KR102168300B1

KR102168300B1 - 피부 상태 개선용 조성물

Info

Publication number: KR102168300B1
Application number: KR1020190003194A
Authority: KR
Inventors: 정은경
Original assignee: 주식회사 에스엠디솔루션
Priority date: 2019-01-10
Filing date: 2019-01-10
Publication date: 2020-10-21
Also published as: KR20200086868A

Abstract

본 발명은 피부 상태 개선용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 구체적으로는 황금, 황백, 황련 및/또는 치자의 추출물을 포함하는 피부 상태 개선용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 피부 상태 개선에 유용한 화장품 조성물 또는 식품 조성물로 이용될 수 있다.

Description

피부 상태 개선용 조성물{Compositions for improving skin condition}

산업의 큰 발전과 국제간의 활발한 교류로 편안한 주거환경과 다양한 식생활등을 경함할 수 있게 되어 삶의 질은 향상되었지만, 상대적으로 주거환경과 식습관의 변화, 그리고 산업의 발전과 함께 환경오염 등도 심각해지면서, 환경성 피부염인 아토피 등과 같은 피부질환 환자가 해가 거듭할수록 급증하고 있다. 이러한 피부질환은 과거에는 유전적인 요소에 의한 경우가 대부분이었지만, 근래에는 스트레스와 같은 심리적 요인, 면역, 모유수유 감소, 소아기 감염질환의 감소, 생활방식의 서구화 등 후천적 요소인 환경요인에 의한 경우가 증가되고 있다.

아토피성 피부 질환은 그 원인이 충분히 밝혀지지 않았으나 알레르기와 관련된 면역글로불린인 Ig E의 증가에 따른 면역 과민 반응 또는 T 림프구의 기능 결여에 의한 것으로 보고 있다. Ig E는 점막이나 피부의 비만세포(mast cell)에 부착하여 그 농도가 높으면 비만세포로부터 히스타민(histamine)이 분비되어 염증을 일으키게 되는 것이다. 아토피성 피부염 환자의 대부분에서 혈청 Ig E치가 증가되어 있고 그 수치와 아토피 피부염의 임상적 중증도가 비례하는 것으로 밝혀져 있다. 이와 관련하여 Ig E의 생성을 유도하는 IL-4, Ig E 생성을 촉진하는 IL-5, Ig E생성을 증폭시키는 IL-6 등의 사이토카인을 분비하는 것으로 확인되었다.

한편, 한의학에서는 아토피 피부염이 생기는 원인에 대해 '몸 안에 뭉친 열이 독을 만들었기 때문'으로 보고 있다. 몸속 깊숙이 숨어 있던 열독이 피부층까지 올라와 각종 트러블을 일으키는 것이다. 따라서 열독이 풀리지 않는 한 아토피 피부염은 계속 재발할 수밖에 없다. 특히 임신 중에 맵고 짠 음식이나 과도한 카페인, 알코올, 인스턴트, 기름진 음식 등을 많이 섭취했거나, 자궁 안에 노폐물이 많이 쌓였거나, 자궁이 약한 경우 태내에 열이 쌓여 태아에게 아토피 피부염을 유발한다고 보고 있다. 열독은 피부 이상만을 일으키는 것이 아니라 몸의 면역력을 떨어뜨려 각종 합병증을 유발시키므로 단순히 증상만 치료하는 것이 아니라 아토피 피부염의 원인을 찾아 근본적인 치료를 해야 한다고 주장한다. 즉, 아토피 피부염의 원인이 되는 열독을 풀어 주고, 알레르기에 대항할 수 있는 자생력을 키우는 등 근본치료를 해야 재발을 막을 수 있다고 이야기하고 있다.

이렇게 다양하게 거론되고 있는 아토피 피부염의 발병 원인들 중 최근 중요하게 고려되고 있는 것이 비정상적 체내 항산화 시스템과 과도한 반응성 자유 라디칼의 발생이다. 원래 자유 라디칼은 면역 시스템의 일환으로 체내로 침투한 외인성 병원균을 소멸시키는 방어 기작으로도 작용하나 아토피성 피부염 환자의 체내 및 피부에서는 발생 민감도가 크게 증가하여 과도한 자유 라디칼이 오히려 피부 보호막 혹은 피부 세포를 손상시키는 것으로 알려져 있다.

이와 같은 면역 과민반응과 활성산소의 과다 발생은 근본적인 발병원인이 명확하지는 않지만 유전적 원인 이외에 주로 환경오염에 따른 다이옥신과 같은 환경호르몬의 인체 내 유입에 따른 내, 외인적 스트레스에 의해 면역 체계의 기능악화 및 파괴에 의해서 발병하는 것으로 알려져 있다. 그리고 아토피성 피부염에 수반되는 피부장벽 손상, 이차적인 세균감염, 약물 부작용에 대한 감수성의 증가, 곰팡이류나 바이러스 등의 감염에 대한 저항력 감소 등도 나타나게 된다.

현재 사용되고 있는 치료방법으로는 면역억제제를 사용하여 아토피 피부염에 의해 발생하는 각종 증상을 완화시키거나 또는 아토피 질환자의 피부건조를 방지하기 위하여 보습제를 도포하고 수반되는 염증을 치료하기 위하여 국소 부신피질호르몬과 같은 스테로이드제 등을 사용하고 있다. 그러나 이러한 스테로이드제를 장기간 사용할 경우 스테로이드성 여드름, 피부위축 및 모세혈관확장 등 다양한 피부 부작용을 유발하기 때문에 이러한 부작용을 나타내지 않으면서 항염증 효과를 나타내는 천연소재를 개발이 필요하다.

선행 특허로 10-1239879호에서는 천연물질인 고칼슘과 고미네랄 성분의 물로 황금, 황백, 어성초, 삼백초, 목이버섯, 자치 및 감초를 고농도로 추출한 추출물을 포함하여, 고미네랄 성분의 손상된 피부장벽 개선 효과와 황금, 황백 등에 포함된 항균, 항염증, 항알레르기, 프리라디칼소거 등의 효과의 시너지화를 통해 부작용 없이 아토피나 가려움증을 개선할 수 있는 화장료 조성물을 개시하고 있다.

다른 특허로 10-1878069호에서는 황금, 황련, 황백 및 치자를 포함하는 생약 혼합물의 추출물과 편백 오일을 함유하는 여드름 또는 아토피 피부염의 예방 또는 치료용 조성물을 개시하고 있다.

상기 선행 문헌들은 천연 물질의 피부상태 개선을 위한 용도를 개시하고 있으나 해당 천연 물질의 효과를 증진시키는 활성 물질 및 이의 추출법을 개시하고 있지 않다.

본 발명의 목적은 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 상태 개선용 화장품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 상태 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물을 유효성분으로 함유하는 추출물을 피부 상태 개선 유효량으로 이를 필요로 하는 대상에 투여하여 피부 상태 개선하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 피부 상태 개선 용도에 사용하는 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물의 용도에 관한 것이다.

이하 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.

황금은 여러해살이 풀인 속썩은풀(Scutellaria baicalensis George) 의 뿌리로서 그대로 또는 주피를 제거한 것이다. 기록에 따르면 중국의 중약재시장에 유통되고 있는 황금은 속썩은풀 이외에 6종이 더 있고 그 외형은 유사한 것으로 보고하고 있다. 따라서 기원식물에 대한 검토는 향후 풀어야 할 숙제이기도 하다. 뿌리로 원뿔 모양이고 비틀어져 굽어 있으며, 길이 8 내지 25cm, 지름 1 내지 3cm이다. 바깥 면은 황갈색 내지 진한 노란색이고, 혹 모양의 가는 뿌리 자국이 드문드문 있다. 위쪽에는 비교적 거칠고 비틀어져 굽어있는 세로주름 또는 불규칙한 그물무늬가 있다. 질은 단단하면서 취약하고 절단하기 쉽다. 자른 면은 노란색이고, 중심부는 적갈색이다. 햇수가 오래된 것은 뿌리의 가운데가 썩어 있거나 비어있고, 어두운 갈색~적갈색을 나타낸다. 앞의 것을 지금이라 하고 뒤의 것을 고금이라 한다. 냄새가 거의 없고 맛은 약간 쓰다.

황백은 황벽나무의 껍질을 약재로 이르는 말로, 황경피라고도 한다. 낙엽활엽 교목으로 높이 10m 정도로 자라는데, 껍질에는 코르크가 발달했으며 속껍질은 황색이다. 잎은 마주나며, 깃꼴겹잎으로 작은 잎사귀는 5 내지 13장이며, 달걀모양의 피침형 또는 긴 원형이다. 잎 가장자리에는 작은 톱니 및 연한 털이 있으며, 중간 맥의 기부에는 긴 털이 약간 있다. 5~6월에 황색의 꽃이 피는데, 자웅이주의 단성이다. 원추 모양의 수술은 긴 원형으로, 수꽃에는 5개의 수술이 있으며 암꽃에는 퇴화된 수술이 비늘 조각 모양을 하고 있다. 자방은 5실로 되어 있으며 암술대는 짧고 암술머리는 5갈래로 갈라진다. 열매는 장과상의 육질이 많고 중심부에 단단한 핵을 갖고 있으며, 동그란 모양으로 익었을 때에는 자흑색을 띤다. 우리나라에서는 제주, 전남 지역을 제외한 전지역에서 분포하고, 일본, 만주, 중국, 아무르, 우수리 등지에 분포하며, 잡목 숲 또는 산속의 계곡에서 자란다. 하지 전후에 나무줄기에서 껍질을 벗겨내어 조피를 제거하거나 썰어서 햇볕에 말린다. 이 껍질은 약으로 쓰이며 혈당저하 작용을 한다. 또한, 폐렴쌍구균, 인형결핵균, 포도상구균 등에 대하여 발육저지 작용을 함과 동시에 종양세포의 번식을 저지시키고, 살균작용을 한다. 복용하는 경우에는 미각 반사의항진에 의하여 위액의 분비를 촉진시키고, 식욕의 항진도 가져오게 한다. 일반 알칼로이드가 지니는 전신작용을 하지 않기 때문에 다량으로 투여해도 부작용이 없으므로 정장제뿐 아니라 건위제로 사용할 수 있다. 또한 이 약재에 대하여 여러 세균의 내성(耐性)도 생기지 않으므로 유행성 눈병이 유행할 때 세안 소독약으로도 사용할 수 있다. 그 외에도 혈압강하·중추신경계 억제, 항염증 등의 효과도 보고되어 있다.

황련(Coptis chinensis Franch)은 초겨울에 캐서 잔뿌리를 다듬어 버리고 물에 씻어 햇볕이나 건조실에서 말린 다음 두드려 겉껍질을 없앤다. 맛은 쓰고 성질은 차다. 심경, 간경, 위경, 대장경에 작용한다. 열을 내리고 습사를 없애며 화를 말끔히 제거하고 해독한다. 약리 실험에서 주요 성분인 베르베린이 장내 세균에 대한 항균 작용, 진정 및 진경 작용, 항동맥경화 작용, 소염 작용, 이담 작용, 췌장액 분비 촉진 작용을 나타낸다는 것이 밝혀졌다. 전염성 열성 질병, 티푸스, 열이 나면서 가슴이 답답한 데, 속이 트적지근하고 메스꺼운 데, 이질, 폐결핵, 토혈, 비출혈(epistaxis), 소갈병, 회충증, 백일해, 인후염, 결막염, 부스럼, 습진, 화상 등에 쓴다. 하루 1.5 내지 3g을 탕제, 산제 또는 환제 형태로 만들어 먹는다. 외용약으로 쓸 때는 가루를 내서 기초(약)제에 개어 붙이거나 달인 물로 씻거나, 우린 액을 눈에 넣는다.

치자는 꼭두서니과 식물인 치자나무 Gardenia jasminoides Ellis의 익은 열매를 말린 것이다. 치자나무는 우리 나라의 중부 이남에서 심으며 북부에서는 온실에 심는다. 가을에 익은 열매를 따서 햇볕에 말린다. 맛은 쓰고 성질은 차다. 심경, 폐경, 위경, 간경, 삼초경에 작용한다. 열을 내리고 가슴이 답답한 것을 낫게 하며 습열사를 없애고 소변이 잘 나오게 하며, 출혈을 멈추게 하고 부기를 가라앉히며 해독한다. 약리 실험에서 누런 색소 배당체인 가르데닌(크로친)과 그 분해산물인 가르데니딘(크로체틴)이 이담 작용을 나타내고, 치자의 탕약과 알콜 우림약은 혈압강하 작용, 항균 작용을 나타낸다는 것이 밝혀졌다. 가슴이 답답하면서 잠을 자지 못하는 데, 황달, 임증, 소갈, 간열로 눈이 벌게지면서 붓고 아픈 데[결막염], 토혈, 코피, 부정자궁출혈, 적리, 헌데, 타박상 등에 쓴다. 적응증에 따라 법제하여 하루 6 내지 12g을 탕제, 산제 또는 환제 형태로 만들어 먹는다. 외용약으로는 가루 내서 기초(약)제에 개어 바른다. 생것은 주로 해열약으로, 까맣게 덖은 것은 지혈약으로 쓰며 생강즙에 축여 덖은 것은 가슴이 답답한 데와 토하는 데 주로 쓴다. 비위가 허한한 데는 쓰지 않는다.

본 발명의 일 양태는 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물을 함유하는 피부 상태 개선용 화장품 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 일 구체예에 있어서, 상기 화장품 조성물은 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물을 포함하는 것일 수 있다.

상기 '추출물'은 용매 조추출물, 특정 용매 가용 추출물 (용매 분획물), 및 용매 조추출물의 용매 분획물을 포함하며, 상기 추출물은 용액, 농축물 또는 분말 상태일 수 있다.

본 발명에 따른 황금은 황금의 뿌리, 줄기, 및 잎을 모두 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 황백은 황금의 뿌리, 줄기, 및 잎을 모두 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 황련은 황금의 뿌리, 줄기, 및 잎을 모두 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 치자는 황금의 뿌리, 줄기, 및 잎을 모두 사용할 수 있다.

상기 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물은 황금, 황백, 황련 또는 치자를 물, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜, 및 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 조추출물일 수 있다.

상기 알코올 수용액은 메탄올 수용액, 에탄올 수용액, 프로판올 수용액, 및 부탄올 수용액으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

본 발명의 일 구체예에 있어서, 상기 용매는 에탄올, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜 및 물이 혼합된 혼합 용매인 것일 수 있다.

상기 혼합 용매는 에탄올, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜 및 물의 부피비가 1:3:3:1인 것일 수 있다.

본 발명의 조성물이 화장품 조성물로 제조될 경우, 상술한 본 발명의 추출물의 화장품학적 유효량(cosmetically effective amount) 및 화장품학적으로 허용되는 담체가 포함될 수 있다.

본 명세서에서 용어 "화장품학적 유효량"은 상술한 본 발명의 추출물의 효능을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.

본 발명의 화장품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 및 샴푸 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히, 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예를 들어, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 화장품 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서의 한약 복합 추출물과 담체 성분 이외에, 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.

본 발명의 다른 일 양태는 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물을 함유하는 피부 상태 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 일 구체예에 있어서, 상기 식품 조성물은 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물을 포함하는 것일 수 있다.

상기 식품은 각종 음료, 식품 첨가제 등일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 식품에 함유된 유효성분으로서의 추출물의 함량은 식품의 형태, 소망하는 용도 등에 따라 적절하게 특별한 제한이 없으며, 예를 들어, 전체 식품 중량의 0.001 내지 15.0 중량%로 가할 수 있다.

상기 식품이 음료인 경우에는 음료 100 ml를 기준으로 1.0 ug 이상, 10.0 ug 이상, 100.0 ug 이상, 예를 들어, 1.0 내지 1000.0 ug, 10.0 내지 1000.0 ug, 100.0 내지 1000.0 ug을 포함하는 것일 수 있다.

상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 복합 추출물을 함유하는 것 외에 액체성분에는 특별한 제한점은 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등의 디사카라이드, 예를 들어, 말토스, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 예를 들어, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다.

상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어, 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(예를 들어, 사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.

상기 천연 탄수화물의 비율은 음료 100 ml 일반적으로 1 내지 20g, 3 내지 20g, 5 내지 20g, 1 내지 18g, 3 내지 18g, 5 내지 18g, 1 내지 16g, 3 내지 16g, 5 내지 16g, 1 내지 14g, 3 내지 14g, 5 내지 14g, 1 내지 12g, 3 내지 12g, 예를 들어, 5 내지 12g인 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.

또한, 본 발명의 식품 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.

본 발명의 또 다른 일 예는 피부 상태 개선 활성을 갖는 황금, 황백, 황련 및/또는 치자의 추출물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

본 발명에 따른 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물의 제조 과정을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다:

황금, 황백, 황련 및/또는 치자를 절단하고 물로 세척하여 협착물을 제거하고 건조시킨 후, 상기 황금, 황백, 황련 및/또는 치자의 중량에 대하여 약 5 내지 20 부피배, 바람직하게는 7 내지 15 부피배의 추출용매로 환류 추출한다. 추출 후 여과하여 여과액을 모은다. 추출 온도는 특별한 제한은 없지만 40 내지 110℃, 바람직하게는 55 내지 90℃인 것이 좋다.

추출공정은 1회 또는 수회 반복할 수 있으며, 본 발명의 한 바람직한 예에서는 1차 추출 후 다시 재추출하는 방법을 채택할 수 있는데, 이는 생약추출물을 대량 생산하는 경우 효과적으로 여과를 한다 하더라도 생약 자체의 수분 함량이 높기 때문에 손실이 발생하게 되어 1차 추출만으로는 추출효율이 떨어지므로 이를 방지하기 위함이다. 또한, 각 단계별 추출효율을 검증한 결과 2차 추출에 의해 전체 추출량의 80 내지 90% 정도가 추출되는 것으로 밝혀졌다.

본 발명의 일 예에서, 추출공정을 2회 반복하는 경우, 상기 얻어진 잔사에 다시 추출용매, 약 5 내지 15 부피배, 바람직하게는 8 내지 12 부피배로 환류 추출한다. 추출 후 여과하고 이전에 얻어진 여과액과 합쳐서 감압농축을 하여 황금 추출물을 제조한다. 이와 같이 2차에 걸친 추출 및 각각의 추출 후 얻어진 여과액을 혼합함으로써 추출 효율을 높일 수 있으나, 본 발명의 추출물이 추출 회수에 한정되는 것은 아니다.

상기 황금, 황백, 황련 및/또는 치자 추출물 제조 시에 사용되는 용매의 양이 너무 적으면 교반이 어렵고 추출물의 용해도가 낮아져 추출효율이 떨어지게 되고, 지나치게 많은 경우는 다음의 정제단계에서 사용되는 용매의 사용량이 많아져 경제적이지 못하여 취급상 문제가 발생할 수 있으므로, 용매의 사용량은 상기 범위로 하는 것이 좋다.

이와 같이 얻어진 여과된 추출물은 화장품, 의약품 또는 식품 원료로 사용하기에 적합하도록 잔존하는 저급 알코올의 함량을 조절하기 위하여 농축물 총량의 약 10 내지 30배, 바람직하게는 15 내지 25배, 보다 바람직하게는 약 20 중량배의 물로 1 내지 5회, 바람직하게는 2 내지 3회 공비 농축하고 재차 동량의 물을 가하여 균질 하게 현탁시킨 후 동결건조하여 분말상태의 추출물로서 제조될 수 있다.

본 발명에 사용된 추출 방법은 통상적으로 사용되는 모든 방법일 수 있으며, 예컨대, 냉침, 열수추출, 초음파 추출 또는 환류 냉각 추출법일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따라 황금, 황백, 황련 및 치자 혼합 추출물의 유효 물질 확인 결과를 보여주는 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따라 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물, 치자 추출물 및 이의 혼합 추출물의 세포독성 평가 결과를 보여주는 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따라 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물, 치자 추출물 및 이의 혼합 추출물의 세포독성 평가 결과를 보여주는 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따라 황금, 황백, 황련 및 치자 혼합 추출물의 유효 물질의 세포독성 평가 결과를 보여주는 그래프이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따라 대조군의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따라 TSA의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따라 황련 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따라 황백 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따라 황금 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 10은 본 발명의 일 실시예에 따라 치자 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 11은 본 발명의 일 실시예에 따라 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물, 치자 추출물 및 이의 혼합 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 그래프이다.
도 12는 본 발명의 일 실시예에 따라 치자 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 13은 본 발명의 일 실시예에 따라 대조군 및 TSA의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 14는 본 발명의 일 실시예에 따라 향상된 Geniposide의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 15는 본 발명의 일 실시예에 따라 Bicalin의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 16은 본 발명의 일 실시예에 따라 Wogonin의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 17은 본 발명의 일 실시예에 따라 Coptisine의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 18은 본 발명의 일 실시예에 따라 Palmitine의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.
도 19는 본 발명의 일 실시예에 따라 Berberine의 피부세포 치유 촉진 효과를 관찰한 사진이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

제조예 1: 알코올 용매 조추출물의 제조

1-1: 황금 알코올 추출물의 제조

건조 황금 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후 70%(v/v) 에탄올 용매 1.0 L에 넣고 상온에서 6시간 동안 추출하였으며, 추출 후 영하 80도씨에서 동결 이후 2일 간 동결 건조하여 파우더 형태를 수득하였다.

1-2: 황백 알코올 추출물의 제조

건조 황백 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후 70%(v/v) 에탄올 용매 1.0 L에 넣고 상온에서 6시간 동안 추출하였으며, 추출 후 영하 80도씨에서 동결 이후 2일 간 동결 건조하여 파우더 형태를 수득하였다.

1-3: 황련 알코올 추출물의 제조

건조 황련 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후 70%(v/v) 에탄올 용매 1.0 L에 넣고 상온에서 6시간 동안 추출하였으며, 추출 후 영하 80도씨에서 동결 이후 2일 간 동결 건조하여 파우더 형태를 수득하였다.

1-4: 치자 알코올 추출물의 제조

건조 치자 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후 70%(v/v) 에탄올 용매 1.0 L에 넣고 상온에서 6시간 동안 추출하였으며, 추출 후 영하 80도씨에서 동결 이후 2일 간 동결 건조하여 파우더 형태를 수득하였다.

1-5: 황금, 황백, 황련 및 치자 알코올 추출물의 제조

황금, 황백, 황련 및 치자 혼합 추출물은 상기 추출액을 1:1:1:1의 부피비로 혼합 한 후 동결건조 하여 수득하였다.

제조예 1: 혼합 용매 조추출물의 제조

1-1: 황금 혼합 용매 추출물의 제조

에탄올 0.1 L, 부탄디올 0.3 L, 1,3-부틸렌글라이콜 0.3 L 및 물 0.3 L를 혼합하여 혼합 용매 1.0 L를 제조하였다. 그 다음, 건조 황금 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후, 혼합 용매에 넣고 상온에서 3시간 동안 추출한 후, 55도씨로 가열하여 6시간 동안 추출하였다.

추출 후 추출 상층액을 따로 모아 수득하고 남은 추출 잔사를 30(v/v)% 1,3-부틸렌글라이콜 수용액 1.0 L에 넣고 상온에서 1일간 추출하였다. 추출액을 상기 상층액과 혼합 교반한 후 영하 80도씨에서 동결 이후 2일간 동결 건조하여 파우더 형태를 수득하였다.

1-2: 황백 혼합 용매 추출물의 제조

에탄올 0.1 L, 부탄디올 0.3 L, 1,3-부틸렌글라이콜 0.3 L 및 물 0.3 L를 혼합하여 혼합 용매 1.0 L를 제조하였다. 그 다음, 건조 황백 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후, 혼합 용매에 넣고 상온에서 3시간 동안 추출한 후, 55도씨로 가열하여 6시간 동안 추출하였다.

1-3: 황련 혼합 용매 추출물의 제조

에탄올 0.1 L, 부탄디올 0.3 L, 1,3-부틸렌글라이콜 0.3 L 및 물 0.3 L를 혼합하여 혼합 용매 1.0 L를 제조하였다. 그 다음, 건조 황련 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후, 혼합 용매에 넣고 상온에서 3시간 동안 추출한 후, 55도씨로 가열하여 6시간 동안 추출하였다.

1-4: 치자 혼합 용매 추출물의 제조

에탄올 0.1 L, 부탄디올 0.3 L, 1,3-부틸렌글라이콜 0.3 L 및 물 0.3 L를 혼합하여 혼합 용매 1.0 L를 제조하였다. 그 다음, 건조 치자 10g을 평균 크기 5mm의 입자로 잘게 분쇄 후, 혼합 용매에 넣고 상온에서 3시간 동안 추출한 후, 55도씨로 가열하여 6시간 동안 추출하였다.

1-5: 황금, 황백, 황련 및 치자 혼합 용매 추출물의 제조

실험예 1. 추출물에 포함된 단일 화합물 확인

참조논문 (Kor. J. Phamacon, 44(1): 22~20(2013))에 나온 방법을 참조하여 확인하였다. 구체적으로, HPLC를 이용하여 황금, 황백, 황련 및 치자의 혼합 추출물에 포함된 유효성분 측정하여, 그 결과를 도 1 및 표 1(알코올 용매 조추출물) 내지 표 2(혼합 용매 추출물)에 나타내었다.

번호	화합물명	RetTime (min)	Mean (mg/g)
1	geniposide		-
2	baicalin		0.34
3	Baicalein		-
4	Wogonin		1.1
5	Coptisine		-
6	Palmitine		0.91
7	Berberine		0.23

번호	화합물명	RetTime (min)	Mean (mg/g)
1	geniposide	2.3	26.8
2	baicalin	9.3	43.7
3	Baicalein	13.2	-
4	Wogonin	16.4	2.3
5	Coptisine	18.5	<LOQ
6	Palmitine	22.7	6.8
7	Berberine	24.1	1.8

도 1 및 표 1 내지 표 2에서 확인할 수 있듯이, 기존 추출방법(알코올 용매 조추출물)에 비해 개선된 추출방법(혼합 용매 추출물)에서는 유효성분의 함량이 전반적으로 증가하였으며, 다양한 유효성분 중 geniposide와 Baicalin의 함유량이 높게 나타남을 확인하였다.

실험예 2. 세포독성 평가

2-1. 추출물의 세포독성 평가

MTT 어세이 방법에 대응되는 WST 어세이를 이용하여 평가하였다. 구체적으로, Hacat 세포를 96 웰 플레이트에 시딩한 후, 37도씨, CO2 5% 조건에서 90% confluency가 될 때까지 둘베코표준미디엄배지(DMEM)에 10%(v/v) FBS(fetal bovine serum)이 포함된 배지를 사용해 24시간 동안 인큐베이션 하였다. 24시간 뒤 각 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물, 치자 추출물 및 이들의 혼합 추출물을 10 mg, 50 mg 및 100 mg로 세포에 처리하고, 37도씨, CO2 5% 조건에서 DMEM에 10%(v/v) FBS가 포함된 배지를 사용해 24시간 동안 배양하였다. 그 다음, WST reagent를 처리한 후 1시간 뒤 흡광도 측정하여, 그 결과를 도 2 내지 3 및 표 3 내지 표 4에 나타내었다.

24 hr	0 ug	10 ug	50 ug	100 ug
황금	100.0	101.9	105.0	105.2
황금	0.0	0.8	0.9	1.1
황백	100.0	101.6	105.4	104.4
황백	0.0	0.3	3.2	1.4
황련	100.0	101.3	104.1	103.1
황련	0.0	0.5	2.9	1.6
치자	100.0	100.1	99.4	103.5
치자	0.0	0.6	1.5	1.3
혼합물	100.0	101.5	103.7	104.7
혼합물	0.0	3.0	2.0	2.9

48 hr	0	10	50	100
황금	100.0	104.6	105.9	107.8
황금	0.0	2.2	1.5	1.3
황백	100.0	104.3	109.2	111.9
황백	0.0	0.8	1.1	1.6
황련	100.0	101.7	104.6	106.0
황련	0.0	3.5	2.5	3.0
치자	100.0	101.8	104.3	110.0
치자	0.0	2.3	4.7	4.1
혼합물	100.0	100.4	106.7	113.3
혼합물	0.0	2.8	4.0	3.3

도 2 내지 3 및 표 3 내지 표 4에서 확인할 수 있듯이, 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물은 별다른 독성을 나타내지 않았으며, 이들의 혼합물 역시 별다른 독성을 나타내지 않음을 확인하였다.

2-2. 단일 화합물의 세포독성 평가

각 단일 화합물을 10 um 및 30 um 처리한 것을 제외하고는 실험예 1과 동일한 방법으로 수행하였으며, 그 결과를 도 4 및 표 5에 나타내었다.

	MW (g/mol)	상대적인 세포독성 수준(%)
Control	0	100 %
Geniposide	388.37	10mM	114
		30mM	118
Baicalin	270.24	10mM	118
		30mM	115
Wogonin hydrate	284.26	10mM	121
		30mM	67
Coptisine chloride	355.77	10mM	112
		30mM	116
Glyceryl tripalmitate	807.32	10mM	115
		30mM	118
Berberine hloride	371.81	10mM	108
		30mM	104

도 4 및 표 5에서 확인할 수 있듯이, 비히클(Vehicle)만 처리한 컨트롤(control)에 비해, wogonin hydrat를 제외한 나머지 표준 물질에서 독성은 관찰되지 않았다. 특히 geniposide와 baicalin, glyceryl tripalmitate의 경우 뛰어난 세포안전성을 보여주었다.

실험예 3. 피부세포 치유 촉진 효과 관찰

3-1. 추출물의 피부세포 치유 촉진 효과 관찰

상피세포주인 Hacat을 6 well plate에 하루동안 배양한 후 세포의 밀도가 90% confluent했을 때 sterile 200p tip을 이용하여 scratch wound를 발생 형성함. PBS로 3번 washing하여 scratch margin의 부유 세포들을 제거한 후 유효성분이 포함된 serum-free DMEM 배양액에서 24시간 동안 배양한 후 scratch margin 부위의 세포가 자라나서 wound closure 정도 및 Wound area를 image J로 측정하여, 그 결과를 도 5 내지 12 및 표 6에 나타내었다.

	-	TSA	황련	황백	황금	치자	혼합물
Wound area	71 %	95 %	50 %	59 %	66 %	36 %	46 %

도 5 내지 13 및 표 6에서 확인할 수 있듯이, 전체적으로 모든 추출물에서 상처치유 효과가 관찰되었고, 황련 추출물, 치자 추출물 및 혼합 추출물에서 높은 수준의 상처치유 효과가 관찰되었다.

3-2. 단일 화합물의 피부세포 치유 촉진 효과 관찰

상피세포주인 Hacat을 6 well plate에 하루동안 배양한 후 세포의 밀도가 90% confluent했을 때 sterile 200p tip을 이용하여 scratch wound를 발생 형성함. PBS로 3번 washing하여 scratch margin의 부유 세포들을 제거한 후 유효성분이 포함된 serum-free DMEM 배양액에서 24시간 동안 배양한 후 scratch margin 부위의 세포가 자라나서 wound closure 정도 및 Wound area를 image J로 측정하여, 그 결과를 도 13 내지 19 및 표 7에 나타내었다.

	MW (g/mol)	유효농도
Geniposide	388.37	30 mM ~ 100 mM
Baicalein	270.24
Wogonin hydrate	284.26
Coptisine chloride	355.77	30 mM ~ 100 mM
Glyceryl tripalmitate	807.32	10 mM ~ 100 mM
Berberine hloride	371.81

도 13 내지 19 및 표 7에서 확인할 수 있듯이, Geniposide, Coptisine chloride, Glyceryl tripalmitate에서 높은 수준의 상처 치유효과가 관찰이 되었으며, 특정 농도 영역 (약 10, 30 ~ 100 uM)을 경계로 하여 유의미한 수준의 상처치유효과가 나타나는 것을 확인하였다.

또한, 각 추출물의 농도에 따라 비회복 수준(세포가 자라서 scratch wound부분을 얼마나 덥었는지 여부)을 수치로 환산하여 하기 표 8에 나타내었다.

샘플	농도	비회복수준
Control	-	70.82
TSA	10uM	95.3
1	10uM	99.1
	30uM	45.8
	50uM	42.8
	100uM	23.5
	130uM	88.4
2	10uM	91.2
	30uM	78.6
	50uM	64.7
	100uM	88.9
	130uM	93.2
4	10uM	74.93
	30uM	64.98
	50uM	72.45
	100uM	82.45
	130uM	88.97
5	10uM	80.55
	30uM	56.61
	50uM	42.86
	100uM	33.8
	130uM	82.4
6	10uM	57.7
	30uM	44.7
	50uM	38.5
	100uM	32.4
	130uM	88.12
7	10uM	88.5
	30uM	82.11
	50uM	78.54
	100uM	77.5
	130uM	82.6

상기 표 8에서 확인할 수 있듯이, 비회복수준이 높다(80이상)는 것은 회복이 거의 일어나지 않았다는 것을 뜻하고, 비회복수준이 낮다(80미만)는 것은 scratch wound를 받은 세포가 처리한 물질에 의해 분열이 촉진되어 빈공간을 채우는 회복이 일어났고, 그것이 초기 간격을 100으로 보았을 때 남은 공간이 적다 라는 것을 뜻한다.

Claims

황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물을 유효성분으로 함유하고,
상기 추출물은 에탄올, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜 및 물이 혼합된 혼합 용매로 추출하여 얻어지며,
상기 혼합 용매는 에탄올, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜 및 물의 부피비가 1:3:3:1인 것을 특징으로 하는 피부 상태 개선용 화장품 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서, 상기 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물은 1:1:1:1의 부피비로 혼합된 것인, 피부 상태 개선용 화장품 조성물.
제1항에 있어서, 상기 피부 상태 개선은 주름개선, 피부재생, 피부탄력 개선, 피부노화 억제, 상처 재생, 여드름 개선 또는 피부 미백인 것인, 피부 상태 개선용 화장품 조성물.
황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물을 유효성분으로 함유하고,
상기 추출물은 에탄올, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜 및 물이 혼합된 혼합 용매로 추출하여 얻어지며,
상기 혼합 용매는 에탄올, 부탄디올, 1,3-부틸렌글라이콜 및 물의 부피비가 1:3:3:1인 것을 특징으로 하는 피부 상태 개선용 식품 조성물.
삭제
삭제
제6항에 있어서, 상기 황금 추출물, 황백 추출물, 황련 추출물 및 치자 추출물은 1:1:1:1의 부피비로 혼합된 것인, 피부 상태 개선용 식품 조성물.
제6항에 있어서, 상기 상기 피부 상태 개선은 주름개선, 피부재생, 피부탄력 개선, 피부노화 억제, 상처 재생, 여드름 개선 또는 피부 미백인 것인, 피부 상태 개선용 식품 조성물.