KR20180110939A - 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 인체에 독성이 없는 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품, 화장료 및 의약품을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품, 화장료 및 의약품을 제공한다.
Description
본 발명은 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물에 관한 것이다.
인체 모발은 성장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen)를 순차적으로 거치면서 성장과 탈락을 반복한다. 정상적인 모발은 하루 평균 50 내지 100개가 탈락하는데, 성장기의 모발이 적어지거나 퇴행기 또는 휴지기의 모발이 많아져 평균 이상으로 모발이 탈락하는 경우를 탈모(alopecia 또는 hair loss)라고 한다.
탈모의 원인은 크게 인체 외부적인 요인과 내부적인 요인으로 나눌 수 있다. 상기 외부적인 요인으로는 청결하지 못한 두피 또는 오염된 물, 공기에 의한 환경적 요인; 잦은 염색, 펌 등의 미용 시술에 의한 물리적·화학적 요인이 있다. 상기 내부적인 요인으로는 탈모 유전자에 의한 유전적 요인; 남성 호르몬, 스트레스에 의한 내분비적 요인; 질병에 의한 병적 요인; 약물 부작용에 의한 화학적 요인이 있다. 이러한 원인은 복합적으로 작용하여 탈모를 유발한다. 이들 중 탈모 유전자와 남성 호르몬에 의해 일어나며 주로 남성에게 나타나는 탈모를 남성형 탈모(androgen alopecia)라고 한다.
남성형 탈모는 남성 호르몬인 테스토스테론(testosterone)에 5α-환원효소(5α-reductase)가 결합하여 생성된 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone, DHT)이 모유두세포에 작용함으로써 세포분열을 억제하여 모발의 성장기가 짧아지고 휴지기가 길어져 모발 성장이 저해되어 발생된다. 따라서, 남성형 탈모는 남성 호르몬의 분비가 많은 사춘기 이후, 특히 20대 중반부터 발생하기 시작한다.
이러한 남성형 탈모를 치료하기 위해서는 염화 카르프로늄(carpronium chloride), 미녹시딜(minoxidil)과 같은 혈관확장제; 여성 호르몬(estrogen), 소포 호르몬(esteradiol)과 같이 남성 호르몬의 작용을 억제하는 호르몬제; 펜타데칸산(pentadecanoic acid), 피나스테리드(finasteride)와 같은 남성 호르몬 활성 억제제를 사용할 수 있다. 이들 중 미녹시딜과 피나스테리드가 대표적인 탈모 치료제이다.
미녹시딜은 고혈압 치료를 목적으로 개발된 경구 혈관확장제로, 최근 남성형 탈모에 대해 치료 효과가 확인되었으나 정확한 작용기작은 알려지지 않고 있다. 피나스테리드는 전립선 비대 치료제로 개발되었으나, 5α-환원효소(5α-reductase)의 활성을 저해하여 디하이드로테스토스테론(DHT)의 생성을 억제하는 것이 확인되어 탈모 치료용 외용제로 사용되고 있다. 그러나, 이러한 치료제들은 구입하는데 많은 비용이 소요되고, 피부 외용제로 사용할 경우 발모 효과가 높지 않은 반면, 경구 투여할 경우 약물 부작용이 발생하는 등 문제가 있어 이들을 사용하는데 제한이 있다.
따라서, 인체에 부작용 없이 안전하며, 탈모 치료에 효과적인 탈모 방지 및 발모 촉진제의 개발이 여전히 필요하다.
상기한 문제점을 해결하기 위해, 본 발명은 인체에 무해한 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 화장료를 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 의약품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 엉겅퀴, 오미자, 진피, 대추, 둥굴레, 다시마 및 현미를 포함하는 제1 식물군;
인삼, 검은콩, 어성초, 구기자, 감초, 진피, 대추, 자소엽 및 녹차잎을 포함하는 제2 식물군;
녹차잎, 백하수오, 은행잎, 감잎, 산수유, 뽕나무, 민들레, 자소엽, 더덕, 오가피, 감초, 도라지 및 개똥쑥을 포함하는 제3 식물군; 및
산수유, 구기자, 뽕나무, 현미, 오미자, 대추, 녹차잎, 감잎, 은행잎, 자소엽, 진피, 더덕, 백하수오, 인삼, 도라지, 둥굴레, 검은콩, 오가피, 감초, 쑥, 어성초, 엉겅퀴, 민들레 및 다시마를 포함하는 제4 식물군
으로 이루어진 군에서 선택되는 하나의 식물군으로부터 추출된 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 화장료를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 의약품을 제공한다.
본 발명의 제조방법에 따르면, 식물 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 인체에 부작용이 없는, 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물을 제조할 수 있다. 이러한 조성물은 탈모를 예방하고 모발의 성장을 촉진하는 식품, 화장료 및 의약품 제조에 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 실험예 1에 따른 탈취능을 확인한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 실험예 2에 따른 섬유아세포의 생존율을 확인한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실험예 2에 따른 진피모유두세포의 생존율을 확인한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실험예 3에 따른 비만세포의 TNF-a 농도를 확인한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실험예 3에 따른 비만세포의 IL-6 농도를 확인한 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실험예 4에 따른 섬유아세포의 증식율을 확인한 그래프이다.
도 7은 본 발명의 실험예 4에 따른 진피모유두세포의 증식율을 확인한 그래프이다.
도 8은 본 발명의 실험예 5에 따른 섬유아세포 및 진피모유두세포의 생존율, 증식율 및 카스파제 활성을 확인한 그래프이다.
도 9는 본 발명의 실험예 6에 따른 진피모유두세포의 5α-환원효소 발현을 확인한 그래프이다.
도 10은 본 발명의 실험예 6에 따른 진피모유두세포의 BAX 발현을 확인한 그래프이다.
도 11은 본 발명의 실험예 7에 따른 섬유아세포의 프로콜라겐 농도를 확인한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 실험예 2에 따른 섬유아세포의 생존율을 확인한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 실험예 2에 따른 진피모유두세포의 생존율을 확인한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 실험예 3에 따른 비만세포의 TNF-a 농도를 확인한 그래프이다.
도 5는 본 발명의 실험예 3에 따른 비만세포의 IL-6 농도를 확인한 그래프이다.
도 6은 본 발명의 실험예 4에 따른 섬유아세포의 증식율을 확인한 그래프이다.
도 7은 본 발명의 실험예 4에 따른 진피모유두세포의 증식율을 확인한 그래프이다.
도 8은 본 발명의 실험예 5에 따른 섬유아세포 및 진피모유두세포의 생존율, 증식율 및 카스파제 활성을 확인한 그래프이다.
도 9는 본 발명의 실험예 6에 따른 진피모유두세포의 5α-환원효소 발현을 확인한 그래프이다.
도 10은 본 발명의 실험예 6에 따른 진피모유두세포의 BAX 발현을 확인한 그래프이다.
도 11은 본 발명의 실험예 7에 따른 섬유아세포의 프로콜라겐 농도를 확인한 그래프이다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명에 따른 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물을 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이러한 설명은 본 발명의 이해를 돕기 위하여 예시적으로 제시된 것일 뿐 본 발명의 범위가 이러한 예시적인 설명에 의하여 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 사용된 "식물 추출물"은 식물로부터 분리된 유효(활성) 성분을 의미한다. 이때, 추출 용매를 사용하여 식물로부터 유효성분을 추출할 수 있다. 추출 용매를 사용하여 식물 추출물을 얻을 경우, 식물 추출물은 식물로부터 분리된 유효성분과 함께 용매를 모두 포함하는 의미로 해석될 수 있다. 또한, 식물 추출물은 액상, 이의 건조 분말 및 이를 이용하여 제형화된 상태의 가공물 중 어느 하나를 지칭할 수도 있다. 또한, 식물 추출물은 당업계에서 일반적으로 통용되고 있는 조추출물(crude extract)뿐만 아니라, 조추출물을 추가적으로 분획(fraction)하여 얻어진 분획물, 여과과정을 거친 여과물 및 정제과정을 거친 정제물을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 예에 따른 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물은 엉겅퀴, 오미자, 진피, 대추, 둥굴레, 다시마 및 현미를 포함하는 제1 식물군; 인삼, 검은콩, 어성초, 구기자, 감초, 진피, 대추, 자소엽 및 녹차잎을 포함하는 제2 식물군; 녹차잎, 백하수오, 은행잎, 감잎, 산수유, 뽕나무, 민들레, 자소엽, 더덕, 오가피, 감초, 도라지 및 개똥쑥을 포함하는 제3 식물군; 및 산수유, 구기자, 뽕나무, 현미, 오미자, 대추, 녹차잎, 감잎, 은행잎, 자소엽, 진피, 더덕, 백하수오, 인삼, 도라지, 둥굴레, 검은콩, 오가피, 감초, 쑥, 어성초, 엉겅퀴, 민들레 및 다시마를 포함하는 제4 식물군으로 이루어진 군에서 선택되는 하나의 식물군으로부터 추출된 식물 추출물을 유효성분으로 포함할 수 있다.
상기 식물 추출물은 제1 식물군, 제2 식물군, 제3 식물군 및 제4 식물군 중 어느 하나의 식물군으로부터 추출된다. 이러한 제1 식물군 내지 제4 식물군에 해당되는 식물에 대해 설명하면, 다음과 같다. 이때, 식물은 자연 그대로 가공하지 않은 날 것이거나, 또는 건조 및 분쇄하여 얻어진 건조 분말일 수 있다.
(1) 엉겅퀴는 국화과에 속하는 여러해살이 풀로, 한국, 일본, 중국 북동부에 분포하며, 가시나물 또는 항가새라고도 한다. 엉겅퀴의 연한 식물체와 어린순은 나물로 사용되고, 성숙한 뿌리는 약으로 쓰인다. 엉겅퀴는 지혈작용이 우수하여 소변출혈, 대변출혈, 코피, 자궁출혈, 외상출혈을 치료하는데 사용된다. 특히, 폐결핵 및 급성전염성간염에 효과가 있으며, 혈압강하 효능을 갖는 것으로 알려져 있다.
(2) 오미자는 오미자나무의 열매로, 단맛, 신맛, 쓴맛, 짠맛 및 매운맛이 나며 특히 신맛이 강하다. 오미자의 종류로는 오미자(북오미자), 화중오미자(남오미자), 익경오미자, 흑오미자 등이 있다. 오미자는 시잔드린, 고미신, 시트랄, 사과산, 시트르산 등의 성분을 함유하며, 약리학적으로 중추신경, 기관지, 심장, 간, 위를 보호하는 것으로 알려져 있다.
(3) 진피는 귤 껍질을 건조하여 약재로 사용하는 것으로, 맛이 쓰고 맵지만 성질이 따뜻하다. 진피는 비장의 기능을 강화하여 복부창만, 트림, 구토, 메스꺼움, 소화불량, 헛배가 부르고 나른한 증상, 대변이 묽은 증상을 치료하는데 사용된다. 진피에 함유된 정유 성분은 소화촉진, 거담, 항궤양, 항위액분비, 강심, 혈압상승, 항알레르기, 담즙분비촉진, 자궁평활근억제, 항균작용하는 것으로 알려져 있다.
(4) 대추는 대추나무의 열매로, 색이 붉어 홍조라고도 한다. 대추의 과육은 당분, 점액질, 능금산, 주석산 등을 포함하고, 씨는 베툴린, 베투릭산, 지방 등을 포함한다. 대추는 한방에서 이뇨강장, 건위진정, 건위자양의 약재로 널리 사용된다.
(5) 둥굴레는 다년생초로, 한국, 일본 및 중국에 분포한다. 둥굴레의 어린잎과 뿌리줄기는 식용하며, 뿌리줄기를 건조시킨 위유는 한방에서 자양, 강장, 해열, 당뇨 등에 사용한다.
(6) 다시마는 다시마과(Laminariaceae)에 속하는 식물로, 참다시마(L. japonica), 오호츠크다시마(L. ochotensis), 애기다시마(L. religiosa), 호스테일켈프(L. digitata) 등이 있다. 다시마는 요오드, 알긴산, 라미닌, 글루탐산, 비타민 등을 많이 함유하고 있어, 체내 무기염류를 공급하고 혈압을 낮추는 것으로 알려져 있다.
(7) 현미는 벼에서 왕겨만을 벗긴 쌀이다. 현미는 도정된 백미에 비해 영양소의 손실이 적으며, 섬유질, 단백질, 무기질 등이 많이 함유되어 있다.
(8) 인삼은 주로 줄기 및 뿌리를 약재로 사용하며, 상태에 따라 백삼(날 것), 홍삼(쪄서 발효한 것), 미삼(뿌리가 가는 것)으로 구분한다. 인삼은 원기를 보강하고, 신체허약, 권태, 피로, 식욕부진, 구토, 설사를 치료하는데 사용된다. 인삼은 대뇌피질 흥분과 억제, 평형, 항피로, 항노화, 면역증강, 심장수축, 성선촉진, 고혈당억제, 단백질합성촉진, 항상성유지, 항암, 해독작용 등의 약리효과가 있는 것으로 알려져 있다.
(9) 검은콩은 흑태, 서목태, 서리태 등과 같이 검은 빛을 띠는 콩을 말한다. 검은콩은 안토시아닌과 이소플라본을 포함하며, 혈액순환 개선, 노화방지에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
(10) 어성초는 약모밀이라고도 한다. 어성초는 한방에서 임질 또는 요도염을 치료하는데 사용되며, 동맥경화 예방 및 이뇨 작용에 효과가 있는 것을 알려져 있다. 어성초의 말린 잎은 종기 또는 화농이 생긴 상처에 효과가 있다.
(11) 구기자는 구기자나무의 열매로, 주로 말려서 사용한다. 구기자는 콜린 대사물질의 하나인 베타인이 풍부하여, 간에 지방이 축적되는 것을 억제한다.
(12) 감초는 시베리아, 몽골, 중국 동부와 북부 등에서 자라며, 주로 줄기와 뿌리를 사용한다. 감초는 해독작용, 간염, 두드러기, 피부염, 습진 등에 효과가 있으며, 한방에서 진해거담, 근육이완, 이뇨작용, 항염작용이 있는 것으로 알려져 있다.
(13) 자소엽은 잎의 양면이 모두 갈색을 띤 자색이거나, 또는 윗면이 회록색~녹갈색이고 뒷면이 갈색을 띤 자색이다. 자소엽은 신맛이 나며, 구토, 복부통증 등을 치료하는데 사용된다.
(14) 녹차잎은 차나무의 잎으로, 녹차잎을 고온으로 가열한 후 건조시킨 것을 녹차, 녹차잎을 50% 발효시킨 것을 우롱차, 녹차잎을 90% 이상 발효시킨 것을 홍차로 구분한다. 녹차잎은 카테킨, 데아닌, 비타민 등의 무기질을 함유하며, 항산화, 심신안정, 지방 분해, 이뇨작용 등의 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
(15) 백하수오는 덩이뿌리로, 은조롱, 큰조롱, 새박풀라고도 한다. 하수오는 적색과 백색이 있으며, 이 중 백색이 백하수오이다. 백하수오는 자양강장제로서 병후쇠약, 빈혈, 조기백발, 신경쇠약, 만성풍비를 치료하는데 사용된다.
(16) 은행잎은 은행나무의 잎으로, 약으로 이용시 푸른 잎을 사용한다. 은행잎은 동맥경화증, 심장병, 고콜레스테롤혈증, 이질, 복통, 설사를 다스리는데 효과가 있으며, 특히 심장과 혈전 개선에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
(17) 감잎은 감나무의 잎으로, 주로 잎을 건조시켜 차로 이용한다. 감잎은 섬유질, 비타민 등을 많이 함유하고 있다.
(18) 산수유는 산수유나무의 열매로, 건조시켜 약재로 사용한다. 산수유의 과육은 타닌, 사포닌, 유기산, 비타민 등을 함유하고, 종자는 팔미트산, 올레인산, 리놀산 등을 함유하고 있다. 산수유는 두통, 이명, 해수병, 해열, 월경과다 등을 치료하는데 사용된다.
(19) 뽕나무는 산뽕나무, 들뽕나무, 몽고뽕나무 등이 있으며, 잎과 열매인 오디를 이용한다. 오디는 한방에서 백발의 머리를 검게하고 정력 보강에도 효능이 있고 정신을 맑게 한다고 알려져 있다.
(20) 민들레는 국화과(Asteraceae)에 속하는 다년생초이다. 민들레는 잎과 줄기를 포함한 식물 전체를 사용하며, 소화를 돕는 것으로 알려져 있다.
(21) 더덕은 사삼이라고도 한다. 더덕은 사포닌, 칼슘 등을 함유하며, 사포닌에 의해 약효를 발휘하는 것으로 알려져 있다.
(22) 오가피는 오갈피나무의 뿌리, 줄기 및 가지(껍질)를 말하며, 줄기에 가시가 있는 경우를 가시오가피라고 한다. 오가피는 간, 신장, 힘줄, 뼈를 튼튼하게 하며, 사지마비, 허리와 무릎의 연약증상, 하지무력감, 골절상, 타박상, 부종 등을 치료하는데 사용된다.
(23) 도라지는 초롱꽃과에 속하는 다년생초로, 뿌리를 약재로 이용한다. 도라지 뿌리는 사포닌을 함유하며, 한방에서 치열, 폐열, 편도염, 설사를 치료하는데 사용된다.
(24) 개똥쑥은 잔잎쑥, 개땅쑥이라고도 하며, 길가나 강가에서 흔히 볼 수 있다. 개똥쑥은 한방에서 잎과 줄기를 사용하며, 발열감기, 학질, 소아경기, 소화불량, 이질 등을 치료하는데 사용된다.
(25) 쑥은 국화과에 속하는 다년생초로, 전세계에 걸쳐 자란다. 쑥은 성질이 따뜻하여 복통, 복부냉증, 월경불순, 소화불량 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
이러한 식물 추출물은 각각의 식물로부터 추출된 식물 추출물을 혼합하거나, 또는 모든 식물들이 혼합된 혼합물로부터 한꺼번에 추출하여 제조할 수 있다.
추출 방법은 당 업계에 알려진 추출법을 제한 없이 사용할 수 있다. 추출법의 일례로는 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출, 열수 추출, 가압 추출, 용매 추출 등을 들 수 있다. 이러한 추출 방법으로는 냉침 추출, 열수 추출, 환류 냉각 추출, 용매 추출이 바람직하고, 냉침 추출, 열수 추출, 환류 추출, 용매 추출을 모두 사용하는 것이 더욱 바람직하다.
추출시 용매를 사용할 경우에는 당 업계에 알려진 추출 용매를 제한 없이 사용할 수 있다. 추출 용매의 일례로는 증류수, C1~C4의 알코올, 아세트산, 디메틸 포마미드(dimethyl formamide), 디메틸 설폭사이드(dimethy sulfoxide, DMSO), 아세톤, 아세토나이트릴, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, 펜탄, 헥산, 클로로포름, 디에틸 에테르, 사염화탄소, 테트라하이드로퓨란(tetrahydrofuran, THF) 등을 들 수 있다. 상기 C1~C4의 알코올은 메탄올, 에탄올, 프로판올, n-부탄올, 이소-부탄올 등일 수 있다. 상기 추출 용매로는 증류수, 에탄올이 바람직하고, 증류수인 것이 더욱 바람직하다. 이때, 식물 혼합물과 용매의 혼합 비율은 식물 혼합물:용매=1:1 내지 10일 수 있으며, 식물 혼합물:용매=1:2 내지 5인 것이 더욱 바람직하다.
식물 추출물을 제조하는 방법은 구체적으로, (a) 반응기에 식물 혼합물과 증류수를 1:1 내지 10의 중량비로 투입한 후 상온에서 2 내지 4시간 동안 담가 두어 침출액을 제조하는 단계; (b) 상기 침출액을 50 내지 60℃에서 2 내지 4시간, 70 내지 80℃에서 2 내지 4시간, 90 내지 110℃에서 8 내지 12시간 동안 순차적으로 가열하는 단계; 및 (c) 상기 가열을 통해 생성된 증기를 냉각하여 액체로 포집하는 단계를 포함할 수 있으며, 상기 포집된 액체가 식물 추출물이다.
상기 (a) 단계에서는 식물 혼합물에 함유된 다양한 유효성분을 증류수에 우려내기 위한 것으로, 상기 식물의 유효성분이 함유된 침출액을 제조할 수 있다. 이러한 냉침 추출 방법은 증류수와 식물 혼합물을 혼합한 후 바로 가열하여 추출하는 방법에 비해 식물의 유효성분이 열에 의해 파괴되는 것을 최소화할 수 있다. 이때, 교반기를 사용할 경우에는 식물의 유효성분이 침출되는 속도를 향상시킬 수 있다.
상기 (b) 단계에서는 식물 혼합물의 유효성분이 함유된 침출액을 가열하여 증기를 발생시킨다. 이때, 가열 온도가 110℃를 초과할 경우에는 가열 시간이 감소될 수 있으나, 식물의 유효성분이 파괴될 수 있다. 따라서, 침출액을 순차적으로 온도를 높여 가열함으로써 열에 의해 식물의 유효성분이 파괴되는 것을 예방하면서 손실 없이 액체 상태의 식물의 유효성분을 기체화할 수 있다.
상기 (c) 단계에서는 식물의 유효성분이 함유된 증기를 냉각하여 액체로 포집함으로써 식물의 유효성분이 농축된 액체, 즉 식물 추출물을 얻을 수 있다. 이때, 포집된 액체에 불순물이 함유될 수 있어, 여과하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 여과하는 단계에서는 당 업계에 알려진 여과 방법을 제한 없이 사용할 수 있다. 여과 방법의 일례로는 액체 상태의 식물 추출물에 부유하는 불순물을 제거하기 위해 여과지를 사용할 수 있고, 식물 추출물의 어는 점을 이용한 냉동 여과법을 이용할 수 있다.
상기 식물 추출물은 액체 상태로 사용하거나, 또는 건조하여 분말 형태로 사용할 수 있다. 상기 액상의 식물 추출물을 건조하는 방법은 당 업계에 알려진 건조 방법을 제한 없이 사용할 수 있다. 건조 방법의 일례로는 동결 건조, 진공 건조, 열풍 건조, 분무 건조 등을 들 수 있다.
이러한 방법으로 추출된, 상기 제1 식물군으로부터 추출된 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 엉겅퀴 10 내지 20 중량%, 오미자 10 내지 20 중량%, 진피 10 내지 20 중량%, 대추 5 내지 15 중량%, 둥굴레 5 내지 15 중량%, 다시마 5 내지 15 중량% 및 현미 10 내지 20 중량%를 함유할 수 있다.
또한, 상기 제2 식물군으로부터 추출된 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 인삼 6 내지 12 중량%, 검은콩 10 내지 15 중량%, 어성초 6 내지 12 중량%, 구기자 6 내지 12 중량%, 감초 10 내지 15 중량%, 진피 6 내지 12 중량%, 대추 6 내지 12 중량%, 자소엽 6 내지 12 중량% 및 녹차잎 10 내지 15 중량%를 함유할 수 있다.
또한, 상기 제3 식물군으로부터 추출된 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 녹차잎 6 내지 12 중량%, 백하수오 6 내지 12 중량%, 은행잎 6 내지 12 중량%, 감잎 6 내지 12 중량%, 산수유 6 내지 12 중량%, 뽕나무 5 내지 10 중량%, 민들레 5 내지 10 중량%, 자소엽 5 내지 10 중량%, 더덕 6 내지 12 중량%, 오가피 6 내지 12 중량%, 감초 5 내지 10 중량%, 도라지 5 내지 10 중량% 및 개똥쑥 5 내지 9 중량%를 함유할 수 있다.
또한, 상기 제4 식물군으로부터 추출된 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 산수유 3 내지 10 중량%, 구기자 3 내지 6 중량%, 뽕나무 3 내지 10 중량%, 현미 3 내지 6 중량%, 오미자 3 내지 6 중량%, 대추 3 내지 6 중량%, 녹차잎 3 내지 6 중량%, 감잎 3 내지 6 중량%, 은행잎 3 내지 6 중량%, 자소엽 3 내지 6 중량%, 진피 3 내지 6 중량%, 더덕 3 내지 6 중량%, 백하수오 3 내지 10 중량%, 인삼 3 내지 6 중량%, 도라지 3 내지 6 중량%, 둥굴레 3 내지 6 중량%, 검은콩 3 내지 6 중량%, 오가피 3 내지 6 중량%, 감초 3 내지 6 중량%, 쑥 3 내지 6 중량%, 어성초 3 내지 6 중량%, 엉겅퀴 3 내지 6 중량%, 민들레 3 내지 6 중량% 및 다시마 3 내지 10 중량%를 함유할 수 있다.
이러한 식물 추출물은 식물의 유효성분을 포함하며, 독성이 없어 세포 사멸과 염증 반응을 일으키지 않고 진피모유두세포의 성장을 촉진하며 5α-환원효소의 활성을 억제함으로써 모발이 탈락되는 현상을 지연시키고 발모를 촉진할 수 있다.
이러한 식물 추출물을 포함하는 조성물은 상기 식물 추출물만을 포함하거나, 또는 상기 식물 추출물의 탈모 방지 및 발모 촉진 효과를 저해하지 않으면서 상기 효과를 증대시킬 수 있는 다른 성분을 더 포함할 수 있다.
상기 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품, 화장료 및 의약품 제조에 사용될 수 있다. 이때, 상기 조성물은 식품, 화장료 또는 의약품의 총 중량을 기준으로, 식물 추출물을 0.001 내지 50 중량%로 포함할 수 있다.
구체적으로, 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품은 건강기능식품으로 제공될 수 있다. 상기 건강기능식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐, 음료 등의 형태일 수 있고, 캔디, 초콜릿, 음료, 껌, 차, 비타민복합체, 건강보조식품 등으로 섭취할 수 있다. 이때, 건강기능식품은 당 업계에 알려진 식품 첨가제를 더 포함할 수 있다.
또한, 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 화장료는 기능성 화장료로 제공될 수 있다. 상기 화장료는 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 클렌징 오일, 클렌징 폼, 클렌징 로션, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등의 제형일 수 있다. 바람직하게는, 샴푸, 린스, 헤어미스트, 헤어에센스, 헤어영양제, 헤어세럼, 헤어마사지크림, 헤어로션, 헤어팩, 헤어스프레이의 제형일 수 있다. 이때, 화장료는 당 업계에 알려진 화장료 첨가제를 더 포함할 수 있다. 상기 화장료 첨가제로는 물, 알코올, 유분, 유화제(계면활성제), 보습제, 점증제, 산화방지제, pH 조정제, 색소, 방부제, 향료 등일 수 있다.
또한, 상기 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 의약품은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구제; 외용제; 좌제; 주사제 등의 제형일 수 있다. 이때, 의약품은 당 업계에 알려진 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 이때, 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 광물유 등일 수 있다.
이러한 식품, 화장료 및 의약품을 복용하거나, 또는 피부 외용제로 사용할 경우에는 인체에 부작용 없이, 탈모 증상이 완화되거나 개선되는 효과를 기대할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예를 통해 구체적으로 설명하나, 하기 실시예는 본 발명의 한 형태를 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
[
제조예
1] 식물 추출물의 제조
하기 표 1의 식물을 준비하였다.
먼저, 각 식물을 채취하고 손질한 후 15 내지 20℃의 그늘에서 6일 동안 1차 건조, 25℃ 이상의 햇볕에서 3일 동안 2차 건조하여 건조물을 준비하였다. 각 건조물을 분쇄하여 건조 분말로 제조하였고, 하기 표 1의 중량비에 따라 각 건조 분말을 혼합하여 혼합 분말 3,500 kg을 제조하였다.
반응기에 증류수 1.3 톤(t)과 멸균된 면주머니에 담긴 혼합 분말 3,500 kg을 투입한 후 상온에서 3시간 동안 우려내어 침출액을 제조하였다. 반응기에서 혼합 분말이 담긴 면주머니를 제거하였고, 남은 침출액을 순차적으로 55℃에서 3시간 동안, 75℃에서 3시간 동안, 100℃에서 9시간 동안 가열하였다. 가열을 통해 생성된 증기를 냉각한 후 여과하여 불순물이 제거된 증류 원액을 얻었다. 이러한 증류 원액은 실시예 1 내지 4의 식물 추출물이다.
실시예 1 | 실시예 2 | 실시예 3 | 실시예 4 | ||||
식물 | 중량% | 식물 | 중량% | 식물 | 중량% | 식물 | 중량% |
엉겅퀴 | 14 | 인삼 | 11 | 녹차잎 | 8.8 | 산수유 | 4.1 |
오미자 | 14 | 검은콩 | 11 | 백하수오 | 7.6 | 구기자 | 4.1 |
진피 | 14 | 어성초 | 11 | 은행잎 | 7.6 | 뽕나무 (열매) |
4.1 |
대추 | 14 | 구기자 | 11 | 감잎 | 7.6 | 현미 | 4.9 |
둥굴레 (뿌리) |
14 | 감초 | 11 | 산수유 | 7.6 | 오미자 | 4.1 |
다시마 | 14 | 진피 | 11 | 뽕나무 (열매) |
7.6 | 대추 | 4.1 |
현미 | 16 | 대추 | 11 | 민들레 | 7.6 | 녹차잎 | 4.9 |
자소엽 | 11 | 자소엽 | 7.6 | 감잎 | 4.1 | ||
녹차잎 | 12 | 더덕 | 7.6 | 은행잎 | 4.1 | ||
오가피 | 7.6 | 자소엽 | 4.1 | ||||
감초 | 7.6 | 진피 | 4.1 | ||||
도라지 | 7.6 | 더덕 | 4.1 | ||||
개똥쑥 | 7.6 | 백하수오 | 4.1 | ||||
인삼 | 4.1 | ||||||
도라지 | 4.1 | ||||||
둥굴레 | 4.1 | ||||||
검은콩 | 4.1 | ||||||
오가피 | 4.1 | ||||||
감초 | 4.1 | ||||||
쑥 | 4.1 | ||||||
어성초 | 4.1 | ||||||
엉겅퀴 | 4.1 | ||||||
민들레 | 4.1 | ||||||
다시마 | 4.1 |
실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 반복 추출하여 각 수율을 측정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
실시예 1 | 실시예 2 | 실시예 3 | 실시예 4 | ||||||||
Lot no. | 추출양 (kg) |
수율 (%) |
Lot no. | 추출양 (kg) |
수율 (%) |
Lot no. | 추출양 (kg) |
수율 (%) |
Lot no. | 추출양 (kg) |
수율 (%) |
1-1 | 780 | 60.0 | 2-1 | 705 | 54.2 | 3-1 | 734 | 56.5 | 4-1 | 740 | 56.9 |
1-2 | 710 | 54.6 | 2-2 | 798 | 61.4 | 3-2 | 768 | 59.1 | 4-2 | 731 | 56.2 |
1-3 | 840 | 64.6 | 2-3 | 830 | 63.8 | 3-3 | 803 | 61.8 | 4-3 | 781 | 60.1 |
1-4 | 768 | 59.1 | 2-4 | 765 | 58.8 | 3-4 | 764 | 58.8 | 4-4 | 756 | 58.2 |
1-5 | 821 | 63.2 | 2-5 | 804 | 61.8 | 3-5 | 741 | 57.0 | 4-5 | 810 | 62.3 |
1-6 | 794 | 61.1 | 2-6 | 821 | 63.2 | 3-6 | 734 | 56.5 | 4-6 | 813 | 62.5 |
1-7 | 764 | 58.8 | 2-7 | 793 | 61.0 | 3-7 | 810 | 62.3 | 4-7 | 791 | 60.8 |
2-8 | 799 | 61.5 | 4-8 | 789 | 60.7 | ||||||
2-9 | 841 | 64.7 | |||||||||
평균 | 60.2 | 평균 | 60.6 | 평균 | 58.8 | 평균 | 59.6 |
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물은 균일한 수율로 추출된 것으로 나타났다.
제조예 1 내지 4에서 제조된 실시예 1 내지 4의 식물 추출물에 대한 탈취능, 독성, 염증반응, 탈모 방지 효과 등을 다음과 같이 측정하였다.
[
실험예
1]
탈취능
시험
실시예 4의 식물 추출물에 대하여, 암모니아, 메틸머캅탄, 트리메틸아민 및 황화수소 탈취능을 측정하였고, 그 결과를 하기 표 3 및 도 1에 나타내었다.
상기 암모니아, 메틸머캅탄, 트리메틸아민 및 황화수소는 불쾌감을 유발하는 화합물이다.
실시예 4에 대한 비교예로는 아무것도 처리하지 않고 상기 화합물의 탈취능을 측정하였다.
측정 화합물 | 식물 추출물의 처리 시간 | 비교예 | 실시예 4 | |
농도 (umol/mol) |
농도 (umol/mol) |
탈취율 (%) |
||
암모니아 | 0분 | 50 | 50 | 0 |
30분 | 49 | 2 | 95.9 | |
60분 | 49 | 1 | 98 | |
90분 | 49 | 1 | 98 | |
120분 | 49 | < 0.2 | 99.6 | |
메틸머캅탄 | 0분 | 50 | 50 | 0 |
30분 | 49 | 43 | 12.2 | |
60분 | 49 | 43 | 12.2 | |
90분 | 49 | 43 | 12.2 | |
120분 | 49 | 43 | 12.2 | |
트리메틸아민 | 0분 | 50 | 50 | 0 |
30분 | 49 | 1 | 98 | |
60분 | 49 | 1 | 98 | |
90분 | 49 | < 0.2 | 99.6 | |
120분 | 49 | < 0.2 | 99.6 | |
황화수소 | 0분 | 50 | 50 | 0 |
30분 | 49 | 45 | 8.2 | |
60분 | 49 | 42 | 14.3 | |
90분 | 49 | 39 | 20.4 | |
120분 | 49 | 97 | 24.5 |
상기 표 3 및 도 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 4의 식물 추출물은 암모니아와 트리메틸아민에 대한 탈취능이 95% 이상인 반면, 메틸머캅탄과 황화수소에 대한 탈취능이 30% 미만인 것으로 나타났다.
따라서, 실시예 4의 식물 추출물이 암모니아 및 트리메틸아민에 의한 악취를 억제할 수 있는 것을 알 수 있었다.
[
실험예
2] 세포독성 시험
실시예 1 내지 4의 식물 추출물에 대하여 세포독성을 확인하기 위해, 섬유아세포 및 진피모유두세포에 상기 식물 추출물을 처리한 후 각 세포의 생존율을 측정하였다.
상기 섬유아세포(fibroblast)는 피부를 구성하는 세포이고, 상기 진피모유두세포(dermal papilla cell)는 모낭 주변을 둘러싼 세포로서 모발의 생성과 성장에 관여하는 세포이다.
먼저, 96 well의 마이크로플레이트에 각 세포 10,000 cells/well와 혈청배지를 분주한 후 37℃, CO2 배양기에서 하룻밤 동안 배양하였다. 각 세포에 실험군으로 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 농도별(1, 5, 10, 20, 30, 50, 100%)로 처리하고, 식물 추출물의 농도가 O%인 경우에 무혈청배지를 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 각 세포에 처리된 물질을 제거한 후 MTT 용액을 분주하여 37℃, CO2 배양기에서 4시간 동안 배양하였다. 이후, 각 세포에 처리된 MTT 용액을 제거한 후 DMSO 1 mL을 넣고 10분 동안 혼합하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였고, 그 결과를 도 2 및 3에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 처리 농도가 증가할수록 섬유아세포의 생존율이 감소하는 것으로 나타났다. 또한, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물의 농도가 50% 이하인 경우, 섬유아세포의 생존율은 70% 이상인 것으로 나타났다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 처리 농도가 증가할수록 진피모유두세포의 생존율이 감소하는 것으로 나타났다. 또한, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물의 농도가 50% 이하인 경우, 진피모유두세포의 생존율은 70% 이상인 것으로 나타났다.
따라서, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 50% 이하의 농도로 사용할 경우, 세포독성이 없는 것을 알 수 있었다.
[
실험예
3] 염증반응 시험
실시예 1 내지 4의 식물 추출물에 대하여 세포 염증반응을 확인하기 위해, PMACI로 염증을 일으킨 비만세포에 상기 식물 추출물을 처리한 후 각 세포의 TNF-a 및 IL-6 농도를 측정하였다.
상기 비만세포는 인간비만세포(HMC-1)로, 염증반응을 유도/조절하는 히스타민 및 TNF-a, IL-2, IL-6, IL-8, IL-10 등의 사이토카인(cytokine)을 분비한다.
상기 PMACI는 염증 유도물질인 PMA(phorbol 12-myristate 13-acetate)와 칼슘 운반체(calcium ionophore) A23187의 혼합물이다.
먼저, 12 well의 마이크로플레이트에 세포 1x106 cells/well와 혈청배지를 분주한 후 37℃, CO2 배양기에서 하룻밤 동안 배양하였다. 대조군으로 각 세포에 무혈청배지를 처리하였다. 실험군으로 각 세포에 PMACI(PMA 1uM과 A23187 40nM을 혼합함)를 처리한 후 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 농도별(1, 10, 20%)로 처리하고, 식물 추출물의 농도가 O%인 경우에 무혈청배지를 처리하여 5시간 동안 배양하였다. 각 세포에 처리된 물질을 회수한 후 ELISA 키트를 이용하여 TNF-a(AbFrontier, #LF-EK0193) 및 IL-6(AbFrontier, #LF-EK0260)의 농도를 측정하였고, 그 결과를 도 4 및 도 5에 나타내었다.
도 4에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 처리 농도가 증가할수록 TNF-a의 농도가 감소하는 것으로 나타났다.
도 5에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 처리한 경우는 염증반응을 일으키지 않은 경우(대조군)과 같이 IL-6의 농도 변화가 없는 것으로 나타났다.
따라서, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물이 염증반응에 의한 TNF-a 발현을 억제하는 것으로, 항염 효과가 있는 것을 알 수 있었다.
[
실험예
4] 세포증식 시험
실시예 1 내지 4의 식물 추출물에 대하여 세포증식을 확인하기 위해, 섬유아세포 및 진피모유두세포에 상기 식물 추출물을 처리한 후 각 세포의 증식율을 측정하였다.
먼저, 96 well의 마이크로플레이트에 각 세포 10,000 cells/well와 혈청배지를 분주한 후 37℃, CO2 배양기에서 하룻밤 동안 배양하였다. 양성대조군으로 각 세포에 상피생장인자(epidermal growth factor, EGF)를 처리하였다. 실험군으로 각 세포에 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 농도별(1, 5, 10, 20, 30, 50%)로 처리하고, 식물 추출물의 농도가 O%인 경우에 무혈청배지를 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 각 세포에 처리된 물질을 제거하고 CCK-8 용액을 분주하여 37℃, CO2 배양기에서 2시간 배양한 후 450 nm에서 흡광도를 측정하였고, 그 결과를 도 6 및 7에 나타내었다.
도 6에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 농도 1 내지 10%로 처리한 경우에는 농도가 O%인 경우에 비해 섬유아세포의 증식율이 증가한 것으로 나타났다. 특히, 실시예 3 및 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 진피모유두세포의 증식율이 EGF(양성대조군)를 처리한 경우와 유사한 수준인 것으로 나타났다.
도 7에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 농도 1 내지 10%로 처리한 경우에는 농도가 O%인 경우에 비해 진피모유두세포의 생존율이 증가한 것으로 나타났다. 특히, 실시예 3의 식물 추출물을 처리한 경우에는 세포 증식율이 EGF를 처리한 경우와 유사한 수준인 것으로 나타났다.
따라서, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물이 세포증식을 촉진하며, 특히 실시예 3 및 4의 식물 추출물에 의한 세포증식 효과가 우수한 것을 알 수 있었다.
[
실험예
5] 세포사멸 시험
세포증식 효과가 우수한 실시예 4의 식물 추출물에 대하여 세포사멸(apoptosis)을 확인하기 위해, 섬유아세포 및 진피모유두세포에 상기 식물 추출물을 처리한 후 세포 생존율, 세포 증식율 및 카스파제 활성을 측정하였다.
상기 세포사멸(apoptosis)은 비정상적인 세포나 손상 또는 노화된 세포가 스스로 사멸하는 것으로, 카스파제(caspase), BAX 등의 세포내 신호전달물질에 의해 세포사멸이 유도된다.
세포 생존율을 측정하기 위해, 상기 실험예 2와 동일한 과정으로 실시예 4의 식물 추출물을 농도별로 처리하였다.
세포 증식율을 측정하기 위해, 상기 실험예 4와 동일한 과정으로 실시예 4의 식물 추출물을 농도별로 처리하였다.
카스파제 활성을 측정하기 위해, 96 well의 마이크로플레이트에 각 세포 10,000 cells/well와 혈청배지를 분주한 후 37℃, CO2 배양기에서 하룻밤 동안 배양하였다. 각 세포에 실험군으로 실시예 4의 식물 추출물을 농도별(1, 5, 10, 20, 30%)로 처리하고, 식물 추출물의 농도가 O%인 경우에 무혈청배지를 처리한 후 48시간 동안 배양하였다. 각 세포에 처리된 물질을 제거한 후 세포 용해액(cell lysis buffer)을 분주하여 세포질 추출액(cytosolic extract)를 회수하였다. 세포질 추출액에 카스파제 반응액(caspase reaction buffer)+DTT를 넣고 DEVD-p-NA와 혼합하여 405nm에서 흡광도를 측정하였다.
세포 생존율, 세포 증식율 및 카스파제 활성의 측정 결과를 도 8에 나타내었다.
도 8에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 처리 농도가 증가할수록 섬유아세포 및 진피모유두세포의 생존율, 증식율, 카스파제 활성이 증가하는 것으로 나타났다.
이때, 실시예 4의 식물 추출물의 농도가 30%인 경우에는 처리된 배지가 적어 카스파제 활성이 증가한 것으로 나타났다. 이에 따라, 이후 실험에서는 실시예 1 내지 4의 식물 추출물의 농도를 20% 이하로 사용하였다.
[
실험예
6] 남성형 탈모 관련 효소의
발현양에
미치는 영향 시험
세포증식 효과가 우수한 실시예 3 및 4의 식물 추출물에 대하여 남성형 탈모 관련 효소의 발현양을 확인하기 위해, DHT를 처리한 진피모유두세포에 상기 식물 추출물을 처리한 후 세포의 5α-환원효소 및 BAX 발현을 측정하였다.
상기 DHT(dehydotestosterone)는 테스토스테론과 같은 남성 호르몬이며, 테스토스테론이 5α-환원효소에 의해 전환된 것이다. DHT는 남성의 성적 발달에 중요한 역할을 하지만, 모낭 내 DHT 농도가 높아질 경우 모발 성장을 억제하여 남성형 탈모를 유발한다.
상기 BAX는 세포사멸(apoptosis)을 유도하는 세포내 신호전달물질이다.
<6-1> 5α-환원효소
먼저, 6 well의 마이크로플레이트에 진피모유두세포 150,000 cells/well와 혈청배지를 분주한 후 37℃, CO2 배양기에서 하룻밤 동안 배양하였다. 각 세포의 배지를 제거한 후 무혈청배지를 분주하여 1일 동안 배양하였다. 각 세포에 음성 대조군으로 무혈청배지, 양성대조군으로 피나스테라이드(finasteride)를 처리하였다. 실험군으로 각 세포에 DHT를 5시간 동안 처리한 후 실시예 3 및 4의 식물 추출물을 농도별(5, 10, 20%)로 처리하고, 식물 추출물의 농도가 O%인 경우에 무혈청배지를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 각 세포에 처리된 물질을 제거한 후 세포 용해액(cell lysis buffer)을 분주하여 세포질 추출액(cytosolic extract)를 회수하였다. 세포질 추출액 내 카스파제의 발현양을 웨스턴 블롯(western blot)으로 측정하였고, 그 결과를 도 9에 나타내었다.
도 9에 나타낸 바와 같이, 실시예 3 및 4의 식물 추출물을 농도 5 내지 20%로 처리한 경우에는 5α-환원효소의 발현양이 감소하는 것으로 나타났다. 특히, 실시예 4의 식물 추출물을 10, 20%의 농도로 처리한 경우, 5α-환원효소의 발현양이 유의적으로 감소하는 것으로 나타났다.
<6-2> BAX
DHT를 5시간 대신 48시간 동안 처리한 경우를 제외하고는, <6-1>과 같은 방법으로 BAX의 발현양을 웨스턴 블롯(western blot)으로 측정하였고, 그 결과를 도 10에 나타내었다.
도 10에 나타낸 바와 같이, 실시예 3 및 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 처리 농도가 증가할수록 BAX의 발현양이 감소하는 것으로 나타났다.
따라서, 실시예 3 및 4의 식물 추출물이 5α-환원효소의 발현 및 세포사멸을 억제하는 것을 알 수 있었다.
[
실험예
7] 콜라겐합성 시험
실시예 1 내지 4의 식물 추출물에 대하여 콜라겐 합성능을 확인하기 위해, 섬유아세포에 상기 식물 추출물을 처리한 후 생성된 콜라겐 농도를 측정하였다.
상기 콜라겐(collagen)은 피부, 모발, 연골, 혈관 등의 결합조직에 존재하는 단백질로, 세포내 콜라겐이 부족하면 탄력이 저하되어 주름, 관절염, 탈모 등이 유발될 수 있다.
먼저, 24 well의 마이크로플레이트에 세포 20,000 cells/well와 혈청배지를 분주한 후 37℃, CO2 배양기에서 하룻밤 동안 배양하였다. 각 세포에 음성대조군으로 무혈청배지, 양성대조군으로 EGF(20ng/mL)를 처리하였다. 실험군으로 각 세포에 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 농도별(1, 5, 10, 20%)로 처리한 후 48시간 동안 배양하였다. 각 세포에 처리된 물질을 제거한 후 세포 용해액(cell lysis buffer)을 분주하여 세포질 추출액(cytosolic extract)를 회수하였다. ELISA 키트를 이용하여 세포질 추출액 내 콜라겐 전구체인 프로콜라겐(pro-collagen)의 농도를 측정하였고, 그 결과를 도 11에 나타내었다.
도 11에 나타낸 바와 같이, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물을 처리한 경우에는 무혈청배지(음성대조군)를 처리한 경우에 비해 프로콜라겐의 농도가 증가하는 것으로 나타났다. 특히, 실시예 3의 식물 추출물의 농도가 20%인 경우 및 실시예 4의 식물 추출물을 처리한 경우는 EGF(양성대조군)를 처리한 경우와 프로콜라겐의 농도가 유사한 것으로 나타났다.
따라서, 실시예 1 내지 4의 식물 추출물이 콜라겐 합성을 촉진하는 것을 알 수 있었다.
결과적으로, 본 발명의 일 실시예에 따른 식물 추출물은 섬유아세포와 진피모유두세포의 증식을 촉진하면서 콜라겐 합성을 유도하고, 5α-환원효소의 활성을 억제함으로써 탈모를 방지하거나 개선시킬 수 있다.
Claims (10)
- 엉겅퀴, 오미자, 진피, 대추, 둥굴레, 다시마 및 현미를 포함하는 제1 식물군;
인삼, 검은콩, 어성초, 구기자, 감초, 진피, 대추, 자소엽 및 녹차잎을 포함하는 제2 식물군;
녹차잎, 백하수오, 은행잎, 감잎, 산수유, 뽕나무, 민들레, 자소엽, 더덕, 오가피, 감초, 도라지 및 개똥쑥을 포함하는 제3 식물군; 및
산수유, 구기자, 뽕나무, 현미, 오미자, 대추, 녹차잎, 감잎, 은행잎, 자소엽, 진피, 더덕, 백하수오, 인삼, 도라지, 둥굴레, 검은콩, 오가피, 감초, 쑥, 어성초, 엉겅퀴, 민들레 및 다시마를 포함하는 제4 식물군
으로 이루어진 군에서 선택되는 하나의 식물군으로부터 추출된 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 엉겅퀴 10 내지 20 중량%, 오미자 10 내지 20 중량%, 진피 10 내지 20 중량%, 대추 5 내지 15 중량%, 둥굴레 5 내지 15 중량%, 다시마 5 내지 15 중량% 및 현미 10 내지 20 중량%를 함유하는 것인 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 인삼 6 내지 12 중량%, 검은콩 10 내지 15 중량%, 어성초 6 내지 12 중량%, 구기자 6 내지 12 중량%, 감초 10 내지 15 중량%, 진피 6 내지 12 중량%, 대추 6 내지 12 중량%, 자소엽 6 내지 12 중량% 및 녹차잎 10 내지 15 중량%를 함유하는 것인 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 녹차잎 6 내지 12 중량%, 백하수오 6 내지 12 중량%, 은행잎 6 내지 12 중량%, 감잎 6 내지 12 중량%, 산수유 6 내지 12 중량%, 뽕나무 5 내지 10 중량%, 민들레 5 내지 10 중량%, 자소엽 5 내지 10 중량%, 더덕 6 내지 12 중량%, 오가피 6 내지 12 중량%, 감초 5 내지 10 중량%, 도라지 5 내지 10 중량% 및 개똥쑥 5 내지 9 중량%를 함유하는 것인 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 식물 추출물은 총 건조 중량을 기준으로, 산수유 3 내지 10 중량%, 구기자 3 내지 6 중량%, 뽕나무 3 내지 10 중량%, 현미 3 내지 6 중량%, 오미자 3 내지 6 중량%, 대추 3 내지 6 중량%, 녹차잎 3 내지 6 중량%, 감잎 3 내지 6 중량%, 은행잎 3 내지 6 중량%, 자소엽 3 내지 6 중량%, 진피 3 내지 6 중량%, 더덕 3 내지 6 중량%, 백하수오 3 내지 10 중량%, 인삼 3 내지 6 중량%, 도라지 3 내지 6 중량%, 둥굴레 3 내지 6 중량%, 검은콩 3 내지 6 중량%, 오가피 3 내지 6 중량%, 감초 3 내지 6 중량%, 쑥 3 내지 6 중량%, 어성초 3 내지 6 중량%, 엉겅퀴 3 내지 6 중량%, 민들레 3 내지 6 중량% 및 다시마 3 내지 10 중량%를 함유하는 것인 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 식물 추출물은 진피모유두세포의 5α-환원효소(5α-reductase) 활성을 억제하는 것인 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물. - (a) 반응기에 제1항의 식물군과 증류수를 1:1 내지 10의 중량비로 투입한 후 상온에서 2 내지 4시간 동안 담가 두어 침출액을 제조하는 단계;
(b) 상기 침출액을 50 내지 60℃에서 2 내지 4시간, 70 내지 80℃에서 2 내지 4시간, 90 내지 110℃에서 8 내지 12시간 동안 순차적으로 가열하는 단계; 및
(c) 상기 가열을 통해 생성된 증기를 냉각하여 액체로 포집하는 단계
를 포함하는 제1항의 탈모 방지 및 발모 촉진용 조성물의 제조방법. - 제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 식품.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 화장료.
- 제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 조성물을 포함하는 탈모 방지 및 발모 촉진용 의약품.
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