KR20070088392A - 양친매성 화합물을 이용한 자성 나노복합체 및 이를포함하는 약제학적 조성물 - Google Patents

양친매성 화합물을 이용한 자성 나노복합체 및 이를포함하는 약제학적 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 자성 나노복합체 및 이를 포함하는 암의 동시진단 및 치료제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 자성 나노입자가 하나 이상의 소수성 영역과 하나 이상의 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물에 의해 둘러싸여 있고, 상기 친수성 영역에 존재하는 하나 이상의 친수활성성분 결합영역이 조직 특이적 결합 성분과 결합되어 있으며, 상기 소수성 영역에 약제학적 활성성분이 결합 또는 봉입되어 있는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체 및 이를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
나노입자, 양친매성 화합물, 조영제, 동시진단, 항암제

Description

양친매성 화합물을 이용한 자성 나노복합체 및 이를 포함하는 약제학적 조성물{Magnetic nanocomposite using amphiphilic compound and pharmaceutical composition comprising the same}
도 1은 본 발명에 따른 자성 나노복합체의 응용분야를 도시한 모식도이다.
도 2는 본 발명에 따른 암의 진단과 치료가 동시에 가능한 자성나노복합체의 개념도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 포화지방산을 이용한 자성 나노입자의 투과전자현미경 사진 및 자기적 특성을 도시한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 다른 실시예에 따른 불포화지방산을 이용한 자성 나노입자의 투과전자현미경 사진 및 자기적 특성을 도시한 그래프이다.
도 5는 본 발명에 따른 친수활성성분 결합영역으로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 합성과정이다.
도 6은 본 발명에 따른 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자를 핵자기공명을 이용하여 결합을 확인한 결과이다.
도 7은 본 발명에 따른 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자를 적외선 분광법으로 확인한 결과이다.
도 8은 본 발명의 따른 생분해성 고분자를 이용한 자성 나노복합체의 제조방법을 도시한 모식도이다.
도 9는 본 발명에 따른 친수활성성분 결합영역이 항체와 결합할 수 있는 작용기로 치환된 자성 나노복합체의 개념도를 나타낸 모식도이다.
도 10은 본 발명에 따른 자성나노입자가 카르복실폴리에틸렌글리콜-폴리락티드-코-글리콜라이드에 의해 봉입된 전자현미경 사진 및 나노복합체의 크기분포도를 도시한 그래프이다.
도 11은 본 발명에 따른 나노입자가 카르복실폴리에틸렌글리콜-폴리락티드-코-글리콜라이드에 의해 봉입된 질량비를 도시한 그래프이다.
도 12는 본 발명에 따른 나노자성입자와 자성나노복합체의 자기이력곡선이다.
도 13은 본 발명에 따른 서스펜션 방법에 의해 제조된 자성나노복합체의 전자현미경 사진 및 광산란 방법에 의한 크기분포도이다.
도 14는 본 발명에 따른 서스펜션방법에 의해 제조된 자성나노입자의 열중량분석 그래프이다.
도 15은 본 발명에 따른 친수성말단기가 숙신이미딜기로 치환된 자성 나노복합체가 분산된 용액의 자기공명영상을 농도에 따라 확인한 사진 및 농도에 따른 T2값 변화 그래프이다.
도 16은 본 발명에 따른 Fe3O4와 MnFe2O4가 폴리락타이드코글리콜라이드-폴리 에틸렌글리콜에 봉입되어 있는 나노복합체가 분산된 용액의 자기공명영상을 농도에 따라 확인한 사진 및 농도에 따른 T2값 변화 그래프이다.
도 17은 본 발명에 따른 서스펜션방법에 의해 제조된 자성나노입자가 분산된 용액의 자기공명영상을 농도에 따라 확인한 사진 및 농도에 따른 T2값 변화 그래프이다.
도 18은 본 발명에 따른 허셉틴-자성 나노복합체의 세포 특이성을 분석한 결과이다.
도 19은 본 발명에 따른 MnFe2O4가 봉입되어 있는 허셉틴-자성 나노복합체의 암세포에 대한 친화성을 유세포분석에 의해 확인한 그림이다.
도 20는 본 발명에 따른 허셉틴-자성 나노복합체의 세포와의 결합정도를 알아보기 위해 유세포분석에 의해 확인한 그림이다.
도 21은 본 발명의 다른 실시예에 따른 제조된 에멀젼형 허셉틴-자성나노복합체와 표적세포주(MDA-MB-231, NIH3T6.7 세포주)의 반응후 자기공명영상을 통해 획득한 사진이다 및 T2값의 비교 그래프이다.
도 22은 본 발명의 또 다른 실시예에 따른 본 발명에 따른 서스펜션 형 허셉틴-자성나노복합체와 표적세포주(MDA-MB-231, NIH3T6.7 세포주)의 반응후 자기공명영상을 통해 획득한 사진 및 T2값의 비교 그래프이다.
도 23은 본 발명의 일 실시예에 따른 에멀젼형 자성나노복합체의 약물방출 거동 그래프이다.
도 24은 본 발명의 다른 실시예에 따른 에멀젼형 자성나노복합체의 약물방출 거동 그래프이다.
도 25는 본 발명의 또 다른 실시예에 따른 서스펜션형 자성나노복합체의 약물방출 거동 그래프이다.
도 26은 본 발명의 일 실시예에 따른 자성나노복합체의 세포독성 실험결과이다.
도 27은 본 발명의 일 실시예에 따른 동물모델에서 제조된 자성나노복합체의 자기공명에의한 영상화 사진 및 T2변화를 수치화한 그래프이다.
본 발명은 자성 나노복합체 및 이를 포함하는 조영제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 자성 나노입자가 하나 이상의 소수성 영역과 하나 이상의 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물에 의해 둘러싸여 있고, 상기 친수성 영역에 존재하는 하나 이상의 친수활성성분 결합영역이 조직 특이적 결합 성분과 결합되어 있으며, 상기 소수성 영역에 약제학적 활성성분이 결합 또는 봉입되어 있는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체 및 이를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
나노기술은 물질을 원자, 분자 수준에서 조절 및 제어하는 기술로서 신물질, 또는 신소자 창출에 적합하여 그 응용분야가 전자, 재료, 통신, 기계, 의약, 농업, 에너지, 및 환경 등 매우 다양하다.
현재 나노기술은 다양하게 발전하고 있으며 크게 세 가지 분야로 분류되어 있다. 첫째, 나노 소재로 극미세한 크기의 새로운 물질과 재료를 합성하는 기술에 관한 것이다. 둘째, 나노 소자인데 나노 크기의 재료들을 조합하거나 배열하여 일정한 기능을 발휘하는 장치를 제조하는 기술에 관한 것이다. 셋째, 나노-바이오라 불리는 나노기술을 생명공학에 응용하는 기술에 관한 것이다.
특히, 나노-바이오 분야에서 자성 나노입자들은 생체 물질의 분리, 자기공명 영상 진단 프로브, 거대자기저항센서를 포함한 바이오 센서, 마이크로 유체계 센서, 약물/유전자 전달, 및 자성 고온치료 등의 넓은 응용범위에 걸쳐 사용되고 있다.
구체적으로 자성 나노 입자는 분자 자기공명영상의 진단 프로브 (조영제)로 사용될 수 있다. 자성 나노 입자는 나노 입자 주변의 물분자의 수소원자의 스핀-스핀 이완시간을 단축시켜 자기공명영상 신호를 증폭시키는 효과를 나타내 지금까지 공명 영상 진단에 널리 사용되고 있다.
또한 자성 나노 입자는 거대 자기-저항 바이오센서 (Giant magnetic resistance (GMR) sensor) 의 프로브 물질로 작용할 수 있다. 자성 나노 입자가 거대자기저항 바이오 센서 표면에 패턴되어 있는 생체 분자를 감지하여 결합하면, 자성 입자에 의해 거대자기저항 센서의 전류 신호가 변하게 되고 이를 이용하면 생체분자를 선택적으로 검출이 가능하다. (US 6,452,763 B1; US 6,940,277 B2; US 6,944,939 B2; US 2003/0133232 A1).
또한 자성 나노 입자는 생체 분자의 분리에도 응용될 수 있다. 예를 들면, 특정한 생체 마커를 발현하는 세포와 다른 여러 가지 세포들이 섞여 있을 때, 자성 나노 입자가 특정한 생체 마커와 선택적으로 결합하게 한 후, 외부에서 자기장을 걸어주면 자기장 방향으로 원하는 세포만 분리할 수 있다 (Whitehead et al. US patent 4,554,088,US 5,665,582, US 5,508,164, US 2005/0215687 A1 ). 또한 세포의 분리뿐만 아니라, 단백질, 항원, 펩타이드, DNA, RNA, 및 바이러스 등 다양한 생체 분자의 분리에 응용될 수 있다. 또한 자성 나노 입자는 자성 마이크로 유체 센서에 응용되어 생체 분자의 분리 및 검출할 수 있다. 칩 위에 매우 작은 채널을 만들어 그 안에 자성 나노 입자를 흘려줌으로써 마이크로 단위의 유체계에서 검출과 분리가 가능하다.
한편, 자성 나노 입자는 약물 또는 유전자의 전달을 통한 생체 치료에도 사용될 수 있다. 자성 나노 입자에 화학적인 결합 또는 흡착을 통해 약물 또는 유전자를 싣고 외부 자기장을 이용하여 원하는 위치로 이동시켜 특정부위에 약물 및 유전자를 방출을 가능하게 하여 선택적인 치료효과를 가져올 수 있게 한다 (US 6,855,749).
자성 나노 입자를 이용한 생체 치료로의 응용의 또 하나의 예로서, 자성 스핀 에너지를 이용한 고온 치료를 들 수 있다 (US 6,530,944 B2, US 5,411,730). 자성 나노 입자는 외부의 라디오주파수의 교류전류를 흘려주면 스핀 플립핑 (flipping) 과정을 통해 열을 방출하게 된다. 이때 나노 입자 주변의 온도가 40 oC 이상이 되면 세포가 높은 열에 의해 죽게 되어 질병 세포를 선택적으로 사멸시킬 수 있다.
자성 나노입자들이 전술한 용도에 이용되기 위해서는 자기적 성질이 우수하고, 생체 내, 즉 수용성 환경에서 안정적으로 운반 및 분산되어야 하며, 생체 활성 물질과 쉽게 결합할 수 있어야 한다. 이러한 조건을 만족시키기 위하여 현재까지 다양한 기술들이 개발되어져 왔다.
미국특허공보 US 6,274,121호는 산화철과 같은 금속을 포함한 상자기성 나노입자에 관한 것으로 상기 나노입자의 표면에 조직 특이적인 결합 물질, 진단 또는 약제학적으로 활성인 물질과 커플링(coupling)될 수 있는 결합 자리를 포함하는 무기 물질을 부착한 나노입자를 개시하고 있다.
미국특허공보 US 6,638,494호는 산화철과 같은 금속을 포함한 상자기성 나노입자에 관한 것으로 상기 나노입자의 표면에 특정한 카르복실산을 부착하여 중력 또는 자기장에서 나노입자가 응집 및 침전되는 것을 방지하는 방법을 개시하고 있다. 상기 특정한 카르복실산으로는 말레산, 타르타르산, 또는 글루카르산과 같은 지방족 디카르복실산, 또는 시트르산, 시클로헥산, 또는 트리카르복실산과 같은 지방족 폴리디카르복실산이 이용되었다.
미국특허공개공보 US 2004/58457호는 단층(monolayer)으로 둘러싸인 기능성 나노입자에 관한 것으로 상기 단층에는 이기능성(bifunctional) 펩타이드가 부착되며 상기 펩타이드에는 DNA 및 RNA를 포함한 다양한 생폴리머(biopolymer)가 결합될 수 있다.
영국특허공보 GB 223,127호는 단백질 주형내에 자기 나노 입자 형성 스텝을 포함한 자기 나노 입자의 제조 방법에 관한 것으로 아포페리틴에 자성 나노 입자를 캡슐화 하는 방법에 대해 기술하였다.
미국특허공보 US 2003/190,471호는 이중미셀 (bi-micellear vesicle)안에서 망간 아연 산화물을 나노 입자로 형성시키는 방법에 관한 것으로써 형성된 자성 나노 입자의 열처리 과정을 통해 향상된 성질을 나타내는 나노 입자를 기술하였다.
미국특허공보 US 2005/130,167는 16-머캅토헥사데카노산(16-mercaptohexadecanoic acid)으로 둘러싸인 수용성 자성 나노 입자의 합성과 합성된 자성 나노 입자에 상 전이제(transfection agent)인 TAT 펩티드(peptide)를 이용하여 세포내 자기적 라벨링(intracellular magnetic labeling)으로 실험 쥐 내의 바이러스 및 mRNA 검출에 관하여 기술하였다.
대한민국특허출원 제 10-1998-0705262호는 녹말 코팅과 임의의 폴리알킬렌 옥사이드 코팅을 구비한 초상자성 철 산화물 코어 입자를 포함하는 입자와 이를 포함하는 MRI 조영제를 개시하고 있다.
그러나 상기 방법들로 제조된 수용성 나노입자는 다음과 같은 단점을 갖고 있다. 미국특허공보 US 6,274,121호, US 6,638,494호, US 2004/58457호, 미국특허공보 US 2003/190,471호, 미국특허공보 US 2005/130,167, 영국특허공보 GB 223,127, 대한민국특허출원 제 10-1998-0705262호에서 개시된 나노 입자는 주로 수용액에서 합성하는데 이러한 경우 나노입자의 크기 조절이 어렵고 합성된 나노입자는 불균일한 크기 분포도를 나타낸다. 또한, 저온에서 합성되기 때문에 나노입자 의 결정성이 낮으며, 비화학양론적 화합물(non-stoichiometric compound)이 형성되는 경향이 있다. 따라서 상기 방법들로 제조된 나노입자는 수용액에서 콜로이드 안정성이 떨어져 생체 응용 시 뭉침, 및 큰 비선택성 결합 등을 나타내는 문제점을 갖고 있다.
본 발명은 상기와 같은 문제를 해결하기 위한 것으로서, 본 발명의 목적은 수용액에서 안정성이 높고 생체 독성이 적어서 생체의 진단 및 치료에 광범위하게 응용할 수 있는 자성 나노복합체를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 본 발명에 따른 상기 자성 나노복합체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 본 발명에 따른 상기 자성 나노복합체를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 자성 나노입자가 하나 이상의 소수성 영역과 하나 이상의 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물에 의해 둘러싸여 있고, 상기 친수성 영역에 존재하는 하나 이상의 친수활성성분 결합영역이 조직 특이적 결합 성분과 결합되어 있어 있으며, 상기 소수성 영역에 약제학적 활성성분이 결합 또는 봉입되어 있는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체에 관한 것이다.
본 발명에 따른 상기 자성 나노복합체의 특징은 나노입자의 표면에 양친매성 화합물을 부가하여 양친매성 화합물의 소수성 영역이 나노입자의 표면과 결합하고, 양친매성 화합물의 친수성 영역이 나노복합체의 최외곽에 분포하고 있는 것이다. 여기서 양친매성 화합물의 소수성 영역은 수소결합, 반데르발스력, 및 극성 인력 등의 물리적 결합에 의하여 나노입자의 표면과 결합한다. 따라서 상기 소수성 영역은 소수성 영역의 메트릭스 내에 나노입자를 분포시키거나, 나노입자의 표면과 결합하는 역할을 할 뿐만 아니라, 필요에 따라서 소수성영역의 메트릭스 내에 약물을 물리적으로 봉입하거나, 소수성 영역의 일 말단에 약물을 화학적으로 결합시킬 수 있다. 한편 양친매성 화합물의 친수성 영역은 나노복합체의 최외곽에 분포하여 수불용성의 나노입자를 수용성 매질 중에서도 안정화시켜 생체 이용율을 극대화시킬 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 상기 자성 나노복합체의 다른 특징은 자성 나노입자인 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금이 유기성 표면 안정제와 결합될 수 있다는 것이다. 여기서 상기 유기성 표면 안정제와 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금의 결합은 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금의 전구물질에 유기성 표면 안정제가 배위하여 착화합물 형성하여 이루어진다. 상기 유기성 표면 안정제는 양친매성 화합물의 소수성 영역을 안정화시키는 역할을 할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 상기 자성 나노복합체의 또 다른 특징은 상기 소수성영역 내에 약제학적 활성성분이 봉입되어 있거나, 그 구조 내의 일부분에 존재하는 하나 이상의 소수활성성분 결합영역(R1)이 약제학적 활성 성분과 결합되어 있을 뿐 만 아니라, 상기 친수성영역은 그 구조 내의 일부분에 친수활성성분 결합영역(R2)을 가지고, 상기 친수활성성분 결합영역은 조기 특이적 결합 성분과 결합되어 있어 질병의 동시 진단 및 치료용 조영제로 사용될 수 있다는 것이고, 이에 관한 모식도를 도 2에 도시하였다.
상기와 같은 본 발명에 따른 상기 자성 나노복합체는 도 8에 도시된 바와 같이 그 제조방법에 따라 하나 이상의 자성 나노입자가 소수성 영역에 분포된 코어 및 친수성 영역을 함유하는 셀을 포함하는 자성 나노복합체(이하, 에멀젼형 자성 나노복합체)와 하나의 자성 나노입자가 소수성 영역과 결합된 코어 및 친수성 영역을 함유하는 셀을 포함하는 자성 나노복합체(이하, 서스펜션형 자성 나노복합체)를 포함한다.
상기 에멀젼형 및 서스펜션형 자성 나노복합체의 자성 나노입자는 모두 유기성 표면 안정제가 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금과 배위 결합되어 있는 것이 바람직하고, 자성 나노입자와 양친매성 화합물의 소수성 영역이 물리적으로 결합되어 있는 것이 바람직하다.
또한 상기 에멀젼형 나노복합체의 바람직한 직경은 1nm 내지 500nm이고, 보다 바람직한 직경은 25nm 내지 100nm이며, 서스펜션형 자성 나노복합체의 바람직한 직경은 1nm 내지 50nm이고, 보다 바람직한 직경은 5nm 내지 30nm이다.
본 발명에 따른 자성 나노복합체의 “자성 나노입자(nanoparticles)”는 자 성을 가지고, 직경이 1nm 내지 1000nm, 바람직하게는 2nm 내지 100nm인 입자라면 제한 없이 사용될 수 있으나, 금속 물질(metal material), 자성 물질(magnetic material), 또는 자성 합금(magnetic alloy)인 것이 바람직하다.
상기 금속은 특별히 제한되지는 않으나, Pt, Pd, Ag, Cu 및 Au로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것이 바람직하다.
상기 자성 물질 역시 특별히 제한되지는 않으나, Co, Mn, Fe, Ni, Gd, Mo, MM'2O4, 및 MxOy (M 및 M'는 각각 독립적으로 Co, Fe, Ni, Mn, Zn, Gd, 또는 Cr을 나타내고, 0 < x ≤3, 0 < y ≤5)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것이 바람직하다.
또한 상기 자성 합금 역시 특별히 제한되지는 않으나 CoCu, CoPt, FePt, CoSm, NiFe 및 NiFeCo로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것이 바람직하다.
또한 상기 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금은 유기성 표면 안정제와 결합되어 있는 것이 바람직하다. 유기성 표면 안정제(surface stabilizer)는 본 발명의 나노입자의 상태와 크기를 안정화시킬 수 있는 유기 기능성 분자를 의미하며 대표적인 예로는 계면활성제가 포함된다.
상기 계면활성제는 알킬 트라이메틸암모늄 할라이드(alkyl trimethylammonium halide)을 포함하는 양이온 계면활성제; 올레산 (oleic acid), 라우르산(lauric acid), 또는 도데실산(dodecylic acid)과 같은 포화 또는 불포화 지방산, 트리옥틸포스핀 옥사이드(trioctylphosphine oxide: TOPO), 트리옥틸포스 핀(trioctylphosphine: TOP), 또는 트리부틸포스핀(tributylphosphine)과 같은 트리알킬포스핀 또는 트리알킬포스핀옥사이드, 도데실아민, 올레익아민(oleic amine), 트리옥틸아민(trioctylamine), 또는 옥틸아민(octylamine)과 같은 알킬아민(alkyl amine), 또는 알킬티올(alkyl thiol)을 포함하는 중성 계면활성제; 및 소디움 알킬 설페이트 (sodium alkyl sulfate), 또는 소디움 알킬 포스페이트 (sodium alkyl phosphate)을 포함하는 음이온 계면활성제를 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
특히, 나노입자의 안정화 및 균일한 크기 분포를 고려할 때, 포화 또는 불포화 지방산 및/또는 알킬아민을 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 양친매성 화합물은 하나 이상의 소수성 영역(P1)과 하나 이상의 친수성 영역(P2)을 가지는 화합물이라면 특별히 제한되지 않는다. 상기 양친매성 화합물에 있어서, 소수성영역(P1) 및 친수성영역(P2)은 다수 개 연결되어 부착될 수 있다. 즉, 본 발명에 따른 양친매성 화합물은 P1-P2, P1-P2-P1, P2-P1-P2, P1-(P2-P1)n-P2, P1-(P2-P1)n-P1, P2-(P1-P2)n-P1, 또는 P2-(P1-P2)n-P2 등 다양한 형태를 가질 수 있으며, 구조 내에 소수성 영역 또는 친수성 영역이 반복하여 존재할 수 있음은 물론이다.
본 발명에 따른 양친매성 화합물의 소수성 영역은 화합물 또는 고분자로 구성될 수 있으며, 예를 들어 생체 친화적인 포화 또는 불포화 지방산, 또는 소수성 고분자 등을 사용할 수 있다.
상기 포화 지방산은 특별히 제한되지 않으나, 부티르산, 카프로산, 카프릴 산, 카프릭산, 라우르산(도데실산), 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 에이코사노산, 및 도코사노산으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상을 사용할 수 있으며, 불포화 지방산 역시 특별히 제한되지 않으나, 올레산, 리놀레산, 리놀렌산, 아라키돈산, 에이코사펜타노산, 도코사헥사노산, 및 에르크산으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 양친매성 화합물에 사용 가능한 포화 또는 불포화지방산을 하기 표 1 및 표 2에 나타내었다.
명칭 화학식 탄소사슬 길이
Butyric (butanoic acid) CH3(CH2)2COOH C4
Caproic (hexanoic acid) CH3(CH2)4COOH C6
Caprylic (octanoic acid) CH3(CH2)6COOH C8
Capric (decanoic acid) CH3(CH2)8COOH C10
Lauric (dodecanoic acid) CH3(CH2)10COOH C12
Myristic (tetradecanoic acid) CH3(CH2)12COOH C14
Palmitic (hexadecanoic acid) CH3(CH2)14COOH C16
Stearic (octadecanoic acid) CH3(CH2)16COOH C18
Arachidic (eicosanoic acid) CH3(CH2)18COOH C20
Behenic (docosanoic acid) CH3(CH2)20COOH C22
영문명 화학식 탄소사슬 길이:이중결합수
Oleic acid CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH C18:1
Linoleic acid CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH C18:2
Alpha-linolenic acid CH3CH2CH(=CHCH2CH=)2CH(CH2)7COOH C18:3
Arachidonic acid CH3(CH2)4CH(=CHCH2CH)3=CH(CH2)3COOH C20:4
Eicosapentaenoic acid CH3CH2CH(=CHCH2CH)4=CH(CH2)3COOH C20:5
Docosahexaenoic acid CH3CH2CH(=CHCH2CH)5=CHCH2CH2COOH C22:6
Erucic acid CH3(CH2)7CH=CH(CH2)11COOH C22:1
한편, 본 발명에 따른 양친매성 화합물에 사용 가능한 상기 소수성 고분자는 특별히 제한되지 않으나, 폴리포스파젠, 폴리락티드, 폴리락티드-코-글리콜라이드, 폴리카프로락톤, 폴리안하이드라이드, 폴리말릭산 또는 그 유도체, 폴리알킬시아노아크릴레이트, 폴리하이드록시부틸레이트, 폴리카보네이트, 폴리오르소에스테르, 소수성 폴리 아미노산 및 소수성 비닐계열 고분자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상인 것이 바람직하다. 또한 상기 소수성 고분자는 중량평균분자량이 100 내지 100,000인 것이 바람직하다. 중량평균분자량이 100 미만이면 생체독성을 보이고, 100,000을 초과하면 응용이 어렵다.
본 발명에 따른 양친매성 화합물의 친수성 영역은 화합물 또는 고분자로 구성될 수 있으며, 예를 들어 생체친화성 고분자 등을 사용할 수 있다.
상기 생체친화성 고분자는 특별히 제한되지 않으나, 폴리알킬렌글리콜(PAG), 폴레에테르이미드(PEI), 폴리비닐피롤리돈(PVP), 친수성 폴리 아미노산 및 친수성 비닐계열 고분자로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상을 포함하는 것이 바람직하며, 폴리에틸렌글리콜이 보다 바람직하다. 또한 상기 생분해성 고분자는 중량평균분자량이 100 내지 100,000인 것이 바람직하다. 중량평균분자량이 100 미만이면 생체독성을 보이고, 100,000을 초과하면 응용이 어렵다.
특히 상기 폴리알킬렌글리콜은 폴리에틸렌글리콜(PEG) 또는 모노메톡시폴리에틸렌글리콜(mPEG)인 것이 바람직하고, 특히 카르복실 또는 아민으로 치환된 폴리에틸렌글리콜인 것이 보다 바람직하다.
또한 본 발명에 따른 자성 나노복합체의 상기 친수성영역(P2)은 그 구조 내의 일부분, 바람직하게는 말단에 친수활성성분 결합영역(R2)을 가지고, 상기 친수활성성분 결합영역(R2)은 조직 특이적 결합 성분과 결합되어 있는 것을 특징으로 한다.
상기 친수활성성분 결합영역(R2)은 결합되는 친수활성성분, 즉 조직 특이적 결합 성분에 따라 임의로 변화할 수 있으며, -COOH, -CHO, -NH2, -SH, -CONH2, -PO3H, -PO4H, -SO3H, -SO4H, -OH, -NR4 +X-, -술포네이트, -니트레이트, -포스포네이트, -숙신이미딜기, -말레이미드기, 및 -알킬기로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상이 기능기를 포함하는 것이 바람직하나, 이에 제한되지 않는다.
상기 조직 특이적 결합성분은 항원, 항체, RNA, DNA, 합텐(hapten), 아비딘(avidin), 스트렙타비딘(streptavidin), 뉴트라비딘 (neutravidin), 프로테인 A, 프로테인 G, 렉틴(lectin), 셀렉틴(selectin), 방사선동위원소로 표지된 성분, 종양 마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 포함하나 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 상기 나노 복합체는 종양과 관련된 다양한 질병, 예를 들어 위암, 폐암, 유방암, 난소암, 간암, 기관지암, 비인두암, 후두암, 췌장암, 방광암, 결장암 및 자궁경부암을 진단 및/또는 치료하는데 이용될 수 있다.
이와 같은 종양 세포는 정상 세포에서는 거의 또는 전혀 생산되지 않는 특정 물질을 발현 및/또는 분비하는데 이들을 일반적으로 “종양 마커(tumor marker)”라고 명명한다. 그러한 종양 마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 상기 수용성 나노입자의 활성성분 결합영역에 결합시켜 만든 나노 복합체는 종양 진단에 유용하게 이용될 수 있다. 당업계에는 다양한 종양 마커뿐만 아니라 이들과 특이적으로 결합할 수 있는 물질이 공지되어 있다. 한편, 본 발명의 명세서에서 종양 마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질은 “활성성분”과 동일한 의미이며, 이들은 상호 교환적으로 사용될 수 있다.
또한 본 발명에서 종양 마커는 작용 기작에 따라 리간드, 항원, 수용체, 및 이들을 코딩하는 핵산으로 분류할 수 있다.
종류 종양 마커의 예 활성 성분의 예
리간드 시냅토타그민 I의 C2 포스파티딜세린
아넥신 V
인테그린 인테그린 수용체
VEGF VEGFR
안지오포이에틴 1, 2 Tie2 수용체
소마토스타틴 소마토스타틴 수용체
바소인테스티날 펩타이드 바소인테스티날 펩타이드 수용체
항원 암성 태아성 항원 허셉틴(Genentech, USA)
HER2/neu 항원
전립선 특이 항원 리툭산(Genentech, USA)
수용체 폴산 수용체 폴산
종양 마커가 리간드인 경우에는 상기 리간드와 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 본 발명에 따른 나노복합체의 활성성분으로 도입할 수 있는데 상기 리간드와 특이적으로 결합할 수 있는 수용체 또는 항체가 적합할 것이다. 본 발명에서 이용 가능한 리간드 및 이와 특이적으로 결합할 수 있는 수용체의 예로는 시냅토타그민의 C2(synaptotagmin의 C2)와 포스파티딜세린, 아넥신 V(annexin V)와 포스파티딜세린, 인테그린(integrin)과 이의 수용체, VEGF(Vascular Endothelial Growth Factor)와 이의 수용체, 안지오포이에틴(angiopoietin)과 Tie2 수용체, 소마토스타틴(somatostatin)과 이의 수용체, 바소인테스티날 펩타이드(vasointestinal peptide)와 이의 수용체 등이 있지만 이에 제한되는 것은 아니다.
종양 마커가 항원인 경우 상기 항원과 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 본 발명에 따른 나노복합체의 활성성분으로 도입할 수 있는데 상기 항원과 특이적으로 결합할 수 있는 항체가 적합할 것이다. 본 발명에서 이용 가능한 항원 및 이와 특이적으로 결합하는 항체의 예로는 암성 태아성 항원(carcinoembryonic antigen - 대장암 표지 항원)과 허셉틴(Genentech, USA), HER2/neu 항원(HER2/neu antigen - 유방암 표지 항원)과 허셉틴, 전립선 특이 항원 (prostate-specific membrane antigen - 전립선암 표지 항원)과 리툭산(IDCE/Genentech, USA) 등이 있다.
종양 마커가 “수용체”인 대표적인 예는 난소암 세포에서 발현되는 폴산 수용체가 있다. 상기 수용체와 특이적으로 결합할 수 있는 물질(폴산 수용체의 경우에는 폴산)이 본 발명에 따른 나노복합체의 활성성분으로 도입될 수 있는데 상기 수용체와 특이적으로 결합할 수 있는 리간드 또는 항체가 적합할 것이다.
상술한 바와 같이 항체는 본 발명에 있어서 특히 바람직한 활성성분이다. 항체는 특정 대상과만 선택적이고 안정적으로 결합하는 성질을 갖고 있으며, 항체의 Fc 영역에 있는 리신의 -NH2, 시스테인의 -SH, 아스파라긴산 및 글루탐산의 -COOH는 수용성 나노복합체의 활성성분 결합영역 작용기와 결합하는데 유용하게 이용될 수 있기 때문이다.
이러한 항체는 상업적으로 입수하거나 당업계에 공지된 방법에 따라 제조할 수 있다. 일반적으로 포유동물 (예, 마우스, 래트, 염소, 토끼, 말 또는 양)을 적절한 양의 항원으로 1회 이상 면역화시킨다. 일정 시간 후 역가가 적정 수준에 이르렀을 때, 포유동물의 혈청으로부터 회수한다. 회수한 항체는 원하는 경우 공지된 공정을 이용하여 정제하고 사용 시까지 냉동 완충된 용액에 저장할 수 있다.이러한 방법의 상세한 사항은 당업계에 잘 알려져 있다.
한편, 상기 “핵산”은 전술한 리간드, 항원, 수용체 또는 이의 일부분을 코딩하는 RNA 및 DNA를 포함한다. 핵산은 당업계에 알려진 바와 같이 상보적인 서열 간에 염기쌍(base pair)을 형성하는 특징을 갖고 있기 때문에 특정 염기서열을 갖는 핵산은 상기 염기서열에 상보적인 염기서열을 갖는 핵산을 이용하여 검출할 수 있다. 상기 효소, 리간드, 항원, 수용체를 코딩하는 핵산과 상보적인 염기서열을 갖는 핵산을 본 발명에 따른 나노복합체의 활성성분으로 이용할 수 있다.
또한, 핵산은 5’- 및 3’- 말단에 -NH2, -SH, -COOH 등의 작용기가 있어 활성성분 결합영역의 작용기와 결합하는데 유용하게 이용될 수 있다.
이러한 핵산은 당업계에 공지된 표준 방법에 의해, 예를 들면 자동 DNA 합성기 (예, 바이오써치, 어플라이드 바이오시스템스 등으로부터 구입할 수 있는 것)를 사용하여 합성할 수 있다. 예로서, 포스포로티오에이트 올리고뉴클레오타이드는 문헌(Stein et al. Nucl. Acids Res. 1988, vol.16, p.3209)에 기술된 방법에 의해 합성할 수 있다. 메틸포스포네이트 올리고뉴클레오타이드는 조절된 유리 중합체 지지체를 사용하여 제조할 수 있다(Sarin et al. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1988, vol.85, p.7448).
한편 본 발명에 따른 자성 나노복합체의 상기 소수성영역(P1)은 그 구조 내의 일부분, 바람직하게는 말단에 하나 이상의 소수활성성분 결합영역(R1)을 가지는 것이 바람직하다. 상기 소수활성성분 결합영역(R1) 또는 소수성 영역(P1)에 약물을 결합하거나 봉입하고, 동시에 친수활성성분 결합영역(R2)에 조직 특이적 결합 성분을 동시에 결합하는 경우 본 발명에 따른 자성 나노복합체는 암진단 및 치료를 동시에 할 수 있는 약물전달체로 사용할 수 있다.
상기 소수성영역(P1)의 소수활성성분 결합영역(R1)은 결합되는 소수활성성분의 종류에 따라 임의로 변화될 수 있으며, 대표적으로 -COOH, -CHO, -NH2, -SH, -CONH2, -PO3H, -PO4H, -SO3H, -SO4H, -OH, -숙신이미딜기, -말레이미드기, 및 -알킬기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 기능기를 포함하는 것이 바람직하나, 이에 제한되지 않는다.
상기 소수활성성분은 약제학적 활성 성분이면 특별히 제한되지는 않으나, 항암제, 항생제, 호르몬, 호르몬길항제, 인터루킨, 인터페론, 성장 인자, 종양 괴사 인자, 엔도톡신, 림포톡시, 유로키나제, 스트렙토키나제, 조직 플라스미노겐 활성제, 프로테아제 저해제, 알킬포스포콜린, 방사선 동위원소로 표지된 성분, 계면활성제, 심혈관계 약물, 위장관계 약물 및 신경계 약물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상인 것이 바람직하다.
한편, 상기 소수성 영역에 존재하는 소수활성성분, 특히 항암제는 물리적 봉입, 화학적 봉입, 또는 이 둘의 조합 또한 가능하다. 에멀전 방법과 서스펜션 방법에 의해 자성 나노복합체가 제조되는 중에 양친매성 고분자의 소수활성성분과 항암제의 물리적인 결합을 통해 약물의 봉입이 이루어지게 된다. 또한 자성 나노복합체를 구성하는 양친매성 고분자의 소수활성성분 결합영역과 화학적 결합이 가능한 항암제의 경우 적당한 가교제를 사용하여 양친매성 고분자의 소수활성성분 결합영역과 항암제의 결합이 가능하여 자성 나노복합체에 약물의 봉입이 이루어 질 수 있다.
본 발명에 따른 치료 방법에서 이용될 수 있는 항암제로는 이에 제한되는 것은 아니지만 에피루비신(Epirubicin), 도세탁셀(Docetaxel), 젬시타빈(Gemcitabine), 파클리탁셀(Paclitaxel), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin), 택솔(taxol), 프로카르바진(procarbazine), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 디악티노마이신(dactinomycin), 다우노루비신(daunorubicin), 에토포시드(etoposide), 탁목시펜(tamoxifen) 독소루비신(doxorubicin), 미토마이신(mitomycin), 블레오마이신(bleomycin), 플리코마이신(plicomycin), 트랜스플라티눔(transplatinum), 빈블라스틴(vinblastin) 및 메토트렉세이트(methotrexate) 등이 있다.
본 발명에 따른 자성 나노복합체에 있어서, 양친매성 화합물은 소수성 영역-친수성 영역, 또는 친수성영역-소수성영역-친수성영역으로 이루어진 것이 바람직하다. 또한 친수성 및 소수성 영역에 각각의 활성성분결합영역이 포함되는 경우 소수활성성분 결합영역-소수성 영역-친수성 영역-친수활성성분 결합영역, 또는 친수활성성분 결합영역-친수성영역-소수성영역(-소수활성성분 결합영역)-친수성영역-친수활성성분 결합영역으로 이루어진질 수 있다. 특히 소수활성성분 결합영역-소수성 영역-NH2-친수성 영역-친수활성성분 결합영역과 같이 상기 친수성 영역과 소수성 영역에 -NH2- 같은 작용기가 있는 것이 바람직하다. 상기 친수성 영역과 소수성 영역에 존재하는 -NH2-기는 양친매성 화합물이 자성 나노입자의 표면에 부가되는 경우 보다 안정한 구조를 가질 수 있다.
또한 본 발명에 따른 자성 나노복합체에 있어서, 양친매성 화합물의 가장 바람직한 예는 카르복실폴리에틸렌글리콜-폴리락티드-코글리콜라이드 공중합체 또는 양 말단이 카르복시기로 치환된 폴리(에틸렌 옥사이드)-폴리(프로필렌 옥사이드)-폴리(에틸렌 옥사이드) 공중합체이다.
본 발명은 또한 상기 자성 나노복합체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조영제 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조영제 조성물에 사용되는 담체는 의약 분야에서 통상 사용되는 담체 및 비히클을 포함하며, 구체적으로 이온 교환, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질(예, 사람 혈청 알부민), 완충 물질(예, 여러 인산염, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분적인 글리세라이드 혼합물), 물, 염 또는 전해질(예, 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소캄륨, 염화나트륨 및 아연 염), 교질성 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로즈계 기질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카르복시메틸셀룰로즈, 폴리아릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌 글리콜 또는 양모지 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 본 발명의 조영제 조성물은 또한 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 유화제, 현탁제, 또는 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다.
한 양태로서, 본 발명에 따른 조영제 조성물은 비경구 투여를 위한 수용성 용액으로 제조할 수 있다. 바람직하게는 한스 용액(Hank’s solution), 링거 용액(Ringer’s solution) 또는 물리적으로 완충된 염수와 같은 완충 용액을 사용할 수 있다. 수용성 주입(injection) 현탁액은 소디움 카르복시메틸셀룰로즈, 솔비톨 또는 덱스트란과 같이 현탁액의 점도를 증가시킬 수 있는 기질을 첨가할 수 있다.
본 발명의 조영제 조성물의 다른 바람직한 양태는 수성 또는 유성 현탁액의 멸균 주사용 제제의 형태일 수 있다. 이러한 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제(예를 들면 트윈 80) 및 현탁화제를 사용하여 본 분야에 공지된 기술에 따라 제형화할 수 있다. 멸균 주사용 제제는 또한 무독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사 용액 또는 현탁액(예를 들면 1,3-부탄디올 중의 용액)일 수 있다. 사용될 수 있는 비히클 및 용매로는 만니톨, 물, 링거 용액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 비휘발성 오일이 통상적으로 용매 또는 현탁화 매질로서 사용된다. 이러한 목적을 위해 합성 모노 또는 디글리세라이드를 포함하여 자극성이 적은 비휘발성 오일은 그 어느 것도 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 본 발명에 따른 조영제 조성물을 생체 또는 시료에 투여하는 단계; 및
상기 생체 또는 시료로부터 자성 나노복합체에 의해 발산되는 신호를 감지하여 영상을 수득하는 단계를 포함하는 조영제 조성물의 이용방법에 관한 것이다.
상기에서 사용된 용어 “시료”는 진단하고자 하는 대상으로부터 분리한 조직 또는 세포를 의미한다. 또한 상기 조영제 조성물을 생체 또는 시료에 주입하는 단계는 의약 분야에서 통상적으로 이용되는 경로를 통해 투여될 수 있으며, 비경구 투여가 바람직하고 예를 들어 정맥내, 복강내, 근육내, 피하 또는 국부 경로를 통하여 투여할 수 있다.
상기 이용방법에 있어서, 자성 나노복합체에 의해 발산되는 신호는 자기장을 이용하는 각종 장비들에 의해서 감지될 수 있으며, 특히 자기공명영상 장치(MRI)가 바람직하다.
자기공명영상 장치는 강력한 자기장 속에 생체를 넣고 특정 주파수의 전파를 조사하여 생체조직에 있는 수소 등의 원자핵이 에너지를 흡수하여 에너지가 높은 상태로 만든 후 상기 전파를 중단하여 상기 수소 등의 원자핵 에너지가 방출되게 하고 이 에너지를 신호로 변환하여 컴퓨터로 처리하여 영상화한 장치이다. 자기 또는 전파는 골에 방해를 받지 않기 때문에 단단한 골 주위 또는 뇌나 골수의 종양에 대하여 종단, 횡단, 임의의 각도에서 선명한 입체적인 단층상을 얻을 수 있다. 특히 상기 자기 공명 영상 장치는 T2 스핀-스핀 이완 자기 공명영상 장치인 것이 바람직하다.
본 발명은 또한 A) 나노입자를 용매에서 합성하는 단계;
B) 소수성 영역과 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물을 상기 나노입자 표면에 부가하여 양친매성 화합물과 나노입자를 결합시키는 단계;
C) 상기 친수성 영역에 존재하는 친수활성성분 결합영역과 종양마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 결합시키는 단계; 및
D) 소수성 영역에 약제학적 활성성분을 결합하거나 봉입하는 단계를 포함하는 자성 나노복합체의 제조방법에 관한 것이다.
이하 본 발명에 따른 자성 나노복합체의 제조방법의 각 단계를 보다 상세히 설명한다.
상기 나노입자를 용매에서 합성하는 단계 A)는 나노입자 전구체와 표면안정제를 반응시키는 단계로서,
a) 용매의 존재 하에 나노입자 전구체와 유기성 표면 안정제를 반응시키는 단계; 및
b) 상기 반응물을 열분해하는 단계를 포함하는 것이 바람직하다.
상기 단계 a)는 유기성 표면 안정제가 포함된 용매에 나노입자 전구체를 투입하여 나노입자 표면에 유기성 표면 안정제를 배위시키는 단계이다.
상기 단계 a)의 나노입자는 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금을 사용하는 것이 바람직하고, 유기성 표면 안정제는 알킬 트라이메틸암모늄 할라이드(alkyl trimethylammonium halide), 포화 또는 불포화 지방산, 트리알킬포스핀 옥사이드(trialkylphosphine oxide), 알킬아민(alkyl amine), 알킬티올(alkyl thiol), 소디움 알킬 설페이트 (sodium alkyl sulfate), 및 소디움 알킬 포스페이트 (sodium alkyl phosphate)로 이루어진 그룹 중에서 선택할 수 있다. 상기 금속, 자성물질, 자성 합금 및 유기성 표면 안정제의 구체적인 종류는 상술한 바와 같다.
상기 단계 a)의 나노입자 전구체는 금속과 -CO, -NO, -C5H5, 알콕사이드(alkoxide) 또는 기타 공지의 리간드가 결합된 금속화합물을 사용할 수 있으며, 구체적으로 아이언펜타카르보닐 (iron pentacarbonyl, Fe(CO)5), 페로센(ferrocene), 또는 망간카르보닐(Mn2(CO)10) 등의 금속 카르보닐계열의 화합물; 또는 철 아세틸아세토네이트 (Fe(acac)3) 등의 금속 아세틸아세토네이트 계열의 화합물등의 다양한 유기금속화합물들을 사용할 수 있다. 또한 나노입자 전구체는 금속과 Cl-, 또는 NO3- 등의 공지된 음이온과 결합된 금속이온을 포함한 금속염을 사용할 수 있으며, 구체적으로 삼클로로화철(FeCl3), 이클로로화철(FeCl2), 또는 철 나이트레이트 (Fe(NO3)3)등을 사용할 수 있다. 또한 합금 나노입자와 복합 나노입자 합성에서는 위에서 언급한 2종 이상의 금속의 전구체의 혼합물을 사용할 수 있다.
상기 a) 단계에서 사용 가능한 용매는 나노입자 표면에 유기성 표면 안정제가 배위된 착화합물의 열분해 온도에 근접하는 높은 끊는점을 가지는 것이 바람직하며, 예를 들어 에테르계 화합물, 헤테로고리화합물, 방향족화합물, 술폭사이드화합물, 아마이드화합물, 알코올, 탄화수소 및 물로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 것을 사용할 수 있다.
구체적으로 상기 용매는 옥틸 에테르(octyl ether), 부틸 에테르(butyl ether), 헥실 에테르(hexyl ether), 또는 데실 에테르(decyl ether)와 같은 에테르계 화합물; 피리딘, 또는 테트라하이드로퓨란(THF)과 같은 헤테로고리화합물; 톨루엔, 자일렌, 메시틸렌, 또는 벤젠과 같은 방향족화합물: 디메틸술폭사이드(DMSO)와 같은 술폭사이드화합물; 디메틸포름아마이드(DMF)와 같은 아마이드화합물; 옥틸알코올, 또는 데칸올과 같은 알코올; 펜탄, 헥산, 헵탄, 옥탄, 데칸, 도데칸, 테트라데칸, 또는 헥사데칸과 같은 탄화수소, 또는 물을 사용할 수 있다.
상기 a) 단계의 반응 조건은 특별히 제한되지 않으며, 금속전구체 및
표면 안정제의 종류에 따라 적절히 조절할 수 있다. 반응은 실온 또는 그 이하의 온도에서도 형성될 수 있으나, 통상적으로는 약 30~200℃의 범위로 가열 및 유지시키는 것이 바람직하다.
상기 b) 단계는 나노입자 표면에 유기성 표면 안정제가 배위된 착화합물을 열분해하여 나노입자를 성장시키는 단계이다. 이 때 반응조건에 따라 균일한 크기 및 형상의 금속 나노입자를 형성할 수 있으며, 열분해 온도역시 금속전구체 및 표면 안정제의 종류에 따라 적절히 조절할 수 있다. 바람직하게는 약 50~500℃에 반응시키는 것이 적절하다. 상기 b) 단계에서 제조된 나노입자는 공지의 수단을 통하여 분리 및 정제할 수 있다.
본 발명에 따른 자성 나노복합체의 제조방법에 있어서, 단계 B)는 소수성 영역과 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물을 상기 나노입자 표면에 부가하여 양친매성 화합물과 나노입자를 결합시키는 단계이다.
상기 자성 나노입자의 표면에 양친매성 화합물을 부가하는 방법은 상술한 바와 같이 에멀젼에 의한 방법과 서스펜션에 의한 방법으로 구분된다.
보다 구체적으로, 상기 부가 단계 B)는
a) 나노입자를 유기용매에 용해시켜 오일상을 제조하는 단계;
b) 양친매성 화합물을 수성용매에 용해시켜 수용상을 제조하는 단계;
c) 상기 오일상과 수용상을 혼합하여 에멀젼을 형성하는 단계; 및
d) 상기 에멀젼으로부터 오일상을 분리하는 단계를 포함하는 것이 바람직하며, 상기 a) 내지 d)단계를 포함하는 방법에 의하여 본 발명에 따른 에멀젼형 자성 나노복합체를 제조할 수 있다.
또한 상기 부가 단계 B)는
e) 상기 나노입자를 양친매성 화합물이 용해된 용액에서 분산시켜 현탁액을 제조하는 단계; 및
f) 상기 현탁액으로부터 용매를 분리하는 단계를 포함하는 것이 바람직하며, 상기 e) 및 f)단계를 포함하는 방법에 의하여 본 발명에 따른 서스펜스형 자성 나노복합체를 제조할 수 있다.
상기 부가단계 B)에 있어서, 상기 소수성 영역은 포화 또는 불포화 지방산, 또는 소수성 고분자인 것이 바람직하고, 상기 친수성 영역은 생분해성 고분자인 것이 바람직하며, 이에 대한 구체적인 종류는 상술한 바와 같다.
한편, 부가 단계 B)에 있어서, 양친매성 화합물은 당업계에 공지된 방법에 의하여 제조할 수 있다. 일 예를 들어, 친수성기를 구성하는 디아민 폴리에틸렌 글리콜(diamine polyethylene glycol, NH2-PEG-NH2)과 소수성기를 구성하는 생분해성고분자의 일종인 폴리락타이드-코-글리콜라이드를 중합시켜 제조할 수 있다. 또한 양친매성 고분자의 아민기로 치환된 친수활성성분 결합영역에 노말-디숙신이미딜 카보네이트(N,N'-Disuccinimidyl carbonate)를 사용하여 친수활성성분 결합영역을 숙신이미딜기로 치환이 가능하다. 또한 친수성기를 구성하는 카르복실/아민 폴리에틸렌 글리콜(carboxyl/amine polyethylene glycol, NH2-PEG-COOH)과 소수성기를 구성하는 생분해성고분자의 일종인 폴리락타이드-코-글리콜라이드를 중합시켜 양친매성 고분자의 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환시킬 수 있다. 또한 생분해성 양친매성 고분자는 락타이드를 단량체로 사용하여 개환 중합을 통하여 제조할 수 있다. 락타이드는 카르복실/아민 폴리에틸렌 글리콜의 아민기에 의해 개시가 일어나게 되며 촉매로는 옥탄산 제 1 주석(stannous octoate)을 사용할 수 있다. 중합은 질소 대기하에서 및 100 ~ 180℃의 조건으로 진행할 수 있다. 이때, 초기 매크로-개시제 인 카르복실/아민 폴리에틸렌 글리콜의 분자량과 양을 조절하여 공중합체의 분자량을 조절할 수 있다.
또한 친수성 영역에 존재하는 친수활성성분 결합영역과 종양마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 결합시키는 C) 단계는
g) 가교제를 사용하여 친수성 영역의 일부에 친수활성성분 결합영역을 제공하는 단계;
h) 상기 친수활성성분 결합영역과 종양마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 결합시키는 단계
를 포함하는 것이 바람직하다.
상기 단계 g)에 있어서, 사용되는 가교제는 특별히 제한되지 않으나, 1,4-디이소티오시아나토벤젠(1,4-Diisothiocyanatobenzene), 1,4-페닐린 디이소시아네이트(1,4-Phenylene diisocyanate), 1,6-디이소시아나토헥산(1,6-Diisocyanatohexane), 4-(4-말레이미도페닐)뷰트릭산 노말-하이드록시숙신이미드 에스터(4-(4-Maleimidophenyl)butyric acid N-hydroxysuccinimide ester), 포스겐(Phosgene solution), 4-(말레이미도)페닐 이소시아네이트(4-(Maleinimido)phenyl isocyanate), 1,6-헥산디아민(1,6-Hexanediamine), 파라-니트로페닐클로로포르메이트(p-Nitrophenyl chloroformate), 노말-하이드록시숙신이미드(N-Hydroxysuccinimide), 1,3-디사이클로헥실카르보이미드(1,3-Dicyclohexylcarbodiimide), 1,1′-카르보닐디이미다졸(1,1′-Carbonyldiimidazole), 3-말레이미도벤조익산 노말-하이드록시숙신이미드 에스터(3-Maleimidobenzoic acid N-hydroxysuccinimide ester), 에틸렌디아민(Ethylenediamine), 비스(4-니트로페닐)카르보네이트(Bis(4-nitrophenyl) carbonate), 숙시닐 클로라이드(Succinyl chloride), N-(3-디메틸아미노프로필)-N′-에틸카르보이미드 하이드로클로라이드(N-(3-Dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodiimide Hydrochloride), N,N′-디숙신이미딜 카르보네이트(N,N′-Disuccinimidyl carbonate), N-숙신이미딜 3-(2-피리딜디티오)프로피오네이트(N-Succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionate), 및 숙시닉 언하이드라이드(sucinic anhydride) 로 이루어진 그룹중에서 선택된 하나 이상을 포함하는 것이 바람직하다. 상기 가교제는 친수성 영역의 일부와 반응하여 상술한 -COOH, -CHO, -NH2, -SH, -CONH2, -PO3H, -PO4H, -SO3H, -SO4H, -OH, -NR4 +X-, -술포네이트, -니트레이트, -포스포네이트, -숙신이미딜기, -말레이미드기, 또는 -알킬기와 같은 친수활성성분 결합영역을 제공한다.
상기 단계 h)에 있어서, 상기 친수성활성성분 결합영역의 작용기는 활성성분, 즉 조직 특이적 결합 성분의 종류 및 이의 화학식에 따라 변화될 수 있다.
본 발명에 따른 나노 복합체의 제조 방법에 있어서, 소수성 영역에 약제학적 활성성분을 결합하거나 봉입하는 단계 D)는 약제학적 활성 성분을 소수성 영역에 물리적으로 봉입하는 단계 및 약제학적 활성 성분을 소수성 영역과 화학적으로 결합시키는 단계로 구분할 수 있다.
상기 화학적 결합 단계는 i) 가교제를 사용하여 소수성 영역의 일부에 소수활성성분 결합영역을 제공하는 단계; 및
j) 상기 소수활성성분 결합영역과 약제학적 활성 성분을 결합시키는 단계를 포함하는 것이 바람직하다.
상기 i) 단계에서 사용 가능한 가교제 상술한 g) 단계의 가교제를 제한 없이 사용할 수 있다. 상기 가교제는 소수성 영역의 일부와 반응하여 상술한 -COOH, -CHO, -NH2, -SH, -CONH2, -PO3H, -PO4H, -SO3H, -SO4H, -OH, -숙신이미딜기, -말레이미드기, 또는 -알킬기와 같은 소수활성성분 결합영역을 제공한다.
한편, 물리적 봉입 단계는 양친매성 화합물과 나노입자를 결합시키는 상기 B) 단계에서 약제학적 활성 성분을 나노입자와 함께 용해시켜 봉입할 수 있다. 보다 구체적으로 에멀젼형 나노복합체에 약제학적 활성성분을 봉입하는 경우 상술한 나노입자를 유기용매에 용해시켜 오일상을 제조하는 단계 a)에서 약제학적 활성 성분을 나노 입자와 함께 유기용매에 용해시키고, 수용상과 혼합하여 에멀젼을 형성한 후 오일상을 분리하면 소수성 영역에 약제학적 활성 성분을 물리적으로 봉입할 수 있다. 또한 서스펜션형 나노복합체에 약제학적 활성성분을 봉입하는 경우 상술한 나노입자를 양친매성 화합물이 용해된 용액에서 분산시켜 현탁액을 제조하는 e) 단계에서 약제학적 활성 성분을 나노 입자와 함께 분산시켜 현탁액을 제조한 후 용매를 분리하면 소수성 영역에 약제학적 활성 성분을 물리적으로 봉입할 수 있다.
상기 h) 단계 및 i) 단계의 친수 또는 소수활성성분 결합영역과 친수 또는 소수활성성분의 결합은, 각 활성성분의 종류 및 이의 화학식에 따라 변화될 수 있으며, 그 구체 예를 하기 표 4에 나타내었다.
I II III
R-NH2 R'-COOH R-NHCO-R'
R-SH R'-SH R-SS-R
R-OH R'-(에폭시기) R-OCH2C(OH)CH2-R'
RH-NH2 R'-(에폭시기) R-NHCH2C(OH)CH2-R'
R-SH R'-(에폭시기) R-SCH2C(OH)CH2-R'
R-NH2 R'-COH R-N=CH-R'
R-NH2 R'-NCO R-NHCONH-R'
R-NH2 R'-NCS R-NHCSNH-R'
R-SH R'-COCH2 R'-COCH2S-R
R-SH R'-O(C=O)X R-OCH2(C=O)O-R'
R-(아지리딘기) R'-SH R-CH2CH(NH2)CH2S-R'
R-CH=CH2 R'-SH R-CH2CHS-R'
R-OH R'-NCO R'-NHCOO-R
R-SH R'-COCH2X R-SCH2CO-R'
R-NH2 R'-CON3 R-NHCO-R'
R-COOH R'-COOH R-(C=O)O(C=O)-R' + H2O
R-SH R'-X R-S-R'
R-NH2 R'CH2C(NH2 +)OCH3 R-NHC(NH2 +)CH2-R'
R-OP(O2 -)OH R'-NH2 R-OP(O2 -)-NH-R'
R-CONHNH2 R'-COH R-CONHN=CH-R'
R-NH2 R'-SH R-NHCO(CH2)2SS-R'
I: 활성성분 결합영역의 작용기 II: 활성성분 III: I과 II의 반응에 따른 결합예
상기 단계 A), B), C) 및 D)에 의해 생성된 수용성 나노 복합체는 당업계에 공지된 방법을 이용하여 분리할 수 있다. 일반적으로 수용성 나노복합체는 침전물로 생성되기 때문에 원심분리 또는 여과를 이용하여 분리하는 것이 바람직하다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일뿐, 어떠한 의미로도 본 발명을 제한하지 않는다.
< 제조예 1> 포화 지방산을 이용한 고민감도 자성 나노입자의 제조
6 nm의 마그네타이트(Fe3O4)는 벤질에테르 용매에서 도데실산(0.6몰)과 도데실 아민(0.6몰) 및 철 트리아세틸아세토네이트 (Aldrich)를 290℃에서 열분해 화학반응(thermal decomposition)시켜 (30 분) 합성하였다. 12 nm 자성 나노입자는 도데실산(0.2 몰), 도데실 아민(0.1 몰), 상기 6 nm 자성 나노입자(10 mg/ml) 및 철 트리에세틸아세토네이트를 포함하는 벤질에테르 용액을 290 ℃에서 30 분 동안 가열하여 제조하였다. 망간페라이트(MnFe2O4)는 위의 반응에 망간 투아세틸아세토네이트를 첨가하여 제조하였다. 제조된 마그네타이트 및 망간페라이트의 투과전자현미경 사진을 각각 도 3a 및 b에 도시하였다. 상기 마그네타이트 및 망간페라이트의 자기적 특성은 VSM을 이용하여 측정하였으며 이를 각각 점선 및 실선으로 표시하여 도 3c에 도시하였다.
< 제조예 2> 불포화 지방산을 이용한 고민감도 자성 나노입자의 제조
6 nm의 마그네타이트(Fe3O4)는 벤질에테르 용매에서 올레인산(0.6 몰)과 올레일 아민(0.6몰) 및 철 트리아세틸아세토네이트 (Aldrich)를 290 ℃에서 열분해 화학반응(thermal decomposition)하여 (30 분) 합성하였다. 12 nm 산화철 나노입자는 올레인산(0.2 몰), 올레일 아민(0.1 몰), 상기 6 nm 산화철 나노입자(10 mg/ml) 및 철 트리에세틸아세토네이트를 포함하는 벤질에테르 용액을 290 ℃에서 30 분 동안 가열하여 제조하였다. 망간페라이트(MnFe2O4)는 위의 반응에 망간 투아세틸아세토네이트를 첨가하여 제조하였다. 제조된 마그네타이트 및 망간페라이트의 투과전자현미경 사진을 각각 도 4a 및 b에 도시하였다. 상기 마그네타이트 및 망간페라이트의 자기적 특성은 VSM을 이용하여 측정하였으며 이를 각각 점선 및 실선으로 표시하여 도 4c에 도시하였다.
< 제조예 3> 친수활성성분 결합영역이 숙신이미딜기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 합성
친수활성성분 결합영역이 숙신이미딜기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 합성은 도 5a 및 b에 나타낸 과정을 통해 진행되었다. 0.05몰의 폴리락타이드-코-글리콜라이드, 0.4몰의 노말-하이드록시숙신이미드(N-Hydroxysuccinimide, NHS) 및 1,3-디사이클로헥실카르보이미드(1,3-Dicyclohexylcarbodiimide)를 메틸렌클로라이드에 용해시킨 후 상온에서 질소 대기하에서 24시간동안 반응하였다. 반응물은 필터를 통해 거른후 차가운 디에틸테테르에 떨어뜨려 침전시켰다. 이 침전물은 디에틸에테르로 수차례 세척후 진공상태에서 보관하였다. 위의 방법으로 활성화된 고분자 0.01몰을 취하여 8ml의 메틸렌클로라이드에 용해시킨 후 양쪽 끝 말단 작용기가 아민기로 치환된 폴리에틸렌글리콜(분자량 3,400) 0.05몰을 취하여 2ml의 메틸렌클로라이드에 용해시켜 조금씩 떨어뜨리면서 반응시켰다. 반응은 상온에서 질소 대기하에 12시간동안 이루어 졌으며, 반응물은 위에 언급한 방법을 통해 세척, 보관하였다. 그리고 생분해성 양친매성 고분자의 아민기로 치환된 친수성 말단 작용기를 항체의 아민기와 결합이 가능한 숙신이미딜기로 변환하기 위해서 노말-디숙신이미딜 카보네이트(N,N'-Disuccinimidyl carbonate)를 사용하였다. 0.01몰의 노말-디숙신이미딜 카보네이트를 취하여 4ml의 메틸렌클로라이드에 용해시킨 후 0.05몰의 친수성 부분이 아민기로 치환된 양친매성 고분자를 1ml의 메틸렌클로라이드에 용해시켜 조금씩 떨어뜨리면서 반응시켰다. 반응은 질소 대기하에서 4시간동안 진행되었고 겔 필트레이션(gel filtration: Sephadex G-25) 과정을 통해 고분자와 결합하지 않은 노말-디숙신이미딜 카보네이트를 제거하였다.
< 제조예 4> 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 합성
가. 고분자들의 활성성분을 결합하여 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 합성
고분자들의 활성성분을 결합하여 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 합성과정을 도 5c에 도시하였다. 0.05몰의 폴리락타이드-코-글리콜라이드, 0.2몰의 노말-하이드록시숙신이미드와 1,3-디사이클로헥실카르보이미드를 메틸렌클로라이드에 용해시킨 후 상온에서 질소 대기하에서 24시간동안 반응하였다. 반응물은 필터를 통해 거른후 차가운 디에틸테테르에 떨어뜨려 침전시켰다. 이 침전물은 디에틸에테르로 수차례 세척 후 진공상태에서 보관하였다.
위의 방법으로 활성화된 고분자 0.01몰을 취하여 8ml의 메틸렌클로라이드에 용해시킨 후 양쪽 끝 말단 작용기가 아민기와 카르복실기로 치환된 폴리에틸렌글리콜을 0.01몰을 취하여 2ml의 메틸렌클로라이드에 용해시켜 조금씩 떨어뜨리면서 반응시켰다. 반응은 상온에서 질소 대기하에 12시간동안 이루어 졌으며, 반응물은 위에 언급한 방법을 통해 세척, 보관하였다. 합성된 고분자의 구조는 수소 핵자기공명(1H-NMR)과 적외선분광(FT-IR)을 통해 분석하였으며, 이를 도 6 및 7에 도시하였다.
나. 친수성 고분자의 활성성분을 통한 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 중합
친수성 고분자의 활성성분을 통한 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자의 중합 과정을 도 5d에 도시하였다. 0.2 g의 양쪽 끝 말단 작용기가 아민기와 카르복실기로 치환된 폴리에틸렌글리콜(분자량 3400)을 감압하여 수분을 제거하였다. 촉매로서 20 mg의 옥탄산 제 1 주석을 수분이 제거된 톨루엔에 가한 후 100 ℃에서 20 내지 30분간 감압하고, 반응물에 0.119 g의 D,L-락티드를 가하고 140 ℃에서 12시간 동안 중합하였다. 생성된 블록 공중합체를 5 ml의 클로로포름을 가해 녹인 다음 과량의 디에틸에테르에 소량씩 떨어뜨리고 생성된 침전물을 여과하고, 디에틸에테르로 세척한 후 50 ℃에서 하루 동안 감압·건조하여 카르복실폴리에틸렌글리콜-폴리락티드의 블록 공중합체를 얻었다(수율 87.2 %).
< 제조예 5> 자성나노복합체에 약물을 봉입하기 위한 양친매성 고분자의 제조
양친매성 고분자의 소수활성 결합 영역에 항암제의 결합은 도 5e에 나타낸 과정을 통해 진행되었다. <제조예 4,나>에서 제조한 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 생분해성 양친매성 고분자와 파라 니트로페니클로로포르메이트(p-Nitrophenyl chloroformate)를 수분이 제거된 메틸렌클로라이드에 용해시키고 0℃에서 피리딘을 가하여 상온에서 질소 대기하에서 3시간동안 반응시키고, 활성화된 양친매성 고분자와 항암제와의 결합을 위해, 독소루비신(DOX)가 용해되어 있는 디메틸포름알데하이드에 트리에틸아민을 더하여 상온에서 질소 대기하에서 3시간동안 진행하였다. 반응하지 않은 DOX와 기타 다른 물질들은 수차례의 분리에 의해 제거하였다.
< 실시예 1> 친수활성성분 결합영역이 숙신이미딜기로 치환된 에멀젼형 자성 나노복합체의 제조
항암제가 봉입되어 있고 친수활성성분 결합영역이 숙신이미딜기로 치환된 에멀젼형 수용상 자성나노복합체(도9a)의 제조를 위해, 오일상으로는 클로로포름이 사용되며 독소루비신(Doxorubicine, DOX) 2mg을 용해시키고 <제조예 1>에서 제조한 20mg의 자성나노입자를 분산 시켰다. 수상으로는 상기 <제조예 3>에서 제조한 100mg의 양친매성 생분해성 고분자가 용해되어 있는 20ml의 초순수를 사용하였다. 상기 두상을 혼합시켜 포화 시킨 후 이 혼합물을 초음파에 의해 10분동안 유화시켰다. 이 에멀젼을 12시간 동안 교반하여 오일상을 증발시키고 여러번의 원심분리와 Sephacryl S-300 컬럼을 통하여 순도 높은 수용상 자성나노복합체를 얻었다.
< 실시예 2> 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 에멀젼형 자성 나노복합체의 제조
항암제가 봉입되어 있고 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 에멀젼형 수용상 자성나노복합체(도9b)의 제조를 위해, 오일상으로는 클로로포름이 사용되며 독소루비신 2mg을 용해시키고 <제조예 1>에서 제조한 20mg의 자성나노입자를 분산시켰다. 수상으로는 상기 <제조예 4, 가>에서 제조한 100mg의 양친매성 생분해성 고분자가 용해되어 있는 20ml의 초순수를 사용하였다. 상기 두상을 혼합시켜 포화 시킨 후 이 혼합물을 초음파에 의해 10분 동안 유화시켰다. 상기 에멀젼을 12시간 동안 교반하여 오일상을 증발시키고 여러 번의 원심분리와 Sephacryl S-300 컬럼을 통하여 순도 높은 수용상 자성나노복합체를 얻었다. 제조된 입자는 동적 레이저 광 산란법과 투과 전자 현미경을 사용하여 확인하였고, 이를 도 10a, b 및 c에 나타내었다. 도 10a 및 b는 각각 마그네타이트 및 망간페라이트가 카르복실폴리에틸렌글리콜-폴리락티드-코-글리콜라이드에 의해 봉입된 전자현미경 사진다. 도 10c는 상기 마그네타이트 및 망간페라이트가 카르복실폴리에틸렌글리콜-폴리락티드-코-글리콜라이드에 의해 봉입된 나노 복합체의 크기 분포를 광산란 방법에 의해 측정한 결과로서 점선은 마그네타이트, 실선은 망간페라이트가 봉입된 나노복합체를 나타낸다. 또한 봉입된 자성나노입자의 무게비율은 열중량분석 방법에 의해 분석되었으며 그 결과를 도11에 나타내었다. 자기적 특성은 VSM을 이용하여 측정하였으며 도 12에 나타내었다.
< 실시예 3> 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 서스펜션형 자성 나노복합체의 제조
가. 항암제가 물리적으로만 봉입된 서스펜셩형 자성 나노복합체의 제조
항암제가 물리적으로만 봉입되어 있고 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 서스펜션형 수용상 자성나노복합체(도9c)의 제조를 위해, 상기 <제조예 1>에서 제조한 3mg의 자성 나노입자와 2m의 DOX를 <제조예 4, 나>에서 제조한 50 mg의 양친매성 생분해성 고분자가 용해되어 있는 클로로포름에 분산 시켰다. 분산액을 교반하면서 40 ℃로 가열하여 용매를 증발시키고, 0.5ml의 인산완충용액(PBS)용액에 재분산시켰다. 상기 용액을 30 ℃에서 6시간 동안 가열/교반하여 현탁액을 완성하였다. 원심분리를 통해 자성입자를 포함하지 않고 있는 마이셀을 제거하고 0.5ml의 PBS용액에 재분산시켰다.
나. 항암제가 화학적으로만 봉입된 서스펜셩형 자성 나노복합체의 제조
항암제가 화학적으로만 봉입되어 있고 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 서스펜션형 수용상 자성나노복합체(도9c)의 제조를 위해, 상기 <제조예 1>에서 제조한 3mg의 자성 나노입자를 <제조예 5>에서 제조한 50 mg의 항암제가 결합된 양친매성 생분해성 고분자가 용해되어 있는 클로로포름에 분산 시켰다. 분산액을 교반하면서 40 ℃로 가열하여 용매를 증발시키고, 0.5ml의 인산완충용액(PBS)용액에 재분산시켰다. 상기 용액을 30 ℃에서 6시간 동안 가열/교반하여 현탁액을 완성하였다. 원심분리를 통해 자성입자를 포함하지 않고 있는 마이셀을 제거하고 0.5ml의 PBS용액에 재분산시켰다.
다. 항암제가 물리적인 방법과 화학적인 방법으로 봉입된 서스펜셩형 자성 나노복합체의 제조
항암제가 물리적인 방법과 화학적인 방법으로 봉입되어 있고 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 서스펜션형 수용상 자성나노복합체(도9c)의 제조를 위해, 상기 <제조예 1>에서 제조한 3mg의 자성 나노입자와 2m의 DOX를 <제조예 4, 나>에서 제조한 25 mg의 양친매성 생분해성 고분자와 <제조예 5>에서 제조한 25 mg의 항암제가 결합된 양친매성 생분해성 고분자가 용해되어 있는 클로로포름에 분산시켰다. 분산액을 교반하면서 40 ℃로 가열하여 용매를 증발시키고, 0.5ml의 인산완충용액(PBS)용액에 재분산시켰다. 상기 용액을 30 ℃에서 6시간 동안 가열/교반하여 현탁액을 완성하였다. 원심분리를 통해 자성입자를 포함하지 않고 있는 마이셀을 제거하고 0.5ml의 PBS용액에 재분산시켰다. 제조된 입자는 동적 레이저 광 산란법과 투과 전자 현미경을 사용하여 확인하였고, 이를 도 13a 및 b에 나타내었다. 봉입된 자성나노입자의 무게비율은 열중량분석 방법에 의해 분석되었으며 그 결과를 도14에 나타내었다.
< 실시예 4> 암의 동시진단과 치료를 위한 허셉틴-자성 나노복합체의 제조
가. 숙신이미딜기 -자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 제조
허셉틴-자성나노복합체는 상기 <실시예 1>에서 제조한 3 mg의 수용상 자성나노복합체를 pH 7.4의 인산 완충용액에 분산시킨 후 허셉틴 0.1 mg을 첨가하여 상온에서 4시간동안 반응시켰다. 반응이 끝난후 Sephacryl S-300 컬럼을 통하여 반응하지 않은 허셉틴과 수용상 자성나노복합체를 제거하여 허셉틴-자성나노복합체를 제조하였다.
나. 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 제조
허셉틴-자성나노복합체는 상기 <실시예 2>에서 제조한 친수성 고분자의 말단 작용기가 카르복실기로 치환된 자성나노복합체를 0.5ml의 PBS 용액에 분산시켰다. 이 수용상 자성나노복합체를 pH 7.4의 인산 완충용액에 분산시킨 후 허셉틴 0.5 mg을 첨가하여 상온에서 4시간동안 반응시켰다. 반응이 끝난후 Sephacryl S-300 컬럼을 통하여 반응하지 않은 허셉틴과 수용상 자성나노복합체를 제거하여 허셉틴-자성나노복합체를 제조하였다. 그리고 항체와 결합된 자성 나노복합체의 세포선택성을 확인하기 위해 표적세포와 반응하지 않는 이뮤노글로불린(IgG)을 위와 같은 방법으로 자성나노복합체와 결합하여 IgG-자성나노복합체를 제조하였다.
다. 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 제조
허셉틴-자성나노복합체는 상기 <실시예 3,다>에서 제조한 친수성 고분자의 말단 작용기가 카르복실기로 치환된 자성나노복합체를 0.5ml의 PBS 용액에 분산시켰다. 이 수용상 자성나노복합체를 pH 7.4의 인산 완충용액에 분산시킨 후 허셉틴 0.5 mg을 첨가하여 상온에서 4시간동안 반응시켰다. 반응이 끝난후 Sephacryl S-300 컬럼을 통하여 반응하지 않은 허셉틴과 수용상 자성나노복합체를 제거하여 허셉틴-자성나노복합체를 제조하였다. 그리고 항체와 결합된 자성 나노복합체의 세포선택성을 확인하기 위해 표적세포와 반응하지 않는 이뮤노글로불린(IgG)을 위와 같은 방법으로 자성나노복합체와 결합하여 IgG-자성나노복합체를 제조하였다.
< 시험예 1> 자성 나노복합체의 조영제로서의 가능성 확인
가. 친수활성성분 결합영역이 숙신이미딜기로 치환된 에멀젼형 자성 나노복합체의 조영제로서의 가능성 확인
친수활성성분 결합영역이 숙신이미딜기로 치환된 에멀젼형 수용성 자성 나노복합체의 자기 공명 영상 조영 효과를 확인하기 위하여, 상기 <실시예 1>에서 제조된 수용성 자성나노복합체를 적정하여 마이크로 튜브에 주입하였다. 자기공명영상의 조영효과를 보기 위해 1.5 T(Intera; Philips Medical Systems, Best, The Netherlands) 시스템을 사용하였으며, micro-47 코일을 이용하였다. Fast Field Echo(FFE) 펄스열을 가지고 관상면의 영상을 얻었다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TE = 20ms, TR = 400ms, 영상여기횟수 1, 영상획득시간 6 분. 항원 특이성에 대한 자기공명영상 조영효과의 정량적 평가를 위해 T2 맵을 시행하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TR = 4000ms, TE = 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160ms, 영상여기횟수 2, 영상획득시간 4분이었다. 도 15에서 도시한 바와 같이 수용성 자성 나노복합체의 농도가 높을수록 자기공명영상 신호가 증폭되는 것을 확인 할 수 있었다.
나. 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 에멀젼형 자성 나노복합체의 조영제로서의 가능성 확인
친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 에멀젼형 수용성 자성 나노복합체의 자기 공명 영상 조영 효과를 확인하기 위하여, 상기 <실시예 2>에서 제조된 수용성 자성나노복합체를 적정하여 마이크로 튜브에 주입하였다. 자기공명영상의 조영효과를 보기 위해 1.5 T(Intera; Philips Medical Systems, Best, The Netherlands) 시스템을 사용하였으며, micro-47 코일을 이용하였다. Fast Field Echo(FFE) 펄스열을 가지고 관상면의 영상을 얻었다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TE = 20ms, TR = 400ms, 영상여기횟수 1, 영상획득시간 6 분. 항원 특이성에 대한 자기공명영상 조영효과의 정량적 평가를 위해 T2 맵을 시행하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TR = 4000ms, TE = 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160ms, 영상여기횟수 2, 영상획득시간 4분이었다. 도 16에서 도시한 바와 같이 수용성 자성 나노복합체의 농도가 높을수록 자기공명영상 신호가 증폭되는 것을 확인 할 수 있었다.
다. 친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 서스펜션형 자성 나노복합체의 조영제로서의 가능성 확인
친수활성성분 결합영역이 카르복실기로 치환된 서스펜션형 수용성 자성 나노복합체의 자기 공명 영상 조영 효과를 확인하기 위하여, 상기 <실시예 3,다>에서 제조된 수용성 자성나노복합체를 적정하여 마이크로 튜브에 주입하였다. 자기공명영상의 조영효과를 보기 위해 1.5 T(Intera; Philips Medical Systems, Best, The Netherlands) 시스템을 사용하였으며, micro-47 코일을 이용하였다. Fast Field Echo(FFE) 펄스열을 가지고 관상면의 영상을 얻었다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TE = 20ms, TR = 400ms, 영상여기횟수 1, 영상획득시간 6 분. 항원 특이성에 대한 자기공명영상 조영효과의 정량적 평가를 위해 T2 맵을 시행하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TR = 4000ms, TE = 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160ms, 영상여기횟수 2, 영상획득시간 4분이었다. 도 17에서 도시한 바와 같이 수용성 자성 나노복합체의 농도가 높을수록 자기공명영상 신호가 증폭되는 것을 확인 할 수 있었다.
< 시험예 2> 유세포 분석을 통한 종양 특이성 자성 나노복합체의 암세포 선택성 확인
가. 유세포 분석을 통한 숙신이미딜기 -자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 암세포 선택성 확인
상기 <실시예4, 가>에서 제조된 허셉틴-자성 나노복합체의 유방암 표지 항원에 대한 결합특이성 및 효율을 분석하기 위하여 유세포 분석기를 이용하였다. 각각의 세포주에 대하여 일만 번의 이벤트를 측정하였다. 형광인덱스는 형광 강도 분포의 평균값과 중간값 범위를 이용하였으며 그 결과를 도 18에 도시하였다. 허셉틴-자성나노복합체 및 대조군 나노복합체 입자를 각각 HER2/neu 수용체를 발현하는 세포주(MDA-MB-231 세포주 << NIH3T6.7 세포주)에 처리한 후 전술된 바와 동일하게 FITC 중합된 이차항체와 반응시켜서 HER2/neu 수용체의 발현 정도가 증가함에 따라 형광 발현 강도도 증가하는 것을 확인할 수 있었다. HER2/neu 수용체 발현 정도가 낮은 MDA-MB-231 세포주의 경우는 대조군 나노복합체를 사용한 경우 보다 형광 발현 강도가 약간 증가하는 것을 볼 수 있었으며, 수용체 발현 정도가 증가함에 따라 형광 발현 강도도 점점 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
나. 유세포 분석을 통한 에멀젼형 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 암세포 선택성 확인
상기 <실시예4, 나>에서 제조된 허셉틴-자성 나노복합체의 유방암 표지 항원에 대한 결합특이성 및 효율을 분석하기위하여 유세포 분석기를 이용하였다. 각각의 세포주에 대하여 일만 번의 이벤트를 측정하였다. 형광인덱스는 형광 강도 분포의 평균값과 중간값 범위를 이용하였다. 허셉틴-자성나노복합체 및 대조군 나노복합체 입자를 각각 HER2/neu 수용체를 발현하는 세포주(MDA-MB-231, NIH3T6.7 세포주)에 처리한 후 전술된 바와 동일하게 FITC 중합된 이차항체와 반응시켜서 형광발현 여부를 유세포 분석기를 이용하여 확인하고 그 결과를 도 19에 나타내었다. HER2/neu 수용체의 발현 정도가 증가함에 따라 형광 발현 강도도 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
다. 유세포 분석을 통한 서스펜션형 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 암세포 선택성 확인
상기 <실시예4, 다>에서 제조된 허셉틴-자성 나노복합체의 유방암 표지 항원에 대한 결합특이성 및 효율을 분석하기위하여 유세포 분석기를 이용하였다. 각각의 세포주에 대하여 일만 번의 이벤트를 측정하였다. 형광인덱스는 형광 강도 분포의 평균값과 중간값 범위를 이용하였다. 허셉틴-자성나노복합체 및 대조군 나노복합체 입자를 각각 HER2/neu 수용체를 발현하는 세포주에 처리한 후 전술된 바와 동일하게 FITC 중합된 이차항체와 반응시켜서 형광발현 여부를 유세포 분석기를 이용하여 확인하고 그결과를 도 20에 나타내었다. HER2/neu 수용체의 발현 정도가 증가함에 따라 형광 발현 강도도 증가하는 것을 확인할 수 있었다.
< 시험예 3> 자기공명영상을 통한 종양 특이성 자성 나노복합체의 세포 선택성 확인
가. 자기공명영상을 통한 에멀젼형 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 암세포 선택성 확인
자기공명영상을 이용하여 상기 <실시예 4,나>에서 제조된 허셉틴-자성 나노복합체의 항원 특이성을 분석하기 위해 각각의 세포들을 PCR용 튜브로 옮긴 후 원심분리하여 세포를 가라앉혔다. 각 세포주들의 항원 특이성에 따른 자기공명영상의 조영효과를 보기 위해 1.5 T(Intera; Philips Medical Systems, Best, The Netherlands) 시스템을 사용하였으며, micro-47 코일을 이용하였다. Fast Field Echo(FFE) 펄스열을 가지고 관상면의 영상을 얻었고, 이를 도 21에 도시하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TE = 20ms, TR = 400ms, 영상여기횟수 1, 영상획득시간 6 분. 항원 특이성에 대한 자기공명영상 조영효과의 정량적 평가를 위해 T2 맵을 시행하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TR = 4000ms, TE = 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160ms, 영상여기횟수 2, 영상획득시간 4분.
도 21의 결과는 도 19에서 보여준 형광 발현 결과와 일치하여 HER2/neu 수용체 발현 정도가 점점 증가함에 따라 자기공명영상 신호가 점점 회색을 거쳐 검은색으로 나타나는 것을 확인하였다. 발현 정도가 낮은 세포주의 경우 대조군 나노복합체를 사용한 경우 보다 약간 어두운 색으로 변하는 것을 확인할 수 있으며 수용체 발현 정도가 증가함에 따라 점점 검은색으로 변해가는 것을 확인할 수 있었다. 이는 허셉틴-자성 나노복합체가 HER2/neu 수용체를 발현하는 세포주에 선택적으로 결합함으로써 자기공명영상 신호를 점점 검은색으로 나타내는 것으로 본 발명의 허셉틴-자성 나노복합체가 생체외 유방암 진단에 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.
나. 자기공명영상을 통한 서스펜션형 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 암세포 선택성 확인
자기공명영상을 이용하여 상기 <실시예 4,다>에서 제조된 허셉틴-자성 나노복합체의 항원 특이성을 분석하기 위해 각각의 세포들을 PCR용 튜브로 옮긴 후 원심분리하여 세포를 가라앉혔다. 각 세포주들의 항원 특이성에 따른 자기공명영상의 조영효과를 보기 위해 1.5 T(Intera; Philips Medical Systems, Best, The Netherlands) 시스템을 사용하였으며, micro-47 코일을 이용하였다. Fast Field Echo(FFE) 펄스열을 가지고 관상면의 영상을 얻었고 이를 도 22에 도시하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TE = 20ms, TR = 400ms, 영상여기횟수 1, 영상획득시간 6 분. 항원 특이성에 대한 자기공명영상 조영효과의 정량적 평가를 위해 T2 맵을 시행하였다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TR = 4000ms, TE = 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160ms, 영상여기횟수 2, 영상획득시간 4분.
도 22의 결과는 도 20에서 보여준 형광 발현 결과와 일치하여 HER2/neu 수용체 발현 정도가 점점 증가함에 따라 자기공명영상 신호가 점점 회색을 거쳐 검은색으로 나타나는 것을 확인하였다. 발현 정도가 낮은 세포주의 경우 대조군 나노복합체를 사용한 경우 보다 약간 어두운 색으로 변하는 것을 확인할 수 있으며 수용체 발현 정도가 증가함에 따라 점점 검은색으로 변해가는 것을 확인할 수 있었다. 이는 허셉틴-자성 나노복합체가 HER2/neu 수용체를 발현하는 세포주에 선택적으로 결합함으로써 자기공명영상 신호를 점점 검은색으로 나타내는 것으로 본 발명의 허셉틴-자성 나노복합체가 생체외 유방암 진단에 이용될 수 있음을 확인할 수 있었다.
< 시험예 4> 자성 나노복합체의 약물방출 거동 분석
가. 숙신이미딜기 -자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 약물방출 거동 분석
상기 <실시예4,가>에서 제조된 항암제가 봉입된 수용상 자성나노복합체에 대한 약물 방출실험은 UV를 이용한 적정곡선을 작성한 후 일정한 시간 간격으로 시료를 추출하여 농도를 측정하여 수행하였고, 그 결과를 도 23에 도시하였다.
나. 카르복실기-자성 나노복합체를 이용한 허셉틴-자성 나노복합체의 약물방출 거동 분석
상기 <실시예4,나>에서 제조된 항암제가 봉입된 수용상 자성나노복합체에 대한 약물 방출실험은 UV를 이용한 적정곡선을 작성한후 일정한 시간 간격으로 시료를 추출하여 농도를 측정하여 수행하였고, 그 결과를 도 24에 도시하였다.
다. 서스펜션형 허셉틴-자성 나노복합체의 약물방출 거동 분석
상기 <실시예4,다>에서 제조된 항암제가 봉입된 수용상 자성나노복합체에 대한 약물 방출실험은UV를 이용한 적정곡선을 작성한후 일정한 시간 간격으로 시료를 추출하여 농도를 측정하여 수행하였고, 그 결과를 도 25에 도시하였다. 약물이 물리적인 방법만으로 봉입된 경우(도25b)에는 초기 방출량이 많았으며, 화학적인 방법으로만 봉입된 경우(도25c)에는 방출 속도가 매우 느렸지만 선형적인 방출 거동을 보였다. 그리고 물리적인 방법과 화학적인 방법을 동시에 이용하여 항암제를 봉입한 경우 선형적이며 상대적으로 단시간에 100%에 가까운 약물 방출 거동을 보여주었다(도25a).
< 시험예 5> 자성 나노복합체의세포 독성 실험
제조된 자성나노복합체의 세포독성실험은 NIH3T6.7세포와 MDA-MB-231세포에 대해서 진행되었다. 순수 DOX, 순수 허셉틴, DOX와 허셉틴, 허셉틴-자성나노입자, IgG-자성나노복합체, 및 허셉틴-자성나노복합체에 대하여 세포 성장에 방해되는 정도를 비율로 나타내서 세포독성을 알아보았다. 96-웰에 4*103개의 세포를 주입하고 동량의 허셉틴과 DOX를 기준으로 하여 세포가 있는 웰에 삽입하였다. 4시간후 잔류 물질을 세척하고 72시간을 더 성장시켜 MTT 시약을 통해 얻은 세포독성을 도 26에 나타내었다. DOX가 봉입된 허셉틴-자성 나노복합체의 세포독성은 허셉틴과 DOX가 같이 작용한 경우보다(도26(i)) 높게 나타났고 나노입자를 이용하여 허셉틴과 DOX를 세포와 반응 시킨 경우보다도 매우 높은 세포 독성을 보였다. 그리고 허셉틴이 작용한 경우 NIH3T6.7세포주가 MDA-MB-231 세포주 보다 낮은 생존율을 보여, 세포선택성도 있음을 확인하였다. 이들 결과는 앞의 도2에서 명시한 봐와 같이 DOX가 봉입된 허셉틴-자성 나노복합체가 암세포를 선택적으로 상승적인 치료효과를 보일 수 있는 가능성을 보여주는 결과라고 할 수 있다.
< 시험예 6> 동물 모델을 통한 자성 나노복합체의 나노 조영제로서의 가능성 확인
자성나노복합체가 동물모델에서 암세포를 추적할 수 있을지를 알아보기 위해, 한그룹의 누드 마우스의 넓적다리에 NIH3T6.7세포를 임플란트하였다. 자기공명영상의 조영효과를 보기 위해 1.5 T(Intera; Philips Medical Systems, Best, The Netherlands) 시스템을 사용하였으며, micro-47 코일을 이용하였다. Fast Field Echo(FFE) 펄스열을 가지고 관상면의 영상을 얻었다. 구체적인 파라미터는 다음과 같았다: 해상도 156× 156㎛, 절편두께 0.6mm, TE = 20ms, TR = 400ms, 영상여기횟수 1, 영상획득시간 6 분이었다. 조영효과는 시간에 따라 확인하였으며 자성나노복합체 투입전(preliminary, Pre), 꼬리의 정맥에 투입직후(immediately, Immed), 4시간 후, 12시간 후 영상을 얻었고, 그 결과를 도 27 및 28에 나타내었다. 주입 후 12시간이 지난 후에도 누드 마우스의 넙적다리에서 매우 높은 조영효과가 나타나는 것을 확인 할 수 있었으며 허셉틴이 결합되어 있지 않은, IgG-자성 나노복합체의 경우 조영효과가 떨어지는 것도 확인 할 수 있었다. 이 결과로 허셉틴-자성 나노복합체가 암세포에 선택적으로 표적화 된다는 것을 확인 할 수 있었다.
본 발명에 따른 자성 나노복합체는 고민감도 자기공명영상 조영제로서, 특히 친수성 영역에 조직 특이적 결합 성분이 결합되어 있고, 소수성 영역에 약제학적 활성물질이 봉입 또는 결합되어 있어 다양한 질명의 동시 진단 및 치료용 조성물로 사용할 수 있다.

Claims (42)

  1. 자성 나노입자가 하나 이상의 소수성 영역과 하나 이상의 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물에 의해 둘러싸여 있고,
    상기 친수성 영역에 존재하는 하나 이상의 친수활성성분 결합영역이 조직 특이적 결합 성분과 결합되어 있으며,
    상기 소수성 영역에 약제학적 활성성분이 결합 또는 봉입되어 있는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  2. 제 1 항에 있어서,
    나노복합체는 하나 이상의 자성 나노입자가 소수성 영역에 분포된 코어 및 친수성 영역을 함유하는 셀을 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  3. 제 1 항에 있어서,
    나노복합체는 하나의 자성 나노입자가 소수성 영역과 결합된 코어 및 친수성 영역을 함유하는 셀을 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  4. 제 1 항에 있어서,
    자성 나노입자는 직경이 1nm 내지 1000nm인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  5. 제 2 항에 있어서,
    자성 나노복합체는 직경이 1nm 내지 500nm인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  6. 제 3 항에 있어서,
    자성 나노복합체는 직경이 1nm 내지 50nm인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  7. 제 1 항에 있어서,
    자성 나노입자는 금속, 자성 물질, 또는 자성 합금인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  8. 제 7 항에 있어서,
    금속은 Pt, Pd, Ag, Cu 및 Au로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  9. 제 7 항에 있어서,
    자성 물질은 Co, Mn, Fe, Ni, Gd, Mo, MM'2O4, 및 MxOy (M 및 M'는 각각 독립적 으로 Co, Fe, Ni, Mn, Zn, Gd, 또는 Cr을 나타내고, 0 < x ≤3, 0 < y ≤5)로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  10. 제 7 항에 있어서,
    자성 합금은 CoCu, CoPt, FePt, CoSm, NiFe 및 NiFeCo로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  11. 제 7 항에 있어서,
    금속, 자성 물질, 또는 자성 합금은 유기성 표면 안정제와 결합되어 있는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  12. 제 11 항에 있어서,
    유기성 표면 안정제는 알킬 트라이메틸암모늄 할라이드(alkyl trimethylammonium halide), 포화 또는 불포화 지방산, 트리알킬포스핀(trialkylphosphine), 트리알킬포스핀 옥사이드(trialkylphosphine oxide), 알킬아민(alkyl amine), 알킬티올(alkyl thiol), 소디움 알킬 설페이트 (sodium alkyl sulfate), 및 소디움 알킬 포스페이트 (sodium alkyl phosphate)로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  13. 제 12 항에 있어서,
    유기성 표면 안정제는 포화 또는 불포화 지방산 및 알킬아민(alkyl amine)로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  14. 제 1 항에 있어서,
    소수성 영역은 포화 또는 불포화 지방산, 또는 소수성 고분자인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  15. 제 14 항에 있어서,
    포화 지방산은 부티르산, 카프로산, 카프릴산, 카프릭산, 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 에이코사노산, 및 도코사노산으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  16. 제 14 항에 있어서,
    불포화 지방산은 올레산, 리놀레산, 아라키돈산, 에이코사펜타노산, 도코사헥사노산, 및 에르크산으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  17. 제 14 항에 있어서,
    소수성 고분자는 폴리포스파젠, 폴리락티드, 폴리락티드-코-글리콜라이드, 폴리카프로락톤, 폴리안하이드라이드, 폴리말릭산 또는 그 유도체, 폴리알킬시아노 아크릴레이트, 폴리하이드로옥시부틸레이트, 폴리카보네이트 및 폴리오르소에스테르, 소수성 폴리 아미노산 및 소수성 비닐계열 고분자로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  18. 제 17 항에 있어서,
    소수성 고분자는 중량평균분자량이 100 내지 100,000인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  19. 제 1 항에 있어서,
    친수성 영역은 생체친화성 고분자인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  20. 제 19 항에 있어서,
    생체친화성 고분자는 폴리알킬렌글리콜(PAG), 폴레에테르이미드(PEI), 폴리비닐피롤리돈(PVP), 친수성 폴리 아미노산 및 친수성 비닐계열 고분자로 이루어진 그룹 중에서 선택된 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  21. 제 19 항에 있어서,
    생체친화성 고분자는 중량평균분자량이 100 내지 100,000인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  22. 제 20 항에 있어서,
    폴리알킬렌글리콜은 폴리에틸렌글리콜인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  23. 제 22 항에 있어서,
    폴리에틸렌글리콜은 모노메톡시 폴리에틸렌글리콜인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  24. 제 1 항에 있어서,
    친수활성성분 결합영역은 -COOH, -CHO, -NH2, -SH, -CONH2, -PO3H, -PO4H, -SO3H, -SO4H, -OH, -NR4 +X-, -술포네이트, -니트레이트, -포스포네이트, -숙신이미딜기, -말레이미드기, 및 -알킬기로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 하나 이상이 기능기를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  25. 제 1 항에 있어서,
    상기 조직 특이적 결합 성분은 항원, 항체, RNA, DNA, 합텐(hapten), 아비딘(avidin), 스트렙타비딘(streptavidin), 뉴트라비딘 (neutravidin), 프로테인 A, 프로테인 G, 렉틴(lectin), 셀렉틴(selectin), 방사선동위원소로 표지된 성분, 및 종양 마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  26. 제 25 항에 있어서,
    상기 종양 마커는 리간드, 항원, 수용체, 및 이들을 코딩하는 핵산으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  27. 제 26 항에 있어서,
    상기 종양 마커는 시냅토타그민 I의 C2, 아넥신 V, 인테그린, VEGF, 안지오포이에틴 1, 안지오포이에틴 2, 소마토스타틴, 바소인테스티날 펩타이드, 암성 태아성 항원, HER2/neu 항원, 전립선 특이 항원 및 폴산 수용체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  28. 제 25 항에 있어서,
    상기 종양 마커와 특이적으로 결합할 수 있는 물질은 포스파티딜세린, VEGFR, 인테그린 수용체, Tie2 수용체, 소마토스타틴 수용체, 바소인테스티날 펩타이드 수용체, 허셉틴, 리툭산 및 폴산으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  29. 제 1 항에 있어서,
    소수성 영역은 구조 내에 하나 이상의 소수활성성분 결합영역을 가지는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  30. 제 29 항에 있어서,
    소수활성성분 결합영역은 -COOH, -CHO, -NH2, -SH, -CONH2, -PO3H, -PO4H, -SO3H, -SO4H, -OH, -숙신이미딜기, -말레이미드기, 및 -알킬기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상의 기능기를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  31. 제 1 항에 있어서,
    약제학적 활성성분은 항암제, 항생제, 호르몬, 호르몬길항제, 인터루킨, 인터페론, 성장 인자, 종양 괴사 인자, 엔도톡신, 림포톡시, 유로키나제, 스트렙토키나제, 조직 플라스미노겐 활성제, 프로테아제 저해제, 알킬포스포콜린, 방사선 동위원소로 표지된 성분, 계면활성제, 심혈관계 약물, 위장관계 약물 및 신경계 약물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  32. 제 31 항에 있어서,
    항암제는 에피루비신(Epirubicin), 도세탁셀(Docetaxel), 젬시타빈(Gemcitabine), 파클리탁셀(Paclitaxel), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라 틴(carboplatin), 택솔(taxol), 프로카르바진(procarbazine), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 디악티노마이신(dactinomycin), 다우노루비신(daunorubicin), 에토포시드(etoposide), 탁목시펜(tamoxifen) 독소루비신(doxorubicin), 미토마이신(mitomycin), 블레오마이신(bleomycin), 플리코마이신(plicomycin), 트랜스플라티눔(transplatinum), 빈블라스틴(vinblastin) 및 메토트렉세이트(methotrexate)로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  33. 제 1 항에 있어서,
    양친매성 화합물은 친수성 영역-소수성 영역-친수성 영역으로 이루어진 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  34. 제 33 항에 있어서,
    양친매성 화합물은 양 말단이 카르복시기로 치환된 폴리(에틸렌 옥사이드)-폴리(프로필렌 옥사이드)-폴리(에틸렌 옥사이드) 공중합체인 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체.
  35. 제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 따른 자성 나노복합체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물.
  36. A) 나노입자를 용매에서 합성하는 단계;
    B) 소수성 영역과 친수성 영역을 가지는 양친매성 화합물을 상기 나노입자 표면에 부가하여 양친매성 화합물과 나노입자를 결합시키는 단계; C) 상기 친수성 영역에 존재하는 친수활성성분 결합영역과 조직 특이적 결합 성분을 결합시키는 단계; 및
    D) 소수성 영역에 약제학적 활성성분을 결합하거나 봉입하는 단계를 포함하는 자성 나노복합체의 제조방법.
  37. 제 36 항에 있어서,
    나노입자를 용매에서 합성하는 단계 A)는
    a) 용매의 존재 하에 나노입자 전구체와 유기성 표면 안정제를 반응시키는 단계; 및
    b) 상기 반응물을 열분해하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체의 제조방법.
  38. 제 36 항에 있어서,
    단계 B)는
    a) 나노입자를 유기용매에 용해시켜 오일상을 제조하는 단계;
    b) 양친매성 화합물을 수성용매에 용해시켜 수용상을 제조하는 단계;
    c) 상기 오일상과 수용상을 혼합하여 에멀젼을 형성하는 단계; 및
    d) 상기 에멀젼으로부터 오일상을 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체의 제조방법.
  39. 제 36 항에 있어서,
    단계 B)는
    e) 상기 나노입자를 양친매성 화합물이 용해된 용액에서 분산시켜 현탁액을 제조하는 단계; 및
    f) 상기 현탁액으로부터 용매를 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체의 제조방법.
  40. 제 36 항에 있어서,
    단계 C)는
    g) 가교제를 사용하여 친수성 영역의 일부에 친수활성성분 결합영역을 제공하는 단계;
    h) 상기 친수활성성분 결합영역과 조직 특이적 결합 성분을 결합시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체의 제조방법.
  41. 제 36 항에 있어서,
    단계 D)는
    i) 가교제를 사용하여 소수성 영역의 일부에 소수활성성분 결합영역을 제공 하는 단계; 및
    j) 상기 소수활성성분 결합영역과 약제학적 활성 성분을 결합시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체의 제조방법.
  42. 제 36 항에 있어서,
    단계 D)는 양친매성 화합물과 나노입자를 결합시키는 상기 B) 단계에서 약제학적 활성 성분을 나노입자와 함께 용해시켜 봉입하는 것을 특징으로 하는 자성 나노복합체의 제조방법.
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Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009069959A2 (en) * 2007-11-30 2009-06-04 Korea University Industrial & Academic Collaboration Foundation A nanoparticle for separating peptide, method for preparing the same, and method for separating peptide using the same
WO2009102426A1 (en) * 2008-02-11 2009-08-20 University Of North Dakota Nanoaggregate composition and method for making
WO2010076946A1 (ko) * 2008-12-30 2010-07-08 경북대학교 산학협력단 나노입자체, 복합 나노입자체 및 이의 제조방법
WO2010131907A2 (ko) * 2009-05-12 2010-11-18 한국과학기술연구원 자기 집합체 고분자 나노입자를 이용한 sirna 전달 시스템
WO2011115342A1 (ko) * 2010-03-19 2011-09-22 강원대학교 산학협력단 소장의 조영을 위한 경구용 조영제
WO2012015125A1 (ko) * 2010-07-29 2012-02-02 연세대학교 산학협력단 파이렌 고분자를 이용한 자극 감응형 자성 나노복합체 및 상기 나노복합체를 포함하는 조영제 조성물
KR101142905B1 (ko) * 2009-11-27 2012-05-10 연세대학교 산학협력단 양이온성 양친매 고분자를 이용한 양이온성 자성 나노복합체 제조
KR20130085004A (ko) 2012-01-18 2013-07-26 (주)바이오니아 자성나노입자-SAMiRNA 복합체 및 그 제조방법
KR101580251B1 (ko) * 2015-04-14 2015-12-29 가톨릭대학교 산학협력단 Tpp-pcl-tpp 고분자 및 상기 고분자를 이용한 미토콘드리아 표적 나노약물전달용 조성물
KR20200084878A (ko) * 2017-11-04 2020-07-13 소나 나노테크 금속 나노입자 및 이의 제조 방법
WO2021075911A1 (ko) * 2019-10-16 2021-04-22 주식회사 퓨전바이오텍 약제 내성을 가지고 내부에 표면 개질된 금속 나노입자를 포함하는 마이셀, 이의 용도 및 제조 방법

Families Citing this family (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2008056827A (ja) * 2006-08-31 2008-03-13 Canon Inc 磁性粒子及びその製造方法
US20090169628A1 (en) 2006-10-17 2009-07-02 Armark Authentication Technologies, Llc Article and method for focused delivery of therapeutic and/or diagnostic materials
AU2007333220A1 (en) * 2006-12-08 2008-06-19 The Regents Of The University Of California Remotely triggered release from heatable surfaces
KR100924786B1 (ko) * 2007-06-28 2009-11-03 연세대학교 산학협력단 진단 및 치료용 자성 메탈 나노 복합체
KR100862973B1 (ko) * 2007-06-28 2008-10-13 연세대학교 산학협력단 표적부위자기약물전달과 조영제를 위한 양이온성 자성나노복합체
US20090104114A1 (en) * 2007-09-21 2009-04-23 Cytimmune Sciences, Inc. Nanotherapeutic Colloidal Metal Compositions and Methods
JP2011509312A (ja) 2007-09-25 2011-03-24 ザ テキサス エー アンド エム ユニバーシティ システム 制御された凝集体サイズを有する水溶性ナノ粒子
KR100957560B1 (ko) * 2007-10-18 2010-05-11 한국생명공학연구원 양자점 나노입자를 함유한 퍼플루오르카본 나노에멀젼 및그 제조방법
US9943490B2 (en) * 2007-11-05 2018-04-17 The Trustees Of Princeton University Composite flash-precipitated nanoparticles
WO2009088777A1 (en) * 2007-12-31 2009-07-16 Armark Authentication Technologies, Llc Article and method for focused delivery of therapeutic and/or diagnostic materials
KR101050401B1 (ko) * 2008-05-09 2011-07-19 경북대학교 산학협력단 이중 방식 ｐｅｔ／ｍｒ 조영제
KR101605578B1 (ko) 2008-05-16 2016-03-22 유니버시티 오브 시드니 중합체 마이크로겔 비드
US8709486B2 (en) 2008-05-16 2014-04-29 The University Of Sydney Administrable compositions
ES2458145T3 (es) 2008-05-16 2014-04-30 The University Of Sydney Perlas de microgel de polímero y método preparativo de las mismas
KR101043223B1 (ko) * 2008-05-20 2011-06-21 연세대학교 산학협력단 자성 나노 물질의 열방출량을 조절하는 방법 및 열방출나노 물질
US8916134B2 (en) 2008-07-11 2014-12-23 Industry-Academic Cooperation Foundation, Yonsei University Metal nanocomposite, preparation method and use thereof
US20100055803A1 (en) * 2008-08-29 2010-03-04 Kwangyeol Lee Method and apparatus for detecting molecules
JP5844156B2 (ja) * 2008-10-27 2016-01-13 アドヴァンテイジアス システムズ エルエルシーＡｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｌｌｃ 磁性ナノ粒子を用いた水の浄化
KR100891456B1 (ko) * 2008-11-06 2009-04-01 씨지케이 주식회사 생리활성물질에 대한 세포내 표적물질을 검출하는 방법 및 장치
JP5317673B2 (ja) * 2008-12-22 2013-10-16 株式会社東芝 油類吸着機能性粒子、及び油類処理方法
KR101072773B1 (ko) 2008-12-30 2011-10-11 경북대학교 산학협력단 산화망간 나노입자체에 생체적합성 리간드가 코팅된 나노입자체 및 이의 제조방법
WO2010098647A2 (ko) * 2009-02-27 2010-09-02 연세대학교 산학협력단 구조물의 변형 측정용 장치 및 이를 이용한 구조물의 변형 측정방법
KR101178512B1 (ko) 2009-06-25 2012-08-30 연세대학교 산학협력단 아연?함유 자성 나노 입자?기반 자기 센서
KR101072389B1 (ko) 2009-11-30 2011-10-11 재단법인대구경북과학기술원 양친매성 고분자를 포함하는 티올 민감형 약물전달체
KR101196667B1 (ko) * 2010-04-15 2012-11-02 포항공과대학교 산학협력단 피에이치 민감성 금속 나노 입자를 이용한 항암제 전달 시스템
WO2011150212A2 (en) 2010-05-26 2011-12-01 The General Hospital Corporation Magnetic nanoparticles
WO2011163136A2 (en) * 2010-06-21 2011-12-29 University of Washington Center for Commercialization Tuned multifunctional magnetic nanoparticles for biomedicine
US9555136B2 (en) * 2010-06-21 2017-01-31 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Coated magnetic nanoparticles
WO2011163661A1 (en) * 2010-06-25 2011-12-29 Massachusetts Institute Of Technology Implantable magnetic relaxation sensors and methods of measuring a sensor's cumulative exposure to a biomarker
BR112013002346A2 (pt) * 2010-08-05 2018-02-20 Hanwha Chemical Corp preparação de nanopartículas paragmagnéticas ou pseudoparamagnéticas de tamanho extremamente pequeno e uniforme com base em óxido de ferro e agentes de contraste t1 de irm usando o mesmo
KR101729554B1 (ko) * 2010-08-05 2017-04-24 한화케미칼 주식회사 매우 작고 균일한 크기의 산화철계 상자성 나노입자의 제조방법 및 이를 이용하는 ｍｒｉ ｔ１ 조영제
AU2013216619B2 (en) * 2010-08-05 2015-08-27 Hanwha Chemical Corporation Preparation of extremely small and uniform sized, iron oxide-based paramagnetic or pseudo-paramagnetic nanoparticles and mri t1 contrast agents using the same
KR101805873B1 (ko) 2011-08-03 2018-01-10 한화케미칼 주식회사 단당류 인산 또는 그 유도체로 표면이 개질된 친수성 나노입자, 그의 콜로이드 용액 및 그 용도
KR101709963B1 (ko) 2010-08-30 2017-02-24 한화케미칼 주식회사 산화철 나노캡슐, 산화철 나노캡슐의 제조방법 및 이를 이용한 ｍｒｉ 조영제
KR101642939B1 (ko) * 2010-08-31 2016-07-26 한화케미칼 주식회사 산화철 나노캡슐, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 자기공명영상진단 조영제
WO2012050810A2 (en) 2010-09-29 2012-04-19 The Board Of Trustees Of The University Of Alabama Shape-controlled magnetic nanoparticles as t1 contrast agents for magnetic resonance imaging
CN101966344B (zh) * 2010-10-29 2012-04-11 中国科学院上海硅酸盐研究所 一种具有磁性和发光性能的中空核壳纳米介孔载药体系及其制备与应用
KR101379971B1 (ko) * 2011-01-31 2014-04-10 고려대학교 산학협력단 생체 적합 온도 내에서 큐리 온도를 가지는 자성 나노입자 및 그 제조 방법
KR101142152B1 (ko) 2011-02-01 2012-05-21 서울대학교산학협력단 긴 소수성 사슬이 도입된 리간드로 코팅된 나노입자 및 이의 제조방법
KR101642903B1 (ko) 2011-02-09 2016-07-27 한화케미칼 주식회사 친수성 물질이 코팅된 산화철 나노입자의 제조방법 및 이를 이용하는 자기공명영상 조영제
TWI410253B (zh) * 2011-05-04 2013-10-01 Univ Nat Chunghsing 水溶性超順磁性群集奈米粒子之製造方法
WO2012151577A2 (en) * 2011-05-05 2012-11-08 Azte Arizona Technology Enterprises Techniques to increase r1 in nanoparticle contrast agents for mri
GB2491387A (en) * 2011-06-02 2012-12-05 Magnequench Ltd Rare earth material capsule used in making a magnet
KR101351331B1 (ko) * 2012-01-09 2014-01-24 한국세라믹기술원 표적지향적 약물전달을 위한 자성나노입자 및 이를 이용한 약물전달체의 제조방법
US9545456B2 (en) * 2012-02-22 2017-01-17 Tomowave Laboratories, Inc. Optoacoustic-ultrasonic contrast agents with enhanced efficiency
US9370490B2 (en) 2012-02-28 2016-06-21 Loma Linda University Methods for the production, modification and use of metallic nanoparticles
KR101355176B1 (ko) * 2012-03-22 2014-01-27 한국과학기술원 혈중종양세포 진단용 조성물 및 이를 이용한 혈중종양세포 검출방법
ITRM20120350A1 (it) * 2012-07-19 2014-01-20 Univ Degli Studi Milano Nanocostrutti con attività farmacologica.
KR101409296B1 (ko) 2012-09-07 2014-06-24 서울대학교산학협력단 자성 나노 입자의 선택적 활성화 방법 및 선택적 활성화되는 자성 나노 입자
KR101495652B1 (ko) * 2012-10-25 2015-02-25 재단법인대구경북과학기술원 코어 크로스링킹된 고분자 마이셀 화합물 및 이의 제조방법
WO2014074475A1 (en) * 2012-11-07 2014-05-15 Emmetrope Ophthalmics Llc Magnetic eye shields and methods of treatment and diagnosis using the same
TWI482782B (zh) 2013-05-31 2015-05-01 Univ Nat Chiao Tung 架接抗體之雙乳化核殼奈米結構
GB2516882A (en) * 2013-08-02 2015-02-11 Univ Bradford Tumour-targeted theranostic
JP6145612B2 (ja) * 2013-08-23 2017-06-14 国立大学法人 東京大学 高分子ナノ粒子複合体、及びそれを含むｍｒｉ造影用組成物
KR101725582B1 (ko) * 2013-08-30 2017-04-11 성균관대학교산학협력단 바닷물 내에서 안정한 나노입자 복합체를 포함하는 조성물 및 그 제조방법
CA2949609A1 (en) 2014-05-20 2015-11-26 Politecnico Di Milano Amphiphilic magnetic nanoparticles and aggregates to remove hydrocarbons and metal ions and synthesis thereof
CN107076741B (zh) * 2014-09-02 2020-11-24 美迪恩斯生命科技株式会社 生理活性物质负载用高分子微颗粒及其制备方法
WO2016143223A1 (ja) * 2015-03-09 2016-09-15 株式会社島津製作所 外部環境変化に対する耐性が向上した固定化プロテアーゼ
US10744208B2 (en) 2015-08-20 2020-08-18 Robert E. Sandstrom Method of attacking target cells
KR101686341B1 (ko) * 2015-08-26 2016-12-13 건양대학교산학협력단 약물 표적화를 위한 초상자성 산화철 나노입자의 제조방법
KR101710702B1 (ko) * 2015-09-02 2017-02-28 재단법인대구경북과학기술원 양친매성 고분자, 이의 제조방법, 및 이를 포함하는 기능성 복합체
US20170151347A1 (en) * 2015-11-29 2017-06-01 Berney PENG Functionalized nanoparticles with encapsulated cargo and method of their self-assembly
WO2017189356A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 University Of Florida Research Foundation, Inc. Magnetic particle conjugates, micelles, and methods of delivering agents
US11311630B2 (en) 2016-04-27 2022-04-26 University Of Florida Research Foundation, Inc. Magnetic particle conjugates, micelles, and methods of delivering agents
CN106290326B (zh) * 2016-07-21 2019-02-01 上海大学 检测脂多糖的比色传感器、其制备方法和应用
KR101963147B1 (ko) * 2016-09-29 2019-03-28 연세대학교 산학협력단 １ 나노몰 이하의 타겟 선택성을 갖는 정밀종양진단용 자기공명영상용 조영제 및 이의 제조방법
KR101882589B1 (ko) * 2016-12-28 2018-07-26 영남대학교 산학협력단 나노 복합체, 이를 포함하는 코팅용 조성물, 나노 복합체의 제조 장치 및 방법
JP6998004B2 (ja) * 2017-05-12 2022-01-18 株式会社Ｌｓｉメディエンス 生理活性物質担持用磁性粒子及びその製造方法
CN110501208B (zh) * 2018-05-17 2023-06-27 国家纳米科学中心 叶酸功能化的链霉亲和素修饰的磁性纳米颗粒、其制备方法和应用
ES2758400B2 (es) * 2018-11-02 2021-01-20 Univ Granada Nanoparticulas biomimeticas mediadas por mamc
KR102154264B1 (ko) * 2018-12-19 2020-09-09 한국세라믹기술원 양친매성 고분자를 이용한 소수성 비드의 표면 개질 방법
KR102249424B1 (ko) * 2019-09-19 2021-05-07 훠리스트 주식회사 미세조류 심바이오디니움 속으로부터 추출된 유효성분을 함유하는 자외선 차단용 조성물 및 그 제조방법
KR102379994B1 (ko) * 2019-10-22 2022-03-29 훠리스트 주식회사 새우난초의 난꽃 줄기 캘러스로부터 추출한 항산화, 항노화성 추출물을 피부 친화적 유효성분으로 하는 항산화, 항노화용 조성물
KR102298773B1 (ko) * 2020-02-07 2021-09-07 주식회사 녹십자엠에스 친수성 리간드와 항체가 표면에 접합된 나노입자의 제조방법, 이에 의해 제조된 나노입자, 그 나노입자를 포함하는 복합체, 및 그 나노입자를 포함하는 진단키트
US11826955B2 (en) 2020-07-24 2023-11-28 City University Of Hong Kong Magnetically-drivable microrobot
CN111983221B (zh) * 2020-08-19 2024-04-09 深圳市卓润生物科技有限公司 表面修饰磁珠及其制备方法和应用
WO2022177041A1 (ko) * 2021-02-19 2022-08-25 주식회사 녹십자엠에스 친수성 리간드와 항체가 표면에 접합된 나노입자의 제조방법, 이에 의해 제조된 나노입자, 그 나노입자를 포함하는 복합체, 및 그 나노입자를 포함하는 진단키트

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3709851A1 (de) * 1987-03-24 1988-10-06 Silica Gel Gmbh Adsorptions Te Nmr-diagnostische fluessigkeitszusammensetzungen
DE59403734D1 (de) * 1993-03-17 1997-09-18 Silica Gel Gmbh Superparamagnetische teilchen, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung derselben
US5543158A (en) * 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
US5565215A (en) * 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
WO1996003653A1 (de) * 1994-07-27 1996-02-08 Silica Gel Ges.Mbh Absorptionstechnik, Apparatebau Superparamagnetische teilchen, verfahren zur herstellung und deren verwendung
AU2003303954A1 (en) * 2002-10-25 2004-10-11 Emory University Multifunctional magnetic nanoparticle probes for intracellular molecular imaging and monitoring
JP2005000822A (ja) * 2003-06-12 2005-01-06 Fuji Clean Kogyo Kk マンホールの蓋部材用止着装置、浄化槽
WO2005065724A1 (en) * 2003-12-30 2005-07-21 Alnis Biosciences, Inc. Formulations of paramagnetic ion complexes
US20050260137A1 (en) * 2004-05-18 2005-11-24 General Electric Company Contrast agents for magnetic resonance imaging
KR100541282B1 (ko) * 2004-06-29 2006-01-10 경북대학교 산학협력단 초상자성 산화철계 나노입자를 이용한 간 조영제 및 그제조방법
KR100702671B1 (ko) * 2005-01-20 2007-04-03 한국과학기술원 스마트 자성 나노 스피어 제제 및 이의 제조방법
DK1945271T3 (da) * 2005-10-24 2020-01-13 Magsense Life Sciences Inc Fremgangsmåde til fremstilling af polymerbelagte mikropartikler

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009069959A3 (en) * 2007-11-30 2009-09-03 Korea University Industrial & Academic Collaboration Foundation A nanoparticle for separating peptide, method for preparing the same, and method for separating peptide using the same
WO2009069959A2 (en) * 2007-11-30 2009-06-04 Korea University Industrial & Academic Collaboration Foundation A nanoparticle for separating peptide, method for preparing the same, and method for separating peptide using the same
WO2009102426A1 (en) * 2008-02-11 2009-08-20 University Of North Dakota Nanoaggregate composition and method for making
WO2010076946A1 (ko) * 2008-12-30 2010-07-08 경북대학교 산학협력단 나노입자체, 복합 나노입자체 및 이의 제조방법
WO2010131907A2 (ko) * 2009-05-12 2010-11-18 한국과학기술연구원 자기 집합체 고분자 나노입자를 이용한 sirna 전달 시스템
WO2010131907A3 (ko) * 2009-05-12 2011-04-14 한국과학기술연구원 자기 집합체 고분자 나노입자를 이용한 sirna 전달 시스템
KR101142905B1 (ko) * 2009-11-27 2012-05-10 연세대학교 산학협력단 양이온성 양친매 고분자를 이용한 양이온성 자성 나노복합체 제조
WO2011115342A1 (ko) * 2010-03-19 2011-09-22 강원대학교 산학협력단 소장의 조영을 위한 경구용 조영제
WO2012015125A1 (ko) * 2010-07-29 2012-02-02 연세대학교 산학협력단 파이렌 고분자를 이용한 자극 감응형 자성 나노복합체 및 상기 나노복합체를 포함하는 조영제 조성물
KR20130085004A (ko) 2012-01-18 2013-07-26 (주)바이오니아 자성나노입자-SAMiRNA 복합체 및 그 제조방법
KR101580251B1 (ko) * 2015-04-14 2015-12-29 가톨릭대학교 산학협력단 Tpp-pcl-tpp 고분자 및 상기 고분자를 이용한 미토콘드리아 표적 나노약물전달용 조성물
KR20200084878A (ko) * 2017-11-04 2020-07-13 소나 나노테크 금속 나노입자 및 이의 제조 방법
WO2021075911A1 (ko) * 2019-10-16 2021-04-22 주식회사 퓨전바이오텍 약제 내성을 가지고 내부에 표면 개질된 금속 나노입자를 포함하는 마이셀, 이의 용도 및 제조 방법
KR20210045235A (ko) * 2019-10-16 2021-04-26 주식회사 퓨전바이오텍 약제 내성을 가지고 내부에 표면 개질된 금속 나노입자를 포함하는 마이셀, 이의 용도 및 제조 방법

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