JPS60222770A - 一体型多層分析要素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の技術分野〕 本発明は液体試料中の特定の成分を分析する几めの改良
された乾式の一体型多層分析要素に関し。

詳しくは水性液体試料の分析、特に体液を試料として用
いる臨床検査に有用な一体型多層分析要素に関する。

〔従来技術〕

従来乾式の分析要素の一形態として、透明支持体の上に
呈色反応試薬と親水性ポリマーバインダー１−含む吸水
性の試薬層と最外層に多孔性展開層ｃ以下、展開層とい
うことがある）を設は九一体型多層分析要素（メ下、多
層分析要素ということがある）が多数提案されている。

多層分析要素の展開層はその上側表面（透明支持体から
違い側の表面）に点着供給された水性液体試料（例、血
液（全血、血漿、血清）、リンノミ液、唾液、髄液。

膣液、尿；飲料水、酒類；河川水；工場排水等）を水性
液体試料中に含有されている成分を実質的に偏在させろ
ことなしに横方向に拡げ単位面積当りほぼ一定容量の割
合で親水性ポリマーを含む吸水性の試薬層または吸水層
に供給する作用（メータリング作用）をする層である。

多孔性展開層のうちで、特開昭ダターｈ３ｒｒｙ　（特
公昭ｊｊ−コ／１７７）、米国特許３．タタコ、ｉｚｔ
等に開示のメンブランフィルタ（プラッシュドポリマー
）に代表される非繊維性等方的微多孔質媒体層。

特開昭！ｊ−２Ｏｒｊり等に開示のポリマーミクロビー
ズが水不膨潤性の接着剤で点接触状に接着されてなる連
続空隙含有三次元格子粒状構造物層に代表される非繊維
性多孔性展開層は多種の水性液体試料に対し優れ友展開
作用を示すが、試料として全血を用いる場合に血液中の
赤血球等の固形成分にエリ微空隙が目詰りして展開作用
が損なわれ、高分子成分である蛋白質を高濃度に含む血
漿または血清を用いる場合にも高分子成分により微空隙
が目詰りして展開作用が損なわれるという問題点かあつ
友。これに対し特開昭ｚ　ｚ　−１４ｕ３ｉ４　。

特開昭、ｔ７−６／ｓ３ｊり等に開示の織物からなる多
孔性展開ｒ＠（織展開１ｉｔ）は水性液体試料として血
液を用いる場合に全血、血漿、血清のいずれをも良好に
展開することができ、かつ一体型多層分析要素の製造の
容易さ、要素の丈夫さ等の種々の点で優れた多孔性展開
層である。

〔従来技術の問題点〕

織物からなる展開層はメータリング作用を保ちつつ展開
面積を固有の範囲から改変するためのコントロールをす
ることが難しい展開層であることが判明した。すなわち
９分析対象成分の水性液体試料（以下、液体試料または
被検液ということがある）中の含有量が少ない場合等に
液体試料が展開される面積（展開面積）を小さくするの
が望ましいので種々の処理にＬり固有の展開面積を小さ
くしょうと試みても容易に実現、できないか、あるいは
展開面積を小さくできるかわりにメータリング作用が不
完全になる傾向が強かった。

〔発明の目的〕

本発明の目的は展開作用（メータリング作用）が損なわ
れることなしに広範囲にわたって展開面積全コントロー
ルできる多孔性展開層を備えた一体型多層分析要素を提
供することである。

本発明の他の目的は尿酸、クレアチニン、アンモニア、
諸種の酵素（活性値）等の極めて微量の生体成分の定量
分析が可能なを一体型多層分析要素を提供することであ
る。

本発明の他の目的は水性液体試料として血液を用いる場
合に全血での測定値と血漿または血清での測定値との対
応づけまたは両側定値相互の換算が容易な一体型多層分
析要素を提供することである。

本発明の他の目的は全血試料を用いてヘマトクリット値
またはヘモグロビン濃度を測定できる一体型多層分析要
素を提供することである。

本発明の他の目的は以下の説明および実施例の記載から
も明らかになろう。

〔発明の構成〕

本発明は。

（１）　光透過性水不透過性支持体の上に親水性ポリマ
ーバインダーを含む吸水層および多孔性展開層がこの順
に積層一体化されてなる一体型多層分析要素であって、
前記展開層が織物または編物からなり、かつ前記展開層
に親水性セルロース誘導体お工びＨＬＢ値ＩＯ以上のノ
ニオン性界面活性剤を含有する一体型多層分析要素。

（２）光透過性水不透過性支持体の上に液体試料中の成
分と反応して検出可能な変化を生じさせる少なくとも一
つの試薬を含む少なくとも一つの吸水性または水浸透性
の試薬層および多孔性展開層がこの順に積層一体化され
てなる一体型多層分析要素であって、前記展開層が織物
または編物からなり、かつ前記展開層に親水性セルロー
ス誘導体およびＨＬＢ値１０以上のノニオン性界面活性
剤を含有する一体型多層分析要素、お工び。

（４）光透過性水不透過性支持体の上に親水性ポリマー
バインダーを含む吸水層お工び液体試料中の成分と反応
して検出可能な変化を生じさせる少なくとも一つの試薬
を含む多孔性展開層がこの順に積層一体化されてなる一
体型多層分析要素であって、前記展開層が織物または編
物からなり、かつ前記展開層に親水性セルロース誘導体
およびＨＬＢ値ｉｏ以上のノニオン性界面活性剤を含有
する一体型多層分析要素である。

本発明の一体型多層分析要素の特徴は多孔性展開層とし
て織物（織布）または編物（ｆ６布）を用い、その展開
層に親水性セルロース誘導体とＨＬＢ値１０以上のノニ
オン性界面活性剤を含有させることにある。

本発明の一体型多層分析要素の光透過性水不透過性支持
体としては前述の特許明細書等に開示の多層分析要素に
用いられている工うな水不透過性の透明支持体を用いる
ことができる。その具体例としてはポリエチレンテレフ
タレート、ビスフェノールＡのポリカルボネート、ポリ
スチレン、セルロースエステル（ＩＩＭＪ　、セルロー
スジアセテート。

セルローストＩＪアセテート、セルロースアセテートプ
ロピオネート等）等のポリマーからなる厚さ約ｊＯμｍ
から約／　１＋１１．好ましくは約ｔｏμｍから約ＪＯ
Ｏμ７７Ｌや範囲の透明支持体を用いることができる。

支持体の表面には必要により前記の諸　゛特許明細書等
にエリ公知の下塗層ま九は接着１ｉ！’を設けて支持体
の上に設けられる吸水層ま几は試薬層等との接着を強固
にすることができる。

吸水層は水を吸収して膨潤する親水性ポリマーを主成分
として構成される層であって９層の界面に到達または浸
透した水を吸収することができる層である。１吸水層に
用いることができる親水性ポリマーは水吸収時の膨潤率
が３００Ｃで約／１０％から約２０００％、好ましくは
約２ｓｏＣＸから約／！００％の範囲の天然または合成
新水性ポリマーである。その例として特願昭ｚｒ−１Ａ
ｚｚｔｉ−７、特願昭ｊ？−２／７４１２１等に開示ノ
セラチｙｒｎｓ酸処理ゼラチン、脱イオンゼラチン等）
。

ゼラチン誘導体（例、フタル化ゼラチン、ヒドロキシア
クリレートグラフトゼラチン等）、アガロース、プルラ
ン、プルラン誘導体、ポリアクリル了ミド、ポリビニル
アルコール、ポリビニルピロリドン等をあけることがで
きる。吸水層の乾燥時の厚さは約１μｍから約１００μ
ｍ、好ましくは約３μｍから約！Ｏμｍ、特に好ましく
は約ｊμｍから約３０μｍの範囲であり、ま′ｆＣ実質
的に透明であることが好ましい。吸水層には公知の媒染
剤、塩基性ポリマー、酸性ポリマー等を含有させること
ができる。

吸水性または水浸透性の試薬層（以下、試薬層というこ
とがある）は液体試料中の測定対象成分と反応して検生
可能な変化を生じさせる少なくとも一つの試薬と親水性
ポリマーバインダーを含む実質的に非孔性で吸水性の層
または微多孔性で水浸透性の層である。検出可能な変化
とは主として光学的測定方法に工す検出できる変化を意
味しており、飼えば色変化１発色（呈色）、螢光発生。

紫外線領域における吸収波長の変化、混濁発生等である
。

試薬層に含有される試薬は液体試料中の分析対象成分と
この成分を分析するために選択した化学反応によって決
まシ１選択した化学反応が２種以上の試薬が関与する反
応の場合にはそれらの試薬を一つの試薬層内に混合して
含有させることもできるし、必要に応じて−ｚｇ＋以上
の試薬を、２Ｎｉ以上の別個の層に含有させることもで
きる。試薬層に含有させる試薬として前記の諸特許明細
書に開示の酵素を含む試薬組成物やその他の公知の分析
試薬系または臨床生化学診断試薬系等がある。

実質的に非孔性で吸水性の試薬層に用いられる親水性ポ
リマーは試薬または試薬組成物を実質的に均一に溶解ま
たは分散させる媒体として作用しまた液体試料中の水を
吸収して水とともに被検成分を試薬層に到達させる作用
を少なくとも有するものである。親水性ポリマーとして
は前記の吸水層に用いられる吸水性の親水性ポリマーと
同じポリマーから適宜に選択して用いることができる。

実質的に非孔性の試薬層の乾燥厚さは約３μｍから約１
０μｍ、好ましくは約ｊμｍから約３０μｍの範囲であ
り、また試薬層は実質的に透明であることが好ましい。

微多孔性で水浸透性の試薬層は固体微粒子と親水性ポリ
マーバインダーから構成される微多孔性構造体層に試薬
ま７ｔＨ試薬組成物が含有保持される微多孔性試薬層で
ある。ここでいう微多孔性構造体層とは微多孔性微粒子
または非多孔性微粒子と微粒子間を接着して微多孔性連
続空隙構造を保持する親水性ポリマーバインダーからな
る構造物の層である。

微多孔性試薬層に用いられる微多孔性微粒子ま７ｔは非
多孔性微粒子の例として微結晶性セルロース、セルロー
ス微粉末または微粒子等のセルロース微粒子；シリカ、
珪藻土等の二酸化珪素化合物の微粒子；沸石等の珪酸塩
の微粒子；ポリマーミクロビーズ、ガラスミクロビーズ
、諸種のセラミックスビーズ等があげられる。親水性ポ
リマー／ぞインダーとして前記の吸水層に用いられる吸
水性の親水性ポリマーと同じポリマーから適宜に選択し
て用いることができるほか特願昭ｌｌ−２１／７１等に
開示の親水性構成繰返し単位を約２％以上ｆＷするコポ
リマーの水性ラテックス等を用いることができる。微多
孔性試薬層の乾燥層厚は約７μｍから約１０μｍ、好ま
しくは約ｉｏμｍから約３０μｍの範囲である。

試薬層には公知のｐＨ緩衝剤組成物、高分子ｐＨ緩衝剤
、塩基性ポリマー、酸性ポリマー、高分子媒染剤等を含
有させることができる。　′吸水層および実質的に非孔
性の試薬層はいずれも前記の光透過性水不透過性支持体
の上に公知の塗布方法に、Ｃり設けることができる。微
多孔性試薬層は特願昭ｊ７−ココ７りｔｏ、特願昭ｓｒ
−λ／１７／等に開示の方法に従って設けることができ
る。必要に応じて支持体の表面を公知の物理化学的活性
化処理または化学的活性化処理し、あるいは透明な下塗
層（例、ゼラチン下塗層）を設けて支持体と吸水層また
は支持体と試薬層との間の接着力を強くすることができ
る。支持体と試薬層の間に吸水層を設けることができ、
試薬層が微多孔性試薬層の場合には試薬層と支持体の間
に吸水１を設けることが好ましい。

吸水層および実質的に非孔性の試薬＠はいずれも前記の
光透過性水不透過性支持体の上に公知の塗布方法にエリ
設けることができる。微多孔性試薬層１ｔｉ％ＦＨ昭ｓ
　７−２２７９１　’−特願昭ｚｒ−２／／７／等に開
示の方法に従って設けることができる。必要に応じて支
持体の表面を公知の物理化学的活性化処理または化学的
活性化処理し、あるいは透明な下塗層（列、ゼラチン下
塗層）を設けて支持体と吸水層または支持体と試薬層と
の間の接着力を強くすることができる。支持体と試薬層
の間に吸水＠を設けることができ、試薬層が微多孔性試
薬層の場合には試薬層と支持体の間に吸水層を設けるこ
とが好ましい。

試薬層または吸水層の上に光遮蔽層を設けることができ
る。光遮蔽層は光遮蔽性または光遮蔽性と光反射性を兼
ね備えた微粒子または微粉末（以下、単に微粒子という
）が少量の被膜形成能を有する親水性ポリマーバインダ
ーに分散保持されて　、１、−いる水透過性または水浸
透性の層である。光遮蔽ｌｉｉは試薬層または吸水−に
おける検出可能な変化　□（色変化１発色等）を光透過
性支持体側から反射　□゛□測光する際に後述する多孔
性展開層に点着供給され九本性液体試料の色、特に全血
試料に含まれるヘモグロビンの赤色等を遮蔽するととも
に光反射層または背景層としても機能する。

光遮蔽性と光反射性とを兼ね備えた微粒子の例として二
酸化チタン微粒子（ルチル型、アナターゼ型またはヲル
カイト型の粒子径的０．１μｍから約１．コμｍの微結
晶粒子等）、硫酸バリウム微粒子、アルミニウム微粒子
また（は微小フレーク等があり、光遮蔽性微粒子の例と
［７てカーボンブラック、ガスブラック、カーボンミク
ロビーズ等があり、これらのうちで二酸化チタン微粒子
、硫酸バリウム微粒子が好ましい。被膜形成能を有する
親水性ポリマーバインダーとしては吸水層に用イラれる
のと同じ親水性ポリマーのほかに弱親水性の再生セルロ
ース、セルロースアセテート等があり、これらのうちで
はゼラチン、ゼラチン誘導体、ポリアクリルアミド等が
好ましい。ゼラチン。

ゼラチン誘導体は公知の硬化剤（架橋剤）を混合して用
いることができる。

光遮蔽＠は光遮蔽性微粒子と親水性ポリマーとの水性分
散液を公知の方法に工９試薬層′！ｌたは吸水層の上に
塗布し乾燥することにより設けることができる。光遮蔽
性微粒子と親水性ポリマーバインダーとの乾燥時の体積
比は光遮蔽性微粒子１０に対しポリマーバインダーが約
２．３から約７゜ｊ、好ましくは約３．０から約４．ｊ
の範囲であり、光遮蔽性微粒子が二酸化チタン微粒子の
場合には重量比で二酸化チタン微粒子１０に対しポリマ
ーバインダーが約ｏ、６から約１．ｆ、好ましくは約０
．ｆから約／、ｊの範囲である。光遮蔽層の乾燥層厚は
約３μｍから約３０μｍ、好ましくは約ｊμｍから約λ
Ｏμｍの範囲である。

試薬層、吸水層または光遮蔽層の上には後述する多孔性
展開＠を接着し積層するために接着＠を設けることがで
きる。光遮蔽層の上に多孔性展開層金膜ける場合には接
着層は必須である。接着層は水で湿潤しているとき、ま
たは水を含んで膨潤しているときに多孔性展開層を接着
して一体化できる親水性ポリマーから主としてなる。接
着層に用いうる親水性ポリマーとしては吸水層に用いる
のと同じ親水性ポリマーがあげられ、これらのうちでゼ
ラチン、ゼラチン誘導体、ポリアクリルアミド等が好ま
しい。接着層の乾燥層厚は約０．３μｍから約２０μｍ
、好ましくは約１μｍから約ｉｏμｍの範囲である。接
着層には界面活性剤を含有させることができる。界面活
性剤としてはノニオン性界面活性剤、特にオキシエチレ
ン基ま几はオキシプロピレン基がｒ、／　ｊ個連なった
鎖状構造を含むノニオン性界面活性剤が好捷しい。

接着層Ｆ′ｉ親水性ポリマーと所望により加えられる界
面活性剤等を含む水溶液を公知の方法で試薬層、吸水者
または光遮蔽層の上に塗布して設けることができる。

吸水＠または試薬層の上に直接寸たは接着層を介して、
またに光遮蔽層（光反射啼）の上に接着層を介して、織
物生地（織布）からなる多孔性展開層（織物展開層）ま
たは編物生地１編布）からなる多孔性展開層（編物展開
層）を設ける。多孔性展開＠はその上側表面（透明支持
体から遠す側の表面）に点着供給された水性液体試料を
その中に含有している成分を実質的に偏在させることな
しに横方向に拡げ単位面積当りほぼ一定容量の割合で親
水性ポリマーバインダーを含む吸水層、ま−ｆｃは吸水
性または水浸透性の試薬層に供給する作用（展開作用ま
たはメータリング作用）をする層である。さらに多孔性
展開層は水性液体試料中の分析を阻害する非溶解性物質
（例、全血試料中の赤血球等）を濾過除去する作用をも
する層である。

多孔性展開層に用いうる織物生地（織布）としては特開
昭オ！＝／＆μ３ｊｔｌ　、特開昭５７−６６３！り等
に開示の広範囲の種類の織物生地があげられる。織物生
地のうちではたて（経）糸とよこ（緯）糸とで織つｔ平
織物が好ましく、平織物のうちでは細布生地、全中生地
、ブロード生地。

ボブリン生地等が好ましい。織物生地を構成する糸とし
ては後述する編物生地を構成する糸と同様の素材からな
る糸があげられ、糸の形態としてはフィラメント糸、紡
績糸（加捻糸）のいずれをももちいることができ、これ
らのうちでは紡績糸が好ましい。織物生地の糸の太さは
綿紡績糸番手で表して約２Ｏ８から約ｌ！Ｏ８，好１し
くけ約≠Ｏ８から約ｌλｏＢ相当の範囲、または絹糸デ
ニールで表して約ＪＪ−１）から約３００ｆ）、好まし
、〈は約４Ｌｔｐから約／ＪＯｆ）相当の範囲、織物生
地の厚さは約１００μｍから約２００μｍ、好ましくは
約／２０μｍから約３１０μｍの範囲、織物生地の有す
る空隙率は約≠θ％から約２θ％、好ましくは約！θ％
から約ｒｓ％の範囲である。

多孔性展開層に用いうる編物生地（編布）としては広範
囲の種類の編物生地があけられ、それらのうちでＶｉり
て（経）メリヤスとよこ（緯）メリヤスが好ましい。た
てメリヤスとしては一重アトラス緬生地、トリコット編
生地、ダブルトリコット編生地、ミラニーズ編生地、ラ
ッシェル編生地等を用いることができ、よこメリヤスと
しては平編生地、パール編生地、ゴム編生地１両面編生
地等を用いることができる。編物生地を編成する糸とし
ては綿、絹、羊毛等の天然繊維の糸、ビスコースレーヨ
ン、キュプラ等の再生セルロース、セルロースジアセテ
ート、セルローストリアセテート等の半合成有機ポリマ
ー、ポリアミド（各種のナイロン類）、アセタール化ポ
リビニルアルコール（ビニロンＷ）ｅポリアクリロニト
リル、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレン、ポ
リプロピレン、ポリウレタン等の合成有機ポリマーの細
繊維からなる糸または単繊維からなる糸、天然繊維と再
生セルロース、半合成ま′ｆｃは合成有機ポリマー繊維
との混合繊維からなる糸があげられる。

糸の形態としてはフィラメント糸、紡績糸（加捻糸）の
いずれをも用いることができ、これらのうちでは紡績糸
が好ましい。編物生地の糸の太さは綿紡績糸番手で表し
て約ａｏＳから約１ｒｏＳ。

好ましくは約ｔＯＳから約９０Ｄ相当の範囲。

−または絹糸デニールで表して約３ｊｆ）かう約７３０
Ｄ、好まり、＜は約≠ｊＤから約９０Ｄ相当の範囲であ
る。編物生地の編成工程時のゲージ数としては約−２０
から約！Ｏの軛囲、ｌ１ｉｌ物生地の厚さは約ｉｏｏμ
ｍから約６ｏｏμｍ、好ましくは約ｌ！θμｍから約４
ＡＯＯμｍの範囲６編物生地の有する空隙率は約グＯ％
から約り０％、好ましくは約１０％から約ｒｓ％の範囲
である。たてメリヤスのうちでは縦方向の伸縮が少なく
、後述する編物展開層のラミネーション工程における操
作のしやすさ、裁断時、の編目はどけのなさ等の観点で
トリコット編生地、ラッセル編生地、ミラニーズ編生地
、ダブルトリコット編生地が好ましい。

多孔性展開層に用いられる織物または編物生地は水洗等
の脱脂処理により少なくとも糸製造時ま７ｔは織物製造
時または編物編成時に供給ま几は付着した油脂類を実質
的に除去した織物または編物生地であるが、さらにその
織物ま交は編物生地は特開昭ま７−４ｔＪ！りに開示の
物理的活性化処理（好ましくはグロー放電処理またはコ
ロナ放電−処理等）を生地の少なくとも片面に施すか、
あるいは特開昭１１−／１４ＡＪＩ＆、特開昭１７−４
ｔ３ｊり等に開示の親水性ポリマー含浸処理等の親水化
処理、ま７’（はこれ°らの処理工程を逐次実施、　す
ることにより織物または編物を親水化し、下側（支持体
に近い側）の層との接着力全強化することができる。

織物または編物生地を試薬層、吸水層または接着層に接
着積層するには特開昭！ｊ−／１ｕＪｊｔ６、特開昭１
７−４ｏ３ｓり等に開示の方法に従うことができる。す
なわち試薬層、吸水層まｆＣは接着層の塗布後未乾燥の
うちに、または乾燥後の層に水（または界面活性剤を少
量含む水）を実質的に均一に供給しｉｉ″ｌｔ膨潤させ
、っ−で織物ｉたは編物生地を湿潤または膨潤している
層の上に実質的に均一に軽く圧力をかけながら接着積層
し一体化する。試薬＠、吸水層ま友は接着層の親水性ポ
リマーバインダーがゼラチンまたはゼラチン誘導体の場
合には層の塗布後ゼラチン（誘導体）が未乾燥のゲル状
態の間に織物または編物生地を接着積層し一体化する方
法を採用することができる。

このようにして織物展開層ま７′ｃは編物展開層を有す
る一体型多層分析要素が完成する。

本発明の一体型多層分析要素の多孔性展開層圧含有させ
ることができる親水性セルロース誘導体は炭素原子数ｌ
から３の低級アルキル基、または炭素原子数ｌから参の
ヒドロキシル基置換低級アルキル基にエリ水酸基の一部
または全部がエーテル化、Ｊれたセルロースエーテル類
であり、それらのうちで水溶性セルロースエーテル類が
好ましい。

セルロースエーテルの例トしてメチルセルロース。

エチルセルロス、ヒドロキシエチルセルロース。

ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチ
ルメチルセルロースがあげられる。親水性セルロース誘
導体の多孔性展開層における含有量は多孔性性展開１ｗ
１ＴｒＬ２当り約０　、　、ｔ　ｇから約ｌｔｇ、好ま
しくは約０．７ｇから約１０ｇの範囲である。

多孔性展開層に含有させることができるＨＬＢ（Ｈｙｄ
ｒｏｐｈｉｌｅ−Ｌｉｐｏｐｈｉｌｅ−Ｂａｌａｎｃｅ
；Ｊ、Ｓｏｃ、Ｃｏｓｍｅｔ、Ｃｈｅｍ、、／、Ｊ／／
　（／２≠り）および「科学」コ３．ｊ≠ｔ（／９！３
）に記載の定義に従う）　＠／　０以上のノニオン性界
面活性剤として多価アルコールエステルエチレンオキシ
ド付加物（縮合物）、ポリエチレングリコールモノエス
テル、ポリエチレングリコールジエステル。

高級アルコールエチレンオキシド付加物（縮合物）。

アルキルフェノールエチレンオキシド付加物（縮合物）
および高級脂肪酸アルカノールアミド等がある。ＨＬＢ
値１０以上のノニオン性界面活性剤は２種以上を組合せ
て用いることができ、または２種以上の組合せ（ＨＬＢ
値ＩＯ未満のノニオン性界面活性剤を含んでもよい）に
エリＨＬ　Ｂ　（！ｆ　’＆適宜に調整して用いること
もできる。

ＨＬＢ値ｉｏ以上−のノニオン性界面活性剤の具体例と
そのＨＬＢｆＩ［を以下にあげる。本発明に用いられる
ノニオン性界面活性剤はこれらの化合物に限られないこ
とは言うまでもない。

界面活性剤の化学構造　ＨＬＢ値 ＰＯＥ翰ンルビタ／モノオレエート／Ｊ、０ＰＯＥ（ｉ
ｔ）ソルビタンモノオレエート　１３．！Ｐ　ＯＥ　（
４）ソルビタントリステアレート　ＩＯ，ｊＰＯＥ（４
））リオレエート　ｉｉ、。

ＰＯＥ（３０１ステアレート　１６．ＯＰ　ＯＥ　ｔ４
０１ステアレー）　／７：、りＰＯＥ（１００）ステア
Ｖ−）／１．ｒＰＥＧ　（μ００）モノステアレート　
／／、４ＰＥＧ（４’θＯ）モノラウレート　ｉｓ、１
ＰＥＧ（１０００）ジラウレート　ｌ≠、１ＰＥＧ　（
／　、ｔ≠Ｏ）ジステアレート　／１１．１ラウリルア
ルコールＥＯＪモル 縮合物　１１．ｒ ラウリルアルコールｐＱ１０モル 縮合物　ｌφ、ｌ ラウリルアルコール８０３０モル 縮合物　／７．昼 オレイルアルコールＥＯ２０モル 縮合物　／！、Ｊ セチルアルコールＥ０２θモル縮合物／ｊ、７ＦＯＲ（
１０オクチルフエニルエーテル　１３゜ｊＰＯＥＱ５）
オクチルフェニルエーテル　／ｊ、／ＰＯＥ■オクチル
フェニルエーテル　１７゜１ＰＯＥαのノニルフェニル
エーテル　／４！、／ＰＯＥ（２１ノニルフエニルエー
テル　ｉｔ、。

トリエタノールアミンオレエート　ｉｓ、。

（註）ＰＯＥ　：ポリエチレンオキシドＰＥＧ：ポリエ
チレングリコール ＥＯ：エチレンオキシド （）内の数字ハエチレンオキシド単位の縮合数多孔性展
開層におけるノニオン性界面活性剤の含有量は７７Ｆ１
　当り約０．Ｉｇから約Ｊｇ、好ましくは約０．２ｇか
ら約２ｇの範囲である。

多孔性展開層に親水性セルロース誘導体およびＨＬＢ１
０以上のノニオン性界面活性剤を含有させる方法として
両者の混合水溶液を多孔性展開層の上から公知の方法に
エリ実質的に均一に塗布または噴霧し乾燥する方法９両
者の混合水溶液に織物生地または編物生地を浸漬し乾燥
ま友は半乾燥状態で吸水層、試薬層または接着層等に積
層し一体化する方法、親水性セルロース誘導体を前記の
処理方法により多孔性展開層に含浸させｔ後にノニオン
性界面活性剤の有機溶媒溶液（例、アセトン溶液等）を
用いて前記の処理方法と同様にしてノニオン性界面活性
剤を多孔性展開層に含浸させる方法、またはこの逆の順
序で両者を順次多孔性展開層に含有させる方法等がある
。さらに多孔性展開層に含有させる試薬成分等の他の成
分とともに両者を多孔性展開層に含有させることもでき
る。

試薬組成物またはその一部の成分は多孔性展開層に含有
させることができる。殊に酵素に代表される高分子物質
ま友は蛋白に結合し友被検成分の解離剤等が試薬組成物
の成分として含まれる場合にはその試薬成分を多孔性展
開層に含有させるのが好まし騒ことがある。多孔性展開
層に試薬組成物ま′ｆＣはその一部の成分を含有させる
には酵素についてｌ”’Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｄｉｓｃｌ
ｏｓｕｒｅＪす／ＪＡ、２Ａ　（Ｏｃｔｏｂｅｒ　ｉり
７１）、特開昭３０−／３７／りλ、特開昭、ｔ７−．
２０１タタ７等、酵素の基質について特開昭１７−２０
１タタを等、蛋白に結合した被検成分の解離剤について
特願昭ｊｒ−４Ｌｔｓμ７等、その他の成分について特
開昭ｊ？−≠り♂ｊ４Ｌ（実施例７）等に開示の方法に
従って実施することができる。

本発明の一体型多層分析要素には前述の諸層のほかに必
要に応じて特開昭ｊ／−μＯ／り１．特開昭よ３−／３
１０ざ２等に開示の検出層または媒染層、特開昭ｒ＜ｚ
−λり７００等に開示のミグレーション阻止層、特開昭
！ｌ−≠ｏｉり１等に開示の中間層、特開昭タフ−４１
≠りに開示の試薬含有微粒子分散層、特開昭ｊ、２−３
μｉｒｅに開示の特定の疎水性ポリマーの均質薄層から
なるバリア一層、特開昭ｊＪ’−７７７乙ｌ、特願昭！
ざ一／１３ｇ２２等に開示の空気バリア一層、特願昭ｊ
ｇ−／２１７３りに開示のガス透過性粘着性中間層等を
組み込んで設けることができる。

本発明の一体型多層分析要素は一辺約／Ｊ’ｉｍから約
Ｊ（７簡の正方形またはほぼ同サイズの円形等の小片に
裁断し特開昭１７−６Ｊ４ＡＪλ、特開昭３≠−／ｊｔ
０７り、実開昭ｊＡ−１１１２４１グ。

実開昭６ｌ−ｊ−３！０　、特表昭５ｒ−ｊｏｉｉぴμ
等に開示のスライド枠等に収めて分析スライドとして用
いるのが製造、包装、輸送、保存、測定操作等の全ての
観点て好ましい。

本発明の一体型多層分析要素は前述の諸特許明細書に開
示の方法に従い約ｊμｍから約３０μｍ。

好ましくは約１１１ｍから約／Ｊμｍの水性液体試料を
多孔性展開層に点着供給し、必要に応じて約２ｏ、。Ｃ
から約＋　ｔ　’ｃの範囲の実質的に一定の温度でイン
クベーションの後に、光透過性支持体側から多層分析要
素内の色変化９発色等の検出可能な変化を反射測光し比
色法の原理により液体試料中の測定対象成分の定量に供
する。光透過性水不透過性支持体の上に吸水層と織物展
開層または編物展開層を設けた一体型多層分析要素では
特開昭ｊ６−タ１，２４Ａｊまｆｃは特開昭ｊ６−７７
１７コに開示の一体型多層分析要素と同様にしてヘマト
クリット値ま７’（は血中ヘモグロビン濃度値をめるこ
とができる。

なお１本発明の一体型多層分析要素は織物または編物生
地を実開昭５７−μコタｊ／に開示の一定の形の一定面
積の水性液体試料点着供給用ポーラス層（パッチ）とし
て最上層に設けｆｃ態様とすることもできる。

以下で実施例および比較ＦｆｒＩｌにより本発明を具体
的に詳細に説明する。

実施例／ 親水化処理しゼラチン下塗層ヲ有する厚さ／♂Ｏμｍの
無色透明ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）フィル
ム（支持体）の上にアルカリ処理脱イオンゼラチン水溶
液を乾燥層厚λＯμ７＋１にな７？ようにして塗布し乾
燥して吸水層を設けた。

−４，ｄｅリエチレンテレフタレー）　（ＰＥＴ）紡績
糸製平織ブロード生地（糸の太さ綿番手ｉ。

Ｏ８相当、生地厚さ１１７０μｍ）の片面ｆｔＯ秒グロ
ー放電処理Ｉ　／　、＆ＫＷ／ｍ２；酸素濃度は減圧調
整）Ｌ、ついでその生地に／Ｗ％のヒドロキシプロピル
セルロース（メトキシ基、２ｒ〜３０％。

ヒドロキシプロ？キシ基７〜ｌ＋２％含有；２％水溶液
の、２０°Ｃでの粘度ｊＯＣＰＳ）とｌＷ％のポリオキ
シエチレンオクチルフェニルエーテル（エチレンオキシ
ド付加モル数３０．ＨＬＢＯｉ”μ）を含むアセトン溶
液で処理してノニオン性界面活性剤と親水性セルロース
誘導体を含浸した。

ついで吸水層を水でほぼ均一に湿潤させ、その上に前述
の含浸処理したブロード生地をグロー放電処理時の電極
側表面を吸水層に向きあわせてかさね全体を加圧ローラ
ー間を通過させ平織ブロード生地を接着層に均一にラミ
ネートして織物展開層を有する一体型多層分析要素？：
調整した。

比較例１および２ 平織ブロード生地に実施例１と同じノニオン性界面活性
剤（比較例１）または親水性セルロース誘導体（比較例
コ）の一方のみをそれぞれ実施例１と同様にして含浸さ
せたほかは実施ｙＩＩｌと同様にして一体型多層分析要
素２種類全調製した。

ついで実施例１および比較例１１．２の各多層分析要素
の織物展開層に７Ｏμｌの人血漿を点着供給し展開に要
する時間と展開面積を測定し第１表の結果を得た。

第１表 本発明の一体型多層分析要素では展開面積、展開時間、
展開状況いずれも好ましい。それに対して比較列／の多
管分析要素ＩＨＬＢ値１７．≠のノニオン性界面活性剤
のみを織物展開層に含浸）では展開面積が好せしい面積
の約２倍で太きすぎ。

比較例−の多層分析要素（親水性セルロース誘導体のみ
を織物展開層に含浸）では展開状況が悪い。

実施例コ 平織ブロード生地含浸処理用溶液の組成を下記のとおり
に変えたほかは実施例１と同様にし、て一体型多層分析
要素を調製した。

平織ブロード生地含浸処理用水溶液の組成メチルセルロ
ース （２％水溶液の、２　ｏｏｃでの粘度！θ（ｐｓ）　２
ｇ ポリオキシエチレンオクチルフェニル エーテル（ＯＥ（来ｌ）単位の平均 縮合数／、ｔ、ＨＬＢ＠ｌ！、／）　／１１水　タリ （米／）ＯＥニオキシエチレン 調製した多層分析要素の織物展開層に人血漿を液量をコ
μｌから１２μｌまで変えて点着供給し。

点着供給液量と展開面積との関係全訳べ文ところ。

点着供給液量（Ｘμｌ）と展開面積（Ｙ−）との間には
直線関係が成立しており、ＸとＹの関係はＹ＝／ｊ、ｔ
７Ｘ＋／　、Ｉ／ であり、相関係数ｒＦｉ　ｒ＝０．タタタｊ　であった
。

実施例３ ＨＩ、Ｂ値の異なるノニオン性界面活性剤を含む下記の
組成の平織ブロード生地含浸処理用水溶液金剛いたほか
は実施例１と同様にして一体型多層分析要素を調製Ｌｆ
ｃ。

平織ブロード生地含浸処理用水溶液の組成メチルセルロ
ース （，２％水溶液の２００Ｃでの粘度 ！　Ｏｃ　ｐ　ｓ　）　２・ｚｇ ノニオン性界面活性剤（ＨＬＢ値 は第２表に記載）　１ｇ 水　タｒｇ 得られた各多層分析要素の織物展開層に７％アルブミン
水溶液ＩＯμノずつを点着供給し展開面填コ表 （註）　Ｐ　ｒ　Ｇ　：プロピレングリコール；ＥＧ：
エチレングリコール：Ｓｒｂ：ソルビタン；０ｃｔｐｈ
　ニオクチルア　工＝　ル；　Ｎｏｎｐｈ　：ノニルフ
ェニル；その他はノニオン性界面活性剤の註記と同じ。

（米、２）異なるＨＬＢ値のノニオン性界面活性剤２種
類を第２表の量比で混合して所望のＨＬＢ値にした。

第２表の結果からＨＬＢ値ｉｏ以上のノニオン性界面活
性剤と親水性セルロース誘導体とを含有する織物展開Ｎ
ｊＩｔ−設けた本発明の一体型多層分析要素においては
点着供給されたアルブミン水溶液Ｃ水性液体試料）の展
開面積が極めて小さくコントロールされることが明らか
である。

実施例μお工び比較例３ 親水化処理しゼラチン下塗層含有する厚さｉｔ０μｍの
無色透明ＰＥＴフィルム（支持体）の上にアルカリ処理
脱イオンゼラチン水溶液を乾燥層厚コＯμｍになるよう
に塗布し乾燥して吸水＠を設けた。

一方、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴＩ紡績糸製
平織ブロード生地（糸の太さ綿番手１００Ｓ相当、生地
厚さ１４ＡＯμｍｍ）の片面をｔｏ秒ダグロー放電処理
　ｉ　、　４　ＫＷ／　ｍ　；酸素濃度は減圧調整）し
た。

ついで吸水層を水でほぼ均一に湿潤させ、その上に前述
のブロード生地をグロー放電処理時の電極側表面を吸水
層に向きあわせてかさね全体を加圧ロー２−間を通過さ
せ平織ブロード生地を接着層に均一にラミネートして織
物展開層を設けた。

ついで織物展開層の上から下記組成の織物展開ｅｔｉ処
理用水溶液を１ｍ　当りのメチルセルロースの含有量が
第３表に記載の割合になる工うにして塗布し乾燥して一
体型多層分析要素（実施例３；３種類）ｔ−調製した。

織物展開層含浸処理用水溶液の組成 メチルセルロース （−２％水溶液の−２０００での粘度 ｊＯｃｐｓ）　コＯｇ 二酸化チタン微粒子 （ルチル型１粒径０．コ！− ０６ａＯμＴｒＬ）　、　１００７７ ポリオキシエチレンオクチルフエニ ルエーテル（ＯＲ単位の平均縮合数 ３０、ＨＬＢ値／７．μ）　１０９ 水　１０００９ 別に織物展開層含浸処理用水溶液で織物展開層の含浸処
理をしなかったほかは実施例μと同様にして一体型多層
分析要素（比較例Ｊ）ｔ−調製した。

本発明と比較例３の各多層分析要素の織物展開層にｉｏ
μｌずつ人血漿を点着供給し３７°Ｃで６分インクベー
ションし展開面積を測定し、あわせて織物展開層におい
て親水性セルロース誘導体に保持され含有されている二
酸化チタン微粒子による光遮蔽機能ま７ｔは光反射（白
色、６ツクグラウンド）機能の目安である背景光学濃度
を支持体を通して反射測光し、第３表の結果をえた。

第３表 第３表の結果から本発明の多層分析要素においては親水
性セルロース誘導体の織物展開層における含有量の広い
範囲にわ几り水性液体試料の展開面積が小さくかつ背景
光学濃度値も小さい。しがし親水性セルロース誘導体な
しでＨＬＢ値ｉｏ以上のノニオン性界面活性剤のみを多
量に織物展開層に含有させ友比較例３の多層分析要素で
は展開面積が好ましい展開面積の約ａＯ％ないし約ｔ。

％大きｂだけでなく背景光学濃度値も大きくて実用する
ことができない。

実施例！および比較９１≠ 綿紡績糸製平織ブロード生地（糸の太さ綿番手ｔｒｏＢ
、生地厚さｉｒｏμｍ、グロー放電処理笑施せず）。

実施例！および比較例弘 綿紡績糸製平織ブロード生地（糸の太さ綿番手ｇｏｓ、
生地厚さｉｔｏμｍ、グロー放電処理実施せず）、ＰＥ
Ｔ７ｊ％綿２ｊ％の混紡績糸製ブロード生地（糸の太さ
綿番手ｒｏＳ相轟、生地厚さ／１０μｍ、グロー放電処
理実施）をそれぞれ用いたほかは実施例１と同様にして
織物展開層が異なる２種類の一体型多層分析要素（実施
例りを調製した。

一方、ＨＬＢ値１０以上のノニオン性界面活性剤と親水
性セルロース誘導体の含浸処理を施さなか：）たほかは
実施例ｊと同様にして織物展開層が異なる一種類の一体
型多層分析要素（比較例１）を調製した。

φ種類の多層分析要素それぞれの織物展開層にｌＯμｌ
の人血漿を点着供給し展開面積と展開状態音調べ第μ表
の結果をえた。

第　μ　表 第μ表の結果から本発明の多層分析要素においては多孔
性展開層が綿ブロード生地、ＰＥＴ−綿混紡ブロード生
地いずれであっても水性液体試料の展開状態が均一でか
つ展開面積が小ζい。しかし比較例≠の多層分析要素に
おいては多孔性展開層がＰＥＴ−綿混紡ブロードの場合
には本発明の多層分析要素に類似の結果であるが綿ブロ
ードの場合には展開状態が幾分不均一でしかも展開面積
は好ましい面積の約３０％ないし約１０％も大きい。

実施例６および比較例！ ゼラチン下塗層を有する厚さ１１１μｍの無色透明ＰＥ
Ｔフィルム支持体の上に下記組成のグルコース測定用試
薬層を乾燥後の層厚が約ｌ！μｍになるようにして塗布
し乾燥した。

グルコース測定用試薬組成 グルコースオキシダーゼ　１ｊＯＯＯ工Ｕペルオキシダ
ーゼ　コｊ０００工Ｕ ／、７−シヒドロキシナ フタレン　ｊｇ 参−アミノアンチピリン　１２ｇ 脱イオンゼラチン　２００９ ポリオキシエチレンノニルフエニルエーテル（平均１０
オキシエチレン 単位含有）−２ｇ この試薬層の上にｏ、、ｔｇのポリオキシエチレンノニ
ルフェニルエーテル（平均ｌＯオキシエチレン単位含有
）、ｆｆ、９の二酸化チタン微粒子（ルチル型１粒子径
０．２１−０．参〇μｍ）および１ｇの脱イオンゼラチ
ンの割合の水分散液を塗布し乾燥して乾燥層厚が約ｊμ
ｍの光遮蔽Ｎ７Ｊヲ設けた。

ついでこの光遮蔽層の上に４Ｌｇの脱イオンゼラチンと
ｏ　、ｘｇのポリオキシエチレンノニルフェニルエーテ
ル（平均１０オキシ工チレン単位含有）−＠ｉｏｏｍｉ
の水に溶解させた溶液ｖｌ−塗布し乾燥して乾燥層厚約
λμｍの接着層を設けた。

一方、ＰＥＴ紡績糸製平織ブロード生地（糸の太さ綿番
手１ｏｏＢ相当、生地厚さｌｕｐｔｉｍ）の片面Ｑｊθ
秒グログロー放電処理／　、　Ａ　ＫＷ／　ｍ”；酸素
濃度は減圧調整）した。

ついで接着層ヲ水でほぼ均一に湿潤させ、その上に前述
のブロード生地をグロー放電処理時の電極側表面を接着
層に向きあわせてかさね全体を加圧ローラー間を通過さ
せブロード生地を接着層に均一にラミネートして織物展
開層を設は皮。

ついで織物展開層の上から下記組成の織物展開１含浸処
理用水溶液ｇ／ｒＩＬ　当り１ｒｏ−の割合で塗布し乾
燥してグルコース濃度定量用一体型多層分析要素（実施
例ｔ）を調製した。

織物展開層含浸処理用水溶液の組成 メチルセルロース （−％水溶液のコＯ０Ｃでの粘 度５０（ｐｓ）　λＯ９ 二酸化チタン微粒子 （ルチル型９粒径Ｏ，コｊ− ０，４Ａθμｍ）　ｉｏｏｇ ポリオキシエチレンオクチルフ ェニルエーテル（ＯＥ単位の 平均縮合数Ｊにｌ、ＨＬＢ１’［／ ７゜ダ）　１０ｇ 水　ｉｏｏｏｇ 一方、織物展開ｅ含浸処理用水溶液の含浸処理を施さな
かったほかは実施例６と同様にしてグルコース濃度定量
用一体型多層分析要素（比較例ｊ）を調製した。

このようにして調製したグルコース濃度定量用一体型多
層分析要素（実施例ｔと比較列ｊの要素）を用い、グル
コースを添加してグルコース含有量を第３表に記載の数
値に調整した人血清を織物展開層にそれぞれｌＯμｌず
つ点着供給し３７°Ｃでｔ分インクベーションした後反
射光学濃度計を用い中心波長２００．の可視光で発色光
学濃度を反射測光し、また人血清とコントロールけつせ
いを点着供給して展開面積を測定して第３表の測定値を
得た。

（米３）人血ｆｆのグルコース濃度はへキソキナーゼー
〇−ｊ−ＰＤＨ法で検定した値・（米ｕ　）　Ｗｅｒｎ
ｅｒ−Ｌａｍｂｅｒｔ社製コントロール血清 第３表の結果から本発明の多層分析要素では比較例の多
層分析要素に比べて検量線の傾きが大きく、グルコース
含有量の大きい領域に至っても検量線の傾きが小さくな
らないので被検成分であるグルコース含有量の広い範囲
にわたって正確な定量が可能であることが明らかである
。

実施例７ 太さ約２０Ｄ相当のＰＥＴ紡績糸からなる厚さ約Ｊ、ｊ
Ｏμｍの水洗脱脂剤トリコット編生地で。

その片面を６０秒グロー放電処理（１，４ＫＷ／ｍ　；
酸素濃度は減圧調整）した編物生地を用い几ほかは実施
例ｔと同様にしてグルコース濃度定量用一体型多層分析
要素を調製した。

実施例ｔと同様の測定をして第６表の結果が得られた。

第　６　表 第を表の結果から編物展開層に親水性セルロース誘導体
とＨＢＬ値ＩＯ以上のノニオン性界面活性剤を含有する
本発明のグルコース濃度定量用一体製多層分析要素は実
施例乙の本発明の織物展開＠を有する多層分析要素と同
学に優れた多層分析要素であることが明らかである。

特許出願人　富士写真フィルム株式会社手続補正書（方
船 昭和ｊり年　１月ｔＺ日 特許庁長官殿　や １、事件の表示　昭和！り年特許願第７りｉｓり号２、
発明の名称　一体型多層分析要素 ３、補正をする者 事件との関係　特許用）願人 ４、補正命令の日付　昭和！２年７月４／日５、補正の
対象　明細書 ６、補正の内容 タイプ印書（黒色）にエリ鮮明に浄書した明細書を提出
致します。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）光透過性水不透過性支持体の上に親水性ポリマー
   バインダーを含む吸水層および多孔性展開層がこの順に
   積層一体化されてなる一体型多層分析要素であって、前
   記展開層が織物または編物力１らなり、かつ前記展開層
   に親水性セルロース誘導体およびＨＬＢ値ｉｏ以上のノ
   ニオン性界面活性剤を含有することを特徴とする一体型
   多層分析要素。
2. （２）光透過性水不透過性支持体の上に液体試料中の成
   分と反応して検出可能な変化を生じさせる少なくとも一
   つの試薬を含む少なくとも一つの吸水性または水浸透性
   の試薬層お工び多孔性展開層がこの順に積層一体化され
   てな仝−一体型多層分析要素あって、前記展開層が織物
   ｔたは編物カーらなり、かつ前記展開層に親水性セルロ
   ース誘導体お工びＨＬＢ［１０以上のノニオン性界面活
   性剤を含有することを特徴とする一体型多層分析要素。
3. （３）前記展開層に液体試料中の前記成分が前記試薬層
   に含まれる試薬と反応するに先立って反応しうる少なく
   とも一つの試薬が含まれる特許請求の範囲λに記載の一
   体型多層分析要素。
4. （４）光透過性水不透過性支持体の上に親水性ポの成分
   と反応して検出可能な変化を生じさせる少なくとも二つ
   の試薬を含む多孔性展開層がこの順に積層一体化され□
   てなる一体型多層分析要素であって、前記展開層が織物
   ま友は編物からなり、かつ前記展開層に親水性セルロー
   ス誘導体およびＨＬＢ値ｉｏ以上のノニオン性界面活性
   剤を含有す本ことを特徴とする一体型多層分析要素。
5. （５）前記吸水層に前記成分と前記展開層に含まれる試
   薬との反応生成物左さらに反応して検出可能な変化を生
   じさせる少なくとも一つの試薬を含む特許請求の範囲参
   に記載の一体型多層分析要素。