KR20120099429A

KR20120099429A - 스피로-옥스인돌 화합물의 합성 방법

Info

Publication number: KR20120099429A
Application number: KR1020127012050A
Authority: KR
Inventors: 진-자퀘스 카디에욱스; 미크하일 차피브; 술탄 초우드후리; 지안민 푸; 치 지아; 스테파니에 아벨; 에마드 엘-세이드; 엘케 후뜨만; 토마스 이사르노
Original assignee: 제논 파마슈티칼스 인크.
Priority date: 2009-10-14
Filing date: 2010-10-14
Publication date: 2012-09-10
Also published as: NZ599334A; US20130072686A1; HRP20120368A2; TN2012000171A1; US20160326184A1; AU2010306768B2; EP2733145A1; US9695185B2; ECSP12011815A; HK1174908A1; JP2013508290A; EP2488531B1; MX2012004373A; US20140336390A1; RU2015103694A; JP2015108016A; CL2016001732A1; US20110087027A1; US8445696B2; CL2013003633A1

Abstract

본 발명은 통증과 같은, 나트륨 채널-매개 질병 또는 질환의 치료 및/또는 예방에 유용한, 특정 스피로-옥스인돌 유도체의 제조 방법에 대한 것이다.

Description

스피로-옥스인돌 화합물의 합성 방법{SYNTHETIC METHODS FOR SPIRO-OXINDOLE COMPOUNDS}

본 출원은 2009년 10월 14일 제출된 미국 가출원번호 61/251,335에 대하여 35 U.S.C.§119(e)에 근거하여 이익을 주장한다. 이 출원은 그 전체가 여기에서 참조로서 포함된다.

본 발명은 특정 스피로-옥스인돌 화합물 뿐만 아니라 이와 관계된 다양한 중간체의 개선된 제조 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 나트륨 채널 매개와 연관된 다른 질병이나 질환 뿐만 아니라 통증과 같은, 나트륨-통로 매개 질병 및 질환을 치료하는데 유용한 스피로-옥스인돌 화합물, 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법에 관한 것이다.

나트륨 채널은 전위 의존성 소듐 채널이 비정상적인 뉴런 활동 및 신경성 또는 병리적 통증을 발생시킨 오랫동안 인식된 역할을 포함하는 정상적 및 병리적 상태를 유지하는 데 있어서, 다양한 역할을 수행한다. 트라우마나 병으로 이어지는 말초신경의 손상은, 나트륨 채널 활성을 변화시키고, 축색절단된 신경으로부터의 이소성 방출 및 민감성 정상 위해탐지기의 자발적인 활성을 포함하는 비정상적인 도입성 활성을 발생시킬 수 있다. 이러한 변화는 정상적인 무해한 자극, 또는 무해자극통증에 대하여 오래-지속되는 비정상적인 과민증을 초래할 수 있다. 신경성 통증의 예시는, 대상포진-후 신경통, 삼차 신경통, 당뇨병성 말초신경병증, 만성요통, 환상지통, 및 암 및 화학요법에 의한 통증, 만성 골반통, 복합부위 통증 증후군 및 연관된 신경통을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

단-기간, 일차 요법으로서, 가바펜틴, 그리고 더 최근에는 프리가발린과 같은 약품을 사용함으로서, 신경성 동통 증상을 치료하는데 조금의 진전이 있어왔다. 그러나 신경성 동통에 대한 약물요법은, 비스테로이드성 소염진통제(NSAIDS) 및 아편제와 같은, 흔히 사용되는 통증 경감 약물에 대한 낮은 반응으로, 일반적으로 제한된 성공을 거두었다. 따라서, 새로운 치료 방법의 조사에 대한 상당한 필요성이 여전히 존재한다.

임상에서 최소한의 부작용을 가지는 강력하고 효과적인 나트륨 통로 차단제는 제한된 수로 존재한다. 부작용없이 신경성 동통 및 나트륨 통로가 관련된 병리적 상태를 효과적으로 치료하고자 하는 충족되지 않은 의학적 필요성 또한 존재한다.

PCT 국제출원 공개번호 WO 2006/110917, PCT 국제출원 공개번호 WO 2010/45251 및 PCT 국제출원번호 PCT/US2010/040187는 특정 스피로-옥스인돌 화합물을 개시하고 있다. 이러한 화합물들은, 나트륨 통로-매개성 질병, 바람직하게는 통증 관련 질병, 간질, 불안, 우울증 및 조울증과 같은 중추 신경 질환; 부정맥, 심방세동 및 심실세동과 같은 심혈관 질환; 하지불안 증후군과 같은 신경근 질환; 뇌졸중에 대한 뇌세포보호작용, 신경성 트라우마 및 질환 다발성경화증; 및 지단홍통증 및 가족성 직장 통증 증후군과 같은 채널병증의 치료에 유용한 것으로 기재되어 있다.

또한 PCT 국제출원 공개번호 WO 2006/110917, PCT 국제출원 공개번호 WO 2010/45251 및 PCT 국제출원번호 PCT/US2010/040187에 이러한 화합물들과 이를 포함하는 약학 조성물의 제조 방법이 기재되어 있다.

그러므로, 특정 스피로-옥스인돌 화합물 제조를 위한 개선된 방법의 필요성이 존재한다.

본 발명은, 단일 입체이성질체 또는 단일 거울상 이성질체 또는 이의 혼합물로서, 특정 스피로-옥스인돌 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법에 대한 것이다. 이러한 화합물들은 통증과 같은, 나트륨 통로-매개 질병 및 질환을 치료하는데 유용하다.

따라서, 한 측면으로, 본 발명은 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이의 혼합물로서 화학식 (Ⅰ)로 표시되는 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법으로서, 화학식 (8)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 화학식 (9)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이들의 혼합물로서 화학식 (Ⅰ)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는 방법에 관한 것이다.

다른 측면으로, 본 발명은, 화학식 (Ⅰ-S)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 화학식 (Ⅰ-R)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법이며, 여기서 상기 방법은 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이들의 혼합물로서 화학식 (Ⅰ)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 화학식 (Ⅰ-S)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 화학식 (Ⅰ-R)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제조하기 위하여 적절한 조건하에 분리하는 단계를 포함하는 제조방법에 관한 것이다.

또 다른 측면으로, 이 발명은 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이들의 혼합물로서 화학식 (Ⅱ)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법이며, 여기서 상기 방법은 화학식 (15)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 화학식 (16)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이들의 혼합물로서 화학식 (Ⅱ)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는 제조방법에 관한 것이다.

또 다른 측면으로, 본 발명은 화학식 (Ⅱ-S)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 화학식 (Ⅱ-R)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법이며, 여기서 상기 방법은 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이들의 혼합물로서 화학식 (Ⅱ)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 화학식 (Ⅱ-S)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 화학식 (Ⅱ-R)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제조하기 위하여 적절한 조건하에 분리하는 단계를 포함하는 제조방법에 관한 것이다.

정의

별도로 명시한 경우를 제외하고, 명세서 및 첨부된 특허청구범위에서 사용되는, 하기 용어는 다음과 같은 의미를 가진다.

"아미노"는 -NH₂ 치환기를 가리킨다.

"시아노"는 -CN 치환기를 가리킨다.

"하이드록실"은 -OH 치환기를 가리킨다.

"이미노"는 =NH 치환기를 가리킨다.

"니트로"는 -NO₂ 치환기를 가리킨다.

"옥소"는 =O 치환기를 가리킨다

"트리플루오로메틸"은 -CF₃ 치환기를 가리킨다.

"무통증"은 일반적으로 고통스러워야 하는 자극에 대하여 통증이 없는 것을 가리킨다.

"무해자극통증"은 압력이나 순간적인 접촉과 같은 일반적으로 무해한 자극에 대하여, 극도로 고통스러운 것으로 지각하는 질환을 가리킨다.

"포유동물"은 인간 및 실험동물 및 애완동물과 같은 가축,(즉, 고양이, 강아지, 돼지, 소, 양, 염소, 말 그리고 토끼), 야생동물 등과 같은 비-가축 모두를 포함한다.

"약학적으로 허용 가능한 염"은 산 및 염기 부가의 염 모두를 포함한다.

"약학적으로 허용 가능한 산 부가염"은 유리염기의 생물학적 유용성 및 특성을 유지하고, 생물학적으로 또는 기타 바람직하며, 무기산 예를 들어 이에 한정되지 않지만 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등, 및 유기산 예를 들어 이에 한정되지 않지만, 아세트산, 2,2-디클로로아세트산, 아디핀산, 알긴산, 아스코르브산, 아스파르트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 4-아세트아미도벤조산, 캄포르산, 캄포르-10-술폰산, 카프르산, 카프로산, 카프릴산, 탄산, 신남산, 시트르산, 사이클람산, 도데실설퍼릭산, 에탄-1,2-디술폰산, 에탄술폰산, 2-하이드록시에탄술폰산, 포름산, 푸마르산, 갈락타르산, 겐티신산, 글루코헵톤산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루타민산, 글루타르산, 2-옥소-글루타르산, 글리세로인산, 글리콜산, 히푸르산, 이소부티르산, 젖산, 락토바이온산, 라우르산, 말레산, 말산, 말론산, 만델산, 메탄설폰산, 뮤직산, 나프탈렌-1,5-디술폰산, 나프탈렌-2-술폰산, 1-하이드록시-2-나프토익산, 니코틴산, 올레산, 오로트산, 옥살산, 팔미트산, 파모인산, 프로피온산, 피로글루탐산, 피루브산, 살리실산, 4-아미노살리실산, 세바스산, 스테아르산, 숙신산, 타르타르산, 티오시안산, p-톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산, 운데실렌산 등과 함께 형성되는 염들을 가리킨다.

"약학적으로 허용 가능한 염기 부가염"은 유리산의 생물학적 유용성 및 특성을 유지하고, 생물학적으로 또는 기타 바람직한 염들을 가리킨다. 이러한 염기는 상기 유리산에 유기염기 또는 무기염기의 부가로 제조된다. 무기염기로부터 유도된 염은 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 염 등을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 바람직한 무기 염들은, 암모늄, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 및 마그네슘 염이다. 유기염기로부터 유도되는 염은 일차, 이차, 및 삼차 아민, 자연적으로 존재하는 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 고리형 아민 및 염기성 이온 교환 수지, 예를 들어 암모니아, 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 디에탄올아민, 에탄올아민, 데아놀, 2-디메틸아미노에탄올, 2-디에틸아미노에탄올, 디사이클로헥실아민, 라이신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 하이드라바민(hydrabamine), 콜린, 베타인, 베네타민, 벤자틴, 에틸렌디아민, 글루코사민, 메틸글루코사민, 테오브로민, 트리에탄올아민, 트로메타민, 푸린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸피페리딘, 폴리아민 수지등을 포함하나 이에 한정되지 않는 유기염기로부터 얻어진다. 특히 바람직한 유기 염기들은 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디사이클로헥실아민, 콜린 및 카페인이다.

본 발명에서 사용되는"치료하다"또는"치료"는 관련 질병 또는 질환을 가진 포유류, 바람직하게는 인간에서의 관련 질환 또는 질병을 치료하는 것을 포함하고, 또한

(ⅰ) 포유류의 질환 또는 질병의 예방, 특히 이러한 포유류가 질환에 걸리기 쉬워졌으나 아직 병을 가지고 있는 것으로 진단받지 않았을 때의, 포유류의 질환 또는 질병의 예방;

(ⅱ) 상기 질병 또는 질환의 억제, 즉, 그 발생을 억제하는 것,

(ⅲ) 상기 질병 또는 질환을 완화하는 것, 즉, 질병 또는 질환의 퇴행을 유발하는 것; 또는

(ⅳ) 상기 질병 또는 질환으로부터 인한 증상들을 완화하는 것, 즉 근본적인 질병 또는 질환을 다루지 않고 고통을 완화하는 것을 포함한다.

본 명세서에서 사용되는, 용어 "질병" 및 "질환"은 서로 교환적으로 사용되거나 또는 특정의 병 또는 질환이 공지된 병원체를 가질 수 없고(그래서 그 병인이 아직 밝혀지지 않음), 따라서 단지 바람직하지 않은 증상이나 징후로만 인식되었을 뿐 아직 질병으로서 인식되지 않고, 여기서 대략 구체적인 증상들이 임상의에 의해 확인되었다는 점에서 다르게 사용될 수 있다.

여기에서 제조된 화합물들은 하나 또는 그 이상의 비대칭 중심들을 포함 할 수 있고 절대 입체화학에 있어, 아미노산의 (R)- 또는 (S)- 로서 또는, (D)- 또는 (L)- 로서 정의될 수 있는 거울상 이성질체를 생성할 수 있다. 본 발명은 그들의 라세믹 또는 광학적으로 순수한 형태들뿐 아니라, 모든 어떤 가능한 거울상 이성질체들을 포함하는 것이다. 광학 활성 (+) 및 (-), (R)- 및 (S)-, 또는 (D)- 및 (L) 이성질체는 키랄 신톤(chiral synthon) 또는 키랄 시약을 사용하여 제조되거나, 또는 예를 들어, 크로마토그래피 및 분획결정의 종래기술 또는 본 명세서에 기재된 기술을 사용하여 분리될 수 있다. 개개의 거울상 이성질체의 제조/분리를 위한 종래의 기술은, 적절한 광학적으로 순수한 전구체로부터의 키랄 합성 또는 라세미체(또는 염 또는 유도체의 라세미체)를 사용한 분리, 예를 들어, 키랄 고압액체 크로마토그래피(HLPC)를 포함한다.

"입체이성질체"는 같은 결합에 의해 같은 원자결합으로 이루어지나, 교환불가능한 다른 삼차원 구조를 가지는 화합물을 가리킨다. 본 발명은 다양한 입체이성질체 및 이의 혼합물을 고려하고 또한 분자가 다른 하나의 비대칭거울상에 겹치지 않는 두 개의 입체이성질체를 가리키는, 거울상 이성질체를 포함한다.

본 명세서에서 사용된 화학 명명 프로토콜 및 구조식은, ACD/Name Version9.07 software program을 사용하는 I.U.P.A.C 명명시스템의 개량형이고, 본 발명의 화합물들은 본 명세서에서 중심코어구조의 유도체, 즉, 2-옥스인돌 구조로 명명된다. 본 명세서에서 사용된 복잡한 화학 명칭들에서 치환기는 그것이 결합된 그룹 이전에 명명되어진다. 예를 들어, 사이클로프로필에틸은 사이클로프로필 치환기를 갖는 에틸 골격을 포함한다. 화학 구조식에서, 몇몇 탄소원자를 제외하고, 모든 결합은 확인되고, 원자가를 완성하기 위해 충분한 수소원자들에 결합된 것으로 간주된다.

따라서, 예를 들어, 화학식 (Ⅰ)의 화합물:

은 본 명세서에서 1'-{[5-(트리플루오로메틸)-2-푸릴]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1 ,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온으로 명명된다.

발명의 구현예

상기 발명의 요약에서 상술된 발명의 다양한 측면들 중에서, 본 발명에서 기재되는 방법의 특정 구현예가 바람직하다.

상기 발명의 요약에 상술된 바와 같이, 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이의 혼합물로서, 화학식 (Ⅰ)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제조하는 방법에서, 하나의 구현예는 화학식 (8)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법으로, 이는 화학식 (7)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 염기를, 화학식 (8)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하는데 적합한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 구현예에서, 다른 구현예는 화학식 (7)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조단계를 추가로 포함하는 방법으로, 이는 화학식 (6)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 표준 Mitsunobu 반응조건 하에서 처리하여 화학식 (5)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성시킨다.

상기 구현예에서, 다른 구현예는 화학식 (6)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조단계를 추가로 포함하는 방법으로, 이는 화학식 (5)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용가능한 염과 알데히드를, 화학식 (6)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 구현예에서, 다른 구현예는 화학식 (5)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법으로, 이는 화학식 (4)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (5)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하는데 적합한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 구현에서, 다른 구현예는 화학식 (4)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법으로, 이는 화학식 (2)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 적절한 조건하에 화학식 3의 그리나드 시약으로;

;

처리하여 중간 생성물을 생성시킨 다음, 상기 중간생성물과 화학식 (Ⅰ)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (4)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하는데 적합한 조건하에 반응시키는 것이다.

상기 발명의 요약에 상술된 바와 같이, 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이의 혼합물로서 화학식 (Ⅱ)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법에서, 하나의 구현 예는, 화학식 (15)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법이며, 여기에서 화학식 (14)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 알킬화제를 화학식 (15)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 구현예에서, 다른 구현에는 화학식 (14)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법이며, 여기에서 화학식 (13)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (14)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하는데 적합한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 구현예에서, 다른 구현예는 화학식 (13)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법이며, 여기에서 화학식 12의 화합물;

;

을 적절한 조건하에 화학식 (3)의 그리나드 시약과;

;

반응시켜 중간 생성물을 생성한 다음, 상기 중간 생성물을 화학식 (1)의 화합물;

;

또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (13)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 반응시키는 것이다.

상기 구현예에서, 다른 구현에는 화학식 (12)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법이며, 여기에서 화학식 (11)의 화합물과;

;

산화제를 화학식 (12)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 구현예에서, 다른 구현예는 화학식 (11)의 화합물의 제조 단계를 추가로 포함하는 방법이며, 여기에서 화학식 (10)의 화합물을;

;

적절한 알킬화제와 함께 화학식 (11)의 화합물을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 것이다.

상기 설명된 단계들의 각각 적절한 조건을 포함하는, 발명의 제조방법에 대한 구체적인 구현 예는, 아래 발명의 방법에 좀더 자세히 설명되어 있다.

발명의 방법

본 발명의 방법은, 화학식 (I) 과 (II) 의 화합물 및 본 명세서에 기재된 화학식 (I-S), (I-R), (II-S) 및/또는 (II-R)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조 방법에 대한 것이다.

일반적으로, 출발 물질은, Sigma Aldrich, Lancaster Synthesis, Inc., Maybridge, Matrix Scientific, TCI, 및 Fluorochem USA 등과 같은 출처로부터 얻어지거나, 또는 당업자에게 잘 알려진 자료에 따라서 합성되거나(예를 들어, Smith, M.B. and J. March, Advanced Organic Chemistry : Reactions , Mechanisms,and Structure, 5th edition (Wiley, December 2000) 참조) 또는 본 명세서에 개시된 PCT 국제출원 공개번호 WO 2006/110917, PCT 국제출원 공개번호 WO 2010/45251 및 PCT 국제출원번호 PCT/US2010/040187에 기재된 방법에 의해 제조될 수 있다.

화학식 (I), (I-S) 및 (I-R)의 화합물의 제조

화학식 (I), (I-S) 및 (I-R)의 화합물은 하기 반응식 1에서 기술된 바와 같이 제조된다:

반응식 1

화학식 (1), 화학식 (2), 화학식 (3) 및 화학식 (9)의 화합물은 상업적으로 입수 가능하거나, 또는 당업자에게 알려진 방법에 의하여 제조될 수 있다.

일반적으로, 화학식 (I), (I-S) 및 (I-R)의 화합물은 상기 기재된 반응식 1의 방법으로 제조되고, 이는 먼저 화학식 (2)의 화합물을 적절한 그리나드 시약(예, 화학식 (3)의 화합물의 시약)으로 적절한 조건, 예를 들어, 약 -25℃에서 약 25℃사이의 온도, 바람직하게는 약 0℃에서 반응시킴으로써, 마그네슘 할로겐화 중간생성물을 생성한다. 이러한 중간체 생성물은 적절한 조건, 예를 들어 용매, 바람직하게는 이에 제한되지는 않지만, 테트라히드로푸란 또는 디클로로메탄 중에 화학식 (1)의 이사틴 화합물의 케토 카보닐기와 친핵성 첨가반응을 행하여, 화학식 (4)의 옥스인돌 화합물을 제공한다.

화학식 (4)의 화합물의 옥스인돌 고리의 C-3 위치의 하이드록실 그룹의 제거는 화학식 (4)의 화합물을 적절한 조건하에 처리하여 이루어지며, 산, 예를 들어 이에 제한되지는 않지만 트리플루오로아세트산의 존재하에 예를 들어 실란 시약, 예를 들어 트리에틸실란 처리하여 화학식 (5)의 화합물을 제조한다. 하이드록실 그룹의 제거는 또한 SOCl₂/NEt₃와의 처리와 같은 적절한 조건하에 화학식 (4)의 화합물을 처리하고, 이어 상기 생성 중간생성체를 아연 분진으로 환원시켜 화학식(5)의 화합물을 제공함으로써 달성할 수 있다. 또한, 상기 제거는 화학식 (4)의 화합물을 요오드화 수소산으로 처리하는 것에 의해 이루어지고 화학식 (5)의 화합물을 제공한다.

다음에 화학식 (5)의 화합물은 적절한 조건하에, 예를 들어 염기, 바람직하게는 이에 제한되지 않지만 디이소프로필아민, 디이소프로필에틸아민, 리튬 디이소프로필아마이드, 리튬 하이드록시드 또는 나트륨 하이드록시드의 처리에 이어 포름알데히드 또는 파라포름알데히드와 반응하여 화학식 (6)의 하이드록시메틸 중간체 화합물을 생성한다.

화학식 (7)의 화합물을 제조하기 위한 화학식 (6)의 화합물의 분자 내 고리화 반응은 화학식 (6)의 화합물을 표준 mitsunobu 반응 조건하에 처리함으로서 이루어지고, 예를 들어 용매, 바람직하게는 이에 제한되지 않지만 테트라히드로푸란, 디클로로메탄, 또는 에틸 아세테이트인 용매 중에서 포스핀 시약, 바람직하게는 이에 제한되지 않지만 트리페닐포스핀 또는 트리부틸포스핀, 및 아조시약, 바람직하게는 이에 제한되지 않지만 디에틸 아조디카르복실레이트, 디이소프로필 아조디카르복실레이트, 디-테트-부틸 아조디카르복실레이트 또는 테트라메틸 디아젠디카르복사미드의 적용에 의해 이루어진다. 화학식 (7)의 생성 화합물은 반응혼합물로부터 표준 분리 기술에 의해 반응 혼합물로부터 분리되거나 또는 반응 혼합물로부터 분리되지 않고, 다음 단계에서 바로 사용될 수 있다.

또는, 분자 내 고리화 반응은 화학식 (6)의 화합물을 염기 예를 들어 이에 제한되지는 않지만 세슘 카보네이트로, 용매 예를 들어 이에 제한되지는 않지만 N,N-디메틸포름아미드 또는 메틸 에틸 케톤 중, 적절한 bis-친전자체 예를 들어 이에 제한되지는 않지만 클로로이도메탄으로 처리하여 이루어지고 화학식(8)의 화합물을 생산한다.

화학식 (7)의 화합물의 질소의 하이드록시메틸 기의 제거는 화학식 (7)의 화합물을 염기, 바람직하게는 이에 제한되지 않지만 나트륨 하이드록시드, 리튬 하이드록시드 또는 암모늄 하이드록시드로 화학식 (8)의 화합물을 생산하기에 적절한 조건하에서 처리함으로써 이루어지며, 상기 화학식 (8)의 화합물은 표준 분리 기술에 의해 반응 혼합물로부터 분리될 수 있다.

그 다음에 화학식 (8)의 화합물은 용매, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 N,N-디메틸포름아미드, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란 또는 아세톤 내에서 예를 들어 염기, 이에 제한되지 않는 나트륨 하이드라이드, 세슘 카보네이트 또는 나트륨 하이드록사이드의 존재하에 화학식 (Ⅰ)의 화합물을 생산하기에 적절한 조건하에서 화학식 (9)의 친전자체와 반응하고, 상기 화학식 (Ⅰ)의 화합물은 표준 분리 기술에 의해 반응 혼합물로부터 분리될 수 있다.

화학식 (Ⅰ)의 화합물은 적절한 조건하에 (S)-거울상 이성질체(즉, 화학식 (Ⅰ-S)화합물) 및 이에 상응하는 (R)-거울상 이성질체(즉, 화학식 (Ⅰ-R)의 화합물)로 분리될 수 있고, 예를 들어 키랄 크로마토그래픽 분리 즉 예를 들어 이에 제한되지 않는 키랄 HLPC 또는 유사 이동층 크로마토그래피에 의해서 분리된다.

화학식 (Ⅱ), (Ⅱ-S) 및 (Ⅱ-R)의 화합물의 제조

화학식 (Ⅱ), (Ⅱ-S) 및 (Ⅱ-R)의 화합물은 하기 반응식 2에 기재된 방법으로 제조된다.

반응식 2

화학식 (10), 화학식 (11), 화학식 (12), 화학식 (1), 화학식 (3) 및 화학식 (16)의 화합물은 상업적으로 입수 가능하거나, 또는 당업자에게 알려진 방법으로 제조될 수 있다.

일반적으로, 화학식 (Ⅱ), (Ⅱ-S) 및 (Ⅱ-R)의 화합물은 반응식 2에 상기 기재된 방법으로 제조되며, 먼저 화학식 (10)의 디하이드록시알데히드를 용매, 예를 들어 이에 제한되지 않는 아세톤 내에서 염기, 예를 들어 이에 제한되지 않는 포타슘 카보네이트의 존재하에 적절한 bis-알킬화제, 예를 들어 이에 제한되지 않는 1,2-디브로모에탄으로 반응시켜 화학식 (11)의 화합물을 생산한다.

화학식 (12)의 화합물은 화학식 (11)의 화합물을 용매, 예를 들어 이에 제한되지 않는 디클로로메탄 중에 염기, 예를 들어 이에 제한되지 않는 탄산수소나트륨의 존재하에 산화제, 예를 들어 이에 제한되지 않는 3-클로로페록시벤조산으로 처리하고, 이어서 물 및 염기, 예를 들어 이에 제한되지 않는 나트륨 하이드록시드로 처리하여 제조되며, 화학식 (12)의 화합물을 생성한다.

그 다음에 화학식 (12)의 화합물을 적절한 그리나드 시약,예를 들어 이에 제한되지 않는 화학식(3)의 그리나드 시약으로, 적절한 조건, 예를 들어 약 -25℃ 내지 약 25℃ 사이의 온도, 바람직하게는 약 0℃에서 처리하여 페닐옥시마그네슘 할로겐화 중간체 생성물을 생산하고, 이는 적절한 조건하에서 화학식 (1)의 화합물과 반응하며, 예를 들어 극성 비-양성자성 용매, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 디클로로메탄 또는 테트라히드로푸란에서 반응하여 화학식 (13)의 옥스인돌 화합물을 제공한다.

화학식 (13)의 옥스인돌 화합물의 C-3 위치로부터 하이드록실 기의 제거는 적절한 조건, 산, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 트리플루오로아세트산의 존재하에서 예를 들어 실란 시약, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 트리에틸실란으로 화학식 (13)의 화합물로 처리하여 이루어지고, 화학식 (14)의 화합물을 생산한다. 또한 화학식 (13)의 옥스인돌 화합물의 C-3위치로부터 하이드록실 기의 제거는 먼저 화학식 (13)의 화합물과 SOCl₂/NEt₃를 처리하고, 그 다음에 생성 중간체를 아연 분진으로 환원시켜 이루어지며 화학식 (14)의 화합물을 제공한다. 또한, 상기 제거는 화학식 (13)의 화합물을 요오드화수소산으로 처리하여 이루어지며, 화학식 (14)의 화합물을 제공한다.

분자 내 고리화 반응은 화학식(14)의 화합물을 염기, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 세슘 카보네이트의 존재하에서, bis-알킬화제, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 클로로이도메탄으로 처리하여 이루어지고, 화학식 (15)의 화합물을 생산하고, 상기 화학식 (15)의 화합물은 표준 분리 기술에 의해 반응 혼합물로부터 분리된다.

그 다음 화학식 (15)의 화합물은 용매, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 N,N-디메틸포름아마이드, 아세토니트릴, 테트라히드로푸란, 1,4-다이옥신 또는 아세톤 중 염기, 바람직하게는 이에 제한되지 않는 수소화 나트륨, 탄산세슘, 또는 수산화나트륨의 존재하에서 화학식 (Ⅱ)의 화합물을 생산하기 위하여 적절한 조건하에서 화학식 (16)의 친전자체와 반응하고, 상기 화학식 (Ⅱ)의 화합물은 표준 분리 기술에 의해 반응 혼합물로부터 분리될 수 있다.

화학식 (Ⅱ)의 화합물은 적절한 키랄 고정상을 사용한 유사 이동층 크로마토그래피를 통해서 (S)-거울상 이성질체(즉, 화학식 (Ⅱ-S)의 화합물) 및 이에 상응하는 (R)-거울상 이성질체(즉, 화학식 (Ⅱ-R)의 화합물)로 분리될 수 있고, 키랄 고정상은 예를 들어 이제 제한되지 않는 ChiralPAK^?-IC이고 적절한 이동상은 예를 들어 이에 제한되지 않는 디클로로메탄/아세톤이다.

유리 염기 또는 산 형태로 존재할 수 있는, 제조된 상기 기재된 모든 화합물은 적절한 무기 또는 유기 염기 또는 산과 함께 처리하는 것에 의해 그들의 약학적으로 허용 가능한 염으로 변환될 수 있다. 상기 제조된 화합물의 염은 표준 기술에 의해 그들의 유리 염기 또는 산의 형태로 변환될 수 있다. 화학식 (Ⅰ) 및 (Ⅱ)의 모든 동소체, 비결정형태, 무수물, 수화물, 용매화물 및 염은 발명의 범위 안으로 의도되었다는 것이 이해되어야 한다. 또한, 산 또는 에스테르 기를 포함하고 있는 화학식 (Ⅰ) 및 (Ⅱ)의 모든 화합물은, 여기서 설명하고 있는 방법 또는 당업자에게 알려진 방법으로, 각각 상응하는 에스테르 또는 산으로 변환될 수 있다.

하기 구체적인 합성 제조(시작 물질 및 중간체의 제조) 및 합성 실시예(화학식 (Ⅰ) 및 화학식 (Ⅱ)의 화합물의 제조)는 발명의 실시를 돕기 위한 안내로서 제공되고, 발명의 범위를 제한하는 것을 의도한 것이 아니다. 특정 화합물에 있어서 하나 이상의 NMR이 제공되고, 각각 NMR은 단일 입체이성질체, 화합물의 입체이성질체의 라세믹 화합물 또는 입체이성질체의 비 라세믹 화합물을 나타낼 수 있다.

합성 제조 1

3-하이드록시-3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온

화학식 (4)의 화합물

630L의 반응기를 세사몰(42.6kg, 299mol)로 충전시켰다. 테트라히드로푸란(400kg)을 첨가하고 수득된 용액을 1℃로 42분 동안 냉각시켰다. 내부 온도를 0℃ 내지 4℃ 사이에서 유지하면서 2시간 동안 이소프로필마그네슘 염화물(테트라히드로푸란 내 2M 용액, 173kg, 337mol)을 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 내부 온도는 -5℃로 낮추고, 이사틴(37.9kg, 250mol)을 4개의 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 1 내지 3℃에서 2.75시간 동안 교반하였다. 1000L 반응기를 암모늄 클로라이드(72kg)에 이어 탈이온수(356 kg)로 충전하였다. 고체가 완전히 녹을때까지 혼합물을 15℃에서 교반하였고, 생성 용액을 한시간 동안 1℃로 냉각시켰다. 630L 반응기의 내용물을 한시간 동안 1000L 반응기로 옮기고 내부 온도를 3℃ 내지 4℃로 유지하였다. 630L의 반응기를 톨루엔(133kg)으로 헹구고 헹군 용액을 1000L 반응기에 첨가하였다. 1000L 반응기의 내용물을 29분 동안 20~20℃로 데우고 추가 15분 동안 교반하였다. 교반을 멈추고, 반응기의 내용물을 25℃에서 15분 동안 유지시켜, 상을 분리되게 하였다. 수상을 제거하고, 탈이온수의 염화 나트륨 용액을 내부 온도 22-24℃에서 25분 동안 첨가하였다. 교반을 멈추고 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 유지시켜, 상이 분리되게 하였다. 유기 상을 질소를 이용하여 0.5시간 동안 가스를 제거시키고, 톨루엔(89kg)을 첨가하였다. 반응기에 300 mbar의 진공을 가하고 반응기의 외부 온도를 50-60℃에 설정하였다. 혼합물의 휘발성분은 12시간 동안 증류에 의해 제거하였고 670L의 증류액을 모았다. 반응기의 외부 온도는 20-25℃로 설정하였다. 냉각 동안 오렌지색 침전물이 침전되었다. 톨루엔(114kg)을 첨가하고 10분동안 현탁액을 교반하였다. 여과에 의해 고체를 얻고, 테트-부틸 메틸 에테르(171kg)와 헵탄(85kg)으로 세척하고, 10.5시간동안 170에서 4 mbar로 감압하면서 연분홍 고체인 3-하이드록시-3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(73.5kg, 양적 수율)을 수득하였다; 순도 (HPLC-UV at 300 nm) 99.3% a/a; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ10.18 (s, 1H), 9.08(s, 1 H), 7.21-7.07 (m, 2H), 6.88-6.74 (m, 3H), 6.38 (br s, 1H), 6.23 (s, 1H), 5.92 (s, 2H); ¹³C NMR (75 MHz, DMSO-d₆)δ178.4, 148.4, 146.6, 143.0, 139.4, 133.2, 128.6, 123.8, 121.1, 120.1, 109.0, 106.8, 100.8, 97.4, 75.1.

합성제조 2

3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온의 합성

화학식 (5)의 화합물

1600L 반응기를 3-하이드록시-3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(113.1kg, 396mol)으로 충전시키고, 진공화하고 질소로 채웠다. 20분동안 트리플루오로아세트산을 두 부분으로 첨가하였고 내부 온도를 1시간동안 10℃로 낮추었다. 트리에틸실란(69.2kg, 595mol)을 10-11℃에서 2시간 5분 동안 첨가하였고 혼합물을 10-11℃에서 추가 0.5시간 동안 교반하였다. 1000L 반응기를 헵탄(524kg) 및 테트-부틸-메틸에테르(63kg)으로 충전시켰다. 1000L 반응기의 내용물을 내부온도 10-11℃에서 13분 동안 1600L 반응기로 옮겼다. 그 결과의 노란-주황색 현탁액을 한 시간 동안 23℃까지 따뜻하게 하였다. 여과에 의해 고체를 모으고, 헵탄(464 kg)으로 세척하고 이어서 테트-부틸 메틸 에테르(57 kg)로 세척하고, 25시간 동안 58에서 7 mbar로 감압하면서 50℃에서 건조하여 황백색 고체인 3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(82.8kg, 75%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 300 nm) 98.0% a/a; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ10.40 (s, 1H), 9.25 (s, 1H), 7.17-7.10 (m, 1H), 6.95-6.81 (m, 3H), 6.55 (s, 1H), 6.43(s, 1H), 5.92-5.85 (m, 2H), 4.66 (s, 1H); ¹³C NMR (75 MHz, DMSO-d₆) δ177.9, 150.1, 146.6, 142.7, 139.6, 130.9, 127.4, 123.8, 121.2, 115.9, 109.5, 109.0, 100.7, 97.8, 55.0.

합성제조 3

3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-비스(하이드록시메틸)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온의 합성

화학식 (6)의 화합물

1000L 반응기를 3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(56.3kg, 209mol)에 이어 파라포름알데히드(25.4kg, 847mol) 및 탈이온수(285kg)로 충전시켰다. 반응 혼합물을 25분 동안 내부온도 5℃로 냉각시키고 30 중량%의 수산화나트륨 수용액(113kg, 847mol)을 5℃에서 40분 동안 첨가하였다. 반응 혼합물을 5℃에서 한시간 동안 교반하였다. 두번째 1000L 반응기를 탈이온수(260kg)와 32% 염산(124kg)으로 충전시켰다. 첫번째 반응기의 내용물을 두번째 반응기의 내용물에 1℃에서 80분 동안 첨가하였다. 첫번째 반응기를 탈이온수(35kg)로 헹구고, 헹군 용액을 두번째 반응기로 옮겼다. 생성 현탁액을 1℃에서 한시간 동안 교반하고 여과에 의해 고체를 모으고, 농축된 염산(11kg)과 물(20kg)의 혼합물로 세척하고 24시간 동안 50 에서 6 mbar로 감압하면서 55-60℃에서 건조시켜 옅은갈색 고체인 3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-비스(하이드록시메틸)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(69.8 kg, 99%)을 수득하였다:순도 (HPLC-UV at 230 nm) 95.4% a/a; ¹H NMR (DMSO-d₆, 300 MHz) δ9.06 (s, 1H), 7.17-6.84 (m, 5H), 6.19-6.10 (m, 2H), 5.86 (s, 2H), 5.12-4.92 (m, 3H), 4.11-4.06 (m, 1H), 3.79-3.73 (m, 1H); ¹³C NMR (DMSO-d₆, 75 MHz) δ179.0, 150.5, 146.7, 143.9, 139.9, 132.6, 127.4, 124.0, 121.9, 118.2, 108.7, 108.6, 101.1, 98.0, 65.4, 63.2, 56.2.

합성제조 4

스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온의 합성

화학식 (8)의 화합물

1000L 반응기를 3-(6-하이드록시-1,3-벤조디옥솔-5-일)-1,3-비스(하이드록시메틸)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(65.0kg, 197 mol)에 이어 테트라히드로푸란(586kg)으로 충전시켰다. 생성 용액을 20분 동안 -4℃로 냉각시키고 트리-n-부틸포스핀(40.0kg, 197 mol)을 6분 동안 첨가하고, 내부 온도를 0℃ 이하로 유지하면서 125분 동안 테트라히드로푸란(75kg)의 디이소프로필 아조디카르복실레이트(44.8kg, 197 mol) 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 20분 동안 -3℃에서 교반하고 반응기의 내용물을 2500L 반응기로 옮겼다. 1000L반응기를 테트라히드로푸란(16kg)으로 헹구고 헹군 용액을 2500L 반응기에 첨가하였다, 25 중량%의 암모니아 수용액(118kg)을 30분 동안 -3 내지 -2℃에서 첨가하였다. 반응혼합물을 1.25시간 동안 25℃로 따뜻하게 하였고, 추가로 2시간 동안 교반하였다. 탈이온수(650kg)와 에틸 아세테이트(585kg)을 첨가하고 그 혼합물을 40분 동안 40℃로 따뜻하게 하였다. 추가 15분 동안 교반한 후에, 교반을 멈추고 한시간 동안 그 상이 분리되게 하였다. 수상을 제거하고 탈이온수(650kg)를 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 15분 동안 교반하였다. 교반을 멈추고 한시간 동안 그 상이 분리되게 하였다. 수상을 제거하고 탈이온수(325kg)를 첨가하였다. 4.5시간 동안 950L의 증류액이 모아질때까지 내부온도 21-39℃ 및 382 에서 98 mbar로의 감압하에서 증류에 의해 혼합물을 부분적으로 농축시켰다. 메탄올(1600kg)을 첨가하고 혼합물을 35분 동안 60℃로 가열하였다. 9.33시간 동안 1260L의 증류액이 모아질 때까지 내부온도 32-58℃ 및 530 에서 170 mbar로의 감압하에서 증류에 의해 혼합물을 부분적으로 농축하였다. 생성 현탁액을 2시간 동안 22℃로 냉각시켰고 추가로 6시간 동안 교반하였다. 여과에 의해 고체를 모으고, 메탄올(34kg) 및 탈이온수(17kg)의 혼합물로 세척하고 31시간 동안 50 에서 3 mbar로 감압하면서 55-60℃에서 건조시켜 35.8kg의 갈색고체를 얻고 이를 400L 반응기로 옮겼다. 메탄올(163kg)을 첨가하고 그 결과의 현탁액을 0.5시간 동안 교반하였다. 그 혼합물을 35분 동안 가열환류하고 추가 15분동안 가열환류하였다. 탈이온수(33kg)를 첨가하고 혼합물을 155분 동안 가열환류하였다. 높은 온도를 유지하면서 상기 현탁액을 여과시키고 필터케이크를 메탄올(22kg)과 탈이온수(11kg)의 혼합물로 세척하고 8시간 동안 50 에서 4 mbar의 감압하에서 55-60℃에서 건조시켜 엷은 갈색 고체인 스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온(30.44 kg, 49%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 230 nm) 89.4%; MS (ES+) m/z 282.3 (M + 1); ¹H NMR (400 MHz, CDCI₃)δ10.56 (s, 1H), 7.27-6.92 (m, 4H), 6.67 (s, 1H), 6.26 (s, 1H), 5.93 (s, 2H), 4.79-4.64 (m, 2H).

합성 제조 5

2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-카르브알데히드의 합성

화학식 (11)의 화합물

2000L 반응기를 아세톤(404.5kg)으로 충전시키고, 이어서 포타슘 카보네이트(256kg, 1852mol) 및 1,2-디브로모에탄(241.5kg, 1298mol)으로 충전시켰다. 상기 혼합물을 가열환류하였다. 500L 반응기를 아세톤(606kg) 및 3,4-디하이드록시벤즈알데히드(128kg, 926mol)로 충전시켰다. 500L 반응기의 내용물을 반응온도가 50-60℃로 유지되는 동안에 150-180 kg/h의 속도로 2000L 반응기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 54-60℃에서 교반하고, 20℃로 냉각시키고, 500L 누체(Nutsche) 필터로 여과하였다. 필터 케익을 아세톤(2×202kg)으로 세척하였다. 여과액과 아세톤 세척액을 2000L 반응기에 합치고 생성 용액을 40℃ 미만의 온도에서 감압하에서 건조물로 농축시켰다. 잔여물에 에틸 아세테이트(683kg)를 첨가하고 생성 용액을 5 중량%의 포타슘카보네이트 수용액(256kg)으로 세척하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고, 0.5시간 동안 가라앉히고 수상을 제거하였다. 이 세척과정을 전체적으로 세번 반복하였다. 유기상은 통안에 임시로 떼어놓았다. 2000L 반응기를 혼합된 수용 세척액으로 충전하고, 이어서 에틸 아세테이트(113.9kg)로 충전하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고, 0.5시간 동안 가라앉히고 수상을 제거하였다. 통 안의 유기상을 반응기안에 첨가하고 이어서 28 중량%의 염화나트륨(192kg) 수용액을 첨가하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 교반하고, 0.5시간 동안 가라앉히고 수상을 제거하였다. 유기상은 혼합물의 에틸 아세테이트 함량이 10% 이하(가스 크로마토그래피에 의해 측정)가 될 때까지 45℃ 미만의 온도에서 감압하면서 농축하였다. 혼합물이 35-45℃ 사이의 온도를 유지하는 동안에 석유 에테르(268.8kg)를 80-90kg/h의 속도로 잔여물에 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 5℃로 냉각시키고, 추가로 석출물이 침전되는 한시간 동안 그 온도를 유지시켰다. 생성 슬러리를 원심 필터로 여과시키고 건조하여 황백색의 고체인 2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-카르브알데히드(111.4 kg, 73%)를 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 230 nm) 99.3%.

합성 제조 6

2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-올의 합성

화학식 (12)의 화합물

2000L 반응기를 디클로로메탄(1303.4kg)에 이어서 2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-카르브알데히드(98.0 kg, 597 mol)로 충전시키고 균일한 용액이 얻어질때까지 교반하였다. 3-클로로페록시벤조산(144.3 kg, 836 mol)을 첨가하였다. 혼합물을 8-10℃/h의 속도로 가열환류하고, 추가로 6시간 동안 가열환류하고 20℃로 냉각하였다. 생성 현탁액을 500L 누체 필터를 이용하여 여과하고 필터케익을 디클로로메탄(391 kg)으로 세척하였다. 여과액과 세척용액을 2000L 반응기로 옮겼다. 7 중량%의 중탄산나트륨 수용액(212.7kg)을 첨가하고 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 교반을 멈추고 상을 0.5시간 동안 분리되게 하였다. 수상을 제거하였다. 중탄산나트륨 수용액 세척과정을 전체적으로 세번 반복하였다. 유기상을 30℃ 미만의 온도에서 감압하에서 건조상태로 농축하였다. 메탄올(116.1kg)을 첨가하고 생성 혼합물을 0℃로 냉각하였다. 15.5 중량%의 수산화나트륨 수용액(243.3kg)을 30-40 kg/h의 속도로 첨가하였고 혼합물의 온도는 0-10℃ 사이로 유지하였다. 혼합물을 이 온도에서 추가 2.25시간 동안 교반하였고 혼합물의 pH는 4N 염산(266.5kg)의 첨가로 6-7로 조절하였고 혼합물의 온도는 0-10℃ 사이로 유지하였다. 상기 혼합물을 주위온도로 따뜻하게 하였고 전체적으로 0.5시간 동안의 교반에 의해 메틸 테트-부틸 에테르(각 추출마다 145kg)로 전체적으로 세 번 추출하고, 교반을 멈추고 0.5시간 동안 상이 분리되게 하였다. 혼합된 유기 추출물을 0.5시간 동안 교반에 의해 7% 중탄산나트륨 수용액(각 세척에 대해 212.7kg)으로 전체적으로 세 번 세척하고, 교반을 멈추고, 0.5시간 동안 상이 분리되도록 하고 수상을 제거하였다. 유기상은 0.5시간 동안 교반에 의해 30 중량%의 염화나트륨 수용액(212.7kg)으로 세척하고, 교반을 멈추고, 0.5시간 동안 상이 분리되도록 하고 수상을 제거하였다. 유기상을 45℃ 미만의 온도에서 감압하에서 건조상태로 농축시켰다. 추가로 테트라히드로푸란(170kg)을 첨가하였고 그 결과의 용액을 45℃ 미만의 온도에서 감압하에서 건조상태로 농축시켰다. 추가로 테트라히드로푸란(17.1kg)을 첨가하였고, 생성용액은 45℃미만의 온도에서 감압하에서 건조상태로 농축시켰다. 테트라히드로푸란을(122.5 kg)을 첨가하여 테트라히드로푸란내의 2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-올(86.3 kg, 95%)의 갈적색 수용액을 수득하였고, 추가의 정제없이 사용하였다: 순도 (HPLC-UV at 220 nm) 95.7%.

합성 제조 7

3-하이드록시-3-(7-하이드록시-2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌l-2-온의 합성

화학식 (13)의 화합물

1000L 반응기를 테트라히드로푸란(296.8kg)으로 충전하였다. 테트라히드로푸란을 한시간 동안 가열환류하고 주위온도로 냉각시켰다. 15-30℃의 온도에서 마그네슘(15.0kg, 625mol), 요오드(19.5g, 촉매량), 브로모에탄(147.0 g, 촉매량)을 첨가하였다. 생성 혼합물을 0.5시간 동안 50-55℃로 가열하고 2-클로로프로판(4.5 kg, 57 mol)에 이어 테트라히드로푸란내의 2M의 이소프로필마그네슘 클로라이드 용액(7.6kg, 촉매량)을 첨가하였다. 2-클로로프로판(39.2 kg, 500 mol)을 8-10 kg/h 의 속도로 첨가하였고 반응 혼합물의 온도는 55-70℃ 사이를 유지하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 58-68℃로 가열하고, 주위온도로 냉각하고 추가로 4시간 동안 교반하였다. 2000L 반응기를 테트라히드로푸란(122.5kg)내의 2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-올(86.3kg, 567mol) 용액에 이어 추가의 테트라히드로푸란(804.1kg)으로 충전하였다. 생성용액을 0℃로 냉각하고 1000L 반응기 안의 내용물을 30-50 kg/h의 속도로 2000L 반응기에 첨가하였고 반응기의 온도는 0-5℃ 사이를 유지하였다. 1000L 반응기를 테트라히드로푸란(각 헹굼마다 5kg)으로 세번 헹구고 헹군 용액을 2000L반응기에 첨가하였다. 반응 혼합물을 한시간 동안 7-13℃에서 교반하였고 -5℃로 냉각하였다. 이사틴(69.5kg, 472.5mol)을 0.5시간 동안 세번의 동일한 양으로 첨가하였고 혼합액을 0.5시간 동안 -5 - 0℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 7.5시간 동안 50-55℃에서 가열하였고 주위온도로 냉각시켰다. 5000L 반응기를 물(576.9kg)과 염화암모늄(118.2kg)으로 충전하였다. 생성 용액을 0-5℃로 냉각시켰다. 2000L 반응기 안의 내용물을 혼합물의 온도를 0-5℃로 유지하면서 300-500 kg/h의 속도로 5000L 반응기로 첨가하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 15-25℃에서 교반하고 교반을 멈추었다 한시간 동안 상이 분리되게 하고 수상을 제거하였다. 27 중량%의 염화나트륨 수용액(69.6kg)을 첨가하고 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. 교반을 멈추고, 상을 한시간 동안 분리되게 한 후 수상을 제거하였다. 염화나트륨 수용액 세척 과정을 전체적으로 두번 반복하였다. 유기상을 2000L 반응기로 옮기고 45-55℃의 온도에서 감압하에서 농축시켰다. 톨루엔(302.3kg)을 45-50℃의 온도 및 90-130kg/h의 속도로 잔여물에 첨가하였다. 생성 혼합물을 8-10℃/h의 비율로 15℃로 냉각하고 추가로 한시간 동안 10-15℃에서 교반하였다. 생성 슬러리를 원심 필터로 여과하고 필터케익을 물(69.5kg)로 세척하고 45-50도에서 건조시켜 황백색 고체인 3-하이드록시-3-(7-하이드록시-2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(130.8kg, 93%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 210 nm) 99.7%.

합성 제조 8

3-(7-하이드록시-2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온의 합성

화학식 (14)의 화합물

2000L 반응기를 디클로로메탄(489.4kg)에 이어서 3-하이드록시-3-(7-하이드록시-2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(92.0 kg, 307 mol)을 23kg씩 네번으로 한시간 동안 충전시켰다. 생성 용액을 주위온도에서 한시간 동안 교반하고 트리에틸실란(107.2kg, 921mol)을 첨가하였다. 혼합물을 -5℃로 냉각하고 반응 혼합물의 온도를 0℃ 아래로 유지하면서 트리플루오로아세트산(105.1kg, 921mol)을 25-30 kg/h의 속도로 첨가하였다. 혼합물을 2.5시간 동안 -5 - 0℃에서 교반하고, 18-20℃로 따뜻하게 하고, 추가 6.5시간 동안 교반하고 30℃ 미만의 온도에서 감압하에서 건조상태로 농축하였다. 15-20℃에서 잔여물에 메틸 테트-부틸 에테르(139.8kg)를 첨가하고 혼합물을 35℃ 미만의 온도에서 감압하에서 거의 건조상태(near-dryness)로 농축하였다. 원심 필터로 혼합물을 여과하고 2000L 반응기를 필터케익에 이어 메탄올(72.7kg)으로 충전시켰다. 혼합물을 10-15℃에서 0.5시간 동안 교반하고 원심필터로 여과하였다. 필터케익을 40-50℃ 하에서 감압하에서 건조시켜 무색의 고체인 3-(7-하이드록시-2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(68.0 kg, 78%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 254 nm) 99.3%.

합성 제조 9

2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온의 합성

화학식 (15)의 화합물

2000L 스테인리스강 결정기를 N,N -디메틸포름아마이드(113.7 kg)와 테트라히드로푸란(1070.9 kg)으로 충전시켰다. 내용물을 0-5℃로 냉각하고 3-(7-하이드록시-2,3-디하이드로-1,4-벤조디옥신-6-일)-1,3-디하이드로-2H-인돌-2-온(12.0 kg, 42.4mol)에 이어 탄산세슘(30.4kg, 93.3mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물의 온도를 0℃ 내지 5℃ 사이로 유지하면서 N,N -디메틸포름아마이드(16.9 kg)내의 클로로이도메탄용액(9.4kg, 53.7mol)을 39.5kg/h의 속도로 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 0-5℃에서 교반하고 18.5시간 동안 20-25℃로 가열하였다. 혼합물을 여과하고 필터케익을 테트라히드로푸란(26.4kg)에 부유시키고 다시 여과하였다. 혼합된 여과액을 혼합하고 60℃ 미만의 온도에서 감압하에서 110L의 부피로 농축하였다. 혼합물을 20-25℃로 냉각시키고 343.1kg/h의 속도로 정제수(1200.8kg)를 첨가하였다. 혼합물을 0-5℃로 냉각시키고 여과하였다. 필터케익을 물(310.5kg)에 부유시키고, 여과하고 물의 함량이 칼-피셔 증류법에 의해 10.6 중량%가 될 때까지 60℃ 미만의 온도에서 건조시켰다. 200L 반응기를 테트라히드로푸란(98.0kg)으로 충전하였다. 부분적으로-건조된 필터 케익을(~11.0kg)을 고체 첨가 깔때기를 사용하여 200L 반응기에 첨가하였다. 혼합물을 4.5시간 동안 가열환류하였고 10-15℃로 냉각하고 10-15℃에서 3.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 필터케익을 차가운(0-5℃) 테트라히드로푸란(2×10.7 kg)으로 세척하고 55℃ 미만의 온도에서 트레이 건조기(tray dryer)에서 건조하여 연노란색 고체인 2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온(6.88kg, 63%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 210 nm) 98.3%; mp > 250℃; ¹H NMR (300MHz, DMSO-d₆) δ10.58 (br s, 1H), 7.26-7.19 (m, 1H), 7.09 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.99-6.90 (m, 2H), 6.47 (s, 1 H), 6.16 (s, 1 H), 4.74, 4.60 (ABq, J_AB = 9.2 Hz, 2H), 4.20-4.07(m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, DMSO-d₆) δ178.4, 154.7, 144.0, 141.8, 137.8, 132.6, 128.7, 123.8, 122.3, 121.5, 111.1, 109.8, 98.7, 79.5, 64.2, 63.6, 57.7; MS (ES+) m/z 295.9 (M + 1).

합성 실시예 1

1'-{[5-(트리플루오로메틸)-2-푸릴]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온의 합성

화학식 (Ⅰ)의 화합물

100L 반응기를 스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온 (6.03kg, 19.5mol)에 이어, 탄산세슘(16.02 kg, 48.7 mol)으로 충전시켰다. 아세톤 (48.8kg)을 첨가하고 그 결과의 현탁액을 한시간 동안 가열환류하였다. 반응혼합물이 환류를 유지하는 동안에 두시간 동안 추가의 깔때기를 사용하여 2-브로모메틸-5-(트리플루오로메틸)푸란(4.92kg, 21.2mol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가로 두시간 동안 환류로 교반하고 대기압에서 증류에 의해 37L의 증류액이 모아질때까지 아세톤을 제거하였다. 톨루엔(48.8kg)을 첨가하고 처음에는 대기압에서 그리고 감압하에서 37L의 증류액이 모아질 때까지 증류를 계속하였다. 톨루엔(36.9 kg)을 첨가하고 37L의 증류액이 모아질 때까지 150 - 180mbar의 압력 및 54-55℃에서 증류를 계속하였다. 100L 반응기의 내용물을 25℃로 식히고 톨루엔(40.9kg)을 첨가하였다. 100L 반응기의 내용물을 200L 반응기로 옮기고 탈이온수(48.8kg)을 첨가하였다. 교반된 혼합물을 39℃로 따뜻하게 하고, 교반을 멈추고 11시간 동안 상을 분리되게 하였다. 아래상은 제거하고 남은 톨루엔 상은 18L의 증류액이 모아질 때까지 100 mbar의 감압하에서 55-64℃에서 증류시켰다. 생성 용액을 톨루엔으로 총 부피 98L로 희석시켰다. 200L 반응기의 내용물이 실리카 겔(20kg)과 툴루엔(40kg)이 채워진 크로마토그래피 컬럼을 지나가게 하였다. 컬럼을 톨루엔으로 용출시켜 10개의 30kg 분획을 회수하였다. 컬럼을 아세톤(100kg)으로 세척하였다. 분획 2 내지 10을 감압하에서 증류가 계속되는 동안 2000L 반응기로 연속하여 옮겼다. 반응기의 내용물을 톨루엔으로 50L 부피가 되도록 조절하고 용액을 79℃로 가열하였다. 헵탄(85 kg)을 15분 동안 첨가하고 혼합물을 3시간 동안 10℃로 냉각시켰다. 내부온도가 56℃일 때 결정화가 시작되었다. 여과에 의해 고체를 회수하고, 헵탄(10.2kg)과 톨루엔(5.1kg)의 혼합물로 세척하고 15시간 동안 50 mbar의 감압하에서 45-50℃에서 건조하여 무색 고체인 1'-{[5-(트리플루오로메틸)-2-푸릴]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온(6.08 kg, 73%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV at 230 nm) 99.6%; mp 139-141℃; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) δ7.32-6.97 (m, 5H), 6.72 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.90-5.88 (m, 2H), 5.05, 4.86 (ABq, J_AB = 16.1Hz, 2H), 4.91 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.66 (d, J = 9.0 Hz, 1H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ176.9, 155.7, 153.5, 148.8, 142.2, 141.9, 140.8, 140.2, 139.7, 139.1, 132.1, 129.2, 124.7, 124.1, 123.7, 121.1, 120.1, 117.6, 114.5, 114.4, 110.3, 109.7, 103.0, 101.9, 93.8, 80.0, 57.8, 36.9; MS (ES+) m/z 430.2 (M + 1), 452.2 (M + 23); Calc'd for C₂₂H₁₄F₃N0₅: C, 61.54%; H, 3.29%; N, 3.26%; Found: C, 61.51 %; H, 3.29%; N, 3.26%.

합성 실시예 2

키랄 HPLC를 이용한 화학식 (Ⅰ)의 화합물의 분리

화학식 (Ⅰ)의 화합물을 아래와 같은 조건에서 키랄 HPLC를 이용하여 화학식(Ⅰ-S)의 화합물 및 화학식(Ⅰ-R)의 화합물로 분리하였다.

컬럼(column): Chiralcel? OJ-RH; 20 mm I.D. x 250 mm, 5 mic; Lot: OJRH CJ-EH001 (Daicel Chemical Industries, Ltd)

용리액(Eluent): 아세토니트릴/물 (60/40, v/v, 등용매)

공급속도(Flow rate): 10mL/min

작동시간(Run time): 60 min

로딩(Loading): 아세토니트릴 1mL의 화학식 (Ⅰ)의 화합물 100mg

온도: 주위온도

상기 키랄 HPLC 조건에서, 화학식(Ⅰ-R)의 화합물, 즉 (R)-1'-{[5-(트리플루오로메틸)푸란-2-일]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1,3]-벤조디옥솔-7,3'인돌]-2'(1'H)-온은 흰색 고체인 첫번째 분획으로 분리된다; ee(거울상초과량) >99% (분석적인 OJ-RH, 물내 55% 아세토니트릴); mp 103-105℃; ¹H NMR(300 MHz, DMSO-d₆)δ7.32-6.99 (m, 5H), 6.71 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.05(s, 1H), 5.89 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 5.13, 5.02 (ABq, J_AB = 16.4 Hz, 2H), 4.82, 4.72 (ABq, J_AB = 9.4 Hz, 2H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCI₃) δ177.2, 155.9, 152.0, 149.0, 142.4, 142.0, 141.3, 132.0, 129.1, 123.9, 120.6, 119.2, 117.0, 112.6, 109.3, 108.9, 103.0, 101.6, 93.5, 80.3, 58.2, 36.9; MS (ES+) m/z 430.2 (M + 1), [α]_D -17.46°(c 0.99, DMSO). 화학식(Ⅰ-S)의 화합물, 즉 (S)-1'-{[5-(트리플루오로메틸)푸란-2-일]메틸}스피로-[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온은 흰색 고체인 두 번째 분획으로부터 분리된다. ee > 99% (분석적인 OJ-RH, 물안의 55% 아세토니트릴); mp 100-102℃; ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ7.32-6.99 (m, 5H), 6.71 (d, J= 3.4 Hz, 1 H), 6.67 (s, 1 H), 6.05 (s, 1 H), 5.89 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 5.12, 5.02 (ABq, J_AB= 16.4 Hz, 2H), 4.82, 4.72 (ABq, J_AB = 9.4 Hz, 2H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ177.2, 155.9, 152.0, 149.0, 142.4, 142.0, 141.3, 132.0, 129.1, 123.9, 120.6, 119.2, 117.0, 112.6, 109.3, 108.9, 103.0, 101.6, 93.5, 80.3, 58.2, 36.9; MS (ES+) m/z 430.2 (M + 1),[α]_D +14.04° (c 0.99, DMSO).

합성 실시예 3

SMB 크로마토그래피에 의한 화학식(Ⅰ)의 화합물의 분리

화학식(Ⅰ)의 화합물을 하기와 같은 조건하에 SMB 크로마토그래피에 의해 화학식(Ⅰ-S)의 화합물 및 화학식(Ⅰ-R)의 화합물로 분리하였다;

추출: 147.05 mL/min

라피네이트(Raffinate): 86.13 mL/min

용리액(Eluent): 183.18 mL/min

공급(Feed): 50 mL/min

재순환(Recycling): 407.88 mL/min

소요시간(Run Time): 0.57 min

온도: 25℃

압력: 55 bar

공급용액(1.0L 유동상(아세토니트릴/메탄올의 25:75(v:v) 혼합물)내의 화학식(Ⅰ)의 화합물 25g)을 고정상으로 110g(컬럼당, 9.6cm, 4.8cm 1.D)의 ChiralPAK-AD를 포함하고 있는 2-2-2-2 배치의 여덟개의 똑같은 관이 장착된 SMB 시스템(Novasep Licosep Lab Unit)안으로 연속적으로 주입시켰다. 첫번째로 용출되는 거울상 이성질체(화학식(Ⅰ-R)의 화합물)가 라피네이트 스트림(raffinate stream)안에 포함되어 있고 두번째로 용출되는 거울상 이성질체(화학식(Ⅰ-S)의 화합물))가 추출 스트림(extract stream)안에 포함되어 있다. SMB 분해로부터 얻어지는 화학식(Ⅰ-R)의 화합물 및 화학식(Ⅰ-S)의 화합물의 특성 데이터는 키랄 HLPC를 사용하여 앞서 얻은 데이터와 동일하다.

화학식(Ⅰ)의 화합물을 물 분취 LCMS 자동정제 시스템(Waters preparative LCMS autopurification system)으로 화학식(Ⅰ-S)의 화합물 및 화학식 (Ⅰ-R)의 화합물로 분리하였다. 키랄 컬럼으로부터 처음 용출된 거울상 이성질체는 상응하는 5'-브로모 유도체를 제공하기 위해서 브롬화 되고(입체중심으로부터 잘-제거된 위치에서), 이는 X선 결정학에 적합한 단일 결정을 생성하기 위해 그 뒤에 결정화 되었다. 처음-용출된 거울상 이성질체의 이러한 브롬화 유도체의 결정 구조가 얻어지고 이의 절대배열은 화학식(1-R)의 화합물과 동일하게 발견된다. 따라서, 키랄 컬럼으로부터 두번째-용출된 거울상 이성질체는 화학식(1-S)의 화합물이다. 게다가, SMB분석의 추출 스트림(extract stream)으로부터 얻어지는 물질은 앞서 언급한 LC분석으로부터 얻어지는 물질의 것과 동일한 사인(positive, 즉 dextrorotatory)의 특정 광학 회전을 가진다.

합성 실시예 4

1'-{[3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일]메틸}-2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온 의 합성

화학식 (Ⅱ)의 화합물

160L 반응기를 주위 온도에서 1,4-디옥산(43 L)에 이어 2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온(6.80kg, 23 mol)으로 충전하였다. 생성 현탁액에 탄산세슘(18.7 kg, 58mol)을 첨가하고 혼합물을 72분 동안 82℃로 가열하였다. 용기를 1,4-디오잔(1,4-diozane)(7 L)으로 헹구고 35분동안 2-(클로로메틸)-3-(트리플루오로메틸)피리딘 하이드로클로라이드(5.88 kg, 25 mol) 소량씩 첨가에 사용하였다. 반응 혼합물의 온도를 43분 동안 100℃까지 올리고 혼합물을 3시간 동안 100℃에서 교반하고, 90분 동안 20℃로 냉각하고 추가 16시간 동안 교반하였다. 탈이온수(40L)와 디클로로메탄(40L)을 첨가하고 반응혼합물을 12분 동안 22℃에서 교반하였다. 교반을 멈추고 21분 동안 상이 분리되게 하였다. 수상 및 유기상을 통으로 분리했다. 160L 반응기를 수상으로 충전시키고 디클로로메탄(41L)를 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 19℃에서 교반하고, 교반을 멈추고 상을 10분 동안 분리되게 하였다. 수상을 제거하고 이전 과정의 유기상을 통으로부터 반응기로 옮겼다. 탈이온수(40L)를 첨가하고 혼합물을 10분 동안 22℃에서 교반하였다. 교반을 멈추고 43분 동안 상을 분리시켰다. 수상을 제거하고 유기상을 19-38℃의 712-97 mbar 감압하에서 건조상태로 농축하였다. 잔여물을 19분 동안 메탄올(56L)에 첨가하였다. 생성 현탁액을 64분 동안 3℃로 냉각시키고 98분 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 필터케익을 차가운(0℃) 메탄올(14L)로 세척하고 10.5시간 동안 21-46℃에서 90-9 mbar 감압하에서 건조시켜 황백색 고체인 1'-{[3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일]메틸}-2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온(8.00 kg, 81%)을 수득하였다: 순도 (HPLC-UV) 99.8%; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) δ8.67-8.63 (m, 1H), 8.01-7.96 (m, 1H), 7.35-7.28 (m, 1H), 7.22-7.13 (m, 2H), 7.05-6.98 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.62-6.58 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.42, 5.14 (ABq, J_AB = 17.3 Hz, 2H), 5.00, 4.74 (ABq, J_AB = 8.9 Hz, 2H), 4.22-4.10 (m, 4H); ¹³C NMR (75 MHz, CDCl₃) δ178.3, 155.3, 152.5, 144.6, 142.4, 138.4, 134.3 (q,³J_C _-F = 5.2 Hz), 132.8, 128.7, 124.4, (q, ²J_C _-F = 32.6 Hz), 123.9 (q, ¹J_C _-F = 273.3 Hz), 123.8, 123.4, 122.2, 121.7, 112.6, 108.6, 99.2, 80.2, 64.6, 64.0, 58.3, 42.3 (q, ⁴J_C _-F =3.3 Hz); MS (ES+) m/z 454.8 (M + 1).

합성 실시예 5

SMB 크로마토그래피에 의한 화학식(Ⅱ)의 화합물의 분리

화학식(Ⅱ)의 화합물을 하기와 같은 조건에서 SMB 크로마토그래피를 이용하여 화학식(Ⅱ-S)의 화합물 및 화학식(Ⅱ-R)의 화합물로 분리하였다.

추출: 182.67 mL/min

라피네이트(Raffinate): 67.44 mL/min

용리액(Eluent): 224.11 mL/min

공급(Feed): 26 mL/min

재순환(Recycling): 420 mL/min

소요시간(Run Time): 1.05 min

온도: 25℃

압력: 50-55 bar

공급용액(1.0L 유동층(디클로로메탄/아세톤의 97:3(v:v) 혼합물)내의 화학식(Ⅱ)의 화합물 68.4g)을 고정상으로 110g(관 당, 10.0 cm, 4.8 cm 1.D))의 ChiraIPAK?-IC를 포함하고 있는 2-2-2-2 배치의 여덟개의 똑같은 관이 장착된 SMB 시스템(Novasep Licosep Lab Unit)안으로 연속적으로 주입시켰다. 화학식(Ⅱ-R)의 화합물이 라피네이트 스트림(the raffinate stream)안에 포함되어 있고, 화학식 (Ⅱ-S)의 화합물이 추출 스트림(extract stream)안에 포함되어 있다.

상기 조건을 사용한 SMB 크로마토그래피로 총 10.62kg의 화학식(Ⅱ)의 화합물을 처리하였다. 키랄 순도(HPLC)가 99.0 a/a 초과인 모든 추출 부분들을 모으고, 감압하에서 26L 부피로 농축하고 100L 반응기 안으로 옮겼다. 13L의 증류액이 모아질 때까지 26-37℃에서 700-590mbar 감압하에서 용액을 추가로 농축시켰다. 메탄올(25L)을 첨가하고 15L의 증류액이 모아질때까지 30-38℃에서 650-360mbar 감압하에서 혼합물을 농축시켰다. 혼합물을 20℃로 냉각하고 메탄올(15L)을 첨가하였다. 15L의 증류액이 모아질때까지 20-39℃에서 650-320mbar 감압하에서 혼합물을 농축시키고 53분 동안 1℃로 냉각하고 추가 70분 동안 교반하였다. 현탁액을 여과하고 필터케익을 차가운(0℃) 메탄올(9L)로 세척하고 15.5시간 동안 질소가스의 흐름하에서 주위온도에서 건조하였다. 고체를 195분 동안 50℃에서 40-1mbar 감압하에서 추가로 건조시키고 화학식(Ⅱ-S)의 화합물, 즉, 무색의 고체인 (S)-1'-{[3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일]메틸}-2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'인돌]-2'(1'H)-온(3.62 kg)을 수득하였다; 순도 (HPLC-UV) 100%; ¹H NMR (300MHz, CDCl₃) δ8.67-8.63 (m, 1H), 8.01-7.96 (m, 1H), 7.35-7.28 (m, 1H), 7.22-7.13 (m,2H), 7.05-6.98 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 6.62-6.58 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 5.42, 5.14 (ABq, J_AB = 17.3 Hz, 2H), 5.00, 4.74 (ABq, J_AB = 8.9 Hz, 2H), 4.22-4.10 (m, 4H); ¹³C NMR (75MHz, CDCI₃) δ178.3, 155.3, 152.5, 144.6, 142.4, 138.4, 134.3 (q, ³J_C _-F = 5.2 Hz),132.8, 128.7, 124.4, (q, ²J_C _-F = 32.6 Hz), 123.9 (q, ¹J_c _-F = 273.3 Hz), 123.8, 123.4, 122.2, 121.7, 112.6, 108.6, 99.2, 80.2, 64.6, 64.0, 58.3, 42.3 (q, ⁴J_C _-F = 3.3 Hz); MS (ES+) m/z 454.8 (M + 1); [α]_D +45.1° (c 2.02, DMSO); ee (CHIRALPAK IC, 디클로로메탄/아세톤 97/3 (v/v)) 100%.

화학식 (Ⅱ-R)의 화합물, 즉, (R)-1'-{[3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일]메틸}-2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온을, 표준절차에 의해 라피네이트로부터 분리시켰다.

생물학적 검정

본 명세서에 기재된 발명을 좀더 완전히 이해하기 위해서, 하기 생물검정이 이에 제조된 화합물의 유용성을 입증하기 위해 개진되었다. 이 예시는 오직 설명적인 목적을 위한 것이고 본 발명을 어떤 식으로든 제한하는 것으로 해석되지 않는다는 점을 이해할 필요가 있다.

생물학적 실시예 1

구아니딘 유입 분석(시험관 내 분석)

이 실시예는 내성 또는 이종성 발현 기원의 세포내에서 안정적으로 발현되는 사람 또는 쥐의 전위-의존성 나트륨 채널에 대한 검사시약 시험 및 자료수집을 위한 시험관내 분석방법을 설명한다. 상기 분석은 전위-의존성 나트륨 채널 변조(바람직하게는 차단된) 화합물의 IC₅₀을 측정하는 데 또한 유용하다. 상기 분석은 Reddy, N.L., et al ., J. Med . Chern . (1998),41(17):3298-302에 의해 설명된 구아니딘 유입 분석을 기초로 한다.

구아니딘 유입 분석은 높은-처리량 마이크로플레이트 기반 형식(high-throughput microplate-based format)에서 전위-의존성 나트륨 채널의 이온 유동 활성을 측정하는데 쓰이는 방사성추적자 유동 분석이다. 이 분석은 유지되는 유입을 생성하는 다양한 알려진 전위-의존성 나트륨 채널 조절기와 ¹⁴C-구아니딘 하이드로클로라이드를, 검사시약의 효능을 분석하기 위해 사용한다. 효능은 IC₅₀ 계산에 의하여 결정된다. 선택성은 다른 전위-의존성 나트륨 채널의 효능과 관심있는 전위-의존성 나트륨 채널의 화합물의 효능을 비교함으로서 결정된다(또한 선택성 평가라고도 불린다).

각각의 검사 시약은 관심있는 전위-의존성 나트륨 채널을 발현하는 세포에 대하여 분석된다. 전위-의존성 나트륨 채널은 TTX 민감성 또는 비민감성으로 특징되어진다. 이 특성은 다른 전위-의존성 나트륨 채널과 함께 혼합 집단안에서 존재할 때 관심있는 전위-의존성 나트륨 채널의 활성을 평가할 때 유용하다. 하기 표 1은 TTX의 존재 또는 부존재에서 어떤 전위-의존성 나트륨 채널을 스크리닝 하는데 유용한 세포주를 요약하였다.

세포주	mRNA 발현	기능분석
CHO-K1 (중국 햄스터 난소; 권장 숙주세포주) ATTC 수납 번호 CCL-61	·RT-PCR에 의하여 Na_v1.4 발현이 보인다. ·다른 Na_v 발현은 검출되지 않는다.	·[¹⁴C] 구아니딘 유입 분석에서의 18- 내지 20-폴드의 증가가 TTX 사용으로 완전히 차단된다(Na_v 1,4는 TTX 민감성 채널이다) .
L6 (쥐 근원세포) ATTC 번호 CRL-1458	·Na_v 1.4 및 1.5의 발현	·[¹⁴C] 구아니딘 유입에서의 10-내지 15-폴드의 증가는 100nM의 TTX에 의해 오직 부분적으로 차단된다 (Na_v 1.5는 TTX 저항성이다)
SH-SY5Y(사람 신경세포종) ATTC 번호 CRL-2268	· Na_v 1.9 및 Na_v 1.7의 출판된 발현	·상기 배경기술의 [¹⁴C] 구아니딘 유입에서의 10- 내지 16- 폴드의 증가는 TTX에 의해 부분적으로 차단된다 (Na_v 1.9는 TTX 저항성이다)
SK-N-BE2C(사람 신경세포종 세포주 ATCC번호 CRL-2268)	· Na_v 1.8의 발현	·피레트로이드와 BE2C 세포의 자극이 상기 배경기술의 [¹⁴C] 구아니딘 유입에서의 6-폴드의 증가를 발생시킨다 ·TTX는 부분적으로 유입을 차단한다 (Na_v1.8 은 TTX 저항성이다)
PC12(쥐 갈색세포종) ATTC 번호 CRL-1721	·Na_v 1.2 및 1.7의 발현	·[¹⁴C] 구아니딘 유입에서의 8-내지 12-폴드 증가가 TTX 사용에 의해 완전히 차단된다 (Na_v 1.2 및 1.7은 TTX 민감성 채널이다)
HEK293 (사람 배아의 신장) ATTC 번호 CRL-1573	·hNa_v 1.7의 발현	·Na_v1.7은 TTX민감성 채널이다. 기능적 구아니딘 분석에서의 TTX IC₅₀ 은 8 nM이다

전위-의존성 나트륨 채널을 이종 발현하는 불멸의 세포주를 사용하는 것 또한 가능하다. 이런 세포주의 클로닝, 안정한 형질감염 및 증식은 당업자에게 알려져 있다(예로, Klugbauer, N, et al .,5 EMBO J. (1995), 14(6):1084-90; 및 Lossin, C., et al ., Neuron (2002), 34, pp. 877-884 참고).

관심있는 전위-의존성 나트륨 채널을 발현하는 세포는 공급자에 의해 또는 G418(Gibco/Invitrogen)과 같은 선택적 성장 매질의 존재에서 재조합 세포에서 성장된다. 상기 세포는 효소 용액 (1X) Trypsin/EDTA(Gibcollnvitrogen)로 배양접시로부터 고립되고 히모사이타미터(Neubauer)를 사용하여 밀도와 생존능력이 분석된다. 고립된 세포는 세척되고 그 배양 매질에서 재부유되고 Poly-D-Lysine이 코팅된 Scintiplates(Perkin Elmer)에 평판배양되고(약 100,000 cells/well) 20-24시간 동안 37℃/5% CO₂로 배양시킨다. 저 염분 HEPES-buffered 생리식염수(LNHBSS)(150 mM 콜린 클로라이드, 20 nM HEPES(Sigma), 1 mM 칼슘 클로라이드, 5 mM 포타슘 클로라이드, 1 mM 마그네슘 클로라이드, 10 mM 글루코스)로 과세척 후에 검사시약은 LNHBSS로 희석하고 의도한 농도로 각각 well에 첨가된다(다양한 농도의 검사시약이 사용될 수 있다). 상기 활성화/방사성동위원소 혼합물은 베라트리딘(veratridine) 또는 아코니틴(Aconitine)(sigma) 또는 델타메트린(deltamethrin), scorpion Leiurus quinquestriatus hebraeus(sigma)의 독과 같은 피테드로이드와 같은 알킬로이드 및 전위-의존성 나트륨 채널을 통한 유동을 측정하기 위한 ¹⁴C-구아니딘 하이드로클로라이드(ARC)를 포함한다.

세포를 검사시약 및 활성화/방사성동위원소 혼합물로 로딩한 후에, Poly-D-Lysin 코팅된 Scintiplates를 주위온도로 배양시켰다. 배양에 이어, Poly-D-Lysin 코팅된 Scintiplates를 구아니딘(sigma)이 보충된 LNHBSS로 과세척하였다. Poly-D-Lysin 코팅된 Scintiplates를 건조시키고 Wallac MicroBeta TriLux (Perkin-Elmer Life Sciences)를 사용하여 계산하였다. 전위-의존성 나트륨 채널을 차단하는 검사시약의 능력은 다른 전위-의존성 나트륨 채널을 발현하는 세포안에 존재하는 ¹⁴C-구아니딘의 양을 비교함으로서 결정된다. 이 결과에 기초하여, 본 명세서의 다른 곳에서 표현된 것과 같은 다양한 측정은 검사시약이 특정 전위-의존성 나트륨 채널에 대하여 선택적인지 아닌지를 결정하기 위하여 사용될 수 있다.

특정한 전위-의존성 나트륨 채널에 대한 검사시약의 IC₅₀의 값은 상기 일반적 방법을 이용하여 결정될 수 있다. 시작농도가 연속적으로 희석된 1,5 또는 10 um이고 최종농도가 서브-나노몰, 나노몰 및 낮은 마이크로몰 범위인 두배 또는 세배의 3,8,10,12 또는 16 점 곡선을 사용하여 IC₅₀을 결정할 수 있다. 검사시약의 전형적인 중간-점 농도는 1μM로 설정되고, 그리고 크게 또는 작게 반씩 희석되는 순차적인 농도가 적용된다 (예를들어, 0.5 μM; 5 μM 및 0.25 μM; 10 μM 및 0.125 μM; 20 μM 등.). 상기 IC₅₀ 곡선은 4 Parameter Logistic Model 또는 Sigmoidal DoseResponse Model 공식 (fit = (A+((B-A)/(1 +((C/x)^D))))을 사용하여 측정된다.

선택성 배수(fold selectivity), 선택성 값(factor of selectivity), 또는 선택성의 배수(multiple of selectivity)는 전위-의존성 나트륨 채널의 IC₅₀ 시험값을 참조 전위-의존성 나트륨 채널, 예를 들어 Na_v1.5로 나누어서 계산한다.

따라서, 본 명세서에 기재된 방법에 의해 준비된 화합물은 하기 표 2와 같이 hNa_v1.7에 대한 전위-의존성 나트륨 채널 차단 활성을 보여준다.

화합물	화학명	IC₅₀ (μM)
(Ⅰ)	1'-{[5-트리플루오로메틸)푸란-2-일]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온	0.007
(Ⅰ-R)	(R)-1'-{[5-트리플루오로메틸)푸란-2-일]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온	4.200
(Ⅰ-S)	(S)-1'-{[5-트리플루오로메틸)푸란-2-일]메틸}스피로[푸로[2,3-f][1,3]벤조디옥솔-7,3'-인돌]-2'(1'H)-온	0.003
(Ⅱ-S)	1'-{[3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일]메틸}-2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온	0.015
(Ⅱ-S)	(S)-1'-{[3-(트리플루오로메틸)피리딘-2-일]메틸}-2,3-디하이드로스피로[푸로[2,3-g][1,4]벤조디옥신-8,3'-인돌]-2'(1'H)-온	0.005

본 명세서에 참조된 및/또는 출원 데이터 시트에 실려있는 모든 미국 특허, 미국 특허 공개 공보, 특허 출원, 외국 특허, 외국 특허 출원 및 비-특허 공보는 전부, 참조로서 본 명세서에 포함된다.

앞서 말한 발명이 쉽게 이해할 수 있도록 자세히 설명되어 있다고 하더라도, 첨부된 청구항의 범위 안에서 어떠한 변화 및 수정이 행해질 수 있다는 점은 명백하다. 따라서, 설명된 구체예는 예시적으로 및 비 제한적으로 고려되어야 하고, 그리고 발명은 본 명세서에 기재된 세부사항에 제한되지 않고, 그러나 첨부된 청구항의 동등물 및 범위 안에서 수정될 수 있다.

Claims

단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이의 혼합물로서 화학식 (Ⅰ)로 표시되는 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법으로서
하기 화학식 (8)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 하기 화학식 (9)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 단일 입체이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이들의 혼합물로서 화학식 (Ⅰ), 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는 방법.
제1항에 있어서, 화학식 (7)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 염기를 화학식 (8)로 표시되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (8)의 화합물의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제2항에 있어서, 화학식 (6)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (7)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 표준 Mitsunobu 반응 조건 하에서 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (7)의 화합물의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제3항에 있어서, 화학식 (5)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 알데히드를 화학식 (6)으로 표시되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (6)의 화합물의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제4항에 있어서, 화학식 (4)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (5)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (5)의 화합물의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제 5항에 있어서,
a) 화학식 (2)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 적절한 조건하에 화학식 (3)의 그리나드 시약으로;

;
처리하여 중간 생성물을 생성하는 단계; 및
b) a)의 중간생성물과 화학식 (1)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (4)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 반응시키는 단계를 포함하는
화학식 (4)의 화합물의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제1항에 있어서, 화학식 (Ⅰ-S)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 화학식 (Ⅰ-R)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제조하기 위하여, 적절한 조건 하에서 화학식 (Ⅰ)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 분해하는 단계를 추가적으로 포함하는 제조방법.
화학식 (15)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 화학식 (16)으로 표시되는 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 단일 이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 이의 혼합물로서 화학식 (Ⅱ)의 화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염을 제공하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
단일 이성질체 또는 거울상 이성질체 또는 그들의 혼합물로서 화학식 (Ⅱ)의 화합물;

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조방법.
제8항에 있어서, 화학식 (14)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 알킬화제를 화학식 (15)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (15)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제9항에 있어서, 화학식 (13)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을, 화학식 (14)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (14)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제10항에 있어서,
a) 화학식 (12)의 화합물을:

;
적절한 조건하에 화학식 (3)의 그리나드 시약으로:

;
처리하여 중간 생성물을 생성하는 단계; 및
b) a)의 중간 생성물과 화학식 (1)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용되는 염을, 화학식 (13)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 반응시키는 단계를 포함하는
화학식 (13)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제11항에 있어서, 화학식 (11)의 화합물과:

;
산화제를 화학식 (12)로 표시되는 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는,
화학식 (12)의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 제조단계를 추가로 포함하는 제조방법.
제12항에 있어서, 화학식 (10)의 화합물과:

;
적절한 알킬화제를, 화학식 (11)의 화합물을 생성하기 위하여 적절한 조건하에 처리하는 단계를 포함하는
화학식 (11)의 화합물의 제조단계를 추가적으로 포함하는 제조방법.
제8항에 있어서, 화학식 (Ⅱ-S)의 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용가능한 염; 및 화학식 (Ⅱ-R)로 표시되는 화합물:

;
또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 생산하기 위해서 적절한 조건하에 화학식 (Ⅱ)로 표시되는 화합물을 분리하는 단계를 추가로 포함하는 제조방법.