KR20070113326A

KR20070113326A - 리팍시민의 다형체, 그의 제조방법, 및 그의의약품으로서의 용도

Info

Publication number: KR20070113326A
Application number: KR1020077026409A
Authority: KR
Inventors: 기우세페 씨. 비스코미; 마누엘라 캄빠냐; 다리아 브라가; 도나텔라 콘포르티니; 빈센조 칸나타; 파올로 리치; 고프레도 로시니
Original assignee: 알파 와셔만 에스.피.아.
Priority date: 2003-11-07
Filing date: 2004-11-04
Publication date: 2007-11-28
Also published as: MD3653G8; US7915275B2; US20080132530A1; AR043547A1; RU2004108953A; DE602004006367D1; KR20070113327A; KR100883216B1; JP5635376B2; EP1682556A2; BRPI0407149A8; MXPA06002644A; EP2208730A1; ES2320160T3; HRP20040265A2; AR081991A2; ES2320160T4; IL174271A0; RS54571B1; US20120059023A1

Abstract

본 발명의 목적은 리팍시민 α 및 리팍시민 β로 지칭되는 리팍시민(INN)의 결정성 다형체 및 리팍시민 γ로 지칭되는 거의 비결정성 형태이며, 이들은 경구 및 국소용 리팍시민 함유 약제의 제조에 유용하며, 에틸 알콜 중에 조 리팍시민을 가열-용해(hot-dissolving)시키고, 소정의 온도에서 및 소정의 시간 동안 물을 가하여 생성물의 결정화를 유도시킴으로써 결정화 공정을 수행하고, 최종 생성물 중에 특정 수분 함량이 얻어질 때까지 조절되는 조건하에서 건조함으로써 얻을 수 있다.

리팍시민, 다형체

Description

리팍시민의 다형체, 그의 제조방법, 및 그의 의약품으로서의 용도{Polymorphic forms of rifaximin, processes for their production and use thereof in medicinal preparations}

본 발명은 리팍시민의 다형체 α, β, 및 γ, 그의 제조방법, 및 경구 또는 국소용 의약품 제조를 위한 이들의 용도에 관한 것이다.

리팍시민(INN; 머크 인텍스(The Merck Index) 13판, 8304 참조)은 리파마이신 계열에 속하는 항생제로서, 이탈리아 특허 IT 1154655에 개시 및 특허청구된 피리도-이미다조 리파마이신이다. 유럽특허 EP 0161534는 리파마이신 O(머크 인텍스 13판, 8301)로부터 출발한 제조방법을 개시 및 특허청구하고 있다.

이들 특허는 모두 일반적으로 적절한 용매 또는 용매 시스템에서의 결정화에 의한 리팍시민의 정제를 기술하고 있으며, 몇가지 실시예에서, 얻어지는 생성물이 에틸 알콜/물의 7:3 혼합물로부터 결정화될 수 있으며, 대기압 또는 진공 하에서 건조할 수 있다는 것을 요약하여 나타내고 있다. 이들 특허 모두는 결정화 및 건조의 실험 조건 및 얻어지는 생성물의 구체적인 결정학적(crystallographic) 특성을 개시하고 있지 않다.

상이한 다형체의 존재가 이전에 발견된 바 없으며, 따라서 상기 특허 모두에 기재되어 있는 실험 조건은, 생성물 자체의 결정학적 특성은 별도로 하고, 화학적인 관점으로부터 적절한 순도를 갖는 동질의 생성물을 제조하기 위하여 개발된 것이다.

본 발명자들은 리팍시민의 몇몇 다형체 형태들이 존재하고, 이러한 다형체들의 형성이, 용매 뿐만 아니라, 결정화 및 건조가 수행되는 시간 및 온도 조건에도 의존한다는 것을 예기치 못하게 발견하였다.

본 특허출원에서, 이들 다형체들을 각각의 특정 회절패턴(diffractograms)에 근거하여 리팍시민 α(도 1) 및 리팍시민 β (도 2)로 칭하며, 높은 함량의 무정형(amorphous) 성분을 가진 거의 결정형이 아닌(poorly crystalline) 형태를 리팍시민 γ (도 3)로 동정하였다.

리팍시민의 다형체는 분말 X-선 회절 기술을 통하여 특성분석을 하였다.

이러한 다형체의 동정 및 특성분석과 함께, 이들을 얻기 위한 실험 조건의 정의는, 리팍시민과 같이 인간 및 동물용 의약품으로서 시판되는 약리학적 활성을 갖는 화합물에 대해서는 매우 중요하다. 사실상, 의약품에 함유되어 활성물질로서 사용될 수 있는 화합물의 다형성(polymorphism)은 약물의 약리학적-독성학적 성질에 영향을 미칠 수 있는 것으로 알려져 있다. 경구 또는 국소 형태로 약물로서 투여되는 활성물질의 상이한 다형체는 생체이용율, 용해도, 안정성, 색, 타정성, 유동성 및 가공성과 같은 많은 성질을 변경시킬 수 있으며, 따라서 독성학적 안전성, 임상적 유효성 및 생산적 효율성의 추이(profiles)를 변경시킬 수 있다.

활성물질의 제조방법이 각 제조단위(production batches)의 다형성의 관점에서 균질하고 안정된(sound) 결과를 얻을 수 있도록 표준화 및 관리되어야 한다는 것을 약물의 시판 허가를 규율하는 기관이 요구한다는 점으로부터, 상기한 사항의 중요성이 확인된다 (CPMP/QWP/96, 2003 - 새로운 활성 성분의 화학에 대한 지침 참조; CPMP/ICH/367/96 - 지침 명세: 새로운 의약 성분 및 새로운 의약품: 화학물질에 대한 시험 방법 및 허용 기준 참조; 시행일 2000년 5월).

상기한 표준화에 대한 필요성은, 라파마이신계 항생제 분야에서 Henwood S.Q., de Villiers M.M., Leibenberg W. 및 Lotter A.P. (Drug Development and Industrial Pharmacy, 26(4), 403-408, (2000))에 의해 더욱 강화되었으며, 이들은 상이한 제조자들에 의해 제조된 리팜피신(INN)의 상이한 제조단위(production batches)가 상이한 다형적 특성을 나타내며, 따라서 이들은 상이한 용출 추이를 나타내고 결과적으로 각각의 약리학적 특성을 변화시키기 때문에 서로 상이하다는 것을 입증한 바 있다.

이탈리아 특허 IT 1154655 및 유럽특허 EP 0161534에서 포괄적으로(generically) 개시된 결정화 및 건조 공정에 따를 경우, 어떤 실험 조건에서는 거의 결정형이 아닌 형태의 리팍시민이 얻어지는 반면, 다른 실험 조건에서는 다른 결정성 다형체 형태의 리팍시민들이 얻어진다는 것을 발견하였다. 또한, 상기 특허들에 전혀 개시된 바 없는 몇몇의 파라미터들(예를 들어, 보관 조건 및 주위의 상대습도)은 다형체의 형태의 결정에 놀라운 영향을 미친다는 것을 발견하였다.

본 특허출원의 목적인 리팍시민 다형체들은 이전에 발견되거나 암시된 바 없 으며, 오히려 결정화, 건조, 및 보관을 위하여 사용된 조건과 관계없이, 개시된 조건의 범위 내에서 어떠한 방법을 선택하더라도 단일의 균질한 생성물이 항상 얻어지게 될 것이라고 일반적으로 가정되었다.

α, β, 및 γ 형태의 형성은 결정화 용매 중의 물의 존재, 생성물이 결정화되는 온도, 및 건조 단계의 마지막에 생성물에 존재하는 물의 양에 의존한다는 것을 발견하였다.

α, β, 및 γ 형태의 리팍시민을 합성하였으며, 이들은 본 발명의 목적이다.

또한, 고체상태에서 리팍시민 내의 물의 존재는 가역적이며, 따라서 물의 흡수 및/또는 방출(cession)은 적절한 주위 조건의 존재하에서 경시적으로 발생할 수 있다. 따라서, 리팍시민은 다시 용해 및 결정화될 필요없이, 고체 상태로 남아있으면서, 하나의 형태로부터 다른 형태로 전이(transition)될 수 있다. 예를 들어, 다형체 α가 4.5% 보다 높은 함량까지 수화(hydration) 물을 흡수할 경우, 다형체 β로 전환되며, 다시 4.5% 보다 낮은 수분함량까지 건조함으로써 다형체 α로 전환된다.

이러한 결과는 이들이, 예를 들어 결정화된 생성물의 세척, 또는 최종 생성물의 보관 조건, 또는 생성물이 보관되는 용기의 특성과 같은, 몇몇 공정의 산업적 제조 조건을 결정하기 때문에 현저한 중요성을 가지는데, 상기 조건들은 생성물의 다형성 결정을 위하여 중요하게 고려될 수 없었다.

리팍시민은 혐기성 균주를 포함한 감염성 설사를 일으키는 편재화 된(localized) 위장관 박테리아에 대하여 위장관 내에서 광범위 항균 활성을 나타낸다. 리팍시민은 그 자체의 화학적 및 물리적 특성 때문에 전신 흡수가 거의 되지 않는 특성을 가지는 것으로 보고되어 있다(Descombe J.J. 등. 건강한 지원자에 있어서 경구투여후 리팍시민의 약물동태학적 연구. Int J Clin. Pharmacol. Res., 14 (2), 51-56, (1994)).

현재, 본 발명자들은 명백히 구분되는 리팍시민의 다형체 형태, 즉 리팍시민 α, 리팍시민 β, 및 리팍시민 γ를 투여함으로써, 전신 흡수의 수준을 조절할 수 있다는 것을 발견하였으며, 이는 본 발명의 일부분이다. 혈중에서 0.001 내지 1 ㎍/ml의 범위에서 거의 600 배의 흡수차이를 가질 수 있다.

생체이용율에 있어서의 입증된 차이점은 그것이 세개의 다형체, 즉 리팍시민 α, β, 및 γ의 약리학적 및 독성학적 거동을 달리할 수 있기 때문에 매우 중요하다.

사실상, 리팍시민 α 및 리팍시민 β는 경구를 통해서 거의 흡수되지 않는 반면, 리팍시민 γ는 온화한(mild) 흡수를 나타낸다.

리팍시민 α 및 β는 실제적으로 흡수되지 않아, 매우 낮은 독성을 갖는다는 장점을 가지고, 위장관의 경우를 포함하여, 국소 작용만을 통하여 작용할 수 있다.

한편, 온화한 정도로 흡수되는 리팍시민 γ는, 스스로를 은폐하여 국소용 항생제의 작용을 부분적으로 피할 수 있는 전신적 미생물(systemic microorganism)에 대하여 유리한 용도를 발견할 수 있다.

리팍시민의 치료학적 용도와 연관된 발생가능한 부작용의 관점에서, 상기 항 생제에 대한 박테리아 내성의 유도가 특히 관련된다.

일반적으로 말하면, 항생제를 사용한 치료(therapeutic practise)에 있어서, 내성 균주가 발생할 경우, 동일한 또는 상이한 항생제에 대한 박테리아 내성이 발생할 수 있다. 리팍시민의 경우, 이러한 면이 특히 관련된는데, 이는 리팍시민이 리파마이신 계열에 속하고, 리파마이신 계열의 하나인 리팜피신은 결핵 치료에 광범위하게 사용되기 때문이다. 결핵에 대한 현재의 단시간의(short course) 치료는 4가지의 활성 약물성분: 리팜피신, 이소니아지드, 에탐부톨, 및 피라진아미드를 포함한 조합치료(combination therapy)이며, 이중 리팜피신이 중추적인 역할을 한다. 그러므로, 리팜피신에 대한 내성을 위한 선별에 의해 상기 치료의 효과를 위태롭게 했던 모든 약물들은 해로울 수 있다 (Kremer L. 등. "결핵의 재-출현: 전략 및 치료", Expert Opin. Investig. Drugs, 11 (2), 153-157, (2002)).

원칙적으로, 리팍시민 및 리팜피신의 구조상 유사성을 고려하면, 리팍시민을 사용함으로써 엠. 튜버클로시스(M. tuberculosis)의 내성 균주를 선별하고, 리팜피신에 대한 교차-내성을 유발시키는 것이 가능할 수도 있다. 이러한 부작용(negative event)을 피하기 위하여, 전신적으로 흡수되는 리팍시민의 양을 조절하는 것은 중요하다.

이러한 관점하에서, 리팍시민의 α, β, 및 γ 형태의 전신 흡수에 있어서 발견된 차이점은 매우 중요한 것이며, 이는 또한 0.1 내지 1 ㎍/ml 범위 등과 같은 리팍시민의 아-저해성(sub-inhibitory) 농도에서, 내성 변이균의 선별이 가능하다는 것이 입증되었기 때문이다 (Marchese A. 등. 클로스트리디움 디피 실(clostridium difficile) 에 대한 리팍시민, 메트로니다졸, 및 반코마이신의 시험관 내(In vitro) 활성 및 암모니아-생성 종을 포함한, 대표적인 혐기성 및 호기성 박테리아에 대한 자발적인 내성 변이균의 선별 효율(rate of selection). Chemotherapy, 46(4), 253-266, (2000)).

상기한 사항은 본 발명의 리팍시민 다형체의 중요성 및 상이한 약리학적 성질을 갖는 순수한 단일 형태를 제조하기 위한 본 발명의 다양한 산업적 제조방법의 중요성을 명백히 보여준다.

상기한 바에 따라, 상기한 리팍시민 다형체의 존재에 대한 지식 및 상이한 약리학적 성질을 갖는 순수한 단일 형태를 제조하기 위한 다양한 산업적 경로로 나아가게 하는 본 발명의 중요성은 더욱 강화된다.

상기한 α, β, 및 γ 형태들은, 리팍시민을 포함하는 의약품의 제조에 있어서, 순수하고 균질한 생성물로서 유리하게 사용될 수 있다.

이미 지적한 바와 같이, 유럽특허 EP 0161534에 개시 및 특허청구된, 리파마이신 O로부터 리팍시민을 제조하는 산업적 방법은 얻어진 생성물의 정제 및 동정(identification)의 관점에서 단점이 있다. 또한, 그것은, 예를 들어 16 내지 72 시간의 매우 긴 반응시간에 관한, 합성적 관점에서도 몇가지 한계를 나타내고 있는데, 이는 산업적 사용에 적합하지 않으며, 또한 반응 혼합물에 형성될 수 있는 산화된 리팍시민의 in situ 환원을 제공하지 않기 때문에 적합하지 않다.

그러므로, 본 발명의 다른 목적은, 여기에서 물질로서 특허청구되고, 상기 활성물질을 포함하는 의약품의 제조에 있어서 정의된 균질한 활성물질로서 사용할 수 있는, α, β, 및 γ 형태의 리팍시민의 개선된 산업적 제조방법이다.

본 발명은 α 형태, β 형태, 및 γ 형태의, 리팍시민(INN)으로 알려진 항생제, 이들의 제조방법, 및 경구 또는 국소 투여용 의약품의 제조를 위한 이들의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 제조방법은 1:1 내지 2:1의 부피비의 물 및 에틸 알콜의 용매 혼합물 중에서, 2 내지 8 시간 동안, 40℃ 내지 60℃의 온도에서, 1 몰당량의 리파마이신 O를 과량의, 바람직하게는 2.0 내지 3.5 몰당량의, 2-아미노-4-메틸피리딘과 반응시키는 단계를 포함한다.

반응 완료 후, 반응중에 형성된 소량의 산화된 리팍시민을 환원시키기 위하여, 반응혼합물을 실온으로 냉각하고, 물, 에틸 알콜, 및 수성(aqueous) 진한 염산의 혼합물 중의 아스코르빈 산 용액을, 격렬히 교반하면서 가한다. 끝으로, 반응에서 사용된 과량의 2-아미노-4-메틸피리딘을 더 제거하기 위하여, 진한 염산 수용액을 더 가함으로써, pH를 약 pH2.0으로 조절한다. 상기 현탁액을 여과하고, 얻어진 고체를 상기 반응에 사용된 동일한 용매 혼합물 물/에틸 알콜로 세척한다. 상기 반-완성된(semifinished) 생성물을 "조 리팍시민(raw rifaximin)"이라 칭한다.

상기 조 리팍시민은 이어지는 정제 단계에 직접 적용할 수 있다. 또한, 선택적으로, 반완성된 생성물을 장기간 보관하고자 할 경우, 상기 조 리팍시민을 진공하에서, 65℃ 보다 낮은 온도에서, 6 내지 24 시간 동안 건조시킬 수 있으며, 이러한 반완성된 생성물을 "건조된 조 리팍시민"이라 칭한다.

상기에서 얻어진 조 리팍시민 및/또는 건조된 조 리팍시민은 45℃ 내지 65℃의 온도에서 에틸 알콜에 용해시키고, 바람직하게는 상기 용해를 위해 사용된 에틸 알콜의 중량에 대하여 15% 내지 70 % 중량의 물을 가함으로써 결정화하고, 4 내지 36 시간 동안 교반하면서 50℃ 내지 0℃의 온도에서 얻어진 현탁액을 유지시킴으로써 정제된다.

상기 현탁액을 여과하고, 상기 얻어진 고체를 물로 세척한 후, 진공 또는 통상의 압력 하에서, 선택적으로 건조제(drying agent)의 존재하에서, 실온 내지 105℃의 온도에서, 2 내지 72 시간 동안, 건조한다.

α, β, 및 γ 형태의 형성은 결정화를 위해 선택한 조건에 의존한다. 특히, 결정화를 위해 사용된 용매 혼합물의 조성, 결정화 후 반응혼합물이 유지되는 온도, 및 상기 온도가 유지되는 시간이 매우 중요한 것으로 입증되었다.

더욱 구체적으로는, 침전을 유발하기 위하여 용액을 28℃ 내지 32℃의 온도로 가져오고, 얻어진 현탁액을 추가로 0℃로 냉각하고, 이 온도에서 6 내지 24 시간 동안 유지할 경우, 리팍시민 γ가 얻어진다.

상기 현탁액을 여과하고, 고체를 탈염수(demineralized water)로 세척하고, 수분 함량이 1.0 ∼ 2.0 % 가 될 때까지 건조한다.

결정화를 유발하기 위하여 우선 온도를 28℃ 내지 32℃로 가져온 다음, 상기 현탁액을 40℃ 내지 50℃의 온도로 가져온 후, 이 온도에서 6 내지 24 시간 동안 유지한 다음, 상기 현탁액을 15분 내지 1시간 내에 신속히 0℃로 냉각하고 여과한 후, 고체를 물로 세척하고, 건조할 경우, α 및 β 리팍시민이 얻어진다.

건조 단계는 리팍시민 α 및 β 다형체를 얻는데 있어서 매우 중요한 역할을 하며, 건조 중 생성물에 존재하는 잔량의 물을 체크하기 위하여, 예를 들어 칼 피셔(Karl Fischer) 방법과 같이, 수분 함량을 측정하기 위한 적절한 방법으로 점검(monitor)하여야 한다.

건조에 의해, 최종 수분 함량이 상이한(4.5% 보다 크거나 작다) 리팍시민 α 또는 리팍시민 β 가 얻어지며, 상기 중요한 수분 함량이 얻어지는 압력 및 온도의 실험 조건에 의존하는 것은 아니다. 사실상, 더 높거나 더 낮은 수분 함량을 갖는, 두 다형체는 진공 또는 대기압 하에서, 실온 또는 고온에서, 선택적으로 건조제의 존재하에서, 건조시킴으로써 얻어질 수 있다. 단, 상기 건조는 각 다형체에 대한 수분 함량 특성을 얻기 위해 필요한 시간 동안 수행되어야 한다.

물로 결정화되고 세척된 생성물의 건조가, 칼 피셔 방법에 의해 측정시 4.5% 보다 높은, 바람직하게는 5.0 내지 6.0%의, 수분 함량에서 정지될 때, 다형체 β가 얻어지는 반면, 4.5% 보다 낮은, 바람직하게는 2.0% 내지 3.0%의 수분함량이 얻어질 때까지 건조를 계속할 때, 다형체 α가 얻어진다.

γ 형태와 α 및 β 형태의 리팍시민 모두는 흡습성이며, 압력 및 습도의 적절한 환경 조건의 존재하에서 경시적으로 가역적으로 물을 흡수하며, 하나의 형태에서 다른 형태로 전환(transformation)되기 쉽다.

다형체 α를 50% 보다 높은 상대습도의 조건하에서 12 내지 48 시간 동안 유지할 경우 다형체 β로 전환되며, 수분 함량이 4.5% 보다 낮게, 바람직하게는 2.0% 내지 3.0%가 될 때까지 건조할 경우 다시 다형체 α로 전환된다.

다른 형태의 전이가 γ 형태와 α 및 β 형태 사이에서 발생하며, 이는 리팍시민이 침전되는 동안 유지되는 온도에 의존한다.

특히, 에틸 알콜/물 7:3 (V/V)의 용매 혼합물 중에 γ 형태의 리팍시민 현탁액을 38℃ 내지 50℃의 온도에서, 격렬히 교반하면서, 소정의 시간, 바람직하게는 6 내지 36 시간 동안, 유지할 경우, γ 형태는 α 또는 β 형태로 전환된다.

탈염수를 사용한 여과 및 세척 후, 수분 함량이 4.5% 보다 높게, 바람직하게는 5.0% 내지 6.0%가 될 때까지 건조시키면, 다형체 β가 얻어지는 반면에, 수분 함량이 4.5% 보다 낮게, 바람직하게는 2.0% 내지 3.0%가 될 때까지 건조시키면 다형체 α가 얻어진다.

리팍시민 α 및 β를 에틸 알콜에 용해시킨 다음, 얻어지는 용액을 γ 형태의 제조를 위해 상기한 바와 같이 처리함으로써, 리팍시민 α 및 β를 리팍시민 γ로 전환시킬 수 있다.

이러한 하나의 형태에서 다른 형태로의 전이는 본 발명에 있어서 매우 중요한데, 이는 이들이 의약품의 제조를 위하여 원하는 형태를 제조하기 위한 선택적인(alternative) 제조방법을 제공할 수 있기 때문이다. 그러므로, 효과적인 산업적 방법으로 리팍시민 γ를 리팍시민 α 또는 β로 전환시킬 수 있는 방법, 효과적인 산업적 방법으로 리팍시민 α 또는 β를 리팍시민 γ로 전환시킬 수 있는 방법, 효과적인 산업적 방법으로 리팍시민 α를 리팍시민 β로 전환시키거나 리팍시민 β를 리팍시민 α로 전환시킬 수 있는 방법은 본 발명의 중요한 부분이다.

리팍시민 γ의 리팍시민 α 또는 리팍시민 β로의 전환에 관한 방법은 7:3의 부피비의 에틸 알콜/물로 이루어진 용매 혼합물 중에 리팍시민 γ를 현탁시키고, 상기 현탁액을 38℃ 내지 50℃의 온도로 가온하고, 이 온도에서 격렬히 교반하면서 6 내지 36 시간 동안 유지시키는 단계를 포함한다. 상기 현탁액을 여과하고, 얻어진 고체를 물로 세척한 후, 칼 피셔 방법으로 측정시 5.0% 내지 6.0%의 수분 함량이 얻어질 때까지 건조하면 다형체 β가 얻어지며, 2.0% 내지 3.0%의 수분 함량이 얻어질 때까지 건조를 계속하면 다형체 α가 얻어진다.

리팍시민 α 또는 β로부터 리팍시민 γ를 제조하는 방법은 50℃ 내지 60℃의 온도에서 에틸 알콜 중에 리팍시민 α 또는 β를 교반하면서 용해시키고, 에틸 알콜/물의 부피비가 7:3이 될 때까지 탈염수를 가하고, 상기 용액을 격렬히 교반하면서 30℃로 냉각하고, 상기 침전물을 0℃로 냉각하고, 상기 현탁액을 0℃에서 6 내지 24 시간 동안 교반하면서 유지시키는 단계를 포함한다. 상기 현탁액을 여과하고, 얻어진 고체를 물로 세척한 후, 수분 함량이 2.0% 보다 낮게 될 때까지 건조함으로써, 리팍시민 γ를 얻는다.

α 형태를 β 형태로 전환하는 방법은, 50% 보다 높은 상대습도를 갖는 주위 환경에서, 4.5% 보다 높은 분말내 수분 함량을 얻기 위하여 필요한 시간 동안, 통상 12 내지 48 시간 동안, 분말 리팍시민 α를 유지시키는 단계를 포함한다.

β 형태를 α 형태로 전환하는 방법은, 진공 또는 대기압 하에서, 선택적으로 건조제의 존재하에서, 실온 내지 105℃의 온도에서, 2 내지 72 시간 동안, 4.5% 보다 낮은, 바람직하게는 2.0% 내지 3.0%의 분말내 수분 함량을 얻도록 분말 리팍시민 β를 건조하는 단계를 포함한다.

상기한 바로부터, 주위 조건이 생성물의 수분 함량에 영향을 미치지 않도록, 생성물의 보관 단계 중에 특별한 주의가 취해져야 한다는 것은 명백하다. 이는 조절된 습도를 갖는 환경에 생성물을 보관하거나 또는 외부와 유의성있는 수분 교환을 허용하지 않는 밀폐용기 내에 생성물을 보관함으로써 달성될 수 있다.

리팍시민 α 다형체는 4.5% 보다 낮은, 바람직하게는 2.0% 내지 3.0%의 수분 함량 및 6.6°; 7.4°; 7.9°; 8.8°; 10.5°; 11.1°; 11.8°; 12.9°; 17.6°; 18.5°; 19.7°; 21.0°; 21.4°; 22.1°의 회절각도 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴(도1에 나타냄)의 특성을 갖는다. 리팍시민 β 다형체는 4.5% 보다 높은, 바람직하게는 5.0% 내지 6.0%의 수분 함량 및 5.4°; 6.4°; 7.0°; 7.8°; 9.0°; 10.4°; 13.1°; 14.4°; 17.1°; 17.9°; 18.3°; 20.9°의 회절각도 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴(도2에 나타냄)의 특성을 갖는다.

리팍시민 γ 다형체는 빈약한(poor) 결정성으로 인한 빈약한 분말 X-선 회절패턴의 특성을 가지며, 도3에 나타낸 바와 같이, 유의성있는 피크가 5.0°; 7.1°; 8.4°의 회절각도 2θ 값에 존재한다.

회절패턴(diffractogram)은 브래그-브렌타노 지오메트리(Bragg-Brentano geometry)가 장착된 필립스 엑스퍼트(Philips X'Pert) 장비를 사용하여 하기 조건 하에서 측정하였다:

X-선 튜브(X-ray tube): 구리(Copper)

조사(Radiation used):: K(α1), K(α2)

발전기의 전압 및 전류: KV 40, mA 40

모노크로마터(Monocromator): 흑연(Graphite)

단계 크기: 0.02

단계 당 시간: 1.25 초

시작 및 종료 각 2θ 값: 3.0°÷ 30.0°

분석된 시료에 존재하는 수분 함량의 측정은 항상 칼 피셔 방법에 의해 수행하였다.

리팍시민 α, 리팍시민 β, 및 리팍시민 γ는 또한 생체이용율 및 고유 용출(intrinsic dissolution)에 있어서 유의성 있게 서로 상이하다.

세 다형제의 생체이용율 연구는 암컷 비글견을 대상으로 수행하였으며, 다형체 중 하나를 100 mg/kg의 용량으로 경구로 투여하였고, 각각의 투여전 및 투여후 1, 2, 4, 6, 8, 및 24시간 후에 각 동물로부터 경정맥(jugular vein)을 통하여 혈액 샘플을 채취하였고, 각 샘플을 헤파린을 함유하는 시험관으로 옮기고, 원심분리하여 혈장을 분리하였다.

상기 혈장은 검증된(validated) LC-MS/MS (액체 크로마토그래피-질량 스펙트로메트리/질량 스펙트로메트리, Liquid Chromathography-Mass Spectrometry/Mass Spectrometry) 방법 상에서 리팍시민에 대하여 분석하였으며, 측정된 최고 혈장 농도(Cmax), 상기 Cmax 에 도달하는 시간(Tmax), 및 농도-시간 곡선하 면적(AUC)을 계산하였다.

하기 표1에 기술된 실험데이터는 리팍시민 α 및 리팍시민 β는 거의 흡수되 지 않은 반면, 리팍시민 γ는 0.1 내지 1.0 ㎍/ml의 범위로 이루어진 값(Cmax = 0.668 ㎍/ml)으로 흡수되는 것을 명백히 나타낸다.

암컷 개에게 캅셀로 100 mg/kg의 단회 경구 투여에 따른 리팍시민 다형체들의 약물동태학 파라메터

	Cmax ng/ml	Tmax h	AUC₀ _-24 ng·h/ml
	평균	평균	평균
다형체 α	2.632	9.5	13
다형체 β	1.096	4	11
다형체 γ	668.22	2.25	3908

미국약전(U.S. Pharmacopoeia) 27의 2512 - 2513 면에 모노그래프 1087(monograph 1087)에 기술된 방법에 따라, 각각의 세가지 다형체에 대하여 고유 용출 시험을 수행하였으며, 리팍시민 α, 리팍시민 β, 및 리팍시민 γ 중에 유의성있는 차이를 명백히 나타낸다.

각각의 리팍시민 다형체 샘플을 다이(die)에 넣고, 수압(hydraulic press) 펀치로 5 톤으로 압축(compress)하여, 압착된 펠렛(compacted pellet)을 얻었다.

압착된 펠렛을 함유하는 다이-홀더(die-holder)를 실험실 교반 장치(laboratory stirring device) 상에 올리고, 용출매체(dissolution medium) 내에 담근 다음, 교반 장치로 교반하였다.

pH 7.4의 수성 인산 완충액 및 소듐 라우릴 술페이트로 이루어진 용출매체 중에서, 37±0.5 ℃의 온도에서 수행된 상기 시험은 세가지 다형체가 나타내는 고유 용출 속도 사이에 유의성있는 차이를 나타낸다.

리팍시민 α는 10분 내에 압착된 펠렛의 붕해를 나타내어 고유 용출 값을 계산하는 것이 불가능하였던 반면, 리팍시민 β의 생체이용율에 비하여 100 배 이상인 리팍시민 γ의 생체이용율에 따라, 리팍시민 γ의 고유 용출은 리팍시민 β의 그것에 비하여 약 10배 높았다.

상기 실험 결과는 세가지 리팍시민 다형체들 사이에 존재하는 차이점을 더욱 나타낸다.

α, β, 및 γ 형태는, 경구 및 국소적 사용을 위하여, 리팍시민을 포함하는 항균 활성을 갖는 의약품의 제조에 유리하게 사용될 수 있다. 경구용 의약품은, 리팍시민 α 또는 β 또는 γ와 함께, 만니톨, 락토오스, 및 솔비톨과 같은 부형제; 전분, 젤라틴, 당, 셀룰로오스 유도체, 천연 고무(natural gums) 및 폴리비닐피롤리돈과 같은 결합제; 탈크, 스테아레이트, 수소화된 식물유(hydrogenated vegetable oils), 폴리에틸렌글리콜 및 콜로이달 실리콘 디옥시드와 같은 활택제; 전분, 셀룰로오스, 알지네이트(alginates), 고무(gums) 및 망상 중합체(reticulated polymers)와 같은 붕해제; 착색제, 향료 및 감미제 등의 통상의 첨가제를 포함한다.

본 발명은, 예를 들어 코팅정 및 비-코팅정, 경질 및 연질 젤라틴 캅셀, 당-코팅된 환제, 로젠지(lozenges), 웨이퍼 시트(wafer sheet), 펠렛 및 밀폐된 소포장(sealed packets) 내의 산제 등의 경구 투여가능한 모든 고형 제제에 관련된다.

국소용 의약품은, 리팍시민 α 또는 β 또는 γ와 함께, 백색 바세린(white petrolatum), 백색 왁스, 라놀린 및 이들의 유도체, 스테아릴 알콜, 프로필렌글리콜, 소듐 라우릴 술페이트, 지방성 폴리옥시에틸렌 알콜의 에테르(ethers of the fatty polyoxyethylene alcohols), 지방성 폴리옥시에틸렌 산의 에스테르(esters of the fatty polyoxyethylene acids), 소르비탄 모노스테아레이트, 글리세릴 모노스테아레이트, 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸 프로필셀룰로오스, 소듐 카르복시메틸셀룰로오스, 콜로이달 알루미늄 및 마그네슘 실리케이트, 소듐 알지네이트 등의 통상의 첨가제를 포함한다.

본 발명은, 예를 들어 연고제, 포마드(pomades), 크림제, 겔제, 및 로오숀제 등의 모든 국소 제제에 관련된다.

이하, 본 발명을 실시예로 설명하지만, 이것이 본 발명을 제한하는 것은 아니다. 하기 결과는 α, β, 및 γ 형태가 상기한 결정화 및 건조 조건을 적절히 조합함으로써 얻어질 수 있다는 것을 보여준다.

실시예 1. 조 리팍시민 및 건조된 조 리팍시민의 제조

기계적 교반기, 온도계 및 환류 콘덴서가 장착된 삼구 플라스크내에, 120ml의 탈염수, 96ml의 에틸 알콜, 63.5g의 리파마이신 O, 및 27.2g의 2-아미노-4-메틸피리딘을 실온에서 순차적으로 가하였다. 반응 혼합물을 47±3℃로 가온하고, 이 온도에서 5시간 동안 교반하면서 유지한 후, 20±3℃로 냉각한 다음, 9ml의 탈염수, 12.6ml의 에틸 알콜, 1.68g의 아스코르빈산, 및 9.28g의 수성(aqueous) 진한 염산의 혼합물을 별도로 준비하여 반응혼합물에 30분 동안 가하였다. 첨가 완료시점에서, 반응혼합물을 20±3℃의 내부 온도에서 30분 동안 교반하면서 유지한 후, 동일한 온도를 유지하면서 7.72g의 진한 염산을 적가하여 pH를 pH 2.0으로 하였다.

첨가 완료 후, 반응혼합물을 20℃의 내부 온도를 유지하면서 30분 동안 교반하면서 유지한 다음, 침전물을 여과하여 32ml의 탈염수 및 25ml의 에틸 알콜의 혼합물로 세척하였다. 이렇게 얻어진 "조 리팍시민"(89.2g)을 실온에서 12시간 동안 진공건조하여 5.6%의 수분 함량 및 다형체 β에 상응하는 회절패턴을 보이는 64.4g의 "건조된 조 리팍시민"을 얻었다. 일정한 중량이 얻어질 때까지 생성물을 더 진공건조하여, 2.2%의 수분 함량을 갖는 62.2g의 건조된 조 리팍시핀을 얻었으며, 그 회절패턴은 다형체 α에 상응하였다.

생성물은 흡습성(hygroscopic)이며, 얻어진 다형체는 가역적이다: 다형체 α는, 상대습도 및 노출 시간에 의존하면서, 대기중 습기로부터 수분을 흡수한다. 다형체 α에 의해 흡수된 수분이 4.5% 보다 크게 될 경우, 다형체 α는 다형체 β로 전환된다. 다형체 β는 다시 건조함으로써 일부의 수분을 잃어 2.0% 내지 3.0%의 수분 함량에 도달할 때 다형체 α로 변화한다.

실시예 2. 리팍시민 γ의 제조

기계적 교반기, 온도계 및 환류 콘덴서가 장착된 삼구 플라스크내에, 163ml의 에틸 알콜 및 62.2g의 건조된 조 리팍시민을 실온에서 가하였다. 현탁액을 교반하면서 고체가 완전히 용해될 때까지 57±3℃로 가온하고, 이 온도에서 70ml의 탈염수를 30분에 걸쳐 가하였다. 첨가 완료 후, 온도를 40분에 걸쳐 30℃로 가져온 다음, 이 온도에서 결정화가 완료될 때까지 유지한 후, 2시간에 걸쳐 온도를 0℃로 더 냉각한 다음, 이 온도에서 6시간 동안 유지하였다. 현탁액을 여과하고, 고체를 180g의 탈염수로 세척하고, 일정한 중량이 얻어질 때까지 실온에서 진공건조하여, 1.5%의 수분 함량을 갖는 52.7g의 순수한 리팍시민 γ를 얻었다.

γ 형태는 5.0°; 7.1°; 8.4°의 회절각도 2θ 값에서 유의성있는 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴의 특성을 갖는다.

실시예 3. 리팍시민 α의 제조

기계적 교반기, 온도계 및 환류 콘덴서가 장착된 삼구 플라스크내에, 62.2g의 건조된 조 리팍시민 및 163ml의 에틸 알콜을 실온에서 가하였다. 고체가 완전히 용해될 때까지 현탁액을 57±3℃로 가온하고, 이 온도에서 70ml의 탈염수를 30분 동안 가하였다. 첨가 완료 후, 온도를 40분 동안 30℃로 가져온 다음, 이 온도에서 풍부한 결정화가 될 때까지 유지하였다. 현탁액의 온도를 약 40℃로 가져온 다음, 이 온도에서 20시간 동안 교반하면서 유지한 후, 온도를 30분에 걸쳐 0℃로 낮추고, 현탁액을 즉시 여과하였다. 고체를 180ml의 탈염수로 세척하고, 일정한 중량이 얻어질 때까지 실온에서 진공건조하여, 2.5%에 해당하는 수분 함량 및 6.6°; 7.4°; 7.9°; 8.8°; 10.5°; 11.1°; 11.8°; 12.9°; 17.6°; 18.5°; 19.7°; 21.0°; 21.4°; 22.1°의 회절각도 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴을 갖는 51.9g의 리팍시민 α를 얻었다.

실시예 4. 리팍시민 α의 제조

기계적 교반기, 온도계 및 환류 콘덴서가 장착된 삼구 플라스크내에, 89.2g의 조 리팍시민 및 170ml의 에틸 알콜을 실온에서 가한 후, 고체가 완전히 용해될 때까지 현탁액을 57±3℃로 가온하였다. 온도를 50℃로 가져온 다음, 이 온도에서 51.7ml의 탈염수를 30분 동안 가하였다. 첨가 완료 후, 온도를 1 시간에 걸쳐 30℃로 가져온 다음, 현탁액을 이 온도에서 30분 동안 유지하여 풍부한 결정화를 얻었다. 현탁액의 온도를 약 40℃로 가져온 다음, 이 온도에서 20시간 동안 교반하면서 유지한 후, 온도를 30분 동안 0℃로 낮추고, 현탁액을 즉시 여과하였다. 고체를 240ml의 탈염수로 세척하고, 일정한 중량이 얻어질 때까지 65℃에서 진공건조하여, 2.5%에 해당하는 수분 함량을 갖는 46.7g의 리팍시민 α를 얻었다.

실시예 5. 리팍시민 α의 제조

현탁액을 유지하는 온도를 50℃로 올리고, 이 온도에서 현탁액을 유지하는 시간을 7시간으로 낮추어, 실시예 3을 반복하였다. 얻어진 생성물은 실시예 3의 생성물과 동등하였다.

실시예 6. 리팍시민 β의 제조

실시예 3에 기재된 방법에 따라, 건조된 조 리팍시민의 결정화를 수행하였다. 실온에서의 진공건조는 칼 피셔 방법으로 검사하였으며, 수분 함량이 5.0%가 될 때 중지하였다: 52.6g의 리팍시민 β를 얻었으며, 5.4°; 6.4°; 7.0°; 7.8°; 9.0°; 10.4°; 13.1°; 14.4°; 17.1°; 17.9°; 18.3°; 20.9°의 회절각도 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴의 특성을 나타냈다.

실시예 7. 리팍시민 γ 로부터 출발하여 리팍시민 α의 제조

5g의 리팍시민 γ를 13ml의 에틸 알콜 및 5.6ml의 물의 혼합물에 현탁시키고, 이 현탁액을 콘덴서, 온도계 및 기계적 교반기가 장착된 50ml 플라스크에서 교반하면서 24시간 동안 40℃로 가온하였다. 상기 현탁액을 여과한 후, 고체를 물로 세척하고, 일정한 중량이 얻어질 때까지 실온에서 진공건조하였다. 4g의 리팍시민을 얻었으며, 다형체 α에 상응하는 분말 X-선 회절패턴 및 2.6%에 해당하는 수분 함량을 나타냈다.

실시예 8. 리팍시민 α 로부터 출발하여 리팍시민 γ의 제조

15g의 리팍시민 α 및 52.4ml의 에틸 알콜을 환류 콘덴서, 온도계 및 기계적 교반기가 장착된 250ml 3구 플라스크에 가하였다; 고체가 완전히 용해될 때까지 현탁액을 50℃의 온도에서 교반하면서 가온하였다.

투명한 용액을 교반하면서 30분 동안 22.5ml의 물을 가하고, 30℃로 냉각한 다음, 이 온도에서 30분 동안 유지하였다. 형성된 현탁액을 격렬히 교반하면서 0℃로 냉각한 다음, 이 온도에서 6시간 동안 유지하였다. 이 시간 후에, 일부의 현탁액을 취하고, 여과하고, 탈염수로 세척하고, 일정한 중량이 얻어질 때까지 30℃에서 진공건조하였다.

이렇게 얻어진 생성물 3.7g은 γ 형태에 상응하는 회절패턴 및 1.7%의 수분 함량을 나타냈다.

나머지 현탁액을 격렬히 교반하면서 추가로 18시간 동안 0℃에서 유지한 후, 여과하고, 탈염수로 세척하고, 일정한 중량이 얻어질 때까지 30℃에서 진공건조하였다. γ 형태에 상응하는 회절패턴 및 1.6%에 해당하는 수분 함량을 나타내는 9g의 생성물을 얻었다.

실시예 9. 리팍시민 β 로부터 출발하여 리팍시민 α의 제조

5.0%에 해당하는 수분 함량을 갖는 5g의 리팍시민 β를 8시간 동안 30℃에서 진공건조하여, 2.3%에 해당하는 수분 함량을 갖는 4.85g의 리팍시민 α를 얻었다.

실시예 10. 리팍시민 α 로부터 출발하여 리팍시민 β의 제조

2.5%에 해당하는 수분 함량을 갖는 5g의 리팍시민 α를 질산칼슘 4수화물(calcium nitrate tetrahydrate)의 포화 수용액으로 만들어진 56%에 해당하는 상대습도를 포함하는 대기 중에 40시간 동안 유지하였다. 이 시간 후에, 5.9%에 해당하는 수분 함량을 갖는 5.17g의 리팍시민 β를 얻었다.

실시예 11. 경구투여시 개에서의 생체이용율

20주령 및 5.0 내지 7.5 kg의 순종 암컷 비글견 12마리를 4마릭씩 3군으로 나누었다.

하기 과정에 따라, 이들 세군중 첫번째 군은 리팍시민 α를 투여하였고, 두번째 군은 리팍시민 β를 투여하였고, 세번째 군은 리팍시민 γ를 투여하였다.

각각의 개에게 리팍시민 다형체 중 하나를 젤라틴 캅셀로 100 mg/kg의 용량으로 경구로 투여하였고, 각각 2ml의 혈액 샘플을 투여전 및 투여후 1, 2, 4, 6, 8, 및 24시간 후에 각 동물의 경정맥(jugular vein)으로부터 채취하였다.

각 샘플을 헤파린화된(heparinized) 시험관으로 옮기고 원심분리하였다; 혈장을 각각 500 ㎕ 씩 2 분획(aliquots)으로 나누고, -20℃에서 냉동하였다.

혈장에 함유된 리팍시민은 검증된(validated) LC-MS/MS 방법으로 분석하였으며, 하기 파라메터를 표준 비-컴파트먼트 분석(standard non-compartmental analysis)에 따라 계산하였다:

Cmax = 혈장중 측정된 리팍시민의 최고 혈장 농도;

Tmax = 상기 Cmax 에 도달하는 시간;

AUC = 선형 사다리꼴 법칙(linear trapezoidal rule)을 통하여 계산된 농도-시간 곡선하 면적

표 1에 기술된 결과는 거의 흡수되지 않는 리팍시민 α 및 리팍시민 β에 비하여, 리팍시민 γ가 얼마나 더 많이, 10² 배 이상으로 흡수되는지를 명백하게 보여준다.

실시예 12. 고유 용출 시험

100 mg의 각각의 리팍시민 다형체 샘플을 대상으로 미국약전(U.S. Pharmacopoeia) 27의 2512 - 2513 면에 모노그래프 1087(monograph 1087)에 기술된 방법에 따라, 고유 용출 시험을 수행하였다.

100 mg의 리팍시민 다형체를 다이(die)에 넣고, 수압(hydraulic press)으로 펀치에 의해 5 톤의 압력하에서 1분 동안 압축(compress)하였다.

50% 내지 75%의 압착된 펠렛(compacted pellet)이 적절한 용출매체(dissolution medium) 중에서 용출될 수 있도록, 다이의 바닥에 노출된 소정 영역의 단일 면(single face)을 갖는 다이 내에 압착된 펠렛을 형성시켰다.

상기 다이를 포함한 홀더(holder)를 실험실 교반 장치(laboratory stirring device) 상에 올리고, 용출매체(dissolution medium)를 포함하는 유리 용기내에 담근 다음, 용출매체의 온도를 37±0.5 ℃로 유지하면서 교반장치로 100 rpm의 교반속도로 교반하였다. 유리 용기내에 함유된 용출매체는 4.5g의 소듐 라우릴 술페이 트를 함유하는 pH 7.4의 0.1M 수성 인산 완충액 1000 ml로 이루어졌으며, 시험 전기간 동안 37±0.5 ℃에서 유지시켰다.

2 ml의 용액 샘플을 용출 과정의 시작으로부터 15, 30, 45, 및 60분 후에 취하여, 용출된 리팍시민 양을 HPLC로 분석하였다.

리팍시민 α를 함유한 샘플은 10분 내에 압착된 펠렛의 붕해를 규칙적으로(systematically) 나타내었으며, 이러한 현상은 또한 더 낮은 농도의(0.1% 및 0.3%) 소듐 라우릴 술페이트에서도 나타났으며, 상기 계면활성제가 없는 경우에서도 나타남으로써, 리팍시민 α의 고유 용출의 값을 계산할 수 없었다.

리팍시민 γ의 고유 용출은 모든 시점에서 리팍시민 β의 그것에 비하여 약 10배 높았으며, 이는 하기 표3에 나타낸 실험결과에서 확인될 수 있다.

0.45% 소듐 라우릴 술페이트를 함유한 pH 7.4의 0.1M 수성 인산 완충액 중에서의 고유 용출

시간(분)	리팍시핀 용출 (mg/cm²)
	다형체 β	다형체 γ
15	0.28	2.46
30	0.50	4.52
45	0.72	6.44
60	0.94	9.04
고유 용출 속도 (mg/min/cm²)	0.0147	0.1444

도 1은 리팍시민 다형체 α의 분말 X-선 회절패턴이다.

도 2는 리팍시민 다형체 β의 분말 X-선 회절패턴이다.

도 3은 리팍시민 다형체 γ의 분말 X-선 회절패턴이다.

Claims

5.4°, 9.0°, 및 13.1°의 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴 및 4.5% 내지 100%의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 리팍시민의 다형체 β.
6.4°, 10.4°, 및 18.3°의 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴 및 4.5% 내지 100%의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 리팍시민의 다형체 β.
7.8°, 17.1°, 및 20.9°의 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴 및 4.5% 내지 100%의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 리팍시민의 다형체 β.
7.8°, 14.4°, 및 18.3°의 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴 및 4.5% 내지 100%의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 리팍시민의 다형체 β.
5.4°, 18.3°, 및 20.9°의 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴 및 4.5% 내지 100%의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 리팍시민의 다형체 β.
5.4°, 6.4°, 7.0°, 7.8°, 9°, 10.4°, 13.1°, 14.4°, 17.1°, 17.9°, 18.3°, 및 20.9°의 2θ 값에서 피크를 나타내는 분말 X-선 회절패턴 및 4.5% 내지 100%의 수분 함량을 갖는 것을 특징으로 하는 리팍시민의 다형체 β.
1:1 내지 2:1의 부피비의 물 및 에틸 알콜의 용매 혼합물 중에서, 2 내지 8 시간 동안, 40℃ 내지 60℃의 온도에서, 1 몰당량의 리파마이신 O를 2-아미노-4-메틸피리딘과 반응시키는 단계;

상기 반응 혼합물을 물, 에틸 알콜 및 진한 수성(aqueous) 염산의 혼합물 중의 아스코르빈 산 용액으로 실온에서 처리하고, 진한 염산 수용액으로 pH를 pH2.0으로 조절하고, 상기 현탁액을 여과하고, 얻어진 고체를 상기 반응에 사용된 동일한 물/에틸 알콜 용매 혼합물로 세척하고, 얻어진 조 리팍시민(raw rifaximin)을 45℃ 내지 65℃의 온도에서 에틸 알콜에 용해시킴으로써 정제하는 단계;

상기 용해를 위해 사용된 에틸 알콜의 중량에 대하여 15% 내지 70% 중량의 물을 가하여 침전시키는 단계; 및

온도를 28℃ 내지 32℃로 낮춰서 결정화를 개시시키고, 그리하여 생성된 현탁액을 6 내지 24 시간 동안 교반하면서 온도를 40℃ 내지 50℃로 유지하고, 15 분 내지 1 시간동안 0 ℃로 냉각한 다음, 여과하고, 그리하여 얻어진 고체를 물의 함량이 4.5-100%가 되도록 건조하는 단계를 포함하는 리팍시민 β의 제조방법.
7:3의 부피비의 에틸 알콜/물로 이루어진 용매 혼합물 중에 리팍시민 γ를 현탁시키고, 상기 현탁액을 38℃ 내지 50℃의 온도로 가온하고, 이 온도에서 6 내지 36 시간 동안 교반하고, 상기 현탁액을 여과하고, 얻어진 고체를 물로 세척하고 수분 함량이 4.5-100%가 될 때까지 건조하는 단계를 포함하는 리팍시민 β의 제조방법.
50% 보다 높은 상대습도를 갖는 주위 환경에서 12 내지 48 시간 동안 리팍시민 α를 유지시키는 단계를 포함하는 리팍시민 β의 제조방법.
리팍시민 β 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 항생제.
제 10 항에 있어서, 상기 항생제는 경구 제제인 것을 특징으로 하는 항생제.
제 11 항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용 가능한 담체는 부형제, 결합제, 활택제, 붕해제, 착색제, 향료, 및 감미제로 구성된 그룹에서 선택되는 것을 특징으로 하는 항생제.
제 11 항에 있어서, 상기 경구 제제는 코팅정 및 비-코팅정, 경질 및 연질 젤라틴 캅셀, 당-코팅된 환제, 로젠지(lozenges), 웨이퍼 시트(wafer sheets), 펠렛 및 밀봉 패킷(sealed packet) 중의 산제로 구성된 그룹에서 선택되는 것을 특징 으로 하는 항생제.
제 10 항에 있어서, 상기 항생제는 국소용 제제인 것을 특징으로 하는 항생제.
제 14 항에 있어서, 상기 국소용 제제는 연고제, 포마드(pomades), 크림제, 겔제, 및 로오숀제로 구성된 그룹에서 선택되는 것을 특징으로 하는 항생제.
제 10 항에 있어서, 상기 항생제는 세균 감염을 앓는 환자를 치료하기 위한 것을 특징으로 하는 항생제.
제 10 항에 있어서, 상기 항생제는 대장 관련 질환을 앓고 있는 환자의 세균 과증식을 치료하기 위한 것을 특징으로 하는 항생제.
제 17 항에 있어서, 상기 환자는 과민성 대장 증후군, 여행자 설사, 소장 세균 과증식, 크론병, 만성 췌장염, 췌장 기능부전, 및 대장염으로 구성된 그룹에서 선택된 적어도 하나의 대장 관련 질환을 앓고 있는 것을 특징으로 하는 항생제.