SK51398A3 - Polymorphic forms of n-[1(r)-[(1,2-dihydro-1- -methanesulfonylspiro[3h-indole-3,4'-piperidin]-1'-yl)carbonyl]- -2-(phenylmethyloxy)ethyl]-2-amino-2-methyl-propanamide- -methanesulfonate, the preparation thereof, pharmaceutical composition containing them and their use - Google Patents
Polymorphic forms of n-[1(r)-[(1,2-dihydro-1- -methanesulfonylspiro[3h-indole-3,4'-piperidin]-1'-yl)carbonyl]- -2-(phenylmethyloxy)ethyl]-2-amino-2-methyl-propanamide- -methanesulfonate, the preparation thereof, pharmaceutical composition containing them and their use Download PDFInfo
- Publication number
- SK51398A3 SK51398A3 SK513-98A SK51398A SK51398A3 SK 51398 A3 SK51398 A3 SK 51398A3 SK 51398 A SK51398 A SK 51398A SK 51398 A3 SK51398 A3 SK 51398A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- ethyl
- amino
- carbonyl
- phenylmethyloxy
- dihydro
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D471/10—Spiro-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
Abstract
Description
Polymorfné formy N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitiePolymorphic forms of N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] 2-amino-2-methyl-propanamide methanesulfonate, process for their preparation, pharmaceutical composition containing them and their use
Oblasť technikyTechnical field
Vynález sa týka polymorfných foriem látok, podporujúcich sekréciu rastového hormónu a použiteľných na výrobu prostriedkov na urýchlenie rastu živočíchov a v rôznych kombináciách aj na ďalšie účely, napríklad na liečenie osteoporózy.The invention relates to polymorphic forms of growth hormone secretagogues useful for the production of agents for accelerating the growth of animals and in various combinations for other purposes, for example for the treatment of osteoporosis.
Doterajší stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION
Rastový hormón, ktorý je vylučovaný hypofýzou, podporuje rast všetkých tkanív v organizme, ktoré sú ešte schopné rastu. Okrem toho je známe, že rastový hormón má nasledujúce základné účinky na metabolické pochody v organizme:Growth hormone, which is secreted by the pituitary gland, promotes the growth of all tissues in the body that are still capable of growth. In addition, growth hormone is known to have the following basic effects on metabolic processes in the body:
1) zvyšuje rýchlosť syntézy bielkovín v bunkách,1) increases the rate of protein synthesis in cells,
2) znižuje rýchlosť využitia uhľohydrátov v bunkách,2) reduces the rate of utilization of carbohydrates in cells,
3) zvyšuje mobilizáciu voľných mastných kyselín a využitie mastných kyselín na získanie energie.3) Increases the mobilization of free fatty acids and the use of fatty acids to obtain energy.
V prípade, že je rastového hormónu nedostatok, môžu vznikať rôzne poruchy, jednou z najzávažnejšou je trpaslíctvo.If growth hormone is deficient, various disorders can arise, one of the most important being dwarf.
Na uvoľnenie rastového hormónu je známy celý rad postupov. Je napríklad možné nepriamo vyvolať uvoľnenie rastového hormónu chemickými látkami, ako je arginín, L-3,4-dihydroxyfenylalanín, L-DOPA, glukagón, vazopresín, alebo je možné vyvolať inzulínom hypoglykémiu, okrem toho zvyšuje uvoľnenie rastového hormónu tiež spánok a telesné cvičenie. Tieto účinky sú nepriamo vyvolané zrejme cez hypotalamus buď znížením sekrécie somastatínu alebo zvýšením sekrécie známeho hormónu GRF, uvoľňujúceho rastový hormón alebo neznámeho hormónu s podobným účinkom.A variety of methods are known for releasing growth hormone. For example, it is possible to indirectly induce growth hormone release by chemicals such as arginine, L-3,4-dihydroxyphenylalanine, L-DOPA, glucagon, vasopressin, or insulin hypoglycemia can be induced by insulin, in addition, growth hormone release also increases sleep and exercise. These effects are indirectly induced via the hypothalamus, either by decreasing the secretion of somastatin or by increasing the secretion of the known hormone GRF, a growth hormone releasing hormone or an unknown hormone with a similar effect.
-2V prípadoch, kedy je žiadúce zvýšiť hladinu rastového hormónu v organizme sa až dosiaľ tento problém zvyčajne rieši podávaním exogénneho rastového hormónu, podávaním GRF alebo iných peptidových látok, stimulujúcich produkciu a/alebo uvoľnenie rastového hormónu. Vo všetkých prípadoch je vzhľadom na peptidovú povahu uvedených látok nutné podávať tieto látky injekčným spôsobom. Počiatočným zdrojom rastového hormónu bola extrakcia hypofýz z mŕtvych tiel. Takto získaný produkt bol veľmi drahý a okrem toho bolo jeho použitie spojené s rizikom prenosu rôznych chorôb. V poslednej dobe je k dispozícii rekombinantný rastový hormón, s použitím ktorého je teraz spojené riziko prenosu chorôb. Ide však stále o veľmi nákladný výrobok, ktorý je nutné podávať injekčné alebo do nosa vo forme spreja. Okrem toho boli vyvinuté ďalšie látky, ktoré podporujú uvoľňovanie endogénneho rastového hormónu.In cases where it is desirable to increase the level of growth hormone in the body, hitherto this problem has usually been solved by administering exogenous growth hormone, by administering GRF or other peptide agents that stimulate the production and / or release of growth hormone. In all cases, due to the peptide nature of the compounds, it is necessary to administer the compounds by injection. The initial source of growth hormone was the extraction of pituitary glands from dead bodies. The product thus obtained was very expensive and, moreover, its use was associated with the risk of transmission of various diseases. Recently, a recombinant growth hormone has been available, with the use of which is now associated with the risk of disease transmission. However, it is still a very expensive product that needs to be injected or sprayed into the nose. In addition, other agents have been developed that promote the release of endogenous growth hormone.
Zvlášť ide o spirozlúčeniny, opísané v US patentovom spise č. 5 536 716, v PCT patentovej prihláške WO 94/13696 a v publikácii Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 7001 až 7005, júl 1995 ako nepeptidové látky, podporujúce uvoľnenie rastového hormónu. Uvedené zlúčeniny majú schopnosť stimulovať uvoľnenie prírodného endogénneho rastového hormónu a je teda možné ich využiť na liečenie stavov, pri ktorých je potrebné stimulovať produkciu alebo sekréciu rastového hormónu, napríklad u ľudí s nedostatkom prírodného rastového hormónu alebo u hospodárskych zvierat, chovaných na mäso alebo na produkciu vlny, kde stimulácia produkcie rastového hormónu vedie k získaniu väčších a produktívnejších hospodárskych zvierat.In particular, they are the spiro compounds described in U.S. Pat. No. 5,536,716, PCT Patent Application WO 94/13696 and Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 7001-7005, July 1995 as non-peptide agents promoting growth hormone release. The compounds have the ability to stimulate the release of natural endogenous growth hormone and can therefore be used to treat conditions in which growth hormone production or secretion needs to be stimulated, e.g. waves where stimulation of growth hormone production leads to the acquisition of larger and more productive livestock.
Z výhodných zlúčenín, opísaných v uvedených publikáciách je možné uviesť napríklad spiro[3H-indol-3,4‘-piperid í n]-1 ‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etylj2-amino-2-metyl-propánamidmetánsulfonát vzorcaPreferred compounds described in the publications include, for example, spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate of formula
-3; -3 ;
US patentový spis č. 5 536 716 a PCT patentová prihláška WO 94/13696 opisujú spôsob výroby uvedenej látky (príklady 18, 19 a 55). Najmä v príklade 55 sa uvádza, že zlúčenina má po prekryštalizovaní zo zmesi etylacetátu, etanolu a vody teplotu topenia 166 až 168 °C. Táto látka bola neskoršie identifikovaná ako jedna z polymorfných foriem označovaná forma II. V Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 7001 až 7005, júl 1995 sa uvádza, že táto látka, izolovaná vo forme monohydrátu má teplotu topenia 168 až 170 °C, avšak uvádza sa len všeobecný postup na výrobu tejto látky a vôbec sa neuvádza, akým spôsobom bola dosiahnutá jej kryštalizácia.U.S. Pat. No. 5,536,716 and PCT Patent Application WO 94/13696 disclose a method for producing said substance (Examples 18, 19 and 55). In particular, Example 55 states that the compound has a melting point of 166-168 ° C after recrystallization from a mixture of ethyl acetate, ethanol and water. This substance was later identified as one of the polymorphic forms referred to as Form II. In Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92, 7001-7005, July 1995, it is reported that this monohydrate-isolated substance has a melting point of 168-170 ° C, but only a general procedure for the preparation of the substance is given and no indication is given as to how it was obtained. crystallization.
Pri výrobe vhodných liekových foriem môžu byť dôležité morfologické formy účinných látok vzhľadom na to, že v prípade, že morfologická forma nie je stála v priebehu klinických skúšok a skúšok na stálosť, nie je možné porovnávať použité látky z rôznych šarží. V prípade výroby farmaceutický účinnej látky na ďalšie použitie je dôležité identifikovať jej morfologickú formu v každej liekovej forme tak, aby bolo možné overiť, ž v každej liekovej forme je prítomná rovnaká forma a rovnaké množstvo účinnej látky. Z týchto dôvodov je najskôr nutné zistiť, či sa účinná látka vyskytuje v jedinej forme alebo v niekoľkých morfologických formách. Okrem toho môžu mať niektoré morfologické formy vyššiu termodynamickú alebo hygroskopickú stálosť a môžu byť vhodnejšie na použitie vo farmaceutických prostriedkoch ako iné formy. Pod pojmom „polymorfná forma“ chemickej zlúčeniny sa rozumie tá istá chemická látka v rôznych kryštalických usporiadaniach.The morphological forms of the active substances may be important in the production of suitable dosage forms, given that, if the morphological form is not stable during clinical and stability studies, it is not possible to compare the substances used from different batches. In the case of the manufacture of a pharmaceutical active substance for further use, it is important to identify its morphological form in each dosage form so that it can be verified that the same form and the same amount of active substance are present in each dosage form. For these reasons, it is first necessary to ascertain whether the active substance is present in a single form or in several morphological forms. In addition, some morphological forms may have higher thermodynamic or hygroscopic stability and may be more suitable for use in pharmaceutical compositions than other forms. The term "polymorphic form" of a chemical compound means the same chemical in different crystalline configurations.
Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION
Podstatu vynálezu tvoria polymorfné formy N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, spôsob výroby týchto polymorfných foriem a farmaceutický prostriedok s obsahom týchto látok.The present invention provides polymorphic forms of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] 2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, a process for the preparation of these polymorphic forms, and a pharmaceutical composition containing them.
Farmaceutické prostriedky obsahujú vyššie uvedenú látku ako svoju účinnú zložku a sú použiteľné v prípade rôznych ochorení. Polymorfné formy podľa vynálezu podporujú vylučovanie rastového hormónu a je teda možné ich použiť uThe pharmaceutical compositions contain the aforementioned substance as its active ingredient and are useful in various diseases. The polymorphic forms of the invention promote the secretion of growth hormone and can therefore be used in the treatment of growth hormone
-4domácich zvierat, chovaných na mäso na podporu rastu a na účinnejší chov, U človeka je možné uvedené formy použiť v prípadoch príliš nízkej sekrécie rastového hormónu a na liečenie chorobných stavov, ktoré môžu byť zlepšené anabolickým pôsobením rastového hormónu.For example, in humans, these forms can be used in cases where growth hormone secretion is too low and to treat disease states that can be ameliorated by the anabolic action of growth hormone.
Polymorfné formy podľa vynálezu majú v porovnaní s inými známymi formami tejto zlúčeniny tú výhodu, že majú vyššiu termodynamickú stálosť a sú teda vhodnejšie na použitie vo farmaceutických prostriedkoch.The polymorphic forms of the invention have the advantage over other known forms of this compound that they have a higher thermodynamic stability and are therefore more suitable for use in pharmaceutical compositions.
N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)-karbonyI]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonát, je možné vyjadriť vzorcomN- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] - 2-Amino-2-methylpropanamide methanesulfonate can be represented by the formula
Ide o látku, podporujúcu sekréciu a uvoľnenie rastového hormónu u človeka a u iných živočíchov. Túto vlastnosť je možné využiť na podporu rastu hospodárskych zvierat, chovaných na mäso a u človeka na liečenie stavov, u ktorých dochádza k zníženiu sekrécie rastového hormónu a tiež na zlepšenie stavov, u ktorých je možné využiť anabolických účinkov rastového hormónu.It is a substance that promotes the secretion and release of growth hormone in humans and other animals. This feature can be used to promote the growth of livestock and meat animals for the treatment of conditions where growth hormone secretion is reduced and also to improve conditions where the anabolic effects of growth hormone can be utilized.
Polymorfné formy, ktoré budú ďalej označované ako forma I, forma II, forma III, forma IV, forma V, forma VI, forma VII, forma VIII, forma IX a forma X majú výhodnejšie vlastnosti v porovnaní s ostatnými kryštalickými formami N-[1-(R)[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-ľ-yl)-karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonát a sú teda vhodnejšie naPolymorphic forms, hereinafter referred to as Form I, Form II, Form III, Form IV, Form V, Form VI, Form VII, Form VIII, Form IX, and Form X, have more favorable properties compared to other crystalline N- [1] forms. - (R) [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -r-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2- methylpropanamide methanesulfonate and are therefore more suitable for
-5použitie vo farmaceutických prostriedkoch. Výhodnou kryštalickou formou na farmaceutické použitie je forma I vzhľadom na svoju termodynamickú stálosť a tie na to, že nie je hygroskopická. Ďalšou výhodnou kryštalickou formou na farmaceutické použitie je forma IV, ktorá je zvlášť vhodná na použitie pri výrobe lisovaných tabliet. Forma IV má vyššiu sypnú hmotnosť ako ostatné formy.- use in pharmaceutical compositions. A preferred crystalline form for pharmaceutical use is Form I because of its thermodynamic stability and that it is not hygroscopic. Another preferred crystalline form for pharmaceutical use is Form IV, which is particularly suitable for use in the manufacture of compressed tablets. Form IV has a higher bulk density than the other forms.
Podstatu vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy I N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, tento postup spočíva v tom, že sa na roztok voľného N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]1 ‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etylj-2-amino-2-metylpropánamid v etylacetáte, obsahujúcom približne 8 % objemových etanolov pôsobí približne 1,1 ekvivalentu kyseliny metánsulfónovej s teplotou približne 50 °C, zmes sa zahreje na teplotu približne 55 °C a potom sa ochladí na približne 45 °C.The present invention also provides a process for the preparation of Form I of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- ( phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, the process consisting in the formation of a solution of free N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4] 1'-piperidin] 1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide in ethyl acetate containing about 8% by volume of ethanol is treated with about 1.1 equivalents of methanesulfonic acid at about 50 ° C, The mixture is heated to about 55 ° C and then cooled to about 45 ° C.
Prípadne je ešte možné potom teplotu zvýšiť na približne 51 °C a na tejto teplote zmes udržovať po dobu 2 až 24 hodín.Alternatively, the temperature can then be raised to about 51 ° C and maintained at this temperature for 2 to 24 hours.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj ďalší spôsob výroby vyššie uvedenej formy I, ktorý spočíva v tom, že sa k roztoku voľného N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘piperidín]-1 ‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidu v etylacetáte s obsahom približne 8 % objemových etanolu pri teplote 50 až 55 °C striedavo pridáva, približne 1,1 ekvivalentu kyseliny metánsulfónovej a forma I N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, pričom poradie pridávania nie je kritické, potom sa zmes zahrieva na približne 55 °C po dobu približne 2 až 15 hodín, potom sa ochladí na približne 25 až 30 °C a pri tejto teplote sa nechá stáť 2 až 3 hodiny.The present invention also provides a further process for the preparation of the above-mentioned Form I, which comprises adding to a solution of free N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indol-3]). 4'piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide in ethyl acetate containing approximately 8% by volume of ethanol at 50 to 55 ° C alternately adds approximately 1, 1 equivalent methanesulfonic acid and Form I N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] 1'-yl) carbonyl] -2- ( phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, wherein the order of addition is not critical, then the mixture is heated to about 55 ° C for about 2 to 15 hours, then cooled to about 25 to 30 ° C and at this temperature Allow to stand for 2 to 3 hours.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj ďalší možný spôsob výroby vyššie uvedenej formy I, ktorý spočíva vtom, že sa mieša roztok formy II N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyl-6oxy)-etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu v izopropanole pri teplote približne 25 °C po dobu 2 až 24 hodín.The invention also provides another possible process for the preparation of the above-mentioned Form I by mixing a solution of Form II N- [1- (R) - [(1,2dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4] 1-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyl-6oxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate in isopropanol at about 25 ° C for 2 to 24 hours.
Súčasť podstaty vynálezu je tiež spôsob výroby formy II N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)-etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa na roztok voľného N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4*-piperidín]-1 ‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidu v etylacetáte, obsahujúcom približne 8 % objemových etanolu pôsobí približne 1,1 ekvivalentom kyseliny metánsulfónovej pri teplote približne 50 °C, potom sa roztok zahreje na približne 55 °C, potom sa ochladí na teplotu miestnosti.The present invention also provides a process for the preparation of Form II of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, which comprises treating a solution of free N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole- 3,4 * -piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide in ethyl acetate containing about 8% by volume of ethanol is treated with about 1.1 equivalents of methanesulfonic acid at temperature about 50 ° C, then the solution is warmed to about 55 ° C, then cooled to room temperature.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy IV N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa rozpustí N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonát v niektorej z morfologických foriem v roztoku v zmesi etanolu s vody, s výhodou v objemovom pomere 25:75, rozpúšťadlo sa z roztoku odparí, s výhodou pri teplote 40 °C, tuhý podiel sa zomelie na jemný prášok a získaný tuhý prášok sa nechá stáť pri relatívnej vlhkosti približne 75 %. Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj ďalší možný spôsob výroby formy IV N-[1(R)-[(1,2-d ihyd ro-1 -metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-1 ‘-yl)karbonyl]-2-(fenyl-metyloxy)etylj-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa nechá prekryštalizovať roztok N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropán-amidmetánsulfonátu s ľubovoľným morfologickým zložením zo zmesi etylacetátu, etanolu a vody, s výhodou v objemovom pomere 24,8:1,6:1,95.The present invention also provides a process for the preparation of Form IV of N- [1- (R) - [(1,2dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by dissolving N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4] '-piperidin] 1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate in one of the morphological forms in a solution in ethanol / water, preferably in a 25:75 v / v ratio solvent The solid is ground to a fine powder and the solid obtained is allowed to stand at a relative humidity of about 75%. Another possible process for the preparation of Form IV of N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl)] carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by recrystallizing a solution of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro) [3 H -indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate of any morphological composition from a mixture of ethyl acetate, ethanol and water, preferably in a volume ratio of 24.8: 1.6: 1.95.
Súčasť podstaty tvorí aj ďalší spôsob na výrobu formy IV N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa forma I tejto látky vystaví pôsobeniu relatívnej vlhkosti vyššej ako 75 %, s výhodouAnother aspect of the invention is another method for producing Form IV N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2 - (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, characterized in that Form I is exposed to a relative humidity of greater than 75%, preferably
-7pôsobeniu relatívnej vlhkosti približne 88 % pri teplote miestnosti po dostatočne dlhú dobu.By applying a relative humidity of about 88% at room temperature for a sufficiently long time.
Podstatu vynálezu tvorí aj ďalší spôsob výroby formy IV N-[1-(R)-[(1,2dÍhydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa táto forma izoluje zo suspenzie formy I tejto látky v zmesi izopropylacetátu a etanolu v objemovom pomere 90:10 s obsahom približne 2,8 % hmotnostných vody pri teplote približne 25 °C.The present invention also provides another process for the preparation of Form IV of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, which is isolated from a suspension of Form I of this substance in a 90:10 mixture of isopropyl acetate and ethanol containing approximately 2.8% by weight of water at about 25 ° C.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy V N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]~2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa vystaví forma IV tejto látky relatívnej vlhkosti nižšej ako 30 % pri teplote miestnosti.The present invention also provides a process for the preparation of Form V of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- ( phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by exposing Form IV to a relative humidity of less than 30% at room temperature.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy VI N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperídín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa suší forma V tejto látky v neprítomnosti vody približne pri teplote miestnosti, napríklad pod dusíkom, vysušeným molekulovým sitom pri teplote približne 25 °C.The present invention also provides a process for the preparation of Form VI of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by drying Form V thereof in the absence of water at about room temperature, for example under nitrogen, dried with molecular sieve at about 25 ° C.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy VII N-[1-(R)-[(1,2díhydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)-etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa táto látka izoluje zo suspenzie formy I alebo formy IV uvedenej látky v zmesi izopropylacetátu a etanolu v pomere 90:10 (objemový priemer) s obsahom približne 1,5 % hmotnostných vody.The present invention also provides a process for the preparation of Form VII of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by isolating it from a suspension of Form I or Form IV thereof in a 90:10 (v / v) isopropyl acetate / ethanol mixture containing: about 1.5% water by weight.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy VIII N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, pri ktorom sa dehydratuje forma VII tejto látky v atmosfére bezvodého inertného plynu, napríklad v atmosfére bezvodého dusíka po dostatočne dlhú dobu.The present invention also provides a process for the preparation of Form VIII of N- [1- (R) - [(1,2dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- ( phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate in which Form VII is dehydrated under an anhydrous inert gas atmosphere such as an anhydrous nitrogen atmosphere for a sufficient period of time.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí taktiež spôsob výroby formy IX N-[1-(R)[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-y|)karbonyl]-2-(fenylmetyl-oxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom,The present invention also provides a process for the preparation of Form IX of N- [1- (R) [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] - 2- (phenylmethyl-oxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate,
-8že sa pripraví roztok tejto látky vo vode s akýmkoľvek morfologickým zložením, potom sa izoluje tuhá látka, ktorá sa vytvorí riadeným odparovaním roztoku pri relatívnej vlhkosti 20 % približne teplote miestnosti.If a solution of this substance in water of any morphological composition is prepared, then a solid is isolated which is formed by controlled evaporation of the solution at a relative humidity of 20% at about room temperature.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby formy X N-[1-(R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, ktorý spočíva v tom, že sa suší forma IX uvedenej látky pri teplote miestnosti a vlhkosti okolia po dostatočne dlhú dobu.The present invention also provides a process for the preparation of Form X of N- [1- (R) - [(1,2dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by drying Form IX of said compound at room temperature and ambient humidity for a sufficiently long time.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj ďalší možný spôsob výroby formy X N-[1 (RHÍI^-dihydro-l-metánsulfonylspirotSH-indol-S^'-piperidínj-ľ-yOkarbonylj-ľ-ífenyl-metyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu, pri ktorom sa vystaví forma I tejto látky pôsobeniu 100% relatívnej vlhkosti na dobu približne 1 až 4 dni.The present invention also provides another possible process for the preparation of Form X of N- [1 (RH, 4'-dihydro-1-methanesulfonylspiro [1H] indol-5'-piperidin-1'-ylcarbonyl] -1'-phenyl-methyloxy) ethyl] -2-amino- 2-methylpropanamide methanesulfonate, wherein Form I is exposed to 100% relative humidity for about 1 to 4 days.
Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj spôsob výroby morfologicky homogénneho N-[1 -(R)-[( 1,2-dihydro-1 -metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1 ‘-y I)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu ktorýmkoľvek z vyššie uvedených spôsobov.The present invention also provides a process for the preparation of morphologically homogeneous N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate by any of the above methods.
Všetky vyššie uvedené nové polymorfné formy N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu sú látky, zvyšujúce sekréciu rastového hormónu, ktoré je možné využiť u hospodárskych zvierat, chovaných na mäso na podporu ich rastu a tým na dosiahnutie vyššej efektívnosti produkcie mäsa. U človeka je možné tieto látky použiť v prípade stavov, pri ktorých je znížená sekrécia rastového hormónu a tiež v prípade stavov, u ktorých je možné využiť anabolický účinok rastového hormónu. Súčasť podstaty vynálezu tvorí aj farmaceutický prostriedok, ktorý obsahuje vyššie uvedené polymorfné formy ako svoju účinnú zložku.All of the above new polymorphic forms of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) Ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate are growth hormone secretion enhancers that can be used in livestock farmed to support their growth and thereby achieve greater efficiency in meat production. In humans, these agents can be used in conditions where growth hormone secretion is reduced and also in conditions where the anabolic effect of growth hormone can be utilized. The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising the above polymorphic forms as its active ingredient.
Údaje, získané v komore na diferenciálnu kalorimetriu DSCData obtained in DSC differential calorimetry chamber
Krivka pre formu I N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyIspiro[3H-indol-3,4‘piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamid-metán-9sulfonátu pri zvyšovaní teploty o 10 °C/min v otvorenej nádobke pod dusíkom prebieha v priebehu topenia ako jediná endotermická krivka s najvyššou teplotou približne 180 °C a extrapolovanou teplotou pri teplote topenia približne 170 °C, teplo, spojené s touto krivkou je približne 53 J/g.Form I N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl ] -2-amino-2-methylpropanamide methane-9sulfonate at 10 ° C / min in an open vial under nitrogen runs as a single endothermic curve with a maximum temperature of about 180 ° C and an extrapolated temperature of about 170 ° C. ° C, the heat associated with this curve is approximately 53 J / g.
Krivka pre formu II N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu pri zvyšovaní teploty o 10 °C/min v otvorenej nádobe pod dusíkom prebieha v priebehu topenia ako jediná endotermická krivka pri najvyššej teplote približne 174 °C a extrapolovanej teplote pri teplote topenia približne 165 °C, teplo, spojené s touto krivkou je približne 37 J/g.Form II curve N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl ] -2-Amino-2-methylpropanamide methanesulfonate at 10 ° C / min in open vessel under nitrogen runs as a single endothermic curve at a maximum temperature of about 174 ° C and extrapolated at a melting point of about 165 ° C, heat associated with this curve is approximately 37 J / g.
Krivka pre formu IV N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu pri zvyšovaní teploty o 10 °C/min v otvorenej nádobe pod dusíkom prebieha ako endotermická krivka, spojená so stratou vody pri teplote približne 45 °C a potom ako endotermická krivka s najvyššou teplotou približne 134 °C a extrapolovanou teplotou pri teplote topenia približne 129 °C vzhľadom na topenie formy VI, teplo, spojené s touto krivkou je približne 23 J/g.Form IV N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] curve -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate, as the temperature rises by 10 ° C / min in an open container under nitrogen, occurs as an endothermic curve, associated with water loss at about 45 ° C and then as the endothermic curve with a maximum temperature of about 134 ° C; extrapolated at a melting point of about 129 ° C relative to the melting of Form VI, the heat associated with this curve is about 23 J / g.
Ďalej sú uvedené zhrnuté údaje pre DSC, pri ktorých bola vzorka zahrievaná pri zvyšovaní teploty o 10 °C/min pod dusíkom, uvedená je extrapolovaná teplota pri začiatku topenia danej formy.The following are summarized data for DSC, in which the sample was heated while increasing the temperature by 10 ° C / min under nitrogen, the extrapolated temperature at the beginning of the melting of the form is given.
Forma I 170 °C (endotermická krivka)Form I 170 ° C (endothermic curve)
Forma II 165 °C (endotermická krivka)Form II 165 ° C (endothermic curve)
Forma VI 129 °C (endotermická krivka).Form VI 129 ° C (endothermic curve).
Forma I N-[1 ~(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je bezvodá látka s teplotou topenia 169 °C a s rozpustnosťou v izopropanole 4,6 mg/ml.Form I N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] 1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] - 2-Amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is an anhydrous substance with a melting point of 169 ° C and a solubility in isopropanol of 4.6 mg / ml.
Forma II N-[1 -(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je bezvodá látka, ktorá má teplotu topenia 158 °C a rozpustnosť v izopropanole 12,3 mg/ml.Form II N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] 1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2 -amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is an anhydrous substance having a melting point of 158 ° C and an isopropanol solubility of 12.3 mg / ml.
- 10Forma III N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je hydrát, charakterizovaný endotermickou krivkou so stratou vody pri prvom teplotnom vrchole 46 °C, nasledovaným endotermickou krivkou s topením a malým rozkladom pri extrapolovanej teplote začiatku topenia 123 °C.- 10Form III N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl -2-Amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is a hydrate characterized by an endothermic curve with water loss at a first temperature peak of 46 ° C, followed by an endothermic curve with melting and little decomposition at extrapolated melting point of 123 ° C.
Forma IV N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je hydrát, charakterizovaný endotermickou krivkou so stratou vody pri prvom teplotnom vrchole 45 °C s následnou endotermickou krivkou pre topenie a rozklad s extrapolovanou teplotou začiatku topenia 129 °C (pravdepodobne v dôsledku topenia a rozkladu formy VI).Form IV N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is a hydrate characterized by an endothermic curve with water loss at a first temperature peak of 45 ° C followed by an endothermic curve for melting and decomposition with an extrapolated melting point of 129 ° C (probably due to melting and decomposition of Form VI) .
Forma IV uvedenej látky je hygroskopický hydrát, ktorý obsahuje 3,5 mol vody na mol uvedenej látky.Form IV is a hygroscopic hydrate containing 3.5 moles of water per mole of said compound.
Forma V N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je hygroskopický hydrát, obsahujúci jeden mol vody na 1 ml vyššie uvedenej formy V.Form V N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is a hygroscopic hydrate containing one mole of water per ml of the above Form V.
Forma VI N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je bezvodá látka s teplotou topenia 129 °C.Form VI N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-Amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is an anhydrous substance with a melting point of 129 ° C.
Forma VII N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je hydrát so širokou endotermickou krivkou so stratou vody pri teplotnom vrchole 60 °C a nasledovanou endotermickou krivkou pre topenie a rozklad pri extrapolovanej teplote začiatku topenia 144 °C (pravdepodobne v dôsledku topenia a rozkladu formy VIII).Form VII N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] The 2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is a hydrate with a broad endothermic curve with water loss at a peak temperature of 60 ° C followed by an endothermic curve for melting and decomposition at extrapolated melting point 144 ° C (probably due to melting and decomposition of Form VIII).
Forma VIII N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-ľ-yl)karbonylj-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonátu je bezvodá látka s teplotou topenia 144 °C.Form VIII N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2 -amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is an anhydrous substance with a melting point of 144 ° C.
Forma X N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfo- 11 nátu je charakterizovaná širokou endotermickou krivkou pri strate vody pri teplotnom vrchole 49 °C.Form X N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] The 2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate is characterized by a broad endothermic curve with water loss at a temperature peak of 49 ° C.
Difrakcia v rtg-žiarení, XRPDX-ray diffraction, XRPD
Difrakcia v rtg-žiarení je široko využívaná na osvetľovanie molekulovej štruktúry, kryštalickej formy a polumorfia rôznych látok. Skúšky boli uskutočňované pri použití prístroja Philips APD3720, ide o automatické zariadenie, pri ktorom bolo použité zariadenie Kalfa medi. Meranie bolo uskutočňované so 2 do 40° (2 teta), vzorka bola udržovaná na teplote miestnosti.X-ray diffraction is widely used to illuminate the molecular structure, crystalline form, and polumorphism of various substances. The tests were performed using the Philips APD3720, an automatic device using a Kalfa copper device. The measurement was performed at 2 to 40 ° (2 aunt), the sample was maintained at room temperature.
Pre formu I boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 6,5, 14,7, 16,9,For Form I, the following major bend values of 6.5, 14.7, 16.9,
17,1, 17,9, 19,5,21,1, 21,7 a 22,0° (2 teta).17.1, 17.9, 19.5, 21.1, 21.7 and 22.0 ° (2 aunt).
Pre formu II boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 4,8, 11,8, 17,5, 19,4, 21,6, 21,9, 22,5 a 2,7° (2 teta).For Form II, the following major bend values of 4.8, 11.8, 17.5, 19.4, 21.6, 21.9, 22.5 and 2.7 ° (2 aunt) were obtained.
Pre formu III boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 13,8, 14,1, 18,0, 19,5, 20,1, 20,6, 21,8 a 25,7° (2 teta).For Form III, the following major bend values of 13.8, 14.1, 18.0, 19.5, 20.1, 20.6, 21.8 and 25.7 ° (2 aunt) were obtained.
Pre formu IV boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 16,0, 16,2, 18,3, 20,1, 21,0 a 24,2° (2 teta).For Form IV, the following major bend values of 16.0, 16.2, 18.3, 20.1, 21.0 and 24.2 ° (2 aunt) were obtained.
Pre formu V boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 14,8, 17,1, 17,6, 19,0, 19,1, 19,4, 20,6, 21,5 a 21,8° (2 teta).For Form V, the following major bend values of 14.8, 17.1, 17.6, 19.0, 19.1, 19.4, 20.6, 21.5 and 21.8 ° (2 aunt) were obtained.
Pre formu VI boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 9,8, 14,0, 14,8,For Form VI, the following major bend values of 9.8, 14.0, 14.8,
17,1, 17,6, 19,0, 19,5, 20,6 a 21,6° (2 teta).17.1, 17.6, 19.0, 19.5, 20.6 and 21.6 ° (2 aunt).
Pre formu VII boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 9,1, 11,3,For Form VII, the following major bend values of 9.1, 11.3,
17.1, 17,4, 20,0, 22,1 a 24,5° (2 teta).17.1, 17.4, 20.0, 22.1 and 24.5 ° (2 aunt).
Pre formu VIII boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 11,5, 11,6,For Form VIII, the following major bend values of 11.5, 11.6,
18.1, 19,6, 22,5, 24,7 a 24,8° (2 teta).18.1, 19.6, 22.5, 24.7 and 24.8 ° (2 aunt).
Pre formu IX boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 8,0, 12,1, 15,3, 15,8, 19,6, 19,7, 21,1, 22,3 a 23,7° (teta).For Form IX, the following major bend values of 8.0, 12.1, 15.3, 15.8, 19.6, 19.7, 21.1, 22.3 and 23.7 ° (aunt) were obtained.
Pre formu X boli získané nasledujúce hlavné hodnoty ohybu 15,5, 15,8, 18,0, 18,4, 18,6, 19,4, 20,7, 20,8, 23,9 a 24,8° (2 teta).For Form X, the following major bend values of 15.5, 15.8, 18.0, 18.4, 18.6, 19.4, 20.7, 20.8, 23.9 and 24.8 ° were obtained ( 2 aunt).
Vyššie uvedené hodnoty ukazujú, že všetky uvedené formy I až X sú odlišné kryštalické formy.The above values show that all of the above forms I to X are different crystalline forms.
- 12Vyššie uvedené hodnoty ukazujú, že všetky uvedené formy I až X sú odlišné kryštalické formy.The above values show that all forms I to X are different crystalline forms.
Mikroskopické sledovanieMicroscopic monitoring
Polymorfné formy boli sledované pri zväčšení 100x v bežnom aj v polarizovanom svetle. Forma I a forma II tvorí ihličkové častice a obe tieto formy sú v polarizovanom svetle dvojlomé.Polymorphic forms were observed at 100X magnification in both normal and polarized light. Form I and Form II form needle particles, and both forms are birefringent in polarized light.
Hygroskopickosťhygroscopicity
Celkový obsah prchavého podielu (pri stanovení analýzou TGA) pre tuhé vzorky foriem I, II, III a IV po vystavení rôznym hodnotám riadenej vlhkosti je zhrnutý v nasledujúcej tabuľke. Bolo ukázané, že forma I obsahuje 0,79 % hmotnostných vody, forma II obsahuje 0,56 % hmotnostných vody, forma III obsahuje 4,5 až 5,0 % hmotnostných vody a forma IV obsahuje 9,5 až 10,0 % hmotnostných vody.The total volatile content (as determined by TGA analysis) for solid samples of Forms I, II, III, and IV after exposure to various controlled humidity values is summarized in the following table. Form I contains 0.79% by weight of water, Form II contains 0.56% by weight of water, Form III contains 4.5 to 5.0% by weight of water, and Form IV contains 9.5 to 10.0% by weight of water. water.
Hygroskopickosť bola sledovaná uložením tuhých látok v uzavretom priestore so stálou relatívnou vlhkosťou. Pri porovnaní bezvodých foriem I a II pri teplote miestnosti bolo zistené, že forma II je hygroskopická a prijíma veľké množstvo vody od relatívnej vlhkosti 65 %. Príjem vody vo väčšom množstve nie je možné dokázať pre formu I s výnimkou prípadov, keď bola skladovaná pri relatívnej vlhkosti vyššej ako 76%. Získané výsledky sú uvedené v tabuľkách 1 a 2.Hygroscopicity was monitored by storing solids in an enclosed space with constant relative humidity. Comparing the anhydrous forms I and II at room temperature, Form II was found to be hygroscopic and absorb large amounts of water from a relative humidity of 65%. The uptake of water in large quantities cannot be demonstrated for Form I, except when stored at a relative humidity of more than 76%. The results obtained are shown in Tables 1 and 2.
Tabuľka 1Table 1
- 13a vzorka sa mení na gumovitú polotuhú látku b premena na formu IV pôsobením vlhkosti okolia13 and the sample is converted to a gummy semi-solid b by conversion to form IV by exposure to ambient humidity
Údaje ukazujú, že forma I uvedenej látky je v podstate bezvodá.The data show that Form I of said substance is substantially anhydrous.
Tabuľka 2Table 2
x materiál sa roztápa RH = relatívna vlhkosť x material melts RH = relative humidity
Hydrtatované formy III a IV N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3Hindol-3,4‘-piperi-dín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidu boli tiež vyhodnotené uložením pri stálej relatívnej vlhkosti na dobu 48 hodín pri teplote miestnosti. U formy III bolo možné pozorovať príjem vody po 48 hodinách pri relatívnej vlhkosti 33 %. U formy IV nedošlo k príjmu vyššieho množstva vody až do relatívnej vlhkosti 100 %, došlo však ku strate hydratačnej vody pri uložení pri relatívnej vlhkosti 11 % alebo nižšej. Získané výsledky sú zhrnuté v nasledujúcej tabuľke 3.Hydrated forms III and IV of N- [1- (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) Ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide was also evaluated by storing at constant relative humidity for 48 hours at room temperature. For Form III, water uptake was observed after 48 hours at a relative humidity of 33%. For Form IV, there was no uptake of water up to a relative humidity of 100%, but there was a loss of hydration water when stored at a relative humidity of 11% or less. The results obtained are summarized in Table 3 below.
- 14Tabuľka 3- 14Table 3
Príjem vlhkosti pri teplote miestnosti v priebehu 48 hodínMoisture absorption at room temperature for 48 hours
Rozpustnosťsolubility
Rozpustnosť formy I v destilovanej vode pri teplote miestnosti je vyššia ako 100 mg/ml. Rozpustnosť formy II vo vode pri teplote miestnosti v roztoku, pufrovanom na pH 4 až 9 je taktiež vyššia ako 100 mg/ml. Ďalej nie je uvedená rozpustnosť formy I v zmesi etanolu a vody.The solubility of Form I in distilled water at room temperature is greater than 100 mg / ml. The solubility of Form II in water at room temperature in a solution buffered to pH 4-9 is also greater than 100 mg / ml. Furthermore, the solubility of Form I in a mixture of ethanol and water is not disclosed.
Teplotná stálosťTemperature stability
Stálosť uvedených foriem v tuhom stave bola sledovaná uložením v sklenených fľaštičkách so skrutkovým vekom v tme. Vzorky boli analyzovanéThe stability of said solid forms was monitored by storing in glass vials with screw lids in the dark. Samples were analyzed
Výsledky pre formu I a II sú ďalej uvedené v % hmotnostných počiatočného množstva.The results for Forms I and II are given below in% by weight of the initial amount.
Forma I - % počiatočného množstvaForm I -% of initial quantity
Forma II - % počiatočného množstva po týždňochForm II -% of initial amount after weeks
- 16Získané výsledky ukazujú, že čisté tuhé formy I a II majú dobrú tepelnú stálosť.The results obtained show that pure solid forms I and II have good thermal stability.
Spôsob výroby účinnej látky je možné vyjadriť nasledujúcou reakčnou schémou:The method of preparation of the active ingredient can be expressed by the following reaction scheme:
Schéma IScheme I
O^OBnO ^ OBn
H IH I
BnOCOCI _ 104 eq· (COCI)gK2CO3, H2O < kat. DMFBnOCOCI- 104 eq · ( COCI) gK 2 CO 3 , H 2 O <cat. DMF
O^OBnO ^ OBn
W Pd/C, H2 W Pd / C, H 2
DIEA tioanizolDIEA thioanisole
COCICOCI
OABOUT
OBnOBn
NaBH4/MeOHNaBH 4 / MeOH
COOHCOOH
O.ABOUT.
COOHCOOH
O^OBn NO ^ OBn N
TFATFA
y~OBny ~ OBn
HH
CH=NNHPhCH = NNHPh
1b1b
- 17Schéma 1 - pokračovanie- 17 Scheme 1 - continued
ll
SO2MeSO 2 Me
Ph/''O/'YC°2H 10 NHBOCPh ( O ) O C 2 H 10 NHBOC
S O2MeSO 2 Me
DCCDCC
HOBT iPrOAc:H2OHOBT iPrOAc: H2O
18Ako je zrejmé zo schémy I, spracováva sa CBZ-spiroindolín pred hydrogenáciou aktívnym uhlím Darco (20 % hmotnostných). Hydrogenácia sa uskutočňuje v etanole pri 65 °C za energického miešania pri použití 10% Pd/C.As shown in Scheme I, CBZ-spiroindoline is treated prior to hydrogenation with Darco activated carbon (20% by weight). Hydrogenation is carried out in ethanol at 65 ° C with vigorous stirring using 10% Pd / C.
Roztok zlúčeniny 1b v izopropylacetáte a vode sa nechá reagovať s bežne dodávaným N-BOC-O-benzyl-D-serínom v prítomnosti dicyklohexylkarbodiimudy DCC a 1-hydroxybenzotriazolu HOBt. Po odfiltrovaní dicyklohexylmočoviny DCU ako vedľajšieho produktu sa dvojfázový filtrát rozdelí a organická vrstva sa postupne premýva 1M vodným hydroxidom sodným, 0,5M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a nakoniec nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Zlepšené výsledky tejto väzby je možné dosiahnuť tak, že sa na roztok voľnej aminokyseliny v zmesi izopropylacetátu a vody pôsobí DCC, HOBT a potom sa pridá pri teplote miestnosti aminokyselina a reakcia sa nechá prebiehať 3 až 5 hodín. Potom sa zmes zahustí vo vákuu a rozpúšťadlo sa vymení, namiesto izopropylacetátu sa použije etanol. Zmena rozpúšťadla sa zvyčajne uskutočňuje pridaním nového rozpúšťadla v množstve, rovnom trojnásobku objemu zmesi a potom odparením zmesi na pôvodný objem.A solution of 1b in isopropyl acetate and water is treated with commercially available N-BOC-O-benzyl-D-serine in the presence of dicyclohexylcarbodiimide DCC and 1-hydroxybenzotriazole HOBt. After filtering off the dicyclohexylurea DCU as a by-product, the biphasic filtrate is separated and the organic layer is washed successively with 1M aqueous sodium hydroxide, 0.5M aqueous hydrochloric acid and finally with a saturated aqueous sodium bicarbonate solution. Improved coupling results can be achieved by treating a solution of the free amino acid in a mixture of isopropyl acetate and water with DCC, HOBT, and then adding the amino acid at room temperature and allowing the reaction to proceed for 3-5 hours. The mixture was then concentrated in vacuo and the solvent replaced, using ethanol instead of isopropyl acetate. The solvent is usually changed by adding a new solvent in an amount equal to three times the volume of the mixture and then evaporating the mixture to its original volume.
Zo zlúčeniny vzorca 11 sa odstráni skupina BOC pôsobením troch ekvivalentov kyseliny metánsulfónovej MsOH v etanole pri teplote 35 až 40 °C. Potom sa roztok delí medzi isopropylacetát a 1M vodný roztok hydroxidu sodného, čím sa získa zlúčenina vzorca 12.The BOC group is removed from the compound of formula 11 by treatment with three equivalents of methanesulfonic acid MsOH in ethanol at 35-40 ° C. The solution was then partitioned between isopropyl acetate and 1M aqueous sodium hydroxide solution to give the compound of Formula 12.
Táto látka sa nechá reagovať s kyselinou N-BOC-alfa-aminomaslovou, reakcia dobre prebieha v dvojfázovom systéme rozpúšťadiel, napríklad v zmesi izopropylacetátu a vody 1:1 v prítomnosti 1,1 ekvivalentu DCC a HOBt DCU sa odfiltruje, vrstvy sa oddelia a organická vrstva sa postupne premýva 1M hydroxidom sodným, 0,5 M vodnou kyselinou chlorovodíkovou a nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným, čím sa získa zlúčenina vzorca 14.This material is reacted with N-BOC-alpha-aminobutyric acid, the reaction proceeds well in a two-phase solvent system, for example isopropyl acetate / water 1: 1 in the presence of 1.1 equivalents DCC and HOBt DCU is filtered off, the layers are separated and layer was washed sequentially with 1M sodium hydroxide, 0.5 M aqueous hydrochloric acid, and saturated aqueous sodium bicarbonate to give the compound of Formula 14.
Rozpúšťadlo sa nahradí etanolom tak, aby bolo možné odštiepiť skupinu Boe kyselinou metánsulfónovou. Odstránenie ochrannej skupiny zo zlúčeniny vzorca 14 je ťažšie ako jej odstránenie zo zlúčeniny vzorca 11, je nutné použiť koncentrovaný roztok kyseliny metánsulfónovej v etanole a teploty 35 až 40 °C. Potom sa reakčná zmes extrahuje etylacetátom s obsahom hydroxidu sodného aThe solvent is replaced with ethanol so that the Boe group can be cleaved with methanesulfonic acid. Removal of the protecting group from the compound of Formula 14 is more difficult than removal from the compound of Formula 11, using a concentrated solution of methanesulfonic acid in ethanol at a temperature of 35-40 ° C. The reaction mixture is then extracted with ethyl acetate containing sodium hydroxide and sodium hydroxide
- 19izoluje sa voľný amín vzorca 15. Organická vrstva sa dobre premyje 1N hydroxidom sodným na zaistenie úplného odstránenia kyseliny metánsulfónovej.The free amine of formula 15 is isolated. The organic layer is washed well with 1N sodium hydroxide to ensure complete removal of the methanesulfonic acid.
Etylacetátový roztok voľnej bázy vzorca 15 v etylacetáte sa zahustí vo vákuu a potom sa aezotrópne vysuší až na hodnotu KF nižšiu ako 500 mg/ml tak, že sa pridajú dva objemy zmesi etylacetátu a etanolu 90:10 a potom dva objemy etylacetátu. Výsledný bezvodý, mierne zakalený roztok voľnej bázy vzorca 16 v etylacetáte sa spracováva pôsobením 25 % hmotnostných aktívneho uhlia Darco G-60 pri teplote miestnosti na dobu 10 hodín. Potom sa aktívne uhlie odfiltruje, čím sa získa voľná báza vzorca 15.The ethyl acetate solution of the free base of formula 15 in ethyl acetate was concentrated in vacuo and then dried aesotropically to a KF value of less than 500 mg / ml by adding two volumes of a 90:10 mixture of ethyl acetate and ethanol and then two volumes of ethyl acetate. The resulting anhydrous, slightly cloudy solution of the free base of Formula 16 in ethyl acetate was treated with 25% Darco G-60 activated carbon at room temperature for 10 hours. The activated carbon is then filtered off to give the free base of formula 15.
Tvorba soli vzorca 16 s kyselinou metánsulfónovou zo zlúčeniny vzorca 15 sa uskutočňuje v etylacetáte pôsobením 1,1 ekvivalentu MsOH pri teplote 50 °C.. Voľná báza vzorca 15 sa spracuje pôsobením 8 % objemových etanolu a jedného ekvivalentu vody a zmes sa zahrieva na 55 °C až do úplného rozpustenia. Ochladením na teplotu miestnosti a miešaním výslednej suspenzie 4 hodiny sa získa kryštalická látka vzorca 16, ide o kryštalickú formu II, ktorej rozpustnosť v izopropylacetáte je 12 g/ml.The formation of the salt of formula 16 with methanesulfonic acid from the compound of formula 15 is carried out in ethyl acetate by treatment with 1.1 equivalents of MsOH at 50 ° C. The free base of formula 15 is treated with 8% by volume ethanol and one equivalent of water. C until complete dissolution. Cooling to room temperature and stirring the resulting suspension for 4 hours yields a crystalline compound of Formula 16, crystalline Form II, having a solubility in isopropyl acetate of 12 g / ml.
Premena formy II na formu I sa uskutoční tak, že sa soľ vytvorí v zmesi etylacetátu a etanolu ako je uvedené vyššie, avšak namiesto ochladenia počiatočného roztoku soli z teploty 55 °C na teplotu miestnosti sa roztok ochladí len na 45 °C. Pri tejto teplote sa začnú tvoriť kryštáliky a suspenzia v priebehu času zhustne. Potom sa teplota zvýši na 51 °C a pri tejto teplote sa suspenzia nechá stáť cez noc. Týmto spôsobom dôjde k úplnej premene na formu I zlúčeniny vzorca 16.Conversion of Form II to Form I is accomplished by forming the salt in a mixture of ethyl acetate and ethanol as described above, but instead of cooling the initial salt solution from 55 ° C to room temperature, the solution is cooled to only 45 ° C. At this temperature, crystals begin to form and the suspension thickens over time. The temperature is then raised to 51 ° C and the suspension is allowed to stand overnight. In this way, complete conversion to Form I of the compound of Formula 16 occurs.
S výhodou sa premena formy II na formu I uskutočňuje tak, že sa k roztoku voľnej bázy v zmesi etylacetátu a etanolu pri teplote 50 až 55 °C pridajú očkovacie kryštáliky formy I a potom sa zmes nechá stáť. Je možné postupovať tak, že sa voľná báza vzorca 15 uvedie do styku s 1,1 ekvivalentom kyseliny metánsulfónovej v 8% etanole v etylacetáte pri teplote 50 až 55 °C. Zmes sa potom naočkuje približne 2 % hmotnostnými formy I metánsulfonátu vzorca 16 a potom sa nechá stáť cez noc pri teplote 55 °C. Potom sa zmes ochladí na teplotu miestnosti a nechá sa stáť približne 2 až 3 hodiny. Produkt sa oddelí filtráciou pri teplotePreferably, the conversion of Form II to Form I is accomplished by adding seed crystals of Form I to a solution of the free base in a mixture of ethyl acetate and ethanol at 50-55 ° C and then allowing the mixture to stand. One may proceed by contacting the free base of Formula 15 with 1.1 equivalents of methanesulfonic acid in 8% ethanol in ethyl acetate at 50-55 ° C. The mixture was then seeded with approximately 2% by weight of Form I of the methanesulfonate of Formula 16 and then allowed to stand overnight at 55 ° C. The mixture was then cooled to room temperature and allowed to stand for about 2-3 hours. The product was collected by filtration at temperature
-20miestnosti pod dusíkom, vysuší sa pri 35 °C vo vákuu a preosieva sa sitom za vzniku metánsulfonátu vzorca 16.-20 under nitrogen, dried at 35 ° C under vacuum and sieved to give the methanesulfonate of Formula 16.
Soľ kyseliny metánsulfónovej vzorca 16 môže byť vytvorená aj tak, že sa striedavo pridáva 1,1 ekvivalentu MsOH a očkovacích kryštálikov formy I k roztoku voľnej bázy v zmesi etylacetátu a etanolu pri teplote približne 50 °C, pričom poradie pridávania MsOH a očkovacích kryštálikov nie je kritické.The methanesulfonic acid salt of Formula 16 can also be formed by alternately adding 1.1 equivalents of MsOH and seed crystals of Form I to a solution of the free base in a mixture of ethyl acetate and ethanol at a temperature of about 50 ° C, wherein the order of addition of MsOH and seed crystals critical.
Využiteľnosť polymorfných zlúčenín podľa vynálezu ako látok, zvyšujúcich sekréciu rastového hormónu je možné dokázať známymi postupmi, napríklad podľa publikácie Smith a ďalší, Science, 260, 1640 až 1643, 1993, najmä podľa obr. 2 a príslušného textu v tejto publikácii, pri tomto postupe boli všetky polymorfné formy podľa vynálezu účinné ako látky, zvyšujúce sekréciu rastového hormónu. Je teda možné považovať za dokázané, že polymorfné formy podľa vynálezu zvyšujú sekréciu prírodného rastového hormónu.The utility of the polymorphic compounds of the invention as growth hormone secretion enhancers can be demonstrated by known methods, for example, see Smith et al., Science, 260, 1640-1643, 1993, in particular Figs. 2 and the corresponding text in this publication, all polymorphic forms of the invention were effective as growth hormone secretagogues. Thus, it can be considered that the polymorphic forms of the invention increase the secretion of natural growth hormone.
Polymorfné látky podľa vynálezu je možné využiť in vitro ako veľmi dobrý nástroj na porozumenie regulácie sekrécie rastového hormónu na úrovni hypofýzy. V týchto prípadoch je nutné vyhodnotiť veľké množstvo faktorov, o ktorých je známe alebo ktoré pravdepodobne môžu ovplyvniť sekréciu rastového hormónu, ako sú vek, pohlavie, výživa, koncentrácia glukózy, aminokyselín a mastných kyselín, dôležitý je aj stav výživy, napríklad hladovanie. Okrem toho je možné využiť uvedené látky na vyhodnotenie možnej modifikácie uvoľnenia rastového hormónu inými hormónmi. Bolo už napríklad dokázané, že somatostatín bráni uvoľneniu rastového hormónu. Z ďalších hormónov, ktorých vplyv na uvoľnenie rastového hormónu je dôležitý a je ešte nutné ich úplne objasniť, je možné uviesť pohlavné hormóny, ako testosterón, estradiol a progesterón, hormóny, ako testosterón, estradiol a progesterón, hormóny nadobličiek, ako kortisol a ďalšie kortikoidy, epinefrín a norepinefrín, hormóny slinivky brušnej a ďalších častí tráviacej sústavy, ako inzulín, glukagón, gastrín a sekretín, niektoré vazoaktívne peptidy, ako bombesín, neurokiníny a hormóny štítnej žľazy, ako tyroxín a trijódtyronín. Polymorfné zlúčeniny podľa vynálezu je tiež možné použiť na sledovanie negatívnych alebo pozitívnych spätných väzieb hormónov hypofýzy, napríklad rastového hormónu a peptidov typu endorfínu na hypofýzu naThe polymorphic compounds of the invention can be used in vitro as a very good tool for understanding the regulation of growth hormone secretion at the pituitary. In these cases, it is necessary to evaluate a number of factors known or likely to affect growth hormone secretion, such as age, sex, nutrition, glucose, amino acid and fatty acid concentrations, and nutritional status such as starvation is also important. In addition, it is possible to use these substances to evaluate the possible modification of growth hormone release by other hormones. For example, somatostatin has already been shown to inhibit the release of growth hormone. Other hormones whose effect on the release of growth hormone is important and still need to be fully understood include sex hormones such as testosterone, estradiol and progesterone, hormones such as testosterone, estradiol and progesterone, adrenal hormones such as cortisol and other corticoids , epinephrine and norepinephrine, pancreatic hormones and other parts of the gastrointestinal tract, such as insulin, glucagon, gastrin and secretin, some vasoactive peptides such as bombesin, neurokinins, and thyroid hormones such as thyroxine and triiodothyronine. The polymorphic compounds of the invention can also be used to monitor for negative or positive feedback of pituitary hormones, such as growth hormone and endorphin-type peptides, on the pituitary gland.
- 21 modifikáciu uvoľnenia rastového hormónu. Zvláštny záujem vedeckých pracovníkov sa sústredí na použitie uvedených látok na osvetlenie subcelulárneho mechanizmu, ktorým je ovplyvnené uvoľnenie rastového hormónu.Modification of growth hormone release. Of particular interest to researchers is the use of these substances to illuminate the subcellular mechanism by which growth hormone release is affected.
Polymorfné látky podľa vynálezu je možné podávať in vivo živočíchom vrátane človeka na uvoľnenie rastového hormónu. Je napríklad možné tieto látky podávať hospodárskym zvieratám, ako prascom, hovädziemu dobytku, ovciam a podobne na urýchlenie rýchlosti ich rastu a na zvýšenie ich konečnej hmotnosti, na zlepšené využitie krmiva a na zvýšenie produkcie mlieka. Okrem toho je možné uvedené látky použiť in vivo ako diagnostický prostriedok na priame stanovenie, či je hypofýza schopná uvoľňovať rastový hormón. Je napríklad možné podávať uvedené látky in vivo a pred aj po podaní odoberať vzorky séra a v týchto vzorkách stanoviť koncentráciu rastového hormónu. Porovnaním množstva rastového hormónu v týchto vzorkách je potom možné získať priamy obraz schopnosti hypofýzy uvoľňovať rastový hormón.The polymorphic compounds of the invention can be administered in vivo to animals, including humans, to release growth hormone. For example, they can be administered to livestock such as pigs, cattle, sheep and the like to accelerate their growth rate and increase their final weight, to improve feed utilization and to increase milk production. In addition, the compounds may be used in vivo as a diagnostic means to directly determine whether the pituitary gland is capable of releasing growth hormone. For example, it is possible to administer the compounds in vivo and to take serum samples before and after administration and to determine the concentration of growth hormone in these samples. By comparing the amount of growth hormone in these samples, it is then possible to obtain a direct picture of the ability of the pituitary to release growth hormone.
Ako už bolo uvedené, tvorí súčasť podstaty vynálezu aj farmaceutický prostriedok, obsahujúci ako svoju účinnú zložku aspoň jednu polymorfnú látku podľa vynálezu spolu s farmaceutickým nosičom alebo riedidlom. Farmaceutický prostriedok môže prípadne obsahovať ešte ďalšiu účinnú látku, napríklad anabolickú látku, antibiotikum alebo látku na liečenie osteoporózy alebo tiež kortikosteroid na zníženie katabolických vedľajších účinkov alebo iné farmaceutický účinné látky, zvyšujúce účinnosť a znižujúce vedľajšie účinky.As already mentioned, the present invention also provides a pharmaceutical composition comprising, as an active ingredient, at least one polymorphic substance of the invention together with a pharmaceutical carrier or diluent. The pharmaceutical composition may optionally contain yet another active agent, for example an anabolic agent, an antibiotic or an agent for the treatment of osteoporosis, or a corticosteroid for reducing catabolic side effects, or other pharmaceutically active substances which increase the effectiveness and reduce the side effects.
Z rastových a anabolických látok je možné uviesť: TRH, dietylstilbestrol, estrogény, beta-agonisty, teofylín, anabolické steroidy, enkefalíny, prostaglandíny rady E, zlúčeniny z US č. 3 239 345, ako zeranol, zlúčeniny z US č. 4 036 979, ako sulbenox alebo tiež peptidy, opísané v US č. 4 411 890.Growth and anabolic agents include: TRH, diethylstilbestrol, estrogens, beta-agonists, theophylline, anabolic steroids, enkephalins, prostaglandins of the E series, compounds of U.S. Pat. U.S. Patent No. 3,239,345, such as zeranol; No. 4,036,979, such as sulbenox or else the peptides disclosed in U.S. Pat. 4,411,890.
Ďalšou možnou kombináciou je kombinácia zlúčenín podľa vynálezu s inými látkami, zvyšujúcimi sekréciu rastového hormónu, ako sú GHRP-6 a GHRP-1, opísané v US 4 411 890 a vo zverejnených prihláškach WO 89/07110, WO 89/07111 a B-HT920 a tiež hexarelín a GHRP-2 podľa WO 93/04081, okrem toho je možné použiť hormón, napomáhajúci uvoľneniu rastového hormónu, označovaný GHRH alebo aj GRF a jeho analógy alebo vlastný rastový hormón a jeho analógy a tiež somatomedíny vrátane IGF-1 a IGF-2 alebo a-adrenergnéAnother possible combination is the combination of the compounds of the invention with other growth hormone secretagogues such as GHRP-6 and GHRP-1 described in US 4,411,890 and in published applications WO 89/07110, WO 89/07111 and B-HT920 as well as hexarelin and GHRP-2 according to WO 93/04081, it is furthermore possible to use a growth hormone releasing hormone called GHRH or GRF and its analogs or its own growth hormone and its analogs, as well as somatomedins including IGF-1 and IGF- 2 or α-adrenergic
-22agonisty, ako clonidín alebo sérotonín a tiež 5HTID agonisty, ako sumitriptan alebo látky, inhibujúce somatostatín alebo jeho uvoľnenie, ako sú fysostigmín a pyridostigmín. Zvlášť výhodné je použitie zlúčenín podľa vynálezu v kombinácii s faktorom, uvoľňujúcim rastový hormón alebo jeho analógy, IGF-1 alebo IGF-2. Napríklad je možné použiť zlúčeniny podľa vynálezu spolu s IGF-1 na liečenie alebo prevenciu obezity. Okrem toho je napríklad možné použiť zlúčeniny podľa vynálezu spolu s kyselinou retínovou na zlepšenie stavu svalstva a pokožky v priebehu starnutia.-22agonists such as clonidine or serotonin as well as 5HTID agonists such as sumitriptan or somatostatin inhibiting or releasing agents such as physostigmine and pyridostigmine. Particularly preferred is the use of the compounds of the invention in combination with growth hormone releasing factor or analogues thereof, IGF-1 or IGF-2. For example, the compounds of the invention may be used together with IGF-1 to treat or prevent obesity. In addition, for example, it is possible to use the compounds of the invention together with retinoic acid to improve muscle and skin conditions during aging.
Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu je možné pripraviť tak, že sa polymorfné látky podľa vynálezu spracujú s farmaceutickým nosičom alebo riedidlom.The pharmaceutical compositions of the invention may be prepared by treating the polymorphic substances of the invention with a pharmaceutical carrier or diluent.
Je známe, že možné použitie rastového hormónu je veľmi všestranné. Podávanie zlúčenín podľa vynálezu môže mať rovnaké účinky ako podávanie vlastného endogénneho rastového hormónu. Je teda možné zhrnúť použitie uvedených látok tak, že je možné ich využiť napríklad na stimuláciu uvoľnenia rastového hormónu u starších osôb, na liečenie nedostatku rastového hormónu u dospelých, na prevenciu katabolických vedľajších účinkov glukokortikoidov, na liečenie osteoporózy, na stimuláciu imunitného systému, na urýchlenie hojenia rán alebo hojenia kostných zlomenín, na liečenie retardácie rastu, na liečenie akútneho alebo chronického zlyhania alebo nedostatočnosti obličiek, na liečenie malého vzrastu, vrátane detí s nedostatkom rastového hormónu, na liečenie malého vzrastu spojeného s chronickými chorobami, na liečenie obezity a oneskorenia rastu, spojené ho s obezitou, na liečenie oneskorenia rastu, spojeného so syndrómom Prader-Willi a sTurnerovým syndrómom, na urýchlenie rekonvalescencie a skrátenie doby hospitalizácie u chorých s popáleninami alebo závažnými chirurgickými zákrokmi, napríklad na tráviacej sústave, na liečenie oneskorenia rastu plodu vo vnútri maternice a kostnej dysplazie, na liečenie neuropatií, na náhradu rastového hormónu u stresovaných chorých, na liečenie osteochondrodysplazií, Noonanovho syndrómu, schizofrénie, depresie, Alzheimerovej choroby, na liečenie spomaleného liečenia rán a psychosociálnej deprivácie, na liečenie pľúcnej dysfunkcie vrátane závislosti na umelom dýchaní, na zníženie katabolickej odpovede po chirurgických zákrokoch, na liečenie mal-23absorpčných syndrómov, na zníženie tachexie a straty bielkovín pri chronických ochoreniach, napríklad pri rakovine alebo AIDS, na urýchlenie prírastku na váhe a na vytváraní bielkovín u chorých s parenterálnou výživou, pri liečení hyperinzulinémie vrátane nesidioblastózy, na pomocné liečenie pri pokusoch o vyvolanie ovulácie a na prevenciu a liečenie žalúdočných a dvanástnikových vredov, na stimuláciu vývoja brzlíka a na prevenciu znižovania funkcie brzlíka s vekom, na pomocné liečenie chorých s chronickou hemodialýzou, na liečenie chorých s nedostatočnosťou imunitného systému a na podporu tvorby protilátok po očkovaní, na zvýšenie počtu lymfocytov u človeka a najmä na zvýšenie pomere buniek T4/T8 u chorých s poklesom tohto pomeru napríklad po traumatoch, ako sú uzavreté poranenia hlavy alebo po infekciách, napríklad bakteriálnych alebo vírusových, najmä pri infekcii HIV, na zlepšenie sily svalov, pohyblivosti, na udržanie dobrého stavu pokožky, metabolickej homeostázy alebo obličkovej hemeostázy u starších osôb, na stimuláciu osteoblastov, rastu chrupavky a na stimuláciu imunitného systému u rôznych živočíchov, vrátane porúch pri ich starnutí. Ďalej je možné tieto látky použiť na stimuláciu rastu vlny u oviec, na zvýšenie využitia krmiva, na urýchlenie rastu, zvýšenie produkcie mlieka a na zlepšenie kvality karkasu u hospodárskych zvierat. Okrem toho je ešte možné tieto látky použiť na liečenie ochorenia a stavov, ktoré je možné upraviť anabolickým účinkom rastového hormónu.It is known that the possible use of growth hormone is very versatile. Administration of the compounds of the invention may have the same effects as administration of endogenous growth hormone itself. Thus, it is possible to summarize the use of these compounds such that they can be used, for example, to stimulate growth hormone release in the elderly, to treat growth hormone deficiency in adults, to prevent catabolic side effects of glucocorticoids, to treat osteoporosis, to stimulate the immune system, to accelerate wound healing or bone fracture healing, for treating growth retardation, for treating acute or chronic renal failure or insufficiency, for treating small stature, including children with growth hormone deficiency, for treating small stature associated with chronic diseases, for obesity and growth retardation, associated with obesity, for the treatment of growth retardation associated with Prader-Willi syndrome and with Turner syndrome, to accelerate convalescence, and to shorten the hospitalization period in patients with burns or major surgery, such as more system, to treat fetal growth retardation within the uterus and bone dysplasia, to treat neuropathies, to replace growth hormone in stressed patients, to treat osteochondrodysplasias, Noonan's syndrome, schizophrenia, depression, Alzheimer's disease, to treat retardation and retardation, for the treatment of pulmonary dysfunction, including artificial respiration, to reduce catabolic response after surgery, to treat malabsorption syndromes, to reduce tachexia and protein loss in chronic diseases such as cancer or AIDS, to accelerate weight gain and to produce protein in patients with parenteral nutrition, in the treatment of hyperinsulinemia, including nesidioblastosis, in auxiliary treatment in attempts to induce ovulation, and in the prevention and treatment of gastric and duodenal ulcers, to stimulate thymus development and to prevent thymus function with age, for the auxiliary treatment of patients with chronic hemodialysis, for the treatment of patients with immune deficiency and for the promotion of antibody production after vaccination, for increasing the lymphocyte count in humans and in particular for increasing the T 4 / T 8 cell ratio in patients with decreased this ratio, for example after traumas such as closed head injuries or infections such as bacterial or viral, in particular in HIV infection, to improve muscle strength, mobility, maintain good skin condition, metabolic homeostasis or renal hemeostasis in the elderly, to stimulate osteoblasts , cartilage growth and to stimulate the immune system in a variety of animals, including aging disorders. Furthermore, these substances can be used to stimulate the growth of wool in sheep, to increase feed utilization, to accelerate growth, to increase milk production and to improve the quality of carcass in livestock. In addition, they can be used to treat diseases and conditions that can be controlled by the anabolic effect of growth hormone.
Zvlášť užitočné môžu byť zlúčeniny podľa vynálezu pri liečení stavu zo skupiny osteoporóza, katabolické ochorenia, nedostatočnosť imunitného systému vrátane ochorenia so zníženým pomerom buniek T4/T8, zlomeniny bedrových kĺbov, poruchy kostného a svalového systému u starých ľudí, znížená koncentrácia rastového hormónu u dospelých alebo u deti, obezita, kachexia a strata bielkovín v dôsledku chronického ochorenia, napríklad AIDS alebo zhubných nádorov a tiež na liečenie chorých, zotavujúcich sa po rozsiahlych chirurgických zákrokoch, poraneniach alebo popálenináchIn particular, the compounds of the invention may be useful in the treatment of osteoporosis, catabolic diseases, immune deficiency including T4 / T8 cell disease, hip fractures, bone and muscle disorders in the elderly, reduced growth hormone concentration in adults or in children, obesity, cachexia and protein loss due to a chronic disease, such as AIDS or malignant tumors, and also to treat patients recovering from major surgeries, injuries or burns
Okrem toho je možné nové zlúčeniny podľa vynálezu využiť pri liečení chorôb, vyvolaných faktorom na uvoľnenie kortikotropínu alebo u chorôb, ktorých vznik je týmto faktorom uľahčený, pri liečení porúch, súvisiacich so stresom a úzkostnými stavmi, vrátane depresie a bolesti hlavy, na liečenie porúch hrubéhoIn addition, the novel compounds of the invention can be used in the treatment of diseases caused by, or facilitated by, the corticotropin release factor, in the treatment of disorders related to stress and anxiety, including depression and headache, for the treatment of severe disorders
-24čreva, pri poklese imunity, pri infekciách HIV, pri Alzheimerovej chorobe, pri chorobách tráviacej sústavy, anorexii nervosa, pri hemorhagickom strese, v prípade abstinenčných príznakov po vysadení drog alebo alkoholu, v prípade návykov na určité látky a pri neplodnosti.-24gut, immunosuppression, HIV infections, Alzheimer's disease, digestive system disorders, anorexia nervosa, haemorrhagic stress, withdrawal symptoms after drug or alcohol withdrawal, substance abuse and infertility.
Je známe, že na liečenie vyššie uvedených ochorení a chorobných stavov sa v súčasnej dobe používa celý rad známych látok. Už vyššie bolo uvedené, že v prípade kombinácie takýchto látok, z ktorých niektoré boli uvedené, spolu s novými polymorfnými látkami podľa vynálezu je možné dosiahnuť ďalšie a často synergné účinky pri dosahovaní zvýšenej rýchlosti rastu, anabolických alebo iných žiadúcich účinkov týchto látok. V týchto kombináciách môžu byť známe účinné látky a nové zlúčeniny podľa vynálezu prítomné nezávisle v množstve jednej desatiny až niekoľkonásobku dávok, v ktorých sú tieto látky účinné v prípade, že sú použité jednotlivo.It is known that a variety of known agents are currently used to treat the above-mentioned diseases and conditions. It has been mentioned above that by combining such substances, some of which have been mentioned, together with the novel polymorphic substances of the invention, additional and often synergistic effects can be achieved in achieving increased growth rates, anabolic or other desirable effects of these substances. In these combinations, the known active compounds and the novel compounds according to the invention can be present independently in an amount of one tenth to several times the doses in which they are effective when used individually.
Možnosť kombinovaného liečenia za účelom inhibície resorpcie kostného tkaniva, na prevenciu osteoporózy a na urýchlenie hojenia kostných zlomenín je možné ilustrovať na kombinácii bifosfonátov a zlúčenín podľa vynálezu, podporujúcich sekréciu rastového hormónu. Použitie bifosfonátov na uvedený účel je opísané napríklad v publikácii Hamdy N. A. T., Role of Bisphosphonates in Metabolic Bone Diseases, Trends in Endocrinol. Metab., 4, 19 až 25, 1993. Bifosfonáty, vhodné na toto použitie zahrnujú napríklad alendronát, tiludronát, dimetyl-APD, risedronát, etidronát, YM-175, clodronát, pamidronát a BM-210995. V súvislosti na účinnosti uvedených látok sa denná dávka bisfosfonátov pri perorálnom podaní pohybuje v rozmedzí 0,1 mg až 5 g a denná dávka látok, podporujúcich sekréciu rastového hormónu podľa vynálezu sa pohybuje v rozmedzí 0,01 mg až 20 mg/kg telesnej hmotnosti, tieto dávky je možné chorým podávať na účinné liečenie osteoporózy.The possibility of a combination treatment to inhibit bone resorption, to prevent osteoporosis, and to accelerate bone fracture healing can be illustrated by the combination of bisphosphonates and compounds of the invention that promote growth hormone secretion. The use of bisphosphonates for this purpose is described, for example, in Hamdy N.A.T., Role of Bisphosphonates in Metabolic Bone Diseases, Trends in Endocrinol. Metab., 4, 19-25, 1993. Biphosphonates suitable for use include, for example, alendronate, tiludronate, dimethyl-APD, risedronate, etidronate, YM-175, clodronate, pamidronate, and BM-210995. In relation to the efficacy of the compounds, the daily dose of bisphosphonates for oral administration is in the range of 0.1 mg to 5 g, and the daily dose of the growth hormone secretagogues according to the invention is in the range of 0.01 mg to 20 mg / kg body weight. doses can be administered to patients for the effective treatment of osteoporosis.
V prípade aiendronátu sa denná dávka 0,1 mg až 50 mg pri perorálnom podaní môže pre efektívne liečenie osteoporózy kombinovať s dávkou 0,01 mg až 20 mg/kg telesnej hmotnosti zlúčenín podľa vynálezu, zvyšujúcich sekréciu rastového hormónu. Pri liečení osteoporózy a ďalších porúch kostného systému je tiež možné použiť zlúčeniny podľa vynálezu v kombinácii s kalcitonínom,In the case of aiendronate, a daily dose of 0.1 mg to 50 mg per oral administration may be combined with a dose of 0.01 mg to 20 mg / kg body weight of growth hormone secretion enhancing compounds for effective treatment of osteoporosis. In the treatment of osteoporosis and other disorders of the bone system, it is also possible to use the compounds of the invention in combination with calcitonin,
-25estrogénmi, raloxifénom a látkami na doplnenie vápnika, napríklad citronanom vápenatým.Oestrogens, raloxifene, and calcium replenishers such as calcium citrate.
Anabolické účinky, najmä pri liečení geriatrických chorých mužského pohlavia je možné zaistiť kombináciou zlúčenín podľa vynálezu s anabolickými steroidmi, napríklad s oxymetanolom, metyltestosterónom, fluoxymesterónom, a stanozolom.Anabolic effects, particularly in the treatment of male geriatric illnesses, can be ensured by combining the compounds of the invention with anabolic steroids such as oxymethanol, methyltestosterone, fluoxymesterone, and stanozol.
Zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť podávané perorálne, parenterálne, napríklad vnútrosvalovo, intraperitonálne, vnútrožilovo, podkožnou injekciou alebo vo forme implantátu, ďalej do nosa, pošvy, konečníka, pod jazyk alebo aj miestne. Na tento účel sa zlúčeniny podľa vynálezu spracovávajú na liekové formy, vhodné pre jednotlivé spôsoby podania.The compounds of the invention may be administered orally, parenterally, for example, intramuscularly, intraperitoneally, intravenously, subcutaneously by injection or in the form of an implant, further into the nose, vagina, rectum, sublingually or even topically. For this purpose, the compounds of the invention are formulated in a dosage form suitable for each mode of administration.
Tuhé liekové formy na perorálne podanie zahrnujú kapsuly, tablety, pilulky, prášky a granuláty. V týchto tuhých liekových formách sa účinná látka mieša s najmenej jedným inertným farmaceutický prijateľným nosičom, ako je sacharóza, laktóza alebo škrob. Tieto liekové formy môžu taktiež obsahovať, ako je vo farmaceutických prostriedkoch bežné, ešte ďalšie látky okrem inertných riedidiel, napríklad klzné látky, ako je stearan horečnatý. V prípade kapsúl, tabliet a piluliek môžu liekové formy obsahovať aj pufre. Okrem toho je možné tablety a pilulky opatriť enterosolventným povlakom.Solid dosage forms for oral administration include capsules, tablets, pills, powders, and granules. In these solid dosage forms, the active ingredient is admixed with at least one inert pharmaceutically acceptable carrier, such as sucrose, lactose or starch. These dosage forms may also contain, as is customary in pharmaceutical compositions, other substances in addition to inert diluents, for example glidants such as magnesium stearate. In the case of capsules, tablets and pills, the dosage forms may also contain buffers. In addition, the tablets and pills may be enteric coated.
Kvapalné liekové formy na perorálne podanie zahrnujú farmaceutický prijateľné emulzie, roztoky, suspenzie, sirupy, elixíry, tieto formy obsahujú bežné inertné riedidlá, napríklad vodu. Okrem toho môžu obsahovať ďalšie pomocné látky, ako zmáčadlá, emulgátory, suspenzné činidlá, sladidlá, látky na úpravu chuti a parfumy.Liquid dosage forms for oral administration include pharmaceutically acceptable emulsions, solutions, suspensions, syrups, elixirs, these forms containing conventional inert diluents, for example water. In addition, they may contain other excipients, such as wetting agents, emulsifying agents, suspending agents, sweetening, flavoring and perfuming agents.
Prostriedky na parenterálne podanie zahrnujú sterilné vodné alebo nevodné roztoky, suspenzie alebo emulzie. Ako príklad nevodných rozpúšťadiel alebo nosných prostredí je možné uviesť propylénglykol, polyetylénglykol, rastlinné oleje, ako olivový alebo kukuričný olej, želatínu a organické estery, vhodné na injekčné podanie, napríklad etyloleát. Tieto liekové formy môžu tiež obsahovať pomocné látky, ako konzervačné činidlá, zmáčadlá, emulgátory a dispergačné činidlá, prostriedky môžu byť sterilizované napríklad filtráciou cez filter, zadržujúci baktérie, pridaním sterilizačného činidla, ožiarením prostriedku alebo jeho zahrievaním.Formulations for parenteral administration include sterile aqueous or non-aqueous solutions, suspensions, or emulsions. Examples of non-aqueous solvents or vehicles include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive or corn oil, gelatin and organic esters suitable for injection, for example ethyl oleate. These dosage forms may also contain adjuvants such as preservatives, wetting agents, emulsifiers and dispersing agents, the compositions may be sterilized, for example, by filtration through a filter, retaining bacteria, addition of a sterilizing agent, irradiation of the composition or heating thereof.
-26Prostriedky taktiež môžu byť dodávané ako sterilné tuhé látky, určené na rozpustenie v sterilnej vode alebo inom sterilnom prostredí na injekčné podanie tesne pred použitím.The compositions may also be supplied as sterile solids, for solution in sterile water or other sterile injectable medium just prior to use.
Prostriedky na rektálne alebo vaginálne podanie sú s výhodou čapíky, obsahujúce okrem účinnej látky pomocné látky, ako je kakaové maslo alebo iný základ na výrobu čapíkov.The compositions for rectal or vaginal administration are preferably suppositories containing in addition to the active ingredient excipients such as cocoa butter or other suppository bases.
Prostriedky na podanie nosnou sliznicou alebo pod jazyk je taktiež možné pripraviť pri použití bežných pomocných látok.Formulations for nasal or sublingual administration may also be prepared using conventional excipients.
Zlúčeniny podľa vynálezu sa podávajú človeku a iným živočíchom v dávkach, ktoré zaistia optimálnu účinnosť. Je zrejmé, že sa dávka v každom jednotlivom prípade môže meniť nielen v závislosti na zvolenej účinnej látke alebo liekovej forme, ale tiež na spôsobe podania, na povahe liečeného ochorenia, na veku a celkovom stave chorého, na výžive a na ďalších faktoroch, ktoré môže vyhodnotiť odborník. Výslednú dennú dávku musí v jednotlivých prípadoch vždy určiť ošetrujúci lekár.The compounds of the invention are administered to humans and other animals at dosages that provide optimal efficacy. Obviously, the dosage may vary in each individual case not only depending on the active ingredient or pharmaceutical form selected, but also on the route of administration, the nature of the disease being treated, the age and general condition of the patient, the nutrition and other factors which may evaluate the expert. The resulting daily dose must always be determined by the attending physician in each case.
Dávkovanie účinnej zložky vo farmaceutickom prostriedku podľa vynálezu sa môže meniť, množstvo účinnej zložky v prostriedku však musí byť také, aby bolo možné pripraviť vhodnú liekovú formu. Zvolená dávka závisí na požadovanom liečebnom účinku, na spôsobe podania a na celkovej dobe podania prostriedku. Na účinné uvoľnenie rastového hormónu u človeka a iných živočíchov, napríklad u cicavcov sa zvyčajne podávajú denné dávky v rozmedzí 0,001 až 10 mg/kg telesnej hmotnosti, s výhodou 0,001 až 25 mg/kg a najmä 0,01 až 10 mg/kg denne.The dosage of the active ingredient in the pharmaceutical composition of the invention may vary, but the amount of active ingredient in the composition must be such that a suitable dosage form can be prepared. The dosage selected will depend upon the desired therapeutic effect, the mode of administration, and the total time of administration of the composition. For effective release of growth hormone in humans and other animals, for example mammals, daily dosages in the range of 0.001 to 10 mg / kg body weight, preferably 0.001 to 25 mg / kg, and in particular 0.01 to 10 mg / kg per day are usually administered.
V nasledujúcich príkladoch budú vysvetlené rôzne spôsoby na prípravu polymorfných foriem podľa vynálezu, príklady sú určené na ilustráciu týchto postupov, v žiadnom smere však nemajú slúžiť na obmedzenie rozsahu vynálezu.Various methods for preparing polymorphic forms of the invention will be explained in the following examples, examples are intended to illustrate these procedures, but are not intended to limit the scope of the invention in any way.
Príklady uskutočnenia vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Príklad 1Example 1
N-[1 -(R)-[(1,2-dihydro-1 -metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1 ‘-y I) ka rbo ny lj2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidN- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] - 2-amino-2-methylpropanamide
-27Časť A: 1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]hydrochlorid-27Part A: 1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4‘-piperidine] hydrochloride
Do roztoku 1,20 g (5,8 mmol) 1‘-metyl-1,2-dihydrospiro[3H-indol-3,4‘piperidínu], ktorého príprava je opísaná H. Ongem a spol. v J. Med. Chem., 23, 981 až 986 (1983) v 20 ml dichlórmetánu sa pri teplote 0 °C pridá 0,90 ml (6,4 mmol) trietylamínu a 0,49 ml (6,35 mmol) metánsulfonylchloridu. Reakčná zmes sa 30 minút mieša, vleje sa do 15 ml nasýteného vodného roztoku uhličitanu sodného a dvakrát sa extrahuje 10 ml dichlórmetánu. Zlúčené organické extrakty sa premyjú 20 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, sušia sa nad bezvodým uhličitanom draselným, filtruje sa a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku. Vznikne 1,44 g svetložltého oleja metánsulfónamidu ako derivátu, ktorý sa bez ďalšieho čistenia použije v nasledujúcej syntéze.To a solution of 1.20 g (5.8 mmol) of 1‘-methyl-1,2-dihydrospiro [3H-indole-3,4‘-piperidine], the preparation of which is described by H. Ong et al. in J. Med. Chem., 23, 981-986 (1983) in 20 mL of dichloromethane at 0 ° C was added 0.90 mL (6.4 mmol) of triethylamine and 0.49 mL (6.35 mmol) of methanesulfonyl chloride. The reaction mixture was stirred for 30 minutes, poured into 15 ml of saturated aqueous sodium carbonate solution and extracted twice with 10 ml of dichloromethane. The combined organic extracts were washed with 20 ml of saturated sodium chloride solution, dried over anhydrous potassium carbonate, filtered and the solvent was removed under reduced pressure. 1.44 g of a light yellow oil of methanesulfonamide are obtained as a derivative which is used as is in the following synthesis without further purification.
Do roztoku surového produktu v 20 ml bezvodého 1,2-dichlóretánu sa pri teplote 0 °C pridá 1,0 ml (9,3 mmol) 1-chlóretylchlórformátu. reakčná zmes sa 30 minút mieša pri teplote miestnosti a následne 1 hodinu pri teplote refluxu. Zmes sa zahustí približne na jednu tretinu objemu, a následne sa zriedi 20 ml bezvodého metanolu. Po 1,5 hodine zahrievania pri teplote refluxu sa reakčná zmes ochladí na teplotu miestnosti a zahustí sa na približne jednu polovicu objemu. Zrazenina sa oddelí filtráciou a premyje sa malým množstvom studeného metanolu. Vznikne 1,0 g bielej tuhej látky ako piperidínhydrochloridu. Filtrát sa zahustí a pridá sa malé množstvo najskôr metanolu a následne éteru. Zrazenina sa znova oddelí filtráciou, premyje sa studeným metanolom a suší sa za vzniku ďalších 0,49 g požadovaného produktu. Celkom vznikne 1,49 g výslednej zlúčeniny s výťažkom 70 %.To a solution of the crude product in 20 mL of anhydrous 1,2-dichloroethane at 0 ° C was added 1.0 mL (9.3 mmol) of 1-chloroethyl chloroformate. the reaction mixture was stirred at room temperature for 30 minutes and then at reflux temperature for 1 hour. The mixture is concentrated to approximately one third of the volume and then diluted with 20 ml of anhydrous methanol. After heating at reflux for 1.5 hours, the reaction mixture is cooled to room temperature and concentrated to about one-half the volume. The precipitate was collected by filtration and washed with a small amount of cold methanol. 1.0 g of a white solid is obtained as piperidine hydrochloride. The filtrate was concentrated and a small amount of methanol was added first followed by ether. The precipitate is collected again by filtration, washed with cold methanol and dried to give an additional 0.49 g of the desired product. A total of 1.49 g of the title compound was obtained in a yield of 70%.
1H NMR (CDCI3, 200 MHz) δ 7,43 - 7,20 (m, 3H), 7,10 (dd, 1H), 3,98 )bs, 2H), 3,55 - 3,40 (bd, 2H), 3,35 - 3,10 (m, 2H), 2,99 (s, 3H), 2,15 (t, 2H), 2,00 (t, 2H). 1 H NMR (CDCl 3 , 200 MHz) δ 7.43-7.20 (m, 3H), 7.10 (dd, 1H), 3.98) (bs, 2H), 3.55-3.40 ( bd, 2H), 3.35-3.10 (m, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.15 (t, 2H), 2.00 (t, 2H).
Časť B: N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘yl)karbonyl]-1‘-(fenylmetyloxy)etyl]-2-[1,1-dimetyletoxy)karbonyl)amino2-metylpropánamidPart B: N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'yl) carbonyl] -1 '- (phenylmethyloxy) ethyl ] 2- [1,1-dimethylethoxy) carbonyl) amino-2-methylpropanamide
-28Do 0,35 g (1,15 mmol) (2R)-2-[(1,1-dimetyietoxy)karbonyl]amino-3-[2(fenylmetyloxy)etyl]-1-propánovej kyseliny v 13 ml dichlórmetánu sa pridá 0,325 g (1,07 mmol) 1,2-dihydro-1 -metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]hydrochloridu, 0,18 ml (1,63 mmol) N-metylmorfolínu, 0,159 g (1,18 mmol) 1-hydroxybenztriazolu (HOBT) a reakčná zmes sa 15 minút mieša. Po pridaní 0,31 g (1,62 mol) EDC sa zmes mieša ďalšiu 1 hodinu a pridá sa 60 μΙ N-metylmorfolínu. reakčná zmes sa mieša 45 minút, vleje sa do 5 ml vody. Organický podiel sa oddelí, premyje sa 5 ml 0,5N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a 5 ml nasýteného vodného roztoku uhličitanu sodného. Zlúčené organické podiely sa sušia nad bezvodým síranom horečnatým a zahustia sa za vzniku 0,627 g žltej peny výsledného produktu, ktorý sa použije bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom postupe.-28Do 0.35 g (1.15 mmol) of (2R) -2 - [(1,1-dimethyethoxy) carbonyl] amino-3- [2 (phenylmethyloxy) ethyl] -1-propanoic acid in 13 ml of dichloromethane is added 0.325 g (1.07 mmol) of 1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidine] hydrochloride, 0.18 ml (1.63 mmol) of N-methylmorpholine, 0.159 g (1, 18 mmol) of 1-hydroxybenzotriazole (HOBT) and the reaction mixture was stirred for 15 minutes. After addition of 0.31 g (1.62 mol) EDC, the mixture is stirred for an additional 1 hour and 60 μΙ of N-methylmorpholine is added. The reaction mixture was stirred for 45 minutes, poured into 5 mL of water. The organic layer was separated, washed with 5 ml of a 0.5N aqueous hydrochloric acid solution and 5 ml of a saturated aqueous sodium carbonate solution. The combined organics were dried over anhydrous magnesium sulfate and concentrated to give 0.627 g of a yellow foam of the title product which was used in the next procedure without further purification.
Do 0,627 g (1,07 mmol) vyššie uvedeného produktu v 5 ml dichlórmetánu sa pridá 1,0 ml kyseliny trifluóroctovej a reakčná zmes sa pri teplote miestnosti 75 minút mieša, pridá sa ďalší 1 ml kyseliny trifluóroctovej, reakčná zmes sa 10 minút mieša a potom sa zahustí a zriedi 5,0 ml dichlórmetánu. Po opatrnom prevedení na zásadité pH vliatím do 10 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného sa organický podiel oddelí a vodný podiel sa ďalej extrahuje dvakrát 15 ml dichlórmetánu. Zlúčené organické podiely sa premyjú 5 ml vody, sušia sa nad uhličitanom draselným, filtrujú sa a zahustia za vzniku 0,486 g amínu ako svetložltej peny, ktorá sa použije pre nasledujúcu syntézu bez ďalšieho čistenia.To 0.627 g (1.07 mmol) of the above product in 5 mL of dichloromethane was added 1.0 mL of trifluoroacetic acid and the reaction mixture was stirred at room temperature for 75 min, another 1 mL of trifluoroacetic acid was added, the reaction was stirred for 10 min. then concentrated and diluted with 5.0 ml of dichloromethane. After carefully converting to basic pH by pouring into 10 ml of 10% aqueous sodium carbonate solution, the organic portion was separated and the aqueous portion was further extracted twice with 15 ml of dichloromethane. The combined organics were washed with 5 mL of water, dried over potassium carbonate, filtered and concentrated to give 0.486 g of the amine as a pale yellow foam, which was used for the next synthesis without further purification.
Do 0,486 g (1,01 mmol) amínu a 10 ml dichlórmetánu sa pridá 0,26 g (1,28 mmol) 2-[(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino-2-metylpropánovej kyseliny, 0,173 g (1,28 mmol) 1-hydroxybenztriazolu (HOBT) a 0,245 g (1,28 mol) EDC a vytvorená reakčná zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa vleje do 5,0 ml vody a organický podiel sa oddelí. Vodný podiel sa ďalej extrahuje 5 ml dichlórmetánu. Zlúčené organické podiely sa premyjú 5,0 ml 0,5N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 5 ml nasýteného vodného roztoku uhličitanu sodného, sušia sa nad bezvodým síranom horečnatým a zahustia sa za vzniku 0,751 g surového produktu ako žltej peny. Roztok tohto produktu v dichlórmetáne sa po absorpcii na 25 g silikagélu čistí chromatografiou pri elúcii najskôr zmesou hexánov, acetónu a dichlórmetánu v pomere 70:25:5 a následne zmesou hexánov,To 0.486 g (1.01 mmol) of the amine and 10 ml of dichloromethane was added 0.26 g (1.28 mmol) of 2 - [(1,1-dimethylethoxy) carbonyl] amino-2-methylpropanoic acid, 0.173 g (1, 28 mmol) of 1-hydroxybenzotriazole (HOBT) and 0.245 g (1.28 mol) of EDC and the resulting reaction mixture was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture is poured into 5.0 ml of water and the organic portion is separated. The aqueous portion was further extracted with 5 mL of dichloromethane. The combined organics were washed with 5.0 mL of a 0.5N aqueous hydrochloric acid solution, 5 mL of a saturated aqueous sodium carbonate solution, dried over anhydrous magnesium sulfate, and concentrated to give 0.751 g of crude product as a yellow foam. A solution of this product in dichloromethane, after absorption on 25 g of silica gel, is purified by chromatography, eluting first with hexanes / acetone / dichloromethane (70: 25: 5) followed by hexanes,
-29acetónu a dichlórmetánu v pomere 65:30:5. Vznikne 0,63 g bielej tuhej látky výslednej zlúčeniny.-29-acetone and dichloromethane in a ratio of 65: 30: 5. This afforded 0.63 g of the title compound as a white solid.
1H NMR (CDCI3, 400 MHz) zlúčenina je zmesou rotamérov v pomere 3:2, δ 7,40 7,10 (m, 6H), 7,06 (d, 1/3H), 7,02 (t, 1/3H), 6,90 (t, 1/3H), 6,55 (d, 1/3H), 5,15 (m, 1H), 4,95 (bs, 1H), 4,63 (bd, 1/3H), 4,57 - 4,40 (m, 2 2/3H), 4,10 (bd, 1/3H), 4,00 (bd, 1/3H), 3,82 (t, 1 H), 3,78 - 3,62 (m, 2H), 3,60 - 3,50 (m, 1 H), 3,04 (q, 1 H), 2,87 (s, 1 H), 2,86 (s, 2H), 2,80 - 2,60 (m, 1 H), 1,90 (bs, 1 H), 2,85 - 2,75 (m, 1 H), 1,82 1,60 (m, 3H), 1,55 - 1,45 (m, 1 H), 1,45 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H). 1 H NMR (CDCl 3, 400 MHz) compound is a 3: 2 mixture of rotamers, δ 7.40 7.10 (m, 6H), 7.06 (d, 1 / 3H), 7.02 (t, 1) (3H), 6.90 (t, 1 / 3H), 6.55 (d, 1 / 3H), 5.15 (m, 1H), 4.95 (bs, 1H), 4.63 (bd, 1 / 3H), 4.57-4.40 (m, 2 / 3H), 4.10 (bd, 1 / 3H), 4.00 (bd, 1 / 3H), 3.82 (t, 1 H), 3.78-3.62 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.04 (q, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.86 (s, 2H), 2.80-2.60 (m, 1H), 1.90 (bs, 1H), 2.85-2.75 (m, 1H), 1.82 1.60 (m, 3H), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.45 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Časť C: N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidhydrochloridPart C: N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] 2-amino-2-methylpropanamide hydrochloride
Do 0,637 g (0,101 mmol) medzipriduktu časti B v 5 ml dichlórmetánu sa pridá 2,5 ml kyseliny trifluóroctovej a reakčná zmes sa 30 minút mieša pri teplote miestnosti. Zmes sa zahustí na olej, spracuje sa v 10 ml etylacetátu a premyje sa 8 ml 10% vodného roztoku uhličitanu sodného. Vodný diel sa ďalej extrahuje 5 ml etylacetátu. Zlúčené organické podiely sa premyjú 10 ml vody, sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú sa a zahustia sa za vzniku 0,512 g voľných báz ako biela pena.To 0.637 g (0.101 mmol) of the intermediate Part B in 5 ml of dichloromethane was added 2.5 ml of trifluoroacetic acid and the reaction mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The mixture was concentrated to an oil, treated with 10 mL of ethyl acetate and washed with 8 mL of 10% aqueous sodium carbonate. The aqueous portion was further extracted with 5 mL of ethyl acetate. The combined organics were washed with 10 mL of water, dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated to give 0.512 g of the free bases as a white foam.
Do roztoku 0,512 g voľných báz v 5 ml etylacetátu sa pri teplote 0 °C pridá 0,2 ml nasýteného roztoku kyseliny chlorovodíkovej v etylacetáte a 1,5 hodiny sa mieša. Biela zrazenina sa oddelí filtráciou pod dusíkom, premyje sa éterom a suší sa za vzniku 0,50 g výslednej zlúčeniny ako biela tuhá látka.To a solution of 0.512 g of the free bases in 5 ml of ethyl acetate at 0 ° C was added 0.2 ml of a saturated solution of hydrochloric acid in ethyl acetate and stirred for 1.5 hours. The white precipitate was collected by filtration under nitrogen, washed with ether, and dried to give 0.50 g of the title compound as a white solid.
1H NMR (400 MHz, CD3OD): zlúčenina je zmesou rotamérov v pomere 3:2, δ 7,40 - 7,28 (m, 4H), 7,25 - 7,17 (m, 2H), 7,08 (t, 1/3H), 7,00 (t, 1/3H), 6,80 (d, 1/3H), 5,16 (ddd, 1H), 4,60 - 4,42 (m, 3H), 4,05 (t, 1H), 3,90 (bs, 2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,30 - 3,15 (m, 1H), 2,97 (s, 1H), 2,95 (s, 2H), 2,90 - 2,78 (m, 1H), 1,96 (t, 1/3H), 1,85 - 1,65 (m, 4H), 1,63 (s, 2H), 1,60 (s, 4H). 1 H NMR (400 MHz, CD 3 OD): the compound is a 3: 2 mixture of rotamers, δ 7.40-7.28 (m, 4H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7 Δ 08 (t, 1 / 3H), 7.00 (t, 1 / 3H), 6.80 (d, 1 / 3H), 5.16 (ddd, 1H), 4.60 - 4.42 (m 3H), 4.05 (t, 1H), 3.90 (bs, 2H), 3.83-3.70 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 1H), 2, 97 (s, 1H), 2.95 (s, 2H), 2.90-2.78 (m, 1H), 1.96 (t, 1 / 3H), 1.85-1.65 (m, 4H), 1.63 (s, 2H), 1.60 (s, 4H).
-30Príklad 2-30Example 2
N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidN- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2- amino-2-methylpropanamide
Časť A: alylester kyseliny (2R)-[[[2-(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-2,2-dimetyl1-oxoetyl]amino-2-(fenylmetoxy)etylPart A: (2R) - [[[2- (1,1-Dimethylethoxy) carbonyl] amino] -2,2-dimethyl-1-oxoethyl] amino-2- (phenylmethoxy) ethyl ester
Výsledná zlúčenina sa pripraví z (2R)-2-[(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino3-(fenylmetyloxy)etyl-propánovej kyseliny a alylalkoholu väzbovou feakciou v metylénchloride za prítomnosti EDC a DMAP.The resulting compound is prepared from (2R) -2 - [(1,1-dimethylethoxy) carbonyl] amino-3- (phenylmethyloxy) ethyl-propanoic acid and allyl alcohol by coupling reaction in methylene chloride in the presence of EDC and DMAP.
1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,25 (s, 5H), 5,8 (m, 1H), 5,2 (dd, 2H), 5,0 (bs, 1H), 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3 ) δ 7.25 (s, 5H), 5.8 (m, 1H), 5.2 (dd, 2H), 5.0 (bs, 1H),
4.7 (m, 1H), 4,6 (m, 2H), 4,4 (dd, 2H), 3,9 (dd, 1H), 3,6 (dd, 1H), 1,45 (d, 6H), 1,39 (s, 9H).4.7 (m, 1H), 4.6 (m, 2H), 4.4 (dd, 2H), 3.9 (dd, 1H), 3.6 (dd, 1H), 1.45 (d, 6H) 1.39 (s, 9H).
Časť B: (2R)-[[[2-(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-2,2-dimetyl-1-oxoetyl]amino-2(fenylmetoxy)etyl]-1 -propánová kyselinaPart B: (2R) - [[[2- (1,1-dimethylethoxy) carbonyl] amino] -2,2-dimethyl-1-oxoethyl] amino-2 (phenylmethoxy) ethyl] -1-propanoic acid
Do miešaného roztoku 6,7 g (15,9 mmol) surového medziproduktu časti A,To a stirred solution of 6.7 g (15.9 mmol) of the crude intermediate part A,
1.8 g (0,1 ekvivalentu) tetrakis(trifenylfosfín)paládia a 1,25 g (0,3 ekvivalenty) trifenylfosfínu sa pridá 35 ml 0,5M roztoku 2-etylhexanoátu draselného v etylacetáte. Reakčná zmes sa 1 hodinu mieša pri teplote miestnosti v atmosfére dusíka a potom sa zriedi 100 ml éteru a vleje sa do ľadovej vody. Organický podiel sa oddelí a vodný podiel sa okyslí pridaním 20% roztoku kyseliny citrónovej. Po extrakcii etylacetátom sa extrakty premyjú nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú sa a odparujú za vzniku výslednej zlúčeniny ako tuhej látky.1.8 g (0.1 equivalents) of tetrakis (triphenylphosphine) palladium and 1.25 g (0.3 equivalents) of triphenylphosphine are added 35 ml of a 0.5 M solution of potassium 2-ethylhexanoate in ethyl acetate. The reaction mixture was stirred at room temperature under nitrogen for 1 hour and then diluted with 100 mL of ether and poured into ice water. The organic portion was separated and the aqueous portion was acidified by the addition of 20% citric acid solution. After extraction with ethyl acetate, the extracts were washed with saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated to give the title compound as a solid.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,3 (s, 5H), 4,7 (m, 1H), 4,5 (s, 2H), 4,0 (m, 1H), 3,6 (m, 1H), 1,4 (d, 6H), 1,3 (s, 9H). 1 H NMR (400 MHz, CD 3 OD) δ 7.3 (s, 5H), 4.7 (m, 1H), 4.5 (s, 2H), 4.0 (m, 1H), 3, Δ (m, 1H), 1.4 (d, 6H), 1.3 (s, 9H).
-31 Časť C: N-[1-(R)-[(1>2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-1‘yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-(1,1 -dimetyl-etoxy)karbonyl]amino-2-metyl-propánamid-31 Part C: N- [1 (R) - [(1> 2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2- (1,1-dimethyl-ethoxy) carbonyl] amino-2-methyl-propanamide
Do reakčného roztoku 1,0 g (3,44 mmol) 1-metánsulfonylspiro[indolín-3,4'piperidín]hydrochloridu, 1,44 g (3,78 mmol) (2R)-[[2-(1,1-dimetyletoxy)karbo-nyl)amino]-2,2-dimetyl-1-oxoetyl]amino-2-(fenylmetyloxy)etyl]-1-propánovej kyseliny, 0,58 ml (5,20 mmol) N-metylmorfolínu a 0,58 g (3,78 mmol) 1-hydroxybenzotriazolu (HOBT) v 50 ml dichlórmetánu sa pridá 1,03 g (5,20 mmol) EDC a reakčná zmes sa 16 hodín mieša pri teplote miestnosti. Zmes sa zriedi 50 ml dichlórmetánu a premyje sa 50 ml vodného roztoku uhličitanu sodného, suší sa nad bezvodým síranom horečnatým, filtruje sa a zahustí. Vytvorený zvyšok sa po absorpcii na 50 g silikagélu čistí rýchlou chromatografiou za vzniku 2,148 g bezfarebnej peny výslednej zlúčeniny s výťažkom 90 %.To the reaction solution, 1.0 g (3.44 mmol) of 1-methanesulfonylspiro [indoline-3,4'-piperidine] hydrochloride, 1.44 g (3.78 mmol) of (2R) - [[2- (1,1- dimethylethoxy) carbonyl) amino] -2,2-dimethyl-1-oxoethyl] amino-2- (phenylmethyloxy) ethyl] -1-propanoic acid, 0.58 ml (5.20 mmol) of N-methylmorpholine and 0, 58 g (3.78 mmol) of 1-hydroxybenzotriazole (HOBT) in 50 ml of dichloromethane were added with 1.03 g (5.20 mmol) of EDC and the reaction mixture was stirred at room temperature for 16 hours. The mixture was diluted with 50 mL of dichloromethane and washed with 50 mL of aqueous sodium carbonate solution, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and concentrated. The residue was purified by flash chromatography to give 2.148 g of the title compound as a colorless foam (90% yield).
1H NMR (400 MHz, CDCb) zlúčenina je zmesou rotamérov v pomere 3:2, δ 7,40 7,10 (m, 6H), 7,06 (d, 1/3H), 7,02 (t, 1/3H), 6,90 (t, 1/3H), 6,55 (d, 1/3H), 5,15 (m, 1H), 4,95 (bs, 1H), 4,63 (bd, 1/3H), 4,57 - 4,40 (m, 2 2/3H), 4,10 (bd, 1/3H), 4,00 (bd, 1/3H), 3,82 (t, 1H), 3,78 - 3,62 (m, 2H), 3,60 - 3,50 (m, 1H), 3,04 (q, 1H), 2,87 (s, 1H), 2,86 (s, 2H), 2,80 - 2,60 (m, 1H), 1,90 (bs, 1H), 2,85 - 2,75 (m, 1H), 1,82 1,60 (m, 3H), 1,55- 1,45 (m, 1 H), 1,45 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,39 (s, 9H). 1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) compound is a 3: 2 mixture of rotamers, δ 7.40 7.10 (m, 6H), 7.06 (d, 1 / 3H), 7.02 (t, 1) (3H), 6.90 (t, 1 / 3H), 6.55 (d, 1 / 3H), 5.15 (m, 1H), 4.95 (bs, 1H), 4.63 (bd, 1 / 3H), 4.57-4.40 (m, 2 / 3H), 4.10 (bd, 1 / 3H), 4.00 (bd, 1 / 3H), 3.82 (t, 1H 3.78-3.62 (m, 2H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.04 (q, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.86 ( s, 2H), 2.80-2.60 (m, 1H), 1.90 (bs, 1H), 2.85-2.75 (m, 1H), 1.82 1.60 (m, 3H) ), 1.55-1.45 (m, 1H), 1.45 (s, 4H), 1.42 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Časť D: N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-pÍperÍdín]-1‘yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidhydrochloridPart D: N- [1- (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] 2-amino-2-methylpropanamide hydrochloride
Do roztoku 2,148 g (3,41 mmol) medziproduktu časti C v 10 ml dichlórmetánu sa pridá 5 ml kyseliny trifluóroctovej. Zmes sa 1 hodinu mieša, zahustí sa a premení na bázické pH pridaním 100 ml 5% vodného roztoku uhličitanu sodného a trikrát sa extrahuje 50 ml dichlórmetánu. Zlúčené organické extrakty sa premyjú 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, sušia sa nad bezvodým uhličitanom draselným, filtruje sa a zahustí za vzniku bezfarebnej peny.To a solution of intermediate Part C intermediate (2.148 g, 3.41 mmol) in dichloromethane (10 mL) was added trifluoroacetic acid (5 mL). The mixture was stirred for 1 hour, concentrated and basified by addition of 100 ml of 5% aqueous sodium carbonate solution and extracted three times with 50 ml of dichloromethane. The combined organic extracts were washed with 50 ml of saturated sodium chloride solution, dried over anhydrous potassium carbonate, filtered and concentrated to give a colorless foam.
-32Do roztoku tejto peny v 25 ml etylacetátu sa pri teplote 0 °C pridajú 4 ml 1M roztoku kyseliny chlorovodíkovej v etylacetáte. Zrazenina sa oddelí filtráciou, premyje sa najskôr etylacetátom a následnej zmesou etylacetátu a éteru v pomere 1:1 za vzniku 1,79 g bezfarebnej tuhej látky výslednej zlúčeniny s výťažkom 93 %. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) zlúčenina je zmesou rotamérov v pomere 3:2, δ 7,40 7,28 (m, 4H), 7,25 - 7,17 (m, 2H), 7,08 (t, 1/3H), 7,00 (t, 1/3H), 6,80 (d, 1/3H), 5,16 (ddd, 1H), 4,60 - 4,42 (m, 3H), 4,05 (t, 1H), 3,90 (bs, 2H), 3,83 - 3,70 (m, 2H), 3,30 - 3,15 (m, 1H), 2,97 (s, 1H), 2,95 (s, 2H), 2,90 - 2,78 (m, 1H), 1,96 (t, 1/3H), 1,85 1,65 (m, 4H), 1,63 (s, 2H), 1,60 (s, 4H).To a solution of this foam in 25 mL of ethyl acetate, 4 mL of a 1M solution of hydrochloric acid in ethyl acetate was added at 0 ° C. The precipitate was collected by filtration, washed first with ethyl acetate followed by a 1: 1 mixture of ethyl acetate and ether to give the title compound as a colorless solid (1.79 g, 93%). 1 H NMR (400 MHz, CD 3 OD) compound is a 3: 2 mixture of rotamers, δ 7.40 7.28 (m, 4H), 7.25-7.17 (m, 2H), 7.08 (t, 1 / 3H), 7.00 (t, 1 / 3H), 6.80 (d, 1 / 3H), 5.16 (ddd, 1H), 4.60-4.42 (m, 3H) 4.05 (t, 1H), 3.90 (bs, 2H), 3.83-3.70 (m, 2H), 3.30-3.15 (m, 1H), 2.97 ( s, 1H), 2.95 (s, 2H), 2.90-2.78 (m, 1H), 1.96 (t, 1 / 3H), 1.85 1.65 (m, 4H), 1.63 (s, 2H); 1.60 (s, 4H).
Príklad 3Example 3
N-[1-(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4‘-piperidín]-1‘-yl)karbonyl]2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmesylátN- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2- amino-2-metylpropánamidmesylát
Výsledná zlúčenina sa pripraví pôsobením kyseliny metánsulfónovej na voľnej báze výslednej zlúčeniny časti D príkladu 5. Po kryštalizácii zo zmesi etylacetátu a etanolu a vody vznikne produkt s teplotou topenia 166 až 168 °C. Ide o polymorfnú formu II, ktorá sa určovala difrakciou RTG žiarenia na práškovom materiáli s hlavnými ohybmi pri 4,7, 11,6, 17,4, 19,2 a 21,6° (2 teta). Ďalej sa určovala diferenciálna kalorimetria pri stúpaní teploty o 10 °C/minútu v otvorenej nádobe pod dusíkom. Bolo možné pozorovať jedinú endotermickú krivku s vrcholom pri teplote okolo 174 °C a extrapolovaný začiatok teploty topenia okolo 165 °C so spotrebou tepla približne 37 J/g.The title compound was prepared by treatment with methanesulfonic acid on the free base of the title compound of Part D of Example 5. Crystallization from ethyl acetate / ethanol / water gave the product, m.p. 166-168 ° C. It is a polymorphic form II which was determined by X-ray diffraction on a powder material with major bends at 4.7, 11.6, 17.4, 19.2 and 21.6 ° (2 aunt). Further, differential calorimetry was determined at a temperature rise of 10 ° C / minute in an open vessel under nitrogen. A single endothermic curve with a peak at about 174 ° C and an extrapolated melting onset of about 165 ° C with a heat consumption of about 37 J / g could be observed.
Príklad 4Example 4
OBn .N (3)OBn .N (2)
CO2HCO 2 H
-33N-benzylkarbamát kyseliny izonipekotínovej (3)Isonipecotinic acid -33N-benzylcarbamate (3)
Východiskové zlúčeniny: izonipekotínová kyselina (2) T.C.I. benzylchloroformát (Schweitzerhall) uhličitan draselný vodaStarting compounds: isonipecotinic acid (2) T.C.I. benzyl chloroformate (Schweitzerhall) potassium carbonate water
4,02 kg (31,1 mol) 6,91 kg (40,5 mol)4.02 kg (31.1 mol) 6.91 kg (40.5 mol)
10.1 kg (72,9 mol)10.1 kg (72.9 mol)
40.2 i40.2 i
V 100 I nádobe so štyrmi hrdlami, mechanickým miešadlom a v atmosfére dusíka sa rozpustí v 40,2 I vody kyselina izonipekotínová (2) a uhliičtan draselný a roztok sa ochladí na teplotu 10 °C. Počas pridávania benzylchlórformátu sa teplota reakčnej zmesi udržuje v rozmedzí 9 až 14 °C. PO skončení adície sa reakčná zmes zohreje na teplotu 22 °C a 58 hodín sa nechá stáť. Adícia sa ukončí po 4 hodinách pri pH 9,0. Po 58 hodinách státia nedošlo k zmene pH.Dissolve isonipecotinic acid (2) and potassium carbonate in 40.2 L of water in a 100 L four-necked flask with mechanical stirrer and nitrogen atmosphere and cool to 10 ° C. The temperature of the reaction mixture is maintained at 9-14 ° C during the addition of the benzyl chloroformate. After the addition was complete, the reaction mixture was warmed to 22 ° C and allowed to stand for 58 hours. Addition is terminated after 4 hours at pH 9.0. There was no change in pH after 58 hours.
Reakčná zmes sa prenesie do extrakčného zariadenia s objemom 200 I, premyje sa trikrát 13 kg (15 I) izopropylacetátu (IPCA) a raz 12 I etylacetátu. Vodný podiel sa extrahuje 8 I toluénu. Podľa HPLC analýzy sa po premytí obsah benzylalkoholu zníži z 3,8 % na 1,4 %.The reaction mixture was transferred to a 200 L extraction apparatus, washed three times with 13 kg (15 L) isopropyl acetate (IPCA) and once with 12 L ethyl acetate. The aqueous portion was extracted with 8 L of toluene. According to HPLC analysis, the benzyl alcohol content was reduced from 3.8% to 1.4% after washing.
Analytická HPLC: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8, rýchlosť prietoku 1,5 ml/minútu, detekcia pri 254 nm, izokratická elučné zmes obsahujúca 35 % metylkyanidu MeCN a 65 % 0,1% vodného roztoku kyseliny trihydrogénfosforečnej, doba retencie: (3) = 6,9 minút, benzylakohol = 3,3 minúty, toluén = 17,3 minút.Analytical HPLC: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column, flow rate 1.5 ml / min, detection at 254 nm, isocratic elution mixture containing 35% MeCN methyl cyanide and 65% 0.1% aqueous phosphoric acid, retention time: (3) = 6.9 minutes, benzyl alcohol = 3.3 minutes, toluene = 17.3 minutes.
Vodný podiel sa okyslí na pH 1,8 pridaním 37% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej, čo vyvolá vývoj oxidu uhličitého, ktorý je ľahké udržať pod kontrolou. Pridávanie kyseliny chlorovodíkovej trvalo menej ako 1 hodinu a vyžaduje 10 I koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej. Vodný podiel sa trikrát extrahuje 6,6 I toluénu, extrakty sa sušia s 2 kg síranu sodného a filtrujú sa cez vrstvu Solka-floc™. Zlúčené filtráty majú hmotnosť 17,8 kg. Odparovaním dosucha vážených podielov filtrátu vznikne 7,89 kg surového karbamátu (3) s výťažkom 97 %. Filtráty sa po filtrácii cez zabudovaný filter s veľkosťou otvorov 10 μιτι umiestnia do 100 I nádoby. Extrakty sa pri teplote menšej ako 25 °C zahustia pri tlakuThe aqueous portion was acidified to pH 1.8 by the addition of a 37% aqueous hydrochloric acid solution, causing the development of carbon dioxide which is easy to keep under control. The addition of hydrochloric acid took less than 1 hour and required 10 L of concentrated hydrochloric acid. Extract the aqueous portion three times with 6.6 L of toluene, dry the extracts with 2 kg of sodium sulfate, and filter through a pad of Solka-floc ™. The combined filtrates weighed 17.8 kg. Evaporation to dry weight of the filtrate yielded 7.89 kg of crude carbamate (3) in a yield of 97%. The filtrates are placed in a 100 L container after filtration through a built-in 10 μιτι orifice filter. The extracts are concentrated under pressure at less than 25 ° C
-341000 Pa na objem 18 I. Výsledná koncentrácia karbamátu 3 je 440 g/l. Koncentrácia toluenového filtrátu slúži na azeotropické odstránenie posledných stôp vody (konečný KF = 170 mg/ml). Výsledný produkt je na 99,1 % čistý, obsahuje 0,9 % plochy pod krivkou benzylalkoholu ako jedinú prítomnú nečistotu.The final concentration of carbamate 3 is 440 g / l. The toluene filtrate concentration serves to azeotropically remove the last traces of water (final KF = 170 mg / ml). The resulting product is 99.1% pure, containing 0.9% of the area under the benzyl alcohol curve as the only impurity present.
Príklad 5Example 5
COCICOCI
Chlorid-N-benzylkarbamát izonipekotínovej kyseliny (4)Isonipecotinic acid chloride N-benzylcarbamate (4)
Východiskové zlúčeniny:Starting compounds:
N-benzylkarbamát izonipekotínovej kyseliny (3) v toluéne (molekulová hmotnosť = 263,3) oxalylchlorid (molekulová hmotnosť = 126,93)Isonipecotinic acid N-benzylcarbamate (3) in toluene (MW = 263.3) oxalyl chloride (MW = 126.93)
Ν,Ν-dimetylformamid (molekulová hmotnosť = 73,10)10 ml toluén 12 1Ν, Ν-dimethylformamide (MW = 73.10) 10 ml toluene 12 L
7,89 kg (30,0 mol) v 17,917.89 kg (30.0 mol) in 17.91
3,94 kg (31,0 mol)3.94 kg (31.0 mol)
Do roztoku výsledného benzylkarbamátu (3) z predchádzajúceho príkladu v toluéne sa pridá 5 ml Ν,Ν-dimetylformamidu a 10 I toluénu. Počas 20 minút sa pridá oxalylchlorid a reakčná zmes sa nechá 16 hodín stáť pri teplote 18 °C v pomalom prúde dusíka. Následná HPLC analýza dokázala 1,3 % nespracovanej kyseliny karboxylovej (3). Reakčná zmes sa zohreje na 26 °C, pridá sa 5 ml Ν,Νdimetylformamidu a zmes sa nechá 2,5 hodiny stáť. Reakcia 1,0 ml podielu reakčnej zmesi sa ukončí pridaním 5,0 ml terc.butylamínu a analyzuje sa po odparovaní pomocou HPLC.To a solution of the resulting benzyl carbamate (3) from the previous example in toluene was added 5 mL of Ν, Ν-dimethylformamide and 10 L of toluene. Oxalyl chloride was added over 20 minutes and the reaction was allowed to stand at 18 ° C for 16 hours under a slow stream of nitrogen. Subsequent HPLC analysis showed 1.3% of untreated carboxylic acid (3). The reaction mixture is warmed to 26 ° C, 5 ml of Ν, im-dimethylformamide are added and the mixture is allowed to stand for 2.5 hours. Reaction of 1.0 mL aliquots of reaction mixture was quenched by addition of 5.0 mL of t-butylamine and analyzed after evaporation by HPLC.
Analytická HPLC: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8, teplota 50 °C, rýchlosť prietoku 1 ml/minútu, detekcia pri 220 nm, izokratická elučná zmesAnalytical HPLC: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column, 50 ° C, flow rate 1 ml / min, detection at 220 nm, isocratic elution mixture
-35obsahujúca 42 % metylkyanidu (MeCN) a 58 %, 0,1% vodného roztoku kyseliny trihydrogén-fosforečnej.-35Containing 42% methyl cyanide (MeCN) and 58%, 0.1% aqueous trihydrogen phosphoric acid.
Týmto postupom sa dokáže pretrvávanie menej ako 0,05 % kyseliny (3) vzorec A a viac ako 3 % plochy pod krivkou zlúčeniny vzorca B (viac ako 1 molárne % (COCI2).This procedure demonstrates the persistence of less than 0.05% acid (3) of formula A and more than 3% of the area under the curve of the compound of formula B (more than 1 mole% (COCl 2 )).
NN
OBnOBn
0^ NH-t-BuO-NH-t-Bu
Y O NH-t-BuY 0 NH-t-Bu
CONH-t-Bu (A) (B)CONH-t-Bu (B)
Na odstránenie 5 I rozpúšťadla sa reakčná zmes zahustí pri tlaku 1000 Pa a teplote 20 až 25 °C.To remove 5 L of solvent, the reaction mixture was concentrated at a pressure of 1000 Pa and a temperature of 20-25 ° C.
Typický HPLC výsledok roztoku koncentrovaného toluénu po ukončení reakcie terc.butylamínom:Typical HPLC result of concentrated toluene solution after reaction with t-butylamine:
Príklad 6Example 6
CHOCHO
-36Piperidíη-4-karboxaIdehyd-1 -benzylkarbamát (5)-36Piperidine-4-carboxaldehyde-1-benzylcarbamate (5)
Východiskové zlúčeniny:Starting compounds:
N-benzylkarbamát izonikopekotínovej kyseliny (4) 3,38 kg (12,0 mol) v toluéne (molekulová hmotnosť = 281,74) v 5,54 kgIsonicotecotinic acid N-benzylcarbamate (4) 3.38 kg (12.0 mol) in toluene (MW = 281.74) in 5.54 kg
DIEA (KF = 18 mg/l)DIEA (KF = 18 mg / l)
10% Pd/C (KF <20 mg/g)10% Pd / C (KF <20mg / g)
1,55 kg (15,0 mol) 101 g tioanizol (molekulová hmotnosť = 124,21, d = 1,058) 0,56 g1.55 kg (15.0 mol) 101 g thioanisole (molecular weight = 124.21, d = 1.058) 0.56 g
Do roztoku zlúčeniny (4) v toluéne sa pridá DIEA a tioanizol a v tejto zmesi sa uvedie do suspenzie katalyzátor. Reakčná zmes sa ihneď umiestni do autoklávu s objemom 19 1a hydrogenuje sa pri teplote 20 °C a tlaku vodíka 2800 kPa. Počas 18 hodín sa reakcia spracuje 70 % teoretického množstva vodíka. Podiel zmesi, v ktorej je reakcia pridaním terc.butylamínu ukončená, sa sleduje analytickou HPLC, ktorá dokáže 14,2 % plochy pod krivkou prítomnosti kyslého chloridu (2). Podmienky pre HPLC zodpovedajú vyššie uvedeným podmienkam. Doba retencie: (5) = 8,1 minút.DIEA and thioanisole are added to a solution of compound (4) in toluene and the catalyst is suspended in this mixture. The reaction mixture is immediately placed in a 19 L autoclave and hydrogenated at 20 ° C and a hydrogen pressure of 2800 kPa. Within 18 hours, the reaction was treated with 70% of the theoretical amount of hydrogen. The proportion of the mixture in which the reaction was terminated by the addition of tert-butylamine was monitored by analytical HPLC, which showed 14.2% of the area under the acid chloride curve (2). The HPLC conditions correspond to the above conditions. Retention time: (δ) = 8.1 minutes.
Do hydrogenačného zariadenia sa pridá podobná suspenzia 101 g katalyzátora a 0,54 g tioanizolu v 1375 ml toluénu. Po 23 hodinách hydrogenácie sa uskutoční HPLC analýza podielu, v ktorom bola reakcia skončená pridaním terc.butylamínu. Podľa HPLC zostáva 1,8 % plochy pod krivkou kyslého chloridu (2). Reakčná zmes sa prebubiáva dusíkom a katalyzátor a zrazenina DIEA.HCI sa odstráni filtráciou Solka-floc™. Filtračný koláč sa premyje 10 I toluénu. Filtráty sa cez zabudovaný filter s veľkosťou otvorov 10 μιη premiestnia do extrakčného zariadenia s objemom 50 I a dvakrát sa premyjú 7,2 I 1M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a dvakrát 7,2 I vody. Reakčná zmes sa pri 1000 Pa a teplote 25 až 30 °C zahusti na zvyšok s objemom 5 I.A similar suspension of 101 g of catalyst and 0.54 g of thioanisole in 1375 ml of toluene is added to the hydrogenation apparatus. After 23 hours of hydrogenation, HPLC analysis of the portion at which the reaction was terminated by addition of t-butylamine. According to HPLC, 1.8% of the area under the acid chloride curve (2) remains. The reaction mixture was purged with nitrogen and the catalyst and the DIEA.HCl precipitate were removed by Solka-floc ™ filtration. The filter cake was washed with 10 L of toluene. The filtrates are transferred to a 50 L extraction apparatus through a 10 µm orifice filter and washed twice with 7.2 L of a 1M aqueous hydrochloric acid solution and twice with 7.2 L of water. The reaction mixture was concentrated to a 5 L residue at 1000 Pa at 25-30 ° C.
zlúčenina doba retencie (min) % plochy pod krivkou karboxylová kyselina (3) 2,1 <2 dimér(21) 6,6 <1 aldehyd (5) 8,1 >95compound retention time (min)% area under the curve carboxylic acid (3) 2.1 <2 dimer (21) 6.6 <1 aldehyde (5) 8.1> 95
-37Podľa HPLC je výťažok aldehydu (3) 94 %.According to HPLC, the yield of aldehyde (3) is 94%.
Príklad 7Example 7
(9)(9)
CBZ-spiroindolín (9)CBZ-spiroindoline (9)
Východiskové zlúčeniny: piperidín-4-karboxaldehyd-1-benzyl karbamát (5) v toluéne fenylhydrazín trifluóroctová kyselina (TFA) hydroborát sodný (NaBH4) toluén metylkyanid metanolStarting compounds: piperidine-4-carboxaldehyde-1-benzyl carbamate (5) in toluene phenylhydrazine trifluoroacetic acid (TFA) sodium borohydride (NaBH 4 ) toluene methyl cyanide methanol
1,71 kg (6,89 mol) v 21,4 kg1.71 kg (6.89 mol) in 21.4 kg
900 ml, 981 g (9,15 mol) 2,20 I, 3,26 kg (28,6 mol) 300 g (7,93 mol)900 ml, 981 g (9.15 mol) 2.20 l, 3.26 kg (28.6 mol) 300 g (7.93 mol)
34,4 kg34.4 kg
7,0 i7.0 i
7,0 I7.0 I
Roztok surového aldehydu (5) z predchádzajúcej časti sa cez filter s veľkosťou otvorov 10 pm premiestni do reakčnej nádoby s objemom 100 I, vybavenej medenou manžetou pokrytou teflonom na ochladenie alebo ohrievanie a mechanickým miešadlom. Po pridaní 34,4 kg toluénu a 7 I metylkyanidu sa vytvorený reakčný roztok ochladí na teplotu 0 °C. Po častiach sa pridá fenylhydrazín a počas nepretržitého prebublávania dusíkom sa teplota reakčnej zmesi udržuje v rozmedzí -1 až 3 °C.The crude aldehyde solution (5) from the previous section was transferred through a 10 µm filter into a 100 L reaction vessel equipped with a Teflon-coated copper sleeve for cooling or heating and a mechanical stirrer. After addition of 34.4 kg of toluene and 7 L of methyl cyanide, the reaction solution formed is cooled to 0 ° C. Phenylhydrazine is added in portions and the temperature of the reaction mixture is maintained at -1 to 3 ° C during continuous nitrogen bubbling.
Fenylhydrazín sa pridáva tak dlho, pokiaľ TLC a HPLC neukazuje úplné spotrebovávanie aldehydu (5) a malý prebytok (<5%) fenylhydrazínu.Phenylhydrazine is added until TLC and HPLC shows complete consumption of aldehyde (5) and a small excess (<5%) of phenylhydrazine.
-38Podmienky TLC: ocňxid kremičitý, E. Merck Kieselgel G60 F254 0,25 mm; dietyléter/penát (4/1); vyvíjacia zmes: 0,5% sulfát cernatý, 14% molybdenan amňonny v 10% vodnom roztoku kyseliny sírovej s následným zahrievaním; Rf: aldehyd (5) = 0,52, fenylhydrazón (7) = 0,61, fenylhydrazín (6) = 0,21. HPLC podmienky: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8 pri teplote 30 °C, rýchlosť prietoku 1,0 ml/minútu, detekcia pri 254 nm; prehľad gradientov koncentrácií elučnej zmesi:-38TLC Conditions: Silica Ocetic, E. Merck Kieselgel G60 F254 0.25 mm; diethyl ether / penate (4/1); developing mixture: 0.5% cerium sulfate, 14% ammonium molybdate in 10% aqueous sulfuric acid followed by heating; Rf: aldehyde (5) = 0.52, phenylhydrazone (7) = 0.61, phenylhydrazine (6) = 0.21. HPLC conditions: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column at 30 ° C, flow rate 1.0 mL / min, detection at 254 nm; Overview of gradient elution mixtures:
doba retencie: fenylhydrazín (6) = 4,5 minút, toluén = 7,2 minút, fenylhydrazón (7) = 11,4 minút.retention time: phenylhydrazine (6) = 4.5 minutes, toluene = 7.2 minutes, phenylhydrazone (7) = 11.4 minutes.
Reakčná zmes sa nechá 30 minút stáť pri teplote 0 až 2 °C a pri zachovaní teploty v rozmedzí 2 až 7 °C sa pridá kyselina trifluóroctová. Reakčná zmes sa zohreje počas 30 minút na teplotu 50 °C, ktorá sa udržuje 17 hodín. Prebublávanie dusíkom reakčnej zmesi sa zastaví a udržuje sa len pomalý prúd dusíka. Farba počas prvej hodiny pri teplote 5 °C postupne tmavne na tmavozelenú. Vytvorí sa relatívne malé množstvo bielej kryštalickej zrazeniny (trifluóracetát amónny). Po 17 hodinách dokáže HPLC, ktorej podmienky zodpovedajú vyššie uvedeným, že reakčná zmes obsahuje 91,6 % plochy pod krivkou indolenínu a 1,5 % nespracovaného fenylhydrazónu. Státím zmesi počas dlhšieho časového obdobia sa nezvýši výťažok indolenínu (8).The reaction mixture was allowed to stand for 30 minutes at 0-2 ° C and trifluoroacetic acid was added while maintaining the temperature at 2-7 ° C. The reaction mixture is heated to 50 ° C for 30 minutes, which is maintained for 17 hours. The nitrogen bubbling of the reaction mixture was stopped and only a slow stream of nitrogen was maintained. The color gradually darkens to dark green over the first hour at 5 ° C. A relatively small amount of white crystalline precipitate (ammonium trifluoroacetate) was formed. After 17 hours, HPLC conditions corresponding to the above indicated that the reaction mixture contained 91.6 area% under indolenine curve and 1.5% raw phenylhydrazone. Standing the mixture over a longer period of time does not increase the indolenine yield (8).
Po ochladení reakčnej zmesi na 12 °C sa pridá 7,0 I metanolu. Po častiach menších ako 20 g sa pridá hydroborát sodný tak, aby sa teplota udržala pod 15 °C. Táto adícia prebieha 30 minút, V jej priebehu sa objavil mierny vývoj vodíka, ktorý sa ľahko kontroluje. Počas adície nedošlo k peneniu. Ku koncu adície sa farba rýchlo zmení zo zelenej na hnedú a potom na jasno oranžovú. Oddelí sa malé množstvo (<200 ml) ťažšej fázy (pravdepodobne vodný roztok soli). HPLC analýzou (podmienky vyššie uvedené) sa dokáže spotrebovanie všetkéhoAfter cooling the reaction mixture to 12 ° C, 7.0 L of methanol are added. Sodium borohydride is added in portions of less than 20 g to maintain the temperature below 15 ° C. This addition takes 30 minutes, during which a slight evolution of hydrogen has occurred which is easy to control. No foaming occurred during the addition. Towards the end of the addition, the color quickly changes from green to brown and then bright orange. Separate a small amount (<200 mL) of the heavier phase (probably aqueous salt solution). HPLC analysis (conditions above) shows consumption of everything
-39množstva indolenínu (8) (90,4 % plochy pod krivkou CBZ-indolínu (9)); doba retencie: indolenín (8) = 7,5 minút, indolín (9) = 8,2 minút.-39 amounts of indolenine (8) (90.4% area under the CBZ-indoline curve (9)); retention time: indoline (8) = 7.5 minutes, indoline (9) = 8.2 minutes.
TLC: etyléter ako rozpúšťadlo, škvrna farbiva obsahujúceho sulfát ceritý a melybdenan amónny alebo škvrna 1% anizaldehydu; Rf : indolenín (8) = 0,18, CBZ-indolín (9) = 0,33.TLC: ethyl ether solvent, dye spot containing cerium sulfate and ammonium melybdate, or 1% anisaldehyde spot; Rf: indolenine (8) = 0.18, CBZ-indoline (9) = 0.33.
Ku koncu reakcie dôjde k zmene reakčnej zmesi zo zelenej na oranžovú. Množstvo hydroborátu sodného, ktoré je potrebné na skončenie reakcie, je významne závislé na teplote a na už pridanom množstve. Množstvo a kvalita produktu nie je v konečnom dôsledku týmto ovplyvnená.At the end of the reaction, the reaction mixture changes from green to orange. The amount of sodium borohydride required to complete the reaction is significantly dependent on the temperature and amount already added. Ultimately, the quantity and quality of the product is not affected.
Reakčná zmes sa ochladí na 30 minút na teplotu 5 °C, pridá sa 8 I 3% vodného roztoku hydroxidu amónneho, čím sa privedie pH vodného podielu na pH 7,4. Zmes sa mieša a potom sa nechá usadiť, teplota sa zvýši na 15 °C a oddelí sa žlto zakalený spodný vodný podiel. Organický podiel sa premyje raz 4 I 3% vodného roztoku hydroxidu amónneho, dvakrát 4 I vody a dvakrát 4 I nasýteného roztoku chloridu sodného. Po premytí vzniklo 53,5 kg organického podielu s výťažkom 94 %.The reaction mixture was cooled to 5 ° C for 30 minutes, 8 L of a 3% aqueous ammonium hydroxide solution was added to bring the pH of the aqueous portion to pH 7.4. The mixture was stirred and then allowed to settle, the temperature was raised to 15 ° C and the yellow-cloudy lower aqueous portion was separated. The organic portion was washed once with 4 L of a 3% aqueous ammonium hydroxide solution, twice with 4 L of water and twice with 4 L of saturated sodium chloride solution. After washing, 53.5 kg of organic fraction were obtained with a yield of 94%.
Premytý toluénový roztok sa zlúči s premytými organickými podielmi dvoch ďalších podobne vedených reakcií. Celkové množstvo aldehydu použité v troch reakciách je 5,06 kg (20,5 mol). Celková hmotnosť CBZ-indolínu (9) zo zlúčených organických podielov je 5,91 kg (18,3 mol) s výťažkom 90 %. Zlúčené organické podiely sa sušia s 5 kg síranu sodného, 30 minút sa na ne pôsobí 250 g aktívneho uhlia zn. Darco G60 a filtrujú sa cez Solka-floc™. Filtráty sa zahustia vo vákuu pri tlaku 1000 Pa a teplote menšej ako 25 °C takmer dosucha. Výmena rozpúšťadla sa uskutoční pomalým vliatím do 30 I izopropylacetátu a zahustením na objem 14 I pri tlaku 2000 Pa a teplote 50 až 60 °C. Zmes sa zahrieva do teploty refluxu za vzniku číreho homogénneho tmavooranžového roztoku. Po výmene rozpúšťadla tento roztok podľa 1H NMR obsahuje približne 6 % molárnych zvyškového toluénu.The washed toluene solution was combined with the washed organic portions of two other similarly conducted reactions. The total amount of aldehyde used in the three reactions is 5.06 kg (20.5 mol). The total weight of CBZ-indoline (9) from the combined organic fractions was 5.91 kg (18.3 mol) with a yield of 90%. The combined organic fractions were dried with 5 kg of sodium sulfate and treated with 250 g of charcoal for 30 minutes. Darco G60 and filtered through Solka-floc ™. The filtrates are concentrated under vacuum to a pressure of 1000 Pa and a temperature of less than 25 ° C almost to dryness. Solvent exchange is accomplished by slowly pouring into 30 L of isopropyl acetate and concentrating to 14 L at 2000 Pa and 50-60 ° C. The mixture was heated to reflux to give a clear, homogeneous dark orange solution. After solvent exchange, this 1 H NMR solution contained approximately 6 mole% residual toluene.
Roztok sa ochladí na 68 °C a naočkuje sa 4 g kryštalického CBZ-indolínu (9). Roztok sa nechá postupne počas 6 hodín ochladiť na teplotu 26 °C a 9 hodín sa nechá stáť pri teplote 20 až 26 °C. Suspenzia sa počas 1 hodiny ochladí na teplotu 2 °C a 1 hodinu sa nechá stáť pri teplote 2 °C. Produkt sa oddelí filtráciou aThe solution is cooled to 68 ° C and seeded with 4 g of crystalline CBZ-indoline (9). The solution was allowed to cool gradually to 26 ° C over 6 hours and allowed to stand at 20-26 ° C for 9 hours. The suspension was cooled to 2 ° C over 1 hour and allowed to stand at 2 ° C for 1 hour. The product is collected by filtration and
-40filtračný koláč sa dvakrát premyje 2 I izopropylacetátu s teplotou 5 °C a dvakrát 2 I MTBE s teplotou 5 °C. Produkt sa suší vo vákuovej peci pri teplote 30 °C a v atmosfére dusíka za vzniku 4,37 kg výslednej zlúčeniny (9) ako svetlej žltohnedej kryštalickej tuhej látky s výťažkom 74 %.The filter cake was washed twice with 2 L of 5 ° C isopropyl acetate and twice with 2 L of 5 ° C MTBE. The product was dried in a vacuum oven at 30 ° C and under nitrogen atmosphere to give 4.37 kg of the title compound (9) as a light yellow-brown crystalline solid in 74% yield.
Podľa HPLC ide o produkt s čistotou 99,5 % plochy pod krivkou. Premývacie podiely a 11 I materskej kvapaliny obsahujú ďalších 1,15 kg (19 %) prosuktu (9) a približne 3 % fenylhydrazidu kyseliny Cbz-izopekotínovej (doba retencie = 4,8 minút).According to HPLC, it is a product with a purity of 99.5% of the area under the curve. The washings and 11 L of mother liquor contain an additional 1.15 kg (19%) of the prodrug (9) and about 3% of Cbz-isopecotinic acid phenylhydrazide (retention time = 4.8 minutes).
Príklad 8Example 8
CBZ-spiroindolín-metánsuIfónamid (1)CBZ-spiroindoline methanesulfonamide (1)
Východiskové zlúčeniny: CBZ-spiroindolín (9) metánsulfonylchlorid trietylamín (KF =151) tetrahydrofurán (KF = 41)Starting compounds: CBZ-spiroindoline (9) methanesulfonyl chloride triethylamine (KF = 151) tetrahydrofuran (KF = 41)
1,69 kg (5,23 mol) 599 g (5,23 mol) 635 g (6,27 mol) 12 I1.69 kg (5.23 mol) 599 g (5.23 mol) 635 g (6.27 mol) 12 L
Nádoba s objemom 22 I sa naplní tuhým CBZ-spiroindolínom (9) a potom sa do tejto nádoby cez filter s veľkosťou otvorov 10 μίτι pridá 11,5 I tetrahydrofurán u a trietylamín. Vytvorí sa homogénny roztok, ktorý sa ochladí na teplotu 0 °C. Pridávací lievik s objemom 1 I sa naplní metánsulfonylchloridom a 500 ml tetrahydrofuránu. Tento roztok sa pridáva do reakčnej zmesi pri zachovaníA 22 L flask was charged with solid CBZ-spiroindoline (9) and then 11.5 L tetrahydrofuran and triethylamine were added to the flask through a 10 µm filter. A homogeneous solution was formed and cooled to 0 ° C. A 1 L addition funnel was charged with methanesulfonyl chloride and 500 mL of tetrahydrofuran. This solution is added to the reaction mixture while maintaining
-41 jej teploty v rozmedzí 0 až 4 °C. Adícia, ktorá prebieha exotermicky, trvá 5 hodín. Počas pridávania sa vytvorí biela zrazenina, pravdepodobne trietylamóniumhydrochlorid. Podľa HPLC analýzy je reakcia skončená po ukončení adície a nie je prítomný žiadny CBZ-spiroindolín (9). Podmienky HPLC: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8, rýchlosť prietoku 1,5 ml/minútu, detekcia pri 254 nm; prehľad gradientov koncentrácií elučnej zmesi:-41 its temperature in the range of 0 to 4 ° C. The addition, which takes place exothermically, takes 5 hours. A white precipitate, probably triethylammonium hydrochloride, is formed during the addition. According to HPLC analysis, the reaction was complete after the addition was complete and no CBZ-spiroindoline (9) was present. HPLC conditions: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column, flow rate 1.5 ml / min, detection at 254 nm; Overview of gradient elution mixtures:
čas (minúty) 0,1% vodný roztok kyseliny trihydrogén-time (minutes) 0.1% aqueous trihydrogen-
doba retencie: (9) = 7,6 minút, (1) = 13,6 minút.retention time: (9) = 7.6 minutes, (1) = 13.6 minutes.
Po skončení adície sa reakčná zmes zohreje na teplotu 18 °C a nechá sa 16 hodín stáť. Porovnaním vzhľadu reakčnej zmesi a výslednou HPLC po skončení adície a po 16 hodinách státia sa došlo k záveru, že nedošlo k žiadnym zmenám. Reakčná zmes sa počas 1 hodiny pomaly premiestni do energicky miešaného roztoku 30 I vody a 200 ml 37% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej umiestneného v 50 I nádobe. Teplota nádoby sa zvýši z 22 °C na 28 °C. produkt sa oddelí ako svetlá žltohnedá gumovitá tuhá látka, ktorá sa zmení na granulárnu tuhú látku. Vodná suspenzia sa ochladí na 22 °C a 1 hodinu sa nechá stáť. Suspenzia sa filtruje a filtračný koláč sa dvakrát premyje 4 I zmesi metanolu a vody v pomere 50 : 50. Podľa HPLC analýzy je prítomných v materskej kvapaline menej ako 0,1 % CBZ-spiroindolín-metánsuIfónamidu (1).Upon completion of the addition, the reaction mixture was warmed to 18 ° C and allowed to stand for 16 hours. Comparing the appearance of the reaction mixture and the resulting HPLC after the addition was complete and after 16 hours of standing, it was concluded that there were no changes. The reaction mixture was slowly transferred to a vigorously stirred solution of 30 L of water and 200 mL of a 37% aqueous hydrochloric acid solution placed in a 50 L flask over 1 hour. The vessel temperature is raised from 22 ° C to 28 ° C. the product separated as a light yellow-brown gummy solid which turned into a granular solid. The aqueous suspension was cooled to 22 ° C and allowed to stand for 1 hour. Filter the slurry and wash the filter cake twice with 4 L of a 50:50 mixture of methanol and water. According to HPLC analysis, less than 0.1% CBZ-spiroindoline methanesulfonamide (1) is present in the mother liquor.
Filtračný koláč sa premyje 4 I zmesi metanolu a vody v pomere 50 : 50, ktorá obsahuje 50 ml 28% vodného roztoku hydroxidu amónneho. Filtračný koláč sa premyje dvakrát 4 I zmesi metanolu a vody v pomere 50 : 50 a tuhá látka sa suší vo vákuovej peci v atmosfére dusíka a pri teplote 50 °C. Vznikne 2,03 kgThe filter cake was washed with 4 L of a 50:50 mixture of methanol and water containing 50 mL of a 28% aqueous ammonium hydroxide solution. The filter cake is washed twice with 4 L of a 50:50 mixture of methanol and water and the solid is dried in a vacuum oven under a nitrogen atmosphere at 50 ° C. 2.03 kg are obtained
-42špinavobieleho prášku výslednej zlúčeniny (1) s výťažkom 97 %. Podľa HPLC analýzy obsahuje tuhá látka 93,7 % plochy pod krivkou výslednej zlúčeniny (1).-42 off-white powder of the title compound (1) in 97% yield. According to HPLC analysis, the solid contained 93.7% area under the curve of the resultant compound (1).
Príklad 9Example 9
(8)(8)
Alternatívny postup izolácie medziproduktu CBZ-spiroindolenínu (8)Alternative procedure for isolation of CBZ-spiroindolenine intermediate (8)
Východiskové zlúčeniny piperidín-4-karboxaldehyd-1-benzyl karbamát (5) fenylhydrazín trifluóroctová kyselina (TFA) metylénchloridStarting compounds piperidine-4-carboxaldehyde-1-benzyl carbamate (5) phenylhydrazine trifluoroacetic acid (TFA) methylene chloride
12,37 g (0,050 mol)12.37 g (0.050 mol)
5,41 g (0,050 mol)5.41 g (0.050 mol)
11,56 ml, 17,10 g (0,150 mol) 500 ml11.56 ml, 17.10 g (0.150 mol) 500 ml
V reakčnej nádobe s objemom 1 I, vybavenej magnetickým miešadlom pokrytým teflonom, sa rozpustí CBZ-aldehyd (5) v dichlórmetáne. Vytvorený roztok sa ochladí na teplotu 0 °C. Kalibrovanou injekčnou striekačkou sa počas 5 minút pridá fenylhydrazín a počas nepretržitého prebublávania dusíkom sa teplota reakčnej zmesi udržuje v rozmedzí -1 až 3 °C.In a 1 L reaction vessel equipped with a Teflon-coated magnetic stirrer, CBZ-aldehyde (5) was dissolved in dichloromethane. The resulting solution was cooled to 0 ° C. Phenylhydrazine is added over 5 minutes via a calibrated syringe and the reaction mixture is maintained at a temperature of -1 to 3 ° C during continuous nitrogen bubbling.
Podľa TLC a HPLC dôjde k úplnému spotrebovaniu aldehydu (5) a vznikne malý prebytok (<2 %) fenylhydrazínu.According to TLC and HPLC, the aldehyde (5) was completely consumed and a small excess (<2%) of phenylhydrazine was formed.
Podmienky TLC: oxid kremičitý, E. Merck Kieselgel G60 F254 0,25 mm; dietyléter/pentán (4/1); vyvíjacia zmes: 0,5 % sulfát cernatý, 14 % molybdenan amónny v 10% vodnom roztoku kyseliny sírovej s následným zahrievaním; Rf : aldehyd (5) = 0,52, fenylhydrazón (7) = 0,61, fenylhydrazín (6) = 0,21.TLC conditions: silica, E. Merck Kieselgel G60 F254 0.25 mm; diethyl ether / pentane (4/1); developing mixture: 0.5% cerium sulfate, 14% ammonium molybdate in 10% aqueous sulfuric acid followed by heating; Rf: aldehyde (5) = 0.52, phenylhydrazone (7) = 0.61, phenylhydrazine (6) = 0.21.
doba retencie: fenylhydrazín (6) = 4,5 minút, toluén = 7,2 minút, fenylhydrazón (7) = 11,4 minúty.retention time: phenylhydrazine (6) = 4.5 minutes, toluene = 7.2 minutes, phenylhydrazone (7) = 11.4 minutes.
Reakčná zmes sa nechá 10 minút stáť pri teplote 0 až 2 °C a pri zachovaní teploty v rozmedzí 2 až 7 °C sa pridá kanylou kyselina trifluóroctová. Reakčná zmes sa zohreje počas 30 minút na teplotu 35 °C, ktorá sa udržuje 17 hodín. Prebublávanie dusíka reakčnou zmesou sa zastaví a udržuje sa len pomalý prúd dusíka. Počas prvej hodiny pri teplote 35 °C farba postupe tmavne na ružovú a potom na tmavozelenú. Vytvorí sa relatívne malé množstvo bielej kryštalickej zrazeniny (trifluóracetát amónny). Po 17 hodinách dokáže HPLC, ktorej podmienky zodpovedajú vyššie uvedeným, že reakčná zmes obsahuje 93 % plochy pod krivkou indolenínu (8) a menej ako 0,5 % nespracovaného fenylhydrazónu. Státie zmesi počas dlhšieho časového obdobia nezvýši výťažok indolenínu (8).The reaction mixture was allowed to stand for 10 minutes at 0-2 ° C and trifluoroacetic acid was added via cannula while maintaining the temperature at 2-7 ° C. The reaction mixture is heated to 35 ° C for 30 minutes, which is maintained for 17 hours. Nitrogen bubbling through the reaction mixture was stopped and only a slow stream of nitrogen was maintained. During the first hour at 35 ° C, the color of the procedure darkens to pink and then dark green. A relatively small amount of white crystalline precipitate (ammonium trifluoroacetate) was formed. After 17 hours, HPLC conditions corresponding to the above indicated that the reaction mixture contained 93% area under the indolenine (8) curve and less than 0.5% of untreated phenylhydrazone. Standing the mixture over an extended period of time does not increase the yield of indolenine (8).
Po ochladení reakčnej zmesi na 10 °C sa za stáleho dôkladného miešania pridá zmes obsahujúca 60 ml 28 až 30% roztoku hydroxidu amónneho, 90 ml vody a 150 g drveného ľadu. Farba zmesi sa zmení na lososovú červenú. Organický podiel sa oddelí a dvakrát sa premyje 400 ml vody a potom 100 ml nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Organický podiel sa suší nad síranom horečnatým a filtruje sa cez vrstvu 5 g oxidu kremičitého. Po odparení filtrátu vznikne 15,84 g svetlooranžového oleja indolenínu (8) s výťažkom 99 %.After cooling the reaction mixture to 10 ° C, a mixture containing 60 ml of a 28-30% ammonium hydroxide solution, 90 ml of water and 150 g of crushed ice is added with vigorous stirring. The color of the mixture changes to salmon red. The organic layer was separated and washed twice with 400 ml of water and then with 100 ml of saturated aqueous sodium chloride solution. The organic portion was dried over magnesium sulfate and filtered through a pad of 5 g silica. Evaporation of the filtrate gave 15.84 g of indolenine light orange oil (8) in a yield of 99%.
-44Príklad 10-44Example 10
Príprava CBZ-spiroindolín-metánsuIfónamidu (1) bez izolácie medziproduktu CBZspiroindolínu (9)Preparation of CBZ-spiroindoline methanesulfonamide (1) without isolation of CBZspiroindoline intermediate (9)
Časť 1: CBZ-spiroindolín (9)Part 1: CBZ-spiroindoline (9)
Východiskové zlúčeniny:Starting compounds:
piperidín-4-karboxaldehyd-1-benzyl karbamát (5) fenylhydrazín (Aldrich) trifluóroctová kyselina (TFA) toluén (KF < 250 mg/l) metylkyanid (MeCN) (KF < 250 mg/l) hydroborát sodný toluén metanolpiperidine-4-carboxaldehyde-1-benzyl carbamate (5) phenylhydrazine (Aldrich) trifluoroacetic acid (TFA) toluene (KF <250 mg / l) methyl cyanide (MeCN) (KF <250 mg / l) sodium borohydride toluene methanol
49,5 g (0,20 mol) 23,7 g (0,22 mol) 75,4 g (0,66 mol) 654 ml49.5 g (0.20 mol) 23.7 g (0.22 mol) 75.4 g (0.66 mol) 654 ml
13.3 ml13.3 ml
11.3 g (0,30 mol) 20 ml ml11.3 g (0.30 mol) 20 ml ml
Za použitia 654 ml toluénu a 13,3 ml metylkyanidu sa pripraví roztok metylkyanidu s koncentráciou 2 % objemové. Do nádoby s tromi hrdlami s objemom 2 I a vybavenej mechanickým miešadlom sa pridá 617 ml vyššie uvedeného roztoku, ktorý sa zbaví plynu prebublávaním jemným prúdom dusíka po dobu 5 minút. Počas prebublávania sa pridá fenylhydrazín a kyselina trifluóroctová. Vo zvyšnej časti vyššie uvedeného roztoku (50 ml) sa rozpustí CBZ-aldehyd (5) a tento roztok sa v pridávacom lieviku zbaví plynu prebublávaním dusíkom. RoztokUsing 654 ml of toluene and 13.3 ml of methyl cyanide, a 2% v / v solution of methyl cyanide is prepared. To a 2 L 3-necked flask equipped with a mechanical stirrer was added 617 mL of the above solution, which was degassed by bubbling a gentle stream of nitrogen for 5 minutes. Phenylhydrazine and trifluoroacetic acid were added during bubbling. CBZ-aldehyde (5) was dissolved in the remainder of the above solution (50 mL) and the solution was degassed with nitrogen by bubbling nitrogen through the addition funnel. solution
-45v nádobe sa zahreje na teplotu 35 °C a roztok aldehydu sa počas 2 hodín pomaly pridá do zmesi fenylhydrazínu a kyseliny trifluóroctovej. Reakčná zmes sa nechá stáť 15 hodín pri teplote 35 °C.The vessel was heated to 35 ° C and the aldehyde solution was slowly added to the phenylhydrazine / trifluoroacetic acid mixture over 2 hours. The reaction mixture was allowed to stand at 35 ° C for 15 hours.
HPLC podmienky: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8 pri teplote 50 °C, rýchlosť prietoku 1 ml/minútu, detekcia pri 220 nm; izokratická elučná zmes 55 % metylkyanidu a 45 % 0,1% vodného roztoku kyseliny trihydrogénfosforečnej.HPLC conditions: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column at 50 ° C, flow rate 1 ml / min, detection at 220 nm; isocratic elution mixture of 55% methyl cyanide and 45% 0.1% aqueous trihydrogenphosphoric acid.
Prehľad výsledkov HPLC po 16 hodinách státia:Overview of HPLC results after 16 hours of standing:
Reakčná zmes sa ochladí na teplotu -10 °C a pridá sa metanol. Po malých (1 ml) častiach sa počas 30 minút pridá suspenzia bórhydridu sodného v 20 ml toluénu tak, aby teplota sa nezvýšila nad -2 °C.The reaction mixture was cooled to -10 ° C and methanol was added. A suspension of sodium borohydride in 20 ml of toluene was added in small (1 ml) portions over 30 minutes so that the temperature did not rise above -2 ° C.
zlúčenina % plochy pod krivkou fenylhydrazín (6) 0,1-1compound% area under the phenylhydrazine (6) curve 0.1-1
CBZ-spiroindolín (9) 85-90CBZ-spiroindoline (9) 85-90
CBZ-spiroindolenín (8) <0,1 ostatné nečistoty (každá <3%) celkom 10-15CBZ-spiroindolenine (8) <0.1 other impurities (each <3%) total 10-15
Pred pridaním 200 ml 6% vodného roztoku amoniaku sa teplota reakčnej zmesi počas 1 hodiny zvýši na 10 °C. Reakčná zmes sa mieša 10 minút, nechá sa 10 minút ustáť a spodná vodná fáza sa oddelí. Do organickej fázy sa pridá 20 mlThe temperature of the reaction mixture was raised to 10 ° C over 1 hour before adding 200 mL of 6% aqueous ammonia. The reaction mixture is stirred for 10 minutes, allowed to stand for 10 minutes and the lower aqueous phase is separated. 20 ml are added to the organic phase
-46acetonitrilu a 20 ml metanolu a roztok sa premyje 150 ml 15% roztoku chloridu sodného. Organický podiel obsahuje podľa analýzy 92 % CBZ-spiroindolínu (9).-46-acetonitrile and 20 ml of methanol and the solution was washed with 150 ml of 15% sodium chloride solution. The organic fraction contained 92% CBZ-spiroindoline (9).
Časť 2: CBZ-spiroindolín-metánsuifónamid (1)Part 2: CBZ-spiroindoline methanesulfonamide (1)
Východiskové zlúčeniny:Starting compounds:
CBZ-spiroindolín (9) (molekulová hmotnosť = 322,51) metánsulfonylchloridCBZ-spiroindoline (9) (MW = 322.51) methanesulfonyl chloride
DIEA(KF = 150 mg/l) tetrahydrofurán (THF) (KF = 41 mg/l) (0,184 mol)DIEA (KF = 150 mg / L) tetrahydrofuran (THF) (KF = 41 mg / L) (0.184 mol)
21,1 g (0,184 mol) 29,7 g, 40,1 ml (0,230 mol)21.1 g (0.184 mol) 29.7 g, 40.1 ml (0.230 mol)
150 ml150 ml
V nádobe s tromi hrdlami s objemom 1 I sa pri teplote 60 až 70 °C a tlakuIn a 1 L three-necked flask at 60 to 70 ° C and pressure
24,4 až 33,2 kPa sa surový roztok CBZ-spiroindolínu (9) z vyššie uvedenej časti 1 zahustí na 250 g zvyšok. Pridá sa tetrahydrofurán a DIEA za vzniku homogénneho roztoku, ktorý sa ochladí na teplotu 0 °C. Pridávací lievik s objemom 125 ml sa naplní metánsulfonylchloridom a 50 ml tetrahydrofuránu. Tento roztok sa pridá do reakčnej zmesi pri zachovaní jej teploty v rozmedzí 0 až 4 °C a reakčná zmes sa nechá 2 hodiny stáť pri teplote 5 až 8 °C. Adícia prebieha mierne exotermicky. Počas pridávania sa vytvorí biela zrazenina, pravdepodobne DIEA hydrochloridu. Podmienky HPLC sú uvedené vyššie. Podľa HPLC analýzy je reakcia skončená 1 hodinu po ukončení adície, kedy nie je prítomný žiadny CBZ-spiroindolín (9) a výťažok vztiahnutý na zlúčeninu (9) je 94 %. Doba retencie: (1) = 7,8 minút. Typický HPLC výsledok reakčnej zmesi po 2 hodinách státia:24.4 to 33.2 kPa, the crude CBZ-spiroindoline solution (9) from part 1 above is concentrated to a 250 g residue. Tetrahydrofuran and DIEA were added to form a homogeneous solution which was cooled to 0 ° C. A 125 mL addition funnel was charged with methanesulfonyl chloride and 50 mL tetrahydrofuran. This solution was added to the reaction mixture while maintaining its temperature in the range of 0 to 4 ° C and the reaction mixture was allowed to stand at 5 to 8 ° C for 2 hours. The addition is slightly exothermic. A white precipitate, probably DIEA hydrochloride, is formed during the addition. The HPLC conditions are set forth above. According to HPLC analysis, the reaction was complete 1 hour after completion of the addition when no CBZ-spiroindoline (9) was present and the yield based on compound (9) was 94%. Retention time: (1) = 7.8 minutes. A typical HPLC result of the reaction mixture after 2 hours of standing:
zlúčenina % plochy pod krivkoucompound% area under the curve
CBZ-spiroindolín (9) CBZ-suifónamid (1) ostatné nečistoty (každá <2%) <0,1 90-92 celkom 8-10CBZ-spiroindoline (9) CBZ-suifonamide (1) other impurities (each <2%) <0,1 90-92 total 8-10
-47 Reakčná zmes sa zohreje na 20 °C a pridá sa 200 ml 1M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej. Zmes sa zohreje na 50 °C a vodná fáza sa oddelí. Organický podiel sa premyje postupne raz 100 ml vody, raz 100 ml 5% vodného roztoku uhličitanu sodného a raz 100 ml vody. Organický podiel sa prenesie do nádoby s tromi hrdlami s objemom 1 I vybavenej mechanickým miešadlom a destilačným zariadením. Približne 400 ml zmesi sa destiluje pri atmosférickom tlaku, pokiaľ sa neodoberie 150 ml destilátu. Teplota hlavy destilačnej kolóny dosiahne 107 °C a teplota spodku destilačnej kolóny je 110 °C. Destilácia sa uskutočňuje za neustáleho pridávania n-propanolu v takom množstve, aby na spodku destilačnej kolóny zostávalo konštantné množstvo, približne 350 ml. Destilácia sa ukončí pridaním 525 ml n-propanolu s celkovým množstvom 800 ml odobratého destilátu.The reaction mixture was warmed to 20 ° C and 200 mL of a 1M aqueous hydrochloric acid solution was added. The mixture is heated to 50 ° C and the aqueous phase is separated. The organic portion is washed successively once with 100 ml of water, once with 100 ml of 5% aqueous sodium carbonate solution and once with 100 ml of water. The organic portion was transferred to a 1 L 3-necked flask equipped with a mechanical stirrer and distillation apparatus. About 400 ml of the mixture was distilled at atmospheric pressure until 150 ml of distillate was collected. The head temperature of the distillation column reaches 107 ° C and the bottom temperature of the distillation column is 110 ° C. The distillation is carried out with constant addition of n-propanol in an amount such that a constant amount of approximately 350 ml remains at the bottom of the distillation column. The distillation was terminated by adding 525 ml of n-propanol with a total of 800 ml of distillate collected.
Počas výmeny rozpúšťadla sa teplota hlavy a spodku destilačnej kolóny zvýši z 94 na 98 °C. Toluén a n-propanol vytvoria azeotropickú látku s teplotou varu 97,2 °C, skladajúcu sa zo 47,5 % toluénu a 52,5 % n-propanolu. Reakčná zmes sa nechá postupne ochladiť na 20 °C počas 3 hodín a nechá sa 12 hodín stáť. Materská kvapalina obsahuje 2 % toluénu a 4 mg/ml sulfónamidu. Rozpustnosť sulfónamidu v rôznych zmesiach toluénu a n-propanolu sa určí použitím HPLC.During the solvent exchange, the temperature of the head and bottom of the distillation column is increased from 94 to 98 ° C. Toluene and n-propanol form an azeotropic with a boiling point of 97.2 ° C, consisting of 47.5% toluene and 52.5% n-propanol. The reaction mixture was allowed to gradually cool to 20 ° C over 3 hours and allowed to stand for 12 hours. The mother liquor contains 2% toluene and 4 mg / ml sulfonamide. The solubility of the sulfonamide in various mixtures of toluene and n-propanol was determined using HPLC.
% toluénu v n-propanole rozpustnosť (1) v mg/ml% toluene in n-propanol solubility (1) in mg / ml
Kryštalická suspenzia sa filtruje a premyje sa trikrát 100 ml n-propanolu. Po 16 hodinách sušenia vo vákuovej peci pri teplote 50 °C a v atmosfére dusíka vznikne 65,5 g zlúčeniny (6) ako žltohnedej látky s výťažkom 82 % vztiahnutých na aldehyd (5) a s čistotou 93,5 % objemových.The crystalline suspension is filtered and washed three times with 100 ml of n-propanol. After drying in a vacuum oven at 50 [deg.] C. under a nitrogen atmosphere for 16 hours, 65.5 g of compound (6) are obtained as a yellow-brown substance with a yield of 82% based on aldehyde (5) and a purity of 93.5%.
‘48Typický HPLC výsledok:‘48Typical HPLC result:
zlúčeninacompound
CBZ-spiroindolín (9)CBZ-spiroindoline (9)
CBZ-suIfónamid (1) ostatné nečistoty (každá <0,2%) % plochy pod krivkou <0,1 >99 celkom <1CBZ-sulphonamide (1) other impurities (each <0,2%)% of the area under the curve <0,1> 99 total <1
Na ďalšie čistenie sa vzorka 40,0 g sulfónamidu kryštalizovaného z npropanolu pri teplote 60 °C rozpustí v 134 ml etylacetátu a na roztok sa 1 hodinu pôsobí 8,0 g aktívneho uhlia zn. Darco G-60 pri teplote 60 °C. Po pridaní 2,0 g Solka-floc™ sa suspenzia filtruje cez vrstvu 4,0 g Solka-floc™ a vrstva sa pri teplote 60 °C premyje 90 ml etylacetátu. Pred pridávaním aktívneho filtrátu sa zmení na zlatožltý filtrát. Filtrát sa destiluje pri atmosférickom tlaku v nádobe s objemom 500 ml a teplote spodku destilačnej kolóny 80 až 85 °C za vzniku 100 g (100 ml) zvyšku. Roztok sa nechá počas 3 hodín ochladiť na teplotu 35 °C. Počas 1 hodiny sa do roztoku za stáleho dokonalého miešania pridá pri teplote 35 °C 116 ml cyklohexánu. Reakčná zmes sa ochladí počas 1 hodiny na teplotu 20 °C a 12 hodín sa nechá stáť pri teplote 20 °C. Pri teplote 35 °C dôjde ku kryštalizácii veľkého množstva sulfónamidu a zmes zhustne. Pridávaním cyklohexánu pri teplote 20 °C sa miešanie stane veľmi ťažké. Po určitej dobe státia sa v supernatante zistí množstvo zlúčeniny (í) 2,5 mg/g. Kryštalická suspenzia sa filtruje a filtračný koláč sa premyje 77 ml zmesi cyklohexánu a etylacetátu v pomere 2:1 a dvakrát sa premyje 77 ml cyklohexánu. Produkt sa 16 hodín suší vo vákuovej peci v atmosfére dusíka a pri teplote 50 °C. Vznikne 34,2 g zlúčeniny (1) (molekulová hmotnosť = 400,3) ako bielej kryštalickej tuhej látky (85 % výťažok zlúčeniny (1), 70 % zlúčeniny (5)) s čistotou vyššou ako 99 % hmotnostných.For further purification, a sample of 40.0 g of sulfonamide crystallized from npropanol at 60 ° C was dissolved in 134 ml of ethyl acetate and the solution was treated with 8.0 g of charcoal for 1 hour. Darco G-60 at 60 ° C. After addition of 2.0 g Solka-floc ™, the suspension is filtered through a 4.0 g Solka-floc ™ layer and the layer is washed with 90 ml of ethyl acetate at 60 ° C. It turns into a golden yellow filtrate before adding the active filtrate. The filtrate was distilled at atmospheric pressure in a 500 mL flask and a bottoms temperature of 80-85 ° C to give 100 g (100 mL) of residue. The solution was allowed to cool to 35 ° C over 3 hours. 116 ml of cyclohexane are added to the solution over 1 hour with vigorous stirring at 35 ° C. The reaction mixture was cooled to 20 ° C over 1 hour and allowed to stand at 20 ° C for 12 hours. At 35 ° C, a large amount of sulfonamide crystallized and the mixture thickened. Addition of cyclohexane at 20 ° C makes stirring very difficult. After a period of standing, the amount of compound (s) 2.5 mg / g was determined in the supernatant. The crystalline suspension is filtered and the filter cake is washed with 77 ml of cyclohexane / ethyl acetate 2: 1 and washed twice with 77 ml of cyclohexane. The product was dried in a vacuum oven at 50 ° C for 16 hours. 34.2 g of compound (1) (molecular weight = 400.3) was obtained as a white crystalline solid (85% yield of compound (1), 70% of compound (5)) with a purity higher than 99% by weight.
Príklad 11Example 11
HH
II
· HCI (1a)· HCI
SO2MeSO 2 Me
-49Sodná soľ spiroindolín-metánsulfónamidu (1a)-49Spiroindoline methanesulfonamide sodium (1a)
Východiskové zlúčeninyStarting compounds
CBZ-spiroindolín-metánsuIfónamid (1) Pearlmanov katalyzátor 20% Pd(OH)2/C THFCBZ-spiroindoline methanesulfonamide (1) Pearlman's catalyst 20% Pd (OH) 2 / C THF
MeOHMeOH
941 g (2,35 mol) 188g 8 I 7I941 g (2.35 mol) 188g 8 L 7I
Katalyzátor bol uvedený do suspenzie v 7 I MeOH a premiestnený do 19 I autoklávu s obsahom roztoku zlúčeniny (1) v 8 I THF. Zmes bola hydrogenovaná pri teplote 25 °C a tlaku vodíka 56 MPa (80 psi). Po 2,5 hodinách bola teplota zvýšená na 35 °C na 30 minút.The catalyst was suspended in 7 L of MeOH and transferred to a 19 L autoclave containing a solution of compound (1) in 8 L of THF. The mixture was hydrogenated at 25 ° C and 80 psi hydrogen pressure. After 2.5 hours the temperature was raised to 35 ° C for 30 minutes.
HPLC analýza indikovala úplne spotrebovanie Cbz-spiroindolínmetánsulfónamídu. HPLC podmienky: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 stĺpec s prietokom 1,5 ml/minútu a detekciou pri 254 nm.HPLC analysis indicated complete consumption of Cbz-spiroindoline methanesulfonamide. HPLC conditions: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column with a flow rate of 1.5 mL / minute and detection at 254 nm.
Prehľad gradientov:Gradients report:
čas (minúty) 0,1% vodný roztok kyseliny trihydrogénforforečnej: metylkyanidtime (minutes) 0.1% aqueous phosphoric acid: methyl cyanide
70:3070:30
70:3070:30
20 : 8020: 80
20 : 8020: 80
Doba retencie: spiroindolín = 7,6 minút, Cbz-spiroindolín-metánsulfónamid = 13,6 minút.Retention time: spiroindoline = 7.6 minutes, Cbz-spiroindoline methanesulfonamide = 13.6 minutes.
Zmes sa prebubláva dusíkom a katalyzátor sa z ešte teplej reakčnej zmesi odstráni filtráciou cez Solka-floc™. Katalyzátor sa premyje 4 I tetrahydrofuránu a 2 I metanolu. Svetložlté filtráty sa zahustia pri tlaku 1000 Pa a pri teplote menšej ako 25 °C na hustý olej. Výmena rozpúšťadla sa ukončí pomalým vliatím do 15 INitrogen was bubbled through the mixture and the catalyst was removed from the still warm reaction mixture by filtration through Solka-floc ™. The catalyst was washed with 4 L of tetrahydrofuran and 2 L of methanol. The light yellow filtrates are concentrated to a thick oil at a pressure of 1000 Pa and a temperature of less than 25 ° C. Solvent exchange is terminated by slowly pouring into 15 L
-50etylacetátu a zahustením dosucha. Vytvorený zvyšok tuhne na tvrdý špinavobiely materiál, do ktorého sa pridá 1,5 I metanolu a zmes sa zahrieva na teplotu 70 °C za vzniku homogénneho roztoku. Pri teplote roztoku 70 °C sa pridá 10,5 I etylacetátu s teplotou 20 °C. teplota sa zníži na 40 °C a zmes zostane homogénna. V nasledujúcich experimentoch sa predpokladá, že vhodnejšou výmenou rozpúšťadla vo filtráte je výmena zo zmesi metanolu a tetrahydrofuránu na metanol, zahustenie na požadovaný objem a následné pridanie etylacetátu. tento postup nevedie k tuhnutiu zvyšku počas zahustenia etylacetátového roztoku.-50-ethyl acetate and concentrated to dryness. The residue formed solidified to a hard off-white material, to which 1.5 L of methanol was added and the mixture was heated to 70 ° C to form a homogeneous solution. At a solution temperature of 70 ° C, 10.5 L of ethyl acetate at 20 ° C was added. the temperature is lowered to 40 ° C and the mixture remains homogeneous. In the following experiments, it is believed that a more suitable solvent exchange in the filtrate is a change from a mixture of methanol and tetrahydrofuran to methanol, concentration to the desired volume and subsequent addition of ethyl acetate. this procedure does not solidify the residue during the concentration of the ethyl acetate solution.
Do roztoku sa pridá chlorovodík približne rovnakým objemom dusíka. Teplota sa počas 15 minút zvýši na 60 °C za vzniku bielej zrazeniny hydrochloridu. Zriedený roztok chlorovodíka len zamedzuje nasávanie zmesi späť a tento postup najskôr nie je nutný.Hydrogen chloride is added to the solution with approximately equal volumes of nitrogen. The temperature was raised to 60 ° C over 15 minutes to give a white hydrochloride precipitate. Dilute hydrogen chloride solution only prevents suction of the mixture back and this procedure is not necessary at first.
Reakčná zmes sa ochladí v ľadovom kúpeli a pridávanie chlorovodíka pokračuje ďalšiu 1 hodinu. Teplota sa postupne zníži na 20 °C a suspenzia sa nechá 2 hodiny stáť pri znižovaní teploty na 10 °C. Vytvorený kryštalický produkt sa oddelí filtráciou a filtračný koláč sa premyje 3 I etylacetátu. Po sušení vo vákuovej peci pri teplote 35 °C vznikne 1,18 kg výslednej zlúčeniny (1a) s výťažkom 86 % ako špinavobielej kryštalickej tuhej látky s čistotou podľa HPLC vyššou ako 99,5 % plochy pod krivkou. Podmienky HPLC: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8, rýchlosť prietoku 1,5 ml/minútu, detekcia pri 230 nm; izokratická elučná zmes 35 % metylkyanidu, 65 % 0,1% vodného roztoku octanu amónneho. Doba retencie: (1a) = 5,4 minút.The reaction mixture was cooled in an ice bath and the addition of hydrogen chloride continued for an additional 1 hour. The temperature is gradually reduced to 20 ° C and the suspension is allowed to stand for 2 hours while the temperature is lowered to 10 ° C. The crystalline product formed is collected by filtration and the filter cake is washed with 3 L of ethyl acetate. After drying in a vacuum oven at 35 ° C, 1.18 kg of the title compound (1a) is obtained in 86% yield as an off-white crystalline solid with HPLC purity greater than 99.5% area under the curve. HPLC conditions: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column, flow rate 1.5 ml / min, detection at 230 nm; isocratic elution mixture of 35% methyl cyanide, 65% 0.1% aqueous ammonium acetate solution. Retention time: (1a) = 5.4 minutes.
Príklad 12 (1b)Example 12 (1b)
SO2MeSO 2 Me
-51 Spiroindolín-metánsulfónamid (vo forme voľných báz) (1b)-51 Spiroindoline methanesulfonamide (in free base form) (1b)
Na približne 10 ml sa zahustí 250 ml časť filtrátu Cbz-hydrogenolýzy, obsahujúca 4,67 g zlúčeniny (1b) (voľnej bázy). Vytvorený zvyšok sa rozpustí v 20 ml etylacetátu a roztok sa zahustí na približne 10 ml. Tento postup sa ešte raz opakuje, a potom sa do zvyšku pridá 10 ml etylacetátu. Keď sa začne vytvárať kryštalická zrazenina, pridá sa naraz 20 ml MTBE. Dôjde k ďalšej kryštalizácii, ale supernatant aj naďalej obsahuje značné množstvo rozpusteného produktu, z ktorého sa státím zrazenina nevytvorí. Za stáleho energického miešania sa do zmesi po kvapkách počas 2 hodín pridá 70 ml zmesi hexánov. Pomalé pridávanie hexánov je nutné na zabránenie vylúčenia amínu ako oleja.Concentrate to about 10 ml a 250 ml portion of the Cbz-hydrogenolysis filtrate containing 4.67 g of compound (1b) (free base). The residue is dissolved in 20 ml of ethyl acetate and the solution is concentrated to about 10 ml. This procedure was repeated once more and then 10 mL of ethyl acetate was added to the residue. When a crystalline precipitate began to form, 20 ml of MTBE were added at once. Further crystallization occurs, but the supernatant still contains a considerable amount of dissolved product from which a precipitate does not form on standing. While stirring vigorously, 70 ml of hexanes are added dropwise over 2 hours. The slow addition of hexanes is necessary to prevent the formation of an amine as an oil.
Reakčná zmes sa 1 hodinu nechá stáť a potom sa filtruje. Filtračný koláč sa premyje 20 ml zmesi MTBE a hexánov v pomere 1:1 a potom 20 ml zmesi hexánov. Produkt sa suší v prúde dusíka za vzniku 3,86 g voľných amínov zlúčeniny (1b) ako špinavobielych kryštálov s čistotou vyššou ako 99,5 % plochy pod krivkou a s výťažkom 82 %.The reaction mixture was allowed to stand for 1 hour and then filtered. The filter cake is washed with 20 mL of 1: 1 MTBE / hexanes and then with 20 mL of hexanes. The product is dried under a stream of nitrogen to give 3.86 g of the free amines of compound (1b) as off-white crystals with a purity greater than 99.5% area under the curve and a yield of 82%.
Podmienky HPLC: 25 cm stĺpec Dupont Zorbax RXC8, rýchlosť prietoku 1,5 ml/minútu, detekcia pri 230 nm; izokratická elučná zmes 35 % metylkyanidu, 65 % 0,1% vodného roztoku octanu amónneho. Doba retencie: (1b) = 5,4 minút.HPLC conditions: 25 cm Dupont Zorbax RXC8 column, flow rate 1.5 ml / min, detection at 230 nm; isocratic elution mixture of 35% methyl cyanide, 65% 0.1% aqueous ammonium acetate solution. Retention time: (1b) = 5.4 minutes.
Príklad 13AExample 13A
Spiroindolín-metánsulfónamid (vo forme voľných báz) (1b)Spiroindoline methanesulfonamide (in free base form) (1b)
Východiskové zlúčeniny: CBZ-spiroindolín-suIfónamid (1)Starting compounds: CBZ-spiroindoline-sulfonamide (1)
833,5 g (2,08 mol)833.5 g (2.08 mol)
-52paládium na aktívnom uhlí (20 % hmotnostných oxidu paladnatého na aktívnom uhlí) tetrahydrofurán metanol hydroxid amónny - koncentrovaný roztok-52 palladium on activated carbon (20% palladium oxide on activated carbon) tetrahydrofuran methanol ammonium hydroxide - concentrated solution
124,5(15%) 6,5 I 19,51 60 ml.124.5 (15%) 6.5 L 19.51 60 ml.
Vzhľadom na obmedzené vybavenie sa hydrogenácia uskutočňovala trikrát. Uvedený postup syntézy zodpovedá jednoduchému postupu. CBZ-spiroindolínsulfónamid (1) sa rozpustí v 6,5 I tetrahydrofuránu (KF = 53 μg/μl) a potom v 4 I metanolu (KF =18 μg/ml). Po pridaní katalyzátora sa suspenzia prenesie do autoklávu s objemom 19 I. Zvyšná časť 2,5 I metanolu sa použije na premytie. Zmes sa 24 hodín zahrieva pri tlaku 3500 Pa na teplotu 40 °C. Množstvo prítomného katalyzátora a reakčný čas sú funkciami čistoty východiskovej zlúčeniny (1). Tento materiál vyžadoval viac ako 15 % katalyzátora a dlhý reakčný čas. Čistejšie dávky spiroindolínu vyžadovali len 5 % katalyzátora a 4 až 6 hodín reakcie.Due to limited equipment, hydrogenation was performed three times. This synthesis procedure corresponds to a simple procedure. CBZ-spiroindoline sulfonamide (1) is dissolved in 6.5 l of tetrahydrofuran (KF = 53 μg / μl) and then in 4 l of methanol (KF = 18 μg / ml). After addition of the catalyst, the suspension was transferred to a 19 L autoclave. The remainder of 2.5 L of methanol was used for washing. The mixture was heated at 40 psi at 40 ° C for 24 hours. The amount of catalyst present and the reaction time are a function of the purity of the starting compound (1). This material required more than 15% catalyst and a long reaction time. Cleaner doses of spiroindoline required only 5% catalyst and 4-6 hours of reaction.
Po dokončení reakcie (prítomnosť zlúčeniny (1) <0,1 % plochy pod krivkou podľa kvapalinovej chromatografie) sa zmes filtruje cez Solka-floc™ a filtračný koláč uhlíka sa premyje 13 I roztoku metanolu, obsahujúceho 60 ml 0,5% roztoku hydroxidu amónneho. Zlúčené filtráty (podľa skúšky 1587 g spiroindolínamín 1b) sa zahustia vo vákuu a vytvorená tuhá látka sa rozdelí do 40 I zmesi toluénu a tetrahydrofuránu v pomere 3:1 a 18 I 0,5N roztoku hydroxidu sodného a vo vodnom podiele sa objaví hustá zrazenina. Podiely sa ľahko oddelia. Vodná suspenzia sa extrahuje 15 I metylénchloridu. Vodný a organický podiel sa pomaly oddelí. Pred pridaním metylénchloridu sa do vodného podielu pridá tetrahydrofurán spolu s dostatočným množstvom chloridu sodného do nasýtenia podielu. Na rozpustenie produktu však týmto postupom nedôjde a je nutné použiť metylénchlorid.After completion of the reaction (presence of compound (1) <0.1% area under liquid chromatography), the mixture was filtered through Solka-floc ™ and the carbon filter cake was washed with 13 L of methanol solution containing 60 ml of 0.5% ammonium hydroxide solution. . The combined filtrates (according to assay 1587 g spiroindolinamine 1b) were concentrated in vacuo and the solid formed was partitioned between 40 L of 3: 1 toluene / tetrahydrofuran and 18 L of 0.5 N sodium hydroxide solution and a thick precipitate appeared in the aqueous fraction. The shares are easily separated. The aqueous suspension was extracted with 15 L of methylene chloride. The aqueous and organic fractions were slowly separated. Before addition of methylene chloride, tetrahydrofuran is added to the aqueous portion together with enough sodium chloride to saturate the portion. However, this process does not occur to dissolve the product and methylene chloride is required.
Zlúčené toluénové, tetrahydrofuránové a metylénchloridové podiely sa zlúčia a zahustia v koncentrátore vsádzok. Vytvorený zvyšok sa prepláchne so 7 IThe combined toluene, tetrahydrofuran and methylene chloride fractions were combined and concentrated in a batch concentrator. The residue is rinsed with 7 L
-53metylkyanidu. Nakoniec sa pridá 10 I metylkyanidu a roztok sa nechá cez noc stáť v atmosfére dusíka.-53metylkyanidu. Finally, 10 L of methyl cyanide is added and the solution is allowed to stand overnight under a nitrogen atmosphere.
Príklad 13BExample 13B
Spiroindolín-metánsulfónamid (vo forme voľných báz) (1b)Spiroindoline methanesulfonamide (in free base form) (1b)
Východiskové zlúčeniny:Starting compounds:
CBZ-spiroindolín-suIfónamid (1) 3 kg (7,49 mol) aktívne uhlie zn. Darco G-60 600 g etylacetát 361 absolútny etanol 189 ICBZ-spiroindoline sulphonamide (1) 3 kg (7.49 mol) activated carbon brand. Darco G-60 600 g ethyl acetate 361 absolute ethanol 189 l
10% roztok paládia na aktívnom uhlí 450 g roztok amoniaku 500 ml10% palladium on charcoal 450 g ammonia solution 500 ml
Solka-floc™ 2,5 kg izopropylacetát 651Solka-floc ™ 2.5 kg isopropyl acetate 651
Zmes 1 kg CBZ-spiroindolínu (1) a 200 g aktívneho uhlia zn. Darco G-60 v 9 I etylacetátu sa za stáleho miešania 8 hodín zahrieva v atmosfére dusíka na teplotu 60 až 65 °C. Darco sa odstráni filtráciou pri teplote 60 až 65 °C, tuhá látka sa premyje 3 I horúceho etylacetátu a filtrát a premývacie podiely sa zlúčia. Kvapalinovou chromatografiou sa potvrdí zanedbateľná strata vzhľadom na použitie aktívneho uhlia zn. Darco G-60. Etylacetátový roztok sa vo vákuu odparí dosucha za použitia Buchiho prístroja s objemom 20 I, a potom sa dvakrát prepláchne 5 I absolútneho etanolu, zahrieva sa na 65 aý 70 4 a umiestni sa doMixture of 1 kg of CBZ-spiroindoline (1) and 200 g of activated charcoal Darco G-60 in 9 L of ethyl acetate was heated at 60-65 ° C under nitrogen atmosphere for 8 hours with stirring. The Darco was removed by filtration at 60-65 ° C, the solid was washed with 3 L of hot ethyl acetate and the filtrate and washings were combined. Liquid chromatography confirms a negligible loss due to the use of activated charcoal grade. Darco G-60 The ethyl acetate solution was evaporated to dryness in vacuo using a 20 L Buchi apparatus, then rinsed twice with 5 L absolute ethanol, heated to 65 to 70 ° C and placed in
-54autoklávu s objemom 20 I. Reakčná zmes sa premyje 1 I absolútneho etanolu. Do auktolávu sa následne pridá suspenzia 75 g 10% paládia na aktívnom uhlí (7,5 % hmotnostných) v 750 ml absolútneho etanolu a následne sa premyje ďalšími 250 ml absolútneho etanolu.The reaction mixture was washed with 1 L of absolute ethanol. A suspension of 75 g of 10% palladium on charcoal (7.5% by weight) in 750 ml of absolute ethanol is then added to the auctolate, followed by a further 250 ml of absolute ethanol.
Reakčná zmes sa za stáleho energického miešania 3 hodiny hydrogenuje pri tlaku vodíka 2800 Pa a teplote 65 °C. Pridá sa ďalších 75 g paládia na aktívnom uhlí, reakčná zmes sa ďalšie dve hodiny hydrogenuje a cez noc sa nechá stáť v uzavretej nádobe. Po premiestnení reakčnej zmesi, ktorá má stále teplotu 60 až 65 °C, do Buchiho zariadenia s objemom 20 I sa vsádzka zbaví plynu za ostránenia kyseliny mravčej metódou „feeding and bleeding“ t.j. pridávaním a preplachovaním celkom 18 I absolútneho etanolu.The reaction mixture was hydrogenated under vigorous stirring for 3 hours at a hydrogen pressure of 2800 Pa and a temperature of 65 ° C. An additional 75 g of palladium on charcoal was added, the reaction mixture was hydrogenated for a further two hours and left in a closed vessel overnight. After transfer of the reaction mixture, which is still at a temperature of 60-65 ° C, into a 20 L Buchi apparatus, the batch is degassed with a formic acid-removing method of feeding and bleeding, i. adding and rinsing a total of 18 L of absolute ethanol.
tento postup sa ešte dvakrát opakuje a tri vsádzke sa zlúčia v nádobe vyloženej sklom s objemom 36 I. Zlúčené vsádzky sa znovu zbavia plynu dvojitým opakovaním pridania vždy 10 I absolútneho etanolu a následnou destiláciou vo vákuu. Do vsádzky sa pridá 0,5 kg Solka-floc™ a zmes sa premyje 10 I etanolu. Suspenziou Solka-floc™ v 20 I etanolu sa naplní filter Estrella a vytvorená zmes sa zahreje na 60 až 65 °C. Pri tejto teplote sa reakčná zmes filtruje cez zahrievaný filter pomocou čerpadla do dvoch vydechtovaných nerezových nádob. Prvá reakčná nádoba, filter, čerpadlo a trubica sa premyjú horúcou zmesou 500 ml vodného roztoku amoniaku v 25 I absolútneho etanolu s teplotou 60 až 65 °C.this procedure is repeated two more times and the three batches are combined in a 36 L glass-lined vessel. The combined batches are again degassed by repeating the addition of 10 L absolute ethanol each time followed by distillation under vacuum. 0.5 kg of Solka-floc ™ is added to the batch and the mixture is washed with 10 L of ethanol. A suspension of Solka-floc ™ in 20 L of ethanol is filled with an Estrella filter and the resulting mixture is heated to 60-65 ° C. At this temperature, the reaction mixture is filtered through a heated filter by means of a pump into two tinned stainless steel vessels. The first reaction vessel, filter, pump and tube were washed with a hot mixture of 500 mL of aqueous ammonia in 25 L of absolute ethanol at 60-65 ° C.
Vsádzka sa prefiltruje do reakčnej nádoby za použitia zabudovaného filtra, obsahujúceho vopred pripravený stĺpec s veľkosťou otvorov 10 μιτι, a potom sa zahustí vo vákuu na objem približne 15 I. Etanol sa nahradí celkom 45 I izopropylacetátu metódou „feeding and bleeding“, tzn. pridávaním a preplachovaním trikrát 15 I izopropylacetátu. Podľa plynovej chromatografie obsahuje reakčná zmes po dokončení výmeny rozpúšťadiel menej ako 1 % etanolu. Reakčná zmes sa zriedi na objem približne 33 I pridaním 20 I izopropylacetátu. tento roztok spiroindolínamínu (1b), ktorého hmotnosť je podľa kvapalinovej chromatografie 1,855 kg, v izopropylacetáte sa použije v nasledujúcej syntéze.The batch is filtered into a reaction vessel using a built-in filter containing a preformed column having a 10 μιτι orifice size and then concentrated in vacuo to a volume of approximately 15 L. Ethanol is replaced with a total of 45 L of isopropyl acetate by feeding and bleeding. adding and rinsing three times with 15 L of isopropyl acetate. According to gas chromatography, the reaction mixture contained less than 1% ethanol upon completion of the solvent exchange. The reaction mixture is diluted to a volume of approximately 33 L by addition of 20 L of isopropyl acetate. this solution of spiroindolinamine (1b), which is 1.855 kg by liquid chromatography, isopropyl acetate is used in the following synthesis.
- 55Príklad 14A55Example 14A
Boc-O-benzykserín-spiroindolín (11)Boc-O-benzycserine-spiroindoline (11)
Východiskové zlúčeniny: spiroindolínamín (1b) aminokyselina (10)Starting compounds: spiroindolinamine (1b) amino acid (10)
1587 g (5,966 mol) 1938 g (6,563 mol)1587 g (5.966 mol) 1938 g (6.563 mol)
Ph .CO2HPh. CO 2 H
NHBOC dicyklohexylkarbodiimid (DCC)NHBOC dicyclohexylcarbodiimide (DCC)
N-hydroxybenztriazol (HOBt) metylkyanidN-hydroxybenztriazole (HOBt) methyl cyanide
0,5N roztok hydroxidu sodného0.5N sodium hydroxide solution
0,5N kyselina chlorovodíková nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného izopropylacetát0.5N hydrochloric acid saturated sodium bicarbonate solution isopropyl acetate
1334,5 g (6,563 mol) 884 g (6,563 mol)1334.5 g (6.563 mol) 884 g (6.563 mol)
I 18 I 18 I 18 I 28 II 18 I 18 I 18 I 28 I
Na roztok spiroindolínamínu (1b) v 25 I metylkyanidu alebo vodného roztoku izopropylacetátu sa postupne pri teplote miestnosti a pod dusíkom pôsobí 884 g (1,1 ekvivalentov) HOBT ako tuhej látky, 1334,5 g DCC (1,1 ekvivalentov) ako taveniny (pripravenej zahrievaním 1 hodinu v horúcej vode s teplotou 60 °C) aA solution of spiroindolinamine (1b) in 25 L of methyl cyanide or aqueous isopropyl acetate is treated successively at room temperature and under nitrogen with 884 g (1.1 equivalents) of HOBT as a solid, 1334.5 g DCC (1.1 equivalents) as a melt ( prepared by heating for 1 hour in hot water at 60 ° C) and
-56nakoniec 1938 g aminokyseliny (10) ako tuhej látky. Reakčná zmes sa tri hodiny mieša za vzniku hustej zrazeniny DCU. Podľa kvapalinovej chromatografíe zostáva v reakčnej zmesi 0,5% plochy pod krivkou amínu (1b). Pridá sa 9 I izopropylacetátu, suspenzia sa filtruje cez Solka-floc™ a filtračný koláč sa premyje 19 I izopropylacetátu. Zlúčený organický roztok sa postupne premyje 18 I 0,5N roztoku hydroxidu sodného, 18 I 0,5N roztoku kyseliny chlorovodíkovej a 18 I nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného.Finally, 1938 g of amino acid (10) as a solid. The reaction mixture was stirred for three hours to form a thick precipitate of DCU. According to liquid chromatography, 0.5% of the area under the amine curve (1b) remains in the reaction mixture. 9 L of isopropyl acetate was added, the suspension was filtered through Solka-floc ™, and the filter cake was washed with 19 L of isopropyl acetate. The combined organic solution was washed successively with 18 L of a 0.5 N sodium hydroxide solution, 18 L of a 0.5 N hydrochloric acid solution, and 18 L of a saturated sodium bicarbonate solution.
Premytím vodou vznikla emulzia, ktorá bola odložená. Organický podiel sa zahustí vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v metanole alebo v etanole do konečného objemu 10 I roztoku. Výťažok je 3026 g t.j. 89 %.Washing with water gave an emulsion which was discarded. The organic portion is concentrated in vacuo and the residue is dissolved in methanol or ethanol to a final volume of 10 L of solution. The yield is 3026 g i.e. 89%.
Výťažok zlúčeniny 11 alebo 14 z reakcie, v ktorej sa použijú alternatívne peptidové väzbové činidlá, ako je karbonyldiimidazol. alebo zmes anhydridov, ako je sek.butylkarbonát, je nižší. V prípade zlúčeniny (11) dôjde k epimerizácii vysokého stupňa. Ostatné peptidové väzbové činidlá sú finančne nedostupné.The yield of compound 11 or 14 from a reaction in which alternative peptide binding agents such as carbonyldiimidazole is used. or a mixture of anhydrides such as sec-butyl carbonate is lower. Compound (11) is epimerized to a high degree. Other peptide binding agents are financially unavailable.
Príklad 14bExample 14b
O (11)O (11)
SO2MeSO 2 Me
Boc-O-benzylserín-spiroindolín (11)Boc-O-benzylserine-spiroindoline (11)
Východiskové zlúčeniny: spiroindolín-amín (1b) izopropylacetát dicyklohexylkarbodiimid (DCC)Starting compounds: spiroindoline-amine (1b) isopropyl acetate dicyclohexylcarbodiimide (DCC)
1,855 kg (6,96 mol) 29 I1.855 kg (6.96 mol) 29 l
1,58 kg (7,65 mol)1.58 kg (7.65 mol)
- 571-hydroxybenztriazol (HOBt)- 571-hydroxybenzotriazole (HOBt)
N-Boc-O-benzyl-D-serínN-Boc-O-benzyl-D-serine
1M vodný roztok hydroxidu sodného nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného absolútny etanol1M aqueous sodium hydroxide solution saturated aqueous sodium bicarbonate solution absolute ethanol
1,03 kg (7,62 mol) 2,26 kg (7,65 mol) 26 I1.03 kg (7.62 mol) 2.26 kg (7.65 mol) 26 L
II
II
Do miešaného roztoku 1,855 kg spiroindolínamínu (1b) v 33 I izopropylacetátu sa v reakčnej nádobe pridá 20 I vody. Postupne sa pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka pridá 1,58 kg (1,1 ekvivalentov) DCC, 1,03 kg (1,1 ekvivalentov) HOBt, a nakoniec (1,1 ekvivalentov) 2,26 kg N-Boc-O-benzyl-Dserínu. Reakčné činidlá sa premývajú 7 I izopropylacetátu. Po 5 hodinách miešania pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka sa kvapalinocou chromatografiou potvrdil pomer produktu a východiskovej zlúčeniny v reakčnej zmesi 99,4:0,6. Reakčná zmes sa filtruje do inej nádoby cez filter Estrella pri použití len tkaniny upevnenej v lepenke a čerpadla. Prvá nádoba sa prepláchne 22 I izopropylacetátu a týmto materiálom sa prepláchne filter, čerpadlo a trubica spojujúcej nádoby. Zmes dvoch fáz sa v nádobe 10 minút mieša a potom sa počas 15 minút nechá stáť cez noc pri teplote miestnosti.To a stirred solution of 1.855 kg of spiroindolinamine (1b) in 33 L of isopropyl acetate was added 20 L of water in the reaction vessel. 1.58 kg (1.1 equivalents) of DCC, 1.03 kg (1.1 equivalents) of HOBt, and finally (1.1 equivalents) 2.26 kg of N-Boc-O are added sequentially at room temperature and under a nitrogen atmosphere. benzyl-Dserínu. The reagents were washed with 7 L of isopropyl acetate. After stirring at room temperature under nitrogen for 5 hours, the ratio of product to starting compound in the reaction mixture was 99.4: 0.6 by liquid chromatography. The reaction mixture is filtered into another vessel through an Estrella filter using only a cloth mounted in a cardboard and a pump. The first vessel is rinsed with 22 L of isopropyl acetate and this material is rinsed with the filter, pump and tubing connecting the vessel. The mixture of the two phases was stirred in the vessel for 10 minutes and then left to stand overnight at room temperature for 15 minutes.
Nasledujúci deň sa organický roztok premyje 26 I 1M vodného roztoku hydroxidu sodného, 26 I 0,5M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a nakoniec 26 I nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného. Výťažok výslednej zlúčeniny podľa kvapalinovej chromatografie je 3,787 kg, t.j. 93 % z 3 kg (7,49 mol) CBZ-spiroindolínu (1) ako východiskovej zlúčeniny. Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu (vnútorná teplota -13 až 15 °C, teplota manžety = 40 °C, vákuum = 3857 Pa) na približne 15 I. Rozpúšťadlo sa zamení na etanol pomalým pridávaním a preplachovaním 50 I etanolu do konečného objemu roztoku približne 15 I. Podľa plynovej chromatografie je v roztoku prítomných menej ako 1 % izopropylacetátu. Roztok sa použije v nasledujúcej syntéze.The next day, the organic solution was washed with 26 L of a 1M aqueous sodium hydroxide solution, 26 L of a 0.5 M aqueous hydrochloric acid solution and finally 26 L of a saturated aqueous sodium bicarbonate solution. The yield of the title compound according to liquid chromatography is 3.787 kg, i.e. 93% of 3 kg (7.49 mol) CBZ-spiroindoline (1) as starting material. The reaction mixture is concentrated in vacuo (internal temperature -13 to 15 ° C, cuff temperature = 40 ° C, vacuum = 3857 Pa) to approximately 15 L. The solvent is converted to ethanol by slowly adding and rinsing 50 L of ethanol to a final volume of approximately I. According to gas chromatography, less than 1% isopropyl acetate is present in the solution. The solution was used in the following synthesis.
-58Príklad 15AExample 58A
O-benzylserín-spiroindolín (vo forme voľných báz) (12)O-benzylserine-spiroindoline (in the form of free bases) (12)
Východiskové zlúčeniny: Boc-O-benzylserín-spiroindolín (11) kyselina metánsulfónová (MsOH) metanol izopropylacetát (iPrOAc)Starting compounds: Boc-O-benzylserine-spiroindoline (11) methanesulfonic acid (MsOH) methanol isopropyl acetate (iPrOAc)
0,5N roztok hydroxidu sodného0.5N sodium hydroxide solution
3026 g (5,57 mol) 1,161(17,9 mol) 10 I 24 I 35 I3026 g (5.57 mol) 1.161 (17.9 mol) 10 L 24 L 35 L
Na roztok Boc-O-benzylserín-spiroindolínu (11) v 10 I metanolu (alebo etanolu) sa pôsobí 1,16 I kyseliny metánsulfónovej ako čistej látky, ktorá sa pridávala približne 30 až 40 minút (počiatočná teplota 16 °C, konečná teplota 28 °C). Tmavočervený roztok sa cez noc nechá stáť pod dusíkom. Reakčná zmes sa prečerpá do extrakčného zariadenia s objemom 100 I, ktoré obsahuje 24 I izopropylacetátu a 35 I 0,5N roztoku hydroxidu sodného. Počiatočné pH vodného podielu je 7. Po pridaní 6M roztoku hydroxidu sodného sa zvýši pH na alebo dosiahne hodnotu = 10,5. Počas zvyšovania pH roztoku sa jeho farba mení z červenej na žltú. Podiely sa oddelia a 24 I organického podielu podľa NMR obsahuje 13 % molárnych metanolu v izopropanole (5 % objemových). Výťažok skúšky podľa kvapalinovej chromatografie je 2,48 kg.A solution of Boc-O-benzylserine-spiroindoline (11) in 10 L of methanol (or ethanol) was treated with 1.16 L of methanesulfonic acid as a pure substance, which was added for about 30 to 40 minutes (initial temperature 16 ° C, final temperature 28). C). The dark red solution was allowed to stand under nitrogen overnight. The reaction mixture was transferred to a 100 L extraction apparatus containing 24 L of isopropyl acetate and 35 L of 0.5 N sodium hydroxide solution. The initial pH of the aqueous portion was 7. Upon addition of 6M sodium hydroxide solution, the pH was raised to or reached = 10.5. As the pH of the solution increases, its color changes from red to yellow. The aliquots were separated and 24 L of the organic portion by NMR contained 13 mole% methanol in isopropanol (5% v / v). Liquid chromatographic assay yield is 2.48 kg.
O-benzylserín-spiroindolín (vo forme voľných báz) (12)O-benzylserine-spiroindoline (in the form of free bases) (12)
Východiskové zlúčeniny: Boc-O-benzylserín-spiroindolín (11) kyselina metánsulfónová izopropylacetátStarting compounds: Boc-O-benzylserine-spiroindoline (11) methanesulfonic acid isopropyl acetate
1M vodný roztok hydroxidu sodného 50% vodný roztok hydroxidu sodného1M aqueous sodium hydroxide solution 50% aqueous sodium hydroxide solution
3,787 kg (6,96 mol) 2,006 kg (20,87 mol) 38 I3.87 kg (6.96 mol) 2.006 kg (20.87 mol) 38 L
II
1,6 11,6 1
Do približne 15 I miešaného roztoku 3,787 kg Boc-O-benzylserín-spiroindolínu (11) v etanole sa v reakčnej nádobe pridá 2,006 kg (1,355 I, približne 3 ekvivalenty) kyseliny metánsulfónovej. Reakčná zmes sa zohreje na teplotu 35 až 40 °C. Po 7 hodinách sa kvapalinovou chromatografiou dokáže vymiznutie počiatočného materiálu a reakcia sa cez noc ochladí na teplotu miestnosti. Nasledujúci deň sa počas miešania pridá 44 I vody. Po ochladení na asi 5 °C a 30 minútach miešania sa zmes filtruje do druhej nádoby cez zabudovaný filter s veľkosťou otvorov 10 pm a prečerpá sa späť do reakčnej nádoby. Nádoby, filtračné zariadenia a nakoniec roztok v reakčnej nádobe sa prepláchne 10 I vody a následne sa postupne pridá 38 I izopropylacetátu a 16 I 1M vodného roztoku hydroxidu sodného. Reakčná zmes sa ochladí na 10 až 15 °C. Hodnota pH spodnej fázy je približne 7 a pridá sa 1,6 I 50% vodného roztoku hydroxiduTo a stirred solution of 3.87 kg of Boc-O-benzylserine-spiroindoline (11) in ethanol (15 L) in ethanol was added 2.006 kg (1.355 L, approximately 3 equivalents) of methanesulfonic acid in a reaction vessel. The reaction mixture is heated to 35-40 ° C. After 7 hours, the starting material disappears by liquid chromatography and the reaction is cooled to room temperature overnight. The following day, 44 L of water was added with stirring. After cooling to about 5 ° C and 30 minutes of stirring, the mixture is filtered into a second vessel through a built-in 10 µm filter and pumped back into the reaction vessel. The vessels, filter devices and finally the solution in the reaction vessel are rinsed with 10 L of water, followed by the sequential addition of 38 L of isopropyl acetate and 16 L of 1M aqueous sodium hydroxide solution. The reaction mixture was cooled to 10-15 ° C. The pH of the lower phase is approximately 7 and 1.6 L of 50% aqueous hydroxide solution is added
-60sodného na zvýšenie hodnoty pH na viac ako 10. Po 15 minútach miešania pri teplote 10 až 15 °C sa zmes nechá počas 10 až 15 minút usadiť. Oddelí sa 78,1 kg spodnej vodnej fázy, ktorá podľa kvapalinovej chromatografíe obsahuje 28,4 g zlúčeniny (12) s teoreticky vypočítaným výťažkom 0,85 %. Organický podiel s objemom 51 I obsahuje podľa kvapalinovej chromatografíe 3,057 kg výslednej zlúčeniny s výťažkom 92 % vztiahnutým na 3 kg (7,49 mol) CBZspiroindolínsulfónamidu (1). Výsledný roztok sa použije v nasledujúcej syntéze.After stirring for 15 minutes at 10-15 ° C, the mixture is allowed to settle for 10-15 minutes. 78.1 kg of the lower aqueous phase are separated, which, according to liquid chromatography, contains 28.4 g of compound (12) with a theoretically calculated yield of 0.85%. The 51 L organic fraction contained 3.057 kg of the title compound according to liquid chromatography with a yield of 92% based on 3 kg (7.49 mol) of CBZ spiroindoline sulfonamide (1). The resulting solution was used in the following synthesis.
Príklad 16AExample 16A
(14)(14)
Boc-aminoizobutyryl-O-benzylserín-spiroindolín (14)Boc-aminoisobutyryl-O-benzylserine-spiroindoline (14)
Východiskové zlúčeniny: spiroindolínamín (12) peptid aminokyseliny (13) dicyklohexylkarbodiimid (DCC)Starting compounds: spiroindolinamine (12) amino acid peptide (13) dicyclohexylcarbodiimide (DCC)
1-hydroxybenzotriazol (HOBt) izopropylacetát (IPAc) voda1-hydroxybenzotriazole (HOBt) isopropyl acetate (IPAc) water
0,5N roztok hydroxidu sodného 0,5N roztok kyseliny chlorovodíkovej nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného0.5N sodium hydroxide solution 0.5N hydrochloric acid solution saturated sodium bicarbonate solution
2481 g (5,57 mol) 1247,1 g (6,16 mol)2481 g (5.57 mol) 1247.1 g (6.16 mol)
1266,7 g (6,16 mol) 827 g (6,16 mol)1266.7 g (6.16 mol) 827 g (6.16 mol)
I 37 I 36 I 36 I 36 II 37 I 36 I 36 I 36 I
-61 Roztok amínu (12) v izopropylacetáte sa použitím izopropylacetátu (IPAc) zriedi na celkový objem 39 I a pridá sa 37 I vody. Na zmes s dvoma fázami sa pri teplote miestnosti a pod dusíkom pôsobí postupne 827 g HOBT ako tuhej látky,The solution of amine (12) in isopropyl acetate is diluted to 39 L with isopropyl acetate (IPAc) and 37 L of water is added. The two-phase mixture is treated successively with 827 g of HOBT as a solid at room temperature and under nitrogen,
1266,7 g DCC ako taveniny a aminokyselinou (13). Reakčná zmes sa 2 hodiny mieša a vymiznutie (<0,3 % plochy pod krivkou) východiskovej zlúčeniny (12) sa dokáže kvapalinovou chromatografiou. Reakčná zmes sa filtruje cez Solka-floc™ a tuhá látka sa premyje 13 I izopropylacetátu. Reakčná zmes sa takto môže uchovať cez noc.1266.7 g of DCC as melt and amino acid (13). The reaction mixture was stirred for 2 hours and the disappearance (<0.3% area under the curve) of the starting compound (12) was detected by liquid chromatography. The reaction mixture was filtered through Solka-floc ™ and the solid was washed with 13 L of isopropyl acetate. The reaction mixture can thus be stored overnight.
Po premiestnení reakčnej zmesi do extrakčného zariadenia s objemom 100 I sa oddelí vodný podiel a organický podiel sa premyje postupne 36 I 0,5N roztoku hydroxidu sodného, 0,5N roztoku kyseliny chlorovodíkovej a nasýteným roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Výťažok skúšky je 3160 g (81% zo spiroindolínu s chybou merania objemu ± 5 %). Roztok sa zahustí na malý objem a dvakrát sa premyje 4 I etanolu. Medziprodukt (14) sa môže oddeliť kryštalizáciou pridaním vody.After transfer of the reaction mixture to a 100 L extraction apparatus, the aqueous portion was separated and the organic portion was washed successively with 36 L of 0.5 N sodium hydroxide solution, 0.5 N hydrochloric acid solution and saturated sodium bicarbonate solution. The assay yield is 3160 g (81% of spiroindoline with a ± 5% volume measurement error). The solution is concentrated to a small volume and washed twice with 4 L of ethanol. Intermediate (14) can be separated by crystallization by addition of water.
Výťažok zlúčeniny (14) z reakcie, v ktorej sa použijú alternatívne peptidové činidlá, ako je karbonyldiimidazol, alebo zmes anhydridov (sek.butylkarbonát) je nižší a s vysokým stupňom epimerizácie. Ostatné peptidové väzbové činidlá sú finančne nedostupné.The yield of compound (14) from the reaction using alternative peptide reagents such as carbonyldiimidazole or a mixture of anhydrides (sec-butyl carbonate) is lower and with a high degree of epimerization. Other peptide binding agents are financially unavailable.
Príklad 16BExample 16B
-62Boc-aminoizobutyryl-O-benzylserín-spiroindolín (14)-62Boc-aminoisobutyryl-O-benzylserine-spiroindoline (14)
Východiskové zlúčeniny: spiroindolínamín (12) dicyklohexylkarbodiimid (DCC) 1-hydroxybenzotriazol (HOBt) Boc-2-aminoizomaslová kyselina (13) izopropylacetátStarting compounds: spiroindolinamine (12) dicyclohexylcarbodiimide (DCC) 1-hydroxybenzotriazole (HOBt) Boc-2-aminoisobutyric acid (13) isopropyl acetate
1M vodný roztok hydroxidu sodného1M aqueous sodium hydroxide solution
3,057 kg (6,89 mol) 1,56 kg (7,56 mol) 1,02 kg (7,55 mol) 1,54 kg (7,58 mol) 32 I3.057 kg (6.89 mol) 1.56 kg (7.56 mol) 1.02 kg (7.55 mol) 1.54 kg (7.58 mol) 32 I
I 38 II 38 I
0,5M vodný roztok kyseliny chlorovodíkovej 38 I nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného 38 I absolútny etanol0.5 M aqueous hydrochloric acid solution 38 L saturated aqueous sodium bicarbonate solution 38 L absolute ethanol
II
Do približne 51 I miešaného roztoku 3,057 kg spiroindolínamínu (12) v izopropylacetáte sa v atmosfére dusíka a pri teplote miestnosti pridá 49 I vody. Postupne sa do reakčnej nádoby pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka pridá (približne 1,1 ekvivalent) 1,56 kg DCC, 1,02 kg (približne 1,1 ekvivalent) HOBt a nakoniec 1,54 kg (približne 1,1 ekvivalent) N-Boc-O-benzyl-D-serínu. Po 2 hodinách energického miešania pri teplote miestnosti v atmosfére dusíka sa kvapalinovou chromatografiou potvrdí dokončenie reakcie. Reakčná zmes sa filtruje cez filter Estrella pri použití čerpadla. Prvá nádoba, filter, čerpadlo a spojujúca trubica sa prepláchnu 22 I izopropylacetátu. Zmes dvoch fáz sa v nádobe 5 minút mieša a podiely sa oddelia. Spodný vodný podiel s hmotnosťouTo an approximately 51 L stirred solution of 3.057 kg of spiroindolinamine (12) in isopropyl acetate was added 49 L of water under a nitrogen atmosphere at room temperature. Gradually, 1.56 kg of DCC, 1.02 kg (approximately 1.1 equivalent) of HOBt, and finally 1.54 kg (approximately 1.1 equivalent) are added to the reaction vessel at room temperature and under nitrogen atmosphere. N-Boc-O-benzyl-D-serine. After stirring vigorously for 2 hours at room temperature under nitrogen atmosphere, completion of the reaction was confirmed by liquid chromatography. The reaction mixture was filtered through an Estrella filter using a pump. The first vessel, filter, pump and connecting tube are rinsed with 22 L of isopropyl acetate. The two-phase mixture was stirred in the vessel for 5 minutes and the fractions were separated. Bottom aqueous portion with weight
51,1 kg sa oddelí. Organický roztok sa postupne premyje 38 I 1M vodného roztoku hydroxidu sodného, 38 I 0,5M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej a nakoniec 38 I nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného.51.1 kg are separated. The organic solution was washed successively with 38 L of a 1M aqueous sodium hydroxide solution, 38 L of a 0.5 M aqueous hydrochloric acid solution and finally 38 L of a saturated aqueous sodium bicarbonate solution.
Organický roztok sa čerpadlom cez zabudovaný filter (obsahujúci vopred pripravený stĺpec s veľkosťou otvorov 10 pm) premiestni do inej nádoby, kde sa vykoná výmena rozpúšťadla na etanol. Nádoba sa prepláchne 10 I izopropylacetátu a týmto roztokom sa premyje čerpadlo, filter a trubica do nádoby s reakčnou zmesou. Filtrát a premývacie podiely sa zlúčia. Celkový objem, meraný ponorným meradlom je 75 I. Podľa kvapalinovej chromatografie vznikne 4,395 kgThe organic solution is transferred via a built-in filter (containing a preformed column with a 10 µm aperture) to another vessel where the solvent is changed to ethanol. The vessel is rinsed with 10 L of isopropyl acetate and this solution is used to wash the pump, filter and tube into the reaction vessel. The filtrate and washings were combined. The total volume measured by the dipstick is 75 L. According to liquid chromatography, 4.395 kg is obtained
-63Boc-aminoizobutyryl-O-benzylserín-spiroíndolínu (14) s celkovým výťažkom 93 % (z 7,49 ml východiskového CBZ-spíroindolín-suIfónamidu (1)).-63Boc-aminoisobutyryl-O-benzylserine-spiroindoline (14) with a total yield of 93% (from 7.49 ml of the starting CBZ-spiroindoline-sulfonamide (1)).
Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu na objem približne 15 1. Uskutoční sa výmena rozpúšťadla na etanol pomalým pridávaním a preplachovaním celkom 5 I absolútneho etanolu. Podľa plynovej chromatografie zostáva v vsádzke menej ako 1 % izopropylacetátu. Roztok s objemom 25 I obsahuje 4,395 kg zlúčeniny (14), ktorá sa použije v ďalšej syntéze. Pokiaľ je to potrebné, je možné zlúčeninu (14) pridaním vody nechať kryštalizovať.The reaction mixture was concentrated in vacuo to a volume of approximately 15 L. The solvent was changed to ethanol by slowly adding and rinsing a total of 5 L of absolute ethanol. According to gas chromatography, less than 1% of isopropyl acetate remains in the batch. The 25 L solution contains 4.395 kg of compound (14), which is used in the next synthesis. If necessary, compound (14) can be crystallized by adding water.
Príklad 17AExample 17A
Aminoizobutyryl-O-benzylserín-spiroindolín (15)Aminoisobutyryl-O-benzylserine-spiroindoline (15)
Východiskové zlúčeniny: Boc-spiroindolín (14) metánsulfónová kyselina (MsOH) etanol vodaStarting compounds: Boc-spiroindoline (14) methanesulfonic acid (MsOH) ethanol water
1N roztok hydroxidu sodného etylacetát aktívne uhlie Darco 601N sodium hydroxide solution ethyl acetate activated carbon Darco 60
3160 g (5,03 mol)3160 g (5.03 mol)
979 ml (15,1 mol)979 ml (15.1 mol)
6,2 I 30 I 11 I 26 I 1 kg6.2 l 30 l 11 l 26 l 1 kg
Na roztok Boc-spiroindolínu (14) v 6,2 I etanolu sa pôsobí 979 ml kyseliny metánsulfónovej. Teplota sa tým zvýši z 20 na 30 °C a reakcia sa nechá prebiehaťA solution of Boc-spiroindoline (14) in 6.2 L of ethanol was treated with 979 mL of methanesulfonic acid. The temperature is then raised from 20 to 30 ° C and the reaction is allowed to proceed
-64cez noc. Po 12 hodinách pri teplote 20 °C zostáva v zmesi stále 15 % plochy pod krivkou východiskovej zlúčeniny. Zmes sa preto zahrieva 6 hodín na teplotu 35 °C. Po ukončení reakcie (menej ako 0,1 % plochy pod krivkou zlúčeniny (14)) sa reakčná zmes ochladí na teplotu 20 °C a pridá sa 30 I vody. Roztok sa filtruje cez sklenený lievik a polypropylénovým filtrom, čím sa odstráni zvyšné množstvo DCU. Zmes sa premiestni do extrakčného zariadenia s objemom 100 I a pridá sa 26 I etylacetátu. Vodný podiel sa privedie na zásadité pH pridaním 11 I ochladeného 1N roztoku hydroxidu sodného a 1 I 50% roztoku hydroxidu sodného. Aby sa teplota udržala pod 14 °C, je potrebné pridať ľad. Vyššia teplota vedie k vzniku emulzie.-64the night. After 12 hours at 20 ° C, 15% of the area under the curve of the starting compound remains in the mixture. The mixture was therefore heated at 35 ° C for 6 hours. After completion of the reaction (less than 0.1 area% under the curve of compound (14)), the reaction mixture was cooled to 20 ° C and 30 L of water was added. The solution is filtered through a glass funnel and polypropylene filter to remove residual DCU. The mixture was transferred to a 100 L extraction apparatus and 26 L of ethyl acetate was added. The aqueous portion was brought to basic pH by the addition of 11 L of cooled 1N sodium hydroxide solution and 1 L of 50% sodium hydroxide solution. Ice must be added to keep the temperature below 14 ° C. A higher temperature leads to the formation of an emulsion.
Organický podiel sa destiluje pri teplote 50 °C a tlaku 2793 Pa na hodnotu KF nižšiu ako 1000 pg/ml. Nižšie KF je výsledkom účinnejšieho pôsobenia aktívneho uhlia a jeho lepšej izolácie po tvorbe soli. Za vzniku 700 g produktu bola dosiahnutá hodnota KF = 160 pg/ml. Roztok sa zriedi etylacetátom do celkového objemu 31 I (roztok obsahuje podľa kvapalinovej chromatografie 2,40 kg produktu). Pridá sa aktívne uhlie Darco G-60 a zmes sa 24 hodín mieša. Po filtrácii cez Solkafloc™ sa filtračný koláč premyje 16 I etylacetátu za vzniku 2,34 kg produktu.The organic portion is distilled at 50 ° C and 2793 Pa to a KF value of less than 1000 pg / ml. Lower KF is the result of more effective action of activated carbon and its better isolation after salt formation. A KF = 160 pg / ml was obtained to give 700 g of product. The solution was diluted with ethyl acetate to a total volume of 31 L (the solution contained 2.40 kg of product by liquid chromatography). Darco G-60 activated charcoal is added and the mixture is stirred for 24 hours. After filtration through Solkafloc ™, the filter cake was washed with 16 L of ethyl acetate to give 2.34 kg of product.
Príklad 17B ··Example 17B ··
(15)(15)
Aminoizobutyryl-O-benzylserín -spiroindolín (15)Aminoisobutyryl-O-benzylserine-spiroindoline (15)
-65Východiskové zlúčeniny: Boc-spiroindolín (14) metánsulfónová kyselina etylacetát-65Substance compounds: Boc-spiroindoline (14) methanesulfonic acid ethyl acetate
1M vodný roztok hydroxidu sodného 50% vodný roztok hydroxidu sodného Darco G-601M aqueous sodium hydroxide solution 50% aqueous sodium hydroxide solution Darco G-60
Solka-floc™Solka floc ™
4,395 kg (6,99 mol) 2,017 kg (20,99 mol)4.395 kg (6.99 mol) 2.017 kg (20.99 mol)
1851 161 2,6 1 900 g 2,5 kg1851 161 2.6 1,900 g 2.5 kg
Do približne 25 I miešaného roztoku 4,395 kg Boc-spiroindolínu (14) v etanole, umiestneného v reakčnej nádobe, sa pri teplote miestnosti pridá 2,017 kg (1,36 I, približne 3 ekvivalenty) kyseliny metánsulfónovej. Reakčná zmes sa zohreje na 35 až 40 °C a cez noc sa mieša. Nasledujúci deň obsahuje reakčná zmes približne 1,1% plochy pod krivkou východiskového materiálu a preto reakcia pokračuje ďalšie 4 hodiny. Podľa kvapalinovej chromatografie bol pomer produktu a východiskového materiálu 99,6:0,4. Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu na objem okolo 15 1a následne sa zriedi 44 I vody. Reakčná zmes sa ochladí na 5 °C, 30 minút sa mieša a filtruje sa za použitia čerpadla cez zabudovaný filter Sparkler (obsahujúci vopred vyrobený stĺpec s veľkosťou otvorov 10 pm) do druhej nádoby na odstránenie malého množstva zvyškového DCU.To approximately 25 L of a stirred solution of 4.395 kg of Boc-spiroindoline (14) in ethanol placed in the reaction vessel was added 2.017 kg (1.36 L, approximately 3 equivalents) of methanesulfonic acid at room temperature. The reaction mixture was warmed to 35-40 ° C and stirred overnight. The next day, the reaction mixture contained approximately 1.1% area under the curve of the starting material and therefore the reaction was continued for a further 4 hours. According to liquid chromatography, the ratio of product to starting material was 99.6: 0.4. The reaction mixture was concentrated in vacuo to a volume of about 15 L and then diluted with 44 L of water. The reaction mixture is cooled to 5 ° C, stirred for 30 minutes and filtered using a pump through a built-in Sparkler filter (containing a pre-made 10 µm hole column) into a second vessel to remove a small amount of residual DCU.
Nádoba, čerpadlo, filter a trubica sa premyjú 10 I vody, ktorá sa potom pridá do nádoby s reakčnou zmesou. Pridá sa 36 I etylacetátu a miešaná zmes sa ochladí na teplotu 10 °C. Pri tejto teplote sa pridá 16 I studeného 1M vodného roztoku hydroxidu sodného s teplotou 5 až 10 °C a 2,6 I studeného 50% vodného roztoku hydroxidu sodného s teplotou 5 až 10 °C. Teplota sa zvýši na 14 °C. Výsledná zmes sa 15 minút mieša pri teplote nižšej ako 14 °C a spodný vodný podiel sa oddelí.The vessel, pump, filter and tube are washed with 10 L of water, which is then added to the reaction vessel. 36 L of ethyl acetate was added and the stirred mixture was cooled to 10 ° C. 16 L of cold 1 M aqueous sodium hydroxide solution at 5-10 ° C and 2.6 L of cold 50% aqueous sodium hydroxide solution at 5-10 ° C were added at this temperature. The temperature was raised to 14 ° C. The resulting mixture was stirred at less than 14 ° C for 15 minutes and the lower aqueous portion was separated.
Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu na objem približne 20 I a do zmesi sa pridá zmes 35 I etylacetátu a 5 I etanolu do konečného objemu 20 I. Ku koncu destilácie je KF 9160 mg/ml. Rozpúšťadlo sa vymení za etylacetát pri pomalomThe reaction mixture was concentrated in vacuo to a volume of approximately 20 L and a mixture of 35 L of ethyl acetate and 5 L of ethanol was added to a final volume of 20 L. At the end of the distillation, KF was 9160 mg / ml. The solvent was replaced with ethyl acetate at a slow rate
-66pridávaní preplachovaní celkom 40 I etylacetátu. Ku koncu tejto destilácie je hodnota KF 446 mg/ml. Reakčná zmes sa zriedi 10 I etylacetátu.Adding a rinse with a total of 40 L of ethyl acetate. At the end of this distillation, the KF was 446 mg / ml. The reaction mixture was diluted with 10 L of ethyl acetate.
Do zmesi sa pridá 900 g aktívneho uhlia zn. Darco G-60 a zmes sa premyje 6 I etylacetátu. Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti a nasledujúci deň sa za stáleho miešania k reakčnej zmesi za stáleho miešania pridá 0,5 kg Solkafloc™. V malom množstve etylacetátu sa mieša 2,0 kg Solka-floc™ a týmto materiálom sa naplní filter Estrella. Prebytok rozpúšťadla sa odčerpá cez zabudovaný filter Estrella. Prebytok rozpúšťadla sa odčerpá cez zabudovaný filter Sparkler obsahujúci stĺpec s veľkosťou otvorov 10 μίτι. Suspenzia sa dvakrát filtruje pomocou čerpadla do dvoch nerezových zásobných nádob s objemom 40 I. Kvapalinba je čistá a číra. Reakčná nádoba sa premyje 22 I etylacetátu a týmto materiálom sa premyje ostatné zariadenie a vleje do zásobných nádob. Obsah oboch zásobných nádob sa premiestni do reakčných nádob a roztok sa dokonale premieša.900 g of activated charcoal are added to the mixture. Darco G-60 and washed with 6 L of ethyl acetate. The mixture was stirred overnight at room temperature, and 0.5 kg of Solkafloc ™ was added to the reaction mixture with stirring the following day. 2.0 kg of Solka-floc ™ was stirred in a small amount of ethyl acetate to fill the Estrella filter. Excess solvent is pumped off through the built-in Estrella filter. Excess solvent is pumped through a built-in Sparkler filter containing a 10 μίτι aperture column. The suspension is filtered twice by means of a pump into two 40 L stainless steel storage vessels. The liquid is clear and clear. The reaction vessel was washed with 22 L of ethyl acetate and this material was washed with other equipment and poured into storage vessels. The contents of both storage vessels are transferred to the reaction vessels and the solution is mixed thoroughly.
Reakčná zmes s objemom 58 I má hodnotu KF = 2950 mg/ml a preto sa znova suší vo vákuu na objem 20 až 25 I. Po zriedení reakčnej zmesi na objem 46 I (merané ponorným meradlom) pridaním 25 I etylacetátu je hodnota KF = 363 mg/ml. Reakčná zmes sa zriedi na objem 62 I pridaním 17 I etylacetátu a použije sa v ďalšom konečnom postupe syntézy.The 58 L reaction mixture had a KF value of 2950 mg / mL and was then dried again in vacuo to a volume of 20-25 L. After diluting the reaction mixture to 46 L (measured by dipping) by adding 25 L of ethyl acetate, the KF value was 363 mg / ml. The reaction mixture was diluted to a volume of 62 L by addition of 17 L of ethyl acetate and used in the next final synthesis procedure.
Príklad 18AExample 18A
(16)(16)
-67Spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2metylpropánamid-metansulfonát (16)-67Spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate (16)
Východiskové zlúčeniny: amín (15) metánsulfónová kyselina (MsOH) etylacetát etanolStarting compounds: amine (15) methanesulfonic acid (MsOH) ethyl acetate ethanol
8% roztok etanolu v etylacetáte8% ethanol in ethyl acetate solution
2340 g (4,43 mol)2340 g (4.43 mol)
316 ml (4,88 mol)316 ml (4.88 mol)
II
4,8 I 20 I.4.8 I 20 I.
Objem roztoku zlúčeniny (15) z predchádzajúcej časti sa privedie pridaním etylacetátu a 4,8 I etanolu na objem 60 I. Pri teplote 45 °C sa pridá roztok 316 ml kyseliny metánsulfónovej v 3 I etylacetátu. Do tmavočerveného homogénneho roztoku sa kvôli naočkovaniu pridá 496 g výslednej zlúčeniny všeobecného vzorca I (10% hmotnostných voľného amínu ako očkovacieho materiálu). Teplota sa zvýši na približne 48 °C a reakčná zmes sa nechá stáť 1,5 hodiny pri teplote 52 °C. Podľa analýzy dôjde k úplnému vytvoreniu výslednej zlúčeniny všeobecného vzorca I. Použitím menej ako 10 % očkovacieho materiálu sa predĺži doba státia (vyššia ako 3 hodiny). Suspenzia sa nechá cez noc ochladiť na teplotu 20 °C a pod dusíkom sa filtruje v centrifúge. Filtračný koláč sa premyje 20 I 8% roztoku etanolu v etylacetáte. Prítomnosť dusíka je veľmi dôležitá, pretože mokré kryštáliky sú veľmi hygroskopické. Reakčná zmes sa vo vákuu suší za teploty 35 °C za vznikuA volume of the solution of compound (15) from the previous part is brought by adding ethyl acetate and 4.8 L of ethanol to a volume of 60 L. At 45 ° C, a solution of 316 mL of methanesulfonic acid in 3 L of ethyl acetate is added. 496 g of the title compound of formula I (10% by weight of free amine as seeding material) were added to the dark red homogeneous solution for seeding. The temperature is raised to about 48 ° C and the reaction mixture is allowed to stand at 52 ° C for 1.5 hours. Analysis showed complete formation of the resultant compound of Formula I. By using less than 10% of the inoculum material, the stand time (greater than 3 hours) was prolonged. The suspension is allowed to cool to 20 ° C overnight and filtered under a nitrogen centrifuge. The filter cake was washed with 20 L of 8% ethanol in ethyl acetate. The presence of nitrogen is very important because wet crystals are very hygroscopic. The reaction mixture was dried under vacuum at 35 ° C to give
2,7 kg výslednej zlúčeniny všeobecného vzorca I s celkovým výťažkom 56 % a s čistotou 99,9 % plochy pod krivkou a s prítomnosťou menej ako 0,1 % enantioméru.2.7 kg of the resultant compound of formula I with a total yield of 56% and a purity of 99.9% of the area under the curve and in the presence of less than 0.1% enantiomer.
Premena zlúčeniny všeobecného vzorca II na zlúčeninu všeobecného vzorca I sa uskutoční tvorbou soli v zmesi etylacetátu a etanolu pridaním kyseliny metánsulfónovej, ako bolo vyššie uvedené, a počiatočný roztok soli s teplotou 55 °C sa ochladí na teplotu 45 °C. pri tejto teplote sa začnú objavovať kryštáliky a suspenzia zhustne. Teplota sa zvýši na 51 °C a suspenzia sa nechá cez noc stáť. Dôjde k premene zlúčeniny (16) na zlúčeninu všeobecného vzorca I. TýmtoThe conversion of the compound of formula II to the compound of formula I is accomplished by salt formation in a mixture of ethyl acetate and ethanol by the addition of methanesulfonic acid as described above, and the initial salt solution at 55 ° C is cooled to 45 ° C. at this temperature, crystals begin to appear and the suspension thickens. The temperature was raised to 51 ° C and the suspension was allowed to stand overnight. The compound (16) is converted to the compound of formula (I)
-68postupom je možné vytvoriť očkujúce kryštáliky zlúčeniny (16) všeobecného vzorcaBy the procedure, it is possible to form the seed crystals of the compound (16) of the general formula
Príklad 18BExample 18B
Východiskové zlúčeniny: amín (15) metánsulfónová kyselina etylacetát absolútny etanolStarting compounds: amine (15) methanesulfonic acid ethyl acetate absolute ethanol
SpirofSH-indol-SÁ'-piperÍdínj-ľ-yOkarbonyl]2-(fenylmetyloxy)etylj-2-amino-2-metylpropánamid-metánsulfonát (všeobecný vzorec I)SpirofSH-indole-5'-piperidin-1'-ylcarbonyl] 2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate (Formula I)
Spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2metylpropánamid-metánsulfonát (16)Spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate (16)
3,1 kg (5,86 mol)3.1 kg (5.86 mol)
620 g (6,45 mol)620 g (6.45 mol)
II
8,7 I g (0,11 mol)8.7 I g (0.11 mol)
Do roztoku s objemom približne 62 I 3,1 kg amínu (15) v etylacetáte sa v reakčnej nádobe pridá 6,4 I absolútneho etanolu. Reakčná zmes sa v reakčnej nádobe zohreje na teplotu 50 °C a počas približne 5 minút sa pri teplote 50 až 54 °C pridá roztok 620 g (412 ml, 1,1 ekvivalentu) kyseliny metánsulfónovej v 11 I etylacetátu. Reakčná zmes sa naočkuje 70 g spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-1 yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamid-metánsulfonátuTo a solution of approximately 62 L of 3.1 kg of amine (15) in ethyl acetate is added 6.4 L of absolute ethanol in the reaction vessel. The reaction mixture was heated to 50 ° C in the reaction vessel and a solution of 620 g (412 mL, 1.1 equivalents) of methanesulfonic acid in 11 L of ethyl acetate was added over a period of about 5 minutes at 50-54 ° C. The reaction mixture was seeded with 70 g of spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate
-69(všeobecného vzorca l). Vytvorená suspenzia sa cez noc mieša a pod dusíkom zahrieva na teplotu 55 °C.-69 (Formula I). The resulting suspension was stirred overnight and heated to 55 ° C under nitrogen.
Nasledujúci deň sa suspenzia ochladí na teplotu 15 až 20 °C, pri ktorej sa udržuje 2 hodiny a potom sa po kvapkách v atmosfére dusíka filtruje cez 50 cm polypropylénový filter, produkt ako tuhá látka sa premyje zmesou 2,3 I absolútneho etanolu v 26 I etylacetátu. Biely produkt ako tuhá látka sa oddelí a približne dva dni sa suší v peci Apex vo vákuu pri teplote 35 °C. Sušený spiro[3H-indol-3,4'piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metylpropánamidmetánsulfonát s hmotnosťou 3,352 kg sa preoseje cez Jackson-Crockattovo sito za vzniku 3,347 kg výslednej zlúčeniny vrátane 70 g očkujúcej látky. Celkový výťažok je 3,277 kg.The next day, the suspension is cooled to 15-20 ° C for 2 hours and then dropped through a 50 cm polypropylene filter dropwise in a nitrogen atmosphere, washing the product as a solid with a mixture of 2.3 L absolute ethanol in 26 L ethyl acetate. The white solid product was collected and dried in an Apex oven at 35 ° C for about two days. The dried spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate weighing 3.352 kg was passed through a Jackson-Crockatt sieve to give 3.357 kg of the title compound, including 70 g of the vaccine. Total yield is 3.277 kg.
Podmienky HPLC:HPLC conditions:
Kvapalinová chromatografia:Liquid chromatography:
Doba retencie na stĺpci Zorbax RX-C8 (4,6 mm x 25 cm), detekcia pri 210 nm, rýchlosť prietoku = 1,5 ml/minútu.Retention time on a Zorbax RX-C8 column (4.6 mm x 25 cm), detection at 210 nm, flow rate = 1.5 mL / minute.
zlúčenina 1: 60:40 CH3CN-H2O (1% H3PO4) RT = 5,0 minút zlúčenina 1b: 35:65 CH3CN-H2O (0,1 % objemové NH4Oac) RT = 6,2 minút zlúčenina 10: 60:40 CH3CN-H2O (0,1% H3PO4) RT = 2,9 minút zlúčenina 11: 60:40 CH3CN-H2O (1% H3PO4) RT = 5,4 minút zlúčenina 12: 40:60 CH3CN-H2O (pH 5,25 NaH2PO4 ) (6,9 g/l vody) (pH dosiahnuté pridaním hydroxidu sodného) RT = 5,6 minút zlúčenina 14: 60:40 CH3CN-H2O (0,1% H3PO4) RT = 4,65 minút zlúčenina 15: 40:60 CH3CN-H2O (pH = 5,25 NaH2PO4) (6,9 g/l vody) (pH dosiahnuté pridaním hydroxidu sodného) RT = 4,9 minútCompound 1: 60:40 CH3CN-H2O (1% H3PO4) RT = 5.0 minutes Compound 1b: 35:65 CH3CN-H2O (0.1% by volume NH 4 OAc) RT = 6.2 minutes 10 Compound 60: 40 CH3CN-H2O (0.1% H3PO4) RT = 2.9 min Compound 11: 60:40 CH3CN-H2O (1% H3PO4) RT = 5.4 min Compound 12: 40:60 CH3CN-H2O (pH 5, 25 NaH 2 PO 4 ) (6.9 g / l water) (pH achieved by addition of sodium hydroxide) RT = 5.6 minutes compound 14: 60:40 CH 3 CN-H 2 O (0.1% H 3 PO 4) RT = 4.65 minutes Compound 15: 40:60 CH 3 CN-H 2 O (pH = 5.25 NaH 2 PO 4 ) (6.9 g / l water) (pH achieved by addition of sodium hydroxide) RT = 4.9 min
Kvapalinová chromatografia:Liquid chromatography:
Doba retencie na stĺpci Zorbax RX-C8 (4,6 mm x 25 cm), detekcia pri 210 nm, rýchlosť prietoku = 1,2 ml/minútu, teplota stĺpca = 48 °C.Retention time on a Zorbax RX-C8 column (4.6 mm x 25 cm), detection at 210 nm, flow rate = 1.2 ml / min, column temperature = 48 ° C.
Rozpúšťadlo A = 0,05% roztok kyseliny fosforečnej + 0,01% roztok trietylamínu vo vode.Solvent A = 0.05% phosphoric acid solution + 0.01% triethylamine in water.
-70Rozpúšťadlo B = acetonitrii.-70Solvent B = acetonitrile.
Prehľad gradientu koncentrácii rozpúšťadiel:Solvent Concentration Gradient Overview:
zlúčenina 1 zlúčenina 1b zlúčenina 10 zlúčenina 11 zlúčenina 12 zlúčenina 14 zlúčenina 15compound 1 compound 1b compound 10 compound 11 compound 12 compound 14 compound 15
Doba retencie (minúty)Retention time (minutes)
25.225.2
8.58.5
20.520.5
26.326.3
14,814.8
25.625.6
15.715.7
Príklad 19Example 19
Príprava zlúčeniny všeobecného vzorca I, N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsuIfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátuPreparation of a compound of formula I, N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methyl-propanamide methanesulfonate
Premena zlúčeniny všeobecného vzorca II na zlúčeninu všeobecného vzorca I sa uskutoční podľa postupu uvedeného v príklade 18A. V zmesi etylacetátu a etanolu sa vytvorí soľ, pridaním kyseliny metánsulfónovej a počiatočný roztok soli s teplotou 55 °C sa ochladí na 45 °C. Po dosiahnutí tejto teploty sa začnú tvoriť kryštály a suspenzia zhustne. Po zvýšení teploty na 51 °C sa suspenzia nechá cez noc stáť, čím by mala byť premena zlúčenín skončená.The conversion of the compound of formula II to the compound of formula I is carried out according to the procedure of Example 18A. A salt is formed in a mixture of ethyl acetate and ethanol, cooled to 45 ° C by addition of methanesulfonic acid, and the initial salt solution at 55 ° C. Upon reaching this temperature, crystals begin to form and the suspension becomes dense. After raising the temperature to 51 ° C, the suspension was allowed to stand overnight to complete the conversion of the compounds.
-71 Príklad 20-71 Example 20
Príprava N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4,-piperidín]-1,-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu (všeobecný vzorec I)Preparation of N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3H-indole-3,4'-piperidine] -1 yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methyl-propanamide methanesulfonate (Formula I)
Premena zlúčeniny všeobecného vzorca II na zlúčeninu všeobecného vzorca I sa uskutoční miešaním 2 až 24 hodín roztoku zlúčeniny N-[1 (R)-[(1,2dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamidu všeobecného vzorca II v izopropanole pri teplote približne 25 °C.Conversion of a compound of formula II to a compound of formula I is accomplished by stirring for 2 to 24 hours with a solution of N- [1 (R) - [(1,2dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3H-indole-3,4'-piperidine]] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide of formula II in isopropanol at about 25 ° C.
Príklad 21Example 21
Príprava N-flíRj-IXI^-dihydro-l-metánsulfonyl-spirojOH-indol-S/'-piperidínj-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu (všeobecný vzorec IV)Preparation of N-Fluoro-1 H -dihydro-1-methanesulfonyl-spiroOH-indole-5H-piperidin-1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methyl-propanamide methanesulfonate (Formula IV)
V zmesi 24,8 ml etylacetátu, 1,6 ml etanolu a 1,95 ml vody sa pri teplote 42 °C a za stáleho miešania rozpustia 8,4 g N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonylspiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu vo vhodnej morfologickej forme. Pri teplote 40 °C sa odparí rozpúšťadlo a vytvorená tuhá látka sa rozomelie na jemný prášok, ktorý sa vystaví účinku približne 75 % relatívnej vlhkosti za vzniku výslednej zlúčeniny všeobecného vzorca IV.In a mixture of 24.8 ml of ethyl acetate, 1.6 ml of ethanol and 1.95 ml of water, 8.4 g of N- [1 (R) - [(1,2-dihydro- 1-Methanesulfonylspiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate in a suitable morphological form. At 40 ° C the solvent is evaporated and the solid formed is ground to a fine powder which is exposed to approximately 75% relative humidity to give the title compound of formula IV.
Príklad 22Example 22
Príprava N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu (všeobecný vzorec IV)Preparation of N- [1 (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] - 2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate (Formula IV)
-72Z roztoku etylacetátu, etanolu a vody v pomere objemov 24,8:1,6:1,95 sa vo vhodnej morfologickej forme nechá kryštalizovať N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-1 '-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonát za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca IV.-72 From a solution of ethyl acetate, ethanol and water in a volume ratio of 24.8: 1.6: 1.95, N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonyl-spiro) is crystallized in a suitable morphological form [3H-Indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate to give compound of formula IV.
Príklad 23Example 23
Príprava N-[1(R)-[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu všeobecného vzorca IVPreparation of N- [1 (R) - [(1,2-Dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] - 2-Amino-2-methyl-propanamide methanesulfonate of formula IV
Pri teplote približne 25 °C sa cez noc mieša suspenzia zlúčeniny N-[1(R)[(1,2-dihydro-1-metánsulfonyl-spiro[3H-indol-3,4'-piperidín]-ľ-yl)karbonyl]-2-(fenylmetyloxy)etyl]-2-amino-2-metyl-propánamid-metánsulfonátu všeobecného vzorca I v zmesi izopropylacetátu a etanolu v pomere objemov 90:10 obsahujúcej približneA suspension of N- [1 (R) [(1,2-dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3H-indole-3,4'-piperidin] -1'-yl) carbonyl] is stirred at approximately 25 ° C overnight. ] -2- (phenylmethyloxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide methanesulfonate of formula I in a 90:10 mixture of isopropyl acetate and ethanol containing approximately
2,8 % objemových vody. Vznikne výsledná zlúčenina ako tuhá látka.2.8% water by volume. The title compound is obtained as a solid.
V opise a príkladovej časti bol predmet vynálezu opísaný v súvislosti s niektorými zvláštnymi a výhodnými uskutočneniami, je však zrejmé, že by odborník mohol navrhnúť rôzne úpravy, zmeny, modifikácie uvedených postupov, najmä pokiaľ ide o vypustenie, náhradu alebo pridanie niektorých častí postupov, bez toho aby pri tom došlo k odchýleniu od zmyslu vynálezu.In the description and the example section, the subject matter has been described in connection with some particular and preferred embodiments, but it is understood that one skilled in the art could suggest various modifications, changes, modifications to the above procedures, particularly as regards deleting, replacing or adding some parts of the procedures. in doing so, depart from the spirit of the invention.
Bolo by napríklad možné použiť iné účinné dávky, ako sú uvedené, najmä v dôsledku zmien v reakcii cicavca na liečenie alebo vzhľadom na ochorenie, pri ktorom by boli účinné látky použité. Špecifické reakcie na účinnú látku sa totiž môžu meniť v závislosti na type účinnej látky alebo na zvolenom farmaceutickom nosiči, na zvolenej liekovej forme a spôsobe podávania a takéto očakávané zmeny je potrebné brať do úvahy. Vyššie uvedené údaje teda nemajú slúžiť na obmedzenie vynálezu.For example, it would be possible to use other effective dosages than those mentioned, in particular due to changes in the mammal's response to treatment or due to the disease in which the active ingredients are used. Indeed, the specific reactions to the active ingredient may vary depending on the type of active ingredient or the pharmaceutical carrier chosen, the chosen pharmaceutical form and the route of administration, and such expected changes must be taken into account. Thus, the above data is not intended to limit the invention.
Claims (27)
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US590095P | 1995-10-27 | 1995-10-27 | |
GBGB9603361.8A GB9603361D0 (en) | 1996-02-16 | 1996-02-16 | Polymorphic forms of a growth hormone secretagogue |
PCT/US1996/016955 WO1997015574A1 (en) | 1995-10-27 | 1996-10-23 | Polymorphic forms of a growth hormone secretagogue |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SK51398A3 true SK51398A3 (en) | 1998-12-02 |
Family
ID=26308741
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SK513-98A SK51398A3 (en) | 1995-10-27 | 1996-10-23 | Polymorphic forms of n-[1(r)-[(1,2-dihydro-1- -methanesulfonylspiro[3h-indole-3,4'-piperidin]-1'-yl)carbonyl]- -2-(phenylmethyloxy)ethyl]-2-amino-2-methyl-propanamide- -methanesulfonate, the preparation thereof, pharmaceutical composition containing them and their use |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP1019402A1 (en) |
JP (1) | JP3204266B2 (en) |
KR (1) | KR19990067098A (en) |
CN (1) | CN1067687C (en) |
AU (1) | AU707946B2 (en) |
BG (1) | BG102476A (en) |
BR (1) | BR9611229A (en) |
CA (1) | CA2235371A1 (en) |
CO (1) | CO4770956A1 (en) |
CZ (1) | CZ128098A3 (en) |
EA (1) | EA000528B1 (en) |
EE (1) | EE9800147A (en) |
HK (1) | HK1017894A1 (en) |
HU (1) | HUP9902208A3 (en) |
IS (1) | IS4721A (en) |
NO (1) | NO310556B1 (en) |
NZ (1) | NZ321370A (en) |
PL (1) | PL327511A1 (en) |
SK (1) | SK51398A3 (en) |
TR (1) | TR199800726T2 (en) |
WO (1) | WO1997015574A1 (en) |
YU (1) | YU56696A (en) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6046333A (en) * | 1996-10-25 | 2000-04-04 | Merck & Co., Inc. | Convergent process for the preparation of a growth hormone secretagogue |
US9119832B2 (en) | 2014-02-05 | 2015-09-01 | The Regents Of The University Of California | Methods of treating mild brain injury |
US20170121385A1 (en) | 2015-10-28 | 2017-05-04 | Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neurodegenerative conditions |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PL176993B1 (en) * | 1992-12-11 | 1999-08-31 | Merck & Co Inc | Spiropiperidines and their homologues stimulating growth hormone release |
-
1996
- 1996-10-23 EA EA199800335A patent/EA000528B1/en not_active IP Right Cessation
- 1996-10-23 EE EE9800147A patent/EE9800147A/en unknown
- 1996-10-23 SK SK513-98A patent/SK51398A3/en unknown
- 1996-10-23 PL PL96327511A patent/PL327511A1/en unknown
- 1996-10-23 EP EP96936869A patent/EP1019402A1/en not_active Withdrawn
- 1996-10-23 CA CA002235371A patent/CA2235371A1/en not_active Abandoned
- 1996-10-23 BR BR9611229A patent/BR9611229A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-10-23 JP JP51673797A patent/JP3204266B2/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-10-23 TR TR1998/00726T patent/TR199800726T2/en unknown
- 1996-10-23 CZ CZ981280A patent/CZ128098A3/en unknown
- 1996-10-23 WO PCT/US1996/016955 patent/WO1997015574A1/en not_active Application Discontinuation
- 1996-10-23 NZ NZ321370A patent/NZ321370A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-10-23 AU AU74686/96A patent/AU707946B2/en not_active Expired
- 1996-10-23 KR KR1019980703038A patent/KR19990067098A/en not_active Application Discontinuation
- 1996-10-23 CN CN96199328A patent/CN1067687C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-10-23 HU HU9902208A patent/HUP9902208A3/en unknown
- 1996-10-25 YU YU56696A patent/YU56696A/en unknown
- 1996-10-25 CO CO96056663A patent/CO4770956A1/en unknown
-
1998
- 1998-04-21 IS IS4721A patent/IS4721A/en unknown
- 1998-04-24 NO NO19981867A patent/NO310556B1/en not_active IP Right Cessation
- 1998-05-21 BG BG102476A patent/BG102476A/en unknown
-
1999
- 1999-07-12 HK HK99102961A patent/HK1017894A1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP3204266B2 (en) | 2001-09-04 |
NO981867L (en) | 1998-06-29 |
YU56696A (en) | 1999-09-27 |
AU707946B2 (en) | 1999-07-22 |
EE9800147A (en) | 1998-12-15 |
NO310556B1 (en) | 2001-07-23 |
EA000528B1 (en) | 1999-10-28 |
BR9611229A (en) | 1999-05-25 |
NO981867D0 (en) | 1998-04-24 |
CO4770956A1 (en) | 1999-04-30 |
HUP9902208A2 (en) | 1999-10-28 |
IS4721A (en) | 1998-04-21 |
NZ321370A (en) | 1999-11-29 |
EP1019402A1 (en) | 2000-07-19 |
HK1017894A1 (en) | 1999-12-03 |
HUP9902208A3 (en) | 2001-05-28 |
TR199800726T2 (en) | 1998-08-21 |
AU7468696A (en) | 1997-05-15 |
BG102476A (en) | 1999-04-30 |
KR19990067098A (en) | 1999-08-16 |
PL327511A1 (en) | 1998-12-21 |
JPH10512295A (en) | 1998-11-24 |
WO1997015574A1 (en) | 1997-05-01 |
EA199800335A1 (en) | 1998-12-24 |
CN1067687C (en) | 2001-06-27 |
MX9803351A (en) | 1998-09-30 |
CN1205703A (en) | 1999-01-20 |
CZ128098A3 (en) | 1998-09-16 |
CA2235371A1 (en) | 1997-05-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5767124A (en) | Polymorphic forms of a growth hormone secretagogue | |
DE69332075T2 (en) | Spiropiperidine and its homologues, which stimulate the release of growth hormones | |
TWI221153B (en) | Tartrate salt of a substituted dipeptide | |
WO1995003289A1 (en) | Benzo-fused lactams promote release of growth hormone | |
JP4932132B2 (en) | Growth hormone secretagogue | |
CZ293423B6 (en) | Heterocyclic dipeptide compounds, their use and pharmaceutical compositions based thereon as well as intermediated therefor | |
JPH09502961A (en) | Benzo-condensed lactams that promote growth hormone release | |
WO1995034311A1 (en) | Piperazine compounds promote release of growth hormone | |
WO1996002530A1 (en) | Piperidines and hexahydro-1h-azepines spiro substituted at the 4-position promote release of growth hormone | |
JPH10506914A (en) | 4-Heterocyclic piperidine enhances growth hormone release | |
AU2001266066A1 (en) | Growth hormone secretagogues | |
JP2509147B2 (en) | Spiropiperidine and homologues that enhance growth hormone release | |
EP0857020A1 (en) | Wet granulation formulation of a growth hormone secretagogue | |
KR20020015987A (en) | Novel Amide Derivatives as Growth Hormone Secretagogues | |
GB2297972A (en) | Camphor compounds promote release of growth hormone | |
JP4679778B2 (en) | Enhancement of growth hormone release by amidospiropiridines. | |
US6211174B1 (en) | Naphtho-fused lactams promote release of growth hormone | |
SK51398A3 (en) | Polymorphic forms of n-[1(r)-[(1,2-dihydro-1- -methanesulfonylspiro[3h-indole-3,4'-piperidin]-1'-yl)carbonyl]- -2-(phenylmethyloxy)ethyl]-2-amino-2-methyl-propanamide- -methanesulfonate, the preparation thereof, pharmaceutical composition containing them and their use | |
MXPA98003351A (en) | ot. POLYMORPHIC FORMS OF A GROWTH HORMONE SECRETAGOGUE | |
BRPI9611229B1 (en) | Polymorphic form of the compound of N- [1 (R) - [(1,2-dihydro-1-methanesulfonyl-spiro [3 H -indol-3,4'-piperdin] -1'-yl) carbonyl] -2 - - (phenylmethyl oxy) ethyl] -2-amino-2-methylpropanamide and pharmaceutical composition | |
CZ20003152A3 (en) | Salts of N-methyl-N-((1R)-1-(N-methyl-N-((1R)-1-(methylcarbamoyl)-2-phenylethyl)carbamoyl)-2-(2-naphthyl)ethyl)amide of (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enoic acid |