KR101089198B1 - 아세틸화 히알루론산 함유 안용 의약조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명의 목적은 보다 장기간에 걸쳐 각막 상에 머물러 있는 보수효과를 발휘하는 드라이 아이용 안용 의약 조성물을 제공하는데 있다. 구체적으로는 아세틸화 히알루론산과 의약적으로 허용되는 담체를 함유하는 안용 의약 조성물을 제공한다. 바람직하게는 아세틸화 히알루론산의 평균 분자량은 10,000∼1,000,000이며, 아세틸기 치환수는 2.0∼4.0이다. 적절한 형태에 있어서, 상기 안용 의약 조성물은 드라이 아이의 치료 또는 예방에 이용되고, 보다 적합한 형태에 있어서는 그것은 드라이 아이용 점안제이다.

Description

아세틸화 히알루론산 함유 안용 의약조성물{MEDICINAL COMPOSITION FOR OPHTHAL USE CONTAINING ACETYLATED HYALURONIC ACID}

본 발명은, 아세틸화 히알루론산을 함유하는 보수성이 우수한 안용(眼用) 의약조성물에 관한 것이다.

고령화 사회의 도래, 또한, 텔레비전이나 워드프로세서, 퍼스널 컴퓨터 등의 OA기기의 보급에 따른 눈의 혹사에 의해, 눈의 건조, 즉 드라이 아이의 증상을 나타내는 환자 혹은 유사환자가 점점 증가하는 것으로 예상된다. 드라이 아이란 누액의 감소나 그 성분의 질적변화가 원인으로 눈의 표면이 건조하고, 상처 등의 장해가 생기는 질환이며, 눈이 아파지거나, 지치거나, 눈꺼풀이 떨리거나, 백목(百目)이 충혈되거나 하는 증상이 따른다. 또한, 상처로부터 세균이 침입하여 감염되거나, 상처가 깊어져서 시력이 저하될 우려도 있다. 드라이 아이의 원인은, 눈의 혹사의 이외에, 시글렌 증후군, 스티븐슨-존슨 증후군, 눈의 화상 및 외상, 혈압 강하제, 정신 안정제, 녹내증 치료용 점안제 등의 약에 의한 부작용 등, 여러가지이다.

드라이 아이의 치료에는 점안제의 점안이 유효하며, 현재 히알루론산을 주성분으로 하는 드라이 아이 치료용 안약이 주목되고, 자주 사용되고 있다. 히알루론산은 생체 유래의 고분자 물질이며, 높은 증점성, 점탄성, 방적성 등의 특이적인 물성, 및 지극히 높은 보수성을 갖고, 각종 피부 외용제 등에 보습제로서 사용되고 있다. 전신이 건조하다는 증상을 나타내는 시글렌 증후군에 있어서의 드라이 아이의 경우, 경도한 증상에는 이 히알루론산 함유 점안제의 점안만으로 유효하지만, 증상이 중독한 경우, 히알루론산 점안제의 점안으로는 충분한 효과를 볼 수 없고, 눈물길 플라그에 의한 눈물길 폐쇄라는 치료를 병용할 경우가 있다. 또한 히알루론산의 각막 상에서의 체류시간은 비교적 짧고, 히알루론산 점안제의 효과는 2∼3 시간 정도이며, 따라서 환자는 빈번하게 점안을 요하며(예를 들면 1일당 5∼10회), 번거롭다. 따라서, 장기간 보수효과를 지속하고, 그 결과 점안회수도 줄이고, 환자의 QOL(퀄리티ㆍ오브ㆍ라이프)을 향상시킬 수 있는 안용 의약조성물이 요구된다.

일본 특허공개 소62-64802호 공보는 히알루론산의 유도체, 상세하게는 카르복실기의 부분 에스테르화된 히알루론산을 개시하고, 그것이 안약 중의 약제의 담체로서 유효한 취지를 나타내고 있다. 그러나, 이러한 카르복실기 부분 에스테르화 히알루론산 유도체를 담체로서 함유하는 안약이, 장기간의 보수 효과유지를 요하는 드라이 아이용 안용 의약조성물에 유효할지는 확인되지 않고 있다.

본 발명은 보다 장기간에 걸쳐 각막 상에 머물어서 보수효과를 발휘하는 드라이 아이용 안용 의약조성물의 제공을 과제로 한다.

놀랍게도 본 발명자는, 히알루론산의 아세틸화 유도체를 안용 의약조성물로서 사용하면, 그 유도체는 동물 각막상피의 모델인 소프트 콘택트렌즈 상에서 히알루론산보다 오래 체류하는 것을 알았다. 따라서, 아세틸화 히알루론산 함유 안용 의약조성물은 히알루론산 함유 안용 의약조성물과 비교하여, 한층 장기간에 걸쳐 보습효과를 나타낼 수 있는 것을 알았다.

따라서, 본 발명은 아세틸화 히알루론산과 의약적으로 허용되는 담체를 함유하는 안용 의약조성물을 제공한다. 바람직하게는 아세틸화 히알루론산의 평균 분자량은 10,000∼1,000,000이며, 아세틸기 치환수는 2.0∼4.0이며, 특히 바람직하게는, 아세틸화 히알루론산의 평균 분자량은 약 100,000이며, 아세틸기 치환수는 약 3.3이다. 적절한 형태에 있어서, 상기한 안용 의약조성물은 드라이 아이의 치료 또는 예방에 이용되고, 보다 적절한 형태에 있어서는, 그것은 드라이 아이용 점안제이다.

본 발명에 따른 아세틸화 히알루론산 함유 안용 의약조성물은, 눈에 적용할 때 , 히알루론산 함유 안용 의약조성물과 비교해서 뛰어난 보수성을 발휘한다. 눈의 각막상피는 약 5층의 세포층으로 이루어지고, 피부의 각층과 유사한 부분이 있지만, 각막 최상층의 세포표면은 완전한 친수성이 아니고, 약간의 소수성을 나타내고 있다고 여겨지고 있다. 이 소수성은, 눈물막이 최상층의 유막, 중간층의 수층,및 각막상피와 접하는 최하층인 점액층의 3층 구조를 갖지만, 그 최하층에 다당류를 주성분으로 하는 점액성분인 무틴이 존재하는 것으로부터도 예측할 수 있다. 아세틸화 히알루론산은, 그 수산기의 아세틸화에 의해 히알루론산과 비교하여, 높은 소수성을 나타낸다. 따라서, 특별히 이론에 구속되는 것은 아니지만, 히알루론산과 비교해서의 아세틸화 히알루론산의 보수성의 장점, 즉 각막 상에서 아세틸화 히알루론산이 히알루론산보다 오래 체류할 수 있는 이유는, 각막층과 마찬가지로, 아세틸화 히알루론산도 약간의 소수성을 보이고 있기 때문이라고 생각된다. 또한 히알루론산은 그 친수성이 높기 때문에, 각막상피 조직으로부터 수분을 흡수하고 있을 우려도 있다. 그 점, 아세틸화 히알루론산은 히알루론산보다 친수성의 관점에서 약간 떨어지기 때문에, 각막상피 조직으로부터의 수분의 흡수력은 약한 것으로 생각된다.

본 발명에 있어서의 아세틸화 히알루론산은 히알루론산의 수산기를 아세틸화한 유도체이며, 상세하게는 하기의 구조식을 갖는다.

[화 1]

아세틸화 히알루론산은 당업자에 주지의 방법으로 제조할 수 있고, 그 방법은 예를 들면 일본 특허공개 평8-53501호 공보에 개시되어 있다.

바람직하게는, 본 발명에 있어서의 아세틸화 히알루론산은 분말상 히알루론산을 무수 초산용매에 현탁하고, 또한 농황산을 첨가해서 아세틸화함으로써 얻을 수 있다. 이 방법에 있어서는, 무수 초산용매에 초산을 혼합하고, 초산:무수산산의 혼합비를 1:4∼1:1이라고 하면, 아세틸화율의 높은 고도 아세틸화 히알루론산을 얻는 것이 가능하다. 또한 무수 초산용매에 초산을 혼합하고, 초산:무수산산의 혼합비를 2:1∼4:1로 하면, 아세틸화의 진행이 완화되고, 아세틸화율의 미세조정이 용이해 진다. 또한 용매에 대하여 농황산은 2∼7용량% 첨가시키는 것이 적절하다.

본 발명에 따른 아세틸화 히알루론산의 아세틸기 치환수는, 특별하게 한정되지 않지만, 바람직하게는 2.0∼4.0, 보다 바람직하게는 2.8∼3.8, 더욱 바람직하게는 3.0∼3.8이다. 가장 바람직하게는, 본 발명에 관한 아세틸화 히알루론산의 아세틸기 치환수는 약 3.3이다. 아세틸기 치환수가 지나치게 높으면 히알루론산이 원래 가지는 친수성에 근거하는 보수효과가 손상되고, 아세틸기 치환수가 지나치게 낮으면, 각막의 소수성과의 관계에서 예상되는 아세틸화 히알루론산이 가지는 소수성에 유래하는 보수 효과가 손상되는 것이라고 생각된다. 또, 히알루론산에는 상기 화학식 1에 나타내는 바와 같이 반복단위 중 4개의 알코올성 수산기가 존재하지만, 이들 중 몇 개가 아세틸기에서 치환되었는지를「아세틸기 치환수」는 의미한다.

상기 아세틸화 히알루론산은, 거친(粗) 아세틸화 히알루론산을 아세톤 수용액에 첨가하고, 유산 나트륨을 더해서 용해시키고, 또한 고농도 아세톤을 첨가함 으로써 고순도 아세틸화 히알루론산으로 정제할 수 있다. 또한, 상기 유산 나트륨은 아세톤 수용액에 대하여, 1∼3중량% 첨가되는 것이 적절하다.

본 발명에 있어서, 히알루론산이란 히알루론산 및 히알루론산염을 의미하고, 각종 분자량의 것을 사용할 수 있다. 특별하게 한정되지 않지만, 본 발명에 관한 아세틸화 히알루론산은 평균 분자량 1,000∼10,000,000, 바람직하게 10,000∼1,000,000이다. 가장 바람직하게는, 평균 분자량은 약 100,000이다.

본 발명의 안용 의약조성물 중의 아세틸화 히알루론산의 함량은, 해당 의약조성물의 총용적(또는 총중량)을 기준으로, 0.01∼10중량/용적(중량)%, 바람직하게 0.05∼5중량/용적(중량)%, 보다 바람직하게는 0.1∼1중량/용적(중량)%이다. 또한, 아세틸화 히알루론산 농도는, 액상의 눈세정제 및 점안제의 경우에는 중량/용적(w/v)%을 의미하고, 고체상의 눈연고제의 경우에는 중량/중량(w/w)%을 의미한다. 또한, 히알루론산 그 분자량에도 의존하지만, 보통 3%이상의 수용액에서는 그 점도가 지나치게 높아서 점안제로는 이용할 수 없지만, 아세틸화 히알루론산의 수용액은 10% 정도의 수용액으로 조제하는 것이 충분하게 가능하다.

본 발명의 안용 의약조성물의 pH는 중성부근이 바람직하고, 보통 pH6.5∼7.5로 한다. 침투압은, 0.5∼4.0 압비 정도로 조정하는 것이 바람직하고, 1.0∼1.5압비가 보다 바람직하다. pH나 침투압의 조절에는 안용 의약조성물에 관용되어 있는 수단이 이용된다.

본 발명에 관한 안용 의약조성물은 눈의 건조증상, 특히, 드라이 아이의 치료, 예방에 유효하다. 드라이 아이는, 눈의 혹사, 시그렌 증후군, 스티븐슨-존슨 증후군, 눈의 화상 및 외상, 혈압강하제, 정신 안정제, 녹내증 치료용 점안제 등의 약에 의한 부작용 등, 여러가지 요인에 의한 것일 수 있다. 본 발명의 안용 의약조성물은, 점안제, 눈세정제, 눈연고제 등의 제형으로서 사용된다.

본 발명의 안용 의약조성물은, 그 제형에 의존해서 관용의 의약적으로 허용되는 담체를 병용할 수 있다. 점안제 및 눈세정제의 담체로서는 관용의 점안제 및 눈세정제에 사용되는 것이라면 좋고, 정제수가 바람직하다.

본 발명의 안용 의약조성물에는, 임의적으로, 아세틸화 히알루론산 이외의 당질, 전해질, 아미노산, 비타민, 지질, 의약품 첨가물, 의약품 등의 각종 성분이 배합되어 있어서 좋다. 그러한 성분의 예에는, 예를 들면, 당류, 예를 들면 글루코오스, 말토스 등, 올리고당, 만니톨, 당알코올류, 예를 들면 소르비톨 등; 전해질, 예를 들면 염화나트륨, 인산수소나트륨, 염화칼륨, 황산마그네슘, 염화칼슘 등; 아미노산, 예를 들면, 글리신, 알라닌 등; 비타민류, 예를 들면, 염산티아민, 인산 리보플라빈나트륨, 염산피리독신, 니코틴산아미드, 엽산, 비오틴, 비타민A, L-아스코르빈산, α-글리코신아스코르빈산 및 그들의 유도체를 들 수 있고, 필요에 따라서 이들을 적당하게 조합시켜서 배합해도 좋다.

또한, 본 발명의 보수효과가 손상되지 않는 한, 일반적인 안용제제에 사용되는 첨가제, 예를 들면, 보존제, 예를 들면, 파라옥시벤조산메틸, 디히드로초산 나트륨, 염화벤잘코늄 등; 안정화제, 예를 들면, 에데트산나트륨, 아황산수소나트륨 등; 완충제, 예를 들면 붕사, 붕산, 탄산수소나트륨 등; 증점제, 예를 들면 메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 콘드로이틴황산, 폴리비닐알콜, 풀란 등; 용해보조제, 예를 들면 폴리솔베이트 80 등을 배합해도 좋다.

본 발명의 안용 의약조성물이 눈연고제일 경우, 관용의 의약적으로 허용되는 연고담체를 사용할 수 있고, 구체적으로는, 안용백색 바세린, 플러스티 베이스 등을 예시할 수 있다. 첨가제로서는, 유동 파라핀 등을 사용해도 좋다. 또한, 본 발명의 안용 의약조성물에는, 필요에 따라서, 메틸프레드니졸론 등의 스테로이드호르몬, 테트라사이클린 등의 항염증제, 페니실린G 등의 항생물질, 사이클로스포린 등의 면역 억제제, 면역 조절제, 진통제, 자기혈청, 히알루론산 등의 의약품을 적당하게 조합시켜서 배합해도 좋다.

본 발명의 안용 의약조성물의 용법ㆍ용량은, 환자의 증상에 따라 적절하게 조정할 수 있다. 점안제의 경우에는, 보통, 1회 수적, 예를 들면 1∼3, 4적(1적은 약 0.05ml 정도로 상정)정도를, 1일 1회∼수회, 예를 들면 1∼5회, 바람직하게는 1∼3회 정도 점안하면 좋다. 눈세정제의 경우에는, 눈세정 전용용기나 세정병 등을 사용해서 적용하여 1일 1회∼수회, 예를 들면 1∼5회, 바람직하게는 1∼3회 정도 세정하면 좋다. 눈연고제의 경우에는 1일 1∼3회 정도 적당량을 결막망 내에 도포해서 사용하면 좋다.

아세틸화 히알루론산을 사용함으로써 히알루론산 함유의 것과 비교하여, 보다 장기간에 걸쳐 각막 상에 머물어서 보수효과를 발휘하는 드라이 아이용 안용 의약조성물의 제공이 가능해 진다.

이하에 본 발명에 한정되지 않는 실시예를 제공한다.

실시예

본 연구에서는, 아세틸화 히알루론산(이하「AcHA」)의 드라이 아이 치료용의 안용 의약조성물에의 응용을 목표로 하고, 사람 혹은 동물각막의 대용으로서 소프트콘택트렌즈(SCL)를 사용하여, AcHA의 수분 증발억제 효과를 조사했다.

실험재료와 실험방법

각막의 대용으로서 사용한 SCL은, 티바비존(도쿄)의 포커스 데일리즈(1일용;직경 13.8㎜)로 했다.

실험에 이용한 SCL은, 생체적합성이 높고 수술 봉합실이나 인공혈관에 사용되고 있는 의료용 재료(폴리비닐ㆍ알코올, PVA)를 베이스로 한 하이드로젤인 nelfilcon A (넬필콘 A)로부터 만들어져 있다. 이 SCL은 높은 함수량(69%)을 유지하고, 충분한 산소투과량을 나타낸다. 이 때문에, 이 SCL은 생체 적합성이 높고, 각막과 친화성이 좋기 때문에, 본 연구와 같은 물성연구(수분증발량의 측정 등)에 사용하는 대용 각막으로서 적당하다.

대조 점안제로서 등장화 인산완충액(PBS)(달벳코 PBS(-)분말 「닛스이」에서 조제, 닛스이 제약(도쿄))을, 히알루론산(HA) 점안제로서 히알레인 O.1(히알루론산 나트륨 O.1중량/용적% 함유; 히알루론산의 평균 분자량: 600,000∼1,200,000;산텐제약(오사카))을 사용했다. AcHA 점안제는 AcHA(추정 평균 분자량 약 100,000, 아세틸화 치환수 약 3.5)을 PBS에 최종농도 0.1중량/용적%이 되도록 용해시켜서 조제했다.

AcHA는 다음과 같이 해서 조제했다.

300ml용의 유리 삼각 플라스크에 20ml의 시판의 특급초산 및 80ml의 무수초산을 넣고, 6g의 히알루론산(평균 분자량 약 1,200kd의 히알루론산, 시세이도(주)제)의 미세분말을 교반하면서 조금씩 첨가했다. 계속해서, 4ml의 농황산을 천천히 첨가하고, 실온에서 1시간 교반해서 아세틸화 반응을 행하게 했다. 반응액은 점조( 粘稠)한 백색액체로 되었다.

31의 글래스제 비이커에, 미리 21의 정제수을 넣어 두고, 교반하면서 상기 반응액을 실형상이 되도록 천천히 첨가했다. 발생된 아세틸화 히알루론산의 침전을 분취하고,침전은 또한 21의 정제수에서 2회 마찬가지로 세정했다. 상기 침전을 11의 글래스제 비이커에 옮기고, 80%(v/v) 아세톤 수용액 250ml 및 50% 유산나트륨 수용액 9g을 첨가하고, 교반하면서 침전을 완전히 용해시켰다. 계속해서, 아세톤 수용액 400ml를 천천히 첨가하여, 아세틸화 히알루론산의 겔상 침전을 재침전시켰다. 상기 침전을 분취한 후, 호모지나이저를 병용해 에탄올 1OOml를 이용하여 1OOO0rpm의 속도에서 1O분간의 세정을 2회 행했다. 다음으로 감압여과에 의해 침전을 분취한 후, 감압 건조하고, 아세틸화 히알루론산의 백색분말을 얻었다.

측정방법

SCL의 중량측정에는 메트라트렌사의 AG64 천평을 사용하고, 중량 데이터는 퍼스널 컴퓨터에 전송ㆍ보존했다. 데이터의 통계학적 검정에는, 데이터의 분포에 영향받지 않는 논파라메트릭 검정법을 사용했다.

실험(점안, 방치, 측정)은 습도 50%, 온도 25℃의 항온ㆍ항습실에서 행했다. 등장 인산완충액에 보존된 상태에서 포장되어 있는 SCL을 각각의 포장에서 치과용 핀셋으로 꺼내고, 미리 중량측정을 행하고 있는 플라스틱 페트리 접시의 덮개(직경30㎜)에 SCL의 볼록부를 위쪽으로 해 두고, SCL을 함유하는 페트리 접시의 중량을 측정하고, 그 후 즉시 SCL의 중심부에 20㎕의 샘플 점안제를 적하했다. 그 후에 20분 경과 후, SCL을 함유하는 페트리 접시의 중량을 측정하고, 그 후 즉시 SCL의 중 심부에 20㎕의 샘플 점안제를 다시 한번 적하했다. 이 측정과 샘플 적하를 20분 간격으로 합계 4회 반복했다. 최종 샘플 적하 후, 20분 간격으로, 실험 기새 후 120분까지 SCL중량을 측정했다.

실험결과

하기표 1에 나타나 있는 바와 같이 실험 개시 후 120분에서의 AcHA 점안제군의 SCL은, 대조 점안제군에 대하여도, HA점안제군에 대하여도, 유의로 그 수분증발량이 억제되었다.

결론

0.1%AcHA점안제는 SCL로부터의 수분증발을 유의로 억제할 수 있었다. 이 점으로부터, AcHA점안제는 드라이 아이 치료용의 점안제로서 응용되는 가능을 가지고 있는 것이 명확해졌다.

AcHA 점안제의 처방예

아세틸화 히알루론산 0.1g

염화벤잘코늄 0.002g

등장인산 완충액 적량

합계 100mL

또한, 이 처방에서는, AcHA는 0.1로부터 10g 정도까지 넣을 수 있다. AcHA 는 고분자량(약 10만)이기 때문에, 고농도에서도 점안제의 침투압비에 영향을 주지 않는 것으로 생각된다.

Claims (4)

1. 평균 분자량이 10,000∼1,000,000이며, 아세틸기 치환수가 3.0∼3.8인 아세틸화 히알루론산과 의약적으로 허용되는 담체를 함유하는 것을 특징으로 하는 안용 의약조성물.
2. 제 1항에 있어서, 드라이 아이의 치료 또는 예방에 이용되는 것을 특징으로 하는 안용 의약조성물.
3. 제 2항에 있어서, 드라이 아이용 점안제인 것을 특징으로 하는 안용 의약조성물.
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