KR20110056014A - 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 헛개나무 어린가지 수매에서 추출한 헛개나무 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무 추출물을 포함하는 제품이 알코올대사에 숙취해소에 유능한 작용을 하는 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물에 관한 것으로

그 구성은 헛개나무 어린가지를 1 내지 2cm 크기로 잘게 파쇄하여 10배 용량의 물을 첨가하여 90℃ 내지 110℃에서 3시간 동안 열수추출한 후 여과하여 불순물을 제거하고 필터로 여과 과정을 거쳐 18~22Brix 농도로 농축하여 추출된 헛개나무 어린가지 추출액 59.9중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여 구성된 것을 특징으로 한다.

Description

헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물{Composition for eliminating hangover containned composition comprising Hovenia dulcis Thunb}

본 발명은 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 헛개나무 어린가지 수매에서 추출한 헛개나무 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무로부터 숙취해소 약리효능이 우수한헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물에 관한 것이다.

현대인들에게 음주는 필수적인 것으로 자리 잡고 있으며, 그로 인하여 음주기회가 상당히 증가하고 있는 실정이다. 한국의 알코올 소비는 세계 최고의 수준이며, 음주로 인한 사회경제적 및 보건학적 폐해는 엄청나며 증가 추세에 있다. 이는 국민 건강의 측면에서 상당히 우려할 만한 수준이다.

이와 같이, 현대인들은 그 정도가 지나쳐 인체 내에서 감당할 수 없을 정도로 알코올을 과량 섭취하고, 그로 인한 부작용인 갈증, 전신권태, 피로감, 기억상 실, 복부팽만감, 소화 불량, 구토 설사, 비타민 결핍 등의 숙취 현상으로 고생하는 경우가 많고, 알코올 중독에 걸릴 위험성도 그만큼 증가하고 있는 실정이다.

천연물로부터 인간의 질병을 예방 또는 치료할 수 있는 신물질을 찾고자 하는 시도는 과거부터 많은 과학자들의 연구 대상이 되어 왔다. 그간 이들 자원을 이용한 의약품의 개발로 현재 사용되고 있는 의약품의 50% 이상이 천연물로부터 유래된 것이고 미국의 경우 사용하는 의약품 중 30%가 식물로부터 얻어진 것이다. 미국 FDA가 승인한 것이 120종으로 시장 규모는 약 10조 달러에 이르고 있다. 최근 각광을 받고 있는 기능성 식품의 개발에서도 대부분의 재료가 천연물로부터 유래하고 있어 천연물의 생리 활성 기능을 가진 물질 탐색 연구는 대단히 중요한 과제로 대두되고 있다.

산업발전으로 인한 업무의 복잡성과 다양함으로 인해 회식과 접대가 잦고, 여러 가지 요인에 의한 스트레스가 많은 현대인들에게 음주는 필수적인 것으로 자리 잡고 있으며, 그로 인하여 음주기회가 상당히 증가하고 있는 실정이다. 한국의 알코올 소비는 세계 최고의 수준이며, 간암이나 간경변으로 인한 사망이 한국인의 주요 사망원인이 되는 등 음주로 인한 사회경제적 및 보건학적 폐해는 엄청나며 이는 증가 추세에 있다. 과다한 알코올 섭취는 신체의 거의 모든 부분에 영향을 미쳐서 간질환, 위염, 췌장염, 고혈압, 중풍, 식도염, 당뇨병 그리고 심장병 등 많은 질환을 일으키는 것으로 보고되고 있다.

술 소비량이 늘어나는 것과 비례해서 경제 사회적 손실 규모도 커지고 있다. 직간접 의료비, 사고 및 숙취로 인한 생산성 손실 등 음주 때문에 빚어지는 연간 경제 사회적 손실 규모는 97년의 경우 국민총생산(GNP)의 4%인 16조 6566억원으로 추산됐다.

최근 한국보건사회연구원이 실시한 국민건강 영양조사결과에 의하면, 국내 20세 이상 성인의 경우, 술 마시는 날은 1달 평균 약 8일로서, 남자는 약 11일, 여자는 약 4일 정도인 것으로 나타났고, 이때 만취 횟수는 주 1회 이상이 약 4.7% 정도, 1개월에 1 내지 3회가 약 10.7% 정도, 3개월에 1 내지 3회가 약 13.2%인 것으로 조사된 바 있으며, 이는 국민 건강의 측면에서 상당히 우려할 만한 수준이다.

이와 같이, 현대인들은 그 정도가 지나쳐 인체 내에서 감당할 수 없을 정도로 알코올을 과량 섭취하고, 그로 인한 부작용인 갈증, 전신권태, 피로감, 기억상실, 복부팽만감, 소화 불량, 구토 설사, 비타민 결핍 등의 숙취 현상으로 고생하는 경우가 많고, 알코올 중독에 걸릴 위험성도 그만큼 증가하고 있는 실정이다.

간암이나 간경변으로 인한 사망이 한국인의 주요 사망 원인이 되는 등 음주로 인한 사회경제적 및 보건학적 폐해는 엄청나며 증가 추세에 있다. 이와 같은 숙취현상은 간세포와 체내에 축적된 알코올 및 아세트알데히드의 작용에 의해 발생하는 것으로 알려져 있다. 특히 아세트알데히드는 음주 후 두통을 수반하는 대표적인 화학물질로 WHO에서도 그 자체의 독성을 경고한 적이 있다.

지난 15년 동안 간질환으로 병원을 찾은 환자를 분석한 바에 따르면 알코올성 간 질환자의 비중은 1986~90년 6.5%에서 91~95년 10.3%, 96~2000년 15.3%로 늘어났고, 2010년까지 20%로 증가할 전망이다. B형 바이러스에 의한 간질환 발생은 선진국 수준으로 낮아지는 반면 술에 의한 간손상 환자가 급격히 증가하고 있어 국 민병이 될 가능성이 있다. 또한, 동양인은 일반적으로 아세트알데히드저해효소가 결핍 또는 부족하기 때문에 아세트알데히드 산화가 느리고 따라서 산화되지 않은 아세트알데히드 및 알코올 유독작용에 의하여 정상적인 신진대사가 방해받아 여러 숙취현상을 느끼게 되는 것이다. 이로 인해 각종 주독해소 드링크제의 생산으로 시장 규모가 날로 커지고 있으나 현재 약효의 효능 검정을 받지 않은 다양한 드링크제들이 시판되고 있는 실정이다. 단 기간 내에 해소시킬 수 있는 바람직한 숙취해소용 조성물의 개발이 요구되고 있으며, 특히 생약성분의 추출물을 숙취에 대한 예방이나 치료효과가 우수한 숙취해소용 조성물의 개발이 절실히 요구되고 있다.

헛개나무는 갈매나무과의 낙엽활엽교목으로 호깨나무, 허리깨나무, 지구(枳俱), 백석목(白石木), 목밀(木蜜), 현포리(玄圃梨) 등으로도 불린다.

헛개나무(Hovenia dulcis Thunb)는 갈매나무과의 낙엽활엽교목으로 경기, 강원 이남의 표고 50-800m에 분포하고 있으며 호깨나무, 허리깨나무, 지구(枳俱), 백석목(白石木), 목밀(木蜜), 현포리(玄圃梨) 등으로도 불린다. Hovenia속나무 열매는 본초학이나 식물도설에서 주독해독, 정혈, 이뇨, 갈증해소, 해독작용을 한다는 보고가 있다. 그리고 헛개나무의 잎, 줄기 및 열매로 만든 차가 주독(酒毒) 제거 및 간 기능 보호에 효능이 뛰어난 것으로 전해지고 있다.

헛개나무는 본초학이나 식물도설에서 주독해독, 정혈, 이뇨, 갈증해소, 해독작용을 한다는 보고가 있다. 그리고 헛개나무의 잎, 줄기 및 열매로 만든 차가 주독(酒毒)제거 및 간 기능 보호에 효능이 뛰어난 것으로 전해지고 있다. Okuma 등은 중국산 헛개나무의 물 추출물이 알코올을 투여한 쥐의 혈중알코올농도를 저하시키 는 효과가 있는 것을 보고하였다. 따리서, 헛개나무 추출물을 가지고 숙취해소에 대한 기작을 구명하고 인체시험을 통해 효능을 입증하고 제품으로 개발하는 것은 중요한 과제이다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 그 목적은 헛개나무 어린가지 수매에서 추출한 헛개나무 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무 추출물을 포함하는 제품이 알코올대사에 숙취해소에 유능한 작용을 하는 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물을 제공하는데 있다.

상기의 목적을 달성하기 위한 본 발명의 특징에 따르면, 헛개나무 어린가지를 1 내지 2cm 크기로 잘게 파쇄하여 10배 용량의 물을 첨가하여 90℃ 내지 110℃에서 3시간 동안 열수추출한 후 여과하여 불순물을 제거하고 필터로 여과 과정을 거쳐 18~22Brix 농도로 농축하여 추출된 헛개나무 어린가지 추출액 59.9중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여 구성된 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물을 제공한다.

본 발명에 의한 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물은 헛개나무 어린가지 수매에서 추출한 헛개나무 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무로부터 숙취해소 약리효능이 우수한 건강기능식품으로 만들어 천연건강식품을 선호하는 현대인에게 유용물질의 인공합성이 아닌 천연 건강식품의 모델을 제시할 수 있다.

또한, 헛개나무 어린가지에서 추출한 추출물은 숙취해소에 대한 과학적 근거 자료를 확립하였으며, 헛개나무 우수성의 국제적 홍보 및 학술 논문 발표를 통하여 헛개나무 우수 자원의 보존기술 구축을 기대할 수 있다.

또한 임상실험에 의한 약효검증과 안정성 및 유효성이 증명되어 국민보건 향상과 국내 의약품 개발 기술의 선진 대열 참여에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.

또한, 과도한 알코올 섭취에 따른 간손상으로 무기력증, 피로, 권태감 등을 해소시켜 활력 있는 국민생활과 노동 의욕을 고취시켜 밝고 건강한 사회를 만드는데 이바지할 수 있을 것으로 기대된다.

또한, 헛개나무 어린가지를 이용하여 숙취해소 조성물을 제조하여 무분별하게 남용되었던 다수의 숙취해소제의 남용이 억제되어 국민건강 증진 및 낭비를 방지할 수 있으며, 제품 제조에 의해 농가 소득 작목으로 이용이 가능하며, 농가 수익증진을 기대할 수 있다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명한다.

도 1은 본 발명에 따른 헛개나무 어린가지 추출물의 제조 과정을 도식한 흐름도이고, 도 2는 도 1에 따라 제조된 헛개나무의 추출물의 AHD와 ALDH 활성도 평가한 그래프를 나타내며, 도 3은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성 측정결과를 도시한 그래프이고, 도 4는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 혈중알코올 농도 평가 결과를 도시한 그래프를 나타내며, 도 5는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 알코올분해 효소의 활성도를 측정한 결과를 도시한 그래프이고, 도 6은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 알코올 농도의 활성도 억제 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프이며, 도 7은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 아세트알데히드 농도의 감소 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프를 나타낸다.

1. 헛개나무 어린가지 추출물 제조 공정

먼저, 본 발명에 따른 헛개나무 어린가지 추출물 제조 공정을 첨부된 도 1을 참조하여 살펴보면, 식품규격에 적합한 헛개나무 어린가지를 구입하여 헛개나무 어린가지를 1 내지 2cm 크기로 잘게 파쇄하여 10배 용량의 물을 첨가하여 90℃ 내지 110℃에서 3시간 동안 열수추출한 후 여과하여 불순물을 제거하고 필터로 여과 과정을 거쳐 추출액을 고형분 10% 농도 즉 18~22Brix 농도로 농축하여 헛개나무 어린 가지 추출액을 제조한다.

2. 헛개나무 숙취해소용 조성물 제조

2-1 시제품 제조

상기의 공정에 따라 추출된 헛개나무 어린가지 추출물을 이용하여 숙취해소용 조성물을 하기 표 1에서 도시된 구성물의 배합표를 참조하여 숙취해소용 시제품을 제조하였다.

보다 세부적으로 상기의 파쇄한 헛개나무 어린가지를 100로 3시간이상 끓인 다음 18~22brix 농도로 농축하여 하기의 표 1에 도시된 성분배합비율에 따라 식품첨가물과 상기에서 추출된 헛개나무 어린가지 농축액을 정밀하게 칭량하여 칭량된 원료들을 혼합기에 넣고 30분간 균일하게 혼합한다. 혼합 후 자체 품질검사를 실시한 합격품에 한하여 미리 준비된 병 또는 캔에 일정량씩 충진, 포장하여 완제품을 만든다.

원료명	장흥샘플1	장흥샘플2	장흥샘플3	T-2	T-2-1	Y-0311-1	Y-0311-3
헛개어린가지	85.9	79.9	69.9	59.9	59.9	59.9	59.9
헛개열매농축액	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
벌꿀	3.0	5.0	5.0	3.0	4.0	3.0	4.0
액상과당	3.0	5.0	10.0			4.0	4.0
구연산나트륨	0.05	0.05	0.05	0.07	0.07	0.05	0.05
자몽종자추출물	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
갈근엑기스				1.0	1.0	1.0	1.0
대추엑기스						1.0	1.0
액상올리고당	3.0	5.0	10.0	3.0	3.5	4.0
솔잎엑기스				1.5
계피엑기스				1.0	1.0		0.5
글리신				0.2	0.2
영지엑기스				0.065	0.065		1.0
정제수				25.215	25.215	22.0	19.5
계	100	100	100	100	100	100	100
당도	9.9	14.4	22.2	11.7	8.8	11.4	12.5

[표 1] 헛개나무 추출물을 이용한 숙취해소음료 배합표(%)

상기 원료의 혼합물 즉,헛개열매추출물, 자몽종자추출물, 갈근엑기스, 대추엑기스, 솔잎엑기스, 계피엑기스, 영지엑기스의 원료는 통상적인 방법으로 추출하거나 처리된 물질을 이용함으로써 본 발명의 상세한 설명에서는 그 추출물, 엑기스 추출방법의 세부적인 기술은 생략한다.

2-2 관능평가

상기의 [표 1]의 배합표를 참조하여 숙취해소음료의 시제품을 제조하여 각 시제품별 관능평가를 실시한 결과 장흥샘플 2와 T-2 시제품 중 T-2 시제품이 선호 도에서 좋은 평가를 받았고 T-2 시제품에 대해 숙취해소 효과 여부에 기술하도록 하겠다.

	풍미	냄새	기호도
장흥샘플	6.30 ± 0.48	5.50 ± 0.53	6.00 ± 0.67
T-2	6.30 ± 0.48	5.70 ± 0.67	6.20 ± 0.63

[표 2] 헛개나무을 이용한 숙취해소 음료의 관능평가 결과

3. 헛개나무 추출물(T-2)의 in vitro 숙취해소 효과

본 발명에 따른 헛개나무 추출물을 함유한 숙취해소용 제품의 효능을 평가하기 위하여, in vitro 실험모델을 이용하여 헛개나무 추출물의 숙취해소활성을 확인하였다.

3-1 ADH와 ALDH 활성도 평가

상기의 헛개나무 추출물 음료와 알코올의 각각 및 동시 처리에 의한 알코올분해효소(ADH:alcohol dehydrogenase) 활성도를 alcohol이 알코올분해효소(ADH)에 의하여 NAD가 NADH로 전환되는 속도를 340nm에서 측정하였으며, 같은 방법으로 아세트알데히드분해효소(ALDH) 활성도 acetaldehyde가 아세트알데히드분해효소(ALDH)에 의하여 NAD가 NADH로 전환되는 속도를 340nm에서 측정하였다.

상기의 실험 결과 첨부된 도 2에서 도시된 바와 같이 알코올 대조군에 비해 헛개나무제품군에서 효소의 활성증진이 더 많이 일어나는 결과를 얻었다. 결국 혈 중알코올농도의 감소는 효소의 증진으로 인하여 나타나는 것으로 예측할 수 있다.

또한, 숙취의 주원인 물질인 아세트알데히드는 알코올분해효소(ADH)의 부산물로 생성되며, 아세트알데히드분해효소(ALDH)에 의해 분해되어 체외로 배출하게 되는데 ALDH의 활성증진효과를 비교한 결과 알코올 대조군은 ADH와 ALDH가 비슷한 활성 증진을 보였으며 헛개나무제품군은 ALDH효소의 활성증진이 증가하는 것으로 나타나 헛개나무가 아세트알데히드를 빠르게 분해시켜 숙취에 도움을 주는 것으로 나타났다.

3-2 cell line을 이용한 in vitro 세포 독성

본 발명에 따른 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성을 확인하기 위해 NIH3T3, Vero, HepG-2, Hep3B, MKN-45 and MKN-28 cell line을 사용하여 헛개나무 어린가지 추출물의 세포독성을 측정하였다. 그 결과 첨부된 도 3과 같이 헛개나무 어린가지 추출물은 세포독성이 없는 것으로 나타났다.

4. In vivo 숙취해소 효능평가

4-1 In vivo 혈중알코올 농도 효능평가

본 발명에 따른 헛개나무 추출물을 포함 숙취해소 조성물의 혈중알코올농도에 미치는 영향을 확인하기 위하여 쥐에 알코올을 투여한 후 상기 시제품 투여군과 비투여군간의 시간별 혈중알코올농도를 N=8, 10 ml/kg B.W을 기준으로 측정하였다.

즉, 알코올을 헛개나무 제품과 동시에 또는 단독으로 rat에 투여한 후 3시간, 6시간, 24시간 등의 여러 시간별로 혈액을 채취하여 혈액내의 알코올농도를 측정한다.

시험결과 첨부된 도 5에서 도시된 바와 같이 2시간 후부터 알코올만 섭취한 대조군에 비해 헛개나무시제품을 섭취한 군이 혈중알코올농도가 떨어지기 시작했으며, 3시간 후가 가장 차이가 많은 것을 확인하였다.

4-2 In vivo 알코올분해효소 효능평가

상기의 실험에 따라 본 발명에 따른 헛개나무의 숙취해소 효과에 대한 작용기작을 규명하기 위해 흰쥐에 알코올 투여하고, 4시간이 경과되었을 때 간을 적출하여 간 세포질 내의 알코올분해효소(ADH)의 효소활성을 측정하였다. 그 결과 첨부된 도 5와 같이 헛개나무 추출물의 시제품 투여군이 알코올분해효소의 활성도를 높여주는 것을 확인할 수 있었다.

5. 헛개나무의 숙취해소 임상실험

5- 1 실험방법

본 발명에 따른 숙취해소개선을 위한 헛개나무 어린가지추출물을 함유하는 숙취해소용 조성물의 효용평가를 위해 헛개나무 추출물을 복용 후 숙취해소 효과에 대해 임상실험을 실시하였다.

5-1-1 시험설계

- Cross-over design, double-blind, randomized trial

- 시험물과 위약을 단회 교차투여

- 피험자는 무작위로 시험물위약 투여군과 위약시험물 투여군으로 배정

- 모든 피험자에게 동일한 일정으로 시험

5-1-2 피험자의 선정

실험을 위해 20 내지 40세 연령의 남성으로 60 내지 75의 체중을 기준으로BMI(Body mass index)의 범위를 18.5 ~ 23.0로 하여 선천성 또는 만성질환이 없고 내과적인 진찰결과 병적 증상 또는 소견이 없으며, 임상병리 검사 및 활력징후가 정상범위에 속하는 자로서 자의로 동의서에 서명한 자를 기준으로 실험을 위한 피험자로 선정하고, 시험개시 1개월 이내 바르비탈류약물 등의 약물대사효소유도 및 억제약물의 복용을 한 사람, 시험개시 7일 이내에 시험에 지장을 줄 우려가 있을 만큼의 과도한 음주를 한 사람, 치료 당시 위궤양 치료제를 복용하고 있거나, 최근 6개월 이내에 위궤양치료를 받은 경험이 있는 사람, 과거에 췌장염, 통풍, 위장관 수술 등의 과거력이 있는 사람, B형, C형 간염환자 또는 보균자, 기타 알코올대사에 영향을 미칠 것으로 판단되는 약물을 복용하고 있는 사람 등 피험자로 부적절하다고 주치의가 판단한 사람, 아스피린 등 잠복출혈의 위험이 있는 약물을 복용하고 있는 사람, 음주 후 심장질환증상이나 부작용을 심하게 경험한 사람 중 피험자 로 부적절하다고 주치의가 판단한 사람 및 과거에 정신질환을 앓았던 사람을 피험자로 제외하여 실험을 실시하였다.

5-1-3 투여방법 및 투여량

시험 개시 6시간 전에 피험자를 소집하여, 1시간 이후 투여 전(0시간) 채혈을 하고, 2시간 후 샘플 또는 위약을 경구로 시험품의 1회 복용 포장단위로 투여하고, 샘플 또는 위약 투여 후 30분 후 알코올 소주 1병을 30분 동안 자유스러운 환경에서 섭취하고, 알코올을 섭취하는 동안 최소한의 안주를 허용하며, 알코올 섭취 후 15시간 동안은 금식을 실시하고 물은 2시간 이후부터 섭취가 가능하도록 하였다.

5-1-4 관찰 내용 및 방법

(가) 혈중 알코올 및 아세트알데히드 측정

- 혈액 채취

a. 알코올 복용 전 좌측 상완 정맥에 saline-locked angio-catheter를 삽입하여 blank 혈액을 채취하고 다시 saline을 1 주입하여 혈액응고를 방지한다.

b. 알코올 복용 후 각각 0, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 15시간(8회)에 채혈한다.

c. 채혈 시에는 약 1의 혈액을 빼낸 뒤, 약 3의 혈액을 채취하고 다시 1ml의 saline을 catheter에 주입하여 혈액응고를 방지한다.

d. 채취한 혈액은 즉시 vaccumtainer에 담은 후 원심분리(3000rpm, 10min)을 하여 혈청을 분리한 후 분석 전까지 -40℃에서 보관한다.

- 혈중 알코올 농도 측정

a. Enzymatic bioanalysis UV-method(F-kit Roche, Cat. No. 0176290)로 사용한 kit의조작법에 의해 농도를 측정한다.

b. 알코올은 nicotinaminde-adenin dinucleotide(NAD+) 존재하에 알코올탈수소효소(Alcohol dehydrogenase, ADH)에 의해 아세트알데히드로 산화된다. 이때 조효소 NAD+가 NADH로 변하게 된다. 따라서 혈청 시료에 NAD+와 ADH를 넣어 반응시킨 후 발생하는 NADH의 양을 340nm에서 흡광도를 통하여 측정한다.

- 혈중 아세트알데히드 농도 측정

a. Enzymatic bioanalysis UV-method(F-kit Roche, Cat. No. 0668613)로 사용한 kit의 조작법에 의해 농도를 측정한다.

b. 알코올은 nicotinaminde-adenin dinucleotide(NAD+) 존재 하에Aldehyde dehydrogenase (ALDH)에 의해 아세트산으로 산화된다. 이때 조효소 NAD+가 NADH로 변하게 된다. 따라서 혈청 시료에 NAD+와 ALDH를 넣어 반응시킨 후 발생하는 NADH의 양을 340nm에서 흡광도를 통하여 측정한다.

- . 설문지 조사

알코올 섭취 15시간 후에 위의 설문지를 통해 숙취증상을 측정한다. 5점 척도를 사용하며, 그 결과는 숙취증상을 느낀 사람 수를 세어(총빈도) 비교하고, 4점 이상의 증상은 심한 숙취증상으로 여기고 그 빈도(중증 숙취증상을 겪은 사람의 빈도)도 역시 대조군과 실험 군을 비교한다. 통계적 유의성은 chi-square test를 사용한다

(나) 분석 방법

그룹 간 혈 중 에탄올과 아세트알데히드의 농도 및 숙취 증상의 차이는 SAS package를 이용한 t-test 분석으로 유의성을 평가한다.

Factor of analysing blood ethanol(acetaldehyde) concentration

Cmax	최초 투약 후 최고 혈중 농도투여 직 후 마지막 채혈시각까지의 혈중 농도-시간 곡선하 면적, 혈중 농도 상승 기간은 linear trapezoidal summation에 의하여 계산하고 혈중 농도 감소 기간은 log/linear trapezoidal summation에 의하여 계산한다.
Tmax	최초 투약 후 최고 혈중농도 도달시간

5-2 실험결과

혈중알코올농도 평가를 위해 알코올을 경구투여한 후 약 30분 이내에 섭취량의 약 60~90%가 흡수되고 60분에 95% 90분에 100% 모두 흡수되므로 혈중알코올농도는 음주 후 60~90분 사이에 최고치를 도달한다고 알려져 있다. 따라서, 본 실험에서는 알코올 섭취 후 헛개나무 추출물을 함유한 시제품의 혈중알코올농도를 시간별도 측정하여 헛개나무 추출물의 조성물이 어떠한 영향이 있는지를 평가하였다.

알코올을 투여한 후 위에 상기에서 제시된 바와 같이 1시간 후에 가장 큰 농도를 나타냈으며 서서히 감소하였다. 즉, 첨부된 도 6에서 도시된 바와 같이 헛개나무 시제품을 투여한 군에서는 알코올만 투여한 군 보다 혈중알코올농도가 감소하는 것을 확인할 수 있다. 이는 in vitro 및 in vivo 실험에서와 같이 헛개나무가 ADH의 활성을 높여주어 혈중알코올농도의 증가를 막아주어 동일한 효과가 있음을 입증한 것이다.

또한, 혈중알코올농도 평가는 첨부된 도 7에서 도시된 바와 같이 헛개나무 추출물의 혈중아세트알데히드농도에 따른 인체실험에서 혈중아세트알데히드가 최고 농도에 도달하는 시간은 알코올 섭취 후 30분이며, 이후 1시간까지 감소하다가 1시간 이후 다시 증가하였다. 헛개나무 시제품 투여군은 1시간부터 2시간까지 약간 증가하다 다시 감소하여 15시간 후에는 거의 검출되지 않는 반면, 알코올만 투여한 군에서는 1시간부터 2시간까지 증가하였다가 감소하는 듯 보이나 15시간까지도 지속적으로 증가하는 경향을 보였다. 즉 숙취의 원인 물질인 아세트알데히드는 헛개나무 추출물 시제품 투여로 15시간 이후에도 계속 남아 있는 아세트알데히드를 감소시켜 숙취에 도움을 주는 것으로 확인하였다.

이상의 본 발명은 상기에 기술된 실시예들에 의해 한정되지 않고, 당업자들에 의해 다양한 변형 및 변경을 가져올 수 있으며, 이는 첨부된 청구항에서 정의되는 본 발명의 취지와 범위에 포함된다.

도 1은 본 발명에 따른 헛개나무 어린가지 추출물의 제조 과정을 도식한 흐름도.

도 2는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 AHD와 ALDH 활성도 평가한 그래프

도 3은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성 측정결과를 도시한 그래프.

도 4는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 혈중알코올 농도 평가 결과를 도시한 그래프.

도 5는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 알코올분해 효소의 활성도를 측정한 결과를 도시한 그래프.

도 6은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 알코올 농도의 활성도 억제 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프.

도 7은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 아세트알데히드 농도의 감소 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프.

Claims (1)

1. 헛개나무 어린가지를 1 내지 2cm 크기로 잘게 파쇄하여 10배 용량의 물을 첨가하여 90℃ 내지 110℃에서 3시간 동안 열수추출한 후 여과하여 불순물을 제거하고 필터로 여과 과정을 거쳐 18~22Brix 농도로 농축하여 추출된 헛개나무 어린가지 추출액 59.9중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여 구성된 것을 특징으로 하는 헛개나무 어린가지 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물

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