KR20070105486A

KR20070105486A - 간 기능 개선과 숙취해소용 차 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR20070105486A
Application number: KR1020060037669A
Authority: KR
Inventors: 정재현; 조주현; 정동현; 여영길
Original assignee: 충청북도
Priority date: 2006-04-26
Filing date: 2006-04-26
Publication date: 2007-10-31
Also published as: KR100787633B1

Abstract

본 발명은 간기능 개선과 숙취해소용 차 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 인진쑥을 기질로 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 추출액을 주원료로 하여, 현미에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 추출액, 곶감 추출액, 생강추출액, 갈근 추출액, 오미자추출액, 진피추출액, 감초추출액, 사인추출액, 헛개나무추출액, 산사추출액, 대추추출액, 헛개나무열매 추출액, 건무화과 추출액, 꿀, 프럭토올리고당, 비타민, 타우린 등을 혼합제조함으로서, 간기능개선과 숙취해소에 효과가 뛰어난 차 및 그의 제조방법에 관한 것이다.

상기 차 제조방법은, 인진쑥을 기질로 하여 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체로부터 발효물을 얻고, 이를 추출하여 주원료를 준비하는 주원료준비과정과; 현미를 기질로 하여 배양시킨 노루궁뎅이버섯 균사체 배양물과, 천연약재로 부터 유효성분을 추출하여 부원료를 준비하는 부원료준비과정과; 상기 추출한 주원료추출액과 부원료추출액을 혼합탱크에 넣고 혼합하는 혼합과정과; 상기 혼합액에 꿀과 프럭토올리고당을 혼합하는 가당과정과; 상기 가당이 이루어진 혼합액을 여과시키고, 110 ~ 130℃에서 1 ~4초간 살균시키는 여과살균과정과; 살균시킨 혼합액을 용기에 충전하여 제품을 완성하는 과정;으로 이루어짐을 특징으로 한다.

간기능개선용차, 숙취해소용차, 기능성음료, 노루궁뎅이버섯, 균사체

Description

간 기능 개선과 숙취해소용 차 및 그 제조방법{Tea and Tea Manufacturing Method for Improving Liver Function and Curing of Hangover}

도 1은 본 발명의 바람직한 일실시예에 따른 간 기능 개선 및 숙취해소용 차의 제조방법을 도시한 블록도이고,

도 2는 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)의 생체실험을 통한 숙취해소효과를 검토한 결과를 나타낸 것으로, 시험물질인 AHE를 실험용 쥐(SD계)에 알코올 투여 30분 전에 투여한 다음 알코올 투여 후 시간이 지나면서 혈중 에탄올 농도를 측정하여 숙취해소효과를 측정한 도면이고,

도 3은 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)의 생체실험을 통한 숙취해소효과를 검토한 결과를 나타낸 것으로, 실험물질인 AHE를 실험용 쥐(SD계)에 알코올 투여 30분 전에 투여한 다음 알코올 투여 후 시간이 지나면서 혈중 아세트알데히드 농도를 측정하여 숙취해소효과를 측정한 도면이고,

도 4는 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)의 생체 실험을 통한 숙취해소효과를 검토한 결과를 나타낸 것으로, 실험 물질인 AHE를 알코올 투여 후 1시간 후에 투여한 다음 시간이 지나면서 혈중 에탄올 농도를 측정하여 숙취해소효과를 측정한 도면이고,

도 5는 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)의 생체 실험을 통한 숙취해소효과를 검토한 결과를 나타낸 것으로, 실험물질인 AHE를 알코올 투여 후 1시간 후에 투여한 다음 시간이 지나면서 혈중 아세트알데히드 농도를 측정하여 숙취해소효과를 측정한 도면이고,

도 6은 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)이 간 조직의 지방변성이 일어나는 것에 대한 개선효과(도 10, 도 11)를 설명하기 위하여 정상대조군의 간 조직을 ×40으로 검사한 것을 나타낸 도면,

도 7은 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)이 간 조직의 지방변성이 일어나는 것에 대한 개선효과(도 10, 도 11)를 설명하기 위하여 정상대조군의 간 조직을 ×100으로 검사한 것으로 간소엽이 전형적인 히펙틱 코드(hepatic cord)를 보여주고 있는 도면,

도 8은 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)이 간조직의 지방변성이 일어나는 개선효과(도 10, 도 11)를 설명하기 위한 것으로, 알코올성 지방간 유도로 종대된 간에서는 중심정맥 주면의 일부를 제외하고 포탈 트라이어즈(portal triads)로부터 광범위하게 간세포 내 지방과립이 축적되어 팽대된 것을 보여주고 있는 것으로 ×40으로 촬영하여 나타낸 도면,

도 9은 본 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(AHE)이 간조직의 지방변성이 일어나는 개선효과(도 10, 도 11)를 설명하기 위 한 것으로, 알코올성 지방간 유도로 종대된 간에서는 중심정맥 주면의 일부를 제외하고 포탈 트라이어즈(portal triads)로부터 광범위하게 간세포 내 지방과립이 축적되어 팽대된 것을 보여주고 있는 것으로 ×100으로 촬영하여 나타낸 도면,

도 10은 본 발명의 실시예에 따른 것으로, 정상대조군을 나타낸 도 6 및 도 7과 알코올성 지방간 유도시킨 도 8 및 도 9와 비교하여 간 조직 일부에 지방변성이 확연하게 개선효과를 보여주고 있는 것으로 ×40으로 촬영하여 나타낸 도면,

도 11은 본 발명의 실시예에 따른 것으로, 정상대조군을 나타낸 도 6 및 도 7과 알코올성 지방간 유도시킨 도 8 및 도 9와 비교하여 간 조직 일부에 지방변성이 확연하게 개선효과를 보여주고 있는 것으로 ×100으로 촬영하여 나타낸 도면,

도 12는 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물의 열수추출물(AHE)이 in vitro 실험을 통하여 숙취해소효과 중 ADH 활성을 검토한 결과를 나타낸 도면,

도 13은 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물의 70% 에탄올 추출물(AHE)이 in vitro 실험을 통하여 숙취해소효과 중 ADH 활성을 검토한 결과를 나타낸 도면,

도 14는 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물의 열수추출물(AHE)이 in vitro 실험을 통하여 숙취해소효과 중 ALDH 활성을 검토한 결과를 나타낸 도면,

도 15는 발명의 실시예에 따른 주재료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물의 70% 에탄올 추출물(AHE)이 in vitro 실험을 통한 숙취해소효과 중 ALDH 활성 을 검토한 결과를 나타낸 도면이다.

<도면의 주요부분에 대한 부호의 설명>

P1 : 주원료준비과정 P2 : 부원료준비과정

P3 : 혼합과정 P4 : 가당과정

P5 : 여과살균 과정 P6 : 제품완성과정

P7 : 농축과정

최근 사회 환경의 변화에 따라 국내의 알코올 섭취량이 크게 증가 하고 있으며, 더욱이 한국적인 음주문화로 인해 사회생활이 왕성한 현대인일수록 숙취, 알 코올성 간 손상, 간염바이러스 감염, 만성피로 및 면역능 저하를 쉽게 경험하는 것으로 알려져 있다. 음주 후 나타나는 숙취는 알코올 자체로도 독성을 나타낼 수 있을 뿐만 아니라 체내에서 대사과정 중 인체에 해로운 물질로 전환될 수 있고, 이는 뇌와 간을 포함한 소화기관에 유해한 물질로 작용하여 나타나는 현상이다. 숙취는 알코올 섭취 후 두통이나 속쓰림 등으로 나타나고, 이를 감소시킬 수 있는 약물을 찾는 연구들이 많이 이루어지고 있지만 현저한 효과를 나타내는 것은 많지 않다. 또한 알코올 섭취 후 간에서 알코올의 분해를 촉진시키며 숙취제거를 도와 줄 수 있는 기능성이 있는 제품에 대한 연구가 다양하게 이루어지고 있다.

더욱이 기능성 식품의 원료는 의약품과는 달리 안전성이 어느 정도 확보되어 단기간에 개발할 수 있는 천연물로부터의 추출방식이 대다수이다. 이들 중 숙취해소 및 간 기능 개선을 위해서는 알코올 분해효소 (alcohol dehydrogenase, ADH) 및 알데히드 분해효소 (aldehyde dehydrogenase, ALDH) 및 항산화제 (antioxidants)에 초점이 맞추어져 있으며, 면역활성 물질로는 대식세포 (macrophages, Mφ)를 비롯한 탐식세포의 활성화 및 항체생성 촉진물질에 표적을 두고 있다.

이러한 물질탐색을 위한 후보군으로는 각종 한약재와 폭넓은 천연물질이 망라되어 있는바, 그중에서도 버섯류가 많은 주목을 받고 있으며, 최근에는 천연물에 배양한 약용버섯류에 대한 다양한 생리활성 연구가 진행 중에 있다.

현재 시중에는 숙취해소 및 간 기능개선제가 다양한 형태로 출시되고 있다. 그러나 만성적으로 알코올 섭취하는 사람이 많은 우리나라에서는 일시적인 숙취해 소뿐만 아니라 알코올 섭취로 일어나는 다양한 대사 작용으로부터 간 등의 몸을 보호할 수 있는 복합적인 제품이 요구되는 실정이다.

현재 국내에서 시판중인 많은 숙취해소 음료로는 아스파라긴산을 원료로 하는 음료, 구르메를 원료로 하는 음료, 헛개나무 및 오리나무 등의 한약재 추출액을 이용한 음료 등 다양한 제품이 출시되고 있으나, 인진쑥을 기질로 한 노루궁뎅이버섯 균사체 추출물을 주원료로 하여 숙취해소 효과는 물론이고 간 기능을 개선시켜 주는 음료의 개발은 아직 없었다.

따라서 본 발명에서는 숙취해소 및 간 기능 개선효과가 있을 뿐 아니라 면역 효과증강효과를 갖는 인진쑥에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 배양물의 추출액을 주원료로 하여 간 기능을 개선 시키고 숙취해소에 도움을 주는 차 및 그 제조방법에 관한 것이다.

따라서 본 발명은 상기 종래의 문제점을 해소하기 위해 안출된 것으로,

인진쑥에 미생물의 기능을 활용해 배양발효시켜 본래의 천연물이 함유하고 있는 것 보다 한 단계 향상된 유효성분이 함유된 배양물을 수득하고, 이러한 배양추출물을 이용해 기능성식품을 제조하여 우리나라의 독특한 음주문화로 파생되는 여러 가지 병리학적 문제 중에서 숙취해소는 물론이고 간 기능 개선 효과를 갖는 음료를 개발하여 국민건강 향상에 일익을 담당하는 기능성 식품으로서의 역할 증대를 목적으로 한다.

특히 인진쑥에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 배양물 추출물을 일정량 이상 첨가하여 음료를 제조 할 경우 효능이 낮게 나타나는 연구 결과를 얻었다. 이에 본 발명에서는 노루궁뎅이버섯 균사체 추출물의 적정량을 선택하여 음료를 조성함으로써 숙취해소 및 간기능을 개선 시켜 주는 효능의 극대화를 이룰 수 있도록 하는 것이 본 발명을 이루는 가장 큰 기술적인 특징이다.

상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법은,

인진쑥을 기질로 하여 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체로부터 발효물을 얻고, 이를 추출하여 주원료를 준비하는 주원료준비과정과; 현미를 기질로 하여 배양시킨 노루궁뎅이버섯 균사체 배양물과, 천연약재로 부터 유효성분을 추출하여 부원료를 준비하는 부원료준비과정과; 상기 추출한 주원료추출액과 부원료추출액을 혼합탱크에 넣고 혼합하는 혼합과정과; 상기 혼합액에 꿀과 프럭토올리고당을 혼합하는 가당과정과; 상기 가당이 이루어진 혼합액을 여과시키고, 110 ~ 130℃에서 1 ~4초간 살균시키는 여과살균과정과; 살균시킨 혼합액을 용기에 충전하여 제품을 완성하는 과정;으로 이루어짐을 특징으로 한다.

상기 주원료준비과정 다음으로 인진쑥을 기질로 한 노루궁뎅이버섯 균사체 건조 배양물 추출액의 고형분함량을 높이기 위해 추출 후에 농축과정이 더 이루어질 수 있다.

또한, 상기 주원료준비과정은, 인진쑥에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 건조배양물에 10~20배수의 멸균수를 가한 후 60~80℃에서 1~3시간, 95~98℃에서 4~6시간을 추출하여 여과한 다음 냉암소에서 5~7일간 숙성시켜 이루어진다.

아울러 상기 부원료준비과정에서도 현미-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물과 천연약재 각각에 10~20배수의 멸균수를 가한 후 60~80℃에서 1~3시간, 95~98℃에서 4~6시간을 추출하여 여과한 다음 냉암소에서 5~7일간 숙성시켜 이루어진다.

또한, 상기 천연약재로는, 곶감, 진피, 감초, 사인, 헛개나무, 헛개나무열매, 산사, 대추, 갈근, 생강, 무화과, 오미자 등으로 이루어진 군으로부터 단독 또는 2종이상 혼합사용될 수 있다.

상기 혼합과정과 가당과정에는, 주원료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 추출액 10~40중량부; 부원료인 현미-노루궁뎅이버섯 추출액 1~10중량부, 곶감 추출액 5~20중량부, 진피 추출액 5~18중량부, 갈근추출액 5~18중량부, 생강추출액 8~18중량부, 오미자 추출액 1~10중량부, 무화과 추출액 2~15중량부, 대추추출액 2~15중량부, 산사 추출액 2~15중량부, 헛개나무열매 추출액 2~15중량부, 헛개나무 추출액 2~15중량부, 사인추출액 2~15중량부, 감초추출액 2~15중량부; 꿀 3~5중량부, 프럭토올리고당 5~10중량부 비율로 혼합된다.

이와같은 제조방법에 의해 본 발명의 간기능개선과 숙취해소용 차는, 인진쑥-노루궁뎅이버섯 추출액 10~40중량부, 현미-노루궁뎅이버섯 추출액 1~10중량부, 곶감 추출액 5~20중량부, 진피 추출액 5~18중량부, 갈근추출액 5~18중량부, 생강추출액 8~18중량부, 오미자 추출액 1~10중량부, 무화과 추출액 2~15중량부, 대추추출 액 2~15중량부, 산사 추출액 2~15중량부, 헛개나무열매 추출액 2~15중량부, 헛개나무 추출액 2~15중량부, 사인추출액 2~15중량부, 감초추출액 2~15중량부; 꿀 3~5중량부, 프럭토올리고당 5~10중량부 비율로 혼합되어 이루어진다.

본 발명은 주원료인 인진쑥을 기질로 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 추출물과 부원료인 곶감, 진피, 감초, 사인, 헛개나무, 헛개나무열매, 산사, 대추, 갈근, 생강, 무화과, 오미자를 각각 추출한 추출액과 꿀, 올리고당, 비타민, 타우린 등을 혼합하여 차를 제조함으로써, 숙취해소는 물론이고 간 기능 개선 효과를 특징으로 하는 차 및 그 제조방법에 관한 것이다.

이하는 본 발명을 구성하는 상세한 설명으로 숙취해소 및 간 기능을 개선 시켜주는 차의 원료의 제조과정 및 특징과 차의 제조방법은 아래와 같다.

1) 첫째, 숙취해소 및 간 기능을 개선시켜 주는 차의 조성비는 주원료인 인진쑥을 기질로 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 추출액(10배수로 추출하여 여과 및 숙성시킨 액 기준) 10~40%와 곶감추출액, 진피추출액, 감초추출액, 사인추출액, 헛개나무추출액, 헛개나무열매추출액, 산사추출액, 대추추출액, 갈근추출액, 생강추출액, 무화과추출액, 오미자추출액, 꿀, 올리고당, 비타민 등 부원료의 혼합액이 60-90% 중량으로 이루어진다.

2) 둘째, 주원료인 인진쑥을 기질로 하여 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 추 출액 제조과정으로는, 특허 제 0432360 호(코시스바이오(주), 정재현(본 발명의 발명자 및 출원인))에 기재된 방법으로 노루궁뎅이버섯 균사체 발효물을 얻고, 이를 추출하여 주원료를 제조하는 방법으로,

2-1) 접종원 준비단계 및 기질준비단계 : 접종원인 H. erinaceum을 종균접종을 위한 액체배양용 배양기에 접종하고 24℃, 120rpm, 6일간 배양하여 접종원을 준비하고, 인진쑥에 2-2.5배수의 물을 가한 다음 일정시간(2시간 간격) 동안 혼합하면서 24시간 동안 팽윤시킨 후 1kg 씩 입병하여 멸균시켜 기질을 준비한다.

2-2) 접종 및 배양단계 : 멸균한 기질을 급랭시켜 H. erinaceum의 종균을 약 8%를 접종하여 배양실에서 24℃, 40%를 유지하면서 45-60일간 배양한다.

2-3) 건조 및 추출단계 : 45일간의 배양이 끝난 배양물을 -40℃ 이하에서 동결하여 건조하고, 건조물과 멸균수의 비를 1:10으로 하여 70℃에서 3시간 추출을 한 다음 95℃-98℃에서 5시간 동안 추출하여 추출액을 얻는다.

2-4) 여과 및 숙성 : 추출액을 1차로 여과한 다음 저온 냉암소(1-4℃)에서 5~7일간 숙성시켜, 주원료를 준비한다.

3)셋째, 부원료인 현미를 기질로하여 배양시킨 노루궁뎅이버섯균사체 배양물 추출액과 곶감추출액, 진피추출액, 감초추출액, 사인추출액, 헛개나무추출액, 헛개나무열매추출액, 산사추출액, 대추추출액, 갈근추출액, 생강추출액, 무화과추출액, 오미자추출액 등의 추출액의 준비과정 및 부 원료의 특징으로는,

3-1) 현미를 기질로 하여 노루궁뎅이버섯 균사체배양물은 노루궁뎅이버섯 고 유의 상큼한 향을 가지고 있다, 현미를 1일간 침지시켜 노루궁뎅이버섯 종균을 8% 접종하여 24℃에서 15~20일간 배양하여 동결건조를 한다, 동결건조 후 건조물과 멸균수를 1:10 배수로 하여 70℃에서 2시간 추출하고 다시 95℃~98℃에서 5시간을 추출하여 추출액을 얻는다. 다음 추출액을 여과하여 냉암소(1~4℃)에서 5~7일간 숙성시켜, 부원료인 현미-노루궁뎅이버섯 균사체 추출여과액을 준비한다.

3-2) 곶감에는 비타민(B1, B2, C, K), 효소(카탈라아제, 폴리페놀옥시다아제, 아밀라아제), 당류(포도당, 과당)등을 함유하고 있어 혈액속의 알코올 분해를 빠르게 일어나도록 도움을 주며 영양을 보충해주는 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 추출공정은 곶감과 멸균수를 1:10(or 10~20)배수로 하여 70℃에서 2시간 추출한 다음 95℃~98℃에서 5시간을 추출하여 추출액을 얻는다. 추출액을 여과한 다음 냉암소(1~4℃)에서 5~7일간 숙성시켜, 부원료인 곶감 추출 여과액을 준비한다.

3-3) 그 이외에 사용한 부 원료인, 오미자, 갈근, 헛개나무, 헛개나무열매 등은 예로부터 숙취해소에 도움을 주는 원료로 알려져 있다. 그 각각의 원료 추출액을 얻는 방법으로는 원료와 멸균수의 비율을 10~20배수하여 70℃에서 2시간 추출하고, 다시 95~98℃에서 5시간 추출하여 추출액을 얻는다. 각각의 추출액은 여과한 다음 냉암소(1~4℃)에서 5~7일간 숙성시켜, 각각의 부원료 추출액을 준비한다.

4) 넷째, 숙취해소 및 간 기능 개선효과를 갖는 차 제조방법으로는,

4-1) 인진쑥에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 건조배양물에 10배수의 멸균수를 가한 후 70℃에서 2시간, 95-98℃에서 5시간을 추출하여 여과한 다음 냉암소에 서 5~7일간 숙성시켜 주원료를 준비하는 단계,

4-2) 현미-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물, 곶감, 진피, 감초, 사인, 헛개나무, 헛개나무열매, 산사, 대추, 갈근, 생강, 무화과, 오미자 등 각각의 부 원료에 멸균수를 10-20배수를 넣고 70℃에서 2시간 추출하고, 95-98℃에서 5시간을 추출하여 여과한 다음 냉암소에서 5~7일간 숙성시켜 각각의 부원료를 준비하는 단계,

4-3) 상기에서 추출한 각각의 추출액(모든 원료를 10배수의 멸균수를 넣고 추출한 것을 기준으로)을 인진쑥-노루궁뎅이버섯 추출액 10~40중량부, 현미-노루궁뎅이버섯 추출액 1~10중량부, 곶감 추출액 5~20중량부, 진피 추출액 5~18중량부, 갈근추출액 5~18중량부, 생강추출액 8~18중량부, 오미자 추출액 1~10중량부, 무화과 추출액 2~15중량부, 대추추출액 2~15중량부, 산사 추출액 2~15중량부, 헛개나무열매 추출액 2~15중량부, 헛개나무 추출액 2~15중량부, 사인추출액 2~15중량부, 감초추출액 2~15중량부, 꿀 3~5중량부, 프럭토올리고당(올리고당) 5~10중량부 비율로 혼합시키는 단계,

4-4) 상기 혼합액을 여과시키는 단계,

4-5) 상기 여과시킨 혼합액을 121℃ 이상에서 2초간 살균시키는 살균단계,

4-6) 상기 살균시킨 혼합액을 충진 하여 제품을 완성하는 단계,

4-7) 상기 혼합액을 캔 음료화 할 경우 살균공정을 한 번 더 실시하는 재 살균 단계,

이하의 실시 예를 통하여 본 발명의 구성을 상세히 설명하고자한다.

실시예 1

본 발명을 이루는 음료조성에 있어서 주원료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물의 양에 따른 숙취해소효능 평가(생체)

1) 실험재료

숙취해소 및 간기능 개선 효능평가를 하기위한 시험물질로는 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물(Artemisia iwayomogi - Hericium erinaceum extract;AHE)로 충주대학교 생화학실험실에서 배양-동결건조-추출하여 직접 사용하였다. 시험물질은 동결건조 갈색 분말로, 보관 중 산화반응 등에 의한 변질을 방지하기 위해 냉장보관 하였으며, 투여 직전 멸균·정제수에 용해하여 사용하였다. 숙취해소 효능평가를 위한 비교물질로는 시판되고 있는 컨디션(Condition, CJ, 경기도 이천)을 사용하였다. 숙취 및 지방간 유도를 위한 에탄올은 Merck에서, 고지혈증 및 지방간 유발을 위한 옥수수기름, 콜레스테롤 및 담즙산(cholic acid), 대식세포 (macrophages) 유도를 위한 liquid thioglycollate medium, 그리고 면역감작을 위한 interferon-γ (IFN-γ)는 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다.

2) 실험동물

숙취해소 및 지방간 개선효능 평가를 위해서는 5주령의 수컷 SD 랫드를, 면역기능 증진효능 평가를 위해서는 5주령의 ICR 마우스를 다물사이언스(주) (대전 유성)로부터 구입하여 1주간의 순화기간을 거친 후 6주령에 실험에 사용하였다. 사 육실 및 실험실의 환경은 온도 23 ± 2℃, 상대습도 55 ± 10%, 환기횟수 12 회/hr, 조명주기 12시간 (07:00 - 19:00), 조도 150 - 300 lux로 조절되었다. 실험동물용 사료로는 펠렛(pellet)형 고형사료 Purina Rat Chow (다물사이언스(주), 대전 유성)를 사용하였는 바, 지방간 유도를 위해서는 고형사료를 분말화한 후 일정 농도의 지질성분 (옥수수기름, 콜레스테롤 및 담즙산)을 혼합하여 급여하였다, 음수는 살균·정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다.

3) 효능평가방법

식품의약품안전청 후원 한국식품공정서협회의 [건강기능식품 유효성평가 가이드] 중 "숙취관련 기능성시험 (pp. 300-343)"에 준하여 평가하되, 사람에서의 숙취해소제 복용 정황을 고려하여 시험물질을 에탄올 투여 30분 전에 복용하는 예방효과와 에탄올 혈중농도가 거의 최고치에 달하는 1시간 후에 복용하는 해소효과로 나누어 평가하였다. 즉, 예방효과 실험에서는 용매 (3 ml/kg 투여), 시험물질 (33, 100 또는 300 mg/kg) 또는 비교물질 (컨디션, 3 ml/kg)을 경구투여하고 30분 후 3 ml/kg (20%로 15 ml/kg)의 에탄올을 경구투여하여 숙취를 유도한 다음 1, 3, 5, 7시간 후 혈액을 채취하여 알콜 및 아세트알데히드의 농도를 기체크로마토그래피(gas chromatography; GC)로 측정하였다. 또 해소효과 실험에서는 에탄올 투여 후 충분한 혈중농도에 다다르는 1시간에 채혈하여 농도를 확인한 다음 바로 시험물질을 투여하고 3, 5, 7시간째 (시험물질 투여 후 2, 4, 6시간)에 채혈하여 분석하였다. 혈중 알콜 및 아세트알데히드의 농도 추이로부터 흡수정도와 배설속도를 확인함으로써 청소율을 시판중인 숙취해소음료 컨디션과 비교 평가하였다.

4) 평가결과

ⓐ 알코올 투여 30분전 실험물질 AHE 투여한 평가결과

정상동물에서 3 ml/kg (20%로 15 ml/kg)의 에탄올 경구투여 후 1시간에는 평균 0.0871%, 3시간에는 0.0598%, 5시간에는 0.0550%, 그리고 7시간에는 0.0062%의 혈중농도를 보여 줌으로써 1시간에 최고치에 도달한 후 1~5시간까지는 서서히 감소하는 것으로 나타났다.(표 1 및 도 2) 이에 비해 33 mg/kg의 시험물질 AHE를 에탄올 투여 30분전에 경구 투여한 경우의 혈중 에탄올 농도는 1시간에 0.0793%, 3시간에 0.0537%, 5시간에 0.0114%, 그리고 7시간에 0.0%로 최고 혈중농도는 물론 3시간 이후의 혈중농도가 현저하게 낮아져 7시간에는 완전히 청소되는 것으로 나타났다. 이는 위는 물론 간에서의 알콜 디하이드로제네이즈(alcohol dehydrogenase; ADH) 활성화로 청소율이 상승했기 때문으로 여겨진다. 이러한 청소율 상승효과는 특히 33 mg/kg의 저용량에서보다 높은 농도에서 오히려 효과가 감소하는 것으로 확인되었다. 또한 시험물질 AHE의 이러한 효과는 33 mg/kg에서는 비교물질인 시판 숙취해소제 컨디션보다 우수한 것으로 판명되었다.

한편, 혈중 아세트알데히드 농도는 에탄올 경구투여 후 1시간에는 평균 0.0015%, 3시간에는 0.0029%, 5시간에는 0.0114%, 그리고 7시간에는 0.0184%로 점차 증가하여 에탄올로부터 분해된 아세트알데히드가 계속 축적되는 것으로 확인되었다(표 2 및 도 3). 이러한 아세트알데히드의 혈중농도 변화에 대해 33 mg/kg의 AHE 투여는 1 - 5시간 사이의 혈중농도를 상당히 낮추어 주었으며, 특히 에탄올 투여 후 1시간에는 아세트알데히드가 검출되지 않았다. 이러한 효과는 100 mg/kg 및 300 mg/kg의 AHE는 물론 시판중인 숙취해소제 컨디션에서도 확인되었다. 이러한 결과는 위와 간의 ADH 활성화에 의한 에탄올의 분해와 더불어 알데히드 디하이드로제네이즈(aldehyde dehydrogenase; ALDH) 활성화로 인한 알데히드 청소율의 상승에 따른 것으로 여겨진다(표 1 및 도 2).

ⓑ 알코올 투여 1시간 후 실험물질 AHE투여 한 시험결과

시험물질 AHE를 에탄올 농도가 최고치에 도달하는 1시간 후에 투여한 경우에는 33 mg/kg 투여 후 4시간까지 에탄올의 혈중농도가 급격하게 감소하는 결과를 얻었다. (표 3 및 도 4). 또한 시판중인 숙취해소제 컨디션은 33 mg/kg의 AHE와 유사한 효과를 보여 주었다.

한편, 혈중 아세트알데히드 농도는 AHE 및 시판중인 숙취해소제 컨디션투여에 의해 5시간까지 억제되는 경향을 나타내었다(표 4 및 도 5).

실시예 2

본 발명을 이루는 음료조성에 있어서 주원료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 추출물의 지방간 개선 효능 평가(생체)

1) 평가방법 : 알코올성 지방간을 유도하기 위해 초기 1주일간은 8 ml/kg (40%로 20 ml/kg), 이후 3주간은 6 ml/kg (40%로 15 ml/kg)의 에탄올을 경구 투여함과 동시에 지질사료 (5% 옥수수기름, 1% 콜레스테롤 및 0.1% 담즙산으로 구성)를 전체 4주간 급여하였다. 즉 지질사료를 급여하면서 매일 오전 10시경 33, 100 또는 300 mg/kg의 시험물질을 경구투여하고, 30분 후 에탄올을 경구 투여하였다.

체중과 사료섭취량을 4일마다 측정하고, 2주마다 16시간 이상 절식한 후 채혈하여 혈액 내 간 기능 지표 및 간의 비대정도를 측정하였다. 마지막 채혈 후 동물을 부검하여 간조직 슬라이드를 제작하고 헤마톡실린(hematoxylin) & 에오신(eosin) 및 Oil red O로 염색하여 간세포의 손상 및 지방의 축적정도를 검사하였다.

2) 평가결과 :

ⓐ Absolute and Relative Organ Weights

*Significantly different from normal control (p < 0.05)

4주 동안 알코올성 지방간이 유도된 강은 상당이 비대되어 절대중량은 36%, 상대중량은 31% 증가하였다. 이러한 간의 종대는 저용량(33 mg/kg)의 AHE 투여로 약간 완화되었지만, 고용량(100 - 300 mg/kg)에 의해서는 오히려 더 증가되는 경향을 나타냈으며,

ⓑ 간조직의 슬라이드

#Significantly different from ethanol + high-fat diet group (p < 0.05)

정상대조군의 간 조직 검사에서 간소엽은 전형적인 히펙틱 코드(hepatic cord)를 보여 주었다(도 6, 도 7). 반면 알코올성 지방간 유도로 종대된 간에서는 중심정맥(central veins) 주변의 일부를 제외하고 포탈 트라이어즈(portal triads)로부터 광범위하게 간세포 내 지방과립(lipid droplets)이 축적되어 팽대된 소견을 보여 주었다(도 8, 도 9). 더욱이 일부의 세포는 변성되었고, 국소적으로 염증반응이 확인되었다. 이러한 지방변성은 저용량(33 - 100 mg/kg)의 AHE 투여에 의해 의미 있게 완화되었는바, 특히 33 mg/kg에서는 간조직의 일부에 국소적으로 지방변성이 일어나 확연한 개선효과가 나타났다(도 10, 도11). 이와 같은 개선효과를 정량적으로 평가하기 위해 간병변의 정도를 점수화했을 때 지방간 유도군에서는 평균 score 4.25 (5.00 만점)를 나타낸 반면, 33 mg/kg과 100 mg/kg의 AHE 투여군에서는 각각 평균 score 2.60와 2.75로 회복되었다(표 6).

실시예 3

In vitro 상에서 ADH 활성 검토를 통한 주원료의 숙취해소효능 평가

1) 평가방법

① 효소준비 : 효소원은 동결 건조된 S9 rat liver homogenate(MOLTOX Co., USA)를 0.1% 소혈청알부민(bovine serum albumin)용액 8ml에 녹여 0.45㎛ 주사필터(syringe filter)로 여과하여 사용.

② ADH활성의 측정 : Blandino가 사용한 방법을 변형한 것으로 흡광도 340nm에서 NADH의 생성속도를 지표로 사용하였다. 반응액의 조성은 증류수가 1.4ml, 1.0 M tris-HCl 완충제(pH 8.8) 0.75ml, 20 mM NAD+ 0.3ml, 에탄올 0.3ml, Sample 0.1ml의 혼합액과 효소원 0.15ml를 큐벳(cuvette)에 넣어 총 3ml가 되게 조절하여 30℃에서 5분간 배양 한 후, 5분간 340nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였다. 시료의 ADH활성은 control에 대한 상대활성(%)으로 측정하였다.

2) 평가결과

열수추출물의 경우, 도 9에 나타낸 바와 같이 100ppm 농도에서 인진쑥-영지 열수추출물(Artemisia iwayomogi- G. lucidum Extract; AGE), 인진쑥-노루궁뎅이버섯 열수추출물(Artemisia iwayomogi-H. erinaceum Extract; AHE) 및 인진쑥-목질진흙버섯 열수추출물(Artemisia iwayomogi-P. linteus Extract; APE)의 대조군에 대한 상대적 ADH 활성이 각각 105%, 98%, 102%로 나타났다. 이는 현재 숙취해소음료의 소재로 잘 알려진 쌀 추출물의 RI-AX, 한국산 구르메(Gurume-K) 및 일본산 구르메(Gurume-J) 등을 같은 방법으로 실험하여 100ppm에서의 ADH의 활성이 각각 116.9%, 112.34%, 108.34% 이었으며, 로터스종자(Lotus seed) 114.71%, 알로에 114.15%, 드릅나무수피 100.78%, 지구자 90.91%, 갈화 86.21%, 영지버섯 85.48%의 결과를 얻었다고 보고(JUNG, 2003)된 점을 감안할 때, 본 발효물이 숙취해소 음료의 원료로서 우수한 효능을 가진다고 할 수 있다.

70% 에탄올추출물의 경우에는 도 10에서 나타낸 것과 같이 100ppm 농도에서 시료 Artemisia iwayomogi-G. lucidum Extract(AGE), Artemisia iwayomogi-H. erinaceum Extract(AHE) 및 Artemisia iwayomogi-P. linteus Extract(APE)의 대조군에 대한 상대적 ADH 활성이 각각 116%, 101%, 102%로 나타났다.

실시예4

In vitro 상에서 ALDH 활성검토를 통한 주원료추출물(AHE)의 숙취해소 효능평가

1) 평가방법

① 효소준비 : 효소원은 동결건조 된 S9 rat liver homogenate(MOLTOX Co., USA)를 0.1% bovine serum albumin 용액 8ml에 녹여 0.45mcm syringe filter로 여과하여 사용하였다.

② ALDH의 활성측정 : Bostian의 방법을 변형하여 측정하는 것으로, 흡광도 340nm에서 ADH 생성속도를 지표로 사용하였다. 반응액의 조성은 증류수 2.1ml, 1.0M tris-HCl 완충제(pH 8.0) 0.3ml, 20mM NAD+ 0.1ml, 1.0 M 아세트알데히드 0.1ml, 3.0M KCl 0.1ml, 0.33 M 2-머캅토에탄올(2-mercaptoethanol) 0.1ml, Sample 0.1ml의 혼합액과 효소원 0.1ml를 cuvette에 넣어 총 3ml가 되게 조절하여 30℃에서 5분간 배양 한 후, 5분간 340nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하였다. 시료의 ALDH활성은 control에 대한 상대활성(%)으로서 측정하였다.

2) 평가결과

① 열수추출물의 경우 도 11에 나타난 결과에서, 100ppm 농도에서 각각의 시료(Artemisia iwayomogi-G. lucidum Extract, Artemisia iwayomogi-H. erinaceum Extract 및 Artemisia iwayomogi-P. linteus Extract)가의 대조군에 대한 상대적 ALDH 활성이 각각 89%, 93%, 92%로 나타났다. 이는 현재 숙취해소식품의 소재로 잘 알려진 쌀 추출물의 RI-AX, 한국산 구르메(Gurume-K) 및 일본산 구르메(Gurume-J) 등을 같은 방법으로 실험하여 ADLH의 활성이 각각 98.24%, 94.03%, 92.47%이었으며, Lotus seed 105.51%, 알로에 91.69%, 드릅나무수피 88.38%, 지구자 94.51%, 갈화 81.53%, 영지버섯 97.35% 결과를 얻었다고 보고(JUNG, 2003)된 점을 감안할 때, 본 발효물이 숙취해소 음료의 원료로서 우수한 효능을 가진다고 할 수 있다.

② 70% 에탄올추출물의 경우 도 12의 결과에서, 100ppm 농도에서 각각의 시료(AGE, AHE, APE)가 대조군에 대한 Relative ALDH activity이 각각 91%, 91%, 91%로 나타났다.

실시예5

인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체를 주원료로 하여 숙취해소 및 간기능 개선을 갖는 차를 제조하는 일실시 예로서,

1) 주원료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 배양추출액 준비

① 인진쑥을 기질로 하여 45~60일간 배양하여 건조한 인진쑥-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물 6.5kg에 65L의 멸균수를 넣고 65~70℃에서 2시간 추출한 다음 다시 95-98℃에서 5시간 추출하여 추출액을 얻는 후 추출액을 다시 여과한 여과액을 냉암소(1~4℃)에서 5일간 숙성시켜 주원료로 준비한다. 이때 주원료로 사용할 추출여과액의 양은 42L이다.

2) 부원료 준비

① 갈근 2kg에 20L 멸균수, 진피 2kg에 20L 멸균수, 감초 1kg에 10L 멸균수, 생강 3kg에 30L 멸균수, 사인 1kg에 10L 멸균수, 오미자 0.5kg에 5.0L 멸균수, 헛개나무 1kg에 10L 멸균수, 산사 1kg에 10L 멸균수, 곶감 1kg에 10L 멸균수, 대추 1kg에 멸균수 10L, 헛개나무열매 1kg에 10L 멸균수, 건무화과 1kg에 10L 멸균수를 각각 넣은 후 하기 방법으로 각각 처리하여 부원료로 준비한다.

② 각각의 재료에 10배의 멸균수를 넣고 65~70℃에서 2시간 추출한 다음 다시 95-98℃에서 5시간 추출하여 추출액을 얻는 후 추출액을 다시 여과한 여과액을 냉암소에서 5일간 숙성시켜 각각의 추출액을 준비한다. 이때 각각의 추출액의 양은 처음 멸균수의 70% 정도이다.

3) 혼합단계

① 상기에서 추출하여 여과 숙성시킨 인진쑥-노루궁뎅이버섯 추출액 42L와 부원료를 각각 추출하여 여과한 후 숙성시킨 추출액이 갈근 추출액 15L, 진피 추출액 15L, 감초추출액 7L, 생강추출액 24L, 사인추출액 7L, 오미자 추출액 4L, 헛개나무 추출액 7L, 산사추출액 7L, 곶감 추출액 7L, 대추 추출액 7L, 헛개나무열매 추출액 7L, 건무화과 추출액 7L를 혼합탱크에 넣고 1차로 혼합하는 단계(156L)

② 1차 혼합액 156L에 벌꿀 6.9kg과 프락토(fructo)올리고당 15.3kg을 넣어 혼합한 다음 비타민B1, 비타민 B6, 타우린을 소량 넣은 후 혼합하여 마무리하는 단계(180L)

4) 상기 혼합액을 여과시키는 단계

5) 상기 여과시킨 혼합액을 121℃ 이상에서 2초간 살균시키는 살균단계

6) 상기 살균시킨 혼합액을 충진 하여 제품을 완성하는 단계(제품 당 100ml의 용량을 주입하는 것을 기본으로 함)

7) 캔 음료화 할 경우 살균공정을 한 번 더 실시하는 재살균 단계

이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 간기능 개선 및 숙취해소용차 및 그 제조방법은,

숙취해소 및 간 기능 개선에 효능이 있는 인진쑥에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 추출액을 주원료(고형분 함량 0.5~2.0g)로 하고, 갈근, 진피, 곶감, 생강, 감초, 오미자, 헛개나무, 헛개나무열매, 대추, 산사, 건무화과의 각각의 추출액과 꿀, 비타민, 타우린 등을 혼합하여 차를 제조함으로써 독특한 음주문화로 야기되어지는 숙취해소효과에 탁월한 효능을 갖는 것은 물론이고 간 기능 개선 효과를 제공하여 국민건강 향상에 일익을 담당하는 기능성식품으로서의 역할을 증대할 수 있다.

Claims

인진쑥을 기질로 하여 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체로부터 발효물을 얻고, 이를 추출하여 주원료를 준비하는 주원료준비과정(P1)과;

현미를 기질로 하여 배양시킨 노루궁뎅이버섯 균사체 배양물과, 천연약재로 부터 유효성분을 추출하여 부원료를 준비하는 부원료준비과정(P2)과;

상기 추출한 주원료추출액과 부원료추출액을 혼합탱크에 넣고 혼합하는 혼합과정(P3)과;

상기 혼합액에 꿀과 프럭토올리고당을 혼합하는 가당과정(P4과);

상기 가당이 이루어진 혼합액을 여과시키고, 110 ~ 130℃에서 1 ~4초간 살균시키는 여과살균과정(P5)과;

살균시킨 혼합액을 용기에 충전하여 제품을 완성하는 과정(P6);으로 이루어짐을 특징으로 하는 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법.
제1항에 있어서,

인진쑥을 기질로 한 노루궁뎅이버섯 균사체 건조 배양물 추출액의 고형분함량을 높이기 위해 추출 후에 농축과정이 더 이루어짐을 특징으로 하는 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법.
제 1항에 있어서,

상기 주원료준비과정은, 인진쑥에 배양한 노루궁뎅이버섯 균사체 건조배양물에 10~20배수의 멸균수를 가한 후 60~80℃에서 1~3시간, 95~98℃에서 4~6시간을 추출하여 여과한 다음 냉암소에서 5~7일간 숙성시켜 이루어짐을 특징으로 하는 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법.
제 1항에 있어서,

상기 부원료준비과정은, 현미-노루궁뎅이버섯 균사체 배양물과 천연약재 각각에 10~20배수의 멸균수를 가한 후 60~80℃에서 1~3시간, 95~98℃에서 4~6시간을 추출하여 여과한 다음 냉암소에서 5~7일간 숙성시켜 이루어짐을 특징으로 하는 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법.
제3항 또는 4항에 있어서,

상기 천연약재로는, 곶감, 진피, 감초, 사인, 헛개나무, 헛개나무열매, 산사, 대추, 갈근, 생강, 무화과, 오미자 등으로 이루어진 군으로부터 단독 또는 2종이상 혼합사용됨을 특징으로 하는 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법.
제5항에 있어서,

상기 혼합과정과 가당과정에는, 주원료인 인진쑥-노루궁뎅이버섯 추출액 10~40중량부; 부원료인 현미-노루궁뎅이버섯 추출액 1~10중량부, 곶감 추출액 2~20중량부, 진피 추출액 5~18중량부, 갈근추출액 5~18중량부, 생강추출액 8~18중량부, 오미자 추출액 1~10중량부, 무화과 추출액 2~15중량부, 대추추출액 2~15중량부, 산사 추출액 2~15중량부, 헛개나무열매 추출액 2~15중량부, 헛개나무 추출액 2~15중량부, 사인추출액 2~15중량부, 감초추출액 2~15중량부; 꿀 3~5중량부, 프럭토올리고당 5~10중량부 비율로 혼합됨을 특징으로 하는 간기능개선과 숙취해소용 차의 제조방법.
제1항 내지 제6항의 제조방법에 의해 제조된 인진쑥-노루궁뎅이버섯 추출액 10~40중량부, 현미-노루궁뎅이버섯 추출액 1~10중량부, 곶감 추출액 5~20중량부, 진피 추출액 5~18중량부, 갈근추출액 5~18중량부, 생강추출액 8~18중량부, 오미자 추출액 1~10중량부, 무화과 추출액 2~15중량부, 대추추출액 2~15중량부, 산사 추출액 2~15중량부, 헛개나무열매 추출액 2~15중량부, 헛개나무 추출액 2~15중량부, 사인추출액 2~15중량부, 감초추출액 2~15중량부; 꿀 3~5중량부, 프럭토올리고당 5~10중량부 비율로 혼합된 간기능개선과 숙취해소용 차.