KR20090123458A - 천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물,식료품 조성물 및 약학 조성물 - Google Patents

천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물,식료품 조성물 및 약학 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 비열처리 발효방법, 상기 방법에 의해 제조된 발효물 및 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 (a) 멸균 과정을 거치지 아니한 천연 식물소재 또는 한약재를 분쇄한 분쇄물을 물과 혼합하여 발효 배지를 만드는 단계; (b) 유산균 및 효모를 멸균 과정을 거치지 아니한 상기 발효 배지에 접종하여 발효하는 단계; (c) 발효액을 채취하는 단계; (d) 채취한 발효액을 숙성하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 비열처리 발효방법, 상기 방법에 의해서 제조된 발효물 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.
혼합발효, 유산균, 효모, 저온 발효, 저온 숙성

Description

천연 식물소재 또는 한약재의 발효방법, 상기 방법에 의해서 제조된 발효물 및 이를 함유하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물 {A method for fermentation of natural plants or herbal medicines, a fermented product prepared therefrom and a cosmetic composition, a food composition and a pharmaceutical composition comprising the same}
본 발명은 비열처리 발효방법, 상기 방법에 의해 제조된 발효물 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 (a) 멸균 과정을 거치지 아니한 천연 식물 소재 및 한약재를 분쇄하고 물과 혼합하여 발효 배지를 만드는 단계; (b) 유산균 및 효모를 멸균 과정을 거치지 아니한 상기 발효 배지에 접종하여 발효하는 단계; (c) 발효액을 채취하는 단계; (d) 채취한 발효액을 숙성하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법, 상기 방법에 의해서 제조된 발효물 및 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물에 관한 것이다.
최근 발효식품 및 발효소재를 이용한 식품 및 화장품 개발이 활기를 띠면서, 천연 식물 소재 또는 전통적인 민간 요법으로 전래되는 한약재를 발효시킨 소재에 대한 관심이 증가되고 있다.
천연 식물소재 또는 한약재는 다양한 생리활성 물질과 항산화 물질을 함유하고 있으나, 추출된 이후에는 불안정하고 때론 자극적이어서, 인체에 독성을 유발하는 경우도 종종 있다. 따라서, 최근에는 천연 추출물을 안정화시키거나, 독성을 줄이거나, 안정한 유도체로 전환시켜 효과를 높이려는 시도가 많이 진행되고 있고, 그 일환으로 미생물이나 효소를 이용한 생물학적 전환(Biological transformation) 방법이 개발되고 있으며, 대표적인 방법으로 발효기술을 예로 들 수 있다.
발효는 미생물이 가지고 있는 효소 작용에 의해 식물 및 동물유래의 유기물이 분해되는 과정으로, 다시 유기 생명체의 필수적인 영양분으로 재생산되는 일련의 과정이라 할 수 있다.
구체적으로, 발효는 미생물에 의한 유기물의 분해 또는 합성 과정으로 인체에 유용한 경우를 의미한다. 이와 같이, 인체에 유용한 물질을 만들어내는 대표적인 발효 미생물로는 누룩균, 효모, 곰팡이, 고초균, 유산균, 초산균등이 있다.
또한, 다양한 식품들이 상기 발효 미생물을 통한 발효 과정에 의해서 생산된다. 미생물에 의해 식품의 성분이 변환되어 얻어지는 이러한 식품을 발효식품이라 정의하며, 대표적인 발효식품으로는 된장, 청국장, 고추장, 김치, 젓갈, 치즈, 요구르트, 식초, 식혜, 술 등 매우 다양하다.
한편, 인체에 섭취된 음식물은 장내의 유산균 등에 의해서 분해되어, 인체 세포에 흡수가 용이한 저분자 물질로 전환, 불안정하거나 불활성인 형태에서 활성 형태로 전환되거나, 또는 음식물에 포함된 인체 유해성분이 미생물에 의해 분해되어 제거(Detoxification)되는 등 다양한 작용을 거쳐 흡수된다. 이러한 결과는 장내 미생물에 의한 생물전환의 중요성을 단적으로 보여주는 것이라 볼 수 있다.
따라서, 유산균 또는 효모 등의 미생물 발효에 의해서 천연 식물소재 및 한약재의 효능을 극대화시키거나, 안전성 문제를 해결하기 위한 시도는 다양한 식품, 화장품, 약품 등의 개발에 있어서 중요한 의미를 갖는다 하겠다. 특히, 김치나 된장 등의 한국전통식품에서 번식하는 미생물은 생물학적 활성이 뛰어난 것으로 보고되고 있어, 이러한 이유로 전통 발효 식품에서 분리한 미생물을 이용하려는 많은 연구가 진행되고 있다.
특히, 식품은 발효를 통하여 맛이나 물성, 영양성분 및 저장성이 향상된다. 발효 식품의 기능은 여러 연구를 통해서 입증되어 왔다. 구체적으로, 우리나라의 대표적인 발효식품으로는 된장, 청국장과 같은 장류를 들 수 있다. 콩 자체보다는 된장에 항암물질이 많은 것은 발효가 얼마나 인체에 유익한 영향을 미치는가를 단적으로 알 수 있는 증거이다. 콩의 주요 활성 성분인 제니스틴(Genistin)은 발효과정을 통하여 비배당체인 제니스테인 (Genistein)으로 전환되어 골다공증 및 폐경기 증후군 예방 및 유방암, 전립선암, 폐암 등 여러 암을 예방하는 효과를 나타낸다. 이외에도 콩의 발효과정에서 생성되는 유리 지방산(리놀레산과 리놀렌산), 갈색색소, 펩타이드 등이 항산화효과와 항암효과를 나타낸다. 결국, 된장은 콩에서 유래된 물질과 발효균에 의해 생성된 항암물질이 어우러져 우수한 항암식품이 되는 것이다.
발효의 놀라운 효과를 확인할 수 있는 또 한가지는 김치이다. 적당히 익은 김치는 암 예방에 효과가 높은 것으로 잘 알려져 있는 것이 사실이며, 또한 최근에는 조류독감 등에도 효과가 있는 것으로 알려지고 있다. 이 밖에도 김치의 효능은 다양하여 식중독을 예방하는 효능과 발효과정을 통해 오염된 농약성분을 제거하는 효과도 실험적으로 확인이 되었다. 심지어는 스트레스를 해소하는 효능이 있다는 연구결과가 일본 연구자들에 의해 증명되기도 하였다. 이러한 결과는 김치발효에서 분리된 김치유산균이 발효과정에서 신경 안정효과가 있는 GABA(gamma aminobutyric acid)라는 물질을 만들어 내기 때문일 것으로 추측된다. 된장의 경우와 마찬가지로 김치재료가 가지고 있는 각종 플라보노이드는 비배당체가 되면서 항산화 및 암예방 활성이 높아진다.
최근 활발히 진행되고 있는 홍삼을 이용한 발효연구는 발효의 또 다른 장점을 확인할 수 있는 예로 볼 수 있다. 인삼의 효과는 사람에 따라 달리 나타난다. 이는 인삼의 사포닌 성분이 인체의 장내 미생물에 의해 분해되고, 흡수되어 효과를 나타내기 때문이다. 이러한 원인 때문에 장내 미생물의 활성이 높은 사람은 인삼의 효과를 더욱 잘 느낄 수 있다고 보고되었다. 최근에는 다양한 미생물을 이용하여 선택적으로 특정 사포닌의 함량을 높임으로서 맞춤형 건강 식품이나 의약으로 개발하려는 시도가 활발히 진행되고 있다.
이외에도 마늘을 한달 간 발효, 숙성시켜 마늘의 매운맛과 독한 냄새를 제거함으로써 매일 복용하여도 거부감이 없는 형태로 전환시킨 흑마늘도 제품화되어 판매되고 있고, 항염 및 항암 등에 효과가 입증되고 있는 생강도 발효제품으로 추진 되고 있다. 이는 발효가 먹기 어려운 식품을 일상생활에 쉽게 먹을 수 있도록 해주는 또 다른 장점이라고 볼 수 있다.
발효식품은 세상 모든 곳에서 대중화되어 있기 때문에 세계시장에 쉽게 접목될 수 있는 장점이 있다. 최근 화장품 및 미용식품분야에서 다양한 한약재를 발효하여 원료로 이용하려는 시도가 진행되고 있다. 이는 한의학의 식품을 이용하여 건강을 지키고 질병을 예방 및 치료하는 "식치(食治)"라는 개념에 뿌리하고 있다. 약의 기원이 되는 식물성 화합물(phytochemicals)이 식품 재료에도 광범위하게 함유되어 있기 때문에 이를 발효에 이용하는 것은 좋은 시도라 볼 수 있다. 발효식품은 단순히 음식을 인간의 미각에 맞도록 바꾸거나 보존성을 높이는 전통적인 지혜에서 건강, 장수를 위한 식품으로 바꾸는, 그리고 부작용이 적고 효과가 우수한 천연물 의학을 개발하려는 시도로, 그리고 궁극적으로는 맞춤의약품을 개발 하려는 데까지 그 지혜의 폭을 넓히고 있다.
그러나 이러한 발효기술을 이용하여 다양한 기능성 신 소재를 개발하는 데에는 극복해야 할 문제점을 가지고 있다. 가장 큰 문제점으로는 발효과정에 필수적으로 거쳐야 하는 멸균과정에서 열처리에 의해, 천연 식물소재의 영양성분 및 활성성분이 파괴된다는 것이다. 멸균과정은 일반적으로 121℃에서 15분간 열처리 하는 과정을 수반하기 때문에, 천연식물 소재나 한약재에 포함되어 있는 활성성분의 파괴를 피할 수 없다.
이에, 본 발명에서는 종래 기술의 문제를 해결하기 위해 영양성분의 파괴를 수반하는 멸균과정, 즉 열처리 과정을 거치지 않고도 잡균에 의한 오염을 최소화시 킬 수 있는 방법을 제공한다.
따라서, 본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점과 과거로부터 요청되어온 기술적 과제를 해결하는 것을 목적으로 한다.
구체적으로, 본 발명의 목적은 천연 식물소재나 한약재를 살균하지 않고 발효시킴으로써, 천연 식물소재나 한약재의 생리활성 성분의 파괴를 최소화하는 발효방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 두 번째 목적은 상기 방법에 의해서 제조된 우수한 항노화, 항암, 항염 및 면역 개선 효능을 가지는 발효물을 제공하는 것이다.
본 발명의 세 번째 목적은 상기 발효물을 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 네 번째 목적은 상기 발효물을 함유하는 식료품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다섯 번째 목적은 상기 발효물을 함유하는 약학 조성물을 제공하는 것이다.
이러한 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 천연 식물 소재 및 한약재의 비열처리 발효방법은
(a) 멸균 과정을 거치지 아니한 천연 식물 소재 및/또는 한약재를 분쇄한 분 쇄물을 물과 혼합하여 발효 배지를 만드는 단계;
(b) 유산균 및 효모를 멸균 과정을 거치지 아니한 상기 발효 배지에 접종하여 혼합 저온 발효하는 단계;
(c) 발효액을 채취하는 단계;
(d) 채취한 발효액을 숙성하는 단계;를 포함하는 것으로 구성되어 있다.
또한, 본 발명은 상기 발효방법을 통해 제조되는 발효물, 상기 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물로 구성되어 있다.
본 발명의 발효방법에 따르면, 천연 식물 소재 및 한약재를 열처리하지 않은 상태에서 파쇄, 추출 및 발효시킬 수 있는 바, 활성성분이 열처리에 의해 파괴되는 것을 방지하면서도, 잡균에 의한 오염을 최소화할 수 있으며, 상기 발효방법에 의해 제조된 발효물은 우수한 항노화, 항암, 항염 및 면역 개선 효능을 갖기 때문에, 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물의 유효성분으로 포함될 수 있다.
상기 단계 (a)는 천연 식물 소재 또는 한약재를 포함한 발효 배지 베이스를 만드는 단계로서, 상기 발효 배지는 슬러리(Slurry) 형태일 수 있다.
상기 천연 식물 소재 또는 한약재는 각각 독립적으로 생강, 갈근, 감초, 녹차, 다시마, 당귀, 맥문동, 복분자, 산수유, 상백피, 오미자, 은행잎, 자초, 천문동, 치자, 캐모마일, 표고버섯, 감잎, 강낭콩, 계피, 고삼, 금은화, 도토리, 목단 피, 포공영, 상황버섯, 석류, 송이버섯, 승마, 약쑥, 영지버섯, 오배자, 우엉, 율피, 황금, 황련, 황백, 괴화, 길경, 대나무, 도인, 옥죽, 백작약, 백지, 복령, 비파옆, 시호, 알로에, 익모초, 차전초, 창이자, 천궁, 천문동, 토사자, 하수오, 행인, 현미, 홍화, 감국, 결명자, 귀리, 녹두, 대추, 더덕, 단호박, 도인, 마치현, 모과, 목단피, 백리향, 산다화, 어성초, 연자육, 고본, 곽향, 대황, 방품, 백급, 백부자, 백지, 사상자, 가시오갈피, 감귤, 도인, 두충, 인삼, 홍삼, 천화분, 토마토, 파파야, 해송자, 행인, 겨우살이, 귀리, 녹용, 동충하초, 포도씨, 백강잠, 아가리쿠스버섯, 차가버섯, 연자육, 강황, 고추, 마늘, 구기자, 구아바, 구절초, 금송, 노근, 느릅나무, 두릅, 두충, 들깨, 루이보스, 마, 마황, 매실, 매화, 백급, 백리향, 병풀, 보골지, 보라지, 복분자, 비수리, 비자, 비파엽, 빈랑자, 산뽕나무, 산수유, 산초, 신선초, 아세로라, 아카시아, 약쑥, 올리브잎, 와송, 우슬, 원지, 육두수, 은행잎, 자근, 자소엽, 죽순, 지구자, 지모, 지실, 지황, 차전초, 창이자, 창포, 천화분, 캐비어, 클로렐라, 스피루리나, 토사자, 파슬리, 포공영, 해송자, 행인, 함초, 호두, 회향 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 또는 둘 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 상기 분쇄물의 평균 입경은 10 nm 내지 1 mm일 수 있다.
더욱이, 상기 분쇄물은 슬러리 전체의 건조 중량을 기준으로 20 내지 50 중량부로 포함될 수 있다. 분쇄물의 첨가량이 50 중량부를 초과하는 경우에는, 슬러리의 점도가 너무 높아 미생물이 적절하게 혼합되지 못하여 발효가 전체적으로 균일하게 일어나지 않을 수 있고, 20 중량부 미만일 경우에는 접종균 이외의 잡균에 의한 오염이 쉽게 유발될 수 있다.
상기 단계 (b)는 유산균 및/또는 효모의 접종을 통해 멸균과정을 거치지 않고, 발효가 이루어지는 단계로서, 천연 소재식물 또는 한약재의 멸균 과정을 거치지 않아도 되는 바, 상기 천연 소재식물 또는 한약재의 고유한 생리활성의 파괴를 최소화할 수 있다.
상기 유산균은 예를 들어, 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis ), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance) 및 이들의 혼합 균주로 이루어진 군에서 선택된 하나 또는 둘 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 상기 락토바실러스 사케이는 바람직하게 Lactobacillus sakei B2-16(기탁번호 KFCC-11321), 상기 락토바실러스 플렌타럼은 바람직하게 Lactobacillus plantarum p23(㈜ 바이오벤), 상기 락토코커스 락티스는 바람직하게 Lactococcus lactis A164(기탁번호 KFCC-11047)일 수 있다.
이러한 유산균을 통해 부패균과 고초균의 성장 및 암모니아의 발생을 억제할 수 있으며, 유산에 의한 미네랄의 가용화를 통해 천연 식물소재의 분해를 촉진할 수 있고, 항균 펩타이드를 생성하여 부패균의 성장 억제할 수 있을 뿐 아니라, 유산을 분비함으로써 효모생육에 적합한 조건을 조성할 수 있다.
상기 효모는 아미노산, 핵산, 지방산, 비타민, 미네랄 등을 합성할 수 있는 능력을 가지고 있을 뿐 아니라, 인체에 필요한 8가지의 필수아미노산 합성할 수 있으며, 예를 들어 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)일 수 있으 나, 이에 제한되는 것은 아니다.
하나의 바람직한 예에서, 상기 유산균과 효모는 공생 관계일 수 있으며, 이들을 함께 접종함으로써, 상호 유익한 작용을 하여 최적의 발효환경(Microbial eco-system)을 조성할 수 있다.
상기 유산균과 호모가 공생하는 경우, 이들은 다른 일반 미생물과는 달리, 낮은 pH 조건, 산소가 공급되지 않은 혐기 조건, 및 15℃ 미만의 저온조건에서도 잘 성장할 수 있다. 또한, 발효시키고자 하는 천연 식물성 소재를 살균하지 않고도, 유산균과 효모가 우점종이 될 수 있도록 발효조건을 조절할 수 있다. 더욱이, 당분이 많은 조건에서는 기질에 의한 저해(substrate inhibition) 작용에 의해 호기적 미생물의 성장이 억제되어 잡균에 의한 오염을 최소화할 수 있다.
이러한 발효과정은 유기 영양소재생산 과정으로, 흔히 장시간에 걸쳐 미생물 플로라(Flora)가 변해가는 과정을 수반할 수 있다. 발효는 누룩 곰팡이에 의해 전분 성분이 분해되면서 시작되는데, 이러한 곰팡이(Fungi)에 의한 초기 분해과정은 세균(Bacteria)의 생육에 필요한 조건을 조성할 수 있다.
이후, 상기 미생물 플로라는 단백질 분해효소를 포함한 각종 분해효소 활성이 강력한 바실러스(고초균) 계열의 세균으로 바뀌면서, 유기물의 분해는 가속화 될 수 있다. 유기물의 분해가 가속화되면, 유산균의 생육에 필요한 조건이 형성되며, 유산균이 성장하게 되면, 바실러스 균과 부패균 등의 잡균의 성장이 억제되고, 유산균과 효모를 중심으로 하는 발효 미생물상이 안정화 될 수 있다.
이에, 본 출원의 발명자들은 발효시키고자 하는 천연 소재식물 또는 한약재 를 포함하는 발효 배지의 기질 농도, 초기 pH 및 온도조건을 조절한 비열처리 혼합 발효법을 통해 유산균과 효모가 우점종이 되어 소망하는 정도로 발효될 수 있도록 하였다.
하나의 바람직한 예에서, 상기 유산균 및 효모의 혼합 배양을 통한 발효 단계(b)는 4 내지 15 ℃의 온도에서 3일 내지 14일 동안 수행될 수 있으며, 공기와 혼합되지 않도록 교반하지 않고 정치하여 배양할 수 있다.
이러한 발효조건에서는 유산균 및 효모 이외의 미생물이 저온 조건에서 성장이 늦어지면서, 접종한 유산균과 효모에 의한 플로라 형성이 빠르게 일어날 수 있다. 일단 유산균과 효모의 성장이 왕성해지면, pH 및 산도가 떨어져서, 타균에 의한 오염은 억제될 수 있다. 발효시간이 14일이 넘게 되면, 유산균과 효모의 적절한 플로라에 변화가 생길 수 있고, 이로 인해 좋지 않은 냄새나 미생물 분해에 의한 발효취가 발생하여 발효물에 부정적인 영향을 미칠 수 있다.
상기 유산균 및 효모의 혼합 배양을 통한 발효 단계에서, 배양 초기 pH는 유산균과 효모가 우선적으로 성장할 수 있도록 4 내지 4.5로 유지될 수 있다. 초기 pH 가 4 미만이면, 효모와 유산균의 초기 성장도 늦어져 유산균과 효모의 최적 플로라 형성이 늦어질 수 있으며, pH가 4.5 이상이면 다른 균에 의한 오염이 발생할 수 있다.
상기 유산균 및/또는 효모의 접종량은 접종 초기 균수가 105 내지 108 cfu/g 또는 105 내지 108 cfu/㎖일 수 있다.
상기 단계 (c)는 발효액을 채취하는 단계로, 채취는 여과 또는 원심분리를 통해 이루어질 수 있다.
상기 단계 (d)는 채취한 발효액을 저온 숙성하는 단계로서, 상기 저온은 0 내지 4 ℃의 온도일 수 있으며, 숙성은 3일 내지 7일간 이루어질 수 있다. 이러한 단계를 통해서, 맛과 향이 좋아지고, 불용성 침전물의 제거가 가능할 수 있다.
본 발명은 또한, 상기 발효 방법에 따라 제조된 발효물에 관한 것이다.
즉, 상기 발효 방법에 따라 제조된 발효물은 열에 의한 멸균 처리를 하지 않아, 생리 활성이 있는 유효 성분의 파괴를 최소화할 수 있으며, 피부 노화 방지 및 개선, 피부 턴오버 보조, 피부 손상 방지 및 개선, 항산화 및 항염증에 유의한 효과를 나타낼 수 있다.
이에, 본 발명은 상기 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물을 제공한다.
상기 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물은 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수도 있으며, 예를 들어 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제, 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 포함할 수 있다.
또한, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다.
상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선 정하여 배합할 수 있으며, 성분들의 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 상기 성분들의 첨가량은 예를 들어, 조성물 총중량에 대하여 0.01~5 중량%, 바람직하게는 0.01~3 중량%일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물의 제형 역시 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사 투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
이하, 실시예를 통해 본 발명을 더욱 상술하지만, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명의 범주가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 발효물의 제조
오디 건조물 100 g을 분쇄기로 분쇄한 다음, 분쇄물이 중량 기준으로 20 중량%가 되도록 물을 첨가하여 잘 버무린 후, pH를 4 내지 4.5의 범위로 조절하였다. 이어서, 미리 배양된 유산균(Lactobacillus plantarum P23 : 입수처 ㈜ 바이오벤) 과 효모(Saccharomyces cerevisiae : KCCM 11201) 을 각각 108 cfu/㎖의 농도가 되도록 첨가한 다음, 14 내지 15 ℃에서 14일간 배양하고, 연속식 원심분리기를 이용하여 상등액을 채취하였다. 채취한 상등액을 4℃에서 3일간 숙성(Aging)하고, 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하였다.
[비교예 1] 종래의 천연 식물소재 또는 한약재 발효물 제조
오디 건조물 100 g을 분쇄기로 분쇄한 다음, 분쇄물이 중량 기준으로 20 중량%가 되도록 물을 첨가하여 잘 버무린 후, pH를 4 내지 4.5의 범위로 조절하였다. 이어서, 121℃에서 15분간 멸균한 후 미리 배양된 유산균 Lactobacillus plantarum P23 및 효모 (Saccharomyces cerevisiae : KCCM 11201)을 각각 108 cfu/㎖의 농도가 되도록 첨가한 다음, 14 내지 15 ℃에서 14일간 배양하고, 연속식 원심분리기를 이용하여 상등액을 채취하였다. 채취한 상등액을 4 ℃에서 3일간 숙성(Aging)하고, 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하였다.
[비교예 2] 종래의 천연 식물소재 또는 한약재 발효물 제조
오디 건조물 100 g을 분쇄기로 분쇄한 다음, 분쇄물이 중량 기준으로 20 중량%가 되도록 물을 첨가하여 잘 버무린 후, pH를 4 내지 4.5의 범위로 조절하였다. 이어서, 121 ℃에서 15분간 멸균한 후 미리 배양된 유산균 Lactobacillus plantarum P23(㈜바이오벤으로부터 입수) 및 효모 Saccharomyces cerevisiae(KCCM 11201)을 각각 108 cfu/㎖의 농도가 되도록 첨가한 다음, 30℃에서 14일간 배양하고, 연속식 원심분리기를 이용하여 상등액을 채취하였다. 채취한 상등액을 4 ℃에서 3일간 숙성(Aging)하고, 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하였다.
[실험예 1] 발효 평가
상기 실시예 1, 비교예 1 및 2의 발효 조건별로 발효 정도를 비교하였다. 발효 정도는 pH, 균수를 비교하였으며, 이를 도 1에 나타내었다.
[실험예 2] 자외선에 의해 유발되는 염증반응 억제실험
사람 피부각질세포 (human keratinocyte : ATCC CRL-2404)를 페니실린 (100 IU/mL), 스트렙토마이신 (100 g/mL), 10% FBS (fetal bovine serum)를 함유하는 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지를 넣고 37℃를 유지하여 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다. 수득된 피부각질세포를 6-웰 플레이트에 각 웰당 3 X 105 개로 분주한 다음 세포배양조건에서 24시간 배양하였다. 배양 후 세포에 25mJ/Cm2량의 자외선을 조사하고, 실시예 1, 비교예 1 및 2의 발효액을 첨가한 후, 24시간 추가 배양하였다. 배양 후 세포의 수를 측정하여 도 2에 나타내었으며, 배양 상등액을 회수하여 염증성 사이토카인인 TNF-α의 분비량을 측정하여 도 3 에 각각 나타내었다.
도 2를 참조하면, 본 발명에 따른 실시예 1의 발효액은 자외선 조사에 의한 세포 사멸을 막을 수 있고, 세포를 부활시켜주는 효과를 나타내고 있음을 확인할 수 있으며, 도 3을 참조하면, 자외선에 의해 유발되는 염증유발 사이토카인의 분비를 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있다.
[실험예 3] 콜라겐 합성 촉진 효과(항노화 효과)
실시예 1 및 비교예 1, 2의 발효액의 항노화 효과를 측정하기 위하여 사람 섬유아세포에서의 콜라겐 합성 촉진 효과를 알아보았다.
사람 섬유아세포 (normal human fibroblast : ATCC CCL110) 를 페니실린 (100 IU/mL), 스트렙토마이신 (100 g/mL), 10% FBS (fetal bovine serum)를 함유하는 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) 배지를 넣고 37℃를 유지하며 5% 이산화탄소를 포함하는 배양기 내에서 배양하였다. 수득된 섬유아세포를 6-웰 플레이트에 각 웰당 3 X 105 개로 분주한 다음 세포배양조건에서 24시간 배양하였다.
배양 후 세포에 25mJ/cm2량의 자외선을 조사하고, 실시예 1 및 비교예 1, 2의 발효액을 첨가한 후 24시간 배양하였다. 세포를 회수하고 파쇄한 후 서콜 콜라겐 어세이 키트(Sircol assay kit)를 이용하여 콜라겐 량을 측정하여, 도 5에 나타내었다.
[실험예 4] 항산화 효과
Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)를 125M의 농도가 되도록 에탄올에 녹였다. DPPH 용액을 희석하여 517 nm의 파장에서 흡광도가 0.8~0.9의 범위가 되도록 제조한 후, 실시예 1, 비교예 1 및 2의 발효액을 최종 농도가 0.05% 가 되도록 1 : 1로 섞은 후 암실에서 20분간 반응시켰다. 반응 후 517 nm의 파장에서 흡광도를 측정하여, 시료의 항산화력(Free radical scavenging activity)을 측정하였으며, 이를 표 1에 나타내었다.
[표 1]
Figure 112008038075016-PAT00001
또한, 하기 조성에 따라 각각 비누형, 로션형, 크림형, 팩형, 미용액형의 제제들을 제조하였다.
[실시예 2] 비누형 제제
실시예 1의 발효액 5.00
유지 75
수산화나트륨 5
향료 10
정제수 잔량
(단위: 중량%)
[실시예 3] 로션형 제제
실시예 1의 발효액 3.00
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 1.00
수용성 콜라겐 (1% 수용액) 1.00
시트르산나트륨 0.10
시트르산 0.05
감초 엑기스 0.20
1,3-부틸렌글리콜 3.00
정제수 잔량
(단위: 중량%)
[실시예 4] 크림형 제제
실시예 1의 발효액 1.00
폴리에틸렌글리콜모노스테아레이트 2.00
자기유화형 모노스테아르산글리세린 5.00
세틸알코올 4.00
스쿠알렌 6.00
트리2-에틸헥산글리세릴 6.00
스핑고당지질 1.00
1.3-부틸렌글리콜 7.00
정제수 잔량
(단위: 중량%)
[실시예 5] 팩형 제제
실시예 1의 발효액 5.00
폴리비닐알코올 13.00
L-아스코르빈산-2-인산마그네슘염 1.00
라우로일히드록시프롤린 1.00
수용성 콜라겐 (1% 수용액) 2.00
1,3-부틸렌글리콜 3.00
에탄올 5.00
정제수 잔량
(단위: 중량%)
[실시예 6] 미용액형 제제
실시예 1의 발효액 2.00
히드록시에틸렌셀룰로오스 (2% 수용액) 12.00
크산탄검 (2% 수용액) 2.00
1,3-부틸렌글리콜 6.00
진한 글리세린 4.00
히알루론산나트륨 (1% 수용액) 5.00
정제수 잔량
본 발명의 발효방법에 따르면, 천연 식물 소재 및 한약재를 열처리하지 않은 상태에서 파쇄, 추출 및 발효시킬 수 있는 바, 활성성분이 열처리에 의해 파괴되는 것을 방지할 수 있고, 상기 발효방법에 의해 제조된 발효물은 우수한 항노화, 항암, 항염 및 면역 개선 효능을 갖기 때문에, 화장료 조성물, 식료품 조성물 및 약학 조성물의 유효성분으로 포함될 수 있으며, 미용산업, 식품산업 및 제약산업 등과 같은 다양한 분야에 폭넓게 적용될 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 발효물과 종래의 발효물에서 발효 조건별로 발효 정도를 비교한 결과를 나타낸 그래프이다;
도 2는 본 발명에 따른 발효물과 종래의 발효물에서 세포 사멸 정도를 비교한 결과를 나타낸 그래프이다;
도 3은 본 발명에 따른 발효물과 종래의 발효물을 처리한 피부각질세포에서 분비되는 TNF-α의 분비량을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다;
도 4는 본 발명에 따른 발효물과 종래의 발효물을 처리한 세포를 파쇄하여 콜라겐 양을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.

Claims (15)

  1. 천연 식물 소재 및 한약재의 비열처리 발효방법으로서,
    (a) 멸균 과정을 거치지 아니한 천연 식물 소재 또는 한약재를 분쇄한 분쇄물을 물과 혼합하여 발효 배지를 만드는 단계;
    (b) 유산균 및 효모를 멸균 과정을 거치지 아니한 상기 발효배지에 접종하여 발효하는 단계;
    (c) 발효액을 채취하는 단계;
    (d) 채취한 발효액을 숙성하는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 천연 식물 소재 또는 한약재는 각각 독립적으로 생강, 갈근, 감초, 녹차, 다시마, 당귀, 맥문동, 복분자, 산수유, 상백피, 오미자, 은행잎, 자초, 천문동, 치자, 캐모마일, 표고버섯, 감잎, 강낭콩, 계피, 고삼, 금은화, 도토리, 목단피, 포공영, 상황버섯, 석류, 송이버섯, 승마, 약쑥, 영지버섯, 오배자, 우엉, 율피, 황금, 황련, 황백, 괴화, 길경, 대나무, 도인, 옥죽, 백작약, 백지, 복령, 비파옆, 시호, 알로에, 익모초, 차전초, 창이자, 천궁, 천문동, 토사자, 하수오, 행인, 현미, 홍화, 감국, 결명자, 귀리, 녹두, 대추, 더덕, 단호박, 도인, 마치현, 모과, 목단피, 백리향, 산다화, 어성초, 연자육, 고본, 곽향, 대황, 방품, 백급, 백부자, 백지, 사상자, 가시오갈피, 감귤, 도인, 두충, 인삼, 홍삼, 천화분, 토마토, 파파야, 해송자, 행인, 겨우살이, 귀리, 녹용, 동충하초, 포도씨, 백강잠, 아가리쿠스버섯, 차가버섯, 연자육, 강황, 고추, 마늘, 구기자, 구아바, 구절초, 금송, 노근, 느릅나무, 두릅, 두충, 들깨, 루이보스, 마, 마황, 매실, 매화, 백급, 백리향, 병풀, 보골지, 보라지, 복분자, 비수리, 비자, 비파엽, 빈랑자, 산뽕나무, 산수유, 산초, 신선초, 아세로라, 아카시아, 약쑥, 올리브잎, 와송, 우슬, 원지, 육두수, 은행잎, 자근, 자소엽, 죽순, 지구자, 지모, 지실, 지황, 차전초, 창이자, 창포, 천화분, 캐비어, 클로렐라, 스피루리나, 토사자, 파슬리, 포공영, 해송자, 행인, 함초, 호두, 회향 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 하나 또는 둘 이상인 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 발효 배지는 슬러리 형태인 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 분쇄물의 평균 입경은 10 nm 내지 1 mm인 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  5. 제 1 항에 있어서, 상기 분쇄물은 발효배지 전체의 건조 중량을 기준으로 20 내지 50 중량%로 포함되는 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  6. 제 1 항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 사케이(Lactobacillus sakei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis ), 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis), 바실러스 코아귤런스 (Bacillus coagulance) 및 이들의 혼합 균주로 이루어진 군에서 선택된 하나 또는 둘 이상인 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  7. 제 1 항에 있어서, 상기 효모는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)인 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  8. 제 1 항에 있어서, 상기 유산균과 효모는 4 내지 15℃의 온도에서 3일 내지 14일 동안 발효되는 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  9. 제 1 항에 있어서, 상기 유산균과 효모는 pH 4 내지 4.5를 유지하여 발효되 는 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  10. 제 1 항에 있어서, 상기 유산균 또는 효모의 접종량은 접종 초기 균수가 105 내지 108 cfu/㎖인 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  11. 제 1 항에 있어서, 상기 저온 숙성은 0 내지 4℃의 온도에서 3일 내지 7일간 이루어지는 것을 특징으로 하는 비열처리 혼합 저온 발효방법.
  12. 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 하나에 따른 발효방법을 통해 제조되는 발효물.
  13. 제 12 항에 따른 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물.
  14. 제 12 항에 따른 발효물을 유효성분으로 포함하는 식료품 조성물.
  15. 제 12 항에 따른 발효물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물.
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