KR20130130077A

KR20130130077A - 지혈용 직물

Info

Publication number: KR20130130077A
Application number: KR1020137026804A
Authority: KR
Inventors: 토마스 에이취. 피셔; 2세 스탠 이. 에스크릿지; 2세 윌리엄 엠. 말로이; 말로이 에반스
Original assignee: 엔테그리온, 인코포레이티드; 더 유니버시티 오브 노쓰 캐롤라이나 엣 채플 힐
Priority date: 2006-01-11
Filing date: 2007-01-10
Publication date: 2013-11-29
Also published as: CN101389318B; MX2008008922A; KR101487840B1; CN103536956A; EP3132808A1; CA2635988A1; KR20080099238A; AU2007204893A1; CN111467559B; US20070160653A1; JP5760048B2; US8377467B2; KR101387372B1; ES2610397T3; JP2013188628A; US20130102946A1; WO2007081996A3; JP2009523058A; ES2820709T3; US10058456B2

Abstract

본 발명은 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시(ramie) 섬유; 황마(jute) 섬유; 사이잘(sisal) 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀(lyocel) 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석(feldspar) 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다. 트롬빈과 같은 추가의 보조인자와, RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린, 피브리노겐 및 이들의 배합물과 같은 지혈제도 직물에 혼입될 수 있다. 본 발명은 이러한 직물의 제조방법과, 출혈을 억제하기 위한 상기 직물의 사용방법도 제공한다(도 1 참조).

Description

지혈용 직물{Hemostatic textile}

본 발명은 붕대, 봉합물 또는 천과 같은 직물, 더욱 구체적으로는 출혈을 신속하게 억제할 수 있고 장시간 동안 저장될 수 있는 약제를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것이다.

표면(국소) 지혈과 관련된 병리 생리학적 과정에 대해 상당한 지식적 진보가 이루어졌음에도 불구하고, 출혈 부위에 도포하여 지혈할 수 있는 재료에 대한 요구가 여전히 제대로 충족되지 못하고 있다. 44세 이하의 연령에서는 외상이 주된 사망 원인이다[Bozeraan, W. Shock, Hemorrhage (2001)]. 미국에서는 매년 외상으로 사망하는 대략 100,000명 중 절반, 즉 50,000건의 사례는 실혈로 사망하고[Peng, R., Chang, C, Gilmore, D. & Bongard, F. Am Surg 제64권, 950-4(1998)], 대략 같은 수의 출혈 환자는 대량 적혈구 수혈 후에 생존한다[Vaslef, S., Knudsen, N., Neligan, P., 및 Sebastian, M. J. Trauma-Inj. Inf. Crit. Care 제53권 291-296(2002)]. 따라서, 미국에서는 매년 대략 100,000명의 환자가 출혈 억제에 대한 필요성을 크게 갖고 있다. 이러한 상황은 전투 부상자 처치에서도 똑같이 중요한데, 군 부상자의 최근 보고[Burlingame, B. DOD's experiences in Afghanistan Advanced Technological Applications for Combat Casualty Care 2002 Conference in www.usaccc.org (2002)]에서는 비압축성 출혈의 억제가 군 응급 의학에서 단독으로 가장 중요한 미충족 요구 사항인 것으로 확인된다. 처치의 기본은 지혈대를 사용하여 "압축성" 출혈을 억제한 후 거즈를 사용하여 나머지 "비압축성" 출혈을 억제하는 것이다. 그러나, 거즈를 통한 지속적인 혈액 손실은 질병과 사망의 주요 원인이 된다.

종래 기술에는 다양한 형태의 붕대에 관한 특허들이 많다. 예를 들면, 미국 특허 제3,419,006호(King)는 불용성 중합체의 친수성 중합체 겔로 만들어진 상처용 무균 투명 드레싱을 개시하고 있으며, 미국 특허 제4,323,061호(Usukura)는 유리 섬유 및 비 유리 섬유로 만들어진 단단한 붕대를 개시하고 있다. 또한, 부상자의 출혈을 신속하게 억지하기 위한 다양한 방법들이 시도되고 있다. 이들 방법 중 일부는 신체의 자연적 응고 과정을 화학적으로 촉진하는 물질들로 보강된 붕대와 같은 용품을 포함한다. 이러한 용품의 예로는 다음의 것들이 포함된다.

미국 특허 제3,328,259호(Anderson)는 나트륨 카복시메틸 셀룰로즈, 하이드록시에틸 셀룰로즈, 폴리옥시에틸렌, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 중합체가 혼입된 붕대 또는 상처 드레싱을 개시하고 있다.

미국 특허 제4,192,299호(Sabatano)는 방부성 물질을 함유한 패킷을 포함하는 붕대를 개시하고 있다.

미국 특허 제4,390,519호(Sawyer)는 콜라겐 또는 콜라겐 유사 물질을 함유한 스폰지 형태의 붕대를 개시하고 있다.

미국 특허 제4,453,939호(Zimmerman 외)는 콜라겐, 피브리노겐 및 트롬빈의 배합물로 만들어지고 상처 드레싱으로서 유용한 조성물을 개시하고 있다.

미국 특허 제4,606,337호(Zimmerman 외)는 피브리노겐 및 트롬빈을 함유한 당단백질 매트릭스로 이루어진 상처 봉합 및 치료용 재흡수성 시트를 개시하고 있다.

미국 특허 제4,616,644호(Saferstein 외)는 고분자량 폴리에틸렌 옥사이드를 지혈제로서 함유하는 접착 붕대를 개시하고 있다.

미국 특허 제5,800,372호(Bell 외)는 흡수성 중합체로 만들어지고 미세섬유 콜라겐을 포함한 드레싱을 개시하고 있다.

미국 특허 제5,902,608호(Read 외)는 혈소판 유래 성장 인자를 발현하는 고정 건조된 혈액 세포를 함유한 붕대, 거즈, 봉합물 등과 같은 수술용 보조 기구를 개시하고 있다.

미국 특허 제6,638,296호(Levinson)는 글루코사민 또는 글루코사민 유도체를 함유한 패드를 포함하는 붕대를 개시하고 있다.

미국 특허 제6,762,336호 및 국제공개공보 제WO/99/59647호(MacPhee 외)는 2개의 피브리노겐층 사이에 트롬빈층이 삽입된 다층 붕대를 개시하고 있다.

미국 특허 제6,897,348호(Malik)는 항균제 및 지혈제(예: 키토산, 니아신아미드 또는 아스코르브산), 또는 항균 및 지혈 작용을 둘 다 갖는 단일 상처 치유제(예: 키토산 니아신아미드 아스코르베이트 염)을 함유한 접착 붕대를 개시하고 있다.

미국 특허 제6,891,077호(Rothwell 외)는 프로필 갈레이트, 갈산 또는 이의 유도체와 같은 응혈원을 포함한 피브리노겐 붕대를 개시하고 있다. 트롬빈 또는 항균제와 같은 임의의 성분들도 또한 포함될 수도 있다.

국제공개공보 제WO 97/28823호(New Generation Medical Corporation)는 점성 폴리사카라이드, 글리콜 또는 석유 젤리와 같은 점성의 비수성 접착제에 의해 섬유성 매트릭스에 접착된 피브리노겐 및 트롬빈 분말을 함유한 지혈 붕대를 개시하고 있다.

지혈, 조직 재형성 및 상처 부위 용해와 관련된 병리 생리학적 과정에 대해 상당한 지식적 진보가 이루어졌음에도 불구하고, 상처 부위에 도포하여 이러한 과정들을 촉진할 수 있는 재료가 여전히 크게 요구되고 있다. 본 발명은 이러한 요구를 만족시키는 것으로 믿어진다.

한 측면에서, 본 발명은 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시(ramie) 섬유; 황마(jute) 섬유; 사이잘(sisal) 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀(lyocel) 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석(feldspar) 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]; 및 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물을 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료와, 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물 약 0.1 내지 약 5중량%를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제[여기서, RL 혈소판 및 RL 혈액 세포는 약 0.1 내지 약 20중량%로 포함되고, 피브린 및 피브리노겐은 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함된다]를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]; 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

다른 측면에서, 본 발명은, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료; 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물 약 0.1 내지 약 5중량%; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제[여기서, RL 혈소판 및 RL 혈액 세포는 약 0.1 내지 약 20중량%로 포함되고, 피브린 및 피브리노겐은 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함된다]를 포함하는 지혈용 직물에 관한 것으로, 상기 지혈용 직물은 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 (1) 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]를, 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물과, 임의로 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린, 피브리노겐 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제와 접촉시켜서 습윤 매트릭스를 형성하는 단계; 및 (2) 상기 습윤 매트릭스를 건조시켜 지혈용 직물을 생성하는 단계를 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법에 관한 것이다.

다른 측면에서, 본 발명은 (1) 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료[여기서, 상기 제2 섬유는 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된다]를, 혈소판을 함유하는 혈소판 풍부 혈장과 접촉시키는 단계; (2) 상기 혈소판을 가교결합하는 단계; 및 (3) 임의로 직물을 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물과 접촉시켜서 지혈용 직물을 생성하는 단계를 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법에 관한 것이다.

이들 및 다른 측면들은 하기 본 발명의 상세한 설명을 통해서 명백해질 것이다.

본 발명은 하기 도면을 참조로 할 때 더욱 잘 이해될 것이다.
도 1은 본 발명의 한 양태를 사용한 경우의 대표적인 트롬빈 생성 곡선을 보여준다.
도 2는 본 발명의 양태를 사용한 경우의 트롬빈 생성을 위한 시간을 보여준다.
도 3은 본 발명에 따른 재료의 혈전 탄성 묘사 분석을 보여준다.
도 4는 이중 섬유와 거즈 상의 혈액 세포를 비교한 도면이다.
도 5는 적혈구(RBC)와 본 발명에 따른 재료의 상호 작용을 보여준다.
도 6은 본 발명에 사용되는 유리 필라멘트 상의 혈소판 활성화를 보여준다.
도 7은 본 발명의 재료를 사용한 경우의 총 혈액 손실을 보여준다.
발명의 상세한 설명
본 발명자들은 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 복합물로부터 지혈용 직물을 제조할 수 있다는 놀라운 사실을 밝혀냈다. 섬유의 복합물로 만들어진 지혈용 직물은 우수한 지혈 특성 및 유체 흡수성을 나타낸다. 복합물로 만들어진 지혈용 직물의 지혈 특성을 더 향상시키기 위하여, 트롬빈, 동결건조된 혈액 세포, 동결건조된 혈소판, 피브린, 피브리노겐, 또는 이들의 배합물과 같은 추가의 혈액 인자들을 첨가할 수 있다. 이러한 추가의 인자들은 신체의 자연적 지혈 연쇄 반응의 활성화를 돕고, 출혈을 신속하게 억지할 수 있는 재료를 제공한다. 본 발명자들은 유리 섬유, 제2 섬유 및 추가의 혈액 인자의 배합물이 다량의 출혈이 일어나는 상황이나, 환자를 병원 또는 외상 치료 센터로 즉시 이송할 수 없는 경우에 유용하게 사용되는, 신속하게 출혈을 억지하는 신규한 지혈용 직물을 제공한다는 사실을 밝혀냈다.
본 발명의 지혈용 직물은 지혈을 활성화하는 기존의 제품에 비해서 중요한 이점을 제공한다. 본 발명은 혈액 응고 연쇄 반응을 활성화하는 물질을 국소적으로 높은 농도로 제공함으로써 혈액 응고 연쇄 반응과 같은 신체의 자연적 지혈 시스템을 신속하게 활성화할 수 있다. 또한, 본 발명의 지혈용 직물은 동결건조된 혈액 단백질을 사용함으로써 즉석 사용을 위해 건조 상태로 장시간 동안 보관될 수 있다. 기존 제품 및 장치는 활성화를 위해 수화된 단백질을 필요로 하기 때문에 이러한 측면은 특히 유리하다.
상기 언급된 바와 같이, 본 발명의 한 양태는 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료를 포함하는 지혈용 직물 매트릭스이다. 이들 각각의 성분을 아래에 더욱 상세히 설명한다.
유리 섬유 성분은 압출 또는 전기방사 공정에 의해 제조되고 섬유 직경이 5㎚ 내지 15㎛인 유리 섬유가 바람직하다. 본 발명에 사용될 수 있는 유리의 종류는 낮은 나트륨 옥사이드 함량의 알루미노-보로실리케이트 유리, 보로실리케이트 유리, 납 유리, 알루미노실리케이트, 알칼리-바륨 실리케이트, 유리질 실리카, 칼코게나이드 유리, 포스페이트 유리 및 생물활성 유리(상품명: "BIOGLASS")를 포함하나 이들에 제한되지 않는다. 유리 섬유 성분의 치수는 다음과 같은 표시, 즉 B(직경 3.5㎛), C(직경 4.5㎛), D(직경 5㎛), DE(직경 6㎛), E(직경 7㎛), G(직경 9㎛), H(직경 10㎛) 또는 K(직경 13㎛)를 포함한 통상의 명칭으로 설명될 수 있다. 추가로, 유리 섬유 성분의 가닥수는 900 내지 37 범위일 수 있다. 유리 섬유의 등급은 전기적 등급("E"), 화학적 등급("C"), 또는 고강도("S")일 수 있고, 필라멘트는, 예컨대, 연속, 스테이플 또는 텍스쳐와 같은 임의의 배열을 가질 수 있다. 유리 섬유는 단독으로 사용되거나 2 내지 20 또는 그 이상의 섬유를 합쳐서 꼬은 상태로 사용될 수 있다. 유리 섬유 재료는 오웬스 코닝(Owens Corning)과 같은 여러 제조원으로부터 상업적으로 구입될 수 있으며 상기 설명된 명칭을 사용하여 등급 G75, E 등급 유리 섬유로서 상업적으로 구입될 수 있다.
본 발명의 직물에 사용되는 제2 섬유는 일반적으로 흡수성, 연성 및 추가의 지혈 활성을 직물에 부여하기 위하여 유리 섬유와 함께 배합될 수 있는 임의의 다른 섬유를 포함한다. 아래에 더욱 상세히 설명되는 바와 같이, 흡수성이 우수한 제2 섬유를 사용하면, 직물에 추가의 지혈 인자를 부가하는 데에도 도움이 된다. 유용한 제2 섬유의 예로는 견 섬유, 폴리에스테르 섬유, 나일론 섬유, 세라믹 섬유, 대나무 원료섬유 또는 재생(예: 화학적 가공)섬유, 면, 레이온, 리넨, 모시, 황마, 사이잘, 아마, 대두, 옥수수, 대마 및 라이오셀과 같은 식물 섬유, 모와 같은 동물 섬유, 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체, 락타이드/글리콜라이드 공중합체, 실리케이트 섬유, 폴리아미드 섬유, 장석 섬유, 제올라이트 섬유, 제올라이트 함유 섬유, 아세테이트 섬유, 포유동물 응고 단백질 또는 포유동물 혈관활성 인자를 발현하도록 유전자 조작된 식물 섬유가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명에 사용하기에 적합한 다른 제2 섬유는 물 흡수성을 증진하기 위한 중합체(예: 폴리비닐 알코올) 및 지혈 시스템을 활성화하는 분자 잔기(예: 엡티피바타이드(eptifibatide)에서 발견되는 것들과 같은 선형 또는 고리형의 아르기닌-글리신-아스파르테이트 잔기)를 함유하는 중합체로 공유적으로 개질된 섬유이다. 바람직한 제2 섬유는 수분 흡수성이 높은 고유의 응고 연쇄 반응을 활성화할 수 있는 대나무 원료섬유 또는 재생(예: 화학적 가공)섬유, 면 섬유 등과 같은 식물 섬유이다. 제2 섬유는 링, 오픈 엔드(OE), 로터, 또는 에어 젯 스피닝을 포함한 통상의 방법을 사용하여 제조될 수 있고, 1/1 내지 100/1 Ne 범위의 계수를 가질 수 있다.
당업자에게 자명한 바와 같이, 제2 섬유는 단독으로 사용되거나 2, 3, 4종 또는 그 이상의 섬유를 합쳐서 꼬거나 혼방한 상태로 배합하여 사용할 수 있다. 추가로, 제2 섬유의 배합물은 어떠한 종류도 사용이 가능하다. 예를 들면, 한 양태에서는 2종 이상의 제2 섬유를 개별적으로 제조한 후 함께 꼬거나 혼방하여 복합사를 형성할 수 있다. 다른 양태에서, 제2 섬유는 선택된 종류의 섬유들의 블록을 포함하는 콘쥬게이트(conjugate), 예를 들면, 폴리에스테르와 폴리사카라이드 블록들이 번갈아 존재하는 콘쥬게이트로서 형성된다. 또 다른 양태에서, 제2 섬유는 상이한 실들의 균질 배합물로서 형성될 수 있다.
유리 섬유와 제2 섬유의 상대적인 양은 광범위할 수 있는데, 예를 들면, 건조된 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 0.1 내지 99.9중량%와 제2 섬유 약 99.9 내지 0.1중량%이다. 이들 재료의 바람직한 양은 유리 섬유 약 30 내지 80중량%와 제2 섬유 약 70 내지 20중량%, 더욱 바람직하게는 유리 섬유 약 50 내지 80중량%와 제2 섬유 약 50 내지 20중량%이다. 본 발명의 지혈용 직물에서 유리와 제2 섬유의 유용한 비율의 예는 유리 섬유 약 50중량%와 제2 섬유 약 50중량%, 유리 섬유 약 40중량%와 제2 섬유 약 60중량%, 유리 섬유 약 30중량%와 제2 섬유 약 70중량% 및 유리 섬유 약 20중량%와 제2 섬유 약 80중량%을 포함한다. 특히 유용한 한 배합물은 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 섬유 약 35중량%이다. 유리 섬유 성분 및 제2 섬유 성분은 방적, 제직 또는 편직과 같은 통상의 방법을 사용하여 배합되거나 부직 상태로 사용될 수 있다.
사용시, 본 발명의 지혈용 직물은 임의의 구성을 가질 수 있다. 한 양태에서, 지혈용 직물은 지혈을 촉진하도록 고안된 지혈층과, 표면 텍스쳐, 수분 이동, 유체 흡수 및 미생물 방지를 위해 고안된 외층으로 이루어진다. 다른 양태에서, 지혈용 직물은 지혈을 촉진하도록 고안된 지혈층, 붕대의 강도와 탄성을 위한 중간층, 및 표면 텍스쳐, 수분 이동, 유체 흡수 및 미생물 방지를 위해 고안된 외층의 3층으로 구성된다. 당업자들은 추가의 구성도 생각할 수 있다.
본 발명의 지혈용 직물은 효과를 향상시키는 각종 약제로 처리될 수도 있다. 추가적 약제의 예로는 미생물고정(microstatic) 또는 살균성(microcidal)인 유기 또는 무기 화합물; 혈액 응고 단백질과 공유적으로 반응하는 유기 또는 무기 화합물; 상처 조직과 공유적으로 반응하여 조직에의 접착성을 향상시키는 공유 결합을 형성하는 유기 또는 무기 화합물; 상처 부위에서 중합되어 3차원 망상 중합체를 형성하는 유기 또는 무기 화합물; 초음파 조영제(예: 기체 충전된 미세기포, 금속 나노입자 등), 방사선 불투명제(예: 이오프로마이드와 같은 요오드화 소분자, 요오드화 고분자량 중합체 등), 자기 공명 프로브(예: 페럼옥사이드 철 나노입자, 초상자성 금속 나노입자, 디에틸렌트리아민펜타아세테이트(DTPA) 킬레이트화 가돌리늄, 및 DTPA 킬레이트화 가돌리늄 함유 중합체 등)와 같은 조영제가 포함된다.
본 발명의 지혈용 직물에 포함될 수 있는 또 다른 추가적 약제로는 알로에 베라, 비타민 E, 코엔자임 Q, 콜라겐 등과 같은 스킨 컨디셔닝제; 아스피린, 이부프로펜, 아세토미노펜, 비타민 C, COX-2 억제제, 스테로이드 등과 같은 소염제; 리도카인, 테트로카인, 오피에이트, 코카인, 안티히스타민 등과 같은 진통제; 바시트라신, 은염, 요오다이드 등과 같은 항균제 또는 항진균제; 에피네페린, 노르에피네프린, 바소프레신, 헤모글로빈, 엔도텔린, 트롬복산, 산화질소(NO) 스캐빈저(scavenger) 등과 같은 혈관수축제; MMP 억제제, PDGF 등과 같은 성장 인자; IL-11, 안티-켈로이드(anti-kheloid) 화합물 등과 같은 흉터 억제제; 재수화시 발열 반응을 겪는 제올라이트와 같은 소작제(cauterizing agent); 덱스트란과 같은 소수성 탈수제; 제올라이트, 덱스트란 설페이트, 폴리포스페이트, 미네랄 인터페이스(mineral interfaces), 포스파티딜 세린, 칼슘 등과 같은 혈전형성제가 포함된다.
본 발명의 직물 매트릭스는 신체의 자연적 지혈 시스템을 활성화함으로써 출혈을 신속하게 억지하는 추가의 인자들도 포함할 수 있다. 이러한 추가의 인자로는 트롬빈 또는 트롬빈 함유 혈장 분획물, 재수화 동결건조(RL) 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린, 피브리노겐 및 이들의 배합물이 포함된다. 바람직한 한 양태에서, 트롬빈은 추가의 지혈 작용을 부여하기 위하여 직물에 혼입된다. 트롬빈은 어떠한 공급원으로부터도 얻을 수 있으며(자연 분리, 재조합 등), 트롬빈과, 인자 XⅡ, 인자 XⅡa, 인자 XⅠ, 인자 XⅠa, 인자 XⅢ, 인자 XⅢa, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅸa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅷa, 인자 vWF, 인자 Ⅴ, 인자 Ⅴa, 인자 Ⅹ, 인자 Ⅹa 및 이들의 배합물과 같은 추가의 응고 인자, 또는 렙틸라제(reptilase)와 같은 동물 독액 성분과 같은 응고 보조인자, 또는 엔도텔린, 트롬복산, 산화질소(NO) 스캐빈저 또는 이들의 배합물과 같은 혈관작용제를 함유하는 혈장 분획물 또는 혈청의 형태일 수 있다. 이들 인자 또는 상기 열거된 임의의 인자는 본 발명의 직물에 혼입될 때 건조 또는 액체 형태일 수 있다.
본 발명의 직물에 사용될 수 있는 트롬빈은 사람 또는 동물 공급원, 유전자 변형 식물, 또는 다른 천연 또는 재조합 단백질 발현 체계로부터 얻은 고순도 트롬빈 Ⅱa를 포함하는 임의의 형태를 가질 수 있다. 또한, 사람 또는 동물 공급원, 유전자 변형 식물, 또는 다른 천연 또는 재조합 단백질 발현 체계로부터 얻은 부분 정제된 트롬빈을 본 발명에 사용할 수 있다. 본 발명에 사용될 수 있는 트롬빈은 정제 또는 부분 정제된 혈청 또는 혈장 내에 함유될 수도 있다. 한 양태에서, 본 발명의 직물에 사용되는 트롬빈은 트롬빈 Ⅱa를 함유한 부분 정제된 혈청 분획물이다.
본 발명의 직물 내의 트롬빈의 바람직한 양은, 건조 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.01중량% 내지 약 10중량%이다. 본 발명의 직물에 포함되는 트롬빈의 더욱 바람직한 양은, 건조 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.05중량% 내지 약 7중량%, 가장 바람직하게는 약 0.1중량% 내지 약 5중량%이다.
하기 실시예에서 더욱 상세히 설명되듯이, 트롬빈을 포함하는 지혈용 직물을 제조하기 위하여, 트롬빈을 함유하는 용액에 직물 매트릭스를 함침시키고 냉동 및 동결건조한다. 동결건조 중에 직물이 부서지거나 백악질로 되는 것을 방지하기 위하여 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로스 등과 같은 방부제를 함침 용액에 첨가할 수 있다. 일반적으로 트롬빈 용액 내의 방부제 농도는 최대 약 20%(v/v)까지이다. 바람직한 양태에서는 약 12%(v/v)의 글리세롤이 사용된다.
다른 바람직한 양태에서는, 추가의 지혈 작용을 부여하기 위하여 재수화 동결건조(RL) 혈소판, RL 혈액세포, 피브린 또는 피브리노겐 중의 1종 이상을 직물에 혼입시킨다. 재수화 동결건조 혈액 세포, 재수화 혈소판 및 이들의 제조방법은 당업계에 공지되어 있다(참조: 미국 특허 제4,287,087호, 제5,651,966호, 제5,891,393호, 제5,902,608호, 제5,993,804호, 이들은 모두 본 명세서에 참조로서 인용된다). 간략하게, RL 혈소판은 혈소판을 분리하고 이것을 포름알데하이드와 같은 고정제에 노출시키고 건조시켜 제조한다. RL 혈소판은 상업적으로 구입될 수도 있다[상품명: "STASIX", 제조원: Entergrion, Inc.(Research Triangle Park, NC)]. 피브린 및 피브리노겐의 분리 및 정제 방법도 당업계에 공지되어 있다.
간략하게, RL 혈액 세포를 제조하기 위해서, 동의서에 서명한 건강한 지원자로부터 아데노신(CPDA-1) 함유 시트레이트-포스페이트-덱스트로스 중에서 혈액을 얻고 이것을 1,000xg로 20분간 원심분리하여 RBC를 수득할 수 있다. 적혈구를 포스페이트 완충 염수(PBS) 중에 5%의 적혈구 용적으로 희석하고 2,000xg로 10분간 원심분리한다. 이 단계를 2회 더 반복하여 혈장 단백질로부터 RBC를 분리할 수 있다. 이어서 RBC를 (glut-RL RBC를 위해) 글루타르알데하이드와 가교결합시키거나 (para-RL RBC를 위해) 파라포름알데하이드와 글루타르알데하이드의 혼합물과 가교결합시킬 수 있다. 미반응 알데하이드는 원심분리에 의해 RBC로부터 제거할 수 있고(혈장 단백질로부터 세포의 제거), 마지막으로 세포를 -30℃에서 냉동 및 동결건조한다.
피브린 및 피브리노겐도 여러 제조원으로부터 상업적으로 구입할 수 있다. 예컨대, 임상 등급 재료는 상품명 HAEMOCOMPLETTAN P[제조원: ZLB Behring (Marburg, Germany)] 및 TISSEEL[제조원: Baxter(Deerfield, IL USA)]로 시판된다. 연구 등급 재료는 Enzyme Research Laboratories(South Bend, IN USA)로부터 구입할 수 있다. 피브린 및 피브리노겐은 당업계에 공지된 방법에 따라서, 분리될 수도 있다[예: van Ruijven-Vermeer IA 외, Hoppe Seylers Z Physiol Chem. 360:633-7 (1979)]. 피브린 및 피브리노겐은 당업계에 공지된 글리실, 암모늄 설페이트 또는 에탄올 침전법을 사용하여 분리될 수도 있다.
RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 또는 피브리노겐은 건조된 재료를 매트릭스 위에 살포 또는 분출시키고 동결 건조함으로써 분말 형태로 첨가될 수 있다. 다른 방법으로, 이들 재료는 용액 형태로 매트릭스에 첨가되고 상술된 바와 같이 동결 및 건조될 수도 있다. 동결건조 중에 직물이 부서지거나 백악질로 되는 것을 방지하기 위하여 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로오스 등과 같은 방부제를 함침 용액에 첨가할 수 있다. 일반적으로, 트롬빈 용액 내의 방부제 농도는 최대 약 20%(v/v)까지이다. 바람직한 양태에서는 약 12%(v/v)의 글리세롤이 사용된다.
RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및/또는 피브리노겐의 임의의 배합물을 본 발명의 직물에 혼입할 수도 있다. 바람직하게, RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및/또는 피브리노겐의 총량은, 건조 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1% 내지 약 50% 범위이다. 예시적 양태에서, 본 발명의 지혈용 직물은 다음과 같은 배합물을 포함할 수 있다(모든 중량%는 건조 직물의 총 중량을 기준으로 한다).

또 다른 양태에서, 본 발명의 직물 매트릭스는 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물과 1종 이상의 재수화 동결건조(RL) 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 또는 피브리노겐을 둘 다 포함한다. 예를 들면, 건조된 혈소판, 피브리노겐 및 트롬빈의 바람직한 한 배합물은, 건조 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 3 내지 7중량%의 RL 혈소판, 0.75 내지 1.5중량%의 피브리노겐, 및 0.1 내지 5중량%의 트롬빈을 포함한다. 특히 바람직한 한 양태에서는 약 5중량%의 RL 혈소판, 약 1중량%의 피브리노겐, 및 약 0.1중량%의 트롬빈의 배합물이 사용된다.
트롬빈과 1종 이상의 재수화 동결건조(RL) 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 또는 피브리노겐을 둘 다 함유하는 지혈용 직물은 앞서 일반적으로 설명된 기술들을 사용하여 먼저 트롬빈을 매트릭스에 혼입시킨 후 1종 이상의 재수화 동결건조(RL) 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 또는 피브리노겐을 혼입시켜서 제조하는 것이 바람직하다. 한 양태에서, 본 발명의 지혈용 직물에는 상품명 "FIBROCAPS"(피브리노겐 미세구와 트롬빈 미세구의 배합물, 제조원: ProFibrix BV(Leiderdorp, The Netherlands)로 시판되는, 미국 특허 제6,113,948호(본 명세서에 참조로서 인용된다)에 기재된 바와 같은 피브리노겐과 트롬빈의 배합물이 주입될 수 있다. 동결건조 중에 직물이 부서지거나 백악질로 되는 것을 방지하기 위하여 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로오스 등과 같은 방부제를 함침 용액에 첨가할 수 있다. 일반적으로, 트롬빈 용액 내의 방부제 농도는 최대 약 20%(v/v)까지이다. 바람직한 양태에서는 약 12%(v/v)의 글리세롤이 사용된다.
일반적으로, 본 발명의 지혈용 직물은 다음과 같은 단계에 의해서 제조된다.
1. RL 혈소판 또는 RL 혈액 세포를 공개된 방법에 따라서, 제조하고 동결건조한다.
2. 직물 성분들로부터 지혈용 직물을 제조한다. 이 단계 중에, 직물을 보존하고 지혈 단백질의 접착을 돕기 위해서 한정된 양의 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 약제를 첨가함으로써 직물을 화학 처리할 수 있다. 추가로, 이 단계에서 트롬빈 함유 혈청 또는 혈장을 직물 매트릭스 위에서 동결건조한다.
3. RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 또는 피브리노겐과 같은 지혈 단백질을 지혈용 직물의 선택된 표면(예: 상처 조직에 접촉하게 될 표면)에 소정의 입자 밀도(단백질/직물 표면의 제곱 면적)로 또는 직물의 총 중량을 기준으로 한 중량 백분율로 직접 도포한다. 지혈 단백질은 임의의 순서로 도포될 수 있으며 용액 형태 또는 건조 형태로 직물에 도포될 수 있다. 한 양태에서는 RL 혈소판을 알데하이드로 안정화하고 액체 상태로 직물에 도포한 후 직물 위에서 동결건조한다.
4. 주입된 지혈용 직물을 포장하고 임의로 멸균 처리(예: 감마 또는 UV 조사)한다.
지혈용 직물 및 그의 제조방법의 상세한 예를 아래에 설명한다.
본 발명의 직물 매트릭스는 상처에 도포시 혈액 응고 체계 및 혈관수축 체계를 포함한 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있다. 각종 재료들이 상처 부위와 접촉시 혈소판 및 다른 혈액 응고 인자들을 활성화하는 것으로 오래 동안 알려져 왔다. 혈관 손상에 반응하여 지혈 작용을 제공하는 혈액의 주요 세포 성분인 혈소판은 금속 유리 및 플라스틱과 같은 외래 물질에 노출시 접촉 활성화된다[참조: Barr, H. The stickiness of platelets. Lancet ⅱ, 775(1941)]. 또한, 트롬빈은 혈액 응고 연쇄 반응에서 피브리노겐을 피브린으로 전환시키는 것으로 잘 알려져 있다. 본 발명의 지혈용 직물에서 성분들의 배합물은 상처에 도포시 고농도의 국소화된 형태로 혈액 응고 연쇄 반응을 국소 및 전신적으로 활성화하도록 함께 작용한다.
본 발명의 지혈용 직물은 상처 드레싱, 예를 들면, 붕대, 거즈 등으로서 유용하거나, 수술에 사용하기 위한 봉합물 형태로 만들어질 수 있다. 추가의 용도로는 보호복 또는 의류용 안감을 제조하는 데 사용되는 천이나 지혈대에 사용하기 위한 천 형태로 만들어진 본 발명의 지혈용 직물이 포함된다. 추가로, 다른 양태에서 본 발명의 지혈용 직물은 수술 또는 응급 또는 외상 상황에 사용하기 위한 키트의 형태를 갖는다. 키트는 롤, 시트 또는 다른 적합한 모양을 갖는 본 발명의 지혈용 직물을 포함하고 추가의 혈액 인자와 함께 또는 단독으로 사용될 수 있다.

하기 실시예는 예시를 목적으로 하며 본 발명의 범위를 어떤 식으로든 제한하지 않는다. 달리 뚜렷한 언급이 없는 한, 모든 부 및 백분율은 중량을 기준으로 하고, 모든 온도는 섭씨 온도이다.

재료

후술되는 실시예에서는 하기 용액이 사용된다.

항응고제 시트레이트 덱스트로스(ACD): 0.042M Na₃ 시트레이트, 0.035M 시트르산, 20%(w/v) 무수 덱스트로스, pH 4.5.

시트레이트 염수: 6.2mM Na₃ 시트레이트, 150mM NaCl, pH 6.5.

이미다졸 완충 염수: 84mM 이미다졸, 150mM NaCl, pH 6.8.

4% 파라포름알데하이드: 파라포름알데하이드 20g 및 NaH₂PO₄ 9.4g을 탈이온수 400㎖에 현탁시키고 용해될 때까지 수욕에서 약 60℃로 가열한다. pH를 7.2로 맞추고 물을 500㎖까지 첨가한다.

고정 용액(사용 직전에 제조): ACD 1㎖, 0.135몰 NaH₂PO₄(pH = 6.5) 10㎖ 및 4%(w/v) 파라포름알데하이드 9㎖의 배합물.

이미다졸 완충액: 84mM 이미다졸, pH = 6.8

시트레이트 저장액: 3.2% 나트륨 시트레이트, pH = 7.4

실시예 1-7: 지혈용 직물의 제조

다음과 같은 특정한 직물 배합물을 제조하고 하기 실험에 사용한다.

직물 1: 직포 형태; 경사(warp)로서 G75 유리 섬유; 위사(fill)로서 30/1 100% 대나무 레이온 OE

상기 배합물은 "길이" 방향(경사)의 유리 섬유(G75, E 등급 압출 유리로부터의 전기적 등급 E225 방적사)와 "가로" 방향(위사)의 대나무 섬유를 함께 짠 유리 섬유/대나무 직물이다.

직물 2; 직포 형태; 경사로서 ECBC150 1/0 1.0 Z 유리 섬유; 위사로서 18/1 100% 대나무 레이온 MJS.

직물 3; 직포 형태; 경사로서 ECE225 2/0 4.0 Z 유리 섬유; 위사로서 18/3 100% 대나무 레이온 RS.

직물 4: 편물 형태; 1 말단 - ECG75 1/2 유리 섬유; 1 말단 - 18/1 100% 대나무 레이온 위사.

직물 5: 편물 형태; 2 겹 - 20/1 100% 대나무 레이온과 함께 꼰 ECG150 1/0 유리 섬유.

직물 6: 직포 형태; 경사로서 ECE225 2/0 4.0 Z 유리 섬유; 위사로서 16/2 100% 아마.

직물 7: 직포 형태; 경사로서 ECH18 1/0 0.7 Z 유리 섬유; 위사로서 18/2 100% 라이오셀 MJS.

실시예 8: 트롬빈을 포함하는 지혈용 직물 매트릭스의 제조

엔젤 헤어(angel hair) 등급의 유리 섬유 120㎎을 혈장(Innovative Research, Inc., Southfield, MI) 8㎖ 및 1M CaCl₂ 80㎕와 함께 배합하고 로커(rocker) 위에 올려놓는다. 혼합물을 로커 위에서 약 90분간 온화하게 혼합하고, 원심분리(300xg, 5분)에 의해 혼합물로부터 유리 섬유를 분리한다. 상등액을 수집하고 글리세롤을 최종 농도 9중량%로 되도록 첨가한다. 최종 생성물은 트롬빈 Ⅱa를 함유하는 혈청이다.

상기 직물 1 50㎠를 상기 혈청 약 5㎖에 약 1분간 함침시킨다. 과량의 혈청을 제거하고, 함침된 직물 매트릭스를 -20℃로 냉동하고 동결건조한다.

실시예 9: 트롬빈과 추가의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물 매트릭스의 제조

A. 트롬빈과 재수화 동결건조(RL) 혈소판을 포함하는 직물 매트릭스

재수화 동결건조(RL) 혈소판과 트롬빈을 함유하는 직물계 지혈용 매트릭스의 두 가지 제조방법을 설명한다. 제조물의 품질은 아래에 설명되는 트롬빈 생성 분석을 사용하여 평가될 수 있다.

1. 방법 1

이 방법에서는 RL 혈소판을 별도로 제조한 후 직물 매트릭스에 첨가한다.

(a) RL 혈소판의 제조

RL 혈소판은 미국 특허 제5,651,966호 및 제6,139,878호(본 명세서에 참조로서 인용된다)에 설명된 바와 같이 제조된다. 또는, 다음과 같은 방법을 사용할 수도 있다.

먼저 신선한 정맥혈을 ACD에 넣어서 혈소판 풍부 혈장(PRP)을 제조한다(예: 50cc 주사기로 혈액 42.5㎖을 ACD 7.5㎖에 넣는다). 혈액을 원심분리(10분, 1,200rpm, 25 내지 27℃)하여 적혈구의 층을 만든다. 상등액에서 PRP를 수득한다. 다른 방법으로, 세포를 저장 백으로부터 꺼내고 약 1,200rpm으로 10분간 원심분리하여 오염된 적혈구와 응고 혈소판을 제거함으로써 저장 및/또는 오래된 혈소판으로부터 PRP를 분리할 수도 있다.

원심분리(10분, 약 2,400rpm)를 이용하여 혈장 단백질을 PRP로부터 제거하고, 분리된 혈소판을 시트레이트 완충 염수 중에 재현탁시킨다. 혈소판을 시트레이트 완충 염수에서 2회 세척하고 최종 농도 약 8 ×10⁹ 혈소판/㎖로 되도록 시트레이트 완충 염수에 재현탁시킨다. 다른 방법으로, 크기 크로마토그래피(시트레이트 완충 염수로 평형화된 Sepharose 4B)를 이용하여 혈장 단백질을 PRP로부터 제거할 수도 있다. 탁한 분획물들을 모아서 합하고 원심분리에 의해 혈소판을 분리할 수 있다. 그런 다음 혈소판을 최종 농도 약 8 ×10⁹ 혈소판/㎖로 되도록 시트레이트 완충 염수에 재현탁시킨다.

약 8 ×10⁹ 혈소판/㎖의 농도로 분리된 혈소판 1.25㎖에 고정 용액 3.5㎖를 온화한 교반하에 적가함으로써 분리된 혈소판을 가교결합한다. 고정 용액은 최종 부피 약 10㎖로 되도록 첨가하고, 혼합물을 교반 또는 진탕 없이 실온에서 1시간 동안 항온처리한다. 가교결합된 혈소판을 원심분리(10분, 2,400rpm)에 의해 분리하고 이미다졸 완충 염수에 재현탁시키고 세척한 후 마지막으로 이미다졸 완충 염수에 최종 농도 약 1 ×10⁹ 혈소판/㎖로 되도록 재현탁시킨다.

가교결합된 혈소판을 먼저 5% 소 혈청 알부민을 함유한 이미다졸 완충 염수(pH 6.8)에 최종 혈소판 농도 약 0.8 ×10⁹ 혈소판/㎖로 되도록 현탁시키고, 이 혼합물을 1㎖의 분취량으로 분배한 후 -80℃로 냉동하고 밤새 또는 그 이상 동결건조한다. 동결건조된 생성물을 -20℃에서 보관한다. 동결건조 및 가교결합된 혈소판을 이미다졸 완충액에 재현탁시킴으로써 재수화할 수 있다.

(b) RL 혈소판의 매트릭스로의 첨가

RL 혈소판을 함유하는 매트릭스를 제조하기 위해서, 먼저 RL 혈소판을 건조 상태에서 미세 분말로 분쇄한다. 미세 분말을 페트리(Petri) 접시와 같은 편평한 멸균 표면 위에 균일하게 살포하고, 상기 실시예 8에서 제조된 동결건조된 트롬빈 부하 매트릭스의 한쪽 측면을 RL 분말 위에서 내리누른 후 떼어낸다. 분말화된 RL 혈소판은 공지의 블로잉 기술에 의해서 매트릭스 내에 취입될 수도 있다. 다른 방법으로서, 혈청 알부민의 부재하에 동결건조 없이 RL 혈소판을 제조하고 상기 실시예 8에서 제조된 트롬빈 혈청에 재현탁시킬 수도 있다. 목적하는 매트릭스를 이 용액에 함침시켜서 최종 생성물을 제조한다. 또 다른 방법으로서, 재수화된 RL 혈소판을 상기 실시예 8에 설명된 트롬빈 혈청에 재현탁시키고 목적하는 매트릭스를 함침시키는 데 사용하여 최종 생성물을 제조할 수도 있다.

2. 방법 2

이 방법에서는 RL 혈소판을 매트릭스의 한 성분으로서 직물 매트릭스에 결합시킨 후 알데하이드로 안정화한다. 이 방법의 원리는 먼저 혈소판을 지혈 세포와 직물 섬유 사이의 정상적 상호작용 과정을 통해서 매트릭스에 접촉 활성화하고 접착시키는 것이다. 그런 다음 혈소판과 직물 매트릭스를 함께 알데하이드 안정화 과정으로 처리한다. 이 방법은 다음의 단계들을 포함한다.

(a) 혈소판 풍부 혈장(PRP)을 상술한 바와 같이 제조하거나, 정상적으로 보관된 액체 혈소판 풍부 혈장으로부터 수득한다.

(b) 상기 혈소판 풍부 혈장을, 소정량의 직물 매트릭스과 함께 항온처리하여 90%의 혈소판을 결합시킨다. 결합의 정도를 예정하기 위하여, 매트릭스 시료를 과량의 혈소판(매트릭스를 포화시키기에 충분하고도 남는 양)과 함께 항온처리하고 매트릭스를 제거한 후 혼합물 중에 남은 혈소판의 양을 산출한다.

(c) 상기 매트릭스를 PRP로부터 제거하고 잔류 유체 내의 혈소판 농도를 측정한다.

(d) 상기 직물을 로커 위에서 10배 부피의 시트레이트 염수 중에 5분간 항온처리하고 과량의 유체를 배출시킨다. 이 단계를 3회 반복한다. 이어서 함침된 직물 매트릭스를 아래에 설명된 가교결합 단계에 사용하기 위하여 적합한 부피의 시트레이트 염수 안에 결합 직물 혈소판 수 8 ×10⁹ 혈소판/㎖로 넣는다.

(e) 함침된 혈소판-매트릭스 1.25㎖에 고정 용액 3.5㎖를 온화하게 교반하면서 적가하여 혼합한다(8 ×10⁹ 혈소판/㎖). 최종 결합 직물 혈소판 수 1 ×10⁹ 혈소판/㎖로 되도록 고정 용액을 더 신속하게 첨가함으로써 혼합물을 10㎖의 최종 부피로 되도록 더 희석한다. 교반 또는 진탕 없이 실온에서 1시간 동안 항온처리를 수행한다. 마지막으로, 혈소판-직물 매트릭스를 10배 부피의 이미다졸 완충 염수에 희석하고 로커 위에서 5분간 항온처리한 후 과량의 유체를 배출시킨다. 이 단계를 3회 반복한다.

(f) 트롬빈을 포함시키기 위하여, 혈소판-직물 매트릭스로부터 과량의 이미다졸 완충 염수를 가능한 한 철저하게 제거한 후 상술된 바와 같은 과량의 Ⅱa 혈청에 함침시킨다. 과량의 Ⅱa 혈청을 제거하고 직물 매트릭스를 상술한 바와 같이 냉동 및 동결건조한다.

(g) 동결건조된 지혈용 매트릭스를 트롬빈 생성 분석(이하 설명)을 이용하여 특성화한다.

실시예 8 및 9는 본 발명의 한 양태를 제조하기 위해서 상기 직물 1을 사용하였으나, 당업자들은 본 명세서에 설명된 어떠한 직물 배합물(예: 상술된 직물 2 내지 7)이라도 사용이 가능함을 이해할 것이다.

트롬빈 생성 분석

이 방법은 하기 문헌의 방법을 따른다[참조: Fischer, T.H. 외, Synergistic platelet integrin signaling and factor XⅡ activation in poly-N-acetyl glucosamine fiber-mediated hemostasis, Biomaterials 26, 5433-43 (2005)]. 간략하게, 지혈용 매트릭스가 응고 연쇄 반응의 성분(예: 인자 XⅡ)을 위한 촉매 표면으로서 작용하는 능력을 반영하기 위하여 트롬빈 생성의 동역학을 이용한다. 이 분석에서, 트롬빈(Ⅱa)은 비-형광 합성 지지체 펩타이드 D-Phe-Pro-Arg-ANSNH을 분리하여 형광 생성물을 생성한다. 형광 생성을 위한 시간 과정은 동역학 모드의 96웰 형광 혈소판 판독기에 따른다.

96웰 플레이트를 150㎕의 5% BSA 및 시트레이트 염수로 37℃에서 밤새 차단한 후 사용시까지 4℃에서 보관한다. 4㎜ 트레핀(Trephine) 천공기 또는 면도칼 또는 날카로운 가위를 사용하여 직경이 (대략) 4㎜인 지혈용 매트릭스 조각을 제조한다. 형광분석 Ⅱa 지지체 D-Phe-Pro-Arg-ANSNH(목록 번호 SN-17a-C₆H₁₁, 제조원: Haematologic Technologies, Inc., Essex Junction, VT)를 혈장 내에 1/200로 희석한 후 CaCl₂를 최종 농도 10mM로 되도록 첨가한다. 혼합물을 형광분석기 안에 넣고 대략 2시간 동안 형광(490㎚)을 측정한다. 각각의 웰로부터 시간 과정을 플로팅하고, 상대적 형광 변화 곡선의 초기 및 최대 경사와 최대 경사를 얻는 데 필요한 시간을 측정함으로써 데이터를 분석한다. 초기 및 최대 경사 및 최대 경사까지의 시간이 품질 지표이다. 경사가 높을 수록, 그리고 최대 경사까지의 시간이 짧을 수록 매트릭스의 지혈 효과가 크다.

실시예 10: 이중 섬유 직물의 제조

이 실시예는 유리 섬유와 기타의 선택된 직물 섬유가 배합되어 만들어진 직물의 제조를 보여준다. 연속 필라멘트 유리실이 지혈용 직물의 잠재적 성분이라는 사실의 두 가지 증거가 있다. 첫째, 혈소판은 유리를 활성화하여 유리에 접착되는 것으로 밝혀졌다[Barr, H. Lancet 238, 609-610 (1941)]. 따라서, 유리 용기는 일반적으로 혈소판의 시험관내 취급에서 제외되며, 혈소판 활성의 분석 방법에서는 유리에 대한 결합이 다년간 이용되고 있다[McPherson, J. & Zucker, M.B. Blood 41, 55-67 (1976); Tsukada, T. & Ogawa, T. Rinsho Ketsueki 14, 777-84 (1973); Cooper, R.G., Cornell, C.N., Muhrer, M.E. & Garb, S. Tex Rep Biol Med 27, 955-61 (1969)]. 둘째, 혈장 단백질[Stouffer, J.E. & Lipscomb, H.S. Endocrinology 72, 91-4 (1963); Lissitzky, S., Roques, M. & Benevent, M.T. C R Seances Soc Biol Fil 154, 396-9 (1960); Bull, H.B. Biochim Biophys Acta 19, 464-71. (1956)], FXⅡ[Ratnoff, O.D. & Rosenblum, J.M. Am J Med 25, 160-8 (1958)] 및 피브리노겐[Sit, P.S. & Marchant, R.E. Thromb Haemost 82, 1053-60 (1999); Rapoza, R.J. & Horbett, T.A. J Biomed Mater Res 24, 1263-87 (1990); Perez-Luna, V.H., Horbett, T.A. & Ratner, B.D. J Biomed Mater Res 28, 1111-26 (1994)]은 충분히 연구된 예로서 외래 표면 위에서 화학적 및 물리적 흡착 과정을 겪는다[Silberberg, A.J. Physical Chem. 66, 1872-1883 (1962)]. FXⅡ[하게만(Hageman) 인자]는 유리/혈액 계면에서 체액의 응고를 개시하기 때문에 특히 중요한 것으로 밝혀졌다[Ratnoff, 상동; Ratnoff, O.D. & Margolius, A., Jr. Trans Assoc Am Physicians 68, 149-54 (1955)]. 혈소판은 트롬빈 생성을 위한 Ⅴa/Ⅹa 착물의 조립을 위한 촉매 표면으로서 작용하기 때문에 혈소판 활성화와 고유 응고의 전환은 상관관계가 매우 높은 기전들이다. 생체재료에 의한(예: 인테그린 아웃사이드-인 신호 전달을 통한) 혈소판 활성화는 트롬빈 생성을 위한 촉매 착물의 중요한 성분인 포스파티딜세린의 표면 제시를 제공할 수 있다[Fischer, T.H., Connolly, R., Thatte, H.S. & Schwaitzberg, S.S. Microsc Res Tech 63, 168-74 (2004)]. 혈소판 표면 위에서 일어나는 인자 XⅡ를 포함한 일련의 단백질 가수분해 단계는 충분히 이해되지 않으나, 인자 XⅡ는 세포의 미세환경에서 고유 응고 경로의 활성화를 위한 혈소판 표면과 피상적으로 관련되는 것으로 밝혀졌다[Iatridis, P.G., Ferguson, J.H. & Iatridis, S.G. Thromb Diath Haemorrh 11, 355-71 (1964); Shibayama, Y., Reddigari, S. & Kaplan, A.P. Immunopharmacology 제32권 24-7 (1996)]. XⅡa 매개된 응고와 혈소판 활성화 사이의 밀접한 상관관계의 전체적인 효과는 피브린 중합의 조속한 개시를 위한 상조작용이다.

유체와 유리의 상호작용은 소수성, 제타 전위 및 습윤성과 관련한 표면 장력 현상에 의해서 크게 제어된다. 필라멘트의 내부와 유체 사이에는 최소한의 상호작용이 존재한다. 따라서, 유리의 낮은 유체 수송력과 흡수성을 보완하기 위해서는 흡수성이 보다 큰 제2 타입의 섬유가 요구된다. 천연 및 합성 섬유의 패널을 혈소판 및 고유 응고 연쇄 반응을 활성화하는 경향에 대해서 시험한다. 연속 필라멘트 타입의 E 유리와 스페셜티 레이온(specialty rayon)으로 구성된 이중 섬유 제품을 제조하고 돼지 출혈 모델에서의 지혈 효능에 대해 시험한다.

재료

타입 E 연속 필라멘트 유리(ECDE 11.6 유리 섬유)는 Carolina Narrow Fabrics, Inc.(Winston-Salem, NC)에 의해 제공된다. 대나무(Bambusa textilis)로부터 만들어진 스페셜티 레이온 및 다른 천연 및 합성 섬유는 Cheraw Yarn Mills, Inc.(Cheraw, SC)에 의해 제공된다. 이중 유리 섬유/스페셜티 레이온 직물은 Carolina Narrow Fabrics, Inc.(Winston-Salem, NC)에 의해 제조된다. 거즈는 Kendall(Mansfield, MA)로부터 구입한다.

혈소판 풍부 혈장 분리

동의서에 서명한 정상적 지원자로부터 얻은 말초 혈액을 시트레이트 항응고제에 넣은 후, 분별 원심분리를 사용하여 혈소판 풍부 혈장을 분리한다[참조: Fischer, T.H. 외, Biomaterials 26, 5433-43 (2005)]. 히스카(Hiska) 혈액학 분석 장치를 사용하여 혈소판 풍부 혈장 중의 혈소판 농도를 측정하고, 시료를 혈소판 무함유 혈장으로 희석함으로써 혈소판 농도를 150,000 혈소판/㎕로 조정한다.

트롬빈 생성 동역학

혈소판 풍부 혈장(150,000 혈소판/㎕)에서 트롬빈 생성의 동역학에 미치는 섬유의 영향을 트롬빈 지지체 D-Phe-Pro-Arg-ANSNH의 가수분해에 의해 형광 반응 생성물을 수득함으로써 조사한다. 각각의 섬유 300㎍을 혈소판 풍부 혈장 100㎕ 내에서 형광 지지체 D-Phe-Pro-Arg-ANSNH를 사용하여 3번씩 시험한다. 트롬빈 생성의 시간 과정은 각각의 시료에 CaCl₂를 10mM로 되도록 첨가함으로써 개시하고 있다. 트롬빈 생성에 대한 지체 시간은 형광이 초기의 기저값에 대해 10% 증가한 시점으로 정의된다.

혈전 탄성 묘사

혈전 탄성 묘사(TEG) 측정은 TEG-5000 혈전 탄성 묘사 지혈 분석 장치(Haemoscope Corporation, Niles, IL)를 사용하여 수행한다. 분석은 혈소판 풍부 혈장(150,000 혈소판/㎕)에 CaCl₂를 10mM로 되도록 첨가한 후 석회화된 혈소판 풍부 혈장 327㎕를, 시트레이트 염수 33㎕ 중에 재료를 함유한 혈전 탄성 묘사 채임버로 옮김으로써 개시된다. 최종 섬유 농도는 3.0㎎/㎖이다. 37℃에서 1시간 동안 3번씩 측정을 수행한 후, 관련 파라미터들을 "강직도" 곡선으로부터 추출한다.

주사 전자 현미경

글루코사민계 재료의 SEM 분석을 다음과 같이 수행한다. 정상적 사람 지원자로부터 얻은 말초 전혈을, 정맥 채혈로부터 이중 섬유 직물 또는 거즈 위에, 각각의 재료 1㎝ ×1㎝가 전혈 2㎖로 덮이도록, 직접 흐르게 한다. 재료를 1분간 항온처리한 후 시트레이트 염수 + 1mM EGTA로 50㎖로 되도록 희석하여 지혈 과정을 멈추게 한다. 재료를 5분간 중력으로 침강시킨 후 시트레이트 염수로 재희석한다. 이 과정을 2회 더 반복하여 비결합 RBC가 없는 각각의 재료를 수득한다. 혈액과의 1분간의 접촉과 희석 및 재료/RBC 착물 안정화의 여러 주기를 수행한 후, 글루타르알데하이드를 0.1%(w/v)로 첨가하고 시료를 실온에서 1시간 동안 항온처리한다. 시료를 4% 파라포름알데하이드를 사용하여 최종 농도 2%로 되도록 1/1(v/v) 희석한 후, 추가의 글루타르알데하이드를 최종 농도 0.5%로 되도록 첨가한다. 0.1% 글루타르알데하이드를 사용한 초기의 안정화 단계는 적혈구(RBC) 형태학에서의 삼투에 의한 변형을 최소화하는 것으로 보여진다[Fischer, T.H. 외, Microsc Res Tech 65, 62-71 (2004)]. 시료를 4℃에서 밤새 보관한 후 캠브리지(Cambridge) S200 주사 전자 현미경으로 20kv에서 시험한다.

결합 RBC의 측정

이중 섬유 또는 거즈 시료 10㎎을 말초 전혈 1.0㎖에 직접 노출시키고 주사 전자 현미경에서 설명한 바와 같이 세척한다. 이어서 pGlcNAc를 1% TX-100과 함께 증류수 10㎖에 넣어서 결합 RBC로부터 헤모글로빈을 방출시킨다. 시료를 10,000xg로 5분간 원심분리한 후 414㎚에서 흡광도를 측정하여 각각의 재료와 관련된 헤모글로빈의 총량 (및 RBC의 개수)을 정량한다.

재료 접촉으로 인한 RBC 용해 정도의 측정

마지막 두 단락에서와 같이 이중 섬유 또는 거즈 시료 10㎎을 말초 전혈 1.0㎖에 노출시킨다. 1분간의 노출 후, 시료를 10,000xg로 5분간 원심분리하여 혈액 세포 및 다른 재료를 펠릿화한다. 414㎚에서 광학 밀도를 측정하여 상등액 내의 방출 헤모글로빈의 양과 유출 혈액의 양을 정량한다.

돼지 상완 신경총 및 대퇴 동맥 횡단면 출혈 모델

40 내지 50㎏의 혼합 사육 돼지를 이소플루오란으로 마취시킨 후 혈역학 및 혈관활성 과정을 따라가기 위해서 여러 센서들을 위치시킨다: 폐동맥 열 희석 카테터를 외경정맥을 통해 폐동맥에 삽입하고, 마이크로마노메터가 끝에 달린 카테터를 좌측 대퇴 혈관을 통해 우심방과 흉부 대동맥 내에 위치시키며, 22 게이지 카테터를 좌측 대퇴 동맥에 삽입하고 회수 펌프에 연결시키고, 좌측 대퇴 혈관을 통해 카테터를 위치시킨다.

실험의 출혈 단계는 두 개의 단계로 수행된다. 먼저, 대측 상완 동맥들의 상호적 열상을 수행한다. 상완 동맥과 직경 약 3㎜의 2개의 관련된 정맥을 수술로 노출시킨다. 각각 한쪽의 동맥과 2개의 정맥을 외과용 메스로 한번 쳐서 완전히 가로절개한다. 손상을 거의 동시적으로 입힌 후 각각의 측면을 이중 섬유 직물 또는 거즈로 즉시 틀어막는다. 날카로운 절단 부위를 각각의 재료로 완전히 틀어막은 후 6분간 압력을 유지한다. 틀어막은 것을 벗겨내고 유출 혈액의 양을 후술하는 바와 같이 확인한다. 이어서 양쪽의 상처들을 이중 섬유 재료로 다시 틀어막아서 동물을 안정시킨다. 실험의 두 번째 단계는 대측 대퇴 동맥들을 수술로 노출시켜서 수행한다. 두 개의 대측 대퇴 동맥을 거의 동시적으로 가로절개한 후 수술 부위들을 이중 섬유 직물 또는 거즈로 틀어막는다. 6분간 압력을 유지한 후 재료들을 벗겨내어 유출 혈액 측정에 사용한다.

이중 섬유 또는 거즈를 증류수 1ℓ에 넣어 RBC를 용해시킴으로써 최초로 틀어막았던 재료 내의 유출 혈액의 양을 측정한다. 실온에서 2시간 동안 교반하고 2℃에서 보관한 후 414㎚에서 광학 밀도를 측정하여 방출된 헤모글로빈의 양과 유출 RBC의 개수 및 혈액 손실 부피를 측정한다.

결과

실험은 세 단계로 진행된다. 먼저, 선택된 섬유를, 혈소판 풍부 혈장 중에서 지혈 과정을 활성화하는 능력을 측정함으로써 지혈용 직물을 제조하기 위한 후보 재료들을 식별한다. 두 번째로, 이중 섬유 배합물을 TEG 및 SEM 분석하여 기능의 기전을 통찰한다. 마지막으로, 돼지 출혈 모델에서 이중 섬유 직물이 지혈을 제공하는 능력을 분석한다. 이들 실험을 아래에 상세히 설명한다.

후보 섬유에 의한 지혈 시스템의 활성화

통상의 직물 섬유 패널을 혈소판의 활성화와 고유(접촉) 응고 경로의 전환의 촉진 능력에 대해 분석한다. 형광 트롬빈 생성 분석에서의 각각의 섬유의 거동을 도 1에 도시한다. 도 1에서, 두 쌍의 유리, 스페셜티 레이온 또는 거즈 섬유 시료를, 형광 트롬빈 지지체를 함유하는 혈소판 풍부 혈장 안에 넣은 후 칼슘 첨가에 의해 트롬빈 생성 시간 과정을 개시하고 있다. 화살표는 트롬빈 생성을 위한 시간을 가리킨다. 도 1에서 보는 바와 같이, 혈소판 풍부 혈장의 타입 E 연속 필라멘트 유리에 대한 노출은 대략 8분에서 트롬빈 생성을 가져온다. 스페셜티 레이온은 12분에서 트롬빈 생성이 일어나 혈전형성성이 덜하고, 거즈 섬유는 상당히 더 느리다.

더 광범위한 섬유 패널들의 거동을 도 2에 도시한다. 도 2에서, 표시된 섬유들을 도 1에서 설명된 바와 같이 시험하여 트롬빈 생성을 위한 시간을 측정한다. 오차 막대는 두 번의 분석에 대한 표준 편차를 나타낸다. 도 2에서 보는 바와 같이, 유리 및 스페셜티 레이온은 각각 1순위 및 2순위로 혈전형성성이 큰 시험 재료이다. 표면 지혈용 제품의 성분들인 키틴 및 거즈는 트롬빈 생성을 크게 촉진하지 않는다. 따라서, 원형(原型) 붕대는 유리와 스페셜티 레이온으로부터 구성된다.

유리/스페셜티 레이온 이중 섬유 직물의 시험관내 특성

이중 섬유 매트릭스 및 거즈를 혈소판 풍부 혈장을 사용한 혈전 탄성 묘사 분석에서 비교하여 도 3에 도시한다. 도 3에서, 이중 섬유 또는 거즈를 생리 식염수와 함께 혈전 탄성 묘사 큐벳(cuvette)에 넣은 후 혈소판 풍부 혈장과 칼슘을 첨가하여 응혈 형성 시간 과정을 개시하고 있다. 재료가 없는 생리 식염수를 음성 대조군으로 사용한다. 도 3에서 보는 바와 같이, 유리/스페셜티 레이온 직물은 거즈 또는 식염수 대조군에 비해서 피브린 응혈 형성을 크게 촉진하는 것으로 밝혀졌다. 이중 섬유 매트릭스와 거즈를 과량의 말초 혈액과 접촉시킨 후 도 3에 도시된 바와 같이 주사 전자 현미경을 사용하여 분석한다. 도 4에서, 이중 섬유 또는 거즈를 과량의 말초 혈액으로 포화시킨 후 상기 설명된 바와 같은 주사 전자 현미경으로 조사한다. 우측 두 개의 이중 섬유 패널에서 백색의 화살표는 스페셜티 레이온 섬유를 가리킨다. 도 4에서 보는 바와 같이, 유리/스페셜티 레이온 매트릭스는 상당한 개수의 RBC를 단단히 결합하는 반면, 거즈 매트릭스는 이들 세포를 드문드문 덮고 있다.

각각의 매트릭스 상의 RBC의 개수에 대한 정량을 도 5에 도시한다. 도 5에서, 이중 섬유 또는 거즈를 과량의 말초 혈액으로 포화시킨 후 결합 RBC의 개수를 상술된 바와 같이 측정한다. 오차 막대는 두 번의 측정에 대한 표준 편차를 나타낸다. 도 5에서 보는 바와 같이, 이중 섬유 직물은 거즈에 비해 대략 10배의 RBC를 결합한다. RBC의 용해는 현저하게 일어나지 않는다(데이터 미기재). 이중 섬유를 말초 혈액으로 포화시키고 세척한 후 주사 전자 현미경으로 시험한 결과를 보여주는 도 6에서 알 수 있듯이, 이중 섬유 매트릭스의 SEM 시험도 연속 유리 필라멘트 성분 위에 고활성화 혈소판이 다수 존재함을 보여준다. 이러한 결과는 유리/스페셜티 레이온 매트릭스가 표면 지혈 작용을 제공함에 있어서 거즈보다 더 효과적임을 나타낸다.

돼지 모델에서 이중 섬유 붕대가 지혈 작용을 제공하는 능력

심각한 돼지 대혈관 절단 손상에서 이중 섬유 매트릭스를 거즈와 비교한다. 두 가지 타입의 손상을 각각 네 마리의 돼지에 대해 행한다. 첫째로, 대측 정맥총 영역에서 상완 동맥과 두 개의 관련된 대정맥을 거의 동시적으로 완전히 절개한다. 이것은 사실상 동맥과 정맥 모두에서 대량의 출혈을 가져온다. 대측 절단/손상 부위를 손상 부위를 메우기 위해 필요한 만큼의 이중 섬유 직물 또는 거즈를 사용하여 즉시 틀어막는다. 6분간 압력을 유지한 후 손상 부위를 풀어서 지혈 정도를 완벽(육안 출혈 없음), 부분적(분당 혈액 손실 3㎖ 미만), 또는 비억제(분당 혈액 손실 3㎖ 초과)로 평가한다. 각각의 상처 부위로부터 틀어막은 재료 상의 혈액 손실과 임의의 유출 혈액을 측정한다. 그런 다음 대측 상완 정맥총 손상 부위를 다시 이중 섬유 직물로 틀어막아서 두 번째의 대퇴 손상을 위해 동물을 안정시킨다. 대측 대퇴 동맥을 노출시킨 후 거의 동시적으로 완전히 절개하여 다량의 출혈을 개시하고 있다. 상완 정맥총 손상과 같이, 손상 부위를 이중 섬유 직물 또는 거즈로 즉시 틀어막는다. 6분간 압력을 유지한 후 손상 부위를 풀고 지혈 정도를 상완 손상에 대해 설명한 바와 같이 평가한다. 이러한 대혈관 절단 모델의 중요한 특징은 동물들이 출혈성 쇼크를 일으키지 않는다는 것이다. 압력을 가해서 손상을 즉시 틀어막기 때문에 평균 동맥압은 45 내지 55㎜Hg 범위이고 총 혈액 손실은 총 혈액 부피의 약 5%를 넘지 않는다. 도 7에서 보는 바와 같이 상완 정맥총과 대퇴 손상 모두에서 이중 섬유 재료를 사용한 혈액 손실의 총량은 거즈를 사용한 경우의 대략 절반이다. 도 7에서, 6분간 압력을 가한 후로부터 상완(좌측 패널 A) 및 대퇴(우측 패널 B)로부터 유출된 혈액과 흡수된 재료의 총량을 측정한다. 오차 막대는 다섯 마리의 동물에서 유사한 손상으로부터의 혈액 손실에 대한 표준 편차를 나타낸다. 도 7에서 보는 바와 같이, 거즈는 지혈 마개를 벗겨내는 경향이 두드러지는 반면(하나가 존재하는 정도), 이중 섬유 직물은 지혈 영역 안에 강하게 혼입되지 않는다.

산업상 이용 가능성

상기 결과들은 지혈의 기본적인 원리를 이용하여 표면 지혈을 위한 경제적인 재료들을 고안할 수 있음을 보여준다. 유리/스페셜티 레이온 직물은 모세혈관 및 대혈관 손상의 돼지 모델에서 거즈보다 우수한 성능을 나타내고, 직물의 섬유 성분을 혈전형성에 관해서 최적화할 때 출혈 시간과 혈액 손실이 대략 절반으로 감소된다.

본 발명을 특정한 양태를 들어서 설명하였으나, 본 명세서에 설명된 본 발명의 개념을 벗어나지 않고 다양한 변화, 변형 및 개선이 이루어질 수 있음은 명백하다. 따라서, 이러한 모든 변화, 변형 및 개선도 첨부된 청구의 범위에 기재된 본 발명의 넓은 범위와 정신에 포함되는 것으로 생각된다.

Claims

유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료를 포함하는 지혈용 직물로서,
상기 제2 섬유가 견 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시(ramie) 섬유; 황마(jute) 섬유; 사이잘(sisal) 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀(lyocel) 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석(feldspar) 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되며,
상기 지혈용 직물이 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
제1항에 있어서, 상기 재료가 유리 섬유와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유의 배합물을 포함하는, 지혈용 직물.
제1항에 있어서, 직포 또는 부직포 형태인, 지혈용 직물.
제1항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 0.1중량% 내지 약 99.9중량%와 제2 섬유 약 99.9중량% 내지 약 0.1중량%인, 지혈용 직물.
제1항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 30중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 70중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제1항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 50중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 50중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제1항에 있어서, 의류 또는 의류용 안감인, 지혈용 직물.
유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료를 포함하고 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료; 및 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물을 포함하는 지혈용 직물로서,
상기 제2 섬유가 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되며,
상기 지혈용 직물이 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 인자 XⅡ, 인자 XⅡa, 인자 XⅠ, 인자 XⅠa, 인자 XⅢ, 인자 XⅢa, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅸa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅷa, 인자 vWF, 인자 Ⅴ, 인자 Ⅴa, 인자 Ⅹ, 인자 Ⅹa 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 응고 인자를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 혈관작용제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제11항에 있어서, 상기 혈관작용제가 엔도텔린, 트롬복산, NO 스캐빈저 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로스 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 방부제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 트롬빈 Ⅱa를 함유하는 부분 정제된 혈장 분획물인, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 0.1중량% 내지 약 99.9중량%와 제2 섬유 약 99.9중량% 내지 약 0.1중량%인, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 30중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 70중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 50중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 50중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.01 내지 약 10중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.05 내지 약 7중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 상기 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 스킨 컨디셔닝제, 소염제, 진통제, 항균제, 항진균제, 혈관수축제, 성장 인자, 흉터 억제제, 소작제(cauterizing agent), 탈수제, 혈전형성제 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 부가제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 직포 또는 부직포 형태인, 지혈용 직물.
제9항에 있어서, 의류 또는 의류용 안감인, 지혈용 직물.
직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료와 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물 약 0.1 내지 약 5중량%를 포함하고, 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물로서,
상기 제2 섬유가 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되며,
상기 지혈용 직물이 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 인자 XⅡ, 인자 XⅡa, 인자 XⅠ, 인자 XⅠa, 인자 XⅢ, 인자 XⅢa, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅸa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅷa, 인자 vWF, 인자 Ⅴ, 인자 Ⅴa, 인자 Ⅹ, 인자 Ⅹa 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 응고 인자를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 혈관작용제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제27항에 있어서, 상기 혈관작용제가 엔도텔린, 트롬복산, NO 스캐빈저 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로스 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 방부제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 0.1중량% 내지 약 99.9중량%와 제2 섬유 약 99.9중량% 내지 약 0.1중량%인, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 30중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 70중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 50중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 50중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 상기 RL 혈소판 또는 RL 혈액 세포가, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1 내지 약 20중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 상기 피브린 또는 피브리노겐이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 스킨 컨디셔닝제, 소염제, 진통제, 항균제, 항진균제, 혈관수축제, 성장 인자, 흉터 억제제, 소작제, 탈수제, 혈전형성제 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 부가제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 직포 또는 부직포 형태인, 지혈용 직물.
제25항에 있어서, 의류 또는 의류용 안감인, 지혈용 직물.
직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료와 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물로서,
상기 RL 혈소판 및 RL 혈액 세포가 약 0.1 내지 약 20중량%로 포함되고,
상기 피브린 및 피브리노겐이 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함되며,
상기 지혈용 직물이 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료; 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물로서,
상기 제2 섬유가 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되며,
상기 지혈용 직물이 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 인자 XⅡ, 인자 XⅡa, 인자 XⅠ, 인자 XⅠa, 인자 XⅢ, 인자 XⅢa, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅸa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅷa, 인자 vWF, 인자 Ⅴ, 인자 Ⅴa, 인자 Ⅹ, 인자 Ⅹa 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 응고 인자를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 혈관작용제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제41항에 있어서, 상기 혈관작용제가 엔도텔린, 트롬복산, NO 스캐빈저 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로스 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 방부제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 트롬빈 Ⅱa를 함유하는 부분 정제된 혈장 분획물인, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 0.1중량% 내지 약 99.9중량%와 제2 섬유 약 99.9중량% 내지 약 0.1중량%인, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 30중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 70중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 유리 섬유와 제2 섬유의 상대적 양이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 50중량% 내지 약 80중량%와 제2 섬유 약 50중량% 내지 약 20중량%인, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.01 내지 약 10중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.05 내지 약 7중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 RL 혈소판 또는 RL 혈액 세포가, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1 내지 약 20중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 상기 피브린 또는 피브리노겐이, 상기 직물의 총 중량을 기준으로 하여, 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함되는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 스킨 컨디셔닝제, 소염제, 진통제, 항균제, 항진균제, 혈관수축제, 성장 인자, 흉터 억제제, 소작제, 탈수제, 혈전형성제 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 부가제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 직포 또는 부직포 형태인, 지혈용 직물.
제39항에 있어서, 의류 또는 의류용 안감인, 지혈용 직물.
직물의 총 중량을 기준으로 하여, 유리 섬유 약 65중량%와 대나무 원료섬유 또는 재생섬유 약 35중량%의 배합물을 함유하는 재료; 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물 약 0.1 내지 약 5중량%; 및 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린 및 피브리노겐으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제를 포함하는 지혈용 직물로서,
상기 RL 혈소판 및 RL 혈액 세포가 약 0.1 내지 약 20중량%로 포함되고,
상기 피브린 및 피브리노겐이 약 0.1 내지 약 5중량%로 포함되며,
상기 지혈용 직물이 상처에 도포시 체내 지혈 시스템을 활성화할 수 있는, 지혈용 직물.
(1) 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료를, 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물과, 임의로 RL 혈소판, RL 혈액 세포, 피브린, 피브리노겐 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 지혈제에 접촉시켜서 습윤 매트릭스를 형성하는 단계; 및
(2) 상기 습윤 매트릭스를 건조시켜 지혈용 직물을 생성하는 단계를 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법으로서,
상기 제2 섬유가 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물의 제조방법.
제57항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 인자 XⅡ, 인자 XⅡa, 인자 XⅠ, 인자 XⅠa, 인자 XⅢ, 인자 XⅢa, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅸa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅷa, 인자 vWF, 인자 Ⅴ, 인자 Ⅴa, 인자 Ⅹ, 인자 Ⅹa 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 응고 인자를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제57항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 혈관작용제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제59항에 있어서, 상기 혈관작용제가 엔도텔린, 트롬복산, NO 스캐빈저 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물의 제조방법.
제57항에 있어서, 상기 직물이 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로스 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 방부제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제57항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 트롬빈 Ⅱa를 함유하는 부분 정제된 혈장 분획물인, 지혈용 직물의 제조방법.
제57항에 있어서, 상기 직물이 스킨 컨디셔닝제, 소염제, 진통제, 항균제, 항진균제, 혈관수축제, 성장 인자, 흉터 억제제, 소작제, 탈수제, 혈전형성제 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 부가제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제57항에 있어서, 상기 재료가 직포 또는 부직포 형태인, 지혈용 직물의 제조방법.
(1) 유리 섬유와 1종 이상의 제2 섬유의 배합물을 함유하는 재료를, 혈소판을 함유하는 혈소판 풍부 혈장과 접촉시키는 단계;
(2) 상기 혈소판을 가교결합하는 단계; 및
(3) 임의로 직물을 트롬빈 또는 트롬빈 함유 분획물과 접촉시켜서 지혈용 직물을 생성하는 단계를 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법으로서,
상기 제2 섬유가 견 섬유; 폴리에스테르 섬유; 나일론 섬유; 세라믹 섬유; 대나무 원료섬유 또는 재생섬유; 면 섬유; 레이온 섬유; 리넨 섬유; 모시 섬유; 황마 섬유; 사이잘 섬유; 아마 섬유; 대두 섬유; 옥수수 섬유; 대마 섬유; 라이오셀 섬유; 모; 락타이드 및/또는 글리콜라이드 중합체; 락타이드/글리콜라이드 공중합체; 실리케이트 섬유; 폴리아미드 섬유; 장석 섬유; 제올라이트 섬유; 제올라이트 함유 섬유; 아세테이트 섬유; 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 지혈용 직물을 건조시키는 단계를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 인자 XⅡ, 인자 XⅡa, 인자 XⅠ, 인자 XⅠa, 인자 XⅢ, 인자 XⅢa, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅸa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅷa, 인자 vWF, 인자 Ⅴ, 인자 Ⅴa, 인자 Ⅹ, 인자 Ⅹa 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 응고 인자를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 혈관작용제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제68항에 있어서, 상기 혈관작용제가 엔도텔린, 트롬복산, NO 스캐빈저 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 직물이 글리세롤, 프로판디올, 폴리옥시에틸렌 글리콜(PEG), 트레할로스 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 방부제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 트롬빈 함유 분획물이 트롬빈 Ⅱa를 함유하는 부분 정제된 혈장 분획물인, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 직물이 스킨 컨디셔닝제, 소염제, 진통제, 항균제, 항진균제, 혈관수축제, 성장 인자, 흉터 억제제, 소작제, 탈수제, 혈전형성제 및 이들의 배합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1종 이상의 부가제를 추가로 포함하는, 지혈용 직물의 제조방법.
제65항에 있어서, 상기 재료가 직포 또는 부직포 형태인, 지혈용 직물의 제조방법.