KR20140100336A - 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물 - Google Patents
헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 헛개나무 목분에서 추출한 헛개나무 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무 추출물을 포함하는 제품이 알코올대사에 숙취해소에 유능한 작용을 하는 헛개나무 목분 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물에 관한 것으로
그 구성은 헛개나무 음건된 목분을 분쇄하여 열수추출하여 원심분리한 후, 얻어진 상등액을 동결건조하여 분말화된 물추출물(164g)을 형성하고, 이를 메탄올로 녹이고 여과하여 얻어진 여액을 38℃에서 감압농축한 후 메탄올이 제거된 메탄올 가용추출물을 획득하고 메탄올 가용 추출물을 에칠아세테이트와 완충 용액으로 수상 획분과 에칠아세테이트 분획하여 생성된 목분 추출액 64.5중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여을 포함하여 이루어진다.
그 구성은 헛개나무 음건된 목분을 분쇄하여 열수추출하여 원심분리한 후, 얻어진 상등액을 동결건조하여 분말화된 물추출물(164g)을 형성하고, 이를 메탄올로 녹이고 여과하여 얻어진 여액을 38℃에서 감압농축한 후 메탄올이 제거된 메탄올 가용추출물을 획득하고 메탄올 가용 추출물을 에칠아세테이트와 완충 용액으로 수상 획분과 에칠아세테이트 분획하여 생성된 목분 추출액 64.5중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여을 포함하여 이루어진다.
Description
본 발명은 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 헛개나무 목질부에서 추출한 헛개나무 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무로부터 숙취해소 약리효능이 우수한 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물에 관한 것이다.
숙취란 술에 몹시 취한 뒤의 수면에서 깬 후에 특이한 불쾌감이나 두통, 또는 심신의 작업능력감퇴 등이 1∼2일간 지속되는 현상을 일컫는데, 이러한 숙취의 원인으로 탈수현상, 전해질 부족, 아세트 알데하이드의 부작용 등을 들 수 있다. 이러한 숙취 해소를 위해서 다음과 같이 헛개나무, 오리나무 등이 사용되고 있다.
헛개나무는 갈매나무과에 속하는 낙엽큰키나무로, 잎, 가지, 열매 등을 모두 약으로 사용하는데, 예로부터 주독해독, 정혈, 이뇨, 갈증해소, 해독작용 등에 효과가 있는 것으로 알려져 왔으며, 최근 연구결과 헛개나무 추출물에서 숙취해소 및 간기능 활성과 보호작용에서 우수한 효과가 입증되었다.
헛개나무 수피는 세로로 잘게 갈라지며, 잎은 호생하고 넓은 난형이며, 꽃은 취산화서로 잎겨드랑이 또는 가지 끝에 붙는다. 열매는 갈색으로 울퉁불퉁한 육질의 자루를 가지며 맛이 달콤한데, 헛개나무의 익은 열매를 '지구자'라고 하며 과당, 설탕, 포도당, 카탈라제, 페록시다제 등의 당분이 13%, 칼륨, 칼슘, 철 등이 미량 함유되어 있어 헛개나무의 여러부위 중 간기능에 대해 보호효과가 가장 우수한 부위가 열매부위라고 알려져 있다.
한편, 헛개나무의 숙취제거와 관련하여는 구체적인 내용은 아래에서 설명한다. 인체 내에서 알코올은 간에서 생성된 알코올 탈 수소효소(alcohol dehydrogenase)에 의해 아세트알데히드(acetaldehyde)로 분해 되어 상기 아세트알데히드가 중추신경을 마비시키며 숙취의 원인이 된다. "숙취" 와 "악취" 란 술을 마시고 난 뒤에 오는 불쾌감을 말한다. 악취는 술을 마신 후 4-5시간 후에 나타나는 두통, 구토 등을 말하며, 숙취는 자고 난 후에도 계속되는 불쾌감을 말한다. 일반적으로 숙취는 아세트알데히드의 신경 자극으로 인한 메스꺼움이 여전히 남아 있으나 이보다는 오히려 알코올이 유발하는 이뇨 현상에 의한 전해질의 불균형과 탈수, 간 기능 저하로 인한 혈당 저하, 위염 증상 등이 복합적으로 일어나는 전신성 허탈상태라고 보는 것이 타당할 것이다.
숙취를 해소하기 위해서는 알코올을 직접 분해시키거나, 또는 체내 흡수를 통하여 분해를 촉진시켜야 한다. 현재, 숙취해소를 위한 제품들이 상용되고 있으며, 특히 한약재 추출물을 드링크제로 상품화 한 것이 많다. 그러나 기존의 제품들은 숙취해소보다는 구취의 제거를 위한 차폐제(masking compound)를 다량 함유하고 있으며, 음료라는 기호성에 치중하여 실제로 숙취효과가 있는지 명확치 않다.
그러나, 헛개나무는 호둘로사이드(Hoduloside)Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ, 호베닌(Hovenine) A, 호베노락톤(Hovenolactone), 호베노사이드(Hovenoside) D, G, I, 사포닌 C2, E, H, 라마노스, 만노스, 글루코스, 갈락토스, 아라비노스 등의 성분으로 구성되어 있다. 이러한 성분들에는 인체에 유익한 물질들이 함유되어 있어 술 해독작용과 피로회복, 당뇨병, 구토증, 소화불량, 액취증의 치료 및 여러 가지 질병의 치료효과를 가지고 있는 것으로 판명되고 있다.
헛개나무의 추출물은 숙취해소, 주독해소, 구취제거, 알코올성 간염, 지방간, 간경화 특히 항암효과, 혈압조절, 혈당강하, 간해독, 변비에 탁월한 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 최근 연구에서도 간암, 유방암, 위암에 대하여 최고 90% 의 암세포 박멸 효과가 있는 것으로 밝혀졌고, 70∼80% 의 알코올 분해 효과가 있는 것으로 분석되었다.
따라서, 본 발명에서는 헛개나무 중 특히 목질부로부터 분리된 추출물을 이용하여 숙취해소에 효과가 있는 조성물의 특성을 제시하고자 한다.
[관련기술문헌]
1. 헛개나무 열매 또는 초목의 추출방법 및 이로부터 제조된음료(AN EXTRACTION METHOD FOR HONENIA DULCIS AND A BEVERAGEPREPARED THEREFROM) (특허출원번호 제10-2005-00074257호)
2. 헛개나무 엑기스 제조방법(Making method of hovenia dulcis juice) (특허출원번호 제10-2009-0126428호)
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 그 목적은 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무 추출물을 포함하는 제품이 알코올대사에 숙취해소에 유능한 작용을 하는 헛개나무 목질부에 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물을 제공하는데 있다.
그러나 본 발명의 목적들은 상기에 언급된 목적으로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 목적들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위해 본 발명의 실시예에 따른 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물은, 헛개나무 음건된 목분을 분쇄하여 열수추출하여 원심분리한 후, 얻어진 상등액을 동결건조하여 분말화된 물추출물(164g)을 형성하고, 이를 메탄올로 녹이고 여과하여 얻어진 여액을 38℃에서 감압농축한 후 메탄올이 제거된 메탄올 가용추출물을 획득하고 메탄올 가용 추출물을 에칠아세테이트와 완충 용액으로 수상 획분과 에칠아세테이트 분획하여 생성된 목분 추출액 64.5중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여 구성된 것을 특징으로 한다.
본 발명에 의한 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물은, 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 in vitro에서 혈중알코올농도 실험을 수행하여 알코올분해효소(ADH)와 아세트알데히드분해효소(ALDH)의 활성도를 평가하여 헛개나무로부터 숙취해소 약리효능이 우수한 건강기능식품으로 만들어 천연건강식품을 선호하는 현대인에게 유용물질의 인공합성이 아닌 천연 건강식품의 모델을 제시할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물은 숙취해소에 대한 과학적 근거 자료를 확립하였으며, 헛개나무 우수성의 국제적 홍보 및 학술 논문 발표를 통하여 헛개나무 우수 자원의 보존기술 구축을 기대할 수 있다.
또한, 임상실험에 의한 약효검증과 안정성 및 유효성이 증명되어 국민보건 향상과 국내 의약품 개발 기술의 선진 대열 참여에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.
또한, 과도한 알코올 섭취에 따른 간손상으로 무기력증, 피로, 권태감 등을 해소시켜 활력 있는 국민생활과 노동 의욕을 고취시켜 밝고 건강한 사회를 만드는데 이바지할 수 있을 것으로 기대된다.
또한, 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물을 제조하여 무분별하게 남용되었던 다수의 숙취해소제의 남용이 억제되어 국민건강 증진 및 낭비를 방지할 수 있으며, 제품 제조에 의해 농가 소득 작목으로 이용이 가능하며, 농가 수익증진을 기대할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 헛개나무 목분 추출물의 제조 과정을 도식한 분획도
도 2는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 AHD와 ALDH 활성도 평가한 그래프
도 3은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성 측정결과를 도시한 그래프.
도 4는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 혈중알코올 농도 평가 결과를 도시한 그래프.
도 5는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 알코올분해 효소의 활성도를 측정한 결과를 도시한 그래프.
도 6은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 알코올 농도의 활성도 억제 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프.
도 7은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 아세트알데히드 농도의 감소 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프.
도 2는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 AHD와 ALDH 활성도 평가한 그래프
도 3은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성 측정결과를 도시한 그래프.
도 4는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 혈중알코올 농도 평가 결과를 도시한 그래프.
도 5는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 알코올분해 효소의 활성도를 측정한 결과를 도시한 그래프.
도 6은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 알코올 농도의 활성도 억제 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프.
도 7은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 아세트알데히드 농도의 감소 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예의 상세한 설명은 첨부된 도면들을 참조하여 설명할 것이다. 하기에서 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기능 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 것이다.
도 1은 본 발명에 따른 헛개나무 목분 추출물의 제조 과정을 도식한 분획도 이고, 도 2는 도 1에 따라 제조된 헛개나무의 추출물의 AHD와 ALDH 활성도 평가한 그래프를 나타내며, 도 3은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성 측정결과를 도시한 그래프이고, 도 4는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 혈중알코올 농도 평가 결과를 도시한 그래프를 나타내며, 도 5는 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 In vivo 알코올분해 효소의 활성도를 측정한 결과를 도시한 그래프이고, 도 6은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 알코올 농도의 활성도 억제 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프이며, 도 7은 도 1에 따라 제조된 헛개나무 추출물의 혈중 아세트알데히드 농도의 감소 효과에 대한 인체시험의 결과를 도시한 그래프를 나타낸다.
1. 헛개나무 목분 추출물 제조 공정
먼저, 본 발명에 따른 헛개나무 어린가지 추출물 제조 공정을 첨부된 도 1을 참조하여 살펴보면, 헛개나무(Hovenia dulcis Thunb)는 전라남도 보성군에서 재배한 식물로, 그 목분을 채취하여 음건한 후, 분쇄기 (BM-2 Nissei bio-mixer, Nihonseiki Kaiseiki LTD, Japan)로 분쇄하여 시료로 사용하였다.
이 시료(3.8 kg)를 열수추출(70-99℃, 15분)하여 원심분리(959×g, 15분; VS-30000MT, Vision, Korea)한 후, 얻어진 상등액을 동결건조(FDU-500, Eyela, Japan)하여 분말화된 물추출물(164g)을 얻었다. 이를 메탄올 (5L)로 녹이고 여과하여 얻어진 여액을 38℃에서 감압농축하여 메탄올이 제거된 메탄올 가용추출물(48 g)을 얻었다.
메탄올 가용 추출물을 에칠아세테이트와 완충 용액(0.2 M glycine-0.2 M HCl, pH3)으로 수상 획분과 에칠아세테이트 가용 산성·중성 획분(EtOAc-soluble acidic·neutral fraction)으로 분획하였다. 에칠아세테이트 가용 산성·중성 획분을 완충 용액(0.2 M Na₂HPO₄-0.2 M NaH₂PO₄, pH 8)으로 분배하여 에칠아세테이트 가용 중성 획분(EtOAc-soluble neutral fraction)과 수상 획분으로 분획하였고, 얻어진 수상 획분에 0.1 N HCl을 가하여 pH3.0으로 조절한 후 에칠아세테이트로 분배하여 에칠아세테이트 가용 산성 획분(EtOAc-soluble acidic fraction)과 수상획분으로 분획하였다.
2. 헛개나무 숙취해소용 조성물 제조
2-1 시제품 제조
상기의 공정에 따라 추출된 헛개나무 목분 추출물을 이용하여 숙취해소용 조성물을 하기 표 1에서 도시된 구성물의 배합표를 참조하여 숙취해소용 시제품을 제조하였다.
보다 세부적으로 상기의 파쇄한 헛개나무 목분을 3시간이상 끓인 다음 18~22brix 농도로 농축하여 하기의 표 1에 도시된 성분배합비율에 따라 식품첨가물과 상기에서 추출된 헛개나무 목분 농축액을 정밀하게 칭량하여 칭량된 원료들을 혼합기에 넣고 30분간 균일하게 혼합한다. 혼합 후 자체 품질검사를 실시한 합격품에 한하여 미리 준비된 병 또는 캔에 일정량씩 충진, 포장하여 완제품을 만든다.
| 원료명 | 샘플1 | 샘플2 | 샘플3 | T-2 | T-2-1 | Y-0311-1 | Y-0311-3 |
| 헛개 목분 추출물 | 90.9 | 84.9 | 74.9 | 64.9 | 64.9 | 64.9 | 64.9 |
| 벌꿀 | 3.0 | 5.0 | 5.0 | 3.0 | 4.0 | 3.0 | 4.0 |
| 액상과당 | 3.0 | 5.0 | 10.0 | 4.0 | 4.0 | ||
| 구연산나트륨 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.07 | 0.07 | 0.05 | 0.05 |
| 자몽종자추출물 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
| 갈근엑기스 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | |||
| 대추엑기스 | 1.0 | 1.0 | |||||
| 액상올리고당 | 3.0 | 5.0 | 10.0 | 3.0 | 3.5 | 4.0 | |
| 솔잎엑기스 | 1.5 | ||||||
| 계피엑기스 | 1.0 | 1.0 | 0.5 | ||||
| 글리신 | 0.2 | 0.2 | |||||
| 영지엑기스 | 0.065 | 0.065 | 1.0 | ||||
| 정제수 | 25.215 | 25.215 | 22.0 | 19.5 | |||
| 계 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 당도 | 9.9 | 14.4 | 22.2 | 11.7 | 8.8 | 11.4 | 12.5 |
상기 원료의 혼합물 즉, 자몽종자추출물, 갈근엑기스, 대추엑기스, 솔잎엑기스, 계피엑기스, 영지엑기스의 원료는 통상적인 방법으로 추출하거나 처리된 물질을 이용함으로써 본 발명의 상세한 설명에서는 그 추출물, 엑기스 추출방법의 세부적인 기술은 생략한다.
2-2 관능평가
상기의 표 1의 배합표를 참조하여 숙취해소음료의 시제품을 제조하여 각 시제품별 관능평가를 실시한 결과 샘플 2와 T-2 시제품 중 T-2 시제품이 선호도에서 좋은 평가를 받았고 T-2 시제품에 대해 숙취해소 효과 여부에 기술하도록 하겠다.
| 풍미 | 냄새 | 기호도 | |
| 샘플 | 6.30 ± 0.48 | 5.50 ± 0.53 | 6.00 ± 0.67 |
| T-2 | 6.30 ± 0.48 | 5.70 ± 0.67 | 6.20 ± 0.63 |
3. 헛개나무 추출물(T-2)의 in vitro 숙취해소 효과
본 발명에 따른 헛개나무 목분 추출물을 함유한 숙취해소용 제품의 효능을 평가하기 위하여, in vitro 실험모델을 이용하여 헛개나무 추출물의 숙취해소활성을 확인하였다.
3-1 ADH와 ALDH 활성도 평가
상기의 헛개나무 추출물 음료와 알코올의 각각 및 동시 처리에 의한 알코올분해효소(ADH:alcohol dehydrogenase) 활성도를 alcohol이 알코올분해효소(ADH)에 의하여 NAD가 NADH로 전환되는 속도를 340nm에서 측정하였으며, 같은 방법으로 아세트알데히드분해효소(ALDH) 활성도 acetaldehyde가 아세트알데히드분해효소(ALDH)에 의하여 NAD가 NADH로 전환되는 속도를 340nm에서 측정하였다.
상기의 실험 결과 첨부된 도 2에서 도시된 바와 같이 알코올 대조군에 비해 헛개나무제품군에서 효소의 활성증진이 더 많이 일어나는 결과를 얻었다. 결국 혈중알코올농도의 감소는 효소의 증진으로 인하여 나타나는 것으로 예측할 수 있다.
또한, 숙취의 주원인 물질인 아세트알데히드는 알코올분해효소(ADH)의 부산물로 생성되며, 아세트알데히드분해효소(ALDH)에 의해 분해되어 체외로 배출하게 되는데 ALDH의 활성증진효과를 비교한 결과 알코올 대조군은 ADH와 ALDH가 비슷한 활성 증진을 보였으며 헛개나무제품군은 ALDH효소의 활성증진이 증가하는 것으로 나타나 헛개나무가 아세트알데히드를 빠르게 분해시켜 숙취에 도움을 주는 것으로 나타났다.
3-2 cell line을 이용한 in vitro 세포 독성
본 발명에 따른 헛개나무 추출물의 in vitro 세포독성을 확인하기 위해 NIH3T3, Vero, HepG-2, Hep3B, MKN-45 and MKN-28 cell line을 사용하여 헛개나무 어린가지 추출물의 세포독성을 측정하였다. 그 결과 첨부된 도 3과 같이 헛개나무 어린가지 추출물은 세포독성이 없는 것으로 나타났다.
4. In vivo 숙취해소 효능평가
4-1 In vivo 혈중알코올 농도 효능평가
본 발명에 따른 헛개나무 추출물을 포함 숙취해소 조성물의 혈중알코올농도에 미치는 영향을 확인하기 위하여 쥐에 알코올을 투여한 후 상기 시제품 투여군과 비투여군간의 시간별 혈중알코올농도를 N=8, 10 ml/kg B.W을 기준으로 측정하였다.
즉, 알코올을 헛개나무 제품과 동시에 또는 단독으로 rat에 투여한 후 3시간, 6시간, 24시간 등의 여러 시간별로 혈액을 채취하여 혈액내의 알코올농도를 측정한다.
시험결과 첨부된 도 5에서 도시된 바와 같이 2시간 후부터 알코올만 섭취한 대조군에 비해 헛개나무시제품을 섭취한 군이 혈중알코올농도가 떨어지기 시작했으며, 3시간 후가 가장 차이가 많은 것을 확인하였다.
4-2 In vivo 알코올분해효소 효능평가
상기의 실험에 따라 본 발명에 따른 헛개나무의 숙취해소 효과에 대한 작용기작을 규명하기 위해 흰쥐에 알코올 투여하고, 4시간이 경과되었을 때 간을 적출하여 간 세포질 내의 알코올분해효소(ADH)의 효소활성을 측정하였다. 그 결과 첨부된 도 5와 같이 헛개나무 추출물의 시제품 투여군이 알코올분해효소의 활성도를 높여주는 것을 확인할 수 있었다.
5. 헛개나무의 숙취해소 임상실험
본 발명에 따른 숙취해소개선을 위한 헛개나무 목분 추출물을 함유하는 숙취해소용 조성물의 효용평가를 위해 헛개나무 추출물을 복용 후 숙취해소 효과에 대해 임상실험을 실시하였다.
5.1 시험예 1. 음료의 알코올 농도 감소효능 시험
성인남자 10명(A 내지 J)을 대상으로 알코올 360 ml (21%)을 섭취하도록 한 직후, 음주측정기(TNT TECH)로 알코올 농도(mg/L)를 측정하여 기록하고, 아무것도 섭취하지 않은 채 30분 경과 후 음주측정기로 알코올 농도(mg/L)를 측정하여 대조군으로 하였다.
일주일 후, 동일인인 성인남자 10명(A 내지 J)을 대상으로 알코올 360 ml (21%)을 섭취시킨 직후, 음주측정기로 알코올 농도(mg/L)를 측정하여 기록하고, 실시예 1 에서 제조한 본 발명의 숙취해소용 음료를 섭취하고 30분 경과 후 음주측정기로 알코올 농도(mg/L)를 측정하여 시험군으로 하였다.
대조군과 시험군의 각 알코올 수치를 기록하여 그 결과를 하기 표 3과 같이 나타내었다.
| 대상 |
대조군 | 시험군 | ||
| 알코올 섭취 직후의 알코올 농도(mg/L) | 알코올 섭취 30분 경과후 알코올농도(mg/L) | 알코올 섭휘 직후의 알코올농도(mg/L) | 알코올 섭취 30분 경과후 알코올농도(mg/L) | |
| A | 0.06 | 0.12 | 0.06 | 0.04 |
| B | 0.10 | 0.15 | 0.09 | 0.09 |
| C | 0.11 | 0.13 | 0.11 | 0.05 |
| D | 0.16 | 0.16 | 0.16 | 0.08 |
| E | 0.05 | 0.06 | 0.05 | 0.03 |
| F | 0.09 | 0.10 | 0.09 | 0.08 |
| G | 0.12 | 0.12 | 0.13 | 0.05 |
| H | 0.17 | 0.18 | 0.16 | 0.14 |
| I | 0.09 | 0.09 | 0.09 | 0.07 |
| J | 0.08 | 0.12 | 0.08 | 0.05 |
상기 표 3에 나타난 바와 같이, 대조군에서 알코올 섭취 직후의 평균 알코올 농도는 10.3% 였으나, 알코올 섭취 30분 경과 후 평균 알코올 농도는 12.3% 로 알코올 섭취 직후에 비해 체내 알코올 농도가 2% 증가하였다.
그러나, 본 발명의 헛개나무 목분 추출물을 함유한 음료를 섭취한 시험군에서, 알코올 섭취 직후의 평균 알코올 농도는 10.2% 였으나 알코올 섭취 30분 경과 후 평균 알코올 농도는 6.8% 로 알코올 섭취 직후에 비해 체내 알코올 농도가 3.4% 감소했다.
따라서 알코올 섭취 후 30분 경과 시 일반적으로 알코올 농도가 증가하거나 그대로 유지되는데 반하여, 본 발명에 따른 음료를 섭취한 경우에는 알코올 농도가 현저히 감소됨을 알 수 있다.
5.2 시험예 2
5-2-1 시험설계
- Cross-over design, double-blind, randomized trial
- 시험물과 위약을 단회 교차투여
- 피험자는 무작위로 시험물위약 투여군과 위약시험물 투여군으로 배정
- 모든 피험자에게 동일한 일정으로 시험
5-2-2 피험자의 선정
실험을 위해 20 내지 40세 연령의 남성으로 60 내지 75의 체중을 기준으로BMI(Body mass index)의 범위를 18.5 ~ 23.0로 하여 선천성 또는 만성질환이 없고 내과적인 진찰결과 병적 증상 또는 소견이 없으며, 임상병리 검사 및 활력징후가 정상범위에 속하는 자로서 자의로 동의서에 서명한 자를 기준으로 실험을 위한 피험자로 선정하고, 시험개시 1개월 이내 바르비탈류약물 등의 약물대사효소유도 및 억제약물의 복용을 한 사람, 시험개시 7일 이내에 시험에 지장을 줄 우려가 있을 만큼의 과도한 음주를 한 사람, 치료 당시 위궤양 치료제를 복용하고 있거나, 최근 6개월 이내에 위궤양치료를 받은 경험이 있는 사람, 과거에 췌장염, 통풍, 위장관 수술 등의 과거력이 있는 사람, B형, C형 간염환자 또는 보균자, 기타 알코올대사에 영향을 미칠 것으로 판단되는 약물을 복용하고 있는 사람 등 피험자로 부적절하다고 주치의가 판단한 사람, 아스피린 등 잠복출혈의 위험이 있는 약물을 복용하고 있는 사람, 음주 후 심장질환증상이나 부작용을 심하게 경험한 사람 중 피험자로 부적절하다고 주치의가 판단한 사람 및 과거에 정신질환을 앓았던 사람을 피험자로 제외하여 실험을 실시하였다.
5-2-3 투여방법 및 투여량
시험 개시 6시간 전에 피험자를 소집하여, 1시간 이후 투여 전(0시간) 채혈을 하고, 2시간 후 샘플 또는 위약을 경구로 시험품의 1회 복용 포장단위로 투여하고, 샘플 또는 위약 투여 후 30분 후 알코올 소주 1병을 30분 동안 자유스러운 환경에서 섭취하고, 알코올을 섭취하는 동안 최소한의 안주를 허용하며, 알코올 섭취 후 15시간 동안은 금식을 실시하고 물은 2시간 이후부터 섭취가 가능하도록 하였다.
5-2-4 관찰 내용 및 방법
(가) 혈중 알코올 및 아세트알데히드 측정
- 혈액 채취
a. 알코올 복용 전 좌측 상완 정맥에 saline-locked angio-catheter를 삽입하여 blank 혈액을 채취하고 다시 saline을 1 주입하여 혈액응고를 방지한다.
b. 알코올 복용 후 각각 0, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6, 15시간(8회)에 채혈한다.
c. 채혈 시에는 약 1의 혈액을 빼낸 뒤, 약 3의 혈액을 채취하고 다시 1ml의 saline을 catheter에 주입하여 혈액응고를 방지한다.
d. 채취한 혈액은 즉시 vaccumtainer에 담은 후 원심분리(3000rpm, 10min)을 하여 혈청을 분리한 후 분석 전까지 -40℃에서 보관한다.
- 혈중 알코올 농도 측정
a. Enzymatic bioanalysis UV-method(F-kit Roche, Cat. No. 0176290)로 사용한 kit의조작법에 의해 농도를 측정한다.
b. 알코올은 nicotinaminde-adenin dinucleotide(NAD+) 존재하에 알코올탈수소효소(Alcohol dehydrogenase, ADH)에 의해 아세트알데히드로 산화된다. 이때 조효소 NAD+가 NADH로 변하게 된다. 따라서 혈청 시료에 NAD+와 ADH를 넣어 반응시킨 후 발생하는 NADH의 양을 340nm에서 흡광도를 통하여 측정한다.
- 혈중 아세트알데히드 농도 측정
a. Enzymatic bioanalysis UV-method(F-kit Roche, Cat. No. 0668613)로 사용한 kit의 조작법에 의해 농도를 측정한다.
b. 알코올은 nicotinaminde-adenin dinucleotide(NAD+) 존재 하에Aldehyde dehydrogenase (ALDH)에 의해 아세트산으로 산화된다. 이때 조효소 NAD+가 NADH로 변하게 된다. 따라서 혈청 시료에 NAD+와 ALDH를 넣어 반응시킨 후 발생하는 NADH의 양을 340nm에서 흡광도를 통하여 측정한다.
- . 설문지 조사
알코올 섭취 15시간 후에 위의 설문지를 통해 숙취증상을 측정한다. 5점 척도를 사용하며, 그 결과는 숙취증상을 느낀 사람 수를 세어(총빈도) 비교하고, 4점 이상의 증상은 심한 숙취증상으로 여기고 그 빈도(중증 숙취증상을 겪은 사람의 빈도)도 역시 대조군과 실험 군을 비교한다. 통계적 유의성은 chi-square test를 사용한다
(나) 분석 방법
그룹 간 혈 중 에탄올과 아세트알데히드의 농도 및 숙취 증상의 차이는 SAS package를 이용한 t-test 분석으로 유의성을 평가한다.
Factor of analysing blood ethanol(acetaldehyde) concentration
| Cmax | 최초 투약 후 최고 혈중 농도투여 직 후 마지막 채혈시각까지의 혈중 농도-시간 곡선하 면적, 혈중 농도 상승 기간은 linear trapezoidal summation에 의하여 계산하고 혈중 농도 감소 기간은 log/linear trapezoidal summation에 의하여 계산한다. |
| Tmax | 최초 투약 후 최고 혈중농도 도달시간 |
5-3 실험결과
혈중알코올농도 평가를 위해 알코올을 경구투여한 후 약 30분 이내에 섭취량의 약 60~90%가 흡수되고 60분에 95% 90분에 100% 모두 흡수되므로 혈중알코올농도는 음주 후 60~90분 사이에 최고치를 도달한다고 알려져 있다. 따라서, 본 실험에서는 알코올 섭취 후 헛개나무 추출물을 함유한 시제품의 혈중알코올농도를 시간별도 측정하여 헛개나무 추출물의 조성물이 어떠한 영향이 있는지를 평가하였다.
알코올을 투여한 후 위에 상기에서 제시된 바와 같이 1시간 후에 가장 큰 농도를 나타냈으며 서서히 감소하였다. 즉, 첨부된 도 6에서 도시된 바와 같이 헛개나무 시제품을 투여한 군에서는 알코올만 투여한 군 보다 혈중알코올농도가 감소하는 것을 확인할 수 있다. 이는 in vitro 및 in vivo 실험에서와 같이 헛개나무가 ADH의 활성을 높여주어 혈중알코올농도의 증가를 막아주어 동일한 효과가 있음을 입증한 것이다.
또한, 혈중알코올농도 평가는 첨부된 도 7에서 도시된 바와 같이 헛개나무 추출물의 혈중아세트알데히드농도에 따른 인체실험에서 혈중아세트알데히드가 최고 농도에 도달하는 시간은 알코올 섭취 후 30분이며, 이후 1시간까지 감소하다가 1시간 이후 다시 증가하였다. 헛개나무 시제품 투여군은 1시간부터 2시간까지 약간 증가하다 다시 감소하여 15시간 후에는 거의 검출되지 않는 반면, 알코올만 투여한 군에서는 1시간부터 2시간까지 증가하였다가 감소하는 듯 보이나 15시간까지도 지속적으로 증가하는 경향을 보였다. 즉 숙취의 원인 물질인 아세트알데히드는 헛개나무 추출물 시제품 투여로 15시간 이후에도 계속 남아 있는 아세트알데히드를 감소시켜 숙취에 도움을 주는 것으로 확인하였다.
이상과 같이, 본 명세서와 도면에는 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 개시하였으며, 비록 특정 용어들이 사용되었으나, 이는 단지 본 발명의 기술 내용을 쉽게 설명하고 발명의 이해를 돕기 위한 일반적인 의미에서 사용된 것이지, 본 발명의 범위를 한정하고자 하는 것은 아니다. 여기에 개시된 실시예 외에도 본 발명의 기술적 사상에 바탕을 둔 다른 변형 예들이 실시 가능하다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 자명한 것이다.
Claims (1)
- 헛개나무 음건된 목분을 분쇄하여 열수추출하여 원심분리한 후, 얻어진 상등액을 동결건조하여 분말화된 물추출물(164g)을 형성하고, 이를 메탄올로 녹이고 여과하여 얻어진 여액을 38℃에서 감압농축한 후 메탄올이 제거된 메탄올 가용추출물을 획득하고 메탄올 가용 추출물을 에칠아세테이트와 완충 용액으로 수상 획분과 에칠아세테이트 분획하여 생성된 목분 추출액 64.5중량%, 헛개열매 농축액 5.0중량%, 벌꿀 3.0중량%, 액상과당 3.0중량%, 구연산나트륨 0.07중량%, 자몽종자추출물 0.05중량%, 갈근엑기스 1.0중량%, 액상올리고당 3.0중량%, 솔잎엑기스 1.5 중량%, 계피엑기스 1.0중량%, 글리신 0.2중량%, 영지엑기스 0.065중량% 및 정제수 25.215중량%이 혼합하여 구성된 것을 특징으로 하는 헛개나무 목질부에 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물.
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| KR1020130013513A KR20140100336A (ko) | 2013-02-06 | 2013-02-06 | 헛개나무 목질부로부터 분리된 추출물을 포함하는 숙취해소 조성물 |
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Publications (1)
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| KR20140100336A true KR20140100336A (ko) | 2014-08-14 |
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ID=51746267
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| KR (1) | KR20140100336A (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2574001C1 (ru) * | 2014-12-09 | 2016-01-27 | Николай Борисович Леонидов | Средство для лечения и профилактики алкоголизма |
| KR20160115635A (ko) | 2015-03-27 | 2016-10-06 | 안동대학교 산학협력단 | 헛개나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
-
2013
- 2013-02-06 KR KR1020130013513A patent/KR20140100336A/ko not_active Application Discontinuation
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| KR20160115635A (ko) | 2015-03-27 | 2016-10-06 | 안동대학교 산학협력단 | 헛개나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
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