PT2270010E - Derivados de 11-hidroxi-5h-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin- 5-ona como intermediários chave para a preparação de pirrolobenzodiazepinas substituídas em c2 - Google Patents

Description

ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

DESCRIÇÃO "Derivados de ll-hidroxi-5h-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona como intermediários chave para a preparação de pirrolobenzodiazepinas substituídas em C2" A presente invenção refere-se a pirrolobenzodiazepinas (PBDs) e em particular a pirrolobenzodiazepinas úteis na síntese de compostos substituídos em C2.

Antecedentes da Invenção

Algumas pirrolobenzodiazepinas (PBDs) têm a capacidade de reconhecer e se ligar a sequências específicas de ADN; a sequência preferida é PuGPu. O primeiro antibiótico anti- tumoral de PBD, antramicina, foi encontrado em 1965 (Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795 (1965);

Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793 (1965)). Desde aí, foram referidas várias PBDs de ocorrência natural e foram desenvolvidas mais de 10 vias de síntese para uma variedade de análogos (Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433-465 (1994)). Os membros da família incluem abeimicina (Hochlowski, et al., J. Antibiotics, 40, 145-148 (1987)), quicamicina (Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200-206 (1984)), DC-81 (Patente Japonesa 58-180 487; Thurston, et al., Chem. Brit., 26, 767-772 (1990); Bose, et al.,

Tetrahedron, 48, 751-758 (1992)), mazetramicina (Kuminoto, et al., J. Antibiotics, 33, 665-667 (1980)), neotramicinas A e B (Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93-96 (1976)), porotramicina (Tsunakawa, et al., J. Antibiotics, 41, 1366- 1373 (1988)), protracarcina (Shimizu, et al, J. Antibiotics, 29, 2492-2503 (1982); Langley e Thurston, J. Org. Chem., 52, 91-97 (1987)), sibanomicina (DC-102) (Hara, et al., J.

Antibiotics, 41, 702-704 (1988); Itoh, et al., J.

Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988)), sibiromicina (Leber, et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992-2993 (1988)) e tomamicina (Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437-444 (1972)). As PBDs têm a estrutura geral: 1 2 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

2

Diferem no número, tipo e posição de substituintes, em ambos os seus anéis aromáticos A e anéis pirrolo C, e no grau de saturação do anel C. No anel B existe uma imina (N=C), uma carbinolamina (NH-CH(OH)), ou um éter metilico de carbinolamina (NH-CH(OMe)) na posição N10-C11 que é o centro electrófilo responsável pela alquilação do ADN. Todos os produtos naturais conhecidos têm uma configuração (S) na posição Cila quiral que lhes proporciona uma torção para a direita quando observados desde o anel C para o anel A. Isto confere-lhes a forma tridimensional apropriada para iso-helicidade com o sulco menor para o ADN de forma B, conduzindo a um ajuste adequado no sitio de união (Kohn, In Antibiotics III. Springer-Verlag, Nova Iorque, pág. 3-11 (1975); Hurley e Needham-VanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230-237 (1986) ) . A sua capacidade para formar um aducto no sulco menor permite-lhes interferir com o processamento do ADN, donde a sua utilização como agentes anti-tumorais.

Os presentes inventores revelaram anteriormente, no documento WO 2004/043963, compostos citotóxicos que têm um grupo arilo na posição C2, por exemplo:

compostos foi obtida por meio do A síntese destes intermediário seguinte:

3 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ cuja síntese foi descrita em detalhe no documento WO 00/12508. Este método envolve uma redução como passo de desprotecção que pode conduzir a sobrerredução do composto o que não é desejável. Do mesmo modo, com certos grupos C2, o passo de redução não se processa de todo. O intermediário que se segue também foi revelado:

mas a sua síntese revelou-se difícil e processa-se apenas com baixo rendimento.

Chen et al. descreveram a preparação de compostos pirrolobenzodiazepina possuindo um grupo alquilo substituído na posição C2, por exemplo:

Chen et al. não revelam compostos pirrolobenzodiazepina dímeros (Chen et al. BIOORGANIC MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, 2004, 14, 1547-1549).

Revelação da Invenção

Num primeiro aspecto, a presente invenção compreende um composto de fórmula III 4 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

e seus sais e solvatos, em que: R6 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R e R' são seleccionados independentemente de entre grupos alquilo C1-12, heterociclilo C3_2o e arilo C5-20 opcionalmente substituídos; R7 é seleccionado independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; sendo o composto um dímero e tendo cada monómero a fórmula (III), em que os grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dímero com a fórmula -X-R"-X- a ligar os monómeros, em que R" é um grupo alquileno C3-i2, cuja cadeia pode ser interrompida por um ou mais heteroátomos e/ou anéis aromáticos e cada X é seleccionado independentemente de entre O, S, ou NH; R10 e R16 em conjunto formam uma ligação dupla entre N10 e Cll, ou R10 é H e R16 é OH; e R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos; grupos esses que têm uma ligação carbono-carbono dupla ou tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3.

Num segundo aspecto, a presente invenção proporciona um composto de fórmula III 5 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

e seus sais e solvatos, em que: R6 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R e R' são seleccionados independentemente de entre grupos alquilo C1-12, heterociclilo C3-20 e arilo C5-20 opcionalmente substituídos; sendo o composto um dímero e tendo cada monómero a fórmula (III), em que os grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dímero possuindo a fórmula -X-R"-X- a ligar os monómeros, em que R" é um grupo alquileno C3-12, cadeia essa que pode ser interrompida por um ou mais heteroátomos e/ou anéis aromáticos e cada X é seleccionado independentemente de entre O, S, ou NH, e R7 é seleccionado de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R10 é um grupo protector de azoto à base de carbamato; R16 é -O-R11; R11 é um grupo protector de oxigénio ou H; e R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos; grupos esses que têm uma ligação carbono-carbono dupla ou tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3.

Num terceiro aspecto, a presente invenção compreende um método de síntese de um composto de fórmula III: 6 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

que compreende ο passo de reacção de um composto de fórmula I:

com um composto de fórmula z-R15 numa reacção de acoplamento, em que: R6 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR' , nitro, MesSn e halo; R e R1 são seleccionados independentemente de entre grupos alquilo C1-12, heterociclilo C3-20 e arilo C5-20 opcionalmente substituídos; R7 e R8 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, MesSn e halo, ou o composto é um dímero tendo cada monómero a fórmula (III) , em que os grupos R7 ou grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dímero possuindo a fórmula -X-R"-X- a ligar os monómeros, em que R" é um grupo alquileno C3-12, cuja cadeia pode ser interrompida por um ou mais heteroátomos e/ou anéis aromáticos e cada X é seleccionado independentemente de entre O, S, ou NH; ou qualquer par de grupos de R6 a R9 em conjunto forma um grupo -O-(CH2) p-O-, em que p é 1 ou 2; R10 é um grupo protector de azoto à base de carbamato; R2 é um grupo removível lábil; R16 é ou R10 e R16 em conjunto formam uma ligação dupla entre 7 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ Ν10 e Cl1; z-R15 é qualquer reagente adequado para uma reacção de acoplamento; e R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos; grupos esses que têm uma ligação carbono-carbono dupla ou tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3.

Num quarto aspecto, a invenção proporciona um composto do primeiro aspecto para utilização num método de terapia. A invenção proporciona também um composto do primeiro aspecto para utilização no tratamento de uma doença proliferativa.

Noutro aspecto, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica contendo um composto de acordo com o primeiro aspecto e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.

Definições

Grupos protectores de azoto à base de carbamato

Os grupos protectores de azoto à base de carbamato são bem conhecidos na arte e têm a estrutura seguinte:

R·1—O O em que R'10 é R tal como definido acima. Um grande número de grupos adequados é descrito nas páginas 503 a 549 de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Edição, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

Grupos protectores particularmente preferidos incluem Troe, Teoc, Fmoc, BOC, Doc, Hoc, TcBOC, 1-Adoc e 2-Adoc.

Os grupos protectores que podem ser removidos com catalisador de paládio não são preferidos, e.g. Alloc. 8 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ São também adequados para utilização na presente invenção os grupos protectores de azoto que podem ser removidos in vivo (e.g. enzimaticamente, utilizando luz) como descrito em WO 00/12507. Exemplos desses grupos protectores incluem:

que é nitroreductase lábil (e.g. utilizando ADEPT/GDEPT);

que são fotolábeis; e

que é glutationa lábil (e.g. utilizando NPEPT).

Grupos protectores de oxigénio

Os grupos protectores de oxigénio são bem conhecidos na arte. Um grande número de grupos adequado é descrito nas páginas 23 a 200 de Greene, T.W. e Wuts, G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Edição, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

Classes de particular interesse incluem, éteres silílicos, éteres metilicos, éteres alquilicos, éteres, ésteres, benzoatos, carbonatos e sulfonatos benzílicos.

Os grupos protectores de oxigénio preferidos incluem TBS, THP para o átomo de oxigénio em Cll e éster metilico 9 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ para ο átomo de oxigénio em C2 (quando presente).

Tal como mencionado acima, o grupo protector de oxigénio R14 deve ser ortogonal em relação ao grupo protector de oxigénio R11. Os grupos protectores que são ortogonais em relação uma ao outro podem ser removidos, cada um, utilizando reagentes ou condições que não removem o outro grupo protector.

Pode também ser preferido que quaisquer grupos protectores utilizados durante a síntese e utilização de compostos de fórmula I sejam ortogonais em relação uns aos outros. No entanto, não é frequentemente necessário, mas pode ser desejável que o grupo protector de azoto à base de carbamato e R11 sejam ortogonais em relação um ao outro, dependendo do composto de fórmula III se destinar a ser utilizado com o grupo protector de azoto no seu lugar.

Grupos removíveis lábeis

Os grupos removíveis lábeis adequados para utilização na presente invenção são em particular os condutíveis a acoplamento catalisado por paládio, por exemplo utilizando acoplamento de Suzuki ou Stille. Grupos adequados incluem mesilato (-0S02CH3) , -OSO2 (CnF2n+i) em que n=0, 1 ou 4, -0S02-Rs em que Rs é um grupo fenilo opcionalmente substituído (e.g. 4-Me-Ph, tosilato), I, Br e Cl. São mais preferidos -0S02 (CnF2n+i) em que n=0, 1 ou 4, I, Br e Cl, sendo o triflato (-0S02CF3) e Br os mais preferidos.

Substituintes A frase "opcionalmente substituído" tal como é aqui utilizada refere-se a um grupo parente que pode ser não substituído ou que pode ser substituído.

Salvo especificação em contrário, o termo "substituído" tal como é aqui utilizado, refere-se a um grupo parente que comporta um ou mais substituintes. O termo "substituinte" é utilizado aqui no sentido convencional e refere-se a uma porção química que está ligada covalentemente a, ou se apropriado fundida a, um grupo parente. É bem conhecida uma vasta variedade de substituintes e os métodos para a sua 10 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ formação e introdução numa variedade de grupos parentes são também bem conhecidos.

Exemplos de substituintes são descritos com maior detalhe abaixo.

Alquilo Ci-i2: O termo "alquilo C1-12" tal como é aqui utilizado, refere-se a uma porção monovalente obtida por remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de carbono de um composto hidrocarboneto possuindo de 1 a 12 átomos de carbono, que pode ser alifático ou aliciclico e que pode ser saturado ou insaturado (e.g. parcialmente insaturado, totalmente insaturado). Assim, o termo "alquilo" inclui as sub-classes alcenilo, alcinilo, cicloalquilo, etc., discutidas abaixo.

Exemplos de grupos alquilo saturados incluem , mas não estão limitados a, metilo (Ci) , etilo (C2) , propilo (C3) , butilo (C4) , pentilo (C5) , hexilo (Ce) e heptilo (C7) .

Exemplos de grupos alquilo lineares saturados incluem, mas não estão limitados a, metilo (Ci) , etilo (C2) , n-propilo (C3) , n-butilo (C4) , n-pentilo (amilo) (C5) , n-hexilo (C6) e n-heptilo (C7) .

Exemplos de grupos alquilo ramificados saturados incluem iso-propilo (C3) , iso-butilo (C4) , sec-butilo (C4) , terc-butilo (C4) , iso-pentilo (C5) , e neo-pentilo (C5) .

Alcenilo C2-12: O termo "alcenilo C2-i2" tal como é aqui utilizado, refere-se a um grupo alquilo que tem uma ou mais ligações duplas carbono-carbono.

Exemplos de grupos alcenilo insaturados incluem, mas não estão limitados a, etenilo (vinilo, -CH=CH2) , 1-propenilo (-CH=CH-CH3) , 2-propenilo (alilo, -CH-CH=CH2) , isopropenilo (1-metilvinilo, -C (CH3) =CH2) , butenilo (C4) , pentenilo (C5) e hexenilo (Ce) .

Alcinilo C2-i2: O termo "alcinilo C2-i2" tal como é aqui utilizado, refere-se a um grupo alquilo que tem uma ou mais ligações triplas carbono-carbono. 11 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Exemplos de grupos alcinilo insaturados incluem, mas não estão limitados a, etinilo (etinilo, -C=CH) e 2-propinilo (propargilo, -CH2-C=CH).

Cicloalquilo C3-i2: 0 termo "cicloalquilo C3-12" tal como é aqui utilizado, refere-se a um grupo alquilo que é também um grupo ciclilo; isto é, uma porção monovalente obtida por remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de anel aliciclico de um composto hidrocarboneto cíclico (carbocíclico) , porção essa que tem de 3 a 7 átomos de carbono, incluindo de 3 a 7 átomos do anel.

Exemplos de grupos cicloalquilo incluem, mas não estão limitados aos, derivados de: compostos hidrocarboneto monocíclico saturado: ciclopropano (C3) , ciclobutano (C4) , ciclopentano (C5) , ciclo-hexano (C6) , ciclo-heptano (C7) , metilciclopropano (C4) , dimetilciclopropano (C5) , metilciclobutano (C5) , dimetilciclobutano (Ce) , metilciclopentano (Cõ) , dimetilciclopentano (C7) e metilciclo-hexano (C7) ; compostos hidrocarboneto monocíclico insaturado: ciclopropeno (C3) , ciclobuteno (C4) , ciclopenteno (C5) ciclo-hexeno (Ce) , metilciclopropeno (C4) , dimetilciclopropeno (C5) , metilciclobuteno (C5) , dimetilciclobuteno (C6) , metilciclopenteno (C6) , dimetilciclopenteno (C7) e metilciclo-hexeno (C7) / e compostos hidrocarboneto policíclico saturado: norcarano (C7) , norpinano (C7) , norbornano (C7)

Heterociclilo C3-20: 0 termo "heterociclilo C3-2o" tal como é aqui utilizado, refere-se a uma porção monovalente obtida por remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de anel de um composto heterocíclico, porção essa que tem de 3 a 20 átomos de anel, dos quais de 1 a 10 são heteroátomos do anel. De preferência, cada anel tem de 3 a 7 átomos de anel, 12 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ dos quais 1 a 4 são heteroátomos do anel.

Neste contexto, os sufixos (e.g. C3-2cu C3-7, C5^6/ etc.) denotam o número de átomos do anel ou o intervalo de número de átomos do anel, sejam eles átomos de carbono ou heteroátomos. Por exemplo, o termo "heterociclilo Ce~e", tal como é aqui utilizado, refere-se a um grupo heterociclilo com 5 ou 6 átomos de anel.

Exemplos de grupos heterociclilo monociclicos incluem, mas não estão limitados aos, derivados de:

Ni: aziridina (C3) , azetidina (C4) , pirrolidina (tetra- hidropirrole) (C5) , pirrolina (e.g., 3-pirrolina, 2,5-di-hidropirrole) (C5) , 2H-pirrole ou 3H-pirrole (isopirrole, isoazole) (C5) , piperidina (C6) , di-hidropiridina (C6) , tetra-hidropiridina (Ce) r azepina (C7) ; Oi: oxirano (C3) , oxetano (C4), oxolano (tetra-hidrofurano) (C5) , oxole (di- hidrofurano) (C5) , oxano (tetra-hidropirano) (C6) , di-hidro-pirano (C6) , pirano (C6) , oxepina (C7) ;

Si: tiirano (C3) , tietano (C4) , tiolano (tetra-hidrotiofeno) (C5) , tiano (tetra-hidrotiopirano) (C6) , tiepano (C7) ; O2: dioxolano (C5)/ dioxano (Cô) e dioxepano (C7) ; 03: trioxano (Cõ) ; N2: imidazolidina (C5) , pirazolidina (diazolidina) (C5), imidazolina (C5) / pirazolina (di-hidropirazole) (C5) , piperazina (Ce) i N1O1: tetra-hidrooxazole (C5) , di-hidrooxazole (C5) , tetra- hidroisoxazole (C5) > di-hidroisoxazole (C5) , morfolina (C6) , tetra-hidrooxazina (C6) , di-hidrooxazina (C6) , oxazina (C6) / N1S1: tiazolina (C5) r tiazolidina (C5) 1 tiomorfolina (Ce) > N20i: oxadiazina (Ce) r O1S1: oxatiole (C5) e oxatiano (tioxano) (C6) ; e, 13 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

NiOiSi: oxatiazina (C6) .

Exemplos de grupos heterociclilo monocíclicos substituídos incluem os derivados de sacáridos, em forma cíclica, por exemplo, furanoses (C5) , tais como arabinofuranose, lixofuranose, ribofuranose e xilofuranose, e piranoses (Ce) , tais com alopiranose, altropiranose, glucopiranose, manopiranose, gulopiranose, idopiranose, galactopiranose, e talopiranose.

Arilo C5-20: 0 termo "arilo 05-20"/ tal como é aqui utilizado, refere-se a uma porção monovalente obtida por remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de anel aromático de um composto aromático, porção essa que tem de 3 a 20 átomos de anel. De preferência, cada anel tem de 5 a 7 átomos de anel.

Neste contexto, os sufixos (e.g. C3-20/ C5-7/ C5-6/ etc.) denotam o número de átomos de anel ou intervalo de número de átomos de anel, sejam eles átomos de carbono ou heteroátomos. Por exemplo, o termo "arilo C5-6" tal como é aqui utilizado, refere-se a um grupo arilo que tem 5 ou seis átomos de anel.

Os átomos do anel podem ser todos átomos de carbono, tal como em "grupos carboarilo". Exemplos de grupos carboarilo incluem, mas não estão limitados aos, derivados de benzeno (i.e. fenilo) (Cô) , naftaleno (Cio), azuleno (Cio), antraceno (C14) , fnantreno (C14) , naftaceno (Cie) e pireno (Ci6) .

Exemplos de grupos arilo que compreendem anéis fundidos, pelo menos um dos quais é um anel aromático, incluem, mas não estão limitados aos, grupos derivados de indano (e.g. 2,3-di-hidro-lH-indeno) (Cg) , indeno (C9) , isoindeno (C9) , tetralina (1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno (Ci0) , acenafteno (C12) , fluoreno (C13) , fenaleno (C13) , acefenantreno (C15) e aceantreno (Ci6) .

Em alternativa, os átomos de anel podem incluir um ou mais heteroátomos tal como em "grupos heteroarilo". Exemplos de grupos heteroarilo monocíclicos incluem, mas não estão limitados aos, derivados de: 14 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ Νι: pirrole (azole) (C5) , piridina (azina) (C6) ; Οι: furano (oxole) (C5) ;

Si: tiofeno (tiole) (C5) ;

NiOi: oxazole (C5) , isoxazole (C5) , isoxazina (Ce); N2Oi: oxadiazole (furazano) (C5) ; N3O1: oxatriazole (C5) ; N1S1: tiazole (C5) , isotiazole (C5) N2: imidazole (1,3-diazole) (C5) , pirazole (1,2-diazole) (C5) , piridazina (1,2-diazina) (Ce), pirimidina (1,3-diazina) (Ce) (e.g., citosina, timina, uracilo), pirazina (1, 4-diazina) (C6) ; N3: triazole (C5) , triazina (Ce); e, N4: tetrazole (C5) .

Exemplos de heteroarilo que compreende anéis fundidos incluem, mas não estão limitados a:

Cg (com 2 anéis fundidos) derivado de benzofurano (Oi) , isobenzofurano (Oi) , indole (Ni) , isoindole (Ni) , indolizina (Ni) , indolina (Nx) , isoindolina (Ni) , purina (N4) (e.g., adenina, guanina) , benzimidazole (N2) , mdazole (N2) , benzoxazole (N1O1) , benzisoxazole (N1O1) , benzodioxole (02) , benzofurazano (N20i) , benzotriazole (N3) , benzotiofurano (S2) , benzotiazole (N1S1) , benzotiadiazole (N2S); derivado de cromeno (Oi) , isocromano (Oi), benzodioxano (Ni), quinolizina (Ni) , (N2) , piridopiridina (N2) , cinolina (N2), ftalazina

Cio (com 2 anéis fundidos) isocromeno (Oi) , cromano (Oi) , (02) , quinolina (Ni) , isoquinolina benzoxazina (N1O1) , benzodiazina quinoxalina (N2) , quinazolina (N2) / (N2) , naftiridina (N2) pteridina (N4) , de benzodiazepina (N2) ;

Cu (com 2 anéis fundidos) derivado 15 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Ci3 (com 3 anéis fundidos) derivado de carbazole (Ni) , dibenzofurano (Oi) , dibenzotiofeno (Si) , carbolina (N2) , perimidina (N2) , piridoindole (N2) ; e, C14 (com 3 anéis fundidos) derivado de acridina (Ni) , xanteno (Oi) , tioxanteno (Si) , oxantreno (02) , fenoxatiina (OiSi) , fenazina (N2) , fenoxazina (NiOi) , fenotiazina (NiSi) , tiantreno (S2) , fenantridina (Ni) , fenantrolina (N2) , fenazina (N2) .

Os grupos acima, quer sozinhos quer como parte de outro substituinte, podem eles próprios opcionalmente ser substituídos com um ou mais grupos seleccionados de entre eles próprios e os substituintes adicionais listados abaixo.

Halogeno: -F, -Cl, -Br e -I.

Hidroxi: -OH. Éter: -0R, em que R é um substituinte de éter, por exemplo, um grupo alquilo C1-7 (também referido como grupo alcoxi C1-7, discutido abaixo) , um grupo heterociclilo C3-20 (também referido como grupo heterocicliloxi C3-20) t ou um grupo arilo C5-20 (também referido como grupo ariloxi C5-20) , de preferência um grupo alquilo C1-7.

Alcoxi: -OR, em que R é um grupo alquilo, por exemplo, um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos alcoxi C1-7 incluem, mas não estão limitados a, -OMe (metoxi), -OEt (etoxi), -O(nPr) (n-propoxi), -0 (iPr) (isopropoxi), -O(nBu) (n-butoxi), -O(sBu) (sec-butoxi), -O(iBu) (isobutoxi), e -O(tBu) (terc-butoxi).

Acetal: -CHÍOR1) (OR2) , em que R1 e R2 são independentemente substituintes de acetal, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-2CU de preferência um grupo alquilo C1-7/ ou, no caso de um grupo acetal "cíclico" R1 e R2, tomados em conjunto com os dois átomos de oxigénio aos quais estão ligados e com os átomos de carbono aos quais estão ligados, formam um anel heterocíclico com 4 a 8 átomos de anel. Exemplos de grupos 16 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ acetal incluem, mas não estão limitados a, -CH(0Me)2^ -CH(OEt)2 e -CH(OMe)(OEt).

Hemiacetal: -CH(OH) (OR1) , em que R1 é um substituinte de hemiacetal, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20/ de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos hemiacetal incluem, mas não estão limitados a, -CH(OH)(OMe) e -CH(OH)(OEt).

Cetal : -CRÍOR1) (OR2) , em que R1 e R2 são como definidos para os acetais e R é um substituinte de cetal que não hidrogénio, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos cetal incluem, mas não estão limitados a, -C(Me)(OMe)2, -C(Me)(OEt)2, -C(Me)(OMe)(OEt), -C(Et)(OMe)2, -C(Et)(0Et)2 e -C- (Et) (OMe) (OEt) .

Hemicetal: -CR (OH) (OR1) , em que R1 é como definido para os hemiacetais e R é um substituinte de hemicetal que não hidrogénio, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo 05-20* de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos hemiacetal incluem, mas não estão limitados a, -C (Me) (OH) (OMe), -C(Et) (OH) (OMe), -C(Me)(OH)(OEt) e -C(Et)(OH)(OEt).

Oxo (ceto, -ona): =0.

Tiona (tiocetona): =S.

Imino (imina): =NR, em que R é um substituinte de imino, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20* de preferência um grupo alquilo Ci_7. Exemplos de grupos éster incluem, mas não estão limitados a, =NH, =NMe, =NEt e =NPh.

Formilo (carbaldeido, carboxaldeido): -C(=0)H.

Acilo (ceto): -C(=0)R, em que R é um substituinte acilo, por exemplo, um grupo alquilo C1-7 (também referido por alquilacilo C1-7 ou alcanoilo C1-7) * um grupo heterociclilo C3-20 (também referido por heterociclilacilo C3-20) ou um grupo 17 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ arilo C5-20 (também referido por arilacilo C5-20) / de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos acilo incluem, mas não estão limitados a, -C(=0)CH3 (acetilo), -C(=0)CH2CH3 (propionilo), -C(=0)C(CH3) 3 (t-butirilo) e -C(=0)Ph (benzoilo, fenona).

Carboxi (ácido carboxilico): -C(=0)0H.

Tiocarboxi (ácido tiocarboxilico): -C(=S)SH.

Tiolocarboxi (ácido tiolocarboxilico): -C(=0)SH.

Tionocarboxi (ácido tionocarboxilico): -C(=S)0H. Ácido imidico: -C(=NH)0H. Ácido hidroxâmico: -C(=N0H)0H. Éster (carboxilato, éster de ácido carboxilico, oxicarbonilo): -C(=0)0R, em que R é um substituinte de éster, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos éster incluem, mas não estão limitados a, -C(=0)0CH3, -C (=0) OCH2CH3, -C (=0) 0C (CH3) 3 e -C (=0)OPh.

Aciloxi (éster invertido) : -0C(=0)R, em que R é um substituinte aciloxi, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos aciloxi incluem, mas não estão limitados a, -0C(=0)CH3 (acetoxi), -0C (=0) CH2CH3, -0C (=0) C (CH3) 3, -0C (=0) Ph e -0C (=0) CH2Ph.

Oxicarboiloxi: -0C(=0)OR, em que R é um substituinte de éster, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3_2o ou um grupo arilo Cs_2o, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos éster incluem, mas não estão limitados a, -0C (=0) 0CH3, -0C (=0) OCH2CH3, -0C (=0) OC (CH3) 3 e -0C(=0)0Ph.

Arai no: -NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, por exemplo, hidrogénio, um grupo 18 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ alquilo Ci_7 (também referido por alquilamino Ci_7 ou dialquilamino Ci_7), um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-2or de preferência H ou um grupo alquilo Ci_7, ou, no caso de um grupo amino "cíclico" R1 e R2, tomados em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam um anel heterocíclico com 4 a 8 átomos de anel. Os grupos amino podem ser primários (-NH2) , secundários (-NHR1) , ou terciários (-NHR1R2) , e em forma catiónica podem ser quaternários (-+NR1R2R3) . Exemplos de grupos amino incluem, mas não estão limitados a, -NH2, -NHCH3, -NHC(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2, e -NHPh. Exemplos de grupos amino cíclicos incluem, mas não estão limitados a, aziridino, azetidino, pirrolidino, piperidino, piperazino, morfolino e tiomorfolino.

Amido (carbamoílo, carbamilo, aminocarbonilo, carboxamida): C (=0) NR3R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes amino, tal como definido para grupos amino. Exemplos de grupos amido incluem, mas não estão limitados a, -C(=0)NH2, -C(=0)NHCH3, -C(=0)N(CH3)2, C ( = ) NHCH2CH3, e -C (=0) N (CH2CH3)2, assim como grupos amido em que R1 e R2, em conjunto com o átomo de azoto ao qual estão ligados formam uma estrutura heterocíclica tal como em, por exemplo, piperidinocarbonilo, morfolinocarbonilo, tiomorfolinocarbonilo e piperazinocarbonilo.

Tioamido (tiocarbamilo) : -C(=S)NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino tal como definido para grupos amino. Exemplos de grupos amido incluem, mas não estão limitados a, -C(=S)NH2, -C(=S)NHCH3, -C (=S) N (CH3) 2 e -C(=S)NHCH2CH3.

Acilamido (acilamino) : -NR1C(=0)R2, em que R1 é um substituinte de amida, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-2o, de preferência hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-7 e R2 é um substituinte de acilo, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo Cs-2o, de preferência hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-7. Exemplos de grupos acilamida incluem, mas não estão limitados a, 19 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ -NHC(=0)CH3, -NHC (=0) CH2CH3 e -NHC (=0) Ph. R1 e R2 podem em conjunto formar uma estrutura cíclica, tal como em, por exemplo, succinimidilo, maleimidilo e ftalimidilo: 19 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

succinimidilo maleimidilo ftalimidilo

Aminocarboniloxi: -0C (=0) NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, tal como definido para grupos amino. Exemplos de grupos aminocarboniloxi incluem, mas não estão limitados a, - 0C(=0)NH2, -0C(=0)NHMe, -0C(=0)NMe2 e -0C(=0)NEt2.

Ureído: -N (R1) CONR2R3 em que R2 e R3 são independentemente substituintes de amino, tal como definido para os grupos amino, e R1 é um substituinte de ureído, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo Cs-2o, de preferência hidrogénio ou um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos ureído incluem, mas não estão limitados a, -NHC0NH2, -NHCONHMe, -NHCONHEt, -NHC0NMe2, -NHC0NEt2, -NMeC0NH2, -NMeCONHMe, -NMeCONHEt, -NMeC0NMe2 e -NMeC0NEt2.

Guanidino: -NH-C(=NH)NH2.

Tetrazolilo: um anel aromático de cinco membros com quatro átomos de azoto e um átomo de carbono,

Imino: =NR, em que R é um substituinte de imino, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência H ou um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos imino incluem, mas não estão limitados a, =NH, =NMe e =NEt. em que cada R é um

Amidina (amidino): -C(=NR)NR2, 20 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ substituinte de amidina, por exemplo, hidrogénio, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5_2cu de preferência H ou um grupo alquilo Ci_7. Exemplos de grupos amidina incluem, mas não estão limitados a, -C (=NH) NH2, -C (=NH) NMe2 e -C (=NMe) NMe2 .

Nitro: -N02.

Nitroso: -NO.

Azido: —N3.

Ciano (nitrilo, carbonitrilo): -CN.

Isociano: -NC.

Cianato: -OCN.

Isocianato: -NCO.

Tiociano (tiocianato): -SCN.

Isotiociano (isotiocianato): -NCS.

Sulfidrilo (tiol, mercapto): -SH.

Tioéter (sulfureto) : -SR, em que R é um substituinte de tioéter, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, (também referido por grupo alquiltio Ci_7) , um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5_2o, de preferência um grupo alquilo Ci-7. Exemplos de grupos alquiltio Ci_7 incluem, mas não estão limitados a, -SCH3 e -SCH2CH3.

Dissulfureto: -SS-R, em que R é um substituinte de dissulfureto, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3_20 ou um grupo arilo C5-2o, de preferência um grupo alquilo Ci-7 (também referido aqui como dissulfureto de alquilo Ci-7) . Exemplos de grupos dissulfureto de alquilo Ci-7 incluem, mas não estão limitados a, -SSCH3 e -SSCH2CH3.

Sulfina (sulfinilo, sulfóxido): -S(=0)R, em que R é um substituinte de sulfina, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, 21 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo Cs-2o, de preferência um grupo alquilo Ci_7. Exemplos de grupos sulfina incluem, mas não estão limitados a, -S (=0) CH3 e -S (=0)CH2CH3.

Sulfona (sulfonilo) : -S (=0) 2R, em que R é um substituinte de sulfona, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo Cs-2o, de preferência um grupo alquilo C1-7, incluindo por exemplo, um grupo alquilo C1-7 fluorado ou perfluorado. Exemplos de grupos sulfona incluem, mas não estão limitados a, -S(=0)2CH3 (metanossulfonilo, mesilo), -S(=0)2CF3 (triflilo), -S(=0)2CH2CH3 (esilo), -S(=0)2C4F9 (nonaflilo), -S(=0)2CH2CF3 (tresilo), -S(=0) 2CH2CH2NH2 (taurilo), -S(=0)2Ph (fenilsulfonilo, besilo), 4-metilfenilsulfonilo (tosilo), 4-clorofenilsulfonilo (closilo), 4-bromofenilsulfonilo (brosilo), 4-nitrofenilo (nosilo), 2-naftalenossulfonato (napsilo) e 5-dimetilamino-naftalen-l-ilsulfonato (dansilo). Ácido sulfinico (sulfino): -S(=0)0H, -S02H. Ácido sulfónico (sulfo): -S(=0)20H, -S03H.

Sulfinato (éster de ácido sulfinico): -S(=0)0R; em que R é um substituinte de sulfinato, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos sulfinato incluem, mas não estão limitados a, -S(=0)0CH3 (metoxissulfinilo; sulfinato de metilo) e -S(=0)OCH2CH3 (etoxissulfinilo; sulfinato de etilo).

Sulfonato (éster de ácido sulfónico): -S(=0)20R, em que R é um substituinte de sulfonato, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-2o, de preferência um grupo alquilo Ci_7. Exemplos de grupos sulfonato incluem, mas não estão limitados a, -S(=0)20CH3 (metoxissulfonilo; sulfonato de metilo) e -S (=0)20CH2CH3 (etoxissulfonilo; sulfonato de etilo).

Sulfiniloxi: -0S(=0)R, em que R é um substituinte de sulfiniloxi, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3_2o ou um grupo arilo C5-2o, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos sulfiniloxi incluem, 22 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ mas não estão limitados a, -OS(=0)CH3 e -OS (=0)CH2CH3.

Sulfoniloxi: -0S(=0)2R, em que R é um substituinte de sulfoniloxi, por exemplo, um grupo alquilo Ci_7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo Cs-2o, de preferência um grupo alquilo Ci_7. Exemplos de grupos sulfoniloxi incluem, mas não estão limitados a, -OS (=0)2CH3 (mesilato) e -OS (=0) 2CH2CH3 (esilato) .

Sulfato: -0S(=0)20R; em que R é um substituinte de sulfato, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo Ci-7. Exemplos de grupos sulfato incluem, mas não estão limitados a, -0S(=0)20CH3 e -S0 (=0) 2OCH2CH3.

Sulfamilo (sulfamoílo; amida de ácido sulfínico; sulfinamida) : -S(=0)NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, tal como definido para os grupos amino. Exemplos de grupos sulfamilo incluem, mas não estão limitados a, -S(=0)NH2, -S (=0) NH (CH3) , -S (=0) N (CH3) 2, -S (=0)NH(CH2CH3) , -S (=0)N(CH2CH3)2 e -S(=0)NHPh.

Sulfonamido (sulfinamoílolo; amida de ácido sulfónico; sulfonamida) : -S (=0) 2NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, tal como definido para os grupos amino. Exemplos de grupos sulfonamido incluem, mas não estão limitados a, -S(=0)2NH2, -S (=0) 2NH (CH3) , -S (=0)2N(CH3)2, -S (=0)2NH(CH2CH3) , -S (=0)2N(CH2CH3)2 e -S(=0)2NHPh.

Sulfamino: -NR1S (=0) 20H, em que R1 é um substituinte de amino, tal como definido para os grupos amino. Exemplos de grupos sulfamino incluem, mas não estão limitados a, -NHS(=0)20H e -N(CH3) S (=0)20H.

Sulfonamino: -NR1S(=0)2R, em que R1 é um substituinte de amino, tal como definido para os grupos amino e R é um substituinte de sulfonamino, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo Ci_7. Exemplos de grupos sulfonamino incluem, mas não estão limitados a, -NHS(=0) 2CH3 e -N(CH3) S (=0)2C6H5. 23 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Sulf inamino: -NR1S(=0)R, em que R1 é um substituinte de amino, tal como definido para grupos amino e R é um substituinte de sulfinamino, por exemplo, um grupo alquilo Ci-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência um grupo alquilo C1-7. Exemplos de grupos sulfinamino incluem, mas não estão limitados a, -NHS(=0)CH3 e -N (CH3) S (=0) C6H5.

Fosfino (fosfina) : -PR2, em que R é um substituinte de fosfino, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-20, de preferência H, um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-20. Exemplos de grupos fosfino incluem, mas não estão limitados a, -PH2, -P(CH3)2, -P(CH2CH3)2, -P (t-Bu) 2, e -P(Ph)2.

Fosfo: —P(=0)2 ·

Fosfinilo (óxido de fosfina): -P(=0)R2, em que R é um substituinte de fosfinilo, por exemplo, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo Cs-2o, de preferência um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-2o· Exemplos de grupos fosfinilo incluem, mas não estão limitados a, -P (=0) (CH3)2, -P(=0) (CH2CH3)2, -P (=0) (t-Bu) 2 e -P(=0) (Ph)2. Ácido fosfónico (fosfono): -P(=0)(0H)2.

Fosfonato (fosfonoéster) : -P (=0) (0R)2, em que R é um substituinte de fosfonato, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-20/ de preferência H, um grupo alquilo Ci_7 ou um grupo arilo C5-2o· Exemplos de grupos fosfonato incluem, mas não estão limitados a, -P (=0) (CH3)2, -P(=0) (OCH2CH3)2, -P (=0) (0-t-Bu)2 e -P(=0) (OPh)2. Ácido fosfórico (fosfonooxi) : -0P(=0) (0H)2 .

Fosfato (fosfonooxiéster) : -0P(=0) (0R)2, em que R é um substituinte de fosfato, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-20 ou um grupo arilo C5-2o, de preferência H, um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-2o· Exemplos de grupos fosfato incluem, mas não estão limitados 24 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ a, -ΟΡ(=0) (OCH3)2, -0Ρ(=0) (OCH2CH3)2, -ΟΡ (=0) (O-t-Bu) 2 e -0Ρ(=0) (OPh)2 . Ácido fosforoso: -0P(0H)2.

Fosfito: -0P(0R)2, em que R é um substituinte de fosfito, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7, um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-20, de preferência H, um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-20. Exemplos de grupos fosfito incluem, mas não estão limitados a, -OP(OCH3)2, -0P (OCH2CH3) 2, -0P (0-t-Bu) 2 e -0P(0Ph)2.

Fosforamidite: -0P (ORi)-NR22, em que R1 e R2 são substituintes de fosforamidite, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7 (opcionalmente substituído) , um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-20/ de preferência -H, um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-2o. Exemplos de grupos fosforamidite incluem, mas não estão limitados a, -0P (OCH2CH3) -N (CH3) 2, -0P (OCH2CH3)-N(i-Pr) 2 e -0P (0CH2CH2CN) -N (i-Pr) 2 .

Fosforamidato: -0P (=0) (0R1)-NR22, em que R1 e R2 são substituintes de fosforamidato, por exemplo, -H, um grupo alquilo C1-7 (opcionalmente substituído) um grupo heterociclilo C3-2o ou um grupo arilo C5-20, de preferência -H, um grupo alquilo C1-7 ou um grupo arilo C5-2o. Exemplos de grupos fosforamidato incluem, mas não estão limitados a, -0P (=0) (OCH2CH3) -N (CH3) 2, -0P (=0) (OCH2CH3)-N(i-Pr) 2 e -0P(=0) (0CH2CH2CN) -N(i-Pr)2.

Alquileno

Alquileno C3-i2: 0 termo "alquileno C3_i2", tal como é aqui utilizado, refere-se a uma porção bidentada obtida por remoção de dois átomos de hidrogénio, quer ambos do mesmo átomo de carbono ou um de cada um de dois átomos de carbono diferentes, de um composto hidrocarboneto possuindo de 3 a 12 átomos de carbono (salvo especificado de outro modo) que pode ser alifático ou alicíclico e que pode ser saturado, parcialmente insaturado ou totalmente insaturado. Assim, o termo "alquileno" inclui as sub-classes alcenileno, alcinileno, cicloalcileno, etc., discutidas abaixo. 25 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Exemplos de grupos alquileno C3-12 saturados linaares incluem, mas não estão limitados a, - (CH2) n- em que n é um inteiro de 3 a 12, por exemplo, -CH2CH2CH2- (propileno) , -CH2CH2CH2CH2- (butileno), -CH2CH2CH2CH2CH2- (pentileno) e -CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2- (heptileno) .

Exemplos de grupos alquileno C3-12 saturados ramificados incluem, mas não estão limitados a, -CH(CH3) CH2-, -CH(CH3)CH2CH2-, -CH(CH3)CH2CH2CH2-, -CH2CH(CH3)CH2-, -ch2ch (CH3) ch2ch2-, -CH (CH2CH3)-, -CH (CH2CH3) CH2- e -ch2ch (CH2CH3) ch2- .

Exemplos de grupos alquileno C3-i2 parcialmente insaturados lineares (grupos alcenileno e alcinileno C3-12) incluem, mas não estão limitados a, -CH=CH-CH2-, -CH2-CH=CH2-, -ch=ch-ch2-ch2-, -ch=ch-ch2-ch2-ch2-, -CH=CH-CH=CH-, -ch=ch-ch=ch-ch2-, -ch=ch-ch=ch-ch2-ch2-, -ch=ch-ch2-ch=ch-, -CH=CH-CH2-CH2-CH=CH- e -CH2-C=C-CH2-.

Exemplos de grupos alquileno C3_i2 parcialmente insaturados ramificados (grupos alcenileno e alcinileno C3-12) incluem, mas não estão limitados a, -C(CH3)=CH-, -C (CH3) =CH-CH2-, -CH=CH-CH (CH3) - e -C=C-CH (CH3) - .

Exemplos de grupos C3-i2 saturados aliciclicos (cicloalquilenos C3-12) incluem, mas não estão limitados a, ciclopentileno (e.g. ciclopent-1,3-ileno) e ciclo-hexileno (e.g. ciclo-hex-1,4-ileno).

Exemplos de grupos C3_i2 parcialmente insaturados aliciclicos (cicloalquilenos C3_i2) incluem, mas não estão limitados a, ciclopentenileno (e.g. 4-ciclopenten-l,3-ileno), ciclo-hexenileno (e.g. 2-ciclo-hexen-l,4-ileno; 3-cilo-hexen-1,2-ileno; 2,5-ciclo-hexadien-l,4-ileno).

Doenças Proliferatlvas

Um perito na técnica consegue determinar prontamente se um composto candidato trata realmente uma condição proliferativa para qualquer tipo de célula particular. Por exemplo, ensaios que podem convenientemente ser utilizados 26 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ para avaliar a actividade oferecida por um composto particular são descritos nos exemplos abaixo. 0 termo "doença proliferativa" refere-se a uma proliferação celular não desejada ou descontrolada de células excessivas ou anormais que é indesejada, tal como, crescimento neoplásico ou hiperplásico in vitro ou in vivo.

Exemplos de condições proliferativas incluem, mas não estão limitados a, proliferação celular benigna, pré-maligna, e maligna, incluindo mas não limitado a, neoplasmas e tumores (e.g. histocitoma, glioma, astrocioma, osteoma), cancros (e.g. cancro do pulmão, cancro do pulmão de células pequenas, cancro gastrointestinal, cancro do intestino, cancro do cólon, carcinoma da mama, carcinoma do ovário, cancro da próstata, cancro testicular, cancro do fígado, cancro do rim, cancro da bexiga, cancro do pâncreas, cancro do cérebro, sarcoma, osteosarcoma, sarcoma de Kaposi, melanoma), leucemias, psoríase, doenças ósseas, desordens fibroproliferativas (e.g. de tecidos conectivos) e aterosclerose.

Qualquer tipo de célula pode ser tratada, incluindo mas não limitado a, pulmão, gastrointestinal (incluindo e.g., intestino, cólon), mama (mamária), ovário, próstata, fígado (hepática), rim (renal), bexiga, pâncreas, cérebro e pele. Métodos de Tratamento

Tal como descrito acima, a presente invenção proporciona um composto de fórmula III do primeiro aspecto para utilização num método de terapia. Os compostos do primeiro aspecto podem ser utilizados num método de tratamento que compreende a administração a um sujeito necessitado de tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto do primeiro aspecto, de preferência na forma de uma composição farmacêutica. O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" é uma quantidade suficiente para revelar benefícios para o paciente. Esse benefício pode ser pelo menos melhoria de pelo menos um sintoma. A quantidade real administrada e a velocidade e decurso temporal da administração dependerão da natureza e severidade do que está a ser tratado. A prescrição de tratamento, e.g., decisões sobre a dosagem, está no âmbito 27 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ da responsabilidade de médicos de clinica geral e de outras especialidades clinicas.

Um composto pode ser administrado sozinho ou em combinação com outros tratamentos, quer simultaneamente quer sequencialmente, dependendo da condição a ser tratada. Exemplos de tratamentos e terapias incluem, mas não estão limitados a, quimioterapia (administração de agentes activos, incluindo, e.g. drogas; cirurgia e terapia de radiação. Se o composto de fórmula III comportar um grupo protector de azoto à base de carbamato que possa ser removido in vivo, então podem ser utilizados os métodos de tratamento descritos no documento WO 00/12507 (ADEPT, GDEPT e PDT).

As composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção e para utilização de acordo com a presente invenção podem compreender, em adição ao ingrediente activo, i.e., um composto de fórmula III, um excipiente, veiculo, tampão, estabilizante ou outros materiais farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos dos peritos na técnica. Esses materiais devem ser não tóxicos e não devem interferir com a eficácia do ingrediente activo. A natureza precisa do veiculo ou outro material dependerá da via de administração que pode ser oral ou por injecção, e.g. cutânea, subcutânea ou intravenosa.

As composições farmacêuticas para administração oral podem ser em forma de comprimido, cápsula, pó ou liquida. Um comprimido pode compreender um veiculo sólido ou um adjuvante. As composições farmacêuticas liquidas compreendem geralmente um veiculo liquido tal como água, petróleo, óleos animais ou vegetais, óleo mineral ou óleo sintético. Podem ser incluídos solução salina fisiológica, dextrose ou outra solução de sacáridos ou glicóis tais como etilenoglicol, propilenoglicol ou polietilenoglicol. Uma cápsula pode compreender um veículo sólido tal como gelatina.

Para injecção intravenosa, cutânea ou subcutânea ou injecção no sítio da aflição, o ingrediente activo estará na forma de uma solução aquosa parentericamente aceitável que seja isenta de pirogénios e que tenha um pH, isotonicidade e estabilidade adequados. Os peritos na técnica estão bem capacitados para preparar soluções adequadas utilizando, por 28 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ exemplo, veículos isotónicos tais como Injecção de Cloreto de Sódio, Injecção de Ringer, Injecção de Ringer Lactada. Podem ser incluídos conservantes, estabilizantes, tampões, antioxidantes e/ou outros aditivos, conforme necessário.

Inclui Outras Formas

Salvo especificado de outra forma, estão incluídas nas acima as bem conhecidas formas iónica, de sal, solvato e protegidas destes substituintes. Por exemplo, uma referência a ácido carboxílico (-C00H) inclui também a forma aniónica (carboxilato) (-C00-) , um seu sal ou solvato, assim como formas protegidas convencionais. Do mesmo modo, uma referência a um grupo amino inclui a forma protonada (-N+HR1R2) , um sal ou solvato do grupo amino, por exemplo, um sal cloridrato, assim como formas protegidas convencionais de um grupo amino. Similarmente, uma referência a um grupo hidroxilo inclui também a forma aniónica (-0”) , um seu sal ou solvato, assim como formas protegidas convencionais.

Isómeros, Sais e Solvatos

Certos compostos podem existir numa ou mais formas geométrica, óptica, enantiomérica, diastereomérica, epimérica, atrópica, estereoisomérica, tautomérica, conformacional ou anomérica particulares, incluindo, mas não limitadas a, formas cis e trans; formas E e Z; formas c, t e r; formas endo e exo; formas R, S e meso; formas D e L; formas de 1; formas ( + ) e (-) ; formas ceto, enol e enolato; formas sin e anti; formas sinclinal e anticlinal; formas α e β; formas axial e equatorial; formas de barco, cadeira, torcida, envelope e semi-cadeira; e suas combinações daqui em diante referidas colectivamente como "isómeros" (ou "formas isoméricas").

De preferência, os compostos da presente invenção têm a estereoquímica seguinte na posição Cll:

o 29 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Note-se que, com excepção do que é discutido abaixo para formas tautoméricas, estão especialmente excluídos do termo "isómeros" tal como é aqui utilizado, os isómeros estruturais (ou constitucionais) (i.e. isómeros que diferem nas ligações entre átomos e não meramente na posição dos átomos no espaço). Por exemplo, uma referência a um grupo metoxi, -OCH3, não deve ser entendida como uma referência ao seu isómero estrutural, um grupo hidroximetilo, -CH2OH. Do mesmo modo, uma referência a orto-clorofenilo não deve ser entendida como uma referência ao seu isómero estrutural, meta-clorofenilo. No entanto, uma referência a uma classe de estruturas pode muito bem incluir formas estruturalmente isoméricas que caiam dentro dessa classe (e.g. alquilo C1-7 inclui n-propilo e iso-propilo; butilo inclui n-, iso-, sec-, e terc-butilo; metoxifenilo inclui orto-, meta- e para-metoxifenilo). A exclusão acima não se refere a formas tautoméricas, por exemplo, formas ceto, enol e enolato, tal como, por exemplo, nos pares tautoméricos seguintes: ceto/enol (ilustrado abaixo), imina/enamina, amida/iminoálcool, ami-dina/amidina, nitroso/oxima, tiocetona/enetiol, N-nitroso/hiroxiazo e nitro/aci-nitro.

rcN

H* TF \ ,°h /c=c\ \ ,0· ceto enol enolato

Note-se que estão especificamente incluídos no termo "isómero" os compostos com uma ou mais substituições isotópicas. Por exemplo, H pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 1H, 2H (D) e 3H (T) ; C pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 12C, 13C e 14C; O pode estar em qualquer forma isotópica, incluindo 160 e 180: e semelhantes.

Salvo especificado de outra forma, uma referência a um composto particular inclui todas essas formas isoméricas incluindo (totalmente ou parcialmente) as suas misturas racémicas ou outras. Os métodos para a preparação (e.g. síntese assimétrica) e separação (e.g. cristalização fraccionada e meios cromatográficos) dessas formas isoméricas são conhecidos na arte ou podem ser prontamente obtidos por 30 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ adaptação de métodos aqui ensinados, ou métodos conhecidos, de uma maneira conhecida.

Salvo especificado de outra forma, uma referência a um composto particular inclui também as suas formas iónicas, de sal, de solvato e protegidas, por exemplo, como discutido abaixo.

Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar e/ou manipular um sal correspondente do composto activo, por exemplo, um sal farmaceuticamente aceitável. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis são discutidos em Berge, et al., J. Pharm. Sei., 66, 1-19 (1977).

Por exemplo, se o composto é aniónico ou tem um grupo funcional que pode ser aniónico (e.g. -COOH pode ser -COO"), então pode ser formado um sal com um catião adequado. Exemplos de catióes inorgânicos adequados incluem, mas não estão limitados a, iões de metais alcalinos tais como Na+ e K+, catiões alcalino-terrosos tais como Ca2+ e Mg2+ e outros catiões tais como Al+3. Exemplos de catiões orgânicos adequados incluem, mas não estão limitados a, ião amónio (i.e. NH4+) e iões amónio substituídos (e.g. NH3R/, NH2R2+, NHR.3+, NR4+) . Exemplos de alguns iões amónio substituídos adequados são os derivados de: etilamina, dietilamina, diciclo-hexilamina, trietilamina, butilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, colina, meglumina e trometamina, assim como aminoácidos, tais como lisina e arginina. Um exemplo de um ião amónio quaternário comum é N(CH3)4+.

Se o composto é catiónico ou tem um grupo funcional que possa ser catiónico (e.g. -NH2 pode ser -NH3+) , então pode ser formado um sal com um anião adequado. Exemplos de aniões inorgânicos adequados incluem, mas não estão limitados aos, derivados dos ácidos inorgânicos seguintes: clorídrico, bromídrico, iodídrico, sulfúrico, sulfuroso, nítrico, nitroso, fosfórico e fosforoso.

Exemplos de aniões orgânicos adequados incluem, mas não estão limitados aos, derivados dos seguintes ácidos orgânicos: 2-acetoxibenzóico, acético, ascórbico, aspártico, 31 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ benzóico, canforsulfónico, cinâmico, cítrico, edético, etanodissulfónico, etanossulfónico, fumárico, gluceptónico, glucónico, glutâmico, glicólico, hidroximaleico, hidroxinaftalenocarboxílico, isetiónico, láctico, lactobiónico, láurico, maleico, málico, metanossulfónico, múcico, oleico, oxálico, palmítico, pamóico, pantoténico, fenilacético, fenilsulfónico, propiónico, pirúvico, salicílico, esteárico, succínico, sulfanílico, tartárico, toluenossulfónico e valérico. Exemplos de aniões orgânicos poliméricos adequados incluem, mas não estão limitados aos, derivados dos ácidos poliméricos seguintes: ácido tânico, carboximetilcelulose.

Uma forma de sal particular de interesse pode ser formada a partir de compostos de fórmula III, em que R10 e R16 formam uma ligação imina, por reacção do dito composto com um sal bissulfito para formar um derivado de bissulfito da PBD. Estes compostos podem ser representados como:

em que M é um catião monovalente farmaceuticamente aceitável ou, se o composto for um dímero, os dois grupos M podem em conjunto representar um catião divalente farmaceuticamente aceitável e os outros grupos são como definido anteriormente.

Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar e/ou manusear um solvato correspondente do composto activo. O termo "solvato" é utilizado aqui no sentido convencional para se referir a um complexo de soluto (e.g. composto activo, sal de composto activo) e solvente. Se o solvente for água, o solvato pode ser convenientemente referido como hidrato, por exemplo, um monohidrato, um di-hidrato, um tri-hidrato, etc.

Os solvatos de relevância particular para a presente invenção são aqueles em que o solvente é adicionado através da ligação imina da porção PBD, o que é ilustrado abaixo em que o solvente é água ou um álcool (RA0H, em que RA é um 32 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ substituinte de éter como descrito acima):

Estas formas podem ser denominadas carbinolamina e formas éter de carbinolamina da PBD. O balanço destes equilíbrios depende das condições em que os compostos são encontrados, assim como da natureza da própria porção.

Em geral, qualquer solvente nucleófilo é capaz de formar esses solvatos como ilustrado acima para solventes hidroxílicos. Outros solventes nucleófilos incluem tióis e aminas.

Estes solvatos podem ser isolados em forma sólida, por exemplo, por liofilização.

Vias Gerais de Síntese A síntese de compostos de PBD é discutida extensivamente no documento WO 00/12508.

Tal como discutido naquele pedido de patente, um passo chave numa via preferida para PBDs é uma ciclização para produzir o anel B, envolvendo a geração de um aldeído (ou seu equivalente funcional) naquela que será a posição 11, e o seu ataque pelo azoto Pro-NIO:

IV em que os substituintes são como definido no segundo aspecto da invenção. 0 "aldeído mascarado", -CPQ pode ser um acetal ou tioacetal, caso em que a ciclização envolve a desmascaração. Em alternativa, pode ser um álcool -CHOH, caso em que a reacção envolve oxidação, e.g. por meios de TPAP, 33 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ TEMPO ou DMSO (oxidação de Swern).

Nesta reacção, Ri2 é de preferência 0-R14, i.e. um grupo hidroxi protegido e R13 é H. 0 composto aldeido mascarado pode ser produzido por condensação de uma pirrolidina 2,4-substituída correspondente com um ácido 2-nitrobenzóico:

O grupo nitro pode então ser reduzido a -NH2 e protegido por reacção com um agente adequado, e.g. um cloroformato, que proporciona o grupo protector de azoto removível no composto de fórmula IV.

Um processo que envolve o procedimento de oxidação-ciclização é ilustrado no esquema 1 (um tipo de ciclização alternativo será descrito mais tarde com referência ao esquema 2).

rv Esquema 1 34 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ A exposição do álcool (Β) (em que o azoto Pro-N10 está geralmente protegido como carbamato) a perrutenato de tetrapropilamónio (TPAP)/N-óxido de N-metilmorfolina (NMO) sobre crivos A4 resulta em oxidação acompanhada por fecho espontâneo do anel B para dar o produto desejado IV. O procedimento de oxidação com TPAP/NMO revela ser particularmente conveniente para reacções de pequena escala, enquanto a utilização dos métodos de oxidação à base de DMSO, particularmente a oxidação de Swern, prova ser superior para trabalho em maior escala (e.g. >1 g). Um agente oxidante particularmente preferido é (diacetoxiiodo)benzeno (1,1 eq) e TEMPO (0,1 eq) dissolvido em CH2C12. O álcool não ciclizado (B) pode ser preparado pela reacção de um reagente de protecção de azoto de fórmula D, que é de preferência um cloroformato ou cloreto de ácido, com uma solução do aminoálcool C, geralmente em solução, geralmente na presença de uma base tal como piridina (de preferência 2 equivalentes) a uma temperatura moderada (e.g. a 0°C) . Sob estas condições é usualmente observada uma pequena O-acilação ou nenhuma. O aminoálcool chave C pode ser preparado por redução do composto nitro correspondente E, escolhendo um método que deixe o resto da molécula intacto. O tratamento de E com cloreto de estanho (II) num solvente adequado, e.g. metanol sob refluxo, origina geralmente, após a remoção dos sais de estanho, o produto desejado com um rendimento elevado. A exposição de E a hidrazina/niquel de Raney evita a produção de sais de estanho e pode resultar num maior rendimento de C, apesar deste método ser menos compatível com o intervalo de possíveis substituintes do anel C e A. Por exemplo, se existir uma insaturação do anel C (quer no próprio anel, quer em R2 ou R3) , esta técnica pode não ser adequada. Outro meio adequado de redução será a hidrogenação catalítica utilizando paládio sobre carbono como catalisador. 0 composto nitro de fórmula E pode ser preparado por acoplamento do cloreto de o-nitrobenzoílo apropriado a um composto de fórmula F, e.g. na presença de K2C03 a -25°C sob 35 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ uma atmosfera de N2. Os compostos de fórmula F podem ser facilmente preparados, por exemplo por olefinação da cetona derivada de L-trans-hidroxiprolina. O intermediário cetona pode também ser explorado por conversão no triflato de enol para utilização em reacções de acoplamento mediadas por paládio. O cloreto de o-nitrobenzoilo é sintetizado a partir do ácido o-nitrobenzóico (ou éster alquilico após hidrólise)) de fórmula G, o qual ele próprio é preparado a partir do derivado (ou éster alquilico) de ácido vanilico H. Muitos destes estão disponíveis comercialmente e alguns são revelados em Althuis, T.H. e Hess, H.J., J. Medicinal Chem., 20(1), 146-266 (1977) .

Ciclização Alternativa (Esquema 2)

f f OH r8v 11 JL ,N-c ,, II R7^ R O L^R13 S12 IV Esquema 2 No esquema 1, o passo final ou penúltimo era uma oxidativa.

Uma de tioacetal, alternativa, mostrado no

utilizando o esquema 2. A ciclização acoplamento 36 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ desmascaração mediada por mercúrio provoca a ciclização no composto protegido PBD IV. 0 composto tioacetal pode ser preparado como mostrado no esquema 2: o anel C protegido com tioacetal [preparado via um método da literatura: Langley, D.R. & Thurston, D.E., J. Organic Chemistry, 52, 91-97 (1987)] é acoplado ao ácido o- nitrobenzóico (ou éster alquilico após hidrólise) (G) utilizando um procedimento da literatura. O composto nitro resultante não pode ser reduzido por hidrogenação devido ao grupo tioacetal, pelo que o método do cloreto de estanho (II) é utilizado para originar a amina. Esta é então N-protegida, e.g., por reacção com um cloroformato ou cloreto de ácido tal como 2,2,2-tricloroetilcloroformato.

Os anéis C que contêm acetal podem ser utilizados como alternativa neste tipo de via com desprotecção envolvendo outros métodos, incluindo a utilização de condições ácidas. Síntese de Dímero (Esquema 3)

G'

Esquema 3 37 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Os dímeros de PBD podem ser sintetizados utilizando a estratégia desenvolvida para a síntese dos monómeros de PBD protegidos. As vias de síntese ilustradas no esquema 3 mostram compostos em que a ligação dímero tem a fórmula -0-(CH2) n—0—. 0 passo de formação do dímero é normalmente realizado para formar um bis(nitro ácido) G' . Este composto pode então ser tratado como composto G no esquema 1 ou esquema 2 acima. 0 bis(nitro ácido) G' pode ser obtido por nitração (e.g. utilizando ácido nítrico a 70%) do bis(ácido carboxílico). Este pode ser sintetizado por alquilação de dois equivalentes do ácido benzóico relevante com o diiodoalcano apropriado sob condições básicas. Muitos ácidos benzóicos estão disponíveis comercialmente e outros podem ser sintetizados por métodos convencionais. Em alternativa, os ésteres de ácido benzóico relevantes podem ser unidos em conjunto por uma reacção de eterificação de Mitsunobu com um alcanodiol apropriado, seguida por nitração e depois por hidrólise (não ilustrado).

Uma síntese alternativa do bis(nitroácido) envolve a oxidação do bis(nitroaldeído), e.g. com permanganato de potássio. Isto pode ser obtido por sua vez, por nitração directa do (aldeído), e.g. com HNO3 a 70%. Finalmente, o bis (aldeído) pode ser obtido por meio da eterificação de Mitsunobu de dois equivalentes do aldeído benzóico com o alcanodiol apropriado.

Vias alternativas para PBDs Métodos alternativos de síntese de PBDs protegidas em N10 são revelados no pedido co-pendente PCT/GB2004/003873 (apresentado em 10 de Setembro de 2004) que reivindica a prioridade de GB0321295.8 (apresentado em 11 de Setembro de 2003), que descreve a utilização de intermediários isocianato.

Formação do Composto de fórmula I 38 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

IV ub

lia ι

Após a ciclização para formar o anel B, o álcool em Cll IV é então de preferência reprotegido por meios convencionais para dar Ilb. Por exemplo, se R11 for TBS, a protecção pode ter lugar por reacção de IV com TBSOTf e 2,6-lutidina. A clivagem do grupo protector de C2 de Ilb proporciona então o álcool em C2. Por exemplo, quando o grupo protector em C2 (R14) é acilo, esta desprotecção pode ser realizada por adição de uma solução aquosa de K2CO3.

Esta reprotecção na posição Cll e desprotecção do álcool em C2 permite a reacção subsequente selectivamente da posição álcool em C2 deixando a posição Cll inalterada. 0 álcool em C2 pode então ser oxidado na cetona Ilb. De preferência, esta oxidação é realizada sob condições de Swern com bom rendimento. No entanto, outros métodos de oxidação que envolvem TPAP ou o reagente de Dess Martin também proporcionam a cetona com bom rendimento.

Se R2 no composto de fórmula I for -OSO2CH3, -0S02 (CnF2n+i) em que n=0, 1 ou 4, ou -0S02Rs, então a conversão a partir de Ilb pode ser conseguida por tratamento com o anidrido apropriado. Por exemplo, se R2 for triflato essa reacção com anidrido trifluorometanossulfónico em DCM na presença de piridina.

Se R2 no composto de fórmula I for -I ou -Br, então a conversão a partir de Ilb pode ser obtida por reacção com hidrazina e iodina ou bromina respectivamente. 39 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Se R2 no composto de fórmula I for -Cl, então a conversão a partir de Ilb pode ser obtida por reacção com um oxicloreto de fósforo (e.g. P0C13) .

Síntese de compostos de fórmula III

Este composto de fórmula I pode ser levado a reagir sob uma variedade de condições para originar moléculas precursoras de PBD com grupos pendentes acoplados na posição C2 IIIc.

Em particular, a utilização de acoplamento catalisado por paládio é preferida, tal como acoplamento de Suzuki, Stille e Heck. O catalisador de paládio pode ser qualquer catalisador adequado, por exemplo Pd(PPh3)4, Pd (OCOCH3) 2, PdCl2, Pd(dba)3. Os compostos que são acoplados podem ser qualquer reagente adequado, e.g. para Heck, alcenos com um H sp2; para Stille, organoestananos; e para Suzuki, derivados de organoboro.

Num aspecto preferido da invenção, o acoplamento pode ser realizado sob condições de microondas. Tipicamente, o catalisador de paládio, tal como Pd(PPh3)4, é suportado num sólido, por exemplo sobre polistireno, para facilitar o processamento e permitir a potencial reciclagem do catalisador. O ácido borónico não reagido pode ser sequestrado após o consumo completo de triflato utilizando PS-DEAM, sendo utilizado um cartucho separador de fase para isolar o produto de acoplamento. Esse método permite a síntese paralela de mais do que um (e.g. até 10, 20 ou 30) 40 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ compostos ao mesmo tempo. A ligação imina no composto de fórmula IIIc pode ser desprotegida por métodos padrão para originar o composto desprotegido Illa (que pode estar na sua forma carbinolamina ou éter de carboinolamina, dependendo dos solventes utilizados). Por exemplo se R10 for Alloc, então a desprotecção é realizada utilizando paládio para remover o grupo protector de N10, seguido pela eliminação de água. Se R10 for Troe, então a desprotecção é realizada utilizando um par Cd/Pb para dar o composto de fórmula Illa.

Se o grupo protector de azoto (R10) for tal que o produto final desejado ainda o contém, e.g. se for removível in vivo, então o composto de fórmula Illb pode ser sintetizado por remoção dos grupos protectores de oxigénio sob condições adequadas.

Outras Preferências

As preferências que se seguem podem ser aplicadas a todos os aspectos da invenção tal como descrito acima, ou podem ser referentes a um único aspecto. As preferências podem ser combinadas em conjunto em qualquer combinação. R6 a R9

Se o composto for um dímero, é preferido que a ponte do dímero seja de fórmula -O-(CH2) n-0-, em que n é de 3 a 12, e com maior preferência de 3 a 7. É preferido que os substituintes R8 se liguem para formar a ponte do dímero. R9 é de preferência H. R6 é de preferência seleccionado de entre H, OH, OR, SH, NH2, nitro e halo, e com maior preferência H ou halo, e com muita preferência é H.

R7 e R8 (quando o composto não é um dímero) são de preferência seleccionados independentemente de entre H, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR' e halo e com maior preferência seleccionados independentemente de entre H, OH e OR, em que R 41 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ é seleccionado de preferência de entre grupos alquilo C1-7, heterociclilo C3-i0 e arilo C5-i0 opcionalmente substituídos. Os substituintes particularmente preferidos nas posições 7- e 8- são OMe e 0CH2Ph.

No terceiro aspecto da invenção R10 é de preferência Troe. R11 é de preferência um grupo protector do oxigénio de sililo (com maior preferência TBS) ou THP. R2 é de preferência triflato. Assim, numa concretização particularmente preferida do terceiro aspecto da invenção, R10 é Troe, R11 é TBS ou THP e R2 é triflato.

No segundo aspecto da invenção, R14 é de preferência um éster metílico. R11 é de preferência um grupo protector do oxigénio de sililo (com maior preferência TBS) ou THP. Assim, numa concretização particularmente preferida do segundo aspecto da invenção R14 é um éster metílico e R11 é TBS ou THP. Além disso, R10 é de preferência Troe.

Nalgumas concretizações do primeiro aspecto da invenção, R10 é de preferência Troe e R16 é O-R11, em que R11 é de preferência um grupo protector do oxigénio de sililo (com maior preferência TBS) ou THP.

Noutras concretizações do primeiro aspecto da invenção, R10 e R16 em conjunto formam uma ligação dupla entre N10 e

Cll.

Os compostos da presente invenção de preferência têm R10 e R16 formando uma ligação dupla entre N10 e Cll. Os compostos da invenção são dímeros através de C8, i.e. os grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dímero com a fórmula -X-R"-X- a ligar os monómeros. Com maior preferência, a ponte do dímero tem a fórmula -O-(CH2) n-0-, em que n é 3 a 12, com maior preferência 3, 5 ou 7. As preferências para R6, R7 e R9 são como expressas acima. R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos, em que os grupos (i) e (ii) têm uma ligação carbono-carbono dupla ou 42 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3. 0 grupo (i) é de preferência um grupo vinilo substituído com um grupo amido e com maior preferência com um grupo amido que é -C(=0)N(CH3) 2; ou um grupo etinilo substituído com um grupo arilo C5-7 opcionalmente substituído, com maior preferência fenilo. O grupo (ii) é de preferência um grupo propileno opcionalmente substituído, por exemplo -CH=CH-CH3.

Se R for alquilo C1-12 opcionalmente substituído, é preferido que seja alquilo C1-7 opcionalmente substituído.

Exemplos

Exemplo 1 - Formação do intermediário dímero chave (2-[[(trifluorometil)sulfonil]oxi]-l,10,ll,lla-tetra-hidro-5JJ-pirrolo [2,1-c] [1,4] benzodiazepin-5-ona] ] (13) ) (2S,4R)-N-(Benziloxlcarbonll)-2-t-butildlmetllslllloximetil-4-hldroxlplrrolldlna (1)

/ OTBS

0 composto 1 é formado com um rendimento elevado num processo em quatro passos conhecido na arte, a partir de trans-4-hidroxi-L-prolina (S.J. Gregson et al., J. Med. Chem., 2004, 1161-1174). (2S,4R)-N-(Benzllox±carbonll-2-t-butildlmetilsillloximetll-4-oxlacetllplrrolldina (2)

OTBS OTBS

O O 1 2 43 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (a) piridina, AC2O, DMAP, THF, 16 h, 96%;

Piridina (18,3 g, 18,7 mL, 232 mmol, 1,1 eq) , anidrido acético (23,6 g, 21,8 mL, 232 mmol, 1,1 eq) e DMAP (5,14 g, 42,1 mmol, 0,2 eq) foram adicionados a uma solução agitada de 1 (76,9 g, 211 mmol) em THF seco (1 L). A mistura de reacção foi agitada durante 16 horas, tempo após o qual a TLC (CHCl3/MeOH 95:5 v/v) revelou o consumo completo do material de partida. O excesso de solvente foi removido por evaporação rotativa e o resíduo foi dissolvido em EtOAc (1 L) , lavado com HC1 IN (2 x 1 L) , H20 (1 L) , salmoura (1 L) e seco (MgSCL) . A filtração e evaporação do solvente originaram o acetato 2 como um óleo incolor (80,7 g, 94%) : 1H RMN (400 MHz, CDCI3) (rotâmeros) δ 7,36-7,12 (m, 5H) , 5,30-5,10 (m, 3H), 4,09-3,97 (m, 2H), 3,74-3,55 (m, 3H), 2,36-2,29 (m, 1H), 2,11-2,06 (m, 1H) , 2,02 (s, 3H), 0,87 (s, 6H), 0,86 (s, 3H), 0,03 e 0,00 (s x 2, 6H); MS (ES), m/z (intensidade relativa) 430 ( [M + Na]+', 95), 408 ( [Μ + Η]+', 100). (2S,4R)-2-t-Butildimetilsililoximetil-4-oxiacetilpirrolidina (3)

OTBS < HN

Uma pasta de éter silílico 2 (1,95 g, 4,80 mmol) e Pd a 10%/C (0,17 g) em etanol absoluto (10 mL) foi submetida a hidrogenação de Parr a 45 Psi durante 16 h, tempo findo o qual a TLC (CHCl3/MeOH 95:5 v/v) revelou o consumo completo do material de partida. A mistura de reacção foi filtrada através de celite para remover o Pd/C, e a almofada de filtração foi lavada repetidamente com etanol. O excesso de solvente foi removido por evaporação rotativa sob pressão reduzida para dar a amina 3 como um óleo ceroso laranja pálido (1,28 g, 98%) : IV (CHC13) 3315, 2930, 2858, 1739, 1652, 1472, 1435, 1375, 1251, 1088, 838, 779, 667 cm"1. !,!'-[[(Propano-1,3-diil)dioxljbls[(2S,4R)-(5-metoxi-2-nitro-1,4-fenlleno)carbonil]]bls[2-(terc- butildimetílsililoximetíl)-4-oxíacetilpirrolidina] (5) 44 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ HOOC Ο,Ν

COOH 4 νο2 3

Uma quantidade catalítica de DMF (2 gotas) foi adicionada a uma solução agitada do nitro-ácido 4 (8,12 g,

17,4 mmol)1 e cloreto de oxalilo (3,80 mL, 5,52 g, 43,5 mmol, 2,5 eq) em THF seco (250 mL). O precipitado inicial dissolveu-se gradualmente e a mistura de reacção foi deixada em agitação durante 16 h à temperatura ambiente. A solução de cloreto de ácido resultante foi adicionada gota a gota a uma mistura agitada da amina 3 (11,9 g, 43,5 mmol, 2,5 eq) , TEA (9,71 mL, 7,05 g, 69,7 mmol, 4,0 eq) e H20 (2,26 mL) em THF (100 mL) a 0°C (gelo/acetona) sob uma atmosfera de azoto. A mistura de reacção foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante mais 2,5 h. O excesso de THF foi removido por evaporação rotativa e o resíduo resultante foi partilhado entre H20 (400 mL) e EtOAc (400 mL) . As camadas foram deixadas separar e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 2 00 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram então lavadas com NH4CI saturado (200 mL), NaHC03 saturado (200 mL) , salmoura (200 mL) e secaos (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto como um óleo escuro. A purificação por cromatografia flash (CHCls/MeOH 99,7:0,3 v/v) isolou a amida pura 5 como um vidro amarelo claro (13,3 g, 78%) : 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,60 (s, 2H) , 6,60 (s, 2H) , 5,06 (s largo, 2H) , 4,44 (s largo, 2H) , 4,25-4,20 (m, 4H) , 4,10-4,08 (m, 2H) , 3,80 (s, 6H) , 3, 64-3, 62 (m, 2H) , 3, 36-3, 32 (m, 2H) , 3,11-3,08 (m, 2H) , 2,36-2,26 (m, 4H) , 2,13-2,08 (m, 2H) , 1,92 (s, 6H) , 0,80 (s, 18H) , 0,00 (s x 2, 12H) ; 13C RMN (100,6 MHz, CDCI3) δ 171,0, 166, 3, 154,5, 148,2, 137, 4, 128,0, 127,2, 109, 2, 108,5, 72,9, 65, 6, 62, 6, 57, 4, 56, 5, 54,8, 33, 0, 28, 6, 25, 8, 21,0, 18, 1; MS (ES) , m/z (intensidade relativa) 1000 ( [M + Na]+', 39), 978 ( [Μ + H]+·, 63), 977 (M+‘, 100), 812 (13). 1,1'-[[ (Propano-1,3-d±ol) dioxljbls[ (2S,4R) - (5-metoxi-2-amino-1,4-fenlleno)carbonll]]bis(2-(terc- butildimetilsililoximetil)-4-oxiacetilpirrolldina] (6) 45 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Adicionou-se ditionite de sódio (16,59 g, 95,27 mmol, 5 eq) a uma solução agitada da amida 5 (18,6 g, 19,1 mmol) em H2O (200 mL) e THF (400 mL). A mistura de reacção foi deixada com agitação durante 36 h, tempo findo o qual o excesso de THF foi removido por evaporação rotativa e o resíduo resultante foi extraído com EtOAc (3 x 250 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram então lavadas com H20 (300 mL) , salmoura (300 mL) e secas (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc 80:20 v/v, seguido de gradiante até EtOAc puro) para dar o produto 6 como uma espuma amarela (9,53 g, 55%): 1H RMN (400 MHz, CDCI3) (rotâmeros) δ 6,70 e 6,67 (s x 2, 2H) , 6,25 e 6,23 (s x 2, 2H) , 5,20 (s largo, 2H), 4,49 (s largo, 4H), 4,16-4,05 (m, 6H), 3,70 (s , 6H), 3, 68-3,57 (m, 4H), 2,36-2,27 (m, 4H) , 2,12-2,04 (m, 2H) , 1,96 (s, 6H) , 0 ,85 (s, 18H) , 0,01 e 0, 00 (s x 2, 12H) ; 13C RMN (100,6 MHz , CDCI3) δ 170, 6, 170, 0, 141,1, 116 ,3, 113,1, 102,3, 102 /1/ 102,0, 66,2, 65,3, 65,2, 57,0, 28,9 f 18,2; MS (ES), m/z ( intensidade relativa) 946 (M+· + 29, 43) , 933 ( [Μ + 16] +', 61) , 932 ( [M+15]+', 100), 918 ( [M+H) +·, 72) . !,!'-[[(Propano-1,3-diol)dloxijbls((2S,4R)-[5-metoxi-l,4-fenlleno-2-(2,2,2- tricloroetoxicarbonilamino)]carbonil]]bis(2-(terc-butildimetilsillloximetll)-4-oxlacetilpirrolidina] (7)

Uma solução de cloroformato de 2,2,2-tricloroetilo (3,58 mL, 5,50 g, 26,0 mmol, 2,2 eq) em DCM seco (60 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de piridina anidra (3,82 46 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ mL, 3,80 g, 47,2 mmol, 4,0 eq) e bis-anilina 6 (10,8 g, 11,8 mmol) em DCM seco (150 mL) a -10°C (N2 liq./etanodiol) . Após 16 h à temperatura ambiente, a mistura de reacção foi lavada com NH4C1 saturado (2 x 150 mL), CuS04 saturado (150 mL), H20 (150 mL) , salmoura (150 mL) e seca (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram um óleo viscoso amarelo que foi purificado por cromatografia flash (hexano/EtOAc 70:30 v/v) para dar o produto 7 como um vidro branco (13,8 g, 92%) : 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 9,42 (s largo, 1H) , 7,83 (s, 2H) , 6,76 e 6,74 (s x 2, 2H) , 5,21 (s largo, 2H) , 4,79 e 4,73 (d x 2, 4H, J = 12,0 Hz), 4,56 (s largo, 2H), 4,26-4,23 (m, 4H), 4,09-4, 04 (m, 2H) , 3,74 (s, 6H) , 3,72-3, 68 (m, 2H) , 3,60 (s largo, 4H) , 2,40-2,32 (m, 4H) , 2,23-2,08 (m, 2H) , 1,95 (s, 6H) , 0,85 (s, 18H) , 0,01 e 0,00 (s x 2, 12H) ; 13C RMN (100,6 MHz, CDCI3) δ 170,4, 169, 2, 151,9, 151,5, 150, 8, 143, 4, 132, 6, 114,4, 111,7, 95, 3, 74,4, 65, 5, 65, 4, 57,3, 56, 4, 32,5, 28,8, 25,8, 21,1, 18,1, 14,9/ MS (ES), m/z (intensidade relativa) 1306 ( [M + 38]+-, 92), 1304 ( [M + 36]+', 100), 1282 ( [M + 14 ] +', 97), 1280 ( [M + 12 ] +*, 55) . !,!'-[[(Propano-1,3-dlll)dioxljbls[(2S,4R)-[5-metoxl-l,4-fenileno-2-(2,2,2- trlcloroetoxicarbonllamlno)]carbonil]]bis(2-h±drox±met±l-9-oxiacetUpirrolldlna) (8)

Uma mistura de ácido acético glacial (310 mL) e H20 (100 mL) foi adicionada a uma solução de 7 (13,8 g, 10,9 mmol) em THF (250 mL) e foi agitada durante 16 h à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi diluída com DCM (750 mL) e neutralizada com NaHCCb saturado (5 L) . A camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 500 mL) e as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (1 L) e secas (MgS04) . A TLC (hexano/EtOAc 60:40 v/v) revelou o desaparecimento completo do material de partida. A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por 47 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ cromatografia flash em coluna (CHCl3/MeOH 99,7:0,3 v/v, seguido de gradiente para CHCl3/MeOH 96:4 v/v) para dar o produto 8 como um vidro branco (11,6 g, >100%) : 1H RMN (500 MHz, CDC13) δ 8,92 (s largo, 2H) , 7,55 (s, 1H) , 6,71 (s, 1H) , 5, 18 (s largo, 2H), 4,78 (d, 2H , J = 12, O K N ,72 ( d, 2H, . J = 12, 0 Hz), 4,50 ( s largo, 2 H) 4, 22-4 ,19 (m, 4H) , 4 , 00 (S largo , 2H) , 3,78 (s , 6H) , 3, 76- 3,52 (m, 6H), ), 2,32- 2, 30 (m, 2H) , 2,21-2,17 (m, 2H) , 2,0 9-2 , 04 ( )m, 2H) 1,94 (s, 6H) ; 13c RMN ( 125,8 MHz, CDC13) δ 17 0,4 , 152 !,2, 149,8, 145, 0 t 111, ,3, 106, 5 , 95, 6, 74,4, 72,5, 65, 4, 64,1, , 58 , 7, 5 6,5 , 56, 3, 33, , 6, 29,1, 21,1. !,!'-[[ (Propano-1,3-dill)d±ox±)b±s[(11S,llaS,2R)-10-(2,2,2-trlcloroetoxicarbonil)-ll-hidroxi-7-metoxi-2-oxiacetil-1,2,3,10,11,lla-hexa-hldro-5H-pirrolo[2,Ιο] [l,4]benzodiazepin-5-ona]] (9)

Adicionaram-se TEMPO (0,69 g, 4,42 mmol, 0,4 eq) e BAIB (15,7 g, 48,7 mmol, 4,4 eq) a uma solução agitada do diol 8 (11,5 g, 11,1 mmol) em DCM (150 mL). A mistura de reacção foi deixada em agitação durante 2 h e diluída com DCM (4 00 mL) , lavada com NaHS03 saturado (500 mL), NaHC03 saturado (500 mL), salmoura (200 mL) e seca (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (CHCl3/MeOH 99,9:0,1 v/v, seguido de gradiente para CHCl3/MeOH 99,7:0,3 v/v) para dar o produto 9 como um vidro amarelo claro (4,43 g, 39%): 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,28 (s, 2H, H6) , 6,84 (s, 2H, H9) , 5,68 (d, 2H, J= 9,1 Hz, Hll), 5,37-5,35 (m, 2H, H2), 5,18 (d, 2H, J = 12,0 Hz, Troe CH2), 4,32-4,21 (m, 6H, 0CH2CH2CH20, Troe CH2), 4,03 (dd, 2H, J= 13,2, 2,6 Hz, H3) , 3,92 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,39-3,69 (m, 4H, H3 e Hlla), 2,39-2,35 (m, 6H, 0CH2CH2CH20 e Hl), 2,03 (s, 6H, CH3C02 x 2) ; 13C RMN (100,6 MHz, CDC13) δ 170,4 (CH3C02) , 167,4 (C^t) , 154,3 (C^t) , 150,5 (Cquat), 149,1 (Cquat) , 127,4 (C^at) , 124,9 (Cquat) , 114,1 (C9) , 110,9 (C6) , 95,0 (Troe CC13) , 87,5 (Cll) , 75,0 (Troe CH2) , 71,4 (C2) , 65,5 (0CH2CH2CH20) , 58,4 (Cila), 56,1 (OCH3) , 48 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

51,1 (C3) , 35,8 (C1), 29,1 (0CH2CH2CH20) , 21,0 (CH3C02) / MS (ES) , m/ζ (intensidade relativa) 1058 ([Μ + Na]+', 100). 1,1'-[[(Propano-1,3-diol)dioxijbis[(11S,llaS,2R)-10-(2,2,2-tricloroetoxicarbon.il) -11- (terc-butildimetilsililoxi) - 7-metoxi-2-oxiacetil-l,2,3,1 O,11,lla-hexa-hidro-5H-pirrolo[2,1 - c][1,9]benzodiazepin-5-ona]] (10)

Adicionou-se TBSOTf (2,70 mL, 3,10 g, 11,7 itimol, 3,0 eq) a uma solução agitada do bis-álcool 9 (4,05 g, 3,91 mmol) e 2,6-lutidina (1,82 mL, 1,68 g, 15,6 mmol, 4,0 eq) em DCM (50 mL) . A mistura de reacção foi deixada com agitação durante 2.5 h e diluída com DCM (150 mL) , lavada com CuSCh saturado (2 X 100 mL) , NaHC03 saturado (100 mL) , salmoura (200 mL) e seca (MgSCg) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (CHCl3/MeOH 99,9:0,1 v/v ) para dar o produto 10 como um vidro branco (5,05 g, >100%) : 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ 7.05 (s, 2H, H6) , 6,52 (s, 2H, H9), 5,53 (d, 2H, J= 9,0 Hz,

Hll), 5,14 (s largo, 2H, H2), 4,99 (d, 2H, J= 12,0 Hz, Troe CH2) , 4, 06-3, 87 (m, 8H, 0CH2CE2CH20, Troe CH2 e Hlla) , 3,71 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,48-3,43 (m, 4H, H3) , 2,21-2,11 (m, 4H, OCH2CJÍ2CH2O e Hl), 2,03-1,96 (m, 2H, Hl), 1,81 (s, 6H, Cfí3C02 x 2), 0,63 (s, 18H, TBS CH3 x 6), 0,00 (s x 2, 12H, TBS CH3 x 4) ; 13C RMN (100,6 MHz, CDC13) δ 170,3 (CH3C02) , 167,9 (C«p,«t) , 153,6 (Cquat), 150,4 (C^t) , 149,2 (Cqaat) , 127,9 (C^t) , 125,5 (Cquat) , 113,9 (C9) , 110,7 (C6) , 95,2 (Troe CC13) , 88,2 (Cll) , 74,7 (Troe CH2) , 71,7 (C2) , 65,0 (0CH2CH2CH20) , 60,5 (Cila), 56,1 (OCH3) , 51,2 (C3) , 36,2 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) , 25,6

(TBS CH3) , 21,0 (CH3C02) , 17,8 (TBS Cquat), 14,2 e 14,1 (TBS CH3) ; MS (ES) , m/z (intensidade relativa) 1285 ( [M + 21)+-, 100) , 1265 ( [M+H] +', 75) . 1,1'-[[(Propano-1,3-diol)dioxijbis[(11S,llaS,2R)-10-(2,2,2-trícloroetoxicarbonil)-11-(terc-butildimetilsililoxi) -7-metoxi-2-hidroxi-l,2,3,10,11,lla-hexa-hidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona]] (11) 49 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Uma solução de K2CO3 (93 mg, 0,67 mmol, 5,0 eq) em H20 (2 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução agitada do acetato 10 (170 mg, 0,13 mmol) em MeOH (3 mL) . A solução incolor inicial tornou-se amarela e observou-se a formação de um precipitado branco. A mistura de reacção foi deixada em agitação durante 16 h, quando a TLC (CHCl3/MeOH 95:5 v/v) revelou o consumo completo do material de partida. O excesso de solvente foi removido por evaporação rotativa e a mistura foi cuidadosamente neutralizada com HC1 IN para pH 7. A mistura resultante foi extraída com EtOAc (3 x 25 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram então lavadas com salmoura (40 mL) e secas (MgSCU) . A filtração e remoção do solvente originaram o produto 11 como um vidro branco (151 mg, 95%) : 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 6,94 (s, 2H, H6) , 6,52 (s, 2H, H9) , 5,53 (d, 2H, J= 9,0 Hz, Hll), 5,00 (d, 2H, J= 12,0 Hz, Troe CH2) , 4,36-4,35 (m, 2H, H2), 4, 06-3, 82 (m, 8H, OCH2CH2CH2O,

Troe CH2 e H3) , 3,61 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,54-3,48 (m, 2H,

Hlla), 3,39-3,34 (m, 2H, H3), 2,96 e 2,95 (s largo x 2, 2H, OH x 2), 2,21-2,20 (m, 2H, 00Η20Η20Η20) , 2,19-2,08 (m, 2H,

Hl), 1,90-1,74 (m, 2H, Hl), 0,64 (s, 18H, TBS CH3 x 6), 0,00 (s, 12H, TBS CH3 x 4); 13C RMN (100,6 MHz, CDC13) δ 168,5 (Cquat), 153,6 (Cquat) , 150,3 (Cquat), 149,1 (C^t), 127,9 (Cquat), 125,4 (Cquat), 113,9 (C9) , 110,7 (C6) , 95,2 (Troe CC13) , 88,3 (Cll), 74,7 (Troe CH2) , 69,4 (C2), 65,0 (OCH2CH2CH2O) , 60,9 (Cila), 55,9 (OCH3) , 54,1 (C3) , 38,8 (Cl), 28,9 (OCH2CH2CH2O) , 25,6 (TBS CH3) , 17,8 (TBS Cquat); MS (ES), m/z (intensidade relativa) 1196 ( [M + 16]+', 100), 1181 ( [M + H]+·, 82) . 1,1' - [ [ (Propano-1,3-dlll) díoxi]bis [ (11S, llaS) -10-(2,2,2-trlcloroetoxlcarboníl)-11-(terc-butildlmetilslllloxl)-7-metoxl-2-oxo-1,2,3,10,11,lla-hexa-hidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodlazepln-5-ona]] (12) 50 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Uma solução de DMSO anidro (0,82 mL, 0,90 g, 11,5 mmol, 6,0 eq) em DCM seco (20 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução agitada de cloreto de oxalilo (2,88 mL de uma solução 2 M em DCM, 5,76 mmol, 3,0 eq) sob uma atmosfera de azoto a -60°C (N2 liq/CHCl3) . Após agitação a -55°C durante 1,5 h, adicionou-se gota a gota uma solução do substrato 11 (2,26 g, 1,92 mmol) em DCM seco (30 mL) à mistura de reacção, a qual foi então agitada durante mais 2 h a -45°C. Adicionou-se gota a gota uma solução de TEA (10,8 mL, 7,82 g; 71,7 mmol, 4,2 eq) em DCM seco (90 mL) à mistura e agitou-se durante mais 30 min. A mistura de reacção foi deixada aquecer para 0°C, lavada com HC1 1 N frio (2 x 50 mL) , H20 (50 mL) , salmoura

(50 mL) e seca (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente in vacuo originou o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (hexano/EtOAc 70:30 v/v, seguido de gradiente para hexano/EtOAc 40:60 v/v) para dar carbinolamina 12 como um vidro branco (1,62 g, 72%) : 1H RMN (400 MHz, CDCI3 ) δ 7,02 ( S, 2H, H6) , 6,54 (s, 2H, H9) , 5,59 (d, 2H, J = 9, 2 Hz, Hll) , 4,98 (d, 2H, J = 12,0 Hz, Troe CH2) , 4,09-3,86 (m, 8H, 0CH2CH2CH20, Troe CH2 e H3) , 3,75-3,66 (m, 10H, OCH3 x 2, Hlla, e H3) , 2,72 (dd, 2H, J = 10,2, 19, 6 Hz, Hl), 2,82 ( dd, 2H, J = 2, 6, 19, 6 Hz, Hl) , 2,22-2,19 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 0,63 (s, 18H, TBS CH3 x 6) , 0,00 (s x 2, 12H, TBS CH3 x 4) ; 13C RMN (100 ,6 MHz, CDC13) δ 207,7 (C2), 168, 0 ( Cquat) , 153,7 ( Cquat) , 150, 7 (Cquat), 149,4 : (Cquat), 127,8 (Cquat) , 124,6 (Cquat) , 114,0 (C9), 110,6 (C6) , 95,1 (Troe CC13) , 87,4 (Cll) , 74,8 (Troe CH2) , 65,0 (0CH2CH2CH20) , 58,9 (Cila), 56,1 (0CH3) , 53,0 (C3) , 40,3 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) , 25,6 (TBS CH3) , 17,8 (TBS Cquat); MS (ES), m/ z (intensidade relativa) 1224 ( [M + 48]+', 100), 1210 ( [M + 34 ] +‘, 60), 1199 ( [M + Na]+', 35), 1192 ( [M + 16]+', 40), 1176 (M+>, 18). !,!'-[[ (Propano-1,3-diol) dloxijbis [ (11S, llaS) -10-(2,2,2-trlcloroetoxicarbon.il) -11- (terc-butildimetilsililoxi) -7-metoxi-2-[[(trifluorometil)sulfonil]oxi]-1,10,11,1la-tetra -hidro-5H-pirrolo[2,1-c][l,4]benzodiazepin-5-ona]] (13) 51 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Adicionou-se anidrido triflico anidro (3,09 mL, 5,19 g, 18,4 mmol, 22 eq) tomado de uma ampola recém-aberta, rapidamente numa porção a uma solução agitada vigorosamente de cetona 12 (0,98 g, 0,84 mmol) e piridina anidra (1,49 mL, 1,46 g, 18,4 mmol, 22 eq) em DCM seco (50 mL) à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. O precipitado inicial dissolveu-se gradualmente e a solução acabou por tomar uma cor vermelho escuro. A mistura de reacção foi deixada agitar durante 4,5 h, altura em que a TLC (EtOAc/hexano 80:20 v/v) revelou o consumo completo do material de partida. A mistura foi vertida em NaHC03 saturado frio (60 mL) e extraída com DCM (3 x 80 mL). As camadas orgânicas combinadas foram então lavadas com CuSCq saturado (2 x 125 mL) , salmoura (125 mL) e secas (MgSCq) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (hexano/EtOAc 80:20 v/v) para dar o triflato 13 como um vidro amarelo claro (0,74 mg, 61%) : [a]25 d = +46,0° (c = 0,33, CHC13) ; XH RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,23 (s, 2H, H6) , 7,19 (s, 2H, H3) , 6,77 (s, 2H, H9) , 5, 94 (d, 2H, J = 8,9 Hz, Hll), 5,23 (d, 2H, J = 12, 0 Hz, Troe CH2) , , 4,31-4, 28 (m, 2H, OCH2CH2CE20) , 4,18 (d, 2H, J = 12,2 Hz, Troe CHZ) , 4,15-4,13 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 3, 95 -3, 91 (m, 8H, och3 x 2, Hlla) , 3,35 (dd, 2H, J = 11,0, 16, 6 Hz, Hl) , 2,84 (d, 2H, J= 16,6 Hz, Hl), 2,46-2, 44 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 0,8 9 (s, 18H, TBS CH3 x 6), 0,29 e 0,26 (s x 2, 12H, TBS CH3 x 4); 13C RMN (100-6 MHz, CDC13) δ 164,9 (C^t) , 153,6 (Cquat), 151,0 (Cquat), 149,5 (Cqa.t), 136,0 (C^t) , 127,7 (Cquat), 123,9 (Cquat) , 121,0 (C3) , 114,0 (C9) , 110,9 (C6) , 95,1 (Troe CC13) , 86, 3 (Cll), 74,8 (Troe CH2) , 65,0 (0CH2CH2CH20) , 60, 6 ( Cila), 56, 2 (OCH3), 34,4 (Cl), 28,8 (OCH2CH2CH20) , 25,6 δ (TBS : CH3), 17,8 ( TBS Cquat) / IV (CHC13) 3020, 2957, 2860, 1725, 1674, 1651, 1604, 1516, 1466, 1454, 1431, 1409, , 1329, 1312, 1274, 1216, 1138, 1113, 1083, 1042, 1006, 900, 840, 757, 668 , 646, 610 cm 1; MS (ES( ), m/z (intensidade relativa) 1461 ( [M + 21 ] +', 100), 1440 (M+·, 55) . 52 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Exemplo 2 - 1,1'-[[(Propano-1,3-diil)dioxi]bis[(llaS)-7- metoxi-2-[(Ν,Ν-dimetilaminocarbonil)vinil]1,lla-di-hidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,9]benzodiazepina-5-ona]] (ZC-204) l,l'-[[ (Propano-1,3-diil) dioxijbis [ (11S ,llaS) -10- (2,2,2-tricloroetoxicarbonil)-11-(terc-butildimetilsililoxi)-7-metoxi-2-[(N,N-dimetilaminocarbonil)vinil]-1,10,11,lla-tetra-hídro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona]] (14)

NMe2

Uma mistura de triflato 13 (732 mg, 1,22 mmol) , N,N- dimetilacrilamida (0,14 mL, 134 mg, 1,35 mmol, 5,0 eq), DABCO (152 mg, 1,35 mmol, 5,0 eq) , (CH3CN) 2PdCl2 (14 mg, 0,05 mmol, 0,2 eq) e MeOH (15 mL) foi agitada a 55 - 65°C durante 16 h. A reacção foi processada vertendo a mistura em CHC13 (20 mL) e NaHC03 aquoso (20 mL) . A camada aquosa foi extraída com CHC13 (3 x 20 mL) e os extractos de CHC13 foram combinados, lavados com H20 (50 mL) , salmoura (50 mL) e secos (MgSCU) . A filtração e evaporação do solvente deram o produto bruto como um vidro castanho escuro. 0 resíduo foi purificado por cromatografia flash em coluna (CHCl3/MeOH 99,9:0,1 v/v, seguido de gradiente para CHCl3/MeOH 99,2:0,8 v/v) para dar o produto acoplado 14 como um vidro amarelo claro (80 mg, 22%) : [a] 26d = +87,2 0 (c = 0,11, CHC13) ) ; 2H RMN (250 MHz, CDC13) δ 7,51 (d, 2H, J = 15,0 Hz, H12), 7,32 (s, 2H, H3) , 7,28 (s, 2H, H6) , 6,79 (s, 2H, H9), 6,10 (d, 2H, J = 15,0 Hz, H13), 5,88 (d, 2H, J= 8,8 Hz, Hll), 5,23 (d, 2H, J= 12,0 Hz, Troe CH2) , 4,33-4,28 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 4,18 (d, 1H, J = 12,2

Hz, Troe CH2) , 4,18-4,14 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 3, 98-3,95 (m, 8H, Hl la e OCH3 x 2), 3,17-3,06 (m, 8H, Hl e NCH3 x 2), 2,65 (d, 1H, J= 16,2 Hz, Hl), 2,47-2,44 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 0,92 (s, 18H, TBS CJÍ3 x 6), 0,29 e 0,27 (s x 2, 12H, TBS CH3 x 4); 13C RMN (62,9 MHz, CDC13) δ 166,5 (CONMe2) , 132,5 (C12), 132,6 (C3) , 116,8 (C13) , 114,0 (C9) , 110,8 (C6) , 95,2 (Troe CC13) , 86.9 (Cll), 74,8 (Troe CH2) , 65,0 (0CH2CH2CH20) , 61,9 (Cila), 56,2 (OCH3) , 33,5 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) , 25, 6 (TBS CH3) , 17.9 (TBS Cquat) ; MS (ES) , m/z (intensidade relativa) 1337 53 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ ( [Μ-Η]+', 100), 1327 (27), 1316 (34). 1,1'-[[(Propano-Ι,3-di±l)dioxijbis[(llaS)-7-metoxi-2- [(Ν,Ν-dimetilamlnocarbonil)vinil]-1,lla-di-hidro-5H-pirrolo[2,2-c][l,4]benzodiazepina-5-ona]] (ZC-204)

Adicionou-se o par Cd a 10%/Pd (120 mg, 0,99 mmol, 16,5 eq) a uma mistura em agitação rápida de 14 (79 mg, 0,06 mmol), THF (1,5 mL) e NH4OAC 1 N (1,5 mL) . A mistura de reacção foi deixada com agitação durante 3,5 h. Os sólidos foram filtrados e lavados com H2O e CHCI3. A camada aquosa foi extraída com CHCI3 (3 x 20 mL) e os extractos orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (50 mL) e secos (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente deixaram um sólido amarelo que foi purificado por cromatografia flash em coluna (CHCls/MeOH 99,9:0,1 v/v, seguido de gradiente para CHCls/MeOH 95:5 v/v) para dar ZC-204 como um vidro amarelo (13,4 mg, 31%) : [a]25 D = +235, 7° (c = 0,07, CHC13) ; 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 7,88 (d, 2H, J = 3,9 Hz, Hll), 7,54 (d, 2H, J = 15,1 Hz, H12) , 7,51 (s, 2H, H3) , 7-34 (s, 2H, H6) , 6,88 (s, 2H, H9), 6,18 (d, 2H, J= 15,0 Hz, H13) , 4-43-4,27 (m, 6H, OCJÍ2CH2CJÍ2O e Hlla) , 3,95 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,41-3,34 (m, 2H, Hl), 3,23-3,04 (m, 14H, Hl e NCH3 x 4), 2,97-2,44 (m, 2H, OCH2CH2CH2O) ; 13C RMN (62,9 MHz, CDC13) δ 166,4 (CONMe2), 162,1 (Cll), 161,7 (Cquat) , 151,5 (C^t) , 148,2 (C^t) , 140,4 (Cquat) t 135,2 (C12) , 132,2 (C3) , 121,8 (C^t) , 118,6 (Cquat) , 117,0 (C13) , 112,0 (C9) , 111,3 (C6) , 65,4 (0CH2CH2CH20) , 56,2 (OCH3) , 54,2 (Cila), 37,4 e 35,9 (NCH3) , 33,8 (Cl) 28,8 (OCH2CH2CH2O) ; MS (ES) , m/z (intensidade relativa) 741 ( [M + H20]+·, 25), 723 (M+·, 62).

54 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ

Exemplo 3 - 1,1'-[[(Propano-1,3-diil)dioxi]bis[(llaS)-7- metoxi-2-(1-propenil)-1,lla-di-hidro-5H-pirrolo[2,Ιο] [l,4]benzodiazepina-5-ona]] (ZC-211) l,l'-[[ (Propano-1,3-diil)dioxijbis[ (HS,llaS) -10- (2,2,2-tricloroetoxicarbonil)-11-(terc-butildimetilsililoxi)-7-metoxí-2- (1-propenil)-1,10,11,lla-tetra-hidro-5H-pirrolo[2,1 -c] [1,4]benzodiazepin-5-ona] ] (16)

Uma solução de TEA (0,11 mL, 81 mg, 0,80 mmol, 6,0 eq) em H20 (3 mL) e EtOH (10 mL) foi adicionada a uma solução de triflato 13 (192 mg, 0,13 mmol) em tolueno (5 mL) à temperatura ambiente. A esta mistura, adicionaram-se ácido trans-propenilborónico (30 mg, 0,35 mmol, 2,6 eq) e Pd(PPh3)4 (6 mg, 5 pmol, 0,04 eq). A mistura de reacção foi aquecida a 76°C durante 2 h, após as quais a TLC (EtOAc/hexano 50:50 v/v) revelou o consumo completo do material de partida. O excesso de solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em EtOAc (15 mL) , lavado com H20 (10 mL) , salmoura (10 mL) e seco (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (hexano/EtOAc 80:20 v/v) para originar 16 como um vidro amarelo claro (40 mg, 25%) : [a]20D = +75,0° (c = 0,20, CHC13) ; 2Η RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,28 (s, 2H, H6) , 6,90 (s, 2H, H3) , 6,78 (s, 2H, H9) , 6,26 (d, 2H, J= 14,8 Hz, H12) , 5,85 (d, 2H, J= 8,8 Hz, Hll) , 5,54 (dq, J= 6,8, 15,4 Hz, 2H, H13) , 5,23 (d, 2H, J= 12,0 Hz, Troe CH2) , 4,32-4,26 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 4,18-4,11 (m, 4H, Troe CH2 e 0CH2CH2CH20) , 3,94 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,89-3,83 (m, 2H, Hlla ) , 3,07 (dd, 2H, J = 10, 6, 15, 9 Hz, Hl), 2,60 (d, 2H, J = 16 ,3 Hz, Hl), 2,46-2,93 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) , 1, 85 (d, 6H, J = = 6, 6 Hz, H14) , 0,90 (s, 18H, TBS CH3 x 6) , 0,28 e 0,25 (s X 2, 12H, TBS CH3 x 4) ; 13C RMN (100, 6 MHz, CDC13) δ 163,6 (Cquat) f 153, 6 (Cquat) f 150,4 (Cquat), 149,2 (Cquat) r 127,7 (Cquat), 126,4 (C13) , 125,6 (Cquat), 124,7 (C12 e C3) , 123,5 (0^), 114,0 (C9) , 110,7 (C6) , 95,2 (Troe OCl3) , 87,2 (Cll), 74,7 (Troe CH2) , 65,0 (0CH2CH2CH20) , 61,4 (Cila), 55 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 56,1 (OCH3) , 33,9 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) , 25, 6 (TBS CH3) , 18,4 (C14), 17,9 (TBS Cquat) ; MS (ES) , m/z (intensidade relativa) 1246 ( [M + 22]+ *, 100), 1226 ( [M + 2]+', 88). !,!'-[[ (Propano-1,3-dlll)dioxijbis[(llaS)-7-metoxl-2-(1-propenil)-1,lla-d±-h±dro-5H-p±rrolo[2,1-c][l,4]benzodlazeplna-5-ona]] (ZC-211)

o ZC-211 O

Adicionou-se o par Cd a 10%/Pd (81 mg, 0,65 mmol, 20 eq) a uma mistura em agitação rápida de 16 (40 mg, 0,03 mmol), THF (1 mL) e NH4OAc 1 N (1 mL) . A mistura de reacção foi deixada em agitação durante 1 h, após a qual a TLC revelou o consumo completo do material de partida. Os sólidos foram filtrados e lavados com H20 e CHC13. A camada aquosa foi extraída com CHCI3 (3x5 mL) e os extractos orgânicos foram combinados, lavados com H20 (10 mL) , salmoura (10 mL) e secos (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (CHCl3/MeOH 99,8:0,2 v/v, seguido de gradiente para CHCl3/MeOH 97:3 v/v) para originar ZC-211 como um vidro amarelo (14,7 mg, 74%) : [a]20D = +1102,0 0 (c = 0,15, CHC13) ; 2H RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,74 (d, 2H, J= 3,8 Hz, Hll), 7,42 (s, 2H, H6) , 6,84 (s, 2H, H3), 6,77 (s, 2H, H9) , 6,19 (d, 2H, J = 15,5 Hz, H12) , 5,52 (dq, J = 6,8, 15,4 Hz, 2H, H13) , 4,27-4,16 (m, 6H, 0CH2CH2CH20 e Hlla) , 3,84 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,22 (dd, 2H, J= 11,5, 16,1 Hz, Hl), 3,03 (dd, 2H, J= 4,8, 16,2 Hz, Hl), 2,38-2,32 (m, 2H, 0CH2CA2CH20) , 1,77 (d, 6H, J = 6,6 Hz, H14) ; 13C RMN (100,6 MHz, CDC13) δ 162,6 (Cll), 161,2 (Cquat), 151,1 (Cquat), 148,1 (Cquat), 140,3 (Cquat), 127,7 (Cquat), 126,9 (C13) , 124,4 (C12 e C3) , 123,9 (Cquat), 119,3 (Cquat), 111,9 (C6) , 111,2 (C9) , 65,4 (0CH2CH2CH20) , 56,2 (OCH3) , 53,8 (Cila), 34,2 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) , 18,5 (C14) ; MS (ES) , m/z (intensidade relativa) 609 (M+-, 100).

Exemplo 4 - 1,1'-[[(Propano-1,3-diil)dioxi]bis[(llaS)-7- metoxi-2-etinilfenil-l,lla-di-hidro-5H-pirrolo[2,Ιο] [1,4]benzodiazepano-5-ona]] (ZC-209) 56 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 1,1' - [ [ (Propano-1,3-diil) dioxi ] bis [ (HS,llaS )-10-(2,2,2-tricloroetoxicarbon.il) -11- (terc-butildimetilsililoxi) - 7-metoxi-2-etinilfenil-1,10,11,lla-tetra-hidro-5H-pirrolo[2,1 -c] [1,4]benzodiazepin-5-ona] ] (17)

Adicionou-se uma quantidade catalítica de Pd(PPh3)4 a uma mistura agitada de triflato 13 (193 mg, 0,13 mmol), LiCl (34 mg, 0,80 mmol, 6,0 eq) e tributil(feniletinil)estanho (0,14 mL, 157 mg, 0,40 mmol, 3,0 eq) em THF seco (5 mL) . A mistura de reacção foi aquecida em refluxo durante 2,5 h, altura em que a TLC revelou o consumo completo do material de partida. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, o excesso de solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em DCM (20 mL), seguido por lavagem com NH4OH a 10% (20 mL) . A camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 2 0 mL) e os extractos orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (50 mL) e secos (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originaram o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (hexano/EtOAc 80:20 v/v) para originar 17 como um vidro amarelo (162 mg, 90%) : 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,40-7,37 (m, 4H, H15), 7,26-7,19 (m, 10H, H3, H6, H16 e H17) , 6,70 (s, 2H, H9) , 5,85 (d, 2H, J = 8,8 Hz, Hll) , 5,15 (d, 2H, J= 12,0 Hz, Troe CH2) , 4,24-4,19 (m, 2H, OCH2CH2CH2O) , 4,12-4,02 (m, 4H, Troe CH2 e OCH2CR2CH2O) , 3,86- 3,79 (m, 8H, OCH3 x 2 e Hlla) , 3,15 (dd, 2H, J = 10,8, 16,5 Hz, Hl), 2,63 (d, 2H, J = 16,5 Hz, Hl), 2,37-2,35 (m, 2H, OCH2CÍÍ2CH2O) , 0,82 (s, 18H, TBS CH3 x 6) , 0,22 e 0,18 (s x 2, 12H, TBS CH3 x 4); 13C RMN (100,6 MHz, CDC13) δ 163,8 (C^at) , 153,6 (0^), 150,8 (C^at) , 149,3 (C^at) , 133,3 (C3), 131,4 (C15) , 128,4 (Cl6 e C17) , 127,8 (C^at) , 125,1 (C^t) , 123,0 (Cquat) , 114,0 (C6) , 110,0 (C9) , 104,8 (C^at) , 95,2 (Troe CC13) , 93,7 (Calcino), 86,9 (Cll), 83,6 (Caicino) , 74,8 (Troe CH2) , 66,0 (OCH2CH2CH20) , 61,4 (Cila), 56,2 (OCH3) , 37,8 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) , 25, 6 (TBS CH3) , 17,8 (TBS Cquat) ; MS (ES), 57 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ m/z (intensidade relativa) 1344 (M+', 8), 625 (100). 1,1'-[[(Propano-1,3-dlll)dloxljbls[(llaS)-7-metoxl-2-etinllfenll-1,lla-dl-hldro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepina-5-ona]] (ZC-209)

Adicionou-se o par Cd a 10%/Pd (314 mg, 2,55 mmol, 20 eq) a uma mistura em agitação rápida de 17 (162 mg, 0,13 mmol), THF (4 mL) e NH4OAc 1 N (4 mL) . A mistura de reacção foi deixada em agitação durante 45 min, altura em que a TLC revelou o consumo completo do material de partida. Os sólidos foram filtrados e lavados com H2O e CHCI3. A camada aquosa foi extraída com CHCI3 (3 x 25 mL) e os extractos orgânicos foram combinados, lavados com H20 (50 mL) , salmoura (50 mL) e secos (MgS04) . A filtração e evaporação do solvente originou o produto bruto que foi purificado por cromatografia flash em coluna (CHCls/MeOH 99,8:0,2 v/v, seguido de gradiente para CHCl3/MeOH 97,5:2,5 v/v) para dar ZC-209 como um vidro amarelo (33 mg, 38%) : 1H RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,79 (d, 2H, J= 3,9 Hz, Hll) , 7,42 (s, 2H, H6) , 7,39-7,37 (m, 4H, H15), 7,26-7,19 (m, 8H, H3, H16 e H17), 6,78 (s, 2H, H9), 4,30-4,19 (m, 6H, OCJÍ2CH2CH2O e Hlla) , 3,86 (s, 6H, OCH3 x 2), 3,36 (dd, 2H, J = 11,7, 16,4 Hz, Hl), 3,18 (dd, 2H, J = 5,4, 16,4 Hz, Hl), 2,37-2,34 (m, 2H, 0CH2CH2CH20) ; 13C RMN (100,6 MHz, CDCI3) δ 162,0 (Cll) , 161,3 (Cquat) , 151,4 (Cquat), 148,2 (C^t) , 140,3 (Cquat) , 132,8 (C3) , 131,4 (C15) , 128,4 (Cl6 e C17), 122,9 (Cquat) , 118,7 (Cquat) , 112,0 (C6), 111,2 (C9) , 105,1 (Cquat), 94,3 (Calcino), 83,3 (Calcino), 65,5 (0CH2CH2CH20) , 56, 2 (OCH3) , 53,8 (Cila), 37,9 (Cl), 28,8 (0CH2CH2CH20) ; MS (ES), m/z (intensidade relativa) 729 (M+-, 100) .

Exemplo 5 - Formação do monómero intermediário chave ((11S,llaS)-7,8-Dimetoxi-ll-(terc-butildimetilsililoximetil)-10-(2,2,2-tricloroetoxicarbonil)-2-[[(trifluorometil)-sulfonil]oxi]-l,2,3,10,ll,lla-tetra-hidro-5H-pirrolo[2,1-c]-[l,4]benzodiazepin-5-ona (27)) 58 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (2S) (4R) -Ν- (4,5-Dimetox±-2-n±trobenzoll) -2- (terc-butlldimetllsililoximetll)-4-oxlacetllplrrolldlna (19)

Uma solução agitada de ácido 6-nitroverátrico (18) (1,49 g, 6,58 mmol; 1,2 Equiv.) em DMF seca (2 mL) e DCM (80 mL) foi tratada com cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N-etilcarbodiimida (1,26 g, 6,58 mmol, 1,2 Equiv.) e arrefecida para 0°C. Adicionou-se hidrato de 1-hidroxibenzotriazole (1,03 g, 6,58 mmol, 1,2 Equiv.) em porções e a mistura de reacção foi deixada aquecer para a temperatura ambiente. Após agitação durante 1 h, adicionou-se gota a gota uma solução de 3 (1,5 g, 5,48 mmol, 1,0 Equiv.) em DCM (80 mL) e a mistura foi agitada durante mais 15 h. Isto foi seguido por aquecimento a 55°C durante mais 3 h. A mistura de reacção foi lavada com NH4C1 (60 mL) , NaHC03 (60 mL) , salmoura (60 mL) , seca (MgS04) e concentrada in vacuo. A purificação por cromatografia flash (EtOAc/éter de petróleo 4:6) originou o produto 19 na forma de cristais pálidos (2,llg, 79,9%): p.f. 13 4 ° C; [a] d19 = -91,9° (c = 0,408, CHC13) ; 3Η RMN (CDC13, 400 MHz) δ 0,12 (s, 6 H, Si(CH3)2), 0,93 (s, 9 H, C(CH3)3), 2,04 (s, 3 H, C=OCH3) , 2,20 - 2,28 (m, 1 H, Hla) , 2,39 - 2,45 (m,

1 H, Hlb), 3,22 (d, 1 H, J = 11,74 Hz, H3a), 3,47 (dd, 1 H, J = 11,89, 4,70 Hz, H3b), 3,75 (d, 1 H, J = 8,39 Hz, Hll), 3,94 (s, 3 H, CH307) , 3, 98 (s, 3 H, CH308) , 4,21 (d, 1 H, J = 9,76 Hz, Hll), 4,56 (m, 1 H, Hlla), 5,19 (m, 1 H, H2b), 6,73 (s, 1 Η, H6) , 7,68 (s, 1 Η, H9) ; 13C RMN (CDC13, 100 MHz) δ 171,0 (C=0) , 166,3 (C5) , 154,0 (C7), 149,1 (C8) , 137,6 (C5-6) , 127,8 (C9-10) , 109,1 (C6) , 107,3 (C9) , 72,9 (C2) , 62,6 (Cll) , 57,4 (Cila), 56, 5, 56, 6 (CH307 e CH308) , 52,0 (C3) , 33,0 (Cl), 25,7 (C(CH3)3), 21,2 (C=OCH3) , 18,1 (¢^),-5,5 (SiCH3)2); IV (película) 2953, 2856, 1740 (C=0) , 1648 (C=0) , 1579, 1525, 1463, 1427, 1338, 1278, 1243, 1225, 1115, 1070, 1028, 1004, 837, 780 cnf1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 483 ( [Μ + H]+·, 100); Anal. Elem. calculada para C22H34N2O8SÍ: C, 54,75; H, 7,10; N, 5,80. Encontrado: C, 54,50; H, 7,08; N, 5,79. 59 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (2S, 4.R) -Ν- (2-Amino-4,5-dimetoxibenzoil) -2-( terc-butildimetilsililoximetil)-4-oxiacetilpirrolidina (20)

59 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ ^.OTBS MeO MeO

20 õ

Uma suspensão de 19 (61,75 g, 127,9 mmol; 1 Equiv.) e Pd a 10%/C p/p (6,17 g) em etanol (400 mL) foi agitada sob uma atmosfera de H2 (45 psi) utilizando um dispositivo de Parr durante um período de 3 h. A suspensão foi filtrada através de celite e o filtrado foi evaporado in vacuo para dar 20 como um óleo amarelo pálido (57,5 g, 99%) : [a]D19 = -105,1° (c = 0,490, CHC13) ; 1H RMN (CDC13, 400 MHz) δ 0,03 (s, 6 H,

Si(CH3)2), 0,88 (s, 9 H, C(CH3)3), 1,98 (s, 3 H, C=OCH3) , 2,09 - 2,15 (m, 1 H, Hla), 2,32-2,39 (m, 1 H, Hlb), 3,57-3,64 (m, 2 H, H3a e Hll), 3,73-3,77 (m, 4 H, H3b e CH308), 3,82 (s, 3 H, CH307), 4,00-4,11 (m (br), 1 H, Hll), 4,40-4,60 (m, 1H,

Hlla) , 5,21-5,27 (m, 1 H, H2b) , 6,21 (s, 1 Η, H9) , 6,69 (s, 1 Η, H6) ; 13C RMN (CDC13, 100 MHz) δ 170,6 (C=0) , 170,0 (C5) , 151,9 {Cl), 141,7 (C9-10) , 140,9 (C8) , 112,2 (C6) , 110,9 (C5-6), 100,6 (C9) , 73,5 (C2) , 62,6 (Cll) , 57,0 (Cila), 55,8, (CH307) , 56, 6 (CH308) , 56,3 (C3) , 32,9 (Cl), 25,8 (C(CH3)3), 21,1 (C=OCH3) , 18,1 (Cquat) , -5,5 (SiCH3)2); IV (película) 3455, 3355 (NH2) , 2931, 2857, 1740 (C=0) , 1628 (C=0) , 1594,

1516, 1401, 1238, 1165, 1120, 1006, 837, 778, 668 cm-1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 453 ( [M + H]+‘, 100). (2S,4R) -N-{4,5-Dimetoxi-2- (2,2,2-tricloroetoxicarbonilamlno) -benzoíl) -2- (tez-c-butildimetilsililoximetil) -4-oxiacetilpirrolidina (21)

Adicionou-se cloroformato de 2,2,2-tricloroetilo (1,61 mL, 11,68 mmol, 2,2 Equiv.) a uma solução agitada de 20 (2,40 g, 5,31 mmol; 1,0 Equiv.) e piridina (1,72 mL, 21,24 mmol, 60 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 4,0 Equiv.) em DCM seco (70 mL) a -20°C. A mistura foi deixada aquecer para a temperatura ambiente e agitada durante mais 2,5 h. A mistura de reacção foi lavada com NH4C1 (2 x 60 mL) , CuS04 (60 mL) , água (60 mL) , salmoura (60 mL) , seca (MgS04) , filtrada e concentrada in vacuo para originar 21 como um óleo incolor (3,32 g, 99 %) : [a]D20 = -43, 4° (c = 0, 980, CHC13) ; 1H RMN (CDC13, 400 MHz) δ 0,28 (s, 6 H,

Si(CH3)2), 0,87 (s, 9 H, C(CH3)3), 1,96 (s, 3 H, C=OCH3) , 2,10 - 2,16 (m, 1 H, Hla) , 2,35 - 2,41 (m, 1 H, Hlb) , 3,55 - 3,65 (m largo, 1H, H3a), 3,68 - 3,74 (m, 2 Η, Hll e H3b), 3,78 (s, 3 H, CH307) , 3, 91 (s, 3 H, CH308) , 4, 06 - 4, 10 (m, 2 H, C13CCH2 rotâmeros e Hll), 4,55 - 4, 65 (m, 1 H, Hlla) , 4,74 - 4,82 (m, 1 H, C13CCH2, rotâmeros), 5, 2 0 - 5,25 (m, 1 H, H2b) , 6,75 (s, 1 Η, H6), 7,82 (s largo, 1 Η, H9), 9,38 (s largo, 1 Η, NH) ; 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 170,5 (C=0) , 169,2 (C5) , 153,1, 151,4 (OC=ONH, rotâmeros), 151,9 (C8), 144,1 (Cl), 132,2 (C5-6) , 114,8 (C9-10) , 111,1 (C6) , 104,3 (C9) , 95,3, 93,9 (C13C, rotâmeros), 77,3, 76,3 (C13CCH2, rotâmeros), 73,4 (C2), 62,3 (Cll), 57,3 (Cila), 57,2 (C3), 56,1, 56,2 (CH307 e CH308) , 32,5 (Cl), 25,8 (C(CH3)3), 21,1 (C=OCH3) , 18,1 (Cquat) , -5,5 (SiCH3)2); IV (película) 3318, 2954, 2858, 1774, 1743 (C=0 e OC=ON) , 1601 (NC=0) , 1525, 1464, 1422, 1398, 1230, 1200, 1125, 1004, 836, 777, 720 cm1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 629 ( [M + H]+', 100). (2S,4R)-N-(4,5-Dimetoxi-2-(2,2,2-trlcloroetoxicarbonllamino)-benzoíl) -2-hidroximeti.l-4-oxiacetilpirrolidina (22)

MeO. Jroc^OH NH !

Uma mistura de ácido acético (81 mL) e água (18 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 21 (5,10 g, 8,12 mmol; 1,0 Equiv.) em THF (45 mL). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante um período de 48 h. O THF foi removido in vacuo e a mistura resultante foi neutralizada para pH 7 com NaHC03 sólido (Cuidado! Efervescência vigorosa). A camada aquosa resultante foi extraída com DCM (5 x 150 mL), seca (MgS04) e concentrada in vacuo. 61 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ Ο resíduo oleoso foi submetido a cromatografia flash

(EtOAc/éter petróleo 6:4) para dar 22 na forma de uma espuma (4,16 g, 99%) : [oí]d18 = -65,0° (c = 0, 500, CHC13) ; XH RMN (CDC13, 400 MHz) δ 2,01 (s, 3 H, C=OCH3) , 2,05 - 2,13 (m, 1 H, Hlb), 2,27 (dd, 1 H, J = 14,20, 7,62 Hz, Hla), 3,62 (d, 1 H, J = 12,36 Hz, H3a) , 3, 65 - 3,74 (m, 1 Η, Hll) , 3,76 (dd, 1 H, J = 12,57, 3,80 Hz, H3b), 3,85 (s, 3 H, CH307), 3,93 (s, 3 H, CH308) , 3, 98 - 4, 08 (m, 1 H, Hll), 4,55-4, 65 (m, 1 H,

Hlla) , 4,79 (d, 1 H, J = 12,09 Hz, C13CCH2) , 4,84 (d, 1 H, J = 12,04 Hz, C13CCH2) , 5,18 - 5,25 (m, 1 H, H2b) , 6,80 (s, 1

Η, H6) , 7,73 (s largo, 1 Η, H9) , 9,03 (s largo, 1 Η, NH) ; 13C RMN (CDCI3, 100 MHz) δ 170,6 (C=0) , 170,4 (C5) , 152,1 (OC=ONH), 151,5 (C8), 144,6 {Cl), 131,2 (C5-6), 115,5 (C9-10), 110,8 (C6) , 104,8 (C9) , 95,3 (C13C) , 74,4 (C13CCH2) , 72,5 (C2) , 64,5 (Cll) , 58,8 (Cila), 56,6 (C3) , 56,5 (CH307) , 56,1

(CH308) , 33,7 (Cl), 21,1 (C=OCH3) ; IV (película) 3358 (NH largo e OH), 3015, 2941, 1740 (C=0 e OC=ON) , 1602 (NC=0) , 1525, 1463, 1433, 1398, 1231, 1174, 1125, 1037, 969, 817, 756 cnf1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 363 ( [M - C13CCH20]+·, 100) , 513 ( [Μ + H]+·, 95) . (11S,llaS,2R)-7,8-Dimetoxi-ll-hidroxi-2-oxiacetil-10-(2,2,2-trlcloroetoxlcarbon.il) -1,2,3,10,11, lla-hexa-hidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona (23)

Adicionaram-se diacetato de diodobenzeno (83,7 g, 259,8 mmol, 1,78 Equiv.) e 2,2,6,6-tetrametilpiperidina-nitroxilo (TEMPO) (4,50 g, 28,8 mmol, 0,2 Equiv.) a uma solução agitada de 22 (74,7 g, 145,4 mmol; 1,0 Equiv.) em DCM seco (1,5 L). A mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 15 h e diluída com DCM (500 mL) . A fase orgânica foi lavada com bissulfito de sódio saturado (700 mL) e a camada aquosa foi reextraída com DCM (3 x 200 mL) . As camadas orgânicas foram combinadas, secas (MgSO,}) , filtradas e concentradas in vacuo. A purificação por cromatografia flash (EtOAc/éter de petróleo 7:3) originou 23 como um vidro branco (57,65 g, 77 %) : [a] d18 = +99,4° (c = 0,483, CHC13) ; ^ RMN (CDC13, 400 MHz) 62 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ δ 2,04 (s, 3 Η, C=OCH3) , 2,34 - 2,46 (m, 2 Η, Hlb e Hla) , 3, 69 - 3,77 (m, 2 Η, H3b e 11a), 3,92 (s, 3 H, CH308) , 3, 95 (s, 3 H, CH307) , 4,05 (dd, 1 H, J = 13,13, 2,35 Hz, H3a) , 4,23 (d, 1 H, J = 12,02 Hz, C13CCH2) , 5,25 (d, 1 H, J = 12,02 Hz, C13CCH2) , 5,38 (p, 1 H, J= 4,10 Hz, H2b) , 5,70 (dd, 1 H, J = 9, 66, 3, 79 Hz, Hll) , 6,81 (s, 1 Η, H9) , 7,27 (s, 1 H, H6) ; 13C RMN (CDC13, 100 MHz) δ 170,3 (C=0) , 167,4 (C5) , 154,4 (OC=ONH) , 151,1 (C8) , 148,8 (C7) , 127,5 (C9-10) , 124,7 (C5- 6), 112,7 (C9) , 110,7 (C6) , 95,0 (C13C) , 87,6 (Cll) , 75,0 (C13CCH2) , 71,4 (C2) , 58,3 (Cila), 56, 19, 56, 13 (CH308 e CH307) , 51,1 (C3) , 35,9 (Cl), 21,0 (C=OCH3) / IV (película) 3421 (OH largo), 3008, 2946, 1719 (C=0) , 1623 (OC=ON) , 1603 (NC=0), 1515, 1429, 1374, 1304, 1238, 1212, 1057, 870, 819, 758, 711, 644 cm-1/ MS (EI) m/ z (intensidade relativa) 511 ( [Μ - H]+', 100), 512,5 ([M+H]+·, 99). (11S,llaS,2R)-7,8-Dimetoxl-2-oxlacet±l-ll- (terc-butildlmetllsililoximet.il) -10- (2,2,2-tricloroetoxicarbonil) -1,2,3,10,11,lla-hexa-hidro-5H-pirrolo[2,Ιο] [1,4]benzodiazepin-5-ona (24)

Jroc OTBS

Adicionou-se TBDMSOTf (0,56 mL, 2,44 mmol; 1,5 Equiv.) a uma solução agitada de 23 (834 mg, 1,63 mmol, 1,0 Equiv.) e 2,6-lutidina (0,38 mL, 3,26 mmol, 2,0 Equiv.) em DCM seco (5 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min e diluída com DCM (20 mL). A mistura foi lavada com CuS04 saturado (2 x 20 mL) , NaHC03 saturado (30 mL) , salmoura (30 mL) , seca (MgS04) e concentrada in vacuo para dar 6 como um vidro branco (1,01 g, 99%) : [oc] D18 = +52,7° (c = 0, 237, CHC13) ; XH RMN (CDCI3, 400 MHz) δ 0,23 (s, 6 H, Si(CH3)2), 0,87 (s, 9 H, C(CH3)3), 2,03 (s, 3 H, C=OCH3) , 2,18 - 2,25 (m, 1 H, Hlb), 2,30 - 2, 40 (m, 1 H, Hla), 3, 66 - 3, 72 (m, 2 H, H3b e 11a), 3,89 (s, 3 H, CH308) , 3, 95 (s, 3 H, CH307) , 4,13 (d, 1 H, J = 13,40 Hz, H3a) , 4,18 (d, 1 H, J = 12,04 Hz, C13CCH2) , 5,23 (d, 1 H, J = 12,03 Hz, C13CCH2) , 5,37 (p, 1 H, J= 2,62 Hz, H2b) , 5,77 (d, 1 H, J= 8,95 Hz, Hll), 6,74 (s, 1 Η, H9) , 7,28 (s, 1 Η, H6) / 13C RMN (CDC13, 100 MHz) δ 170,3 63 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (C=0) , 167,9 (C5) , 153,5 (OC=ONH) , 151,0 (C8) , 148,9 (C7) , 128,0 (C9-10) , 125,4 (C5-6) , 112,9 (C9) , 110,6 (C6) , 95,2 (C13C) , 88,2 (C11) , 74,7 (C13CCH2) , 71,7 (C2) , 60,5 (Cila), 56,1 (CH307) , 56, 9 (CH308) , 51,2 (C3) , 36,2 (C1) , 25,5 (C(CH3)3) 21,0 (C=OCH3) , 17,8 (Cquat) , -4,3 e -5,3 (Si(CH3)2); IV (película) 3023, 2956, 1738 (C=0) , 1718 (OC=ON) , 1644

(NC=0), 1605, 1518, 1466, 1428, 1411, 1376, 1301, 1245, 1214, 1116, 1075, 1041, 1023, 842, 784, 756, 730, 712 cnT1 ; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 627 ( [M + H]+', 100). (11S, llaS,2R) -7, 8-Dlmetoxl-2-hldroxl-ll- (terc-butildimetllslllloxlmetll) -10- (2,2,2-trlcloroetoxlcarbon.il) -1,2,3,10,11,11a-hexa-hldro-5H-plrrolo[2,1-c][1,4]benzodlazepln-5-ona (25)

TrOCOTBS

Uma solução de K2CO3 (732 mg, 5,30 mmol; 1,0 Equiv.) em água (15 mL) foi adicionada a uma solução agitada de 24 (3,32 g, 5,30 mmol, 1,0 Equiv.) em MeOH (15 mL) e THF (5 mL) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 h e em seguida o excesso de solvente foi removido por evaporação rotativa a pressão reduzida. O resíduo aquoso remanescente foi neutralizado para pH 7 com HC1 IN e extraído com EtOAc (4 x 30 mL) . As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 mL) , secas (MgS04) , filtradas e concentradas ín vacuo. O óleo resultante foi submetido a cromatografia flash (EtOAc) para originar 25 como um vidro branco (2,84 g, 92%): [a] d22 = +58,3° (c = 0,587, CHC13) ; 3H RMN (CDC13, 500 MHz) δ 0,22 (s, 6 H, Si(CH3)2), 0,87 (s, 9 H, C(CH3)3), 2,06 - 2,11 (m, 1 H, Hlb), 2,28 - 2,33 (m, 1 H, Hla), 3,60 (dd, 1 H, J = 4,31, 12,67 Hz, H3b) , 3,71 (q, 1 H, J = 7,42, 15, 67 Hz, Hlla), 3,88 (s, 6 H, CH3O8 e CH307) , 4, 01 (d, 1 H, J = 12,93 Hz, H3a) , 4,17 (d, 1 H, J = 12,03 Hz, C13CCH2) , 4,58 (s largo, 1 H, H2b) , 5,23 (d, 1 H, J = 12,03 Hz, C13CCH2) , 5,54 (d, 1 H, J = 9,00 Hz, Hll) , 6,73 (s, 1 Η, H9) , 7,21 (s, 1 H, H6) ; 13C RMN (CDC13, 125 MHz) δ 168,4 (C5) , 153,6 (OC=ONH) , 151,9 (C8) , 148,8 (C7) , 128,0 (C9-10) , 125,5 (C5-6) , 112,8 64 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (C9) , 110,5 (C6) , 95,2 (Cl3C) , 88,2 (C11) , 74,7 (C13CCH2) , 69,5 (C2) , 60,8 (Cila), 56, 0, 55, 9 (CH308 e CH307), 54,0 (C3) , 38,8 (Cl), 25,6 (C(CH3)3), 17,8 (Cquat) , -4,2 e -5,2 (Si (CH3) 2) ; IV (película) 3400 (OH largo), 2932, 1731 (OC=ON), 1629 (NC=0), 1604, 1515, 1456, 1430, 1407, 1302, 1273, 1214, 1117, 1075, 987, 837, 754, 712, 638 cm-1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 585 ( [M + H]+', 100). (11S, llaS) -7, 8-Dimetoxi -2-oxo-ll - (terc- butildímetilsililoxímetíl)-10- (2,2,2-tricloroetoxicarbonil)-1,2,3,10,11,lla~hexa-hidro-5H-pirrolo [2,1-c] [1,4]benzodiazepln-5-ona (26)

Adicionaram-se diacetato de diodobenzeno (2,44 g, 7,58 mmol, 1,78 Equiv.) e 2,2,6,6-tetrametilpiperidina-nitroxilo (TEMPO) (133 mg, 0,85 mmol, 0,2 Equiv.) a uma solução agitada de 25 (2,49 g, 4,26 mmol; 1,0 Equiv.) em DCM seco (40 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h e a mistura de reacção foi diluída com DCM (50 mL) . A fase orgânica foi lavada com bissulfito de sódio saturado (2 x 25 mL), salmoura (40 mL), seca (MgS04) e concentrada in vacuo. A purificação por cromatografia flash (EtOAc/éter de petróleo 6:4) originou 26 na forma de um vidro branco. (2,26 g, 91%): [a] d22 = +95, 0° (c = 0,795, CHC13) ; 2H RMN (CDC13, 500 MHz) δ 0,22, 0,23 (dois s, 6 H, Si(CH3)2), 0,86 (s, 9 H, C(CH3)3), 2,56 (dd, 1 H, J = 3,12, 19,60, Hlb) , 2,96 (dd, 1 H, J = 10,29, 18,9, Hla) , 3,90 (s, 3 H, CH308) , 3, 95 - 3, 99 (m, 5 H, H3b, Hlla e CH307) , 4,21 (d, 1 H, J = 12,02 Hz, C13CCH2) , 4,32 (d, 1 H, J = 20, 93 Hz, H3a) , 5,24 (d, 1 H, J = 12,03 Hz, C13CCH2) , 5,83 (d, 1 H, J = 9,26 Hz, Hll) , 6,77 (s, 1 Η, H9) , 7,25 (s, 1 Η, H6) ; 13C RMN (CDC13, 125 MHz) δ 207,8 (C2) , 168,0 (C5) , 153,7 (OC=ONH) , 151,4 (C8) , 149,2 (C7) , 128,0 (C9-10) , 124,5 (C5-6) , 113,0 (C9) , 110,4 (C6) , 95,1 (C13C) , 87,4 (Cll) , 74,8 (C13CCH2) , 58,9 (Cila), 56,2 (CH307) , 56,0 (CH308) , 52,8 (C3) , 40,3 (Cl), 25,5 (C(CH3)3), 17,8 (Cquat), -4,2 e -5,3 (Si (CH3) 2) ; IV (película) 2934, 1763 (C=0) , 1720 65 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (OC=ON), 1649 (NC=0), 1604, 1515, 1402, 1274, 1217, 1120, 1075, 1002, 866, 834,756, 712 cnf1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 615 ( [M + MeOH]+-, 100). (11S,llaS)-7,8-Dimetoxl-ll- (terc-butildimetilsillloxlmetll)-10-(2,2,2-tricloroetoxicarbonil)-2- [[ (trifluorometil)sulfonil]oxl]-1,2,3,10,11,lla-tetra-hldro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona (27)

Adicionaram-se piridina (1,71 mL; 21,17 mmol; 7 Equiv.) e anidrido trifluorometanossulfónico (3,56 mL; 21,17 mmol; 7 Equiv) a uma solução aqitada de 27 (1,76 g, 3,02 mmol; 1 Equiv.) em CHC13 seco (50 mL) a 0-5°C (banho de gelo) . O banho de gelo foi removido e a mistura de reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Nesta altura a análise por TLC revelou a persistência de material de partida. Como resultado, foi adicionado um equivalente extra de piridina e Tf20 (0,24 e 0,51 mL, respectivamente). A reacção foi agitada durante mais lh até ao consumo completo do material de partida ter sido observado por TLC. A mistura de reacção foi lavada com água, CuSCh saturado, NaHC03 saturado, seca (MgS04) , filtrada e o solvente foi evaporado in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia flash (EtOAc/éter de petróleo 2:8) para dar 27 na forma de um vidro amarelo pálido (1,12 g, 52%) : [a]D22 = +56, 2° (c = 0,587, CHCI3) ; 3H RMN (CDCI3, 500 MHz) δ 0,25, 0,27 (dois s, 6 H,

Si(CH3)2), 0,88 (s, 9 H, C(CH3)3), 2,82 (dd, 1 H, J = 2,79, 16,66 Hz, Hlb) , 3,33 (ddd, 1 H, J = 1,96, 10,73, 16,59 Hz,

Hla) , 3,90 (s, 3 H, CH308) , 3, 94 (s, 3 H, CH307) , 3, 88 - 3, 96 (m, 1 H, Hlla) , 4,20 (d, 1 H, J = 12,00 Hz, C13CCH2) , 5,23 (d, 1 H, J = 12,00 Hz, C13CCH2) , 5,93 (d, 1 H, J = 9,26 Hz,

Hll) , 6,74 (s, 1 Η, H9) , 7,17 (s, 1 Η, H3) , 7,23 (s, 1 H, H6) ; 13C RMN (CDC13, 125 MHz) δ 164,9 (C5) , 153,6 (OC=ONH) , 151,8 (C8), 149,3 (Cl), 136,0 (C2), 127,9 (C9-10), 123,8 (C5-6), 121,0 (C3) , 119,8 (CF3) , 113,2 (C9) , 110,7 (C6) , 95,1 (C13C) , 86,4 (Cll) , 74,9 (C13CCH2) , 60,6 (Cila), 56,2 (CH307) , 66 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 56,0 (CH308) , 34,4 (Cl), 25,5 (C(CH3)3), 17,8 (C^t) , -4,2 e - 5,4 (SÍ(CH3)2); IV (película) 3008, 2930, 2858, 1725 (OC=ON) , 1651 (NC=0), 1516, 1423, 1214, 1136, 1078, 897, 835, 783, 760, 713, 642 cm-1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 715 ( [Μ + H]+·, 100) .

Exemplo 6 - (llaS)-7,8-Dimetoxi-2-(1-propenil)-1,lla-di- hidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona (29) (11S,llaS)-7,8-Dimetoxl-ll-(terc-butildimetilslllloximetil)-10-(2,2,2-tricloroetoxicarbonil)-2-(1-propenil)-1,2,3,10,11,lla-tetra-hidro-5H-pirrolo[2,1-c][l,4]benzodiazepin-5-ona (28)

Uma mistura de Et3N (0,34 mL, 2,48 mmol, 3 Equiv.), água (0,5 mL) e EtOH (1,70 mL) foi adicionada a uma solução de 27 (590 mg, 0, 826 mmol, 1 Equiv.) em tolueno (1,70 mL) com agitação vigorosa. A mistura de reacção foi tratada com ácido trans-propenilborónico (92,2 mg, 1,07 mmol, 1,3 Equiv.) e Pd(PPh3)4 (19 mg, 0,016 mmol, 0,02 Equiv.). Ao fim de 2 h de agitação à temperatura ambiente a TLC revelou a inexistência de reacção. A mistura foi então aquecida a refluxo (111°C) durante 30 min, tempo ao fim do qual a TLC revelou o consumo completo do material de partida. A mistura de reacção foi deixada arrefecer para a temperatura ambiente e diluída com EtOAc (30 mL). A fase orgânica foi extraída com água (20 mL), salmoura (20 mL) , seca (MgS04) , filtrada e o solvente foi evaporado in vacuo. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia flash (EtOAc/éter de petróleo 2:8) para dar o produto 10 (297 mg, 59%) : [a]D22 = +78,2° (c = 0, 582, CHC13) ; RMN (CDC13, 500 MHz) δ 0,24, 0,26 (dois s, 6 H, Si(CH3)2), 0,89 (s, 9 H, C(CH3)3), 1,83 (dd, 3 H, J = 0, 79, 6, 69 Hz, H14) , 2,58 (dd, 1 H, J= 3,11, 16,45 Hz, Hlb) , 3,06 (dd, 1 H, J= 10,59, 16, 40 Hz, Hla) , 3, 82 - 3, 88 (m, 1 H, Hlla) , 3,89 (s, 3 H, CH308) , 3, 94 (s, 3 H, CH307) , 4,17 (d, 1 H, J = 12,04 Hz, C13CCH2) , 5,23 (d, 1 H, J = 12,04 Hz, C13CCH2) , 5,50 - 5,56 (m, 1 Η, H13) , 5,84 (d, 1 H, J = 8,86 Hz, Hll) , 6,25 67 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ (d, 1 Η, J = 14,80 Hz, Η12), 6,75 (s, 1 Η, Η9), 6,88 (s, 1 Η, Η3) , 7,24 (s, 1 Η, Η6) ; 13C RMN (CDC13, 125 ΜΗζ) δ 163,6 (C5) , 153.6 (OC=ONH) , 151,1 (C8) , 149,0 (C7) , 127,9 (C9-10) , 126,5 (C13) , 125,5 (C5-6) , 124,7 (C12) , 124,6 (C3) , 123, 6 6 (C2), 113,0 (C9) , 110,5 (C6) , 95,2 (C13C) , 87,2 (C11) , 74,7 (C13CCH2) , 61,4 (Cila), 56,2 (CH307) , 56, 0 (CH308) , 33, 9 (Cl), 25.6 (C (CH3) 3) , 18,4 (C14) , 17,9 (Cquat) , -4,2 e -5,1 (Si(CH3)2) ; IV (película) 2961, 2935, 2858, 1723 (OC=ON) , 1648 (NC=0), 1514, 1404, 1272, 1216, 1076, 837, 756, 644 cnf 1; MS (EI) m/z (intensidade relativa) 607 ([M + H]+, 100). (llaS)-7,8-D±metox±-2-(1-propenll)-1,lla-d±-hidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-ona (29)

Adicionou-se o par Cd a 10%/Pd (418 mg, 3,38 mmol, 8,2 Equiv.) a uma mistura em agitação rápida de 28 (250 mg, 0,412 mmol, 1 Equiv.), THF (3 mL) e acetato de amónio 1 N (3 mL). A mistura de reacção foi deixada em agitação durante 3,5 h, altura em que a TLC revelou o consumo completo do material de partida. Os sólidos foram filtrados e lavados com H20 e DCM. A camada aquosa foi extraída com DCM (3 X 30 mL) e os extractos orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (50 mL) , secos (MgSCM , filtrados e evaporados in vacuo para proporcionar o produto bruto. A purificação por cromatografia em coluna (0,5% -► 2% de MeOH em CHC13) originou 29 na forma de um vidro amarelo (96 mg, 78%) : [a]D24 = +989° (c = 0, 890, CHCI3) ; 4H RMN (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ 1,85 (d, 3 H, J = 6,26 Hz, H14), 3,12 (dd, 1 H, J = 4, 95, 16,27 Hz, Hlb), 3,30 (dd, 1 H, J = 11,80, 15,27 Hz, Hla), 3, 93 (s, 3 H, CH308) , 3 ,95 ( s, 3 H, CH307) , 4,30 (dt, J = 4,95 , 15,70 Hz, Hlla), 5, 55 - 5, 65 (m, 1 H, H13) , 6, 27 (d, J = 16,04 Hz, H12) , 6,81 (s, 1 H, H9) , 6,92 (s, 1 Η, H3) , 7,50 (s, 1 Η, H6) , 7,82 (d, 1 H, J = 4,00 Hz, Hll) ; 13C RMN (CDC13, 100 ΜΗζ) δ 162,7 (Cll) , 161,2 (C5) , 151,8 (C8), 147,7 (C7), 140,4 (C9-10) , 126,9 (C13), 124,46, 124,43 (C12 e C3) , 123,9 (C2) , 119,2 (C5-6) , 111,6 (C6) , 109,8 (C9) , 56, 18, 56, 11 (CH307 e (CH308) , 53, 8 (Cila), 34,2 (Cl), 18,4 (C14); IV (película) 3018, 2997, 2 930, 2847, 68 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 1610, 1598 (C=0), 1 959, 862, 779 cm-1; ( [Μ + MeOH] +·, 100) , 507, 1431, . 1344 , 1254 MS (EI) m/z ( intens 299 ( [M + H]+·, 45) . , 1214, 1101, 1065, idade relativa) 331

Exemplo 7 Síntese Paralela de PBDs substituídas em C2-(30a-al)

(i) Uma solução de trietilamina (0,12 mL, 6 equiv.) em água (0,2 mL) e etanol (1,0 mL) foi vertida numa solução agitada de 27 (100 mg, 0,14 mmol, 1 Equiv.) em tolueno (1,0 mL) num frasco de Processo Emrys”. À solução adicionou-se o ácido borónico apropriado (1,07 equiv.) e polistireno trif enilfosf ina-paládio (0) PS-PPh3Pd (15 mg, 0,0014 mmol, 0,01 Equiv). 0 frasco foi selado com um septo Reseal” e a suspensão foi então irradiada a 100°C durante 20 minutos sob radiação de microondas utilizando uma estação Emrys™ Optimizer Microwave Station quando a TLC revelou a ausência do material de partida. Adicionou-se N,N-dietanolaminometil-polistireno PS-DEAM (87,5 mg, 0,14 mmol, 1,0 equiv. [13 equiv. em excesso de ácido borónico]) à reacção e a suspensão foi irradiada a 100°C durante 10 minutos sob radiação de microondas (como acima). Adicionou-se água (3 mL) à reacção e a suspensão foi agitada vigorosamente durante 10 minutos. A mistura foi então transferida para um cartucho de separação de fases (PS) equipado com uma frita selectivamente permeável pré-condicionada com CH2CI2 (3 mL) e acoplada a um cartucho de Na2SC>4. A extracção com CH2CI2 (3x5 mL) , seguida por concentração in vacuo originou um óleo que foi redissolvido em THF (1,5 mL) e acetato de amónio IN (1,5 mL). (ii) À mistura resultante do passo anterior adicionou-se Cd a 10%/Pb (140 mg, 1,12 mmol, 8,0 Equiv.) com agitação vigorosa e a reacção foi mantida durante 1 hora à temperatura ambiente, altura em que a TLC revelou a ausência do material de partida. A mistura foi vertida num cartucho PS idêntico pré-condicionado com CH2CI2 (3 mL) e acoplado a um cartucho 69 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ de Na2S04. A extracção com CH2C12 (3 x 5 mL) seguida por concentração in vacuo deu um óleo que foi submetido a crornatografia flash (EtOAc:Hexano 1:1) ori ginando os compostos desejados que estão listados abaixo.

Composto R" Rendimento (%)+ [a]D* 30a fenilo 62 +1012° 30b 4-metilfenilo 39 + 916° 30c 2-metilfenilo 38 + 802° 30d 4-etilfenilo 45 + 985° 30e 2,6-dimetilfenilo 35 +549° 30f 4-metoxifenilo to to +1- + 976° 30g 3-metoxifenilo — + 825° 30h 4-terc-butilfenilo 35 +781° 30i 4-fluorofenilo 41 + 978° 30 j 4-clorofenilo 67 +796° 30k 4-bifenilo 44 +792° 301 4-fenoxifenilo 47 + 823° 30m 2-naftilo 47 +720° 30n 3,4-metilenodioxifenilo 46 + 837° 30o trans-2-(4-metilfenil)vinilo 58 + 990° 30p 2-tiofenilo 59 + 974° 3 Oq trans-propenilo -H- OD + 989° 30r 4-dimetilaminofenilo 44 + 858° 30s 4-metiltiofenilo 18 + 979° 30t 4-vinilfenilo 36 +796° 30u 3,4-diclorofenilo 41 + 641° 30v 4-trifluorometilfenilo 28 +785° 30w 4-isopropilfenilo 44 + 985° 30x 4-cianofenilo 42 +1000° 30i 3-piridinilo 14 +1200° 30z 4-piridinilo 27 + 859° 30aa 4-formilfenilo 42 + 928° 30ab 4-carboxilfenilo 43 — 30ac 2,6-dimetoxifenilo 18,5 — 30ad 4-acetanilida 26, 3 — 70 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 30ae 4-aminofenilo 21,3 — 30af 1-naftilo 32 — 30ag 5-indole 34 — 30 ah 3-aminofenilo 41 — 30ai 2,6-difluorofenilo 14 — 30aj 1-pirenilo 39 — 30ak 4-hidroxifenilo 14 — 30al trans-hexenilo — — ^Rendimentoglobal,incluindoacoplamentodeSusukiseguidoporformação da imina. ^rendimento calculado a partir apenas do passo final de desprotecção de Troe. *Intervalo de concentração: 0,047-0,89 g/lOOmL; Temp.: 20-29°C. Todas as amostras foram dissolvidas em clorofórmio de grau para HPLC estabilizado com amileno, adquirido de Fisher Chemicals, Leicestershire, RU.

Exemplo 8: Determinação da Citotoxicidade In Vltro Células K562 de leucemia mielóide crónica humana foram mantidas em meio RPM1 1640 suplementado com 10% de soro bovino fetal e glutamina 2 mM a 37°C numa atmosfera humidificada contendo 5% de CO2 e foram incubadas com uma dose especificada de droga durante 1 hora ou 96 horas a 37°C no escuro. A incubação foi terminada por centrifugação (5 min, 300 g) e as células foram lavadas uma vez com meio isento de droga. Após o tratamento com droga apropriado, as células foram transferidas para placas de microtitulação de 96 poços (104 células por poço, 8 poços por amostra) . As placas foram então mantidas no escuro a 37 °C numa atmosfera humidificada contendo 5% de CO2. Este ensaio é baseado na capacidade de células viáveis para reduzir um sal de tetrazólio solúvel amarelo, brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil-2Jí-tetrazólio (MTT, Aldrich-Sigma), a um precipitado de formazano púrpura, insolúvel. Após a incubação das placas durante 4 dias (para permitir o aumento do número de células de controlo em aproximadamente 10 vezes), adicionaram-se 20 pL de solução de MTT solution (5 mg/mL em solução salina tamponada com fosfato) a cada poço e as placas foram novamente incubadas durante 5 h. As placas foram então centrifugadas durante 5 min a 300 g e a maior parte do meio 71 ΕΡ 2 270 010/ΡΤ foi pipetada do pelete de células deixando 10-20 pL por poço. Adicionou-se DMSO (200 pL) a cada poço e as amostras foram agitadas para assegurar a mistura completa. A densidade óptica foi então lida a um comprimento de onda de 550 nm sobre um leitor de placa Titercek Multiscan ELISA e foi construída uma curva de dose-resposta. Para cada curva, foi lido um valor de IC50 como a dose requirida para reduzir a densidade óptica final para 50% do valor de controlo.

Resultados

Os compostos que se seguem revelaram um IC50 inferior a 1 pM após um período de incubação de 96 horas: 30a, 30b, 30c, 30d, 30f, 30g, 30h, 30i, 30j, 30k, 301, 30m, 30n, 30o, 30p, 30q, 30r, 30s, 30t, 30u, 30v, 30w, 30x, 30y, 30z, 30aa, 30ac, 30ad, 30ae, 30af, 30ag, 30ah, 30ai, 30aj, 30al.

Os compostos que se seguem revelaram um IC50 inferior a 10 nM após um período de incubação de 96 horas: 30a, 30b, 30c, 30g, 30i, 30n, 30p, 30q, 30ai.

Composto IC50b (μΜ) ZC-204 3,80 ± 0,44 ZC-209 <0,01 ZC-211 <0,01 b 1 hora de incubação

Lisboa, 2012-03-02

Claims (19)

1. ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 1/5 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula III:

   e seus sais e solvatos, em que: R6 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R e R' são seleccionados independentemente de entre grupos alquilo C1-12, heterociclilo C3-20 e arilo C5-20/ opcionalmente substituídos; R7 é seleccionado independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; o composto sendo um dimero tendo cada monómero a fórmula (III) , em que os grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dimero com a fórmula -X-R"-X- a ligar os monómeros, em que R" é um grupo alquileno C3-12 cuja cadeia pode estar interrompida por um ou mais heteroátomos e/ou anéis aromáticos, e cada X é seleccionado independentemente de entre O, S, ou NH; R10 e R16 em conjunto formam uma ligação dupla entre N10 e Cll, ou R10 é H e R16 é OH; e R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos; ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 2/5 grupos esses que têm uma ligação carbono-carbono dupla ou tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o dimero tem a fórmula -0-(CH2)n-0- a ligar os monómeros, em que n é de 3 a 12.
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que n é de 3 a 7.
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que n = 3.
5. 5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que R9 é H.
6. 6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que R6 é seleccionado de entre H, OH, OR, SH, NH2, nitro e halo.
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 6 em que R6 é H.
8. 8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que R7 é seleccionado de entre H, OH, OR, SH, NH2, NHR, NRR' e halo.
9. 9. Composto de acordo com a reivindicação 8, em que R7 é OR.
10. 10. Composto de acordo com a reivindicação 9, em que R7 é OMe.
11. 11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, em que R15 é um grupo alquilo Cz-η opcionalmente substituído.
12. 12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, em que R15 é um grupo alquilo C2 substituído. ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 3/5
13. 13. Composto de fórmula III R R

    m R o e seus sais e solvatos, em que: R6 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, R OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R e R' são seleccionados independentemente de entre grupos alquilo Ci-i2, heterociclilo C3-20 e arilo C5-2CU opcionalmente substituídos; o composto sendo um dímero tendo cada monómero a fórmula (III), em que os grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dímero com a fórmula -X-R"-X- a ligar os monómeros, em que R" é um grupo alquileno C3-12 cuja cadeia pode estar interrompida por um ou mais heteroátomos e/ou anéis aromáticos e cada X é seleccionado independentemente de entre 0, S, ou NH; e R7 é seleccionado de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R10 é um grupo protector de azoto à base de carbamato;

    R11 é um grupo protector de oxigénio ou H; e R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos; grupos esses que têm uma ligação carbono-carbono dupla ou tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3. ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 4/5
14. 14. Composto de acordo com a reivindicação 13, em que R10 é Troe.
15. 15. Composto de acordo com a reivindicação 13 ou 14, em que R11 é um grupo protector do oxigénio de sililo ou THP.
16. 16. Método de síntese de um composto de fórmula III:

    que compreende o passo de reacção de um composto de fórmula I:

    com um composto de fórmula z-R15 numa reacção de acoplamento, em que: R6 e R9 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo; R e R' são seleccionados independentemente de entre grupos alquilo Ci-i2, heterociclilo C3-20 e arilo C5-2o opcionalmente substituídos; R7 e R8 são seleccionados independentemente de entre H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo, ou o composto é um dímero tendo cada monómero a fórmula (III) , em que os grupos R7 ou grupos R8 de cada monómero formam em conjunto uma ponte de dímero com a fórmula -X-R"-X-a ligar os monómeros, em que R" é um grupo alquileno C3_i2, cuja cadeia pode ser interrompida por um ou mais heteroátomos e/ou anéis aromáticos e cada X é seleccionado independentemente de entre 0, S, ou NH; ΕΡ 2 270 010/ΡΤ 5/5 ou qualquer par de grupos adjacentes de R6 a R9 em conjunto forma um grupo -O-(CH2) p-0-, em que p é 1 ou 2; R10 é um grupo protector de azoto à base de carbamato; R2 é um grupo removível lábil; R16 é O-R11, em que R11 é um grupo protector de oxigénio, ou OH, ou R10 e R16 em conjunto formam uma ligação dupla entre NI0 e Cl1; z-R15 é qualquer reagente adequado para uma reacção de acoplamento; e R15 é seleccionado de entre: (i) grupos alquilo C2 substituídos; e (ii) grupos alquilo C3-7 opcionalmente substituídos; grupos esses que têm uma ligação carbono-carbono dupla ou tripla conjugada com a ligação entre C2 e C3.
17. 17. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12 para utilização num método de terapia.
18. 18. Composição farmacêutica que contém o composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.
19. 19. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12 para utilização no tratamento de uma doença proliferativa. Lisboa, 2012-03-02