JPS62138756A - 一体型多層分析要素 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明は水性液体試料中の予め定められたアナライト（
分析対象成分）を定量分析するための平板状またはシー
ト状の一体型多層分析要素に関し。

詳しくは水性液体試料、殊に生物体液２例えば全血、の
中のアナライトを定量分析するのに適した臨床検査に有
用な平板状またはシート状の一体型多層分析要素に関す
るものである。

［従来技術］ 乾式の分析要素の一形態として、透明支持体の上に呈色
反応試薬がゼラチンに代表される親水性ポリマーバイン
ダーに分散含有されている試薬層と最上層に多孔性展開
層（以下、展開層ということがある）が密着して接着さ
れた構成の一体型多層分析要素（以下、多層分析要素と
いうことがある）が特公昭５３−２１６７７　、米国特
許３９９２１５８．特開昭５５−９０８５９　、特開昭
５５−１６４３５６　、特開昭５７−６Ｇ３５Ｇ　、特
開昭５２−３４８８　、米国特許Ｒｅ３０２６７、特開
昭５８−７７６６１　、特開昭６０−２２２７６９　、
特開昭５７−１４８２５０、特開昭５７−１２５８４７
等において多数提案され、実用に供されている。これら
の多層分析要素では全血試料に適応させるために展開層
に二酸化チタン微粒子等の光）ｌ！蔽注性微粒子含有さ
せるか。

展開層と試薬層の間に光速Ｆ！層を設けている。多層分
析要素はその展開層に約１０ｐ１の全血または血漿等の
水性液体試料を点着するだけの乾式操作で被検成分の正
確な定量分析、または半定量分析が実施できるので、臨
床検査分野での使用が増大しつつある分析手段である。

［従来技術の問題点］ 上述の一体型多層分析要素では試薬層または光遮蔽層等
の展開層以外の層にゼラチンに代表される親水性ポリマ
ーバインダーを用いているので水浸透性ではあるが、一
般的にアナライトの拡散移動による浸透が遅いこと、高
分子アナライトや脂質または疎水性アナライトに対して
は不浸透性または難浸透性で、この種のアナライトに関
しては適応できないという問題点があった。また水性）
α体試料として全血を用いる場合には特に全てのアナラ
イトに適応てきないという問題点があった。

従来高分子アナライトや脂質または疎水性アナライトに
対応するために、特公昭５６−４５５９９に記載のコレ
ステロール定量分析用多層分析要素では酵素を含む呈色
試薬組成物を展開層に含有させることが提案されている
。しかしこの多層分析要素では全血試料に対して光遮蔽
効果が不充分という問題点があった。また特開昭５９−
１２０９５７に記載の多層分析要素では展開層に接して
固体微粒子が親水性ポリマーバインダ中に保持された構
造の連続空隙含有多孔質構造体層の空隙に試薬組成物が
含有されている多孔性試薬層が提案されている。この多
層分析要素では多孔性試薬層に含有させる試薬組成物が
制限されるという問題点があった。

［発明の目的コ 本発明の目的は発色反応に充分な量のアナライトが試薬
層まで速やかに拡散浸透できる一体型多層分析要素を提
供することである。

本発明の他の目的は全血試料中の赤血球を分前する機能
を有し、比色法のための反射光学濃度測定時に赤血球に
よる妨害を回避して全血試料中のアナライトの定量分析
を可能にする一体型多層分析要素を提供することである
。

本発明の他の目的は高分子アナライトや脂質または疎水
性アナライトの定量分析に適した一体型多層分析要素を
提供することである。

本発明の他の目的はアナライトとの発色反応に充分な量
の呈色試薬試薬組成物が含有されており。

検量線の勾配が大きく、測定精度の高い一体型多層分析
要素を提供することである。

本発明の他の目的は呈色試薬試薬組成物の経時劣化が少
なく、カブリが少なく、測定感度が高く。

測定精度の高い一体型多層分析要素を提供することであ
る。

さらに本発明は、特願昭５９−１２６２６７に記載の一
体型多層分析要素、すなわち相接する２面の間において
液体の均一通過が妨げられないように微貫通空隙を構成
するように部分的に配置された接着剤により密着して接
着されて一体化された（多孔性接着または微多孔性接着
された）少なくとも２層の微多孔性シートを含む一体型
多層分析要素を改良する発明でもある。

（以下余白） ［発明の構成］ 本発明は、光透過性水不透過性支持体の上に呈色試薬組
成物が含有されている少なくとも１層を含めて複数の層
を有する一体型多層分析要素において。

支持体から遠い側から順に繊維質多孔性シート。

上側非繊維質多孔性シート、下側非繊維質多孔性シート
、および親水性ポリマーバインダーを含有する吸水層を
有し、前記３層の多孔性シー！・はそれぞれその隣接す
る２面の間において液体の均一通過が実質的に妨げられ
ないように微貫通空隙を構成するように部分的に配置さ
れた接着剤により実質的に密着して接着され一体化され
ている一体型多層分析要素である。

［発明の構成の詳細な説明コ 繊維質多孔性シートは最外層（支持体から最も遠い最上
Ｐりに位置して主に展開作用を有する層として機能する
。すなわち、その上側表面（支持体から遠い側の表面）
に点着供給された水性液体試料をその中に含有している
成分を実質的に偏在させることなしに単位面積当りほぼ
一定量の液体試料が分布するように、受容した水性液体
試料を横方向（シートの面の方向）に拡散させ、同時に
隣接する下側の層に水性液体試料を単位面積当りほぼ一
定容量の割合で受容した水性液体試料を供給する作用（
展開作用またはメータリング作用）を有する層である。

さらに繊維質多孔性シートは水性液体試料中の分析を妨
害する非溶解性物質（例。

全血試料中の赤血球等）を濾過除去する作用もする層で
ある。

繊維質多孔性シートとして、織物生地２編物生地、有機
ポリマー繊維バルブ含有抄造紙および濾紙、ガラス繊維
バルブ含有抄造紙およびン２紙、繊維質不織布等を用い
ることができる。

織物生地としては、特開昭５５−１６４３５６．特開昭
６０−２２２７７０等に記載の展開層用の平織物が好ま
しく。

平織物のうちでは細布生地、全中生地、ブロード生地、
ボブリン生地等が好ましい。織物生地を構成する糸とし
ては紡績糸（加捻糸）が好ましい。織物生地の糸の太さ
は綿紡績糸番手で表して約２０８から約１５Ｏ３，好ま
しくは約４Ｏ３から約１２ＯＳ相当の範囲、または絹糸
デニールで表して約３５０から約３００Ｄ、好ましくは
約４５Ｄから約１３０　Ｄの範囲。

織物生地の厚さは約１１００１Ｊから約５００…、好ま
しくは約１２０ＬｉｌＴｌから約３５０ｕｍの範囲、織
物生地の空隙率は約４０％から約９０％、好ましくは約
５０％から約８５％の範囲である。

編物生地としては、特開昭６０−２２２７６９　、特開
昭６０−２２２７７０等に記載の展開層用の経（たて）
メリヤス編生地が好ましく、経メリヤス編生地のうちで
はトリコット編生地、う°ツシエル編生地、ミラニーズ
編生地、ダブルトリコツ）［生地が好ましい。

編物生地を構成する糸としては紡績糸（加捻糸）が好ま
しい。編物生地の糸の太さは綿紡績糸番手で表して約４
０Ｓから約１５０Ｓ、好ましくは約６０Ｓから約１２０
Ｓ相当の範囲、または絹糸デニールで表して約３５Ｄか
ら約１３０Ｄ、好ましくは約４５０から約９０Ｄの範囲
９編物生地の編成工程時のゲージ数としては約２０から
約５０の範囲１編物生地の厚さは約＋００１Ｊ１１から
約６００ｕｍ、好ましくは約１５０ｕｎから約４００ｕ
ｍの範囲９編物生地の空隙率は約４０％から約９０％、
好ましくは約５０％から約８５％の範囲である。

有機ポリマー繊維バルブ含有抄造紙としては。

特開昭５７−１４８２５０等に記載のポリエチレン繊維
だけのバルブからの抄造紙、およびポリエチレン繊維（
３０〜７０％）とセルロース繊維等の天然繊維の混合バ
ルブからの抄造紙が好ましい。紙の厚さは約８０…から
約４００Ｌｆｆ１１．好ましくは約１００回から約２５
０−の範囲１紙の空隙率は約２０％から約８０％、好ま
しくは約５０％から約７０％の範囲である。

繊維質多孔性シートのうち織物生地および編物生地（以
下２両者をあわせて布ということがある）は水洗等の脱
脂処理により少なくとも糸製造時または布製造時に供給
または付着した油脂類を実質的に除去した布を用いる。

抄造紙およびカレンダー処理した抄造濾紙は油脂類を実
質的に付着していないものを用いる。繊維質多孔性シー
トは特開昭５７−６６３５９等に記載の物理的活性化処
理（好ましくはグロー放電処理、またはコロナ放電処理
）をその片面または両面に施すか、あるいは特開昭５５
−１０４３５６．特開昭５７−６Ｇ３５９　、特開昭５
７−１４８２５０等に記載の界面活性剤、好ましくはノ
ニオン性界面活性剤水溶液の含浸処理、塗布またはスプ
レィ処理、親水性ポリマー水溶液の含浸処理、塗布また
はスプレィ処理、特開昭Ｇｏ　−２２２７７０に記載の
親水性セルロース誘導体とＨＬ　Ｂ　ｆｌαｌＯ以上の
ノニオン性界面活性剤の水溶液の含浸処理、塗布または
スプレィ処理、これらの２種以上の処理等により多孔性
接着による下側の層との接着の強化、メータリング作用
、ヘマトクリッＩ・値対応のメータリング作用等をコン
トロールすることができる。

本発明の一体型多層分析要素において微貫通空隙構造接
着剤層により多孔性接着されて隣接する２層の非繊維質
多孔性シートのうち上側非繊維質多孔性シートは主に水
性液体試料中の分析を妨害する非溶解性物質（例、全血
試料中の赤血球、白血球等の微粒子成分）を濾過する作
用、および光遮蔽作用を有する層として機能する。下側
非繊維質多孔性シートは光遮蔽作用を有する層、または
試薬組成物の一部成分または全成分を含有保持する多孔
性試薬層として機能する。

非繊維質多孔性シートとして特公昭５３−２１６７７゜
米国特許３９９２１５８．米国特許１４２１３４１等に
記載のセルロースエステル、例えばセルロースアセテー
ト、セルロースブチレート、セルロースアセテートブチ
レート（ン昆合エステル）、セルロースニトレート：セ
ルロースエーテル、例えばエチルセルロース；炭酸エス
テルポリマー、例えばビスフェノールＡのポリカルボネ
ート；ポリアミド、例えばポリカブラミド（６−ナイロ
ン）、ポリへキサメチレンアジボアミド（６，６−ナイ
ロン）等からなるメンブランフィルタ（プラッシュポリ
マ一層）、第９回プラスチックフィルム研究会講座講演
要旨集（高分子学会、　１９８４年２月２２発行）、　
Ｍｅｍｂｒａｎａ、　Ｉ　ｎｃ、カタログ（１９８２年
７月発行）等に記載のポリエチレン微多孔性膜、ポリプ
ロピレン微多孔性膜等のポリオレフィン微多孔性膜、特
公昭５３〜２１６７？、米国特許３９９２１５８等に記
載のポリマーミクロビーズ、ガラスミクロビーズ、珪藻
土等の微粒子が親水性ポリマーバインダーに保持されて
なる連続微空隙含有多孔性層、特開昭５５−９０８５９
に記載のポリマーミクロビーズが水で膨潤しないポリマ
ー接着剤で点接触状に接着されてなる連続微空隙含有多
孔性Ｎ（三次元格子状粒状構造物層）等の非繊維質等方
的多孔性層等を用いることができる。

微貫通孔構造接着剤により多孔性接着された２層の非繊
維質多孔性シートのかわりに特願昭６０−２３２７２６
に記載の多Ｎ塗布法または多層流延法により形成された
２Ｎの高分子微多孔性層がその界面で密着一体化してな
る連続空隙構造の複合メンブランフィルタ（複合プラッ
シュポリマ一層）を用いることができる。

下側非繊維質多孔性シートの空隙サイズは約２０ｎｍか
ら約３０ｕｍ＋好ましくは約５０ｎｍから約１０ｕｍの
範囲、空隙率は約２０％から約９０％、好ましくは約４
０％から約８５％の範囲、厚さは約２０−から約５００
…、好ましくは約８０−から約３５０ｕｍの範囲である
。上側非繊維質多孔性シートの空隙サイズ（平均最小孔
径）は約０．８−から約３０ｐｍ、好ましくは約１　、
０　Ｉｎから約１０ｕｍの範囲、空隙率は約２０％から
約９０％、好ましくは約４０％から約８５％の範囲、厚
さは約２０１血から約５００１Ｊｍ、好ましくは約８０
Ｌ１１Ｔｌから約３５０ｕｍの範囲、上下２層の非繊維
質多孔性シートの合計厚さは約４０１１ｍから約５００
ｕｍ＋好ましくは約８０ｕｍから約３５０１１ｍの範囲
が充分な測定感度を得るために有利である。

非繊維質多孔性シート中には全血中のヘモグロビンの赤
色等の反射光学裁度測定の光学的妨害排除のために特公
昭５３−２１６７７　、米国特許３９９２１５８゜特開
昭５５−９０８５９　、特願昭６０−２３２７２６等に
記載の方法に従って白色の難溶性二酸化チタン微粒子、
硫酸バリウム微粒子、黒色の難溶性カーボンブラック、
白色のアルミニウム微粒子または微少フレーク等の微粒
子をいずれか１層または２層に含有させて光反射層また
は光遮蔽層としての機能を高めることができる。あるい
はこれらの微粒子の分散液を非繊維質多孔性シートに、
好ましくは繊維質多孔性シートの接着される側と反対側
（下側）から浸透させ空隙の内部表面に付着含有させる
方法で同様の目的を達成することができる。微粒子分散
）αにはゼラチン、ポリビニルアルコール、ポリアクリ
ルアミドのようなバインダを高分子アナライトの通過を
実質的に妨害しない範囲の含有量で含んでよい。これら
の微粒子のうちでは二酸化チタン微粒子、硫酸バリウム
微粒子が好ましい、三次元格子状粒状構造物層を用いる
場合にはいずれかの微粒子が接着剤で点接触状に接着さ
れてなる三次元格子状粒状構造物層を用いることができ
る。

２Ｐｉの非繊維質多孔性シート層には公知の界面活性剤
、好ましくはノニオン性界面活性剤な含浸保持させるこ
とができる。界面活性剤の含浸保持により水性液体試料
の拡散、浸透９通過が均一になる。

本発明の多層分析要素においては呈色試薬組成。

物は支持体以外のいずれか１層又は２以上の複数層に含
有されている。呈色試薬組成物が含有される層の例とし
て、　１１水性ポリマ一バインダ一層と下側非繊維質多
孔性シート層の２層、親水性ポリマーバインダ一層と上
側非繊維質多孔性シート層の２Ｎ、２層の非繊維質多孔
性シート層、親水性ポリマーバインダ一層と２層の非線
！ｉＩ質多孔性シート層の３層、繊維質多孔性シート層
と２ＦＩの非繊維質多孔性シート層の３Ｎがある。呈色
試薬組成物はこれらのいずれか２層又は３層にその全成
分が含有されるように配合できるほか、呈色試薬組成物
の特定の複数成分の多層分析要素製造時又は分析操作使
用前の保存時の呈色試薬組成物の特定の複数成分の相互
作用によるカブリの増大又は感度低下等の性能劣化を防
ぐ目的で特定の複数成分各々を別異の２層以上の複数層
にわけて含有させることができる。実質的に同じ呈色試
薬組成物の全成分が２Ｎ以上の複数層に含有される態様
においても、各層の試薬組成物の単位面積当りの含有量
が実質的に同一である態様と含有量が異なる態様とがあ
る。

繊！ＩＩ質多孔性シート又は２層の非繊維質多孔性シー
ト中には呈色試薬組成物の全成分または一部成分を含有
保持させることができる。この場合。

繊維質多孔性シート又は上側非繊維質多孔性シート中に
試薬組成物の酵素を含む一部成分、殊にオキシダーゼ、
加水分解酵素等の酵素とその作用を活性化又は補助する
成分を含有保持させることにより測定感度が高くなり好
ましい場合がある。あるいは特開昭５９−２１３９８．
特願昭６０−１２２３４８等に記載の内因性アンモニア
捕捉試薬組成物のような前処理試薬組成物を繊維質多孔
性シート又は上側非繊維質多孔性シート中に含有保持さ
せて前処理層又はトラップ層として機能させることもで
きる。

呈色試薬組成物は水性液体試料中のアナライトとこのア
ナライトを分析するするために選択した酵素が関与する
（触媒する）生化学反応または化学反応によって決り２
選択した反応が２種以上の酵素が関与する反応の場合に
はそれらの酵素を含む試薬組成物の全成分を前記の２Ｎ
又は３層に含有させることもできるし、必要に応じて試
薬組成物中の特定の複数成分を２層以上の別異の層に分
けて含有させることもできる。

酵素を少なくとも１種含む呈色試薬組成物の例として、
米国特許３９９２１５８．特公昭５３−２１６７７　。

特開昭５４−２６７９３　、特開昭５５−１６４３５６
　、特開昭５７一２０８９９？　、特開昭５９−２０８
５３　、特開昭５９−４６８５４　、特開昭５９−５４
９６２．特公昭５５−２５８４０等に記載のグルコース
オキシダーゼとペルオキシダーゼを含むグルコース分析
用改良Ｔ　ｒｉｎｄｅｒ試薬絹成物、特組成５６−４５
５９９　、特開昭５９−１９３３５２等に記載のコレス
テロールオキシダーゼ、ペルオキシダーゼと必要により
配合されるコレステロールエステラーゼを含むコレステ
ロール分析用試薬組成物、特摩昭５２−３４８８　。

特開昭５８−７７６（ｉ　１　、特開昭５６−７０４６
０等に記載のウレアーゼを含む血液尿素窒素（Ｂ　Ｕ　
Ｎ）分析用試薬組成物、特開昭５３−２４８９３等に記
載のリボプロティンリパーゼ、グリセロールキナーゼ、
α〜グリセロールー３−燐酸オキシダーゼ、ペルオキシ
ダーゼを含むトリグリセリドまたはグリセロール分析用
試薬組成物、特開昭５４−１５１１９３　、特開昭６０
−７８５８０に記載のビリルビン特異的酸化酵素とペル
オキシダーゼを含むビリルビン分析用試薬組成物、特開
昭５３−２６１８８、特開昭５９−１９３３５２等に記
載のウリカー°ゼとペルオキシダーゼを含む尿酸分析用
試薬組成物。

特開昭５５−１２４４９９　、特開昭５８−８６４５７
等に記載のペルオキシダーゼを含む過酸化水素検出用呈
色試薬組成物等がある。

多孔性シートを多層分析要素に組こむ前に多孔性シート
に酵素含有試薬組成物を含有保持させる方法の例として
、多孔性シートを酵素含有試薬組成物水溶液又は有機溶
媒含有溶液に浸漬し、多孔性シートを溶液から取りだし
、乾燥（好ましくは減圧乾燥、減圧凍結乾燥）させる方
法がある。

多層分析要素に組みこまれた多孔性層に酵素含有試薬組
成物を含有保持させる方法の例として。

特開昭５９−１７１８６４　、特開昭６０−２２２７６
９　、特開昭６０−２２２７７０等に記載のように、接
着層又は吸水層等の上に多孔性層を設けた後、多孔性層
の上から酵素含有試薬組成物含有水溶液又は有機溶媒含
有溶液を塗布し乾燥（好ましくは減圧乾燥）させる方法
がある。

呈色試薬組成物中の特定の複数成分各々を別異の２Ｎ以
上の複数層に分離して含有保持させるのが好ましい例と
して、電子伝達剤２色素前駆体。

酸化型補酵素、前記酸化型補酵素を還元型補酵素に変え
ろる酵素又は酵素基質を主要成分とする。

酵素活性又は蛋白結合低分子アナライトを還元型補酵素
を介して測定するための呈色試薬組成物がある。この場
合、電子伝達剤と色素前駆体とを別異の２Ｎに分離して
（他の成分はこれら２成分のいずれか一方とともに、あ
るいは適宜に別異の層に分離して）含有保持させること
により呈色試薬組成物の経時劣化の減少、カブリの減少
、測定感度の増大、測定精度の向上が達成されて好まし
い場合が多い。

電子伝達剤９色素前駆体、＃化型補酵素、前記酸化型補
酵素を還元型補酵素に変えうる酵素又は酵素基質を主要
成分とする呈色試薬組成物の例として、　Ｃｌ１ｎｉｃ
ａ　Ｃｈｉｍｉｃａ　Ａｃｔａ、ｌｉ、２１０（１９６
５）。

特開昭５９−４４６５８　、特開昭５９−８８０９７に
記載のラフデートデヒドロゲナーゼ活性測定用呈色試薬
組成物、Ｃ１１ｎｉｃａ　Ｃｈｉｍｉｃａ　Ａｃｔａ、
２ｆｉ、４３１（１９７０）、特開昭５０−４４８９４
　、特開昭５７−２０８９９８　、特開昭５９−４４０
５８　。

特開昭５９−８８０９７に記載のアスバルデートアミノ
トランスフエラーゼ活性測定用呈色試薬組成物、アラニ
ンアミノトランスフェラーゼ活性測定用呈色試薬組成物
、特公昭４６−９９８８に記載のクレアチンキナーゼ活
性測定用呈色試薬組成物、特開昭４９−１１３９５、特
開昭５９−４４６５８　、特開昭５９−８８０９７に記
載のクレアチンホスホキナーゼ活性測定用呈色試薬組成
物、米国特許３７９１９３３に記載のテストステロン活
性測定用呈色試薬組成物およびアンドロステロン活性測
定用呈色試薬組成物、特公昭５６−３９６３７に記載の
アミラーゼ活性測定用呈色試薬組成物、特公昭５３−２
１６７７に記載のグリセロール分析用呈色試薬組成物、
特開昭５０−１２６４９４　、特開昭５３−２４８９３
　、特公昭５６−３８１９９に記載のトリグリセリド分
析用呈色試薬組成物等がある。

試薬層を下側非繊維質多孔性シートと吸水層との間に設
ける場合には、試薬層は吸水層の親水性ポリマーと同様
な親水性ポリマーバインダー中に呈色試薬組成物が分散
含有されている層としで設けるのが好ましい。

（以下余白） 吸水層は水を吸収して膨潤する親水性ポリマーを主成分
とする層で、吸水層の界面に到達または浸透した水性液
体試料の水を吸収できる層であり。

全血試Ｈを用いる場合には水性液体成分、血漿の下側非
繊維質多孔性シート（多孔性試薬ｐｊりへの浸透を促進
する作用を有している。吸水層に用いられる親水性ポリ
マーは水吸収時の膨潤率が３０℃で約１５０％から約２
０００％、好ましくは約２５０％から約１５００％の範
囲のポリマーである。親水性ポリマーの具体例として特
開昭５９−１７１８６４　、特開昭６０−１１５８５９
等に開示の酸処理ゼラチン、脱イオンゼラチン等のゼラ
チン、フタル化ゼラチン、ヒドロキシアクリレートグラ
フトゼラチン等のゼラチン誘導体、特開昭５９−１７１
８６４　、特開昭６０−１１５８５９等に開示のアガロ
ース、プルラン、プルラン誘導体。

ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコール、ポリビニ
ルピロリドン等がある。これらの親水性ポリマーは単独
で、あるいは２種以上を組合せて用いることができる。

吸水層には一般的にはゼラチンまたはゼラチン誘導体が
好ましいが、アナライトがアルブミンや総蛋白等の場合
には蛋白誘導体のゼラチン以外の親水性ポリマー、ポリ
アクリルアミド、ポリビニルアルコール等を用いるのが
好ましい。

吸水層の乾燥時の厚さは約２ｐｍから約１１００ｕ、好
ましくは約５ｕｍから約３０ｕｍの範囲、被覆量では約
２８１ＩＩ＋２から約１００ｇ／ｍ２．好ましくは約５
ｇ１ｆｆ１２から約３０ｇ／ｒａ２の範囲である。吸水
層には公知のｐＨ緩衝剤。

有機カルボン酸、酸性ポリマー、塩基性ポリマー等を含
有させて使用時（分析操作実施時）のｐＨを調節するこ
とができる。さらに吸水層には公知の媒染剤、ポリマー
媒染剤等を含有させることができる。吸水層は実質的に
透明であることが好ましい゛が、必要に応じて吸水層中
に二酸化チタン微粒子。

硫酸バリウム微粒子、カーボンブラック等を少量分散含
有させて光学的性能を調節することができる。

本発明の一体型多層分析要素の光透過性水不透過性支持
体としては従来公知の多層分析要素に用いられている光
透過性（透明な）水不透過性支持体を用いることができ
る。その具体例としてはポリエチレンテレフタレート、
ビスフェノールＡのポリカルボネート、ポリスチレン、
セルロースエステル（例、セルロースジアセテート、セ
ルローストリアセテート、セルロースアセテートピロビ
オネート等）等のポリマーからなる厚さ約５０１ＪＩＩ
＋から約１ｍｍ、好ましくは約８０−から約３ｏｏｕｍ
の範囲の透明な、すなわち波長約２００ｎｍから約９０
０ｎｍの範囲内の少なくとも一部の波長範囲の電磁輻射
線を透過させる平滑な表面を有するフィルム状（シート
状）または平板状の支持体を用いることができる。支持
体中には必要に応じて二酸化チタン微粒子、硫酸バリウ
ム微粒子、カーボンブラック等を分散含有させて光学的
性能を調節することができる。支持体の表面には必要に
応じて公知の下塗層または接着層を設けて支持体の上に
設けられる吸水層と支持体との接着を強固にすることが
できる。

本発明の一体型多層分析要素においては繊維質多孔性シ
ートと２１７！の非繊維質多孔性シートとの間で上側か
ら下側に水性液体の均一通過が円滑に行われるようにこ
れらの多孔性シートは相互に微貫通空隙構造（または微
貫通孔構造）の接着剤層により実質的に密着して接着し
て一体化（多孔性接着又は微多孔性接着）される。本明
細書において。

水性液体の均一通過とは、連続微空隙を有する繊維質多
孔性シートの上側表面に点着供給された水性液体がその
連続微空隙のメータリング作用により拡散されその層の
下側表面に達した分布状態を実質的に保ったまま隣接す
る上側非繊維質多孔性シートの上側表面に水性液体が通
過すること、または上側非繊維質多孔性シートの下側表
面に達した水性液体がその分布状態を実質的に保ったま
ま隣接する下側非繊維質多孔性シートの上側表面に水性
液体が通過することを意味する。

微貫通空隙構造の接着剤層としては９例えば印刷におけ
る網点と同じように円、方形、星形、不定形等のドツト
状の接着剤が整然と配列されたもの、平行状細線（波型
または直線）形、交叉細線（波型または直線）形に配列
されたもの（この場合。

微貫通孔構造接着剤層になる）、スクリーンレスドツト
（砂目状パターン）のように微視的にはドツトの形、大
きさ、配列はランダムであるが巨視的には均一性が感じ
られるように配列されたもの等の部分的配列のいずれか
になるように配置された接着剤層を用いるられる。単位
面積当りの接着剤のドツトや線が占める総面積の比率、
すなわち接着剤面積率は、印刷における網点面積率（日
本印刷学会編「印刷工学便覧Ｊ１９８３年発行、　、２
６２−２６３頁）と同様の定義により、約８０％以下、
好ましくは約５０％以下、最も好ましくは約５％から約
２０％の範囲である。接着剤のドツト径または線の太さ
は、約５０−から約１１の範囲で接着力が損なわれない
範囲で小さいことが望ましい。接着剤ドツトまたは線の
相互間隔は、約３０μｍから約３ｍｍの範囲で接着され
る２枚の多孔性シートの対向する２表面の間に毛細間隙
ができない範囲で実験により決めることが出来る。１例
として、厚さ１５０１．１ｍの平滑表面の２枚のメンブ
ランフィルタは上記の数値範囲内のドツト径とドツト間
隔でドツト状に配置された接着剤で実質的に密着して接
着されて一体化（多孔性接着）し、１表面に水性液適を
点着したときに形成される液の拡がり模様と面積はンυ
滴点着側表面とその反対側表面で実質的な差が見られな
い。

他の例として厚さ１５０ｐｍの平滑表面のメンブランフ
ィルタと厚さ２００μｍのトリコット編物生地とを接着
する場合には、後者表面の糸の山部だけに接着剤をつけ
てから両者を貼りあわせろと両者を多孔性接着させるこ
とができる。

接着剤としては）α状接着剤、非ニユートン枯性の液体
接着剤、ボットメルト 等を用いることができる。液状接着剤としては粘度約１
０００ｃｐｓ以上て延糸性の少ない接着剤が，多孔性シ
ートの表面に局在し，多孔性シートの内部方向への侵入
の少ない点て好ましい。その具体例としてポリビニルア
ルコール水溶液，デギストリン水）古漬，カルボキシメ
チルセルロース水，古漬がある。非ニユートン粘性の液
体接着剤としては固体微粒子等を適宜混合して非ニユー
トン粘性を付与された液体接着剤が好まし′い。その具
体例として澱粉糊，メチルセルロース添加澱粉糊，酢酸
ビニル−ブチルアクリレートコポリマー水性エマルジョ
ンがある。ホットメルト型接着剤としては温度約５５℃
以下で固体状の接着剤が好ましい。その具体例としてエ
チレン−酢酸ビニルコポリマー。

エチレン−イソブチルアクリレートコポリマーがある。

ホットメルト型接着剤は糸状，！［主系状。

顆粒状，微粒子状，粉状等のものを適宜選択して用いる
ことができる。

接着剤の部分的存在パターン、すなわち網点状パターン
、平行状細線（波型または直線）形パターン、交叉細線
（波型または直線）形パターン、砂目状パターン等を形
成する好ましい方法として印刷方式による方法がある。

印刷方式として，凹版またはグラビア版により直接多孔
性シートの表面に接着剤パターンを形成する方法，オフ
セット印刷方式で一度ゴムローラー，離型紙等の上に接
着剤パターンを移し取り，さらにこの接着剤パターンを
多孔性シートの表面に移す方法，ポリエチレンテレフタ
レート紗スクリーンまたはメタルスクリーンを通してス
クリーン印刷方式により直接またはオフセラＩ・方式で
多孔性シートの表面に接着剤パターンを形成する方法等
がある。ホットメルト型接着剤を用いる場合にはこれら
の方法は接着剤の融解温度より高い温度で実施すること
ができる。

接着剤の部分的存在パターンを形成する他の方法として
，仮支持体の表面に固体微粒子等を適宜混合して非ニユ
ートン粘性を付与された液体接着剤の薄層を塗布形成し
，その上にメンブランフィルタまたは抄造紙を一様に重
ねた後すぐにこれを剥離することによりメンブランフィ
ルタまたは抄造紙の表面に印刷におけるスクリーンレス
ドツト状の接着剤パターンを形成する方法がある。

接着剤の部分的存在パターンを形成する他の方法として
，仮支持体の表面に接着剤の薄層を塗布し，その上に織
物生地または編物生地のような規則的な微細凸凹表面の
多孔性シートを一様に重ねた後すぐにこれを剥離するこ
とにより織物生地または編物生地の布目の山部（糸の山
部）だけに点状に接着剤を付着させ，この多孔性シート
を池の平滑な表面の多孔性シート（メンブランフィルタ
等）に貼りあわせて密着一体化（多孔性接着）する方法
がある。

接着剤の部分的存在パターンを形成する他の方線として
、繊維質多孔性シート全体を接着剤、８液中に浸漬し、
シートを溶液から取り出し、シートを圧搾して接着剤溶
液を紋り出し、繊維の表面だけに接着剤が付着している
状態にし、Ｗｋ維質多孔性シートを他の平滑な表面の多
孔性シート（メンブランフィルタ等）に貼りあわせて密
着一体化（多孔性接着）する方法がある。

このようにして表面に接着剤の部分的存在パターンが形
成された多孔性シートを池の（表面に接着剤パターンの
形成されていない）多孔性シートに重ねあわせ（ホット
メルト型接着剤を用いる場合には接着剤の融解温度より
高い温度で）実質的に一様な軽い圧力を加えて対向する
多孔性シートを密着させることにより多孔性シートは相
互に微貫通空隙構造（または微貫通孔構造）の接着剤層
により実質的に密着して接着され一体化する（本明細書
では、これを多孔性接着又は微多孔性接着ということが
ある）。多孔性接着は多孔性シート相互間、多孔性シー
トと非多孔性シートの間、非多孔性シート相互間いずれ
の接着にも適用できる。

本発明の一体型多層分析要素においては、必要に応して
さらに１４以上の繊維質多孔性シート又は非繊維質多孔
性シートを多孔性接着して設けることができるほか、さ
らに必要に応じて前述の諸特許明！Ｈ書等に記載の諸種
のＪａ能層２例えば、インジケータ一層、媒染層又は検
出層、半透膜層。

バリア層、マイグレーション防止層、前処理層又はトラ
ップ層、光遮蔽層又は光反射層くバックグラウンド層）
、第２吸水層等を適宜選択して設けることができる。

本発明の一体型多層分析要素は水性液体試料中の予め定
められた被検対象成分（アナライト）の定量分析に好適
で２例えば、血液、特に全血中の総蛋白、アルブミン、
各（１８素等の高分子アナライト、ビリルビン等の高分
子（蛋白）と結合したアナライト、コレステロール、ト
リグリセリド等の疎水性アナライトに特に有用であるば
かりでなく。

血液や尿中のグルコース、尿素、尿酸、クレアチニン等
の低分子アナライトにも有用である。さらに多層分析要
素中の多孔性層に抗原または抗体を含有保持させて免疫
学的方法で抗体または抗原を定量分析することも可能で
ある。本発明の一体型多層分析要素は全血試料に特に有
用であるが、池の水性液体試料２例えば血漿、血清、尿
、ｉｉ液。

食品、飲料等にも適用できる。

本発明の一体型多層分析要素の一具体例の実施例１の分
析要素では上から順にトリコット編物生地からなる繊維
質多孔性シート（１）、セルロースアセテートメンブラ
ンフィルタからなる非繊維質多孔性シー）（２）、セル
ロースアセテートメンブランフィルタからなる非繊維質
多孔性シー）（３）、ゼラチンを主成分とする吸水層（
４）がポリエチレンテレフタレート透明フィルムからな
る光透過性水不透過性支持体（５）の上に接着された構
成の一体型多層分析要素で、多孔性シー）（＋）−（２
）間、多孔性シー）　（２）　−（３）間が網点状に配
置された澱粉糊で微貫通空隙を構成して密着一体化（多
孔性接着）されている。繊維質多孔性シート（１）は主
としてメータリング作用を有し、非繊維質多孔性シート
（２）は主として血球類濾過作用と光遮蔽作用を有し、
非線！ｔｔ質多孔性シート（３）は酵素を含む呈色試薬
組成物を含浸保持する多孔性試薬層で呈色層を兼ねてお
り、吸水層（４）は全面試料中の水を吸収して水性液体
成分の非繊維質多孔性シート＜３）への移行を促進する
作用を有する。

本発明の多層分析要素は一辺約１５ｍｍから約３０ｍｍ
の正方形またはほぼ同サイズの円形等の小片に裁断し、
特公昭５７−２８３３１　、実開昭５６−１４２４５４
　、特開昭５７−６３４５２．実開昭５８−３２３５０
．特表昭５８−５０１１４４等に記載のスライド枠に収
めて化学分析スライドとして用いることが、製造、包装
、輸送、保存、測定操作等諸種の観点で好ましい。使用
目的によっては。

長いテープ状でカセットまたはマガジンに収めて用いる
こと、または小片を開口のあるカードに貼付または収め
て用いることなどもてきる。

本発明の多層分析要素は前述の諸特許明細書等に記載の
操作により液体試料中の被検成分の分析を実施できる。

すなわち約５ｕｌから約５０μｌ、好ましくは８μｍか
ら３０μｍの範囲の全面、血２Ｍ　＋血清等の水性液体
試料滴を展開層に点着し、１分から１０分の範囲で、約
２０°Ｃから約４０°Ｃの範囲の実質的に一定の温度で
、好ましくは３７℃近傍の実質的に一定の温度でインク
ベーションし、光透過性支持体側から要素内の色、蛍光
、混濁または紫外線の吸収極大波長またはその近傍の波
長の光を用いて試薬展開層の光学濃度を反射測光し、予
め作成した検量線を用いて比色測定法の原理により液体
試料中の被検成分含有量を求めることができる。点着す
る水性液体試料の量、インクベーション時間と温度は一
定にすることにより被検成分の定量分析を高精度で実施
できる。この測定操作は特開昭５６−７７７４６、特開
昭５８−２１５６６、特開昭５８−１６１８６７等に記
載の化学分析装置により極めて容易な操作で高精度の測
定をすることができる。

（以下余白） 実施例１および比較例１ 全ビリルビン定量用一体型多層分析要素ゼラチン下塗さ
れた厚さ１８０ｕｒｎの無色透明ポリエチレンテレフタ
レー）（ＰＥＴ）フィルム（支持体）の上に乾燥後の層
厚が２５ｐｍになるように平均重合度１０００．　Ｈ化
度約８８％のポリビニルアルコール水溶液を塗布し乾燥
させて吸水層を形成した。

ついで吸水層の表面を約２５°Ｃの水でほぼ一様にぬら
した後、下側非繊ＩＩＩ質多孔性シートとして最小孔径
１．２層ｍ、厚さ１４０μｍ、空隙率約８０％のセルロ
ースアセテートメンブランフィルタをラミネートシ。

乾燥させて吸水層とメンブランフィルタを畜着一体化さ
せた。

別に水溶液１００８当リダイフイリン（ＣＩ＋ｅｍ　１
ｃａ、ＩＡｂｓｔｒａｃｔｓ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ
、４７９−１８−５）１０ｇ、スルホサリチルｌＩｊ２
ｇ、２．１１−ジクロロベンゼンジアゾニウムスルホサ
リチレート０．２ｇ含有のビリルビン分析用呈色試薬組
成物水溶液調製しておき、その水溶液を下側メンブラン
フィルタの上から１ｍ２当り８０ＩｎＩの割合で塗布し
乾燥してメンブランフィルタに呈色試薬組成物を含浸保
持させた。

次に１００メツシユの網点（網点面積率約２０％）を通
してスクリーン印刷法で澱粉糊を下側メンブランフィル
タの表面に固形成分約３　ｇ／ｍ２の割合で付着させ、
直ちに上側非繊維質多孔性シートとして最小孔径３．０
Ｌｆｆ１１．厚さ１４０１ｍ、空隙率約８０％のセルロ
ースアセテートメンブランフィルタをラミネートし、ｔ
ｊ粉糊を乾燥させて２枚のメンブランフィルタを多孔性
接着して密着一体化させた。

ついで同様にして上側メンブランフィルタの上に１０Ｏ
Ｓ相当のＰＥＴ紡績糸からなる厚さ約２５０ｕｍのトリ
コット編物生地を多孔性接着して密着一体化させた。こ
のようにして３層の多孔性シートが微貫通空隙構造の接
着剤で密着して接着一体化された（多孔性接着された）
全ビリルビン定量用一体型多層分析要素（実施例１）を
調製した。

一方、上側メンブランフィルタを省略した他は実施例１
と同様にして２層の多孔性シートが多孔性接着された全
ビリルビン定量用一体型多層分析要素（比較例ＩＡ）と
トリコット編物生ｊｌｌｊ層を省略した他は実施例１と
同様にして２層の多孔性シートが多孔性接着された全ビ
リルビン定量用一体型多層分析要素（比較例ＩＢ）を調
製した。

別に、ヘマトクリット値４５％、ビリルビン含有ｆｆ１
０．５ｍｇ／旧と検定（Ｊ　ｅｎｄｒａｓｓｉｋ　−Ｇ
　ｒｏｆ法による検定値）された全血試料、および前記
全血を遠心して血漿と血餅を分離し、血漿の一部を総ビ
リルビン含有量検定値２１ｍｇ／旧のコントロール血清
オメガビリルビン（商品名）の等容積でおきかえ、再び
血餅と混合してヘマトクリット値４５％、ビリルビン含
有ｆｆ１（検定値）４．ｌ：　８．０　：　１６．２ｍ
ｇ／旧のコントロール全血試料を用意した。

次に上記３種の要素を評価するためにこれらの全血試料
とコントロール全血試料それぞれの２０μｍを実施例１
と比較例１の各多層分析要素の平織物生地層の上に点着
し、３７℃で６分インクベーションし、中心波長５４０
ｎｍの可視光でＰＥＴ支持体側から要素中の呈色を反射
測光して第１表に記載の結果を得た。実施例１と比較例
１の多層分析要素では全血試料の展開が良好であったが
、比較例２の多層分析要素では全血試料が点着時の盛り
上がった液滴状態のままとどまり眉間が不十分てあった
。

第　　１　　表 第１表の結果から本発明の全ビリルビン定員用一体型多
層分析要素においてはビリルビン低含有量域で反射光学
濃度が小さく、シかも検量線の勾配が大きいからビリル
ビン測定可能範囲が広く。

測定精度が良好なことが明らかである。これはアナライ
トのビリルビンが試薬層にまで十分に拡散浸透するが赤
血球は試薬層より上側の層で分雛されているので、光遮
蔽Ｊｒｉなしでも反射光学濃度測定を妨害しないためと
推定される。

一方晶上層がトリコット編物生地Ｊ筈２次層が呈色試薬
組成物含浸保持メンブランフィルタ層、の２多孔性層を
有する多層分析要素比較例ＩＡにおいてはビリルビン含
有量の多少にかかわらずに反射光学濃度値が大きく、シ
かも検量線の勾配は小さいのて全血試料用の全ビリルビ
ン定量用一体型多層分析要素としては実用できないこと
が明らかである。これは赤血球がトリコット層で分離さ
れきらずに呈色試薬含浸メンブランフィルタ層にまで到
達して反射光学濃度測定を妨害するためと推定される。

また２Ｐｉのメンブランフィルタ層を有し、下側メンブ
ランフィルタ層が呈色試薬を含浸保持する多層分析要素
比較例ＩＢでは検量線の勾配が小さいので分析精度が悪
く、シかも点着時の全血試［［の挙動から全血試料用の
全ビリルビン定量用一体型多層分析要素としては実用で
きないことが明らかである。

実施例２ 全ビリルビン定量用一体型多層分析要素吸水層として脱
イオンゼラチンおよび平均重合度１０００　、鹸化度約
８８％のポリビニルアルコールを用い、それぞれ乾燥後
の層厚が、１　；２；５；１０；２５−になるようにし
た他は実施例１と同様にして上からＩＦ’のトリコット
編物生地層、２層のメンブランフィルタ層の３Ｎの多孔
性シートが多孔性接着された全ビリルビン定量用一体型
多層分析要素１０種を調製した。

１０種の多層分析要素について実施例１と同様の全面試
料を用い実施例１と同様にして検量線を作成し、総ビリ
ルビン含有ｒＪ　１６．２ｍｇ／ｄｌと０．５１Ｔ１ｇ
／旧の反射光学濃度値の差を求めて総ビリルビンの定量
精度を評価して第２表に記載の結果を得た。

（以下余白） 第　　２　　表 世　ゼラチン：脱イオンゼラチン ＰＶＡ　　：ポリビニルアルコール 評価記号 ◎　検量線の勾配が大きく、定員精度良好。

（実施例１の結果と同程度） Ｏ検量線の勾配が◎に比べてやや小さく、定量精度がや
や劣る。

Δ　検量線の勾配が小さく、定量精度悪い。

（比較例ＩＢの結果と同程度） 第２表の結果から吸水層がゼラチン、ポリビニルアルコ
ールいずれからなる場合にも吸水層の層厚が１１Ｊｍて
は検ｆｆｉ線の勾配が小さく、定量精度良好；２ＬＩｍ
で検量線の勾配が吸水層厚５〜２５１Ｊｍの場合の検量
線の勾配に比べてやや小さく、定量精度がやや劣るが実
用可能；　５〜２５１Ｊｍでは検量線の勾配が大きく、
定量精度良好で実用可能なことが明らかである。すなわ
ち吸水層厚は２１．ｌｒＩ＋以上必要で。

５１ｍ以上が好ましいことが明らかである。

実施例３ アルブミン定量用一体型多層分析要素 ゼラチン下塗された厚さ１８０１１ｍの無色透明ＰＥＴ
フィルムの上に乾燥後の層厚が２５１．Ｉｍになるよう
に平均重合度＋０００．鹸化度約８８％のポリビニルア
ルコール水溶液を塗布し乾燥させて吸水層を形成した。

ついて吸水層の表面を約２５℃の水でほぼ一様にぬらし
た後、下側非繊維質多孔性シートとして最小孔径１．２
１．ｏｎ、厚さ１４０ＬＩｍ、空隙率約８０％のセルロ
ースアセテートメンブランフィルタをラミネートし、乾
燥させて吸水層とメンブランフィルタを密着一体化させ
た。

別に水−メタノール（重量比ｌ：３）混合溶媒溶液１０
０ｇ当リブロすクレ゛ブールグリーンｏ、ｓｇ、林（禽
酸０　、３７ｇ含有のアルブミン分析用呈色試薬組成物
溶液調製しておき、その溶液を下ＩＩＩメンブランフィ
ルタの上から１ｍ２当り１３０ｍ１の割合で塗布し乾燥
してメンブランフィルタに呈色試薬組成物を含浸保持さ
せた。

次に１００メツシユの網点（網点面積率約２０％）を通
してスクリーン印刷法で澱粉糊を下側メンブランフィル
タの表面に固形成分約３　ｚ７ｍ２の割合で同着させ、
直ちに上側非繊維質多孔性シートとじて最小孔径３．Ｏ
ＬＩｍ、厚さ１４０μｍ、空隙率約８０％のセルロース
アセテートメンブランフィルタをラミネートし、澱粉糊
を乾燥させて２枚のメンブランフィルタを多孔性接着し
て密着一体化させた。

ついで同様にして上側メンブランフィルタの上に１００
Ｓ相当のＰＥＴ紡績糸からなる厚さ約１４０ｕｍの平織
物生地を多孔性接着して密着一体化させた。

このようにして３層の多孔性シートが多孔性接着された
アルブミン定量用一体型多層分析要素を調製した。

別に、ヘマトクリット値４２％、アルブミン含有量４．
２ｇ／旧と検定された全血試料、および前記全血を遠心
して血漿と血餅を分離し、血漿の一部を等容積の生理食
塩水又は１５％ヒトアルブミン含有生理食塩水でおきか
え、再び分離した血餅と混合してヘマトクリット値４２
％、アルブミン含有量（検定値）　１．４　；　７．７
　：　１０．０ｇ／旧のコントロール全血試料を用意し
た。

次にこれらの全血試料とコントロール全血試料それぞれ
の２０μｌを多層分析要素の平織物生地層の上に点着し
、３７℃で６分インクベーションし、中心波長６４０ｎ
ｍの可視光でＰＥＴ支持体側から要素中の呈色を反射測
光して第３表に記載の結果を得た。

第３表の結果から本発明のアルブミン定量用一体型多層
分析要素においては検量線の勾配が大きく、アルブミン
の定量精度が高いことが明らかである。これは全血試料
中のアナライトのアルブミンが多孔性試薬層へ速やかに
充分な量浸透するため呈色反応が充分に進行するためと
推定される。

第　　３　　表 実施例４ アルブミン定量用一体型多層分析要素 ブロムクレゾールグリーンの代りにブロムクレゾールパ
ープルを用いたほかは実施例３と同様にして３Ｎの多孔
性シートが多孔性接着されたアルブミン定量用一体型多
層分析要素を調製した。

得られた要素について実施例３と同様にして全血試料と
コントロール全血試料それぞれの２０μｌを多層分析要
素の平織物生地層の上に点着し、３７°Ｃで６分インク
ベーションし、中心波長６００ｎｍの可視光でＰＥＴ支
持体側から要素中の呈色を反射測光して第４表に記社の
結果を得た。

第　　４　　表 第４表の結果から本発明のブロムクレゾールパープルを
指示薬色素として含有するアルブミン定量用一体型多層
分析要素においては検ｆｌ線の勾配が大きく、アルブミ
ンの定量精度が高いことが明らかである。これは全血試
料中のアナライトのアルブミンが多孔性試薬層へ速やか
に充分な量浸透するため呈色反応が充分に進行するため
と推定される。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）光透過性水不透過性支持体の上に呈色試薬組成物
   が含有されている少なくとも１層を含めて複数の層を有
   する一体型多層分析要素において、支持体から遠い側か
   ら順に繊維質多孔性シート、上側非繊維質多孔性シート
   、下側非繊維質多孔性シート、および親水性ポリマーバ
   インダーを含有する吸水層を有し、前記３層の多孔性シ
   ートはそれぞれその隣接する２面の間において液体の均
   一通過が実質的に妨げられないように微貫通空隙を構成
   するように部分的に配置された接着剤により実質的に密
   着して接着され一体化されていることを特徴とする一体
   型多層分析要素。
2. （２）前記部分的に配置された接着剤が網点状、交叉線
   状、並列線状または砂目状に配置された接着剤である特
   許請求の範囲１に記載の分析要素。
3. （３）前記下側非繊維質多孔性シートに呈色試薬組成物
   が含有されている特許請求の範囲１に記載の分析要素。
4. （４）前記上側非繊維質多孔性シートに呈色試薬組成物
   が含有されている特許請求の範囲１に記載の分析要素。