KR20140016863A - 식물 재료의 항피로 조성물 및 이의 용도 및 제품 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피로 증상 개선, 수면의 질 개선을 위한 식물 재료의 조성물, 및 이의 제조 방법, 용도 및 제품에 관한 것으로, 상기 조성물은 로디올라 L.20-80%, 지노스템마 BL.10-60% 및 리시움 L.10-60%를 사용하여 제조된다.

Description

식물 재료의 항피로 조성물 및 이의 용도 및 제품 {ANTI-FATIGUE COMPOSITION OF PLANT MATERIAL AND PREPARATION METHOD, USE AND PRODUCTS THEREOF}

본 발명은 현대 식물 의학의 응용 분야에서 순수한 식물 기원의 의약 조성물에 관한 것이다.

피로는 때때로 "활동을 수행하기 위해 필요한 자원들의 가용, 활용 및 회복에서의 불균형으로 인한 신체적 및 정신적 활성에 대한 감소된 능력의 지각"으로 정의된다. 이는 종종 자가 진술을 통해 평가된 복잡하며 주관적인 현상이다. 피로의 주요 증상들은 다음 중 하나 이상을 포함한다: 에너지의 부족, 피곤과 졸림, 두통, 어지러움, 근육 약화, 늦은 반응, 부실한 판단, 우울, 식욕 부진, 감소된 면역력 및 기억 능력, 집중력 문제, 약화된 활동 개시 욕구 등.

피로는 흔히 사회 각계 각층의 사람들에게서 나타나는 한편 급성 또는 만성 질환들을 겪는 환자들은 종종 다양한 정도의 피로를 느낀다. 동시에, 건강한 사람들은 다음을 포함하는 모든 종류의 원인들로 인해 피로 증상들을 가질 수 있다.

1. 수면 부족

일반적으로 성인은 매일 8시간의 잠을 필요로 하지만 많은 사람들은 필요조건을 만족시키지 못하고 피로를 나타낸다. 수면 부족의 이러한 형태는 일반적으로 다음 두 가지 환경들 하에서 나타난다: a) 일, 가족 및 사회와 관련된 다양한 현실적인 이유들. 많은 사람들의 너무 빠른 생활 방식의 페이스는 이들을 점점 더 적게 자도록 하여, 이들의 생리적인 필요조건을 만족시키지 못하게 한다. 또한 일부 특정 시간 동안 사람들은 피곤을 느낄 수 있다. 예를 들어, 밤에 신생아들 또는 환자들을 돌보는 사람들은 보통 숙면을 취하지 못한다; b) 수면 부족의 보다 일반적인 원인은 주로 노화와 관련되어 있다. 50대부터 노인까지, 사람들의 신체 기능은 잠을 책임지는 생체 시계의 둔한 변화를 포함하는 점진적인 감퇴를 겪는다. 황혼 즈음에, 졸리는 기분이 많은 노인들을 사로잡으며, 이들은 또한 새벽 전에 일어나며, 수면 동안 증가된 횟수의 깨어남을 가지며, 잠이 들기 위해 긴 시간이 필요하며 수면의 질에 중요한 지표인 숙면의 지속 기간이 점점 더 짧아진다. 하버드 의과대학의 연구 보고서(Harvard Medical School Special Health Report <<Boosting Your Energy>>, Harvard Health Publications)에 따르면, 30세 사람들의 매일 밤 숙면 시간은 20세 사람들의 숙면 시간의 약 50%인 반면 65세의 숙면 시간은 20% 미만이었으며 전체 수면 시간의 오직 5%의 숙면을 가졌다. 낮아진 수면의 질은 불충분한 에너지를 야기하며 보다 쉽게 피로를 느끼게 된다.

2. 너무 적은 운동

오랜 시간 동안 규칙적인 운동의 부족 또는 활동 없이 너무 오랫동안 매일 앉아 있는 것은 사람들이 어떠한 신체적 활동을 시작한 직후 쉽게 피로를 느끼도록 만든다.

3. 불균형 식이

살 빼기 등과 같은 이유들로 오직 적은 당, 낮은 칼로리의 식품 또는 무엇을 먹을지에 대한 과도한 선택하기의 결과일 수 있는 불충분한 에너지 또는 영양실조로 인해 일부 사람들은 피로감을 매우 쉽게 느낀다. 다른 사람들은 에너지를 보충하기 위해 초콜릿과 같은 높은 칼로리 식품을 먹는 습관을 가진다. 이는 에너지 공급의 짧은 분출(burst)을 제공할 수 있지만 효과는 매우 빠르게 줄어들기 쉬우며 증가된 피로감을 야기한다.

4. 알콜 중독과 같은 나쁜 습관

알콜은 신경계를 억제하여 지연된 반응 시간을 야기하며 또한 수면 모드를 방해한다. 흡연 또는 카페인 함유 드링크의 섭취는 신경계에 자극 효과를 가질 것이어서 피로감으로 이어지는 불면증을 유발한다. 비록 많은 사람들이 한 때의 기분전환을 위해 이러한 습관들을 유지하지만 최종 결과는 이들이 더 많은 피로를 느끼게 하는 것이다.

5. 정신적 압박

비정상적인 정신 상태는 피로의 중요한 원인들 중 하나이다. 사람들이 과도한 업무 부담, 직무의 큰 변화, 나쁜 작업 환경, 고용 보장의 부재, 병, 가족 불행 등과 같은 일 또는 가족 관련된 이유들에 대하여 정신적 압박 또는 스트레스를 느끼는 것은 현재 매우 일반적이다.

6. 나쁜 작업 환경

광산 지역, 고원의 산소-부족 환경, 너무 춥거나 더운, 너무 시끄럽거나 조용한, 누구도 말하지 않는, 불규칙적인 교대의, 동일한 일을 반복적으로 하는 것에 집중하는 등의 작업장과 같은 나쁜 작업 환경은 피로감을 증가시킬 것이다.

피로는 사람들의 일상을 크게 방해할 수 있으며 삶의 질에 크고 부정적인 영향을 가질 수 있다. 장기간의 피로는 건강 또는 심지어 삶의 잠재적인 "살인자"가 될 수 있다. 인간 정신에 대한 피로의 주요 영향은 다음과 같이 요약될 수 있다:

(1) CNS 기능에 대한 억제

피로 상태 하에서, 인간 CNS는 세로토닌, 도파민 및 아세틸콜린과 같은 신경전달물질의 억제된 분비로 인해 기량 발휘를 못하기 쉬우며, 이는 늦은 반응, 부실한 판단, 근육 약화 및 정신이 산만해지는 것을 유발할 것이다. 이것이 만약 운전 중에 운전자에게 발생한다면 결과는 매우 심각할 수 있다.

(2) 약화된 면역계 기능

면역계는 우리 신체에서 방어하는 역할을 한다. 정상적인 상황 하에서 면역계는 박테리아, 바이러스 또는 유해 화학물질과 같은 유해한 인자들의 나쁜 영향들로부터 우리를 효과적으로 방어한다. 하지만, 만약 면역 기능이 피로로 인해 약화되면 다양한 유해 인자들에 대한 신체의 저항력은 약화될 것이다. 전형적인 예는 피로한 사람이 상부 기도 감염에 걸리기 쉽다는 것이다. 다른 한편으로는, 정상적인 사람은 급성 바이러스 또는 박테리아 감염 이후 그들의 감소된 면역력 및 증가된 일부 세포 인자들을 가질 것이며, 증가된 피로감을 유발한다. 억제된 면역계가 피로의 원인 또는 결과가 될 수 있다는 것을 알 수 있다. 따라서, 피로와 싸우기 위한 본질적 접근은 면역계를 조절하여 면역력을 강화시키는 것이다.

(3) 혈관계에 의한 산소 공급에 대한 영향 및 신체 에너지 공급 감소

혈당의 인 비보 분해는 에너지를 방출할 것이다. 충분한 산소와 함께는 이는 CO2 및 물로 분해될 것이며, 동시에 대량의 에너지를 방출한다. 대조적으로, 산소의 불충분한 공급은 적은 에너지 방출을 야기할 것이며 많은 수의 독성 폐기물들이 당의 분해를 통해 생산된다. 연구들은 피로 상태에서, 근육에 공급되는 산소의 양이 크게 감소하고 근육은 사실상 산소 부족 상태에 있는 것을 보여주었다. 만약 산소 부족이 오랜 시간 동안 심근에 나타나는 경우 그 결과는 파괴적일 수 있다. 더불어, 다른 신체 활동들이 또한 산소를 필요로 하기 때문에 신체의 모든 계들의 정상적인 활력을 유지하기 위해 모든 조직들에 산소의 지속적인 공급을 가지는 것이 필수적이다. 따라서, 조직으로의 증가한 산소 공급은 신체로의 에너지 공급을 도울 것이며, 이는 차례로 피로 회복을 도울 것이며 병에 걸리는 위험을 감소시킬 것이다.

피로와 싸운다는 점에서, 휴일을 갖는 것, 만족스러운 일을 찾는 것, 규칙적인 운동, 더 나은 식이로의 변화 및 충분한 잠을 포함하는 여러 접근 방법들이 존재한다. 하지만, 특정한 객관적인 이유들 때문에 피로와 싸우기 위해 취해진 방안들이 많은 사람들에게 기대한 효과를 야기하지 못하였다. 첫째로, 사람들이 이들의 생활방식 또는 사회적인 역할을 변화시키는 것이 쉽지 않다. 개인이 그/그녀의 삶을 사는 방법은 직장에서의 임무, 가족 책임감, 사회적 상호작용, 경제적 상황 등과 같은 관련된 현실들에 의해 이미 결정되었다. 둘째로, 장기간의 피로를 가진 사람들은 신경계 및 내분비계의 장애, 약화된 면역력, 비정상적인 혈관계, 소화 장애 등을 포함하는 특정 생리학적 변화들을 겪는다. 이런 것들이 발생하는 경우, 모든 것을 올바르게 되돌리기 위한 신체의 자가 수리 기능에 전적으로 의존하는 것은 어려울 수 있다. 그리고 이러한 단계에서, 고려되는 매우 필수적이며 중요한 개입은 개별적인 계를 정상으로 복구하는 것을 도와주기 위한 몇몇 효과적이며, 안전하고 자연적인 건강 제품들의 사용이다.

항피로 효과를 갖는 제품의 형태로 서양 의학 세계에서 "강장제(adaptogen)" 약물이 현재 널리 인정되고 있다. "강장제"의 개념은 러시아 과학자인 니콜라이 라자레브에 의해 1947년에 처음 도입되었다. 이는 압박 및 자극에 대한 신체의 비특이적인 방어 기능을 도움으로써 신체를 정상으로 되돌리는 것을 도울 수 있는 것으로 여겨지는 천연 식물 제품의 그룹을 참조하였다. 이들은 정상 복용 범위 내에서 안전하고 무독성으로 여겨졌으며 인체를 전신적으로 조정하고 조절할 수 있다. "강장제" 약물 및 다른 약물들 사이의 가장 현저한 차이는 전자가 과도한(hyper)-기능을 길항 작용하고 저하된(hypo)-기능을 강화시켜 호르몬의 분비 및 면역계를 효과적으로 균형 맞출 수 있어서 향상된 면역력 및 감소된 피로감을 나타낸다는 것에 있다. 결과적으로, 우리는 호르몬 수준 및 면역계의 조절, 밸런싱 및 최적화를 통한 중년 및 노인의 활력 및 수면의 질을 향상시키기 위해 식물 제품의 강장제 형태의 사용을 고려할 수 있습니다.

외국 연구자들은 약물의 강장제 형태가 전통 중국 한의학(TCM)의 "기 강화(qi tonifying)" 약초와 유사한 방식으로 작동한다는 것을 추측하였습니다. TCM의 이론에 따라, 피로감, 특히 장기간 피로가 "결핍", 주로 "기 결핍" 또는 "기 및 양 결핍" 둘 다에 의해 유발된다. "기 결핍"은 물의 축적, 축축함 및 가래, 혈액 정체를 야기할 수 있으며, 이는 또한 기 및 양의 소비를 야기할 것이며, 밤의 불면증 및 낮의 에너지 부족을 유발한다. 또한, 노화와 함께 기 및 혈관계 모두는 점점 약화되며, 사람들은 주로 불면증 및 피로로 나타나는 기 및 양 결핍 증상들을 보다 쉽게 겪는다. TCM 의사들은 보통 이들을 수면을 향상시키고 피로를 감소시키기 위하여 신체 계(body system)를 조절하기 위해 관련된 특징 또는 기능의 다른 약초들과 함께 리시움(Lycium) 열매와 같은 기 및 양 강화 약초들로 치료한다.

로디올라(Rhodiola), 지노스템마(Gynostemma) 및 리시움(Lycium) 식물들은 일반적으로 "강장제" 약초로 여겨지며, 이들은 또한 중국 약물에서 기-강화 특성을 가진 것으로 분류된다. 3개의 각각의 약초 추출물들은 현재 항피로 제품으로 각각 판매되지만 각각의 약초가 포함하는 서로 다른 화학 성분들로 인해 서로 다른 "강장제" 작용을 가진다. 예를 들어, 로디올라는 여러 신체 계들을 위한 유명한 정류(rectification) 기능을 가진다. 지노스템마(Gynostemma)는 현저한 진정, 최면 및 진통 활성들을 나타내며 수면을 효과적으로 향상시킬 수 있으며, 리시움(Lycium)은 체격을 향상시키고 노화를 늦추는데 사용되는 전통적인 항 노화 토닉이다. 결합되는 경우, 3개의 약초들은 더 나은 항피로 결과를 성취하고 동시에 필요한 개개의 약초들의 양을 감소시키기 위해 활성의 서로 다른 메커니즘을 가지고 작용할 것이다. 이는 또한 최종 제품의 안정성 프로파일을 향상시킬 것이어서 단일 약초 제품들 보다 더 긴 기간 동안의 사용을 허용할 것이다.

위에서 언급된 판매되는 단일 약초 제품의 대부분은 제품의 일관성을 보증하기 위한 안정성 및/또는 약효 측정, 또는 분명한 품질 기준을 가지지 않는다. 대조적으로, 본 발명의 발명자들은 엄격한 독성 및 임상 연구들을 수행하였으며, 이는 본 발명의 제품의 임상 안정성 및 약효를 완전하게 증명한다. 또한 본 발명의 발명자들은 실험 연구들을 통해 제품의 안정성 및 배치 간 일관성을 보증하기 위한 특정 품질 기준 및 생산 방법을 정립하였다. 수행된 약학적 및 임상적 연구들은 또한 항피로 분야에서 인간 사용을 위한 안전하고 효율적인 제품의 투여 범위의 결정을 초래하였다.

본 발명은 상기 문제점을 해결하는 것을 그 목적으로 한다.

본 발명의 제 1 양태는 항피로 효과를 갖는 식물 재료의 조성물을 제공하는 것이다. 이는 사람들의 수면을 향상시키고, 에너지를 제공하며 피로감을 현저하게 감소시킨다.

본 발명의 제 2 양태는 안전하고 적은 투여량의 항피로 제품을 제공하는 것이며, 이는 독성 또는 부작용 없이 장기간 동안 투여될 수 있다.

본 발명의 제 3 양태는 관련된 식품, 약물 및 건강 제품의 제조에서 상기 조성물의 용도를 제공하는 것이다.

다른 양태에서, 식물 재료들로부터 만들어지고 항피로 효과를 갖는 상기 조성물은 로디올라(Rhodiola), 지노스템마(Gynostemma) 및 리시움(Lycium) 속의 식물들로부터의 식물 재료들을 이용하여 제조된다.

디른 양태에서, 더 나은 항피로 효과를 달성하기 위해 상기 조성물은 원료의 건조 중량을 기초로 계산된, 로디올라 속으로부터의 20-80% 식물 재료; 10-60% 지노스템마(Gynostemma); 10-60% 리시움(Lycium)을, 바람직하게는, 로디올라 속으로부터 30-50%; 20-40% 지노스템마(Gynostemma); 20-40% 리시움(Lycium)을 포함한다.

다른 양태에서, 상기 로디올라 식물은 다음 종들 중 하나 이상일 수 있다: 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) A. Bor., 로디올라 로제아(R. rosea) L., 로디올라 크레눌라타(R. crenulata)(Hook. f. et Thoms.) H. Ohba, 로디올라 키릴로위이(R. kirilowii )(Regel) Maxim이며，로디올라 사카리넨시스(R. sachalinensis)가 선호되는 종이다.

다른 양태에서, 상기 지노스템마(Gynostemma) 식물은 다음 종들 중 하나 이상일 수 있다: 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum)(Thunb.) Makino，지노스템마 락숨(G. laxum)(Wall) Cogn., 지노스템마 퓨베센스(G. pubescens)(Gagnep) C. Y. Wu，지노스템마 구나그시엔스(G. gunagxiense) X. X. Chen et D. H. Qin，지노스템마 컴프레섬(G. compressum) X. X. Chen et D. R. Lians이며，지노스템마 펜타필룸(G. pentaphyllum)이 선호되는 종이다.

다른 양태에서, 상기 리시움(Lycium) 식물은 다음 종들 중 하나 이상일 수 있다: 리시움 바바룸(Lycium barbarum) L., 리시움 차이니즈(L. chinense) Mill., 리시움 다시스테뭄(L. dasystemum) Pojark이며, 리시움 바바룸(L. barbarum)이 선호되는 종이다.

다른 양태에서, 본 발명의 식물 조성물을 얻기 위해 상기 식물 종의 임의의 부분들을 사용할 수 있다. 최상의 품질의 추출물들을 얻기 위하여 각각의 식물들로부터 선호되는 부분들은 다음과 같다:

로디올라의 뿌리 및/또는 뿌리줄기(Rhizome)

지노스템마(Gynostemma)의 뿌리줄기 및/또는 전체 약초

리시움(Lycium)의 건조된 익은 과일(Dried ripe fruit)

다른 양태에서, 상기 식물 조성물의 필수적인 구성성분들은 상기 식물 원료 또는 이들의 혼합물의 총 추출물을 포함한다. 예를 들어, 로디올라 추출물은 두 개 이상의 로디올라 종의 혼합된 원료를 추출함으로써 또는 개개의 로디올라 식물의 추출물들을 혼합함으로써 얻을 수 있다. 이는 또한 지노스템마(Gynostemma) 및 리시움(Lycium) 추출물에도 적용된다.

다른 양태에서, 각 약초 재료의 상기 비율을 이용하여 상기 조성물을 얻기 위해 다양한 추출 방법들이 사용될 수 있기 때문에, 조성물의 활성 성분들은 변할 수 있다. 또한 동일한 속으로부터의 서로 다른 종 또는 서로 다른 제조 측면들로부터의 동일한 종은 추출된 활성 성분을 더 많거나 더 적게 포함할 수 있다. 하지만, 이들 활성 성분의 함량의 변화들은 본 발명의 목적 구현에 큰 영향을 가지지 않을 것이다. 각 식물 재료의 상기 비율을 기초로 하고 추출을 위한 일반적인 방법들을 사용하여, 야기된 추출물들은 본 발명의 어느 정도의 요구조건을 만족시키기 위한 특정량의 활성 성분들을 포함할 것이다.

다른 양태에서, 추출물들의 품질을 향상 및 제어하고, 원료에 따른 상기 언급된 변화의 영향을 감소시키기 위해, 본 발명의 발명자들은 관련 있는 활성/마커 화학물질/성분들의 양을 다음과 같이 정의하였다:

상기 로디올라 추출물은 0.5-3.0%, 바람직하게는 0.8-2.0% 살리드로사이드(salidroside)를 포함하며; 상기 지노스템마(Gynostemma) 추출물은 20-80%, 바람직하게는 20-40% 지페노사이드(gypenosides)를 포함하며; 및 상기 리시움(Lycium) 추출물은 20-60%, 바람직하게는 30-40% 리시움(Lycium) 폴리사카라이드를 포함한다.

다른 양태에서, 상기 식물 조성물을 얻기 위해, 임의의 현재 이용가능한 방법을 사용할 수 있으나 바람직한 방법은 분쇄, 추출, 응축, 건조 및 혼합을 포함한다.

다른 양태에서, 바람직한 추출 용매는 물 및/또는 저분자 알콜 또는 둘의 혼합물을 포함하며, 약학적 또는 식품 등급의 에탄올이 선호되는 저분자 알콜이다. 다른 양태에서, 원 식물 재료의 중량 : 추출물의 중량으로 표시된 추출물의 수율은 20 : 1 내지 2 : 1일 것이며, 바람직하게는 10 : 1 내지 3 : 1일 것이다.

다른 양태에서, 추출을 위한 바람직한 방법은 리플렉싱(reflexing)이며 추출 용매의 양은 원 식물 재료의 중량의 5-18 배, 바람직하게는 7-12 배이며, 리플렉싱 시간은 1-5회, 바람직하게는 2-3회 동안 1-3 시간, 바람직하게는 1-2 시간이다.

다른 양태에서, 건강 제품들, 식품 또는 항피로 약물 제조를 위해 첨가제가 본 발명의 상기 식물 조성물에 추가될 수 있으며, 건강 제품들, 식품 또는 항피로 약물에 적합한 임의의 첨가제는 각각 어떠한 창의력 없이 여전히 본 발명의 범위 내에서 당업계의 사람들에 의해 선택될 수 있다.

다른 양태에서, 상기 조성물이 건강 제품들 또는 항피로 약물들로 만들어지는 경우 추천되는 일일 복용량은 100-800 mg, 바람직하게는 150-600 mg이다.

다른 양태에서, 본 발명은 또한 상기 조성물 및 첨가제를 포함하는 3가지 형태의 제품을 제공한다.

상기 제품들 중 하나는 건강 제품이며, 이는 상기 조성물 외에 정제, 캡슐, 경구 액체 또는 소프트 드링크의 바람직한 제형을 갖는 약학적 등급의 관련 있는 첨가제를 포함한다. 상기 제품이 식품, 바람직하게는 소프트 드링크 형태인 경우, 조성물에 추가되는 첨가제는 식품 첨가제이다. 상기 제품이 항피로 약물인 경우, 약학적 등급 첨가제는 정제, 캡슐 또는 경구 액체의 바람직한 제형으로 사용되어야 한다.

다른 양태에서, 본 발명은 또한 상기 조성물을 포함하는 항피로 약물 및 건강 제품의 용도를 제공한다.

본 발명 내용 중에 포함되어 있다.

도 1은 실시예 1의 HPLC 결과이다.
장비: 워터스 HPLC 장비; 밀레니엄 32 데이터 처리 시스템; 600 pump; 2487 UV 검출기; PYE UNICAMPU 8800 UV/visible 분광광도계.
이동상: 물-아세토나이트릴 = 95:5
흐름 속도: 1 ml/min
검출 파장: 275 nm
컬럼: Sherisorb S10ODS1, 250 mm x 4.6 mm, 5 ㎛
상부(Above): 살리드로사이드의 표준 참조 화학물질의 HPLC 크로마토그램
하부(Lower): 실시예 1의 샘플의 HPLC 크로마토그램
도 2는 지노스템마 펜타필룸으로부터의 총 지페노사이드의 UV 흡수이다.
장비: PYE UNICAMPU 8800 UV/visible 분광광도계
시약들: 메탄올, 부탄올, 암모니아수, 바닐린, 빙초산 및 과염소산
표준 참조 화학물질: 진세노사이드 Rb1
방법: 실험 샘플의 100μl 메탄올 용액을 마개가 있는 10 ml 실험 튜브로 정확하게 덜어내고, 이를 수조에 위치시키고 용매를 증발시킨 다음, 즉시 수조에서 꺼낸 후 정확하게 측정된 0.2 ml 빙초산의 5% 바닐린 용액 및 0.8 ml 과염소산을 를 첨가하고, 잘 흔든 다음, 60℃ 수조에 15분간 위치시키며, 이후 10분간 흐르는 물에서 식혀준 후 5 ml 빙초산을 첨가하고 잘 흔든 다음 300-700 nm 파장에서 측정한다.
도면에서 곡선 1은 표준 기준 화학물질을 나타낸다; 곡선 2는 실험 5로부터의 총 지페노사이드 샘플을 나타낸다; 곡선 3은 실험 9로부터의 총 지페노사이드 샘플을 나타낸다; 3개 샘플들의 흡수의 유사함은 이들의 유사성을 나타낸다.
도 3은 실시예 7로부터의 리시움 폴리사카라이드의 UV 흡수이다.
장비: PYE UNICAMPU 8800 UV/visible 분광광도계
시약들: 황산, 물, 페놀 시약
표준 기준 화학물질: 글루코오스
방법: 실험 샘플의 1.0 ml 수용액을 마개가 있는 10 ml 실험 튜브로 정확하게 덜어내고, 2.0 ml까지 물을 첨가한 후 1.0 ml 페놀 시약을 첨가하고, 잘 흔들어 준 다음, 5.0 ml 황산을 첨가하고 잘 흔든 다음 5분간 방치하고 이를 끓는 물 수조에서 15분간 가열한 후 꺼내서 차가운 물로 15분간 식힌 다음 400-600 nm 파장에서 측정한다.
도면에서 곡선 1은 블랭크를 나타낸다; 곡선 2는 표준 기준 화학물질을 나타낸다; 곡선 3은 실험 샘플을 나타낸다. 결과는 표준 기준 화학물질과 유사한 화학물질들의 존재를 나타낸다.

일 실시태양에서, 본 발명의 조성물은 로디올라, 지노스템마 및 리시움의 속으로부터의 식물을 포함한다.

로디올라 식물은 현재 일반적으로 강장제 약초로 인식되며, 신체 기능을 효과적으로 조절하며 유해한 인자들에 대해 신체의 방어 기능을 강화시킬 수 있다. 동물 실험들은 로디올라의 영향 하 비정상적인 CNS 트랜스미터 함량을 바로잡거나 정상으로 되돌아올 수 있다는 것이 증명되었다. 이는 심장 기능을 향상시키고 혈액 및 산소 부족에 의해 유발된 일정한 정도까지의 혈액 역학 이상을 바로 잡을 수 있었으며, 산소 부족에 대한 증가된 인내력을 야기하였다. 로디올라는 면역계 조절을 통해 다른 환경 조건들에 적응하는 사람들의 능력을 향상시킨다. 1976년 러시아는 심각한 피로, 노인성 심부전, 다른 형태들의 정신 신경증, 자율신경 장애에 의해 유발된 증상들 및 정신 약물들의 부작용들의 치료를 위해 로디올라 사카리넨시스(R. sachalinensis)의 의학적 사용을 허용하였다. 일반적으로, 로디올라는 여러 신체 계들의 기능을 바로잡는 몇몇 특별한 특성들을 갖는다. 현대 연구들은 로디올라의 주요 활성 화학물질이 다음 구조를 갖는 살리드로사이드(salidroside)인 것을 발견하였다.

비록 지노스템마가 또한 다른 강장제 약초로 일반적으로 알려져 있지만, 이의 작용은 로디올라의 것과는 다소 다르다. 현대 화학 연구들은 지노스템마가 주로 사포닌 글리코사이드(saponin glycosides)를 포함하고 있다는 것을 발견하였다. 일본 연구자들에 의해 지난 세기의 70년대에 지노스템마로부터 Rb1과 같은 일부 진세노사이드(ginsenosides)의 분리 및 확인 이후로 계속, 지노스템마의 의학적 사용들, 특히, 이의 총 사포닌 글리코사이드들은 증가하는 관심을 끌었다. 동물들에서 약리학적 실험들은 지노스템마 추출물들의 여러 활성들을 보여주었다. 지노스템마는 특이적 및 비특이적 면역을 포함하는 면역 기능을 효과적으로 증가시켰다. 이는 순환계의 안정성을 유지시키는 것을 도울 수 있었으며 따라서 심혈관계 및 혈관계를 보호하였다. 그리고 가장 눈에 띄게 지노스템마는 현저한 진정, 최면 및 진통 활성들을 가진다. 수면을 향상시키는 이의 능력은 불면증의 경감 및 에너지 회복을 크게 도울 것이며 특히 노인들에게 유용할 것이다. 이는 천연 생산물이기 때문에 장기간 투여가 단일 화학 독립체들의 최면제의 사용에서 보이는 바와 같은 약물 의존성을 유발하지 않을 것이다. 또한 노화 방지에서 일정한 작용들을 나타낸다.

리시움은 노화 방지 토닉으로서 전통적으로 사용되었으며, 기운이 나게하며 노화 과정을 늦출 수 있는 것으로 여겨진다. 약학적 연구들은 면역력의 강화 및 조절에서의 이의 강한 작용을 보여주었으며 그 결과 암을 위한 보조 요법으로 사용되었다. 이는 또한 피로 상태에서 많이 생산되는 자유 라디칼들, 리포퍼옥사이드(lipoperoxides)를 효과적으로 제거함으로써 항산화 활성을 나타내었다. 이는 리시움의 항노화 작용의 메커니즘일 수 있다.

로디올라, 지노스템마 및 리시움의 조합은 아래 기술된대로 피로의 증상들을 포괄적으로 경감하는 작용을 최대화하기 위해 상호 보완적 이점들 및 상승적인 효과들을 가질 것이다.

1) 로디올라의 "체계적인 교정(systematic correction)" 작용은 CNS의 정상 기능 회복, "늦은 반응, 부실한 판단 및 우울"과 같은 피로 증상들의 감소, 및 불리한 환경에서 적응 능력의 향상을 도울 것이다.

2) 지노스템마의 진정 및 최면 작용들은 수면의 질 향상시키는 것을 도울 것이며 이는 피로를 보다 효과적으로 경감하기 위한 "병렬적인 약물 및 자가 회복 작용"의 쌍방향 접근을 가능하게 한다.

3) 3 개의 성분들의 조합된 작용들, 즉, 면역계의 강화 및 조절, 심혈관계의 보호 및 피로로 인한 독성 성분들의 제거를 통해, 모든 피로 증상들을 제거하는 것이 가능하다.

4) 동물 실험에서 본 발명 조성물의 높은 투여량이 혈액에서 산소를 운반하는 적혈구, 혈소판 및 헤모글로빈의 양을 높였다는 것은 주목할 만하다. 이들 양성 변화는 본 발명의 상기 조성물의 정상 투여량이 혈관계의 기능 및 산소 운반 능력을 향상시켜 피로의 경감 및 보다 효율적인 에너지 회복을 야기할 수 있을 것이라는 것을 보여주었다.

상기 언급한 이점들과 함께, 상기 조합의 사용은 개개의 약초들의 양의 감소를 가능하게 할 것이며, 단일 약초의 장기간 투여에 의해 유발되는 가능한 부작용의 위험을 최소화할 것이다. 그리고 순수 효과(net effect)는 증가된 효능과 안정성일 것이다. 게다가, 감소된 투여 요법은 환자들이 투여받기에 보다 편리하게 만들어 준다.

다른 실시태양에서, 3개의 조합 사용에 대한 합리적인 점은 중국 약물학(Chinese Materia Medica)에 기술된 개개의 약초들의 특성들 및 기능들에 의해 추가로 뒷받침된다. 로디올라는 "기-강화, 혈액 이동 및 순환 촉진"으로, 지노스템마는 "항염증 및 해독"으로 기술되어 있는 반면, 리시움은 "시력 향상을 위한 신장 및 간 강화, 바이탈 에센스 보충"을 할 수 있다.

다른 실시태양에서, 상기 조성물은 식물 원료 및/또는 개별적으로 각각의 식물 원료를 추출함으로써 제조된 식물 추출물의 혼합물 및/또는 혼합된 식물 원료를 추출함으로써 제조된 혼합된 식물 추출물들을 포함할 수 있다.

다른 실시태양에서, 더 나은 항피로 효과를 달성하기 위해 상기 조성물은 원료의 건조 중량을 기초로 계산된, 로디올라 속으로부터의 20-80% 식물 재료; 10-60% 지노스템마(Gynostemma); 10-60% 리시움(Lycium)을 바람직하게는, 로디올라 속으로부터 30-50%; 20-40% 지노스템마(Gynostemma); 20-40% 리시움(Lycium)을 포함한다.

식물 분류학에 의해, 동일한 속으로부터의 식물은 비록 서로 다른 지리학적 지역들에서 자란다고 하더라도 일반적으로 유사한 화학적 프로파일을 가진다. 이러한 특징은 동일한 목적을 위한 원료로서 동일한 속으로부터의 서로 다른 종의 사용을 가능하게 한다. 중국의 로디올라 종은 주로 북동, 간쑤(Gansu), 신장(Xinjiang), 쓰촨(Sichuan), 티벳(Tibet), 윈난(Yunnan) 및 구이저우(Guizhou) 지역에 분포된다. 일반적으로 약물 또는 건강 제품에 사용되는 종들은 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) A. Bor., 로디올라 로제아(R. rosea ) L., 로디올라 크레눌라타(R. crenulata)(Hook. f. et Thoms.) H. Ohba, 로디올라 키릴로 위이(R. kirilowii )(Regel) Maxim을 포함한다.

다른 실시태양에서, 상기 4종들 중의 하나 이상이 본 발명 조성물의 제조에 사용될 수 있으며, 로디올라 사카리넨시스(R. sachalinensis)가 선호되는 종이다.

다른 실시태양에서, 로디올라의 뿌리 및 뿌리줄기가 원료로서 사용된다.

다른 실시태양에서, 로디올라 속으로부터의 다음 종들이 또한 상기 4 종에 대한 대체물들로서 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 목적을 위해 사용될 수 있는 당업계에서 사람들에게 알려진 다른 로디올라 종들이 있을 수 있으며, 이는 여전히 본 발명의 범위 내에 있을 것이다.

로디올라 알시아 (R. alsia )(Frod.) S. H. Fu), 로디올라 알터나 (R. alterna ) S. H. Fu, 로디올라 앙구스타 (R. angusta ) Nakai, 로디올라 아프론티카(R. aporontica)(Frod.) S. H. Fu, 로디올라 앗사엔시스 (R. atsaensis )(Frod.) H. Ohba, 로디올라 아툰수엔시스 (R. atuntsuensis )(Praeg.) S. H. Fu, 로디올라 브레비페티올라타(R. brevipetiolata )(Frod.) S. H. Fu, 로디올라 부플레우로이즈(R. bupleuroides)(Wall. ex Hook. f. et Thoms.) S. H. Fu, 로디올라 칼리안타(R. calliantha)(H. Ohba) H. Ohba, 로디올라 크리산디미폴리아(R. chrysanthemifolia)(Levl.) S. H. Fu, 로디올라 콘시나 (R. concinna )(Praeg.) S. H. Fu, 로디올라 크레티니 (R. cretinii )(Hamet) H. Ohba, 로디올라 디엘시아나(R. dielsiana)(Limpr. f.) S. H. Fu, 로디올라 디스칼라 (R. discolor )(Franch.) S. H. Fu, 로디올라 드물로사 (R. dumulosa )(Franch.) S. H. Fu, 로디올라 유리카파 (R. eurycarpa)(Frod.) S. H. Fu, 및 로디올라 파스티지아타(R. fastigiata )(Hook. f. et Thoms.) S. H. Fu.

지노스템마 속의 식물은 모든 양쯔 강의 남부 지역들을 포함한 중국에 널리 분포되며 대부분 재배된다. 다음 5개의 종은 보다 높은 함량의 사포닌 글리코시드를 포함한다.

다른 실시태양에서, 다음 4개의 종들의 하나 이상은 본 발명 조성물의 제조에 사용될 수 있으며, 지노스템마 펜타필룸(G. pentaphyllum)이 선호되는 종이다.

지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum)(Thunb.) Makino，지노스템마 락숨(G. laxum)(Wall) Cogn., 지노스템마 퓨베센스(G. pubescens)(Gagnep) C. Y. Wu，지노스템마 구나그시엔스(G. gunagxiense) X. X. Chen et D. H. Qin，지노스템 마 컴프레섬(G. compressum) X. X. Chen et D. R. Lians.

다른 실시태양에서, 본 발명 조성물의 제조에서 상기 종들의 하나 이상의 뿌리줄기 또는 전체 약초가 원료로 사용될 수 있다.

다른 실시태양에서, 지노스템마 속으로부터의 다음 종들이 또한 상기 5개의 종들에 대한 대체물들로서 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 목적을 위해 사용될 수 있는 당업계에서 사람들에게 알려진 다른 지노스템마 종들이 있을 수 있으며, 이는 여전히 본 발명의 범위 내에 있을 것이다.

지노스템마 아그레가툼 (G. aggregatum ) C. Y. Wu et S. K. Chen, 지노스템마 버마니쿰(G. burmanicum ) King ex Chakr., 지노스템마 버마니쿰 (G. burmanicum ) King ex Chakr. var . molle C. Y. Wu ex C. Y. Wu et S. K. Chen, 지노스템마 카디오스퍼뭄(G. cardiospermum ) Cogn. ex Oliv., 지노스템마 락시플로룸(G. laxiflorum) C. Y. Wu et S. K. Chen, 지노스템마 롱기페스 (G. longipes ) C. Y. Wu ex C. Y. Wu et S. K. Chen, 지노스템마 마이크로스퍼뭄 (G. microspermum ) C. Y. Wu et S. K. Chen, 지노스템마 팔리디너브 (G. pallidinerve ) Z. Zhang, 지노스템마 펜타지넘(G. pentagynum ) Z. P. Wang, 지노스템마 펜타필룸 (G. pentaphyllum ) (Thunb.) Makino var. dasycarpum C. Y. Wu ex C. Y. Wu et S. K. Chen, 지노스템 마 심플리시폴리움 (G. simplicifolium ) Bl., 지노스템마 이싱젠스 (G. yixingense ) (Z. P. Wang et Q. Z. Xie) C. Y. Wu et S. K. Chen.

다른 실시태양에서, 본 발명의 조성물에서 다음 3개의 리시움 종들이 사용된다, 즉, 중국 약전에 열거된 리시움 차이니즈(L. chinense) Mill., 리시움 다시스테뭄(L. dasystemum) Pojark 및 리시움 바바룸(Lycium barbarum) L.이며, 본 발명의 목적을 위해 리시움 바바룸(L. barbarum)이 선호되는 종이다.

다른 실시태양에서, 상기 종들의 하나 이상의 건조된 익은 과일이 본 발명 조성물의 제조에 사용된다.

다른 실시태양에서, 리시움 속으로부터의 다음 종들이 또한 상기 3개의 종들에 대한 대체물들로서 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 목적을 위해 사용될 수 있는 당업계에서 사람들에게 알려진 다른 리시움 종들이 있을 수 있으며, 이는 여전히 본 발명의 범위 내에 있을 것이다.

리시움 바바룸 (L. barbarum ) L var. auranticarpum K. F. Ching, 리시움 차이니즈(L. chinense ) Mill. var. potaninii (Pojarkova) A. M. Lu, 리시움 시린드리쿰(L. cylindricum ) Kuang & A. M. Lu, 리시움 루테니쿰 (L. ruthenicum ) Murray, 리시움 트렁카툼 (L. truncatum ) Y. C. Wang 및 리시움 유나넨스 (L. yunnanense ) Kuang & A. M. Lu

다른 실시태양에서, 본 발명 조성물의 더 나은 효능을 달성하기 위하여 식물 원료를 적절한 방법으로 추출하는 것이 필요하다. 로디올라 및 지노스템마의 경우들에서와 같이 만약 사용될 식물 일부들이 뿌리 또는 뿌리줄기인 경우, 이들은 추출 전에 분쇄되어야 한다.

다른 실시태양에서, 식물 재료로부터 활성 성분들을 얻기 위해 비록 다른 용매들이 사용될 수 있지만 본 발명의 바람직한 추출 용매는 물, 저분자 알콜 또는 둘의 혼합물이다.

다른 실시태양에서, 5-50%의 수율에서 건조된 추출물을 얻기 위한 본 발명의 활성 조성물 제조 방법은 다음 단계들을 포함한다: 추출, 여과, 여과액의 농축, 건조 및 건조된 추출물의 분쇄.

다른 실시태양에서, 잔여 용매의 가능한 독성 및 가격을 고려하여 바람직한 저분자 알콜은 약학적 또는 식품 등급의 에탄올이다.

다른 실시태양에서, 추출 방법은 속슬레(Soxhlet) 추출과 같은 리플렉싱(reflexing), 실온에서의 침지, 여과, 초음파 추출 및 마이크로파 추출을 포함할 수 있으나 바람직한 방법들은 리플렉싱 및 실온에서의 침지이다.

다른 실시태양에서, 활성 성분을 철저하게 추출하기 위해, 이 방법은 1-5 회, 바람직하게는 2-3 회 동안 1-3 시간, 바람직하게는 1-2 시간의 리플렉싱을 포함한다.

다른 실시태양에서, 추출 용매의 양은 원 식물 재료의 중량의 5-18 배, 바람직하게는 7-12 배이다.

다른 실시태양에서, 액체 추출물을 위한 진공 하에서의 저온 응축이 활성 성분들의 가능한 분해를 최소화하기 위해 바람직하다.

다른 실시태양에서, 건조 방법들은 진공 하에서의 건조, 스프레이 건조, 동결 건조 및 임의의 다른 적절한 건조 방법들을 포함한다.

다른 실시태양에서, 본 발명은 활성 성분들의 고 순도의 추출물들을 얻기 위한 제조 방법을 제공하며 이는 다음 단계들을 포함한다. 상기 언급된 방법으로부터 얻어진 로디올라 또는 지노스템마의 농축된 추출물 액체를 적절한 양의 에탄올에 첨가하여 최종 에탄올 함량을 50-80%, 바람직하게는 70%로 만들기, 전체적으로 저어주기, 10-30 시간, 바람직하게는 20 시간 동안 방치하기, 여과하기, 여과액 수집하기 및 진공 하에서 여과액 응축하기, 추출물 건조하기, 높은 순도의 활성 성분들을 포함하는 건조된 추출물 분쇄하기. 건조 방법들은 진공 하에서의 건조, 스프레이 건조 및 임의의 다른 적절한 건조 방법들을 포함한다.

다른 실시태양에서, 본 발명은 또한 활성 성분들의 보다 더 높은 순도의 추출물들을 얻기 위한 제조 방법을 제공하며, 이는 다음 단계들을 포함한다. 상기 언급된 방법으로부터 얻어진 로디올라 또는 지노스템마의 농축된 추출물 액체를 적절한 양의 용매에 용해시키기, 컬럼 크로마토그래피 수행하기. 컬럼을 낮은 용출 능력의 용매로 시작하고, 이후 하나 이상의 용출 용매로 용출하는 적절한 용매를 이용하여 용출하고 그 다음 진공 하에서 응축되는 용리액(eluent)을 수집하기. 보다 높은 순도의 활성 성분들을 가진 추출물들을 얻기 위해 얻어진 고체는 건조되고 분쇄된다.

다른 실시태양에서, 상기 컬럼은 D-101, AB-8 및 XDA-1, 또는 폴리아마이드, 실리카겔 또는 화학 분리에 사용될 수 있는 임의의 다른 물질들을 포함하지만 이에 제한되지 않는 다공성 수지(macroporous resin)로 채워진다.

다른 실시태양에서, 모두는 농도 기울기 및 농도 불변 용출 방법들이 사용될 수 있다.

컬럼 크로마토그래피의 다른 기술들에 관한 한 이들은 당업자들에게 잘 알려져 있을 것이다.

다른 실시태양에서, 건조 방법들은 진공 하에서의 건조, 스프레이 건조, 동결 건조 및 임의의 다른 적절한 건조 방법들을 포함한다.

다른 실시태양에서, 본 발명의 식물 원료 및 활성 성분들의 특성들에 기초하여, 식물 재료로부터의 활성 성분들을 얻기 위한 두 가지 접근법이 존재할 수 있다. 제 1 접근법의 방법들은 다음 3가지 단계들을 포함하는 "혼합 추출(mixed extraction)"로 불린다: 3가지 식물 재료들이 분쇄된 다음 상기 비율에 따라 혼합된다; 혼합물은 상기 방법을 이용하여 추출된다; 농축 및 건조 후 본 발명 조성물의 추출물이 얻어진다.

다른 실시태양에서, 본 발명은 바람직한 접근법, 즉, 다음 단계들을 포함하는 "분리 추출(separate extraction)"로 불리는 제 2 접근법을 제공한다: 3가지 식물 원료를 개별적으로 분쇄 및 추출, 상기 3가지 추출물들을 각각 정제, 응축 및 건조하여 3가지 단일 추출물들을 얻으며, 이들 각각은 이들의 고유 활성 성분들을 포함한다. 각 식물 재료로부터의 건조 추출물의 수율 및 조성물의 식물 원료 비율을 기초로, 각 단일 추출물의 적절한 양들을 재고, 잘 혼합하여 본 발명의 조성물을 얻는다.

다른 실시태양에서, 본 발명의 조성물에서, 각 구성 식물의 활성 성분들은 서로 다른 물리적 및 화학적 특성들을 가진다. 본 발명 조성물의 활성 성분들을 보다 효율적으로 추출하고 높은 생리학적 활성을 보증하기 위하여, 본 발명의 조성물을 제조하기 위해 상기에 언급된 바람직한 (제 2) 접근법에서 기술된대로 각 식물을 개별적으로 추출하기 위해 추출 용매로 사용되는 에탄올의 서로 다른 농도를 포함하는 에탄올 수용액이 추천된다.

다른 실시태양에서, 3가지 약초들의 개별 추출물들을 얻기 위한 상기 언급된 방법들과 함께, 상기 조성물은 다음 3가지 추출물들을 포함하는 것으로 기술될 수 있다:

a) 로디올라 추출물

b) 지노스템마 추출물

c) 리시움 추출물

다른 실시태양에서, 상기 개별 추출물이 서로 다른 물리적 및 화학적 특징들을 가질 것이라는 것은 주지의 사실이다. 본 발명은 각 추출물에 대한 필수적인 서술 및 품질 요구조건을 제공한다.

a) 로디올라 추출물: 0.5-3.0%, 바람직하게는 0.8%-2.0%의 살리드로사이드를 포함하는 시큼한 맛을 가진 분홍색 가루. 한계 시험: 물<5.0%; 중금속<10ppm; 총 생균 측정<1000 cfu/g; 대장균(E. coli) 및 살모넬라(Salmonelia): 음성.

b) 지노스템마 추출물: 20-80%, 바람직하게는 20-40%의 지페노사이드를 포함하는 쓴맛을 가진 연두색 분말이며, 기준 화학물질로 Rb1을 갖는다; 한계 시험: 물<5.0%; 중금속<10ppm; 총 생균 측정<1000 cfu/g; 대장균(E. coli) 및 살모넬라(Salmonelia): 음성.

c) 리시움(Lycium) 추출물: 20-60%, 바람직하게는 30-40% 리시움(Lycium) 폴리사카라이드를 포함하는 신맛을 가진 갈색 분말이며, 표준 화학물질로 글루코오스를 갖는다; 한계 시험: 물<5.0%; 중금속<10ppm; 총 생균 측정<1000 cfu/g; 대장균(E. coli) 및 살모넬라(Salmonelia): 음성.

다른 실시태양에서, 약물로 만들어지는 경우 본 발명 조성물의 최고의 효능을 달성하기 위하여, 추출물들에서의 활성 성분들의 함량, 사용자의 나이, 성별 및 체중에 따라 경구 투여량이 조절되어야 한다. 일반적인 가이드로서, 성인에 대한 일일 투여량은 총 추출물의 건조 중량을 기초로 계산하여 100-800 mg, 바람직하게는 150-600 mg으로 추천된다.

다른 실시태양에서, 상기 기술된 대로 제조된 본 발명의 조성물은 임의의 경로를 통하지만 바람직한 투여 경로는 경구인 잠재적인 소비자들에 의해 투여되는 임의의 제형으로 만들어지기 위해 임의의 약학적으로 허용가능한 담체들과 조합될 수 있다.

다른 실시태양에서, 경구 투여 형태가 선택되는 경우, a) 건조 전분, 소듐 카복실 메틸 전분, 저치환 하이드록시프로필 메틸 셀룰로오스, 가교 PVP 등과 같은 붕해제; b) 마그네슘 스테아레이트, 탤컴 분말, 소듐 벤조에이트, 폴리에틸렌 글리콜(peg) 4000 등과 같은 윤활제; c) 소듐 카복시메틸 셀룰로오스, 당, 젤라틴 등과 같은 결합제를 포함하지만 이에 제한되지 않는 다음의 통상적인 첨가제가 본 발명의 조성물에 첨가될 수 있다. 조제 과학의 하나 이상의 방법들이 정제, 캡슐 또는 경구 액체 등을 포함하나 이에 제한되지 않는 임의의 통상적인 경구 제형을 제조하기 위해 사용될 수 있다.

다른 실시태양에서, 본 발명의 조성물은 향미제, 색소, 및 안정제 등의 첨가에 의해 고체 또는 액체 소프트 드링크로 만들어질 수 있다. 상기 소프트 드링크는 항피로를 위해 탄산이 들어가거나 탄산이 없을 수 있다. 상기 첨가제의 선택, 양은 당업자에게 알려져 있거나 적은 수의 간단한 실험들을 통해 결정될 수 있다.

다른 실시태양에서, 본 발명 조성물의 적용은 또한 의약 제제의 성분들 중의 하나로 상기 조성물의 사용을 포함하며, 본 발명의 활성 성분 및 식물 추출물들 및/또는 화학물질들과 같은 다른 물질들을 포함하며, 이의 최종 생산물은 본 발명의 활성 성분 및 다른 의약 물질들의 혼합물이다. 예를 들어, 본 발명의 조성물 또는 혼합된 추출물은 새로운 레시피를 형성하기 위한 건강 및 영양가를 가지는 하나 이상의 비타민, 아미노산, 미네랄 또는 임의의 다른 물질들과 함께 사용될 수 있으며, 항피로 목적을 위한 최종 제품을 위해 상기 언급된 형태들 중 임의의 것으로 만들어질 수 있다..

다른 실시태양에서, 쥐들이 본 발명의 조성물을 인간 임상 투여량들보다 120 및 240배 높은 투여량으로 30일 동안 섭취하였으며(실험 1 참조), 다음 결과들을 나타내었다.

a) 실험 재료는 일반적인 컨디션, 체중, 간 및 신장 기능들에 어떠한 영향을 갖지 않았다;

b) 높은 투여 및 낮은 투여 그룹 모두의 암컷 쥐와 높은 투여 그룹의 수컷 쥐의 혈액 글루코오스 수준이 관련되는 비교 그룹들의 쥐들의 것들보다 각각 현저하게 낮았다.

c) 실험 그룹에서 암컷 쥐들의 혈액 세포 수, 혈소판 수 및 헤모글로빈 수가 관련되는 비교 그룹들의 쥐들의 것들보다 각각 현저하게 높았다(p < 0.01).

d) 조직병리학 검사는 독성 조직 병리학적 변화를 발견하지 못하였다.

다른 실시태양에서, 단기간의 만성 독성 연구는 본 발명 조성물의 추천된 임상 투여 범위가 극히 안전하다는 것을 발견하였다.

다른 실시태양에서, 상기 조성물을 이용한 에임즈 실험(Ames Test)은 돌연변이의 어떠한 징후도 나타내지 않았다.

다른 실시태양에서, 상기 실험 결과들은 본 발명의 조성물이 혈액 글루코오스 감소, 혈액의 적혈구, 혈소판 및 헤모글로빈 증가를 돕기 위해 추천된 투여 범위의 상한(higher end)에서의 투여량을 이용하여 장기간 안전하게 사용될 수 있다는 것을 증명하였다. 산소 공급을 향상시키는 본 발명 조성물의 잠재적인 효과가 고찰될 수 있으며 더 나은 항피로 효능이 기대된다

다른 실시태양에서, 잠재적인 약물의 효능 및 안정성의 궁극적인 확인은 항상 잘 디자인된 인간의 임상 실험으로부터 나온다. 본 발명의 발명자들은 120명의 피로 환자들에서 무작위화된, 이중 맹검, 플라시보 제어된 임상 실험을 수행하였다(실험 3 참조). 실험 결과들의 다음 간략한 요약은 본 발명의 조성물이 피로의 치료에 안전하며 효과적인 약물인 것을 증명한다.

상기 조성물을 포함하는 실험 약물은 참가자들에서 어떠한 비정상적인 신체적 변화를 유발하지 않았지만 카레바리아(carebaria) 및 두통, 셀로스토미아(celostomia), 어려운 생각 및 말하기가 싫어지는 것과 같은 전형적인 피로 증상들을 현저하게 감소시켰다. 실험 약물을 투여받은 치료 그룹의 참가자들은 플라시보 그룹으로부터의 결과와 비교하여 이들의 수면의 질 및 에너지 수준이 현저하게 향상되었다. 실험 그룹의 참가자들 중 어느 누구도 실험 약물 투여의 결과로서 어떠한 부작용도 나타내지 않았다.

다른 실시태양에서, 일반적으로 "건강한" 것으로 여겨지는 사람들에 의한 항피로 제품에 대한 요구와는 별도로 많은 만성 질환 환자들이 항피로 제품을 섭취하는 것으로부터 이익을 얻을 수 있으며, 이들은 우울, 울혈성 심부전, 빈혈, 갑상선 기능 저하증, 당뇨 등을 가진 사람들을 포함한다. 상기 만성 질환들로부터의 장기간 고통으로 인해 이들은 피로를 자주 겪는다. 통상적인 치료요법과 함께 일부 항피로 제품을 섭취하는 것은 이들이 활기를 되찾고, 질병-저항 능력을 증가시키고, 일반적인 건강 및 삶의 질을 향상시키는 것을 도울 것이다. 이들 중 일부는 혈액 생화학에 대한 건강 제품의 효과, 예를 들어, 당뇨 환자들의 혈당 수준, 및 종래 치료법들과 항피로 제품과의 가능할 수 있는 불양립성에 대해 걱정할 것이다. 또한 많은 건강 제품들은 인간 사용에서의 이들의 안정성 및 효능을 뒷받침하는 동물 실험 또는 임상 연구로부터 나온 데이터를 가지고 있지 않다. 대조적으로, 본 발명의 조성물을 포함하는 조성물 및 관련된 제품의 인간에서의 안정성 및 효과적인 사용은 위에서 서술된 바대로 동물 및 임상 연구들을 걸쳐 잘 문서화되어 있다.

결론적으로, 로디올라, 지노스템마 및 리시움의 속들로부터의 식물 종들의 활성 성분들을 포함하는 본 발명의 조성물은 인간 사용에서 증명된 항피로 효능 및 안정성, 제어된 품질, 및 투여의 편의성의 명확한 장점을 가지며, 따라서 일반 대중 및 건강 전문가들 모두에게 보다 수용되기 쉽다.

실시예

본 발명에서 다음 실시예는 오직 본 발명을 설명하기 위한 목적으로 기술되며 본 발명의 범위를 어떠한 형태로도 제한하지 않는다.

실시예 1

로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis)의 원료 1000 kg을 분쇄하고, 원료 중량의 4배의 다량의 50% 에탄올을 사용하여 각 2시간씩 4회의 리플렉싱으로 분쇄된 재료를 추출한다; 혼합된 추출된 액체를 여과하고 여과액을 수집한 다음, 진공 하에서 응축에 의해 용매를 제거한다; 응축된 액체를 스프레이 건조하여 2.4% 살리드로사이드를 포함하는 325 kg의 로디올라 추출물을 제조한다.

실시예 2

로디올라 로제아(R. rosea)의 원료 1000 kg을 분쇄하고, 원료 중량의 4배의 다량의 70% 에탄올을 사용하여 각 2시간씩 4회의 리플렉싱으로 분쇄된 재료를 추출한다; 혼합된 추출된 액체를 여과하고 여과액을 수집한 다음, 진공 하에서 응축에 의해 용매를 제거한다; 응축된 액체를 건조하여 0.8% 살리드로사이드를 포함하는 217 kg의 로디올라 추출물을 제조한다.

실시예 3

실시예 2로부터의 응축된 추출물을 적절한 양의 물로 희석하고; 최종 용액을 D101 다공성 수지 컬럼 크로마토그래피하고; 이후 컬럼을 물로 안정화하며(balanced), 컬럼을 통해 용액을 적용한 다음; 물 및 이후 60% 에탄올로 용출하고 에탄올 용리액을 수집한다; 용리액으로부터 에탄올을 제거한다; 진공 하에서 응축된 용리액을 건조하여 5.1% 살리드로사이드를 포함하는 65.2 kg 건조 추출물을 얻는다.

실시예 4

로디올라 크레눌라타(R. crenulata)의 원료 100 kg을 분쇄하고, 이를 7배의 70% 에탄올과 혼합한 다음 40℃ 및 40KHz 주파수에서 40분간 초음파 추출한다; 여과하여 여과액을 수집하고; 5 배의 70% 에탄올을 잔여물에 첨가하고 30분간 초음파 추출한 다음, 여과하고 두 개의 여과액들을 조합한다; 진공 하에서 용매를 제거하고 최종 응축된 액체를 스프레이 건조하여 3.0% 살리드로사이드를 포함하는 184 kg의 건조 추출물을 얻는다.

실시예 5

지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum)의 원료 100 kg을 분쇄하고, 원료 중량의 5배의 다량의 70% 에탄올을 사용하여 각 2시간씩 4회의 리플렉싱으로 분쇄된 재료를 추출한다; 혼합된 추출된 액체를 여과하고 여과액을 수집한 다음, 진공 하에서 응축에 의해 용매를 제거한다; 진공 하에서 응축된 액체를 건조하여 27.4% 지페노사이드를 포함하는 188 kg 지노스템마 추출물을 제조한다.

실시예 6

실시예 5로부터의 응축된 추출물을 적절한 양의 물로 희석하고; 최종 용액을 AB-8 다공성 수지 컬럼 크로마토그래피하고; 이후 컬럼을 물로 안정화하며(balanced), 컬럼을 통해 용액을 적용한 다음; 물 및 이후 70% 에탄올로 용출하고 에탄올 용리액을 수집한다; 용리액으로부터 에탄올을 제거한다; 진공 하에서 응축된 용리액을 건조하여 71.1% 지페노사이드를 포함하는 65.2 kg 건조 추출물을 얻는다.

실시예 7

리시움 바바룸(Lycium barbarum)의 원료 1000 kg을 4배의 물로 각 1시간씩 4회 추출한다; 추출된 액체를 여과하고 진공 하에서 ml 당 원료와 같은 0.5g으로 응축된 여과액을 수집한다. 농축된 액체를 5배의 95% 에탄올에 저어주면서 첨가하고, 충분히 저어준 다음 적어도 12시간 동안 방치한다; 진공 하에서 여과하고; 여과액으로부터 에탄올을 회수한다; 95% 에탄올로 잔여물을 충분히 세척하고; 잔여물을 진공 하에서 건조하여 28.6% 폴리사카라이드를 포함한 160 kg 리시움 추출물을 얻는다.

실시예 8

실시예 7의 "진공 하에서 여과" 이후 침전물을 5배의 물에 넣고, 고르게 용해하도록 저어준 후, 0.2 mol/L의 세틸 트라이메틸 암모늄(CAT-OH) 용액을 pH 12까지 천천히 첨가하고, 하룻밤 동안 방치한다; 원심분리에 의해 침전물을 분리하고; 35%의 산성 산 용액을 침전물에 첨가한 후, 충분히 용해하도록 저어준 후, 여과하고 여과액을 수집한다; 여과액에 3배의 95% 에탄올을 첨가하여 침전시킨 다음, 여과하고 침전물을 수집한다; 이를 95% 에탄올로 충분히 세척한 후 진공 하에서 건조하여 54% 폴리사카라이드를 포함하는 94 kg 정제된 리시움 추출물을 생산한다.

실시예 9

실시예 1로부터의 1.40 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 0.55 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 0.45 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 혼합된 추출물들을 크기 2 캡슐들에 채워 각각 240 mg의 추출물들을 포함하는 10000개의 채워진 캡슐들을 제조한다.

실시예 10

실시예 3으로부터의 6.40 kg 로디올라 추출물, 실시예 6으로부터의 4.4 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 8로부터의 1.6 kg 리시움 추출물, 1.7 kg 미정질 셀룰로오스, 0.45 kg 가교 PVP, 0.55 kg CSM - Na, 0.05 kg 마그네슘 스테아레이트 및 0.05 kg 실리카겔 미세분말을 잘 혼합하여, 각 정제의 평균 중량이 1.2g인 12000개의 정제들을 제조한다.

실시예 11

실시예 4로부터의 0.8 kg 로디올라 추출물, 실시예 6으로부터의 0.35 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 0.45 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 적절한 양의 흰설탕, 카라멜 착색제 및 에센스를 첨가한다; 적절한 양의 탄산수에 혼합물을 용해하고; 여과한 다음 여과액을 살균하여 각 355ml 용량의 고리를 잡아당겨 여는 캔에 채워지는 3550 L의 탄산 드링크를 얻는다.

실시예 12

실시예 2로부터의 2.78 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 1.80 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 1.60 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 적절한 양의 감미료, 에센스 및 가용성 전분을 첨가하고, 에탄올로 과립화한 다음 과립들을 건조시키고 10000개의 알루미늄 호일 봉지에 과립들을 채운다; 마시기 전에 물에 내용물을 용해시킨다.

실시예 13

실시예 2로부터의 2.0 kg 로디올라 추출물, 실시예 6으로부터의 0.5 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 2.5 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 적절한 양의 감미료, 에센스, 전분 및 락토오스를 첨가하고, 10000개의 정제를 만든다.

실시예 14

실시예 1로부터의 4.1 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 0.5 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 8로부터의 0.5 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 적절한 양의 감미료, 에센스 및 가용성 전분을 첨가하고, 에탄올로 과립화한 다음 과립들을 건조시키고 10000개의 알루미늄 호일 봉지에 과립들을 채운다; 마시기 전에 물에 내용물을 용해시킨다.

실시예 15

실시예 1로부터의 0.3 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 0.4 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 0.3 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 혼합된 추출물들을 크기 2 캡슐들에 채워 3000개의 채워진 캡슐들을 제조한다.

실시예 16

실시예 1로부터의 0.8 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 0.1 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 0.1 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 혼합된 추출물들을 크기 2 캡슐들에 채워 3000개의 채워진 캡슐들을 제조한다.

실시예 17

실시예 1로부터의 0.35 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 0.22 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 0.18 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 혼합된 추출물들을 크기 2 캡슐들에 채워 2000개의 채워진 캡슐들을 제조한다.

실시예 18

실시예 1로부터의 0.60 kg 로디올라 추출물, 실시예 5로부터의 0.13 kg 지노스템마 추출물 및 실시예 7로부터의 0.13 kg 리시움 추출물을 잘 혼합하고, 혼합된 추출물들을 크기 2 캡슐들에 채워 3000개의 채워진 캡슐들을 제조한다.

실시예 19

실시예 1의 방법에 따라, 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) 원료 1000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 5의 방법에 따라, 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum) 원료 3000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 7의 방법에 따라, 리시움 바바룸(Lycium barbarum) 원료 1000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다. 상기 3개의 추출물들을 잘 혼합하며, 이는 실시예 11의 방법을 기초로 소프트 드링크로 만들어진다.

실시예 20

실시예 1의 방법에 따라, 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) 원료 800kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 5의 방법에 따라, 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum) 원료 100kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 7의 방법에 따라, 리시움 바바룸(Lycium barbarum) 원료 1000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다. 상기 3개의 추출물들을 잘 혼합하며, 이는 실시예 14의 방법을 기초로 과립화하여 포장된다.

실시예 21

실시예 1의 방법에 따라, 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) 원료 1500kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 5의 방법에 따라, 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum) 원료 2000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 7의 방법에 따라, 리시움 바바룸(Lycium barbarum) 원료 1500kg으로부터 건조 추출물을 얻는다. 상기 3개의 추출물들을 잘 혼합하며, 이는 실시예 10의 방법을 기초로 정제로 만들어진다.

실시예 22

실시예 1의 방법에 따라, 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) 원료 500kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 5의 방법에 따라, 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum) 원료 200kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 7의 방법에 따라, 리시움 바바룸(Lycium barbarum) 원료 300kg으로부터 건조 추출물을 얻는다. 상기 3개의 추출물들을 잘 혼합하며, 이는 실시예 10의 방법을 기초로 정제로 만들어진다.

실시예 23

실시예 1의 방법에 따라, 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) 원료 2000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 5의 방법에 따라, 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum) 원료 2000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 7의 방법에 따라, 리시움 바바룸(Lycium barbarum) 원료 1000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다. 상기 3개의 추출물들을 잘 혼합하며, 이는 실시예 14의 방법을 기초로 과립화하여 포장된다.

실시예 24

실시예 1의 방법에 따라, 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) 원료 1500kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 5의 방법에 따라, 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum) 원료 1500kg으로부터 건조 추출물을 얻는다; 실시예 7의 방법에 따라, 리시움 바바룸(Lycium barbarum) 원료 2000kg으로부터 건조 추출물을 얻는다. 상기 3개의 추출물들을 잘 혼합하며, 이는 실시예 14의 방법을 기초로 과립화하여 포장된다.

실시예 25-32

각각 동일한 양의 원료를 사용하여, 실시예 9에 기술된 동일한 제조 방법을 따라, 추출물들을 제조하기 위해 사용된 실시예 25-32의 서로 다른 종들의 원료가 아래 표에 나타나 있으며, 그 이외에도 해당하는 추출물들 및 관련된 약물, 건강 품 및 식품을 제조하기 위하여 아래에 열거된 것들 이외의 로디올라 속, 지노스템마 및 리시움으로부터의 임의의 종들이 본 발명에서 기술된 동일한 방식으로 사용될 수 있다.

실험

실험 1 본 발명 조성물의 독성 실험

1. 목적: 서로 다른 양의 본 발명 조성물을 30일간 연속적으로 섭취한 이후 쥐들에서 가능한 독성 효과들을 관찰하며, 만약 있다면, 발현의 시간, 표적 기관 및 증상들의 심각성을 기록하여 인간 사용을 위한 안전한 투여 범위를 결정하기 위한 기준을 제공한다.

2. 동물: 중국 의료과학 아카데미의 실험동물 센터(Experimental Animal Centre of Chinese Academy of Medical Sciences)에서 제공된 150-170g의 체중, 동일한 수의 성별의 66마리 위스타 쥐(Wistar rats). 품질 증명 번호: MA01-3008.

3. 실험 샘플: 에탄올 냄새를 가진 진한 갈색 분말인 실시예 9에서 만들어진 혼합 추출물.

4. 방법:

4.1 동물 육종: 쥐들은 5-6마리가 각각의 비니온 케이지, 온도 20±2℃, RH 40-70%, 자연광의 연구소 애니멀 하우스에서 길러짐; 중국 의료과학 아카데미의 실험동물 센터에 의해 제공된 과립의 쥐 먹이; 자유로운 먹이와 물 섭취; 실험전 일주일간 관찰.

4.2 실험 샘플 제조: 샘플을 분말로 갈고 물을 첨가하여 1일 공급량에 충분한 성체 쥐를 위한 필요한 농도의 현탁액을 제조.

4.3 투여 그룹화 및 투여: 쥐들을 동일한 수의 성별을 가진 22마리의 3개의 그룹들로 무작위로 나눔: 두 개의 실험 그룹들의 쥐들은 실험 샘플의 각각 5 g/kg 및 10 g/kg의 투여량을 투여받으며 3번째 그룹은 대조군; 30일 동안 아침에 하루에 한번 위관 투여.

4.4 결과

4.4.1 일반사항: 쥐의 행동, 배설물 및 소변, 독성 징후, 발현의 시간 및 지속 시간을 매일 관찰; 일주일에 한번 먹이의 양 및 물 섭취 기록; 실험 전 각 쥐의 체중을 재고 실험기간 동안 일주일에 한 번씩 체중을 기록하고 이에 따라 투여량을 조절.

4.4.2 혈액 정기 검사: 30일의 실험기간의 마지막에 후안와정맥총(postocular venous plexus)으로부터 혈액을 채취하여 RBC, WBC, Plt, Hb 및 백혈구 백분율(leukocyte differential count)을 측정. 장비: SWELAB 혈액세포 분석기.

4.4.3 혈액 생화학: 실험 기간의 마지막에, 펜토바비탈나트륨으로 쥐를 마취시키고; 복대동맥(abdominal aorta)으로부터 혈액을 채취하고 AST, ALT, ALP, Cre, BUN, TP, ALB, Cho, T-Bill, Glu을 포함하는 혈액 생화학 측정을 위해 혈장을 분리. 상기 측정들을 위해 사용된 장비들: Hitachi 7060 자동 생화학 분석기; 실험 키트들은 베이징 종센 하이테크 주식회사(Beijing ZhongShen Hightech Ltd.)로부터 제공됨.

4.4.4 조직 해부 및 조직학적 검사: 혈액 채취 이후 형태상의 변화, 각 기관, 즉 심장, 간, 비장, 신장, 부신, 뇌, 흉선, 난소, 자궁, 고환, 및 전립샘의 분리 및 무게측정에 의해 얻어진 내장 지수(기관/체중 x 100%의 중량)를 포함하는 조직 해부 검사가 동물들 상에서 수행되었다. 조직학적 검사를 위해 10% 포르말린 용액에 고정되는 상기 기관들 및 위, 십이지장, 공장, 회장, 결장, 림프절, 갑상선의 적절한 조직들을 보유하였다.

4.5 통계학적 방법들: t-실험 및 X²-실험을 이용하여 데이터를 분석하였다.

5. 결과 및 토론:

5.1 일반사항 및 체중 변화: 실험 기간 동안 모든 쥐들의 비정상적인 행동 또는 활성은 관찰되지 않았으며 정상적인 배설물 및 소변을 가졌다. 10g/kg 그룹에서 6일째에 한 마리의 쥐가 죽었다; 5 g/kg 그룹에서 15일째에 한 마리의 쥐가 죽었다; 부검은 두 경우 모두에서 위장 빌지 가스(gastrointestinal bilge gas)를 확인하였으며 심장, 간, 비장, 폐, 신장 및 뇌의 이상은 발견되지 않았다. 위장 빌지 가스는 쥐들의 죽음(밤)과 조사 사이의 장시간의 공백으로 인해 내장에서의 성분들의 발효에 의해 유발되었을 수 있다. 병리학적 조사는 5 kg/kg 그룹의 죽은 쥐에서 뚜렷한 폐 염증을 발견하였다. 낮은 투여 그룹에서 암컷 쥐들의 3주째의 마지막 및 수컷 쥐들의 1주째의 마지막에서의 체중 증가는 대조군 쥐들의 것들보다 더 낮은 것으로 확인되었다(p < 0.05). 실험의 마지막에서, 체중 증가가 3개의 그룹들 모두에서 동일한 것으로 확인되었다.

5.2 혈액 생화학에 대한 영향(표 1 참조): 높은 투여 및 낮은 투여 그룹들 모두에서의 암컷 쥐들의 혈액 글루코오스 수준 및 높은 투여 그룹에서의 수컷 쥐들의 혈액 글루코오스 수준이 대조군의 쥐들의 것들보다 현저하게 낮은 것으로 각각 확인되었다(p < 0.05, p < 0.01); 간 기능 지표들의 경우에는 그룹들 사이에서 ALT 및 AST의 현저한 차이가 없는 반면 두 투여 그룹들 모두의 암컷 쥐들의 ALP는 대조군의 쥐들의 것보다 현저하게 높았다(p <0.05). BUN 및 Cre, 신장 기능 지표들의 현저한 변화는 없었다. 낮은 투여 그룹의 암컷 쥐들의 Cho값은 대조군의 쥐들의 것보다 현저하게 높았다(p <0.05).

섭취 실험의 30일 이후 혈액 생화학 변화

	투여량 (g/kg)	쥐들의 수	ALP (μ/L)	BUN (mmol/L)	Cre (μmol/L）	Glu (mg/dl)	Cho (mg/dl)
♀	0	9	63.2±22.3	6.2±0.4	67.7±12.0	133.1±33.2	55.3±10.7
	5	10	101.7±27.7**	5.4±0.7**	73.7±6.4	105.4±11.0*	68.4±8.1**
	10	10	84.7±18.9*	5.8±0.9	67.7±4.4	94.8±10.8**	62.7±8.2
♂	0	9	135.3±35.1	5.8±0.5	74.2±10.0	127.2±26.9	57.6±8.5
	5	11	143.2±17.0	6.1±0.5	74.9±5.9	113.6±23.3	62.3±10.5
	10	11	140.9±23.5	5.3±0.4*	63.4±4.0**	95.2±9.8**	63.1±5.5

^* 대조군에 대한 P<0.05, ^** 대조군에 대한 P<0.01

5.3 혈액 정기 검사(표 2 참조): 실험의 마지막에서, 암컷 쥐들의 RBC, Plt 및 Hb가 대조군의 쥐들의 것들보다 현저하게 높았다. 실험 그룹들의 수컷 쥐들에서 지표들의 증가하는 경향이 존재하였으나 통계적 유의성은 갖지 않았다.

섭취 실험의 30일 이후 혈액 정기 변화

	투여량 (g/kg)	쥐들의 수	RBC (×1012/L)	WBC (×109/L)	HB (g/L)	Plt (×109/L)
♀	0	11	5.17±0.31	9.9±1.6	117.1±7.8	348.9±141.5
	5	10	5.91±0.38**	9.1±2.1	133.0±8.1**	524.2±71.6**
	10	10	6.11±0.40**	8.9±3.2	135.2±9.0**	418.4±46.5
♂	0	11	6.23±0.53	9.9±1.6	139.8±11.8	371.9±193.5
	5	11	6.65±0.41	9.1±2.1	145.5±8.7	438.0±105.5
	10	10	6.65±0.55	8.9±3.2	141.5±9.1	429.7±139.6

^* 대조군에 대한 P<0.05, ^** 대조군에 대한 P<0.01

6.4 내장 지수들 및 병리학적 조사들: 높은 투여 그룹의 쥐의 신장 및 부신 지수들은 대조군 쥐들의 것들보다 더 높았다. 낮은 투여 그룹의 수컷 쥐들의 내장 지수는 대조군 쥐들의 것들보다 더 높았다. 병리학적 조사는 어떠한 독성 병리학적 변화들을 발견하지 못하였다.

7. 결론: 상기 결과들은 실험 조건 하에서 5g/kg 및 10g/kg 그룹 모두의 쥐들이 뚜렷한 독성 반응을 겪지 않는다는 것을 보여준다. 실험에서 사용된 5 g/kg의 낮은 투여량은 인간의 임상 투여량 480 mg/day의 120배와 동등하다.

실험 2 에임스 실험(Ames test)

1. 목적: 히스티딘 영양 결핍 생쥐 살모넬라 타이피(salmonella typhi)의 역 돌연변이에 대한 이의 효과를 관찰함으로써 본 발명 조성물의 돌연변이 유발성을 실험.

2. 실험 샘플: 에탄올 냄새를 가진 진한 갈색 분말인 실시예 9에서 만들어진 혼합 추출물.

3. 박테리아 균주(bacteria strains): TA97, TA98, TA100, TA102.

4. 방법:

4.1 배지 제조: 페트리 접시에 2% 아가를 포함하는 배지의 바닥층을 부은 다음, 식히고 뒤집어서, 사용 전 37℃의 배양기에 보관한다.

4.2 박테리아 배양: 20㎕ 박테리아 현탁액을 5ml 영양 배지에 첨가하고 12시간 동안 진동과 함께 37℃에서 배양한다.

4.3 투여량 그룹화: 5개의 투여량들, 즉, 5000μg/dish, 2500μg/dish, 1000μg/dish, 100μg/dish, 1μg/dish가 사용되었으며, 각 투여량에 대해 3개의 접시들이 사용되었다; 하나의 음성 대조군 및 하나의 양성 대조군; in vitro 활성 시스템으로 쥐 간 마이크로좀 효소(S9)를 사용하였다.

4.4 플레이트 적용: 0.1 ml의 배양된 박테리아 현탁액 및 0.1 ml의 실험 샘플 용액을 접시에 첨가하고, 37℃ 수조에서 20분간 흔들었다; 배지의 상부를 첨가하고 잘 섞어 주었다. 응고 후 뒤집어서 48시간 동안 37℃에서 배양하였다; 역 콜로니(reverse colony)의 수를 세었다.

4.5 기준: 실험 샘플로부터의 역 콜로니 수는 대조군의 그것의 2배였으며, 동시에 투여량-의존적임을 보여주었다.

결론: 모든 4종류의 균주들에 대해 돌연변이 효과가 없었다(아래 표 참조).

5. 히스티딘 영양 결핍 생쥐 살모넬라 타이피(salmonella typhi)의 역 돌연변이에 대한 본 발명 조성물의 효과.

그룹	박테리아 균주
	TA97		TA98		TA100		TA102
	-S9	+S9	-S9	+S9	-S9	+S9	-S9	+S9
C1	136.3	186.7	38.3	44.7	181.7	194.7	278	287.3
	±5.1	±8.5	±3.2	±4.5	±5.7	±8.7	±10.4	±4.0
C2	1703.0	1397.0	923.3	793.3	1317.0	1625.0	1337.7	1306.7
	±107.8	±100.2	±59.4	±83.8	±32.1	±33.1	±151.1	±139.3
1ug/접시	126.7	159.3	38.0	42.3	178.0	192.0	281.0	292.3
	±6.5	±6.8	±4.0	±6.0	±4.6	±12.1	±6.0	±7.0
100ug/접시	122.7	147.0	34.0	42.0	180.3	186.3	268.3	283.0
	±6.7	±6.0	±3.6	±2.7	±12.9	±6.7	±11.0	±11.5
1000ug/접시	122.3	128.0	32.7	37.7	159.7	169.0	252.7	262.0
	±9.5	±6.6	±4.0	±4.2	±9.0	±4.0	±8.6	±9.5
2500ug/접시	98.0	109.3	32.3	39.3	160.3	171.7	193.0	200.3
	±11.5	±16.0	±4.6	±4.9	±4.7	±12.3	±5.6	±9.5
5000ug/접시	96.3	109.7	27.7	32.0	157.0	161.7	177.7	183.0
	±5.0	±5.0	±5.5	±5.6	±12.7	±13.7	±16.6	±5.6

참조: C1 = 음성 대조군; C2 = 양성 대조군

TA97 양성 대조군: 2.0μg/dish4-NQO(-S9), 10.0μg/dish2-AF(+S9)

TA98 양성 대조군: 20.0μg/dish DMC(-S9), 20.0μg/dish2, 7-2AF(+S9)

TA100 양성 대조군: 2.0μg/dish MMS(-S9), 10.0μg/dish 2-AF(+S9)

TA102 양성 대조군: 100.0μg/dish paraplatin（±9）

6. 결론: 에임즈 실험 음성.

실험 3 임상 연구

1. 목적: 본 발명 조성물의 임상적 항피로 효능 및 안전성 연구

2. 실험 샘플: 실시예 9에서 제조된 캡슐 및 전분을 포함한 플라시브 캡슐.

3. 연구 기관: 산시 의과대학(ShanXi medical University).

4. 대상 포함/배제 기준:

a) 50-60세의 피로 증상을 가진 건강한 지원자들; 여성 대상들은 폐경 후 여성들이어야만 한다;

b) 설명 동의서에 사인을 해야만 한다;

c) 피로 증상 체크(FSC)를 내야한다;

d) 정기적인 검진을 내야한다;

e) 대상 배제 기준: 어떠한 임상 연구에 현재 참여; 심각한 질환 환자; 실험 물질들에 알레르기가 있음.

5. 투여량 및 투여: 각 캡슐은 실시예 9로부터의 혼합 추출물 0.24 g 또는 전분을 포함하며, 8:30 내지 9:00 사이의 아침에 하루 두 개의 캡슐을 섭취.

6. 측정:

1) 30가지의 피로 증상들을 포함하는 FSC 설문지, 이는 주관적인 피로감을 측정하기 위한 가장 포괄적인 형태 중 하나로 여겨진다;

2) 수면의 질 설문지;

3) 기억 능력 측정;

4) 생리학적 검사.

7. 연구 설계: 120명의 적격 대상들을 비교할 만한 체중 및 나이 범위를 가진 각 그룹당 30명의 남성 및 30명의 여성의 2개 그룹들로 무작위화한다; 한 그룹의 대상들은 본 발명의 조성물을 포함하는 캡슐을 투여받는 한편 다른 그룹은 전분을 포함한 캡슐을 투여받는다; 피로 수준은 FSC 및 생리학적 검사들의 조합에 의해 평가되었다. 연구 스케줄은 여기에서 나열된다.

	1일째	11일째	21일째
건강 체크	X	X	X
FSC 설문지	X	X	X
수면의 질 설문지	X	X	X
기억 능력 측정	X	X	X
정기적 검진 및 혈액 검사	X		X
약물 제공	X
약물 회수			X

8. 연구 결과:

1) 플라시보 그룹과 비교하여, 상기 조성물을 투여받은 대상들의 피로 증상들의 전부는 아니지만 일부가 현저하게 감소하였다;

2) 플라시보 그룹과 비교하여, 상기 조성물을 투여받은 대상들은 보다 빨리 잠이드는 것 및 줄어든 수면시간 불안을 포함하는 수면의 질이 현저하게 향상되었다;

3) 플라시보 그룹과 비교하여, 연구 전, 연구 중 및 연구 후에 관찰된 현저한 생리학적 변화들은 존재하지 않았으며, 이는 다음 조사들을 포함하였다: 체중, 혈압, 심박동수, 정기 혈액 검사(Alt，Ast， Cre， 총 단백질, BUN, TC, TG, HDL-c, 혈액 글루코오스, RBC, Pit, 및 Hb) 및 혈액 아드레날린 수준.

4) 어떠한 부작용도 발견되지 않았다;

5) 그룹들 사이의 현저한 차이[80% 이상의 신뢰 구간(confidence interval)(c.i.)]를 보여주는 FSC 설문지 결과들 및 다음을 포함하는 "피로감 감소"에서의 실험 약물의 효능:

a) 카레바리아(Carebaria)(c.i. 96%)

b) 피곤(Tiredness)(c.i. 88%)

c) 약한 다리(Weak legs)(c.i. 98%)

d) 누워있기를 원함(Wanting to be recumbent)(c.i.87%)

e) 식사 후 졸림(c.i.98%)

f) 말하기가 싫어짐(c.i.82%)

g) 두통(c.i.96%)

h) 뻣뻣한 어깨(c.i.80%)

6. 연구 결과들은 본 발명의 조성물이 대상들의 생리학적 지표들에 영향 없이 피로 증상들을 현저하게 감소시키며 수면의 질을 향상시킨다는 것을 보여준다.

더불어, 다른 실시예들로부터 제조된 제품들 또한 실험 1-3에 기술된대로 동일한 결과를 나타낼 것이다.

Claims (12)

1. 로디올라(Rhodiola), 지노스템마(Gynostemma) 및 리시움(Lycium) 속(genera)의 식물로부터 일반적으로 제조되는 항피로 활성을 갖는 식물 재료의 조성물.
2. 제 1 항에 있어서,
   상기 조성물은 원료의 건조 중량을 기초로 계산된 20-80% 로디올라; 10-60% 지노스템마; 10-60% 리시움 속으로부터의 식물 재료를 포함하며, 바람직하게는 30-50% 로디올라; 20-40% 지노스템마; 20-40% 리시움 속으로부터의 식물 재료를 포함하는 것인 조성물.
3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
   상기 로디올라 식물은 로디올라 사카리넨시스(Rhodiola sachalinensis) A. Bor., 로디올라 로제아(R. rosea ) L., 로디올라 크레눌라타(R. crenulata)(Hook. f. et Thoms.) H. Ohba, 로디올라 키릴로위이(R. kirilowii )(Regel) Maxim 종들 중 하나 이상일 수 있으며, 로디올라 사카리넨시스(R. sachalinensis)가 선호되는 종이며, 상기 지노스템마 식물은 지노스템마 펜타필룸(Gynostemma pentaphyllum)(Thunb.) Makino，지노스템마 락숨(G. laxum)(Wall) Cogn., 지노스템마 퓨베센스(G. pubescens)(Gagnep) C. Y. Wu，지노스템마 구나그시엔스(G. gunagxiense) X. X. Chen et D. H. Qin，지노스템마 컴프레섬(G. compressum) X. X. Chen et D. R. Lians 종들 중 하나 이상일 수 있으며, 지노스템마 펜타필룸(G. pentaphyllum)이 선호되는 종이며, 상기 리시움 식물은 리시움 바바룸(Lycium barbarum) L., 리시움 차이니즈(L. chinense) Mill., 리시움 다시스테뭄(L. dasystemum) Pojark 종들 중 하나 이상일 수 있으며, 리시움 바바룸(L. barbarum)이 선호되는 종인 조성물.
4. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 조성물은 40-80% 로디올라 식물, 10-50% 지노스템마 식물 및 10-50% 지노스템마 식물의 추출물을 포함하는 것인 조성물.
5. 제 4 항에 있어서,
   상기 로디올라 추출물은 0.5-3.0%, 바람직하게는 0.8-2.0% 살리드로사이드를 포함하며; 상기 지노스템마 추출물은 20-80%, 바람직하게는 20-40% 지페노사이드를 포함하며; 및 상기 리시움 추출물 20-60%, 바람직하게는 30-40% 리시움 폴리사카라이드를 포함하는 것인 조성물.
6. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 조성물의 제조 방법은 분쇄, 추출, 응축, 건조 및 혼합을 포함하는 것인 조성물.
7. 제 6 항에 있어서,
   상기 조성물의 제조는 식물 재료의 추출을 위한 용매로서 물, 저분자 알콜, 바람직하게는 에탄올, 또는 둘의 혼합물을 포함하며 추출된 액체는 이후 응축 후 건조되는 것인 조성물.
8. 제 7 항에 있어서,
   상기 추출 방법은 리플렉싱(reflexing)이며 추출 용매의 양은 식물 재료의 5-18 배, 바람직하게는 7-12 배이며, 상기 리플렉싱은 1-5 회, 바람직하게는 2-3 회 동안 1-3 시간, 바람직하게는 1-2 시간 지속되는 것인 조성물.
9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
   상기 조성물의 사용은 임의의 적절한 첨가제의 첨가와 함께 건강 제품, 식품 또는 항피로 약물을 포함하는 것인 조성물.
10. 제 9 항에 있어서,
    총 추출물의 중량을 기초로 계산된 건강 제품 또는 항피로 약물로 만들어진 상기 조성물의 일일 투여량은 100-800 mg, 바람직하게는 150-600 mg인 조성물.
11. 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항을 기초로 한 상기 조성물 및 적절한 첨가제를 포함하는 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 따라 제조된 제품.
12. 제 11 항에 있어서,
    상기 제품은 a) 정제, 캡슐, 경구 액체 또는 소프트 드링크의 바람직한 제형을 갖는 약학적 등급의 첨가제를 포함하는 건강 제품들; b) 바람직하게는 소프트 드링크로 만들어진 첨가제로서 식품 첨가제를 포함하는 식품 및 c) 정제, 캡슐 또는 경구 액체의 바람직한 제형을 갖는 약학적 등급의 첨가제를 포함하는 항피로 약물을 포함하는 것인 제품.

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