KR20160096323A - Anb 공법을 이용한 보습효능이 우수한 pe-6를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 ANB 공법을 이용한 보습효능이 우수한 PE-6를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 개시하며 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)으로 추출한 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥의 각 천연추출물을 동량(v/v)으로 배합한 신규한 혼합물 PE-6를 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

Description

ANB 공법을 이용한 보습효능이 우수한 PE-6를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{The cosmetic compositions for moisturing using AtoNB Nature Barrier Technology comprising PE-6 as an efficient component}

본 발명은 보습 및 항알러지 기능성 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로 더욱 상세하게는 더치커피 추출법과 냉침(冷沈) 추출법을 응용한 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)을 이용하여 6종의 천연 추출물을 얻고 이를 동량으로 배합한 혼합물 PE-6를 제조하고 이를 히알루론산 분석, Moisture cheker기 측정분석 및 항알러지 효능을 측정평가하여 보습 및 항알러지 효과를 갖는 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 데 있다.

ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)은 더치커피 추출법과 냉침(冷沈) 추출법을 응용한 추출법으로 열에 약한 천연물의 생리활성 물질을 보다 안전하고 신선하게 추출할 수 있는 추출법이다(황성희 외, 추출시간에 따른 더치커피 추출액의 페놀성분과 항산화효과의 변화, 대한보건연구 39(2): 21-29, 2013). 이와 같이 저온의 용매로 오랜 시간 추출되는 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)은 천연물이 용매에 침지되어 있는 시간이 길어 천연물의 유효성분 추출을 극대화 시킬 수 있으며 열에 의한 파괴가 적은 장점을 가진다.

아토피 피부염은 가려움증을 유발하는 만성 염증성 피부염으로 주로 신생아나 유아기에 많이 발생하고 대부분 9~10세가 되면 자연치유되나 최근에는 성인이 되어서도 아토피가 지속되는 경우가 늘어나고 있다. 아토피는 극심한 가려움증을 동반하고 붉게 변하며 피부가 부어 올라 자꾸 피부를 긁게 되는데 이때 손톱 사이의 균이나 바이러스 등에 의해서 염증성 질병으로 발전하게 되어 심한 경우 진물이 나고 딱지가 질 수 있는 질환이다. 아토피 피부를 위해 화장품에 적용되어야 할 점으로는 간지러움 개선, 염증피부 개선, 피부 장벽 개선 및 수분공급 등이 있다.

오리나무(Alnus japonica Steud .)는 자작나무과의 식물로 lupenone, L-amyrin, β-amyrin, glutenol, taraxerol, betulinic acid 등 여러 종류의 triter- penoid이며 β-sitosterol, heptacosane, 지방족 알코올, pyrocathechol계 탄닌을 주요성분으로 함유하고 있다(송상곤, 약초도감, (주)넥서스, 2010). 오리나무는 물감나무라고도 하는데 오리나무 수피나 열매에 탄닌이 함유되어 있어 나무를 삶은 물은 붉은색이 되고 열매는 철분 있는 논의 개흙과 함께 쓰면 검은색이 되며 수피를 우린 물은 다갈색으로 주로 염료로 사용된다. 또한, 오리나무는 공기 중의 유리질소를 흡수하며 콩과 식물처럼 근류가 생기므로 메마른 땅에도 잘 자라며 땅을 걸지게 하는 비료목(肥料木) 및 뚝을 보호하는 사방목으로도 유용하게 사용되어 왔다. 또, 오리나무는 청열작용이 있어서 코피를 그치게 하고 설사를 예방하며 외상 출혈에 나무 껍질을 가루 내어 붙이면 지혈 효과가 있으며 민간에서는 간염 치료를 위해 물을 넣고 달여서 복용하기도 한다.

비파엽(Eriobotrya japonica L.)은 장미과의 상록 교목으로 우리나라의 제주도, 경남 및 전남지방 등 온화한 기후 조건에서 주로 자생하며 민간요법으로 청폐, 진해, 거담, 건위, 이뇨, 패혈해소, 기관지염, 구역질, 딸국질 및 부종 등에 효과가 있다고 알려져 있다. 비파엽은 terpenoid와 flavonoid 등의 유용한 화합물을 다량 함유하고 있어 항산화, 항염증, 항HIV, 항돌연변이 및 항암활성이 보고되고 있다(이창복, 대한식물도감(大韓植物圖鑑), 향문사, 1982).

삼백초(Saururus chinensis Baill)는 삼백초과의 다년생 초본으로 꽃이 피는 7~8월에 3~4개의 백색의 잎을 보이기 때문에 붙여진 이름이다(정연옥, 야생화도감(여름), 푸른행복, 2010). 삼백초의 주성분은 quercetin, quercitrin, isoquercitrin, rutin 및 수용성 tannin 등이 알려져 있고 이 중 quercetin, quercetrin은 플라보노이드의 일종으로 항균 및 항산화 효과를 나타내는 것으로 보고되며 항암 및 모세혈관 강화작용 등의 효과가 있다. 중국에서는 식물 전체를 해독제로 사용하거나 각기병 치료에 사용하며 일본에서는 이뇨제로 사용하고 있다.

율피(Castanea crenata Sieb)는 너도 밤나무과(Buna)의 다년생 초목인 밤나무(Castanea crenata Sieb)의 과실인 밤의 속껍질로써 피부를 청결하게 하고 피부에 수분을 공급하거나 피부 수분의 손실을 막아주는 보습작용을 한다. 또, 율피는 피부의 과다한 멜라닌 색소 형성에 의한 피부의 색소 침착을 억제하며 오래 전부터 피부 미용 재료로 많이 사용되고 있다. 또한, 비타민이 많이 함유되어있어 야채가 귀한 겨울철에 중요한 식자원으로 쓰였으며 탄닌, 아미노산, 카테킨 외 coumarin, gallic acid, cathechin 등의 성분이 유효성분으로 알려져 있다.

명일엽으로도 불리우는 신선초(Angelica keiskei)는 미나리과에 속하는 다년생 초본으로 생장력이 좋아 매일 당귀로도 불린다(박원만, 김인경, 텃밭백과(유기농 채소 기르기), 도서출판 들녘, 2012). 신선초 줄기 내부의 노란 액체의 주성분은 chalcone, triterpenoid 등으로 피부암 억제효과, 폐암 및 대장암 예방 효과가 있으며 특히 6 종류의 chalcone에서 신종 인플루엔자 발병에 관여하는 neuraminidase 활성 억제 효과가 있다고 보고되었다. 신선초에는 신진대사를 촉진하는 루테오린 등의 성분이 풍부하게 함유되어 있고 B1, B2, B6, B12, C 및 biotin 등의 각종 비타민과 철, 마그네슘, 칼슘 및 칼륨 등의 무기질이 풍부하게 함유되어 있다. 그 외 신선초의 생리 활성에 관한 연구로는 간보호 효과, 항당뇨 효과, 항산화 효과 및 미백효과 등이 있다.

인진호(Artemisia capillaris Thunberg)라고도 불리우는 사철쑥은 국화과(Compositae)에 속하는 다년초 낙엽관목으로 줄기가 30~60 cm 의 높이를 가지는 식물이다(장준근, 몸에 좋은 산야초, (주)넥서스, 2009). 사철쑥의 어린잎은 식용으로 쓰이며 말린 것은 민간요법으로 간염, 간경변증 등의 약재로 사용되어 왔다. 사철쑥의 성분은 수분이 81.4%로 대부분을 차지하며 단백질 5.2%, 지질 0.8%, 당질 4.0%, 섬유질 3.7%, 회분 2.7%와 칼슘, 인, 철, 비타민과 camphor 등의 정유성성분, esculetin-7-methylether 등의 coumarin류, chromone류, flavonoid 류, caffeic acid 등으로 구성되어 있다. 사철쑥에 대한 연구는 주로 항균효과, 간장약효, 간세포에 미치는 효과와 간장 내 효소활성에 관한 연구 등 간경변에 대한 연구가 많이 이루어져 있다.

히알루론산(HA)은 피부의 세포외기질을 구성하는 주요 구성성분이며 조직의 수분 유지, 세포 간 간격 유지, 세포 성장 인자 및 영양성분의 저장과 확산에 관여할 뿐만 아니라 세포의 분열, 분화 및 이동 등에 관여하는 것으로 알려져 있다(R. Tammi et al ., Localization of epidermal hyaluronic acid using the hyaluronate binding region of cartilage proteoglycans as a specific probe, J. Invest Dermatol., 90, 412, 1988). 또한, 체내에 존재하는 히알루론산의 50% 이상이 피부 표피의 세포 간 간격과 진피의 세포외 기질에 분포하며 주로 각질형성세포와 섬유아세포에 의해 합성된다(S. Sakai et al ., N-Methyl-L-Serine stimulates hyaluronan production in human skin fibroblasts, Skin Pharmacol. Physiol ., 12, 276, 1999).

알레르기 반응은 주로 히스타민 분비에 영향을 많이 받는다. L-히스티딘 디카복시레이즈에 의해 디카복실레이션되어 히스티딘이 형성되면 비만세포나 호염구에 과립형태로 저장된다. 이때 알러젠이 비만세포나 호염구에 결합하여 알레르기 반응이 시작되면 세포가 탈과립되어 히스타민이 분비되며 이 과정에서 β-hexosaminidase도 함께 분비된다. 이러한 효소적 활성은 비만세포 탈과립의 척도로 사용될 수 있어 많은 연구에 사용된다. 기존에 사용되는 치료제로는 스테로이드성 소염제 및 비스테로이드성 소염제와 항히스타민제 및 항류코트리엔제로 나뉘며 스테로이드성 소염제 및 항히스타민제는 대부분 강력한 면역억제 작용을 가지므로 단기간 내에 일시적인 진정 효과를 나타낼 수 있지만 메스꺼움 등의 가벼운 부작용부터 성장 억제나 골다공증 등과 같은 심각한 부작용까지 있어 장기 복용에는 많은 문제가 따른다. 비스테로이드성 소염제 및 항류코트리엔제는 일시적인 완화 효과를 보일 수는 있으나 졸림이나 어지러움 등의 부작용이 있어 사용에 제한이 따른다. 따라서, 체내 부작용이 적으며 항알레르기 활성이 높은 천연 추출물에서 유래한 물질의 필요성이 대두되고 있다.

본 발명의 선행기술로 항균, 항여드름, 피부진정, 보습 및 피지 조절 활성이 우수한 생약 혼합 추출물이 대한민국 등록특허 제10-0910747호에 공지된 바 있으나 이는 발효콩, 마치현 및 버드나무 추출물의 제조에 초음파 추출법을 사용하고 오레가노, 편백, 육계 및 황금 추출물의 제조에 초임계 추출법을 사용함으로써 항균활성 및 항여드름균 활성이 우수할 뿐만 아니라 피부자극 완화 효과, 보습 효과 및 피지 조절 효과 또한 우수한 생약 혼합 추출물의 제공에 관한 것이다. 또, 혼합 식물 추출물이 대한민국 등록특허 제10-1224238호에 공지된 바 있으나 이는 항산화, 항염, 항균, 세포증식 촉진, 탈과립화 억제, 피부 가려움증 개선, 알러지 예방 또는 아토피 피부 개선 활성이 우수한 감국, 잎갈나무, 대황, 족도리풀, 신갈나무, 여뀌, 붓순나무, 현호색, 황련 및 후박나무 혼합 식물 추출물 및 그를 포함하는 화장료 조성물의 제공에 관한 것이다.

또, 오크라, 다시마, 참마, 모로헤이야, 연근, 폴리글루탐산을 이용하여 구성된 네바네바컴플랙스를 포함하는 화장료 조성물이 대한민국 등록특허 제10-1308669호에 공지되어 있으나 이는 다양한 원료의 첨가에 따라 문제시되는 피부 사용감 악화의 문제를 현저히 개선할 수 있는 효과를 발휘하고 뛰어난 항산화 효과를 발휘하여 피부주름 개선 및 피부 노화를 방지의 효과를 발휘하며 피부 탄력증진효과, 피부 보습 및 피부장벽강화에 대해서도 우수한 효과를 발휘하는 화장료 조성물의 제공에 관한 것이다.

한편, 현삼추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 보습용 외용제조성물이 대한민국 등록특허 제10-1352363호에 공지되어 있으나 이는 단지 유효성분으로 현삼(Scrophularia buergeriana Miq .) 추출물을 주성분으로 함유하고 백복령(Poriacocos Wolf) 추출물을 더 함유하여 피부의 건조증상을 개선시키는 용도의 피부 보습용 외용제 조성물에 관한 것이다.

따라서, 상기 특허문헌 어디에도 보습 및 항알러지 효능을 갖는 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥 추출물의 동량 혼합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 발명은 공지된 바 없다.

따라서, 본 발명의 목적은 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)으로 추출한 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥의 각 천연추출물을 동량으로 배합한 혼합물(일명 PE-6)을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적은 보습 및 항알러지 효능을 갖는 PE-6를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 데 있다.

본　발명은　오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥을 각 10~25℃의 저온에서　6~24시간　더치커피 추출법과 냉침(冷沈) 추출법을 응용한 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)으로 추출하여 각 추출물을　수득하는　단계와；상기 단계에서 얻은　각　천연추출물을 동량(v/v)으로 배합하여 혼합물(PE-6)을 제조하는 단계로 이루어지고；상기　단계에서　얻은　PE-6의　히알루론산의　양을　측정하는　단계와；　상기　PE-6를　Moisture cheker기를 사용하여 피부 표면의 수분량을 측정하는　단계와；　상기　PE-6의　항알러지 생성 억제 효과를　측정평가하는　단계를　통하여　달성하였다.

본 발명은 더치커피 추출법과 냉침(冷沈) 추출법을 응용한 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)으로 추출한 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥의 각 추출물을 동량(v/v)으로 배합한 혼합물(PE-6)을 제공하는 효과가 있고 보습 및 항알러지 효능을 갖는 천연물질을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있다.

도 1은 본 발명 PE-6의 히알루론산 생성을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명 PE-6의 수분 함유량(%)을 나타낸 그래프이다.
도 3는 본 발명 PE-6의 항알러지 생성 억제 효과를 나타낸 그래프이다.

본 발명에 따른 더치커피 추출법과 냉침(冷沈) 추출법을 응용한 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)은 15∼25℃의 저온에서 6~24시간 내외로 추출하는 것이 천연물의 유효성분 추출을 극대화하고 열에 의한 성분의 파괴를 줄이는데 가장 바람직하였다.

본 발명에서는 상기 언급한 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)을 이용하여 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초，사철쑥을 각각 추출하고 상기 각 천연추출물을 동량(v/v)으로 배합하여 얻은 혼합물을 'PE-6'로 명명하였다.

또, 본 발명에 따른 히알루론산 측정 실험에 사용한 피부 섬유아세포(HDFn)는 48 well plate에 5×10⁴ cells/well의 농도로 배양 배지 0.5 mL로 접종하여 37℃, 5％ CO₂에서 24시간 동안 배양하는 것이 가장 바람직하다.

또한 본 발명에 따른 보습 효능 및 항알러지 효능이 우수한 본 발명 PE-6를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며 사용자의 피부상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

예컨대, 본 발명 PE-6를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 스킨류, 로션류, 에센스류, 크림류, 팩류, 파운데이션류, 메이크업베이스류, 비누 및 세안폼와 같은 다양한 제형으로 제조할 수 있다. 또한, 물성적인 측면에서는 액상, 크림상, 페이스트상 및 고체상 등 다양한 성상으로 적용가능하며 통상적인 화장료 제조법에 적용시킬 수 있음은 또한 자명하다.

이하, 본 발명의 구체적인 내용을 실시예를 들어 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 발명이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 본 발명 PE -6 제조

본 발명에 따른 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)으로 오리나무의 어린가지와 나무 껍질，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥을 각각 15∼25℃의 저온에서 6~24시간 내외로 추출하여 열에　의한　파괴　및　손상이　적은　각각의 천연추출물을 수득하고 이를 동량(v/v)으로 혼합하여 제조된 본 발명 PE-6를 공시재료로 사용하였다.

실험예 1. 본 발명 PE -6의 히알루론산 양 측정

본 발명에 따른 피부 섬유아세포(HDFn)를 48-well plate에 5×10⁴cells/well의 농도로 배양한 후 serum-free 배지 0.5 mL에 접종하여 37℃, 5% CO₂에서 배양하였다. 배양 24시간 경과 후 serum-free 배지로 2회 세척하여 세포가 자라는 동안 축적된 히알루론산을 완전히 제외하고 새로운 serum-free 배지에 10 ug/mL, 50 ug/mL 및 100 ug/mL의 농도별로 희석한 본 발명 PE-6를 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 배양액을 수확하고 enzymes-linked immunoassay kit(R&D사)를 이용하여 히알루론산의 양을 측정하고 40 ng/mL의 히알루론산 용액을 이용하여 히알루론산 농도 0 ng-40 ng 사이의 표준곡선을 얻어 배지에 있는 히알루론산 양을 확인하였다. 실험 결과 본 발명 PE-6를 처리하지 않은 대조군에 비해 100 ug/mL의 본 발명 PE-6를 처리한 군에서 히알루론산 양이 124% 증가하였다(도 1).

실험예 2. Moisture cheker 기를 통한 본 발명 PE -6의 피부 표면 수분량 측정

본 발명에 따른 각질층의 수화도 또는 피부 수분량이라 일컬어지는 평가방법은 주로 각질층의 전기적 특성을 이용하여 평가한다. 피부 표면의 수분량을 평가하는 방법 중 가장 많이 사용되는 방법은 전기용량(capacitance)에 의한 측정방법으로 본 발명에서도 건강한 피험자를 선발하여 화장품을 전박에 도포하여 시간에 따른 전기용량을 측정평가하였다. 본 발명에서는 moisture checker MY-808S(Scalar, Tokyo)를 이용하여 피부의 전기용량을 측정하였고 그 결과값을 수분 함유량(%)으로 표시하였다. 본 발명 PE-6를 처리하지 않은 대조군과 본 발명 PE-6 2%(v/v) 및 3%(v/v)를 첨가한 실험군으로 6시간동안 전기용량을 측정한 결과 본 발명 PE-6를 처리하지 않은 대조군에 비해 본 발명 PE-6 3%(v/v)를 첨가했을때 수분 함유량이 가장 높게 유지되었다(도 2).

실험예 3. 본 발명 PE -6의 항알러지 실험

본 발명에 따른 RBL-2H3 cell을 10중량% FBS를 함유한 DMEM(Dulbecco’s modified Eagle’s medium)에 현탁시킨 후 24-well plate에 각 well당 2 x 10⁵ cell이 되도록 접종하였다. 각 well당 100 ng/mL의 mouse monoclonal IgE로 감작시킨 후 37℃, 5% CO₂ incubator에서 24시간 동안 배양하였다. 세포를 well당 Tyrode buffer 500 uL씩 사용하여 세척하고 농도별로 본 발명 PE-6를 처리하여 37℃, 5% CO₂ incubator에서 15분간 배양한 후 1 시간 동안 DNP-BSA 100 ng/mL을 처리하였다. 상층액에 1mM p-nitrophenyl-N-acetyl-ß-D-glucosaminide의 substrate를 50 uL 처리한 후 37℃, 5% CO₂ incubator에서 1 시간 동안 배양하고 ELISA reader를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 측정 결과 본 발명 PE-6를 처리하지 않은 대조군에 비해 본 발명 PE-6를 100 ug/mL의 처리한 군에서 24%의 항알러지 생성 억제 효과가 나타났다(도 3).

이상 설명한 바와 같이 본 발명은 ANB 공법(AtoNB Nature Barrier Technology)으로 추출한 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥의 천연추출물을 동량(v/v)으로 배합한 신규한 PE-6를 제공하는 효과가 있고 보습 및 항알러지 효능을 갖는 PE-6를 유효성분으로 함유하는 신규한 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 뛰어난 효과가 있으므로 화장품산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (4)

1. 오리나무，비파엽，삼백초，발효율피，신선초 및 사철쑥을 각각　10~25℃에서　6~24시간　냉침추출하여 각 천연추출물을　수득하는　단계와；상기 단계에서 얻은　각　천연추출물을 동량(v/v)으로 배합하여 혼합물을 수득하는 단계로 이루어진 것이 특징인 보습 및 항알러지 효능을 갖는 추출혼합물 PE-6
2. 제 1항의 PE-6를 유효성분으로 함유하는 보습 기능성 화장료 조성물
3. 제 1항의 PE-6를 유효성분으로 함유하는 항알러지 기능성 화장료 조성물
4. 제 2항 또는 제 3항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 스킨류, 로션류, 에센스류, 크림류, 팩류, 파운데이션류, 메이크업베이스류, 비누 및 세안폼 중 선택된 어느 하나의 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 보습효과 및 항알러지 기능성 화장료 조성물
   

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