태의 일부에서, H가 아닌 기는 메틸이다.

다른 실시양태에서, R²¹는 H이다.

다른 실시양태에서, R²²는 H이다.

다른 실시양태에서, R²³는 H이다.

다른 실시양태에서, R²¹ 및 R²²는H이다.

다른 실시양태에서, R²¹ 및 R²³는H이다.

다른 실시양태에서, R²² 및 R²³는H이다.

특히 원하는 R¹² 기는

이다.

R¹²가

인 경우, R^25a 및 R^25b 중 하나는 H이며 다른 하나는 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택된다. 다른 실시양태에서, H가 아닌 기는 선택적으로 치환된 페닐이다. 페닐 선택적 치환기가 할로인 경우, 이는 바람직하게는 플루오로이다. 일부 실시양태에서, 페닐기는 비치환된다.

R¹²가

인 경우, R²⁴ 는 H; C₁ _-3 포화된 알킬; C₂ _-3 알케닐; C₂ _-3 알키닐; 시클로프로필; 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택된다. 페닐 선택적 치환기가 할로일 경우, 이는 바람직하게는 플루오로이다. 일부 실시양태에서, 페닐기는 비치환된다.

다른 실시양태에서, R²⁴는 H, 메틸, 에틸, 에테닐 및 에티닐로부터 선택된다. 이들 실시양태의 일부에서, R²⁴는H 및 메틸로부터 선택된다.

M 및 z

M 및 M'는 1가의 약학적으로 허용가능한 양이온인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 Na⁺이다.

z는 바람직하게는 3이다.

특히 바람직한 본 발명의 화합물은 하기 화학식 Ia이다:

화학식 Ia

상기 식에서,

n은 1 또는 3이고;

R^1a는 메틸 또는 페닐이고;

R^12a는 하기로부터 선택된다:

R^12a에 대한 추가의 기는 하기일 수 있다:

및

제3의 측면

제1 측면에 대해 상기 나타낸 바람직한 것은 필요에 따라 이 측면의 화합물에 적용될 수 있다.

R¹⁰이 카르바메이트 질소 보호기일 경우, 이는 바람직하게는 Teoc, Fmoc 및 Troc일 수 있고, 더욱 바람직하게는 Troc일 수 있다.

R¹¹이 O-Prot^O (여기서 Prot^O는 산소 보호기임)일 경우, Prot^O는 바람직하게는 TBS 또는 THP일 수 있고, 더욱 바람직하게는 TBS일 수 있다.

R¹⁰이 헤미아민 질소 보호기일 경우, 이는 바람직하게는 MOM, BOM 또는 SEM일 수 있고, 더욱 바람직하게는 SEM일 수 있다.

화학식 I의 화합물에 대한 선호는 본 발명의 제 6의 측면에서 D에 대해 필요에 따라 적용한다.

예를 들면, 제6 측면에서, PBD 이량체는

이

로 대체되고,

이

로 대체되고,

이

로 대체되는 것을 제외하고는, 본 명세서에 기술된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 중 임의의 것이며, 여기서 물결선은 링커 단위에 부착 지점을 표시한다.

따라서, 본 발명의 접합체는 하기 화학식 IV 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물을 갖는 것들을 포함한다:

여기서, L은 리간드 단위(즉, 표적화 제제)이며, LU는 링커 단위이고, PBD는 이량체 D, D는

이

로 대체되고,

이

로 대체되고,

이

로 대체되는 것을 제외하고는, 본 명세서에 기술된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물 중 임의의 것이며, 물결선은 링커 단위의 부착 지점을 표시한다.

(a) 본 발명의 접합체는 예를 들면, 하기 화학식의 것들을 포함한다:

상기 식에서, 별표는 PBD 이량체(D)에 대한 부착 지점을 나타내며, CBA는 세포 결합제이고, L¹은 효소의 작용으로 절단될 수 있는 특이성 단위이고, A¹은 세포 결합제에 L¹을 연결하는신장 단위이다.

(b)본 발명의 접합체는 예를 들면, 하기 화학식의 것들을 포함한다:

상기 식에서, 별표는 PBD 이량체(D)에 대한 부착 지점을 나타내며, CBA는 세포 결합제이고, A¹은 세포 결합제에 L¹을 연결하는신장 단위이며, L¹은카뎁신의 작용으로 절단될 수 있는 디펩티드이거나 L¹은 -Phe-Lys-, -Val-Ala-, -Val-Lys-, -Ala-Lys-, 및 -Val-Cit-로부터 선택된다.

본 발명의 바람직한 접합체는 (a) 및 (b)에서 기술된 것들 중 임의의 것을 포함하며, 여기서 A¹은 하기 식이다:

상기 식에서, 별표는 L¹에 부착 지점을 표시하고, 물결선은 CBA의 부착 지점을 표시하며, n은 0 내지 6이다(바람직하게는 n은 5임).

실시예

실시예 1에 대한 일반적인 실험 방법

ADP 220 편광계(Bellingham Stanley Ltd.) 상에서 광학 회전을 측정하고, 농도(c)를 g/100 ㎖로 제공하였다. 융점은 디지털 융점 장치(Electrothermal)를 이용하여 측정하였다. IR 스펙트럼을 Perkin-Elmer Spectrum 1000 FT IR 분광계 상에 기록하였다. 각각 400 및 100 MHz에서 Bruker Avance NMR 분광계를 이용하여 300 K에서 ¹H 및 ¹³C NMR 스펙트럼을 얻었다. TMS(δ = 0.0 ppm)에 대한 화학적 이동을 기록하고, 신호를 헤르츠(Hz)로 주어지는 커플링 상수와 함께, s(단일항), d(이중항), t(삼중항), dt(이중 삼중항), dd(이중항의 이중항), ddd(이중항의 이중 이중항) 또는 m(다중항)으로 나타내었다. Waters 2996 PDA와 함께 Waters 2695 HPLC에 결합된 Waters Micromass ZQ 기기를 이용하여 질량 분광학(MS) 데이터를 수집하였다. 사용된 Waters Micromass ZQ 변수는 하기와 같다: 모세관(kV), 3.38; 원뿔(V), 35; 추출기(V), 3.0; 소스 온도(℃), 100; 탈용매화 온도(℃), 200; 원뿔 유속(L/h), 50; 탈-용매화 유속(L/h), 250. 샘플을 기기에 도입하기 위한 금속 코팅 붕규산염 유리 팁(tip)을 이용하여 포지티브 W 모드의 Waters Micromass QTOF Global 상에서 고해상도 질량 분광학(HRMS) 데이터를 기록하였다. 실리카 겔 알루미늄 플레이트(Merck 60, F₂₅₄) 상에서 박층 크로마토그래피(TLC)를 수행하고, 실리카 겔(Merck 60, 230-400 메쉬 ASTM)을 사용하여 플래쉬 크로마토그래피를 수행하였다. HOBt(NovaBiochem) 및 고체-지지 시약(Argonaut)을 제외하고는, 모든 다른 화학 물질 및 용매는 시그마-알드리치로부터 구입하고, 추가의 정제 없이 공급된 대로 사용하였다. 적절한 건조제의 존재 하에 건조 질소 분위기 하에서 증류에 의해 무수 용매를 제조하고, 4Å 분자체 또는 나트륨 와이어 상에 보관하였다. 석유 에테르는 40-60℃에서 비등하는 분획을 지칭한다.

화합물 1은 본 명세서에서 참고로 인용하는 WO 2102010/043880 (화합물 17), 에 기술된 바와 같이 합성하였다.

일반적인 LC/MS 조건: 물(A)(포름산 0.1%) 및 아세토니트릴(B)(포름산 0.1%)의 이동상을 이용하여 HPLC(Waters Alliance 2695)를 구동하였다. 구배: 1.0 분에 걸쳐 초기 조성 5% B, 그 다음 3 분 내에 5% B에서 95% B. 95% B에서 0.5 분 동안 조성을 유지한 후, 0.3 분 내에 5% B로 되돌렸다. 총 구배 구동 시간은 5 분에 상당하였다. 유속 3.0 ㎖/분, 400 ㎕를 질량 분광계에 통과하는 제로 무효 부피 T형 조각(zero dead volume tee piece)을 통해 흘렸다. 파장 검출 범위: 220 내지 400 ㎚. 기능 유형: 다이오드 어레이(535 스캔). 컬럼: Phenomenex^? Onyx Monolithic C18 50×4.60 ㎜.

보로네이트 에스테르의 합성

(a) 메틸 - 프로프 -2-인일- 카르밤산 2,2,2- 트리클로로 -에틸 에스테르 ( I2 )

DCM(100 mL) 중 Troc 클로로포르메이트(10.2 mL, 75.8 mmol, 1.05 당량) 용액을 DCM(150 mL) 중 N-메틸프로파길아민(I1)(5g, 72.3 mmol, 1 당량) 및 TEA(12.08 mL, 0.86 mmol, 1.2 당량) 용액에 -78℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반시켰다. 용액을 물(200 mL), 0.1 N 수성 시트르산(200 mL), 포화된 수성 NaHCO3(100 mL), 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 마그네슘 설페이트로 건조시키고 진공하에 증발시켜 무색 오일로서 원하는 생성물을 얻었다(15.5 g, 93 %). LC/MS에 의해 검출하지 않았다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.69 (s, 2H), 4.09 (d, 2H, J = 2.4 Hz), 3.01-2.97 (m, 3H), 2.20 (t, 1H, J = 2.4 Hz).

(b) 메틸 -[(E)-3-(4,4,5,5- 테트라메틸 -[1,3,2] 디옥사보로란 -2-일)-알릴]- 카르밤산 2,2,2- 트리클로로에틸 에스테르 ( I3 )

순수한(neat) BH₃.SMe₂ 복합체(1.7 mL, 16.8 mmol, 1.3 당량)를 아르곤 하에 0℃에서 건조 THF(5 mL) 중에 알파 (-)피넨(5.4 mL, 33.6 mmol, 2.6 당량) 용액에 적가하였다. 반응물을 밤새 교반시키고, 흰색 침전물을 관찰하였다. 건조 THF(5 mL) 중에 Troc 보호된 메틸프로파길아민(3 g, 13 mmol, 1 당량) 용액을 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고, 반응을 상온에서 밤새 지속하였다. 그후 순수한 아세트알데하이드(22 mL, 387 mmol, 30 당량)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 5시간 동안 교반시켰다. 휘발물을 진공하에 제거하였다. 에테르(20 mL), 이어서 피나콜(2.4 g, 20.1 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 상온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 펜탄(20 mL) 중에 두고, 물(2 x 10 mL)로 세척한 후, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 휘발물을 회전증발(rotoevaporation)에 의해 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다(구배: 0/100 내지 10/90 에틸 아세테이트/헥산 v/v). 순수한 분획을 과망간산칼륨으로 가시화하고 2.25 g(46%)의 순수한 보로네이트 에스테르를 얻었다. LC/MS에 의해 검출하지 않았다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.44 (dt, 1H, J = 18.0 Hz, J = 4.9 Hz,), 5.48 (dd, 1H, J = 18.0 Hz, J = 1.3 Hz), 4.66 (d, 2H, J = 6.3 Hz), 3.95 (dd, 2H, J = 4.9 Hz, J = 1.7 Hz), 2.89 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 1.20 (s, 12H).

실시예 1

(a) 화합물 2

화합물 1(WO 2010/0043880의 화합물 17)을 건조 THF(25 mL) 중에 용해시키고, -78℃에서 냉각시켰다(700 mg, 0.65 mmol, 1 당량). THF(1M, 1.95 mL, 1.95 mmol, 3 당량) 중 과수화물의 용액을 교반된 반응 혼합물에 천천히 주입하였다. 반응 완료를 30분 후 관찰하였다. 반응 혼합물을 물(10 mL)로 퀀칭시키고, 이후에 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기물을 물(100 mL)로 세척한 후, 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조시키고, 휘발물을 회전증발, 이어서 고진공에 의해 제거하였다. 잔류물을 DCM (50 mL), 에탄올(140 mL), 물(70 mL) 및 실리카 겔(100 g)로 처리하였다. 점성 혼합물을 3일 동안 상온에서 교반시켰다. 혼합물을 신터(sinter) 깔대기를 통해 천천히 여과하고, 실리카 잔류물을 90/10 클로로포름/메탄올 v/v(500mL)로 세척하였다. 유기상을 물(300 mL), 염수(100 mL), 건조된(마그네슘 설페이트)로 세척하고, 여과하고, 진공하에 증발시켜 미정제 물질을 얻고, 이를 플래쉬 크로마토그래피(메탄올/클로로포름의 구배, 0/100에서 부터 2.5/97.5,v/v)로 정제하여 150 mg(29 %)의 비교적 불안정한 PBD 모노 트리플레이트(2)를 얻어, 다음 단계에서 바로 사용하였다.

(b) 화합물 3

고체 Pd(PPh₃)₄(6.6 mg, 5.7 μmol)를 상온에서 톨루엔(8 mL), EtOH(4 mL), 및 H₂O(4 mL) 중 Na₂CO₃(65 mg, 0.61 mmol) 중 PBD 모노-트리플레이트(2)(150 mg, 0.19 mmol) 및 Troc-보호된 보로네이트화된 에스테르(I3)(114 mg, 0.31 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20시간 동안 질소 대기하에 교반시키고, 이 시점에서 LC/MS 및 TLC(EtOAc)에 의해 판단하여 반응이 완결된 것으로 간주되었다. 용매를 진공에서 감압하에 회전 증발에 의해 제거하고, 생성된 잔류물을 EtOAc(30 mL)와 H₂O(60 mL) 간에 분배하였다. 수성상을 EtOAc(2 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기층을 H₂O(30 mL), 염수(40 mL), 건조된(MgSO₄)로 세척하고, 여과하고, 증발시켜 미정제 생성물(3)을 얻었다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여(메탄올/클로로포름의 구배, 0.5/100에서 부터 2.5/97.5, v/v) 60 mg(35.5 %)을 얻었다. LC/MS rt 3.28 분 m/z (879.97) M+H.

(c) 화합물 4

미세하게 배분된, 새롭게 제조한 Cd/Pb 커플(150 mg)을 THF/1N 수성 암모늄 아세테이트(1.5 mL /1.5 mL) 중 Troc 보호된 PBD 이량체(3)(55 mg, 0.070 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 격렬하게 교반시키고, 1시간 후 완료를 관찰하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 클로로포름(v/v, 3 x 20 mL) 및 1N 수성 탄산나트륨(50 mL) 중 15 % MeOH에 두었다. 유기물을 염수(20 mL)로 세척하고, 황산나트륨 상에 건조시키고, 휘발물을 진공하에 제거하였다. 미정제 물질을 예비 LC/MS로 정제하여 화합물 4를 얻었다. LC/MS rt 2.43 분 m/z (704.4) M+H.

하기 실시예에 대한 일반 실험 방법

LCMS 데이터는 전기분무 이온화와 함께 Agilent 6110 사중극자 MS를 갖춘 Agilent 1200 시리즈 LC/MS를 사용해 얻었다. 이동상 A - 물 중 0.1% 아세트산. 이동상 B - 아세트니트릴 중 0.1%. 유속: 1.00ml/분. 구배: 5% B에서 3분에 걸쳐 95% B까지 상승시키고 1분 동안 95% B로 유지한 후, 6초에 걸쳐 5% B로 되돌렸다. 총 구동 시간은 5분이다. 컬럼: Phenomenex Gemini-NX 3㎛ C18, 30 x 2.00mm. 크로마토그램은 254nm에서 UV 검출을 기초 로 하였다. 질량 스펙트럼은 양성 모드에서 MS를 사용해 달성하였다. 양성자 NMR 화학적 이동 값은 Bruker AV400를 사용해 400 MHz에서 델타 규모 상에서 측정하였다. 다음의 약어를 사용하였다: s(단일항), d(이중항), t(삼중항), q(사중항), m(다중항), br(브로드). 커플링 상수는 Hz로 기록하였다. 달리 언급되지 않는 한, 컬럼 크로마토그래피(플래쉬 절차에 의함)은 Merck Kieselgel 실리카(Art. 9385) 상에서 수행하였다. 질량 분광학(MS) 데이터는 Waters 2795 HPLC 분리 모듈에 커플링된 Waters Micromass LCT 장치를 사용해 수집하였다. 박층 크로마토그래피(TLC)는 실리카 겔 알루미늄 플레이트(Merck 60, F₂₅₄) 상에서 수행하였다. 모든 다른 화학 물질 및 용매는 시그마-알드리치 또는 피셔 사이언티픽(Fisher Scientific)으로부터 구입하고, 추가의 정제 없이 공급된 대로 사용하였다.

ADP 220 편광계(Bellingham Stanley Ltd.) 상에서 광학 회전을 측정하고, 농도(c)를 g/100 ㎖로 제공하였다. 융점은 디지털 융점 장치(Electrothermal)를 이용하여 측정하였다. IR 스펙트럼을 Perkin-Elmer Spectrum 1000 FT IR 분광계 상에 기록하였다. 각각 400 및 100 MHz에서 Bruker Avance NMR 분광계를 이용하여 300 K에서 ¹H 및 ¹³C NMR 스펙트럼을 얻었다. TMS(δ = 0.0 ppm)에 대한 화학적 이동을 기재하고, 신호를 헤르츠(Hz)로 주어지는 커플링 상수와 함께, s(단일항), d(이중항), t(삼중항), dt(이중 삼중항), dd(이중항의 이중항), ddd(이중항의 이중 이중항) 또는 m(다중항)으로 나타내었다. Waters 2996 PDA와 함께 Waters 2695 HPLC에 결합된 Waters Micromass ZQ 기기를 이용하여 질량 분광학(MS) 데이터를 수집하였다. 사용된 Waters Micromass ZQ 변수는 하기와 같다: 모세관(kV), 3.38; 원뿔(V), 35; 추출기(V), 3.0; 소스 온도(℃), 100; 탈용매화 온도(℃), 200; 원뿔 유속(L/h), 50; 탈-용매화 유속(L/h), 250. 샘플을 기기에 도입하기 위한 금속 코팅 붕규산염 유리 팁(tip)을 이용하여 포지티브 W 모드의 Waters Micromass QTOF Global 상에서 고해상도 질량 분광학(HRMS) 데이터를 기록하였다. 실리카 겔 알루미늄 플레이트(Merck 60, F₂₅₄) 상에서 박층 크로마토그래피(TLC)를 수행하고, 실리카 겔(Merck 60, 230-400 메쉬 ASTM)을 사용하여 플래쉬 크로마토그래피를 수행하였다. HOBt(NovaBiochem) 및 고체-지지 시약(Argonaut)을 제외하고는, 모든 다른 화학 물질 및 용매는 시그마-알드리치로부터 구입하고, 추가의 정제 없이 공급된 대로 사용하였다. 적절한 건조제의 존재 하에 건조 질소 분위기 하에서 증류에 의해 무수 용매를 제조하고, 4Å 분자체 또는 나트륨 와이어 상에 보관하였다. 석유 에테르는 40-60℃에서 비등하는 분획을 지칭한다.

주요 중간체의 합성

(i) 1,1'-[[(프로판-1,3- 디일 ) 디옥시 ] 비스 (11 aS )-7- 메톡시 -2-[[ 트리플루오로 메틸) 설포닐 ] 옥시 ]-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-1,10,11,11a- 테트라하이드로 -5H- 피롤로 [2,1-c][1,4]-벤조디아제핀-5,11- 디온 ] ( 7 )

화합물 5는 본 명세서에 참고로 인용하는 WO 2010/043880(화합물 6a)에 기재된 대로 합성하였다.

(a) 1,1'-[[(프로판-1,3- 디일 ) 디옥시 ] 비스 [(11 aS )-11- 설포 -7- 메톡시 -2-옥소-10-((2-(트 리 메틸실릴) 에톡시 ) 메틸 )1,2,3,10,11,11a- 헥사히드로 -5H- 피롤로[2,1-c][1,4]벤조디아제핀 -5,11- 디온 ]] ( 6 )

디올 5(25.60 g, 29.9 mmol, 1.0 당량), NaOAc(6.90 g, 84.1 mmol, 2.8 당량) 및 TEMPO(0.188 g, 1.2 mmol, 0.04 당량)를 질소 하에 DCM(326 mL) 중 용해시켰다. 이를 -8℃로 냉각시키고, TCCA(9.70 g, 41.7 mmol, 1.4 당량)를 20분에 걸쳐 일부씩 첨가하고, 이 동안 용액은 어두운 갈색으로 변하였고, 이는 반응이 계속됨에 따라 밝아졌다. 30분 후, 냉 DCM(200 mL)를 첨가하고, 혼합물을 셀라이트를 통해 여과한 후, 포화된 탄산수소 나트륨/티오황산 나트륨(1:1 v/v; 200 mL x 2)의 용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 비스 케톤 6을 황색/주황색 스폰지로서 얻었다(25.5 g, 100%). LC/MS (3.173 분 (ES⁺)). m/z: 854.20 [M]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.32 (s, 2H), 7.25 (s, 2H), 5.50 (d, 2H, J = 10.1 Hz), 4.75 (d, 2H, J = 10.1 Hz), 4.60 (dd, 2H, J = 9.9, 3.1 Hz), 4.31-4.18 (m, 6H), 3.89-3.84 (m, 8H), 3.78-3.62 (m, 4H), 3.55 (dd, 2H, J = 19.3, 3.0 Hz), 2.76 (dd, 2H, J = 18.6, 10.2 Hz), 2.42 (p, 2H, J = 5.8 Hz), 0.98-0.91 (m, 4H), 0.00 (s, 18H).

(b) 1,1'-[[(프로판-1,3- 디일 ) 디옥시 ] 비스 (11 aS )-7- 메톡시 -2-[[( 트리플루오로메틸 ) 설포닐 ] 옥시 ]-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-1,10,11,11a- 테트라히드로 -5H- 피롤로 [2,1-c][1,4]-벤조디아제핀-5,11- 디온 ] ( 7 )

무수 2,6-루티딘(1.984 g, 17.864 mmol, 6.22 당량)을 질소 분위기 하에서 -45℃(드라이 아이스/아세토니트릴)에서 무수 DCM(90 mL) 중 비스-케톤 6(2.45 g, 2.977 mmol, 1.0 당량)의 격렬하게 교반된 용액에 일부분씩 주입하였다. 온도를 -40℃ 이하로 유지시키면서 새롭게 개봉된 앰플로부터 취한 무수 트리플산 무수물(5.04 g, 17.86 mmol, 6.0 당량)을 빠르게 적가 주입하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 -45℃에서 교반시켰고, 이 시점에서 TLC(50/50 v/v n-헥산/EtOAc) 및 LCMS는 출발 물질의 완전한 소비를 나타냈다. 냉 반응 혼합물을 DCM(100 mL)으로 즉시 희석하고, 격렬하게 진탕시키면서 물(1 x 50 mL), 5% 시트르산 용액(1 x 100 mL), 포화된 NaHCO₃(100 mL), 염수(50 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 미정제 생성물을 얻었고, 이를 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, 구배 용리: 90:10 n-헥산/EtOAc v/v 내지 60:40 n-헥산/EtOAc v/v)로 정제하여 비스 에놀 트리플레이트를 황색 폼으로서 얻었다(2.097 g, 63%). LC/MS (3.916 분 (ES⁺)). m/z: 1117.24 [M]⁺.¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.33 (s, 2H), 7.26 (s, 2H), 7.14 (t, 2H, J = 2.0 Hz), 5.51 (d, 2H, J = 10.1 Hz), 4.76 (d, 2H, J = 10.1 Hz), 4.62 (dd, 2H, J = 11.0, 3.6 Hz), 4.32 - 4.23 (m, 4H), 3.94 - 3.90 (m, 8H), 3.81 - 3.64 (m, 4H), 3.16 (ddd, 2H, J = 16.4, 11.1, 2.3 Hz), 2.43 (p, 2H, J = 5.9 Hz), 1.23 - 0.92 (m, 4H), 0.02 (s, 18H).

(ii) (E)-(9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 3-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보로란 -2-일) 알릴카르바메이트 ( 10 )

(a) (9H- 플루오엔 -9-일) 메틸 프로프 -2- 인일카르바메이트 ( 9 )

DCM(150 mL) 중 Fmoc 클로라이드(25.00 g, 96.64 mmol, 1.05 당량)의 용액을 -78℃에서 DCM(200 mL) 중 프로파길아민 8(5.89 mL, 92.04 mmol, 1.0 당량) 및 트리에틸아민(15.4 mL, 110.4 mmol, 1.2 당량)의 용액에 적가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 교반시키고, 16시간 후 용액을 물(300 mL), 0.1 N 수성 시트르산(300 mL), 포화된 수성 NaHCO₃(300 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하였다. 유기상을 마그네슘 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축시켜 비정질 흰색 분말을 얻었다. 냉 헥산(200 mL) 중 초음파처리한 후 여과하여 생성물을 흰색 고체로서 얻었다(24.316 g, 95%). LC/MS (2.758 분 (ES⁺)). m/z: 300.0 [M+Na]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.74 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.57 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 7.41 - 7.37 (m, 2H), 7.30 (dt, 2H, J = 7.5, 1.2 Hz), 4.93 (br s, 1H), 4.41 (d, 2H, J = 6.9 Hz), 4.21 (t, 1H, J = 6.4 Hz), 3.99 (d, 2H, J = 3.3 Hz), 2.24 (t, 1H, J = 2.5 Hz).

(b) (E)-(9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 3-(4,4,5,5- 테트라메틸 -1,3,2- 디옥사보로란 -2-일) 알릴카르바메이트 ( 10 )

순수한 BH₃.SMe₂ 복합체(9.35 mL, 92.47 mmol, 1.3 당량)를 질소 하에 0℃에서 건조 THF(40L) 중에 알파 (-)피넨(25.20 g, 19.72 mmol, 2.6 당량) 용액에 적가하였다. 반응을 밤새 교반시키고, 흰색 침전물을 관찰하였다. 건조 THF(40 mL) 중에 Troc 프로파길아민 9(19.72 g, 71.13 mmol, 1.0 당량) 용액을 0℃에서 반응 혼합물에 첨가하고, 반응을 상온에서 밤새 지속시켜, 흰색 침전물을 용해시켜, 옅은 담황색 현탁액을 형성하였다. 그후 순수한 아세트알데하이드(121.32 mL, 2.134 mol, 30.0 당량)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 5시간 동안 교반시켰다. 휘발물을 감압하에 제거하였다. 디에틸 에테르(125 mL), 이어서 피나콜(10.08 g, 85.36 mmol, 1.2 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 상온에서 밤새 교반시켰다. 혼합물을 DCM (125 mL) 중에 두고, 물(2 x 75 mL)로 세척한 후, 마그네슘 설페이트 상에서 건조시켰다. 휘발물을 감압하에 농축시켜 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다(0/100 내지 60/40 에틸 아세테이트/헥산 v/v). 생성물 분획을 합하고 감압하에 농축시켜 무색 오일을 얻고, 이를 소량의 DCM 중에 취해, -78℃에서 냉각시키고, 흰색 침전물이 형성될 때까지 헥산을 첨가하였다. 현탁액을 5분 동안 교반시키고, 여과하여 생성물을 흰색 고체로서 얻었다(14.09 g, 49%). LC/MS (분 (ES⁺)). m/z: [M]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) ) δ 7.76 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.59 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 7.40 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 7.32 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 6.59 (dt, 1H, J = 18.0, 4.7 Hz), 5.60 (d, 2H, J = 18.0 Hz), 4.90-4.83 (m, 1H), 4.40 (d, 2H, J = 7.1 Hz), 4.22 (t, 1H, J = 7.1 Hz), 3.92 (t, 1H, J = 4.7 Hz), 1.27 (s, 12H).

( iii ) (S)-2-((S)-2-(((9H- 플루오렌 -9-일) 메톡시 ) 카르보닐아미노 )-3- 메틸부탄아미도 )프로피온산( HO - Ala - Val - Fmoc ) ( 12 )

H-Val-Ala-OH 11(1.0g, 5.313 mmol, 1.0 당량) 및 Na₂CO₃(1.42 g, 13.282 mmol, 2.5 당량)을 증류된 H₂O(40 mL) 중에 가용화시키고, 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후 디옥산(40 mL)을 첨가하였다. 아미노산 염의 부분 침전이 발생했다. 디옥산(40 mL) 중 용해된 Fmoc-Cl(1.44 g, 5.579 mmol, 1.05 당량)의 용액을 10분에 걸쳐 격렬하게 교반시키면서 적가하였다. 생성된 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반시킨 후, 얼음 배스를 제거하고, 16시간 동안 교반을 유지하였다. 용매를 감압하에 증발시키고, 남아있는 고체를 물(450 mL) 중에 용해시켰다. 1N HCl(25 mL)로 pH를 2로 조정하고, 그후에 수성층을 EtOAc(3 x 250 mL)로 추출하였다. 화합된 유기물을 염수(100 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조하고, 여과하고, 휘발물을 감압하에 제거하여, 순수한 HO-Ala-Val-Fmoc 12를 흰색 고체로서 얻었다(2.06 g, 94%). LC/MS (2.758 분 (ES⁺)), m/z: 411.0 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.47 (br s, 1H), 8.20 (d, 1H, J = 6.7 Hz), 7.89 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.75 (t, 2H, J = 6.8 Hz), 7.43 - 7.38 (m, 3H), 7.34 - 7.30 (m, 2H), 4.31 - 4.16 (m, 4H), 3.88 (dd, 1H, J = 8.8, 7.2 Hz), 1.98 (m, 1H), 1.26 (d, 3H, J = 7.3 Hz), 0.89 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 0.86 (d, 3H, J = 6.8 Hz).

실시예 2

(a)(S)-8-(3-((S)-2-((E)-3-(((9H- 플루오렌 -9-일) 메톡시 ) 카르보닐아미노 ) 프로프 -1-엔일)-7- 메톡시 -5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테트라히드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일옥시) 프로폭시 )-7- 메톡시 -5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일 트리플루오로메탄설포네이트 ( 13 )

톨루엔(6 mL) 중 보론산 에스테르 10(2.19 g, 5.61 mmol, 0.95 당량)의 현탁액을 메탄올(28 mL), 톨루엔(56 mL) 및 물(34 mL) 중 비스-에놀 트리플레이트 7(6.6 g, 5.91 mmol, 1.0 당량), 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(0.273 g, 0.236 mmol, 0.04 당량), 탄산나트륨(2.00 g, 18.91 mmol, 3.2 당량)의 교반 용액에 1시간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 밤새 교반시킨 후, 농축건조시키고, 잔류물을 EtOAc(200 mL) 중에 두고, 물(2 x 150 mL), 염수(150 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 80:20 헥산/EtOAc v/v 내지 10:90 헥산/EtOAc 이후 순수한 EtOAc)로 정제하여 회수된 7, 생성물 및 비스-치환된 불순물을 얻었다. 황색 고체로서 2.49g(37%)의 13. LC/MS (3.930 분 (ES⁺)), m/z: 1247.39 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.78 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.60 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 7.41 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 7.36 - 7.31 (m, 1H), 7.14 (m, 1H), 6.96 (m, 1H), 6.36 (d, 1H, J = 14.4 Hz), 5.69 - 5.59 (m, 1H), 5.51 (dd, 2H, J = 10.1, 3.0 Hz), 4.87 - 4.81 (m, 1H), 4.75 (dd, 2H, J = 10.1, 7.9 Hz), 4.61 (dd, 1H, J = 10.9, 3.6 Hz), 4.54 (dd, 2H, J = 10.6, 3.3 Hz), 4.43 (d, 2H, J = 6.6 Hz), 4.31 - 4.20 (m, 6H), 3.95 - 3.87 (m, 9H), 3.81 - 3.63 (m, 6H), 3.15 (ddd, 1H, J = 16.2, 10.9, 2.3 Hz), 2.93 - 2.83 (m, 1H), 2.43 (hep, 1H, J = 5.8 Hz), 1.00 - 0.92 (m, 4H), 0.01 (s, 18H). 2.06 g (33%)의 7. LC/MS (3.916 분 (ES⁺)). 황색 고체로서 0.770g의 비스-치환된 불순물. LC/MS (3.977 분 (ES⁺)). m/z: 1376.52 [M+H]⁺.

(b) 화합물 14a-e

(i) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -2- 메틸 -5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H-벤조[e]피롤로[1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일옥시)프로폭시)-5,11-디옥소-10-((2-( 트리 메틸실릴) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디 아제핀-2-일) 알릴카르바메이트 ( 14a )

트리페닐아르신(0.010 g, 0.0321 mmol, 0.8 당량)을 질소 분위기 하에서 건조 디옥산(2 mL) 중 트리플레이트 13(0.050 g, 0.0401 mmol, 1.0 당량), 메틸보론산(0.012 g, 0.20 mmol, 5.0 당량), 산화은(0.074 g, 0.321 mmol, 8.0 당량) 및 제삼인산칼륨(0.102 g, 0.481 mmol, 12.0 당량)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 질소로 씻어내고 비스(벤조니트릴)팔라듐(II) 클로라이드(0.003 g, 0.00802 mmol, 0.2 당량)를 첨가하였다. 반응물을 질소로 한번 더 씻어낸 후, 1시간 동안 70℃로 가열하였다. 상기 반응 조건을 0.200 g의 트리플레이트 13에 대해 반복하였고, 합한 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 세척과 함께 셀라이트? 패드를 통해 여과시켰다. 미정제 물질을 감압하에 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 옅은 황색 고체로서 생성물을 얻었다(0.010 g, 56%). LC/MS (3.823 분 (ES⁺)), m/z: 1112.92 [M+H]⁺.

( ii ) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -5,11-디옥소-2-((E)- 프로프 -1-엔일)-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테트라히드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭 시)-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H-벤 조[ e] 피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일) 알릴카르바메이트 ( 14c )

트랜스-1-프로펜-1-일보론산(0.103 g, 1.20 mmol, 3.0 당량), 트리에틸아민(0.220 ml, 1.60 mmol, 4.0 당량) 및 모노 트리플레이트 13(0.500 g, 0.401 mmol, 1.0 당량)을 질소 분위기 하에서 에탄올(10 mL), 톨루엔(20 mL) 및 물(3 mL)의 혼합물 중 용해시켰다. 반응 혼합물을 5분 동안 질소 하에 가스제거하고, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(0.018 g, 0.016 mmol, 0.04 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50분 동안 60℃에서 교반시킨 후, 감압하에 건조되도록 농축시키고, 미정제 고체를 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 50:50 아세테이트/헥산 v/v 이후 66:33 에틸 아세테이트/헥산 v/v)로 정제하여, 생성물을 옅은 황색 고체로서 얻었다(0.35 g, 77%). LC/MS (3.910 분 (ES⁺)), m/z: 1137.86 [M+H]⁺.

( iii ) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (E)-3-((S)-8-(3-((S)-2-( 벤조[d][1,3]디옥솔 -5-일)-7- 메톡시 -5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-7- 메톡시 -5,11-디옥소-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H-벤조[e] 피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일) 알릴카르바메이트 ( 14d )

3,4-(메틸렌디옥시)페닐 보론산(0.027 g, 0.160 mmol, 2.0 당량), 트리에틸아민 (0.065 g, 0.064 mmol, 8.0 당량) 및 모노 트리플레이트 13 (0.100 g, 0.080 mmol, 1.0 당량)를 질소 하에 에탄올(1 mL), 톨루엔(2 mL) 및 물(0.4 mL)의 혼합물 중 용해시켰다. 반응 용기를 배기하고, 질소로 3회 씻어준 후, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(0.006 g, 0.005 mmol, 0.06 당량)를 첨가하였다. 그후 플라스크를 진공처리하고, 질소로 3회 씻어내고, 8분 동안 80℃에서 마이크로파 조사 하에 가열하였다. 이 반응은 0.100g 규모로 2회 반복하고, 0.130g 규모로 1회 수행했다. 미정제 반응 혼합물을 합하고, DCM(10 mL)로 희석하고, H₂O(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 30/70 내지 20/80 v/v 헥산/에틸 아세테이트)로 정제하여 생성물을 옅은 황색 고체로서 수득하였다(0.199 g, 62%). LC/MS (3.887 분 (ES⁺)), m/z: 1217.57 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.77 (d, 2H, J = 7.4 Hz), 7.60 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.43 - 7.29 (m, 7H), 6.97 - 6.94 (m, 2H), 6.88 (dd, 2H, J = 7.8, 1.7 Hz), 6.78 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 6.35 (d, 1H, J = 15.7 Hz), 5.97 (s, 2H), 5.69 - 5.59 (m, 1H), 5.50 (dd, 2H, J = 10.1, 2.7 Hz), 4. 84 (m, 1H), 4.75 (dd, 2H, J = 10.1, 5.8 Hz), 4.61 - 4.52 (m, 3H), 4.44 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 4.32-4.20 (m, 6H), 3.94 - 3.87 (m, 9H), 3.81 - 3.64 (m, 6H), 3.15 (ddd, 1H, J = 16.2, 10.6, 1.9 Hz), 2.88 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 0.99 - 0.95 (m, 4H), 0.01 (s, 18H).

( iv ) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -2-(4-(4-메 틸피 페라진-1-일) 페닐 )-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테트라히드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H-벤조[e] 피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일) 알릴카르바메이트 ( 14e )

모노 트리플레이트 13(0.100 g, 0.0802 mmol, 1.0 당량), (4-메틸피페라진-1-일)페닐보론산, 피나콜 에스테르(0.023 g, 0.0762, 0.95 당량) 및 트리에틸아민 (0.051 mL, 0.369 mmol, 4.6 당량)을 질소 분위기 하에서 톨루엔/에탄올/H₂O [6:3:1](4 mL)의 혼합물 중 가용화시켰다. 반응물을 5분 동안 질소로 씻어내고, 팔라듐-테트라키스트리페닐포스핀(0.9 mg, 0.000802 mmol, 0.01 당량)을 첨가하였다. 그후 반응물을 5분 동안 마이크로파 조사하였다. 상기 반응을 0.100g 규모로 3회 반복했다. 합한 반응 혼합물을 감압하에 농축시키고, 고체 잔류물을 H₂O (180 mL)와 에틸 아세테이트(180 mL) 간에 분배하였다. 수성층을 에틸 아세테이트(2 x 180 mL)로 추출한 후, 합한 유기물을 염수(180 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 생성된 미정제 혼합물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 40:1 v/v DCM/MeOH 내지 20:1 v/v DCM/MeOH)로 정제하여, 소정의 생성물을 황색 고체로서 얻었다(0.220 g, 54%). LC/MS (2.833 분 (ES⁺)), m/z: 1272.53 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.77 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.60 (d, 2H, J = 7.3 Hz), 7.43 - 7.39 (m, 3H), 7.35 - 7.30 (m, 6H), 6.95 (m, 1H), 6.90 - 6.87 (m, 1H), 6.34 (d, 1H, J = 15.7 Hz), 5.67 - 5.57 (m, 1H), 5.50 (dd, 2H, J = 10.1, 3.3 Hz), 4.86 (m, 1H), 4.75 (dd, 2H, J = 10.1, 5.6 Hz), 4.54 (m, 2H), 4.44 (d, 2H, J = 6.8 Hz), 4.31 - 4.21 (m, 6H), 3.96 - 3.87 (m, 9H), 3.81 - 3.73 (m, 3H), 3.71 - 3.62 (m, 3H), 3.31 - 3.20 (m, 5H), 3.10 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.58 (m, 4H), 2.43 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 0.97 (m, 4H), 0.01 (s, 18H).

(c) 화합물 15a-e

(i) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (E)-3-((S)-8-(3-((S)-2-( 벤조[d][1,3]디옥솔 -5-일)-7- 메톡시 -5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일 옥 시) 프로폭시 )-7- 메톡시 -5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디아제핀-2-일) 알릴카르바메이트 ( 15d )

SEM 디락탐 14d(0.223 g, 0.183 mmol, 1.0 당량)을 질소 분위기 하에서 THF(10 mL) 중 가용화시키고, -78℃로 냉각시켰다. 과수화물 용액(0.373 mL, 0.373 mmol, 2.04 당량)을 5분에 걸쳐 적가하였다. 20분 후, 분취액을 LCMS 및 TLC 분석을 위해 물로 세척하고, 30분 후 물(30 mL)을 첨가하고, 냉 배스(cold bath)를 제거하였다. 유기층을 EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수(30 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 MeOH(12 mL), DCM(6 mL) 및 물(2 mL) 중 용해시키고, 충분한 실리카 겔로 진한(thick) 교반 현탁액을 형성하고 이를 5일 동안 두었다. 현탁액을 여과시키고, 생성물 용리가 완료될 때까지 DCM/MeOH 9:1(~200 mL)로 세척하였다. 유기층을 염수(2 x 70 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로로마토그래피(실리카겔, 100/0 내지 90/10 v/v CHCl₃/ MeOH)로 정제하여 생성물을 황색 고체로서 얻었다(0.133 g, 79%). LC/MS (2.916 분 (ES⁺)), m/z: 926.33 [M+H]⁺.

(ii) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메톡시-2-(4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 페닐 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H-벤조[e] 피롤 로[ 1,2-a][1,4]디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H-벤조[e]피롤로[1,2-a][1,4]디아제핀-2-일) 알릴카르바메이트 ( 15e )

SEM 디락탐 14e(0.250 g, 0.196 mmol, 1.0 당량)을 질소 분위기 하에서 THF(13 mL) 중 가용화시키고, -78℃로 냉각시켰다. 과수화물 용액(0.40 mL, 0.401 mmol, 2.04 당량)을 5분에 걸쳐 적가하였다. 20분 후, 분취액을 LCMS 및 TLC 분석을 위해 물로 세척하였다. 30분 후, 물(30 mL)을 첨가하고, 냉 배스를 제거하였다. 유기층을 EtOAc(2 x 40 mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수(40 mL)로 세척하고, MgSO₄상에 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 MeOH(13 mL), DCM(7 mL) 및 물(1.7 mL) 중 용해시키고, 충분한 실리카 겔로 진한 교반 현탁액을 형성하였다. 5일 후, 현탁액을 소결 깔때기를 통해 여과시키고, 생성물이 완전히 용리될 때까지 DCM/MeOH 9:1(~200 mL)로 세척하였다. 유기층을 염수(2 x 70 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과시키고, 용매를 감압하에 제거하였다. 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔, CHCl₃ 100 내지 96:4 v/v CHCl₃/MeOH)로 정제시켜 생성물을 옅은 황색 고체로서 얻었다(0.090 g, 47%). LC/MS (2.112 분 (ES⁺)), m/z: 981.0 [M+H]⁺.

(d) 화합물 16a-e

(i) (S)-2-((E)-3- 아미노프로프 -1-엔일)-8-(3-((S)-2-( 벤조[d][1,3]디옥솔-5-일)-7- 메톡시 -5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일 옥 시) 프로폭시 )-7- 메톡시 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -5(11 aH )-온 ( 16d )

피페리딘(6 방울, 과량)을 무수 DMF(0.30 mL) 중 Fmoc 알릴아민 15d(0.030 g, 0.0306 mmol, 1.0 당량)의 교반 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 교반시켰다. 20분 후, 반응 혼합물의 LCMS는 반응 완료를 보였고, 반응 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 물(3 x 30 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 물질을 클로로포름 중 용해시키고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 생성물을 주황색 고체로서 얻었다(0.003 g, 13%). LC/MS (1.802 분 (ES⁺)), m/z: 704.1 [M+H]⁺.

( ii ) (S)-2-((E)-3- 아미노프로프 -1-엔일)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -2-(4-(4-메 틸피 페라진-1-일) 페닐 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디아제핀-8- 일옥시 ) 프로폭시 )-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -5(11aH)-온 ( 16e )

피페리딘(4 방울, 과량)을 무수 DMF(0.25 mL) 중 Fmoc 알릴아민 15e(0.02 g, 0.0204 mmol, 1.0 당량)의 교반 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 교반시켰다. 30분 후, 반응 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 물(3 x 30 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 물질을 클로로포름 중 용해시키고, 생성된 침전물을 여과에 의해 수집하여 생성물을 주황색 고체로서 얻었다(0.001 g, 7%). LC/MS (1.495 분 (ES⁺)), m/z: 379.5 1/2[M+2H]⁺.

주요 중간체의 합성

1- 아이오도 -2-옥소-6,9,12,15- 테트라옥사 -3- 아자옥타데칸 -18- 오익산 ( I5 )

건조 DCM(1 mL) 중 아이오도아세틱 무수물(0.250 g, 0.706 mmol, 1.1 당량)을 DCM (1 mL) 중 아미노-PEG₍₄₎-산 I4(0.170 g, 0.642 mmol, 1.0 당량)에 첨가하였다. 혼합물을 상온에서 밤새 암실에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 0.1 M HCl, 물로 세척하고, MgSO₄ 상에 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카겔, 클로로포름 중 3% MeOH 및 0.1% 포름산 내지 클로로포름 중 10% MeOH 및 0.1% 포름산)로 정제하여, 생성물을 주황색 오일로서 얻었다(0.118 g, 42%). LC/MS (1.623 분 (ES⁺)), m/z: 433..98 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.069 (s, 1H), 7.22 (br s, 1H), 3.79 (t, 2H, J = 5.8 Hz), 3.74 (s, 2H), 3.72 - 3.58 (m, 14H), 3.50 - 3.46 (m, 2H), 2.62 (t, 2H, J = 5.8 Hz).

실시예 3

(a) 화합물 17a-e

(i) (S)-2-((E)-3- 아미노프로프 -1-엔일)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -2- 메틸 -5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H-벤조[ e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -5,11(10H,11 aH )- 디온 ( 17a )

피페리딘(0.133 mL, 1.35 mmol, 12 당량)을 DMF(1.8 ml) 중 Fmoc 아민 14a(0.125 g, 0.112 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 30분 동안 상온에서 교반시킨 후, LCMS 분석은 출발 물질의 소비를 나타냈고, 반응 혼합물을 DCM(200 mL)으로 희석하고, 물(3 x 200 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 건조되도록 농축시켜, 추가의 추가를 거치지 않은 미정제 생성물을 얻었다(0.100 g, 추측 100% 수율). 이 물질을 추가의 특성화를 거치지 않고 사용하였다,

( ii ) (S)-2-((E)-3- 아미노프로프 -1-엔일)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -5,11-디옥소-2-((E)- 프로프 -1- 에닐 )-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테트라히드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭 시)-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -5,11(10H,11aH)-디온 ( 17c )

DMF(5.0 mL) 중 피페리딘(0.40 mL, 4.0 mmol, 12 당량)을 Fmoc 아민 14c(0.380 g, 0.334 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 20분 동안 상온에서 교반시킨 후, LCMS 분석은 출발 물질의 소비를 나타냈고, 반응 혼합물을 DCM(300 mL)으로 희석하고, 물(3 x 300 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 건조되도록 농축시켜, 추가 정제를 거치지 않은 미정제 생성물을 얻었다(0.306 g, 추측 100% 수율).

LC/MS (2.533 분 (ES⁺)), m/z: 916.3 [M+H]⁺.

( iii ) (S)-2-((E)-3- 아미노프로프 -1-엔일)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -2-(4-(4-메 틸피 페라진-1-일) 페닐 )-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테트라히드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -5,11(10H,11aH)-디온( 17e )

피페리딘(0.40 mL, 4.0 mmol, 14.2 당량)을 DMF(5.0 mL) 중 Fmoc 아민 14e(0.358 g, 0.282 mmol, 1.0 당량)의 교반된 용액에 첨가하였다. 맑은 용액을 30분 동안 상온에서 교반시켰다. 반응 혼합물을 DCM(300 mL)로 희석하고, 물(3 x 300 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켜 추가의 정제를 거치지 않은 미정제 생성물을 얻었다(0.296 g, 추측 100% 수율). LC/MS (2.049 분 (ES⁺)), m/z: 1051.2 [M+H]⁺.

(b) 화합물 18a-e

(i) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (R)-1-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메 톡 시-2- 메틸 -5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테 트라히드로 -1H- 벤조 [e]피롤로[1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일옥시)프로폭시)-5,11-디옥소-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H-벤조[e] 피롤로 [ 1,2-a][1,4]디아제핀 -2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2- 일아민 )-3- 메틸 -1- 옥소부탄 -2- 일카르바메이트 ( 18a )

1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드(0.018 g, 0.095 mmol, 1.0 당량)를 건조 디클로로메탄(6 mL) 중 알릴아민 17a(추측 100% 수율, 0.100 g, 0.095 mmol, 1.0 당량) 및 HO-Ala-Val-Fmoc 12(0.036 g, 0.095 mmol, 1.0 당량)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(10 mL)으로 희석하고, 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 연속하여 세척하는 동안, 반응 혼합물을 상온에서 120분 동안 교반시켰다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 과량의 디클로로메탄을 감압하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔; 100:1 v/v DCM/MeOH 내지 40:1 v/v DCM/MeOH)로 정제하여 생성물을 황색 고체로서 얻었다(0.050 g, 35%). LC/MS (3.677 분 (ES⁺)), m/z: 1281.42 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.76 (d, 2H, J = 7.7 Hz), 7.58 (m, 2H), 7.40 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 7.34 (d, 2H, J = 5.7 Hz), 7.31 (m, 3H), 7.25 (m, 2H), 6.93 (s, 1H), 6.68 (m, 1H), 6.34 (m, 3H), 5.58 (m, 1H), 5.49 (m, 2H), 4.71 (m, 2H), 4.45 (m, 5H), 4.27 (m, 4H), 4.22 (t, 1H, J = 7.0 Hz), 3.97 (m, 2H), 3.89 (m, 7H), 3.75 (m, 2H), 3.65 (m, 3H), 3.44 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.43 (m, 2H), 2.14 (m, 1H), 1.83 (d, 3H, J = 1.0 Hz), 1.40 (d, 3H, J = 6.9 Hz), 0.99 - 0.91 (m, 10H), 0.01 (s, 9H), 0.00 (s, 9H).

( ii ) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (S)-1-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메톡시-5,11- 디옥소 -2-((E)- 프로프 -1- 에닐 )-10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 )메틸)-5,10,11,11a-테트라히드로-1H-벤조[e]피롤로[1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일옥시)프로폭시)-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히 드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2-)-3-메틸-1- 옥소부탄 -2- 일카르바메이트 ( 18c )

1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드 (0.0641 g, 0.334 mmol, 1.0 당량)를 건조 디클로로메탄(18 mL) 중 알릴아민 17c(추측 100% 수율, 0.306 g, 0.334 mmol, 1.0 당량) 및 HO-Ala-Val-Fmoc 12(0.1367 g, 0.334 mmol, 1.0 당량)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(30 mL)으로 희석하고, 물(30 mL) 및 염수(30 mL)로 연속하여 세척하는 동안, 반응 혼합물을 상온에서 95분 동안 교반시켰다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 과량의 디클로로메탄을 감압하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔; 100:1 v/v DCM/MeOH 내지 40:1 v/v DCM/MeOH)로 정제하여 생성물을 황색 고체로서 얻었다(0.220 g, 50%). LC/MS (3.804 분 (ES⁺)), m/z: 1307.37 [M+H]⁺. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.76 (d, 2H, J = 7.6 Hz), 7.57 (m, 2H), 7.39 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 7.34 (d, 2H, J = 3.2 Hz), 7.31 (m, 3H), 7.26 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.85 (m, 1H), 6.36 (m, 2H), 6.24 (d, 1H, J = 14.7 Hz), 5.68 (m, 1H), 5.58 (m, 1H), 5.49 (m, 2H), 4.72 (m, 2H), 4.83 (m, 4H), 4.39 (m, 1H), 4.27 (m, 4H), 4.22 (t, 1H, J = 6.9 Hz), 3.98 (m, 3H), 3.89 (m, 8H), 3.75 (m, 2H), 3.65 (m, 4H), 2.85 (m, 2H), 2.43 (m, 2H), 2.14 (m, 1H), 1.82 (dd, 3H, J = 5.8, 0.8 Hz), 1.40 (d, 3H, J = 6.9 Hz), 0.99 - 0.92 (m, 10H), 0.01 (s, 9H), 0.00 (s, 9H).

( iii ) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (S)-1-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메톡시-2-(4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 페닐 )-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 )에 톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a- 테트라히드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8-일옥시) 프로폭시 )-5,11- 디옥소 -10-((2-( 트리메틸실릴 ) 에톡시 ) 메틸 )-5,10,11,11a-테트라히드로-1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2- 일아미노 )-3- 메틸 -1- 옥소부탄 -2- 일카르바메이트 ( 18e )

1-에틸-3-(3'-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 하이드로클로라이드 (0.0541 g, 0.282 mmol, 1.0 당량)를 건조 디클로로메탄(18 mL) 중 알릴아민 17e(추측 100% 수율, 0.296 g, 0.282 mmol, 1.0 당량) 및 HO-Ala-Val-Fmoc 12(0.116 g, 0.282 mmol, 1.0 당량)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄(30 mL)으로 희석하고, 물(30 mL) 및 염수(30 mL)로 연속하여 세척하는 동안, 반응 혼합물을 상온에서 80분 동안 교반시켰다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 과량의 디클로로메탄을 감압하에 제거하였다. 생성된 잔류물을 플래쉬크로마토그래피(실리카 겔; 40:1 v/v DCM/MeOH 내지 20:1 v/v DCM/MeOH)로 정제하여 생성물을 노란 고체로서 얻었다(0.245 g, 60%). LC/MS (2.706 분 (ES⁺)), m/z:721.5 1/2[M+2H]⁺.

(c) 화합물 19a-e

(i) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (S)-1-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메 톡 시-5-옥소-2-((E)- 프로프 -1-엔일)-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디아제핀-8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디아제핀-2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2- 일아미노 )-3- 메틸 -1- 옥소부 탄-2- 일카르바메이트 ( 19c )

SEM Fmoc 아민 18c(0.212 g, 0.162 mmol, 1.0 당량)을 THF(9.2 mL) 중 가용화시키고, 질소 분위기 하에서 -78℃로 냉각시켰다. 과수화물 용액(0.330 mL, 0.330 mmol, 2.04 당량)을 4분에 걸쳐 적가하였다. 45분 후, 분취액을 LCMS를 위해 물 및 MeOH로 희석하였다. 추가로 10분 동안 교반시킨 후, 반응 혼합물을 물(27 mL)로 희석하고, 냉 배스를 제거하였다. 유기층을 EtOAc(2 x 27 mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수(27 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 MeOH(11.05 mL), DCM (5.53 mL) 및 물(1.85 mL) 중 용해시키고, 충분한 실리카 겔을 첨가하여 진한 현탁액을 형성하고 이를 5일 동안 교반하도록 두었다. 현탁액을 여과시키고, 생성물의 완전한 용리까지 DCM/MeOH 9:1(~200 mL)로 세척하였다. 유기층을 염수(2 x 70 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔; 40:1 v/v DCM/MeOH 내지 20:1 v/v DCM/MeOH)로 정제하여 생성물을 황색 고체로서 얻었다(0.060 g, 36%). LC/MS (2.802 분 (ES⁺)), m/z: 1016.15 [M+H]⁺.

( ii ) (9H- 플루오렌 -9-일) 메틸 (R)-1-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메톡시-2-(4-(4- 메틸피페라진 -1-일) 페닐 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H-벤조[ e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H-벤 조[ e] 피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2- 일아미노 )-3- 메틸 -1- 옥소부탄 -2- 일카르바메이트 ( 19e )

SEM Fmoc 아민 18e(0.245 g, 0.170 mmol, 1.0 당량)을 질소 분위기 하에서THF(10.6 mL) 중 용해시키고, -78℃로 냉각시켰다. 과수화물 용액(0.347 mL, 0.347 mmol, 2.04 당량)을 4분에 걸쳐 적가하였다. 45분 후, 분취액을 LCMS를 위해 물 및 MeOH로 희석하였다. 추가로 10분 동안 교반시킨 후, 반응 혼합물을 물(35 mL)로 희석하고, 냉 배스를 제거하였다. 유기층을 EtOAc(2 x 35 mL)로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수(35 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 미정제 물질을 MeOH(12.8 mL), DCM(6.4 mL) 및 물(2.15 mL) 중 희석하고, 충분한 실리카 겔을 첨가하여 진한 현탁액을 형성하고 5일 동안 교반하도록 두었다. 현탁액을 여과시키고, 생성물의 완전한 용리까지 DCM/MeOH 9:1(~200 mL)로 세척하였다. 유기층을 염수(2 x 100 mL)로 세척하고, MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔; 40:1 v/v DCM/MeOH 내지 20:1 v/v DCM/MeOH)로 정제하여 생성물을 얻었다(0.100 g, 51%). LC/MS (2.117 분 (ES⁺)), m/z: 575.7 1/2[M+2H]⁺.

(a) 화합물 20a-e

(i) (S)-2-아미노-N-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -5-옥소-2-((E)- 프로프 -1-엔일)-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4] 디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디 아제핀 -2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2-일)-3- 메틸부탄아미드 ( 20c )

피페리딘(0.04 mL, 4.1 mmol, 13.7 당량)을 무수 DMF(0.5 mL) 중 Fmoc 아민 19c(0.030 g, 0.0295 mmol, 1 당량)의 교반 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 교반시켰다. 20분 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 보였으므로, 반응 혼합물을 DCM(75 mL)으로 희석하고, 물(3 x 75 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 건조되도록 농축시켰다. n-헥산으로 공동-증발시켜 생성물을 갈색 오일로서 얻고, 이 물질을 추가 정제를 하지 않았다(0.023 g, 추측 100%). LC/MS (1.868 분 (ES⁺)), m/z: 794.2 [M+H]⁺.

( ii ) (S)-2-아미노-N-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7- 메톡시 -2-(4-(4-메 틸피 페라진-1-일) 페닐 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디아제핀-8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H- 벤조[e]피롤로 [1,2-a][1,4]디아제핀-2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2-일)-3- 메틸부탄아미드 ( 20e )

피페리딘(0.058 mL, 0.590 mmol, 12.0 당량)을 무수 DMF(0.8 mL) 중 Fmoc 아민 19e(0.050 g, 0.0492 mmol, 1.0 당량)의 교반 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 주위 온도에서 교반시켰다. 20분 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 보였으므로, 반응 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 물(3 x 30 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 건조되도록 농축시켰다. n-헥산으로 공동-증발시켜, 생성물을 갈색 오일로서 얻고, 이 물질을 추가 정제에 주입하지 않았다(0.040 g, 추측 100%). LC/MS (1.533 분 (ES⁺)), m/z: 928.2 [M+H]⁺.

(a) 화합물 21a-e

(i) 1-(2- 아이오도아세트아미도 )-N-((S)-1-((S)-1-((E)-3-((S)-7- 메톡시 -8-(3-((S)-7-메톡시-5-옥소-2-((E)- 프로프 -1- 에닐 )-5,11a- 디하이드로 -1H-벤조[e] 피롤로 [ 1,2-a][1,4]디아제핀 -8- 일옥시 ) 프로폭시 )-5-옥소-5,11a- 디하이드로 -1H-벤조[e]피롤로[ 1,2-a][1,4]디아제핀 -2-일) 알릴아미노 )-1- 옥소프로판 -2- 일아미노 )-3- 메틸부탄 -2-일)-3,6,9,12- 테트라옥사펜타데칸 -15-아미드 ( 21c )

2-에톡시-1-에톡시카르보닐-1,2-디하이드로퀴놀린(0.007 g, 0.0290 mmol, 1.0 당량)을 건조 디클로로메탄(2 mL) 중 아민 20c(추측 100%, 0.023 g, 0.0290 mmol, 1.0 당량) 및 1-아이오도-2-옥소-6,9,12,15-테트라옥사-3-아자옥타데칸-18-오익산 (I5)(0.0126 g, 0.0290 mmol, 1.0 당량)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 교반시킨 후, DCM(6 mL)로 희석하고, 물(2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄ 상에서 건조시키고, 여과시키고, 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카 겔; 40:1 v/v DCM/MeOH 내지 5:1 v/v DCM/MeOH)에 주입하여, 생성물을 옅은 황색 오일로서 얻었다(0.0043 g, 29%). LC/MS (2.380 분 (ES⁺)), m/z: 605.0 1/2[M+2H]⁺.

실시예 4: 시험관내 세포독성의 측정

세포를 웰당 150 μL 성장 배지 중 블랙-사이디드(black-sided)-클리어-바텀 96-웰 플레이트(Costar, Corning)로 플레이팅하고 생물학적 캐비넷에서 1 시간 동안 고정시키고 37℃, 5% CO₂에서 인큐베이터 중에 넣었다. 다음날, 약물 스톡의 4X 농도를 준비하였고, 그 후 10-배 연속 희석으로서 적정하여 8-점 용량 곡선을 생성하고 듀플리케이트로 웰당 50μl로 첨가하였다. 그 후 세포를 37℃, 5% CO₂에서 48 시간 동안 인큐베이션하였다. 세포독성은 100 μL의 세포 티터 글로(Cell Titer Glo)(프로메가) 용액으로 1 시간 동안 인큐베이션함으로써 측정하고, 그 후 퓨전 HT 플레이트 판독기(Fusion HT plate reader)(퍼킨 엘머) 상에서 발광을 측정하였다. 데이터는 엑셀(마이크로소프트) 및 그래프패드(프리즘)으로 처리하여 용량 반응 곡선 및 IC50 수치를 생성하고 데이터를 수집하였다.

Claims

하기 화학식 I를 갖는 화합물:
화학식 I

상기 식에서,
R²는 하기 화학식 II의 구조를 가지며:

상기 식에서,
X는 OH, SH, CO₂H, COH, N=C=O, NHNH₂, CONHNH₂,
및 NHR^N을 포함하는 군으로부터 선택되며, 여기서 R^N은 H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택되고;
R^C1, R^C2 및 R^C3은 독립적으로 H 및 비치환된C₁ _-2 알킬로부터 선택되고;
R¹²는 하기로 이루어진 군으로부터 선택되며:
(ia) 할로, 니트로, 시아노, 에테르, C₁ _-7알킬, C₃ _-7 헤테로시클릴 및 비스-옥시-C₁ _-3알킬렌을 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치환기에 의해 선택적으로 치환된, C₅ _-10 아릴기;
(ib) C₁ _-5비치환된 지방족 알킬;
(ic) C₃ _-6치환된 시클로알킬;
(id) R²¹, R²² 및 R²³ 각각이 독립적으로 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되며, 여기서 R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자는 5를 초과하지 않는 것인,
;
(ie) R^25a와 R^25b 중 어느 하나가 H이며 다른 하나가 페닐 (여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인,
;
(if) R²⁴가 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐, 시클로프로필, 페닐(여기서 페닐은 할로, 메틸, 메톡시로부터 선택된 기에 의해 선택적으로 치환됨); 피리딜; 및 티오페닐로부터 선택되는 것인,
;
R⁶ 및 R⁹는 독립적으로 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로로부터 선택되고;
여기서, R 및 R'는 독립적으로 선택적 치환된 C₁ _-12 알킬, C₃ _-20 헤테로시클릴및 C₅ _-20 아릴기로부터 선택되며;
R⁷은 H, R, OH, OR, SH, SR, NH₂, NHR, NHRR', 니트로, Me₃Sn 및 할로로부터 선택되고;
(a) R¹⁰은 H이고, R¹¹은 OH 또는 OR^A (여기서, R^A는 C₁ _-4 알킬임)이거나; 또는
(b) R¹⁰ 및 R¹¹은 이들이 결합된 질소 원자와 탄소 원자 사이에 질소-탄소 이중 결합을 형성하거나; 또는
(c) R¹⁰은 H이고, R¹¹은 SO_zM (여기서, z는 2 또는 3이고, M은 1가의 약학적으로 허용가능한 양이온임)이고;
R"는 사슬에 하나 이상의 헤테로 원자, 및/또는 방향족 고리가 개재할 수 있는 C₃ _-12 알킬렌기이며;
Y 및 Y'는 O, S 또는 NH로부터 선택되며;
R^6', R^7', R^9'는 각각 R⁶, R⁷ 및 R⁹와 동일한 기로부터 선택되고, R^10' 및 R^11'는 R¹⁰ 및 R¹¹과 동일하며, 여기서 R¹¹ 및 R^11'가 SO_zM일 경우, M은 2가의 약학적으로 허용가능한 양이온을 나타낼 수 있다.
제 1항에 있어서, R⁷이 H, OH 및 OR로부터 선택되는 것인 화합물.
제 2항에 있어서, R⁷이 C₁ _-4 알킬옥시기인 화합물.
제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, Y가 O인 화합물.
제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, R"가 C₃ _-7 알킬렌인 화합물.
제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, R⁹이 H인 화합물.
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, R⁶가 H 및 할로로부터 선택되는 것인 화합물.
제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서, R^C1, R^C2 및 R^C3가 독립적으로 H 및 메틸로부터 선택되는 것인 화합물.
제 8항에 있어서, R^C1, R^C2 및 R^C3가 모두H인 화합물.
제 8항에 있어서, R^C1, R^C2 및 R^C3가 모두 메틸인 화합물.
제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서, X가 OH, SH, CO₂H, -N=C=O 및 NH₂로부터 선택되는 화합물.
제 11항에 있어서, X가 NH₂인 화합물.
제 1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²가C₅ _-7아릴기인 화합물.
제 13항에 있어서, R¹²가 페닐인 화합물.
제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²는 C₈ _-10 아릴기인 화합물.
제 13항 내지 제 15항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²는1개 내지 3개의 치환기를 갖는 것인 화합물.
제 13항 내지 제 16항 중 어느 한 항에 있어서, 치환기는 메톡시, 에톡시, 플루오로, 클로로, 시아노, 비스-옥시-메틸렌, 메틸-피페라지닐, 모르폴리노 및 티오모르폴리노로부터 선택되는 것인 화합물.
제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²가 C₁ _-5 포화된 지방족 알킬기인 화합물.
제 18항에 있어서, R¹²가메틸, 에틸 또는 프로필인 화합물.
제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²가 C₃ _-6포화된 시클로알킬기인 화합물.
제 20항에 있어서, R¹²가 시클로프로필인 화합물.
제 1항 내지 제 12항에 있어서, R¹²가 하기 화학식의 기인 화합물:

.
제 22항에 있어서, R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자가 4를 초과하지 않는 것인 화합물.
제 23항에 있어서, R¹² 기에서 탄소 원자의 총 숫자가 3을 초과하지 않는 것인 화합물.
제 22항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, R²¹, R²² 및 R²³ 중 하나는 H이며, 이때 다른 두 기는 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되는 것인 화합물.
제 22항 내지 제 24항 중 어느 한 항에 있어서, R²¹, R²² 및 R²³ 중 둘은H이며, 이때 다른 기는 H, C₁ _-3 포화된 알킬, C₂ _-3 알케닐, C₂ _-3 알키닐 및 시클로프로필로부터 선택되는 것인 화합물.
제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²가 하기 화학식의 기인 화합물:

.
제 27항에 있어서, R¹²가 하기 화학식의 기인 화합물:

.
제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서, R¹²가 하기 화학식의 기인 화합물:

.
제 29항에 있어서, R²⁴가 H, 메틸, 에틸, 에테닐 및 에티닐로부터 선택되는 것인 화합물.
제 30항에 있어서, R²⁴가 H 및 메틸로부터 선택되는 것인 화합물.
제 1항 내지 제 31항 중 어느 한 항에 있어서, R¹⁰ 및 R¹¹이 질소-탄소 이중 결합을 형성하는 것인 화합물.
제 1항 내지 제 32항 중 어느 한 항에 있어서, R^6', R^7', R^9', R^10', R^11' 및 Y'가 각각 R⁶, R⁷, R⁹, R¹⁰, R¹¹ 및 Y와 동일한 것인 화합물.
증식성 질환 치료용 약제의 제조에 있어서 제 1항 내지 제 33항 중 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
증식성 질환의 치료에 사용하기 위한 제 1항 내지 제 33항 중 어느 한 항에 따른 화합물.
하기 화학식 II의 화합물:
화학식 II

상기 식에서,
R², R⁶, R⁷, R⁹, Y, R'', Y', R¹², R^6' R^7'및 R^9'가제 1항 내지 제 31항 중 어느 한 항에 화학식 I의 화합물에 대해 정의된 바와 같고;
(a) R¹⁰은카르바메이트 질소 보호기이고, R¹¹ O-Prot^O이고, 여기서 Prot^O는 산소 보호기이거나; 또는
(b) R¹⁰은헤미아민(hemi-aminal) 질소 보호기이고, R¹¹은 옥소기이며;
R^10'및 R^11'은 R¹⁰ 및 R¹¹와 동일하다.
제 36항에 있어서, R¹⁰이 Troc인 화합물.
제 36항 또는 제 37항에 있어서, R¹¹이 OTBS인 화합물.
제 36항에 있어서, R¹¹은 옥소이고, R¹⁰은 SEM인 화합물.
하기 화학식 III을 갖는 접합체:

상기 식에서,
L은 리간드 단위이고,
LU는 링커 단위이며,
p는 1 내지 20이고;
D는 제 1항 내지 제 33항 중 어느 한 항에 따른 PBD 이량체인 약물 단위이며, LU는 R²의X 치환기를 통해 D에 결합된다.
제 40항에 있어서, 링커 단위(LU)가 하기 화학식 IIIa 또는 IIIb를 갖는 것인 접합체:

상기 식에서,
-A¹-은 신장 단위이고,
a는 1 또는 2이며,
L¹-은 특이성 단위이고,
s는 0 내지 12 범위의 정수이며,
-L²-는 스페이서 단위이고,
y는 0, 1 또는 2이며,
p는 1 내지 20으로부터 선택됨; 또는

상기 식에서,
-A¹-은 신장 단위(L²)에 연결된 신장 단위이고,
a는 1 또는 2이며,
L¹ -은 신장 단위(L²)에 연결된 특이성 단위이고,
s는 1 내지 12 범위의 정수이며,
-L²-는 스페이서 단위이고,
y는 1 또는 2이며;
p는 1 내지 20임.
제 41항에 있어서, 링커 단위(LU)는 화학식 IIIa를 갖는 것인 접합체.
제 42항에 있어서, A¹이하기로부터 선택되는 접합체:

별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6임;

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6임;

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30임; 또는

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 또는 1이고, m은 0 내지 30임.
제 42항에 있어서, A¹이 하기 식인 접합체:

상기 식에서, 별표는 L¹에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 리간드 단위에 대한 부착 지점을 나타내며, n은 0 내지 6임.
제 44항에 있어서, n이 5인 접합체.
제 41항 내지 제 45항 중 어느 한 항에 있어서, L¹이 아미노산 서열을 포함하는 것인 접합체.
제 46항에 있어서, L¹이 디펩티드인 접합체.
제 47항에 있어서, L¹이 발린-알라닌, 발린-시트룰린 및 페닐알라닌-리신으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 접합체.
제 41항 내지 제 48항 중 어느 한 항에 있어서, y가 0인 접합체.
제 41항 내지 제 49항 중 어느 한 항에 있어서, y가 1 또는 2인 접합체.
제 50항에 있어서, L²가 하기 식인 접합체:

상기 식에서, 별표는 약물 단위에 대한 부착 지점을 나타내고, 물결선은 L¹에 대한 부착 지점을 나타내며, Y는 -N(H)-, -O-, -C(=O)N(H)- 또는 -C(=O)O-이고, n은 0 내지　3임.
제 51항에 있어서, L²가 하기 식인 접합체:

.
증식성 질환 또는 자가면역 질환 치료용 약제의 제조에 있어서, 제 40항 내지 제 52항 중 어느 한 항에 따른 접합체의 용도.
증식성 질환 또는 자가면역 질환 치료용 제 40항 내지 제 52항 중 어느 한 항에 따른 접합체의 용도.
제 40항 내지 제 52항 중 어느 한 항의 접합체의 약학적 유효량을 투여하는 것을 포함하는, 증식성 질환 또는 자가면역 질환을 갖는 포유동물의 치료방법.
하기 화학식 V의 약물 링커 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물:

상기 식에서,
LU는 링커 단위이고, D는 제 1항 내지 제 33항 중 어느 한 항에 따른 PBD 이량체인 약물 단위이지만, X는 O, S, CO₂, CO, NH(C=O), NHNH, CONHNH,

NR^N으로부터 선택되며, R^N은 H 및 C₁ _-4 알킬을 포함하는 군으로부터 선택된다.
제 56항에 있어서, 하기 화학식의 약물 링커:
(a) G¹이 리간드 단위에 결합을 형성하기 위한 신장 기이고, L¹은 특이성 단위이며, L²는 공유 결합이거나 -OC(=O)-와 함께 자가-희생 기를 형성하는 것인,
; 또는
(b) G¹ 이 리간드 단위에 결합을 형성하기 위한 신장 단위이고, L¹ 은 특이성 단위이며, L² 는 공유 결합이거나 자가-희생기인 것인,
;
상기 식에서, L¹ 및 L²는 제 41항 내지 제 52항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같다.