JPS5811999B2 - モエノマイシンノセイホウ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はモエノマイシンの製法に関する。

ドイツ特許第１２１０５１４号によればモエノマイシン
生成ストレプトマイセス属菌株の微生物学的発酵による
モエノマイシンの製造方法は既に知られており、該方法
においては炭素源としてさらに脂肪が使用される。

本発明はモエノマイシン生成ストレプトマイセス属菌株
を通常の生物学的方法により脂肪の存在下において微生
物学的に発酵させることによるモエノマイシンの製造方
法を提供し、この方法は発酵媒質に一般式（１） ％式％（１） （式中Ｒは８〜１８個の炭素原子を有し、かつそれぞれ
ヒドロキシ基を有していてもよい飽和またはモノ不飽和
炭化水素基をあられし、ｎは１８〜３０の整数をあられ
す） の非イオン源性界面活性剤を添加することからなる。

前記の炭化水素基Ｒは直鎖状であるのが好ましいが、特
に合成によって得られる基の場合には約２０％までの分
枝部分を含有していてもよい。

特に、１０〜１４個の炭素原子を有する炭化水素基が好
適である。

前記一般式（１）においてＲは特にオクチル、ノニル、
デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデ
シル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オ
クタデシルならびにオクテニル、ノネニル、デセニル、
ウンデセニル、ドデセニル、トリテセニル、テトラデセ
ニル、ペンタデセニル、ヘキサデシル、ヘプタデセニル
、およびオクタデセニノペさらにヒドロキシ−オクチル
、ヒドロキシ−ノニル、ヒドロキシ−デシル、ヒドロキ
シ−ウンデシル、ヒドロキシ−ドデシル、ヒドロキシー
トリテシル、ヒドロキン−テトラデシル、ヒドロキシ−
ペンタデシル、ヒドロキシーヘフタテシルならびにヒド
ロキシ−オクタデシルをあられす。

以上のすべての基において、ヒドロキシ基は第１、第２
、第３等の最後から第２番目までの炭素原子上に存在し
得る。

すなわち、オクチル基の場合にはＣ１〜Ｃ７、ノニル基
の場合にはＣ１〜Ｃ８、デシル基の場合にはＣ１〜Ｃ０
、ウンデシル基の場合にはＣ１〜ＣＩＯ、ドデシル基の
場合にはＣ１〜Ｃ１い トリデシル基の場合にはＣ１〜
Ｃ１２、テトラデシル基の場合にはＣ１〜Ｃ１３、ペン
タデシル基の場合にはＣ１〜Ｃ１４、ヘキサデシル基の
場合にはＣ１〜Ｃ１６、ヘプタデシル基の場合にはＣ１
〜Ｃ１６そしてオクタデシル基の場合にはＣ１〜Ｃ１□
の炭素原子上に存在し得る。

分子中のヒドロキシ基の位置に関しては実際上極めて入
手容易な化合物、例えば、１２−ヒドロキシ−△−９・
１０−オクタデセン酸、１２−ヒドロキシ−△−６・７
−オクタデセン酸、１２−ヒドロキシ−△−９・１０−
テトラデセン酸または１２−ヒドロキシ−△−５・６−
テトラデセン酸が好ましい。

前記Ｒをあられすモノ不飽和炭化水素基としては、△−
４・５−デセニル、△−９・１０−デセニル、△−４・
５−ドデセニル、△−５・６−テトラデセニル、△−９
・１０−テトラデセニル、△−９・１０−へキサデセニ
ル、△−６・７−オクタデセニル、△−９・１０−オク
タデセニルおよび△−１１・１２−オクタデセニルがあ
げられるが、以上の不飽和炭化水素基のすべてにおいて
さらにヒドロキシ基が二重結合を担持しない各炭素原子
に存在していてもよい。

前述のすべての不飽和炭化水素基はシス−ならびにトラ
ンス−配位において存在し得るが、天然に存在する配位
が好ましい。

同じことが二重結合の位置に関しても該当する。

前記一般式（１）であられされる界面活性剤のうち、そ
の分子量が１０００〜１５００の範囲内にあり、その混
濁点（強度１０％の塩化ナトリウム溶液１００ｍ１中物
質ＩＰ）が７３〜７９であり、そのヒドロキシ基数が３
９〜７８であり、さらにその親水親油平衡値が１６〜１
８であるような界面活性剤が特に好ましい。

特に好適な前記一般式（１）の界面活性剤のうち、一方
において、ｎが２５の数をあられし、Ｒがオクチル６〜
９％、デシル５〜７％、ドデシル４８〜５４％、テトラ
デシル１８〜２０％、ヘキサデシル７〜９％およびオク
タデシル８〜１０％の混合物をあられすか、他方におい
て、ｎが１８゜２０または２２の数をあられしＲがドデ
シルをあられす物質が非常に好適であることが立証され
てい′る。

前述の界面活性剤はアルカリ性媒質中各種の量のエチレ
ンオキサイドにより相当する脂肪アルコールをオキシア
ルキル化、特にオキシエチル化することによって製造さ
れる。

前記ストレプトマイセス属菌株の発酵は好気性条件下、
炭素源として無機塩りほかに殿粉、グルコース、しよ糖
または糖蜜を含有し、さらに、動物、植物または合成脂
肪を含有し、窒素源としてひき割り大豆または大豆粉、
コーンスチープリカー、酵母エキス、綿実粉または綿苗
粉、硝酸塩あるいはアンモニウム塩を含有しさらに一般
式（１）の界面活性剤を含有する水性媒質中において実
施される。

発酵は最大抗生物質活性が達成されるまで行なわれる。

後者の最大抗生物質活性は前記発酵媒質中の溶解窒素の
濃度または形成される乾燥物質を測定することによって
決定され得る。

最大抗生物質活性が達成された後発酵は中止される。

抗生物質を単離するためには、培養物全部をホモジナイ
ズし次で抽出するか、あるいは培養溶液から菌糸体を遠
心分離によって分離し、得られる二成分を次で別々に抽
出する。

抽出剤としては、好適には、水と混合し得るかまたは部
分的に混和し得る溶媒例えば、メタノール、エタノール
、グロパノール、ブタノール、エチレングリコールモノ
メチルエーテル、アセトンまたはジオキサンがあげられ
る。

こうして得られる抽出物から粗抗生物質が有利には前記
溶媒を減圧下に蒸発させることによって得られる。

さらに精製するためには、前記の残留物を熱極性有機溶
媒例えばメタノールで抽出し、抗生物質を減圧下におい
て濃縮された前記抽出物から中程度の極性有機溶媒例え
ばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテルまたはエ
チルアセテ−トによる沈殿反応によって沈殿させる。

モエノマイシン生成ストレプトマイセス属菌株としては
、ストレプトマイセス・ガネンシス（Ｓ。

ｇｈａｎａｅｎｓｉｓ 、 ＡＴＣＣ１４６７２）、ス
トレプトマイセス・パンベルギエンシス（Ｓ、ｂａｍｂ
ｅｒｇｉ −ｅｎｓｉｓ、 ＡＴＣＣ１３８７９）、ス
トレプトマイセス・エデレンシス（Ｓ、 ｅｄｅｒｅ
ｎｓｉｓ、 ＡＴＣＣ１５３０４）およびストレプトマ
イセス・ガイシリエンシス（Ｓ、 ｇｅｙｓｉｒｉｅ
ｎｓｉｓ、 ＡＴＣＣ１５３０３）ならびにそれらのム
ユータントおよびリバータントが用いられる。

動物脂肪としては有利には豚脂または羊脂、あるいは特
定の炭素含量を有する前記脂肪の合成により得られるフ
ラクションがあげられる。

植物脂肪としてはオリーブ油、ひまわり油、落花生油、
やし油およびひまし油のような脂肪油を用いるのが有利
である。

さらに、オレイン酸トリグリセライドまたはステアリン
酸トリグリセライドのような合成脂肪もあげられる。

すべての脂肪は０．１〜１６重量％、好ましくは２〜５
重量％の濃度で使用される。

本発明に従って前記一般式（１）の界面活性剤を添加す
ることによりストレプトマイセス属菌株からのモエノマ
イシン生成が高度に促進されるという事実は驚くべきで
あり予知されることのできなかった事実である。

脂肪酸で部分的にエステル化されたソルビタン無水物の
ポリオキシエチレン誘導体（トウイーン（登録商標名）
型）あるいは糖脂肪酸エステルのある種の微生物の酸素
生成ならびにアッシュピア・ゴシツピー（Ａｓｈｂｙａ
ｇｏｓｓｙｐｉｉ）からのりボフラビンの形成（Ｃ１
Ｇ、 Ｓｍ１ｔｈ外著、Ｂｉｏｃｈｅｍ、 Ｂｉｏｐｈ
ｙｓ、 Ａｃｔａ ４ヱ（１９６１）、第３４４〜３
４９頁参照）に対する刺激効果がすでに知られているこ
とは事実である（Ｅ、Ｔ。

Ｒｅｅｓｅ外著、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ
ｏｇｙ、１９６９、第２４２〜２４５頁参照）。

しかしながら、これらの表面活性化合物はモエノマイシ
ン生成に対しては正の効果を示さない。

他方、前記一般式（１）に相当する、モエノマイシン生
成促進化合物は例えばストレプトマイシン生成に対して
正の効果を示さない。

以下実施例により本発明を例示する。

実施例 容量３００１７１１のエルシンマイヤーフラスコ中、ス
トレプトマイセス・ガネンシスＡＴＣＣ１４６７２を次
の組成を有する滅菌栄養媒質３０ｄに接種した。

グルコース ４．０ ％大豆粉
３．０ ％乾燥蒸留廃液
０．３ ％食塩 ０．２５％ 炭酸カルシウム ０．２５％水
全量 ３０ｍ１１ 接種後、上記予備培地を２８〜３０℃の温度において２
日間３００回／分の振動数で振盪した。

主培地の発酵媒質の組成は次のとおりであった。

大豆油 ３．０ ％大豆粉
３．０ ％コーンスターチ
３．０ ％サッカロース １
．０ ％硫酸アンモニウム ０．３ ％
炭酸カルシウム ０．４ ％酵母
２．０％ 水 全量 ３０ｍＡ！ 後記表１に記載の界面活性剤の１種を前記発酵媒質に２
倍の蒸留水と共に１０重量％水溶液の形で添加した。

次に該溶液を１０分間１２３〜１２７℃の範囲の温度に
おいて滅菌した。

以上の発酵媒質を次に３７℃の界面活性剤１．５ｍｌと
混合し、続いて前記の予備培地５ｍｌを添加した。

この主培地を２８〜３０℃の範囲の温度において１２０
時間２６０〜３００回／分の割合で振盪した。

前記反応混合物を次にメタノール６０ｍ１と共に２分間
振動ミキサー中で攪拌し次でひたろ紙を用いてろ過した
。

ろ液のある特定の部分において、モエノマイシン含量を
黄色ぶどう球菌の標準培地に対するその効果を該物質の
既知量を含有するモエノマイシン溶液の効果と比較する
ことによって混濁度測定法により測定した。

後記の表に示されるようなその他の結果が、その他の条
件は同一にして、ストレプトマイセ不属菌株、添加脂肪
および添加界面活性剤を変更することによって得られた
。

後記の表に記載の界面活性剤は次のような特有≧のデー
タを有する。

以下の表中、ＭＷは分子量をあられし、ＴＰは混濁点を
あられし、ＨＮはヒドロキシ基数をあられし、そしてＨ
ＬＢは親水親油平衡値をあられす。

以下に本発明により開示された新規な技術的事項を要約
して示す。

１、一般式（１） ％式％（１） （式中Ｒは８〜１８個の炭素原子を有し、かつ所望によ
り、それぞれヒドロキシ基を有する飽和またはモノ不飽
和炭化水素基をあられし、ｎは１８〜３０の整数をあら
れす） を有する界面活性剤を発酵媒質に添加することからなる
、モエノマイシン生成ストレプトマイセス属菌株の脂肪
の存在下における通常の生物学的方法による微生物学的
発酵によるモエノマイシンの製法。

２、モエノマイシン生成ストレフトマイセス属菌株とし
て、ストレプトマイセス・ガネンシスＡＴＣＣ１４６７
２、ストレプトマイセス・パンベルギエンシスＡＴＣＣ
１３８７９、ストレプトマイセス・エデレンシスＡＴＣ
Ｃ１５３０４またはストレフトマイセス、ガイシリエン
シスＡＴＣＣ１５３０３ならびにそれらのミュータント
およびリバータントを使用することからなる、前記第１
項の方法。

３、一般式（１）の界面活性剤として、１０００〜１５
００の範囲の分子量、７３〜７９の混濁点、３９〜７８
のヒドロキシ基数および１６〜１８の親水親油平衡値を
有する界面活性剤を使用することからなる、前記第１項
または第２項の方法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式（１） ％式％（１） （式中Ｒは８〜１８個の炭素原子を有し、かつそれぞれ
   ヒドロキシ基を有していてもよい飽和またはモノ不飽和
   炭化水素基をあられし、ｎは１８〜３０の整数をあられ
   す） を有する界面活性剤を発酵媒質に添加することを特徴と
   する、脂肪の存在下におけるモエノマイシン生成ストレ
   プトマイセス属菌株の微生物学的発酵によるモエノマイ
   シンの製法。