KR102130243B1 - 글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물 - Google Patents

글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102130243B1
KR102130243B1 KR1020190014775A KR20190014775A KR102130243B1 KR 102130243 B1 KR102130243 B1 KR 102130243B1 KR 1020190014775 A KR1020190014775 A KR 1020190014775A KR 20190014775 A KR20190014775 A KR 20190014775A KR 102130243 B1 KR102130243 B1 KR 102130243B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
skin
extract
cosmetic composition
comparative example
natural
Prior art date
Application number
KR1020190014775A
Other languages
English (en)
Inventor
송윤탁
Original Assignee
주식회사 엠디글로벌
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 엠디글로벌 filed Critical 주식회사 엠디글로벌
Priority to KR1020190014775A priority Critical patent/KR102130243B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102130243B1 publication Critical patent/KR102130243B1/ko

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • A61K8/988Honey; Royal jelly, Propolis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52Stabilizers
    • A61K2800/522Antioxidants; Radical scavengers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

본 발명은 미세침 분말 및 천연 성분을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 조성물에 관한 것이다.

Description

글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물{A COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN WHITENING, ANTI-WRINKLE, ANTI-AGING, AND ANTI-OXIDATION CONTAINING GLUTATHIONE, NATURAL SPICULE POWDER, ACETYL HEXAPEPTIDE AND BROUSSONETIA KAZINOKI EXTRACT}
본 발명은 천연 미세침 분말 및 천연 성분을 유효성분으로 포함하는 친환경 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 신체의 외부를 덮고 있는 하나의 막으로 여러 가지 외부의 자극, 장해, 건조 등의 환경요소로부터 신체를 보호해 주는 다양한 생리적 기능을 수행하여 내부 장기와 그 밖의 체내 기관을 보호 조절하는 역할을 한다.
그러나, 생체 노화로 인해 내적으로는 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하된다.
또한, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선 함량이 증가하게 되고, 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써 야기되는 과도한 물리적, 화학적 자극 및 스트레스는 피부의 정상기능 저하, 멜라닌 침착에 의한 기미, 주근깨 등의 생성 및 피부 노화현상을 촉진하여 피부를 손상시킬 수 있다.
이러한 내적, 외적 요인에 의한 피부노화 및 손상을 방지하여 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위하여 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻어진 생리 활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유 기능을 유지시키고 피부 세포를 활성화시켜 피부 신진대사를 촉진하여 피부 건강을 유지하고자 하는 노력이 계속되고 있으며, 이에 따른 화장품, 피부 외용제 등이 개발되고 있다.
그러나, 이들 물질은 피부 적용시 자극, 홍반, 발적 등의 안전성 문제로 사용량의 제한이 있거나, 효과가 미미하여 실질적으로 피부 기능 개선 효과를 기대기 어려웠다. 따라서, 기존의 피부 외용제 조성물 보다 생체에 안전하고 효과가 높은 새로운 피부 외용제 조성물의 개발이 요구되고 있다.
최근 화장품 업계에서 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 제품이 다수 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다.
따라서, 부작용이 적고, 소비자의 호응도가 높은 천연 재료를 이용한 화장품의 수요가 점차 증가하고 있으며, 생체 안전성 및 피부 개선 효과가 우수한 다기능성(multi-functional) 화장품 개발에 대한 다양한 연구가 활발하게 이루어지고 있다.
본 발명은 전술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로, 본 발명의 목적은 피부에 대한 자극성이 적고, 외부 자극에 의한 피부 손상을 최소화하는 기능성 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 미세침 분말; 및 글루타치온 및 닥나무 추출물;을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.
일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 서열번호 1의 아세틸 헥사펩타이드를 더 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 인삼 추출물 또는 프로폴리스 추출물을 더 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 뽕나무잎 추출물, 병풀 추출물, 및 익모초 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함할 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 주름 개선 및 피부 탄력 개선용일 수 있다.
일 실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 미백 또는 항산화용일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 따른 화장료 조성물은 피부 자극이 적고 각 유효성분의 시너지 효과에 의해 피부 개선 효과가 현저히 우수하다.
본 발명의 효과는 상기한 효과로 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 상세한 설명 또는 청구범위에 기재된 발명의 구성으로부터 추론 가능한 모든 효과를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본 명세서에서 사용되는 용어는 본 발명에서의 기능을 고려하면서 가능한 현재 널리 사용되는 일반적인 용어들을 선택하였으나, 이는 당 분야에 종사하는 기술자의 의도 또는 판례, 새로운 기술의 출현 등에 따라 달라질 수 있다.
또한, 특정한 경우는 출원인이 임의로 선정한 용어도 있으며, 이 경우 해당되는 발명의 설명 부분에서 상세히 그 의미를 기재할 것이다. 따라서 본 발명에서 사용되는 용어는 단순한 용어의 명칭이 아닌, 그 용어가 가지는 의미와 본 발명의 전반에 걸친 내용을 토대로 정의되어야 한다.
다르게 정의되지 않는 한, 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 모든 용어들은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가지고 있다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 것과 같은 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 의미를 가지는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다.
수치 범위는 상기 범위에 정의된 수치를 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최대의 수치 제한은 낮은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 낮은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 최소의 수치 제한은 더 높은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼 모든 더 높은 수치 제한을 포함한다. 본 명세서에 걸쳐 주어진 모든 수치 제한은 더 좁은 수치 제한이 명확히 쓰여져 있는 것처럼, 더 넓은 수치 범위 내의 더 좋은 모든 수치 범위를 포함할 것이다.
이하, 본 발명의 실시예를 상세히 기술하나, 하기 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 아니함은 자명하다.
본 발명의 일 측면에 따르면, 미세침 분말; 및 글루타치온 및 닥나무 추출물;을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물이 제공된다.
상기 화장료 조성물은 천연 추출물과 함께 천연 펩타이드 성분을 유효성분으로 포함하여 생체 안전성 및 피부 개선 활성이 우수할 뿐만 아니라 피부 자극이 적다.
상기 “유효성분으로 포함하는”은 피부 개선 효과를 나타낼 수 있는, 예컨대, 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 미백, 항산화 효과 등을 나타낼 수 있는 정도의 유효량을 함유하는 것을 의미할 수 있다.
상기 “미세침(Spicule)”은 대개 유럽, 러시아 지역의 담수에서 서식하는 해면 동물에서 채취되는 다양한 미세침의 형태를 띈 칼슘과 실리케이트로 이루어진 복합 물질이고, 일반적으로 분말의 형태로 수득할 수 있다.
상기 미세침은 미세한 침상형 구조로서 피부층을 침투하여 미세 통로를 형성하므로 도포된 화장료 성분의 침투 효과가 현저히 증대될 수 있다. 상기 미세침은 인위적 상처 치유에 작용하는 콜라겐의 피부재생을 촉진하고 피부 조직 온도를 상승시켜 생체 활성을 증대시킬 수 있다.
상기 미세침은 인체에 무해한 물질로서 피부에 접촉될 때 피부를 자극하여 미세한 기공을 형성하고 체내에서 용해되거나 배출될 수 있는 분말형 소재라면 특별히 제한되지 않는다.
상기 미세침 분말은 해면 동물에서 수득할 수 있으며, 상기 해면 동물은 스폰질라 라쿠스트리스 엘(Spongilla lacustris L.), 스폰질라 프라길리스 레이디(Spongilla fragilis Leidy) 및 에피다티아 플루비아틸리스(Ephydatia fluviatilis) 종에 속하는 해면일 수 있다.
상기 해면동물은 근육, 신경 또는 장기가 존재하지 않은 원시적인 해양 생물로 5000 여종 이상이 존재한다. 골편은 무척추 동물의 체내에 존재하는 바늘 모양을 가지는 골격의 기능을 하는 조직으로 주로 규산 및 탄산 칼슘을 주성분으로 한다. 상기 해면동물은 탄산칼슘 또는 규산을 주성분으로 하는 1축, 3축, 4축 또는 다축 골편을 포함할 수 있다.
상기 해면동물은 주황색이나 청록색 등 다양한 색의 스펀지(sponge) 형태로 주로 바다에 서식하나, 민물 해면동물도 존재한다.
상기 해면동물은 세포들이 응집된 상태로 조직의 시초 단계에 있는 생물이며 몸체는 스펀지 섬유소(sponge fibers), 체벽을 형성하는 골편(spicules) 및 골편에 결합된 세포군으로 이루어진다. 상기 골편의 주성분은 석회질, 규산 또는 실리카 등이고 크기는 100 ㎛ 내외이므로 현미경에 의해 관찰될 수 있다.
상기 골편은 피부 재생의 효과적 수단으로서, 다양한 병인의 과색소침착, 미세 주름, 일광에 의한 손상 및 표재성 흉터, 면포, 확대된 모공과 같은 시각적 안면 결함을 교정하기 위한 용도로 사용될 수 있다. 또한, 피부 상태를 개선하는 물리적 시술인 미세 피부 연마술 및 피부 연마술, 화학 박피술, CO2 레이저 박피술 및 어븀 레이저 박피술에 대한 천연의 대안적 접근법으로 활용되고 있다.
상기 골편은 피부층에 접촉되어 마찰될 때, 물리적으로 분리하여 각질세포 응집을 감소시키고, 각질층, 피지 플러그, 및 각질세포를 탈리시켜 미세 통로를 형성하므로 화장료 성분의 침투 효과를 극대화시킬 수 있다.
상기 “글루타치온(glutathione)”은 하기 화학식 1의 구조를 가지는 화합물로서 Cas 번호가 70-18-8이고, 분자량이 307.32일 수 있다.
Figure 112019013328685-pat00001
상기 글루타치온은 생체 내에 존재하는 항산화제로서 아스코르빈산(비타민 C), 토코페롤(비타민 E) 등과 같은 생체 내 항산화제와 가역적으로 반응하여 생체 내 라디칼을 효과적으로 제거할 수 있다.
상기 글루타치온은 상기 라디칼 제거와 관련된 생체 시스템에서 최종 라디칼 수용체로서 매우 중요한 역할을 수행할 수 있다.
상기 “닥나무(Broussonetia kazinoki)”는 쐐기풀목 뽕나무과에 속하는 식물로서, 참닥나무, 산닥나무 또는 삼지닥나무를 포함한다. 상기 닥나무는 잎, 꽃, 줄기, 가지, 뿌리, 열매 및 씨앗 중 하나 이상을 포함할 수 있으나, 바람직하게는 닥나무의 뿌리 껍질일 수 있다.
상기 닥나무는 유효 성분인 카지놀(kazinol) F를 통해 티로시나제를 저해하여 피부 미백 효과를 구현할 수 있다.
상기 닥나무 추출물에 포함된 카지놀 C는 티로시나제를 저해하는 효과가 뛰어나며, 이는 코지산보다 티로시나제 저해 효과가 우수한 것으로 알려져 있다.
상기 “추출물”은 용매와 추출 원료를 특정 조건 하에서 접촉시킴으로써 추출 원료에 함유된 유효성분으로 천연물로부터 원료에 함유된 성분을 분리해낸 물질이라면, 추출 방법이나 성분의 종류와 무관하게 모두 포함할 수 있다.
예컨대, 물이나 유기용매를 이용하여 천연물로부터 용매에 용해되는 성분을 추출한 것, 천연물의 특정 성분, 예컨대 오일과 같은 특정 성분만을 추출하여 얻어진 것 등을 모두 포함할 수 있다. 상기 추출물은 상기 천연 원료를 건조 후 분말화하거나, 열수추출법, 에탄올 추출법 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득할 수 있다.
상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4개의 무수 또는 함수 저급 알코올, 아세톤, 석유에테르, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 트리클로로메탄, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 1,3-부틸렌글리콜로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 용매로 추출될 수 있고, 구체적으로 60 내지 80%(v/v)의 에탄올에 의해 추출될 수 있다.
상기 원료에 포함된 유효성분은 용매의 극성에 따라 추출 비율이 상이해질 수 있으며, 상기 에탄올은 천연 원료의 생리 활성 물질 추출에 있어서 선택성이 뛰어나므로 상기 에탄올 추출에 의해 최적의 피부 개선 효과가 구현될 수 있다.
상기 물과 에탄올은 극성이 상이하고 각 극성에 따라 추출되는 유효성분이 달라질 수 있으므로 최적의 피부 개선 효과가 구현될 수 있도록 상기 에탄올의 농도를 적절히 제어할 수 있다. 이 때, 상기 에탄올의 농도가 60% 미만이면 피부 개선 효과를 나타내는 유효성분이 충분하게 추출되지 않을 수 있고, 80% 초과이면 적정한 수율이 구현되지 않을 수 있다.
상기 추출물은 추출 원료를 물로 수세한 후 건조 및 분쇄하여, 원료 중량의 10 내지 20배에 달하는 부피의 용매로 24 내지 240시간 동안 환류 순환 추출, 가압 추출, 초음파 추출 등 통상적인 방법으로 추출 및 여과하여 제조할 수 있다. 또한, 상기 추출물은 감압 증류 또는 동결 건조 등과 같은 추가적인 공정에 의해 분말 상태로 수득할 수 있다.
상기 추출물은 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함할 수 있다. 예컨대, 상기 추출물은 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획물을 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 아세틸 헥사펩타이드를 더 포함할 수 있다.
상기 “아세틸 헥사펩타이드(Acetyl Hexapeptide)”의 Ac-Glu-Glu-Met-Gln-Arg-Arg-NH2(서열번호 1)로 표시되는 아미노산 서열로 구성될 수 있고, 다양한 방법을 통하여 수득할 수 있으며, 바람직하게는 고상 펩타이드 합성법(Solid Phase Peptide Synthesis)으로 수득할 수 있다.
상기 “아세틸 헥사펩타이드”는 아세틸 헥사펩타이드-8(acetyl hexapeptide-8)" 또는 "아세틸 헥사펩타이드-3(acetyl hexapeptide-3)"과 호환적으로 사용될 수 있고, SNAP-25의 단편인 펩타이드를 의미할 수 있다.
상기 아세틸 헥사펩타이드의 일반명은 아지렐린(argirenline)이며, 주름 개선을 위한 화장료 조성물로서 사용될 수 있다. 예컨대, 상기 아세틸 헥사펩타이드는 얼굴 근육의 움직임 혹은 수축 등의 반응을 억제함으로써 주름의 생성을 방지할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 인삼 추출물 또는 프로폴리스 추출물을 더 포함할 수 있다.
상기 “인삼(Panax ginseng)”은 깊은 산악지대에서 자라는 식물로 높이는 60㎝ 에 달하고, 근경은 짧으며 곧거나 비스듬히 서고, 밑에서 도라지 같은 뿌리가 발달한다. 주로 우리나라, 중국에서 널리 재배되며 인삼은 원기를 보하고 신체허약, 권태, 피로, 식욕부진, 구토, 설사에 쓰이며, 폐기능을 도우며 진액을 생성하고 안식작용 및 신기능을 높여 주는 것으로 알려져 있다.
상기 “프로폴리스(propolis)”는 꿀벌이 자신의 생존과 번식을 위해 여러 식물에서 뽑아낸 수지와 같은 물질에 자신의 침과 효소 등을 섞어서 만든 물질로서, 유기물 및 미네랄을 다량 함유하며, 미네랄, 비타민, 아미노산, 지방, 유기산, 플라보노이드 등은 세포대사에 중요한 역할을 한다.
상기 프로폴리스는 항암성, 화상 치유능, 습진, 아토피성 피부염 및 무좀 등과 같은 진균류에 의한 피부병 치유 효과, 탈모 억제 효과, 미용 효과, 세균성 치과적 질환에 대한 치유 효과가 보고되었으며, 그 외에도, 호르몬 자극 활동, 비타민 p의 작용에 의한 괴혈병 치료, 고혈압 환자의 혈압강하작용, 생체 호르몬의 균형 유지 등 다양한 효과가 규명된 바 있다.
상기 화장료 조성물은 뽕나무잎 추출물, 병풀 추출물, 및 익모초 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함할 수도 있다.
상기 “뽕나무(Mulberry, Morus spp.)”는 한방에서는 그 약리작용을 이용하여 유행성 이하선염, 폐결핵, 만성요퇴통, 타박상, 급성관절염, 악창, 강장, 중풍, 이뇨, 진해 등의 치료약으로 사용되고 있고, 상근백피는 발모촉진제, 오디를 이용한 천연 염색제와 항당뇨제 및 누에를 이용한 대체 의약품 개발(천연강장제 등)등의 소재로서 활용되고 있다.
동의보감(東醫寶鑑)에 따르면 인체 내부 및 혈관 속 노폐물을 배출하는 역할을 하므로 중풍, 비만, 관절염, 부종, 해수 및 천식 등의 질병을 치료, 예방하고, 혈당과 혈압의 강하작용, 소화기능을 촉진시키는 것으로 알려져 있다.
뽕나무는 외형편(外形篇), 내경편(內景篇) 및 잡병편(雜病篇)에 습(염증)을 없애고, 여위게 하니 살찐 사람이 먹으면 좋고, 각기와 소변에 효과가 뛰어나며, 편풍과 일체의 풍을 예방하고, 음식을 소화시키며, 기를 내려 입이 마르는 것을 예방하니 차를 만들어 먹으면 좋고, 자양강장제로서 여러 줄기 질환을 예방하는데 유익한 식물로 기록되어 있다.
상기 “병풀(Centella Asiatica)”은 우리나라 남부 섬의 산이나 들에 흔히 나는 다년초로 원줄기는 옆으로 뻗고, 뿌리가 내리는 마디 근처에 2개의 퇴화된 비늘 모양의 잎이 있다.
상기 병풀의 주요성분은 베타-카로텐, 베타-시토스테롤, 캄페스테롤, 캠페롤, 사포닌등이 있으며 약리작용으로는 이뇨작용, 강장, 신경안정, 마취, 면역자극, 구토억제, 콜레스테롤억제, 한센병균억제, 해열 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
상기 “익모초”는 꿀풀과의 익모초(Leonurus japonicus)의 지상부를 건조시킨 약재를 의미한다. 상기 익모초의 성분으로는 전초에 알칼로이드(레오누린, 레오누리딘, 스타히드린)가 있고, 피토스테린, 정유, 사포닌, 기름, 수지, 루틴, 유기산, 쿠마린 등이 있다. 상기 익모초의 약리작용으로 중추신경 계통의 진정 작용이 알려져 있으며, 상기 레오누린은 혈압강하, 강심, 이뇨 작용을 한다.
상기 화장료 조성물은 주름 개선 및 피부 탄력 개선용일 수 있다.
상기 "피부 탄력 개선"은 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유가 콜라겐과 함께 존재하며, 상기 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력이 유지 또는 향상되는 현상을 의미한다.
또한, 피부 탄력 개선 효과와 동시에 피부 주름 개선 효과가 동반될 수 있다. 상기 "주름 개선"은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름이 완화되는 현상을 의미한다.
상기 화장료 조성물은 피부 미백, 또는 항산화용일 수 있다.
상기 "피부 미백"은 피부색에 영향을 미치는 멜라닌, 산화-환원 헤모글로빈, 카로틴, 멜라노이드 등 다양한 생체 분자의 생성을 억제함으로써 잡티, 주근깨, 기미 등의 피부 색소 침착 현상을 완화시키고, 피부 누런기, 붉은기를 완화시켜 피부 밝기 및 균일도를 향상시키는 효과를 의미한다.
상기 “항산화”는 산화를 억제하는 작용을 의미하는 것으로, 인체는 산화촉 진물질과 산화억제물질이 균형을 이루고 있으나, 여러 가지 요인들로 인하여 이러한 균형 상태를 잃고 산화를 촉진하는 방향으로 기울게 되면, 생체 내에 산화적 스트레스(oxidative stress)가 유발되어 세포손상 및 병리적 질환을 유발할 수 있다.
상기 산화적 스트레스의 직접적 원인이 되는 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)은 화학적으로 불안정하고 반응성이 높아 DNA, 단백질, 지질 및 탄수화물과 같은 여러 생체물질과 쉽게 반응할 수 있으며, 생체 내 고분자들을 공격하여 세포와 조직에 비가역적인 손상을 일으키거나 돌연변이, 세포독성 및 암 등을 초래하게 되고, 노화의 직접적인 원인이 되기도 한다. 상기 활성 산소종을 제거하거나 감소시킴으로써 항산화 효과를 얻어 노화를 방지하고 건강을 유지할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유연화장수, 영양화장수, 수분크림, 영양크림, 마사지크림, 영양로션, 에센스, 앰플, 젤, 아이크림, 오일, 파운데이션, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 샴푸, 린스, 팩, 스프레이 및 파우더로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상으로 제형화될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 통상의 방법에 의해 제형화될 수 있다. 피부 외용제의 제형화에 있어서 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있고, 화장료 조성물의 제형화에 있어서 International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed(The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995)에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있다.
구체적으로, 상기 화장료 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형으로 제조할 수 있다. 예컨대, 유연 화장수 또는 영양 화장수 등의 화장수; 훼이셜 로션, 바디로션 등의 유액; 영양 크림, 수분 크림, 아이 크림 등의 크림; 에센스; 화장연고; 스프레이; 젤; 팩; 선 스크린; 메이크업 베이스; 액체 타입, 고체 타입 또는 스프레이 타입 등의 파운데이션; 파우더; 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 오일 등의 메이크업 제거제; 또는 클렌징 폼, 비누, 바디워시 등의 세정제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 상기 피부 외용제는, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제로 제형화될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물은 각각의 제형에 있어서 상기 필수성분 외에 제형의 종류 또는 사용 목적 등에 따라 본 발명에 따른 목적을 저해하지 않는 범위 내에서 다른 성분들이 적절히 배합될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 통상적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있으며, 예컨대 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 허용 가능한 담체는 제형에 따라 달리할 수 있다. 예컨대, 연고, 페이스트, 크림 또는 젤로 제형화될 때 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있다
상기 화장료 조성물은 파우더 또는 스프레이로 제형화될 때, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있고, 스프레이의 경우 클로로플루오로히드로카본, 프로판, 부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 더 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 용액 또는 유탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 용매, 용해화제, 또는 유탁화제가 사용될 수 있고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 현탁액으로 제형화될 때, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리 옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 사용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 최종 제품의 품질이나 기능에 따라 업계에서 통상적으로 사용되는 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉 쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 추가적으로 함유할 수 있다.
다만, 상기 보조제 및 그 혼합 비율은 본 발명에 따른 화장료 조성물의 바람직한 성질에 영향을 미치지 않도록 적절히 선택할 수 있다.
이하 실시예를 통해, 본 발명을 더욱 상술하나 하기 실시예에 의해 본 발명이 제한되지 아니함은 자명하다.
제조예 1 : 미세침 분말 제조
건조된 해면(Spongilla lacustris)에서 수득한 천연 스폰지 200g에 0.5N-수산화나트륨 용액을 800mL를 투입하여 초음파 공정으로 혼합 및 분쇄하였다.
교반 후 원심 분리를 통해 불순물을 제거하고, 정제수로 700mL를 투입하여 가용성 불순물 및 수산화나트륨 용액을 제거하였다.
2%-L-아스코르빈산 용액 800mL로 미량의 수산화나트륨을 화학 반응으로 제거하고 과투입된 L-아스코르빈산 용액을 제거한 후 건조시켜 정제수가 제거된 미세침 분말을 수득하였다.
제조예 2 : 천연 성분 제조
닥나무 뿌리 및 껍질, 연교, 인삼, 뽕나무잎, 병풀, 및 익모초를 수세한 후 상온에서 완전히 건조시키고 분쇄하여 분쇄물을 각각 100g씩 수득하였다.
각 분쇄물 및 원료에 대해 각각 10배 부피의 에탄올 수용액(70% w/w)를 용매로 하여 50℃의 온도에서 12시간 동안 침적 추출하였다.
상기 추출물을 250메쉬 및 0.5㎛ 필터로 여과한 후 잔여 원료에 대해 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였으며, 30℃에서 감압 농축하고, 동결 건조하여 천연 추출물의 고형분을 수득하였다.
프로폴리스 추출물은 초음파 추출 방식으로 제조하였다. 프로폴리스 원괴를 밀링 머신으로 분쇄한 후, 80% 알코올 수용액에 현탁시켜 현탁액을 제조하였다.
pH를 조정한 후 20℃를 유지하며, 70 kHz 초음파를 가하여 초음파 추출을 수행하였으며, 상기 추출물은 여과 공정을 거친 후 감압 농축 및 동결 건조하여 고형으로 수득하였다.
글루타치온 및 아세틸헥사펩타이드-8은 시중에서 구득하여 사용하였다.
실시예 및 비교예
수득한 추출물의 피부 개선 효과를 검증하고자 하기 표 1 및 2와 같이 시료를 혼합하여 실시예 및 비교예를 설정하였다.
[함량(중량부)]
구분 실시예
1 2 3 4 5 6 7 8 9
미세침 분말 100 100 100 100 100 100 100 100 100
글루타치온 150 100 75 75 60 50 50 50 37.5
닥나무 추출물 150 100 75 75 60 50 50 50 37.5
아세틸헥사펩타이드 - 100 75 75 60 50 50 50 37.5
인삼추출물 - - 75 - 60 50 50 50 37.5
프로폴리스
추출물
- - - 75 60 50 50 50 37.5
뽕나무잎
추출물
- - - - - 50 - - 37.5
병풀 추출물 - - - - - - 50 - 37.5
익모초추출물 - - - - - - - 50 37.5
[함량(중량부)]
구분 비교예
1 2 3 4 5 6 7 8 9
미세침 분말 400 - - - 200 - 150 - -
글루타치온 - 400 - - - 200 150 150 -
닥나무추출물 400 - 200 200 - 150 -
아세틸헥사펩타이드 - - - 400 - - 100 100 -
인삼추출물 - - - - - - - - 80
프로폴리스
추출물
- - - - - - - - 80
뽕나무잎
추출물
- - - - - - - - 80
병풀 추출물 - - - - - - - - 80
익모초추출물 - - - - - -- - - 80
실험예 1 : 피부 안전성 시험
실시예 및 비교예의 피부 안전성을 검증하기 위해, 섬유아세포(HDF), 멜라닌형성세포(B16F10), 각질세포(HaCaT)에 대한 MTT assay 실험을 수행하였다.
실시예 및 비교예의 시료를 정제수에 0, 1, 5, 10, 20, 50 및 100mg/L의 농도별로 각각 현탁한 후, 세포 생존율을 측정하였다.
세포 독성은 MTT{3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2-5-diphenyltetrazolium bromide} 시약을 이용하여 세포 생존율을 측정하는 모스만(Mosmann)의 방법을 변형하여 수행하였다.
섬유아세포(HDF), 멜라닌형성세포(B16F10), 및 각질세포(HaCaT)를 각각 96-웰 플레이트에 1 × 104cells/well의 농도로 분주하여 37℃, 5% CO2에서 48시간 동안 배양하였다.
배양 배지를 제거하고 시료를 농도별로 처리한 배지에 48시간 동안 배양한 후 배지를 제거하고 PBS(Phosphate buffered saline)로 반복 세척하였다.
MTT를 5mg/mL로 PBS에 녹여 50L 첨가하고 37℃, 5%의 CO2에서 48시간 동안 배양하였다. DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 한 웰(well) 당 100L 넣고, 10분 동안 교반한 후 540nm에서 흡광도를 측정하였다.
측정 결과, 각 시료의 모든 농도에서 세포 독성은 확인되지 않았다. 상기 결과는 상기 시료가 인체에 무해할 뿐만 아니라 인체 안전성이 우수함을 시사한다.
실험예 2 : 엘라스타제 억제 효과 평가
엘라스타제(elastease)의 저해 활성을 통해 실시예 및 비교예의 시료의 주름 개선 효과를 평가하였다. 실시예 및 비교예의 시료를 정제수에 현탁하여 엘라스타제 저해 활성을 하기과 같이 측정하였다.
1.6mM 엘라스타제 기질(N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide; SANA) 및 0.2mM Tris-HCl 버퍼(pH 8.0)를 준비하였다. 96 well-plate에 상기 Tris-HCl 버퍼 0.165 mL, SANA 0.005 mL 및 엘라스타제 0.01 mL씩 분주하였다.
양성 대조군과 함께 실시예 및 비교예의 시료를 넣고 25℃에서 15분간 반응시킨 후 405nm에서 흡광도를 측정하였다.
시료를 첨가하지 않은 흡광도 대비 시료를 첨가한 흡광도의 차의 비율로 엘라스타제 저해 활성의 퍼센트(%)를 계산하였다.
양성 대조군으로 oleanolic acid를 사용하였고, 실시예 및 비교예의 시료의 엘라스타제를 50% 억제하는 농도(IC50)를 측정하여 표 3에 나타내었다.
[엘라스타제 50% 억제 농도]
구분 IC 50 (μg/mL)
실시예 1 181.0
실시예 2 172.0
실시예 3 167.9
실시예 4 168.3
실시예 5 163.9
실시예 6 156.2
실시예 7 152.9
실시예 8 151.0
실시예 9 142.1
비교예 1 354.4
비교예 2 322.4
비교예 3 276.8
비교예 4 328.3
비교예 5 275.6
비교예 6 286.3
비교예 7 269.4
비교예 8 273.0
비교예 9 284.2
양성 대조군 91.8
IC50의 값이 낮을수록 엘라스타제 활성 억제율이 높은 것을 의미한다.
엘라스타제(Elastase)는 진피 내 피부 탄력을 유지시키는 데 중요한 기질인 엘라스틴을 분해하는 효소이다. 또한 엘라스타제는 다른 중요한 기질단백질인 콜라겐(collagen)을 분해할 수 있는 비특이적 가수분해 효소이다.
따라서 높은 엘라스타제 활성 억제율은 피부 탄력을 유지하는데 중요한 엘라스틴과 콜라겐이 오래 유지됨을 의미하며, 이는 피부 주름 개선 효과가 우수하다는 것을 시사한다.
표 3을 참조하면, 실시예의 시료는 비교예에 비해 엘라스타제 활성을 더욱 효과적으로 억제하였다.
실험예 3 : 주름 개선 효과 평가
하기 실험을 통해 피부 주름 개선 효과를 평가하였다.
30세 이상의 성인 여성을 대상으로 18개의 그룹으로 나누고, 피시험자는 4주 동안 매일 아침, 저녁 세안 후 크림 타입으로 제형화한 화장료를 안면에 고르게 도포하여 충분히 흡수시켰다.
주름개선 평가를 위하여 ANTERA 3D(Miravex, Ireland)를 적용하였으며, 기기측정은 시험물질 사용 전과 3주 사용 후 시점에서 이루어졌다.
동일한 시험담당자가 모든 피시험자의 왼쪽 눈꼬리부위를 측정하였고, 측정의 재현성을 위하여 시험 물질 사용 전에 측정한 이미지와 오버랩시켜 동일부위를 측정하였다.
촬영된 이미지는 ANTERA 3D 전용 소프트웨어인 ANTERA pro software를 이용하여 매칭시킨 후 일치된 측정부위를 분석에 사용하였다.
측정값은 측정변수인 Indentation index를 이용하여 피부 주름을 나타내는 Wrinkles small 값을 분석하였다.
표 4에서 실시예 및 비교예의 시료를 제형화한 화장료 사용에 따른 피시험자의 4주 후 Wrinkles small값의 변화량을 나타내었다. 주름 개선 효과가 우수할수록 Wrinkles small 값 변화량은 크다.
구분 Wrinkles small 평균값
실시예 1 1.36
실시예 2 1.40
실시예 3 1.43
실시예 4 1.42
실시예 5 1.46
실시예 6 1.52
실시예 7 1.51
실시예 8 1.53
실시예 9 1.63
비교예 1 0.44
비교예 2 0.62
비교예 3 0.79
비교예 4 0.77
비교예 5 0.69
비교예 6 0.72
비교예 7 0.77
비교예 8 0.73
비교예 9 0.71
표 4를 참조하면, 실시예의 시료를 제형화한 화장료는 비교예 대비 피부 주름 개선 효과가 현저히 우수하였다.
실험예 4 : 피부 탄력 개선 효과 평가
실시예 및 비교예의 시료를 제형화한 화장료 조성물의 피부 탄력 개선 효과를 평가하였다.
상기 각 시료를 동일한 조성의 크림으로 제형화하였으며 실시예 및 비교예 시료만을 달리하였다.
온도 24 내지 26℃, 습도 75%의 조건에서 20세 이상의 건강한 여성(평균연령 37세)을 그룹별로 나누고 제형화한 실시예 및 비교예의 크림을 각각 도포하였다.
눈가를 중심으로 하루 2회씩(아침 및 저녁) 12주간 제형화한 크림을 도포하였고, 피부 탄력 측정기(Cutometer MPA580, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 이용하여 피부 탄력을 측정하였다.
시험결과는 cutometer MPA580의 R8(R8(12주)-R8(0주)) 값으로 기재하였고, R8 값은 피부 점탄성(Vicoelasticity)의 성질을 나타내며, 결과는 하기 표 5와 같다
구분 피부 탄력 개선 효과
실시예 1 0.73
실시예 2 0.76
실시예 3 0.78
실시예 4 0.79
실시예 5 0.82
실시예 6 0.84
실시예 7 0.84
실시예 8 0.86
실시예 9 0.91
비교예 1 0.32
비교예 2 0.48
비교예 3 0.47
비교예 4 0.46
비교예 5 0.49
비교예 6 0.53
비교예 7 0.51
비교예 8 0.58
비교예 9 0.45
양성 대조군(비타민 C) 0.86
음성 대조군(무처리) 0.31
표 5를 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 피부 탄력 개선 효과가 현저히 우수하였다.
특히, 미세침 분말, 글루타치온, 닥나무 추출물을 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 5 내지 7에 비해 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.
실험예 5 : DPPH 측정법을 통한 자유라디칼 소거 활성 평가
실시예 및 비교예의 추출물을 정제수에 현탁하여 자유라디칼 소거 활성(free radical scavenging acticity)을 평가하였다.
DPPH 측정법은 억제제(inhibitor)가 안정한 라디칼 DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl radical)를 소거하여 탈색되는 정도를 540nm에서 흡광도를 측정하는 방법이다.
대조군으로 비타민 C를 이용하였고, 실험의 정확도를 위하여 동일한 실험을 3회 반복하였으며, 결과는 하기 표 6과 같다.
[라디칼 DPPH의 50% 소거하는 농도]
구분 SC 50 (μg/mL)
실시예 1 139.2
실시예 2 127.8
실시예 3 125.0
실시예 4 124.5
실시예 5 123.8
실시예 6 121.2
실시예 7 122.4
실시예 8 120.3
실시예 9 118.8
비교예 1 214.3
비교예 2 187.4
비교예 3 176.1
비교예 4 175.0
비교예 5 172.2
비교예 6 165.5
비교예 7 168.5
비교예 8 163.5
비교예 9 165.4
대조군(비타민 C) 121.5
SC50의 값이 낮을수록 DPPH 자유라디칼의 소거 활성이 높은 것을 의미한다.표 5를 참조하면, 실시예의 시료는 비교예 대비 피부 탄력 개선 효과가 현저히 우수하였다.
특히, 미세침 분말, 글루타치온, 닥나무 추출물을 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 5 내지 7에 비해 자유라디칼 소거 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.
실험예 6 : 항염 활성 평가
Lipopolysaccharide(LPS)로 자극을 유도한 쥐 대식세포주 RAW 264.7 cell에서 EAME의 NO 생성 억제능을 분석하여 실시예 및 비교예의 항염 활성을 평가하였다.
실험을 위해 Murine macrophage cell line 인 Raw 264.7 세포를 한국 세포주 은행으로부터 분양받았다.
100units/mL penicillin-streptomycin 및 10% fetal bovine serum(FBS)이 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5%, CO2 incubator에서 배양하였으며, 2 내지 3일에 1회씩 계대 배양을 실시하였다.
Raw 264.7 세포(3 x 105 cells/mL)를 18시간 전 배양하고, 실시예 및 비교예의 시료(농도 10%)와 LPS(1 μg/mL)를 동시 처리하여 24시간동안 배양하였고, 생성된 NO는 Griess reagent을 이용하여 세포 배양액 중 존재하는 NO2 -의 형태로 측정하였다.
음성 대조군은 LPS를 처리하지 않았으며, 양성 대조군은 LPS만을 처리하여 생성된 NO량을 측정하였다.
세포 배양 상층액 100μL 및 Griess 시약(1%(w/v) sulfanilamide, 0.1%(w/v) naphtylehtylenediamine in 2.5%(v/v) phosphoric acid)을 동량 혼합하여 10분간 실온 암실에서 반응시킨 후 ELISA reader를 이용하여 흡광도(540nm)를 측정하였다.
표준농도 곡선은 sodium nitrite(NaNO2)를 serial dilution하여 산출하였다(10-100μM). 측정 결과는 하기 표 7과 같다.
구분 NO 생성율(%)
실시예 1 57.4
실시예 2 56.1
실시예 3 55.3
실시예 4 54.9
실시예 5 53.8
실시예 6 51.5
실시예 7 52.6
실시예 8 50.2
실시예 9 47.5
비교예 1 87.1
비교예 2 80.9
비교예 3 77.5
비교예 4 73.5
비교예 5 72.3
비교예 6 71.8
비교예 7 70.5
비교예 8 72.9
비교예 9 73.7
대조군 30.1
음성 대조군(무처리) 100.0
표 7을 참조하면, 실시예 1 내지 9의 시료는 비교예 1 내지 9 대비 NO(Nitric oxide) 생성 억제 활성이 우수하였다.
특히, 미세침 분말, 글루타치온, 닥나무 추출물을 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 5 내지 7에 비해 항염 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.
실험예 7 : 멜라닌 생성 억제 활성 평가
실시예 및 비교예의 멜라닌 생성 억제 효과를 평가하고자 멜라노사이트 B16F10을 배양하였다.
B16F10을 8 x 104 cells가 되도록 6-well plate의 각 well에 분주한 후, 5% CO2, 37℃ 조건의 세포 배양기에서 18시간동안 배양하였다.
18시간 후 B16F10 세포의 배지를 제거하고 실시예 및 비교예의 시료를 동일 농도로 처리하여 5% CO2, 37℃ 조건의 세포 배양기에서 2일 동안 배양하였다.
2일 후, scraper를 이용하여 플레이트로부터 세포를 회수하고 1분간 원심 분리하여 펠렛 형태의 세포를 수득하였다.
수득된 세포에 1N NaOH를 넣고 95℃에서 10분 동안 반응시켜 멜라닌을 용해시켰다.
10분 후, microplate reader를 이용하여 475nm 파장으로 멜라닌 생성량을 측정하였고, BCA assay를 이용하여 595nm 파장으로 단백질 양을 측정하였다.
각 실험군은 “melanin 절대량 / protein 절대량”으로 수치화하여 나타내고, 실험군과 대조군을 상대 정량하였다.
Melanogenesis inducer로는 α-MSH를 사용하였고, 양성 대조군으로 알부틴을 사용하였다.
구분 멜라닌 상대값 (%)
실시예 1 57.4
실시예 2 56.1
실시예 3 54.7
실시예 4 55.1
실시예 5 54.3
실시예 6 53.2
실시예 7 51.6
실시예 8 52.9
실시예 9 49.5
비교예 1 87.1
비교예 2 78.9
비교예 3 74.5
비교예 4 73.5
비교예 5 72.3
비교예 6 71.8
비교예 7 73.5
비교예 8 72.9
비교예 9 72.7
양성대조군 52.0
대조군 100.0
표 8을 참조하면, 실시예 1 내지 9의 시료는 비교예 1 내지 9 대비 멜라닌 생성 억제 활성이 우수하였다.
특히, 미세침 분말, 글루타치온, 닥나무 추출물을 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 5 내지 7에 비해 멜라닌 생성 저해 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 본원 각 구성의 조합에 따른 시너지 효과를 시사한다.
실험예 8 : 타이로시네이즈(tyrosinase) 억제 활성 평가
상기 실시예, 및 비교예의 Tyrosinase 저해 활성을 평가하였다.
상기 동일 농도로 처리하여 저해 활성을 측정하였으며, L-DOPA를 기질로 하였다.
68mM sodium phosphate buffer(pH 6.8)에 mushroom tyrosinase를 녹여 125U/ml가 되도록 하고, -20℃에서 저장하여 실험에 사용하였다.
96-well plate에 희석된 시료 40μM 및 8mM L-DOPA 120μL를 투입하였다.
mushroom tyrosinase 40μL를 첨가하여 20분간 반응시킨 후, ELISA reader로 490nm에서 흡광도를 측정하였다.
대조군으로 kojic acid를 사용하였다. Tyrosinase 저해 활성은 시료 무첨가군 대비 시료 첨가군의 흡광도 비율을 측정하였다.
구분 Tyrosinase activity 상대값 (%)
실시예 1 53.5
실시예 2 52.3
실시예 3 51.3
실시예 4 51.9
실시예 5 50.9
실시예 6 49.7
실시예 7 47.8
실시예 8 48.3
실시예 9 46.4
비교예 1 86.7
비교예 2 79.2
비교예 3 72.2
비교예 4 73.0
비교예 5 71.6
비교예 6 69.1
비교예 7 73.5
비교예 8 72.3
비교예 9 70.1
양성대조군 46.4
대조군 100.0
표 9을 참조하면, 실시예 1 내지 9의 시료는 비교예 1 내지 9 대비 타이로시네이즈 저해 활성이 우수하였다.
특히, 미세침 분말, 글루타치온, 닥나무 추출물을 동시에 포함하는 실시예 1은 일부가 결여된 비교예 5 내지 7에 비해 타이로시네이즈 저해 활성이 현저히 우수하였으며, 상기 결과는 본원 발명의 우수한 미백 활성을 시사한다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 예를 들어, 단일형으로 설명되어 있는 각 구성 요소는 분산되어 실시될 수도 있으며, 마찬가지로 분산된 것으로 설명되어 있는 구성 요소들도 결합된 형태로 실시될 수 있다.
본 발명의 범위는 후술하는 청구범위에 의하여 나타내어지며, 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
SEQUENCE LISTING <110> MD GLOBAL <120> A COSMETIC COMPOSITION FOR SKIN WHITENING, ANTI-WRINKLE, ANTI-AGING, AND ANTI-OXIDATION CONTAINING GLUTATHIONE, NATURAL SPICULE POWDER, ACETYL HEXAPEPTIDE AND BROUSSONETIA KAZINOKI EXTRACT <130> 2019-00001 <160> 1 <170> PatentIn version 3.2 <210> 1 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> SEQ ID NO:1 <400> 1 Glu Glu Met Gln Arg Arg 1 5

Claims (6)

  1. 미세침 분말; 및
    글루타치온 및 닥나무 추출물;을 유효성분으로 포함하는 피부 미백 및 항산화용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    서열번호 1의 아세틸 헥사펩타이드를 더 포함하는 화장료 조성물.
  3. 제2항에 있어서,
    인삼 추출물 또는 프로폴리스 추출물을 더 포함하는 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    뽕나무잎 추출물, 병풀 추출물, 및 익모초 추출물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 더 포함하는 화장료 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    주름 개선 및 피부 탄력 개선용인 화장료 조성물.
  6. 삭제
KR1020190014775A 2019-02-08 2019-02-08 글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물 KR102130243B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190014775A KR102130243B1 (ko) 2019-02-08 2019-02-08 글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020190014775A KR102130243B1 (ko) 2019-02-08 2019-02-08 글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102130243B1 true KR102130243B1 (ko) 2020-07-03

Family

ID=71571858

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020190014775A KR102130243B1 (ko) 2019-02-08 2019-02-08 글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102130243B1 (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220020564A (ko) * 2020-08-12 2022-02-21 김혜용 효과적인 피부재생 및 안티에이징을 위한 미세침, 저분자 펩티드, 천연 추출물을 함유하는 기능성 마이크로 앤 리커버리 화장료 조성물
KR102463745B1 (ko) * 2022-07-20 2022-11-07 (주)바이오시엠 미백 및 항산화기능을 가지는 화장품 조성물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090123458A (ko) * 2008-05-28 2009-12-02 주식회사 엘씨에스바이오텍 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물,식료품 조성물 및 약학 조성물
KR101239393B1 (ko) * 2011-12-16 2013-03-05 바이허브 주식회사 자연추출물을 함유한 즉각적인 주름개선용 화장품 조성물
KR20130060683A (ko) * 2011-11-30 2013-06-10 (주)아모레퍼시픽 진세노사이드 f1과 닥나무 추출물 또는 백화사설초 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR20170112750A (ko) * 2016-04-01 2017-10-12 주식회사 아미코스메틱 프로폴리스 미세침 분말을 함유하는 화장료 조성물

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090123458A (ko) * 2008-05-28 2009-12-02 주식회사 엘씨에스바이오텍 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물,식료품 조성물 및 약학 조성물
KR20130060683A (ko) * 2011-11-30 2013-06-10 (주)아모레퍼시픽 진세노사이드 f1과 닥나무 추출물 또는 백화사설초 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR101239393B1 (ko) * 2011-12-16 2013-03-05 바이허브 주식회사 자연추출물을 함유한 즉각적인 주름개선용 화장품 조성물
KR20170112750A (ko) * 2016-04-01 2017-10-12 주식회사 아미코스메틱 프로폴리스 미세침 분말을 함유하는 화장료 조성물

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20220020564A (ko) * 2020-08-12 2022-02-21 김혜용 효과적인 피부재생 및 안티에이징을 위한 미세침, 저분자 펩티드, 천연 추출물을 함유하는 기능성 마이크로 앤 리커버리 화장료 조성물
KR102445188B1 (ko) * 2020-08-12 2022-09-19 김혜용 효과적인 피부재생 및 안티에이징을 위한 미세침, 저분자 펩티드, 천연 추출물을 함유하는 기능성 마이크로 앤 리커버리 화장료 조성물
KR102463745B1 (ko) * 2022-07-20 2022-11-07 (주)바이오시엠 미백 및 항산화기능을 가지는 화장품 조성물
WO2024019212A1 (ko) * 2022-07-20 2024-01-25 (주)바이오시엠 미백 및 항산화기능을 가지는 화장품 조성물

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20200026646A (ko) 피부 생기 부여 및 활력 증대를 위한 식물세포 컴플렉스 배양물 또는 그 추출물을 함유하는 피부개선용 화장료 조성물
KR101207557B1 (ko) 백합나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101387308B1 (ko) 황칠나무 발효산물을 이용한 피부 미백 화장료 조성물
KR102625374B1 (ko) 피부 및/또는 점막을 수화시키기 위한 네펠리움 라파세움의 과피의 추출물의 용도
KR101810231B1 (ko) 프로폴리스 미세침 분말을 함유하는 화장료 조성물
KR20150139688A (ko) 미백 활성을 갖는 당유자 추출물 및 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
KR20100135871A (ko) 섬유모세포의 증식 및/또는 활성을 자극하는 활성 성분
KR101895412B1 (ko) 천연 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물
KR102113645B1 (ko) 미세침 분말 및 천연 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 모발 성장 촉진용 화장료 조성물
KR101825704B1 (ko) 커피 실버스킨 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR101319997B1 (ko) 분홍바늘꽃 및 구슬꽃나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 주름개선용 화장료 조성물
KR102130243B1 (ko) 글루타치온, 미세침, 아세틸헥사펩타이드, 닥나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부미백, 주름개선, 항노화, 항산화 효능의 화장료 조성물
KR102168532B1 (ko) 한약재 추출물을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물
KR102473093B1 (ko) 햄프씨드오일, 식물캘러스배양여과물 및 펩타이드를 유효성분으로 함유하는 피부 상태 개선용 화장료 조성물
KR101685251B1 (ko) 순무, 순무 무청 또는 순무 캘러스의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화, 피부수렴 및 주름개선용 화장료 조성물 및 이의 제조방법
KR101009766B1 (ko) 하고초 추출물 및 개사철쑥 추출물을 함유하는 주름개선용 화장료 조성물
KR101862039B1 (ko) 미세침 분말 및 나노리포좀으로 안정화된 천연 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
KR102257448B1 (ko) 흑다시마를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
KR102226179B1 (ko) 항노화 화장료 조성물
KR102450862B1 (ko) 천궁, 작약 유래 엑소좀을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR102403451B1 (ko) 펩타이드 복합체 및 천연 복합 추출물을 함유하는 다기능성 화장료 조성물
KR102056263B1 (ko) 커피 실버스킨 및 커피박 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물
KR102445188B1 (ko) 효과적인 피부재생 및 안티에이징을 위한 미세침, 저분자 펩티드, 천연 추출물을 함유하는 기능성 마이크로 앤 리커버리 화장료 조성물
KR101969684B1 (ko) 천연 미세침 분말과 천연 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름개선 및 모공축소 기능의 화장료 조성물
KR20160003918A (ko) 한약재 추출물을 포함하는 피부 탄력 증진 또는 주름 개선용 화장료 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant