KR101059471B1 - 피부 노화 방지용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 생약 추출 혼합물을 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로 보다 구체적으로, 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물(이하 '가감천금단'이라 칭함)과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물(이하 '가감경옥고'이라 칭함)과 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물(이하 '가감홍옥산'이라 칭함) 을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 피부에 안전하고, 세포증식 및 대사 활성 증진, 프리 라디칼 소거, 콜라겐 생산촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선을 통하여 피부 노화를 방지 및 개선한다.

Description

피부 노화 방지용 화장료 조성물{Cosmetic composition for preventing skin aging}

본 발명은 생약 추출 혼합물을 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로 보다 구체적으로, 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물(이하 '가감천금단'이라 칭함)과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물(이하 '가감경옥고'이라 칭함)과 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물(이하 '가감홍옥산'이라 칭함) 을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.

인체의 피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 부위로서, 과도한 자외선이나 오염 물질 등에 노출되면 활성산소나 프리라디칼이 생성되며, 생성된 활성산소나 프리라디칼에 의해 홍반, 부종, 뾰루지, 따끔거림, 가려움 등의 피부 자극 및 염증반응이 유발된다. 이러한 원인들에 의해 생성된 피부 트러블은 미관상 문제가 될 뿐만 아니라, 염증 반응 과정에서 생성되는 물질들이 부수적으로 피부의 색소 침착을 일으키고, 피부 탄력 섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부 주름의 증가에까지 영향을 미치는 등 피부 노화에까지 이르는 것으로 알려져 있다. 따라서 화장품에서 가장 관심을 갖고 연구하는 분야 중 하나가 어떻게 피부 노화를 지연할 수 있을까 하는 것이다. 피부 노화에 따라 외관상 최종적으로 나타나는 현상은 주름의 형성, 피부 탄력 저하, 노인성 반점의 형성 등이 있는데, 특히 주름 형성이 가장 대표적인 현상으로 받아들여지고 있다.

피부의 노화는 크게 내인적 노화(intrinsic aging)와 외인적 노화(extrinsic aging)로 대별된다(Cosmetics & Toiletories, 111:31-37(1996)). 내인적 노화는 나이가 듦에 따라 피부의 생리적 기능이 점차 저하되어 자연적으로 나타나는 노화 현

상으로 임상학적으로 탄력이 감소하고, 피부결이 거칠어지며, 깊은 주름이 생기며 색소가 침착되는 특징이 있다(Arch Dermatol., 130:87-95(1994)). 외인적 노화는 자외선, 활성 산소종(reactive oxygen species) 및 스트레스 등의 외인적 요인에 의해 발생하는 노화 현상을 말한다. 이러한 요인들에 의해 피부의 노화가 급속히 진행되며, 그 결과 피부 표면에 거친 주름이 생성되고 탄력이 현저히 감소하게 된다.(Physiology Of The Skin , Allured Publishing Corporation , Peter T. Pugliese.MD, p61 -72)

피부의 노화 기작을 규명하기 위한 여러 연구들이 진행되어 여러 가지 피부 노화의 원인들이 밝혀졌다. 피부가 온도의 변화, 습도의 저하 또는 바람 등에 의해 건조하게 되면 외부에 대한 방어벽으로서의 피부 생리 활성이 저하되어 노화가 촉진된다. 또한, 유해 활성산소종 또는 자유 라디칼에 피부가 노출되면 체내의 산화 작용에 의해 과산화 지질이 생성되고 피부를 구성하는 여러 단백질들의 변형을 유발하게 된다. 한편 피부 진피의 대부분(피부 전체 건조 중량의 약 70-80%)을 차지하는 피부의 주요 구조적 성분인 콜라겐과 엘라스틴은 자연적 또는 외부 자극에 의해 구조가 변성되거나 생합성량이 감소하게 되는데 이로 인해 피부 노화가 가속화된다.

피부의 구조에 따라 피부 노화 원인을 좀 더 구체적으로 살펴보면, 피부는 크게 표피와 진피로 나뉘는데, 표피에서는 각질 형성 세포의 turn-over의 감소로 각질층의 누적과 이로 인해 각질층의 두꺼워지고, 수분 함유 능력이 감소되고, 각질이 경화되어 주름이 발생하게 된다.

또한, 표피와 진피의 경계부위는 표피세포 지지, 부착, 영양물질의 이동, 표피 분화의 조절 등에 관여하는데, 각종 노화 요인 특히, UV 에 인하여 콜라겐 IV, VII이 감소되어 표피, 진피 지지기능이 감소되고, 선별 투과 기능이 약화되어 해로운 성분이 쉽게 진피에 영향을 미치게 되어 주름이 생성된다. (Keene, J. Cell Biol., 104, p611 -621, 1987)

또한, 진피는 표피의 아래에 있는 결합조직으로 이루어지는 조직으로 표피 세포인 케라티노사이트처럼 치밀하게 채워져 있지 않고 세포외 공간이 많으며 세포외 간질(extracellular matrix)이라 불리는 거대 분자의 망상 구조에 의해 채워져 있다. 이 세포외 간질은 진피 내의 섬유아세포에서 만들어지며, 콜라겐, 엘라스틴 등의 섬유상 단백질과 히알루론산 등의 산성 뮤코다당이라 불리는 다당류로 이루어져 있다. 세포외 간질은 피부의 탄력성, 신진대사, 생기 등에 직접적으로 관여하고 있다. 좀 더 자세히 설명하면, 산성 무코다당은, 대량의 물을 이의 분자내에 유지하여 겔상을 나타내고, 이 겔내의 물이 영양분, 대사산물, 호르몬 등을 혈관으로부터 조직 중의 세포까지 침투시키는 작용을 담당하고 있다. 따라서, 세포 외 간질에 있어서의 산성 무코다당의 생산이 촉진되면, 피부가 싱싱하게 될 뿐만 아니라, 피 부의 신진 대사가 촉진되어, 피부 노화를 방지하는 것이 가능하게 된다. 또한, 섬유성 단백질은, 조직의 형태를 유지하거나, 피부에 탄성을 부여하는 등의 기능을 담당하고 있다. 따라서 세포외 간질에 있어서 섬유성 단백질의 생산이 촉진되면, 피부에 탄력을 주게 되어 주름 또는 잔주름이 억제된다. 이러한 세포외 간질을 생산하는 섬유아세포의 활성이 내적, 외적인 노화 요인, 특히, UV에 의해 저하되게 되면 콜라겐 생합성이 감소하고 변성된 엘라스틴이 증가하게 된다. 콜라겐과 신축성이 큰 엘라스틴 단백질은 섬유아세포에서 생성되는 주요 단백질로 피부 진피층에서 피부의 기계적 견고성, 조직의 결합력 및 탄력성 등에 관여한다(Journal of the american academy of dermatology, 21:610-613(1989)). 콜라겐은 연령이 증가할수록, 그리고 자외선에 노출이 많이 될수록 양적 감소를 보인다. 콜라겐은 형태와 구조적 특징에 따라서 분류되는데 이들 중에서, 가장 특징이 잘 알려진 것은 타입 I, II, III 그리고 IV이다. 콜라겐 타입 I과 III는 진피층의 세포간질의 구성성분을 이루고 콜라겐 타입 IV는 DEJ (Dermal Epidermal Junction)의 주요 구성물질이 된다. DEJ는 피부의 표피층과 진피층 사이에 위치하여 두 층간의 물질 투과와 수송을 조절해주며 인접한 피부세포의 분화를 조절하며 피부의 견고성을 유지시켜준다.이렇듯, 섬유아 세포의 감소 및 세포의 활성도 손상은 피부 노화 프로세스 중에 중요한 부분을 차지한다.

이러한 피부노화를 억제시키거나 진행 속도를 완화시키기 위하여, 레티놀, 레티노이드, 비타민 C, 플라보노이드 및 토코페롤 등의 여러 가지 피부 보호 성분 이 함유된 화장료 또는 피부 보호제가 개발되고 있다. 그러나 이와 같은 화장료 또는 피부 보호제는 최종적인 제형에 있어서 역가가 떨어져 그 효능이 경미하고, 피부 자극이 심한 문제점을 지니고 있다.

최근 들어서는 이러한 원료들의 피부 자극 문제 때문에 보다 안전하고 피부에 자극이 없는 천연 식물성 원료를 이용한 화장품 개발이 많이 이루어지고 있다. 특히, 국내에서는 천연 한방 원료를 이용한 화장품을 많이 개발하고 있는데 이러한 이유는 천연 한방 원료들이 오래전부터 민간에서 사용되어 오면서 안전성, 유효성등이 이미 확보되어 있어 화장품 원료로 사용하는데 큰 문제점이 없는 것으로 인식되고 있기 때문이다.

이에 본 발명자들은 종래부터 생약으로 사용되어 오던 자연의 천연물을 대상으로 연구를 수행하였고, 그 결과 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향, 백강잠의 혼합 추출물과 인삼, 지황, 꿀 혼합추출물 및 행인, 과루근, 백봉령 혼합 추출물로 이루어진 생약 혼합물에 세포증식 및 대사 활성 증진, 프리 라디칼 소거, 콜라겐 생산촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선효과가 뛰어나다는 것을 발견하였다.

종래 선행특허들에 있어서, 백지의 경우 보습 및 미백용(한국 특허 공개 2006-92179), 노폐물 제거용(한국 특허 공개 2002-93655), 동과인의 경우 노폐물 제거용(한국 특허 공개 2002-93655), 둥글레의 경우 보습용(한국 특허 공개 1997- 32840), 토과근의 경우 보습용(한국 특허 공개 2002-93655), 감송향의 경우 보습 및 미백용(한국 특허 공개 2006-92179), 미백용(한국 특허 공개 2000-20728, 한국 특허 공개 2003-21811), 과루근의 경우 노폐물 제거용(한국 특허 공개 2002-93655), 미용(1995-7824)으로 사용된 예는 있으나 노화 방지용으로 사용된 예가 없었다. 뿐만 아니라 본 발명의 생약 성분인 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향, 백강잠과 인삼, 지황, 꿀, 행인, 과루근, 백봉령을 모두 함유하는 피부 노화 방지용 화장물 조성물에 대해서는 언급된 적이 없었다.

이에 본 발명자들은 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 혼합 추출물(가감천금단)과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 혼합추출물(가감경옥고)과 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 혼합 추출물(가감홍옥산)이 상술한 바와 같이 주름이 없는 생생한 피부를 유지하는데 있어 가장 중요한 역할을 담당하고 있는 세포외 간질을 생합성하는 섬유아 세포의 증식과 대사를 원활히 함은 물론, 생합성을 촉진하는 효과가 있으며 프리라디칼 저해능이 뛰어나서 주름, 잔주름, 피부의 거칠어짐 등으로 나타나는 피부 노화를 근본적으로 예방할 뿐만 아니라 안정성에도 문제가 없음을 발견하였다. 아울러, 세가지 혼합추출물을 혼합하였을 때 시너지 효과를 일으켜 피부 노화 예방 및 개선에 보다 탁월한 효과를 발휘함을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 본 발명은 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 본 발명은 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물과 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물 모두를 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 세포증식 및 대사 활성 효과를 가짐을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 프리 라디칼 소거효과를 가짐을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 콜라겐 생산촉진 효과를 가짐을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 목적은 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물과 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물의 제조방법을 제공하고자 하는 것이다.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 세 가지 생약 추출 혼합물 모두를 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

즉, 본 발명은 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 생약 추출 혼합물과 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 생약 추출 혼합물 모두를 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명은 상기 세 가지 생약 추출 혼합 추출물 모두를 동시에 적용함으로써 시너지 효과를 보인다. 본 발명에서의 용어 "시너지"라 함은 서로 다른 생약 추출 혼합물 각각이 가지는 효과를 넘어서, 각각의 효과를 합한 것 이상의 효과를 내는 것으로 전체적 효과에 기여하는 각 기능의 공동작용이나 협동을 의미한다. 본 발명의 실험예 4 내지 7에서도 보여주고 있듯이, 생약 추출 혼합물을 각각 적용한 것에 비하여 세가지 생약 추출 혼합물을 동시에 적용하였을 때, 세포 대사 활성, 세포 증식, 콜라겐 합성 면에서 각각의 효과를 합한 것 이상의 피부 노화 방지, 개선 및 치료 효과를 나타낸다.

본 발명에서 사용된 천궁(Cnidium officinale Makino)은 다년생 초본으로 높이가 40-70 cm이고, 식물체에 향기가 나는 특징을 가지고 있다. 상기 천궁의 뿌리는 불규칙한 결절상의 덩어리로서 직경이 2-7 ㎝이며 표면은 황갈색으로 거친 주름이 있고 평행으로 융기한 윤절이 여러 개 있으며 정상부에는 오목한 원형의 줄기 흔적이 있다. 그 단면은 황백색 혹은 회황색인데 황갈색의 유실이 산재해 있고 형성층은 물결 모양의 황문을 이룬다. 천궁의 뿌리는 한방에서 보혈, 강장, 진정 및 진통 등을 목표로 냉증, 빈혈 및 월경 장애 등 각종 부인병 질환에 쓰이고 있다. 천궁은 멜라노사이트 자극 호르몬의 활성을 저해하며, 이러한 특성은 결과적으로 티로시나아제의 생성을 억제하여 멜라닌 생성을 억제함으로써 색소 침착을 방지하며 미백 효과를 나타낸다. 미나리과의 여러해살이풀로 중국이 원산이며 약용 작물로 재배한다. 높이 30 ~60cm이며, 성분으로는 크니딜라이드(cnidilide), 리구스틸라이드(ligustilide), 네오크니딜라이드 (neocnidilide), 부틸프탈라이드 (butylphthalide), 세다노닉산(sedanonic acid) 등이 알려져 있다. 천궁은 한방에서는 그 뿌리줄기를 건조하여 사용하고, 자궁 진정작용과 혈압조절작용, 항균작용, 피부사상균에 대한 억제 작용, 두통, 빈혈, 불임, 월경불순, 냉증 등의 부인병에 사용하였다. 민간에서 좀 예방을 위해 옷장에 넣어두었다(정보섭, 신민교, 향약 대사전, pp418, 1998).

본 발명에서 사용된 신이(Magnolia denudata Desrousseaux)는 낙엽성 관목으로 중국 남방 각지의 정원에서 재배하며 야생은 적다. 목련과(Magnoliaceae)에 속하며 봄철 꽃봉오리가 벌어지기 전에 따서 햇볕에 말려 이용한다. 기원식물은 Magnolia denudata로 이것 외에도 한국 생약 규격집에는 magnolia kobus, Magnolia salicifolia Maxim.이 있으며 중국약전에는 Magnolia biondii, Magnolia sprengeri, Magnolia liliflora, Magnolia faragesii로 규정되어 있다. 신이는 전 통적으로 풍으로 속골이 아픈 것을 낫게 하며 얼굴의 주근깨를 없애고 코가 메는 것, 콧물이 흐르는 것 등을 낫게 하며 눈을 밝게 하며 수염과 머리털을 나게 한다고 알려져 있다(본초강목). 또한 신이와 관련되어서 피부 미백효과 및 항염 효과를 가지는 화장료 조성물(일본 특개평 5-320034), 피부병치료제(일본 특개평 5-246874), 소취제(일본 특개평 5-212099) 등의 연구가 보고되어 있으나 본 발명과는 완전히 구별된다. 기존의 신이 성분 동정 연구에 의하면 마그놀롤(Magnolol), 시린긴(Syringin), 호노키올(Honokiol), 유게놀(Eugenol), 티라민(Thyramine) 등의 물질이 보고되어 있다.

본 발명에서 사용된 백지(Angelica Dahuricae Radix)는 산형과(Umbelliferae) 식물인 구릿대를 기원으로 하며 다년생 초본으로 풀이 무성한 저습지나 관목 숲 또는 강가에서 자란다. 가을철에 근부를 채취하여 햇볕에 말려 사용한다. 기존의 성분 동정 연구에 의하면 쿠마린(Cumarins), 비악-안겔리신(Byak-angelicin), 오신(Oscine), 강초톡신(Xangthotoxin), (-)-노카데켄네틴((-)-Nokadekenetin)등의 물질이 알려져 있다. 백지는 전통적으로 열이나 풍으로 머리가 아픈 것을 치료한다고 알려져 있으며 또한 풍증으로 어지러운 것을 낫게 하는데 알약을 만들어 복용한다(본초강목). 한방에서는 진통, 지혈, 진정약으로 사용한다. 백지와 관련된 연구를 살펴보면 피지분비 촉진에 의한 피부염 치료(일본 특개평 9-176030), 인체 안정성이 뛰어난 발모 억제제(일본 특개평 10-139639), 온욕 효과를 높인 입욕제(일본 특개평 06-206814) 등이 알려져 있고, 동의보감과 신농본초경에 상기 백지를 고약과 분으로 만들어 얼굴에 바르면 따뜻한 기운을 얼굴 피부로 보내 혈액순환을 촉진하여 안색을 기름지게 윤택하게 하며, 얼굴에 기미와 주근깨, 흉터를 없앤다고 기록하고 있다.

본 발명에서 사용된 감송향(Nardostachys chinensis Batal)은 다년생 초본으로 고산의 초지나 초원의 도랑가에서 자라며, 봄과 가을에 채취하여 지하경이나 뿌리를 이용한다. 감송향은 마타리과(valerianaceae)에 속하며 우리나라에서의 기원식물은 Nardostachysis chinensis Batal.로 중국에서는 이것 이외에도 Nardostachysis jatamansi로 규정되어 있다. 감송향은 전통적으로 완복창통, 구토, 식욕부진, 치통 등의 각종 한방약재로 사용되어 왔다(참조: 본초강목). 또한 감송향과 관련되어서 피부 건조개선 및 아름다운 피부유지를 위한 화장료 조성물(참조: 일본 특개평 8-259423), 피부병 치료제(참조: 일본 특개평 5-246874) 등의 연구가 보고되어 있다. 그러나, 라디컬 소거 효과에 대해서는 보고되지 않았다. 기존의 감송향 성분 동정연구에 의하면 에틸-β-D-글루코피라노사이드, 나르도스타친(Nardostachin),칸숀(Kanshone), 나르도퓨란(Nardofuran) 등의 화합물이 보고되어 있다.

본 발명에서 사용된 인삼(Panax ginseng C. A. Mey.)은 다년성 초본으로서, 진세노사이드(Ginsenoside)류, 다마나란(Damanarane), 올레노익산(Oleanolic acid), 파낙시놀(Panaxynol) 등의 성분을 다량함유하고 있어 피부미용의 측면에서 볼 때 신진대사촉진, 피부노화방지, 이상세포억제, 혈액순환촉진 등의 효과를 나타낸다. 원기 부족으로 인한 신체허약, 권태, 피로, 땀이 많은 증상, 비위 기능의 감퇴로 인해 나타나는 식욕부진, 구토, 설사에 활용된다. 폐 기능의 약화로 인해 호흡이 가쁜 경우에도 활용되며, 또한 진액을 생성있어서 진액 손상으로 기운이 없으면서 갈증이 있는 경우 및 소갈증에 널리 쓰인다. 안신(安神)작용이 있어서 꿈이 많고 잠을 이루지 못하면서 가슴이 뒤고 잘 놀며, 정신력을 증강시키고 사고력과 영적활동을 높인다. 기운이 허약해서 혈허 증상을 일으키는 사람에게는 기혈(氣血)을 보해 준다. 그 밖에도 신기능 허약으로 인하여 음위증(陰 症:발기부전)을 일으킬 때 강장효과가 있다.

본 발명에서 사용된 백복령(Poria cocas Wolf.)은 담자균류 민주름목 구멍장이버섯과의 버섯으로서 옛날부터 한방 재료로 이용되어 온 약용버섯이다. 약용으로 하는 것은 이 버섯이 땅 속의 소나무 뿌리에 만드는 균핵이며, 자실체는 균핵이 지표에 노출되었을 때 균핵의 표면에 드물게 형성된다. 균핵은 지름 10∼30㎝의 감자모양 또는 타원형 덩어리로, 표면은 암갈색이고, 주름이 많은 단단한 껍질로 덮여 있다. 육질(肉質)은 반쯤 마른 치즈와 비슷하고, 빛깔이 희다. 조직을 현미경으로 보면, 균사 조각에 섞여 광선을 심하게 굴절시키는 과립체(顆粒體)를 많이 볼 수가 있다. 이것은 균사의 변형물로, 요오드화칼륨용액에서 짙은 적갈색으로 변색되는 덱스트린반응을 나타낸다. 복령의 자실체는 균핵 위에 평평하게 퍼지고, 깊이 2∼20㎜, 지름 0.5∼2㎜의 관공(管孔)이 표면에 배열되어 있을 뿐, 버섯모양을 나타내 지 않으며, 색은 거의 흰색이다. 이뇨제·진정제·강장제로서, 부종(浮腫)·정신불안·동계(動悸)·소화불량 등의 치료에 사용된다. 또한, 피부 미용측면에서 해독작용, 주근깨예방, 피부보호(안정)의 효과가 있으며, 또 최근에는 함유성분의 하나로 다당류인 파키만에 항종양성작용(抗腫瘍性作用)이 있다는 발표도 있어, 약용효과가 한층 기대되고 있다.

본 발명에서 사용된 천궁(Cnidium officinale Makino)은 혈관확장 작용을 한다고 하며 항염증, 해열, 진통치료 작용 등이 보고되고 있으며 한방에서 보혈, 강장, 진정, 진통치료 등을 목적으로 사용되고 있다.

본 발명에서 사용된 동과인(Benincase hispida cogniaux)은 일명 지지이며 덩굴에 열매가 맺어 처음에는 청옥색이고 서리를 맞으면 분을 바른 것 같이 희어지기 때무에 백동과라고도 한다. 기부(肌膚)를 두텁게 하고 얼굴색을 아름답게 하며 검은 주근깨를 없애니 기름을 만들어 얼굴에 바르면 좋다.

본 발명에서 사용된 행인(Prunus armeniaca L.)은 기미를 없애주고, 만청자는 죽은깨를 없애주고 주름진 살을 펴지게 한다.

본 발명에서 사용된 꿀은 꿀벌이 여러 식물의 꽃으로부터 수집한 화밀과 화분을 그들의 식량으로 전환하여 저장한 것으로, 2개의 단당류, 즉 글루코오 스(glucose)와 프룩토오스(fructose), 탄수화물, 무기질, 식물성 색소, 효소 및 화분 등을 함유하고 있다. 꿀의 성분 중 80% 이상은 글루코오스(glucose), 프룩토오스(fructose) 등의 단당류이다. 이 성분은 흡습성이 매우 뛰어나 피부에서 수분막을 형성하여 지속적인 보습효과를 가진다. 꿀 추출물은 이러한 성분이 다량 포함되어 있어 강력한 보습효과를 가진다.

본 발명에서 사용된 둥글레(Polygonatum odoratum(MILLER) var. pluriflorum Ohwi)는 외떡잎식물 백합목 백합과의 여러해살이풀로 이명으로 맥도둥굴레, 애기둥굴레, 좀둥굴레, 제주둥굴레 등이 있으며 약재명은 옥죽이다. 산과 들에서 자란다. 굵은 육질의 뿌리줄기는 옆으로 벋고 줄기는 6개의 능각(稜角)이 있으며 끝이 비스듬히 처진다. 높이는 30∼60cm이다. 잎은 어긋나고 한쪽으로 치우쳐서 퍼진다. 길이 5∼10cm, 나비 2∼5cm로 긴 타원형이고 잎자루가 없다. 6∼7월에 길이 15∼20mm의 녹색빛을 띤 흰색 꽃이 1∼2개씩 잎겨드랑이에 달리며, 작은꽃대는 밑부분에서 서로 합쳐진다. 수술은 6개이고 통부(筒部) 위쪽에 붙으며 수술대에 잔 돌기가 있다. 꽃밥은 길이 4mm로서 수술대의 길이와 거의 같다. 열매는 장과로 둥글고 9∼10월에 검게 익는다. 봄철에 어린 잎과 뿌리줄기를 식용한다. 생약의 위유는 뿌리줄기를 건조시킨 것이며, 한방에서는 뿌리줄기를 번갈·당뇨병·심장쇠약 등의 치료에 사용한다. 한국·일본·중국에 분포한다. 잎 뒷면에 유리조각 같은 돌기가 있고 꽃의 길이가 2∼2.5cm인 것을 산둥굴레(var. thunbergii), 잎 뒷면 맥 위에 잔 돌기가 많고 꽃이 1∼4개씩 달리는 것을 큰둥굴레(var. maximowiczii), 잎은 길이 16cm, 나비 5cm 정도이고 꽃이 4개씩 달리는 것을 맥도둥굴레(P. koreanum), 전체가 크고 잎 뒷면에 털이 있으며 꽃이 2∼5개씩 달리는 것을 왕둥굴레(P. robustum)라고 한다.

본 발명에서 사용된 과루근(Prunus armeniaca L.)은 하늘타리뿌리라고도 하는 것으로, 일명 천화분(千花粉), 우명(又名), 천과(天瓜)라고도 하며 손과 얼굴의 주름을 없애며 토혈, 사혈, 적백리를 치료하는데 쓴다.

본 발명에서 사용된 토과근(Thladiantha dubia Bunge)은 얼굴빛을 곱고 광택나게 하는 것이며, 행인은 기미를 없애준다.

본 발명에서 사용된 도인(Prunus persica)은 장미과(Rosaceae) 갈잎큰키나무 북숭아나무(Prunus persica (L.) B.)의 종자로 에물신(emulsion), 아미그달린(amygdalin), 리놀렌산(linolenic acid) 등이 함유되어 있다. 7 ~ 8월경 복숭아가 익었을 때 종자를 채집하여 단단한 씨껍질[種皮]을 깨고서 속에 들어 있는 자인을 꺼내어 주로 한약재로 쓴다. 계란모양을 한 편압(扁壓)된 작은 덩어리로서, 크기는 길이 1.2 ~ 2.0 cm, 너비 0.6 ~ 1.2 cm, 두께 0.3 ~ 0.7 cm이며, 적갈색의 얇은 껍질에 싸여 있고 그 속은 희다. 맛은 약간 쓰고 물을 가해 부술때는 벤즈알데히드의 방향(芳香)을 발산한다. 도인은 한방에서는 악혈이 체내에 있을 때 생리통, 무월경, 산후의 복통 등에 사용되고 진통, 소염, 해독, 완화제로 타박상, 삔데, 내 출혈 등에 사용되고 있으며, 민간에서는 생선을 먹고 중독되었을 때 복숭아를 먹으면 해독이 되고, 기침을 멈추게 하는 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 이것이 포함되는 한방 처방에는 도핵승기탕 (桃核承氣湯), 대황모란피탕 (大黃牡丹皮湯), 계지복령환(桂枝茯笭丸) 등이 있다.

본 발명에서 사용된 목단피 (Paeonia moutan Sims, P.subfruticosa Makino)는 중국 서부 원산이며 신라시대 선덕여왕의 기록으로 미루어 중국에서 도입된 귀화식물로 추측된다. 내한성이 강하여 함경북도를 제외한 전국에 분포하지만, 충북 단양군, 제원군과 전남 화순군에서 많이 재배되고 있다. 다년생 낙엽관목으로 높이는 1 ~ 1.5 m이다. 잎은 어긋나고, 2 회 삼출복엽이며 난형 또는 광란형이고 정생하는 소엽은 항상 셋으로 갈라지며, 측생하는 소엽도 장상으로 3 열한다. 꽃은 단생하고 크기가 크며, 꽃받침잎은 5 장이고, 꽃잎은 5 장 혹은 더 많으며 재배품종의 대부분은 겹꽃이 있고 변이가 많으며 장미색을 비롯하여 홍, 자, 백색 모두 있다. 수술은 여러 개이고 수술대는 홍색이며, 암술은 2 ~ 5개로 암술머리는 엽상이고 화반은 술잔모양이다. 외면은 암갈색~암적색이고, 가로로 작은 타원형의 곁뿌리 자국이 있으며, 세로주름이 있다. 내면은 담회갈색~암적색이고 편평하며, 파절면은 거칠고 백~담홍색을 띤 분말성이다. 특이한 냄새가 나기 때문에 용이하게 식별 할 수 있으며, 맛은 약간 맵고 쓰다. 안쪽 면 및 꺽인 면에 백색의 결정(paeonol)이 붙어 있고 신선한 향기가 강하게 나는 것일수록 좋은 상품이다. 모란과의 관목으로 각지에서 꽃 보기나 약초로 심는다. 가을에 뿌리를 캐서 목부를 빼버리고 볕에 말 린다. 뿌리껍질과 목심에는 페오놀 배당체인 페오노시드, 페오놀리드, 페오니플로린, 안식향산, 페오놀 등이 있다. 진정 진경약으로 자율신경부조에 쓰이며, 해열, 진통, 항염제로 쓰이며, 월경불순, 허리아픔 관절통 등에 쓰인다. 목단피와 복숭아씨(도인)를 함께 쓰면 항염 작용과 혈액순화개선 효과가 높아진다. 모란과(Paeoniaceae) 여러해살이풀 모란(Paeonia suffruticosa A.)의 뿌리껍질로 페오놀(paeonol)과 그 배당체인 페오노시드(paeonoside), 페오놀리드(paeonolide), 페오니플로린(paeoniflorin) 등이 함유되어 있다. 이는 부인약의 필수약재로서, 진정작용, 열내림작용, 아픔멎이작용, 항염작용 및 피멎이작용을 하며 혈압강하작용이 보고된 바 있다. 목단피는 도인과 병행 사용될 때 소염효과와 혈액순환개선의 효과가 보여주는 것으로 알려져 있다. 한편, 화장료와 관련된 목단피의 효능은 소염작용에 의한 종기치료효과, 티로시네이즈활성 저해효과가 있으며, 혈액순환 촉진과 항염작용 및 수렴작용으로 피부노화를 예방하는 효능이 알려져 있다.

본 발명에서 사용된 세신(Aiasarum sieboldii Miquel)은 방울풀과(Aristolochiaceae)에 속하는 민족두리풀 및 족두리풀의 뿌리를 말린 것으로 흔히 족두리풀뿌리라고 일컫는다. 고르지 않게 구부러진 노끈모양을 이르고 길이 2~4cm, 지름 2~3mm의 황갈색의 마디가 진 뿌리줄기에 길이 약 15cm, 지름 약 1mm의 뿌리가 많이 달린다. 냄새가 있고 맛은 맵고 혀를 약간 마비시킨다. 그 성분으로는 리그난 화합물인 l-세사민, 1.9∼3.4%의 정유가 들어 있으며, 정유에는 메틸에우게놀, 팔미틴산, 사프롤, 피넨, 치네올, 에우카르본 등이 들어있다. 해열, 진정, 진 통, 항염, 항알레르기 작용, 국소마취작용 및 억균작용이 있다.

본 발명에서 사용된 백강잠(Bombyx mori Linn)은 누에나방과(Bombycidae 누에과)의 유충에 백강균(Beauveriabassiana (Bals.) Vuill.)을 접종시킨 유충의 건조충체로서, 이것을 말리거나 석회와 반죽하여 불에 구워 말린 것을 약으로 쓴다. 생약명은 백강잠 또는 강잠(Batyticatus Bombycis, Corpus Bombycis)으로 불려진다. 백강잠은 전통적으로 진경, 진정, 거풍, 소종에 이용되어 왔으며(원색천연물 대사전), 피부염치료제(일본 특개평 5-246874) 등으로 연구되었고, 성분에 대한 연구는 거의 진행되지 않았다.

본 발명에서 사용된 지황(Rehmannia glutinosa Libschitz var. purpurea Makino)은 현삼과에 딸린 여러해살이 약용식물로 그 뿌리를 한방에서 약재로 쓰는데, 날 것을 생지황, 말린 것을 건지황이라 하며, 숙지황 중 특히 술에 담갔다가 쪄서 말리기를 9번 되풀이하여 만든 것은 구지황이라 하여 그 약효를 으뜸으로 친다. 허리와 무릎이 시리고 아픈 증상이나 월경이상, 어지럼증 등을 치료하고 머리를 검게 하는 효능이 있다. 또한 피부각화를 예방, 피부를 부드럽게 각질세포를 연화해주며, 혈행 촉진의 특징을 가지고 있다.

본 발명에서 제공하는 ‘가감천금단’과 ‘가감경옥고’ 와 ‘가감홍옥산' 생약 추출 혼합물 내 각종 생약 성분은 당업계에 공지된 다양한 추출 방법을 이용 하여 수득할 수 있으며, 추출 용매의 종류 및 함량 등도 목적에 따라 임의 선정하여 사용할 수 있다.

바람직하게는 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜 , 함수 프로필렌글리콜, 함수 글리세린, 함수 에탄올, 함수 부틸렌글리콜로 구성된 그룹으로부터 선택된 한 가지 이상의 용매를 사용하여 수득할 수 있다. 또한, 이때 5-20배 부피량의 용매를 가하여 추출하는 것이 바람직하다.

한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출 용매 뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 생약 추출물을 수득할 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물 뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 생약 추출물에 포함되는 것이다.

본 발명의 생약 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.

생약 혼합 추출물을 통상적인 화장료 조성물에 첨가하여 피부노화방지용 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

생약 추출 혼합물의 함량은 각각의 화장료 조성물의 쓰임, 화장료 조성물의 제형 및 피부 상태에 따라서 적절히 선택해야 한다. 생약 추출 혼합물의 함량은 화장료 조성물의 총중량에 대하여 0.001-20 중량%, 바람직하게는 1-10 중량%의 양으로 함유될 수 있다. 상기 혼합물의 함량은 총 중량에 대하여 0.001 중량% 미만일 경우에는 본 발명에서 목적하는 효과를 기대하기가 힘들며, 20 중량% 초과일 경우에는 제형 안정성에 문제가 생길 수 있다.

본 발명에서 제공하는‘가감천금단’과 ‘가감경옥고’ 및 ‘가감홍옥산’은 동시에 적용시 단일 적용시보다 훨씬 우수한 세포증식 및 대사 활성화능을 보이는바, 세 가지 혼합 추출물을 동시에 적용하여 시너지 효과에 의한 피부 세포 활성을 극대화시킬 수 있다. 이 경우‘가감천금단’과 ‘가감경옥고’ 및 ‘가감홍옥산’은 10 : 10: 80 ~ 80:10:10의 중량비로 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 화장품 조성물은 유효 성분으로서의 생약 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료,향료와 같은 통상적인 보조제, 또는 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제하는 것이 바람직하다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제하는 것이 바람직하다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제 등이 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witePSol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 추가로 포함할 수 있다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료 조성물에 배합되는 다른 성분을 배합할 수도 있다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제 한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리 콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸 암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또한, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 바람직하게는 화장수, 영양로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 팩 등의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해 화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명에 따른 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 세포증식 및 대사 활성 효과를 가짐을 특징으로 한다. 본 발명은 상기 특징으로부터 세포의 turn-over가 증가되어 노화된 피부 세포가 재생되고, 세포에서 생성되는 세포외 간질의 합성을 증가시키는바 피부의 탄력성, 신진대사, 생기 등에 직접 관여하는 세포외 간질의 합성량 증가에 의해 피부 탄력 증가, 피부 신진 대사 촉진 및 피부 생기 증강을 통하여 피부 노화를 방지하는 효과를 가진다.

본 발명에 따른 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 프리 라디칼 소거효과를 가짐을 특징으로 한다. 본 발명은 상기 특징으로부터 피부 주름 생성 억제 및 개선, 피부 탄력 증가를 통하여 피부 노화를 방지하는 효과를 가진다.

본 발명에 따른 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 콜라겐 생산촉진 효과를 가짐을 특징으로 한다. 본 발명은 상기 특징으로부터 피부 주름 생성 억제 및 개선, 피부 탄력 증가를 통하여 피부 노화를 방지하는 효과를 가진다.

본 발명은 상기 특징들으로부터 피부 주름 생성 억제 및 개선, 피부 탄력 증가, 피부 신진 대사 촉진 및 피부 생기 증강을 통하여 피부 노화를 방지하는 효과를 가지는 바 본 발명에서의 용어 "피부 노화 방지"는 주름 개선, 피부 탄력 개선, 피부 신진 대사 촉진 및 피부 생기 증강을 포함하는 의미로 해석된다. 또한, 상기 용어 "피부 노화 방지"는 피부 노화 예방, 개선 및 치료를 포함하는 의미를 갖는다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 건조된 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠을 용매에 넣고 60~80℃에서 2~5시간 가온하여 추출한 후 여과하고 냉각한 후 5-15℃에서 4~14일간 숙성시킨 후 여과하여 생약 추출 혼합물 A을 제조하고, 건조된 인삼, 지황 및 꿀을 용매에 넣고 60~80℃에서 2~5시간 가온하여 추출한 후 여과하고 냉각한 후 5-15℃에서 4~14일간 숙성시킨 후 여과하여 생약 추출 혼합물 B를 제조하고, 건조된 행인, 과루근 및 백봉령을 용매에 넣고 60~80℃에서 2~5시간 가온하여 추출한 후 여과하고 냉각한 후 5-15℃에서 4~14일간 숙성시킨 후 여과하여 생약 추출 혼합물 C를 제조하여, 생약 추출 혼합물 A, B, C를 혼합하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물 제조방법을 제공한다.

상기 건조된 생약 성분들을 용매에 넣고 추출한 후 냉각은 상온에서 하는 것 이 바람직하나 이에 제한되지 않는다.

상기 생약 추출 혼합물 A,B,C를 제조하는 순서에는 제한이 없다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

상기와 같이 본 발명에 따른 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 혼합 추출물('가감천금단')과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 혼합추출물('가감경옥고'), 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 혼합 추출물('가감홍옥산')을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용할 수 있다. 뿐만 아니라 세포증식 및 대사 활성 증진, 프리 라디칼 소거, 콜라겐 생산촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선을 통하여 피부 노화를 방지 및 개선한다.

제조 실시예 1~10 : 가감천금단 혼합 추출물의 제조

건조된 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송 향, 백강잠을 증류수 5kg에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기를 사용하여 70℃에서 3시간 가온하여 추출한 후 400 메쉬 여과포(whatman)로 여과하고 상온으로 냉각한 후 5-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 0.45 μm필터로 여과하여 4.3kg 의 추출물을 얻었다.

	용매	수득량 (kg)
실시예 2.	에탄올	4.2
실시예 3.	메탄올	4.3
실시예 4.	부틸렌글리콜	4.0
실시예 5.	프로필렌글리콜	4.1
실시예 6.	글리세린	3.9
실시예 7.	함수 부틸렌글리콜 (30 w/w%)	4.1
실시예 8.	함수 프로필렌글리콜 (30 w/w%)	4.1
실시예 9.	함수 에탄올 (30 w/w%)	4.4
실시예 10.	함수 에탄올 (70 w/w%)	4.3

제조실시예 11~20 : 가감경옥고 혼합 추출물의 제조

건조된 인삼, 지황, 꿀을 증류수 2kg에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기를 사용하여 70℃에서 3시간 가온하여 추출한 후 400 메쉬 여과포(whatman)로 여과하고 상온으로 냉각한 후 5-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 0.45μm필터로 여과하여 1.6kg 의 추출물을 얻었다.

	용매	수득량 (kg)
실시예 12.	에탄올	1.8
실시예 13.	메탄올	1.7
실시예 14.	부틸렌글리콜	1.7
실시예 15.	프로필렌글리콜	1.8
실시예 16.	글리세린	1.5
실시예 17.	함수 부틸렌글리콜 (30 w/w%)	1.7
실시예 18.	함수 프로필렌글리콜 (30 w/w%)	1.6
실시예 19.	함수 에탄올 (30 w/w%)	1.7
실시예 20.	함수 에탄올 (70 w/w%)	1.8

제조실시예 21~30 : 가감홍옥산 혼합 추출물의 제조

건조된 행인, 과루근, 백봉령을 증류수 2kg에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기를 사용하여 70℃에서 3시간 가온하여 추출한 후 400 메쉬 여과포(whatman)로 여과하고 상온으로 냉각한 후 5-15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 0.45μm필터로 여과하여 1.4kg 의 추출물을 얻었다.

	용매	수득량 (kg)
실시예 22.	에탄올	1.5
실시예 23.	메탄올	1.3
실시예 24.	부틸렌글리콜	1.4
실시예 25.	프로필렌글리콜	1.2
실시예 26.	글리세린	1.3
실시예 27.	함수 부틸렌글리콜 (30 w/w%)	1.4
실시예 28.	함수 프로필렌글리콜 (30 w/w%)	1.4
실시예 29.	함수 에탄올 (30 w/w%)	1.4
실시예 30.	함수 에탄올 (70 w/w%)	1.5

실험예 1~7

하기 실험예 1~7은 상기 제조실시예의 제조방법에 따라 에탄올 30%의 용매로 추출된 생약 혼합 추출물을 evaporator를 사용하여 감압, 농축하여 파우더로 제조하여 실험한 것이다.

실험예 1. 세포독성

혼합 추출물에 대하여 단층 세포 배양에서의 세포독성을 측정하였다.

실험 방법

MTT assay [참고문헌: Mossman T. (1983) Rapid colorimetric assay for cellular growth & survival: application to proliferation & cytotoxicity assays. Journal of Immunological Methods 65, 55~63]는 살아있는 세포의 수를 측정함으로서 세포 증식이나 독성에 많이 사용되는 실험법으로 표준 비색분석법(standard colorimetric assay)이라고 할 수 있다. 살아있는 세포의 미토콘드리아 내에서 노란색의 수용성 기질인 MTT(3-[4,5- dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide,Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide)가 탈수소 효소작용(succinate dehydrogenase 또는 mitochondrial dehydrogenase라고도 불림)에 의해 비수용성인 파란색의 포르마잔(formazan) 유도체로 환원되는 원리를 이용하는 것이다. 생성된 포르마잔 유도체는 용해제(보통 DMSO(dimethylsulfoxide) 사용)를 넣고 용해시킨 후 흡광도를 측정한다. 생성된 포르마잔 유도체는 DMSO에 용해되고 흡광도 (Optical Density)를 측정한다. 측정된 흡광도는 살아있는 세포의 수와 직선적인 상관관계를 나타내게 된다.

보다 구체적으로 설명하면, human fibroblasts cell line (ATCC, CRL-2310)을 1x10⁴cells/ml의 농도로 하여 24well plate에 접종하였다. 배지는 소혈청 10%를 함유한 DMEM (Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL, USA)를 사용하였다. 접종 후 24시간 후 소혈청 2%를 함유한 DMEM (Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL, USA)으로 교체하고, 시험 시료를 50㎍/㎖의 농도로 10㎕ 첨가한 후 3일 동안 37℃, 5% CO₂ 인큐베이터에서 배양하였다. 배양이 끝난 후 상등액을 제거하고 다시 PBS(phosphate buffered saline) 200ul씩을 가하여 세척하고 MTT 용액을 well당 1.0㎖씩 가한 후 4시간 후에 MTT를 제거하고 DMSO(Dimethy 1 Sulfoxide)를 well당 1.0㎖씩 가한 후 하룻밤 37℃에서 인큐베이션 후 ELISA reader(sunrise, Austria)를 사용하여 wave length 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과를 표1에 나타내었다.

표 1. 혼합 추출물의 단층 세포배양에서의 세포독성

시 료	농도(ug/ml)	세포 생존율(%)
가감천금단	0.1	101
	1	100
	10	103
	50	100
	100	102
가감경옥고	1	103
	10	102
	50	100
	100	101
	200	101
가감홍옥산	1	103
	10	104
	50	101
	100	103
	200	100

표 1의 결과에서 보듯이 가감천금단, 가감경옥고, 가감홍옥산은 모두 세포생존율이 100%이상인바, 안전성이 매우 우수함을 알 수 있다.

실험예 2. 프리라디칼 소거 실험 (1)

상기 혼합 추출물에 대하여 히드록실 라디칼소거 효과를 측정하였다.

실험 방법

사람 섬유아세포를 2×10⁵세포/웰로 웰 플래이트에 놓고 10 % FBS함유하는 EMEM 배지(Eagle's minimum essential medium, BRL , USA)를 0.2㎖을 깐 다음 24시간 동안 CO₂ 배양기에서 배양한다. 여기에 DMSO에 녹인 혼합 추출액을 처리하고, 히드록실 라디칼을 발생시키기 위하여 30mM H₂O₂를 가한 후 24시간 동안 배양한다. 그 다음 배양한 세포의 증식율을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행한다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖을 가한 후 4시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포르마잔을 ELISA reader(sunrise, Austria)를 사용해 570㎚에서 흡광도를 측정하는 방식으로 수행하였다. 양성 대조군은 라디칼 소거 능이 뛰어난 EGCG(epigallocatechin gallate)를 사용하였다. 상기 실험군과 대조군에 대한 흡광도 측정후, 하기 수학식 1를 이용하여 자유라디칼 소거활성 효과를 구하여 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

수학식 1

히드록실라디칼저해효과(%)=((실험군의 흡광도)/(대조군의 흡광도))x100

실험군 : 시료 처리군

대조군 : 시료 무처리군(다른 실험 조건은 모두 동일)

표 2. 혼합 추출물에 대한 히드록실 라디칼 소거 효과

시 료	농도( ug / ml )	히드록실 라디칼 소거율 (%)
가감천금단	0.1	15
	1	34
	10	56
	50	79
	100	95
가감경옥고	1	10
	10	25
	50	42
	100	53
	200	76
가감홍옥산	1	12
	10	27
	50	41
	100	49
	200	56
양성대조군(EGCG)	10	67

상기 표 2에 나타낸 결과를 통해 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 생약추출 혼합물은 히드록실 라디칼 소거능력이 매우 탁월하고, 농도가 증가할수록 라디칼 소거능력이 더 증가 된다는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 3. 프리라디칼 소거 효과 실험 (2)

상기의 혼합 추출물에 대하여 과산화물 라디칼소거 효과(항산화 효과)를 측정하였다.

실험 방법

사람 섬유아 세포를 2×10⁵세포/웰로 웰 플래이트에 놓고 10 % FBS함유하는 EMEM 배지 0.2㎖를 깐 다음, 24시간 동안 CO₂ 배양기에서 배양한다. 여기에 DMSO에 녹인 혼합 추출액을 처리하고 30분 동안 배양한다. 이 배양된 세포에 1.5mM 크산틴 10㎕ 과 0.25U 크산틴 산화효소 10㎕를 가하여 과산화물 라디칼을 발생시킨 후 24시간 동안 CO₂ 배양기에서 배양하였다. 배양한 세포의 증식율을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행한다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖을 가한 후 4시간동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포르마잔을 ELISA reader(sunrise, Austria)를 사용해 570㎚에서 흡광도를 측정함으로써 수행하였다. 양성 대조군은 라디칼 소거 능이 뛰어난 EGCG(epigallocatechin gallate)를 사용하였다. 상기 실험군과 대조군에 대한 흡광도 측정후, 하기 수학식 2를 이용하여 자유라디칼 소거활성 효과를 구하여 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

수학식 2

과산화물 라디칼저해효과(%)=((실험군의 흡광도)/(대조군의 흡광도))x100

실험군 : 시료 처리군

대조군 : 시료 무처리군(다른 실험 조건은 모두 동일)

표 3. 혼합 추출물에 대한 과산화물 라디칼 소거 효과

시 료	농도( ug / ml )	과산화물 라디칼 소거율 (%)
가감천금단	0.1	5
	1	13
	10	37
	50	56
	100	79
가감경옥고	1	10
	10	16
	50	19
	100	28
	200	55
가감홍옥산	1	8
	10	11
	50	23
	100	27
	200	49
양성대조군(EGCG)	10	43

상기 표 3에 나타난 결과를 통해 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 생약추출 혼합물은 과산화물 라디칼 소거능력이 매우 탁월하며, 농도가 증가할수록 라디칼 소거능력이 더 증가 됨을 확인할 수 있었다.

실험예 4. 세포 대사활성 촉진 및 시너지 효과 실험

상기 혼합 추출물에 대하여 세포대사 활성 및 시너지 효과를 측정하였다.

실험 방법

이 실험은 세포가 성장하는데 필요한 영양분과 각종 호르몬을 가지고 있는 FBS(fetal bovine serum)을 가한 것과 가하지 않고 대신 혼합 추출물을 넣은 것의 세포 증식능을 비교하는 실험으로 이로써 혼합 추출물의 대사 활성 촉진에 의한 세 포 증식에 미치는 효과를 알 수 있다.

신생아의 포피(foreskin)조직에서 얻은 섬유아 세포를 24웰 플래이트에 웰당 2x10³cell수가 되도록 넣어준 후 24시간 배양하였다. 여기에 한쪽에는 DMEM배지에 혼합 추출물을 넣고 대조군에는 DMEM배지에 10% FBS(fetal bovine serum)을 가한다. 4일 동안 배양시킨 후, 세포의 증식율을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행한다. MTT assay는 배양한 세포에 MTT 용액 0.1㎖을 가한 후 4시간 동안 배양한 다음 배지는 제거하고 DMSO 0.5㎖를 넣어 형성된 포르마잔을 ELISA reader(sunrise, Austria)를 사용해 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 상기 실험군과 대조군에 대한 흡광도 측정 후, 하기 수학식 3를 이용하여 세포대사활성효과를 구하여 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

수학식 3

실험군의 세포 대사활성 촉진효과(%)

=((실험군의 흡광도)/(음성대조군의 흡광도))x100

대조군의 세포 대사활성 촉진효과(%)

=((대조군의 흡광도)/(음성대조군의 흡광도))x100

실험군 : FBS 0% + 시료 처리군

대조군 : FBS 10% + 시료 무처리군(다른 실험 조건은 모두 동일)

음성대조군: FBS 0%

표 4. 혼합 추출물에 대한 세포대사 활성 촉진 효과

실시예	반응액중에 함유시킨 시료의 최종농도(㎍/ml)	세포 대사 활성 촉진 (증식) 효과(%)
		대조군 (FBS 첨가)	혼합 추출물 첨가
가감천금단	10	109	105
	50	118	116
	100	129	127
가감경옥고	50	118	109
	100	129	114
	200	135	121
가감홍옥산	50	118	108
	100	129	110
	200	135	114
가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산	50	118	115
	100	129	127
	200	135	138

상기 표 4에 나타낸 결과를 통해 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 생약추출 혼합물을 첨가한 경우 FBS를 첨가했을 때에 못지않은 세포대사 활성 촉진 효과를 나타내었으며, 농도가 증가할수록 세포 대사 활성 촉진 효과는 더욱 증가하는 결과를 보였다. 또한, 가감천금단, 가감경옥고, 가감홍옥산을 함께 첨가한 경우 각각 첨가한 경우에 비해 보다 향상된 세포 대사 활성 촉진 효과를 나타내었다.

실험예 5. 세포 증식 효과 및 시너지 효과 실험

상기 혼합 추출물에 대하여 세포증식 및 시너지 효과를 측정하였다.

실험 방법

96 마이크로웰 플래이트(96 well plate, Corning사)에 5% 어린 송아지 혈 청(FBS) 용액을 100ul씩 넣은 다음, 2% FBS 가 함유된 DMEM 배지에 일정농도 분산시켜 묽힌 시료를 100ul씩 다시 첨가하고 MTT assay를 수행하여 세포 증식 정도를 평가하였다. 신생아의 포피(foreskin)조직에서 얻은 섬유아세포를 웰당 4000개씩 100ul의 DMEM 배지에 분산시켜 가한 후 7일간 배양하였다. 배양이 끝난 후 상등액을 제거하고 다시 5%PBS(phosphate buffered saline) 200ul씩을 가하여 세척하고 DMSO를 well당 150ul씩 가한 후 10분간 흔들어 녹인 후 570nm에서 ELISA reader(sunrise, Austria)로 흡광도를 측정하였다. 이때 혼합 추출물을 첨가하지 않고 같은 방법으로 실험을 진행한 것을 대조군으로 하여 상대적인 흡광도의 차이로부터 세포증식 효과를 비교하였다. 상기 실험군과 대조군에 대한 흡광도 측정 후, 하기 수학식 4를 이용하여 세포증식효과를 구하여 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.

수학식 4

세포증식효과(%)=((실험군의 흡광도)/(대조군의 흡광도))x100

실험군 : 시료 처리군

대조군 : 시료 무처리군(다른 실험 조건은 모두 동일)

표 5. 혼합 추출물에 대한 세포증식 및 시너지 효과

시 료	농도(ug/ml)	세포증식 효과 (%)
가감천금단	0.1	105
	1	111
	10	119
	50	123
	100	134
가감경옥고	1	103
	10	109
	50	118
	100	123
	200	126
가감홍옥산	1	104
	10	114
	50	120
	100	125
	200	127
가감천금단 +가감경옥고 +가감홍옥산	50	135
	100	148
	200	152

대조군(2% FBS 배지):100%

상기 표 5에 나타난 결과에서 알 수 있듯이, 생약추출 혼합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여, 생약추출 혼합물이 처리된 실험군의 경우 매우 높은 섬유아세포 증식 효과를 나타낸다. 또한, 가감천금단과 가감경옥고 가감혹옥산을 각각 처리한 실험군에 비하여 세가지 생약추출 혼합물을 함께 처리한 실험군이 보다 월등한 세포 증식 효과를 나타낸다.

실험예 6. type Ⅰ 콜라겐 생합성량

혼합 추출물에 대하여 type Ⅰ 콜라겐 생합성량을 측정하였다. (Kanayama. N., and Terao, T.1992, Gynecol. Obstet. Invest. 34, 24-26)

실험 방법

섬유아세포에서 배지로 배출되는 콜라겐 합성 양을 측정하기 위하여 procollagen type I C-peptide ELA kit(TaKaRa사, cat.# MK101)을 사용하였다. KIT을 사용하기 전 human fibroblasts cell line (ATCC, CRL-2310)을 1x10⁴ cells/ml의 농도로 하여 24well plate(24 well plate, Corning사)에 접종하였다. 배지는 FBS(소혈청) 10%를 함유한 DMEM (Dubelcco'S Modified Eagle Medium, BRL, USA)를 사용하였다. 접종 후 24시간 후 시험 시료를 50㎍/㎖의 농도가 되도록 10㎕ 첨가하고 24시간 동안 37℃, 5% CO₂ 인큐베이터에서 배양하였다. 배양한 배지를 E-tube로 옮기고 15,000rpm에서 30초 동안 원심분리 하였다. 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐(procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PIP) 양을 키트 (Takara, 일본국)를 이용하여 측정함으로써 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하였다.

실시 후 ELISA reader(sunrise, Austria)로 흡광도는 450nm에서 측정하였다. 이때 비타민 C를 첨가한 것을 양성 대조군으로 같은 방법으로 실험을 진행하여 상대적인 흡광도의 차이로부터 콜라겐 생성량을 비교하였다. 대조군으로 사용된 비타민 C는 섬유아세포의 활성을 도와 콜라겐 합성을 촉진시켜주는 물질이다. 그 결과를 표6에 나타내었다.

표 6. 혼합 추출물의 type Ⅰ 콜라겐 생합성량

시료	농도(ug/ml)	PIP(ng/㎖)	합성량 증가율(%)
가감천금단	0.1	250	16
	1	329	21
	10	371	33
	50	396	42
	100	462	48
가감경옥고	1	223	10
	10	250	16
	50	319	28
	100	337	35
	200	372	41
가감홍옥산	1	264	17
	10	294	18
	50	327	20
	100	351	27
	200	368	39
가감천금단 +가감경옥고 +가감홍옥산	50	388	40
	100	462	48
	200	518	59
대조군 (vitamin C 50㎍/㎖)		391	41
무처리군		203	3

상기 표 6에 나타난 결과에서 알 수 있듯이, 생약추출 혼합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여, 생약추출 혼합물이 처리된 실험군의 경우 매우 높은 type Ⅰ 콜라겐 생합성량을 나타낸다. 또한, 비타인 C를 처리한 대조군에 못지않은 효과를 나타낸다. 또한, 가감천금단과 가감경옥고 가감홍옥산을 각각 처리한 실험군에 비하여 세가지 생약추출 혼합물을 함께 처리한 실험군이 보다 월등한 type Ⅰ 콜라겐 생합성량를 나타낸다. 생약추출 혼합물의 농도가 증가할수록 type Ⅰ 콜라겐 생합성량도 증가한다.

실험예 7. Type Ⅰ 콜라겐 mRNA 발현량 조사

상기 실시예로부터 얻어진 혼합 추출물에 대하여 type I 콜라겐 유전자의 발현 정도를 측정하기 위하여 RT-PCR(Reverse Transcription -Polymerase Chain Reaction)을 실시하였다. 인간 정상 섬유아세포(ATCC-2706)를 60mm 배양접시에 1 x 10⁶의 밀도로 10% 소혈청(Gibco/BRL)을 포함하는 DMEM 배지(Gibco/BRL)에서 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 하루 동안 키웠다. 그 후 혈청이 2% 첨가된 배지로 교환해 주고 시료를 농도별로 첨가하여 24시간 동안 37℃에서 배양한다. 그 후, 세포로부터 트라이졸 시약(Trizole reagent) (Gibco/BRL)을 이용한 구아니디움 티오시아네이트-페놀-클로로포름 추출 방법 (Guanidium thiocyanate-phenol- chloroform extraction)으로 토탈 RNA를 분리하였다. RT-PCR을 하기 위해 위의 방법으로 얻어진 RNA에 RNA 분해 효소가 없는 DNA 분해 효소 (RNase-free DNase, Promega)를 37℃에서 30분 동안 처리하여 DNA의 오염을 제거하였으며 페놀/클로로포름 추출법과 에탄올 침전을 통해 순수 RNA를 얻었다.

1㎍의 RNA를 올 인 원 RT/PCR 키트 (All in one RT/PCR kit, Superbio)를 사용하여 RT-PCR를 실시하였다. 대조군으로 베타-엑틴을 사용하였으며 RT-PCR에 사용된 type I 콜라겐의 프라이머(primer)는 서열번호 1과 서열번호 2로 구성되어있고, 베타-엑틴의 프라이머는 서열번호 3 과 서열번호 4로 구성되어있다. 반응 조건은 type I 콜라겐은 94℃ 1분, 62℃ 1분, 72℃ 1분, 30사이클이며, 베타-엑틴은 95℃ 1분, 62℃ 1분, 72℃ 1분, 22사이클이며, PCR 생산물은 1.5%(w/v) 아가로즈(agarose, Sigma사) 겔에 전기영동하여 겔 이미지 분석기(Biorad)로 정량하였다. 대조군으로 사용된 비타민 C는 섬유아세포의 활성을 도와 콜라겐 합성을 촉진시켜주는 물질이다. 그 결과를 표 8에 나타내었다.

표 7. 프라이머

서열번호 1	5'-CTGGCAAAGAAGGCGGCAAA-3'
서열번호 2	5'-CTCACCACGATCACCACTCT-3'
서열번호 3	5'-GAGACCTTCAACACCCCAGCC-3'
서열번호 4	5'-GGCCATCTCTTGCTCGAAGTC-3'

표 8.

시 료	Type I 콜라겐 발현량 (%)
	100 ㎍/㎖	200 ㎍/㎖
가감천금단	139.28	156.87
가감경옥고	112.92	111.62
가감홍옥산	109.4	110.7
가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산	145.21	189.54
대조군 (vitamin C 100 ㎍/㎖)	131.1	156.3
무처리군	100	100

상기 표 8에서 나타난 결과에서 알 수 있듯이, 생약추출 혼합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여, 생약추출 혼합물이 처리된 실험군의 경우 매우 높은 type Ⅰ 콜라겐 발현양을 나타낸다. 또한, 비타인 C를 처리한 대조군에 못지않은 효과를 나타낸다. 또한, 가감천금단과 가감경옥고 가감홍옥산을 각각 처리한 실험군에 비하여 세가지 생약추출 혼합물을 함께 처리한 실험군이 보다 월등한 type Ⅰ 콜라겐 발현양을 나타낸다. 생약추출 혼합물의 농도가 증가할수록 type Ⅰ 콜라겐 발현양도 증가한다. 이러한 결과는 상기 표6에서 나타난 결과와도 일치한다.

제형예 및 비교예

하기 표의 조성비를 가지는 화장료 조성물에 본 발명 생약추출 혼합물이 포함된 제형예 및 생약추출 혼합물이 포함되지 않은 비교예를 제조하였다.

제형예 및 비교예 1.

하기 표에 나타난 바와 같이 유연 화장수(스킨)을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

번호	원 료	제형예 1 (중량%)	비교예 2 (중량%)
1	혼합 추출물(가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산	2.0	-
2	글리세린	3.0	3.0
3	부틸렌 글리콜	2.0	2.0
4	프로필렌 글리콜	2.0	2.0
5	폴리옥시에칠렌(60)경화 피마자유	1.00	1.0
6	에탄올	10.0	10.0
7	트리에탄올아민	0.1	0.1
8	방부제	미량	미량
9	색소	미량	미량
10	향료	미량	미량
11	정제수	잔량	잔량
계		100.0	100.0

제형예 및 비교예 2.

하기 표에 나타난 바와 같이 영양화장수(로션)을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

번호	원 료	제형예 2 (중량%)	비교예 2 (중량%)
1	혼합 추출물(가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산)	2.0	-
2	시토 스테롤	1.70	1.70
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.50	1.50
4	세라마이드	0.7	0.7
5	세테아레스-4	1.2	1.2
6	콜레스테롤	1.5	1.5
7	디세틸포스페이트	0.4	0.4
8	농글리세린	5.0	5.0
9	선플라우어오일	10.0	10.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
11	산탄검	0.3	0.3
12	방부제	미량	미량
13	향료	미량	미량
14	정제수	잔량	잔량
계		100.0	100.0

제형예 및 비교예3

하기 표에 나타난 바와 같이 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

번호	원 료	제형예 3 (중량%)	비교예 3 (중량%)
1	혼합 추출물(가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산)	5.0	-
2	시토 스테롤	4.0	4.0
3	폴리글리세릴 2-올레이트	3.0	3.0
4	세라마이드	0.7	0.7
5	세테아레스-4	2.0	2.0
6	콜레스테롤	3.0	3.0
7	디세틸포스페이트	0.4	0.4
8	농글리세린	5.0	5.0
9	선플라우어오일	22.0	22.0
10	카르복시비닐폴리머	0.5	0.5
11	트리에탄올아민	0.5	0.5
12	방부제	미량	미량
13	향료	미량	미량
14	정제수	잔량	잔량
계		100.0	100.0

제형예 및 비교예 4.

하기 표에 나타난 바와 같이 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

번호	원 료	제형예 4 (중량%)	비교예 4 (중량%)
1	혼합 추출물(가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산)	7.0	-
2	시토 스테롤	1.70	1.70
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.50	1.50
4	세라마이드	0.7	0.7
5	세테아레스-4	1.2	1.2
6	콜레스테롤	1.5	1.5
7	디세틸포스페이트	0.4	0.4
8	농글리세린	5.0	5.0
9	선플라우어오일	15.0	15.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
11	산탄검	0.2	0.2
12	방부제	미량	미량
13	향료	미량	미량
14	정제수	잔량	잔량
계		100.0	100.0

제형예 및 비교예 5.

하기 표에 나타난 바와 같이 유화형 화운데이션을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

번호	원 료	제형예 5 (중량%)	비교예 5 (중량%)
1	혼합 추출물(가감천금단+가감경옥고+가감홍옥산)	2.0	-
2	밀납	2.0	2.0
3	사이크로메치콘	2.0	2.0
4	유동파라핀	5.0	5.0
5	스쿠알란	5.0	5.0
6	스테아린산	2.0	2.0
7	친유성 모노스테아린산 글리세린	3.0	3.0
8	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0	4.0
9	글리세린	4.0	4.0
10	프로필렌글리콜	3.0	3.0
11	부틸렌글리콜	3.0	3.0
12	트리에탄올아민	1.0	1.0
13	알루미늄마그네슘실리케이트	0.5	0.5
14	안료	12	12
15	방부제	미량	미량
16	향료	미량	미량
17	정제수	잔량	잔량
계		100.0	100.0

시험예 1. 주름 깊이 감소에 의한 피부 탄력도 개선 효과 측정

실험방법

피부주름에 대한 혼합 추출물의 영향을 실험하기 위해 제형예 3을 여성 20명(평균 연령 42세)씩 2그룹으로 나누어 왼쪽 눈 가장자리에 하루에 세안 후 아침, 저녁 두 번 도포하였다. 비교예 3의 영양크림을 오른쪽 눈 가장자리에 도포하여 대조군으로 사용하였다. 적용 15일, 30일 후 피부 표면의 피부 주름 깊이를 Cutometer SEM 474(Courage+Khazaka electronic GmbH. Germany)에 의해 측정하였다. Cutometer SEM 474에 의한 피부 탄력도 측정은 주름의 깊이를 측정하는 것으로서, 값이 적을수록 탄력성이 좋은 것이다. 탄력도 값은 대조군에 비해 감소한 값을 %로 나타내었으며, 피검자 20명의 평균값을 표 9에 나타내었다.

실험 결과

표. 9

시 료	피부 탄력도(주름깊이 감소) 효과(%)
	0일	15일	30일
제형예 3	0	5.2	18.9
비교예 3	0	0.5	1.2

표 9의 결과에서 나타나는 바와 같이, 생약추출 혼합물을 함유한 실시예의 피부탄력(주름깊이 감소)효과는 생약혼합 추출물을 함유하지 않는 15일 경과시에는 비교예에 비해 10배 이상 증가, 30일 경과시에는 18배 이상 증가함을 확인할 수 있 었다.

시험예 2. 피부 상태 개선효과 확인 실험

제형예 4와 비교예 4의 에센스에 대한 피부도포시 피부상태 개선효과를 확인하기 위하여 다음과 같은 임상 확인 실험을 하였다. 36～69세의 건강한 여성층으로서 30명씩 2그룹으로 나누어 안면 왼쪽 부분에는 처방예 4의 제형예 4의 에센스를, 안면 오른쪽 부분에는 비교예 4의 에센스를 매일 아침, 저녁 세안 후 피부에 1일 2회 4주간 도포한 후 피부상태 개선을 확인하기 위하여 피부상태 개선 정도를 측정하였다. (가) 피부의 탄력, 늘어짐에 대한 개선 효과 및 (나) 주름, 잔주름에 대한 개선 효과에 관해서 다음의 평점으로 판정하여, 30명의 평균점으로 평가하였다. 시험결과를 표10에 나타내었다.

표 10.

(가) 피부의 탄력, 늘어짐에 대한 개선 효과의 평점 기준

대단히 개선되었다	3점
개선되었다	2점
약간 개선되었다	1점
개선효과가 없다	0점
악화되었다	-1점

(나) 주름, 잔주름에 대한 개선 효과의 평점 기준

대단히 개선되었다	3점
개선되었다	2점
약간 개선되었다	1점
개선효과가 없다	0점
악화되었다	-1점

(다) 시험결과

시료	(가) 피부의 탄력, 늘어짐	(나) 주름, 잔주름
제형예 4	63	60
비교예 4	32	29

상기 표10의 결과에서 나타나는 바와 같이 제형예 4를 사용한 군에서는 (가) 와 (나) 양쪽 모두에서 비교예를 사용한 군과 비교할때 훨씬 뛰어난 피부 개선 효과가 확인되었다.

상기 상술한 바와 같이 본 발명에 따른 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠으로 이루어진 혼합 추출물('가감천금단')과 인삼, 지황 및 꿀로 이루어진 혼합추출물('가감경옥고'), 행인, 과루근 및 백봉령으로 이루어진 혼합 추출물('가감홍옥산')을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물은 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용할 수 있다. 뿐만 아니라 세포증식 및 대사 활성 증진, 프리 라디칼 소거, 콜라겐 생산촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선을 통하여 피부 노화를 방지 및 개선한다.

<110> korea University industry and academy collaboration foundation <120> Cosmetic composition for preventing skin <160> 4 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> RT-PCR primer 1 for type 1 collagen <400> 1 ctggcaaaga aggcggcaaa 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> RT-PCR primer 2 for type 1 collagen <400> 2 ctcaccacga tcaccactct 20 <210> 3 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> RT-PCR primer 3 for beta-actin <400> 3 gagaccttca acaccccagc c 21 <210> 4 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> RT-PCR primer 4 for beta-actin <400> 4 ggccatctct tgctcgaagt c 21

Claims (12)

1. 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및백강잠으로 이루어진 생약 추출 혼합물을 유효 성분으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
2. 삭제
3. 삭제
4. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 인삼, 지황, 꿀, 행인, 과루근 및 백봉령 추출물을 더 포함하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
5. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 생약 추출 혼합물은 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜 , 함수 프로필렌글리콜, 함수 글리세린, 함수 에탄올 및 함수 부틸렌글리콜로 구성된 그룹으로부터 선택된 한 가지 이상의 용매를 5-20배의 부피량을 가하여 추출하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
6. 삭제
7. 제4항에 있어서, 상기 생약 추출 혼합물은 조성물의 총중량에 대하여 0.001~ 20 중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
8. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수, 영양로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스 또는 팩의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
9. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 세포 증식 및 대사 활성 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
10. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 프리 라디칼 소거효과를 가지는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
11. 제1항 또는 제4항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 콜라겐 생산촉진 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
12. 건조된 백지, 동과인, 천궁, 둥글레, 세신, 토과근, 도인, 목단피, 신이, 감송향 및 백강잠을 용매에 넣고 60~80℃에서 2~5시간 가온하여 추출한 후 여과하고 냉각한 후 5-15℃에서 4~14일간 숙성시킨 후 여과하여 생약 추출 혼합물 A을 제조하고, 건조된 인삼, 지황 및 꿀을 용매에 넣고 60~80℃에서 2~5시간 가온하여 추출한 후 여과하고 냉각한 후 5-15℃에서 4~14일간 숙성시킨 후 여과하여 생약 추출 혼합물 B를 제조하고, 건조된 행인, 과루근 및 백봉령을 용매에 넣고 60~80℃에서 2~5시간 가온하여 추출한 후 여과하고 냉각한 후 5-15℃에서 4~14일간 숙성시킨 후 여과하여 생약 추출 혼합물 C를 제조하여, 생약 추출 혼합물 A, B, C를 혼합하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물 제조방법.