JPS60226898A - 新規ゴナドリベリン誘導体およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、新規なゴナドリペリン銹導体並びの該誘導体
の製造方法に関する。

（発明の構成および効果） 更に詳しくは、本発明は一般式■： Ｇ　１　ｐ　Ｈｉ　ｓ　−Ｔ　ｒ　ｐ　−Ｓ　ｓ　ｒ　
−Ｔｙ　ｒ　−Ｘ　１−Ｘ　２−ＸＢ　−Ｐ　ｒ　ｏ　
−Ｘ　４（１） で表わされるゴナドリペリン誘導体、その医薬として使
用可能な酸との付加塩およびその複合体並びにそれらを
含有する医薬組成物に関する。

一般式Ｉにおいて、Ｘ、はグリシル基又は天然もしくは
合成アミノ酸基のＤ−異性体であシ、Ｘ２は側鎖に１〜
４個の炭素原子を有するＬ−アミノ酸基、Ｌ−フェニル
−アラニルもしくはＬ−トリプトフィル基を表わし、 Ｘ、はＣ４〜４アルキルもしくは０２〜４アルカノイル
−アミド側鎖を有するＬ−アミノ酸基を表わし、Ｘ４は
グリシンアミド又はＣ４〜４アルキルアミド基である、
但しＸ、がグリシル以外の基を表わし更にＸ２がトリプ
トフィルである場合はＸ、はロイシルでないことを条件
とする。

式中で使用される略記号はたとえばＪ、Ｂｉｏｌ。

Ｃｈｅｍ、　（２４１巻、５２７Ｊｊ（１９６６年））
において記載されているペプチド化学において認められ
ている命名法と同一である。

ゴナドリペリン（文献において知られている他の命名：
生殖腺刺激物放出ホルモン、ＧｎＲＨ１黄体形成ホルモ
ン及び卵黄刺激ホルモン、Ｉ４／ＴＳＨ）並びにその公
知の誘導体が黄体形成ホルモン（ＬＨ）及び卵胞刺激ホ
ルモン（ＦＳＨ）を放出し得ることは一般的性質である
。

８０年代の初期から、以下の内容が文献から知られてい
る。すなわちある種の魚及び鳥のゴナドリペリンは哺乳
動物のそれと構造的に異っている。

［：Ｊ、Ａ、キング及びＲ，Ｐ、ミラー、Ｊ、Ｂｌｏｌ
。

Ｃｈｅｍ、２５７．１０７２２−２８（１９８２）；５
ｏｕｔｈ−Ａｆｒｉｃａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　５
ｃｉｅｎｃｅ　７８　。

１２４（１９８２）；Ｎ、ジュワーウッド等、。

Ｐｒｏｅ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ　、８０　、２
７９４−２７９８（１９８３））−これらの相違は７位
及び／又は８位のアミノ酸において見い出される。

更に又以下の内容が文献から知られてい右。すなわちグ
リシンの代わシに６位にある種のＤ−アミノ酸を含有す
るゴナドリペリンのそれらの誘導体は本来のゴナドリペ
リンに比較し生物学的活性の増大が見られる（Ｊ、サン
ドウ等、Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆＯｖｕｌａｔｉｏｎ　、
　Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ　、　Ｌｏｎｄｏｎ　、　１
９７８年、４９〜７０頁）。

更に又以下の内容が知られている。すなわち１０位のグ
リシンアミド部分を、脂肪族炭素鎖を有するアミド基に
置換すると生物学的活性をよシ高いレベルにまで上昇さ
せる（Ｍ、フジノ等、Ｊ。

Ｍｓｄ　−Ｃｈｅｍ　−１６巻、１１４４〜１１４７頁
（１９７３年）〕。

本発明は、魚、鳥及び哺乳動物の繁殖方法に対し有効に
使用できる新規なゴナドリペリン銹導体を調製すること
をその目的とする。

加えて本発明は更に天然の物に比較しよシ生物学的活性
が増加した誘導体を更に提供する。

本発明は以下の知見に基づく。すなわち、ゴナドリペリ
ン分子の７位及び８位のアミノ酸を、他のアミノ酸に変
換すること並びにこれらの変換のある種の組み合わせが
各々魚、鳥及び哺乳動物の繁殖に対し適当であるゴナド
リペリン同族体をもたらす、ということである。

更に、本発明は以下の知見に基づく。すなわち７位及び
８位のアミノ酸を交換することによって得られるゴナド
リペリン誘導体の有効性が、グリシン及びグリシンアミ
ドの代わシに、各々６位にある種のＤ−アミノ酸並びに
１０位にアルキルアミド基を導入することによシ増加で
きる、ということである。

次式Ｉ： Ｇｌ　ｐ−Ｈｌ　５−Ｔｒ　ｐ−８ｓ　ｒ　−Ｔｙ　ｒ
−Ｘｌ　−Ｘ２−Ｘ３−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ｘ４（１） （式中、ｘｌ、ｘ２．ｘ３およびＸ４は先に定義した意
味と同じである°） で表わされるノナペプチドＣ４〜４アルキルアミドおよ
びデカペプチドアミド、およびその塩並びにそれらの複
合体は次の如く本方法発明に従って調製できる： ａ）固相ペプチド合成法を用い、適当に保護されたアミ
ノ酸を、カルがジイミド又は活性エステルを用い必要な
配列で固体ポリマ支持体に結合させ、次いで定められた
場合、調製ペグチドをアシドリス又はアミツリシスによ
シ該支持体から脱離させ、次いで所望によシポリマー支
持体からベグチドを脱離する前に又は脱離後にアミノ酸
の保護基をベグチドから同時に除去するか、又は ｂ）　可変アミノ酸成分の化学的特性に応じて適当に保
護されたアミノ酸からフラグメント縮合および段階的合
成の適当な組合わせを用い、所望の目的物質を組み立て
る。

ベンズヒドリルアミンもしくはＢｏａ−ゾロリン樹脂を
固体支持体として用いるのが有利である。

保護されたベグチドをフッ化水素を用いた処理によシお
よび／又はエチル−アンモノリシスにょシ樹脂から脱離
させるのが適当である。

変法ｂ）によれば、 次式■： Ｇｌｐ−Ｈｌｍ−Ｔｒｐ−８＠ｒ−Ｔｙｒ−Ｎ、　Ｑ［
）のペンタペプチドを、一般式■： ｘ　、−ｘ２−ｘＢ　−ｐ　ｒ　ｏ−Ｘ４（ＩＩＩ　）
のテトラ−もしくはペンタペプチドと縮合させるか又は
、 一般式■： Ｇｌｐ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｂａｒ−Ｔｙｒ−Ｘｌ−Ｎ３
（Ｆ／）のヘキサペプチドアジドを、一般式■：Ｘ２−
Ｘ、−Ｐｒｏ−Ｘ４（ｖ） のトリーもしくはテトラペプチドと縮合させるか、又は
一般式■： Ｇｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ−８ｓｒ−Ｔｙｒ−Ｘｌ　−Ｘ
２−Ｎ、ＣｖＤのへブタ被ブチドアシトを、一般式■：
Ｘ５−Ｐ　ｒｏ−Ｘ４　（■） （前記式■〜■中、ｘ、、ｘ２．ｘ５およびＸ４は先に
定義した意味を有する） のジーもしくはトリ硬プチドを縮合させることによシ新
規なノナ−もしくはデカーｅｆチド誘導体を調製するの
が好ましい。

所望ならば、得られ九ノナ−もしくはデカペプチドアミ
ドは、それを医薬的に使用できる酸と反応させることに
よシ酸の塩に変換することができるし、あるいは又所望
によシ、遊離塩基は塩基との酸付加塩から遊離にさせる
こと本でき、更に所望によシ得られたノナ−もしくはデ
カペプチドアミドを金属錯体に変換できる。

更に本発明は有効成分として一般式■の化合物及びそれ
らの塩並びに複合体を含有する医薬組成物にも関する。

医薬製剤は、通常式■の化合物又はその医薬として許容
され得る塩又は複合体の少なくとも一種を、医薬組成物
において通常用いられる単体及び／又は添加剤と混合し
次いで得られた組成物をたとえば錠剤、糖剤、カプセル
剤、坐剤、注射可能な液剤、経鼻スプレー剤等に製剤す
ることによシ調製される。

式Ｉのゴナドリベリン誘導体は、魚、鳥及び哺乳動物に
おいて０．１μ？〜５■の用量で筋肉内もしくは皮下内
に投与した場合効果的に使用できる。

本発明に係る化食物の主な利点は以下の点にある。すな
わち式ｌの新規なゴナドリペリン誘導体は魚及び鳥に特
徴的である７位及び８位におけるアミノ酸結合を有し、
これによシ該化合物はこれらの動物種の繁殖方法にも好
ましく用いることができる。

更に本発明の詳細は以下の実施例によシ非制限的に説明
される。

実施例１ないし５において化合物は固相手法（メリフィ
ールド、Ｒ−Ｂ　６　ｓ　Ｊ　−Ａｘｎ　ａ　Ｃｈ　ａ
ｍ　＠　Ｓ　ｏ　ｅ　＊８５巻、２１４９〜２１５１頁
（１９５３年））によジペプチドアルキル−アミドの場
合にはクロルメチル化、ｊ？　ＩＪスチレンジビニルベ
ンゼン樹脂を用いるか、又はイブチドアミドの場合には
ベンズヒドリルアミン樹脂を用いることによシ合成され
る。個々のアミノ酸はそれらのＮ−α−第三プチルオキ
シカル？ニル（Ｂｏｃ）誘導体として、ジシクロへキシ
ルカルデジイミド（ＤＣＣ）、　Ｎ　、　Ｎ’−ジイソ
プロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）又は活性エステル法
を用いて、樹脂に結合させる。所望によシ、アミノ酸の
反応性側鎖基は、適当な保護基により係挿される。

カップリング反応の完結は、ニンヒドリン試験によシ測
定する〔カイザー、Ｅ、、カレスコット。

Ｒ，Ｌ、、ボジングル、Ｃ，Ｄ、、及びタック、　Ｐ、
１．。

Ａｎａｌ、Ｂｌｏｅｈｅｍ、３４，５９５−５９８（１
９７０））。

もしも試験結果が陽性である場合、カップリング反応を
くシ返す。カップリングの期間は、アミノ酸に応じ１〜
１６時間の範囲で変化する。

ペプチドの保護解除並びにペプチドの分解は液体フッ化
水素（ＨＦ　）を用いて一工程で好ましく行なわれる（
　Ｓａｋｍｋｌｂａｒａ　、　Ｓ　＠　、　Ｓｈｉｍｏ
ｎｉｓｈｌ　、ｙ＋＋　。

Ｋ１＊ｈｉｄａ　、Ｙ、　、０ｋａｄａ　、Ｍ、　、及
びＳｕｇｉｋａｒａ　、　Ｈ，。

Ｂｕｌｌ、Ｓｏａ、Ｊａｐａｎ４０．２１６４−２１６
７（１９６７））。Ｎｉｍ　−シ＝　）　ｏ　７　エニ
ｋ　（ＤＮＰ）保護基を用いる場合、ＨＦ分解の前にヒ
スチジン側鎖からそれは除去される。保護ペプチド樹脂
は、数滴のプロピルアミンを含有するジメチルホルムア
ミド（ＤＭＦ）中で攪拌する。溶剤を除去した後、ペプ
チド樹脂を通常の方法でフッ化水素を用いて処理する。

ペプチドアルキルアミドタイプの化合物を調製する場合
、ペプチドは保護基の性質に応じ、アルキル−アンモノ
リシスによシ次いで水添分解によシ及び／又はアシドリ
シスによシ樹脂から分離される。

ＨＦ分解の後得られた粗製生成物を、溶離液として酢酸
溶液を用いセファデックスＧ−２５を充填したカラムを
用いてグル濾過に委ねる。

調製用高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）及び
／又はシリカゲルクロマドグ２フイーにょシを用い更に
精製を行なう。ペプチドの純度はアミノ酸分析及び薄層
クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によシ試験する。ＴＬＣ
Ｒ，−値は以下の混合溶剤を用いキーゼルグル（ＤＣ，
アルフロリン、メルク）フレートを用いて測定する： ６、ｎ−ブタノール／酢酸／水　４：１：　１７、ｉ−
プロΔノール／ＩＭ酢酸　２：１１０、メチルエチルケ
トン／酢酸／水　１２０：１５：２０（実施例） 例Ｉ Ｍ：１２４３ ａ）合成 １．２５ＳＬ（１ミリモル）のベンズヒドリルアミン樹
脂、ＨＣｔ［０，８ｍ＠ｑ／’！−）　（ピアルス）を
、塩化メチレン中２時間膨潤させ、次いでアミノ酸残基
を結合させるため次のスケジュールを用いる二以下余白 ２　ＣＨ２ＣＬ２中３３チ酸フッ化酢酸（ＴＦＡ）　１
３　ＣＨ２ＣＬ２中３３チＴ　ＦＡ　２５４　ＣＭ２Ｃ
２２，３回洗浄　１ ５　ＣＨＣＡ、　、　２回洗浄　１ ６　ＣＩ（ＧＬ３中１０チドリエチルアミン（ＴＥＡ）
。

２回　２ ７ＣＨＣ１３，２回洗浄　１ ８　エタノール、２回洗浄　１ ９　ＣＨ２Ｃｌ２．２回洗浄　１ １１　ＣＨ２Ｃｌ２．２回洗浄　ｊ １２　エタノール、２回洗浄　１ ＊Ｇｌｎは活性エステル法によシそのＢｏｃ−Ｇｌｎ−
ＯＮＰ（ｐ−二トロフェニル）誘導体として結合し；Ｇ
ｌｐの場合にはα−アミノ基は保護されない。

各サイクルの後（１２工程後）、ニンヒドリン試験用に
アリコートを採取し、もしも試験結果が陰性である場合
、次のサイクルを工程１から始め、もしも試験結果が陽
性である場合他のカップリング（工程５〜１２）を導入
する。

合成終了後、２．２８　ＰのＧｌｐ−Ｍｌ　ｓ（Ｔｏｍ
）−Ｔｒｐ−８ｏｒ（ＯＢｚｌ　）−Ｔｙｒ（ＯＢｓｌ
　）−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ　−−Ｇ１
７−ペプチド樹脂を得る。ΔＷ：１．０５Ｐ（６６％）
（Ｍ保護されたペプチド：１５７７） ｂ）　ＨＦ分解 保護されたペプチド（２，２８ｙ−）をアニソール（３
１Ｒ１）及びジテオトレイトール（１００〜）の存在中
古蒸留したフッ化水素（３０１１／）を用い６０分間、
０℃で処理する。フッ化水素を無水窒素ｆス気流中で除
去し、次いで樹脂を無水エーテル中に懸濁させ更に濾過
する。固体残留物を５０チ酢酸で洗浄し、次いで溶液を
３７℃で真空蒸発させる。蒸発された物質を直接ゲル濾
過に委ねる（下記の工程Ｃ）を参照）。

Ｃ）ゲル濾過 粗製ペプチド〔工程ｂ〕で得る〕を、５０％酢酸中１５
プ／時の流速でセファデックスＧ−２５カラム（２，５
Ｘ　１００ｃｒｎ）で精製する。分離は２８０ｎｍでの
ＵＶ吸収及びＴＬＣによシ監視する分画（３００〜３５
（１／）を集め次いで凍結乾燥する６収率：６９０ｍｇ
（５５％） ｄ）調！！！ｊ用ＨＰＬＣ ３０チ酢酸中２５％メタノールの溶液で平衡状態にある
。逆相Ｃ１１ｌ−結合シリカグルＩ、ＲＰ　−１（１３
〜２４　μｍ）　（ホワット−ｒ　７　）　ＦｌｆＪ＆
ＨＰＬｃカラム（２，５Ｘ４５ｃｒｎ）を用い更に精製
を行なう。

平衡後、２３０〜のグル濾過物質なカラムに充填する。

溶出は、流速２が７分のメタノール−３０チ酢酸（２５
〜４０％メタノール）の直線勾配システムを用い更に圧
力３．５Ｘ１０Ｐａを用いて行なう。分画の濃度を２８
０　ｎｍで測定し更に’ｆ’Ｌｃにより監視する。生成
物の採集及び凍結乾燥はＤ−Ｐｈｅ’　、　Ｇ１ｎ８−
ＧｎＲＨ１３３１Ｑを与える。絶対是は、ダル藷遇物質
６９０ｍｇに対し正常化のため二倍だけ増加させるべき
である（３９９ｍｇ、３２チ）。

Ｒｆ−０，７６；ｎ’、　＝０．６８　；Ｒ，＝０．３
３　；ａ：＝ｏ、９３；Ｒ８−０，８３゜ アミノ酸分析： Ｂａｒ　Ｏ，９３，Ｇｌｕ　１．９６．Ｐｒｏ　Ｏ，９
５，Ｇｌｙ　１．０２゜Ｌｅｕ　１．００．Ｔｙｒ　１
．０１．Ｐｈｓ　１．０２．Ｈｌｓ　Ｏ，９９゜融点：
１７５〜１７８℃；〔α）＝−６８，０°（ｃ＝Ｏ，１
、０，１ＭＡｅＯＨ）　。

例２ Ｔｒｐ’　、　Ｇ１ｎ８−ゴナドリベリンの調製Ｍ：１
２２６ ａ）合成 ２．５Ｆ（１ミリモル）のベンズヒドリルアミン樹脂、
ＨＣＬ　（０，４ｍａｑ／？　）を塩化メチレンに膨潤
させ、次いで３．６２９−のＧｌ　ｐ−Ｈｌ　ｓ　（Ｄ
ＮＰ）−Ｔｒｐ−−８＠ｒ（ＯＢｚｌ　）−Ｔｙｒ−Ｇ
ｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ペプチド樹脂
を例１　／　ａに従って調製する。

ΔＷ：１．１２Ｌ？（７６％）（Ｍ保護ペプチド：１４
６Ｂ）。

ｂ）保護解除及び樹脂からペプチドの分解ＤＮＰ基の分
解 保護されたデカペプチド樹脂（３，６２ｐ）を２０１の
ＤＭＦ及び１１のプロピルアミン中６０分間室温で攪拌
し、次いで部分的に保護されたペプチド樹脂を濾別し、
塩化メチレンで洗浄し次いでエタノールで洗浄し最終的
に真空乾燥する。

フッ化水素分解 ＤＮＰ−保護基を除去した後、ペプチドを例１／ｂに従
いフッ化水素を用いて処理する。この様にして０．８Ｆ
（６！１１）の粗製デカペプチドアミドを得る。

Ｃ）グル濾過 例１　／　ｃに従いグル濾過を行なう。収率：５２０１
ｎ９（４２％）。

ｄ）調製用ＨＰＬＣ ＬＲＰ　−１グルを３０チ酢酸に溶解した１８％メタノ
ール溶液で等張化した以外は例１／ｄに従いプルセスを
行なう。粗製グル濾過物質を、メタノール−３（ｌ酢酸
（１８〜３５チメタノール）の直線勾配システムによシ
カラムから溶出させる。

かくして３８０１ｎ９（３１％）の純粋なペプチドな得
る。

Ｒ；＝０．６６；Ｒ；−０，５７；Ｒ；＝０．７８゜ア
ミノ酸分析： Ｂａｒ　Ｏ，９３，Ｇｌｕ　１．９３．Ｐｒｏ　１．０
０．Ｇｌｙ　２゜０４゜Ｔｙｒ　Ｏ，９８，Ｔｒｐ　１
．８６．Ｈｌｍ　１．０３゜例３ Ｔｒｐ’　、Ｌｅｕ’　、ｄａｓＧｌｙ”−ゴナドリペ
リンエチルアミンの調製 Ｍ：１１９８ ａ）合成 りｅｅ　−Ｐｒｏ−樹脂を、メリーフィールド法〔メリ
ー７４−ｈドｖ　Ｒａ　Ｂ　ｅ　ＨＪ　＠　Ａｚｎ　＠
　Ｃｈ＠ｗ　＠　Ｓｏ　ｃ　＠　８６巻３０４頁（１９
６４年〕〕に従い調製する。２．０？（１ミリモル）の
Ｂｅｅ　−Ｐｒｏ−樹脂（０，５ｍ５ｑ／？）を２時間
膨潤させ、次いで適当なアミノ酸を・例１／暴に従い次
々に樹脂に結合させる。最後のサイクルの後、３．０２
ｆのＧｌ　ｐ−Ｈｌ　ｓ　（ＤＮＰ）−Ｔｒｐ　−−８
＊ｒ（ＯＢｇｌ　）−Ｔｙｒ（ＯＢｚｌ　）−Ｇｌｙ−
Ｔｒｐ−Ｌｓｕ−Ｐｒｏ　−ノナペプチド樹脂を得る。

ΔＷ：１．０２Ｆ（８３ｑｂ）（’保護ペプチド：　１
４８６）。

ｂ）保脇解除及び樹脂からペプチドの分解まずＤＮＰ保
護基を例２／ｂに従って除去する。

次いで部分的に保護されたペプチドをそのエチルアミン
の形として樹脂から脱離させる〔コイ、Ｄ。

Ｈｏ等、　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　１３巻、３２３
〜３２６頁（１９７４年）〕。この目的に対しペプチド
樹脂を１５１の濃エチルアミンと共に０℃で３時間攪拌
する。過剰のエチルアミンを窒素気流中で除去する。残
留物をエタノール及びＤＭＦで洗浄し、次いで濾過する
。濾液を真空蒸発させ、残留物をエーテルで処理し次い
で固体物質を濾過する。ペプチドの完全な保護解除は、
例１／ｂに従い無水フッ化水素を用いて処理することに
よって行なう。

収率ニア１０ｍ９（５９チ） Ｃ）グル濾過 ノナペプチドエチルアミドを例１　／　ｃに従い３０チ
酢酸中セファデックスＧ−２５カラムに導入する。収率
：４９０■（４１チ）。

ｄ）シリカダルクロマトグラフィー 粗製ペゾテドを、キーゼルグル６０，２Ｘ１００ｃｍ　
（２３０〜４００メツシユ、メルク）のカラムを用い酢
酸エチル、ピリジン、酢酸及び水の３ｏ：２０：６：１
１混合物中流速８１／時で精製する。

４１の分画を集め次いで溶出をＴＬＣによシ監視する。

純粋な物質を含有する分画を蒸発させ、次いで凍結乾燥
する。収率：３２０ｔｎｇ（２６チ）、Ｒ；＝０．６１
　；Ｒｆ−０，４２；Ｒ，−０，７５。

アミノ酸分析： ８ｅｒ　Ｏ，８９、Ｇｉｎ　Ｏ，９６，Ｐｒｏ　Ｏ，９
５，Ｇｌｙ　Ｏ，９７゜Ｌｅｕ　１．００．Ｔｙｒ　１
．０２．Ｔｒｐ　１．８８．Ｈｌｍ　１．０３゜例４ Ｐｈｅ　、　Ｇｌｎ　−ゴナドリペリンの調製Ｍ：　１
１８７ ＆）合成 １．２５Ｆ（１ミリモル）のベンズヒドリルアミン、Ｈ
Ｃ１樹脂（０，８ｍｅｑ／ｆ　）を塩化メチレン中２時
間膨潤させ、次いで例１　／　ａに従い２．９１のＧｌ
ｐ−Ｈｌｓ（Ｔｏｓ）−Ｔｒｐ−８＠ｒ−（ＯＢｚｌ）
−Ｔｙｒ（ＯＢｚｌ　）−−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｇｉｎ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−”４ゾチド樹脂を調製する。

ΔＷ：１．２７ＰＣ８３％）（Ｍ保賎ペプチド：１５２
１）ｂ）フッ化水素分解 保護ペプチドを例１／ｂに従い無水フッ化水素で処理す
る。かくして９８０■（８２％）の保護解除された物質
を得る。

Ｃ）ダル濾過 粗製デカペプチドアミドを、例１　／　ｃに従い２Ｍ酢
酢酸上セファデックスＧ−２５カラムを用いて精製する
。収率：５７６ｒｎｇ（４９チ）ｄ）調製用）ＩＰＬＣ ＬＲＰ　−１グルを２０チ酢酸中の１０％メタノール溶
液を用いて平衡化する以外は、例１／ｄの方法に従って
プロセスを行なう。溶出はメタノール−２０チ酢酸（１
０〜２５チメタノール、１５０〜１５　Ｑ＋ｎＪ）の直
線勾配システムを用いて行ない、次いで該方法を２５〜
４０チメタノールー含有直線勾配システム（各々１５０
−１５０ｍ１１１）を用いて継続する。純粋なペプチド
を含有する分画を集め次いで蒸発させる。収率：４４８
＃Ｉｌｉ＋、（３８チ）。

ｕ７＝ｏ、ｔ　２　、　Ｒ，−０，７、Ｒ，−０，２４
、Ｒｆ＝０．８７　。

アミノ酸分析： Ｓ＠ｒ　Ｏ，８７，Ｇｉｎ　２．０５．Ｐｒｏ　１．０
３．Ｇｌｙ　２．１３゜Ｔｙｒ　Ｏ，９２，Ｐｈｓ　１
．００．Ｈｌｓ　Ｏ，９５，Ｔｒｐ　Ｏ，８１−融点＝
１８２℃。

例５ Ｐｈ・　、　Ｌ＠ｕ　−ゴナドリペリンの調製Ｍ：１１
７２ ａ）合成 ０、６２　Ｆ　（０，５ミリモル）のベンズヒドリルア
ミン、ＨＣＬ樹脂（０，８ｍｅｑ／ｉ）を塩化メチレン
中２時間膨潤させ、次いで例１　／　ａに従い１．３３
Ｐの　Ｇｌｐ−Ｈｌｓ（Ｔｏｓ）−Ｔｒｐ−８ｓｒ（Ｏ
Ｂｚｌ）’Ｔｙｒ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌａ
ｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ペプチド樹脂を合成する。

ΔＷ：６９５即（９２チ）（Ｍ保護ベグチド：１５０６
）ｂ）７．化水素分解 保護ペプチドを例１／ｂに従いフ、化水素を用いて処理
する。かくして５１０〜（８７％）の粗製デカペプチド
を得る。

Ｃ）グル濾過 工程ｂ）で得られた粗製デカペプチドアミドを２Ｍ酢酢
酸上セファデックスＧ−２５カラム充填し次いで例１　
／　ｅに従い精製する。

収率：３６３ダ（６２％）。

ｄ）シリカゲルクロマトグラフィー 被ゾチドを、ｎ−ブタノール、酢酸、水及び酢酸エチル
１：１：１：１混合物中キーゼルグル６０（２ｘｌＯＯ
ｃｒｎ）のカラムを用いて更に精製する。

分画の含料を２８０　ｎｍでかつＴＬＣによシ監視する
。

かくして２９９即（５１チ）の純粋なデカペプチドアミ
ドを荀る。

− Ｒｆｏ、５５；Ｒ４０，３９＊Ｒｒ”’０．６２；Ｒｔ
＝０．７３−アミノ酸分析： Ｓｅｒ　Ｏ，９１、Ｇｌｕ　Ｏ，９７，Ｐｒｏ　１．０
７　、Ｇｌｙ　２．１２゜Ｌｅｕ　１．００．Ｔｙｒ　
１．０３．Ｐｈｅ　Ｏ，９４，Ｈｌｇ　１．０５゜例６ Ｄ−Ｐｈｅ　、Ｇｉｎ　、ｄ＠５Ｇ１ｙ”ゴナドリベリ
ンエチルアミドの調製 Ｍ：１１９８ ａ）　Ｂｏｃ−Ｈｌｓ（ＤＮＰ）−Ｔｒｐ　−０Ｍ５Ｍ
：６２３ ２１．１２Ｆ−（５０ミリモル）のＢＯ６−Ｈｌ　ｍ（
ＤＮＰ）−ＯＨを１００−のＤＭＦに溶解し次いで溶液
を０℃に冷却する。しかる後１０．３２ＰＣ５０ミリモ
ル）のＤＣＣＩ及び７．６６ｉ（５０ミリモル）のＮ−
ヒドロキシ−ベンズトリアゾールを攪拌しながら添加す
る。混合物を０℃で１０分間攪拌し次いで沈殿シたジシ
クロヘキシル−ウレアを濾別する。

１２．７４％（５０ミリモル）のＨ−Ｔｒｐ　−ＯＭｅ
、ＨＣｔを７ＱｄのＤＭＦに溶解し次いで溶液を０℃に
冷却する。６９３１１／（５０ミリモル）のトリエチル
アミンを添加し１次いで５分間攪拌した後沈殿トリエチ
ルアギン塩酸塩を濾別する。

二個の溶液を一緒にし次いで０℃で一夜攪拌する。しか
る後沈殿したＤＣＵを一別し次いで溶液を蒸発乾固する
。油状残留物を酢酸エチル５００１に溶解し１００ｍ１
／の水冷却Ｉ　Ｍ　ＫＨ８Ｏ４溶液を用いて三回振とう
し、更に飽和ＮａＨＣＯｘ　１００　ｖｌで五回更に最
終的に１０チＮａＣＬ溶液１００ゴで二回振とりする。

有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、だ・７遇し次いで
蒸発乾固する。得られた油状物質を石油エーテルで粉末
化し、濾過し次いで乾燥する。

得られた結晶生成物は石油エーテルを含有する酢酸エチ
ルから再結晶できる二双率：２７．７Ｆ（８９％） 融点＝１１９〜１２２℃；〔α〕二２＝＋１４．１゜（
ｅ＝１．ＤＭＦ）。

村＝０．６２゜ ｂ）　Ｈ−Ｈｌｓ（ＤＮＰ）−Ｔｒｐ−ＯＭｅ、２Ｈ１
，ｔＭ：５２２．５（遊離塩基）；５９５（−２ＨＣｔ
）２４．９ＰＣ４０ミリモル）のＢｏａ−Ｈｌｓ（ＤＮ
Ｐ）−〇Ｍｅジペゾチドを１００ｄのメタノールに溶解
し次いで１００１の４ｎメタノール性塩酸溶液を添加す
る。混合物を室温で３０分放置し、この間ジイグチド塩
酸塩が結晶化する。結晶を濾別し、エーテルで洗浄し次
いで乾燥する。収率：２１．９１ｆＦ（９２％） 融点：１９８〜２０２℃；〔α式２＝０．４９°（（Ｂ
＋＝１、ＤＭＦ）。

Ｒ；＝０．４６　、　Ｒｆ−０，１８。

ｃ）　Ｇｌｐ−Ｈｉｓ（ＤＮＰ）　−Ｔｒｐ　−ＯＭｅ
−Ｍ　：　６３４ ・４．８５ｐ（３６，８ミリモル）のＬ−ピログルタミ
ン酸、７．５８Ｆのジシクロへキシル−カルデジイミド
及び５．６３７のＮ−ヒドロキシ−ベンズトリアゾール
を１００−のＤＭＦに溶解する。混合物を５〜１０℃で
１０分間攪拌し、しかる後沈殿したＤＣＵを濾別する。

２０．８４ＰＣ３５ミリモル）のＨ−Ｈｌｍ（ＤＮＰ）
−Ｔｒｐ　−ＯＭｅ　、　２　ＨＣＬを１００−のジメ
チルホルムアミドに溶解し、次いで９．７２１／（７０
ミリそル）のトリエチルアミンを該溶液に添加する。５
分間攪拌した後沈殿したトリエチルアミン塩酸塩を濾別
する。２個の溶液を一緒にし次いで室温で一夜攪拌する
。次いで９０１のアセトンを混合物に添加し次いで沈殿
した不溶性物質を濾別する。

溶液を蒸発させ油状物質を得、これを酢酸エチルで砕き
、濾過し次いで乾燥する。乾燥結晶性物質を２５１の水
で三回洗浄し次いで乾燥する。生成物は熱酢酸エチルに
溶解し次いで冷却することによシ結晶化できる。収率：
ｘｓ、４２ｙ（ｓａ、ｔ％）融点：１４８〜１５１℃；
〔α）　−＋５．２（ｅ＝１゜ＤＭＦ）。

脣＝０．５３　、　Ｒ，−０，３８。

ｄ）　Ｇｌｐ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−ＯＭｅＭ：４６６ １５．８４ｉ（２５ミリモル）のＧｌｐ−Ｈｌｍ（ＤＮ
Ｐ）−Ｔｒｐ−ＯＭ＠保設トリペプチドを１００−のＤ
ＭＦ及び４０ＷＬｌの水の混合物に溶解する。４１のメ
ルカプト−エタノールを添加し次いで溶液の声をトリエ
チルアミンで８に調節する。室温で３０分間放置し１次
いで真空下で蒸発乾固する。油状物質をエーテルで砕き
、濾過し次いで乾燥する。得られた生成物を少量のメタ
ノールに溶解し次いでエーテルを添加して再結晶する。

沈殿した結晶を濾別し次いで乾燥する。収率：１０．９
２ＰＣ９３，６チ）。融点：２２８〜２３２℃；〔α九
＝＋４．０４゜（ｃ＝０．４２．ＤＭＦ）。

Ｒ７＝ｏ、３ｏ。

ｅ）　Ｇｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ　−Ｎ２Ｈ。

Ｍ：４６６．５ ９．３３ｔ（２０ミリモル）のＧｌｐ−Ｍｌ　ｍ−Ｔｒ
ｐ−ＯＭ・トリペプチドを２５０１１／のメタノールに
溶解する。２０ｍ１７のヒドラジン水和物を該溶液に添
加する。反応混合物を４０℃で３時間攪拌し引き続き室
温で一夜攪拌する。沈殿物質を濾別し、冷メタノールで
洗浄し次いで乾燥する。収率ニア、５Ｂ）（８１，２チ
）。

融点：１６６〜１６９℃；〔α）２２＝　２２．３（ｃ
−Ｏ，５、ＤＭＦ　）　。

Ｒ，−０，５０、Ｒｉ＝０．１４　。

ｆ）　Ｇｌｐ−Ｈｌｍ−Ｔｒｐ−Ｂａｒ−Ｔｙｒ−ＯＭ
ｅＭニア１７ 工程・で得られた７、０ｙ−（１５ミリモル）のＧ　１
　ｐ　Ｈｉ　ｓ　−Ｔ　ｒ　ｐ−Ｎ２Ｈ５を、５Ｑｓｌ
のＤＭＦに溶解する。

溶液を０℃に冷却し次いで７．５Ｍ１（４５ミリモル）
の６ｎ塩酸溶液を攪拌しながら添加する。しかる後１．
０３５Ｆ（１５ミリモル）の亜硝酸ナトリウムを製水性
溶液として混合物に滴下し、次いで混合物を０′Ｃで更
に１５分間攪拌する。１５１１／のＤＭＦに溶解した４
、７８ｉ（１５ミリモル）のＨ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−ＯＭ
ｓ　、　ＨＣｔの溶液を反応混合物に添加する。−を６
．２５１ｄ（４５ミリモル）のトリエチルアミンで中性
に調節し次いで混合物を０〜４℃で一夜攪拌する。翌日
これを真空下で蒸発乾固し次いで油状物質をエーテルで
砕く。

少量の不純物を含有する１２．１５１’（１００％）の
目的物質を得る。この生成物は、精製することなくヒド
ラジドに変換することができ更に得られ融点：１８８〜
１９０℃；〔α）、＝−３，４８゜（ｃ＝１．ＤＭＦ）
； １４　＝０．５８　、　Ｒｆ−０，２６。

ｇ）　Ｇｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｎ２
）（５Ｍニア１７ １２Ｌｉ−の粗製の粉末Ｇｌ　ｐ−Ｈｌ　５−Ｔｒｐ−
８＠ｒ−Ｔｙｒ　−ＯＭ＠ペンタ被ノチドエステルを２
００Ｒ／のメタノールに溶解し、次いで１０ＩＩ！１０
９８チヒドラジン水和物を添加する。混合物を４０℃で
３時間攪拌し、次いで室温で一夜攪拌し、しかる後沈殿
した結晶を濾別し次いでデシケータ−中濃硫酸で乾燥す
る。乾燥結晶物質を、２５０１の０．５ｎ塩酸溶液に溶
解する。溶液の−を飽和炭酸す）　ＩＪウム溶液で８に
調節する。０℃で２時間放置後、沈殿した結晶を濾過し
、氷冷動水で洗浄し次いで乾燥する。収率：６．１２Ｆ
（５６，９チ、二回の工程に対しての計算）。

融点：２０５〜２０６℃；〔α）２２＝−２１，５１゜
（ｅ−１、ＤＭＦ　）　。

Ｒ２＝０．３９　、　Ｒ，−０，１４。

ヒドラジンの窒素：実験値：３．７９チ、３．７６％理
論値：３．９１％。

ｈ）　Ｚ　−Ｇｌ　ｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＩｔＭ：４０５ ３．２４Ｓｌのプロリンエチルアミド（２２，８ミリモ
ルのＺ　−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔを水添分解することにより
て得られる）を、７０１のテトラヒドロフラン（ＴＨＦ
）に溶解し、次いで５．６ＰＣ２０ミリモル）のＺ　−
Ｇｌｎ−ＯＲ及び１．０３４　ｐのＮ−ヒドロキシ−ベ
ンズトリアゾールを該溶液に添加する。反応混合物を０
℃に冷却し次いでＴＨＦに溶解した５、３４１ｉ’（２
５，９ミリモル）のジシクロへキシルカルボジイミドの
溶液を攪拌した反応混合物に滴下する。

０℃で５時間攪拌を継続し、更に室温で２０時間攪拌を
継続する。沈殿物を濾過し、ＴＨＦで洗浄し、次いで卸
液を真空下で蒸発させ次いで残留物をクロロホルムに溶
解する。溶液を、水酸化アンモニウム及び水の混合物（
１：５）の３５ｍで三回振とうし、水２０−で二回、０
．１　ｎ　ＨＣｔ溶液３５に／で三回次いで最終的に水
２０−で二回振とうする。

有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、クロロ
ホルムで洗浄し次いで蒸発させる。得られた油状残留物
をＴＨＦ　３５　ｌＩ／及び酢酸エチル５０１／の混合
物中に溶解し、次いで濾過する。溶液を蒸発させ次いで
残留物をエーテルで砕く。得られた固体生成物を濾過し
エーテルで洗浄し次いで真空下で乾燥する。収率ニア、
６８？（９５％）Ｒ，＝０．７３　、　Ｒ，＝０．４５
・１）　Ｚ　−Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔＭ：
５１８．６ ４．５Ｆ（１１ミリモル）のＺ　−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−Ｍ
侶ｔを、３０１の氷酢酸に溶解し、次いで、氷酢酸に溶
解した４ｎ臭化水素５５１を該溶液に添加する。

反応混合物を室温で９０分間保持し、次いで無水エーテ
ル２５０ｄを混合物に添加し更に室温で６０分間保持す
る。上面みをデカントし、１００１Ｉｌのエーテルを残
留物に添加し次いで１５分後読過し次いでエーテルで洗
浄する。固体残留物を真空下五酸化リン及び水酸化ナト
リウムで乾燥する。

収率：４．９Ｐ（吸湿性）。

得られたジペグチドエチルアミド・ＨＢｒ３．８５Ｌ（
１１建リモル）を１５０−のクロロホルムに懸濁させ、
次いで７−のトリエチルアミンを懸濁液に添加する。６
５−のクロロホルムに溶解した６Ａ？のカル−ベンゾイ
ル−ロイシル−ペンタクロロフェニルエステルを添加す
る。反応混合物を室温で一夜攪拌する。翌日１ｎ塩酸、
飽和塩化す）　ＩＪウム、２ｎ水酸化アンモニウムで洗
浄し更に飽和塩化ナトリウム溶液でくり返し洗浄する。

クロロホルム層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで
真空下で蒸発させる。残留物をエーテルで砕き、濾過し
、エーテルで洗浄し、次いで真空下で乾燥させる。収率
：ｔ６ｙ（白１チ）。

ｊ）　Ｈ−Ｌ＠ｕ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−Ｎ）ｔＥｔ　−）
ＩＢｒＭ：４６５．５ 工程量）で調製した粗製生成物を、１０ＴＩｌの氷酢酸
に溶解し、次いで室温で６０分間攪拌し、しかる後溶液
を１００ｓｌの無水エーテルで希釈する。

沈殿物を濾過し、次いで真空下で乾燥する。収率：３．
５４５’（７６チ）。

Ｒ＝０．１　、Ｒ，＝０．５５．Ｒ，＝０．１３．Ｒ，
＝０．７７゜アミノ酸分析： Ｇｌｕ　１．０５．Ｐｒｏ　１．１９．Ｌｓｕ　１．０
０゜ｋ）　Ｂｏａ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｉｎ−Ｐｒ
ｏ−ＮＨＥｔＭ：６３１．７ ２．３３Ｆ（５ミリモル）のＨ−Ｌｓｕ−Ｇｉｎ−Ｐｒ
ｏ−ＮＨＥｔ−ＨＢｒを、５ｄのＤＭＦに溶解し、次い
で０℃に冷却し、更に０．７１１７（５ミリモル）のト
リエチルアミン及び１０ｉ１のＤＭＦに溶解した２、５
７）（５ミリモル）の第三ブチルオキシカルがニルーＤ
−フェニルアラニルーペンタクロロフェニルエステルを
該溶液に添加する。声を７〜８の間の値に調節し、次い
で反応混合物を室温で４８時間攪拌し、その間−値をト
リエチルアミンを用いて待時中性に調節する。反応混合
物を蒸発させた後、残シの物質をエーテルで砕き次いで
濾過し更に乾燥する。得られた粗製生成物を更に精製す
ることなく保護解除に委ねる。収率：　２．８１　Ｐ　
Ｃ８９％＞。

１）　Ｈ−Ｄ−Ｐｈｓ−Ｌ＠ｕ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨ
Ｅｔ・ＴＦＡＭ：６４５．６ １．２６Ｆ（２ミリモル）のＢｏａ−Ｄ−Ｐｈｓ−Ｌ＠
ｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｎ）Ｉｌｌｉ：ｔを１０１の三フ
ッ化酢酸に溶解し次いで室温で２０分間攪拌する。三ツ
、化酢酸を真空下で蒸発させ次いで残留物をエーテルで
砕き、濾過し次いで乾燥する。残留物をｎ−ブタノール
、酢酸及び水の４：１：１混合物を用いたシリカダルカ
ラムによるクロマトグラフィー処理に委ねる。

適当な分画を集め次いで減圧下で蒸発させる。残留物を
２．３ｄの水に溶解し、次いで凍結乾燥する。

収率：８８０ｆｆｌｌ／（６８％）。

Ｒ＝０．２５　、　Ｒ，＝０．３５０ 融点：１４２℃；〔α〕２０＝−６６°（Ｃ＝　Ｑ、　
ｌ　、ＤＭＦ）。

ｍ）　Ｇｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−
Ｐｈｅ−Ｌ＠ｕ−Ｇｌｎ−−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ Ｍ：１１９９ 工８ｇ）で得られた２８６■（０，４ミリモル）の６ン
タペノチドヒドラジドＧｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ−８ｅｔ
　−−Ｔ　ｙ　ｒ’−Ｎ　２　Ｈｓ　を１（１７のジメ
チルホルムアミドに溶解する。溶液を一１０℃に冷却し
、次いで攪拌しながら０．２７　ｍ／の６ｎ塩酸を滴下
ししかる後３０．２Ｉｎ９の亜硝散ナトリウムの濃厚水
溶液を滴下する。５分後、調製した２５８＃Ｉｆｉ’（
０，４ミリモル〕のテトラペゾチドＨ−Ｄ　−Ｐｈｅ−
Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−−ＮＨＥｔの三フッ化酢酸塩
を１−のジメチルホルムアミドに溶解した溶液を、０．
２７１７のトリエチルアミンと共に一１０℃で添加する
。必要ならば、反応混合物をトリエチルアミンを用いて
中性の声値に調節し、次いで一５℃の温度で１時間攪拌
し、０℃で１時間更に室温で１２時間攪拌する。

ジメチルホルムアミドを真空下で除去し、油状残留物を
０．２ｎ酢酸５ｄに溶解し次いで溶液を０．２ｎ酢酸を
用いたセファデックスＧ−２５カラム（２Ｘ　９５　ｃ
ｍ　）のクロマトグラフィー処理に委ねる。適当々分画
を集め次いで凍結乾燥する。収率：２９８〜（６２チ）
。

Ｒ，＝０．３９　、Ｒ，＝０．１３　、Ｒ，＝０．４８
．Ｒ，＝０．１４０アミノ酸分析： Ｓ＠ｒ　Ｏ，８９、Ｇｌｕ　１．９Ｂ　、Ｐｒｏ　Ｏ，
９７、Ｌｅｕ　１．００　。

Ｔｙｒ　１．０３．Ｐｈｅ　Ｏ，９９，Ｈｌｍ　１．０
１．Ｔｒｐ　Ｏ，９１゜例７ Ｔｒｐ　、Ｇｉｎ　、デスＧｌ）ｒ　−ゴナドリペリン
エチルアミドの調製 Ｍ：１２２０ ａ）　Ｂｏｃ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔＭ：３７０ １．０ｆｆ−（７ミリモル）のプロリンエチルアミドを
、１５１のジメチルホルムアミドに溶解し、次いて一値
をトリエチルアミンを用いて８に調節し次いで１５１１
／のジメチルホルムアミドに溶解した３．２Ｐ（８，４
ミリモル）の第三ブチルオキシカルボニル−グルタミニ
ルーｐ−ニトロ−フェニルエステルを該溶液に添加する
。反応混合物を室温で４８時間撹拌し、この間時々゛声
値をトリエチルアミンを用いて８に調節する。反応混合
物を蒸発せしめに後、油状残留物を水に溶解し、エーテ
ルで洗浄し次いで分離した水相を真空下で蒸発させ更に
乾燥させる。収率：１．９３ＰＣ７４，５チ）。

Ｒ＝０．７６゜ ｂ）　Ｈ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ−ＴＦＡＭ：２７
０（遊離塩基）　Ｍ：３６７（ＴＦＡ塩）１０ＩＩ／の
三ツ、化酢酸に溶解した１、９ン（７，２ミリモル）の
Ｂｏａ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔを溶解し次いで室温
で２０分間攪拌する。溶液を真空下で蒸発させ、残留物
をエーテルで砕き、濾過し次いで真空下で乾燥する。収
率：１．５２Ｆ−（５８％）。

Ｒ＝０．４５　、Ｒ＝０．４５　、Ｒ＝０．２５．Ｒ，
−ｆ　ｆ　ｆ Ｏ１３０゜ 吸湿性物質；〔α）＝−３４，８°（ｅ　＝　１　、　
ＭｅＯＨ）。

ｅ）　Ｂｏｃ−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔＭ：
５５７ ５００１１ｉｉＩ（１，８５ミリモル）のＨ−Ｇｉｎ−
Ｐｒｏ−ＮＨＥｔを１０ｍ／のジメチルホルムアミドに
溶解する。μ値をトリエチルアミンを用いて８に調節し
、次いでｌＱｍのジメチルホルムアミドに溶解した’６
０８１＋１；ｌ（２ミリモル）の第三ブチルオキシ−カ
ルがニル−トリプトファン及び６２０μｔｃ４ミリモル
）のＮ、Ｎ’−ジイソフロビルカルがジイミドを添加す
る。反応混合物を室温で４８時間攪拌し、次いで真空下
で蒸発させる。残留物を酢酸エチルに一溶解し次いでエ
ーテルで希釈する。沈殿したＢｏａ−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ−
Ｐｒｏ−ＮＨＥｔを濾過し、エーテルで洗浄し更に乾燥
する。収率ニア４０＃ｌ９（７２％）Ｒ−０，７５、Ｒ
−０，３８゜ ｆ　、ｆ ｄ）　Ｈ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｎ）ｔＥｔ、ＴＦ
ＡＭ：４５６．５（遊離塩基）　Ｍ　：　５５４　（Ｔ
ＦＡ塩）７００＃（１，２５ミリモル）のＢｅｅ−Ｔｒ
ｐ−Ｇｌｎ　−−Ｐ　ｒ　ｏ　−ＮＨＥ　ｔ　を、三フ
ッ化酢酸及び塩化メチレン１：１混合物の１５−に溶解
し次いで室温で２０分間攪拌する。更に溶液を真空下で
蒸発させ次いで残留物をエーテルで砕く。固体残留物を
濾過し次いで乾燥する。かくして得られた粗製生成物約
５００ｒｎ９を、酢酸エチル、ピリジン、酢酸及び水４
７：２０：６：１１混合物を用いシリカゲルカラムによ
るクロマトグラフィー処理によシ精製する。適当な分画
を集め、真空下で蒸発乾固し更に残留物をエーテルで砕
く。かくして白色粉末３６０■（５２チ）を得る。

融点：１１９〜１２３℃；〔α）２０　＝４．　ｓ°（
ｅ＝Ｏ，１、０，１ｎＨｃｔ）。

ｅ）　Ｂｏａ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨ
ＥｔＭ：６１３．７ ３５０■（０，フロミリモル）のＨ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−
Ｐ　ｒ　ｏ　−ＮＨＥ　ｔをジメチルホルムアミドに溶
解し、次いで例７の工程Ｃ）に従って１０４１０４Ｆｎ
、８ミリモル）のＢｏＣ−Ｇｌｙと結合させる。かくし
て３７５Ｎ！９（ｓ１％）の結晶性物質を得る。

Ｒ；＝０．８８．Ｒン＝ｏ、ｓ　２　、　Ｒ＃　＝０．
６１゜ｆ）　Ｈ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−Ｎ
ＨＥｔ、ＴＦＡＭ：６０９．６ 例７の工程ｄ）に従って３７５〜（０，６ミリモル）の
Ｂｏａ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔを
保腰解除し次いで精製する。かくして２８５１１１；１
（７６，６チ）の白色粉末を得る。

Ｒ；＝０．０８　、　Ｒ＃−０，１６、Ｒン＝０．６７
　、　Ｒ＃　−０，２８゜ｇ）　Ｇｌｐ−Ｈｌｍ−Ｔｒ
ｐ−８ｏｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌｎ−−Ｐ　
ｒ　ｏ　−ＮＨＥ　ｔ Ｍ：１２１６．４ ２８６ｍｐ（０，４ミリモル）のペンタベゾチドヒドラ
ジドＧｌｐ−Ｍｌ’５−Ｔｒｐ−８＠ｒ−Ｔｙｒ−Ｎ２
Ｈ，を、例６の工程ｍ）に従って得られたＨ　−Ｇｌｙ
−Ｔｒｐ−Ｇｉｎ　−−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ　、ＴＦＡ　
２４３．８１１Ｑ　（０，４ミリモル）と結合させる。

かくして純粋な物質２５２．９η（５２チ）を得る。

Ｒ＝０．２６　、　Ｒｆ＝０．３２゜ アミノ酸分析： Ｂａｒ　Ｏ，８７，Ｇｌｕ　２．０２．Ｐｒｏ　Ｏ，９
１、Ｇｌｙ　１．００　。

Ｔｙｒ　１．１２．Ｈｌｇ　１．０５．Ｔｒｐ　１．８
０゜以下余白 例８ 筋肉内、皮下内又は静脈内投与用の注射剤の調製 ａ）式■のゴナドリペリン誘導体を蒸留水、生理食塩溶
液又は緩衝水溶液に溶解し、濃度１〜１０■／ｌｌｌ１
とする。溶液を滅菌濾過し、有効成分５０〜５００　ｔ
ｔＰを含有する少量部分をアンプルに充填し次いで凍結
乾燥し、更にアンプルを封止する。

アンプルの有効成分台上を膜力前に蒸留水１〜１０−を
添加して新たに溶解し、次いで所望用量に対応する量を
投与する。

ｂ）式Ｉのゴナドリベリン訪導体２５〜５００μ汁値を
、０．９％の塩化ナトリウム及び０．９−のベンジルア
ルコールを含有する水溶液に溶解する。

有効成分２５〜５００μｆ／ｍｌを含有する部分をアン
プルに充填し、次いで封止する。得られた溶液は直接注
射可能である。

以下余白 第１頁の続き ＠発明者　ジョルジイ　ケリ　ノ１ンガリーウツツア。

０発　明　者　力ロリイ　ニコリチ　ノ１ンガリーア、
６２／ビ ０発　明　者　パ　ラ　ジ　ソケ　ノ＼ンガリー＠発明
者　イストバシ　テプラン　ノ１ンガリーウツツア。

国、ブタペスト　１０２４ケレテイ　カロリイ９−３１ 国、ブタペスト　１１４＆　フオガラシ　ウツツ国、ブ
タペスト　１０３７．ベチイ　ウツツア、７２国、ブタ
ペスト　１０２６．ヘルマン　オツトー３

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式Ｉ： ＧＪｐ−Ｈｌ　５−Ｔｒｐ−Ｂａｒ−Ｔｙｒ−７１−Ｘ
   ２−ｘ、５−Ｐｒｏ　−Ｘ４（１） （式中、Ｘ、はグリシル基又は天然もしくは合成アミノ
   酸基のり一異性体であシ、 Ｘ２は側鎖に１〜４個の炭素原子を有するＬ−アミノ酸
   基、Ｌ−フェニルーアラニルもしくはＬ−トリットフィ
   ル基を表わし、 Ｘ−３はＣ１〜４アルキルもしくはＣ２〜４アルカノイ
   ル−アミド側鎖を有するＬ−アミノ酸基を表わし、Ｘ４
   はグリシンアミド又はＣ１〜４アルキルアミＰ基である
   、但しＸ、がグリシル以外の基を表わし更にＸ２がトリ
   プトフィルである場合はＸ３はロイシルでないことを条
   件とする） で表わされるゴナドリペリン誘導体およびその医薬とし
   て使用可能な酸との付加塩並びにその複合体。 ＝Ｌ　Ｇｌｐ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−
   Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨｌ。 Ｇｌ　ｐ−Ｈｉ　５−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌ　
   ｙ−Ｔｒｐ−Ｇｌ　ｎ−Ｐｒｏ−−Ｇｌｙ−隅１ Ｇｌｐ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔ
   ｒｐ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−ＥＡ。 Ｇｌ　ｐ−Ｈｉ　５−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌ　
   ｙ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−−Ｇｌｙ−正、゛。 Ｇｌ　ｐ−Ｈｉ　５−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌ　
   ｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｐｒｏ−−ｏｔｙ−ＮＨ，。 Ｇｌｐ−Ｈｉ＠−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｐｈｅ
   −Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−−８人、および Ｇｌｐ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｔ
   ｒｐ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−ＥＡ以下余白 から成る群から選ばれる特許請求の範囲第１項記載のゴ
   ナドリンペリン誘導体、およびその医薬として使用可能
   な酸との伺加塩並びにその複合体。 ３、一般式Ｉ： Ｇｌｐ−Ｈｌ　５−Ｔｒｐ−８ｏｒ−Ｔｙｒ−Ｘｌ　−
   Ｘｌ−Ｎ５−Ｐｒｏ　−Ｎ４（１） （式中、Ｘ、はグリシル基又は天然もしくは合成アミノ
   酸基のＤ−異性体でｓｂ、 Ｘｌは側鎖に１〜４個の炭素原子を有するＬ−アミノ酸
   基、Ｌ−フェニルーアラニルもしくはＬ−トリプトフィ
   ル基を表わし、 ＸはＣアルキルもしくはＣ２〜４アルカノイル３　１〜
   ４ 一アミド側炉を有するＬ−アミノ酸基を表わし、Ｎ４は
   グリシンアミド又はＣ１〜４アルキルアミド基である、
   但しＸ、がグリシル以外の基を表わし更にＸｌがトリシ
   トフィルである場合はＮ３はロイシルでないことを条件
   とする） で表わされるゴナドリベリン誘導体およびその医薬とし
   て使用可能な酸との付加塩並びにその複合体の製造方法
   であって、 ａ）固相４プチド合成法を用い、適当に保護されたアミ
   ノ酸を、カルがジイミド又は活性エステルを用い必要な
   配列で固体ポリマ支持体に結合させ、次いで定められた
   場合、訓製ベゾチドをアシドリス又はアミツリシスによ
   シ該支持体から脱離させ、次いで所望によシデリマー支
   持体からペプチドを脱離する前に又は脱離後にアミノ酸
   の保護基をペプチドから同時に除去するか、又は ｂ）可変アミノ酸成分の化学的特性に応じて、適当に保
   護されたアミノ酸から７ラグメント縮合および段階的合
   成の適当な組合わせを用い、所望の目的物質を組み立て
   る、前記方法。 ４、前記方法ａ）においてベンズヒドリルアミンもしく
   はＢｅｅ−プロリン樹脂を固体支持体として用いる、特
   許請求の範囲第３項記載の方法。 ５、前記方法ａ）において、保護されたペプチドを７２
   化水素を用いた処理によシおよび／又はエチル−アンモ
   ノリシスによシ樹脂から脱離させる、特許請求の範囲第
   ３項記載の方法。 ６、前記方法ｂ）において、 次式■： Ｇｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｎ３　（Ｉ
   Ｉ）のペンタ被プチドを、一般式■： ｘ、−Ｘｌ−Ｘ、−Ｐｒｏ−Ｎ４（ｎ［）（式中、Ｘｌ
   、ＸｌおよびＮ３は特許請求の範囲第３項で定義された
   意味である） のテトラ−もしくはペンタベグチドと縮合させる、特許
   請求の範囲第３項記載の方法。 ７、前記方法ｂ）において一般式■； Ｇｌｐ−Ｈ１＠−Ｔｒｐ−８ｏｒ−Ｔｙｒ−Ｘ、−Ｎ３
   （ＩＶ）のヘキサペプチドアジドを、一般式Ｖ：ｘ２−
   ｘｓ−Ｐｒｏ−Ｘ４　（Ｖ） （両式中、ｘ、、Ｎ２．Ｎ３およびＮ４は特許請求の範
   囲第３項で定義した意味を有する） のトリーもしくはテトラペプチドと縮合させる、特許請
   求の範囲第３項記載の方法。 ８、前記方法ｂ）において、一般式■：Ｇｌｐ−Ｈ１ｓ
   −Ｔｒｐ−８ｅｒ−Ｔｙｒ−Ｘｌ−Ｘｌ−Ｎ３　Ｑｌ）
   のベブタ被ブチドアシトを、一般式■：Ｘ　−Ｐｒｏ−
   Ｎ４　（■） （両式中、ｘｌ、Ｎ２．ｘ、およびＮ４は特許請求の範
   囲第３項で記載した意味を有する） のジーもしくはトリー！！プチドを縮合させる、特許請
   求の範囲第５項記載の方法。 ９、有効成分として、一般式Ｉ： Ｇｌｐ−Ｈｌｓ−Ｔｒｐ−８＠ｒ−Ｔｙｒ−Ｘｌ　−Ｘ
   ｌ　−Ｎ５−Ｐｒｏ　−Ｎ４（１） （式中、Ｘ、はグリシル基又は天然もしくは合成アミノ
   酸基のＤ−異性体であシ、 Ｘｌは側鎖に１〜４個の炭素原子を有するＬ−アミノ酸
   基、Ｌ−フェニル−アラニルもしくはＬ−トリシトフィ
   ル基を表わし、 ＸはＣアルキルもしくはＣ２〜４アルカノイルｓ　１〜
   ４ 一アミド側鎖を有するＬ−アミノ酸基を表わし、Ｎ４は
   グリシンアミド又はＣ１〜４アルキルアミド基である、
   但しＸ、がグリシル以外の基を表わし更にＸｌがトリシ
   トフィルである場合はＮ３はロイシルでないことを条件
   とする） で表わされるゴナドリペリン誘導体又はその医薬として
   使用可能な酸との付加塩又はその複合体の少なくとも一
   種並びに担体もしくは希釈剤を含んでなる医薬組成物。 １０、医薬組成物の製造方法であって、二股式■（式中
   、Ｘ、、Ｘ２．Ｘ、およびＸ４は特許請求の範囲第９項
   で記載された意味である）の化合物又はその医薬として
   許容し得る塩又はその錯体を通常の医薬担体又は希釈剤
   と混合する、前記方法。