KR20130059640A - 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상을 함유하는 모발 및 두피 상태 개선용 조성물에 관한 것이다.

Description

탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물{Composition for improving hair growth or preventing hair loss}
본 발명은 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상의 누룩 발효물을 함유하는 모발 및 두피 상태 개선용 조성물에 관한 것이다.
탈모는 성장주기에 따라 휴지기성 탈모와 성장기성 탈모로 구분하며 휴지기성 탈모로는 안드로겐에 의한 남성형 탈모, 여성의 산후 탈모, 내분비 질환에 의한 탈모가 있으며 성장기성 탈모는 원형 탈모, 반흔성 탈모 및 두부 백선에 의한 탈모 등이 있다(Kuag, 2001). 또한 국소감염(Muller et al., 1980), 내분비 장애(Bergfeld, 1978), 유전 인자(Selman, wilzet al., 1974) 및 자가 면역(Friedman, 1981) 등에 의하여 탈모가 발생하는 것으로 알려져 있다.
현재 대표적인 탈모 방지제로는 미국 FDA에서 승인받은 프로페시아와 미녹시딜 등이 있다. 이러한 약물은 임상적으로 분명한 효과를 보이나 성기능 장애 및 피부 자극 등 부작용을 나타낼 뿐만 아니라 여성은 사용이 불가되었거나 혹은 제한적인 단점이 있다. 최근 이러한 약물의 단점을 보완할 수 있는 새로운 기전의 발모제와 더불어 안전하면서 성별에 제한없이 사용할 수 있는 천연물 원료 개발이 활발하게 이루어 지고 있다.
대한민국 등록특허 제10-0581316호에서는 충을자, 감송향, 감국, 도인, 산수유, 토사자, 오미자, 백출, 솔잎과 당귀의 수종 한약재 혼합 추출액을 함유하는 탈모방지 및 발모촉진 조성물에 대해 언급하고 있고 대한민국 등록특허 제10-0609210호에서는 당귀뿌리와 우엉뿌리의 에탄올 추출물을 함유함으로서 당귀 뿌리의 베타시토스테롤 성분에 의한 5-알파 환원효소의 억제 효과와 우엉뿌리의 이눌린 성분에 의한 혈류개선 효과로 탈모방지 효과를 가지는 탈모방지 샴푸 조성물에 대해 언급하고 있다. 그러나 이와 같은 사례 중 많은 경우가 임상적으로 나타나는 탈모 방지 효과의 작용 기작을 명확하게 규명할 수 없는 경우가 많으며, 본 발명의 7가지 약삼 추출물의 누룩 발효 추출물을 사용하여 모유두 세포 증식, 혈행 촉진효과 및 두피 항상화 효과에 대해서는 아직까지 알려진 바 없다.
본 발명에서는 샴푸와 같이 일상적인 관리 차원에서 편리하면서 부작용 없이 안전하게 탈모 방지 효과를 제공하는 천연물 원료를 이용한 조성물을 개발하고자 노력한 결과 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상을 누룩 발효하여 모유두 세포 증식, 혈행 촉진, 항산화 효과를 보임으로써 탈모 방지 효과를 부여 할 수 있음을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에서는 본 발명은 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상의 누룩발효물을 함유하는 모발 및 두피 상태 개선용 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 현삼(玄蔘, Scrophularia buergeriana)은 현삼과의 다년초 식물로, 중대(重臺), 현대(玄臺), 귀장(鬼藏), 축마(逐馬)라고도 한다. 한방에서 뿌리를 현삼이라고 하며 해열제로 인후염, 종기, 림프선염에 사용한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 인삼(人蔘)은 두릅나무과의 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)의 뿌리로서 가는 뿌리와 코르크 층을 제거한 것을 말한다. 특히 우리나라에서는 백삼(白蔘:생 것), 홍삼(紅蔘:찐 것), 미삼(尾蔘:가는 뿌리)으로 구분하여 기록했으나 민간에서는 야생삼도 장뇌와 산삼으로 구별한다. 중국에서는 인삼의 뿌리와 뿌리줄기를 말하며 원삼(재배삼), 홍삼, 산삼(야생삼)으로 구별한다. 인삼은 뿌리 모양이 사람과 같아서 붙여진 이름이며 귀신 같은 효험이 있다고 하여 신초(神草)로 불리기도 하고 높은 계급에 해당되어 사람이 받든다는 의미로 인함(人銜)이라고도 하며 해를 등지고 음지를 향해 있으므로 귀개(鬼蓋)라고도 한다. 이 약은 특이한 냄새가 있으며 맛은 달고 약간 쓰며 성질은 약간 따듯하다. 인삼은 원기를 보하고 신체허약, 권태, 피로, 식욕부진, 구토, 설사에 쓰이며 폐기능을 도우며 진액을 생성하고 안신작용 및 신기능을 높여 준다. 약리작용은 대뇌피질흥분과 억제, 평형, 항피로, 항노화, 면역증강, 심장수축, 성선촉진, 고혈당억제, 단백질합성촉진, 항상성유지, 항암, 해독작용 등이 보고되었다. 생김새는 가늘고 긴 원주형이나 방추형으로 2~5개의 곁뿌리가 나 있고 바깥 면은 엷은 황갈색이며 세로주름과 가는 뿌리 자국이 있다. 근두부에는 줄기의 잔기가 붙어 있던 노두가 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 단삼(丹蔘)은 Salvia miltiorrhiza Bunge의 뿌리로 만든 약재(한국, 중국)이며 일본에서는 사용하지 않는다. 다섯 가지 삼(參)- 인삼, 고삼, 단삼, 현삼, 사삼 -은 오색(五色)을 띄며 오장(五臟)에 각각 배속되는데 단삼은 심(心)에 들어가기 때문에 적삼(赤參)이라고 부르기도 하였다. 또한 단삼은 풍병(風病)을 치료하여 하지무력감을 없애주므로 달리는 말을 쫓아갈 수 있게 한다 하여 분마초(奔馬草)라는 이름으로 부르기도 하였다. 이 약은 약간 특이한 향기가 있고 약성은 쓰고 떫으며 약간 차다. 혈액순환을 돕고, 어혈을 제거하며 사지관절 동통을 완화시킨다. 부인의 생리불순, 생리통, 산후복통, 어혈성심복부통, 타박상 등을 치료한다. 고열로 인한 정신혼몽, 헛소리, 번조, 불면증, 피부발진, 심계항진 등을 치료한다. 약리작용은 관상동맥 확장, 콜레스테롤 강하, 혈압 강하, 간기능 활성화, 진정 항염, 항암, 항균작용이 보고되었다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 단너삼은 콩과에 속하는 다년생 초본식물로 황기(皇耆)라고도 한다. 고려 때의 이두향명으로는 수판마(數板麻)라 하였고 조선 초기에는 감판마(甘板麻)라 하였으나, 1600년대에 들어와서는 '너삼불휘' 등으로 변하여 1700년대에는 '단너삼'이 되었다. 이것은 너삼(苦參)과 비슷하되 맛이 달아 붙여진 이름이다. 학명은 Astragalus membranaceus BUNGE이다. 산지에서 자라며 뿌리는 약재로 이용하는데 약효성분은 폴리산(folic acid), 콜린(choline) 등이다. 동물실험에서는 중추신경계통의 흥분작용과 이뇨작용도 현저하였으며, 흰쥐에게 대량의 분말을 투여하였을 때에는 신염(腎炎)의 발생을 억제시키고 단백뇨와 콜레스테롤혈증의 발생도 지연시켰으며, 혈압강하작용도 인정되었다. 이 약은 약성이 온화하고 맛이 달다. 효능은 쉽게 피로하고 힘이 약하며, 음성이 낮고 맥박이 연약하고 땀을 많이 흘리는 사람에게 현저한 효능을 나타내고 있어서 예로부터 인삼 대용으로 많이 써왔다. 그리고 자궁하수, 위하수, 탈홍, 자궁출혈에도 널리 이용되며, 체력을 항진시켜 주고 전신근육의 긴장도를 높여주기도 한다. 그러나 발열이 심할 때에는 사용할 수가 없다. 민간에서는 닭에다 이 약을 넣고 달여 먹으면 식은땀을 흘리지 않고 체력이 증강된다고 하여 많이 쓰고 있다. 대표적인 처방으로는 기운이 없고 식욕을 잃은 사람에게 많이 활용되는 보중익기탕(補中益氣湯)이 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 만삼(蔓蔘)은 쌍떡잎식물 초롱꽃목 초롱꽃과의 덩굴성 여러해살이풀(Codonopsis pilosula Nannfeldt)로 뿌리를 당삼(黨蔘) 또는 삼이라고 하며 거담제로 사용하거나 식용한다. 만삼은 인삼 부작용이 있는 사람들이 대용해서 쓰면 인삼과 같은 효능을 얻을 수 있다는 명약이다. 이 약은 특이한 방향이 있으며 맛은 조금 달고 성질은 한쪽으로 치우치지 않고 평하다. 당삼은 비위 기운이 부족하여 생기는 신체피곤, 소화흡수불량, 기침, 갈증, 기허, 혈허에 효능이 있다. 약리작용은 강장작용, 항피로 및 면역기능항진작용, 적혈구수증가작용, 소화성궤양, 혈압강하 및 심장, 뇌, 하지, 내장혈류량 증가작용이 보고되었다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 고삼(苦蔘)은 고삼(Sophora flavescens Aiton)의 주피를 거의 벗긴 뿌리를 말한다. 고삼이라는 이름은 맛이 써서 고(苦)라는 글자를 사용하고 효능이 삼과 유사하다하여 삼(參)이라는 글자를 사용한다. 뿌리의 생김새 때문에 도둑놈의지팡이라는 식물명을 가지고 있다. 이 약은 특이한 냄새가 있고 잔류성이며 약성은 매우 쓰고 차다. 하초습열로 인한 이질, 대하, 음부소양증, 피부가려움증 등에 사용하며 방광열로 인하여 소변을 잘 못보고 통증이 있을 때 사용한다. 약리효과로는 백혈구감소증 치료 및 항방사능작용, 관상동맥혈류량 증가, 심장근육 강화, 혈당 낮추는 작용, 항종양, 항균, 면역기능 억제작용 등이 보고되었다.
본 발명의 일 실시예에 따른 조성물에 사용되는 상기 사삼(沙蔘)은 백합과의 잔대(Adenophora triphylla var . japonica Hara) 또는 동속 식물의 뿌리로 만든 약재로(한국), 일본에서는 세엽사삼(Adenophora triphylla(Thunb.) A. DC.:細葉沙參), 중국에서는 북사삼(Adenophora stricta Miq:北沙參)과 윤엽사삼(Adenophora tetraphylla (THUNB.）FISCH:輪葉沙參)을 사용하여 만든다.상기 사삼은 인삼(人參), 현삼(玄蔘), 단삼(丹參), 고삼(苦參)과 함께 오삼(五參)이라 부르는데, 이것은 형태는 모두 다르나 치료하는 바는 비슷하기 때문이다. 사삼(沙參)이란 이름은 백색이며 모래땅에서 잘 자라서 붙여진 이름이다. 뿌리에는 흰색 즙이 많아서 이인(俚人)들은 양파내 라고도 불렀다. 이 약은 특이한 방향이 있고 씹으면 점액성이 있으며 맛은 조금 달고 성질은 조금 차다. 사삼은 진액을 보충하여 폐를 윤택하게 하고 열을 식히며 담을 없애 인후건조, 마른기침, 가래, 해수, 천식 등에 쓰인다. 위음 부족으로 입안이 마르고 인후가 건조하며 대변이 굳는 변비 증상 등에 사용한다. 약리작용으로 거담작용, 항균작용, 용혈작용, 강심작용 등이 보고되었다.
본 발명에 있어서, 상기 7가지 약삼은 동의보감과 한국본초도감에서 혈행 (인삼, 단삼, 단너삼), 영양 (현삼, 만삼), 보호(고삼, 사삼)의 효능을 나타내는 약재를 선별한 것이다.
본 발명에 사용된 조성물은 다음과 같은 방법으로 제조한다.
우선, 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상을 누룩발효하여 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 제조할 수 있다.
또한, 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상의 추출물을 수득한 후, 상기 추출물을 누룩발효하여 본 발명의 일 실시예에 따른 조성물을 제조할 수 있다.
이때 사용되는 누룩은 대표적인 천연숙성 발효제이며, 처음 만들어진 것은 중국 춘추시대이고 우리나라는 삼국시대 이전이다. 누룩은 술을 만드는 효소를 갖는 누룩곰팡이와 효모를 곡류인 밀에 번식시킨 것으로서, 누룩곰팡이속에는 약 50여 종이 알려져 있다. 그 중에서도 Aspergullus oryzae (황국균)와 Aspergillus niger (흑국균)가 대표적인데 이들은 쌀의 녹말을 당화하는 강력한 효소를 지니고 있어, 녹말을 이당류 및 단당류로 분해하고 최종적으로 에탄올로 전환시키는 효소전환 반응이 진행된다. 술 발효외에도 이들 효소는 이소플라본과 폴리페놀의 배당체를 생리활성이 증가된 형태인 비배장체의 활성화된 형태로 전환시킨다. 된장이나 술을 제조하는 공장에 근무하는 작업자들의 손이 하얗게 변한다는 사실을 연구한 결과 누룩 곰팡이의 성분인 코직산이 발견되었다. 효모는 술을 만들게 할 뿐 아니라 생명 현상과 관계가 깊은 여러가지 효소와 함께 비타민 B 복합체, 단백질, 무기질 등을 함유하고 있다.
상기 제조 방법에 대하여 보다 상세하게 설명하면, 예를 들어 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼, 사삼 중 1종 이상을 삼베보자기에 싸서 누룩과 밥이 혼합되어 들어있는 항아리에 넣고 이를 묻는다. 35℃에서 2~3일간 발효시킨 후 열수 추출하여 조성물을 얻을 수 있지만 이에 한정되는 것은 아니다.
또 다른 제조방법으로, 예를 들어 상기 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼, 사삼 중 1종 이상을 통상의 천연물 수득 방법을 이용하여 추출물을 수득한 후, 이를 누룩과 밥이 혼합되어 들어있는 항아리에 넣고 이를 묻는다. 35℃에서 2~3일간 발효시켜 조성물을 얻을 수 있지만 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 약삼 추출물을 수득하는 방법을 보다 상세하게 설명하면, 예를 들어 상기 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼, 사삼 중 1종 이상을 세척하고 건조한 후, 이를 용매 추출한 다음, 상기 추출물을 여과하는 단계를 거쳐 수득할 수 있다. 상기에서 용매는 물, 유기 용매 및 물과 유기 용매의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함한다. 상기에서 물은 증류수 또는 정제수를 포함하고, 상기 유기 용매는 C1~C5의 저급 알코올과 같은 예로 들 수 있는 알코올, 아세톤, 에테르, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 에틸메틸케톤 및 클로로포름으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상의 약삼의 누룩 발효물은 조성물 총 중량에 대하여 0.01~10 중량%로 함유하는 것이 바람직하며, 상기 범위에서 두피 자극 및 트러블 없이 우수한 모발 및 두피 상태를 개선 효과를 갖는다.
본 발명에서 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 추출물 중 1종 이상의 누룩 발효 추출물을 함유하는 두피 및 모발 화장료 조성물은 모유두 세포 증식, 혈행 촉진 및 항산화 효과를 보임으로써 탈모 현상을 방지하고 모발 성장을 촉진하는 효과를 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 의한 조성물이 모낭 모유두 세포 증식을 촉진하는 효과를 나타내는 그래프이다.
도 2은 본 발명에 의한 조성물의 혈행촉진과 관련이 있는 칼륨이온 채널 활성 증가 효과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명에 의한 조성물의 항산화 효과를 나타내는 그래프이다.
이하, 실시예 및 시험예를 들어 본 발명을 보다 구체적으로 설명하나, 본 발명의 권리범위가 이들에 한정하는 것은 아니다.
[ 제조예 1] 약삼 추출물의 제조
본 발명의 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼의 7가지 약삼의 추출물은 다음과 같은 방법으로 제조하였다. 상기 각각의 약삼을 흐르는 물에 세척한 후 250 메쉬(mesh) 필터에 걸러 50℃에서 24시간 동안 건조한다. 건조된 약삼 각 50g에 1L 70% 에탄올을 첨가하고, 7가지 건조된 약삼 혼합물 350g(각 50g)에는 10L 70% 에탄올을 첨가하여 4℃의 온도 조건 하에서 48시간 동안 환류 추출한다. 그 후 250 메쉬 필터에 걸러 침전 시킨 후 다시 한번 0.5μm 필터에 걸러 각각의 약삼 추출물 및 혼합 추출물을 얻었다.
[ 제조예 2] 누룩 발효 추출물의 제조
본 발명에 사용한 조성물은 상기 약삼의 누룩발효 추출물 또는 이의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하며, 다음과 같은 방법으로 제조하였다. 7가지 약삼 (현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼, 사삼)을 흐르는 물에 세척한 후 250 메쉬(mesh) 필터에 걸러 50℃에서 24시간 동안 건조한다. 삼베보자기에 상기 건조된 약삼 각 50g 과 7가지 건조된 약삼 혼합물 350g (각 50g)을 각각 싸서 누룩과 밥이 1:1로 혼합되어 들어있는 항아리에 묻는다. 35℃에서 3일간 발효시킨 후 삼베보자기를 꺼낸다. 발효된 약삼의 무게에 20배의 정제수를 넣고 80℃에서 24시간 열수 추출하여 누룩발효 추출물을 얻는다.
[ 참고예 1] 비교예 1~9 및 실시예 1~8의 제조
상기 제조예 1의 추출물을 사용하여 비교예 1~9를, 상기 제조예 2의 누룩발효 추출물을 사용하여 실시예 1~8을 하기 표 1의 조성에 따라 제조하였다.
성분(단위: ppm) 비교예 1 비교예 2 비교예 3 비교예 4 비교예 5 비교예 6 비교예 7 비교예 8 비교예 9 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 실시예 6 실시예 7 실시예 8
현삼 추출물 - 5 - - - - - - - - - - - - - - -
인삼 추출물 - - 5 - - - - - - - - - - - - - -
당삼 추출물 - - - 5 - - - - - - - - - - - - -
단너삼 추출물 - - - - 5 - - - - - - - - - - - -
만삼 추출물 - - - - - 5 - - - - - - - - - -
고삼 추출물 - - - - - - 5 - - - - - - - - - -
사삼 추출물 - - - - - - - 5 - - - - - - - - -
7종 약삼혼합 추출물
(현삼,인삼,당삼,단너삼,만삼,고삼,사삼)		 - - - - - - - - 5 - - - - - - - -
현삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - 5 - - - - - - -
인삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - - 5 - - - - - -
당삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - - - 5 - - - - -
단너삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - - - - 5 - - - -
만삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - - - - - 5 - - -
고삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - - - - - - 5 - -
사삼 누룩발효 추출물 - - - - - - - - - - - - - - - 5 -
7종 약삼 혼합 누룩발효 추출물
(현삼,인삼,당삼,단너삼,만삼,고삼,사삼)		 - - - - - - - - - - - - - - - - 5
[ 시험예 1] 모낭 모유두 세포 증식 효과 시험
모발을 구성하는 케라틴 단백질은 모근부 케라틴형성세포 (keratinocyte)에서 생성되며, 이 케라틴형성세포는 모유두 세포로부터 분화된다. 본 발명에 의한 조성물의 모유두 세포를 활성을 평가하기 위하여 본 발명에서는 DP6 (rat immortalized dermal papilla cell) 세포주를 사용하였다. (Wendy Filsell, Journal of Cell Science 107, 1761-1772 (1994)) 본 모유두 세포주는 수컷 PVG rat 수염의 모근에서 microdissection 방법으로 분리하여 배양한 세포주이며, 10% Fetal bovine serum (FBS)이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM; Gibco BRL, Gaithersburg, MD, USA)에서 5% CO2, 37℃가 유지되는 incubator에서 24시간 동안 배양하였다.
상기 배양된 DP6에 표 1의 조성의 비교예 1~9 및 실시예 1~8을 처리하여 96-well plate에 24시간 동안 37℃ incubator에서 배양하였다. 비교예 1은 추출물을 처리하지 않은 비처리군이다. 약물 처리 24시간 경과 후에 WST-1 kit (Roche)을 사용하여 세포 증식능을 측정하여 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1의 결과에서, 약삼 추출물 자체를 사용하는 비교예 2~9의 경우에 비해 누룩발효 추출물을 처리한 실시예 1~8의 경우에 모유두 세포 증식 효과가 뛰어났으며, 1종 추출물과 동일 농도로 처리한 혼합 추출물인 실시예 8의 경우에 1종만의 추출물을 사용하는 실시예 1~7에 비해 효과가 뛰어나 혼합 사용으로 인한 상승 효과가 있음을 확인할 수 있다.
[ 시험예 2] 칼륨 이온 채널 활성 증가 효과 평가
탈모 치료제인 미녹시딜은 잠재적인 미토콘드리아 KATP channel opener(칼륨 이온 채널 오프너)로 알려져 있으며, 안드로겐성 탈모의 치료에 사용되는 대표적인 약물이다. 이러한 미녹시딜의 기작을 평가하기 위해서 두피의 진피를 구성하는 섬유아 세포에서 KATP channel을 막는 톨부타마이드(Tolbutamide, SIGMA AlDRICH, T0891)을 처리하여 세포증식을 억제하고, 다시 칼륨 이온 채널을 열어 세포증식이 회복되는 시험법을 사용하였다.
본 조성물의 KATP channel opener로서의 기능을 평가하기 위해서 본 발명에서는 섬유아세포주인 NIH3T3 (Mouse embryonic fibroblast cell line) 세포주를 사용하였다. 본 세포주는 NIH Swiss mouse embryo에서 분리한 섬유아세포주를 3T3 protocol로 자연 불멸화 시킨 세포주이다. 상기 세포주는 10% Fetal bovine serum (FBS)이 함유된 Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM; Gibco BRL, Gaithersburg, MD, USA)에서 5% CO2, 37℃가 유지되는 incubator에서 24시간 동안 배양하였다. NIH3T3 를 96-well plate에 24시간 동안 37℃ incubator에서 배양한 후 2.5mM 톨부타마이드를 처리하고, 10분 뒤에 양성대조군인 미녹시딜 10μM과 제조예 1에서의 약삼 추출물 및 제조예 2의 누룩발효 추출물을 하기 표 2 및 3의 조성에 따라 각각 처리하고, 약물 처리 48시간 경과 후에 WST-1 kit (Roche)을 사용하여 세포 증식능을 측정하여 결과를 도 2에 나타내었다.
성분 (ppm) 비교예 10 비교예 11 비교예 12 비교예 13 비교예 14 비교예 15 비교예 16 비교예 17 비교예 18 비교예 19 비교예 20
톨부타마이드 (mM) - 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
미녹시딜 (μM) - - 10 - - - - - - - -
현삼 추출물 - - - 5 - - - - - - -
인삼 추출물 - - - - 5 - - - - - -
당삼 추출물 - - - - - 5 - - - - -
단너삼 추출물 - - - - - - 5 - - - -
만삼 추출물 - - - - - - - 5 - - -
고삼 추출물 - - - - - - - - 5 - -
사삼 추출물 - - - - - - - - - 5 -
7종 약삼혼합 추출물
(현삼,인삼,당삼,단너삼,만삼,고삼,사삼)		 - - - - - - - - - - 5
성분 (ppm) 실시예 9 실시예 10 실시예 11 실시예 12 실시예 13 실시예 14 실시예 15 실시예 16
톨부타마이드 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
미녹시딜 - - - - - - - -
현삼 누룩발효 추출물 5 - - - - - - -
인삼 누룩발효 추출물 - 5 - - - - - -
당삼 누룩발효 추출물 - - 5 - - - - -
단너삼 누룩발효 추출물 - - - 5 - - - -
만삼 누룩발효 추출물 - - - - 5 - - -
고삼 누룩발효 추출물 - - - - - 5 - -
사삼 누룩발효 추출물 - - - - - - 5 -
7종 약삼 혼합 누룩발효 추출물
(현삼,인삼,당삼,단너삼,만삼,고삼,사삼)		 - - - - - - - 5
도 2의 결과에서, 실시예 9~16을 처리한 경우 미녹시딜을 처리한 비교예 12 수준으로 섬유아세포의 증식이 회복되며, 약삼 추출물 자체를 사용하는 경우인 비교예 13~20에 비해 누룩발효 추출물을 처리한 실시예 9~16 경우에 칼륨 이온 채널 활성 증가 효과가 뛰어났으며, 1종 추출물과 동일 농도로 처리한 혼합 추출물을 처리한 실시예 16의 경우에 1종만의 추출물을 사용한 실시예 9~15에 비해 효과가 뛰어나 혼합사용으로 인한 상승 효과가 있음을 확인할 수 있다.
[ 참고예 2] 비교예 21~31 및 실시예 17~24의 제조
상기 제조예 1의 약삼 추출물을 사용하여 비교예 21~31를, 상기 제조예 2의 누룩발효 추출물을 사용하여 실시예 17~24를 하기 표 4 및 5의 조성에 따라 제조하였다.
성분 (ppm) 비교예 21 비교예 22 비교예 23 비교예 24 비교예 25 비교예 26 비교예 27 비교예 28 비교예 29 비교예 30 비교예 31
비타민 C (μg/ml) - 50 100 - - - - - - - -
현삼 추출물 - - - 500 - - - - - - -
인삼 추출물 - - - - 500 - - - - - -
당삼 추출물 - - - - - 500 - - - - -
단너삼 추출물 - - - - - - 500 - - - -
만삼 추출물 - - - - - - - 500 - - -
고삼 추출물 - - - - - - - - 500 - -
사삼 추출물 - - - - - - - - - 500 -
7종 약삼혼합 추출물
(현삼,인삼,당삼,단너삼,만삼,고삼,사삼)		 - - - - - - - - - - 500
성분 (ppm) 실시예 17 실시예 18 실시예 19 실시예 20 실시예 21 실시예 22 실시예 23 실시예 24
현삼 누룩발효 추출물 500 - - - - - - -
인삼 누룩발효 추출물 - 500 - - - - - -
당삼 누룩발효 추출물 - - 500 - - - - -
단너삼 누룩발효 추출물 - - - 500 - - - -
만삼 누룩발효 추출물 - - - - 500 - - -
고삼 누룩발효 추출물 - - - - - 500 - -
사삼 누룩발효 추출물 - - - - - - 500 -
7종 약삼 혼합 누룩발효 추출물
(현삼,인삼,당삼,단너삼,만삼,고삼,사삼)		 - - - - - - - 500
[ 시험예 3] 항산화 효과 평가
본 조성물의 항산화 효과를 평가하기 위하여 DPPH 항산화 평가법을 사용하였다. 체내에서 일어나는 산화 반응은 주로 자유 라디칼에 의해 일어나고, 이러한 작용은 세포의 노화 및 암 발생을 초래하는 것으로 알려져 있다. 따라서 체내의 자유 라디칼 생성 억제는 결국 체내 항산화, 항노화와 연관될 수 있으며, 이러한 항산화 효과는 체내의 자유 라디칼을 대상으로 실험하기 어렵기 때문에 DPPH(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) 라디칼을 보편적으로 사용하고 있다. DPPH 라디칼은 짙은 보라색을 띠고 있는데 항산화 효능 물질과 만나 반응하면 옅은 노란색으로 바뀌며 517nm 파장에서 흡광도를 측정하여 항산화능을 평가한다. 항산화능이 높은 물질일수록 색이 옅은 노란색을 띠면서 흡광도가 낮아진다.
본 실험에서는 96 well plate에 0.1mM DPPH용액을 넣은 후 상기 참고예 2의 비교예 21~31 및 실시예 17~24를 각각 37℃ 배양기에서 30분간 반응 시켜 517nm에서 흡광도를 측정하여 결과를 도 3에 나타내었다. 비교예 21은 무처리군이며, 비교예 22~23은 양성대조군으로 비타민 C (SIGMA, (+)-Sodium L-ascorbate) 50 μg/ml, 100 μg/ml를 각각 처리하였다.
도 3에서 볼 수 있는 바와 같이 본 발명의 누룩발효 추출물을 처리한 실시예17~24는 대조군에 비하여 항산화 효과가 뛰어남을 알 수 있으며, 약삼 추출물 자체를 사용하는 비교예 24~31의 경우에 비해 누룩발효 추출물을 처리한 실시예 17~24가 항산화 효과가 뛰어남을 알 수 있다. 또한 1종 추출물과 동일 농도로 처리한 혼합 추출물 실시예 24의 경우에 1종만의 추출물을 사용한 실시예 17~23에 비해 효과가 뛰어나 항산화 효과에 있어서 혼합 사용으로 인한 상승 효과가 있음을 확인할 수 있다.

Claims (10)

  1. 현삼, 인삼, 단삼, 단너삼, 만삼, 고삼 및 사삼 중 1종 이상의 누룩 발효물을 유효성분으로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 현삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량%로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 인삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량% 로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 단삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량% 로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 단너삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량% 로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 만삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량% 로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  7. 제 1항에 있어서, 상기 고삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량% 로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  8. 제 1항에 있어서, 상기 사삼의 누룩 발효물을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~ 10 중량% 로 함유하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  9. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 혈행을 촉진시키는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
  10. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 두피 항산화용인 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 모발 성장 촉진용 조성물.
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