KR20090077619A - 주름개선에 효과가 있는 한방추출물을 포함하는 화장료조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부의 주름을 개선시키거나, 피부에 주름이 생성되는 것을 방어 또는 지연시킬 수 있는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물를 함유하여 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초, 주름개선, 한방추출물,

Description

주름개선에 효과가 있는 한방추출물을 포함하는 화장료 조성물{Cosmetic composition with the effect of antiwrinkle containing oriental medicine extract}

본 발명은 피부의 주름을 개선시키거나, 피부에 주름이 생성되는 것을 방어 또는 지연시킬 수 있는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물을 함유하여 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다. 인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적으로는 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 구성 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선의 함량이 증가하게 되고 환경오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 활성 유해 산소 등이 증가함으로써, 피부의 주름은 증가하게 되고 피부의 탄력은 감소하며, 기미, 주근깨 및 검버섯은 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다. 이와 같이 피부 노화에 영향을 미치는 여러 가지 요인들 가운데에서 요즘 가장 활발히 진행되고 있는 연구 분야는 피부 주름의 변화에 대한 연구이다. 피부 주름은 피부의 수분 함유량, 콜라겐의 함유량 및 외부 환경에 대한 면역 작용 능력 등 여러가지 요소들에 의해 생성되는 것으로 알려져 있다. 이중 주름의 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐의 생성량 및 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 발현량과 활성이다.

콜라겐은 피부 진피 층에 존재하는 것으로 피부 전체 건조 중량의 약 70~80%를 차지하는 엘라스틴과 함께 피부의 탄력을 주관하는 주요 성분으로 알려져 있는데, 자연 노화에 따른 세포활성의 감소와 같은 내적 요인에 의해 콜라겐의 함유량이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적요인에 의해 콜라겐의 분해가 증가되며, 생합성이 감소되는 문제점이 있다.

따라서, 이러한 현상을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있는 것이 현실이다.

천궁은 산형과의 여러해살이 풀이다. 천궁의 원산지는 중국 사천성 지방으로서 미나리과에 속하는 다년 생 식물로 뿌리는 토란과 비슷하며 한약의 특수 향기 냄새는 바로 이 천궁에서 난다 천궁은 궁궁이, 호궁, 향과, 작뇌궁으로 불린다. 미나리과에 속하는 다년생 풀인 궁궁이나 산궁궁이의 뿌리, 줄기를 말린 것이다. 궁궁이는 각지에서 심고 산궁궁이(산천궁, 토천궁)는 우리 나라 중부 이북의 깊은 산골짜기에서 자라거나 각지에서 심는다. 늦가을에 서리가 내린 다음 뿌리를 캐서 줄기를 버리고 물에 씻어 햇볕에 말린다. 맛은 맵고 성질은 따뜻하다. 심포경, 간경, 담경, 삼초경에 작용한다. 혈을 잘 돌게 하고 월경을 고르게 하며 풍을 없애고 통증을 멈춘다. 약리실험에서 진정작용, 강압작용, 자궁수축작용, 억균작용 등이 밝혀졌다. 정유 성분은 중추신경계통에 대하여 소량에서는 흥분적으로, 다량에서는 억제적으로 작용한다. 풍한두통, 무월경, 월경부조, 월경통, 산후복통, 협통, 힘줄이 땅기는 데, 고혈압, 옹종 등에 쓴다. 하루 6~12그램을 탕약, 산제, 환약 형태로 먹는다. 음허로 인한 두통, 월경과다, 임신부에게는 쓰지 않는다. 한국에서도 약재료로 많이 쓰기 때문에 수입에만 의존할 수 없어 재배를 많이 한다. 품종은 토천궁과 일천궁이 있으며 재배적지는 최고기온이 30℃ 이상이 장기간 되지 않는 지대가 높은 고 냉지 지방이 좋으며, 가뭄이 심한 곳은 생육이 불량하다. 토질은 부식질이 많은 사양토, 식양토로서 배수가 잘 되어야 하며, 연작을 하면 병해충의 피해로 생육이 저조하므로 재배했던 장소는 5∼6년씩 다른 작물을 재배하는 것이 좋다. 토천궁의 주산지는 영일, 평창 등이며 일천궁은 울릉, 봉화 등이다. 맛은 맵고 따뜻하다. 천궁은 혈액순환을 활발하게 하고 기운의 순행을 도와서 통증을 제거하는 약초이다. 전신의 기체혈어(氣滯血瘀)로 인한 협통과 복통에 유효하며, 여자의 생리통에 향 부자와 등과 배합해서 치료한다.

약효로는 관상 동맥 질환으로 인한 흉부동통에 신효하며, 풍한으로 인한 감기에 쓰이고 사지와 전신의 동통을 치료하며, 맹장염으로 인한 심한 복통을 완화시키고 타박상으로 인한 어혈이 정체된 것을 풀어 주는 동시에 통증을 제거한다. 두통에 지통 효과가 높다. 산전산후에 널리 사용한다. 또한, 진통, 진정 작용이 강하다. 항궤양 작용, 혈압 강하 작용, 항균 작용이 있다.

고본(藁本)은 산형과의 여러해살이 풀이다. 전국의 깊은 산골에서 자생하고 있는데 특히 강원도 및 경상북도의 해발 600m이상의 고랭지대에서 주로 많이 자라고 있다. 여러 해살이 초본으로 초장은 40~80㎝정도 곧게 자라며 향기가 강한 약초이다. 잎은 뿌리 잎과 3회 깃털 잎으로 가늘게 갈라지며, 꽃은 백색으로 8~9월에 피고, 종자는 10월에 맺는다.

맛은 맵고 따뜻하다. 매운맛은 발산작용이 강하여 외감성으로 인한 두통, 발열, 해수, 가래, 콧물에 사용하고 풍한습이 원인이 되어 발병한 사지 마비관절동통에 강활, 방풍, 위령선과 배합하여 사용한다. 두정통(頭頂痛)에 즉 머리가 아픈 것을 그치게 하는데 효과가 있다.

휘발성 정유를 함유하고 있는데, 정유 성분은 진정, 진통, 해열, 항염증 작용을 나타낸다. 장관(腸管)과 자궁 평활근을 억제시키고 백선균에 강한 억제 작용을 나타낸다. 신경성 피부염, 가려움증, 피부의 발진을 소실시킨다.

뿌리를 약으로 이용하는데 특히 고본은 향기와 색소가 좋아 고본차, 고본술 등 식품으로 개발할 가치가 높다. 성분은 뿌리줄기에 약 0.5%의 정유가 함유되어 있고, 주 성분은 3- butylidenephthalide senkyunolid, cnidilide, ligustilide이며, 종자에는 β-sitosterol, prangolarin 등이 함유되어 있다. 분포는 산비탈의 풀밭에서 자란다. 채취 및 제법은 봄과 가을에 채취하여 햇볕에 말린다. 성분은 cnidilide등이다. 기운과 맛은 맵고 따뜻하다. 효능은 풍거한(散風祛寒), 정통제습(定痛除濕)이며, 효능은 풍한외감(風寒外感), 두정두통(頭頂頭痛), 부인산증(婦人疝症), 한습복통설사(寒濕腹痛泄瀉)를 치료하며, 외용약으로는 개선(疥癬) 즉 옴과 버짐을 낫게한다. 하루 3~9그램을 달여서 먹는다. 외용약으로 사용 시는 적당한 양을 사용한다.

갈근(葛根)은 콩과의 여러해살이 낙엽 덩굴나무 칡 Pueraria thunbergiana 의 뿌리이다. 꽃을 갈화(葛花), 잎을 갈엽(葛葉), 줄기를 갈만(葛蔓)이라고 한다.

효능으로는 피부의 모공을 이완시켜 땀을 내게 하므로 외감성으로 인한 발열, 두통, 목덜미가 뻣뻣한 것을 풀어준다. 홍역초기에 온몸에 불고 좁쌀만 한 것이 돋는 병을 치료한다.

갈증을 해소하고 열병으로 인해 가슴속이 답답하고 편안치 않아 팔다리를 가만히 두지 못하는 증상과 당뇨에 유효하다. 이질초기에 몸에 열이 날 때 쓰고 소화기가 약해서 오랫동안 설사를 해서 기진맥진할 때에 사용한다. 고혈압으로 인한 두통, 이명 및 목덜미가 뻣뻣한 것을 풀어준다. 관상동맥경화증으로 심장부위의 통증을 호소할 때 사용한다. 돌발성 중이염에 유효하다.

약리작용으로는 성분인 flavonoids는 관상동맥의 확장작용을 보이고 뇌하수체후엽에서 발생한 관상동맥 경련을 막아주며 심장근육의 산소소모량을 줄이고 혈소판의 응집을 억제시킨다.

뇌혈관개선작용이 있어서 두통과 목덜미가 뻣뻣한 증상을 개선시킨다. 달인 물은 혈압강하작용에 일정한 효과가 있다. 알콜 추출물은 해열작용을 보인다.

가루는 피부혈관작용이 있어서 해열을 촉진시키는 동시에 호흡운동을 증가시키며, 수분의 배설을 증가시킨다. 혈당 강하작용이 있으며, 경련 완화작용이 있다.

대황(大黃)의 학명은 Rheum undulatum L로서 분류는 이판화군 마디풀목 마디풀과 에 속한다.

원산지는 중국으로서 황량, 화삼 등의 다른 이름으로 불리운다.

특징으로는 원줄기 높이 1m. 다년초로 잎은 넓은 달걀 모양이다. 뒷면의 잎맥이 뚜렷하고 가장자리에 무딘 톱니가 드물 게 있고 끝도 둔한 편이다. 꽃은 7~8월에 황백색 꽃이 원추화서로 핀다. 열매는 삭과로 삼각형 모양이며 날개가 있고 9월에 익는다.

한약으로의 용도는 약용으로 완하, 건위, 행어통경에 효능이 있으며, 실연변비, 세균성하리, 혈뇨 등 치료제로서 쓰이고 민간은 화상에 쓰기도 한다.

가자(訶子)의 학명은 TERMINALIAE FRUCTUS, 가여륵(訶藜勒)이라고도 한다.

이 약은 가자(訶子) Terminalia chebula Retzius (사군자과 Combretaceae)의 열매이다.

성상은 이 약은 긴 난형~난형체로서 길이 25~ 30 mm, 지름 15~25 mm이다. 바깥 면은 황갈색~갈색으로 광택이 있고 세로로 5개의 두드러진 주름과 그 사이에 불규칙한 주름이 있다. 기부에는 과병과 떨어진 자국이 있다. 질은 단단하고 가로로 자른 면은 어두운 갈색이며 과육의 두께는 2~5 mm이고 내과 피는 두께 약 5 mm로 황갈색을 나타내고 그 질은 매우 단단하며 갈색의 봉합선이 있고 중앙부에 지름 약 5 mm의 씨 1개가 있다. 이 약은 약간 특이한 냄새가 있고 맛은 쓰고 조금 시며 떫다.

생지황(生地黃)의 학명은 REHMANNIAE RADIX CRUDUS, 생지(生地), 선지황(鮮地黃) 이라고 도 불리우며, raw rehmania root이다. 이 약은 지황 Rehmannia glutinosa Libschitz var. purpurea Makino (현삼과 Scrophulariaceae)의 신선한 뿌리이다.

성상은 이 약은 원주형 ~ 방수형을 이루고 길이 5 ~ 15 cm, 지름 8 ~ 20 mm로서 더러는 꺾어졌거나 구부러진 것도 있다. 바깥 면은 황적색 ~ 황적갈색을 띠고 가로로 깊이 패어진 골이 있다. 질은 매우 연하여 잘 꺾인다. 꺾은 면은 평탄하며 목부는 백색, 피부는 엷은 황적색이다. 피부와 목부에는 전혀 기계조직이 없고 목부에는 망문도관이 방사상으로 배열되어 있다.

이 약은 특이한 냄새가 좀 있고 맛은 달며 조금 쓰다. 순도시험은 줄기, 토사 등의 이물질이 섞여 있어서는 안 된다. 등급으로는 바깥 면에 상처가 없고 다육질(多肉質)인 신선한 것이어야 한다.

어성초는 삼백초과의 그늘진 습지에서 자라는 여러해살이풀이다. 약모밀, 멸, 어성초라고도 부른다. 땅 속 줄기가 옆으로 벋고 20~50cm 높이로 자라는 줄기는 세로줄이 있으며 검은 자줏빛이 돌고 털이 없다. 전체에서 역겨운 생선 썩은 비린내가 물씬 풍긴다고 하여 '어성초(魚腥草)'라고 한다. 줄기에 어긋나는 잎은 달걀 모양의 심장형으로 끝이 뾰족하고 가장자리가 밋밋하다. 5~7월에 줄기 끝의 수상 꽃차례에 자잘한 노란색 꽃이 달리고 꽃이삭 밑에 꽃잎처럼 생긴 4개의 커다란 흰색 포가 있다. 북한에서 펴낸 <동의학사전>에서는 어성초에 관해서 즙채(菜), 약모밀, 어성초(魚腥草), 중약초(重藥草)로 기록하고 있다.

삼백초과에 속하는 다년생 풀인 약모밀(Houttuynia cordata Thunb.)의 전초를 말린 것이다.

우리나라 중부와 남부의 낮은 산과 들판, 길섶의 습한 곳에서 자란다. 이른 여름 꽃이 필 때 전초를 베어 그늘에서 말린다. 맛은 맵고 성질은 차다. 간경, 폐경에 작용한다.

열을 내리고 해독하며 소변이 잘 나오게 하고 부종을 내린다. 약리실험에서 강심이뇨작용, 모세혈관강화작용, 강한 억균작용 등이 밝혀졌다. 폐렴, 폐농양, 임질, 요도염, 방광염, 자궁염, 유선염, 치루, 무좀, 헌데 등에 쓴다. 하루 9~15그램을 탕약으로 먹는다. 외용약으로 쓸 때는 즙을 내어 바른다. 차처럼 늘 마시면 동맥경화를 예방할 수도 있다.

또한 북한에서 펴낸 <약초의 성분과 이용>에서도 즙채에 관해서 이렇게 적고 있다.

약모밀(Houttuynia cordata Thunb Polypara cordata Bueck) 다른 이름으로는 중약초, 즙채, 어성초, 십약이라 불리운다. 식물의 높이는 15~30센티미터 되는 여러해살이 풀이다. 달걀 또는 심장 모양의 잎이 어긋나게 붙고 줄기 윗부분에 꽃 이삭이 돋아난다. 작은 노란 꽃들이 모인 꽃 이삭 밑에 4개의 흰 꽃쌈이 열십자 모양으로 있다. 중부와 남부의 낮은 산, 들, 길섶의 습한 곳에서 자란다. 고기 비린내가 난다고 하여 어성초라고 한다.

전초(중약, 십약) 꽃필 때 베어 말린다. 성분으로는 생전 초에는 정유가 0.005퍼센트가 들어 있다. 그 주성분은 메틸노닐케톤, 미르센, 라우린알데히드, 카프린알데히드, 카프르산이고 이 밖에도 기체 크로마토그래피에 의하여 28개의 성분이 밝혀졌다. 이 식물의 불쾌한 냄새는 데카노일 아세트알데히드와 라우린알데히드에 의한 것이다. 이 두 성분은 신선한 식물에만 들어 있으며, 수증기 증류하여 얻은 정유에는 변화 생성물인 메틸노닐케톤, 미르센, 카프르산 등이 있다.

잎에는 쿠에르시트린과 물에 풀리는 무기성분 2.7퍼센트가 있다. 주성분은 칼륨 염이다. 꽃과 열매, 이삭에는 쿠에르시트린이 없고 이소쿠에르시트린이 있다.

작용으로는 전초의 10퍼센트 소금물 추출액을 개구리에게 피하 주사할 때 눈동자를 축소하고 피부의 색소세포를 확대한다. 또한 개구리의 적출 및 노출 심장의 활동을 멎게 하며, 콩팥의 사구체핏줄 또는 복막핏줄에 대하여 일시 수축시켰다가 확장시키고 횡문근을 마비시킨다. 고양이에게서는 혈압을 약간 낮추며 모르모토의 새끼집과 장관운동을 빠르게 한다.

쿠에르시트린은 오줌내기 작용(10만 배 농도)과 강심작용이 세고, 두꺼비의 뒷다리핏줄을 약하게 수축한다. 또한 대장균, 티푸스균, 파라티푸스균, 적리균, 임균, 포도알균, 사상균에 대한 항균작용과 모세혈관 강화작용이 있다. 이소쿠에르시트린도 모세 혈관 강화작용이 있다.

데카노일아세트알데히드는 비병원성 곰팡이는 물론 백선균, 무좀균 등에 대한 항균작용이 있으며 포도알균, 임균, 항산성균에도 억균작용이 있다. 포도알균에 대한 항균력은 1:40,000이며 술파제보다 세다.

본 발명자들 또한 주름 형성에 막대한 영향을 주는 여러 요인들을 효과적으로 통제하여 피부에 있어서의 주름을 개선시키거나, 주름이 생성되는 것을 방지 또는 지연시킬 수 있는 활성성분에 대하여 광범위하게 연구 검토한 결과, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물을 동시에 사용할 경우, 각각을 단독으로 사용할 때보다 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과가 우수하다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

즉, 본 발명의 목적은 피부의 주름을 개선시키거나, 피부에 주름이 생성되는 것을 방어 또는 지연시키는 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명에 따르면, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물로 이루어진 추출물을 사용하여 제조한 화장료는 섬유아세포의 증식효과, 표피세포의 증식효과, 콜라겐 생성 촉진효과, 주름 개선 효과가 우수한 화장료가 제공된다.

본 발명에서 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물의 재료로는 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초의 뿌리, 줄기, 잎을 모두 사용할 수 있으며, 뿌리를 사용하는 것이 효과 면에서 가장 바람직하다.

천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출 용매로서는 물, 에탄올, 메탄올, 아세톤, 프로판올, 1,3-부틸렌글리콜을 단독 또는 혼합 사용할 수 있으며, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 원료 kg당 10 내지 20ℓ를 가하고, 35℃ 내지 45℃에서 8시간 추출하는 것이 바람직하다. 이 때, 냉각콘덴서가 달린 추출기 등에서 추출을 실시할 수 있다.

추출이 완료되면 1차 여과하고, 실온(20 내지 25℃)에서 7일간 방치하여 숙성시킨다. 이러한 숙성을 통하여 유효성분의 용출이 용이해지므로, 숙성을 거치지 않은 경우보다 더욱 우수한 주름제거 효과를 얻을 수 있게 되는데, 7일이 초과되면 한약 냄새가 없어지나 유효성분 함량이 더 이상 증가되지 않으며, 7일 미만이면 한약냄새가 많이 남아있을 뿐 아니라 유효 성분 함량도 낮아 바람직하지 못하다. 숙성된 추출물은 다시 여과 후 농축한다. 농축은 45 내지 50℃의 온도, 25 내지 35cmHg의 감압조건에서 실시하는 것이 바람직한데, 이 범위에서 농축하고자 하는 유효성분이 다량 배출되기 때문이다. 또한, 농축은 용매가 완전히 제거된 점 조성있는 암갈색 또는 흑갈색 액체가 될 때까지 실시한다.

본 발명에 의한 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물은 우수한 섬유아세포의 증식효과, 표피세포의 증식효과, 콜라겐 생성 촉진효과, 주름 개선 효과제로서, 주름개선 효과가 뛰어나다. 따라서, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스 팩 등 주름개선 관련 화장료 조성물에 모두 첨가할 수 있으며, 그 양은 화장료의 건조중량에 대하여 0.0005 ∼ 20 중량% 정도로 한다. 20 중량% 초과 배합 시에는 주름개선 효과 증가 및 안정성 면에서 경제적이지 못하며, 0.0005 중량% 미만으로 배합 시에는 주름개선 효과가 거의 없다.

이하, 실시 예에 의해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 이들 실시 예는 본 발명 의 예시적인 기재일 뿐이며 본 발명의 범위가 이들 실시 예에 국한되는 것은 아니다.

본 발명에 의한 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초추출물은 각종 피부손상의 방지 및 개선효과가 탁월하며 안전성면에서도 매우 우수하다. 또한, 상술한 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초추출물은 피부화장료에 적용이 가능하고 화장료에 함유시 우수한 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과, 면역증강효과 및 항산화효과를 나타낸다.

(실험예 1) 섬유아세포의 증식효과

인간으로부터 직접 채취하거나 혹은 상업적으로 구입한 인간의 섬유아세포에 하기 표 1의 조성물을 처리하여 섬유아세포의 증식 효과를 측정하였다.

한방추출물의 함량

성 분	함 량	비 고
천 궁	20중량%
고 본	20중량%
갈 근	20중량%
대 황	20중량%
가 자	20중량%
생지황	20중량%
어성초	20중량%

즉, 2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media)배지가 함유된 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 사람의 섬유아세포를 5,000세포/well가 되도록 넣고, 70∼80% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 다음, 0.01% 및 0.001%의 농도의 상기 표 1의 조성물을 3일 동안 하루에 2회 처리한 후 세포의 수를 측정하여, 섬유아세포의 증식효과를 관찰하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 하였다. 그 결과는 표 2에 나타내었다.

섬유아세포의 증식효과

물질	증식효과(%)	비고
조성물 0.01%	87
조성물 0.001%	44
대조군	0

표 2로부터, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물을 함유하는 본 발명의 조성물은 섬유아세포의 증식효과가 있음을 알 수 있다.

(실험예 2) 표피세포의 증식효과

2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media)배지가 함유된 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 사람의 표피 세포를 5,000세포/well가 되도록 넣고, 70~80% 정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 다음, 0.01% 및 0.001%의 농도의 상기 표 1의 조성물을 3일 동안 하루에 2회 처리한 후 세포의 수를 측정하여, 표피세포의 증식효과를 관찰하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군을 대조군으로 하였다. 그 결과는 표 3에 나타내었다.

표피세포의 증식효과

물질	증식효과(%)	비고
조성물 0.01%	79
조성물 0.001%	43
대조군	0

표 3으로부터, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물을 함유하는 본 발명의 조성물은 표피세포의 증식효과가 있음을 알 수 있다.

[시험예 3]

2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media)배지가 함유된 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000세포/well가 되도록 넣고, 70~80%정도 자랄 때까지 배양하였다. 그 다음, 0.01% 및 0.001%의 농도의 상기 표 1의 조성물을 1일 동안 처리한 후, 세포배양액을 채위하였다. 채위한 세포배양액을 상업적으로 이용 가능한 콜라겐 단백질 측정기구(일본 Takara Shuzo Co., Ltd. Catalog #: MK101)를 이용하여 콜라겐 생성정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라겐 항체가 균일하게 도포된 96-well plate에 채위된 세포 배양액을 넣고, 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. 3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-well plate에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후 발색 유발물질을 넣어 실온에서 15분간 발색을 유발시키고, 다시 1M 황산을 넣어 발색을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띄며 반응의 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타난다. 노란색을 뛴 96-well plate를 흡광계를 이용하여 450nm에서 측정하고, 하기 수학식 1에 의해 콜라겐의 합성정도를 계산하였다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군의 채위된 세포배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다.

콜라겐 생성 촉진효과

물질	생성율(%)	비고
조성물 0.01%	96
조성물 0.001%	52
대조군	0

표 4로부터, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물을 함유하는 본 발명의 조성물은 콜라겐 생성 촉진효과가 있음을 알 수 있다.

[시험예 4] 동물실험을 통한 주름제거 효과

무모 생쥐(hairless mouse) 40마리에 자외선을 8주 동안 매일 1회(UVB 70mJ/㎠)씩 조사한 후, 각 군당 20마리씩 2군으로 나누었다. 그 다음, 하기 표 5의 실시예 1 및 비교예 1~6의 조성물을 각각 1달 동안 매일 100㎕씩 등부위에 도포한 후, 생검하여 조직학적으로 표피 세포의 증식, 콜라겐의 형성, 콜라겐 분해 효소인 콜라게네이즈의 함량을 측정하였다. 그리고, 실리콘을 이용하여 등부위의 레플리카(replica)를 뜬 후 비지오메타(visiometer; SV500, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 주름의 깊이를 측정하여 주름의 개선정도를 평가하였다.

에센스

성분	실시예1	비교예1	비교예2	비교예3	비교예4	비교예5	비교예6	비교예7	비교예8	비고
1. 정제수	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100
2. 글리세린	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
3. 히아루론산추출물	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
4. 베타글루칸	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
5. 카보머	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
6. 천궁추출물	0.5	-	0.5	-	-	-	-	-	-
7. 고본추출물	0.5	-	-	0.5	-	-	-	-	-
8. 갈근추출물	0.5	-	-	-	0.5	-	-	-	-
9. 대황추출물	0.5	-	-	-	-	0.5	-	-	-
10. 가자추출물	0.5	-	-	-	-	-	0.5	-	-
11. 생지황추출물	0.5	-	-	-	-	-	-	0.5	-
12. 어성초추출물	0.5	-	-	-	-	-	-	-	0.5
13. 유동파라핀	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
14. 스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
15. 세테아릴글루코사이드	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
16. 르비탄세스퀴올레이트	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
17. 세테아릴알코올	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8	0.8
18. 방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
19. 향	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
20. 트리에탄올아민	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1

〈제조방법〉

1) 원료 1~5를 혼합하여 70℃에서 용해하였다.

2) 원료 6~19을 70℃에서 용해하였다.

3) 상기 2)를 상기 1)에 첨가한 후, 호모믹서로 교반하여 유화하고, 원료 19를 첨가하여 점증하였다.

4) 기포를 제거한 후, 실온으로 냉각시켜 에센스를 제조하였다.

〈결과〉

① 표피 두께 증가

무모 생쥐의 등 부위를 생검하여 헤마톡실린(hematoxylin)과 에오신(eosin)으로 염색하였다. 그 다음, 광학 현미경을 이용하여 표피의 두께 변화를 측정하였다.

② 콜라겐 생성율

콜라겐 생성율

도포군	실시예1	비교예1	비교예2	비교예3	비교예4	비교예5	비교예6	비고
콜라겐 생성율(%)	90	0	30	15	10	20	7

③ 콜라겐 분해 효소 생성 억제율

콜라겐 분해 효소 생성 억제율

도포군	실시예1	비교예1	비교예2	비교예3	비교예4	비교예5	비교예6	비고
콜라겐분해효소생성억제율(%)	80	0	28	10	10	25	5

④ 주름 개선 효과

먼저, 무모 생쥐의 등 부위에 실플로(flexico)를 이용하여 피부의 레플리카를 뜬 후, 화상분석을

하여 주름의 깊이를 측정하고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.

그리고, 무모 생쥐의 등 부위에 실시예 1의 조성물(A)과 비교예 1(B)의 조성물을 1개월 동안 도포한 후, 주름의 개선효과를 관찰하였다.

이상의 결과로부터, 본 발명의 조성물은 표피세포의 두께를 유의적으로 증가시킬 수 있고, 콜라겐 분해효소의 생성은 억제하고, 콜라겐의 생성을 증가시킬 수 있으며, 주름의 개선에 효과적이라는 것을 알 수 있다.

[시험예 5] 인체 실험을 통한 주름 개선 효과 측정

하기 표 6의 실시예 2 및 비교예 9~16에서 제조된 크림에 대한 피부 주름 개선 효과를 비교하였다. 즉, 피부의 주름 개선 효과는 30~40대 여성 180명을 대상으로 9개조로 나눈 다음, 각조에 실시예 2와 비교예 9~16의 크림을 주고 매일 1회 1개월간 도포하게 하였다.

1개월이 지난 다음 실리콘을 이용하여 레플리카를 뜨고 비지오메타(visiometer: SV500,

Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용한 화상 분석을 통하여 주름의 깊이를 측정하였다. 그리고, 피부 탄력을 측정할 수 있는 큐토메타(cutometer; SEM474, Courage+ Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 얼굴 부위의 탄력을 측정하여 도포하기 전과 비교하였으며, 코네오메타(coneometer; CM820 Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)를 이용하여 보습력을, 또한 설문을 이용하여 매끄러움, 화장할 때 화장이 잘 받는지 등의 여부를 판별하여 그 결과를 표 7에 나타내었다.

크림

성분	실시예2	비교예9	비교예10	비교예11	비교예12	비교예13	비교예14	비교예15	비교예16	비고
1. 정제수	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100
2. 글리세린	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0
3. 부틸렌글리콜	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
4. 히아루론산추출물	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
5. 베타글루칸	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0	7.0
6. 카보머	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
7. 천궁추출물	0.5	-	0.5	-	-	-	-	-	-
8. 고본추출물	0.5	-	-	0.5	-	-	-	-	-
9. 갈근추출물	0.5	-	-	-	0.5	-	-	-	-
10. 대황추출물	0.5	-	-	-	-	0.5	-	-	-
11. 가자추출물	0.5	-	-	-	-	-	0.5	-	-
12. 생지황추출물	0.5	-	-	-	-	-	-	0.5	-
13. 어성초추출물	0.5	-	-	-	-	-	-	-	0.5
14. 카프릴 카프릭트리글리세라이드	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0
15. 스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
16. 세테아릴글루코사이드	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
17. 소르비탄세스퀴올레이트	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
18. 세테아릴알코올	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
19. 방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
20. 향	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
21. 트리에탄올아민	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1

〈제조방법〉

1) 원료 1~6을 혼합하여 70℃에서 용해하였다.

2) 원료 7~20을 70℃에서 용해하였다.

3) 상기 2)를 상기 1)에 첨가한 후, 호모믹서로 교반하여 유화하고, 원료 21를 첨가하여 점증하였다.

4) 기포를 제거한 후, 실온으로 냉각시키고 크림을 제조하였다.

설문을 이용하여 매끄러움, 화장할 때 화장이 잘 받는지 등의 여부 판별 결과

사용 1개월 후 임상결과	실시예 2	비교예 7	비교예 8	비교예 9	비교예10	비교예11	비교예12	비교예13	비교예14	비교예16	비고
주름감소(%)	91	9	31	16	16	21	16	14	11	12
피부탄력개선도(%)	84	8	36	10	9	12	13	11	9	5
보습력증가율(%)	86	31	41	42	26	36	29	31	22	21
매끄러움(%)	78	26	32	25	28	18	29	31	16	18
화장의 잘 받음 정도(%)	83	36	25	37	25	28	29	28	22	20

Claims (7)

1. 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물을 함유하는 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과가 우수한 화장료.
2. 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물의 일정한 분율로 이루어진 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 화장료 조성물.
3. 제1항에 있어서, 화장료 총량에 대하여 천궁 0.0001-10중량%, 고본 0.0001- 10중량%, 갈근 0.0001-30중량%, 대황 0.0001-30중량%, 가자 0.0001-10중량%, 생지황 0.0001-10중량%, 어성초 추출물 0.0001-10중량% 양으로 함유되어 있음을 특징으로 하는 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 화장료 조성물.
4. 제1 항에 있어서, 유연화장수(스킨), 영양화장수(밀크로숀), 영양크림, 맛사지크림, 영양에센스 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 화장료 조성물.
5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초 추출물은 물에 대한 60∼100% 에탄올로 추출한 것을 특징으로 하는 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과 화장료 조성물.

   [
6. 청구항 6] 제5항에 있어서, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초추출물이 친수성 용매 또는 비친수성 용매로 추출하여 얻어진 것임을 특징으로 하는 피부 주름의 개선 및 주름의 생성 억제 효과 화장료.
7. 제6항에 있어서, 천궁, 고본, 갈근, 대황, 가자, 생지황, 어성초추출물이 친수성 용매 또는 비친수성 용매로 추출된 것의 배합물임을 특징으로 하는 화장료.