KR102041543B1 - 한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents

한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 혼합 추출물은 세포독성이 없고, 자외선 조사에 의해 손상된 세포를 보호하며, 엘라스타아제의 발현을 현저하게 억제하며, 히알루론산의 함량을 증가시키는 효과가 있는 것이다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물{Cosmetic composition for skin moisturizing and anti-wrinkle comprising herbal medicine mixed extract as effective component}
본 발명은 한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부환경의 자극으로부터 체내의 기관들을 보호해주며, 체온조절 등의 생체 항상성 유지에 중요한 역할을 한다. 이러한 피부는 여러 가지 내외적 요인에 의해서 노화가 발생하며, 크게 유전적 원인에 의한 내인성 노화와 환경적 원인에 의한 외인성 노화로 구분된다. 이 중, 광노화는 자외선(ultraviolet; UV)에 의한 노화를 의미한다. 최근 환경오염으로 인한 오존층 파괴는 자외선의 양을 증가시켰고 이에 따라 광노화에 대한 연구가 주목되고 있다. 광노화 된 피부에서는 거칠어짐, 탄력 손실, 주름 발생 및 불규칙한 색소 침착 등과 같은 외관상의 특징이 관찰되며, 이 중 광노화의 주된 연구 분야는 피부 주름의 변화에 대한 것이다. 상기 광노화에 의한 피부 주름 형성에 관해 피부의 주요 구성성분인 콜라겐(collagen)의 합성, 분해 및 수분 함유량 등의 기초적인 생리 대사 변화에 대한 연구 결과가 다수 보고되고 있다. 특히 자외선에 의해 활성 산소종(reactive oxygen species) 생성이 증가되고 피부의 효소적, 비효소적 항산화 방어체계가 붕괴되어 콜라겐의 분해 증가 및 생합성을 감소시켜 진피층 내의 콜라겐이 현저하게 감소된다. 상기 콜라겐 감소에 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐 분해 효소(MMPs; matrix metalloproteinases)로, 이는 세포외기질(extracellular matrix)과 기저막(basement membrane)의 분해에 관여한다. 상기 효소는 자외선에 의해 활성이 증가되며 이를 억제함으로써 자외선에 의해 유도되는 피부 두께 증가 및 주름 형성이 감소된다는 연구 결과들이 보고되어 있다. 따라서 광노화의 예방 및 치료를 위해서는 MMPs를 조절하는 것이 효과적인 방법으로 알려져 있다.
한편, 감초(Glycyrrhiza uralensis Fischer)는 모든 약의 독성을 조화시켜서 약효가 잘 나타나게 하며 장부의 한열과 사기를 다스리고 모든 혈맥의 소통을 잘 시키며 근육과 뼈를 튼튼하게 하는 것으로 알려져 있으며, 해독작용, 간염, 두드러기, 피부염, 습진 등에 효과가 있다. 진해·거담, 근육이완, 이뇨작용, 항염작용이 있으며 소화성궤양을 억제하는 것으로 알려져 있다.
또한, 대추는 조(棗) 또는 목밀(木蜜)이라고도 한다. 표면은 적갈색이며 타원형이고 길이 1.5∼2.5cm에 달하며 빨갛게 익으면 단맛이 있다. 과실은 생식할 뿐 아니라 채취한 후 푹 말려 건과(乾果)로서 과자 ·요리 및 약용으로 쓰인다.
또한, 반하(Pinellia ternata Breitenbach)는 다년생 초본으로 끼무릇이라고도 한다. 둥근 뿌리줄기는 지름이 1㎝이며, 한두개의 잎이 나오고, 작은 잎은 3개이다. 꽃은 6월과 7월경에 피고, 수꽃은 대가 없이 꽃밥만으로 이루어지며, 장과는 녹색이고 크기가 작다. 중국, 일본, 한국 등 동남아 전역에 분포하며 우리나라에서는 전국적으로 재배하고 있으나, 서울, 수원, 제주도, 울릉도 산이 유명한 것으로 알려져 있다. 반하는 거담작용이 있어서 호흡중추를 진정하며 기관지의 경련을 제거하여 해수를 경미케 한다.
또한, 생강(Zingiber officinale)은 특유의 향기와 매운맛 때문에 가정에서 식품원료인 향신료로 사용되어 왔으며, 다양한 활성 때문에 모든 한방 처방에 많이 사용되고 있다. 한약재의 원료로는 사용방법이 다양하며, 수확한 근경을 생강이라고 하며 생강의 근강을 찌거나 삶아서 건조한 것을 건강(乾薑)이라 하고, 불에 구워 말린 것을 흑강이라 칭한다. 생강은 소화액을 분비하여 식욕을 증진시키고 위장의 운동을 촉진하고 소화흡수를 도와주며, 또한 담을 없애고 기를 내리며 구토를 그치게 하고 풍한과 종기를 제거함과 동시에 천식에 사용된다. 또한 발한 해열약, 혈행장애, 감기풍한 등에 이용되고 있으며 방향신미 성분은 혈액순환과 체온을 증가시키며, 민간요법으로 감기와 기침을 치료하기 위해 생강즙에 꿀을 혼합하여 복용한다. 반면에 건강은 신진대사 기능이 저하되었을 때 이용되며 기침, 현기증, 손발이 찬 경우, 요통, 설사, 구토 등의 치료제로 활용된다. 또한, 구풍, 소화제로서 심기를 통하고 양을 돋우며 오장육부의 냉을 제거하는데 사용된다.
또한, 시호는 북시호·묏미나리라고도 한다. 풀밭에서 자라며 높이 40∼70cm이다. 포기 전체에 털이 없으며 가늘고 긴 줄기 위에서 가지가 갈라진다. 뿌리줄기는 굵고 짧다. 잎은 어긋나고 줄 모양이거나 바소꼴이며 가장자리가 밋밋하고 맥은 평행하다. 뿌리에 달린 잎은 밑부분이 좁아져서 잎자루처럼 되고 길이 10∼30cm이다. 줄기에 달린 잎은 4∼10cm, 나비 5∼15mm이고 끝이 뾰족하다. 해열·진통·강장제나 호흡기·소화기·순환기 질환에 약재로 쓴다.
또한, 인삼(ginseng C. A. Meyer)은 깊은 산악지대에서 자라는 식물로 흔히 재배하고 있다. 높이는 60㎝에 달하고, 근경(根莖: 뿌리와 줄기)은 짧으며 곧거나 비스듬히 서고, 밑에서 도라지 같은 뿌리가 발달한다. 근경 끝에서 1개의 원줄기가 나오고 끝에서 3, 4개의 잎이 윤생(輪生:돌려나기)하며 긴 엽병 끝에 5개의 장상복엽(掌狀複葉: 손바닥 모양의 겹잎)이 달린다. 강장·강심·건위보정(健胃補精)·진정약으로 널리 상용되고, 위장기능 쇠약에 의한 신진대사기능의 저하에 진흥약(振興藥)으로 사용되며, 병약자의 위부정체감(胃部停滯感)·소화불량·구토·흉통(胸痛)·이완성하리(弛緩性下痢)·식욕부진 등에도 응용된다.
또한, 황금은 산지의 풀밭에서 자란다. 높이 20∼60cm이다. 여러 대가 나와 포기로 자라고 털이 있으며 가지가 갈라진다. 잎은 마주나고 바소꼴이며 가장자리가 밋밋하다. 꽃은 7∼8월에 피고 자주빛이 돌며 총상꽃차례로 한쪽으로 치우쳐서 달린다. 화관(花冠)은 밑부분에서 꼬부라져 곧게 서고 통형이며 길이 1.5∼2.5cm이고 입술 모양이다. 꽃받침은 종 모양이다. 뿌리를 해열·이뇨·지사·이담 및 소염제로 이용한다.
상기 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 피부 주름의 예방 또는 개선에 관한 선행기술로는 일본공개특허 제2013-203679호에 황금 추출물을 포함한 MMP-1 저해제가 개시되어 있고, 한국공개특허 제2006-0027764호에 시호 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물이 개시되어 있으나, 본 발명의 한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 기술은 개시된 바 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명은 한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하고, 본 발명의 유효성분인 혼합 추출물이 세포 독성이 없으며, 자외선 조사에 의한 세포 손상으로부터 세포를 보호하고, 엘라스타아제 저해 활성이 현저하며, UV 조사에 의해 감소된 히알루론산 함량이 회복되는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 한약재 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 혼합 추출물이 자외선 조사에 의해 손상된 세포를 보호하며, 엘라스타아제의 발현을 현저하게 억제하며, 히알루론산 함량을 증가시키는 것이다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물과 비교군으로 상기 개별약재 단독 추출물의 세포생존율(%)을 확인하기 위하여, HaCaT 세포에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별(10, 50, 100 및 200㎍/㎖)로 처리한 후, MTS 어세이를 수행한 결과이다.
도 2는 본 발명의 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물과 비교군으로 상기 개별약재 단독 추출물의 UV 조사에 따른 세포 보호효과를 확인하기 위하여, HaCaT 세포(사람 각질형성 세포주)에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별(50㎍/㎖ 및 100㎍/㎖)로 처리하고, 자외선(UV Crosslinker, UltR5 Lum)을 30분간 조사한 후, MTS 어세이를 수행한 결과이다.
도 3은 본 발명의 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물과 비교군으로 상기 개별약재 단독 추출물의 처리에 따른 엘라스타아제 저해 활성을 확인한 결과이다. ****은 본 발명의 혼합 추출물을 처리한 군에서의 엘라스타아제 저해 활성(%)이 개별약재 단독 추출물에 비해 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로 p<0.0001임을 의미한다.
도 4는 본 발명의 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물과 비교군인 상기 한약재들의 단독 추출물의 처리에 따른 히알루론산 함량 변화를 확인한 결과이다. ####은 아무것도 처리하지 않은 대조군(Control)에 비해 자외선 조사군(UVB)의 히알루론산 함량이 통계적으로 유의미하게 감소하였다는 것으로 p<0.0001임을 의미한다. $$$$는 자외선 조사군에 비해 본 발명의 혼합 추출물을 처리하고 자외선을 조사한 실험군의 히알루론산 함량이 유의미하게 증가하였다는 것으로 p<0.0001임을 의미한다. **, ****은 본 발명의 혼합 추출물의 함량이 한약재 단독 추출물에 비해 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것으로, **는 p<0.01이고, ****은 p<0.0001임을 의미한다.
본 발명은 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
상기 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물은 한의학상의 처방으로 '소시호탕'이라고 지칭하는 것이다.
상기 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물은 하기의 단계를 포함하는 방법에 의해 제조되는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 않는다:
(1) 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합물에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
(2) 단계 (1)의 추출물을 여과하는 단계; 및
(3) 단계 (2)의 여과한 추출물을 감압 농축하고 건조하여 추출물을 제조하는 단계.
상기 단계 (1)에서 추출용매는 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합물 중에서 선택하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 에탄올이고, 더욱더 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올이지만 이에 한정하지 않는다.
상기 제조방법에 있어서, 추출방법은 여과법, 열수 추출, 침지 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 등의 당 업계에 공지된 모든 통상적인 방법을 이용할 수 있다. 상기 추출용매는 건조된 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합물의 중량에 대하여 1~20배 첨가하여 추출하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 5~15배 첨가하는 것이다. 추출온도는 4~50℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 0.5~10시간인 것이 바람직하며, 0.5~5시간이 더욱 바람직하고, 1 시간이 가장 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 방법에 있어서, 단계 (3)의 감압농축은 진공 감압 농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무 건조 또는 동결 건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물은 18~26중량% 시호, 8~12중량%의 인삼, 5~7중량%의 감초, 9~14중량%의 대추, 31~46중량%의 황금, 8~13중량%의 반하 및 0.8~1.2중량%의 생강의 혼합 추출물인 것이 바람직하지만 이에 한정하는 것은 아니다.
상기 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물은 엘라스타아제 저해 활성이 우수한 것이 특징이며, 특히, 상기 혼합 추출물에 함유된 단독의 한약재 추출물을 단독으로 사용하는 것에 비해 엘라스타아제 저해 활성이 통계적으로 유의미하게 증가하였다는 것이 특징이다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 피부주름의 예방 및 개선용 화장료 조성물은 피부외용 연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형으로 이루어진 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당 유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.
이하, 실시예를 이용하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들에 의해 제한되지 않는다는 것은 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어 자명한 것이다.
실시예 1. 감초, 대추, 반하 , 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물의 제조
감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금 각각의 총중량에 대하여 10배량에 해당되는 물을 첨가하여 3시간씩 2회 환류냉각 추출하고, 여과지를 이용하여 얻어진 여액을 감압농축기로 용매를 제거함으로써 각각의 추출물을 제조하였고, 0.64g의 시호, 0.3g의 인삼, 0.17g의 감초, 0.34g의 대추, 1.13g의 황금, 0.31g의 반하, 0.03g의 생강을 혼합하여 상기 추출방법과 동일한 방법으로 본 발명의 혼합추출물을 제조하였다.
실시예 2. 세포 생존율 분석
세포 생존율 분석은 HaCaT 세포를 이용하였으며, HaCaT 세포는 Dulbecco's Modified Eagle Medium(DMEM, Gibco)에 10% 소태아 혈청(Fetal bovine serum;FBS, Gibco)과 1% 페니실린-스트렙토마이신(penicillin-streptomycin;PS, Gibco)이 함유된 배지에서 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다.
상기 추출한 시호, 인삼, 감초, 대추, 황금, 반하 추출물 및 혼합 추출물을 농도별(10, 50, 100, 200㎍/㎖)로 희석하여, 배양한 HaCaT 세포에 24시간 동안 처리하고, MTS 어세이(CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophynyl)-2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) 기법으로 세포 생존율을 490nm에서 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 측정하였다.
그 결과, 도 1에 개시한 바와 같이 본 발명의 시료를 처리하였을 때의 상대적 세포 생존율(%)이 다소 증가하였거나 유지하였다. 따라서, 본 발명의 혼합추출물은 세포 독성이 거의 없다는 것을 알 수 있었다.
실시예 3. 자외선 조사에 따른 세포 보호 효과 확인
HaCaT 세포에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별로 희석하여 처리하고 자외선(UV Crosslinker, UVP)을 30분간 조사한 후, MTS 어세이(CellTiter Aqueous One Solution Cell proliferation assay kit, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophynyl)-2H-tetrazolium, inner salt; MTS, Promega Co. Madison, WI, USA) 기법으로 세포 생존능을 490nm에서 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) 로 측정하여 시험하였다.
그 결과 도 2에 개시한 바와 같이 UVB 조사에 의해 세포생존률(%)이 약 50% 정도 감소한 것을 확인할 수 있었고, UV 조사 후, 본 발명의 혼합 추출물을 처리한 경우 세포 생존률(%)이 증가하는 것을 확인하여 본 발명의 혼합 추출물이 세포보호 효과가 있다고 판단하였다.
실시예 4. 엘라스타아제 저해 활성 확인
본 발명의 시료 및 상기 시료를 구성하는 각각의 한약재 단독 추출물의 엘라스타아제 저해 활성을 확인하기 위하여, 트리스 완충 용액(0.2M Tris buffer, pH 8.0) 140㎕와 1mg/㎖의 각각의 시료 20㎕ 및 5mM N-Succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide (Sigma S4760) 20㎕씩 기질 용액을 첨가한 후, 10㎍/㎖의 엘라스타아제(Sigma, E7885) 20㎕를 잘 혼합하여 상온에서 15분 동안 반응시킨 후, 410nm에서 생성된 p-nitroanline의 양을 마이크로플레이트 리더기로 측정하였다. 양성대조군으로 아스코르브산을 사용하였다.
그 결과, 도 3에 개시한 바와 같이 본 발명의 혼합 추출물뿐만 아니라, 단독의 한약재 추출물 모두 엘라스타아제 저해 활성이 있는 것으로 나타났다. 특히, 단독의 한약재 추출물에 비해 혼합 추출물의 엘라스타아제 저해 활성이 통계적으로 유의미하게 증가된 것을 확인하였다.
실시예 5. 히알루론산의 발현량 분석
HaCaT 세포에 24시간 동안 각각의 시료를 농도별로 희석하여 처리하고 자외선(UV Crosslinker, UVP)을 30분간 조사한 후, 각 실험군의 상층액을 모아 히알루론산 ELISA kit (R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)를 이용하여 세포에서 발현된 히알루론산의 발현량을 측정하였다. 반응물은 흡광 어세이를 수행하여 히알루론산의 발현량을 450nm에서 마이크로플레이트 리더(Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA) 로 측정한 후 정량하였다.
그 결과, 도 4에 개시한 바와 같이, 자외선 조사에 의해 히알루론산 함량이 감소하였고, 본 발명의 혼합 추출물뿐만 아니라, 단독의 한약재 추출물을 처리한 군은 모두 히알루론산 함량이 증가한 것으로 나타났으나, 단독의 한약재 추출물에 비해 혼합 추출물의 히알루론산 함량의 증가가 통계적으로 유의미하게 증가한 것으로 나타났다.

Claims (5)

  1. 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 감초, 대추, 반하, 생강, 시호, 인삼 및 황금의 혼합 추출물의 추출용매는 물, C1~C4의 저급알코올 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 18~26중량%의 시호, 8~12중량%의 인삼, 5~7중량%의 감초, 9~14중량%의 대추, 31~46중량%의 황금, 8~13중량%의 반하 및 0.8~1.2중량%의 생강의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 엘라스타아제 발현 저해 및 히알루론산 함량을 증진시키는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저 중에서 선택된 어느 하나의 제형으로 제조되는 것을 특징으로 하는 피부 보습 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
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