KR102120144B1 - 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents
천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 혼합 및 가공하여 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 향상된 생리활성 기능을 갖는 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물의 제조방법은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 제조하는 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)와 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공하는 가공단계(S200)를 포함한다.
본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물의 제조방법은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 제조하는 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)와 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공하는 가공단계(S200)를 포함한다.
Description
본 발명은 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 혼합 및 가공하여 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 향상된 생리활성 기능을 갖는 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
한국사회에서 음주는 심신의 긴장을 풀고 타인과의 커뮤니케이션을 원활하게 하는 비언어적 커뮤니케이션의 중요한 매체이며, 공동체 규합의 수단으로 널리 행해지며, 여가시간에도 음주가 빠지지 않는다.
또한, 경제의 불안정성, 빈부격차에서 오는 사회적 소외감, 정신적 스트레스 등 여러 가지 요인에 의한 스트레스가 많은 현대인들에게 음주는 필수적인 것으로 자리 잡고 있다.
이와 동시에 건강 및 숙취해소에 관한 관심이 점점 증대되면서 숙취해소제 시장은 그동안 꾸준히 매출이 증가했다. 시장조사기관인 닐슨 코리아에 따르면 국내 숙취해소시장 매출규모는 수천억대에 육박했으며, 지난 20년간 추세를 살펴보았을 때 계속해서 증가될 것으로 관측한다.
숙취(hangover)란 알코올 음료를 복용한 후 육체적 또는 정신적으로 나타나는 불쾌한 경험 및 심신의 작업 능력 감퇴를 초래하는 현상을 의미한다. 숙취는 통상 수 시간에서 며칠에 걸쳐서 나타날 수 있다.
숙취의 주요 증상으로는 두통, 근육통, 메슥거림, 구토, 현기증, 집중력 저하, 구갈, 피로감, 포만감, 과흥분증, 초조및 우울증상, 발한 등 이다. 등이 있다. 수면 패턴의 변화, 위장관 불쾌증상 등도 수반될 수 있다. 탈력감과 인지능력의 감소가 알코올에 의한 숙취의 중요한 증상일 수도 있다.
숙취는 알코올의 체내 대사과정 중 분해되는 아세트알데하이드가 인체에 유해하게 작용함으로써 나타난다. 알코올은 간에서 알코올 탈수소효소(alcohol dehydrogenase; ADH)에 의해 아세트알데하이드로 산화되고, 다시 알데하이드 탈수소효소(aldehyde dehydrogenase; ALDH)에 의해 아세트산과 수소로 분해된 뒤 소변을 통해 배설된다.
숙취해소를 위한 음료 및 건강기능식품의 주성분을 살펴보면, 식물성 생약재가 가장 많았고, 그 다음으로 커큐민과 같은 기능성 화학물질, 복어나 황태와 같은 식물 이외의 생물유래 천연물질, 광천수와 같은 기능성 물의 순이었다. 첨가되는 재료별로는 헛개나무가 가장 많았고, 그 다음으로 칡, 인삼·홍삼, 오리나무, 진피, 오가피 순이었다.
이와 관련한 특허문헌으로는 국내공개특허 제10-2014-0137549호에서 헛개나무 목질부, 열매 및 잎의 에탄올 추출물로부터 용매별 분획물을 수득하고 이중 알코올 및 아세트알데히드 분해능이 매우 우수한 목질부 열수 분획물, 잎 부탄올 분획물, 열매 부탄올 분획물, 목질부 에틸아세테이트 분획물 및 목질부 물 분획물을 선정하고, 이를 건조하여 혼합한 헛개나무 추출물과 이의 제조방법을 제시하고 있다.
또한, 국내등록특허 제10-0608456호에서 알코올의 분해 작용 및 간장 보호 효과가 가지며 복용이 용이한 손바닥 선인장, 오리나무, 헛개나무 및 갈근의 복합생약 추출물을 함유하는 숙취 해소효과를 갖는 기능성 식품 조성물 및 이를 유효성분으로 함유하는 건강기능식품을 제시하고 있다.
종래 특허문헌은 공지의 효능을 갖는 생약제제를 단순히 이용하는데 목적을 두고있을 뿐이며, 건강식품에 적용시 감미료 등의 첨가제에 의해 유효성분의 발현 특성이 저하되고, 다양한 기능성을 기대하기 어려운 한계가 있었다.
본 발명자는 천연원료유래로 부작용이 없으며, 숙취제거활성 뿐만 아니라 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 향상된 생리활성을 갖는 다기능성의 건강기능성 조성물의 연구개발의 일환으로 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 주성분으로 하는 다기능성의 건강기능성 조성물을 개발하였고, 종래 시판제품에 비하여 월등히 효과가 우수함을 확인하여 본 발명에 이르게 되었다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 본 발명의 목적은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 혼합 및 가공하여 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 향상된 생리활성 기능을 갖는 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물의 제조방법은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 제조하는 천연복합원료 조성물 제조단계(S100);와 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공하는 가공단계(S200)를 포함한다.
상기 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)는 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 혼합하는 것을 특징으로 한다.
상기 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)는 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 포함하는 주원료 혼합물 100중량부에 대하여, 천연 결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 1 내지 200중량부 첨가하는 것을 특징으로 한다.
상기 과제를 해결하기 위한 본 발명의 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공한 것임을 특징으로 한다.
상기 천연복합원료 조성물은 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 혼합한 것임을 특징으로 한다.
상기 천연복합원료 조성물은 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 포함하는 주원료 혼합물 100중량부에 대하여, 천연 결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 1 내지 200중량부 첨가한 것임을 특징으로 한다.
상기 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물은 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 이들의 조합 중 어느 하나의 기능성을 갖는 것을 특징으로 한다.
상기 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물은 총 플라보노이드, 총 폴리페놀 및 이들의 조합 중 어느 하나의 생리활성이 증가된 것을 특징으로 한다.
상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 의하면, 시판 제품에 비하여 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 향상된 생리활성 기능이 우수한 효과가 있다.
도 1 은 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물에 사용되는 원료분말, 원료분말의 열수추출 상등액 및 시판제품 4종의 색도를 비교한 사진.
도 2는 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물의 알코올 대사관련 효소 활성을 평가한 NADH의 표준곡선과 ADH 유사활성 및 ALDH 유사활성을 보여주는 데이터.
도 3은 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 환을 보여주는 사진.
도 2는 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물의 알코올 대사관련 효소 활성을 평가한 NADH의 표준곡선과 ADH 유사활성 및 ALDH 유사활성을 보여주는 데이터.
도 3은 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 환을 보여주는 사진.
본 발명의 구체적 특징 및 이점들은 이하에서 첨부도면을 참조하여 상세히 설명한다. 이에 앞서 본 발명에 관련된 기능 및 그 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 구체적인 설명을 생략하기로 한다.
본 발명은 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 혼합 및 가공하여 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성, 항균활성 및 향상된 생리활성 기능을 갖는 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물의 제조방법은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 제조하는 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)와 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공하는 가공단계(S200)를 포함한다.
제 1실시예에 따른 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)는 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 제조하는 단계로, 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 혼합하여 천연복합원료 조성물을 제조할 수 있다.
상기 주원료(굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀)는 건조-분쇄공정을 통해 제조된 분말상, 증류수, 알코올류 및 이들의 조합 중 어느 하나의 추출용매를 이용하여 추출된 액상 및 상기 액상 추출물을 건조한 분말상 중 어느 하나를 사용할 수 있다.
분말상의 주원료를 사용할 시, 유효성분의 소실 및 변성을 최소화하기 위하여 동결건조된 것을 사용하는 것이 바람직하다.
더욱 바람직하게는, 굼벵이, 노루궁뎅이는 동결건조 및 분쇄된 것을 사용할 수 있으며, 헛개열매는 열수추출된 추출액 및 상기 헛개열매추출액을 과립화한 것을 사용할 수 있다.
쌀은 롤밀장치를 이용하여 10 내지 300μm의 평균입도를 갖도록 분쇄된 분말상을 사용할 수 있으며, 이때, 수분함량은 10 내지 15 wt%를 갖는 것이 바람직하다.
제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)에서는 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 포함하는 주원료 혼합물 100중량부에 대하여, 천연 결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 1 내지 200중량부 첨가하여 제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물을 제조한다.
이때, 천연 결합재는 원료들을 결합시키기 위한 바인더의 역할을 수행하며, 전분, 유기칼슘, 콜라겐, 한천, 젤라틴 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함할 수 있으며, 천연복합원료 조성물이 점도 1,000 내지 30,000 cP을 갖도록 첨가될 수 있다.
특히, 유기칼슘은 해조류, 산호류 및 갑각류 중 어느 하나 이상의 원료를 650 내지 1300℃에서 소성처리한 후 유기산수용액과 100 내지 350 rpm 에서 5분 내지 25분간 교반 및 건조된 것을 사용하는데, 소성 및 유기산처리를 통해 다른 성분들과의 반응성 및 결합특성을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.
유기산은 pH조절, 보존성, 점도제어를 위해 첨가되며, 상기 유기산은 시트르산, 사과산, 락트산, 살리실산, 아세트산, 부티르산, 팔미트산, 옥살산, 타타르산, 글리콜산, 설폰산 및 이들의 조합 중 어느 하나를 사용할 수 있으며, 바람직하게는, 시트르산, 사과산 및 이들의 조합 중 어느 하나를 사용할 수 있다.
감미료는 당도 및 기호도를 높이기 위해 첨가되며, 상기 감미료의 대부분은 점성을 가져 천연결합재의 역할을 수행함과 동시에 발효공정시 유효성분의 용출 및 미생물의 에너지원으로서 사용될 수 있다. 상기 감미료는 꿀, 조청, 메이플 시럽, 코코넛 당, 대추야자, 블랙스트랩 당밀, 스테비아, 아가베 시럽, 수카나트, 과당 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함할 수 있다.
또한, 제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 바코파 몬니에리, 콜라드그린, 병풀, 어스니어, 마치현, 후박, 버터넛 스쿼시, 개똥쑥, 구아바잎, 노니, 연자육, 백단향, 스피루리나, 참마 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가 천연원료를 첨가할 수 있다.
제 3실시예에 따른 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)는 상기 제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물의 구성성분 및 배합비로 첨가하되, 한꺼번에 투입하는 것이 아니라 순차적으로 혼합 및 소정의 방법으로 가공처리함으로써 유효성분의 용출특성 및 기능성을 향상시킨 천연복합원료 조성물을 제조하는 단계로서, 굼벵이, 노루궁뎅이버섯 및 부첨가 천연원료를 알칼리처리하는 알칼리처리단계(S110)와 알칼리처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루, 부첨가물을 혼합하는 혼합단계(S120)를 포함한다.
알칼리처리단계(S110)는 주원료인 굼벵이, 노루궁뎅이버섯 및 부첨가 천연원료가 갖는 유효성분의 용출특성을 높이기 위하여 알칼리처리하는 단계로, 상기 알칼리처리를 통해 굼벵이가 갖는 알칼로이드 성분 및 노루궁뎅이버섯의 베타글루칸 등의 다당류 등의 유효성분 추출특성을 향상시킬 수 있으며, 또한 부첨가 천연원료의 경우 알칼리처리를 통해 부첨가 천연원료의 섬유질을 분해하여 유효성분의 용출특성을 더욱 높일 수 있으며, 파이톨기가 떨어져 나가 클로로필리드를 형성하고, 다시 메틸 에스테르 결합이 가수분해되어 진한 녹색의 클로로필린을 형성하게 되면서 갈변 및 산화를 방지할 수 있는 효과가 있다.
상기 알칼리 처리는 알칼리 용액을 이용한 처리방법, 알칼리성 천연물을 이용한 처리방법 및 이들의 조합 중 어느 하나의 방법을 이용할 수 있다.
알칼리 용액을 이용할 경우, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘, 수산화암모늄, 탄산나트륨, 탄산수소나트륨 및 이들의 조합 중 어느 하나의 알칼리 용액을 이용할 수 있으며, 상기 알칼리 용액의 농도는 1 내지 15%(w/v)를 사용하여, 알칼리 용액의 온도 25 내지 85℃, 반응시간은 10 내지 120분간 상기 원료를 침지한다.
바람직하게는, 알칼리 처리시, 초음파 처리를 동시 수행할 수 있으며, 초음파 처리를 통하여 섬유질의 분해 및 유효성분의 용출특성을 더욱 활성화시킬 수 있다.
초음파 처리는 20kHz 내지 35 kHz 세기에서 5분 내지 20분간 수행되는데, 상기 초음파 세기 및 초음파 처리시간 미만으로 수행시에는 상술한 효과를 기대하기 어려우며, 상기 초음파 세기 및 초음파 처리시간을 초과하여 수행시에는 유효성분의 변성이 발생될 수 있기 때문에 상기 조건하에서 수행되는 것이 바람직하다.
제 4실시예에 따른 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)는 제 3실시예에 따른 천연복합원료 조성물의 제조방법을 포함하되, 부첨가물과 혼합하기에 앞서 알칼리처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지하는 단계를 더 포함하는 것으로, 굼벵이, 노루궁뎅이버섯 및 부첨가 천연원료를 알칼리처리하는 알칼리처리단계(S110)와 알칼리 처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지하는 키토산 용액 침지처리단계(S115)와 키토산 용액에 침지처리된 원료, 부첨가물을 혼합하는 혼합단계(S120)를 포함한다.
키토산 용액은 키틴, 키토산 및 이들의 유도체 중 어느 하나를 포함하는 키토산 유래입자와 용매를 혼합하여 제조되는 것으로, 키토산용액 침지 처리단계 (S115)에서는 알칼리 처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지함으로써 키토산 유래입자에 상기 원료 및 유효성분을 흡착시켜 유효성분의 보유특성을 향상시키고, 유효성분의 소실 및 변성을 방지할 수 있는 효과가 있다.
이때, 키틴 및 키토산의 유도체로는 글리콜키틴, 디히드록시프로필키틴, 인산화키틴, N-카르복시메틸키토산, 글리콜키토산, N-디히드록시프로필키토산, 키토산 올리고당 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함하며, 상기 키토산 유래입자는 100nm 내지 150 ㎛ 를 갖는 것을 사용할 수 있다.
제 2실시예 내지 제 4실시예에 따른 천연복합원료 조성물의 제조단계는 주원료 및 부첨가물의 혼합 후, 혼합물을 30 내지 40 ℃ 에서 48 내지 96시간 숙성시키는 숙성단계를 더 포함할 수 있으며, 상기 숙성단계를 통해 기능성, 기호성 및 장기저장 안정성이 증진될 수 있다.
가공단계(S200)는 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공하는 단계이다.
환제 제조시에는, 천연복합원료 조성물의 점도를 5,000 내지 30,000 cP로 제어하고, 수분량 5 내지 15wt% 로 제어한 후 제환기를 이용하여 환의 형상으로 제조할 수 있다. 이때, 환으로의 성형 방법은 종래 공지된 방법, 즉 제환기 등을 이용하며, 환의 크기, 즉 환의 직경을 제한하지 않으며, 또한, 환제 형상을 제조 후 식용금박으로 코팅하는 것도 가능하다.
액상의 경우, 상기 천연복합원료 조성물을 증류수, 과일쥬스, 천연추출액 및 이들의 조합 중 어느 하나의 용매와 혼합하여 제공될 수 있다. 또한, 용매와 혼합 후 열수추출되거나 발효공정을 거치는 것도 가능하다.
과립상은 천연복합원료 조성물 및 이를 이용한 액상을 이용하여 건조 및 과립화시켜 제조될 수 있으며, 분무건조법, 유동층과립제조법, 열풍건조법 및 이들의 조합 중 어느 하나의 가공공정을 적용하여 제조될 수 있다.
보다 바람직하게는, 분무건조법 또는 유동층과립제조법을 이용할 수 있으며, 유동층 과립 제조방법을 이용시, 장치 흡입 공기량 5 ~ 15㎥/sec, 투입관 온도 80 ~ 150℃, 분무압력 10 ~ 50 bar, 분무속도 1 ~ 10 kg/hr 로 제어될 수 있으며, 분무건조법을 이용시, 150 내지 190 ℃의 입구온도, 80 내지 110 ℃의 출구온도 및 공급량 6 내지 10 L/h 하에서 건조하여 입경크기가 10 내지 500㎛의 평균입도를 갖는 분말을 수득할 수 있다.
상기 가공단계(S200)는 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 형성함에 있어 매스틱검, 자일리톨, 레드와인, 산양유, 프로폴리스 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함하는 천연 항산화제를 포함하는 것도 가능하다. 구체적인 예를 들어, 환제 형상 후 표면에 천연 항산화제로 코팅하거나 액상의 제조시 함께 첨가할 수 있다. 상기 천연항산화제를 적용함으로써 보존성을 향상시킴은 물론이고 풍미를 높일 수 있게 된다.
이하, 본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물을 설명하도록 한다.
본 발명에 따른 천연복합원료를 포함하는 건강기능성 조성물은 상술된 제조방법에 의해 제조되며, 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공한 것이다.
제 1실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 혼합한 것이다.
상기 주원료(굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀)는 건조-분쇄공정을 통해 제조된 분말상, 증류수, 알코올류 및 이들의 조합 중 어느 하나의 추출용매를 이용하여 추출된 액상 및 상기 액상 추출물을 건조한 분말상 중 어느 하나를 사용할 수 있다.
분말상의 주원료를 사용할 시, 유효성분의 소실 및 변성을 최소화하기 위하여 동결건조된 것을 사용하는 것이 바람직하다.
더욱 바람직하게는, 굼벵이, 노루궁뎅이는 동결건조 및 분쇄된 것을 사용할 수 있으며, 헛개열매는 열수추출된 추출액 및 상기 헛개열매추출액을 과립화한 것을 사용할 수 있다.
쌀은 롤밀장치를 이용하여 10 내지 300μm의 평균입도를 갖도록 분쇄된 분말상을 사용할 수 있으며, 이때, 수분함량은 10 내지 15 wt%를 갖는 것이 바람직하다.
제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 포함하는 주원료 혼합물 100중량부에 대하여, 천연 결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 1 내지 200중량부 첨가한 것이다.
이때, 천연 결합재는 원료들을 결합시키기 위한 바인더의 역할을 수행하며, 전분, 유기칼슘, 콜라겐, 한천, 젤라틴 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함할 수 있으며, 천연복합원료 조성물이 점도 1,000 내지 30,000 cP을 갖도록 첨가될 수 있다.
특히, 유기칼슘은 해조류, 산호류 및 갑각류 중 어느 하나 이상의 원료를 650 내지 1300℃에서 소성처리한 후 유기산수용액과 100 내지 350 rpm 에서 5분 내지 25분간 교반 및 건조된 것을 사용하는데, 소성 및 유기산처리를 통해 다른 성분들과의 반응성 및 결합특성을 향상시킬 수 있는 효과가 있다.
유기산은 pH조절, 보존성, 점도제어를 위해 첨가되며, 상기 유기산은 시트르산, 사과산, 락트산, 살리실산, 아세트산, 부티르산, 팔미트산, 옥살산, 타타르산, 글리콜산, 설폰산 및 이들의 조합 중 어느 하나를 사용할 수 있으며, 바람직하게는, 시트르산, 사과산 및 이들의 조합 중 어느 하나를 사용할 수 있다.
감미료는 당도 및 기호도를 높이기 위해 첨가되며, 상기 감미료의 대부분은 점성을 가져 천연결합재의 역할을 수행함과 동시에 발효공정시 유효성분의 용출 및 미생물의 에너지원으로서 사용될 수 있다. 상기 감미료는 꿀, 조청, 메이플 시럽, 코코넛 당, 대추야자, 블랙스트랩 당밀, 스테비아, 아가베 시럽, 수카나트, 과당 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함할 수 있다.
또한, 제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 바코파 몬니에리, 콜라드그린, 병풀, 어스니어, 마치현, 후박, 버터넛 스쿼시, 개똥쑥, 구아바잎, 노니, 연자육, 백단향, 스피루리나, 참마 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가 천연원료를 첨가할 수 있다.
제 3실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 상기 제 2실시예에 따른 천연복합원료 조성물의 구성성분 및 배합비로 첨가하되, 한꺼번에 투입하는 것이 아니라 순차적으로 혼합 및 소정의 방법으로 가공처리함으로써 유효성분의 용출특성 및 기능성을 향상시킨 천연복합원료 조성물로서, 굼벵이, 노루궁뎅이버섯 및 부첨가 천연원료를 알칼리처리하고, 알칼리된 원료, 헛개열매, 쌀가루, 부첨가물을 혼합한 것이다.
알칼리처리는 주원료인 굼벵이, 노루궁뎅이버섯 및 부첨가 천연원료가 갖는 유효성분의 용출특성을 높일 수 있으며, 보다 상세하게는, 상기 알칼리처리를 통해 굼벵이가 갖는 알칼로이드 성분 및 노루궁뎅이버섯의 베타글루칸 등의 다당류 등의 유효성분 추출특성을 향상시킬 수 있으며, 또한 부첨가 천연원료의 경우 알칼리처리를 통해 부첨가 천연원료의 섬유질을 분해하여 유효성분의 용출특성을 더욱 높일 수 있으며, 파이톨기가 떨어져 나가 클로로필리드를 형성하고, 다시 메틸 에스테르 결합이 가수분해되어 진한 녹색의 클로로필린을 형성하게 되면서 갈변 및 산화를 방지할 수 있는 효과가 있다.
상기 알칼리 처리는 알칼리 용액을 이용한 처리방법, 알칼리성 천연물을 이용한 처리방법 및 이들의 조합 중 어느 하나의 방법을 이용할 수 있다.
알칼리 용액을 이용할 경우, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화칼슘, 수산화암모늄, 탄산나트륨, 탄산수소나트륨 및 이들의 조합 중 어느 하나의 알칼리 용액을 이용할 수 있으며, 상기 알칼리 용액의 농도는 1 내지 15%(w/v)를 사용하여, 알칼리 용액의 온도 25 내지 85℃, 반응시간은 10 내지 120분간 상기 원료를 침지한다.
바람직하게는, 알칼리 처리시, 초음파 처리를 동시 수행할 수 있으며, 초음파 처리를 통하여 섬유질의 분해 및 유효성분의 용출특성을 더욱 활성화시킬 수 있다.
초음파 처리는 20kHz 내지 35 kHz 세기에서 5분 내지 20분간 수행되는데, 상기 초음파 세기 및 초음파 처리시간 미만으로 수행시에는 상술한 효과를 기대하기 어려우며, 상기 초음파 세기 및 초음파 처리시간을 초과하여 수행시에는 유효성분의 변성이 발생될 수 있기 때문에 상기 조건하에서 수행되는 것이 바람직하다.
제 4실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 제 3실시예에 따른 천연복합원료 조성물을 포함하되, 부첨가물과 혼합하기에 앞서 알칼리처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지한 것을 사용한다. 보다 상세하게는, 굼벵이, 노루궁뎅이버섯 및 부첨가 천연원료를 알칼리처리하고, 상기 알칼리 처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지하여 키토산 용액에 침지처리된 원료를 수득하고, 부첨가물과 혼합하여 제조된다.
키토산 용액은 키틴, 키토산 및 이들의 유도체 중 어느 하나를 포함하는 키토산 유래입자와 용매를 혼합하여 제조되는 것으로, 알칼리 처리된 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지함으로써 키토산 유래입자에 상기 원료 및 유효성분을 흡착시켜 유효성분의 보유특성을 향상시키고, 유효성분의 소실 및 변성을 방지할 수 있는 효과가 있다.
이때, 키틴 및 키토산의 유도체로는 글리콜키틴, 디히드록시프로필키틴, 인산화키틴, N-카르복시메틸키토산, 글리콜키토산, N-디히드록시프로필키토산, 키토산 올리고당 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함하며, 상기 키토산 유래입자는 100nm 내지 150 ㎛ 를 갖는 것을 사용할 수 있다.
제 2실시예 내지 제 4실시예에 따른 천연복합원료 조성물은 주원료 및 부첨가물의 혼합 후, 혼합물을 30 내지 40 ℃ 에서 48 내지 96시간 숙성처리될 수 있으며, 숙성처리를 통해 기능성, 기호성 및 장기저장 안정성이 증진될 수 있다.
준비된 천연복합원료 조성물은 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공처리되는데, 환제 제조시에는 천연복합원료 조성물의 점도를 5,000 내지 30,000 cP로 제어하고, 수분량 5 내지 15wt% 로 제어한 후 제환기를 이용하여 환의 형상으로 제조할 수 있다. 이때, 환으로의 성형 방법은 종래 공지된 방법, 즉 제환기 등을 이용하며, 환의 크기, 즉 환의 직경을 제한하지 않으며, 또한, 환제 형상을 제조 후 식용금박으로 코팅하는 것도 가능하다.
액상의 경우, 상기 천연복합원료 조성물을 증류수, 과일쥬스, 천연추출액 및 이들의 조합 중 어느 하나의 용매와 혼합하여 제공될 수 있다. 또한, 용매와 혼합 후 열수추출되거나 발효공정을 거치는 것도 가능하다.
과립상은 천연복합원료 조성물 및 이를 이용한 액상을 이용하여 건조 및 과립화시켜 제조될 수 있으며, 분무건조법, 유동층과립제조법, 열풍건조법 및 이들의 조합 중 어느 하나의 가공공정을 적용하여 제조될 수 있다.
보다 바람직하게는, 분무건조법 또는 유동층과립제조법을 이용할 수 있으며, 유동층 과립 제조방법을 이용시, 장치 흡입 공기량 5 ~ 15㎥/sec, 투입관 온도 80 ~ 150℃, 분무압력 10 ~ 50 bar, 분무속도 1 ~ 10 kg/hr 로 제어될 수 있으며, 분무건조법을 이용시, 150 내지 190 ℃의 입구온도, 80 내지 110 ℃의 출구온도 및 공급량 6 내지 10 L/h 하에서 건조하여 입경크기가 10 내지 500㎛의 평균입도를 갖는 분말을 수득할 수 있다.
또한, 상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 형성함에 있어 매스틱검, 자일리톨, 레드와인, 산양유, 프로폴리스 및 이들의 조합 중 어느 하나를 포함하는 천연 항산화제를 포함하는 것도 가능하다. 구체적인 예를 들어, 환제 형상 후 표면에 천연 항산화제로 코팅하거나 액상의 제조시 함께 첨가할 수 있다. 상기 천연항산화제를 적용함으로써 보존성을 향상시킴은 물론이고 풍미를 높일 수 있게 된다.
이하, 본 발명을 바람직한 일 실시예를 참조하여 다음에서 구체적으로 상세하게 설명한다. 단, 다음의 실시예는 본 발명을 구체적으로 예시하기 위한 것이며, 이것만으로 한정하는 것은 아니다.
1. 재료 및 방법
1-1. 원료의 준비
흰점박이꽃무지의 3령 유충(굼벵이)을 경기도 소재지의 S 곤충나라로부터 확보한 후, 먹이원(사료)을 제거하고 3일 동안 절식상태로 배변을 유도하였다. 유충을 흐르는 물에 3회 세척한 후 자연건조하여 물기를 제거한 다음 115℃, 0.9 kgf/㎠로 5분간 고온고압멸균하고 -80℃에서 24시간 이상 동결 후, 동결건조기(Eyela, Japan)에서 약 48∼60시간 동안 건조하였다. 건조된 유충은 분쇄기를 이용하여 분쇄하여 분말을 제조하였고, -80℃에 보관하며 시료로 사용하였다.
노루궁뎅이 버섯은 P농장으로부터 제공받아 음건한 후 동결건조(Eyela, Japan)를 거친 분말을 사용하였다.
헛개나무의 열매는 충남 G 소재지에서 채집하여 건조시킨 뒤 시료 중량에 대해 각각 10배의 증류수로 10시간 동안 100 ℃에서 Hot Plate를 사용하여 열수 추출하였다. 추출물은 여과지(WHATMAN 0.45 μm)를 사용하여 여과 및 농축시키고, 건조기에서 건조하여 분말을 수득하였다.
쌀가루는 국내산 H 농업협동조합 멥쌀 일반미를 시중에서 구입하여 제조하였다. 쌀을 3회 수세한 후 쌀 무게의 3배 정도 물에 수침(3시간)하고 물기를 제거한 후 쌀가루의 제조를 위해 제분기에 적용하였다. 쌀가루의 수분함량을 동일하게 하기 위해 원적외선 건조기(SLD-1400S, CILIC Tech, Daegu, Korea)를 사용하여 최종 수분함량이 14±1%가 되도록 건조한 후 밀봉하여 보관하면서 시료로 사용하였다.
1-2. 열수추출분말의 제조
굼벵이, 노루궁뎅이 버섯, 헛개 열매, 쌀가루를 각각 3:3:3:1 (w/w/w/w)로 한 시료 무게에 대해 10배의 증류수를 가한 후 100℃에서 1시간 추출하였으며, 상기 과정을 2회 반복 한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하여 열수추출분말을 제조하였다.
1-3. 숙취 제거 활성
1) 진핵 효모세포를 위한 알코올 독성 감소 활성 평가
진핵세포는 원핵세포와 달리 다양한 알코올 대사경로를 가지며, 특히 효모 Saccharomyces cerevisiae 는 인간 세포와 유사하게 알코올 대사 경로를 가진다. 따라서 효모 Saccharomyces cerevisiae를 이용한 알코올 독성 변화를 평가하는 것은 숙취 제거의 또 다른 분석 방법으로 이용 가능하다.
본 연구에서는 효모에 50% 의 독성을 나타내는 에탄올을 처리하면서, 개발된 굼벵이, 노루궁뎅이 버섯, 헛개 열매, 쌀가루, 열수추출분말 및 시판 숙취 제거제 4종을 각각 20mg/5ml (0.4%) 농도로 첨가한 이후의 효모의 세포 독성 회복 효과를 검토하였다. 이때 사용한 실험배지는 YPD (yeast extract 0.5%, polypeptone 0.5%, dextrose 1%)를 사용하였으며, 사용 ethanol 은 0, 2, 4, 6, 8 및 10% 농도를 사용하였다.
실제 실험은 24시간 이내에 50% 생육저해가 나타나는 4% 에탄올을 포함하는 YPD 배지에 효모를 흡광도 0.02가 되도록 접종한 후, 숙취 제거 평가용 시료를 최종 0.4% 가 되도록 첨가하고, 4, 8, 12, 및 24시간 경과후의 효모 생육도를 각각 측정하였다.
2) 알코올 대사관련 효소의 활성 평가
체내에 흡수된 알코올은 ADH 및 ALDH의 순차적 반응에 의해 최종적으로 물과 이산화탄소로 전환되어 무독화된다. 따라서, 숙취제거제의 ADH 및 ALDH에 미치는 영향을 측정하여 숙취 제거능을 판단할 수 있다.
ADH 의 활성 측정은 Blandino 의 방법을 변형하여 측정하였으며, 흡광도 450nm에서의 NADH 생성속도를 평가하였다. 반응액은 Assay kit 제조사(Sigma Co.)의 지시와 동일하게 제조하였으며, 표준곡선은 아래의 혼합물을 대상으로 평가하였다(표 1).
| Reagent | uM | |||||
| 0 | 40 | 80 | 120 | 160 | 200 | |
| 1mM NADH | 0ul | 2ul | 4ul | 6ul | 8ul | 10ul |
| ADH Assay Buffer | 82ul | 80ul | 78ul | 76ul | 74ul | 72ul |
| Developer | 8ul | |||||
| 2M Ethanol | 10ul | |||||
이후 37℃에서 5분간 전반응 이후, 5분간 450nm에서의 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하고, 시료의 ALDH 활성은 대조구에 대한 상대활성으로 측정(표 2, 표 3)하였으며, 다음과 같은 식으로 나타내었다.
| Reagent | S 10ul | TC 10ul |
| ADH Assay Buffer | 72ul | 82ul |
| Developer | 8ul | |
| 2M Ethanol | 10ul | - |
| Sample | 10ul | |
| Reagent | C | TC 10ul | S 10ul | Blank |
| ADH Assay Buffer | 82ul | 82ul | 72ul | 92ul |
| Developer | 8ul | |||
| 2M Ethanol | 10ul | - | 10ul | - |
| Sample | - | 10ul | 10ul | - |
상대 ADH 활성도 (%)= B/A × 100
A : △ Abs/min of control at 450nm
B : △ Abs/min of sample at 450nm
ALDH 의 활성 측정은 Blandino 의 방법을 변형하여 측정하였으며, 흡광도 450nm에서의 NADH 생성속도를 평가하였다. 반액은 Assay kit 제조사(Sigma Co.)의 지시와 동일하게 제조하였다. 이후 37℃에서 5분간 전반응 이후, 5분간 450nm에서의 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 시료를 첨가하지 않은 것을 대조군으로 하고, 시료의 ALDH 활성은 대조구에 대한 상대활성으로 측정(표 4, 표 5)하였으며, 다음과 같은 식으로 나타내었다.
| Reagent | uM | |||||
| 0 | 40 | 80 | 120 | 160 | 200 | |
| 1mM NADH | 0ul | 2ul | 4ul | 6ul | 8ul | 10ul |
| ALDH Assay Buffer | 43ul | 41ul | 39ul | 37ul | 35ul | 33ul |
| ALDH Substrate Mix | 2ul | |||||
| Acetaldehyde | 5ul | |||||
| Reagent | S 10ul | TC 10ul | PC 10ul | SPC |
| ALDH Assay Buffer |
33ul | 38ul | 23ul | 33ul |
| ALDH Substrate Mix | 2ul | |||
| Acetaldehyde | 5ul | - | 5ul | 5ul |
| Sample | 10ul | 10ul | 10ul | - |
| ALDH Positive Control | - | - | 10ul | 10ul |
상대 ALDH 활성도 (%)= B/A × 100
A : △ Abs/min of control at 450nm
B : △ Abs/min of sample at 450nm
1-4. 항산화 활성
항산화 활성은 DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) anion scavenging activity [DSA], ABTS [2,2-azobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)] cation scavenging activity [ASA], 환원력 평가 및 nitrite scavenging activity [NSA] 측정으로 평가하였으며, 활성평가의 대조구로는 vitamin C (Sigma Co.)를, 용매 대조구로는 DMSO를 사용하였다.
먼저 DSA 측정의 경우, 다양한 농도로 희석한 시료 20 μl에 99.5% ethanol 에 용해시킨 2×10-4M DPPH용액 380 μl를 넣고 혼합하여 37℃ 에서 30분 동안 반응시킨 후, 516 nm에서 microplate reader (Asys Hitech, Expert 96, Asys Co, Austria)를 사용하여 흡광도를 측정하였다. DSA는 시료 첨가구와 비첨가구의 흡광도 백분율로 표시하였다.
ASA 측정의 경우, 7 mM ABTS (Sigma Co.) 5 ml와 140 mM potassium persulfate 88 ml를 섞은 후 상온에서 16시간 빛을 차단하여 ABTS 양이온을 형성시켰으며, 이후 이 용액을 414 nm에서 흡광도 값이 1.5가 되도록 ethanol로 희석하였다. 조제된 희석용액 190 μl와 시료 10 μl를 혼합한 후 상온에서 6분간 반응시킨 후 734 nm에서 흡광도를 측정하고 다음의 식에 의해 ASA (%)를 결정하였다.
ASA (%) = [(C-S)/C] × 100,
C: DMSO 첨가시 흡광도, S: 시료 첨가시 흡광도.
환원력 평가의 경우 Oyaizu등의 방법을 변형하여 측정하였다. Ethanol에 용해한 시료 2.5 ml에 0.2 M sodium phosphate buffer (pH 6.6) 2.5ml와 10% potassium ferricyanide 2.5 ml를 첨가하고 50℃에서 20 분간 반응시킨 후, 10% trichloroacetic acid 2.5 ml를 첨가하여 반응을 종료하고 4000 rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였다. 회수한 상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5:1 (v/v) 비율로 혼합하고 700 nm에서 흡광도를 측정하여 평가하였다. 각각의 활성 평가는 각각 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 표시하였다.
Nitrite 소거능 측정의 경우, 아질산염 용액(1 mM)에 시료용액을 가하고 여기에 0.1 N HCl을 가해 pH 1.2로 조정한 후, 37℃에서 1시간 반응시킨 후 Griess reagent (Sigma Co.)를 가하고 혼합하였다. 이후 15분간 실온에서 방치 후 520 nm에서 흡광도를 측정하여 잔존 nitrite 양을 측정하였다. NSA (%)는 다음의 식에 의해 계산하였다.
NSA (%) = [1-(A-C)/B] ×100,
A: 1 mM nitrite 용액에 시료를 첨가하여 1시간 반응시킨 후의 흡광도,
B: 1 mM nitrite 용액의 흡광도, C: 시료의 흡광도.
1-5. 항당뇨 활성
제공시료 및 시판 숙취 제거제의 항당뇨 활성은 전분 분해 효소 저해 활성을 측정하여 평가하였으며, 저해활성은 다음의 방법으로 측정하였다.
α-amylase 저해 활성: α-amylase 저해활성은 전분이 요오드 염색용액(I2+KI)에 청색으로 발색하는 원리를 이용하여 미분해 전분의 양을 정량하여 평가하였다. 먼저 다양한 농도의 시료 2.5 μl와 50 mM phosphate buffer (pH 6.8)로 희석한 α-amylase (0.25 U/ml) 25 μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation 한 후, 0.5% soluble starch (Samchun Chemicals Co., Korea) 25 μl 를 가하여 37℃에서 10분간 반응하였다. 이후 1N acetic acid 10 μl를 가하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 25 μl의 요오드 염색용액 (I2+KI)을 용액을 가하여 상온에서 발색하였다. 발색액은 96 well microplate reader (Sunrise-BAS/C, Tecan Co., USA)를 이용하여 660 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 각각의 실험은 3회 반복한 후 평균값을 구하여 다음의 식으로 저해율을 계산하였다. 각각의 효소활성은 unit로 환산하여 나타내었으며, α-amylase 활성을 50% 저해하는 농도를 IC50으로 계산하였다.
저해율(%)=[1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] ×100.
β-amylase 저해활성: β-amylase 저해활성은 Lim 등의 방법을 수정하여 사용하였다. 먼저 다양한 농도의 시료 2.5 μl와 50 mM phosphate buffer (pH 6.8)로 희석한 β-amylase (0.25 U/ml) 25 μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation 한 후, 0.5% soluble starch (Samchun Chemicals Co., Korea) 25 μl 를 가하여 37℃에서 10분간 반응하였다. 이후 100℃에서 5분간 가열하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 150 μl의 DNS (3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., St. Louis, USA) 용액을 가하여 100℃에서 5분간 가열하여 발색한 후 상온에서 방냉하였다. 발색액은 96 well microplate reader (Sunrise-BAS/C , Tecan Co., USA)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 각각의 실험은 3반복한 후 평균값을 구하여 다음의 식으로 저해율을 계산하였다. 각각의 효소활성은 unit로 환산하여 나타내었으며, β-amylase 활성을 50% 저해하는 농도를 IC50으로 계산하였다.
저해율(%) = [1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] ×100.
α-glucosidase 저해활성: α-glucosidase 저해 활성 측정을 위해 다양한 농도의 시료 2.5 μl와 50 mM Sodium acetate buffer (pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase (0.68 U/ml) 25 μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 preincubation 한 후, 1 mM pNPG (p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA) 용액 25 μl를 가하여 60℃에서 10분간 반응하였다. 이후 1M NaOH 25 μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405 nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.
저해율(%) = [1-(시료 첨가구 효소활성/대조구 첨가구 효소활성)] ×100
1-6. 항균 활성
제공시료 및 시판 숙취 제거제의 in-vitro 항균 활성은 기존의 보고된 방법과 동일하게 평가하였다. 항균 활성평가를 위한 그람 양성세균으로는 Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Listeria monocytogenes KACC 10550, Bacillus subtilis KCTC 1924를, 그람 음성세균으로 Escherichia coli KCTC 1682, Pseudomonas aeruginosa KACC 10186, Proteus vulgaris KCTC 2433, 진균으로는 Candida albicans KCTC 1940및 Saccharomyces cerevisiae IF0 0233를 사용하였다. 항세균 활성 평가의 경우, Nutrient broth (Difco Co., USA)에 각각의 세균을 접종하여 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 각 균주를 O.D.6000.1로 조정하여 Nutrient agar (Difco Co., USA) 배지를 포함하는 멸균 petri dish (90×15 mm, Green Cross Co., Ltd. Korea)에 100 μl 도말하고, 각각의 시료 5μl를 멸균 disc-paper (지름 6.5 mm, Whatsman No.2)에 가하여, 37℃에서 24시간 동안 배양하였으며, 진균 경우에는 Sabouraud dextrose (Difco Co. USA)를 이용하여 동일한 방법으로 30℃에서 24시간 동안 배양 후, 생육저지환의 크기를 측정하여 항균활성을 평가하였다. 대조구로는 항세균제인 ampicillin과 항진균제인 miconazole (Sigma Co., USA)을 각각 1 μg/disc 농도로 사용하였으며, 생육 저지환의 크기는 육안으로 생육이 나타나지 않는 부분의 지름을 mm 단위로 측정하였고, 3회 이상 평가 후 대표 결과로 나타내었다.
1-7. 기타 분석
1) 이화학적 분석
pH 및 brix 측정
pH는 시료 2g 을 50 ml 멸균 tube에 넣고, 18ml의 증류수를 첨가한 후 30분간 실온에서 가용화하였으며, 이후 상등액을 회수하여 pH와 brix를 측정하였으며, pH 측정은 320 pH meter (Mettler Toledo InLabR 413, UK)로 측정하였으며, brix 측정은 refractometer (Atago N-1E, Japan)을 이용하였다.
산도 측정
산도는 시료 2g 을 50 ml 멸균 tube에 넣고, 18ml의 증류수를 첨가한 후 30분간 실온에서 가용화하였으며, 이후 상등액을 회수하여 산도를 측정하였으며, 식품공전에서 정한 방법대로 phenolphthalein 지시약을 가하고 0.1 N NaOH로 적정하였으며, 결과는 acetic acid Eq. 로 나타내었다.
색도 측정
색도는 Hunter Color Difference meter (Super color SP-80 Colormeter, Tokyo Denshoku Co., Japan)를 이용하여 측정하였으며, 명도(lightness, L), 적색도(redness, a), 황색도(yellowness, b)를 측정하였다. 이때 표준백판의 색도는 L값이 92.44, a값이 -0.06, b값이 1.35로 기준을 정하였으며, 시료당 3회 측정하여 평균값을 구하여 나타내었고 색차(△E)는 다음의 식을 이용하여 계산하였다.
L: degree of lightness (white ＋100 ∼ 0 black),
a: degree of redness (red ＋100 ∼ －80 green),
b: degree of yellowness (yellow ＋70 ∼ －80 black)
△E: overall color difference
2) 유용성분 함량 분석
총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다.
총 플라보노이드 함량 측정은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4mL를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다.
2. 결과 및 고찰
2-1. 복합 천연분말 및 열수추출분말의 이화학적 특징
제공된 원료 분말과 이를 혼합하여 만든 복합 천연분말 및 시판 숙취제 4종의 pH와 brix(수용성 고형분 함량) 및 산도를 측정하였다.
시판 숙취제 4종의 표기사항에 따른 성분 및 복합 천연분말의 성분은 표 6과 같다.
| 구분 | 성분 |
| B** | 국산 헛개나무 열매 추출 농축액(1.30%) 감초뿌리, 귤나무열매껍질, 타우린, 구연산 나트륨, 정제수 합성항료 혼합물, 기타과당, 니코틴산, 설탕, 디아라린 미강추출물, 사과산, 배아, 무수구연산, 대두 펩타이드 황기, 컨디션농축액, 자라추출물, 창출뿌리 줄기 효모추출물혼합물, 쌀, 복합허브추출물 |
| C** | 헛개나무 열매 추출농축액(1.40%) 댕댕이나무 열매 농축액(1.15%), 구연산, 합성향료허브향, 타우린, 대두 펩타이드 정제수, 인진쑥, 구연산 나트륨, 구연산나트륨 기타과당, 갈근, 효소처리스테비아, 말티톨 시럽 감초, 알로에베라 겔 분말, 사과과즙, 대입둥글레 펙틴, 사양벌꿀, 배초향, 비타민b1질산염 이베아 복합 발효 추출액, 엉겅퀴, 비타민b2 엠피3농축액, 베타사이클로덱스트린 |
| D*** | 헛개나무열매추출농축액 (1.50%) 오이발효식초(3%) 배농축액, 혼합향료, 사과농축액(칠레산) 홍삼농축액, 비타민b1질산염, 울금농축분말 비타민b2, 정제수, 아미노라비릭스, 디엘-사과산 기타과당, 글루타민, 니코틴산아미드 타우린, 메티오닌, 복합 황금 추출물 무수 구연산, 알라닌, 합성향료 |
| A**** | 혼합농축액(중국산정제수, 개암, 오리나무, 마가목 열매, 꿀, 대추, 생강, 박, 감초, 갈화, 프락토올리고당) 정제수, 프락토올리고당 |
| 본 발명 | 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개 열매 |
표 7은 원료 분말과 이를 혼합하여 만든 복합 천연분말 및 시판 숙취제 4종의 pH, brix 및 산도를 보여준다.
| 구분 | pH | Brix | Acidity | 당/산 |
| 헛개열매 | 5.6 | 4.2 | 0.77 | 5.4 |
| 노루궁뎅이버섯 | 6.4 | 4.0 | 0.87 | 4.6 |
| 굼벵이 | 6.4 | 3.0 | 0.74 | 4.0 |
| 복합 천연분말 | 6.4 | 4.0 | 1.02 | 3.9 |
| B** | 3.8 | 14.8 | 0.91 | 16.2 |
| C** | 4.2 | 17 | 0.41 | 41.5 |
| D*** | 3.4 | 15.8 | 0.48 | 33.1 |
| A**** | 4.6 | 16 | 0.41 | 39.1 |
그 결과 복합 천연분말은 pH 6.4, brix 4.0, 산도 1.02를 나타내어 당/산 비는 약 3.9를 나타내었다. 한편 시판 4종 숙취 제거제의 경우, pH 3.4~4.6의 범위를 나타내었으며, brix는 14.8~17.0을 나타내었다. 또한 산도 역시 0.41~0.91로 다양하게 나타났다. C** 및 A***의 경우 0.41의 산도로 당/산비는 39~41로 나타나 유사하였으며, D*** 제품의 경우 33.1로 다른 제품보다 낮은 당/산비를 나타내었다. 가장 높은 산도는 B**에서 확인된 바, 당도 14.8%, 산도 0.91%로 당/산비는 16.2로 가장 낮았으며, 관능적으로는 가장 우수하리라 판단되었다.
원료 분말과 이를 혼합하여 만든 복합 천연분말의 색도를 측정하였다. 표 8은 원료 분말과 이를 혼합하여 만든 복합 천연분말의 색도를 보여준다. 도 1의 (a)는 원료분말(왼쪽부터 순서대로 헛개열매, 노루궁뎅이버섯, 굼벵이, 복합 천연분말)의 색감을 비교한 것이다.
| 구분 | L | a | b | DE |
| 헛개열매 | 37.73±0.13 | 6.74±0.05 | 13.91±0.05 | 56.26±0.13 |
| 노루궁뎅이버섯 | 68.77±0.58 | 1.93±0.36 | 19.36±0.29 | 29.53±0.66 |
| 굼벵이 | 28.99±0.08 | 4.22±0.09 | 10.60±0.01 | 63.98±0.09 |
| 복합 천연분말 | 60.39±0.02 | 3.93±0.06 | 20.74±0.02 | 37.38±0.01 |
결과 노루궁뎅이버섯 분말에서 가장 높은 명도를, 헛개열매 분말에서 가장 높은 적색도를 나타내었으며, 황색도는 제조된 복합 천연분말에서 가장 높게 나타났다. 최종적으로 제조된 복합 천연분말의 색도는 37.38로 나타나 노루궁뎅이 버섯의 색도 영향을 가장 많이 받는 것으로 나타났다.
원료 분말, 이를 혼합하여 만든 복합 천연분말에 10배 증류수를 가해 상온 용출한 상등액(이하, 복합 천연분말 상등액) 및 시판 숙취제 4종의 색도를 측정하였다.(표 9) 도 1의 (b)는 원료 분말의 상등액(왼쪽부터 순서대로 헛개열매, 노루궁뎅이버섯, 굼벵이, 복합 천연분말 상등액)의 색감을 비교한 것이며, 도 1의 (c)는 시판 제품 4종(왼쪽부터 순서대로 B**, C**, D***, A***)의 색감을 비교한 것이다.
| 구분 | L | a | b | DE |
| 헛개열매 | 17.20±0.00 | -0.74±0.00 | 6.89±0.02 | 75.46±0.00 |
| 노루궁뎅이버섯 | 19.25±0.02 | -1.36±0.00 | 6.40±0.04 | 73.40±0.02 |
| 굼벵이 | 19.47±0.11 | -0.05±0.13 | 11.98±0.00 | 73.76±0.10 |
| 복합 천연분말 | 20.89±0.08 | -0.93±0.07 | 4.29±0.01 | 71.61±0.08 |
| B** | 16.11±0.02 | -0.32±0.16 | 4.19±0.05 | 75.74±0.02 |
| C** | 12.23±0.10 | 2.47±0.21 | 5.10±0.06 | 79.68±0.10 |
| D*** | 15.49±0.18 | -1.30±0.19 | 5.37±0.19 | 76.41±0.18 |
| A**** | 11.74±0.00 | 0.64±0.11 | 5.24±0.00 | 80.14±0.00 |
결과, 제조된 복합 천연분말에서 가장 높은 명도를, 굼벵이 분말에서 가장 높은 적색도를 나타내었으며, 황색도 역시 굼벵이 분말에서 가장 높게 나타났다. 최종적으로 원료 분말과 이를 혼합하여 만든 복합 천연분말에 10배 증류수를 가해 상온 용출한 상등액(실제 음용액과 유사상태)의 색도는 71.61 ~ 75.46으로 나타났으며, 거부감이 없는 색도로 확인되었다.
제조된 복합 천연분말의 10배 가수 추출액과 시판 4종의 숙취 제거제의 색도를 측정하였으며, 그 결과 제조된 복합 천연분말의 명도는 20.89, 적색도는 -0.93, 황색도는 4.29로 나타나, 최종적인 색도는 71.68로 나타났다. 반면 시판 제품의 경우 75.74~80.14의 색도를 나타내었다.
2-2. 열수추출분말의 유용성분 평가
복합 천연분말의 10배 가수 후 열수 추출액을 조제하고, 열수 추출액과 시판 숙취제 4종의 유용성분 분석으로 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총당 및 환원당 함량을 평가하였다(표 10).
| 구분 | Total polyphenol | Total flavonoid | Total sugar | Reducing sugar |
| 본 발명 | 20.8±0.1 | 4.8±0.8 | 250.3±4.2 | 113.0±3.1 |
| B** | 13.9±0.3 | 2.6±0.4 | 614.5±37.5 | 629.4±20.2 |
| C** | 1.8±2.3 | 2.8±0.7 | 768.2±4.9 | 502.2±29.2 |
| D*** | 4.8±1.5 | 2.2±0.3 | 1048.4±18.0 | 936.4±45.0 |
| A**** | 3.1±0.5 | 4.2±0.4 | 986.1±4.9 | 584.9±33.7 |
조제된 열수추출분말은 20.8 mg/g의 높은 폴리페놀 함량과 4.8 mg/g의 높은 플라보노이드 함량 및 113 mg/g의 낮은 환원당 함량을 나타내었다. 반면 시판 숙취 제거제들은 B**의 경우 13.9 mg/g의 총 폴리페놀 함량 및 629 mg/g 의 높은 환원당 함량을 나타내었다. 따라서 제조된 열수추출분말은 다양한 생리활성과 낮은 당 함량으로 건강지향성 음료로 개발 가능함을 확인하였다. 그러나, 시판 제품에 비해 맛과 향은 부족하여 레시피 보정으로 관능성 향상이 필요하다고 판단되었다.
2-3. 열수추출분말의 숙취 제거 활성
1) 진핵 효모세포를 위한 알코올 독성 감소 활성 평가
먼저 S. cerevisiae를 이용한 YPD 배지에서 50% 생육저해가 나타나는 에탄올 농도를 결정하였다. 예비 실험 결과 4% 에탄올을 포함하는 YPD 배지가 숙취 제거제 활성 평가에 적합함을 확인하였다.
이후 4% 에탄올을 포함하는 YPD배지에 S. cerevisiae 효모를 흡광도 0.02가 되도록 접종한 후, 숙취 제거 평가용 시료를 최종 0.4% 되도록 첨가하고, 4, 8, 12, 및 24시간 경과후의 효모 생육도를 각각 측정하였다(표 11).
| OD 600 nm | ||||||
| 0h | 4h | 8h | 12h | 24h | ||
| 본발명 | 0% | 0.02 | 0.02 | 0.085 | 0.27 | 0.95 |
| 0%+숙취해소 | 0.13 | 0.13 | 0.19 | 0.36 | 1 | |
| 4% | 0.015 | 0.015 | 0.015 | 0.02 | 0.32 | |
| 4%+숙취해소 | 0.13 | 0.13 | 0.13 | 0.135 | 0.62 | |
| B** | 0% | 0.02 | 0.02 | 0.085 | 0.27 | 0.95 |
| 0%+숙취해소 | 0.045 | 0.06 | 0.125 | 0.37 | 1.15 | |
| 4% | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.03 | 0.26 | |
| 4%+숙취해소 | 0.05 | 0.058 | 0.058 | 0.07 | 0.52 | |
| A*** | 0% | 0.02 | 0.02 | 0.085 | 0.27 | 0.95 |
| 0%+숙취해소 | 0.06 | 0.07 | 0.1 | 0.28 | 1 | |
| 4% | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.02 | 0.28 | |
| 4%+숙취해소 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.07 | 0.39 | |
| C** | 0% | 0.02 | - | - | 0.54 | 0.95 |
| 0%+숙취해소 | 0.14 | - | - | 1 | 1 | |
| 4% | 0.02 | - | - | 0.38 | 0.38 | |
| 4%+숙취해소 | 0.12 | - | - | 0.54 | 0.54 | |
| D*** | 0% | 0.02 | - | - | 0.54 | 0.95 |
| 0%+숙취해소 | 0.1 | - | - | 2 | 2 | |
| 4% | 0.02 | - | - | 0.35 | 0.38 | |
| 4%+숙취해소 | 0.08 | - | - | 0.25 | 0.274 | |
알코올 처리에 대한 독성 회복이 가장 우수한 것은 본 연구의 개발제품이었으며, 그 다음으로는 B**, C**, A*** 으로 나타났으며, D***의 경우 알코올 독성 회복 효과가 미미하였다. 따라서, 본 연구의 복합 천연분말 추출액은 알코올 독성에 대해 우수한 보호효과를 나타내는 것으로 확인되었으며, 이는 시판 숙취제거제와 유사하거나 우수한 효과임을 확인하였다.
2) 알코올 대사관련 효소의 활성 평가
복합 천연분말 숙취제가 ADH 유사활성을 나타내는지, ADH 효소활성에 어떠한 영향을 나타내는지 평가하였다. 먼저 NADH의 표준곡선을 실험하였으며, 그 결과 X=(Y+2.3809e-5)/2.42857e-3의 상관관계식을 확인하였다.
도 2의 (A)는 ADH 활성에 관한 NADH의 표준곡선과 본 발명에 따른 복합 천연 숙취제 및 시판제품(A***, B**)의 ADH 유사활성을 비교한 것이다.
실험에 사용한 시판 숙취제와 본 연구의 복합 천연분말 숙취제의 경우, 모두 ADH-like activity (ADH 유사활성)은 인정되지 않았으나, 본 연구의 복합 천연분말 숙취제(10% 첨가)의 경우 15분 이후, ADH 활성을 1.2배 증가시킴을 확인하였다. 반면 B***의 경우 미미한 증가가 나타났으며, A**의 경우 거의 영향을 미치지 않았다.
복합 천연분말 숙취제가 ALDH 유사활성을 나타내는지, ALDH 효소활성에 어떠한 영향을 나타내는지 평가하였다. 먼저 NADH의 표준곡선을 실험하였으며, 그 결과 X=(Y+0.01621)/2.0996e-3의 상관관계식을 확인하였다.
도 2의 (B)는 ALDH 활성에 관한 NADH의 표준곡선과 본 발명에 따른 복합 천연 숙취제 및 시판제품(A***, B**)의 ALDH 유사활성을 비교한 것이다.
실험에 사용한 시판 숙취제와 본 연구의 복합 천연분말 숙취제의 경우, 모두 ALDH-like activity (ALDH 유사활성)은 인정되지 않았으나 본 연구의 복합 천연분말 숙취제(10% 첨가)의 경우 15분 이후, ALDH 활성을 1.1배 증가시킴을 확인하였다. 반면 B*** 및 A**의 경우 ALDH 활성을 증가시키지는 못하였으며, 오히려 부분적인 저해가 나타났다. 이은 다양한 첨가물에 의한 ALDH 활성에 영향을 준것으로 판단하였다.
2-4. 열수추출분말의 항산화 활성
제조된 복합 천연분말의 10배 가수 열수 추출액과 4종 시판 숙취 제거제의 항산화 활성(표 12) 및 IC50 (표13)을 평가하였다.
| 구분 | 항산화 활성(%) | |||
| DPPH 음이온 소거능 |
ABTS 양이온 소거능 |
Nitrite 소거능 |
Reducing power Abs. 700 nm |
|
| B** | 17.6±1.9 | 41.7±1.8 | 34.13±1.35 | 0.315±0.004 |
| C** | 6.3±1.4 | 26.5±2.9 | 37.47±4.73 | 0.138±0.005 |
| D*** | 11.4±0.5 | 35.9±1.4 | 21.86±5.99 | 0.672±0.047 |
| A**** | 9.1±1.6 | 52.5±5.5 | 25.58±0.89 | 0.150±0.006 |
| 본 발명 | 21.8±0.0 |
86.5±0.2 | 37.71±5.74 |
0.984±0.086 |
| 구분 | IC50 (ug/ml) | ||
| DPPH 음이온 소거능 |
ABTS 양이온 소거능 |
Nitrite 소거능 |
|
| B** | 987.1 | 132.2 | 332.3 |
| C** | 799.1 | 218.7 | 173.1 |
| D*** | 315.9 | 140.1 | 262.5 |
| A**** | 552.5 | 148.2 | 163.3 |
| 본 발명 | 196.4 | 93.7 | 157.4 |
그 결과, 본 발명에 따른 복합 천연원료의 열수 추출액의 DPPH 음이온 소거능, ABTS 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력이 시판 4종 숙취 제거제에 비하여 월등히 우수함을 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구의 복합 천연분말 추출액은 지나친 음주 등으로 나타날 수 있는 산화 스트레스를 효율적으로 감소시킬 수 있을 것으로 예상되었다.
2-5. 열수추출분말의 항당뇨 활성
제조된 복합 천연분말의 10배 가수 열수 추출액과 시판 숙취제 4종의 항당뇨 활성을 평가하였다(표 14).
| 구분 | Anti diabates activity (%) | |
| b-amylase nhibition(%) |
a-glucosidase inhibition(%) | |
| B** | -7.3±5.7 | 1.6±0.5 |
| C** | -9.2±5.6 | -3.0±3.9 |
| D*** | -0.4±0.9 | 3.6±3.3 |
| A**** | -0.9±0.4 | 9.7±0.9 |
| 본 발명 | 5.5±0.2 | 12.6±0.1 |
| acarbose | 62.7±0.9 | 73.9±0.2 |
그 결과, 모든 시판 숙취제에서 beta-amylase 저해활성은 인정되지 않았으며, 제조된 열수추출분말에서 5.5%의 beta-amylase 저해활성이 확인되었다. alpha-glucosidase 저해활성은 제조된 열수추출분말에서 12.6%로 임상에서 사용되는 acarbose에 비해서는 상대적으로 미약한 활성이나, 시판제품과 비해 우수함을 확인할 수 있었다.
2-6. 열수추출분말의 항균 활성
제조된 복합 천연분말의 10배 가수 열수 추출액과 4종 시판 숙취 제거제의 항균 활성을 평가한 결과(표 15), 실험에 사용된 시판제품은 그람양성 세균, 그람음성 세균 및 진균 10종에 대해 500 ㎍/disc 농도에서 모두 항균 활성을 확인할 수 없었으나, 본 발명에 따른 열수 추출액의 경우 대조구인 ampicillin 및 miconazole에 비해 항균 활성이 낮으나, 그람양성 세균, 그람음성 세균 및 진균에 대해 항균 활성이 있음을 확인할 수 있었다.
| 구분 | Gram positive | Gram negative | Yeast | |||||||
| L.m | S.e | S.a | B.s | E.c | P.a | P.v | S.t | C.a | S.c | |
| B** | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| C** | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| D*** | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| A**** | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
| 본 발명 | 12 | 14 | 7 | 6 | 3 | 8 | 14 | 5 | 5 | 2 |
| Amp (1ug/disc) | 24 | 24 | 25 | 25 | 16 | 18 | 28 | 9 | - | - |
| Mic (1ug/disc) | - | - | - | - | - | - | - | - | 12 | 7 |
3. 천연복합원료 조성물을 이용한 가공물
(실시예 1)
상술된 열수추출분말 100g 당 찹쌀전분 5g, 유기칼슘 1g, 구연산 1g, 꿀 10g을 첨가 및 150rpm에서 20분간 교반한 후 38 ℃ 에서 96시간 숙성시켜 천연복합원료 조성물을 제조하였다.
(실시예 2)
주원료(굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매 및 쌀가루)는 상술된 바와 동일한 것을 사용하였으며, 각 시료 무게에 대해 10배의 증류수를 가한 후 100℃에서 1시간 추출하였으며, 상기 과정을 2회 반복 한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하여 열수추출분말을 준비하였다. 굼벵이 열수추출분말과 노루궁뎅이버섯 열수추출분말 1:1의 중량비로 준비하고, 15%(w/v) 수산화나트륨 용액에 투입하여 35 ℃에서 30분간 침지처리하였다. 알칼리처리된 굼벵이 분말 및 노루궁뎅이버섯 분말, 헛개 열매 열수추출분말, 쌀가루를 3:3:3:1 (w/w/w/w)가 되도록 준비하고, 상기 주원료 100g 당 찹쌀전분 5g, 유기칼슘 1g, 구연산 1g, 꿀 10g을 첨가한 후 38 ℃ 에서 96시간 숙성시켜 천연복합원료 조성물을 제조하였다.
(실시예 3)
주원료(굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매 및 쌀가루)는 상술된 바와 동일한 것을 사용하였으며, 각 시료 무게에 대해 10배의 증류수를 가한 후 100℃에서 1시간 추출하였으며, 상기 과정을 2회 반복 한 후 추출액을 모아 필터링한 후, 감압 농축하여 분말로 제조하여 열수추출분말을 준비하였다. 굼벵이 열수추출분말과 노루궁뎅이버섯 열수추출분말 1:1의 중량비로 준비하고, 15%(w/v) 수산화나트륨 용액에 투입하여 35 ℃에서 30분간 침지처리하였다. 알칼리처리된 굼벵이 분말 및 노루궁뎅이버섯 분말, 헛개 열매 열수추출분말, 쌀가루를 3:3:3:1 (w/w/w/w)가 되도록 준비하고, 키토산 올리고당 용액에 침지처리하였다.
키토산 올리고당 용액에 침지처리된 원료 100g 당 찹쌀전분 5g, 유기칼슘 1g, 구연산 1g, 꿀 10g을 첨가한 후 38 ℃ 에서 96시간 숙성시켜 천연복합원료 조성물을 제조하였다.
천연복합원료 조성물을 이용한 가공물의 숙취제거활성, 항당뇨활성, 항산화활성을 확인하였다.
실시예 1, 2 및 3의 천연복합원료 조성물 10% 첨가의 경우 15분 이후, ADH 활성이 각각 1.1배, 1.2배, 1,2배 증가됨을 확인하였고, ALDH 활성이 각각 1.1배, 1.1배, 1.2배 증가시킴을 확인하였으며, 부첨가물의 첨가에도 숙취제거활성을 유지함을 확인할 수 있었다.
표 16 내지 표 18은 각각 항당뇨활성, 항산화활성 및 생리활성을 보여준다.
| 구분 | Anti diabates activity (%) | |
| b-amylase inhibition(%) | a-glucosidase inhibition(%) | |
| 열수추출분말 | 5.5±0.2 | 12.6±0.1 |
| 실시예 1 | 5.4±0.3 | 11.5±0.3 |
| 실시예 2 | 5.8±0.1 | 13.2±0.2 |
| 실시예 3 | 6.3±0.2 | 15.7±0.1 |
| 구분 | 항산화 활성(%) | |||
| DPPH 음이온 소거능 |
ABTS 양이온 소거능 |
Nitrite 소거능 |
Reducing power Abs. 700 nm |
|
| 열수추출분말 | 21.8±0.0 | 86.5±1.8 | 37.71±5.74 | 0.984±0.086 |
| 실시예 1 | 19.3±0.1 | 39.2±0.8 | 32.12±2.13 | 0.821±0.013 |
| 실시예 2 | 24.1±0.0 | 45.1±1.1 | 29.71±3.74 | 0.912±0.016 |
| 실시예 3 | 27.2±0.0 | 49.1±0.3 | 39.11±2.42 | 0.881±0.067 |
| 구분 | Total polyphenol | Total flavonoid | Total sugar | Reducing sugar |
| 열수추출분말 | 20.8±0.1 | 4.8±0.8 | 250.3±4.2 | 113.0±3.1 |
| 실시예 1 | 19.2±0.1 | 5.1±0.2 | 578.2±3.8 | 511.2±11.2 |
| 실시예 2 | 28.1±0.7 | 6.2±0.1 | 424.1±1.7 | 629.4±4.2 |
| 실시예 3 | 28.3±0.2 | 7.1±0.3 | 477.2±0.4 | 436.4±31.0 |
그 결과, 부첨가물을 첨가하여 가공시에도 항당뇨활성, 항산화활성 및 생리활성이 열수추출분말과 비슷한 수준으로 유지되거나 더욱 우수한 것을 확인할 수 있었다. 특히, 실시예 2 및 3의 높은 기능성은 굼벵이, 노루궁뎅이버섯의 알칼리 처리, 키토산 용액 침지처리 및 숙성공정을 통해 기능성이 증가된 것에 기인한 것으로 판단하였다.
상기 실시예 1의 천연복합원료 조성물을 환제기에 투입하여 약 7mm의 입경을 갖는 환을 제조하였으며, 도 3은 제조된 환을 보여준다. 상기 환의 이화학적은 특성은 상술된 바와 동일한 방법으로 측정되었으며, 그 결과, pH는 5.6, 12 brix, 산도는 0.79로 당/산의 비는 15.2 로 시판 숙취제와 유사하거나 낮은 수준으로 확인되었다.
관능테스트를 통해 제조된 환의 색, 향, 맛, 식감 및 전체 기호도를 확인하였으며, 20 대에서 70 대까지의 남녀 각각 2 명씩 모두 14명을 대상으로 10점 척도법으로 측정하였다(10점: 매우 좋음, 1점: 매우 나쁨). 그 결과, 색, 향, 맛, 식감 및 전체 기호도에 대하여 각각 9.2점, 8.9점, 9.4점, 9.1점 및 9.0점으로 관능도가 우수한 것을 확인할 수 있었다.
이상과 같이 본 발명은 첨부된 도면을 참조하여 바람직한 실시예를 중심으로 설명하였지만 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명의 특허청구범위에 기재된 기술적 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 또는 변형하여 실시할 수 있다. 따라서 본 발명의 범주는 이러한 많은 변형의 예들을 포함하도록 기술된 청구범위에 의해서 해석되어야 한다.
Claims (8)
- 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 주원료 혼합물과 천연결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 혼합하여 천연복합원료 조성물을 제조하는 천연복합원료 조성물 제조단계(S100);와
상기 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공하는 가공단계(S200)를 포함하며,
상기 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)에서는
굼벵이와 노루궁뎅이버섯을 알칼리처리한 알칼리처리 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지하고, 키토산 용액에 침지처리된 원료와 상기 부첨가물을 혼합하는 것을 특징으로 하는
천연복합원료를 포함하는 숙취제거, 항당뇨, 항산화 및 항균활성을 갖는 건강기능성 식품조성물의 제조방법.
- 삭제
- 제 1항에 있어서,
상기 천연복합원료 조성물 제조단계(S100)는
굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 포함하는 주원료 혼합물 100중량부에 대하여, 천연 결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 1 내지 200중량부 첨가하는 것을 특징으로 하는
천연복합원료를 포함하는 숙취제거, 항당뇨, 항산화 및 항균활성을 갖는 건강기능성 식품조성물의 제조방법.
- 굼벵이, 노루궁뎅이버섯, 헛개열매, 쌀을 포함하는 주원료 혼합물과 천연결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 혼합한 천연복합원료 조성물을 환제, 액상, 과립상 중 어느 하나의 제형으로 가공한 것이며,
상기 천연복합원료 조성물은
굼벵이와 노루궁뎅이버섯을 알칼리처리한 알칼리처리 원료, 헛개열매, 쌀가루를 키토산 용액에 침지하고, 키토산 용액에 침치저리된 원료와 상기 부첨가물을 혼합한 것임을 특징으로 하는
천연복합원료를 포함하는 숙취제거, 항당뇨, 항산화 및 항균활성을 갖는 건강기능성 식품조성물.
- 삭제
- 제 4항에 있어서,
상기 천연복합원료 조성물은
굼벵이 25 내지 40중량%, 노루궁뎅이버섯 25 내지 40중량%, 헛개열매 25 내지 40중량%, 쌀 5 내지 15중량%를 포함하는 주원료 혼합물 100중량부에 대하여, 천연 결합재, 유기산, 감미료 및 이들의 조합 중 어느 하나의 부첨가물을 1 내지 200중량부 첨가한 것임을 특징으로 하는
천연복합원료를 포함하는 숙취제거, 항당뇨, 항산화 및 항균활성을 갖는 건강기능성 식품조성물.
- 삭제
- 삭제
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