“COMPOSTO DE PIRROLOBENZODIAZEPINAS, SUA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E SEU USO” [001]A presente invenção refere-se a pirrolobenzodiazepinas (PBDs) e, em particular, a monômeros de PBD e métodos de sintetizar monômeros de PBD.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO [002]Algumas pirrolobenzodiazepinas (PBDs) têm a habilidade de reconhecer fazer ligações a sequências específicas de DNA; a sequência preferencial é PuGPu. O primeiro antibiótico antitumor de PBD, antramicina, foi descoberto em 1965 (Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5.793 a 5.795 (1965); Leimgruber, et al., J. Am. Chem. Soc., 87, 5.791 a 5.793 (1965)). Desde então, várias PBDs que ocorrem naturalmente foram relatadas, e mais de 10 vias sintéticas foram desenvolvidas para uma variedade de análogos (Thurston, et al., Chem. Rev. 1994, 433 a 465 (1994)). Membros de família incluem abeimicina (Hochlowski, et al., J. Antibiotics, 40, 145 a 148 (1987)), quicamicina (Konishi, et al., J. Antibiotics, 37, 200 a 206 (1984)), DC-81 (Patente Japonesa 58-180 487; Thurston, et al., Chem. Brit., 26, 767 a 772 (1990); Bose, et al., Tetrahedron, 48, 751 a 758 (1992)), mazetramicina (Kuminoto, et al., J. Antibiotics, 33, 665 a 667 (1980)), neotramicinas A e B (Takeuchi, et al., J. Antibiotics, 29, 93 a 96 (1976)), porotramicina (Tsunakawa, et al., J. Antibiotics, 41, 1366 a 1373 (1988)), protracarcina (Shimizu, et al, J. Antibiotics, 35, 972 a 978 (1982); Langley e Thurston, J. Org. Chem., 52, 91 a 97 (1987)), sibanomicina (DC-102) (Hara, et al., J. Antibiotics, 41, 702 a 704 (1988); Itoh, et al., J. Antibiotics, 41, 1281-1284 (1988)), sibiromicina (Leber, et al., J. Am. Chem. Soc., 110, 2992 a 2993 (1988)) e tomamicina (Arima, et al., J. Antibiotics, 25, 437 a 444 (1972)). As PBDs são da estrutura geral:
[003]As mesmas diferem no número, no tipo e na posição de substituintes,
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2/75 tanto em seus anéis A aromáticos A e anéis C de pirrol, e no grau de saturação do anel C. No anel B há ou uma imina (N=C), uma carbinolamina (NH-CH(OH)), ou um carbinolamina metil éter (NH-CH(OMe)) na posição N10-C11 que é o centro eletrofílico responsável por alquilar DNA. Todos os produtos naturais conhecidos têm uma configuração (S) na posição C11a quiral que fornece aos mesmos uma torção para direita quando vistos do anel C na direção de um anel A. Isso oferece aos mesmos o formato tridimensional apropriado para isso-helicidade com o sulco menor de DNA de forma B, levando a um encaixe apertado no local de ligação (Kohn, em Antibiotics III. Springer-Verlag, Nova Iorque, páginas 3 a 11 (1975); Hurley e NeedhamVanDevanter, Acc. Chem. Res., 19, 230 a 237 (1986)). Sua habilidade de formar um aduto no sulco menor permite que os mesmos interfiram com processamento de DNA, portanto seu uso como agentes antitumores. A síntese dos compostos foi revisada em Thurston, D.E., et al., Chem. Rev., 1994, 94, 433 a 465 e Thurston, D.E., et al., Chem. Rev., 2011, 111, 2.815 a 2.864.
[004]A grande maioria de antibióticos no uso clínico atual é derivada de derivados de moléculas bactericidas ou bacteriostáticas produzidas como metabólitos secundários por micróbios, predominantemente aqueles que pertencem aos mofos e actinobactérias. A triagem identificou moléculas tais como as tomaimicina, antramicina e DC-81 de pirrolobenzodiazepinas (PBDs) que exerceram atividade antibacteriana potente contra patógenos humanos através de uma capacidade de se ligar ao DNA; alguns desses compostos têm potencial como quimioterapêuticos de câncer, porem um alto grau de citotoxicidade tornou os mesmos não atraentes como antibióticos antibacterianos em comparação com outras classes do composto.
[005]No entanto, a evolução de patógenos resistentes a múltiplos fármacos com a capacidade de transmissão horizontal rápida e eficiente de determinantes de resistência de antibiótico de codificação de genes facilitou a erosão de um período de tempo relativamente curto de boa parte do valor terapêutico dos agentes
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3/75 quimioterapêuticos antibacterianos de linha frontal. Aumentar a resistência a múltiplos fármacos em patógenos Gram-negativos tais como Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter baumannii forçou a reavaliação de colistina para uso sistêmico; esse antibiótico de polimixina, observado mais de cinquenta anos atrás e até recentemente considerado tóxico demais para uso não tópico, é agora amplamente utilizado sistematicamente devido às opções terapêuticas limitadas para essas infecções.
[006]Vários conjugados de PBD com pirróis e imidazóis foram relatados, tais como:
O Me [007]em que n = 1-3 (Damayanthi, Y., et al., Journal of Organic Chemistry,
64(1), 290 a 292 (1999));
Me [008]em que n=1-3 e
Me
Me [009]em que n=1-2 (Kumar, R. e Lown, J.W. Oncology Research, 13(4), 221 a 233 (2003)); Kumar, R., et al., Heterocyclic Communications, 8(1), 19 a 26 (2002));
o Me [010]em que n = 1-4, (Baraldi, P.G., et al., Journal of Medicinal Chemistry,
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4/75
452).
42(25), 5.131 a 5.141 (1999));
[011]em que n=3, (Wells, G., et al., Proc. Am. Assoc.
Canc. Res., 2003, 44, [012]No documento WO 2005/085177, alguns dos presentes inventores revelaram aminoácidos que compreendem um número de biarila que pode ter propriedades uteis na ligação de DNA.
[013]Os inventores observaram agora que os conjugados de PBD da técnica anterior podem ser modificadas a fim de alcançar propriedades aprimoradas, particularmente propriedades antibacterianas. Em particular, a presente invenção se refere à incorporação de um resíduo de aminoácido que contém um grupo heterocíclico de 5 membros em combinação com um arileno com base em resíduo de aminoácido em um conjugado de PBD quer resulta em compostos altamente eficazes.
[014]Um primeiro aspecto da presente invenção fornece um composto de fórmula I:
[015]ou um sal ou solvato do mesmo, em que:
(I) [016]a ligação dupla pontilhada indica a presença de uma ligação simples ou dupla entre C2 e C3;
[017]R2 é selecionado de -H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, OR, halo, di-halo, =CHR, =CHRR', -O-SO2-R, CO2R e COR;
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5/75 [018]R7 é selecionado de H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro,
MeaSn e halo;
[019]em que R e R' são independentemente selecionados de grupos alquila
C1-7, heterociclila C3-20 e arila C5-20 opcionalmente substituídos;
[020]R10 e R11 formam, em conjunto, uma ligação dupla, ou são selecionados de H e QRQ respectivamente, em que Q é selecionado de O, S e NH e RQ é H ou alquila C1-7 ou H e SOxM, em que x é 2 ou 3, e M é um cátion monovalente farmaceuticamente aceitável;
(A1)
G (A3)
G [021]A é selecionado de A1, A2, A3, A4 ou A5:
G—F
N (A4) (A5)
N H
N H
G—F
G—F (A2) [022]Em que [023]X1 e Y1 são selecionados de: CH e NH; CH e NMe; N e NMe; CH e S; N
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6/75 e S; N e O; e CH e O, respectivamente;
[024]X2 e Y2 são selecionados de: CH e NH; CH e NMe; N e NMe; CH e S; N e S; N e O; e CH e O, respectivamente;
[025]Z1 é selecionado de O e S;
[026]Z2 é selecionado de CH e N;
[027]F é selecionado de uma ligação simples e -(E-F1)m-;
[028]cada E é independentemente selecionado de uma ligação simples, e C(=O)-NH-;
[029]cada F1 é independentemente um grupo heteroarileno C3-20;
[030]m é 1,2 ou 3;
[031]G é selecionado de hidrogênio, grupo alquila C1-4, alquila -C(=O)-O-C1-4, -(CH2)n-C3-20 heterocicloalquila, e -O-(CH2)n-C3-20 heterocicloalquila, e cada n é 0-4;
[032]desde que A2 não seja A2':
[033]em que X1 e Y1 de A2' são selecionados de: CH e NMe; COH e NMe; CH e S; N e NMe; N e S, respectivamente; e [034]desde que A3 não seja A3':
(A3') [035]em que X2 e Y2 de A3' são selecionados de: CH e NMe; COH e NMe; CH e S; N e NMe; N e S, respectivamente;
[036]B em A2' e A3' é uma ligação simples ou:
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7/75
Η (B1) ;
[037]em que X e Y de B1 são selecionados de: CH e NMe; COH e NMe; CH e S; N e NMe; N e S, respectivamente; e [038]R1 é alquila C1-4.
[039]Um segundo aspecto da presente invenção fornece um método de síntese de um composto de fórmula I.
[040]Um terceiro aspecto da presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto do primeiro aspecto da invenção e um diluente ou veículo farmaceuticamente aceitável.
[041]Um quarto aspecto da presente invenção fornece um composto do primeiro aspecto da invenção para uso em um método de terapia.
[042]Um quinto aspecto da presente invenção fornece o uso de um composto do primeiro aspecto da invenção na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma infecção bacteriana. Esse aspecto também fornece um composto do primeiro aspecto para uso em um método de tratamento de uma infecção bacteriana.
[043]Um sexto aspecto da presente invenção fornece um método de tratamento de um paciente que sofre de uma infecção bacteriana que compreende administrar ao dito paciente uma quantidade terapeuticamente aceitável de um composto do primeiro aspecto ou uma composição do terceiro aspecto.
[044]No quarto ao sexto aspectos da invenção, o composto da invenção pode ser administrado sozinho ou em combinação com outros tratamentos, seja simultaneamente ou sequencialmente dependendo da afecção a ser tratada. No terceiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica pode compreender um ou mais (por exemplo, dois, três ou quatro) agentes ativos adicionais.
Definições
Substituintes
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8/75 [045]A expressão “opcionalmente substituído”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo pai que pode ser não substituído ou que pode ser substituído.
[046]A não ser que seja especificado o contrário, o termo “substituído”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo pai que possui um ou mais substituintes. O termo “substituinte” é utilizado no presente documento no sentido convencional e se refere a uma porção química que é ligada de modo covalente, ou, se apropriado, fundida, a um grupo pai. Uma variedade ampla de substituintes é bem conhecida, e métodos para sua formação e introdução em uma variedade de grupos pais também é conhecida.
[047]Exemplos de substituintes são descritos em mais detalhes abaixo.
[048]Alquila C1-7: O termo “alquila C1-7”, conforme utilizado no presente documento, pertence a uma porção química monovalente obtida removendo-se um átomo de hidrogênio de um átomo de carbono de um composto de hidrocarboneto que tem de 1 a 7 átomos de carbono, que pode ser alifático ou acíclico, e que pode ser saturado ou insaturado (por exemplo, parcialmente insaturado, completamente insaturado). Portanto, o termo “alquila” inclui as subclasses alquenila, alquinila, cicloalquila, etc., discutidas abaixo.
[049]Exemplos de grupos alquila saturados incluem, porém sem limitação, metila (C1), etila (C2), propila (C3), butila (C4), pentila (C5), hexila (C6) e heptila (C7).
[050]Exemplos de grupos alquila linear saturados incluem, porém sem limitação, metila (C1), etila (C2), n-propila (C3), n-butila (C4), n-pentila (amila) (C5), nhexila (C6) e n-heptila (C7).
[051]Exemplos de grupos alquila ramificados saturados incluem iso-propila (C3), isobutila (C4), sec-butila (C4), terc-butila (C4), iso-pentila (C5), e neo-pentila (C5).
[052]Alquenila C2-7: O termo “alquenila C2-7”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo alquila que tem um ou mais ligações duplas de
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9/75 carbono-carbono.
[053]Exemplos de grupos alquenila insaturados incluem, porém sem limitação, etenila (vinila, -CH=CH2), 1-propenila (-CH=CH-CH3), 2-propenila (alila, CH-CH=CH2), isopropenila (1-metilvinil, -C(CH3)=CH2), butenila (C4), pentenila (C5), e hexenila (Cs).
[054]Alquinila C2-7: O termo “alquinila C2-7”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo alquila que tem um ou mais ligações triplas de carbono-carbono.
[055]Exemplos de grupos alquinila insaturados incluem, porém sem limitação, etinila (etinila, -C^CH) e 2-propinila (propargila, -CH2-C^CH).
[056]Cicloalquila C3-7: O termo “cicloalquila C3-7”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo alquila que também é um grupo ciclila; ou seja, uma porção química monovalente obtida removendo-se um átomo de hidrogênio de um átomo de anel alicíclico de um composto de hidrocarboneto cíclico (carbocíclico), cuja porção química tem de 3 a 7 átomos de carbono, incluindo de 3 a 7 átomos de anel.
[057]Exemplos de grupos cicloalquila incluem, porém sem limitação, aqueles derivados de:
[058]compostos de hidrocarboneto monocíclicos saturados:
[059]ciclopropano (C3), ciclobutano (C4), ciclopentano (C5), ciclohexano (Cs), cicloheptano (C7), metilciclopropano (C4), dimetilciclopropano (C5), metilciclobutano (C5), dimetilciclobutano (Cs), metilciclopentano (Cs), dimetilciclopentano (C7) e metilciclohexano (C7);
[060]compostos de hidrocarboneto monocíclicos insaturados:
[061]ciclopropeno (C3), ciclobuteno (C4), ciclopenteno (C5), ciclohexeno (Cs), metilciclopropeno (C4), dimetilciclopropeno (C5), metilciclobuteno (C5), dimetilciclobuteno (Cs), metilciclopenteno (Cs), dimetilciclopenteno (C7) e
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10/75 metilciclohexeno (C7); e [062]compostos de hidrocarboneto policíclicos saturados:
[063]norcarano (C7), norpinano (C7), norbornano (C7).
[064]Heterociclila C3-20: O termo “heterociclila C3-20”, conforme utilizado no presente documento, pertence a uma porção química monovalente obtida removendose um átomo de hidrogênios de um átomo de anel de um composto heterocíclico, cuja porção química tem de 3 a 20 átomos de anel, dos quais de 1 a 10 são heteroátomos de anel. Preferencialmente, cada anel tem de 3 a 7 átomos de anel, dos quais de 1 a 4 são heteroátomos de anel.
[065]Nesse contexto, os prefixos (por exemplo, C3-20, C3-7, C5-6, etc.) denotam o número de átomos de anel, ou faixa de átomos de anel, seja átomos de carbono ou heteroátomos. Por exemplo, o termo “heterociclila C5-6”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo heterociclila que tem 5 ou 6 átomos de anel.
[066]Exemplos de grupos heterociclila monocíclicos incluem, porém sem limitação, aqueles derivados de:
[067]N1: aziridina (C3), azetidina (C4), pirrolidina (tetraidropirrol) (C5), pirrolina (por exemplo, 3-pirrolina, 2,5-diidropirrol) (C5), 2H-pirrol ou 3H-pirrol (isopirrol, isoazol) (C5), piperidina (Ce), diidropiridina (Ce), tetraidropiridina (Ce), azepina (C7);
[068]O1: oxirano (C3), oxetano (C4), oxolano (tetraidrofurano) (C5), oxol (diidrofurano) (C5), oxano (tetraidropirano) (C6), diidropirano (C6), pirano (C6), oxepina (C7);
[069]S1: tiirano (C3), tietano (C4), tiolano (tetraidrotiofeno) (C5), tiano (tetraidrotiopirano) (C6), tiepano (C7);
[070]O2: dioxolano (C5), dioxano (C6), e dioxepano (C7);
[071]O3: trioxano (C6);
[072]N2: imidazolidina (C5), pirazolidina (diazolidina) (C5), imidazolina (C5),
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11/75 pirazolina (diidropirazol) (C5), piperazina (Ce);
[073]NiOi: tetraidrooxazol (C5), diidrooxazol (C5), tetraidroisoxazol (C5), diidroisoxazol (C5), morfolina (Ce), tetraidrooxazina (Ce), diidrooxazina (Ce), oxazina (Ce);
[074]NiSi: tiazolina (C5), tiazolidina (C5), tiomorfolina (C6);
[075]N2Oi: oxadiazina (C6);
[076]OiSi: oxatiol (C5) e oxatiano (tioxano) (C6); e, [077]NiOiSi: oxatiazina (Ce).
[078]Exemplos de grupos heterociclila monocíclicos substituídos incluem aqueles derivados de sacarídeos, em forma cíclica, por exemplo, furanoses (C5), tais como arabinofuranose, lixofuranose, ribofuranose, e xilofuranse e piranoses (Ce), tais como alopiranose, altropiranose, glucopiranose, mannopiranose, gulopiranose, idopiranose, galactopiranose e talopiranose.
[079]Arila C5-20: O termo “arila C5-20”, conforme utilizado no presente documento, pertence a uma porção química monovalente obtida removendo-se de um átomo de anel aromático de um composto aromático, cuja porção química tem de 3 a 20 átomos de anel. Preferencialmente, cada anel tem de 5 a 7 átomos de anel.
[080]Nesse contexto, os prefixos (por exemplo, C3-20, C5-7, C5-e, etc.) denotam o número de átomos de anel, ou a faixa de número de átomos de anel, seja átomos de carbono ou heteroátomos. Por exemplo, o termo “arila C5-e”, conforme utilizado no presente documento, pertence a um grupo arila que tem 5 ou 6 átomos de anel.
[081]Os átomos de anel podem ser todos átomos de carbono, como “grupos carboarila”.
[082]Exemplos de grupos carboarila incluem, porém sem limitação, aqueles derivados de benzeno (isto é, fenila) (Ce), naftaleno (C10), azuleno (C10), antraceno (C14), fenantreno (C14), naftaceno (C18), e pireno (C1e).
[083]Exemplos de grupos arila que compreendem anéis fundidos, pelo menos
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12/75 um dos quais é um anel aromático, incluem, porém sem limitação, grupos derivados de indano (por exemplo, 2,3-diidro-1H-indeno) (C9), indeno (C9), isoindeno (C9), tetralina (1,2,3,4-tetraidronaftaleno (C10), acenafteno (C12), fluoreno (C13), fenaleno (C13), acefenantreno (C15), e aceantreno (C16).
[084]Alternativamente, os átomos de anel podem incluir um ou mais heteroátomos, como “grupos heteroarila”. Exemplos de grupos heteroarila monocíclicos incluem, porém sem limitação, aqueles derivados de:
[085]Ni: pirrol (azol) (C5), piridina (azina) (C6);
[086]Oi: furano (oxol) (C5);
[087]Si: tiofeno (tiol) (C5);
[088]NiOi: oxazol (C5), isoxazol (C5), isoxazina (C6);
[089]N2Oi: oxadiazol (furazano) (C5);
[090]N3Oi: oxatriazol (C5);
[091]NiSi: tiazol (C5), isotiazol (C5);
[092]N2: imidazol (1,3-diazol) (C5), pirazol (1,2-diazol) (C5), piridazina (1,2diazina) (C6), pirimidina (1,3-diazina) (C6) (por exemplo, citosina, timina, uracila), pirazina (1,4-diazina) (C6);
[093]N3: triazol (C5), triazina (C6); e, [094]N4: tetrazol (C5).
[095]Exemplos de heteroarila que compreende anéis fundidos incluem, porém sem limitação:
[096]C9 (com 2 anéis fundidos) derivado de benzofurano (Oi), isobenzofurano (Oi), indol (Ni), isoindol (Ni), indolizina (Ni), indolina (Ni), isoindolina (Ni), purina (N4) (por exemplo, adenina, guanina), benzimidazol (N2), indazol (N2), benzoxazol (N1O1), benzisoxazol (N1O1), benzodioxol (O2), benzofurazano (N2O1), benzotriazol (N3), benzotiofurano (Si), benzotiazol (N1S1), benzotiadiazol (N2S);
[097]Ci0 (com 2 anéis fundidos) derivado de cromeno (Oi), isocromeno (Oi),
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13/75 cromano (Oi), isocromano (Oi), benzodioxano (O2), quinolina (Ni), isoquinolina (Ni), quinolizina (N1), benzoxazina (N1O1), benzodiazina (N2), piridopiridina (N2), quinoxalina (N2), quinazolina (N2), cinolina (N2), ftalazina (N2), naftiridina (N2), pteridina (N4);
[098]C11 (com 2 anéis fundidos) derivado de benzodiazepina (N2);
[099]C13 (com 3 anéis fundidos) derivado de carbazol (N1), dibenzofurano (O1), dibenzotiofeno (S1), carbolina (N2), perimidina (N2), piridoindol (N2); e, [0100]C14 (com 3 anéis fundidos) derivado de acridina (N1), xanteno (O1), tioxanteno (S1), oxantreno (O2), fenoxatiína (O1S1), fenazina (N2), fenoxazina (N1O1), fenotiazina (N1S1), tiantreno (S2), fenantridina (N1), fenantrolina (N2), fenazina (N2).
[0101]Os termos “arileno”, “carboarileno”, “heteroarileno”, conforme utilizado no presente documento, pertencem a uma porção química bivalente obtida removendo-se um átomo de hidrogênio de cada um dentre dois átomos de anel de um composto aromático conforme descrito acima com referência a arila, carboarila e heteroarila.
[0102]Os grupos acima, sejam sozinhos ou como parte de outro substituinte, pode, os próprios, ser opcionalmente substituídos com um ou mais grupos selecionados dentre os mesmos e os substituintes adicionais listados abaixo.
[0103]Halo: -F, -Cl, -Br, e -I.
[0104]Hidróxi: -OH.
[0105]Éter: -OR, em que R é um substituinte de éter, por exemplo, um grupo alquila C1-7 (também referido como um grupo alcóxi C1-7, discutido abaixo), um grupo heterociclila C3-20 (também referido como um grupo heterociclilóxi C3-20), ou um grupo arila C5-20 (também referido como um grupo arilóxi C5-20), preferencialmente um grupo alquila C1-7.
[0106]Alcóxi: -OR, em que R é um grupo alquila, por exemplo, um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos alcóxi C1-7 incluem, porém sem limitação, -OMe
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14/75 (metóxi), -OEt (etóxi), -O(nPr) (n-propóxi), -O(iPr) (isopropóxi), -O(nBu) (n-butóxi), O(sBu) (sec-butóxi), -O(iBu) (isobutóxi), e -O(tBu) (terc-butóxi).
[0107]Acetal: -CH(OR1)(OR2), em que R1 e R2 são independentemente substituintes de acetal, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C320, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7, ou, no caso de um grupo acetal “cíclico”, R1 e R2, juntamente com os dois átomos de oxigênio aos quais os mesmos são ligados, e os átomos de carbono aos quais os mesmos são ligados, formam um anel heterocíclico que tem de 4 a 8 átomos de anel. Exemplos de grupos acetal incluem, porém sem limitação, -CH(OMe)2, -CH(OEt)2, e CH(OMe)(OEt).
[0108]Hemiacetal: -CH(OH)(OR1), em que R1 é um substituinte de hemiacetal, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C520, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos hemiacetal incluem, porém sem limitação, -CH(OH)(OMe) e -CH(OH)(OEt).
[0109]Cetal: -CR(OR1)(OR2), em que R1 e R2 são conforme definido para acetais, e R é um substituinte de cetal que não seja hidrogênio, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos cetal incluem, porém sem limitação, C(Me)(OMe)2, -C(Me)(OEt)2, -C(Me)(OMe)(OEt), -C(Et)(OMe)2, -C(Et)(OEt)2, e C(Et)(OMe)(OEt).
[0110]Hemicetal: -CR(OH)(OR1), em que R1 é conforme definido para hemiacetais, e R é um substituinte hemicetal que não seja hidrogênio, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos hemiacetal incluem, porém sem limitação, -C(Me)(OH)(OMe), -C(Et)(OH)(OMe), -C(Me)(OH)(OEt), e C(Et)(OH)(OEt).
[0111]Óxo (ceto, -ona): =O.
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15/75 [0112]Tiona (tiocetona): =S.
[0113]Imino (imina): =NR, em que R é um substituinte de imino, por exemplo, hidrogênio, grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente hidrogênio ou um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos éster incluem, porém sem limitação, =NH, =NMe, =NEt, e =NPh.
[0114]Formila (carbaldeído, carboxaldeído): -C(=O)H.
[0115]Acila (ceto): -C(=O)R, em que R é um substituinte de acila, por exemplo, um grupo alquila C1-7 (também referido como alquilacila C1-7 ou alcanoíla C1-7), um grupo heterociclila C3-20 (também referido como heterociclilacila C3-20), ou um grupo arila C5-20 (também referido como arilacila C5-20), preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos acila incluem, porém sem limitação, -C(=O)CH3 (acetila), C(=O)CH2CH3 (propionila), -C(=O)C(CH3)3 (t-butirila), e -C(=O)Ph (benzoíla, fenona).
[0116]Carbóxi (ácido carboxílico): -C(=O)OH.
[0117]Tiocarbóxi (ácido tiocarboxilíco): -C(=S)SH.
[0118]Tiolocarbóxi (ácido tiolocarboxilíco): -C(=O)SH.
[0119]Tionocarbóxi (ácido tionocarboxilíco): -C(=S)OH.
[0120]Ácido imídico: -C(=NH)OH.
[0121]Ácido hidroxâmico: -C(=NOH)OH.
[0122]Éster (carboxilato, éster de ácido carboxílico, oxicarbonila): -C(=O)OR, em que R é um substituinte éster, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos éster incluem, porém sem limitação, -C(=O)OCH3, C(=O)OCH2CH3, -C(=O)OC(CH3)3, e -C(=O)OPh.
[0123]Acilóxi (éster reverso): -OC(=O)R, em que R é um substituinte de acilóxi, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos acilóxi incluem, porém sem limitação, -OC(=O)CH3 (acetóxi), -OC(=O)CH2CH3, Petição 870190100538, de 07/10/2019, pág. 31/96
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OC(=O)C(CH3)3, -OC(=O)Ph, e -OC(=O)CH2Ph.
[0124]Oxicarboilóxi: -OC(=O)OR, em que R é um substituinte de éster , por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos éster incluem, porém sem limitação, -OC(=O)OCH3, -OC(=O)OCH2CH3, -OC(=O)OC(CH3)3, e OC(=O)OPh.
[0125]Amino: -NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, por exemplo, hidrogênio, um grupo alquila C1-7 (também referido como alquilamino C1-7ou alquilamino di-C1-7), um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo C520, preferencialmente H ou um grupo alquila C1-7, ou, no caso de um grupo amino “cíclico”, R1 e R2, juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos são ligados, formam um anel heterocíclico que tem de 4 a 8 átomos de anel. Os grupos amino podem ser primários (-NH2), secundários (-NHR1) ou terciários (-NHR1R2) e, na forma catiônica, podem ser quaternários (-+NR1R2R3). Exemplos de grupos amino incluem, porém sem limitação, -NH2, -NHCH3, -NHC(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2, e -NHPh. Exemplos de grupos amino cíclicos incluem, porém sem limitação, aziridino, azetidino, pirrolidino, piperidino, piperazino, morfolino e tiomorfolino.
[0126]Amido (carbamoíla, carbamila, aminocarbonila, carboxamida): C(=O)NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, conforme definido para amino grupos. Exemplos de grupos amido incluem, porém sem limitação, -C(=O)NH2, -C(=O)NHCH3, -C(=O)N(CH3)2, -C(=O)NHCH2CH3, e C(=O)N(CH2CH3)2, bem como grupos amido em que R1 e R2, juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos são ligados, formam uma estrutura heterocíclica como, por exemplo, piperidinocarbonila, morfolinocarbonila, tiomorfolinocarbonila e piperazinocarbonila.
[0127]Tioamido (tiocarbamila): -C(=S)NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, conforme definido para grupos amino.
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Exemplos de grupos amido incluem, porém sem limitação, -C(=S)NH2, -C(=S)NHCH3, -C(=S)N(CH3)2, e -C(=S)NHCH2CH3.
[0128]Acilamido (acilamino): -NR1C(=O)R2, em que R1 é um substituinte de amido, por exemplo, hidrogênio, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente hidrogênio ou um grupo alquila C1-7, e R2 é um substituinte de acila, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente hidrogênio ou um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos acilamida incluem, porém sem limitação, -NHC(=O)CH3 , NHC(=O)CH2CH3, e -NHC(=O)Ph. R1 e R2 podem formar juntamente uma estrutura cíclica, como, por exemplo, succinimidila, maleimidila e ftalimidila:
succinimidila maleimidile talimidila [0129]Aminocarbonilóxi: -OC(=O)NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, conforme definido para amino grupos. Exemplos de grupos aminocarbonilóxi incluem, porém sem limitação, -OC(=O)NH2, OC(=O)NHMe, -OC(=O)NMe2, e -OC(=O)NEt2.
[0130]Ureído: -N(R1)CONR2R3 em que R2 e R3 são independentemente substituintes de amino, conforme definido para amino grupos, e R1 é um substituinte de ureído, por exemplo, hidrogênio, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C320 ou um grupo arila C5-20, preferencialmente hidrogênio ou um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos ureído incluem, porém sem limitação, -NHCONH2, -NHCONHMe, -NHCONHEt, -NHCONMe2, -NHCONEt2, -NMeCONH2, -NMeCONHMe, NMeCONHEt, -NMeCONMe2, e -NMeCONEt2.
[0131]Guanidina: -NH-C(=NH)NH2.
[0132]Tetrazolíla: um anel aromático de cinco membros que tem quatro átomos de hidrogênio e um átomo de carbono,
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[0133]Imino: =NR, em que R é um substituinte de imino, por exemplo, por exemplo, hidrogênio, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente H ou um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos imino incluem, porém sem limitação, =NH, =NMe, e =NEt.
[0134]Amidina (amidino): -C(=NR)NR2, em que cada R é um substituinte de amidina, por exemplo, hidrogênio, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20 ou um grupo arila C5-20, preferencialmente H ou um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos amidina incluem, porém sem limitação, -C(=NH)NH2, -C(=NH)NMe2, e C(=NMe)NMe2.
[0135]Nitro: -NO2.
[0136]Nitroso: -NO.
[0137]Azido: -N3.
[0138]Ciano (nitrila, carbonitrila): -CN.
[0139]Isociano: -NC.
[0140]Cianato: -OCN.
[0141]Isocianato: -NCO.
[0142]Tiociano (tiocianato): -SCN.
[0143]Isotiociano (isotiocianato): -NCS.
[0144]Sulfidrila (tiol, mercapto): -SH.
[0145]Tioéter (sulfeto): -SR, em que R é um substituinte de tioéter, por exemplo, um grupo alquila C1-7 (também referido como um grupo alquiltio C1-7), um grupo heterociclila C3-20 ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos alquiltio C1-7 incluem, porém sem limitação, -SCH3 e SCH2CH3.
[0146]Bissulfeto: -SS-R, em que R é um substituinte de bissulfeto, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20 ou um grupo arila C5-20,
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19/75 preferencialmente um grupo alquila C1-7 (também referido no presente documento como bissulfeto de alquila C1-7). Exemplos de grupos bissulfeto de alquila C1-7 incluem, porém sem limitação, -SSCH3 e -SSCH2CH3.
[0147]Sulfina (sulfinila, sulfóxido): -S(=O)R, em que R é um substituinte de sulfina, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de sulfina grupos incluem, porém sem limitação, -S(=O)CH3 e -S(=O)CH2CH3.
[0148]Sulfona (sulfonila): -S(=O)2R, em que R é um substituinte de sulfona, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C520, preferencialmente um grupo alquila C1-7, que inclui, por exemplo, um grupo alquila C1-7 fluorado ou perfluorado. Exemplos de grupos de sulfona incluem, porém sem limitação, -S(=O)2CH3 (metanossulfonila, mesila), -S(=O)2CF3 (triflila), -S(=O)2CH2CH3 (esila), -S(=O)2C4F9 (nonaflila), -S(=O)2CH2CF3 (tresila), -S(=O)2CH2CH2NH2 (taurila), -S(=O)2Ph (fenilsulfonila, besila), 4-metilfenilsulfonila (tosila), 4-clorofenilsulfonila (closila), 4-bromofenilsulfonila (brosila), 4-nitrofenila (nosila), 2-naftalenossulfonato (napsila), e 5-dimetilamino-naftalen-1-ilsulfonato (dansila).
[0149]Ácido sulfínico (sulfino): -S(=O)OH, -SO2H.
[0150]Ácido sulfônico (sulfo): -S(=O)2OH, -SO3H.
[0151]Sulfinato (éster de ácido sulfínico): -S(=O)OR; em que R é um substituinte de sulfinato, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C320, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfinato incluem, porém sem limitação, -S(=O)OCH3 (metoxissulfinila; sulfinato de metila) e -S(=O)OCH2CH3 (etoxissulfinila; sulfinato de etila).
[0152]Sulfonato (éster de ácido sulfônico): -S(=O)2OR, em que R é um substituinte de sulfonato, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfonato incluem, porém sem limitação, -S(=O)2OCH3 (metoxissulfonila;
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20/75 sulfonato de metila) e -S(=O)2OCH2CH3 (etoxissulfonila; sulfonato de etila).
[0153]Sulfinilóxi: -OS(=O)R, em que R é um substituinte de sulfinilóxi, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfinilóxi incluem, porém sem limitação, -OS(=O)CH3 e -OS(=O)CH2CH3.
[0154]Sulfonilóxi: -OS(=O)2R, em que R é um substituinte de sulfonilóxi, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfonilóxi incluem, porém sem limitação, -OS(=O)2CH3 (mesilato) e -OS(=O)2CH2CH3 (esilato).
[0155]Sulfato: -OS(=O)2OR; em que R é um substituinte de sulfato, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfato incluem, porém sem limitação, -OS(=O)2OCH3 e -SO(=O)2OCH2CH3.
[0156]Sulfamila (sulfamoíla; amida de ácido sulfínico; sulfinamida): S(=O)NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, conforme definido para amino grupos. Exemplos de grupos sulfamila incluem, porém sem limitação, -S(=O)NH2, -S(=O)NH(CH3), -S(=O)N(CH3)2, -S(=O)NH(CH2CH3), S(=O)N(CH2CH3)2, e -S(=O)NHPh.
[0157]Sulfonamido (sulfinamoíla; amida de ácido sulfônico; sulfonamida): S(=O)2NR1R2, em que R1 e R2 são independentemente substituintes de amino, conforme definido para grupos amino. Exemplos de grupos sulfonamido incluem, porém sem limitação, -S(=O)2NH2, -S(=O)2NH(CH3), -S(=O)2N(CH3)2, S(=O)2NH(CH2CH3), -S(=O)2N(CH2CH3)2, e -S(=O)2NHPh.
[0158]Sulfamino: -NR1S(=O)2OH, em que R1 é um substituinte de amino, conforme definido para grupos amino. Exemplos de grupos sulfamino incluem, porém sem limitação, -NHS(=O)2OH e -N(CH3)S(=O)2OH.
[0159]Sulfonamino: -NR1S(=O)2R, em que R1 é um substituinte amino,
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21/75 conforme definido para grupos amino, e R é um substituinte de sulfonamino, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfonamino incluem, porém sem limitação, -NHS(=O)2CH3 e -N(CH3)S(=O)2C6H5.
[0160]Sulfinamino: -NR1S(=O)R, em que R1 é um substituinte de amino, conforme definido para amino grupos, e R é um substituinte de sulfinamino, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7. Exemplos de grupos sulfinamino incluem, porém sem limitação, -NHS(=O)CH3 e -N(CH3)S(=O)C6H5.
[0161]Fosfino (fosfina): -PR2, em que R é um substituinte de fosfino, por exemplo, -H, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C520, preferencialmente -H, um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C5-20. Exemplos de grupos fosfino incluem, porém sem limitação, -F2, -P(CH3)2, -P(CH2CH3)2, -P(t-Bu)2, e -P(F)2.
[0162]Fosfo: -P(=O)2.
[0163]Fosfinila (óxido de fosfina): -P(=O)R2, em que R é um substituinte de fosfinila, por exemplo, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C5-20. Exemplos de grupos fosfinila incluem, porém sem limitação, -P(=O)(CH3)2, -P(=O)(CH2CH3)2, P(=O)(t-Bu)2, e -P(=O)(F)2.
[0164]Ácido fosfônico (fosfono): -P(=O)(OH)2.
[0165]Fosfonato (éster de fosfono): -P(=O)(OR)2, em que R é um substituinte de fosfonato, por exemplo, -H, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente -H, um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C520. Exemplos de grupos fosfonato incluem, porém sem limitação, -P(=O)(OCH3)2, P(=O)(OCH2CH3)2, -P(=O)(O-t-Bu)2, e -P(=O)(OF)2.
[0166]Ácido fosfórico (fosfonoóxi): -OP(=O)(OH)2.
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22/75 [0167]Fosfato (éster de fosfonoóxi): -OP(=O)(OR)2, em que R é um substituinte de fosfato, por exemplo, -H, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente -H, um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C5-20. Exemplos de grupos fosfato incluem, porém sem limitação, OP(=O)(OCH3)2, -OP(=O)(OCH2CH3)2, -OP(=O)(O-t-Bu)2, e -OP(=O)(OF)2.
[0168]Ácido fosforoso: -OP(OH)2.
[0169]Fosfito: -OP(OR)2, em que R é um substituinte de fosfito, por exemplo, -H, um grupo alquila C1-7, um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente -H, um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C5-20. Exemplos de grupos fosfito incluem, porém sem limitação, -OP(OCH3)2, -OP(OCH2CH3)2, -OP(O-tBu)2, e -OP(OF)2.
[0170]Fosforamidito: -OP(OR1)-NR22, em que R1 e R2 são substituintes de fosforamidito, por exemplo, -H, um grupo alquila C1-7 (opcionalmente substituído), um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente -H, um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C5-20. Exemplos de grupos fosforamidito incluem, porém sem limitação, -OP(OCH2CH3)-N(CH3)2, -OP(OCH2CH3)-N(i-Pr)2, e OP(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2.
[0171]Fosforamidato: -OP(=O)(OR1)-NR22, em que R1 e R2 são substituintes de fosforamidato, por exemplo, -H, um grupo alquila Cw(opcionalmente substituído), um grupo heterociclila C3-20, ou um grupo arila C5-20, preferencialmente -H, um grupo alquila C1-7 ou um grupo arila C5-20. Exemplos de grupos fosforamidato incluem, porém sem limitação, -OP(=O)(OCH2CH3)-N(CH3)2, -OP(=O)(OCH2CH3)-N(i-Pr)2, e OP(=O)(OCH2CH2CN)-N(i-Pr)2.
Grupos de proteção de nitrogênio [0172]Grupos de proteção de nitrogênio são bem conhecidos na técnica. Grupos de proteção de nitrogênio preferenciais são grupos de proteção de carbamato que têm a fórmula geral:
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23/75
R1—O. ,O [0173]Um número grande de grupos de proteção nitrogênio carbamato são listados nas páginas 706 a 771 de Wuts, P.G.M. e Greene, T.W., Protective Groups in
Organic Synthesis, 4a Edição, Wiley-Interscience, 2007, que é incorporado no presente documento a título de referência.
[0174]Grupos de proteção particularmente preferenciais incluem Alloc, Troc,
Teoc, BOC, Doc, Hoc, TcBOC, Fmoc, 1-Adoc e 2-Adoc.
Grupos de proteção de hidroxila [0175]Grupos de proteção de hidroxila são bem conhecidos na técnica. Um número grande de grupos adequados é descrito nas páginas 16 a 366 de Wuts,
P.G.M. e Greene, T.W., Protective Groups in Organic Synthesis, 4a Edição, WileyInterscience, 2007, que é incorporado no presente documento a título de referência.
[0176]Classes de interesse particular incluem éteres de silila, éteres de metila, éteres de alquila, éteres de benzila, ésteres, benzoatos, carbonatos e sulfonatos.
[0177]Grupos de proteção particularmente preferenciais incluem THP.
Infecções bacterianas e doenças contagiosas [0178]Um indivíduo de habilidade comum na técnica é prontamente capaz de determinar se um composto candidato trata uma infecção bacteriana ou doença contagiosa bacteriana. Por exemplo, ensaios que podem ser convenientemente utilizados para avaliar a atividade oferecida por um composto particular são descritos nos exemplos abaixo.
[0179]O termo “infecção bacteriana” pertence a uma invasão de tecidos corporais por bactérias, sua multiplicação e a reação dos tecidos corporais às bactérias e às toxinas que as mesmas produzem. O termo “doença contagiosa bacteriana” pertence a uma doença causada por bactérias.
[0180]Exemplos de infecção bacteriana e doenças contagiosas bacterianas incluem, porém sem limitação, infecções adquiridas em hospital e comunidade devido
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24/75 a bactérias Gram-positivas tais como Staphylococcus aureus, incluindo formas resistentes a múltiplos fármacos tal como S. aureus resistente à meticilina (MRSA), e a streptococci, incluindo formas resistentes a fármaco tal como enterococci resistente a vancomicina (VRE). Outras infecções que podem ser tratadas incluem aquelas devido a Clostridium difficile, Listeria monocytogenes e infecções de pele devido a bactérias Gram-positivas.
[0181]Preferencialmente, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de doenças contagiosas bacterianas causadas por infecções bacterianas que envolvem cepas bacterianas resistentes a fármaco. Cepas bacterianas particularmente preferenciais são Staphylococcus aureus.
[0182]Preferencialmente, o tratamento é de uma doença contagiosa bacteriana ou infecção bacteriana que envolve MRSA, S. aureus intermediário à vancomicina (VISA), S. aureus resistente à vancomicina (VRSA) e outras infecções devido a bactérias Gram-positivas resistentes a fármacos.
Métodos de Tratamento [0183]Conforme descrito acima, a presente invenção fornece o uso de um composto do primeiro aspecto da invenção em um método de terapia.
[0184]O termo “quantidade terapeuticamente eficaz” é uma quantidade suficiente para mostrar benefícios a um paciente. Tal benefício pode ser pelo menos uma melhora de pelo menos um sintoma. A quantidade real administrada, e a taxa e o curso de tempo de administração dependerão da natureza e gravidade do que está sendo tratado. A prescrição de tratamento, por exemplo, decisões sobre dosagem, está dentro da responsabilidade de praticantes gerais e outros médicos.
[0185]Um composto pode ser administrado sozinho ou em combinação com outros tratamentos, seja simultânea ou sequencialmente, dependendo da condição a ser tratada. Exemplos de tratamentos e terapias incluem, porém sem limitação, fármacos β-lactama tais como as penicilinas e cefalosporinas, aminoglicosídeos,
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25/75 fluoroquinolonas, oxazolidinonas e as estreptograminas.
[0186]Composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção, e para uso de acordo com a presente invenção, podem compreender, além do ingrediente ativo, isto é, um composto de fórmula I, um estabilizador, tampão, veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável ou outros materiais bem conhecidos por aqueles versados na técnica. Tais materiais devem ser não tóxicos e não devem interferir com o ingrediente ativo. A natureza precisa do veículo ou do outro material dependerá da via de administração, que pode ser oral, ou por injeção, por exemplo, cutânea, subcutânea ou intravenosa.
[0187]Composições farmacêuticas para administração oral podem ser em forma de tablete, cápsula, em pó ou líquida. Um tablete pode compreender um veículo sólido ou um adjuvante. Composições farmacêuticas líquidas compreendem, em geral, um veículo líquido tais como água, petróleo, óleos animal ou vegetal, óleo mineral ou óleo sintético. Solução salina fisiológica, dextrose ou outra solução de sacarídeo ou glicóis tais como etileno glicol, propileno glicol ou polietileno glicol podem ser incluídos. Uma cápsula pode compreender um veículo sólido tal como uma gelatina.
[0188]Para injeção intravenosa, cutânea ou subcutânea no local de aflição, o ingrediente ativo estará na forma de uma solução aquosa aceitável de modo parenteral que é livre de pirogênio e tem pH, isotonicidade e estabilidade adequados. Aqueles de habilidade relevante na técnica serão bem capazes de preparar soluções adequadas com uso, por exemplo, de veículos isotônicos tais como Injeção de Cloreto de Sódio, Injeção de Ringer, Injeção de Ringer Lactada. Preservativos, estabilizadores, tampões, antioxidantes e/ou outros aditivos podem ser incluídos, conforme necessário.
Dosagem [0189]Será observado por um indivíduo versado na técnica que as dosagens
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26/75 apropriadas do composto podem variar de paciente para paciente. Determinar a dosagem ideal geralmente envolverá o equilíbrio do nível de benefício terapêutico contra qualquer risco ou efeitos colaterais prejudiciais. O nível de dosagem selecionado dependerá de uma variedade de fatores, o que inclui, mas sem limitações, a atividade do composto em particular, a via de administração, o tempo de administração, a taxa de excreção do composto, a duração do tratamento, outros fármacos, compostos, e/ou materiais usados em combinação, a gravidade da afecção, e a espécie, sexo, idade, peso, condição, saúde geral, e histórico médico anterior do paciente. A quantidade de composto e via de administração estarão por fim a critério do médico, veterinário, ou clínico, apesar de geralmente a dosagem ser selecionada para alcançar concentrações locais no local de ação que alcançar o efeito desejado sem causar efeitos colaterais nocivos ou prejudiciais substanciais.
[0190]A administração pode ser efetuada em uma dose, continua ou intermitentemente (por exemplo, em doses divididas em intervalos apropriados) ao longo do curso de tratamento. Os métodos para determinar os meios e dosagem de administração são bem conhecidos aos versados na técnica e variarão com a formulação usada para terapia, o propósito da terapia, a(s) célula(s) alvo que devem ser tratadas, e o indivíduo que deve ser tratado. Administrações únicas ou múltiplas podem ser conduzidas com o nível e padrão da dose selecionados pelo médico, veterinário, ou clínico do tratamento.
[0191]Em geral, uma dose adequada de o composto ativo está na faixa de cerca de 100 ng a cerca de 25 mg (mais tipicamente cerca de 1 pg a cerca de 10 mg) por quilograma de peso corporal do indivíduo por dia. Quando o composto for um sal, um éster, uma amida, um pró-fármaco, ou similares, a quantidade administrada é calculada na base do composto parental, e então, o peso real que deve ser usado é aumentado proporcionalmente.
[0192]Em uma modalidade, o composto ativo é administrado a um paciente
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27/75 humano de acordo com o seguinte regime de dosagem: cerca de 100 mg, 3 vezes ao dia.
[0193]Em uma modalidade, o composto ativo é administrado a um paciente humano de acordo com o seguinte regime de dosagem: cerca de 150 mg, 2 vezes ao dia.
[0194]Em uma modalidade, o composto ativo é administrado a um paciente humano de acordo com o seguinte regime de dosagem: cerca de 200 mg, 2 vezes ao dia.
[0195]Para a prevenção ou tratamento de doença, a dosagem apropriada do composto da invenção dependerá do tipo de doença que deve ser tratada, conforme definido acima, da gravidade e curso da doença, independentemente de a molécula ser administrada para propósitos preventivos ou terapêuticos, antes da terapia, do histórico clínico do paciente e resposta ao anticorpo, e da discrição do médico atendente. A molécula é adequadamente administrada ao paciente em uma hora ou por uma série de tratamentos. Dependendo do tipo e gravidade da doença, cerca de 1 pg/kg a 15 mg/kg (por exemplo, 0,1 a 20 mg/kg) de molécula é uma dosagem candidata inicial para administração ao paciente, se, por exemplo, através de uma ou mais administrações separadas, ou por infusão contínua. Uma dosagem tipicamente diária pode estar na faixa a partir de cerca de 1 pg/kg a 100 mg/kg ou mais, dependendo dos fatores mencionados acima. Uma dosagem exemplificativa de composto que deve ser administrado a um paciente está na faixa de cerca de 0,1 a cerca de 10 mg/kg do peso do paciente. Para administrações repetidas por diversos dias ou mais, dependendo da afecção, o tratamento é mantido até que uma supressão desejada de sintomas da doença ocorra. Um regime de dosagem exemplificativo compreende um curso de administração de uma dose de carga inicial de cerca de 4 mg/kg, seguida por doses adicionais toda semana, duas semanas, ou três semanas de um composto. Outros regimes de dosagem podem ser úteis. O progresso dessa
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28/75 terapia é facilmente monitorado através de ensaios e técnicas convencionais.
Inclui Outras Formas [0196]A menos que especificado de outra forma, estão incluídos acima as formas protegidas dos substituintes a seguir: iônicos, sal e solvato. Por exemplo, uma referência ao ácido carboxílico (-COOH) também inclui a forma aniônica (carboxilato) (-COO-), um sal ou solvato do mesmo, bem como formas protegidas convencionais. De maneira similar, uma referência a um grupo amino inclui a forma protonada (N+HR1R2), um sal ou solvato do grupo amino, por exemplo, um sal de hidrocloreto, bem como formas protegidas convencionais de um grupo amino. De maneira similar, uma referência a um grupo hidroxila também inclui a forma aniônica (-O-), um sal ou solvato do mesmo, bem como formas protegidas convencionais.
Isômeros, Sais e Solvatos [0197]Determinados compostos podem existir em uma ou mais formas particulares geométricas, ópticas, enantioméricas, diasterioméricas, epiméricas, atrópicas, esteroisoméricas, tautoméricas, conformacionais, ou anoméricas, o que inclui, mas sem limitações, formas cis e trans; formas E e Z; formas c, t, e r; formas endo e exo; formas R, S, e meso; formas D e L; formas d- e l; formas (+) e (-); formas ceto, enol, e enolato; formas sin e antiformes; formas sinclinais e anticlinais; formas α e β; formas axiais e equatoriais; formas de barco, cadeira, torção, envelope-, e meia cadeira; e combinações das mesmas, daqui por diante citados coletivamente como “isômeros” (ou “formas isoméricas”).
[0198]Preferencialmente, os compostos da presente invenção têm a seguinte estereoquímica na posição C11:
O [0199]Note que, exceto quando conforme discutido abaixo para formas
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29/75 tautoméricas, especificamente excluído do termo “isômeros”, conforme usado no presente documento, são isômeros estruturais (ou constitucionais) (isto é, isômeros que diferem nas conexões entre átomos em vez de meramente pela posição dos átomos no espaço). Por exemplo, uma referência a um grupo metóxi, -OCH3, não deve ser interpretada como uma referência a seu isômero estrutural, um grupo hidroximetila, -CH2OH. De maneira similar, uma referência a orto-clorofenila não deve ser interpretada como uma referência a seu isômero estrutural, meta-clorofenila. Entretanto, uma referência a uma classe de estruturas pode também incluir formas estruturalmente isoméricas que se enquadrem naquela classe (por exemplo, alquila C1-7 inclui n-propila e iso-propila; butila inclui n, iso, see, e tert-butila; metoxifenila inclui orto, meta, e para-metoxifenila).
[0200]A exclusão acima não pertence às formas tautoméricas, por exemplo, formas ceto-, enol-, e enolato, como, por exemplo, nos seguintes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrados abaixo), imina/enamina, álcool de amida/imino, amidina/amidina, nitroso/óxima, tiocetona/enetiol, N-nitroso/hidroxiazo, e nitro/aci-nitro.
1 ,0 |
, OH |
H4 |
\ °’ |
|
= / =C\ |
|
c=cz |
— I C\
Ceto |
Enol |
H4 |
Enolato |
[0201]Note |
que especificamente |
estão |
incluídos no termo “isômero: |
compostos com uma ou mais substituições isotópicas. Por exemplo, H pode estar em qualquer forma isotópica, o que inclui 1H, 2H (D), e 3H (T); C pode estar em qualquer forma isotópica, o que inclui 12C, 13C, e 14C; O pode estar em qualquer forma isotópica, o que inclui 16O e 18O; e similares.
[0202]A menos que especificado de outra forma, uma referência a um composto em particular inclui todas as tais formas isoméricas, o que inclui (completamente ou parcialmente) racêmicas e outras misturas das mesmas. Os métodos para a preparação (por exemplo, síntese assimétrica) e separação (por
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30/75 exemplo, cristalização fracionada e meios cromatográficos) de tais formas isoméricas ou são conhecidos na técnica ou são prontamente obtidos através da adaptação dos métodos ensinados no presente documento, ou métodos conhecidos, em uma maneira conhecida.
[0203]A menos que especificado de outra forma, uma referência a um composto em particular também inclui iônicos, sal, solvato, e formas protegidas de dos mesmos, por exemplo, conforme discutido abaixo.
[0204]Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar, e/ou manusear um sal correspondente do composto ativo, por exemplo, um sal farmaceuticamente aceitável. Os exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis são discutidos no documento Berge, et al., J. Pharm. Sci., 66, 1 a 19 (1977).
[0205]Por exemplo, se o composto for aniônico, ou tiver um grupo funcional que pode ser aniônico (por exemplo, -COOH pode ser -COO-), então um sal pode ser formado com um cátion adequado. Os exemplos de cátions inorgânicos adequados incluem, mas sem limitações, íons de metais alcalinos como Na+ e K+, cátions de alcalinos terrosos como Ca2+ e Mg2+, e outros cátions como Al3+. Os exemplos de cátions orgânicos adequados incluem, mas sem limitações, íon de amônio (isto é, NH4+) e íons de amônio substituídos (por exemplo, NH3R+, NH2R2+, NHR3+, NR4+). Os exemplos de alguns íons de amônio substituídos adequados são os derivados de: etilamina, dietilamina, diciclohexilamina, trietilamina, butilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, benzilamina, fenilbenzilamina, colina, meglumina, e trometamina, bem como aminoácidos, como lisina e arginina. Um exemplo de um íon de amônio quaternário comum é N(CH3)4+.
[0206]Se o composto for catiônico, ou tiver um grupo funcional que pode ser catiônico (por exemplo, -NH2 pode ser -NH3+), então um sal pode ser formado com um ânion adequado. Os exemplos de ânions inorgânicos adequados incluem, mas sem limitações, os derivados dos seguintes ácidos inorgânicos: clorídrico, bromídrico,
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31/75 iodídrico, sulfúrico, sulfuroso, nítrico, nitroso, fosfórico, e fosforoso.
[0207]Os exemplos de ânions orgânicos adequados incluem, mas sem limitações, os derivados dos seguintes ácidos orgânicos: 2-acetioxibenzóico, acético, ascórbico, aspártico, benzóico, canforossulfônico, cinâmico, cítrico, edético, etanodissulfônico, etanosulfônico, fumárico, gluceptônico, glucônico, glutâmico, glicólico, hidroximalêico, hidroxinaftaleno carboxílico, isetiônico, lático, lactobiônico, láurico, malêico, málico, metanossulfônico, múcico, oleico, oxálico, palmítico, pamóico, pantotênico, fenilacético, fenil sulfônico, propiônico, pirúvico, salicílico, esteárico, succínico, sulfanílico, tartárico, toluenossulfônico, e valérico. Os exemplos de ânions orgânicos poliméricos adequados incluem, mas sem limitações, os derivados dos seguintes ácidos poliméricos: ácido tânico, carboximetilcelulose.
[0208]Pode ser conveniente ou desejável preparar, purificar, e/ou manusear um solvato correspondente do composto ativo. O termo “solvato” é usado no presente documento no sentido convencional para se referir a um complexo de soluto (por exemplo, composto ativo, sal de composto ativo) e solvente. Se o solvente for água, o solvato pode ser convenientemente citado como um hidrato, por exemplo, um monoidrato, um diidrato, um triidrato, etc.
[0209]Os compostos da fórmula I incluem compostos nos quais um solvente nucleofílico (H2O, RAOH, RANH2, RASH) é adicionado ao longo da ligação de imina da porção química de PBD, a qual é ilustrada abaixo onde o solvente é água ou um álcool (RAOH, onde RA é um substituinte de éter conforme descrito acima):
h2o
R
O
RAOH
[0210]Essas formas podem ser chamadas de formas do PBD carbinolamina e éter de carbinolamina. O equilíbrio desse balanço depende das condições nas quais os compostos são encontrados, bem como a natureza da porção química em si.
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32/75 [0211]Esses compostos podem ser isolados em forma sólida, por exemplo, por liofilização.
Vias Sintéticas Gerais [0212]Os compostos da fórmula I, onde R10 e R11 juntos formam uma ligação dupla podem ser sintetizados a partir dos compostos da fórmula 2:
(2) [0213]R'10 é um grupo de proteção de nitrogênio e R'11 é O-R12, em que R12 é H ou um grupo de proteção de hidroxila. Tais técnicas são bem conhecidas na técnica, e são descritas, por exemplo, no documento Wuts, P.G.M. e Greene, T.W., Protective Groups in Organic Synthesis, 4a Edição, Wiley-Interscience, 2007. Se ambos os grupos de proteção de nitrogênio e de hidroxilas estiverem presentes, os mesmos são selecionados preferencialmente para serem removíveis pelas mesmas condições.
[0214]Se essa desproteção for conduzida em um solvente da fórmula HQRQ, então R10 e R11 serão H e QRQ, respectivamente. Alternativamente, esses grupos podem ser introduzidos através da adição do composto a um solvente diferente daquele no qual a desproteção é conduzida.
[0215]A conversão de compostos da fórmula I, conforme discutido acima, àqueles que têm R11 como SOxM pode ser alcançada através da adição do sal de bissulfito ou sal de sulfinato apropriados, seguida por uma etapa de purificação. Os métodos adicionais são descritos no documento GB 2 053 894, que está incorporado no presente documento a título de referência.
[0216]Os compostos da fórmula 2 podem ser feitos através do acoplamento de compostos da Fórmula 3 e da Fórmula 4:
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(3) [0217]sob condições padrão de formação de ligação de amida, por exemplo, na presença de HOBt ou DMAP e EDCl.
[0218]Os compostos da fórmula 3 podem ser sintetizados a partir dos compostos da fórmula 5:
(5) [0219]onde R'8 é um grupo alquila C1-4, por exemplo, metila. Essa desproteção do grupo carboxila pode ser conduzida com o uso de meios padrão, por exemplo, tratamento com base.
[0220]Os compostos da fórmula 5 podem ser sintetizados de modo geral seguindo os métodos descritos nos documentos n^ WO 00/12506 e WO 2007/039752, os quais estão incorporados no presente documento a título de referência. Em particular, a cadeia lateral do ácido butanoico pode ser introduzida em qualquer estágio na síntese, normalmente com grupos de proteção apropriados no lugar. Por exemplo, a cadeia lateral pode ser formada através do acoplamento de uma forma protegida ou precursora a um grupo hidróxi no anel de benzeno com o uso de, por exemplo, acoplamento de Mitsunobo.
[0221]Os compostos da fórmula 4 podem ser sintetizados com o uso dos métodos revelados no documento no WO 2005/085177, os quais estão incorporados
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34/75 no presente documento a título de referência. É feito referência também à revelação do documento no WO 2007/039752.
Ligação de Dna [0222]A capacidade dos compostos de se ligarem ao DNA, e em particular oligonucleotídeos, pode ser medida com o uso de um ensaio HPLC em fase reversa de pares de íons, conforme descrito em Rahman, K. M., et al., Journal of the American Chemical Society 2009, 131, 13756 e Narayanaswamy, M., et al., Analytical Biochemistry 2008, 374, 173. A afinidade de ligação do DNA pode também ser avaliada através do uso de um ensaio de desnaturação térmica de DNA de timo de bezerro, conforme descrito no documento Wells, G., et al., Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49, 5442; Jenkins, T. C., et al., Journal of Medicinal Chemistry 1994, 37, 4529; e Gregson, S. J., et al., Journal of Medicinal Chemistry 2001,44, 737.
Preferências Adicionais
C2 [0223]Pode ser preferencial em qualquer uma das modalidades que o carbono C2 tenha um centro sp2, de modo que quando R2 for selecionado dentre qualquer um dos seguintes grupos:
-H, -OH, -CN, -R, -OR, halo, -O-SO2-R, -CO2R e -COR [0224]há uma ligação dupla entre C2 e C3.
[0225]Quando R2 for selecionado dentre qualquer um dos seguintes grupos:
=O, =CH2, =CHR, =CHRR' [0226]não pode haver uma ligação dupla entre C2 e C3.
R2 [0227]R2 é selecionado dentre -H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, OR, halo, di-halo, =CHR, =CHRR', -O-SO2-R, CO2R e COR.
[0228]Em algumas modalidades, R2 pode ser selecionado dentre -H, -OH, =O, =CH2, -CN, -R, -OR, =CHR, =CRR', -O-SO2-R, -CO2R e -COR.
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35/75 [0229]Em algumas modalidades, R2 pode ser selecionado dentre -H, =CH2, R, =CHR, e =CRR'.
[0230]Em uma modalidade, R2 é H.
[0231]Em uma modalidade, R2 é =O.
[0232]Em uma modalidade, R2 é =CH2.
[0233]Em uma modalidade, R2 é =CHR. No composto de PBD, o grupo =CHR pode ter qualquer configuração mostrada abaixo:
H (C1)
(C2) [0234]Em uma modalidade, a configuração é a configuração (C1).
[0235]Em uma modalidade, R2 é =CRR'.
[0236]Em uma modalidade, R2 é =CF2.
[0237]Em uma modalidade, R2 é R.
[0238]Em uma modalidade, R2 é arila C5-20 opcionalmente substituída.
[0239]Quando R2 for arila C5-20 opcionalmente substituída, pode ser opcionalmente preferencial arila C5-7 ou arila C8-10 substituídas. R2 pode preferencialmente ser adicionalmente fenila opcionalmente substituída, naftila opcionalmente substituída, piridila opcionalmente substituída, quinolinila ou isoquinolinila opcionalmente substituídas. Desses grupos, a fenila opcionalmente substituída é de máxima preferência.
[0240]Quando R2 for arila C5-20 opcionalmente substituída, pode ser preferencial portar de um a três grupos substituintes, com 1 e 2 sendo mais preferenciais, e grupos substituídos unicamente sendo de máxima preferência. Os substituintes podem estar em qualquer posição.
[0241]Onde R2 é um grupo arila C5-7, um único substituinte está
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36/75 preferencialmente em um átomo de anel que não está adjacente à ligação ao restante do composto, isto é, é preferencial β ou γ à ligação ao restante do composto. Portanto, onde o grupo arila C5-7 é fenila, o substituinte está preferencialmente nas posições meta ou para, e mais preferencialmente está na posição para.
[0242]Em uma modalidade, R2 é selecionado dentre:
[0243]onde o asterisco indica o ponto de anexação.
[0244]Onde R2 é um grupo arila C8-10, por exemplo, quinolinila ou isoquinolinila, pode portar qualquer quantidade de substituintes em qualquer posição dos anéis de quinolina ou isoquinolina. Em algumas modalidades, o mesmo suporta um, dois ou três substituintes, e esses podem estar ou no anel proximal ou no distal ou ambos (se mais de um substituinte).
[0245]Quando R2 for arila C5-20 opcionalmente substituída, os substituintes podem ser selecionados dentre: halo, hidroxila, éter, formila, acila, carbóxi, éster, acilóxi, amino, amida, acilamido, aminocarbonilóxi, ureído, nitro, ciano e tioéter.
[0246]Quando R2 for arila C5-20 opcionalmente substituída, os substituintes podem ser selecionados do grupo que consiste em R, OR, SR, NRR', NO2, halo, CO2R, COR, CONH2, CONHR, e CONRR'.
[0247]Se um substituinte em R2 for halo, é preferencialmente F ou Cl, mais preferencialmente Cl.
[0248]Se um substituinte em R2 for éter, o mesmo pode ser, em algumas modalidades, um grupo alcóxi, por exemplo, um grupo alcóxi C1-7 (por exemplo, metóxi, etóxi) ou pode ser, em algumas modalidades, um grupo arilóxi C5-7 (por exemplo, fenóxi, piridilóxi, furanilóxi).
[0249]Se um substituinte em R2 for alquila C1-7, pode ser preferencial ser um grupo alquila C1-4 (por exemplo, metila, etila, propila, butila).
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37/75 [0250]Se um substituinte em R2 for C3-7 heterociclila, pode, em algumas modalidades, ser nitrogênio C6 que contém grupo heterociclila, por exemplo, morfolino, tiomorfolino, piperidinila, piperazinila. Esses grupos podem ser ligados ao resto da porção química de PBD por meio do átomo de nitrogênio. Esses grupos podem ser substituídos adicionalmente, por exemplo, por grupos alquila C1-4.
[0251]Se um substituinte em R2 for bis-oxi-alquileno C1-3, o mesmo é preferencialmente bis-oxi-metileno ou bis-oxi-etileno.
[0252]Os substituintes particularmente preferenciais para R2 incluem metóxi, etóxi, flúor, cloro, ciano, bis-oxi-metileno, metil-piperazinila, morfolino e metil-tienila.
[0253]Os grupos R2 substituídos particularmente preferenciais incluem, mas sem limitações, 4-metoxi-fenila, 3-metoxifenila, 4-etoxi-fenila, 3-etoxi-fenila, 4-flúorfenila, 4-cloro-fenila, 3,4-bisoximetileno-fenila, 4-metiltienila, 4-cianofenila, 4fenoxifenila, quinolin-3-íla e quinolin-6-íla, isoquinolin-3-íla e isoquinolin-6-íla, 2-tienila,
2-furanila, metoxinaftila, e naftila.
[0254]Em uma modalidade, R2 é alquila C1-12 opcionalmente substituída.
[0255]Quando R2 for alquila C1-12 opcionalmente substituída, o mesmo pode ser selecionado dentre:
(a) alquila alifática saturada C1-5;
(b) cicloalquila saturada C3-6;
,22 ,23 (c) em que cada um dentre R21, R22 e R23 são selecionados independentemente a partir de H, alquila saturada C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3 e ciclopropila, em que o número total de átomos de carbono no grupo R12 não é maior do que 5;
R25b (d) , em que um dentre R25a e R25b é H e o outro é selecionado a partir de: fenila, cuja fenila é opcionalmente substituída por um grupo selecionado a
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38/75 partir de halo metila, metóxi; piridila; e tiofenila; e (e) R , onde R24 é selecionado a partir de: H; alquila saturada C1-3;
C2-3 alquenila; C2-3 alquinila; ciclopropila; fenila, cuja fenila é opcionalmente substituída por um grupo selecionado a partir de halo metila, metóxi; piridila; e tiofenila.
[0256]Quando R12 for alquila alifática saturada C1-5, o mesmo pode ser metila, etila, propila, butila ou pentila. Em algumas modalidades, pode ser metila, etila ou propila (n-pentila ou isopropila). Em algumas dessas modalidades, o mesmo pode ser metila. Em outras modalidades, o mesmo pode ser butila ou pentila, que pode ser linear ou ramificada.
[0257]Quando R12 for cicloalquila saturada C3-6, o mesmo pode ser ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila ou ciclohexila. Em algumas modalidades, o mesmo pode ser ciclopropila.
,22 ,23 [0258]Quando R12 for R , cada um dentre R21, R22 e R23 é selecionado independentemente a partir de H, alquila saturada C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3 e ciclopropila, em que o número total de átomos de carbono no grupo R12 não é maior do que 5. Em algumas modalidades, o número total de átomos de carbono no grupo R12 não é maior do que 4 ou no mais do que 3.
[0259]Em algumas modalidades, um dentre R21, R22 e R23 é H, com os outros dois grupos selecionados a partir de H, alquila saturada C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3 e ciclopropila.
[0260]Em outras modalidades, dois dentre R21, R22 e R23 são H, em que o outro grupo é selecionado a partir de H, alquila saturada C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3 e ciclopropila.
[0261]Em algumas modalidades, os grupos que não são H são selecionados dentre metila e etila. Em algumas dessas modalidades, os grupos que não são H são
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39/75 metila.
[0262]Em algumas modalidades, R21 é H.
[0263]Em algumas modalidades, R22 é H.
[0264]Em algumas modalidades, R23 é H.
[0265]Em algumas modalidades, R21 e R22 são H.
[0266]Em algumas modalidades, R21 e R23 são H.
[0267]Em algumas modalidades, R22 e R23 são H.
R25b *
[0268]Quando R12 for _25a R , um dentre R25a e R25b é
H e o outro é selecionado dentre: fenila, cuja fenila é opcionalmente substituída selecionado a partir de halo, metila, metóxi; piridila; e tiofenila.
por um grupo
Em algumas modalidades, o grupo que não é H é fenila opcionalmente substituída. Se o substituinte opcional de fenila for halo, o mesmo é preferencialmente flúor. Em alguma modalidade, o grupo fenila não é substituído.
* [0269]Quando R12 for R , R24 é selecionado dentre: H; alquila saturada C1-3; C2-3 alquenila; C2-3 alquinila; ciclopropila; fenila, cuja fenila é opcionalmente substituída por um grupo selecionado a partir de halo metila, metóxi;
piridila; e tiofenila. Se o substituinte opcional de fenila for halo, o mesmo é preferencialmente flúor. Em alguma modalidade, o grupo fenila não é substituído.
[0270]Em algumas modalidades, R24 é selecionado dentre H, metila, etila, etenila e etinila. Em algumas dessas modalidades, R24 é selecionado a partir de H e metila.
[0271]Em uma modalidade, R2 é halo ou di-halo. Em uma modalidade, R2 é F ou -F2, cujos substituintes são ilustrados abaixo como (C3) e (C4) respectivamente:
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F
O
F
F
O (C3) (C4) [0272]R2 pode preferencialmente selecionado a partir de =CH2, =CH-R, onde R é mais preferencialmente um grupo alquila opcionalmente substituído C1-4, e -R, onde R é mais preferencialmente um grupo arila opcionalmente substituído C5-20. Os grupos particularmente preferenciais para R2 incluem =CH2, =CH-Me, e um grupo fenila opcionalmente substituído.
R7 [0273]R7 é selecionado a partir de H, R, OH, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', nitro, Me3Sn e halo;
[0274]R7 pode preferencialmente ser selecionado a partir de H, OR, SH, SR, NH2, NHR, NRR', e halo.
[0275]R7 pode ser selecionado mais preferencialmente a partir de H e OR.
[0276]Em algumas modalidades, R7 é OR, e mais particularmente OR7A, onde R7A é independentemente alquila C1-7 opcionalmente substituída.
[0277]R7A pode ser selecionado dentre alquila saturada opcionalmente substituída C1-7 e alquenila opcionalmente substituída C2-4.
[0278]R7A pode preferencialmente ser selecionado dentre Me, CH2Ph e alila. [0279]R10/R11 [0280]R10 e R11 formam, em conjunto, uma ligação dupla, ou são selecionados dentre H e QRQ respectivamente, onde Q é selecionado dentre O, S e NH e RQ é H ou alquila C1-7 ou H e SOxM, onde x é 2 ou 3, e M é um cátion monovalente farmaceuticamente aceitável;
[0281]Em algumas modalidades, R10 e R11 forma uma ligação dupla juntos.
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41/75 [0282]Em algumas modalidades, R10 é H e R11 é ORQ. Nessas modalidades, RQ pode preferencialmente ser selecionado dentre H ou Me.
[0283]Em algumas modalidades, R10 é H e R11 é SOxM. x pode preferencialmente ser 3, e M pode preferencialmente ser Na+.
R1 [0284]R1 é alquila C1-4.
[0285]R1 pode preferencialmente ser C1-2 alquila, e mais preferencialmente metila.
[0286]A é selecionado de A1, A2, A3, A4 ou A5.
X1 e Y1 [0287]Para cada um dentre A1, A2, A3, A4 e A5, X1 e Y1 são selecionados dentre: CH e NH; CH e NMe; N e NMe; CH e S; N e S; N e O; e CH e O, respectivamente.
[0288]Preferencialmente, X1 e Y1 são selecionados dentre: CH e NMe; N e NMe; CH e S; e CH e O, respectivamente. De máxima preferencialmente, X1 e Y1 são selecionados dentre N e NMe e CH e NMe, respectivamente.
F [0289]F é selecionado dentre uma ligação simples e -(E-F1)m-.
[0290]Quando F for -(E-F1)m-, cada E é selecionado independentemente dentre uma ligação simples, e -C(=O)-NH-; cada F1 é independentemente um grupo heteroarileno C3-20; e m é 1,2 ou 3.
[0291]Preferencialmente, F1 é um C5-6 heteroarileno grupo, mais preferencialmente um grupo heteroarileno C5. Mais preferencialmente, F1 é representado pela estrutura F11:
(F11)
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42/75 [0292]em que X3 e Y3 são selecionados dentre: CH e NH; CH e NMe; N e NMe; CH e S; N e S; N e O; e CH e O, respectivamente. Preferencialmente X3 e Y3 são selecionados dentre: CH e O; e CH e NMe, respectivamente.
[0293]Assim, as estruturas preferenciais de F11 são:
[0294]Cada E é selecionado independentemente a partir de uma ligação simples e -C(=O)-NH-. Em algumas modalidades, cada E é -C(=O)-NH-.
[0295]m é 1,2 ou 3. Preferencialmente m é 1. Em outras modalidades, m é 3.
[0296]Em algumas modalidades F é uma ligação simples.
[0297]G é selecionado dentre hidrogênio, alquila C1-4, alquila -C(=O)-O-C1-4, -(CH2)n-C3-20 heterocicloalquila, e grupo -O-(CH2)n-C3-20 heterocicloalquila; e cada n é 0 a 4.
[0298]Preferencialmente, o grupo heterocicloalquila C3-20 é um grupo morfolina. Preferencialmente, G é selecionado a partir do grupo que consiste em -H, -Me, -C(=O)-O-Me, -(CH2)n-N(CH2CH2OCH2CH2), e -O-(CH2)n-N(CH2CH2OCH2CH2).
[0299]n é 0 a 4. Assim, n pode ser 0, 1, 2, 3 ou 4.
Combinações Preferenciais de F e G [0300]Em algumas modalidades, G e pelo menos uma das unidades (-E-F1)de F são fornecidos pelas estruturas FG1 e FG2:
OMe
(FG1),
(FG2).
[0301]FG1 e FG2 podem ser combinadas com outras unidades -(E-F1)- de F
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43/75 se m for 2 ou 3.
A1 [0302]A1 é representado pela estrutura:
(A1) [0303]Z1 é O ou S. Preferencialmente X1 e Y1 são selecionados dentre CH e
NMe, e N e NMe.
[0304]Assim, as estruturas preferenciais de A1 são A11, A12, A13 e A14:
X1 |
Y1 |
Z1 |
A1 |
CH |
NMe |
O |
i \ o
V /Z^N^^X //
(A11) |
N |
NMe |
O |
G^\=\
I \ O
Η N—7
(A12) |
CH |
NMe |
S |
G-F\ / V o
ΧΪ
Η N—J
(A13) |
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44/75
[0305]A2 é representado pela estrutura:
(A2) [0306]Preferencialmente X1 e Y1 são selecionados dentre CH e NMe, e N e
NMe. Assim, as estruturas preferenciais de A2 são A21, A22, A23 e A24:
X1 |
Y1 |
Z2 |
A2 |
CH |
NMe |
CH |
Η N—J
/ (A21) |
N |
NMe |
N |
Χ^λ Λ N__i
(A22) |
N |
NMe |
CH |
G^r. o
Η N—
(A23) |
CH |
NMe |
N |
(A24) |
[0307]Preferencialmente, -F-G é disposto na posição para do grupo fenileno ou piridinila de A2.
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45/75 [0308]Quando A2 for representado pelas estruturas A21 ou A23, A pode não ser A2':
[0309]em que X1 e Y1 de A2' são selecionados dentre: CH e NMe e N e NMe, respectivamente;
[0310]B é uma ligação simples ou:
[0311 ]em que X e Y de (B1) são selecionados dentre: CH e NMe; COH e NMe;
CH e S; N e NMe; N e S, respectivamente; e [0312]R1 é alquila Ci-4.
A3 [0313]A3 é representado pela estrutura:
(A3) [0314]Preferencialmente, X1 e Y1 são selecionados dentre CH e NMe, N e
NMe, e CH e O.
[0315]Preferencialmente X2 e Y2 são selecionados dentre CH e NMe, e N e
NMe.
[0316]Assim, as estruturas preferenciais de A3 são A31, A32, A33, A34, A35 e A36:
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CH |
NMe |
CH |
NMe |
Η N—J
(A31) |
CH |
NMe |
N |
NMe |
G F' ?> íT^i >
\=n Λ .. JI —j—|
11^ Η /N—-<
(A32) |
N |
NMe |
CH |
NMe |
g^f\__ o
Η N—J
(A33) |
N |
NMe |
N |
NMe |
g^f\ 9
>=N Λ N II
11^
Η N—J
(A34) |
CH |
O |
CH |
NMe |
G>\
H
(A35) |
CH |
O |
N |
NMe |
g^f\ °
\=N Λ .. II
H O—V
(A36) |
[0317]Preferencialmente, a porção de PBD do composto é disposta na posição para do grupo fenileno de A3.
[0318]Quando A3 for representado pelas estruturas A31 ou A32, A pode não ser A3':
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(A3') [0319]em que X2 e Y2 de A3' são selecionados dentre: CH e NMe; COH e
NMe; CH e S; N e NMe; N e S, respectivamente;
[0320]B é uma ligação simples ou:
[0321]em que X e Y de B1 são selecionados dentre: CH e NMe; COH e NMe;
CH e S; N e NMe; N e S, respectivamente; e [0322]R1 é alquila C1-4.
A4 [0323]A4 é representado pela estrutura:
[0324]Preferencialmente, X1 (A4) e Y1 são CH e O e Z1 é NMe. Assim, uma estrutura preferencial de A4 é A41:
(A41)
A5 [0325]A5 é representado pela estrutura
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[0326]Preferencialmente X1 e Y1 são selecionados dentre CH e NMe, e CH e
O. E ntão, as estruturas preferenciais de A5 são dadas como A51, A52, A53 e A54:
X1 |
Y1 |
Z2 |
A5 |
CH |
NMe |
CH |
G—F θ
V \ //
Η N—J
/ (A51) |
CH |
O |
CH |
'λ
H 0 (A52) |
CH |
NMe |
N |
'j Q N
/ (A53) |
CH |
O |
N |
p__-F O
1/-ví //
H 0 (A54) |
[0327]Quando Z2 de A5 for CH, F é preferencial uma ligação simples.
[0328]Os compostos preferenciais da presente invenção são conforme segue:
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40 |
H
' Meo 0 |
49 |
H
L N /^\ yN—/
LI Z5 yZl
°<. / MeO
N^Z \=/
/ |
51 |
H
NS!rS^XX> -z-s. Ο.
c> J L II __! y—r O
°y—/ MeO
\=J
/ |
52 |
<nk jrV^-\ n=x£-\
—'o—\ JT N /=( i>
J O-d V ^hUZ
οΐί>—\ θ\ /—J /—7lí
^O~O-N Me° ° |
53 |
t Η /Ά N-'
nxJL o—g λ—<
0 y-v 0
J ,__, '4—f MeO
0 rY/VN
N^Z \=J |
54 |
och3
0^/ 3 H
A NtfSXXx^
—n j /=( N^y
JN o
oA^. ΖΓΠΧ Y-1 MeO |
56 |
och3
05sZ
—Ν ] H
\s=^L^
Ti
,° -\J~i J \\ /— / 0
O^XssSk /“Ά /— Me0
1 >--(/ 7—N
o^Z \_/ |
59 |
H /—\ 0 --Xk /
χ XOCH, N* N
N -5 \-^^Ο
Ύ O
°γΝ ° οΜθ
o4
7 N
0 Z^V
-Ο-n
0 o r |
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51/75 [0329]Os compostos 26, 27, 28, 35, 54, e 56 são preferenciais. Os compostos 26, 27, e 35 são mais preferenciais, e o composto 35 é particularmente preferencial.
Exemplo
Métodos Gerais [0330]As rotações ópticas foram medidas em um polarímetro ADP 220 (Bellingham Stanley Ltd) e as concentrações (c) são fornecidas em g/100 ml. Os pontos de fusão foram medidos com o uso de um aparelho de ponto de fusão digital (Eletrotérmico). Os espectros de IR foram gravados em um espectrômetro de IR Perkin-Elmer Spectrum 1000 FT. Os espectros RMN de 1H e 13C foram adquiridos a 300 K com o uso de um espectrômetro de RMN Bruker Advance a 400 e 100 MHz, respectivamente. Os deslocamentos químicos são reportados em relação ao TMS (δ = 0,0 ppm) e os sinais são designados como s (singleto), d (dupleto), t (tripleto), dt (duplo tripleto), dd (dupleto de dupletos), ddd (duplo dupleto de dupletos) ou m (multipleto), com as constantes de acoplamento fornecidas em Hertz (Hz). Um sistema de numeração de pró-PBD é usado para atribuições de próton e carbono para intermediários sintéticos (isto é, com base no sistema de anel de PBD tricíclico final). Os dados de espectrometria de massa foram coletados com o uso de um instrumento Waters Micromass ZQ acoplado a um Waters 2695 de HPLC com um Waters 2996 de PDA. Os parâmetros ZQ de Waters Micromass usados foram: capilar (kV), 3,38; Cone (V), 35; Extrator (V), 3,0; Temperatura de fonte (°C), 100; Temperatura de Dessolvatação (°C), 200; Taxa de fluxo de cone (L/h), 50; Taxa de fluxo de dessolvatação (L/h), 250. Os dados de espectrometria de alta resolução foram gravados em um Waters Micromass QTOF Global em modo W positivo com o uso de pontas de vidro de borossilicato revestidas com metal para introduzir as amostras no instrumento. A Cromatografia de Camada Fina (Thin Layer Chromatography (TLC)) foi realizada em placas de alumínio de gel de sílica (Merck 60, F254) e a cromatografia de flash utilizou gel de sílica (Merck 60, ASTM de 230 a 400 malhas). As reações
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52/75 paralelas foram conduzidas com o uso de um RadleysTM Green House Synthesizer (Sintetizador de Estufa) e as purificações paralelas foram conduzidas com o uso de um IST VacmasterTM. Para as reações conduzidas em paralelo, os solventes foram evaporados com o uso de um Genevac VC 2000D (Genevac Technologies, UK). Os compostos purificados foram secos por congelamento com o uso de um secador por congelamento Heto-Lyolab 3000. As reações de hidrogenação foram conduzidas com o uso de um gerador de hidrogênio UHP-60H fixado a um aparelho de hidrogenação Parr. Os blocos de construção sintéticos foram adquiridos a partir de Maybridge Chemicals (UK), Bachem Chemicals (USA) e Sigma-Aldrich (UK). Os reagentes e solventes foram adquiridos a partir de Sigma-Aldrich (UK).
Síntese de Intermediários (a) 4-(4-(tert-butoxicarbonilamino)fenil)-1-metil-1 H-pirrol-2-carboxilato de metila (5) (i) 2-(tricloroacetil)-1-metila pirrol (2) [0331 ]Uma solução de N-metila pirrol (1 )(113,06 g, 1,39 mol, 1,0 eq.) em éter seco (350 ml) foi adicionado em gotas sobre um período de 1 hora e 10 minutos a uma solução agitada de cloreto de tricloroacetila (254 g, 1,39 mol, 1,0 eq.) em éter seco (350 ml) em um 2 L, 3 frasco com gargalo. O gás HCl produzido em na reação foi removido através de purgação com nitrogênio. A mistura de reação pôde ser agitada durante 1,5 hora e o progresso da reação foi monitorado regularmente através de TLC e LCMS. Após 1,5 hora a reação foi bruscamente arrefecida com o uso de solução de 1 M de K2CO3. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (3 x) e as camadas orgânicas foram combinadas e concentradas em vácuo. O resíduo cristalino foi lavado com n-hexano e , por fim, seco a vácuo. O rendimento - 281,18 g, 79,5%, RMN comparado com a literatura de IR, (FTIR, vmax /cm-1) 3299, 3121, 3008, 2954, 1789, 1674, 1521, 1406, 1206, 1100, 980, 881, 757; 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,42 (1H, dd, J = 4,4, 1,6 Hz), 6,97 (1H, t, J = 1,6 Hz), 6,22 (1H, dd, J =
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53/75
4,4, 2,4 Hz) 3,97 (3H, s); 13C RMN (CDCI3, 400 MHz): δ 133,6, 124,0, 122,4, 108,9, 38,5.
(ii) 1 -(4-bromo-1 -metil-1 H-pirrol-2-il)-2,2,2-tricloroetanona (3) [0332]NBS (N-Bromosuccinimida, 2,36 g, 13,24 mmol, 1,0 equiv.) foi adicionado a uma solução agitada de 2-(tricloroacetil)-1-metilpirrol (2) (3 g, 13,24 mmol, 1,0 equiv.) em THF anidrido (35 ml) a -10 °C. A mistura de reação foi mantida a -10 °C durante 2 horas e então deixada para alcançar a temperatura ambiente (aproximadamente 4 horas). O excesso de THF foi evaporado a vácuo e o sólido foi redissolvido em uma mistura de EtOAc/n-hexano (1:9). A mistura resultante foi filtrada através de um plugue de sílica e o filtrado foi evaporado a vácuo. O sólido resultante foi recristalizado a partir de n-hexano para fornecer 3 (3,55 g, 88%). IR (FTIR, ymax /cm-1): 3148, 2956, 1669 (C=O),1458, 1215, 1189, 1062, 923, 842, 823, 748, 678; 1HRMN (CDCl3, 400 MHz) δ 7,46 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,95 (1H, d, J = 1,6 Hz) 3,95 (3H, s); 13C RMN (CDCl3, 100 MHz): δ 172,4, 132,8, 124,6, 132,2, 96,1, 38,7; EIMS m/z (+EI) calc. para C7H5BrCl3NO (M)+ 305,38, a análise LCMS encontrou 306,86 (M+H)+ (iii) 4-bromo-1-metil-1H-pirrol-2-carboxilato de metila (4) [0333]Para uma solução agitada de 1-(4-bromo-1-metil-1H-pirrol-2-il)-2,2,2tricloro-etanona (3) (3,28 g, 10,74 mmol, 1 eq..) em MeOH seco (30 ml), uma solução de metóxido de sódio (0.5 ml) foi adicionada por uma seringa. A solução de metóxido de sódio foi preparada a partir de NaH 60% em óleo mineral (43 mg, 1,07 mmol, 0,1 eq..), que foi anteriormente lavado com n-hexano. A solução foi aquecida para refluir ao longo de um período de 30 minutos, quando a análise de TLC mostrou o consumo completo do material inicial. Poucas gotas de H2SO4 concentrado foram adicionadas à solução para neutralizar a base (pH 2). O excesso de MeOH foi evaporado a vácuo e o óleo resultante foi redissolvido em EtOAc (50 ml) e lavado com água (40 ml). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 40 ml) e as fases orgânicas foram
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54/75 combinadas, secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo para proporcionar o produto como um sólido branco pálido. (2,28 g, 97%). IR (FTIR, νmax /cm-1): 3138, 2948, 1692, 1472, 1334, 1245, 1115, 1082, 921, 823, 753; 1H-RMN (400 MHz, CDCl3): δ 6,89 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 3,89 (s, 3H), 3,81 (s, 3H); 13C-RMN (100 MHz, CDCl3): δ 160,8, 128,7, 122,9, 119,2, 95,1,51,2, 36,9; EIMS m/z (+EI) calc. para C7H8BrNO2 (M)+ 218,05 encontrou 219,26 (M+H)+ (iv) 4-(4-(tert-butoxicarbonilamino)fenil)-1-metil-1 H-pirrol-2-carboxilato de metila (5) [0334]Uma quantidade catalítica de tetracis(trifenilfosfina)paladino, Pd(PPh3)4 (0,477g, 0,413, 0,06 eq.) foi adicionada a uma solução de 4 (1,5 g, 6,88 mmol, 1 eq.) e ácido (4-((tert-butoxicarbonil)amino)fenil)borônico (1,57 g, 6,88 mmol, 1,20 eq.) em um 9:3:1 combinação (13,5 ml) de EtOH, tolueno e água na presença de K2CO3 (2,856 g, 3 eq..) em um recipiente de micro-ondas de 10 a 20 ml que contém um agitador magnético. O vaso de reação foi purgado com o nitrogênio durante cada adição. A mistura de reação foi vedada em um a atmosfera inerte de N2 e aquecida com radiação de micro-ondas em uma estação de otimizador de micro-ondas EMRYS™ (Optimizer Microwave Station) (Química Pessoal) a 100 °C durante 12 minutos. Após as análises de LCMS e TLC revelarem a conclusão da reação, a mistura de reação resfriada foi diluída com água (50 ml), extraída com EtOAc (3 x 40 ml), os filtrados combinados, secos sobre MgSO4 e concentrados a vácuo. O óleo resultante foi submetido à cromatografia de flash (n-hexano/EtOAc 9:1) para fornecer 5 (Rendimento - 2,2 g, 97%). IR (FTIR, νmax /cm-1): 3353, 2975, 1696, 1521, 1441, 1366, 1264, 1235, 1209, 1058, 822, 799, 657; 1H-RMN (400 MHz, CDCl3): δ 7,40 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,33 (d, 2 H, J = 8,8 Hz), 7,16 (d, 1H, J = 2,0 Hz,), 7,02 (d, 1H, J = 2,0), 6,45 (br s, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 1,52 (s, 9H); 13C-RMN (100 MHz, CDCl3): δ 161,7, 152,8, 136,5, 129,5, 125,9, 125,6, 123,7, 123,0, 119,0, 114,6, 80,5, 51,1, 36,9, 28,4; EIMS m/z (+EI) calc. para C18H22N2O4 (M)+ 330,38 encontrou
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55/75
330,46 (M+H)+ (b) ácido 4-(4-(terc-butoxicarbonilamino)fenil)-1-metil-1H-pirrola-2-carboxílico (6)
![Figure BR112014027190B1_D0037](https://patentimages.storage.googleapis.com/13/17/c8/efa0edf11e7ddf/BR112014027190B1_D0037.png)
6 [0335]Uma solução de 0,5 M de NaOH (2,0 eq) foi adicionada a uma solução de 5 (1,0 g, 3,027 mmol) em dioxano (40 ml). Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada à temperatura ambiente durante 6 horas as quais o ponto TLC revelou término de reação. 1,4-dioxano em excesso foi evaporado a vácuo e o resíduo foi diluído com água. A solução resultante foi acidificada com 0,5 M de HCl. O produto foi extraído da água com 2 x acetato de etila (100 ml x 2) e as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas em MgSO4 e concentradas em vácuo. O produto foi purificado com o uso de cromatografia flash (acetato de etila/n-hexano 2:8). Rendimento - 0,92 g, 96,8%. IR (FTIR, vmax /cm-1): 3371, 2979, 1698, 1671, 1522, 1445, 1367, 1285, 1161, 1112, 1047, 823, 803, 762, 714, 631; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,33 (1H, s), 7,55 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,50 (d, 2 H, J = 8,8 Hz), 7,36 (d, 1H, J = 2,0 Hz,), 7,22 (d, 1H, J = 2,0), 3,97 (s, 3H), 1,50 (s, 9H); RMN de 13C (100 MHz, CDCl3): δ 162,3, 153,7, 138,6, 123,0, 127,1, 126,0, 124,4, 124,0, 119,5, 115,1, 79,9, 36,9, 28,6; EIMS m/z (+EI) calculados para C17H20N2O4 (M)+ 316,35 obtidos 315,16 (M+H)+ (c)
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(i) 4-(4-aminofenil)-1-metil-1H-pirrola-2-carboxilato de metila (7) [0336]5 (1g, 3,027 mmol) foi dissolvido em um pequeno volume de MeOH e 4M de HCl em dioxano (15 ml) foi adicionado lentamente à solução sendo agitada. A mistura de reação foi agitada durante 6 horas quando TLC mostrou término de reação. Solvente em excesso foi evaporado a vácuo para obter um sólido de cor marrom 7. O produto sólido foi submetido à cromatografia flash (n-hexano/EtOAc 9:1) para gerar 7 puro (065 g, 94,2%). IR (FTIR, ymax /cm-1): 3.366, 2.987,1.688, 1.629, 1.566, 1.422, 1.372, 1.262, 1.181, 1.103, 1.067, 951, 821, 784, 756; RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 7,28 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,11 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,96 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,68 (d, 2 H, J = 8,0 Hz), 3,94 (s, 3H), 3,83 (s, 3H); RMN de 13C (100 MHz, CDCla): δ 161,7, 144,7, 126,2, 125,4,125,2, 115,5, 114,4, 51,0, 36,8; EIMS m/z (+EI) calculados para C13H14N2O2 (M)+ 230,26 obtidos 231,1 (M+H)+
(i)
4-(4-(4-aminofenil)-1-metil-1H-pirrola-2-carboxamido)-1-metil-1H-pirrola-2carboxilato de metila (9) [0337]Dois eq de EDCI e 2,5 eq de DMAP foram adicionados a uma solução agitada de 6 (0,45 gm, 1,2 eq) em DMF (8 ml) e permitiu-se que a mistura fosse agitada
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57/75 durante 30 minutos após a mesma metila 4-amino-1-metil-1H-pirrola-2-carboxilato (0,18 g, 1,18 mmol, 1,0 eq) comercialmente disponível foi adicionada. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante um adicional de 6 horas quando TLC mostrou término de reação. A reação foi arrefecida vertendo-se a mesma sobre uma mistura de mistura de gelo/água e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 150 ml). Os extratos combinados foram sequencialmente lavados com ácido cítrico (100 ml), NaHCO3 aquoso saturado (100 ml), água (100 ml), salmoura (100 ml) e finalmente secos em MgSO4. O acetato de etila em excesso foi evaporado através de evaporador rotatório sob pressão reduzida e o produto cru 9a (0,58 gm, rendimento 90,6%) foi usado para a etapa de desproteção de boc para proporcionar 9 sem purificação adicional. Para desproteção de boc, 0,29 gm de 9a foi dissolvido em um pequeno volume de MeOH e 4M de HCl em dioxano (15 ml) foi adicionado lentamente à solução sendo agitada. A mistura de reação foi agitada durante 6 horas quando TLC mostrou término de reação. O solvente em excesso foi evaporado a vácuo para obter um sólido de coloração marrom (9). O produto sólido foi submetido à cromatografia flash (n-hexano/EtOAc 9:1) para gerar 9 puro. Rendimento 0,21 gm, 95%.
(ii) 4-(4-(4-(4-aminofenil)-1 -metil-1 H-pirrola-2-carboxamido)- 1-metil-1Hpirrola-2-carboxamido)-1-metil-1H-pirrola-2-carboxilato de metila (10) [0338]Hidróxido de lítio (68 mg, 1,65 mmol, 3 eq) foi adicionado à 9a (0,25 g, 0,55 mmol) em dioxano aquoso (8 ml dioxano, 4 ml água) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas quando TLC mostrou término de reação. Dioxano foi evaporado sob alto vácuo e o resíduo foi diluído com água. A solução resultante foi acidificada com 1 M de ácido cítrico seguido de extração com acetato de etila (2 x 50 ml). A camada orgânica combinada e lavada com salmoura (50 ml), seca em MgSO4 e finalmente concentrada com o uso de um evaporador rotatório sob pressão reduzida para obter o ácido hidrolisado a partir de 9a como um sólido branco (rendimento 0,23 g, 91,6%). A uma solução sendo agitada do sólido branco (0,23 gm,
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0,52 nmol) em DMF, 2,0 equivalente de EDCI e 2,5 equivalente de DMAP foi adicionado. Após agitar a mistura durante 20 minutos, metila 4-amino-1-metil-1Hpirrola-2-carboxilato comercialmente disponível (80,1 mg, 0,52 mmol, 1,0 eq) foi adicionado. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante 3 horas adicionais quando TLC mostrou término de reação. A reação foi arrefecida vertendose a mesma sobre uma mistura de mistura de gelo/água e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). Os extratos combinados foram sequencialmente lavados com NaHCO3 aquoso saturado (50 ml) e salmoura (50 ml) e finalmente secos em MgSO4. Acetato de etila em excesso foi evaporado pelo evaporador rotatório sob pressão reduzida e o produto cru foi usado para a etapa de desproteção de boc para proporcionar 10. Para desproteção de boc, o intermediário cru foi dissolvido em um pequeno volume de MeOH e 4M de HCl em dioxano (5 ml) foi adicionado lentamente à solução sendo agitada. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas quando TLC mostrou término de reação. O solvente em excesso foi evaporado a vácuo para obter um sólido de coloração marrom (10). O produto sólido foi submetido à cromatografia flash (n-hexano/EtOAc 8:2) para gerar 10 puro. Rendimento 0,20 gm, 83% ao longo de 2 etapas.
[0339]RMN de 1H (DMSO, 400 MHz): δ 9,72 (1H, s), 8,09 (1H, t, J = 5,6 Hz), 7,71 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,49 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,40 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,27 (1H, d, J = 2,0), 7,19 (1H, d, J = 2,0), 7,03 (1H, dd, J = 4,0, 1,6 Hz), 7,00 (1H, t, J = 2,0 Hz), 6,84 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,10 (1H, m), 3,89 (3H, s). m/z (+EI) calculados para C25H26N6O4 (M)+ 474,51 obtidos 475,35 ([M+H]+
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4-(4-(4-aminofenil)-1-metil-1H-pirrola-2-carboxamido)-1-metil-1H-imidazola2-carboxilato de metila (11) [0340]0,3 gm de boc protegido 6 (0,94 mmol, 1,2 eq) foi dissolvido em DMF (5 ml) ao qual 2,0 eq de EDCI e 2,5 eq de DMAP foram adicionados. Permitiu-se que a mistura fosse agitada durante 30 minutos, após a mesma metila 4-amino-1-metil-1Himidazola-2-carboxilato comercialmente disponível (0,121 g, 0,79 mmol, 1,0 eq) foi adicionada. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante 6 horas adicionais quando TLC mostrou término de reação. A reação foi arrefecida vertendose a mesma sobre uma mistura de mistura de gelo/água e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 150 ml). Os extratos combinados foram sequencialmente lavados NaHCO3 aquoso saturado (50 ml), água (50 ml), salmoura (50 ml) e finalmente secos em MgSO4. Acetato de etila em excesso foi evaporado através do evaporador rotatório sob pressão reduzida e o produto cru (0,48 gm) foi usado para a etapa de desproteção de boc para proporcionar 11. Para a desproteção de boc, o intermediário cru foi dissolvido em um pequeno volume de MeOH e 4M de HCl em dioxano (5 ml) foi adicionado lentamente à solução sendo agitada. A mistura de reação foi agitada durante 2 horas quando TLC mostrou término de reação. O solvente em excesso foi evaporado a vácuo para obter um sólido de coloração marrom (11). O produto sólido foi submetido à cromatografia flash (n-hexano/EtOAc 9:1) para gerar 11 puro. Rendimento 0,35 gm, 81% ao longo de duas etapas.
[0341]RMN de 1H (DMSO, 400 MHz): 9,75 (1H, s), 8,03 (1H, s), 7,71 (2H, d, J = 8,8 Hz, 7,53 (1H, s), 7,52 (1H, s), 7,48 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,42 (1H, s), 7,19 (1H, d, J = 2,0), 3,94 (3H, s), 3,91 (3H, s), 3,89 (3H, s). m/z (+EI) calculados para C18H19N5O3 (M)+ 353,38 obtidos 354,42 ([M+H]+ (f) ácido 4-( 10-(aliloxicarbonil)-7-metóxi-5-oxo-11-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)2,3,5,10,11,11a-hexahidro-1H-pirrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepino-8-iloxi)butanoico (13)
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![Figure BR112014027190B1_D0042](https://patentimages.storage.googleapis.com/f2/27/dd/e38f31db9354be/BR112014027190B1_D0042.png)
![Figure BR112014027190B1_D0043](https://patentimages.storage.googleapis.com/bf/37/64/87e689b03df012/BR112014027190B1_D0043.png)
[0342]Uma solução de 0,5 M de NaOH (feita a partir de 1,4135 g de NaOH) foi adicionada a uma solução de 12 (Composto 18, documento no WO 2007/039752) em dioxano à temperatura ambiente. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante 4 horas quando TLC mostrou término da reação. O dioxano foi evaporado sob alto vácuo e o resíduo foi diluído com água. A solução resultante foi acidificada com 1 M de ácido cítrico seguido de extração com acetato de etila (2 x 100 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 ml), secas em MgSO4 e finalmente concentradas com o uso de um evaporador rotatório sob pressão reduzida. Rendimento - 8,7 g, (94%), RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,2 (2H, s), 6,90 (1H, s), 6,58 (1H, s), 5,85 (2H, d, J = 9,2 Hz), 5,73 (2H, d, J = 9,2 Hz), 5,03-5,13 (m, 6H), 4,68-4,35 (m, 4H), 4,09-4,01 (m, 4H), 3,91-3,82 (m, 8H), 3,69-3,46 (m, 8H), 2,60-2,55 (m, 4H), 2,18-2,00 (m, 10H), 1,76-1,55 (m, 4H), 1,53-1,43 (m, 8H); RMN de 13C (100 MHz, CDCl3): δ 177,6, 167,6, 149,8, 132,1, 131,9, 126,7, 117,3, 114,9, 110,8, 100,7, 96,0, 91,7, 88,5, 67,9, 66,6, 63,6, 60,1, 56,1, 46,5, 31,1, 30,3, 28,8, 25,2, 24,1, 23,2, 20,0; EIMS m/z (+EI) calculadas para C26H34N2O9 (M)+ 518,56 obtidas 519,26 (M+H)+ [0343]Outros blocos de formação de amina Q1 e Q2 são comercialmente disponíveis ou sintetizadas de modo análogo.
Exemplo 1 (Compostos comparativos)
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Procedimento Experimental Geral para acoplar diferentes blocos de formação ao ácido PBD protegido com THP Aloc a diferentes blocos de formação. Exemplo fornecido aqui é para 15a. Procedimentos similares foram seguidos para obter outros híbridos de PBD protegido com THP Aloc ligado por C8.
7-metóxi-8-(4-(4-(5-(metoxicarbonil)-1 -metil-1 H-pirrol-3-il)fenilamino)-4oxobutoxi)-5-oxo-11-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-2,3,11,11a-hexahidro-1H-pirrolo[2,1c][1,4]benzodiazepina-10(5H)-carboxilato de (11aS)-alila (15a) [0344]Uma solução de ácido PBD protegido com THP Aloc 13 (3,72 g, 7,16 mmol, 1,2 equivalente) foi dissolvido em DMF. EDCI (2,49 g, 13,02 mmol, 2,0 eq) e DMAP (1,989 g, 16,28 mmol, 2,5 eq) foram adicionados à solução agitada de 13 à temperatura ambiente e permitiu-se que a mistura fosse agitada durante 30 minutos após a qual o MPB-éster 7 (1,5 g, 6,514 mmol, 1,0 eq) foi adicionado. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante 2 horas adicionais quando TLC mostrou término de reação. A reação foi arrefecida vertendo-se a mesma sobre uma mistura de mistura de gelo/água e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 150 ml). Os extratos combinados foram sequencialmente lavados com ácido cítrico (200 ml), NaHCOa aquoso saturado (250 ml), água (250 ml), salmoura (250 ml) e finalmente secos em MgSO4. O acetato de etila em excesso foi evaporado através de evaporador rotatório sob pressão reduzida e o produto cru foi purificado através de cromatografia flash de sílica gel (MeOH: CHCl3, 20:80) para gerar um sólido espumoso
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62/75 branco, 15a. Rendimento - 4,05 g, 85,5%.
(FTIR, vmax /cm-1): 2.949, 2.362, 1.704, 1.600, 1.514, 1.436, 1.372, 1.269, 1.203, 1.107, 1.021,964, 765. (RMN de 1H, 400 MHz, CDCLb): δ 7,82 (1H, s), 7,48 (2H, m), 7,41 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,40 (1H, d, J = 2,4 Hz), 7,23 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,17 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,04 (1H, d, J = 2,0 Hz), 5,93-5,65 (2H, m), 5,09-5,4,97 (m, 4H), 4,68-4,32 (m, 4H), 4,15-4,10 (m, 4H), 3,94-3,82 (m, 12H), 3,68 (m, 2H), 3,59-3,49 (m, 6H), 2,60-2,57 (m, 3H), 2,15-2,00 (m, 8H), 1,88-1,80 (m, 2H), 1,79- 1,70 (6H), 1,601,44 (m, 12H); (RMN de 13C, 100 MHz, CDCla): 177,1, 170,5, 167,3, 161,6, 149,1, 136,3, 132,1, 131,9, 130,4, 128,9, 127,1, 125,9, 125,4, 123,5, 123,1, 120,3, 117,3, 114,6, 110,8, 91,5, 88,6, 68,2, 66,5, 64,3, 63,6, 60,3, 56,0, 51,1,46,4, 36,8, 31,1,30,9,
29,1, 25,1,24,6, 23,2, 21,0, 20,1; m/z (+EI) calculados para C39H46N4O10 (M)+ 730,80 obtido 731,67 ([M+H]+
Procedimento Experimental Geral para obter a imina PBD final desprotegendo-se o híbrido de PBD protegido com THP Aloc ligado por C8. Exemplo fornecido aqui é para 16.
[0345]Tetraquis[trifenilfosfina] paládio (5,60 mg, 4,8 pM, 0,05 equiv) foi adicionado a uma solução de conjugado de PBD THP Aloc 15a (70 mg, 0,097 mmol), pirrolidina (8,36 mg, 0,117 mmol, 1,2 eq) e trifenilfosfina (8,62 mg, 0,25 equiv) em DCM (5 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas quando TLC mostrou término de reação. DCM em excesso foi removido através de evaporação rotatória sob pressão reduzida e o resíduo resultante seco em vácuo para remover pirrolidona. O produto foi purificado através de cromatografia em coluna (eluído com n-hexano 651-7, EtOAc 35%) para gerar o produto como um sólido amarelado, 3,37 (40 mg, 77%). [o]22-7d + 165° (c = 0,046, CHCl3); IR (FTIR, vmax /cm1): 3.297, 2.944, 2.358, 1.701, 1.598, 1.567, 1.508, 1.442, 1.374, 1.264, 1.212, 1.181, 1.106, 1.072, 824, 730; RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 7,68 (1H, s), 7,65 (1H, d, J =
4,5 Hz, H-11), 7,52 (1H, s, H-6), 7,46 (2H, dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 2Ar-H), 7,40 (2H, dd, J
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63/75 = 8,4, 2,0 Hz, 2Ar-H), 7,16 (1H, d, J = 2,0 Hz, Py-H), 7,03 (1H, d, J = 1,6 Hz, Py-H), 6,82 (1H, s, H-9), 4,12-4,20 (ligante de cadeia lateral CH2, m, 2H), 3,94 (3H, s, NCH3), 3,88 (3H, s, O-CH3), 3,68-3,71 (1H, m, H-11a) , 3,50-3,60 (2H, m, H2-3), 2,582,62 (2H, m, CH2), 2,26-2,31 (4H, m, CH2), 1,50-1,54 (2H, m, CH2); RMN de 13C (125 MHz, CDCIs): δ 164,5, 162,4, 161,6, 150,5, 147,8, 140,7, 125,9, 125,5 (2C), 123,6,
123.1, 120,3, 114,6, 111,8, 111,0, 94,4 (2C), 68,0, 63,7, 56,1, 53,7, 51,0, 46,6, 36,8, 31,9, 29,6, 25,2, 24,8, 24,1,20,2; HRMS m/z (+EI) calculados para C30H32N4O6 (M+H)+ 545,2400 obtido 545,2422 (M+H)+, δ 4ppm [0346]Composto 18 foi feito de um modo análogo.
5-(4-(4-( (7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)tiofeno-2-carboxilato de (S)-metíla (18).
RMN de 1H (500 MHz, CDCI3): δ 7,75 (1H, s), 7,69 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,58 (1H, s), 7,49 (2H, d, J = 8,4), 7,23 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,13 (1H, d, J = 4,0 Hz), 4,24 (ligante de cadeia lateral CH2, m, 2H), 3,90 (3H, s, O-CH3), 3,86 (3H, s, O-CH3), 3,71 3,73 (1H, m, H-11 a), 3,50-3,60 (2H, m, H2-3), 2,55-2,67 (2H, m, CH2), 2,23-2,33 (4H, m, CH2), 1,56-1,74 (2H, m, CH2); RMN de 13C (125 MHz, CDCI3): δ 164,5, 162,5, 161,4, 150,6, 147,7, 140,6, 134,5, 132,9, 132,1, 131,9, 128,6, 126,8, 120,3, 114,6, 111,8, 111,0, 94,4 (2C), 68,0, 63,7, 56,1, 53,7, 52,1,46,6, 36,8, 31,9, 29,6, 25,2, 24,8,
24.1, 20,2;HRMS m/z (+EI) calculados para C29H29N3O6S (M+H)+ 547,6200 obtido 547,6422 (M+H)+
Exemplo 2 (Compostos da presente invenção)
ex. 26a ex. 26
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[0347]Procedimento Experimental Geral para acoplar diferentes (Q1) blocos de formação ao ácido 13 PBD protegido por THP Aloc a diferentes blocos de formação. Exemplo fornecido aqui é para 14a. Procedimentos similares foram seguidos para obter outros intermediários híbridos de PBD protegidos com THP Aloc ligado por C8.
ácido (4-((( 11S, 11aS)-10-((aliloxi)carbonil)-7-metóxi-5-oxo-11-((tetrahidro2H-piran-2-il)oxi)-2,3,5,10,11,11a-hexahidro-1H-benzo[e]pirrolo[1,2-a][1,4]diazepin-8il)oxi)butanamido)-1 -metil-1 H-pirrola-2-carboxílico (14a).
[0348]Uma solução de ácido PBD protegido por THP Aloc 13 (1,85 g, 3,57 mmol, 1,2 equivalente) foi dissolvido em DMF. EDCI (1,24 g, 6,48 mmol, 2,0 eq) e DMAP (0,99 g, 8,1 mmol, 2,5 eq) foram adicionados à solução agitada de 13 à temperatura ambiente e permitiu-se que a mistura fosse agitada durante 30 minutos após a qual metila 4-amino-1-metil-1H-pirrola-2-carboxilato comercialmente disponível (0,5 g, 3,243 mmol, 1,0 eq) foi adicionado. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante 6 horas adicionais quando TLC mostrou término de reação. A reação foi arrefecida vertendo-se a mesma sobre uma mistura de mistura
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65/75 de gelo/água e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 150 ml). Os extratos combinados foram sequencialmente lavados com ácido cítrico (200 ml), NaHCO3 aquoso saturado (250 ml), água (250 ml), salmoura (250 ml) e finalmente secos em MgSO4. O acetato de etila em excesso foi evaporado através de evaporador rotatório sob pressão reduzida e o produto cru (1,88 gm) foi usado para reação de hidrólise para proporcionar 14a. Para hidrólise, hidróxido de Lítio (0,24 g, 5,71 mmol, 3 eq) foi adicionado ao produto cru (1,88 g, 2,87 mmol) em dioxano aquoso (75 ml dioxano, 11,5 ml de água) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 3 horas quando TLC mostrou término de reação. Dioxano foi evaporado sob alto vácuo e o resíduo foi diluído com água. A solução resultante foi acidificada com 1 M de ácido cítrico seguido de extração com acetato de etila (2 x 100 ml). A camada orgânica combinada e lavada com salmoura (100 ml), seca em MgSO4 e finalmente concentrada com o uso de um evaporador rotatório sob pressão reduzida para obter 14a como um sólido branco (rendimento, 1,68 gm, 74,0% ao longo de duas etapas).
RMN de 1H δ 9,09 (1H, s, NH), 7,39 (1H, d, J=2,0 Hz), 7,14 (1H, s, H-6), 7,12 (1H, s, H-6), 6,96 (1H, s, H-9), 6,76 (1H, d, J= 2,0 Hz, Py-H), 5,86-5,75 (2H, m, H-11), 5,13-4,84 (3H, m), 4,61-4,21 (2H,m), 4,06-3,88 (3H, m, cadeia lateral H-1, pirano H6), 3,87 (3H, s, O/NCH3), 3,87 (3H, s, O/NCH3), 3,86 (3H, s), 3,53-3,44 (3H, m), 2,552,45 (2H, m), 2,13-1,88 (6H, m), 1,70-1,39 (6H). m/z (+EI) calculados para C32H40N4O10 (M)+ 640,68 obtido 641,57 ([M+H]+
Procedimento experimental Geral para obter 26a de 14a acoplando-se blocos de formação de Q2 a blocos de formação Q1 contendo intermediários (por exemplo, 14a).
[0349]7-metóxi-8-(4-((5-((4-(5-(metoxicarbonil)-1-metil-1 H-pirrol-3il)fenil)carbamoil)-1-metil-1H-pirrol-3-il)amino)-4-oxobutoxi)-5-oxo-11-((tetrahidro-2Hpiran-2-il)oxi)-2,3,11,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2-a][1,4]diazepina-10(5H)carboxilato de (11S,11aS)-alila (26a).
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66/75 [0350]Uma solução de ácido Py de PBD protegido com THP Aloc 14a (150 mg, 0,23 mmol, 1,0 equivalente) foi dissolvido em DMF. EDCI (0,46 mmol, 2,0 eq) e DMAP (0,58 mmol, 2,5 eq) foram adicionados à solução agitada de 14a à temperatura ambiente e permitiu-se que a mistura fosse agitada durante 30 minutos após a qual o benzofuran-5-amina (38,3 mg, 0,29 mmol, 1,25 eq) foi adicionado. Permitiu-se que a mistura de reação fosse agitada durante 3 horas adicionais quando TLC mostrou término de reação. A reação foi arrefecida vertendo-se a mesma sobre uma mistura de mistura de gelo/água e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 150 ml). Os extratos combinados foram sequencialmente lavados com ácido cítrico (50 ml), NaHCOa aquoso saturado (50 ml), água (50 ml), salmoura (50 ml) e finalmente secos em MgSO4. O acetato de etila em excesso foi evaporado através de evaporador rotatório sob pressão reduzida e o produto cru foi diretamente usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
m/z (+EI) calculado para C40H45N5O10 (M)+ 755,91 obtido 756,76 ([M+H]+.
[0351]Compostos 26a, 27a, 28a, 30a, 31a, 35a, 37a, 39a, 40a, 49a, 51a, 52a, 53a, 54a e 56a foram obtidos de um modo análogo.__________
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Q2 |
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h3co
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\---/ n--' £ |
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Procedimento experimental geral para obter 26 de 26a através de desproteção de THP Aloc simultânea.
(i) (S)-N-(benzofuran-5-il)-4-(4-((7-metôxi-5-oxo-2,3,5!11a-tetrahidro-1Hbenzo[e]pirrolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-1H-pirrola-2carboxamida (26) [0352]Tetraquis[trifenilfosfina] paládio (12,17 mg, 10,5 μΜ, 0,05 equiv) foi adicionado a uma solução de conjugado de PBD THP Aloc 26a (154 mg, 0,21 mmol), pirrolidina (17,91 mg, 0,25 mmol, 1,2 eq) e trifenilfosfina (13,81 mg, 0,25 equiv) em DCM (5 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2h quando TLC mostrou término de reação. DCM em excesso foi removido através de evaporação rotatória sob pressão reduzida e o resíduo resultante seco in vacuo para remover pirrolidona. O produto foi purificado através de cromatografia líquida de desempenho alto (eluído com acetona:gradiente de água com 1% TFA) para gerar o produto como um sólido amarelo claro, 26 (38 mg, 36% após purificação de HPLC).
RMN de 1H (500 MHz, CDCl3): 7,98 (1H, s), 7,94 (1H, d, J=2,0 Hz), 7,83 (1H, s), 7,65 (1H, d, J=4,4 Hz), 7,59 (1H, d, J = 2,0 Hz), 7,52 (1H, s), 7,42 (1H, d, J = 9,0
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Hz), 7,33 (1H, dd, J=8,0 Hz, 2,0 Hz), 7,10 (1H, s), 6,82 (1H, s, H-9), 6,71 (1H,s) 4,064,14 (2H, m, CH2), 3,90 (3H, s, N-CH3), 3,88 (3H, s, O-CH3), 3,66-3,72 (1H, m, H-11a) , 3,50-3,59 (2H, m, H2-3), 2,47-2,54 (2H, m, CH2), 2,18-2,31 (4H, m, CH2), 1,95-2,08 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ 169,9, 164,6, 162,7,159,9, 151,9, 150,6,
147,7, 145,7, 140,6, 133,2, 132,1, 128,5, 127,8, 123,4(2C), 121,5, 120,5, 119,6, 118,0,
113,2, 111,8, 111,3, 111,0, 106,8 (2C), 103,9, 68,1, 56,2 (2C), 53,7, 46,7(2C), 36,7 (2C), 33,1, 29,8, 24,5, 24,1; HRMS m/z (+EI) calculados para C31H31N5O6 (M)+ 569,6900 obtido 569,6981 ([M+H]+) [0353]Compostos 27, 28, 30, 31,35, 37, 39, 40, 49, 51, 52, 53, 54 e 56 foram obtidos de um modo análogo.
ii) (S)-N-(benzo[b]tiofen-5-il)-4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 Hbenzo[e]pirrolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1 -metil-1 H-pirrola-2carboxamida (27)
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 8,23 (1H, d, J=4,5 Hz), 8,21 (1H, d, J=2,0 Hz), 7,74 (1H, d, J=8,4 Hz), 7,66 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,61 (1H, d, J=1,6 Hz), 7,53 (1H, d, J = 3,6 Hz), 7,48 (1H, s), 7,45 (2H, dd, J=8,0 Hz, 2,0 Hz), 7,39 (1H, s), 7,09 (1H, d, J=1,6 Hz), 6,80 (1H, s, H-9), 4,03-4,08 (2H, m, CH2), 3,85 (3H, s, N-CH3), 3,82 (3H, s, O-CH3), 3,63-3,69 (1H, m, H-11a) , 3,49-3,57 (2H, m, H2-3), 2,44-2,49 (2H, m, CH2), 2,15-2,29 (4H, m, CH2), 1,95-2,04 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ 169,9,
164,6, 162,7,160,0, 150,7, 147,7, 140,7, 140,1, 135,1, 132,8, 131,9, 128,6, 127,3,
123,9, 123,2, 122,5, 121,6, 120,4, 119,8, 118,1, 114,8, 111,8, 110,9, 104,2, 68,1,56,1 (2C), 53,7, 46,7(2C), 36,7 (2C), 32,9, 29,5, 24,9, 24,2;
iii) 5-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-1H-pirrola-2carboxamido)benzo[b]tiofeno-2-carboxilato de (S)-metila (28)
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 8,29 (1H, d, J=2,0 Hz), 8,10 (1H, s), 7,97 (1H, s), 7,76 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,73 (1H, s), 7,66 (1H, dd, J = 8,0 Hz, 2,0 Hz), 7,64 (1H,
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69/75 d, J=1,6 Hz), 7,55 (2H, dd, J=8,0 Hz, 2,0 Hz), 7,47 (2H, d, J = 3,0 Hz), 7,11 (1H, s), 6,83 (1H, s, H-9), 4,09-4,15 (2H, m, CH2), 3,93 (3H, s, N-CH3), 3,90 (3H, s, O-CH3), 3,87 (3H, s, O-CH3), 3,68-3,73 (1H, m, H-11 a) , 3,51 -3,60 (2H, m, H2-3), 2,49-2,57 (2H, m, CH2), 2,19-2,34 (4H, m, CH2), 1,94-2,09 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ
169.9, 164,6, 163,2,150,6, 147,7, 139,3, 137,66, 135,7, 134,3, 132,8, 132,1, 132,0,
131.9, 130,5, 128,6, 123,1, 122,5, 121,5, 120,9, 120,0, 116,1, 111,8, 104,2, 101,1,
68,1, 56,2 (2C), 53,7, 52,5, 46,7(2C), 36,7 (2C), 33,1,29,6, 25,0, 24,2;
iv) (S)-4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-N-(4-morfolinofenil)-1 H-pirrola-2carboxamida (30)
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 7,71 (1H, s), 7,65 (1H, d, J=4,6 Hz), 7,52 (1H, s), 7,46 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,06 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,87 (2H, d, J = 8,4 Hz), 6,82 (1H, s), 6,55 (1H, d, J=1,6 Hz), 4,05-4,19 (2H, m, CH2), 3,88 (3H, s, N-CH3), 3,85 (3H, s, OCH3), 3,73-3,82 (4H, m), 3,66-3,72 (1H, m, H-11a) , 3,52-3,60 (2H, m, H2-3), 3,03-3,13 (4H, m), 2,50-2,56 (2H, m, CH2), 2,19-2,33 (4H, m, CH2), 1,97-2,07 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCl3): δ 169,9, 164,6, 162,7, 159,6, 150,6, 148,1, 147,7, 130,8, 123,5,
121,5, 120,6, 119,5, 116,4, 111,8, 111,1, 103,8, 68,1, 66,9 (2C), 56,2 (2C), 53,7, 49,8, 46,7(2C), 36,7 (2C), 33,1,29,6, 25,0, 24,2;
v) (S)-4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-N-(6-morfolinopiridin-3-il)-1 H-pirrola-2carboxamida (31)
RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 8,23 (1H, s), 7,92 (1H, s), 7,89 (1H, d, J=8,4 Hz), 7,83 (1H, s), 7,65 (1H, d, J = 3,6 Hz), 7,51 (1H, s), 7,08 (1H, s), 6,82 (1H, s), 6,63 (1H, d, J=8,4 Hz), 6,56 (1H, s), 4,05-4,16 (2H, m, CH2), 3,91 (3H, s, N-CH3), 3,85 (3H, s, O-CH3), 3,74-3,82 (4H, m), 3,67-3,71 (1H, m, H-11a) , 3,51-3,61 (2H, m, H2-3), 3,413,48 (4H, m), 2,49-2,57 (2H, m, CH2), 2,17-2,26 (2H, m, CH2), 1,99-2,09 (2H, m); RMN de 13C (100 MHz, CDCla): δ 169,9, 164,5, 162,7, 159,9, 156,8, 150,6, 147,7, 140,6,
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131.5, 126,3, 123,0, 121,5, 120,6, 119,7, 111,9, 111,1, 106,8, 104,2, 68,1, 66,7 (2C), 56,2 (2C), 53,7, 46,7, 46,1(2C), 41,0, 36,7 (2C), 33,1,29,6, 25,0, 24,2;
vi) 5-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-1H-imidazola-2carboxamido)benzo[b]tiofeno-2-carboxilato de (S)-metila (35)
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 9,04 (1H, s), 8,35 (1H, s), 8,04 (1H, s), 7,74 (1H, d, J=8,4 Hz), 7,66 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,61 (1H, d, J=1,6 Hz), 7,53 (1H, d, J = 3,6 Hz), 7,48 (1H, s), 7,45 (2H, dd, J=8,0 Hz, 2,0 Hz), 7,39 (1H, s), 7,09 (1H, d, J=1,6 Hz), 4,10-4,22 (2H, m, CH2), 3,96 (3H, s, N-CH3), 3,94 (3H, s, O-CH3), 3,80 (3H, s, O-CH3), 3,66-3,71 (1H, m, H-11a) , 3,50-3,57 (2H, m, H2-3), 2,49-2,57 (2H, m, CH2), 2,21-2,34 (4H, m, CH2), 1,95-2,08 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ 169,9, 164,6,
163,2,150,6, 147,7, 139,3, 137,66, 135,7, 134,3, 132,9, 132,1, 132,0, 131,9, 130,5,
128.5, 123,2, 122,5, 121,5, 120,1, 120,0, 115,4, 114,8, 11,6, 111,0, 100,0, 67,7, 56,1 (2C), 53,7, 52,5, 46,7(2C), 35,8 (2C), 33,0, 29,6, 24,7, 24,1;
vii) (S)-4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-N-(4-morfolinofenil)-1 H-imidazola-2carboxamida (37)
RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 8,80 (1H, s), 7,98 (1H, s), 7,83 (1H, s), 7,64 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,54 (1H, s), 7,51 (2H, d, J=8,4 Hz), 7,40 (1H, s), 6,90 (2H, d, J = 8,4 Hz), 6,82 (1H, s), 4,05-4,18 (2H, m, CH2), 4,01 (3H, s, N-CH3), 3,95 (3H, s, O-CH3), 3,74-3,82 (4H, m), 3,67-3,71 (1H, m, H-11a) , 3,52-3,57 (2H, m, H2-3), 3,11-3,14 (4H, m), 2,61-2,63 (2H, m, CH2), 2,17-2,23 (2H, m, CH2), 2,02-2,09 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ 169,9, 164,5, 162,5, 156,4, 150,5, 148,3, 147,8, 140,7, 135,7,
133,9, 130,2, 120,9, 120,6, 116,3, 114,5 (2C), 111,6, 110,9, 67,8, 66,9 (2C), 56,1 (2C),
53,7, 49,7 (2C), 46,7, 35,8 (2C), 29,6, 24,8, 24,1;
viii) (S)-4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-N-(4-(2-morfolinoetoxi)fenil)-1 H-
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71/75 imidazola-2-carboxamida (39)
RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 8,80 (1H, s), 7,96 (1H, s), 7,83 (1H, s), 7,65 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,54 (1H, s), 7,51 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,41 (1H, s), 6,90 (2H, d, J =
8,8 Hz), 6,83 (1H, s), 4,17-4,22 (2H, m, CH2), 4,06-4,12 (4H, m), 4,06 (3H, s, N-CH3), 3,95 (3H, s, O-CH3), 3,72-3,79 (4H, m), 3,67-3,71 (1H, m, H-11a) , 3,52-3,57 (2H, m, H2-3), 2,79-2,81 (4H, m), 2,53-2,66 (6H, m, CH2), 2,31-2,29 (2H, m, CH2), 2,01-2,07 (2H, m); RMN de 13C (100 MHz, CDCla): δ 174,7, 169,5, 167,0, 162,5, 155,6, 149,4, 147,8, 147,8, 140,7, 135,7, 131,8, 130,9, 121,3, 120,6, 115,1, 111,6, 110,9, 67,8, 66,9 (2C), 66,0, 57,6, 56,1 (2C), 54,0, 53,7, 48,2 (2C), 46,7, 35,8 (2C), 33,0, 29,6, 24,8,
24,2, 24,1;
ix) (S)-4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)-1-metil-N-(6-morfolinopiridin-3-il)-1 H-imidazola-2carboxamida (40)
RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 8,73 (1H, s), 8,27 (1H, s), 7,98 (2H, m), 7,64 (1H, d, J = 3,6 Hz), 7,53 (1H, s), 7,42 (1H, s), 6,82 (1H, s), 6,64 (1H, d, J=7,2 Hz), 4,074,22 (2H, m, CH2), 4,04 (3H, s, N-CH3), 3,93 (3H, s, O-CH3), 3,78-3,85 (4H, m), 3,673,72 (1H, m, H-11a) , 3,52-3,59 (2H, m, H2-3), 3,44-3,5 (4H, m), 2,58-2,65 (2H, m, CH2), 2,23-2,34 (2H, m, CH2), 2,00-2,08 (2H, m); RMN de 13C (100 MHz, CDCla): δ
169.6, 164,5, 162,7, 159,9, 150,4, 147,8, 140,6, 139,9, 135,8, 133,6, 130,4, 125,7,
120.7, 114,6, 111,7, 110,9, 106,8, 67,8, 66,7 (3C), 56,1 (2C), 53,7, 46,7, 46,1(2C), 35,7 (2C), 32,9, 29,6, 24,7, 24,2;
x) (S)-4-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)-1-metil-N-(4-morfolinofenil)-1H-pirrolo-2carboxamida (49)
RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 7,75 (1H, s), 7,9 (1H, s), 7,64 (1H, d, J=4,0 Hz), 7,52 (1H, s), 7,46 (2H, d, J = 8,0 Hz), 7,39 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,00 (1H, s), 6,91 (1H, s), 6,90 (2H, d, J = 8,0 Hz), 6,82 (1H, s), 4,08-4,14 (2H, m, CH2), 3,98 (3H, s, N
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CH3), 3,87 (3H, s, O-CH3), 3,74-3,82 (4H, m), 3,69-3,74 (1H, m, H-11a) , 3,55-3,4 (2H, m, H2-3), 3,11-3,13 (4H, m), 2,58-2,60 (2H, m, CH2), 2,25-2,31 (4H, m, CH2), 2,03-2,06 (2H, m); RMN de 13C (100 MHz, CDCI3): δ 175,4, 169,9, 162,5, 162,7, 150,4, 148,1,
147.7, 140,7, 130,8, 125,4, 124,9, 123,2, 121,6, 120,4, 116,4, 111,7, 110,9, 109,3,
67,9, 66,9 (2C), 56,1 (2C), 53,7, 49,8, 46,7(2C), 36,9 (2C), 34,1,29,6, 24,8, 24,2;
xi) (S)-4-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)-1-metil-N-(4-(2-morfolinoetoxi)fenil)-1 Hpirrola-2-carboxamida (51)
RMN de 1H (400 MHz, CDCla): δ 7,77 (1H, s), 7,73 (1H, s), 7,65 (1H, d, J = 4,4 Hz), 7,52 (1H, s), 7,8 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,45 (1H, s), 7,38 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,00 (1H, s), 6,91 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,83 (1H, s), 4,14-4,18 (2H, m, CH2), 4,09-4,14 (4H, m), 3,98 (3H, s, N-CH3), 3,87 (3H, s, O-CH3), 3,77-3,83 (1H, m, H-11 a), 3,71-3,75 (4H, m) , 3,52-3,57 (2H, m, H2-3), 2,79-2,82 (2H, m), 2,53-2,64 (6H, m, CH2), 2,25-2,31 (4H, m, CH2), 2,01-2,07 (2H, m); RMN de 13C (100 MHz, CDCla): δ 174,7, 164,6, 162,2,
159.8, 155,4, 150,5, 147,7, 140,7, 135,7, 131,8, 126,6, 125,4, 125,0, 122,0, 120,4, 115,0, 111,7, 110,9, 67,9, 66,8 (2C), 66,0, 57,6, 56,1 (2C), 54,1 (2C), 53,7, 46,7, 35,9, 33,0, 29,6, 24,8, 24,2, xii) (S)-4-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)-1-metil-N-(4-(2-morfolinoetoxi)benzil)-1 Hpirrola-2-carboxamida (52)
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 7,77 (1H, s), 7,68 (1H, s), 7,65 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,51 (1H, s), 7,44 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,35 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,27 (1H, s), 6,96 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,88 (2H, dd, J=7,0, 2,0 Hz), 6,82 (1H, s), 6,73 (1H, s), 4,50 (2H, d, J=5,5 Hz), 4,10-4,20 (4H, m, CH2), 3,98 (3H, s, N-CH3), 3,87 (3H, s, O-CH3), 3,78-3,83 (1H, m, H-11a), 3,68-3,71 (4H, m) , 3,52-3,59 (2H, m, H2-3), 2,80-2,82 (2H, m), 2,53-2,64 (6H, m, CH2), 2,24-2,33 (4H, m, CH2), 2,01-2,07 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCl3): δ 174,7, 164,6, 161,6, 158,1, 150,4, 147,7, 140,7, 137,5, 135,7, 131,8, 129,2,
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126.6, 125,4, 124,5, 120,4, 114,9 (2C), 111,7, 110,9, 108,7, 67,9, 66,8 (2C), 66,0, 57,6, 56,1 (2C), 54,1 (2C), 53,7, 46,7, 35,9, 33,0, 29,6, 24,8, 24,2, xiii) (S)-4-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11a-tetrahidro-1H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)-1-metil-N-(6-morfolinopiridin-3-il)-1 H-pirrola2-carboxamida (53).
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 8,25 (1H, s), 7,96 (1H, d, J=6,5 Hz), 7,90 (1H, s), 7,85 (1H, s), 7,65 (1H, d, J = 4,0 Hz), 7,51 (1H, s), 7,44 (2H, d, J = 8,0 Hz), 7,35 (2H, d, J = 8,0 Hz), 7,00 (1H, s), 6,95 (1H, s), 6,82 (1H, s), 6,65 (1H, d, J=9,0 Hz), 4,084,15 (2H, m, CH2), 3,97 (3H, s, N-CH3), 3,84 (3H, s, O-CH3), 3,78-3,82 (4H, m), 3,673,70(2H, m, H2-3), 3,53-3,59 (1H, m, H-11a), 3,42-3,46 (4H, m), 2,55-2,58 (2H, m, CH2), 2,23-2,30 (4H, m, CH2), 1,99-2,05 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ
174.7, 164,6, 162,7, 159,9, 156,8, 150,4, 147,7, 140,7, 131,6, 126,2, 125,4, 125,1, 120,4, 111,7, 110,8, 109,6, 106,9, 67,9, 66,7 (3C), 56,1, 53,7, 46,7, 46,1(2C), 41,0, 36,9 (2C), 34,0, 29,6, 24,8, 24,2;
xiv) 4-(4-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H-benzo[e]pirrolo[1,2a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)furan-2-carboxamido)-1 -metil-1 H-pirrola-2carboxilato de (S)-metila (54)
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 7,98 (1H, s, NH), 7,88 (1H, s, NH), 7,68 (1H, s, H-6), 7,65 (1H, d, J = 4,0 Hz, H-11), 7,64 (2H, d, J = 8,0 Hz, 2Ar-H), 7,54 (1H, d, J = 1,6 Hz, Py-H), 7,52 (1H, d, J = 1,6 Hz, Py-H), 7,45 (1H, d, J = 2,0 Hz, Py-H), 7,33 (2H, d, J = 8,0 Hz, 2Ar-H), 6,97 (1H, s, Py-H), 6,89 (1H, s, H-9), 4,08-4,18 (2H, m, CH2), 3,97 (3H, s, N-CH3), 3,89 (3H, s, N-CH3), 3,84 (3H, s, O-CH3), 3,79 (3H, s, OCH3), 3,66-3,70 (1H, m, H-11a) , 3,55-3,60 (2H, m, H2-3), 2,56-2,61 (2H, m, CH2), 2,232,32 (4H, m, CH2), 2,00-2,05 (2H, m); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ 162,5, 161,6,
159.1, 150,4, 147,7, 138,4, 132,8, 132,1 131,9 (2C), 128,6, 128,4 (2C), 125,4(2C),
124.8, 123,0, 121,0, 120,4 (2C), 116,2, 114,6 (2C), 109,9, 94,2, 67,4, 63,6, 57,1,53,7,
51.1, 46,7, 36,9, 36,7, 34,0, 29,6, 24,2;
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74/75 xv) 4-(4-(4-(4-(4-((7-metóxi-5-oxo-2,3,5,11 a-tetrahidro-1 H- benzo[e]pirrolo[1,2-a][1,4]diazepin-8-il)oxi)butanamido)fenil)furan-2carboxamido)fenil)-1-metil-1H-pirrola-2-carboxilato de (S)-metila (56).
RMN de 1H (500 MHz, CDCla): δ 7,72 (1H, s, NH), 7,69 (1H, s, NH), 7,66 (1H, d, J = 4,0 Hz, H-11), 7,57 (2H, d, J = 8,0 Hz, 2Ar-H), 7,53 (1H, s, H-6), 7,46 (4H, d, J = 8,0 Hz, 4Ar-H), 7,41 (2H, d, J = 8,0 Hz, 2Ar-H), 7,20 (1H, d, J = 2,0 Hz, Py-H), 7,06 (1H, d, J = 2,0 Hz, Py-H), 7,02 (1H, d, J = 1,6 Hz, Py-H), 6,92 (1H, s, Py-H), 6,84 (1H, s, H-9), 4,12-4,20 (ligante de cadeia lateral CH2, m, 2H), 4,00 (3H, s, N-CH3), 3,96(3H, s, N-CH3), 3,88 (3H, s, O-CH3), 3,84 (3H, s, O-CH3), 3,70-3,73 (1H, m, H-11a) , 3,553,61 (2H, m, H2-3), 2,58-2,62 (2H, m, CH2), 2,29-2,31 (2H, m, CH2), 1,93-2,06 (4H, m, CH2); RMN de 13C (125 MHz, CDCla): δ 164,5, 162,4, 161,7, 150,7, 147,3, 139,2, 126,0, 125,6, 125,4 (2C), 125,2 (2C), 123,0, 120,4 (2C), 114,6 (2C), 111,4, 94,6 (2C),
68,3, 63,7, 56,1, 51,6 (2C), 41,0, 36,9, 31,9, 29,6, 25,2, 24,2, 24,1,20,2.
Exemplo 3 - Avaliação Antibacteriana [0354]As propriedades antibacterianas dos compostos da invenção 26, 27, 28, 30, 31, 33, 35, 37, 39, 40, 49, 51, 52, 53, 54, 56 e 59 foram comparadas com os compostos comparativos 16 e 18 contra um número de cepas bacterianas com o uso do ensaio de microplaca de caldo de CLSI, conforme descrito abaixo.
[0355]Cepas Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA) EMRSA15 e EMRSA-16 foram isoladas de material clínico no Royal Free Hospital, London; a cepa MRSA BB568 foi um presente de Brigitte Berger-Bãchi, Institute of Medical Microbiology, University of Zürich, Switzerland. O isolado de MRSA de comunidade associada USA300 foi comprado pela American Type Culture Collection como BAA1556. A cepa VISA S. aureus Mu50 é um isolado clínico MRSA com resistência intermediária à vancomicina e foi isolado e fornecido por Keiichi Hiramatsu, Juntendo University, Tokyo. ATCC 29213 é uma cepa de referência S. aureus suscetível a antibiótico. Os isolados de enterococcus resistentes à vancomicina E. faecalis VRE1
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75/75 e E. faecium VRE10 foram isolados no Royal Free Hospital. Bactérias foram desenvolvidas em caldo Mueller-Hinton (MH) (Oxoid) ou em placas de ágar MH a 37 °C.
[0356]MICs de agentes antibacterianos foram determinados pelo ensaio de microplaca de caldo de CLSI conforme previamente descrito (Hadjivassileva T, Stapleton PD, Thurston DE et al. Interactions of pyrrolobenzodiazepine dimers and duplex DNA from methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Int J Antimicrob Agents 2007; 290: 672 a 678); agentes foram dissolvidos em DMSO antes de diluição em caldo. Nas concentrações usadas, o solvente não teve efeito no crescimento bacteriano. Três determinações de MIC por cepa foram realizadas em duplicata para cada composto testado._____________________________________________________
PBD No. |
Concentração inibitória mínima (MIC mg/l) |
EMRSA -15 |
EMRSA -16 |
BB568 |
USA30
0 |
Mu50 |
VRE1 |
VRE10 |
16* |
>32 |
32 |
>32 |
>32 |
32 |
>32 |
16 |
18* |
>32 |
>32 |
>32 |
32 |
>32 |
>32 |
16 |
26 |
0,06 |
0,125 |
0,125 |
0,125 |
0,06 |
0,06-
0,125 |
0,06 |
27 |
0,03 |
0,125 |
0,125 |
0,06-
0,125 |
<0,03 |
0,125 |
0,03 |
28 |
0,06 |
0,125 |
0,125 |
0,06 |
|
0,06 |
0,06 |
30 |
0,5 |
2 |
2 |
0,5 |
|
1 |
0,5 |
31 |
0,5 |
4 |
4 |
1 |
|
1 |
0,5 |
35 |
0,06 |
0,06 |
0,06 |
0,06 |
|
0,06 |
0,06 |
37 |
0,125 |
0,5 |
0,5 |
0,125 |
|
0,25 |
0,125 |
39 |
0,25 |
0,25 |
0,25-
0,5 |
0,5 |
0,125 |
0,125 |
0,5 |
40 |
0,125 |
0,5 |
0,5 |
0,125 |
- |
0,25 |
0,125 |
49 |
2 |
2 |
2 |
2 |
1 |
0,5 |
0,5-1 |
51 |
2 |
2 |
2 |
2 |
1 |
0,5 |
1 |
52 |
4 |
1-2 |
4 |
4 |
2 |
2 |
1 |
53 |
1 |
2-4 |
4 |
4 |
2 |
1 |
0,5 |
54 |
<0,03 |
0,06 |
0,125 |
0,06 |
0,03 |
0,06 |
<0,03 |
56 |
0,25 |
0,5 |
0,5 |
1 |
0,5 |
0,5 |
0,25 |
59 |
2 |
16 |
16 |
16 a 32 |
4 |
32 |
4 |
* Exemplos Comparativos