JPH028271B2 - - Google Patents

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JPH028271B2
JPH028271B2 JP58230705A JP23070583A JPH028271B2 JP H028271 B2 JPH028271 B2 JP H028271B2 JP 58230705 A JP58230705 A JP 58230705A JP 23070583 A JP23070583 A JP 23070583A JP H028271 B2 JPH028271 B2 JP H028271B2
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latex
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hydrophilic
biologically
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Batsutsu Hansuugeoruku
Tansueru Pauru
Baiaa Manfureeto
Bohyaru Kareru
Kararu Yarosurafu
Sueku Furanchizeku
Zurukoa Eua
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BEERINGAA MANHAIMU GmbH
CHEKOSUROBENSUKA AKADEMII BEDO
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BEERINGAA MANHAIMU GmbH
CHEKOSUROBENSUKA AKADEMII BEDO
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    • A61K39/395Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/44Antibodies bound to carriers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08FMACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F2/00Processes of polymerisation
    • C08F2/12Polymerisation in non-solvents
    • C08F2/16Aqueous medium
    • C08F2/22Emulsion polymerisation
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
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Description

【発明の詳现な説明】 本発明は芪氎性ラテツクス粒子を含む蚺断薬に
関する。 特に迅速か぀簡単に実斜し、か぀しばしば裞県
で芳察するこずができるために免疫孊で倚くの蚺
断枬定の範囲内で利甚される抗原抗䜓耇合物の凝
集反応には免疫孊的に掻性な物質、䟋えば抗䜓の
キダリダずしお疎氎性ラテツクス粒子が長い間䜿
甚されおいる。この疎氎性ラテツクス粒子は倧お
いはポリスチレンホモポリマヌたたはコポリマ
ヌ、䟋えばスチレンブタゞ゚ンコポリマヌたた
はアクリルニトリルブタゞ゚ンスチレンコポ
リマヌABSから成り、か぀゚マルゞペン重
合により補造される。 長い間知られおいる゚マルゞペン重合では、䞀
般に成分が添加される氎に難溶性のモノマヌ
たたは数皮の氎に難溶性のモノマヌの混合物、
氎、乳化剀および氎溶性開始剀。モノマヌは乳化
剀によ぀お小滎の圢状に液化され、その際倚数の
乳化剀分子の䌚合によ぀お䞭でも䞀郚は空の、か
぀䞀郚はモノマヌ分子によ぀お満たされた倧きな
ミセルが圢成される。埌者はモノマヌの“可溶
性”ずしお瀺される。氎溶性開始剀は、氎盞の各
モノマヌ分子の重合、たたモノマヌで満たされた
ミセルで䞊びにモノマヌ滎で重合を開始もしくは
掻性化するこずのできるラゞカルを圢成する。し
かし実際には重合は膚最したミセルで起る、それ
ずいうのも䞀方でミセル䞭のモノマヌ濃床が呚囲
における個々の溶けたモノマヌ分子の濃床よりも
著しく倧きく、たた他方でミセルの掻性化の確率
がモノマヌ滎の数に比べおミセルの数が倚いため
にきわめお高いからである。充填ミセルの盎埄は
重合䞭にミセルが最終的に球状のラテツクス粒子
に移行するたで増倧する。掻性化されないミセル
の乳化剀分子および消費されたモノマヌ滎の衚面
からの乳化剀分子はラテツクス粒子の衚面をおお
い、か぀生成するポリマヌ分散液の安定化に圹立
぀。 䟋えば界面掻性剀たたは湿最剀であ぀およい乳
化剀たたぱマルゞペン安定剀の添加䞋に公知方
法により補造されるラテツクスは次の欠点を持぀
おおり、これらの欠点は特に免疫孊的に掻性な物
質のキダリダずしおの䜿甚および連続的な溶液枬
定系での䜿甚を劚げる  ラテツクス粒子の疎氎性衚面に所望の免疫孊
的に掻性な物質、䟋えば抗䜓の他に非特異的に
倚数の他の血枅成分が結合する  共有結合によらず吞着的にのみ結合せる免疫
孊的に掻性な物質は蚺断詊隓の経過の䞭で枬定
䞭に再び分離する堎合がある  ゚マルゞペン重合で乳化剀たたは安定剀ずし
お䜿甚される界面掻性剀が氎溶液䞭に拡散しお
生物孊的に掻性なたん癜質の構造を、したが぀
お掻性を砎壊する堎合がある  安定化䜜甚を有する界面掻性剀を陀く際にラ
テツクス懞濁液が凝集し、か぀遠心分離の際に
も安定性がこわれる。その際生成する沈柱物は
再懞濁されお前の状態にするのがきわめお困難
かたたはもはや可胜ではない。 これらの欠点を回避するために既に皮々の提案
がなされたが、これらは垞に前蚘の問題の䞀郚の
みを解決し埗たにぎなか぀た。 カルボキシル化ABS−コポリマヌおよびカル
ボキシル化スチレンブタゞ゚ンコポリマヌから
成る、粒床0.01〜0.9Όの疎氎性ラテツクス粒子
が西ドむツ囜特蚱公告第2203377号公報から公知
であり、これらは血枅孊的に䞍掻性のキダリダず
しお生物孊的に掻性なたん癜質に察しお䜿甚さ
れ、その際たん癜質はキダリダに、ラテツクス䞭
に導入されたカルボキシル基を介しおアミド結合
の圢成䞋に共有結合される。 西ドむツ囜特蚱公開第2812845号公報からABS
−コポリマヌから成る、粒床0.05〜1Όの疎氎性
ラテツクスが公知であり、この堎合にもラテツク
スはカルボキシル基で倉性され、か぀反応性偎鎖
ず瞮合しおおり、そのために免疫孊的に掻性な物
質も共有結合できる。 この公知の疎氎性ラテツクスによ぀お前蚘の第
の問題は解決されるが他のすべおの欠点は盞倉
わらず存圚する。 したが぀お疎氎性ラテツクスの代わりに芪氎性
ゲルを免疫孊的に掻性な物質のキダリダずしお䜿
甚するこずも詊みられた。芪氎性ゲルは吞着性を
党くたたはきわめお僅かしか持たず、他方たん癜
質のかかるゲルぞの共有結合は公知であるので、
その補法および粒床に基づいお“ラテツクス”ず
瀺しおもよい“マむクロゲル”が提案された。か
かる芪氎性ラテツクスは䟋えば米囜特蚱第
4138383号明现曞から公知である。該ラテツクス
は0.35Όよりも小さな盎埄を有する球圢粒子か
ら成り、ラゞカルによ぀お開始される氎性゚マル
ゞペン重合の条件䞋に補造され、その際モノマヌ
ずしおアクリルアミド、アクリル酞、メタクリル
酞たたはアクリレヌトが䜿甚される。乳化剀ずし
おは䟋えば金属石けんが䜿甚される。こうしお埗
られる芪氎性マむクロゲルに生物孊的およびた
たは免疫孊的に掻性な物質が自䜓公知の方法でカ
ルボゞむミド−ブリツゞたたはグルタルゞアルデ
ヒド−ブリツゞを介しお共有結合する。これによ
぀お前蚘の第ず第の問題が解決されるが、第
ず第の問題は解決されない。それずいうのも
゚マルゞペン重合は盞倉らず乳化剀たたは安定剀
の添加䞋に実斜しなければならないからである。 本発明の課題は、前蚘の぀の欠点すべおを回
避するこずのできる芪氎性ラテツクスを含有する
蚺断薬を芋い出すこずである。したが぀お本発明
の課題は、特に生物孊的およびたたは免疫孊的
に掻性な物質を共有結合するこずができ、生物孊
的に掻性なたん癜質の構造、したが぀お掻性を損
なわず、その安定性が遠心分離の際にこわれず、
か぀凝集し、か぀匕続き再び容易に懞濁させるこ
ずのできる芪氎性ラテツクス粒子を含有する蚺断
薬を芋出すこずである。 この課題は本発明によれば氎に難溶性のモノマ
ヌのホモポリマヌたたはコポリマヌから成る芪氎
性ラテツクス粒子を含有する蚺断薬によ぀お解決
される。該芪氎性ラテツクス粒子は氎溶性の、ラ
ゞカルを圢成する開始剀の存圚で、しかし乳化
剀、安定剀たたは湿最剀を添加せずに゚マルゞペ
ン重合によ぀お補造可胜であり、か぀ホモポリマ
ヌの堎合にモノマヌが、もしくはコポリマヌの堎
合にモノマヌ類の䞀郚が分子䞭に少なくずも個
の重合可胜な−二重結合を有する゚ポキシ
ドである。 意想倖にも冒頭で匕甚された公知技術にも蚘述
されおいる、圓業界で長い間支配的であ぀た思想
に反しお乳化剀、安定剀たたは湿最剀の添加が゚
マルゞペン重合の実斜にた぀たく必芁ではないこ
ずが瀺された。したが぀お、乳化剀ずしお䜿甚さ
れる金属石けんたたは界面掻性剀はラテツクス粒
子から拡散し、か぀ラテツクス粒子に共有結合せ
るたん癜質の生物孊的掻性を損ないたたは完党に
砎壊したために埓来は無条件に必芁であ぀た、ポ
リマヌのラテツクス粒子からの倧おいはきわめお
困難か぀煩雑な乳化剀の陀去が省略される。 少なくずも個の重合可胜な二重結合を含むグ
リシゞル化合物をモノマヌずしお䜿甚するのがき
わめお有利であるず瀺された。該化合物の構造は
重合性の二重結合䞭に疎氎性郚分および゚ポキシ
ド基、オキシラン環䞭に同時に芪氎性郚分を有す
る。生成するラテツクス懞濁液は乳化剀、安定剀
たたは湿最剀の䞍圚にもかかわらず凝集しない。
ラテツクス懞濁液の安定化は遠心分離の際にもこ
わされない。末端゚ポキシド基は皮々の反応加
氎分解、アンモノリシス、アミノリシス、瞮合
をきわめお受け易いので゚ポキシド基は単分散系
に分散したラテツクス球䜓の衚面を該゚ポキシド
基が氎盞方向に配向されるようにおお぀おいるに
ちがいない。 モノマヌずしおは有利にグリシゞルメタクリレ
ヌト、グリシゞルアクリレヌト、グリシゞルビニ
ル゚ヌテル、グリシゞルビニルフタレヌトおよび
−゚ポキシブト(1)゚ンが䜿甚される。その
際これらのモノマヌの皮を専ら䜿甚し、その結
果、生成する芪氎性ラテツクス粒子はホモポリマ
ヌであるが、これらのモノマヌの混合物を共重合
しおもよい。 ゚ポキシド基の含量を制埡するために前蚘のグ
リシゞル化合物皮たたは数皮ず䞀緒に他のモノ
マヌ、䟋えばスチレン、ゞ゚ン、アクリルアミ
ド、メタクリルアミド、アルキル−、ヒドロキシ
アルキル−およびアミノアルキルアクリレヌト、
アルキル−、ヒドロキシアルキル−およびアミノ
アルキルメタクリレヌト、ビニル゚ヌテル、ビニ
ル゚ステル、−ビニルピロリドン等も共重合す
るこずができる。 着色料たたは螢光性化合物、䟋えばフルオレセ
むンのモノマヌの重合性誘導䜓の存圚で重合しお
もよい。このようにしおヒトたたは動物の組織で
抗原もしくは抗䜓を怜出するために奜適である着
色した、もしくは螢光性のラテツクス粒子が埗ら
れる。この怜出方法は組織孊で組織断片を補造す
るのに特に奜適である。モノマヌの重合性誘導䜓
ずしおは有利に着色料もしくは螢光性化合物が䜿
甚され、この䞭に自䜓公知の方法でメタクリル基
もしくはアクリル基が導入される。 生成するラテツクス粒子の氎に察する難溶性を
高めるために゚マルゞペン重合䞭に垞甚の架橋
剀、䟋えばアルキレン−たたはヒドロキシアルキ
レンゞアクリレヌト、アルキレン−たたはヒドロ
キシアルキレンゞメタクリレヌト、アルキレンビ
スアクリルアミドたたはアルキレンビスアクリル
メタクリルアミド、ゞビニルベンれン等を添加し
おもよい。 開始剀ずしお゚マルゞペン重合で垞甚の氎溶性
開始剀を䜿甚するこずができる。有利にペルオキ
゜ゞスルプヌト、ペルオキ゜ボレヌト、過酞化
氎玠たたは奜適なレドツクス系が䜿甚される。 氎に難溶性のモノマヌ皮たたは数皮を乳化剀
䞍含の゚マルゞペン重合により芪氎性ラテツクス
粒子を補造するための方法は空䞭酞玠もしくは遊
離の酞玠に察しお敏感である。したが぀お酞玠を
すべおのポリマヌ成分および容噚から十分な煮
沞、䞍溶性ガス雰囲気䞋における蒞溜たたは窒
玠、アルゎンたたは他の䞍掻性ガスの導通により
きわめお慎重に陀去しなければならない。 乳化剀䞍含の゚マルゞペン重合は有利に氎盞察
モノマヌ盞の济比を容量に関しお〜16
で実斜する。 氎盞に溶けた開始剀の濃床は有利に0.5〜1.5
であり、か぀モノマヌ盞䞭の゚ポキシドの
濃床は有利に〜100重量である。 ゚マルゞペン重合は有利に枩床〜80℃で実斜
する。枩床は遞択された開始剀に䟝存する。ペル
オキ゜二硫酞カリりムの䜿甚の際には有利に60〜
70℃で䜜業する。同様に反応時間は開始剀の遞択
に䟝存し、〜40時間である。 芪氎性ラテツクス粒子は厳密に球圢で、単分散
系で分散され、か぀盎埄0.15〜1.5Όの互いにほ
が同じ倧きさの粒子である。 芪氎性ラテツクス粒子ぱマルゞペン重合終了
埌尚重合されないモノマヌの残分を含んでいる堎
合があり、この残分は氎蒞気蒞溜たたは透析によ
り陀去するこずができる。この堎合にも遠心分離
によりラテツクス粒子を安定性をこわさずに沈降
させるこずができ、その結果匕続き再分散するこ
ずができる、芪氎性ラテツクス粒子の特に有利な
性質は保持される。このようにしお本発明による
ラテツクスは数床の遠心分離およびデカンテヌシ
ペンによ぀お簡単に粟補するこずができる。 ラテツクスの末端の遊離゚ポキシド基は皮々の
化孊物質に察しお高反応性であり、したが぀お容
易に加氎分解でき、過ペり玠酞塩もしくは過ペり
玠酞を甚いお酞化しおアルデヒド基にし、アンモ
ニア、第アミン、ゞアミンたたはヒドラゞンず
反応させお第たたは第アミノ基にし、たたは
他の公知の反応を甚いお倉性するこずができる。
ラテツクスの゚マルゞペンは乳化剀を欠いおいる
にもかかわらず゚ポキシド基の倉性が所望により
゚マルゞペン重合の間も実斜し埗るほど高い安定
性を有し、そのために既に重合反応から衚面が䟋
えば第アミノ基で倉性されたラテツクスが生成
する。次いで倉性された、たたは誘導䜓化された
゚ポキシド基は、キダリダずしお䜜甚する芪氎性
ラテツクス粒子に共有結合される生物孊的におよ
びたたは免疫孊的に掻性なたん癜質ずの“結合
Kupplung”に䜿甚される。 前蚘の課題は芪氎性ラテツクス粒子を生物孊的
およびたたは免疫孊的に掻性な物質の血枅孊的
に䞍掻性なキダリダずしお、䟋えばペプチド、た
ん癜質、酵玠、ホルモン、ビタミン、抗原、抗䜓
および埮生物のキダリダずしお䜿甚するこずによ
り解決される。 本発明の目的はキダリダずしお芪氎性ラテツク
ス粒子およびこのキダリダに盎接たたは“ブリツ
ゞ”ずしおの結合剀を介しお共有結合する、生物
孊的およびたたは免疫孊的に掻性な前蚘の物質
を含む蚺断薬である。 本発明による蚺断薬は同䜍元玠暙識免疫定量法
RIA、酵玠免疫定量法EIAおよびいわゆる
ELISA酵玠結合免疫吞着定量法で䜿甚するの
に特に奜適である。 䟋 参考 ペルオキ゜二硫酞カリりムK2S2O80.08
を蒞溜氎80mlに溶かし、か぀分間窒玠を導通さ
せるこずにより空䞭酞玠を排陀する。同時にグリ
シゞルメタクリレヌト10mlから同様に空䞭酞玠を
陀く。成分をガラス反応噚に入れ、か぀曎に10
分間窒玠で凊理する。次いで反応噚を閉じ、か぀
反応を枩床65℃で䞍断に撹拌䞋に時間実斜す
る。この期間の埌倉換率は98である。反応生成
物は盎埄0.44Όの球圢の、単分散系に分配され
るポリグリシゞルメタクリレヌト粒子から成るラ
テツクスである。 䟋 参考 䟋ず同様にしおK2S2O80.08を溶かした蒞
溜氎160mlおよびグリシゞルメタクレヌト15重量
ずスチレン85重量の混合物10mlを別個に酞玠
を排陀し、か぀枩床65℃で䞍断に撹拌䞋に時間
互いに反応させる。倉換率は71.6である。重合
しない残量モノマヌを氎蒞気蒞溜により陀く。生
じる単分散系コポリマヌのラテツクス粒子は盎埄
0.22Όを有する。 䟋 参考 䟋ず同様にしお、蒞溜氎100ml䞭の
K2S2O80.1の溶液およびグリシゞルメタクリレ
ヌト15重量ず酢酞ビニル85重量の混合物10ml
を互いに反応させる。倉換率は80である。残量
モノマヌを氎蒞気蒞溜により陀く。生成するラテ
ツクスは盎埄0.16Όの単分散系、球圢粒子であ
る。 こうしお補造されたラテツクス100mlを0.1M−
NaOH溶液100mlず混合し、か぀枩床玄25℃で24
時間攟眮する。加氎分解䞭および埌もラテツクス
の安定性は保持される。゚マルゞペンを遠心分離
し、䞊柄みをデカンテヌシペンし、か぀固䜓盞を
再び氎䞭に分散させる。遠心分離および再分散を
床繰返す。生じる䞭性゚マルゞペンを−
H2SO4でPHにし、か぀過ペり玠酞を゚ポキシ
ド基ず圓量で加える。酞化は25℃で玄24時間行な
う。匕続き未反応䜎分子物質を透析によ぀お陀
く。安定な゚マルゞペンの倉性ラテツクス粒子は
アルデヒド基2.8重量たたは0.97ミリモル
を含有する。 䟋 参考 䟋のようにしお蒞溜氎100ml䞭のK2S2O80.1
の溶液およびグリシゞルメタクリレヌト15重量
ずむ゜プレン85重量の混合物10mlを枩床65℃
で24時間反応させる。倉換率は76である。匕続
き残量モノマヌを氎蒞気蒞溜により陀く、その際
盎埄0.25Όの安定な、単分散系に分散する球圢
のラテツクス粒子が生じる。 匕続きこの゚マルゞペン100mlにアンモニア氎
溶液25100mlを加え、か぀宀枩で24時間攟
眮し、その際゚ポキシド基がアンモノリシスによ
぀おアミノ基に倉わる。匕続き反応生成物を過ペ
り玠酞で凊理し、その際アルデヒド基4.5重量
たたは1.55ミリモルを含有するラテツクスが
生じる。 䟋 参考 䟋のようにしお氎1.5䞭のK2S2O81.5の溶
液およびグリシゞルメタクリレヌト15mlを別個に
酞玠を陀き、か぀互いに反応させる。曎に酞玠䞍
含のグリシゞルメタクリレヌト120mlを酞玠排陀
䞋に時間の間反応容噚に連続的に滎䞋する。次
いで曎に30分間重合を続ける。倉換率は85であ
り、か぀生成する粒子は盎埄1.1Όを有する。 䟋 参考 䟋のようにしおグリシゞルメタクリレヌト
重量ずスチレン99重量の混合物10mlおよび蒞
溜氎100ml䞭のK2S2O80.1の溶液を65℃で22時
間重合し、その際盎埄0.5Όの芪氎性ラテツクス
粒子が生成する。倉換率は90である。 䟋 参考 䟋により補造されたラテツクス懞濁液20mlを
2N−苛性゜ヌダ液mlずずもに䞀倜にわた぀お
宀枩で撹拌し、次いで時間氎に察しお透析す
る。残溜する懞濁液を過ペり玠酞ナトリりム100
mgの添加によりPHに調節し、か぀䞀倜にわた぀
お宀枩で撹拌し、次いで時間蒞溜氎に察しお透
析する。 䟋 参考 䟋により補造されたラテツクス懞濁液20mlを
濃アンモニア溶液10mlずずもに宀枩で20時間撹拌
し、か぀流氎に察しお48時間透析する。埗られる
懞濁液を遠心分離する。也燥物質の窒玠含量は玄
であり、これは各玄10の゚ポキシド単䜍のア
ミノ化に盞圓し、しかし衚面の優れた反応では確
実により高い誘導䜓化床に盞圓する。遠心分離さ
れた固䜓物質を0.1N−苛性゜ヌダ液20mlで吞収
する。これに撹拌䞋にゞメチルホルムアミドml
に溶かしたコハク酞ヒドロキシサクシンむミド゚
ステル−アミドアセトアルデヒド−アセタヌル
1.5を滎䞋する。生成する懞濁液を曎に時間
撹拌し、次いで1N−塩酞でPHにし、か぀流れ
る蒞溜氎に察しお12時間透析する。 䟋 参考 䟋により補造されたラテツクス懞濁液20mlに
Na2S・9H2O0.5を加え、か぀宀枩で日撹拌
する。匕続き懞濁液の臭いがなくなるたで流れる
蒞溜氎に察しお透析し、次いで懞濁液を遠心分離
する。也燥物質はむオり玄を有し、これは玄
10の゚ポキシド単䜍の誘導䜓化に盞圓し、衚面で
の優れた反応では確実により高い誘導䜓化床に盞
圓する。 遠心分離された生成物にゞメチルホルムアミド
mlに溶かした−マレむンむミドヘキサン酞ヒ
ドロキシサクシンむミド゚ステルを加え、宀
枩で時間撹拌し、次いで流れる蒞溜氎に察しお
12時間透析する。 䟋 10 ラテツクス−γ−グロブリンコンゞナゲヌト
Konjugatの圢成 γ−グロブリン溶液mlたん癜質56.6mg含
有に (a) 䟋により補造されたラテツクス懞濁液 (b) 䟋により誘導䜓化されたラテツクス懞濁液 (c) 䟋により誘導䜓化された 〃 (d) 䟋により誘導䜓化された 〃 各20mlを加え、か぀宀枩で12時間透析する。残留
する懞濁液を遠心分離する。匕続き䞊柄み液䞭の
遊離のたん癜質を枬定する。実枬倀からラテツク
ス粒子に結合された割合を蚈算するこずができ
る。それによれば バツチ(a)はγ−グロブリン mgを結合しお含有、 〃 (b)は 〃 43mgを結合しお含有、 〃 (c)は 〃 15mgを結合しお含有、 〃 (d)は 〃 19mgを結合しお含有。 䟋 11 ラテツクス−IgG−コンゞナゲヌト 䟋10のようにしおIgG−溶液および皮々のラテ
ツクス懞濁液からラテツクス−IgGコンゞナゲヌ
トを補造する。抗䜓耇合䜓圢成によ぀おラテツク
ス粒子にIgG−分子が積茉されおいるこずが怜出
される。 以䞋本発明による芪氎性ラテツクス粒子の䜿甚
䟋ずしお、詳现にはヒツゞの抗T4−血枅からの
T4−抗䜓を甚いおチロキシンT4を免疫定量
するための、および二重抗䜓−分離法を甚いお血
枅䞭のヒトチレオトロピンTSHを定量する
ための぀の蚺断薬を蚘茉する。 䟋 12 ヒツゞの抗T4−血枅に察するキダリダずしお
のホモポリグリシゞルメタクリレヌトラテツク
ス粒子の䜿甚T4−ELISAを行なうための蚺
断薬 チロキシンT4をELISAを甚いお定量する
ために先ずヒツゞの抗T4−血枅からのT4−抗䜓
を本発明による芪氎性ホモポリグリシゞルメタク
リレヌトラテツクス粒子に、該粒子を䟋〜の
いずれかによ぀お誘導䜓化し、か぀䟋10および11
ず同様にしおT4−抗䜓ず反応させるこずによ぀
お共有結合させる。こうしお埗られる゜リツド−
プヌスSolid−Face−抗䜓は詊隓のための
第詊薬である。第詊薬ずしおT4を自䜓公知
の方法で奜適な酵玠、䟋えばペルオキシダヌれ
PODたたはβ−ガラクトシダヌれβ−Gal
で暙識する、すなわち結合しお酵玠コンゞナゲヌ
トにする。酵玠ずしおこの䟋ではβ−Galを䜿甚
する。第詊薬は未知量のT4を含有する詊料で
あり、か぀第詊薬は酵玠コンゞナゲヌトのβ−
Galの垞甚の基質であり、詳现にはこの䟋ではト
リス−HCl−緩衝液PH7.3䞭のニトロプニ
ル−β−ガラクトシドである。 詊隓の原理は次の぀の反応経過に基づく  䞀方の芪氎性ラテツクス粒子に共有結合せる
T4−抗䜓ず他方の酵玠暙識T4“酵玠コンゞナ
ゲヌト”ず詊料䞭に含たれる遊離のT4ずの間
の免疫反応。この反応では゜リツド−プヌス
−抗䜓、酵玠コンゞナゲヌトおよび詊料のT4
の間に競合的結合が起こる。  −分離結合、遊離。これ
は結合した酵玠コンゞナゲヌト(B)ず結合しない
酵玠コンゞナゲヌト(F)の分離である。この分離
は有利に遠心分離たたは䟋えば氎たたは奜適な
緩衝液に察する透析によ぀お達成される。  酵玠コンゞナゲヌトず垞甚の、䜿甚される酵
玠に関しお特異的な基質ずの間に進行し、か぀
比色法たたは他の公知方法で远跡するこずので
きる酵玠怜出反応。酵玠掻性は䞊柄み液遊離
郚分䞭でかたたは再懞濁された沈柱物結合
郚分䞭で枬定するこずができる。 詊隓実斜 前蚘のようにしお補造されたラテツクス−抗
T4懞濁液を氎たたは緩衝液䞭で比1000で垌
釈する。この懞濁液0.5mlに皮々の既知量のT4−
含量を有するT4−血枅暙䞖溶液100ΌおよびT4
−β−Gal−コンゞナゲヌト溶液100Όを加え
る。反応混合物を宀枩で30分恒枩保持する。恒枩
保持の間バツチを䞍断に振盪し、か぀同じT4
−暙準含量を有するバツチを単に攟眮した。次
いでそれぞれ懞濁液を遠心分離し、か぀−盞が
存圚する䞊柄み液を分離した。−盞、すなわち
゜リツド−プヌス抗䜓に結合したT4−β−Gal
コンゞナゲヌトは沈柱物䞭に存圚する。酵玠掻性
を枬定するためにこれを −ニトロプニル−β−ガラクトシドシグマ
瀟 450mg 塩化ナトリりム 100ミリモル 塩化マグネシりム 10ミリモル トリス緩衝剀HCl 10ミリモル メルカプト゚タノヌル 0.4v から成る、PH7.3の過剰の基質溶液に加え、か぀
公知方法で波長405nで吞光床を枬定する。倖
郚の機械的な混合をしない堎合に懞濁状態で保持
されるラテツクス粒子が玄11枛少したシグナル
を䞎えるこずが瀺された。 このようにしおT4−怜量曲線を枬定した埌、
匕続き同様にしおT4−暙準血枅100Όの代わり
に未知量のT4含量の詊料それぞれ100Όを䜿甚
し、か぀再懞濁埌の−盞の吞光床を基質溶液䞭
で枬定するこずにより定量を行な぀た。 芪氎性ラテツクス粒子が抗䜓および抗原のキダ
リダずしおきわめお奜適であり、か぀それらの免
疫反応性の損なわないこずが認めれた。したが぀
お芪氎性ラテツクス粒子は゜リツド−プヌス−
酵玠免疫詊隓でキダリダずしお有利に䜿甚するこ
ずができる。曎に緩衝剀条件にある芪氎性ラテツ
クス粒子が長期間にわた぀お懞濁状態を保持し、
したが぀お粒子の密床がほがに等しいこずが認
められた。その䞊に本発明による芪氎性ラテツク
ス粒子は免疫反応性を損なわずに良奜に遠心分離
可胜であり、か぀再懞濁可胜である。 䟋 13 ヒトチレオトロピンTSHを定量するため
の酵玠免疫定量EIA ヒト血枅䞭のTSHの枬定は甲状腺疟病の蚺断
で著しく重芁である。基瀎TSH濃床の著しい䞊
昇で次甲状腺機胜枛匱が認められる。その他血
枅䞭のTSH基瀎倀0.5〜3ÎŒUmlがTRH刺激ホ
ルモン攟出因子で刺激埌に䞊昇しない堎合に甲
状腺機胜枛匱は確実にあり埗ない。それに察しお
TSH倀が少なくずも2.5ÎŒUml、しかし25ÎŒU
ml以䞋で䞊昇する堎合には甲状腺物質代謝は高い
確率で損なわれおいない。25ÎŒUmlを僅かに䞊
回぀た基瀎倀の䞊昇は朜圚的な症状発珟前の甲状
腺機胜枛匱を掚枬するこずができる。既にTSH
の酵玠免疫定量は公知である〔“クリニカ・ヒミ
カ・アクタClinica Chemica Acta”、第67
巻、263〜268頁1976幎“゚ンツむヌメ・ラベ
ルド・むムノアツセむ・オブ・ホルモンズ・アン
ド・ドラツグスenzyme labelled
immunoassay of hormones and drugs”、327〜
337頁。S.B.Pal、Walter de Gruyter、ベルリン
およびN.Y.1978幎“アナリナヌチカル・ビオ
ケミストリAnalytical Biochemistry”第96
巻、419〜425頁1979幎〕。しかしこれらの公知
の枬定法はきわめお長い恒枩保持時間日た
でを必芁ずし、鋭敏ではなくTSH5ÎŒUml
たたは高䟡な枬定装眮螢光枬定装眮たたは発光
枬定装眮ず前提ずし、その際その他にバツチを
混合するための装眮が必芁である。 本発明による芪氎性ラテツクス粒子の䜿甚は
1/2日にすぎない党恒枩保持時間で二重抗䜓分離
技術によるTSHの枬光法による枬定を可胜にす
る。その際第の抗䜓が本発明による芪氎性ラテ
ツクス粒子に共有結合される。次いで結合された
酵玠掻性を−分離により枬定する。ラテツ
クス粒子は氎の密床よりも著しくは高くない密床
を有しおいるので、ラテツクス粒子は酵玠反応の
間も懞濁状態であり、これにより垞甚の堎合が省
略される。抗䜓の高い負荷可胜性のために可胜で
あるきわめお垌釈されたラテツクス粒子を䜿甚す
る堎合には酵玠反応終了埌の粒子の遠心分離も省
略される、それずいうのも懞濁液を通過しお枬光
できるからである。 免疫孊的詊隓方法で䞀般に䜿甚されるラテツク
スずは異なり抗䜓を負荷された、本発明による芪
氎性ポリグリシゞルメタクリレヌト粒子は遠心分
離埌容易に再懞濁させるこずができる。同じ理由
から酵玠で暙識された抗原のきわめお小さあ非特
異的吞着が瀺される第抗䜓の䞍圚での結合さ
れた掻性。 詊隓実斜 TSH−暙準TSH䞍含血枅䞭の囜際参照調剀
MRC68380.2mlを150000で氎たたは奜適
な緩衝溶液で垌釈した、自䜓公知の、䟋えばモル
モツトの抗TSH−抗血枅0.1mlずずもに恒枩保持
する。12時間埌グルコヌスオキシダヌれGOD
に共有結合せるTSHTSH箄1.5×10-9に盞圓
から成る酵玠コンゞナゲヌトの溶液0.1mlを第
工皋の混合物にピペツトで添加する。この混合物
に曎に12時間埌ラテツクス懞濁液0.1mlをピペツ
トで添加する。該懞濁液はメタクリレヌトラテツ
クス0.1〜mgmlを含有し、その際䟋11に蚘茉
されおいるように也燥ラテツクス粒子1000mgに぀
き、モルモツト−IgGに察するダギの抗血枅から
埗られた免疫グロブリンフラクシペンのたん癜質
〜150mgを加え、か぀そうしお芪氎性ラテツク
ス粒子に共有結合された。時間埌遠心分離し、
か぀ラテツクス粒子の沈柱物を奜適な緩衝溶液
mlで掗う、それによりラテツクス粒子は再懞濁さ
れる。匕続き改めお数床遠心分離し、か぀掗浄す
る。䞊柄み液を棄おる。 各バツチにGODの基質溶液mlをピペツトで
入れ、か぀短時間振盪する。その埌少なくずも
時間ラテツクス粒子は均䞀に懞濁されたたたであ
る。次いで懞濁液を目盛りクベツトに入れ、か぀
405nで吞光床を枬定する。各吞光床から基質
盲怜倀L1を匕く。L1は、抗TSH−抗血枅ずTSH
−GODずの混合物に添加された前蚘のラテツク
ス懞濁液ず同じ物質を負荷されたラテツクス粒子
を含む基質溶液mlの吞光床である。 こうしお求められた吞光床を皮々のTSH暙準
濃床に関しお蚘録する。この怜量曲線を甚いお臚
床詊料䞭の未知含量のTSHの濃床を枬定した吞
光床に基づいお読み取る。 奜適な緩衝溶液ずしお有利にEDTA0.005モル、
りシ血枅アルブミン0.1䞊びにNaCl0.15モルを
含む0.04M−ホスプヌト溶液PH7.4を䜿甚
する。 GOD−基質溶液ずしお有利にグルコヌス
100ml、2′−アゞノ−ゞ−〔−゚チル−
ベンズチアゟロン−スルホン酞(6)〕ABTS
100mg100ml、ペルオキシダヌれPOD
mg100ml、0.05M−ホスプヌト緩衝液PH
5.6を含む氎溶液を䜿甚する。 比范のために぀の血枅詊料のTSH含量を前
蚘EIA(A)䞊びに公知の二重抗䜓−RIA(B)で枬定し
た。次衚に瀺す通りそれぞれ枬定倀は良く䞀臎す
る (A) (B) 血枅 11.2ÎŒUml 12.5ÎŒUml  7.3ÎŒUml 7.1ÎŒUml 血枅 3.8ÎŒUml 4.5ÎŒUml 前蚘のTSH−枬定からも、本発明による芪氎
性ラテツクス粒子が生物孊的およびたたは免疫
孊的に掻性な物質、特に抗䜓のキダリダずしおき
わめお奜適であるこずが埗られる。 非特異的結合の枬定 TSH暙準詊料を前蚘の詊隓実斜の項目で蚘茉
されたようにしお凊理し詊料、か぀ほずん
ど詊料ず同じ反応にかけられた同様の詊料詊
料ず比范する。抗TSH−抗血枅のみは省い
た。詊料ずの懞濁液で枬定された吞光床の比
范は非特異的結合が1.5よりも小さいこずを瀺
す。 【衚】

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  キダリダずしお氎に難溶性のモノマヌである
    分子䞭に少なくずも個の重合可胜な−二
    重結合を有する゚ポキシドのホモポリマヌたたは
    コポリマヌから成る芪氎性ラテツクス粒子および
    このキダリダに盎接たたは“ブリツゞ”ずしおの
    結合剀を介しお共有結合せる生物孊的にか぀た
    たは免疫孊的に掻性な物質を含有するが、この
    際、芪氎性ラテツクス粒子が氎溶性のラゞカル圢
    成性開始剀の存圚で、しかし乳化剀、安定剀を添
    加せずに゚マルゞペン重合によ぀お補造可胜であ
    るこずを特城ずする、蚺断薬。  生物孊的にか぀たたは免疫孊的に掻性な物
    質ずしおペプチド、たん癜質、酵玠、ホルモン、
    ビタミン、抗原、抗䜓たたは埮生物を含有する、
    特蚱請求の範囲第項蚘茉の蚺断薬。  チロキシン枬定のための蚺断薬ずしお生物孊
    的にか぀たたは免疫孊的に掻性な物質ずしおチ
    ロキシン抗䜓を含有する、特蚱請求の範囲第項
    蚘茉の蚺断薬。  ヒトチレオトロピン枬定の蚺断薬ずしお生物
    孊的にか぀たたは免疫孊的に掻性な物質ずしお
    ヒト−チレオトロピン抗䜓を含有する、特蚱請求
    の範囲第項蚘茉の蚺断薬。
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58185604A (ja) * 1982-04-26 1983-10-29 Tokuyama Soda Co Ltd ポリメタクリル酞グリシゞルラテツクスの補造方法
JPS59182804A (ja) * 1983-04-01 1984-10-17 Toray Ind Inc 反応性埮粒子およびその補造法
JPS59204601A (ja) * 1983-05-09 1984-11-20 Unitika Ltd 生理掻性を有する成圢䜓の補造方法
DE3318184A1 (de) * 1983-05-19 1984-11-22 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Traeger zur beschichtung mit immunologisch aktivem material
JPS59219380A (ja) * 1983-05-27 1984-12-10 Nippon Mektron Ltd 撥氎撥油剀゚マルゞペンの補造法
KR860001409B1 (ko) * 1983-06-10 1986-09-23 니혌엑슀란 고였교였 가부시끌가읎샀 비읎드상 폎늬뚞의 제조법
JPH0713641B2 (ja) * 1984-05-07 1995-02-15 株匏䌚瀟トクダマ 蚺断甚詊薬の補造方法
DE3530312A1 (de) * 1985-08-24 1987-02-26 Guenther Dr Sawatzki Traeger fuer die photometrische immunspezifische bestimmung von antigenen oder antikoerpern, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung
GB2407500A (en) * 2003-11-03 2005-05-04 Ist Superiore Sanita Use of microparticles for antigen delivery
US7465765B2 (en) * 2004-09-27 2008-12-16 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Latex particulates with epoxide functional groups
JP4993081B2 (ja) * 2007-02-28 2012-08-08 株匏䌚瀟 蛋癜質固定化磁性粒子およびその補造方法
WO2008111599A1 (ja) * 2007-03-12 2008-09-18 Jsr Corporation 生䜓関連物質の怜出方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5428816A (en) * 1977-08-03 1979-03-03 Hoffmann La Roche Immunological diagnostic reagent

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2841033A1 (de) * 1978-09-21 1980-04-03 Bayer Ag Verfahren zur herstellung waessriger polymerisatdispersionen

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5428816A (en) * 1977-08-03 1979-03-03 Hoffmann La Roche Immunological diagnostic reagent

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