JPH10512295A

JPH10512295A - 成長ホルモン分泌促進剤の多形形態

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Publication number: JPH10512295A
Application number: JP9516737A
Authority: JP
Inventors: ドレイパー，ジエローム・ピー; デユボスト，デイビツド・シー; カウフマン，マイケル・ジエイ; マツコウリ，ジエイムズ・エイ; バンドリラ，ジエニフアー・エル; バーソロナ，リチヤード・ジエイ
Original assignee: メルクエンドカンパニーインコーポレーテッド
Priority date: 1995-10-27
Filing date: 1996-10-23
Publication date: 1998-11-24
Anticipated expiration: 2016-10-23
Also published as: CO4770956A1; AU7468696A; KR19990067098A; HUP9902208A2; EA000528B1; CN1067687C; NO981867L; YU56696A; BG102476A; WO1997015574A1; HK1017894A1; EA199800335A1; CA2235371A1; JP3204266B2; BR9611229A; HUP9902208A3; NZ321370A; SK51398A3; NO310556B1; AU707946B2

Abstract

(57)【要約】食用動物において、その成長を促進しそれにより食用肉産物の製造をより効率的にし、ヒトにおいて、成長ホルモン分泌の欠損により特徴付けられる生理学的または医学的状態を処置し、および成長ホルモンの合成代謝促進効果により改良される医学的状態を処置するのに有用な成長ホルモン分泌促進剤である化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態に関する。この多形形態は、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの他の既知の形態に対して、熱力学的安定性および薬剤組成における使用のための適切さにおいて利点を有する。本発明は、また、これらの多形形態、活性成分としてこれらの多形形態を含む薬剤組成物を調製する方法、および特定の疾患の治療における化合物の多形形態およびそれらの組成物の使用にも関する。

Description

【発明の詳細な説明】成長ホルモン分泌促進剤の多形形態発明の背景脳下垂体から分泌される成長ホルモンは、成長することのできる全ての体の組織の成長を刺激する。さらに、成長ホルモンは、体の代謝プロセスに以下の基本的効果を有することが知られている:（１）体の全ての細胞におけるタンパク合成の増加：（２）体の全ての細胞における炭水化物利用の低下：（３）遊離脂肪酸の移動およびエネルギーのための脂肪酸の使用の増加。成長ホルモン分泌の欠損は、小人症のような種々の医学的疾患を発生させ得る。成長ホルモンを放出するための種々の方法が知られている。化学物質（例えばアルギニン、Ｌ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（Ｌ−ＤＯＰＡ）、グルカゴン、バソプレシン）およびインシュリン誘導低血糖は、睡眠および運動のような活動と同様に、何らかの方法で視床下部に作用してソマトスタチン分泌を低下させるかあるいは既知の分泌促進成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）もしくは未知の内因性成長ホルモン放出ホルモンまたは両者の分泌を増加させることにより、間接的に成長ホルモンを脳下垂体から放出させる。成長ホルモンのレベルの増加が望まれる場合、通常問題は、外因性成長ホルモンを提供することにより、または成長ホルモンの生成および／または放出を刺激するＧＲＦもしくはペプチド系化合物を投与することにより、解決された。いずれの場合にも、これら化合物のペプチド性性質によって注射により投与することを必要としていた。初期の成長ホルモンの入手源は死体の脳下垂体の抽出であった。これは、成長ホルモンを非常に高価な産物にし、脳下垂体の入手源に含まれる病気が成長ホルモンの受容者に伝染される危険性があり得た。組み換え成長ホルモンが入手可能になり、もはや病気伝染のいかなる危険性は伴わないが、なお成長ホルモンは非常に高価であり、注射によりまたは鼻腔内噴霧により付与しなければならない。内因性成長ホルモンの放出を刺激する他の化合物が開発された。特に、非ペプチド性成長ホルモン分泌促進剤として、米国特許第５，５３６，７１６号、ＰＣＴ特許出願ＷＯ９４／１３６９６およびＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第９２巻，７００１〜７００５頁（１９９５年７月）に特定のスピロ化合物が開示されている。これらの化合物は、天然または内因性成長ホルモンの放出を刺激する性能を有している。したがって、天然成長ホルモンが欠損しているヒトもしくは成長ホルモンの刺激が大きなより生産的動物を提供する食用もしくは羊毛製造のために用いられ動物におけるように、成長ホルモンの生成または分泌の刺激を必要とする状態を処置するのに用いることができる。開示されている好ましい化合物として、下記構造：を有するスピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートがある。米国特許第５，５３６，７１６号およびＰＣＴ特許出願ＷＯ９４／１３６９６は、この化合物を調製するための方法を開示している（実施例１８、１９および５５を参照されたい）。特に、実施例５５は、酢酸エチル−エタノール−水からの再結晶により調製される化合物の融点が１６６〜１６８℃であったことを記載している。この化合物は、その後、ここで「形態ＩＩ」と表される多形形態であると同定された。Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，第９２巻，７００１〜７００５頁（１９９５年７月）は、一水和物として単離された化合物の融点が１６８〜１７０℃であったことを記載しているが、その化合物を調製するための極一般的な方法しか開示しておらず、その化合物をいかに結晶化するかは開示していない。臨床および安定性試験中に多形形態が一定に保持されていないならば、使用または測定される正確な投与量がロットごとに比較できないであるうから、薬剤化合物の多形形態は、適当な投与形態の開発に関与しているものにとっては関心がある。薬剤化合物がいったん使用のために製造されると、製造プロセスが同じ形態を使用していることおよび同じ量の薬剤が各投与材料に含まれていることを確保するために、各調剤に与えられた多形形態を把握することが重要である。従って、単一の多形形態または多形形態の既知の組み合わせが存在していることを確認することが必須である。さらに、特定の多形形態は、向上した熱力学的または吸湿安定性を示すことにより、薬剤組成に含むために他の多形形態よりも一層好適であり得る。ここで用いられる化学的化合物の「多形形態」は同じ化学的物質であるが、異なる結晶配列を有するものである。発明の概要本発明は、化合物：Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態、およびそのような多形形態を調製する方法に関する。本発明は、活性成分としてこれらの多形形態を含む薬剤組成物および特定の疾患の治療におけるこれらの多形形態およびそれら組成の使用にも関する。本発明の多形形態は、成長を促進しそれにより食用肉産物の製造をより効率的にするように食用動物において有用な、または例えば成長ホルモン分泌の欠損を特徴とする生理学的または医学的状態を処置し、及び成長ホルモンの合成代謝促進作用により改善される医学的状態を処置するヒトにおいて有用な、成長ホルモン分泌促進剤である。これらの多形形態は、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの他の既知の形態に対して、熱力学的安定性および薬剤組成における使用のための適切さにおいて、利点を有する。発明の詳細な説明本発明は、化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの新規多形形態、およびこれら多形形態を調製するための方法に関する。化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］− ２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートは下記構造：を有し、ヒトおよび動物において成長ホルモンの放出を誘発する成長ホルモン分泌促進剤である。この特性を、食用肉産物の製造をより効率的にするように食用動物の成長を促進するために、ヒトにおいては、成長ホルモン分泌の欠損により特徴付けられる生理学的または医学的状態を処置し、成長ホルモンの合成代謝促進作用により改善される医学的状態を処置するために、利用することができる。これらの特定の多形形態（ここで「形態Ｉ」、「形態ＩＩ」、「形態ＩＩＩ」、「形態ＩＶ」、「形態Ｖ」、「形態ＶＩ」、「形態ＶＩＩ」、「形態ＶＩＩＩ」、「形態ＩＸ」、「形態Ｘ」と表される）は、薬剤組成中に含ませるのにより適しているという点において、化合物の他の結晶形態に対して優れた特性を有する。薬剤開発のために好ましい結晶形態は、その熱力学的安定性および非吸湿特性のゆえに形態Ｉである。薬剤開発のためのもう一つの好ましい結晶形態は、特に錠剤調製のための圧縮に関する組成特性のゆえに形態ＩＶである。形態ＩＶは他の形態よりも高い嵩密度を有することがわかった。本発明は、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル− スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミド遊離塩基のエタノール（約８容量％）を含む酢酸エチル中溶液をメタンスルホン酸（約１．１当量）により約５０℃で処理し、約５５℃に加熱し、約４５℃に冷却することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１ −メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１ ’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを調製するための方法にも関する。必要により、温度を、続いて約５１℃に上昇させ２〜２４時間維持することができる。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミド遊離塩基のエタノール（約８容量％）を含む酢酸エチル中溶液に、約５０〜５５℃で、メタンスルホン酸（約１．１当量）およびＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール −３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル −オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを二者択一的に添加（ここで相対的添加順序は重要でない）し、続いて約５５℃で約２〜１５時間加熱し、約２５から３０℃に冷却し、約２〜３時間放置することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’− イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを調製するための別の方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩのイソプロパノール中溶液を約２５℃で約２〜２４時間攪拌することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’ −ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを調製するための別の方法にも関する。本発明は、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル− スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドの遊離塩基のエタノール（約８容量％）を含む酢酸エチル中溶液をメタンスルホン酸（約１．１当量）により約５０℃で処理し、約５５℃に加熱し、周囲温度に冷却することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］ −２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、任意の形態組成のＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ −１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］ −１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２− アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートをエタノール／水（好ましくは２５：７５容量／容量）の溶液中に溶解し、溶液から好ましくは約４０ ℃の温度で溶媒を蒸発させ、得られる個体を微粉末に粉砕し、微粉末を約７５％の相対湿度にさらすことを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ −１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］ −１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２− アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、任意の形態組成のＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ −１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］ −１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２− アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートを酢酸エチル／エタノール／水（好ましくは２４．８／１．６／１．９５容量／容量／容量）の溶液から再結晶することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１− メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’ −イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ −２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶを調製するための別の方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを室温にて約７５％を超える相対湿度、より好ましくは約８８％の相対湿度に充分な時間さらすことを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］ −２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶを調製するための別の方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉの約２．８重量％の水を含む酢酸イソプロピル／エタノール（９０：１０容量／容量）中のスラリーから約２５ ℃で単離することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１− メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’ −イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ −２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶを調製するための別の方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶを室温にて３０％を下回る相対湿度にさらすことを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１ −メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１ ’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｖを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｖを、ほぼ室温で湿分の不存在下に、例えば篩乾燥窒素雰囲気下約２５℃で乾燥することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉまたは形態ＩＶの約１．５重量％の水を含む酢酸イソプロピル／エタノール（９０：１０容量／容量）中のスラリーから単離することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ− １−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］− １’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩＩを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩＩを乾燥窒素のような乾燥不活性気体の雰囲気下に充分な時間脱水することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１− メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’ −イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ −２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩＩＩを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、任意の形状組成のＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ −１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］ −１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２− アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの水溶液を調製し、続いて２０％の相対湿度およびほぼ室温にて制御された蒸発により形成された固体を単離することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’− イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ− ２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＸを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＸを周囲温度および湿度で充分な時間乾燥することを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１ −メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１ ’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｘを調製するための方法にも関する。本発明は、さらに、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを１００％相対湿度に約１〜４日間さらすことを含んでなる、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｘを調製するための別の方法にも関する。同様に、本発明は、また、ここに記載の任意の方法を含む、形態的に均質のＮ −［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ− インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートを調製するための別の方法にも関する。本発明の化合物であるＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの新規多形形態は、食用動物においてその成長を促進して食用肉産物の製造をより効率的にし、ヒトにおいて成長ホルモン分泌の欠損により特徴付けられる生理学的または医学的状態を処置し、成長ホルモンの合成代謝促進作用により改善される医学的状態を処置するのに有用な、成長ホルモン分泌促進剤である。従って、本発明は、さらに、活性成分として多形形態を含んでなる薬剤組成物、および特定の疾患の治療におけるこの多形形態およびその組成物の使用にも関する。示差走査熱量計セル［ＤＳＣ］窒素流雰囲気下、オープンカップ中１０℃／分で測定したＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩのＤＳＣ曲線は、溶融による単一の吸熱を示し、ピーク温度は約１８０℃ で、外挿開始温度（融点）は約１７０℃、付随する熱約５３Ｊ／ｇである。窒素流雰囲気下、オープンカップ中１０℃／分で測定したＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩのＤＳＣ曲線は、溶融による単一の吸熱を示し、ピーク温度は約１７４℃で、外挿開始温度（融点）は約１６５℃、付随する熱約３７Ｊ／ｇである。窒素流雰囲気下、オープンカップ中１０℃／分で測定したＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶのＤＳＣ曲線は、約４５℃での水損失吸熱およびそれに続くピーク温度約１３４℃での吸熱を示し、外挿開始温度（融点）は約１２９℃、形態ＶＩの溶融による付随する熱約２３Ｊ／ｇである。ＤＳＣデータ［サンプルを窒素雰囲気下１０℃／分の割合で加熱（外挿開始温度）］：形態Ｉ：１７０℃（溶融吸熱）形態ＩＩ：１６５℃（溶融吸熱）形態ＶＩ：１２９℃（溶融吸熱）Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉは以下の性質に特徴付けられる比較的無水の多形化合物である：融点１６９℃ およびイソプロパノール中溶解度４．６ｍｇ／ｍＬ。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩは以下の性質に特徴付けられる無水の多形化合物である：融点１５８℃およびイソプロパノール中溶解度１２．３ｍｇ／ｍＬ。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩＩは以下の性質に特徴付けられる水和物である：ピーク温度４６℃で水損失吸熱、および続いて外挿開始温度１２３℃で微量溶融／分解吸熱。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶは以下の性質に特徴付けられる水和物である：ピーク温度４５℃で水損失吸熱、およびそれに続く外挿開始温度１２９℃での溶融／分解吸熱（おそらく、形態ＶＩの溶融／分解による）。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶは、Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１ −メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１ ’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート１モル当たり３．５モルの水を含む吸湿性水和物であると思われる。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶはＮ−［１（Ｒ）−［（１，２− ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート１モル当たり１モルの水を含む吸湿性水和物であると思われる。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩは無水多形化合物であると思われ、１２９℃の融点により特徴付けられる。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩＩは以下の特性により特徴付けられる水和物である：ピーク温度６０℃での幅広い水損失吸熱、およびそれに続く外挿開始温度１４４℃での溶融／分解吸熱（おそらく、形態ＶＩＩＩの溶融／分解による）。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＶＩＩＩは１４４℃の融点により特徴付けられる無水多形化合物である。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｘはピーク温度４９℃での幅広い水損失吸熱により特徴付けられる。Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）分子構造、結晶性および多形性を解明するためにＸ線粉末回折研究が広く用いられる。Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを、フィリップスＡＰＤ３７２０自動粉末回折装置を用いて銅Ｋα線を照射して収集した。測定はサンプルを周囲の室温に維持して２°〜４０°（２シータ）で行った。形態Ｉは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：６．５、１４．７、１６．９、１７．１、１７．９、１９．５、２１．１、２１．７および２２．０°（２シータ）。形態ＩＩは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：４．８、１１．８、１７．５、１９．４、２１．６、２１．９、２２．５および２２．７°（２シータ）。形態ＩＩＩは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：１３．８、１４．１、１８．０、１８．８、１９．５、２０．１、２０．６、２１．８および２５．７°（２シータ）。形態ＩＶは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：１６．０、１６．２、１８．３、２０．１、２１．０および２４．２°（２シータ）。形態Ｖは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：１４．８、１７．１、１７．６、１９．０、１９．１、１９．４、２０．６、２１．５および２１．８°（２シータ）。形態ＶＩは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：９．８、１４．０、１４．８、１７．１、１７．６、１９．０、１９．５、２０．６および２１．６°（２シータ）。形態ＶＩＩは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：９．１、１１．３、１７．１、１７．４、２０．０、２２．１および２４．５°（２シータ）。形態ＶＩＩＩは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：１１．５、１１．６、１８．１、１９．６、２２．５、２４．７および２４．８°（２シータ）。形態ＩＸは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：８．０、１２．１、１５．３、１５．８、１９．６、１９．７、２１．１、２２．３および２３．７°（２シータ）。形態Ｘは、ほぼ下記における主反射を有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられた：１５．５、１５．８、１８．０、１８．４、１８．６、１９．４、２０．７、２０．８、２３．９および２４．８°（２シータ）。これらのＸＲＰＤパターンは、形態Ｉ〜Ｘの全てが異なる結晶形態であることを確認するものである。鏡検法白色光および偏光で１００倍にて多形形態の試験を行った。形態Ｉおよび形態ＩＩは針状粒子であった。形態Ｉおよび形態ＩＩの両方が偏光下に複屈折しているように見えた。吸湿性形態Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶの固体サンプルの、種々の制御された湿度にさらしたときの、合計揮発分含量（ＴＧＡ分析により得られる）を以下の表に示す。形態Ｉが０．７９重量％の水；形態ＩＩが０．５６重量％の水；形態ＩＩＩが４．５〜５．０重量％の水；および形態ＩＶが９．５〜１０．０重量％の水を含むことがわかった。固体化合物を一定相対湿度チャンバーに貯蔵することにより吸湿性を調べた。室温における無水の形態Ｉと形態ＩＩとの比較は、形態ＩＩが吸湿性であり湿度が６５％相対湿度で始まって大きな増加を示すことを示している。形態Ｉは、７６％を超える相対湿度で貯蔵した場合を除いて、実質的湿度増加は示さない。Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの水和形態ＩＩＩ及びＩＶも、室温で相対湿度チャンバーに４８時間貯蔵することにより評価した。形態ＩＩＩは３３％ＲＨで４８時間貯蔵した後に湿度の増加を示す。形態ＩＶは、１００％ＲＨでの貯蔵までは認識可能な程度の湿度の増加示さないが１１％以下のＲＨで貯蔵したときにその水和水を失う。結果を以下の表３に示す。このデータは、形態Ｉが比較的無水であることを示している。溶解性室温における蒸留水中への形態Ｉの溶解性は１００ｍｇ／ｍＬより大きい。緩衝溶液中（ｐＨ４〜９）への形態ＩＩの水性溶解性（ＲＴ）は１００ｍｇ／ｍＬより大きい。エタノール／水混合液中への形態Ｉの溶解性を以下に示す：溶解性エタノール／水％（ｍｇ／ｍＬ）２５／７５＞１００５０／５０＞１００７５／２５＞９０１００％エタノール＞９０熱安定性−純化合物純化合物の固体状態安定性を、暗部でガラススクリューキャップ付バイアル中に薬剤を貯蔵することにより調べた。サンプルをＨＰＬＣで調べ、親化合物を定量的に分析した。使用したアイソクラティック法を以下に概説する。カラム：ベックマン・ウルトラスフィア（Beckman Ultrasphere）ＯＤＳ（２５０×４．６ｍｍ）５μ）移動相：０．１％ＴＥＡ、ｐＨ４．０（Ｈ₃ＰＯ₄：アセトニトリル（６５：３５）を含む）流量：１．０ｍＬ／分検出波長：２２８ｍｍ実行時間：１４分カラム温度：周囲温度注入容量：Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート（５０μｇ／ｍＬ）の２０μＬ形態ＩおよびＩＩについての以下に示す結果は重量％として計算した。形態Ｉ形態ＩＩこれらの結果は、純固体の形態Ｉおよび形態ＩＩが良好な熱安定性を有していたことを示す。課題の化合物を調製するための方法を以下に概略する。図式Ｉに示すように、ＣＢＺ−スピロインドリン１を、水素化の前にＤａｒｃｏ（２０重量％）で処理する。エタノール中、６５℃にて１０％Ｐｄ／Ｃを用いて激しく攪拌しつつ水素化を行う。酢酸イソプロピルおよび水中の１ｂの溶液を、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下に市販のＮ−ＢＯＣ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−セリンと結合させた。副生物であるジシクロヘキシルウレア（ＤＣＵ）の濾過後、２相濾液を分離し、有機相を、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液、０．５Ｍ塩酸水溶液および最後に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で順次洗った。この結合反応における改善された結果は、ｉＰｒＯＡｃ／Ｈ₂Ｏ中遊離アミノ酸溶液をＤＣＣ、ＨＯＢＴで処置し、続いてアミノ酸を周囲温度で添加し、続いて３〜５時間反応させたときに達成される。次にバッチを減圧濃縮し、溶媒を酢酸イソプロピルからエタノールに換える。この溶媒交換は、通常、酢酸イソプロピルの除去のために３倍バッチ容量を「供給および除去」することにより迅速に進められる。３５〜４０℃でエタノール中のメタンスルホン酸（ＭｓＯＨ）（３当量）で処理することにより、１１のＢＯＣ基を除去する。酢酸イソプロピルと１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液との分配により１２を得る。１２とＮ−ＢＯＣ−α−アミノイソ酪酸との結合は、ＤＣＣおよびＨＯＢｔ（それぞれ１．１当量）の存在下、２相溶媒系である酢酸イソプロピル／水（１：１）中において最も良好に行われる。濾過によるＤＣＵの除去、層の分離、および１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液、０．５Ｍ塩酸水溶液および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で順次有機層を洗うことにより、１４を得る。混合物は、続いてＢｏｃ基をメタンスルホン酸で開裂するためにエタノールに溶媒交換される。１４の脱保護は１１の脱保護より難しく、エタノール／メタンスルホン酸の濃厚溶液および３５〜４０℃に加熱することを必要とする。抽出処理（ＥｔＯＡｃ−ＮａＯＨ）後、遊離アミン１５を単離する。有機層を１ＮのＮａＯＨで充分に洗ってメタンスルホン酸の完全な除去を確実にする。遊離塩基１５の酢酸エチル溶液を減圧下に濃縮して容量を小さくし、９０／１０の酢酸エチル／エタノール２倍バッチ容量および続いて酢酸エチルの２倍容量を「供給および除去」することにより共沸乾燥（ＫＦ＜５００ｍｇｍｌ^-1）する。酢酸エチル中の得られた乾燥遊離塩基１５の僅かに濁った溶液をＤａｒｃｏで処理する。Ｇ−６０（２５重量％）により室温で約１０時間処理する。濾過剤により濾過することによりＤａｒｃｏを除去して遊離塩基１５を得る。１５からのメタンスルホン酸塩１６の形成は、ＥｔＯＡｃ中、１．１当量のＭｓＯＨを用いて約５０℃で行われる。遊離塩基１５を８容量％のＥｔＯＨおよび１当量の水で処理し、完全に溶解するまで５５℃に加熱する。周囲温度まで冷却し得られるスラリーを４時間攪拌することにより結晶形態ＩＩで表される１６の結晶性物質が得られる［ＩＰＡへの溶解性は１２ｍｇ／ｍＬ］。前述のようにＥｔＯＡｃ−ＥｔＯＨ中で塩が形成されるが、塩の初期溶液（５５℃）を周囲温度に冷却する代わりに４５℃に冷却すると、形態ＩＩから形態Ｉへ変換される。結晶はその温度で現れ始めスラリーは時間と共に濃くなるはずである。次に温度を５１℃に昇温し、スラリーを一晩放置する。１６の形態Ｉへの完全な変換が期待できるはずである。好ましくは、形態ＩＩから形態Ｉへの変換は、形態Ｉの種結晶を、ＥｔＯＡｃ −ＥｔＯＣ中遊離塩基の溶液に５０〜５５℃で添加し、続いて放置することにより達成される。従って、遊離塩基１５は、酢酸エチルに８％のエタノールを含む溶液中で１．１当量のメタンスルホン酸で５０〜５５℃にて処理することができる。次にバッチに、メタンスルホン酸塩１６の形態Ｉの約２重量％を種結晶として供給し、次に５５℃で一晩放置する。バッチを室温に冷却し、約２〜３時間放置する。生成物を窒素雰囲気下、室温で濾過することにより単離し、減圧下、３５℃で乾燥し、篩にかけてメタンスルホン酸塩１６を得る。メタンスルホン酸塩１６は、ＥｔＯＡｃ−ＥｔＯＨ中遊離塩基の溶液への、ＭｓＯＨ（１．１当量）および種結晶の約５０℃での段階的添加に代えることにより形成することもできる。ＭｓＯＨと種結晶の添加順序は重要でない。本発明の多形化合物の成長ホルモン分泌促進剤としての有用性は、Ｓｍｉｔｈら著，Ｓｃｉｅｎｃｅ，第２６０巻，１６４０より１６４３頁（１９９３年）（その図２の文章を参照）に記載の論文のような当分野において知られている方法により示すことができる。特に、前述の論文のアッセイにより、本発明の多形形態の全てが成長ホルモン分泌促進剤としての活性を有していた。そのような結果は、本発明の多形形態の成長ホルモン分泌促進剤としての固有の活性を有していることを示している。本発明の成長ホルモン放出化合物は、成長ホルモン分泌が脳下垂体レベルでいかに制御されているかを理解するための生体外における独自の手段として有用である。これは、年齢、性、栄養因子、グルコース、アミノ酸、脂肪酸、および断食および非断食のような成長ホルモンの分泌に影響を与えると考えられているまたは与えることが知られている多くの因子を評価するための使用を含む。さらに、本発明の化合物は、他のホルモンが成長ホルモン放出活性をいかに変化させるかを評価するのに用いることができる。例えば、ソマトスタチンが成長ホルモン放出を抑制することが既に確立されている。成長ホルモン放出への影響についての研究に重要であり必要な他のホルモンは、生殖腺ホルモン、例えば、テストステロン、エストラジオール、およびプロゲステロン；副腎ホルモン、例えば、コルチゾールおよび他のコルチコイド、エピネフリンおよびノルエピネフリン；膵臓および胃腸ホルモン、例えば、インシュリン、グルカゴン、ガストリン、セクレチン；血管作用性ペプチド、例えば、ボンベシン、ニューロキニン；および甲状腺ホルモン、例えば、チロキシンおよびトリヨードチロニンを含む。本発明の化合物は、一部の脳下垂体ホルモン、例えば、成長ホルモンおよびエンドルフィンペプチドが、成長ホルモン放出を変化させるように脳下垂体に与える可能な陰性または陽性フィードバック効果を研究するために用いることもできる。特に科学的に重要であるのは、成長ホルモンの放出を媒介する細胞レベル以下の機構を明らかにするためにこれらの化合物を使用することである。本発明の化合物をヒトを含む動物に投与して、生体内で成長ホルモンを放出させることができる。例えば、この化合物を、ブタ、ウシ、ヒツジなどのような商業的に重要な動物に投与して、そのような動物の飼育効率を改良しミルク生産を増加させることができる。さらに、これらの化合物を診断手段としてヒトの生体内に投与して、脳下垂体が成長ホルモンを放出できるかどうか直接決めることができる。例えば、本発明の化合物は、子供の生体内に投与することができる。そのような投与の前および後で得られる血清サンプルを、成長ホルモンに関して調べることができる。これらのサンプルの各々における成長ホルモンの量を比較することは、患者の脳下垂体が成長ホルモンを放出する性能を直接決めるための手段となる。従って、本発明の範囲には、活性成分として本発明の化合物の少なくとも一つを薬剤キャリアまたは希釈剤と組み合わせて含む薬剤組成物が含まれる。必要により、薬剤組成物の活性成分は、本発明の化合物の少なくとも一つに加えて、合成代謝促進剤を、または異なる活性を示すもう一つの組成物、例えば抗生成長許容剤もしくは骨粗鬆症の治療剤を、あるいは異化服作用を最少にするためにコルチコステロイドと組み合わせてもしくは組み合わせが効能を高め副作用を最少にする他の薬学的活性材料と組み合わせて、含むことができる。成長促進および合成代謝促進剤としては、ＴＲＨ、ジエチルスチルベステロール、エストロゲン、β−作用薬、テオフィリン、合成代謝促進ステロイド、エンケファリン、Ｅシリーズプロスタグランジン、米国特許第３，２３９，３４５号に開示の化合物、例えば、ゼラノール、および米国特許第４，０３６，９７９号に開示の化合物、例えば、スルベノックス、または米国特許第４，４１１，８９０号に開示のペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。本発明のさらなる用途は、他の成長ホルモン分泌促進剤、例えば米国特許第４，４１１，８９０号およびＷＯ８９／０７１１０、ＷＯ８９／０７１１１およびＢ−ＨＴ９２０に記載の成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−６およびＧＨＲＰ −１、また、ＷＯ９３／０４０８１に記載のヘキサレリンおよびＧＨＲＰ−２、または成長ホルモン放出ホルモン（ＧＲＦとも表されるＧＨＲＨ）およびその類似体または成長ホルモンおよびその類似体またはＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２を含むソマトメジンまたはα−アドレナリン作用薬、例えばクロニジンまたはセロトニン５ＨＴＩＤ作用薬、具体的にはスミトリプタン、またはソマトスタチンもしくはその放出を抑制する薬剤、例えばフィゾスチグミンおよびピリドスチグミンとの組み合わせである。特に、本発明の化合物は、成長ホルモン放出因子、成長ホルモン放出因子の類似体、ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２と組み合わせて用いることができる。例えば、本発明の化合物は、肥満の治療または予防のためにＩＧＦ−１と組み合わせて用いることができる。さらに、本発明の化合物は、内因性老化から生じる筋系および皮膚の症状を向上させるためにレチノイン酸と組み合わせて用いることができる。さらに、本発明は、本発明の多形形態を薬剤キャリアまたは希釈剤と組み合わせることを含んでなる、ヒトおよび動物における成長ホルモンの放出を刺激するための薬剤を製造する方法に関する。当業者に周知のように、成長ホルモンの既知の、潜在的使用は、多数存在する。内因性成長ホルモンの放出を刺激する目的で本発明の化合物を投与することは、成長ホルモンそのものと同じ効果または使用を有し得る。本発明の化合物のこれらの種々の用途は以下のように要約することができる：高齢のヒトにおける成長ホルモン放出の刺激；成長ホルモン欠損成人の治療；免疫系の刺激、傷治癒の促進；骨折修復の促進；成長遅延の治療；急性または慢性腎臓疾患または不全の治療；成長ホルモン欠損児を含む生理学的短身の治療；慢性疾患による短身の治療；肥満および肥満にかかわる成長遅延の治療；プラーダー−ヴィリ（Prader-W illi）症候群およびターナー（Turner）症候群にかかわる成長遅延の治療；火傷の患者または胃腸の手術のような大手術の後の回復および入院の短縮；子宮内成長遅延および骨形成異常の治療、末梢神経障害の治療；ストレス患者における成長ホルモンの置き換え；骨軟骨異形成症、ヌーナン（Noonan）症候群、精神分裂病、うつ病、アルツハイマー症傷治癒遅延、および心理的社会的離反の治療；肺機能不全および人工呼吸器依存の治療；大手術の後のタンパク異化反応の弱化；吸収不良症候群の治療；ガンやＡＩＤＳのような慢性病による悪液質およびタンパク損失；ＴＰＮ（全身的非経口滋養）中の患者における体重増加およびタンパク増大の促進；島細胞症を含む高インシュリン血症の治療；排卵誘発のためおよび胃および十二指腸潰瘍を予防および治療するためのアジュバント治療；胸腺発育の刺激および胸腺機能の加齢低下の防止；慢性血液透析中の患者のアジュバント治療；免疫抑制患者の治療およびワクチン接種に続く抗体反応の高揚；ヒトにおける合計リンパ球数の増加、特に、例えば、閉鎖頭部損傷のような身体的外傷から、またはバクテリアやウイルス感染のような感染、特にヒト免疫不全ウイルスの感染により生じる、抑制されたＴ₄／Ｔ₈細胞比を有するヒトにおけるＴ₄／Ｔ₈細胞比の増加；弱った高齢者における筋肉の強度、可動性、皮膚厚の維持、代謝恒常性、腎臓恒常性の向上；骨芽細胞、骨再造形および軟骨成長の刺激；愛玩動物における免疫系の刺激および愛玩動物における老化加齢不全の治療；家畜の成長促進；およびヒツジの羊毛成長の刺激。さらに、本発明の化合物は、飼育効率の増加、成長促進、ミルク生産の増加および家畜の屠殺体の品質向上に有用である。同様に、本発明の化合物は、本発明の化合物を投与することからなる、高められた成長ホルモンレベルによる合成代謝促進効果により改善される病気または状態の処置において有用である。特に、本発明の化合物は、骨粗鬆症；異化疾患；抑制されたＴ₄／Ｔ₈細胞比を有する個体におけるものを含む免疫不全；股関節骨折；老齢者における筋骨欠陥；成人または子供における成長ホルモン欠損；肥満；ＡＩＤＳまたはガンのような慢性病による悪液質およびタンパク損失；および大手術、損傷または火傷から回復している患者の治療：からなる群より選択される状態の予防または処置を必要としている患者におけるそのような予防または処置において有用である。さらに、本発明の化合物は、コルチコトロプシン放出因子により誘発もしくは促進される病気、またはストレスおよび不安に関連する疾患、例えば、ストレス誘発性の鬱病および頭痛、腹腸部症候群、免疫抑制、ＨＩＶ感染、アルツハイマー病、胃腸疾患、神経性食欲不振、出血性ストレス、薬物およびアルコール離脱症候群、薬物嗜癖、および受胎問題の治療において有用となり得る。当業者は、前述した病気および治療適応症の治療のために用いられている多くの化合物があることを知るであろう。幾つかは先に述べているこれら治療薬と本発明の成長ホルモン分泌促進剤との組み合わせにより、付加的で、補足的で、多くの場合相乗的な特性がもたらされて、これらの種々の治療薬の成長促進性、合成代謝促進性の望ましい特性が高められる。これらの組み合わせにおいて、本発明の治療薬および成長ホルモン分泌促進剤は、これらの化合物および分泌促進剤を単独で用いた場合に有効な投与量水準の１／１００から１倍の範囲の投与量で独立して存在し得る。骨吸収を抑制し、骨粗鬆症を防止し、骨折の治療を向上させるための組み合わせ治療は、ビスホスホネートと本発明の成長ホルモン分泌促進剤との組み合わせにより示すことができる。これらの用途のためのビスホスホネートの使用は、例えば、Ｈａｍｄｙ，Ｎ．Ａ．Ｔ．著，ＲｏｌｅｏｆＢｉｓｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓｉｎＭｅｔａｂｏｌｉｃＢｏｎｅＤｉｓｅａｓｅｓ、ＴｒｅｎｄｓｉｎＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．、第４巻、１９〜２５頁（１９９３年）においても再検討されていた。これらの有用性を有するビスホスホネートは、アレンドロネート、チルドロネート、ジメチル−ＡＰＤ、リゼドロネート、エチドロネート、ＹＭ−１７５、クロドロネート、パミドロネート、およびＢＭ−２１０９９５がある。それらの性能によれば、骨粗鬆症の有効な治療を得るために、０．１ｍｇ〜５ｇの間の一日当たり経口投与量でビスホスホネートを、および体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜２０ｍｇの間の一日当たり投与量で本発明の成長ホルモン分泌促進剤を患者に投与する。アレンドロネートの場合、有効な骨粗鬆症の治療のためには、０．１ｍｇ〜５０ｍｇの間の一日当たり経口投与量を、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの間の本発明の成長ホルモン分泌促進剤と組み合わせる。骨粗鬆症および他の骨疾患は、本発明の化合物をカルチトニン、エストロゲン、ラロキフェン、およびクエン酸カルシウムのようなカルシウム補足剤と組み合わせて治療することもできる。特に老齢男性患者の治療における合成代謝促進効果が、本発明の化合物を、オキシメトロン、メチルテステロン、フルオキシメステロンおよびスタノゾロールのような合成代謝促進性ステロイドと組み合わせることにより得られる。本発明の化合物は、経口、非経口（例えば、筋肉内、腹腔内、静脈内または皮下注射、または埋没）、鼻腔、膣、直腸、舌下、または局所的投与経路により投与することができ、また、各投与経路に適当な投与形状に調製することができる。経口投与のための固体投与形態は、カプセル、錠剤、ピル、粉末および顆粒を含む。そのような固体投与形態において、活性化合物を、スクロース、ラクトースまたは澱粉のような少なくとも一つの不活性な薬学的に許容できるキャリアと混合する。そのような投与形態は、また、通常の実施においてそうであるように、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤も含むことができる。カプセル、錠剤およびピルの場合、投与形態は、緩衝剤も含んでよい。錠剤およびピルは、さらに腸溶性被膜を用いて調製することができる。経口投与のための液体投与形態は、薬学的に許容できる乳濁液、溶液、懸濁液、シロップ、および、水のような当分野において一般的に用いられる不活性希釈剤を含むエリキシルを含む。そのような不活性希釈剤以外に、組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤のようなアジュバント、および甘味剤、風味剤および香料を含むこともできる。非経口投与のための本発明による製剤は、滅菌された水性または非水性溶液、懸濁液または乳濁液を含む。非水性溶媒またはビヒクルの例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油およびコーン油のような植物油、ゼラチン、およびオレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルである。そのような投与形態は、防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のようなアジュバントも含む。それらは、例えば、バクテリア保留フィルターを通す濾過、組成物への滅菌剤の導入、組成物の照射、または組成物の加熱により滅菌することができる。それらは、使用直前に滅菌水または他の滅菌注射可能媒体に溶解することのできる滅菌固体組成物の形態として製造することもできる。直腸または膣投与のための組成物は、好ましくは、活性物質に加えてココアバターまたは座剤ワックスのような賦形剤を含んでよい座剤である。鼻腔または舌下投与のための組成物も当分野において良く知られている標準的賦形剤を用いて調製される。本発明の化合物は、そのような治療を必要としている患者（動物およびヒト）に、最良の薬学的効能を提供するような投与量で投与することができる。特定の用途に用いるために必要な投与量は、選択される特定の化合物または組成物についてのみならず、投与経路、処理される症状の性質、患者の年齢および症状、患者が従う併行する投与薬または特別の食事、および当業者が理解する他の因子についても、患者毎に異なり、適当な投与量は最終的には担当医の分別によるものと認識される。本発明の組成物中の活性成分の量は変化し得るが、活性成分の量は好適な投与形態が得られるような量であることが必要である。選択される投与量は、望まれる治療効果、投与経路、および治療期間に依存する。成長ホルモンを効果的に放出させるために、通常、体重１ｋｇ当たり毎日０．０００１ｍｇ〜１０ｍｇの投与量水準で、患者および動物、例えば、哺乳動物に投与がなされる。好ましくは、投与量水準は、一日当たり約０．００１〜約２５ｍｇ／ｋｇ；より好ましくは一日当たり約０．０１〜約１０ｍｇ／ｋｇである。本発明の多形形態の調製方法を以下の実施例により説明する。以下の実施例は、本発明の説明の目的で行われ、本発明の範囲または精神を制限するものと解すべきでない。実施例１Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミド工程Ａ：１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４ ’−ピペルジン］ハイドロクロライド１’−メチル−１，２−ジヒドロ−スピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］（Ｈ．Ｏｎｇら著．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，第２３巻，９８１− ９８６頁（１９８３年）記載の様に調製）１．２０ｇ（５．８ｍｍｏｌ）を乾燥ジクロロメタン２０ｍＬ中に含む溶液に、０℃で、トリエチルアミン（０．９０ｍＬ；６．４ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロライド（０．４９ｍＬ；６．３５ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間攪拌した。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液１５ｍＬに注ぎ、ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）で抽出した。併せた有機分をブライン（２０ｍＬ）で洗い、無水炭酸カリウムで乾燥し、濾過し、減圧下に溶媒を除去してメタンスルホンアミド誘導体１．４４ｇを淡黄色油状物として得、それを精製することなく使用した。前記粗生成物を乾燥１，２−ジクロロエタン２０ｍＬ中に含む溶液に、０℃で、１−クロロエチルクロロホルメート１．０ｍＬ（９．３０ｍｍｏｌ）を添加し、次に室温で３０分間、最後に還流下に１時間攪拌した。反応混合物を約１／３の容量に濃縮し、次に乾燥メタノール２０ｍＬで希釈し、１．５時間還流した。反応液を室温に冷却し、約１／２の容量に濃縮した。沈殿物を濾過し、少量の冷たいメタノールで洗った。これにより、ピペリジン塩酸塩１．０ｇを白色固体として得た。濾液を濃縮し、少量のメタノールを添加し、続いてエーテルを添加した。沈殿物質をもう一度濾過し、冷たいメタノールで洗い、乾燥した。これにより、さらに０．４９ｇの所望の生成物を得た。合計収率は１．４９ｇ（７０％）であった。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，２００ＭＨｚ）δ７．４３−７．２０（ｍ，３Ｈ），７．１０（ｄｄ，１Ｈ），３．９８（ｂｓ，２Ｈ），３．５５−３．４０（ｂｄ，２Ｈ），３．３５−３．１０（ｍ，２Ｈ），２．９９（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｔ，２Ｈ），２．００（ｔ，２Ｈ）．工程Ｂ：Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−２−メチル−プロパンアミド（２Ｒ）−２−［（１，１−ジメチルエトキシ）−カルボニル］アミノ−３− ［２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−１−プロパン酸０．３５ｇ（１．１５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１３ｍＬ中に含む溶液に、１，２−ジヒドロ− １−メタンスルホニル−スピロ−［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］ハイドロクロライド（０．３２５ｇ；１．０７ｍｍｏｌ）Ｎ−メチルモルホリン０．１８ｍＬ（１．６３ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯＢＴ）０．１５９ｇ（１．１８ｍｍｏｌ）を添加し、１５分間攪拌した。ＥＤＣ（０．３１ｇ；１．６２ｍｏｌ）を添加し、１時間攪拌を続けた。Ｎ−メチルモルホリン６０μＬをさらに添加し、４５分間攪拌した。反応混合物を水５ｍＬに注ぎ、有機層を分離した。有機層を０．５Ｎ塩酸水溶液５ｍＬおよび飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗った。併せた有機分を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して生成物０．６２７ｇを黄色泡状物として得、これを精製することなく使用した。前記生成物０．６２７ｇ（１．０７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍＬ中に含む溶液に、トリフルオロ酢酸１．０ｍＬを添加し、室温で７５分間攪拌した。さらにトリフルオロ酢酸１．００ｍＬを添加し、１０分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタン５．０ｍＬで希釈し、１０％飽和炭酸ナトリウム溶液１０ｍＬを注ぐことにより注意深く塩基性化した。有機層を分離し、水層をさらにジクロロメタン１５ｍＬで２回抽出した。併せた有機分を水５ｍＬで洗い、炭酸カリウムで乾燥し、濾過し、濃縮してアミン０．４８６ｇを淡黄色泡状物として得、これを精製することなく使用した。アミン０．４８６ｇ（１．０１ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン１０ｍＬの混合物に、２−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−２−メチル −プロパン酸０．２６ｇ（１．２８ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯＢＴ）０．１７３ｇ（１．２８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ（０．２４５ｇ；１．２８ｍｏｌ）を添加し、室温で一晩攪拌した。反応混合物を水５．０ｍＬに注ぎ、有機層を分離した。水層をジクロロメタン５ｍＬで逆抽出した。併せた有機分を０．５Ｎ塩酸水溶液０．５ｍＬ、および無水硫酸マグネシウムで乾燥した飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗い、濃縮して粗生成物０．７５１ｇを黄色泡状物として得た。この粗生成物のジクロロメタン溶液をシリカゲル２５ｇ上のクロマトグラフィーに付し、まずヘキサン／アセトン／ジクロロメタン（７０／２５／５）で溶離し、次にヘキサン／アセトン／ジクロロメタン（６５／３０／５）で溶離した。これにより、表記化合物０．６３ｇを白色固体として得た。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）。化合物は回転異性体の３：２混合物として存在。δ７．４０−７．１０（ｍ，６Ｈ），７．０６（ｄ，１／３Ｈ），７．０２（ｔ，１／３Ｈ），６．９０（ｔ，１／３Ｈ），６．５５（ｄ，１／３Ｈ），５．１５（ｍ，１Ｈ），４．９５（ｂｓ，１Ｈ），４．６３（ｂｄ，１／３Ｈ），４．５７−４．４０（ｍ，２２／３Ｈ），４．１０（ｂｄ，１／３Ｈ），４．００（ｂｄ，１／３Ｈ），３．８２（ｔ，１Ｈ），３．７８−３．６２（ｍ，２Ｈ），３．６０−３．５０（ｍ，１Ｈ），３．０４（ｑ，１Ｈ），２．８７（ｓ，１Ｈ），２．８６（ｓ，２Ｈ），２．８０−２．６０（ｍ，１Ｈ），１．９０（ｂｓ，１Ｈ），２．８５−２．７５（ｍ，１Ｈ），１．８２−１．６０（ｍ，３Ｈ），１．５５−１．４５（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，４Ｈ），１．４２（ｓ，２Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）．工程Ｃ：Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドハイドロクロライド工程Ｂからの中間体０．６３７ｇ（０．１０１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５ｍＬ中に含む溶液に、トリフルオロ酢酸２．５ｍＬを添加し、室温で３０分間攪拌した。反応混合物を濃縮して油状物を得、酢酸エチル１０ｍＬ中に取り込み、１０％炭酸ナトリウム水溶液８ｍＬで洗った。水層をさらに酢酸エチル５ｍＬで抽出した。併せた有機分を水１０ｍＬで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮して遊離塩基０．５１２ｇを白色泡状物として得た。遊離塩基０．５１２ｇを酢酸エチル５ｍＬ中に含む溶液に、０℃で、酢酸エチル中の飽和塩酸０．２ｍＬを添加し、１．５時間攪拌した。白色沈殿物を窒素雰囲気下に濾過し、エーテルで洗い、乾燥して表記化合物０．５０ｇを白色固体として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ）。化合物は回転異性体の３：２混合物として存在。δ７．４０−７．２８（ｍ，４Ｈ），７．２５−７．１７（ｍ，２Ｈ），７．０８（ｔ，１／３Ｈ），７．００（ｔ，１／３Ｈ），６．８０（ｄ，１／３Ｈ），５．１６（ｄｄｄ，１Ｈ），４．６０−４．４２（ｍ，３Ｈ），４．０５（ｔ，１Ｈ），３．９０（ｂｓ，２Ｈ），３．８３−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．３０−３．１５（ｍ，１Ｈ），０．２９７（ｓ，１Ｈ），２．９５（ｓ，２Ｈ），２．９０−２．７８（ｍ，１Ｈ），１．９６（ｔ，１／３Ｈ），１．８５−１．６５（ｍ，４Ｈ），１．６３（ｓ，２Ｈ），１．６０（ｓ，４Ｈ）．実施例２Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミド工程Ａ：（２Ｒ）−［［［２−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−２，２−ジメチル−１−オキソエチル］アミノ−２−（フェニルメトキシ）エチル］−１−プロパン酸アリルエステルＥＤＣおよびＤＭＡＰの存在下、ＣＨ₂Ｃｌ₂中でカップリング反応を行うことにより（２Ｒ）−２−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−３ −（フェニルメチル−オキシ）エチル−プロパン酸およびアリルアルコールから調製した。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．２５（ｓ，５Ｈ），５．８（ｍ，１Ｈ），５．２（ｄｄ，２Ｈ），５．０（ｂｓ，１Ｈ），４．７（ｍ，１Ｈ），４．６（ｍ，２Ｈ），４．４（ｄｄ，２Ｈ），３．９（ｄｄ，１Ｈ），３．６（ｄｄ，１Ｈ），１．４５（ｄ，６Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）．工程Ｂ：（２Ｒ）−［［［２−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−２，２−ジメチル−１−オキソエチル］アミノ−２−（フェニルメトキシ）エチル］−１−プロパン酸工程Ａで得られた粗中間体（６．７ｇ，１５．９ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（１．８ｇ，０．１当量）およびトリフェニルホスフィン（１．２５ｇ，０．３当量）からなる攪拌された溶液に、カリウム−２−エチルヘキサノエート（３５ｍＬ，０．５ＭのＥｔＯＡｃ溶液）の溶液に添加した。反応混合物を窒素雰囲気下、室温で１時間攪拌し、次にエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、氷水に注いだ。有機層を分離し、水性フラクションをクエン酸（２０％）で酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ抽出液をブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させて表記化合物を固体として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ）δ７．３（ｓ，５Ｈ），４．７（ｍ，１Ｈ），４．５（ｓ，２Ｈ），４．０（ｍ，１Ｈ），３．６（ｍ，１Ｈ），１．４（ｄ，６Ｈ），１．３（ｓ，９Ｈ）．工程Ｃ：Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−［（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ−２−メチルプロパンアミド１−メタンスルホニル−スピロ［インドリン−３，４’−ピペルジン］ハイドロクロライド１．０ｇ（３．４４ｍｍｏｌ）、（２Ｒ）−［［２−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル］アミノ］−２，２−ジメチル−１−オキソ−エチル］−アミノ−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−１−プロパン酸１．４４ｇ（３．７８ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（０．５８ｍＬ；５．２０ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯＢＴ）（０．５８ｇ；３．７８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン５０ｍＬ中に含む溶液に、ＥＤＣ（１．０３ｇ；５．２０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１６時間攪拌した。反応混合物をさらに５０ｍＬのジクロロメタンで希釈し、重炭酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。粗油状物残さをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル５０ｇ）に付して、所望の物質２．１４８ｇ（９０％）を無色泡状物として得た。¹ ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）。化合物は回転異性体の３：２混合物として存在。δ７．４０−７．１０（ｍ，６Ｈ），７．０６（ｄ，１／３Ｈ），７．０２（ｔ，１／３Ｈ），６．９０（ｔ，１／３Ｈ），６．５５（ｄ，１／３Ｈ），５．１５（ｍ，１Ｈ），４．９５（ｂｓ，１Ｈ），４．６３（ｂｄ，１／３Ｈ），４．５７−４．４０（ｍ，２２／３Ｈ），４．１０（ｂｄ，１／３Ｈ），４．００（ｂｄ，１／３Ｈ），３．８２（ｔ，１Ｈ），３．７８−３．６２（ｍ，２Ｈ），３．６０−３．５０（ｍ，１Ｈ），３．０４（ｑ，１Ｈ），２．８７（ｓ，１Ｈ），２．８６（ｓ，２Ｈ），２．８０−２．６０（ｍ，１Ｈ），１．９０（ｂｓ，１Ｈ），２．８５−２．７５（ｍ，１Ｈ），１．８２−１．６０（ｍ，３Ｈ），１．５５−１．４５（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，４Ｈ），１．４２（ｓ，２Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）．工程Ｄ：Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドハイドロクロライド工程Ｃで得られた中間体２．１４８ｇ（３．４１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１０ｍＬ中に含む溶液に、トリフルオロ酢酸５ｍＬを添加し、１時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、５％炭酸ナトリウム水溶液１００ｍＬで塩基性化し、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。併せた有機分をブライン（５０ｍＬ）で洗い、無水炭酸カリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して無色泡状物を得た。泡状物を酢酸エチル２５ｍＬ中に含む溶液に、０℃で、酢酸エチル中の１Ｍ塩酸溶液４ｍＬを添加した。沈殿物を濾過し、まず酢酸エチルで洗い、次に酢酸エチル− エーテル（１：１）で洗って、乾燥させて、表記化合物１．７９ｇ（９３％）を無色固体として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ）。化合物は回転異性体の３：２混合物として存在。δ７．４０−７．２８（ｍ，４Ｈ），７．２５−７．１７（ｍ，２Ｈ），７．０８（ｔ，１／３Ｈ），７．００（ｔ，１／３Ｈ），６．８０（ｄ，１／３Ｈ），５．１６（ｄｄｄ，１Ｈ），４．６０−４．４２（ｍ，３Ｈ），４．０５（ｔ，１Ｈ），３．９０（ｂｓ，２Ｈ），３．８３−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．３０−３．１５（ｍ，１Ｈ），２．９７（ｓ，１Ｈ），２．９５（ｓ，２Ｈ），２．９０−２．７８（ｍ，１Ｈ），１．９６（ｔ，１／３Ｈ），１．８５−１．６５（ｍ，４Ｈ），１．６３（ｓ，２Ｈ），１．６０（ｓ，４Ｈ）．実施例３Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドメシレートこの化合物は、実施例５の工程Ｄで得られる遊離塩基をメタンスルホン酸で処理することにより調製した。表記化合物を、酢酸エチル−エタノール−水から再結晶することにより得た。融点＝１６６〜１６８℃。このサンプルを、続いて、多形形態ＩＩであると同定した。これは、主反射がほぼ４．７、１１．６、１７．４、１９．２および２１．６°（２シータ）にあるＸ線末回折パターンにより特徴付けられた。これは、さらに、窒素流下のオープンカップにおける１０℃／分でのＤＳＣにより特徴付けら、溶融による単一吸熱を示し、ピーク温度は約１７４℃、外挿された開始温度（融点）が約１６５℃付随する熱約３７Ｊ／ｇであった。実施例４イソニペコチン酸−Ｎ−ベンジルカルバメート（３）材料：イソニペコチン酸（２）Ｔ．Ｃ．Ｉ．４．０２ｋｇ（３１．１ｍｏｌ）ベンジルクロロホルメート（Ｓｃｈｗｅｉｔｚｅｒｈａｌｌ製）６．９１ｋｇ（４０．５ｍｏｌ）Ｋ₂ＣＯ₃ １０．１ｋｇ（７２．９ｍｏｌ）水４０．２Ｌ１００Ｌ四つ口フラスコ内でイソニペコチン酸（２）およびＫ₂ＣＯ₃を窒素雰囲気下、機械的に撹拌しながら水４０．２Ｌに溶解し、溶液を１０℃に冷却した。温度を９〜１４℃に維持しつつベンジルクロロホルメートを添加し、添加完了後、混合物を２２℃に暖め、５８時間放置した。添加は４時間で完了し、その時点でｐＨは９．０であった。５８時間放置後、ｐＨの変化はなかった。反応混合物を２００Ｌ抽出器に移し、ＩＰＡＣ１３ｋｇ（１５Ｌ）で３回およびＥｔＯＡｃ１２Ｌで１回洗った。水層をトルエン８Ｌで抽出した。洗浄後、ベンジルアルコール含量はＨＰＬＣ分析により３．８％から１．４％に低下した。ＨＰＬＣ分析：デュポンＺｏｒｂａｘ２５ｃｍＲＸＣ８カラム，流速１．５ｍＬ／分，２５４ｎｍで検出；ＭｅＣＮ３５％および０．１％Ｈ₃ＰＯ₄水溶液６５％を用いるアイソクラティック混合物；滞留時間：３＝６．９分、ベンジルアルコール＝３．３分、トルエン＝１７．３分。水相を３７％塩酸水溶液でｐＨ１．８に酸性化した。塩酸の添加中、二酸化炭素が発生したが、気体発生は容易に制御された。塩酸の添加は１時間より短時間で行われ、濃塩酸１０Ｌを必要とした。水相をトルエン６．６Ｌで３回抽出した。トルエン抽出液を、硫酸ナトリウム２ｋｇで乾燥し、Ｓｏｌｋａ−ｆｌｏｃ^TMのパッドを通して濾過した。併せた濾液は１７．８ｋｇと秤量された。カルバメート３の粗収量は７．８９ｋｇ（９７％）であった（秤量した少量の濾液を蒸発して乾燥させることにより得た）。濾液を１０μインラインフィルターを通して１００ｍＬフラスコに移した。抽出液は１０ミリバールで２５℃未満で濃縮して、容量１８Ｌにした。カルバメート３の最終的濃度は４４０ｇ／Ｌであった。トルエン濾液の濃縮は、最後の少量の水を共沸的に除去するのに役だった（最終的ＫＦ＝１７０ｍｇ／Ｌ）。生成物は９９．１面積％の純度で、唯一の不純物としてベンジルアルコール０．９面積％を含んでいた。実施例５イソニペコチン酸クロライド−Ｎ−ベンジルカルバメート（４）材料：イソニペコチン酸Ｎ−ベンジルカルバメート（３）７．８９ｋｇ（３０．０ｍｏｌ）トルエン中（ＭＷ＝２６３．３０）１７．９Ｌ中塩化オキサリル（ＭＷ＝１２６．９３）３．９４ｋｇ（３１．０ｍｏｌ）ＤＭＦ（ＭＷ＝７３．１０）１０ｍＬトルエン１２Ｌ前記工程からのベンジルカルバメート３のトルエン溶液に、ＤＭＦ５ｍＬおよびトルエン１０Ｌを添加した。塩化オキサリルを２０分間かかって添加した。反応混合物を、窒素をゆっくりと流しながら、１８℃で１６時間放置した。反応混合物のＨＰＬＣ分析は、カルボン酸３の１．３％がなお未反応のままであることを示した。反応混合物を２６℃に暖め、ＤＭＦ５ｍＬを添加した。混合物を２．５時間放置した。反応混合物１．０ｍＬをｔ−ブチルアミン５．０ｍＬで急冷し、ＨＰＬＣ：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラムにより５０℃で１ｍＬ／分の流速で、蒸発させた後に、分析し、２２０ｎｍで検出した。ＭｅＣＮ４２％および０．１％Ｈ₃ＰＯ₄水溶液５８％のアイソクラティックを検出した。この方法は、０．０５％より少ない酸３が残り（Ａにより判断されるように）、３面積％より多いＢ（１モル％より多い（ＣＯＣｌ）₂）を示した。混合物を１０ミリバールにで２０〜２５℃の温度で、５Ｌの溶媒が除去されるまで濃縮した。前述のｔ−ＢｕＮＨ₂による急冷後の濃縮トルエン溶液の典型的ＨＰＬＣプロフィールを以下に示す。実施例６ピペリジン−４−カルボキサルデヒド−ベンジルカルバメート（５）材料：イソニペコチン酸クロライドＮ−ベンジルカルバメート（４）３．３８ｋｇ（１２．０ｍｏｌ）トルエン中（ＭＷ＝２８１．７４）５．５４ｋｇ中ＤＩＥＡ（ＫＦ＝１８ｍｇ／Ｌ）１．５５ｋｇ（１５．０ｍｏｌ）１０％Ｐｄ／Ｃ（ＫＦ＜２０ｍｇ／ｇ）１０１ｇチオアニソール（ＭＷ＝１２４．２１，ｄ＝１．０５８）０．５６ｇＤＩＥＡおよびチオアニソールを前記工程からのトルエン中の（４）の溶液に添加し、この溶液に触媒を懸濁させた。混合物を、直ぐに５ガロンのオートクレーブに入れ、４０ｐｓｉの水素圧力下に２０℃で水素化した。１８時間後、反応は理論量の水素の７０％を消費し、ｔ−ブチルアミンで急冷した部分をＨＰＬＣ分析すると酸塩化物２の１４．２面積％が残っていることが示された。ＨＰＬＣ条件は前述と同様である。滞留時間：５＝８．１分。触媒（１０１ｇ）およびチオアニソール（０．５４ｇ）の第２仕込分をトルエン１３７５ｍＬ中のスラリーとして水素化器に添加した。ｔ−ブチルアミンで急冷した部分を２３時間ＨＰＬＣ分析すると酸塩化物２の１．８面積％が残っていることが示された。混合物を窒素パージし、触媒および沈殿したＤＩＥＡ／ＨＣｌをＳｏｌｋａ−ｆｌｏｃ^TMを通して濾過することにより除去した。フィルターケーキをトルエン１０Ｌで洗った。濾液を、１０μインラインフィルターを介して、５０Ｌ抽出器に送り、１Ｍ塩酸水溶液７．２Ｌで２回、および水７．２Ｌで２回洗った。混合物を１０ミリバール、温度２５〜３０℃で５Ｌの残さが残るまで濃縮した。アルデヒド３のアッセイ収率は、ＨＰＬＣ分析で９４％であった。実施例７ＣＢＺ−スピロインドリン（９）材料：ピペリジン−４−カルボキサルデヒド−１−ベンジルカルバメート（５）１．７１ｋｇ（６．８９ｍｏｌ）トルエン溶液中２１．４ｋｇ中フェニルヒドラジン９００ｍＬ，９８１ｇ（９．１５ｍｏｌ）トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）・２０Ｌ，３．２６ｋｇ（２８．６ｍｏｌ）ＮａＢＨ₄ ３００ｇ，（７．９３ｍｏｌ）トルエン３４．４ｋｇＭｅＣＮ７．０ＬＭｅＯＨ７．０Ｌ前記工程からの粗アルデヒド５溶液を、１０μインラインフィルターを通して、冷却または加熱のためのテフロン被覆銅コイルおよび機械的撹拌器を備えた１００Ｌ反応器に移した。トルエン（３４．４ｋｇ）およびＭｅＣＮ（７Ｌ）を添加し、得られる溶液を０℃に冷却した。フェニルヒドラジンを少しずつ添加し、反応混合物に窒素を連続的に吹き込みながら温度を−１〜３℃に維持した。ＴＬＣおよびＨＰＬＣ分析が、アルデヒド５の完全な消費および僅かに過剰（＜５％）のフェニルヒドラジンの出現を示すまで、フェニルヒドラジンを添加した。ＴＬＣ条件：シリカ、Ｅ．ＭｅｒｃｋＫｉｅｓｅｌｇｅｌＧ６０Ｆ２５４０．２５ｍｍ；ジエチルエーテル／ペンタン（４／１）；展開剤、１０％硫酸水溶液中に硫酸セリウム０．５％およびモリブデン酸アンモニウム１４％を溶解してから加熱；Ｒ_f：アルデヒド５＝０．５２、フェニルヒドラゾン７＝０．６１、フェニルヒドラジン６＝０．２１。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、３０℃、流速１．０ｍＬ／分、２５４ｎｍで検出；グラジエント計画：滞留時間（分）アセトニトリル：水０５７：４３１０６５：３５１５７５：２５１８７５：２５滞留時間：フェニルヒドラジン６＝４．５分、トルエン＝７．２分、フェニルヒドラゾン７＝１１．４分反応混合物を０〜２℃で３０分間放置し、温度を２〜７℃に維持しつつＴＦＡを添加した。反応混合物を５０℃で３０分間暖め、１７時間維持した。反応混合物への窒素スパージを停止し、反応混合物上にゆっくりとした窒素の流れを維持した。５℃での最初の時間中、色は徐々に暗くなり深緑に変化し、比較的少量の白色結晶沈殿物（トリフルオロ酢酸アンモニウム）が形成された。１７時間後、ＨＰＬＣ分析（前述と同じ条件）は、反応混合物が９１．６面積％のインドレニン８および１．５％の残っている未反応フェニルヒドラゾンを含むことを示した。混合物を長時間放置しても、インドレニン８のアッセイ収率を増加させなかった。反応混合物を１２℃に冷却し、ＭｅＯＨ７．０Ｌを添加した。温度を１５℃より低く維持しつつＮａＢＨ₄を少量（＜２０ｇ）づつ添加した。添加には３０分かかった。添加中におだやかな水素の発生が観察されたが、それは容易に制御され、実質的にあわ立つことはなかった。添加の終了近くに、色は緑から急速に褐色および続いて明るいオレンジに変化した。少量（＜２００ｍＬ）の重質相（おそらく水性塩）が分離した。ＨＰＬＣ分析（条件は前述）は、インドレニン８の全てが消費され（９０．４面積％ＣＢＺインドリン９）；滞留時間：インドレニン８＝７．５分、インドリン９＝８．２分であることを示した。ＴＬＣ：溶媒としてエチルエーテル、硫酸第二セリウム−モリブデン酸アンモニウム発色または１％アニスアルデヒド発色；滞留計数：インドレニン８＝０．１８、ＣＢＺ−インドリン９＝０．３３。緑からオレンジへの色変化は、反応終了点に非常に密接に関連している。反応の完了に必要なＮａＢＨ₄の量は、温度およびＮａＢＨ₄の添加速度に大きく依存するが、生成物の収率および質は、反応が完了すれば実質的に影響を受けない。反応混合物を３０分間で５℃に冷却した。次に、ＮＨ₄ＯＨ３％水溶液８Ｌを添加して水相のｐＨを７．４にし、混合物を攪拌し、沈下させた。温度は１５℃に上昇した。濁った黄色の下側水層が分離された。有機分をＮＨ₄ＯＨ３％水溶液４Ｌ、水２×４Ｌおよびブライン２×４Ｌで洗った。洗浄後の有機層の重量は５３．５ｋｇであり、アッセイの収率は９４％であった。洗ったトルエン溶液を、他の二つの同様の加工反応の洗った有機層と併せた。三つの反応で用いられるトルエン合計量は５．０６ｋｇ（２０．５ｍｏｌ）であった。併せた有機相中で調べられたＣＢＺ−インドリン９の合計重量は、５．９１ｋｇ（１８．３ｍｏｌ、９０％アッセイ収率）であった。併せた有機相を硫酸ナトリウム５ｋｇで乾燥し、２５０ｇのＤａｒｃｏＧ６０で３０分間処理し、Ｓｏｌｋａ−ｆｌｏｃ^TMを通して濾過した。残さが乾燥に近づくまで、濾液を２５ ℃より低い温度で１０ミリバールにて減圧濃縮した。３０ＬのＩＰＡＣにゆっくり流し出し、５０〜６０℃の温度で２００ミリバールにて１４Ｌに再度濃縮することにより溶媒交換を完了した。透明な均質の深いオレンジ色溶液を得るために混合物を加熱還流した。¹ ＨＮＭＲ分析は、溶液が溶媒交換後に約６モル％の残留トルエンを含んでいることを示した。溶液を６８℃に冷却し、４ｇの結晶性ＣＢＺ−インドリン９を種材料として加えた。溶液を６時間かかって徐々に２６℃に冷却し、２０〜２６℃で９時間放置した。スラリーを１時間で２℃に冷却し、２℃で１時間放置した。生成物を濾過により単離し、フィルターケーキを５℃のＩＰＡＣ２×２Ｌおよび５℃のＭＴＢＥ２×２Ｌで洗った。生成物を減圧炉中において窒素流動下、３０℃で乾燥して表記化合物９の４．３７ｋｇ（７４％）を淡褐色結晶性粉末として得た。生成物のＨＰＬＣ分析は９９．５面積％純度を示した。母液（１１Ｌ）および洗浄液は１．１５ｋｇ（１９％）のさらなる生成物９および約３％のＣｂｚ−イソニペコチン酸フェニルヒドラジド（滞留時間＝４．８時間）を含んでいた。実施例８ＣＢＺ−スピロインドリン−メタンスルホンアミド（１）材料：ＣＢＺ−スピロインドリン（９）１．６９ｋｇ（５．２３ｍｏｌ）メタンスルホニルクロライド５９９ｇ（５．２３ｍｏｌ）Ｅｔ₃Ｎ（ＫＦ＝１５１）６３５ｇ（６．２７ｍｏｌ）ＴＨＦ（ＫＦ＝４１）１２Ｌ２２Ｌフラスコに、固体ＣＢＺ−スピロインドリン９を仕込み、次に１１．５ＬのＴＨＦおよびＥｔ₃Ｎを１０μインラインフィルターを通してフラスコに移した。得られる均質溶液を０℃に冷却した。１Ｌの滴下漏斗にメタンスルホニルクロライドおよびＴＨＦ５００ｍＬを仕込んだ。ＭｓＣｌのＴＨＦ溶液を、温度を０〜４ ℃に維持しながら反応混合物に添加した。添加には５時間かかり、発熱性であった。白色沈殿、おそらくトリエチルアンモニウムハイドロクロライド（塩酸塩）であるが添加中に形成された。ＨＰＬＣ分析は、反応が添加終了時に完了（９が検出できない）したことを示した。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流速１．５ｍＬ／分、２５４ｎｍで検出；グラジエント計画：滞留時間（分）０．１％Ｈ₃ＰＯ₄水溶液：ＭｅＣＮ０７０：３０３７０：３０１２２０：８０２５２０：８０滞留時間：９＝７．６分，１＝１３．６分添加完了後、反応混合物を１８℃に暖め１６時間放置した。反応混合物の概観、および添加終了時と１６時間の放置後との間のＨＰＬＣポロフィールに変化はなかった。反応混合物をゆっくりと１時間かけて、５０Ｌフラスコ中で水３０Ｌと３７％塩酸水溶液との水溶液を激しく撹拌しているところへ添加した。５０Ｌフラスコ中の温度は２２から２８℃に上昇した。生成物は淡褐色ゴム状固体として分離され、それは顆粒状固体に変化した。水性懸濁液を２２℃に冷却し、１時間放置した。懸濁液を濾過し、フィルターケーキを４ＬのＭｅＯＨ／水（５０／５０）で２回洗った。ＨＰＬＣ分析は、０．１％より少ないＣＢＺ−スピロインドリン− メタンスルホンアミド１が母液中に存在することを示した。フィルターケーキを２８％ＮＨ₄ＯＨ水溶液５０ｍＬを添加しておいた４ＬのＭｅＯＨ／水（５０／５０）で洗った。フィルターケーキを２×４ＬのＭｅＯＨ／水（５０／５０）で洗い、固体を減圧炉内にて窒素流下、５０℃で乾燥して、表記化合物１の２．０３ｋｇ（９７％）を淡白色粉末として得た。固体のＨＰＬＣ分析は９３．７面積％の１を示す。実施例９中間体ＣＢＺ−スピロインドレニン（８）の任意の単離手順材料：ピペリジン−４−カルボキサルデヒド−１−ベンジルカルバメート（５）１２．３７ｇ（０．０５０ｍｏｌ）フェニルヒドラジン５．４１ｇ（０．０５０ｍｏｌ）トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）１１．５６ｍＬ，１７．１０ｇ（０．１５０ｍｏｌ）塩化メチレン５００ｍＬテフロン被覆磁気撹拌棒を備える１Ｌフラスコ内でＣＢＺ−アルデヒド５をジクロロメタンに溶解した。得られる溶液を０℃に冷却した。フェニルヒドラジンを秤量注射器を介して５分間で添加し、窒素を反応混合物に連続的に吹き込みながら温度を−１〜３℃に維持した。ＴＬＣおよびＨＰＬＣ分析は、ＣＢＺ−アルデヒド５の完全な消費および僅かに過剰（＜２％）のフェニルヒドラジンの出現を示した。ＴＬＣ条件：シリカ、Ｅ．ＭｅｒｃｋＫｉｅｓｅｌｇｅｌＧ６０Ｆ２５４０．２５ｍｍ；ジエチルエーテル／ペンタン（４／１）；および発色剤、１０％硫酸水溶液中に硫酸第二セリウム０．５％およびモリブデン酸アンモニウム１４％を溶解してから加熱；Ｒ_f：アルデヒド５＝０．５２、フェニルヒドラゾン７＝０．６１、フェニルヒドラジン６＝０．２１。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、３０℃、流速１．０ｍＬ／分、２５４ｎｍで検出；グラジエント計画：時間（分）アセトニトリル：水０５７：４３１０６５：３５１５７５：２５１８７５：２５滞留時間：フェニルヒドラジン６＝４．５分，トルエン＝７．２分，フェニルヒドラゾン７＝１１．４分反応混合物を０〜２℃で１０分間放置し、温度を２〜７℃に維持しつつ注射器によりＴＦＡを添加した。反応混合物を３５℃で３０分間暖め、１７時間維持した。反応混合物を通す窒素スパージを停止し、反応混合物上にゆっくりとした窒素の流れを維持した。３５℃での最初の時間中、色は徐々に暗くなりロースピンク色に変化し続いて深緑色に変化し、比較的少量の白色結晶沈殿物（トリフルオロ酢酸アンモニウム）が形成された。１７時間放置しＨＰＬＣ分析（前述と同じ条件）すると、反応混合物が９３面積％のインドレニン８および０．５％より少ない残っている未反応フェニルヒドラゾンを含むことが示された。混合物を長時間放置しても、インドレニン８のアッセイ収率を増加させなかった。反応混合物を１０℃に冷却し、２８〜３０％の水酸化アンモニウム６０ｍＬ、水９０ｍＬおよび破砕氷１５０ｇを含む混合物を、充分に撹拌しつつ添加した。混合物の色はサーモン色に変化した。有機相を分離し、水４００ｍＬで２回洗い、次に飽和塩化ナトリウム水溶液１００ｍＬで洗った。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、シリカ５ｇのプラグを通して濾過した。濾液を蒸発させてインドレニン８の１５．８４ｇ（９９％）を淡オレンジ色油状物として得た。実施例１０中間体ＣＢＺ−スピロインドリン（９）を単離することなくＣＢＺ−スピロインドリンメタンスルホンアミド（１）を調製する方法工程１：ＣＢＺ−スピロインドリン（９）材料：ピペリジン−４−カルボキサルデヒド−１−ベンジルカルバメート（５）４９．５ｇ（０．２０ｍｏｌ）フェニルヒドラジン（アルドリッチ製）２３．７ｇ（０．２２ｍｏｌ）トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）７５．４ｇ（０．６６ｍｏｌ）トルエン（ＫＦ＜２５０ｍｇ／Ｌ）６５４ｍＬＭｅＣＮ（ＫＦ＜２５０ｍｇ／Ｌ）１３．３ｍＬＮａＢＨ₄ １１．３ｇ，（０．３０ｍｏｌ）トルエン２０ｍＬＭｅＯＨ５０ｍＬトルエン６５４ｍＬおよびＭｅＣＮ１３．３ｍＬを用いてＭｅＣＮの２％（容量）トルエン溶液を調製した。機械的撹拌器を備えた２Ｌ三つ口フラスコにおいて、前記溶液６１７ｍＬを、溶液に窒素を５分間、細かく通すことにより脱気した。脱気しつつ混合物にフェニルヒドラジンおよびＴＦＡを添加した。ＣＢＺ−アルデヒド５を先に調製した溶液の残り（５０ｍＬ）に溶解し、添加漏斗内にて溶液に窒素を吹き込むことにより脱気した。フラスコ内の溶液を３５ ℃に加熱し、アルデヒド溶液をフェニルヒドラジン−ＴＦＡに２時間かかってゆっくりと添加した。混合物を、３５℃で１６時間放置した。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、５０℃、流速１ｍＬ／分、２２０ｎｍで検出；アイソクラティックＭｅＣＮ５５％、０．１％Ｈ₃ＰＯ₄水溶液４５％。１６時間放置後の典型的ＨＰＬＣプロフィール：混合物を−１０℃に冷却し、ＭｅＯＨを添加した。水素化ホウ素ナトリウムをトルエン２０ｍＬ中に含む懸濁液を、温度が−２℃を超えないように注意しつつ、３０分かかって少量（１ｍＬ）添加した。面積％同定０．１−１フェニルヒドラジン６８５−９０ＣＢＺ−スピロインドリン９＜０．１ＣＢＺ−スピロインドレニン８合計１０−１５他の不純物（各＜０．３％）温度を１時間かかって１０℃に上昇させ、６％アンモニア水溶液（２００ｍＬ）を添加した。混合物を１０分間撹拌し、さらなる１０分間沈降させ、下側の水層を抽出した。有機層にアセトニトリル（２０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２０ｍＬ）、それを１５％ブライン１５０ｍＬで洗った。有機層は、ＣＢＺ−スピロインドリン９を９２％のアッセイ収率で含むことがわかった。工程２：ＣＢＺ−スピロインドリン−メタンスルホンアミド（１）材料：ＣＢＺ−スピロインドリン（９）（ＭＷ＝３２２．５１）（０．１８４ｍｏｌ）メタンスルホニルクロライド２１．１ｇ（０．１８４ｍｏｌ）ＤＩＥＡ（ＫＦ＝１５０ｍｇ／Ｌ）２９．７ｇ，４０．１ｍＬ（０．２３０ｍｏｌ）ＴＨＦ（ＫＦ＝４１ｍｇ／Ｌ）１５０ｍＬ前記工程１からのＣＢＺ−スピロインドリン９の粗溶液を、２５０ｇの残さが残るまで、１Ｌの三つ口フラスコ（６０〜７０℃、１５０〜２００トール）内で濃縮した。ＴＨＦおよびＤＩＥＡを添加し、得られる均質溶液を０℃に冷却した。１２５ｍＬの滴下漏斗にメタンスルホニルクロライドおよびＴＨＦ５０ｍＬを仕込んだ。ＭｓＣｌのＴＨＦ溶液を、温度を０〜４℃に維持しながら反応混合物に２時間かかって添加し、混合物を５〜８℃で２時間放置した。添加は僅かに発熱性であった。添加中に、おそらくＤＩＥＡ塩酸塩である白色沈殿が形成された。ＨＰＬＣ条件は前述と同じである。ＨＰＬＣ分析は、添加終了後１時間で反応が完了（９が検出されない）し、９からのアッセイ収率が９４％であることを示した。滞留時間：１＝７．８分。２時間後の反応混合物の典型的ＨＰＬＣプロフィール：面積％同定＜０．１ＣＢＺ−スピロインドリン９９０−９２ＣＢＺ−スルホンアミド１合計８−１０他の不純物（各＜２％）混合物を２０℃に暖め、１Ｍの塩酸水溶液２００ｍＬを添加した。混合物を５０℃に暖め、水層を分離した。有機層を、水１００ｍＬ、５％重炭酸ナトリウム水溶液１００ｍＬおよび水１００ｍＬで順次洗った。有機層を、機械的撹拌および蒸留のために装置が備えられたＩＬ三つ口フラスコに移した。混合物（約４００ｍＬ）を、蒸留液１５０ｍＬが収集されるまで大気圧下に蒸留した。ヘッド温度は１０７℃に達し、ポット温度は１１０℃であった。ポット内の一定容量（約３５０ｍＬ）を維持するようにｎ−プロパノールを連続的に添加しつつ蒸留を続けた。合計で５２５ｍＬのｎ−プロパノールが添加され、合計で８００ｍＬの蒸留液が収集されたときに蒸留を停止した。ヘッドおよびポットの両方の温度が、溶媒交換中に、９４℃ から９８℃に上昇した。トルエンとｎ−プロパノールは、トルエン４７．５％およびｎ−プロパノール５２．５％からなる９７．２℃で沸騰する共沸体を形成する。混合物を３時間かかって徐々に２０℃に冷却し、１２時間放置した。母液は、トルエン２％およびスルホンアミド４ｍｇ／ｍＬを含むことがわかった。トルエンとｎ−プロパノールとの種々の混合物へのスルホンアミドの溶解性をＨＰＬＣアッセイにより決めた。ｎ−ＰｒＯＨ中トルエン％１の溶解度（ｍｇ／ｍＬ）０２．３６５３．０２１０４．２３２０７．５１２５１０．３結晶性スラリーを濾過し、ｎ−プロパノール１００ｍＬで３回洗った。生成物を、減圧炉内において窒素流下、５０℃で１６時間乾燥して６の６５．５ｇ（アルデヒド５から８２％）を純度９３．５重量％の褐色固体として得た。固体の典型的ＨＰＬＣプロフィール：面積％同定＜０．１ＣＢＺ−スピロインドリン９＞９９ＣＢＺ−スルホンアミド１合計＜１他の不純物（各＜０．２％）さらなる精製のために、ｎ−プロパノール結晶化スルホンアミドのサンプル４０．０ｇを６０℃でＥｔＯＡｃ１３４ｍＬに溶解し、６０℃でＤａｒｃｏＧ− ６０炭素８．０ｇで１時間処理した。Ｓｏｌｋａｆｌｏｃ^TM２．０ｇを添加後、スラリーをＳｏｌｋａｆｌｏｃ^TM４．０ｇのパッドを通して濾過し、パッドを６０℃でＥｔＯＡｃ９０ｍＬにより洗った。炭素の添加前に、溶液は茶色であった。濾過は目詰まりなく良好に進み、黄金色濾液を得た。濾液を５００ｍＬフラスコ（ポット温度８０〜８５℃）内において、残さ１００ｇ（１００ｍＬ）が残るまで、大気圧下に蒸留した。この溶液を３時間かかって３５℃に冷却した。１時間かかって、シクロヘキサン１１６ｍＬを３５℃で良く撹拌しながら添加した。混合物を１時間かかって２０℃に冷却し、２０℃で１２時間放置した。３５℃で、スルホンアミドの多くが晶出し、混合物は濃厚であった。２０℃でシクロヘキサンを添加することにより撹拌が困難になる。撹拌期間の後、上澄みは１ｇ当たり化合物１を２．５ｍｇを含むことがわかった。結晶性スラリーを濾過し、ケーキを２：１シクロヘキサン−ＥｔＯＡｃの７７ｍＬで洗い、シクロヘキサン７７ｍＬで２回洗った。生成物を、減圧炉内において窒素流下、５０℃で１６時間乾燥して化合物１（分子量（ＭＷ）＝４００．３）３４．２ｇを白色結晶性固体（粗生成物１から８５％回収、化合物５から７０％回収、純度は９９．９重量％より多い）として得た。実施例１１スピロインドリン−メタンスルホンアミドの塩酸塩（１ａ）材料ＣＢＺ−スピロインドリン−メタンスルホンアミド（１）９４１ｇ（２．３５ｍｏｌ）パールマンズ触媒２０％Ｐｄ（ＯＨ）₂／Ｃ１８８ｇＴＨＦ８ＬＭｅＯＨ７Ｌ触媒をメタノール７Ｌ中に懸濁させ、５ガロンのオートクレーブに移し、続いて化合物１をＴＨＦ８Ｌ中に含む溶液を移した。混合物を８０ｐｓｉのＨ₂により２５℃で水素化した。２．５時間後、温度を３０分かかって３５℃に上げた。ＨＰＬＣ分析は、Ｃｂｚ−スピロインドリン−メタンスルホンアミドの完全な消費を示した。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流速１．５ｍＬ／分、２５４ｎｍで検出：グラジエント計画：時間（分）０．１％Ｈ₃ＰＯ₄水溶液：ＭｅＣＮ０７０：３０３７０：３０１２２０：８０２５２０：８０滞留時間：スピロインドリン＝７．６分Ｃｂｚ−スピロインドリン−メタンスルホンアミド＝１３．６分混合物を窒素パージし、触媒を、暖かい間に、Ｓｏｌｋａ−ｆｌｏｃ^TMを通して濾過することにより除去した。触媒をＴＨＦ４Ｌおよびメタノール２Ｌで洗った。淡黄色濾液を２５℃より低温で１０ミリバール下に、濃縮して濃厚な油状物を得た。ＥｔＯＡｃ１５Ｌ中でゆっくり流し、再度濃縮して乾燥させることにより溶媒交換を完了した。残さを固化して硬い淡白色塊を得た。メタノール（１．５Ｌ）を添加し、混合物を７０℃に過熱して均質溶液を得た。溶液を７０℃に維持しつつ、ＥｔＯＡｃ１０．５Ｌを２０℃で添加した。温度は４０℃に低下し、混合物は均質さを維持した。次の実験は、ＭｅＯＨ−ＴＨＦ濾液をＭｅＯＨに溶媒交換し、所望の容量に濃縮し、次にＥｔＯＡｃを添加することがより都合良いことを示した。これは、ＥｔＯＡｃ溶液の濃縮時に残さの固化を避ける。ほぼ等しい容量の窒素で希釈した塩化水素を溶液に通した。温度は１５分かかって６０℃に上昇し、塩酸塩の白色沈殿物が形成された。窒素で塩酸を希釈することは反応混合物を逆に吸収することのみを回避するが、必要ないかもしれない。混合物を氷浴内で冷却し、１時間塩化水素を添加した。温度は徐々に２０℃に下がった。懸濁液を、温度を１０℃に下げて、２時間放置した。結晶性生成物を濾過により単離し、フィルターケーキをＥｔＯＡｃ３Ｌで洗った。それを減圧炉内において３５℃で乾燥して表記生成物１ａの１．１８ｋｇ（８６％）を、ＨＰＬＣ分析による純度が９９．５免疫％より大きな淡白色結晶性固体として得た。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流速１．５ｍＬ／分、２３０ｎｍで検出；アイソクラティックＭｅＣＮ３５％、０．１％酢酸アンモニウム水溶液６５％。滞留時間：１ａ＝５．４分。実施例１２スピロインドリン−メタンスルホンアミド（遊離塩基形熊）（１ｂ）化合物１ｂ（遊離塩基）４．６７ｇを含むＣｂｚ−水素化分解からの濾液２５０ｍＬを約１０ｍＬに濃縮した。残さをＥｔＯＡｃ２０ｍＬに溶解し、溶液を約１０ｍＬに再度濃縮した。これをもう一度繰り返し、残さにＥｔＯＡｃ１０ｍＬを添加した。結晶性沈殿が形成し始めた。ＮＴＢＥ（２０ｍＬ）を一部分に添加した。さらなる結晶性固体が沈殿したが、上澄みは、静置時に沈殿しない実質量の溶解生成物を、なお含んでいた。ヘキサン（７０ｍＬ）を、激しく撹拌しつつ、混合物に２時間かかって滴下した。アミンが油状物として出てくるのを避けるためにヘキサンをゆっくり添加することが必要である。撹拌混合物を１時間放置し、濾過した。フィルターケーキを１：１ＭＴＢＥ− ヘキサンの２０ｍＬで洗い、次にヘキサン２０ｍＬで洗った。生成物を窒素流下に乾燥して１ｂの遊離アミン３．８６ｇ（８２％）を、純度が９９．５面積％より大きな淡白色結晶性固体として得た。ＨＰＬＣ条件：２５ｃｍデュポンＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流速１．５ｍＬ／分、２３０ｎｍで検出；アイソクラティックＭｅＣＮ３５％、０．１％酢酸アンモニウム水溶液６５％。滞留時間：１ｂ＝５．４分実施例１３Ａスピロインドリン−メタンスルホンアミド（遊離塩基形態）（１ｂ）材料：ＣＢＺ−スピロインドリン−スルホンアミド（１）８３３．５ｇ（２．０８ｍｏｌ）Ｐｄ（ＯＨ）₂／Ｃ（Ｐｄ（ＯＨ）₂が２０重量％）１２４．５（１５％）ＴＨＦ６．５ＬＭｅＯＨ１９．５ＬＮＨ₄ＯＨ（濃）６０ｍＬ装置の制約のために水素化を３回行った：この手順は単一操作で示す。ＣＢＺスピロインドリンスルホンアミド１をＴＨＦ（６．５Ｌ、ＫＦ＝５３μｇ／μＬ）に溶解し、次にＭｅＯＨ（ＫＦ＝１８μｇ／ｍＬ、４Ｌ）を添加し、続いて触媒を添加し、スラリーを５ガロンのオートクレーブに移した。ＭｅＯＨの残り（２．５Ｌ）を、濯ぎのために用いた。混合物を５０ｐｓｉにて４０℃で２４時間加熱した。触媒負荷および反応時間は、出発材料１の純度の関数である。この材料は、１５％以上の触媒および長い反応時間を要求する独自のものである。スピノインドリンの純粋なバッチは、５％の触媒と４〜６時間の反応時間しか必要としなかった。完了（ＬＣにより化合物１が０．１Ａ％より少ない）時に、混合物をＳｏｌｋａ−Ｆｌｏｃ^TMを通して濾過し、ＮＨ₄ＯＨ（０．５％、６０ｍＬ）を含むＭｅＯＨ（１３Ｌ）で炭素ケーキを洗った。併せた濾過液（アッセイはスピロインドリンアミン１ｂ１５８７ｇを示す）を減圧下に濃縮し、得られる固体を４０Ｌ（トルエン：ＴＨＦ（３：１））と１８Ｌ（０．５ＮＮａＯＨ）とに分けた。層は簡単に分離されるが、水層において多量の沈殿を見ることができた。水性懸濁液を、ＣＨ₂Ｃｌ₂（１５Ｌ）で抽出した。水性および有機層をゆっくり分離した。ＣＨ₂Ｃｌ₂添加の前に、ＴＨＦを層の飽和に充分なＮａＣｌと共に水層に添加した。しかしながら、生成物は溶解されずＣＨ₂Ｃｌ₂の使用を必要とした。トルエン、ＴＨＦおよびＣＨ₂Ｃｌ₂の層を併せて、バッチ式濃縮器において濃縮した。残さを、ＣＨ₃ＣＮの７Ｌでフラッシングした。最後に、ＣＨ₃ＣＮ１０Ｌを添加し、溶液を窒素雰囲気下に一晩放置した。実施例１３Ｂスピロインドリン−メタンスルホンアミド（遊離塩基形態）（１ｂ）材料：ＣＢＺ−スピロインドリン−スルホンアミド（１）３ｋｇ（７．４９ｍｏｌ）ＤａｒｃｏＧ−６０６００ｇ酢酸エチル３６Ｌ無水エタノール１８９Ｌ１０％Ｐｄ／Ｃ４５０ｇアンモニア溶液５００ｍｌＳｏｌｋａＦｌｏｃ^TM ２．５ｋｇ酢酸イソプロピル６５ＬＣＢＺ−スピロインドリン（１）（１ｋｇ）およびＤａｒｃｏＧ−６０（２００ｇ）を酢酸エチル（９Ｌ）中に含む混合物を撹拌し、窒素雰囲気下に６０〜６５℃で８時間加熱したＤａｒｃｏを６０〜６５℃で濾過することにより除去し、固体を熱い酢酸エチル（３Ｌ）で洗い、濾液および洗浄液を併せた。ＬＣ重量／重量アッセイで、Ｄａｒｃｏに付着した損失は無視できることを確認した。酢酸エチル溶液を、２０ＬのＢｕｃｈｉ装置を用いて減圧下に蒸発して乾燥させ、次に無水エタノール（２×５Ｌ）でフラッシングした。この物質を、次に、６５〜７０℃に暖めた無水エタノール（８Ｌ）中でスラリー化し、２０Ｌのオートクレーブ内に置いた。バッチを無水エタノール（１Ｌ）で濯いだ。次に、無水エタノール（７５０ｍＬ）中に木炭担持１０％パラジウム（７５ｇ、７．５重量％）を含むスラリーをオートクレーブに添加し、さらなる無水エタノール（２５０ｍＬ）で濯いだ。バッチを、４０ｐｓｉ水素圧下、６５℃で激しく撹拌しつつ、３時間水素化し、第２の木炭担持１０％パラジウム（７５ｇ）を添加し、バッチをさらに２時間水素化し、一晩封止した。バッチを（なお、６０〜６５℃の熱い状態で）、２０ＬのＢｕｃｈｉ装置に移し、減圧下に脱気して、無水エタノール（合計１８Ｌ）を「供給および除去」することにより蟻酸を除去した。この手順を２回以上繰り返し、三つのバッチを１０ガロンライニング容器内で合わせ、併せたバッチを、無水エタノール（２×１０Ｌ）を添加および蒸留（減圧下）することにより再び脱気した。Ｓｏｌｋａｆｌｏｃ^TM（０．５ｋｇ）をバッチに添加し、エタノール（１０Ｌ）で濯いだ。エストレラ（Ｅｓｔｒｅｌｌａ）フィルターに、Ｓｏｌｋａｆｌｏｃ^TM（２ｋｇ）をエタノール（２０Ｌ）中スラリーとして負荷した。得られる混合物を６０〜６５℃に暖め、次にこの温度で熱フィルターを介してポンプにより二つの重さを測ったステンレススチールビンに送った。最初の容器、フィルター、ポンプおよびライニングはアンモニア水溶液（５００ｍＬ）を無水エタノール（２５Ｌ）中に含む熱い（６０〜６５℃ ）混合物で濯いだ。濾液および洗浄液を二つのステンレススチールビン内で併せた。次に、バッチを、１０ミクロンカートリッジを含むインラインフィルターを用いて容器に移し、次に、減圧下に低容量（〜１５Ｌ）に濃縮した。バッチ容量を約１５Ｌに維持しつつ、酢酸イソプロピルのバッチ容量×３（合計４５Ｌ）の「供給および除去」により、エタノールを酢酸イソプロピルで置き換えた。溶媒交換は、完了したときに、ＧＣ測定で１％より少ない残留エタノールを含んだ。次に、バッチを、酢酸イソプロピル（２０Ｌ）の添加により約３３Ｌに希釈し、このスピロインドリン−アミン１ｂ（ＬＣ分析で１．８５５ｋｇ）の酢酸イソプロピル中溶液を次のプロセスの工程に用いた。実施例１４ＡＢｏｃ−Ｏ−ベンジルセリンスピロインドリン（１１）材料：スピロインドリン−アミン（１ｂ）１５８７ｇ（５．９６６ｍｏｌ）アミノ酸（１０）１９３８ｇ（６．５６３ｍｏｌ）ＤＣＣ１３３４．５ｇ（６．５６３ｍｏｌ）ＨＯＢＴ８４４ｇ（６．５６３ｍｏｌ）ＣＨ₃ＣＮ２５Ｌ０．５ＮＮａＯＨ１８Ｌ０．５ＮＨＣｌ１８Ｌ飽和ＮａＨＣＯ₃ １８ＬｉＰｒＯＡｃ２８ＬＣＨ₃ＣＮまたはｉＰｒＯＡｃ：Ｈ₂Ｏ（２５Ｌ）中にスピロインドリン−アミン１ｂを含む混合液を、窒素雰囲気中にて、固体としてのＨＯＢＴ（８８４ｇ；１．１当量）、溶融物（６０℃の熱い水中で約１時間加熱）としてのＤＣＣ（１３３４．５ｇ、１．１当量）および固体としてのアミノ酸１０（１９３８ｇ）で処理した。混合物を３時間撹拌し、その時点にＤＣＵが大量沈殿し、ＬＣ分析は約０．５Ａ％のアミン１ｂが残っていることを示した。ＩＰＡｃ（９Ｌ）を添加し、スラリーをＳｏｌｋａＦｌｏｃ^TMを通して濾過し、ケーキをＩＰＡｃ（１９Ｌ）で洗った。併せた有機溶液を、０．５ＮのＮａＯＨ（１８Ｌ）、０．５ＮのＨＣｌ（１８Ｌ）および飽和ＮａＨＣＯ₃（１８Ｌ）で次々と洗った。この時点で最終的に水洗することにより乳濁液が形成され、除去した。有機層を減圧下に濃縮し、残さをＭｅＯＨまたはＥｔＯＨ（最終容量１０Ｌ）に溶解した。アッセイ収率は３０２６ｇ（８９％）であった。カルボニルジイミダゾールのような別のペプチドカップリング剤の使用、または炭酸ｓｅｃ−ブチルのような混合無水物の生成により、１１および／または１４は低収率となり、前者の化合物の場合はエピマー化の程度が高かった。他のペプチドカップリング剤は使用できない程高価である。実施例１４ＢＢｏｃ−Ｏ−ベンジルセリンスピロインドリン（１１）材料：スピロインドリン−アミン（１ｂ）１．８５５ｋｇ（６．９６ｍｏｌ）酢酸イソプロピル２９Ｌジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）１．５８ｋｇ（７．６５ｍｏｌ）１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）１．０３ｋｇ（７．６２ｍｏｌ）Ｎ−Ｂｏｃ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−セリン２．２６ｋｇ（７．６５ｍｏｌ）１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液２６Ｌ０．５Ｍ塩酸水溶液２６Ｌ飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２６Ｌ無水エタノール５０Ｌ反応容器内において酢酸イソプロピル（３３Ｌ）中にスピロインドリン−アミン１ｂ（１．８５５ｋｇ）を含む溶液に、撹拌下、水（２０Ｌ）を添加した。次に、以下の化学薬品を、窒素雰囲気下、室温で次々と添加した。ＤＣＣ（１．５８ｋｇ、１．１当量）、ＨＯＢｔ（１．０３ｋｇ、１．１当量）および最後にＮ−Ｂｏｃ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−セリン（２．２６ｋｇ、１．１当量）。試薬を酢酸イソプロピル（７Ｌ）中で濯いだ。バッチを、窒素雰囲気下、室温で５時間攪拌し、その時点にＬＣにより生成物／出発材料の比が９９．４／０．６であることが示された。次に混合物を、布と厚紙のみを用いるエストレラフィルターを通して濾過し、ポンプを用いて別の容器に送った。送付容器を酢酸イソプロピル（２２Ｌ）で濯ぎ、これを用いてフィルター、ポンプおよびラインを濯ぎ受器内に送り込んだ。容器中の２相混合物を１０分間攪拌し、次に１５分間沈降させた。下側の水層を分離し、有機溶液を室温で一晩放置した。翌日、有機溶液を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２６Ｌ）および０．５Ｍ塩酸水溶液（２６Ｌ）で洗い、最後に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗った。ＬＣ分析によると、アッセイ収量は３．７８７ｋｇであり、出発材料であるＣＢＺ− スピロインドリン（１）の７．４９モル（３ｋｇ）から全収率で９３％であった。バッチを減圧下（内部温度＝１３〜１５℃、ジャケット温度＝４０℃、減圧＝２９’’）に濃縮して容量を下げ（約１５Ｌ）、容量を約１５Ｌに維持しつつエタノール（５０Ｌ）を「供給および除去」させることにより溶媒をエタノールに換えた。ＧＣは１％より少ない酢酸イソプロピルが残っていることを示した。この溶液を次のプロセス工程で用いた。実施例１５ＡＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（遊離塩基形態）（１２）材料：Ｂｏｃ−Ｏ−ベンジルセリンスピロインドリン（１１）３０２６ｇ（５．５７ｍｏｌ）メタンスルホン酸（ＭｓＯＨ）１．１６Ｌ（１７．９ｍｏｌ）ＭｅＯＨ１０ＬｉＰｒＯＡｃ２４Ｌ０．５ＮＮａＯＨ３５ＬＭｅＯＨ（ＥｔＯＨ）１０Ｌ中のＢｏｃ−Ｏ−ベンジルセリンスピロインドリン１１を、約３０〜４０分かかって添加した純粋ＭｓＯＨ（１．１６Ｌ）で処理した（初期温度１６℃、最終温度２８℃）。暗赤色溶液を窒素雰囲気下、一晩放置した。次に、混合物をポンプにより、ｉＰｒＯＡｃ２４Ｌおよび０．５ＮＮａＯＨ３５Ｌを含む１００Ｌ抽出器に送った。水層のｐＨは７であった。ｐＨが１０．５以上になるまでＮａＯＨ（６Ｍ）を添加した。ｐＨが増加すると、すると、色は赤から黄色に変化した。層を分離し、有機層（２４Ｌ）はＮＭＲによりｉＰｒＯＡｃ中にＭｅＯＨを１３モル％（５容量％）含むことが示された。ＬＣアッセイでは収量２．４８ｋｇが示された。実施例１５ＢＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（遊離塩基形態）（１２）材料：Ｂｏｃ−Ｏ−ベンジルセリンスピロインドリン（１１）３．７８７ｋｇ（６．９６ｍｏｌ）メタンスルホン酸２．００６ｋｇ（２０．８７ｍｏｌ）酢酸イソプロピル３８Ｌ１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１６Ｌ５０％水酸化ナトリウム水溶液１．６Ｌ反応容器内中エタノール（合計容量約１５Ｌ）中にＢｏｃ−Ｏ−ベンジルセリンスピロインドリン（１１）（３．７８７ｋｇ）を含む溶液に、撹拌下、メタンスルホン酸（２．００６ｋｇ、１．３５５Ｌ、約３当量）を添加した。バッチを３５〜４０℃に暖めた。７時間後、ＬＣは出発材料の不存在を示し、反応液を一晩室温に冷却した。次の日、水（４４Ｌ）を撹拌下にバッチに添加した。バッチを５℃まで冷却し、３０分間撹拌し、次に、インラインフィルター（１０μカートリッジを負荷）を通して濾過してビン内に入れた。次に、バッチを容器に逆に吸い入れた。濯ぎ水（１０Ｌ）を用いて容器を濯ぎ、ビン内に入れ、次にこれを用いて容器に濯ぎ戻した。酢酸イソプロピル（３８Ｌ）を添加し、続いて１ｍＬ水酸化ナトリウム水溶液（１６Ｌ）を添加した。バッチを１０〜１５℃に冷却し、下側水層のｐＨは約７であると確認され、５０％水酸化ナトリウム水溶液（１．６Ｌ）を添加した（ｐＨ＞１０）。バッチを１０〜１５℃で２５分間撹拌し、次に、１０〜１５分間沈殿させた。下側水層を分離した（７８．１ｋｇ）。ＬＣアッセイは、水性液体中に化合物１２が２８．４ｇ（理論値の０．８５％）含まれることを示した。有機溶液の容量＝５１Ｌ。ＬＣアッセイは、ＣＢＺ−スピロインドリンスルホンアミド（１）の３ｋｇ（７．４９モル）からの全収率９２％である３．０５７ｋｇを示した。この溶液を次の工程に用いた。実施例１６ＡＢｏｃ−アミノイソブチリルＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（１４）材料：スピロインドリンアミン（１２）２４８１ｇ（５．５７ｍｏｌ）アミノ酸ペプチド（１３）１２４７．１ｇ（６．１６ｍｏｌ）ＤＣＣ１２６６．７ｇ（６．１６ｍｏｌ）ＨＯＢＴ８２７ｇ（６．１６ｍｏｌ）ＩＰＡｃ５２ＬＨ₂Ｏ３７Ｌ０．５ＮＮａＯＨ３６Ｌ０．５ＮＨＣｌ３６Ｌ飽和ＮａＨＣＯ₃ ３６ＬＩＰＡｃ中にアミン１２を含む溶液を、ＩＰＡｃで合計容量３９Ｌになるように希釈し、水３７Ｌを添加した。二相混合物を、窒素雰囲気下、周囲温度で、固体としてのＨＯＢＴ（８２７ｇ）、溶融物としてのＤＣＣ（１２６６．７ｇ）およびアミノ酸１３で次々と処理した。反応混合物を１時間撹拌し、その時点で、ＬＣ分析は出発材料１２の消失を示した（＜０．３Ａ％）。混合物を、ＳｏｌｋａＦｌｏｃ^TMを通して濾過して、固体をＩＰＡｃ１３Ｌで洗った。材料を、この時点で二相混合物として一晩貯蔵してよい。混合物を１００Ｌ反応器に移し、水層を分離し、有機相を、０．５ＮＮａＯＨ３６Ｌ、０．５ＮＨＣｌおよび飽和ＮａＨＣＯ₃で順次洗った。アッセイ収量は３１６０ｇであった（スピロインドリンから８１％±５％容量測定誤差）。溶液を小さい容量に濃縮し、エタノール（２×４Ｌ）でフラッシングした。要すれば、中間化合物１４を水を添加することにより単離して晶出することができる。カルボニルジイミダゾールのような別のペプチドカップリング剤の使用、または炭酸ｓｅｃ−ブチルのような混合無水物の形成により、化合物１４を低収率で高いエピマー化度で得た。他のペプチドカップリング剤は使用できない程高価である。実施例１６ＢＢｏｃ−アミノイソブチリルＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（１４）材料：スピロインドリンアミン（１２）３．０５７ｋｇ（６．８９ｍｏｌ）ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）１．５６ｋｇ（７．５６ｍｏｌ）１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）１．０２ｋｇ（７．５５ｍｏｌ）Ｂｏｃ−２−アミノイソ酪酸（１３）１．５４ｋｇ（７．５８ｍｏｌ）酢酸イソプロピル３２Ｌ１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液３８Ｌ０．５Ｍ塩酸水溶液３８Ｌ飽和炭酸水素ナトリウム水溶液３８Ｌ無水エタノール４５Ｌ反応溶液中酢酸イソプロピル（合計容量約５１Ｌ）中にスピロインドリンアミン１２（３．０５７ｋｇ）を含む溶液に、撹拌下、窒素雰囲気下に室温で水（４９Ｌ）を添加した。次に、以下の化学薬品を順次添加した。ＤＣＣ（１．５６ｋｇ、約１．１当量）、ＨＯＢｔ（１．０２ｋｇ、約１．１当量）および最後にＮ −Ｂｏｃ−２−アミノイソ酪酸１３（１．５４ｋｇ）約１．１当量）。混合物を室温で激しく２時間撹拌し、その時点でＬＣによると反応は完了した。混合物を、ポンプを用いてエストレラフィルターを通して濾過してもう一つの容器に移した。酢酸イソプロピル（２２Ｌ）を用いて容器、フィルター、ポンプおよびラインを受器に濯ぎ入れた。次に、２相混合物を５分間撹拌し、層を分離させた。下側水層を問題なく分離した（水性液体＝５１．１ｋｇ）。次に、有機溶液を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（３８Ｌ）、０．５Ｍ塩酸水溶液（３８Ｌ）および最後に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３８Ｌ）で問題なく洗った。次に、有機溶液を、ポンプを用いてインラインフィルター（１０μカートリッジを含む）を通してもう一つの容器に移し、溶媒をエタノールに換えた。容器を酢酸イソプロピル（１０Ｌ）で濯ぎ、これを用いて、ポンプ、フィルター、およびラインを受器に濯ぎ入れた。濾液および洗浄液を併せた。合計容量＝７５Ｌ（ディップスティックによる）。ＬＣアッセイは、Ｂｏｃ−アミノイソブチリルＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（１４）の収量４．３９５ｋｇを示した、すなわち、出発材料であるＣＢＺ−スピロインドリンスルホンアミド（１）の７．４９モルからの全収率で９３％であった。バッチを減圧下に濃縮して容量を下げ（約１５Ｌ）、無水エタノール（合計４５Ｌ）を「供給および除去」させることにより溶媒をエタノールに換えた。溶媒交換の最後に、ＧＣは１％より少ない酢酸イソプロピルが残っていることを示した。化合物１４を４．３９５ｋｇ含むこの溶液（２５Ｌ）を次の工程で用いた。要すれば、中間体化合物１４を水を添加することにより単離して晶出することができる。実施例１７ＡアミノイソブチリルＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（１５）材料：Ｂｏｃスピロインドリン（１４）３１６０ｇ（５．０３ｍｏｌ）メタンスルホン酸（ＭｅＯＨ）９７９ｍＬ（１５．１ｍｏｌ）ＥｔＯＨ６．２ＬＨ₂Ｏ３０Ｌ１ＮＮａＯＨ１１ＬＥｔＯＡｃ２６ＬＤａｒｃｏ６０活性炭１ｋｇＢｏｃスピロインドリン１４をＥｔＯＨ６．２Ｌに溶解し、ＭｓＯＨ（９７９ｍＬ）で処理した。温度は２０から３０℃に上昇し、反応を一晩進行させた。２０℃で１２時間後、なお、１５Ａ％の出発材料が残っており、混合物を３５℃で６時間加熱した。終了時（化合物１４が０．１Ａ％を下回る）に反応液を２０℃ に冷却し、水３０Ｌを添加し、溶液をポリプロピレンフィルターを用いてガラス漏斗を通して濾過することにより残留ＤＣＵを濾去した。混合物を１００抽出器に移し、ＥｔＯＡｃ２６Ｌを添加した。水層を冷却した１ＮＮａＯＨ（１１Ｌ）および５０％ＮａＯＨ１Ｌを添加することにより塩基性化した。温度を１４℃ より低く維持するために氷の添加が必要であった。高い温度により激しい乳濁の問題が生じた。有機層を、ＫＦが１０００μｇ／ｍＬより低くなるまで５０℃にてＨｇ約２１ ’’で蒸留した。より低いＫＦにより、より効率的な炭素処理および塩形成工程におけるより優れた回収が得られる。７００ｇスケールで１６０μｇ／ｍＬのＫＦが達成された。溶液を酢酸エチルで合計容量３１Ｌ(ＬＣアッセイにより２.４０ｋｇ)になるように希釈した。活性炭（ＤａｒｃｏＧ−６０）を添加し、混合物を２４時間撹拌した。混合物をＳｏｌｋａＦｌｏｃ^TMを通して濾過し、フィルターケーキを酢酸エチル（１６Ｌ）で洗った。アッセイにより２．３４ｋｇの収量が認められた。実施例１７ＢアミノイソブチリルＯ−ベンジルセリンスピロインドリン（１５）材料：Ｂｏｃスピロインドリン（１４）４．３９５ｋｇ（６．９９ｍｏｌ）メタンスルホン酸２．０１７ｋｇ（２０．９９ｍｏｌ）酢酸エチル１８５Ｌ１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液１６Ｌ５０％水酸化ナトリウム水溶液２．６ＬＤａｒｃｏＧ−６０９００ｇＳｏｌｋａＦｌｏｃ^TM ２．５ｋｇ反応容器中エタノール（合計容量約２５Ｌ）をＢｏｃスピロインドリン１４（４．３９５ｋｇ）中に含む溶液に、撹拌下、メタンスルホン酸（２．０１７ｋｇ、１．３６Ｌ、約３当量）を室温で添加した。バッチを３５〜４０℃に暖め、一晩攪拌した。次の日、バッチは約１．１Ａ％の出発材料を含み、それで反応をさらに４時間続け、その時、ＬＣは生成物／出発材料の比を９９．６／０．４であった。バッチを減圧下に約１５Ｌに濃縮し、次に、水（４４Ｌ）で希釈した。バッチを５℃に冷却し、３０分間攪拌し、次に、ポンプを用いてＳｐａｒｋｌｅｒインラインフィルター（１０μカートリッジを含む）を通して濾過してもう一つの容器に送って少量の残留ＤＣＵを除去した。容器、ポンプ、フィルターおよびラインを水（１０Ｌ）で濯ぎ、これを容器に添加した。容器に酢酸エチル（３６Ｌ）を添加し、撹拌した混合物を１０℃に冷却した。冷たい（５〜１０℃）１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１６Ｌ）と冷たい（５〜１０℃）５０％水酸化ナトリウム水溶液（２．６Ｌ）からなる溶液を１０℃で添加し、温度は１４℃に上昇した。得られる混合物を１４ ℃より低い温度で１５分間攪拌し、次に下側水層を分離した。バッチを減圧下に約２０Ｌの容量に濃縮し、次に酢酸エチル（３５Ｌ）とエタノール（５Ｌ）との混合物を、容量を約２０Ｌに維持しつつ供給した。この蒸留の最後に、ＫＦは９１６０ｍｇｍｌ^-1であった。バッチの溶媒を、酢酸エチル（合計４０Ｌ）を「供給および除去」することにより酢酸エチルに換えた。この蒸留の終了時に、ＫＦは４４６ｍｇｍｌ^-1であった。バッチを酢酸エチル（１０Ｌ）で希釈した。ＤａｒｃｏＧ−６０（９００ｇ）を濁った混合物に添加した。これを酢酸エチル（６Ｌ）で濯いだ。この混合物を室温で一晩撹拌した。次の日、ＳｌｏｋａＦｌｏｃ^TM（０．５ｋｇ）を、容器内において撹拌下にバッチに添加し、次にＳｌｏｋａＦｌｏｃ^TM（２．０ｋｇ）を、少量の酢酸エチル中において撹拌し、エストレラフィルターに負荷した。過剰の溶媒を、１０μカートリッジを含むＳｐａｒｋｌｅｒインラインフィルターを通してポンプにより送り出した。スラリーをポンプを用いて容器からフィルターを介して送り、次にもう一つのフィルターを通して２×４０Ｌのステンレススチール容器に送った。目でみて、液体は透明で汚れがなかった。容器を酢酸エチル（２２Ｌ）で濯ぎ、これを用いて先に概略した経路を通してステンレススチール缶に送り込んだ。両方の缶の内容物を反応容器に送り、溶液を完全に混合した。バッチ（５８Ｌ）はＫＦが２９５０ｍｇｍｌ^-1であり、そのため減圧下に２０〜２５Ｌの容量に濃縮した。バッチを、酢酸エチル（２５Ｌ）を添加することにより容量４６Ｌ（ディップスティックによる）に希釈した。ＫＦは３６３ｍｇｍｌ^-1であった。バッチを酢酸エチル（１７Ｌ）の添加により容量６２Ｌに希釈し、プロセスの最終工程に用いた。実施例１８Ａスピロ[３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン]−１’−イル）カルボニル] −２−（フェニルメチル−オキシ）エチル]−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート（１６）材料：アミン（１５）２３４０ｇ（４．４３ｍｏｌ）メタンスルホン酸（ＭｓＯＨ）３１６ｍＬ（４．８８ｍｏｌ）ＥｔＯＡｃ６０ＬＥｔＯＨ４．８ＬＥｔＯＡｃ中の８％ＥｔＯＨ２０Ｌ先の工程からの化合物１５の溶液の容量を酢酸エチルで６０Ｌに調節し、ＥｔＯＨ（４．８Ｌ）を添加した。ＭｓＯＨ（３１６ｍＬ）を４５℃でＥｔＯＡｃ３Ｌに添加した。深赤色均質溶液に表記化合物形態Ｉの種材料４９６ｇを添加した（遊離アミンの重量に基いて１０％種材料）。温度が約４８℃に上昇し、反応液を５２℃で１．５時間放置した。分析は、表記化合物（形態Ｉ）への完全な変換を示した。（１０％より少ないと、種材料のより長い放置（３時間より長い）が必要である）。スラリーを一晩２０℃に冷却し、窒素雰囲気下に遠心分離により濾過した。ケーキをＥｔＯＡｃ中８％ＥｔＯＨ２０Ｌで洗った。湿潤結晶は非常に吸湿性であるので、濾過中に窒素は必須である。バッチを減圧下に３５℃で乾燥して表記化合物（形態Ｉ）２．７ｋｇ（５６％全収率）（９９．９Ａ％純度；エナンチオマー０．１％未満）を得た。前述のようなＭｓＯＨの添加により、ＥｔＯＡｃ−ＥｔＯＨ中に塩が形成され、塩の初期溶液（５５℃）を４５℃に冷却しても、形態ＩＩから形態Ｉへ変換される。その温度で結晶が現れ始め、スラリーは時間と共に濃厚になる。次に温度を５１℃に上昇させ、スラリーを一晩放置する。化合物１６の形態Ｉへの完全な変換が期待されるはずである。この手順は、化合物１６の形態Ｉの種結晶の調製のために用いることもできる。実施例１８Ｂスピロ[３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン]−１’−イル）カルボニル] −２−（フェニルメチル−オキシ）エチル]−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドメタンスルホネート（１６）材料：アミン（１５）３．１ｋｇ（５．８６ｍｏｌ）メタンスルホン酸６２０ｇ（６．４５ｍｏｌ）酢酸エチル３７Ｌ無水エタノール８．７Ｌスピロ[３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン]−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２ −メチルプロパンアミドメタンスルホネート（形態Ｉ）７０ｇ（０．１１ｍｏｌ）反応容器中酢酸エチル（合計容量約６２Ｌ）中にアミン（１５）（３．１ｋｇ）を含む溶液に無水エタノール（６．４Ｌ）を添加した。バッチを５０℃に暖め、酢酸エチル（１１Ｌ）中にメタンスルホン酸（６２０ｇ、４１２ｍｌ、１．１当量）を含む溶液を５０〜５４℃で約５分かかって添加した。バッチにスピロ［３Ｈ−インドール−３，４’−ピペルジン］−１’−イル）−カルボニル］−２ −（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート（形態Ｉ）（７０ｇ）を種物質として加え、得られるスラリーを撹拌し、窒素雰囲気下に５５℃で一晩加熱した。翌日、スラリーを１５〜２０℃に冷却し、２時間維持し、次に窒素雰囲気下に５０ｃｍポリプロピレンフィルターに滴下した。固体生成物を酢酸エチル（２６Ｌ）中に無水エタノール（２．３Ｌ）を含む混合液で洗った。白色の固体生成物をかき出し、Ａｐｅｘ炉内において減圧下３５℃で適当な時間（約２日）乾燥した。乾燥されたスピロ［３Ｈ−インドール−３，４’ −ピペルジン］−１’−イル）−カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート（３．３５２ｇ）をＪａｃｋｓｏｎ−Ｃｒｏｃｋａｔｔ篩を用いて篩い分けて産物３．３４７ｋｇ（種物質７０ｇを含む：収量＝３．２７７ｇ）を得た。ＨＰＬＣ条件：ＺｏｒｂａｘＲＸ−Ｃ８（４．６ｍｍ×２５ｃｍ）上でのＬＣ滞留時間、λ＝２１０ｍｍ、流速１．５ｍｌ／分化合物１：６０：４０ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（１％Ｈ₃ＰＯ₄）ＲＴ＝５．０分化合物１ｂ：３５：６５ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（０．１ｗ％ＮＨ₄ＯＡｃ）ＲＴ＝６．２分化合物１０：６０：４０ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（０．１Ｈ₃ＰＯ₄）ＲＴ＝２．９分化合物１１：６０：４０ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（０．１％Ｈ₃ＰＯ₄）ＲＴ＝５．４分化合物１２：４０：６０ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ［ｐＨ５．２５ＮａＨ₂ＰＯ₄（水６．９ｇ／Ｌ）（ＮａＯＨでｐＨ調整）］ＲＴ＝５．６分化合物１４：６０：４０％ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ（０．１％Ｈ₃ＰＯ₄）ＲＴ＝４．６５分化合物１５：４０：６０％ＣＨ₃ＣＮ−Ｈ₂Ｏ［ｐＨ＝５．２５ＮａＨ₂ＰＯ₄（水６．９ｇ／Ｌ）］（ＮａＯＨでｐＨ調整）ＲＴ＝４．９分ＺｏｒｂａｘＲＸ−Ｃ８（４．６ｍｍ×２５ｃｍ）上でのＬＣ滞留時間、λ＝２１０ｍｍ、流速１．２ｍｌ／分、カラム温度＝４８℃ 溶媒Ａ＝水中に０．０５％燐酸＋０．０１％トリエチルアミン溶媒Ｂ＝アセトニトリルグラジエント系：滞留時間（分）化合物１２５．２化合物１ｂ８．５化合物１０２０．５化合物１１２６．３化合物１２１４．８化合物１４２５．６化合物１５１５．７実施例１９Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉの調製実施例１８Ａの手順に従って、ＭｓＯＨの添加によりＥｔＯＡｃ−ＥｔＯＨ中に塩を形成し塩の初期溶液（５５℃）を４５℃に冷却して形態１１から形態Ｉへの変換を行うことができる。この温度で結晶が現れ始めるはずであり、スラリーは時間と共に濃厚になるはずである。次に温度を５１℃に上昇させ、スラリーを一晩放置する。形態Ｉへの完全な変換が期待できるはずである。実施例２０Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉの調製Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩのイソプロパノール溶液を、約２５℃で約２〜２４時間撹拌することにより形態ＩＩから形態Ｉへの変換を完了する。実施例２１Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶの調製任意の形態のＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル −スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネート８．４ｇのサンプルを、酢酸エチル２４．８ｍｌ、エタノール１．６ｍｌおよび水１．９５ｍｌの混合液に４２℃で撹拌下に溶解する。溶媒を４０℃の温度で溶液から蒸発させ、得られる個体を乳鉢中で粉砕して微粉末にし、微粉末を約７５％の相対湿度にさらして表記形態ＩＶを得る。実施例２２Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール３，４’−ピペルジン]−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶの調製任意の形態のＮ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル −スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートのサンプルを、酢酸エチル／エタノール／水（２４．８／１．６／１．９５ｖ／ｖ／ｖ）の溶液から再結晶して表記形態ＩＶを形成する。実施例２３Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ −インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−メチルプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＶの調製Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態Ｉを水約２．８重量％を含む酢酸イソプロピル／エタノール（９０：１０ｖ／ｖ）中に含むスラリーを約２５℃で一晩撹拌し、得られた固体を単離した。本発明を特定の態様について記載および説明したが、当業者は、本発明の精神および範囲から離れることなく、手順およびプロトコールの種々の適用、変化、修正、置換、削除または追加を設けることができることを理解する。例えば、前記本発明の化合物を用いて任意の症状について治療される哺乳動物の反応性の変化の結果として、ここに記載の特定の投与量以外の有効投与量を適用することができる。同様に、観察される特定の薬理学的反応は、選択される特定の活性化合物により、または薬学的キャリアが存在するかどうかにより、同様に剤形の種類および用いられる投与モードにより、または依存して、変化してよく、そのような予想される結果の変化および相違は、本発明の目的および実施に従って考慮される。従って、本発明は以下の請求の範囲により定義され、そのような請求項はできるだけ合理的に広く解釈されることが意図されている。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９７年９月１８日【補正内容】請求の範囲１．およそ６．５、１４．７、１６．９、１７．１、１７．９、１９．５、２１．１、２１．７および２２．０°（２シータ）において主反射を有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、形態Ｉとして表される化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’ −ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態。２．示差走査熱量計セルにおいて窒素雰囲気下、１０℃／分の速度で加熱した場合に約１７０℃の外挿された開始温度で溶融して吸熱することを特徴とする請求項１に記載の多形形態。３．イソプロパノール中４．６ｍｇ／ｍｌの溶解性を示す請求項１に記載の多形形態。４．偏光下に複屈折性である請求項１に記載の多形形態。５．およそ１６．０、１６．２、１８．３、２０．１、２１．０および２４．２ °（２シータ）において主反射を有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、形態ＩＶとして表される化合物Ｎ −［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ− インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態。６．示差走査熱量計セルにおいて窒素雰囲気下、１０℃／分の速度で加熱した場合に約４５℃の温度で水損失吸熱し、続いて約１２９℃の外挿された開始温度で吸熱することを特徴とする請求項５に記載の多形形態。７．Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの１モル当たり約３．５モルの水を含む請求項５に記載の多形形態。８．薬学的に許容されるキャリアおよび請求項１の多形形態の有効量を含む薬剤組成物。９．ビスホスホネート化合物と請求項１の多形形態との組み合わせを含んでなる、骨粗鬆症の治療に有用な薬剤組成物。１０．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項９に記載の薬剤組成物。１１．薬学的に許容されるキャリアおよび請求項５の多形形態の有効量を含む薬剤組成物。１２．ビスホスホネート化合物と請求項５の多形形態との組み合わせを含んでなる、骨粗鬆症の治療に有用な薬剤組成物。１３．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項１２に記載の薬剤組成物。【手続補正書】【提出日】１９９８年４月２４日【補正内容】請求の範囲１．およそ６．５、１４．７、１６．９、１７．１、１７．９、１９．５、２１．１、２１．７および２２．０°（２シータ）において主反射を有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、形態Ｉとして表される化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’ −ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態。２．示差走査熱量計セルにおいて窒素雰囲気下、１０℃／分の速度で加熱した場合に約１７０℃の外挿された開始温度で溶融して吸熱することを特徴とする請求項１に記載の多形形態。３．イソプロパノール中４．６ｍｇ／ｍｌの溶解性を示す請求項１に記載の多形形態。４．偏光下に複屈折性である請求項１に記載の多形形態。５．およそ１６．０、１６．２、１８．３、２０．１、２１．０および２４．２ °（２シータ）において主反射を有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、形態ＩＶとして表される化合物Ｎ −［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ− インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態。６．示差走査熱量計セルにおいて窒素雰囲気下、１０℃／分の速度で加熱した場合に約４５℃の温度で水損失吸熱し、続いて約１２９℃の外挿された開始温度で吸熱することを特徴とする請求項５に記載の多形形態。７．Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの１モル当たり約３．５モルの水を含む請求項５に記載の多形形態。８．薬学的に許容されるキャリアおよび請求項１の多形形態の有効量を含む薬剤組成物。９．ビスホスホネート化合物と請求項１の多形形態との組み合わせを含んでなる、骨粗鬆症の治療に有用な薬剤組成物。１０．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項９に記載の薬剤組成物。１１．薬学的に許容されるキャリアおよび請求項５の多形形態の有効量を含む薬剤組成物。１２．ビスホスホネート化合物と請求項５の多形形態との組み合わせを含んでなる、骨粗鬆症の治療に有用な薬剤組成物。１３．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項１２に記載の薬剤組成物。１４．請求項１の多形形態の有効量をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。１５．請求項１の多形形態の有効量およびさらなる成長ホルモン分泌促進剤をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。１６．さらなる成長ホルモン分泌促進剤が、成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ −６；成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−２;成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−１；Ｂ−ＨＴ９２０；成長ホルモン放出因子；成長ホルモン放出因子の類似体；ＩＧＦ −１およびＩＧＦ−２からなる群より選択される請求項１５に記載の方法。１７．請求項１の多形形態の有効量を家畜に投与することを含んでなる、家畜の飼育効率を向上、成長を促進、ミルク生産を増加、および屠殺体の品質を向上させるための方法。１８．請求項１の多形形態の有効量を患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症；異化疾患；抑制されたＴ₄／Ｔ₈細胞比を有する個体におけるものを含む免疫不全；股関節骨折；老齢者における筋骨欠陥；成人または子供における成長ホルモン欠損；肥満；ＡＩＤＳまたはガンのような慢性病による悪液質およびタンパク損失；および大手術、損傷または火傷から回復している患者の治療：からなる群より選択される状態の予防または治療を必要としている患者におけるそのような予防または治療方法。１９．ビスホスホネート化合物と請求項１の多形形態を組み合わせて骨粗鬆症の患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症の治療方法。２０．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項１９に記載の方法。２１．請求項５の多形形態の有効量をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。２２．請求項１の多形形態の有効量およびさらなる成長ホルモン分泌促進剤をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。２３．さらなる成長ホルモン分泌促進剤が、成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ −６；成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−２;成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−１；Ｂ−ＨＴ９２０；成長ホルモン放出因子；成長ホルモン放出因子の類似体；ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２からなる群より選択される請求項２２に記載の方法。２４．請求項５の多形形態の有効量を家畜に投与することを含んでなる、家畜の飼育効率を向上、成長を促進、ミルク生産を増加、および屠殺体の品質を向上させるための方法。２５．請求項５の多形形態の有効量を患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症；異化疾患；抑制されたＴ₄／Ｔ₈細胞比を有する個体におけるものを含む免疫不全；股関節骨折；老齢者における筋骨欠陥；成人または子供における成長ホルモン欠損；肥満；ＡＩＤＳまたはガンのような慢性病による悪液質およびタンパク損失；および大手術、損傷または火傷から回復している患者の治療：からなる群より選択される状態の予防または治療を必要としている患者におけるそのような予防または治療方法。２６．ビスホスホネート化合物と請求項５の多形形態を組み合わせて骨粗鬆症の患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症の治療方法。２７．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項２６に記載の方法。２８．Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２− （フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態１１のイソプロパノール溶液を約２５℃で約２〜２４時間攪拌することを含んでなる、形態Ｉとして表される請求項１の多形形態を調製する方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者デユボスト，デイビツド・シーアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者カウフマン，マイケル・ジエイアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者マツコウリ，ジエイムズ・エイアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者バンドリラ，ジエニフアー・エルアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者バーソロナ，リチヤード・ジエイアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126

Claims

【特許請求の範囲】１．形態Ｉとして表される化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１− メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’− イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ− ２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態。２．示差走査熱量計セルにおいて窒素雰囲気下、１０℃／分の速度で加熱した場合に約１７０℃の外挿された開始温度で溶融して吸熱することを特徴とする請求項１に記載の多形形態。３．およそ６．５、１４．７、１６．９、１７．１、１７．９、１９．５、２１．１、２１．７および２２．０°（２シータ）において主反射を有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする請求項１に記載の多形形態。４．形態ＩＶとして表される化合物Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１ −メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’ −イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ −２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの多形形態。５．示差走査熱量計セルにおいて窒素雰囲気下、１０℃／分の速度で加熱した場合に約４５℃の温度で水損失吸熱し、続いて約１２９℃の外挿された開始温度で吸熱することを特徴とする請求項４に記載の多形形態。６．Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２−（フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの１モル当たり約３．５モルの水を含む請求項４に記載の多形形態。７．およそ１６．０、１６．２、１８．３、２０．１、２１．０および２４．２ °（２シータ）において主反射を有するＸ線粉末回折パターンを特徴とする請求項４に記載の多形形態。８．薬学的に許容されるキャリアおよび請求項１の多形形態の有効量を含む薬剤組成物。９．ビスホスホネート化合物と請求項１の多形形態との組み合わせを含んでなる、骨粗鬆症の治療に有用な薬剤組成物。１０．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項９に記載の薬剤組成物。１１．薬学的に許容されるキャリアおよび請求項４の多形形態の有効量を含む薬剤組成物。１２．ビスホスホネート化合物と請求項４の多形形態との組み合わせを含んでなる、骨粗鬆症の治療に有用な薬剤組成物。１３．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項１２に記載の薬剤組成物。１４．請求項１の多形形態の有効量をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。１５．請求項１の多形形態の有効量およびさらなる成長ホルモン分泌促進剤をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。１６．さらなる成長ホルモン分泌促進剤が、成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ −６；成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−２;成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−１；Ｂ−ＨＴ９２０；成長ホルモン放出因子；成長ホルモン放出因子の類似体；ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２からなる群より選択される請求項１５に記載の方法。１７．請求項１の多形形態の有効量を家畜に投与することを含んでなる、家畜の飼育効率を向上、成長を促進、ミルク生産を増加、および屠殺体の品質を向上させるための方法。１８．請求項１の多形形態の有効量を患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症；異化疾患；抑制されたＴ₄／Ｔ₈細胞比を有する個体におけるものを含む免疫不全；股関節骨折；老齢者における筋骨欠陥；成人または子供における成長ホルモン欠損；肥満；ＡＩＤＳまたはガンのような慢性病による悪液質およびタンパク損失；および大手術、損傷または火傷から回復している患者の治療：からなる群より選択される状態の予防または治療を必要としている患者におけるそのような予防または治療方法。１９．ビスホスホネート化合物と請求項１の多形形態を組み合わせて骨粗鬆症の患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症の治療方法。２０．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項１９に記載の方法。２１．請求項４の多形形態の有効量をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。２２．請求項１の多形形態の有効量およびさらなる成長ホルモン分泌促進剤をヒトまたは動物に投与することを含んでなる、ヒトまたは動物において内因性成長ホルモンのレベルを増加させる方法。２３．さらなる成長ホルモン分泌促進剤が、成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ −６；成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−２;成長ホルモン放出ペプチドＧＨＲＰ−１;Ｂ−ＨＴ９２０；成長ホルモン放出因子；成長ホルモン放出因子の類似体；ＩＧＦ−１およびＩＧＦ−２からなる群より選択される請求項２２に記載の方法。２４．請求項４の多形形態の有効量を家畜に投与することを含んでなる、家畜の飼育効率を向上、成長を促進、ミルク生産を増加、および屠殺体の品質を向上させるための方法。２５．請求項４の多形形態の有効量を患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症；異化疾患；抑制されたＴ₄／Ｔ₈細胞比を有する個体におけるものを含む免疫不全；股関節骨折；老齢者における筋骨欠陥；成人または子供における成長ホルモン欠損；肥満；ＡＩＤＳまたはガンのような慢性病による悪液質およびタンパク損失；および大手術、損傷または火傷から回復している患者の治療：からなる群より選択される状態の予防または治療を必要としている患者におけるそのような予防または治療方法。２６．ビスホスホネート化合物と請求項４の多形形態を組み合わせて骨粗鬆症の患者に投与することを含んでなる、骨粗鬆症の治療方法。２７．ビスホスホネート化合物がアレンドロネートである請求項２６に記載の方法。２８．Ｎ−［１（Ｒ）−［（１，２−ジヒドロ−１−メタンスルホニル−スピロ［３Ｈ−インドール３，４’−ピペルジン］−１’−イル）カルボニル］−２− （フェニルメチル−オキシ）エチル］−２−アミノ−２−ロチメプロパンアミドメタンスルホネートの形態ＩＩのイソプロパノール溶液を約２５℃で約２〜２４時間攪拌することを含んでなる、形態Ｉとして表される請求項１の多形形態を調製する方法。