JPH08278308A - 免疫測定法 - Google Patents
免疫測定法Info
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- JPH08278308A JPH08278308A JP24142595A JP24142595A JPH08278308A JP H08278308 A JPH08278308 A JP H08278308A JP 24142595 A JP24142595 A JP 24142595A JP 24142595 A JP24142595 A JP 24142595A JP H08278308 A JPH08278308 A JP H08278308A
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- antibody
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 臨床検査等の分野に広く利用でき、例えば抗
原抗体反応を利用したラテックス凝集法や血球凝集法に
よる梅毒診断薬などの診断薬に利用し得る、汎用性が高
く非特異反応が少ない免疫測定法を提供する。 【解決手段】 抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤
（例、ポリエチレングリコール）並びに、アミノエタン
スルホン酸誘導体（例、２−〔４−（２−ハイドロキシ
エチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸）及び
アミノプロパンスルホン酸誘導体（例、３−（Ｎ−モル
ホリノ）プロパンスルホン酸）の少なくとも一種を０．
００１〜３．０Ｍの濃度で存在させる。例えば、梅毒ト
レポネーマ抗原を不溶性担体に担持させ、抗梅毒トレポ
ネーマ抗体との抗原抗体反応により生じた不溶性担体の
凝集の度合いを検出する免疫測定法に使用し得る。
原抗体反応を利用したラテックス凝集法や血球凝集法に
よる梅毒診断薬などの診断薬に利用し得る、汎用性が高
く非特異反応が少ない免疫測定法を提供する。 【解決手段】 抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤
（例、ポリエチレングリコール）並びに、アミノエタン
スルホン酸誘導体（例、２−〔４−（２−ハイドロキシ
エチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸）及び
アミノプロパンスルホン酸誘導体（例、３−（Ｎ−モル
ホリノ）プロパンスルホン酸）の少なくとも一種を０．
００１〜３．０Ｍの濃度で存在させる。例えば、梅毒ト
レポネーマ抗原を不溶性担体に担持させ、抗梅毒トレポ
ネーマ抗体との抗原抗体反応により生じた不溶性担体の
凝集の度合いを検出する免疫測定法に使用し得る。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、抗原抗体反応によ
り抗原または抗体を測定する免疫測定法に関し、さらに
詳しくは、抗原抗体反応による凝集反応によって抗梅毒
トレポネーマ抗体を測定する免疫測定法に関する。
り抗原または抗体を測定する免疫測定法に関し、さらに
詳しくは、抗原抗体反応による凝集反応によって抗梅毒
トレポネーマ抗体を測定する免疫測定法に関する。
【０００２】
【従来の技術】抗梅毒トレポネーマ抗体の検出方法の一
つとして、梅毒トレポネーマ抗原を不溶性担体に担持さ
せ、検体中の抗梅毒トレポネーマ抗体との抗原抗体反応
によって生じた不溶性担体の凝集の度合いを検出するこ
とにより測定する方法がある。このような測定方法とし
ては、赤血球凝集反応法、ラテックス凝集法が知られて
いる。
つとして、梅毒トレポネーマ抗原を不溶性担体に担持さ
せ、検体中の抗梅毒トレポネーマ抗体との抗原抗体反応
によって生じた不溶性担体の凝集の度合いを検出するこ
とにより測定する方法がある。このような測定方法とし
ては、赤血球凝集反応法、ラテックス凝集法が知られて
いる。
【０００３】上記検出方法としては、凝集の有無を肉眼
で判定する方法、反応液に光を照射して散乱光または透
過光を測定する方法があり、肉眼判定は定性法または半
定量法として用いられている。
で判定する方法、反応液に光を照射して散乱光または透
過光を測定する方法があり、肉眼判定は定性法または半
定量法として用いられている。
【０００４】これら凝集反応の測定において、測定感度
の向上または抗原抗体反応の促進を目的として、ポリエ
チレングリコール（特開昭５８−４７２５６号公報）、
ポリグリコシルエチルメタクリレート（特開平４−１２
２８５８号公報）、ポリビニルピロリドン（特開平５−
１８０３８３号公報）等の水溶性高分子を反応系に添加
する方法が提案されていた。しかしながらポリエチレン
グリコール、ポリグリコシルエチルメタクリレート、ポ
リビニルピロリドン等の水溶性高分子では、目的物質以
外の共存物質の反応による凝集、いわゆる非特異凝集が
生じ、誤った測定結果を与えるという問題がある。
の向上または抗原抗体反応の促進を目的として、ポリエ
チレングリコール（特開昭５８−４７２５６号公報）、
ポリグリコシルエチルメタクリレート（特開平４−１２
２８５８号公報）、ポリビニルピロリドン（特開平５−
１８０３８３号公報）等の水溶性高分子を反応系に添加
する方法が提案されていた。しかしながらポリエチレン
グリコール、ポリグリコシルエチルメタクリレート、ポ
リビニルピロリドン等の水溶性高分子では、目的物質以
外の共存物質の反応による凝集、いわゆる非特異凝集が
生じ、誤った測定結果を与えるという問題がある。
【０００５】そこで上記の問題を防止するため、ウシ血
清アルブミン、ウマ血清アルブミン等の免疫学的に不活
性なアルブミン類を反応系に添加する方法が提案されて
いる（特開昭５８−１４４７４８号公報）。しかしなが
ら、上記のようなアルブミン添加によっても、非特異凝
集を抑えるには十分ではなく、非特異凝集の発生しない
免疫測定法が望まれていた。
清アルブミン、ウマ血清アルブミン等の免疫学的に不活
性なアルブミン類を反応系に添加する方法が提案されて
いる（特開昭５８−１４４７４８号公報）。しかしなが
ら、上記のようなアルブミン添加によっても、非特異凝
集を抑えるには十分ではなく、非特異凝集の発生しない
免疫測定法が望まれていた。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記問題点
を解決するものであり、その目的は、汎用性が高く、非
特異反応が少ない免疫測定法を提供することである。
を解決するものであり、その目的は、汎用性が高く、非
特異反応が少ない免疫測定法を提供することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明の免疫測定法は、
抗原抗体反応により抗原又は抗体を測定する免疫測定法
において、上記抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤並
びに、アミノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロパ
ンスルホン酸誘導体の少なくとも一種を０．００１〜
３．０Ｍの濃度で存在させる。
抗原抗体反応により抗原又は抗体を測定する免疫測定法
において、上記抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤並
びに、アミノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロパ
ンスルホン酸誘導体の少なくとも一種を０．００１〜
３．０Ｍの濃度で存在させる。
【０００８】本発明２の免疫測定法は、梅毒トレポネー
マ抗原を不溶性担体に担持させ、抗梅毒トレポネーマ抗
体との抗原抗体反応により生じた凝集の度合いを検出す
ることにより前記抗体を測定する免疫測定法において、
上記抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤並びに、アミ
ノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロパンスルホン
酸誘導体の少なくとも一種を０．００１〜３．０Ｍの濃
度で存在させる。
マ抗原を不溶性担体に担持させ、抗梅毒トレポネーマ抗
体との抗原抗体反応により生じた凝集の度合いを検出す
ることにより前記抗体を測定する免疫測定法において、
上記抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤並びに、アミ
ノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロパンスルホン
酸誘導体の少なくとも一種を０．００１〜３．０Ｍの濃
度で存在させる。
【０００９】上記凝集促進剤は、凝集反応の測定におい
て測定感度の向上や抗原抗体反応の促進を目的として添
加されるものである。凝集促進剤としては、従来抗原抗
体反応の凝集促進に使用されたものはいずれも使用可能
であり、例えば、ポリエチレングリコール、ポリグリコ
シルエチルメタクリレート、ポリビニルピロリドン等が
挙げられる。
て測定感度の向上や抗原抗体反応の促進を目的として添
加されるものである。凝集促進剤としては、従来抗原抗
体反応の凝集促進に使用されたものはいずれも使用可能
であり、例えば、ポリエチレングリコール、ポリグリコ
シルエチルメタクリレート、ポリビニルピロリドン等が
挙げられる。
【００１０】本発明３においては、上記凝集促進剤がポ
リエチレングリコール、ポリグリコシルエチルメタクリ
レート又はポリビニルピロリドンに限定される。ポリエ
チレングリコールとしては、平均分子量が１，０００〜
５００，０００のものが好ましく、６，０００〜２０，
０００のものがより好ましい。ポリグリコシルエチルメ
タクリレートとしては、平均分子量が１００，０００〜
１，５００，０００のものが好ましく、５００，０００
〜１，２００，０００のものがより好ましい。ポリビニ
ルピロリドンとしては、平均分子量が５，０００〜２，
０００，０００のものが好ましく、１０，０００〜１，
０００，０００のものがより好ましい。
リエチレングリコール、ポリグリコシルエチルメタクリ
レート又はポリビニルピロリドンに限定される。ポリエ
チレングリコールとしては、平均分子量が１，０００〜
５００，０００のものが好ましく、６，０００〜２０，
０００のものがより好ましい。ポリグリコシルエチルメ
タクリレートとしては、平均分子量が１００，０００〜
１，５００，０００のものが好ましく、５００，０００
〜１，２００，０００のものがより好ましい。ポリビニ
ルピロリドンとしては、平均分子量が５，０００〜２，
０００，０００のものが好ましく、１０，０００〜１，
０００，０００のものがより好ましい。
【００１１】凝集促進剤の測定系中の濃度は、低くなる
と抗原抗体反応の促進効果が十分でなくなり、高くなる
と目的成分以外の物質との非特異反応が増大するので、
０．０５〜５．０％（重量対容量百分率：ｗ／ｖ）が好
ましく、より好ましくは０．１〜３．０％（ｗ／ｖ）で
ある。
と抗原抗体反応の促進効果が十分でなくなり、高くなる
と目的成分以外の物質との非特異反応が増大するので、
０．０５〜５．０％（重量対容量百分率：ｗ／ｖ）が好
ましく、より好ましくは０．１〜３．０％（ｗ／ｖ）で
ある。
【００１２】本発明において、上記アミノエタンスルホ
ン酸誘導体としては、例えば、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−
ビス（２−エタンスルホン酸）（以下「ＰＩＰＥＳ」と
する）、２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）−１−
ピペラジニル〕エタンスルホン酸（以下「ＨＥＰＥＳ」
とする）、Ｎ−トリス（ハイドロキシメチル）メチル−
２−アミノエタンスルホン酸（以下「ＴＥＳ」とする）
が挙げられ、アミノプロパンスルホン酸誘導体として
は、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（以下
「ＭＯＰＳ」とする）、Ｎ−ハイドロキシエチルピペラ
ジン−Ｎ’−３−プロパンスルホン酸（以下「ＥＰＰ
Ｓ」とする）、３−（Ｎ−モルホリノ）−２−ハイドロ
キシプロパンスルホン酸（以下「ＭＯＰＳＯ」とす
る）、Ｎ−トリス（ハイドロキシメチル）メチル−３−
アミノプロパンスルホン酸（以下「ＴＡＰＳ」とす
る）、Ｎ−２−ハイドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−
２−ハイドロキシプロパン−３−スルホン酸（以下「Ｈ
ＥＰＳＯ」とする）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２
−ハイドロキシプロパンスルホン酸（以下「ＰＯＰＳ
Ｏ」とする）、Ｎ−トリス（ハイドロキシメチル）メチ
ル−２−ハイドロキシ−３−アミノプロパンスルホン酸
（以下「ＴＡＰＳＯ」とする）などが挙げられ、特にピ
ペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）、
２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）−１−ピペラジ
ニル〕エタンスルホン酸又は３−（Ｎ−モルホリノ）プ
ロパンスルホン酸が好ましい。
ン酸誘導体としては、例えば、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−
ビス（２−エタンスルホン酸）（以下「ＰＩＰＥＳ」と
する）、２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）−１−
ピペラジニル〕エタンスルホン酸（以下「ＨＥＰＥＳ」
とする）、Ｎ−トリス（ハイドロキシメチル）メチル−
２−アミノエタンスルホン酸（以下「ＴＥＳ」とする）
が挙げられ、アミノプロパンスルホン酸誘導体として
は、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（以下
「ＭＯＰＳ」とする）、Ｎ−ハイドロキシエチルピペラ
ジン−Ｎ’−３−プロパンスルホン酸（以下「ＥＰＰ
Ｓ」とする）、３−（Ｎ−モルホリノ）−２−ハイドロ
キシプロパンスルホン酸（以下「ＭＯＰＳＯ」とす
る）、Ｎ−トリス（ハイドロキシメチル）メチル−３−
アミノプロパンスルホン酸（以下「ＴＡＰＳ」とす
る）、Ｎ−２−ハイドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−
２−ハイドロキシプロパン−３−スルホン酸（以下「Ｈ
ＥＰＳＯ」とする）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２
−ハイドロキシプロパンスルホン酸（以下「ＰＯＰＳ
Ｏ」とする）、Ｎ−トリス（ハイドロキシメチル）メチ
ル−２−ハイドロキシ−３−アミノプロパンスルホン酸
（以下「ＴＡＰＳＯ」とする）などが挙げられ、特にピ
ペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）、
２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）−１−ピペラジ
ニル〕エタンスルホン酸又は３−（Ｎ−モルホリノ）プ
ロパンスルホン酸が好ましい。
【００１３】本発明においては、アミノエタンスルホン
酸誘導体とアミノプロパンスルホン酸誘導体が併用され
てもよい。
酸誘導体とアミノプロパンスルホン酸誘導体が併用され
てもよい。
【００１４】本発明４では、上記アミノエタンスルホン
酸誘導体がピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンス
ルホン酸）及び２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）
−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸の少なくとも一
種であり、アミノプロパンスルホン酸誘導体が３−（Ｎ
−モルホリノ）プロパンスルホン酸に限定される。
酸誘導体がピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンス
ルホン酸）及び２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）
−１−ピペラジニル〕エタンスルホン酸の少なくとも一
種であり、アミノプロパンスルホン酸誘導体が３−（Ｎ
−モルホリノ）プロパンスルホン酸に限定される。
【００１５】上記アミノエタンスルホン酸誘導体及びア
ミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくとも一種の測定
系中の濃度は、低くなると非特異反応の抑制効果が十分
でなく、高くなると上記物質が溶解せず、また非特異反
応の抑制効果が大きくなりすぎ正常な抗原抗体反応をも
押さえこんでしまうため０．００１〜３．０Ｍに限定さ
れ、好ましくは０．０１〜２．０Ｍである。なお、上記
の濃度は、アミノエタンスルホン酸誘導体及び／又はア
ミノプロパンスルホン酸誘導体が、２種以上併用される
場合には、個々の物質の濃度の総和を意味するものであ
る。上記アミノエタンスルホン酸誘導体及び／又はアミ
ノプロパンスルホン酸誘導体は、凝集促進効果と非特異
反応の抑制効果の両方の効果を有しており、測定系中の
濃度が低くなると、凝集促進効果の方が強く、高くなる
と、非特異反応の抑制効果の方が強い。この効果は、測
定される抗原及び抗体、又は測定系によって異なるが、
概ね０．００１〜０．３Ｍでは凝集促進効果が強く、
０．３〜３．０Ｍでは非特異反応の抑制効果の方が強
い。また、低濃度では、これらの凝集促進効果が発現す
るため、前記の別に添加される凝集促進剤の使用量を減
らすことができる。この場合、凝集促進剤の減少によっ
て、凝集促進剤がもつ非特異反応促進効果も減少するの
で、上記アミノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロ
パンスルホン酸誘導体の少なくとも一種の測定系中の濃
度を０．３Ｍ以下としても非特異反応抑制効果が発揮さ
れることになる。
ミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくとも一種の測定
系中の濃度は、低くなると非特異反応の抑制効果が十分
でなく、高くなると上記物質が溶解せず、また非特異反
応の抑制効果が大きくなりすぎ正常な抗原抗体反応をも
押さえこんでしまうため０．００１〜３．０Ｍに限定さ
れ、好ましくは０．０１〜２．０Ｍである。なお、上記
の濃度は、アミノエタンスルホン酸誘導体及び／又はア
ミノプロパンスルホン酸誘導体が、２種以上併用される
場合には、個々の物質の濃度の総和を意味するものであ
る。上記アミノエタンスルホン酸誘導体及び／又はアミ
ノプロパンスルホン酸誘導体は、凝集促進効果と非特異
反応の抑制効果の両方の効果を有しており、測定系中の
濃度が低くなると、凝集促進効果の方が強く、高くなる
と、非特異反応の抑制効果の方が強い。この効果は、測
定される抗原及び抗体、又は測定系によって異なるが、
概ね０．００１〜０．３Ｍでは凝集促進効果が強く、
０．３〜３．０Ｍでは非特異反応の抑制効果の方が強
い。また、低濃度では、これらの凝集促進効果が発現す
るため、前記の別に添加される凝集促進剤の使用量を減
らすことができる。この場合、凝集促進剤の減少によっ
て、凝集促進剤がもつ非特異反応促進効果も減少するの
で、上記アミノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロ
パンスルホン酸誘導体の少なくとも一種の測定系中の濃
度を０．３Ｍ以下としても非特異反応抑制効果が発揮さ
れることになる。
【００１６】本発明の免疫測定法において、凝集促進剤
並びに、アミノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロ
パンスルホン酸誘導体の少なくとも一種は、測定系に存
在していればよく、例えばラテックス試薬を用いた抗原
抗体反応の場合、梅毒トレポネーマ抗原等を担持したラ
テックス試薬に予め凝集促進剤並びに、アミノエタンス
ルホン酸誘導体及びアミノプロパンスルホン酸誘導体の
少なくとも一種を添加しておく。
並びに、アミノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロ
パンスルホン酸誘導体の少なくとも一種は、測定系に存
在していればよく、例えばラテックス試薬を用いた抗原
抗体反応の場合、梅毒トレポネーマ抗原等を担持したラ
テックス試薬に予め凝集促進剤並びに、アミノエタンス
ルホン酸誘導体及びアミノプロパンスルホン酸誘導体の
少なくとも一種を添加しておく。
【００１７】またこれらを含まないラテックス試薬を使
用することも可能で、この場合には抗原抗体反応時にこ
れらが該反応系に存在するようにすればよい。例えば、
検体に予め凝集促進剤並びに、アミノエタンスルホン酸
誘導体及びアミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくと
も一種を添加しておく方法や、使用する緩衝液にこれら
を添加しておく方法等があり、特に限定されない。
用することも可能で、この場合には抗原抗体反応時にこ
れらが該反応系に存在するようにすればよい。例えば、
検体に予め凝集促進剤並びに、アミノエタンスルホン酸
誘導体及びアミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくと
も一種を添加しておく方法や、使用する緩衝液にこれら
を添加しておく方法等があり、特に限定されない。
【００１８】言い換えれば、本発明で使用される測定試
薬は、例えば、梅毒トレポネーマ抗原等を担持した不溶
性担体と上記物質とを含む１液系の試薬；梅毒トレポネ
ーマ抗原等を担持した不溶性担体を含む第１試薬と、上
記物質を含む緩衝液からなる第２試薬とで構成された２
液系の試薬；など種々の形態であり得る。
薬は、例えば、梅毒トレポネーマ抗原等を担持した不溶
性担体と上記物質とを含む１液系の試薬；梅毒トレポネ
ーマ抗原等を担持した不溶性担体を含む第１試薬と、上
記物質を含む緩衝液からなる第２試薬とで構成された２
液系の試薬；など種々の形態であり得る。
【００１９】上記抗原抗体反応は通常の条件で行われ、
反応媒体としては、例えば、アミノエタンスルホン酸誘
導体又はアミノプロパンスルホン酸誘導体を用いた緩衝
液であるＰＩＰＥＳ緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液、ＭＯＰ
Ｓ緩衝液の他、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、グリシ
ン緩衝液、トリス緩衝液等が用いられる。測定系のｐＨ
は、４．５〜１０．０が好ましく、さらに好ましくは
５．８〜８．０である。測定系の温度は、０〜５０℃が
好ましく、さらに好ましくは２０〜４０℃である。反応
時間は適宜決められる。
反応媒体としては、例えば、アミノエタンスルホン酸誘
導体又はアミノプロパンスルホン酸誘導体を用いた緩衝
液であるＰＩＰＥＳ緩衝液、ＨＥＰＥＳ緩衝液、ＭＯＰ
Ｓ緩衝液の他、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、グリシ
ン緩衝液、トリス緩衝液等が用いられる。測定系のｐＨ
は、４．５〜１０．０が好ましく、さらに好ましくは
５．８〜８．０である。測定系の温度は、０〜５０℃が
好ましく、さらに好ましくは２０〜４０℃である。反応
時間は適宜決められる。
【００２０】上記不溶性担体としては、例えば、有機高
分子粉末、無機物質粉末、微生物、血球、細胞膜片、プ
ラスチック製マイクロタイタープレート等が挙げられ
る。上記有機高分子粉末としては、例えば、不溶性アガ
ロース、セルロース、不溶性デキストラン等の天然高分
子粉末、ポリスチレン、スチレン−スチレンスルホン酸
塩共重合体、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン
共重合体、塩化ビニル−アクリル酸エステル共重合体、
酢酸ビニル−アクリル酸エステル共重合体等の合成高分
子粉末などが挙げられ、特に合成高分子粉末を均一に懸
濁させたラテックスが好ましい。
分子粉末、無機物質粉末、微生物、血球、細胞膜片、プ
ラスチック製マイクロタイタープレート等が挙げられ
る。上記有機高分子粉末としては、例えば、不溶性アガ
ロース、セルロース、不溶性デキストラン等の天然高分
子粉末、ポリスチレン、スチレン−スチレンスルホン酸
塩共重合体、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン
共重合体、塩化ビニル−アクリル酸エステル共重合体、
酢酸ビニル−アクリル酸エステル共重合体等の合成高分
子粉末などが挙げられ、特に合成高分子粉末を均一に懸
濁させたラテックスが好ましい。
【００２１】上記無機物質粉末としては、例えば、金、
チタン、鉄、ニッケル等の金属片、シリカ、アルミナ、
炭素末などが挙げられる。
チタン、鉄、ニッケル等の金属片、シリカ、アルミナ、
炭素末などが挙げられる。
【００２２】上記不溶性担体の平均粒径は、測定方法、
測定機器によって異なるが、０．０５〜１．０μｍのも
のが通常用いられる。
測定機器によって異なるが、０．０５〜１．０μｍのも
のが通常用いられる。
【００２３】上記不溶性担体に梅毒トレポネーマ抗原を
担持させる方法としては、例えば、化学的または物理的
結合により感作させる方法が挙げられる。
担持させる方法としては、例えば、化学的または物理的
結合により感作させる方法が挙げられる。
【００２４】上記抗原としては、例えば、菌体破砕物、
菌体からの精製物、または遺伝子組み換えにより人工的
に合成されたもの等が挙げられ、これらは単独で用いら
れても、併用されてもよい。
菌体からの精製物、または遺伝子組み換えにより人工的
に合成されたもの等が挙げられ、これらは単独で用いら
れても、併用されてもよい。
【００２５】上記試薬を用いて抗原抗体反応を測定する
際の測定系としては、例えば、ラテックス凝集反応、血
球凝集反応等が利用される。
際の測定系としては、例えば、ラテックス凝集反応、血
球凝集反応等が利用される。
【００２６】上記反応により生じた凝集を測定する方法
としては、凝集の程度を光学的に観察する方法あるいは
目視により観察する方法等が挙げられる。具体的には、
光学的に観察する方法においては、測定は検体、検体希
釈液及び抗梅毒トレポネーマ抗体を担持させた不溶性担
体を混合した後、該混合液の散乱光強度、吸光度、また
は透過光強度を検出する。測定の波長は３００〜２４０
０ｎｍが使用でき、測定方法は公知の方法に従い、用い
る不溶性担体の粒径、濃度、反応時間によって散乱光強
度、吸光度、または透過光強度の増加もしくは減少を測
定する。またこれらの方法は単独で用いられても、併用
されてもよい。目視により観察する方法においては、通
常、検体と抗原が担持された不溶性担体を含む溶液を判
定板上で混合し、揺り動かした後、凝集の有無を判定す
る。判定には、単に肉眼で判定する以外に、ビデオカメ
ラで撮影し画像処理を施すことによって判定することも
できる。
としては、凝集の程度を光学的に観察する方法あるいは
目視により観察する方法等が挙げられる。具体的には、
光学的に観察する方法においては、測定は検体、検体希
釈液及び抗梅毒トレポネーマ抗体を担持させた不溶性担
体を混合した後、該混合液の散乱光強度、吸光度、また
は透過光強度を検出する。測定の波長は３００〜２４０
０ｎｍが使用でき、測定方法は公知の方法に従い、用い
る不溶性担体の粒径、濃度、反応時間によって散乱光強
度、吸光度、または透過光強度の増加もしくは減少を測
定する。またこれらの方法は単独で用いられても、併用
されてもよい。目視により観察する方法においては、通
常、検体と抗原が担持された不溶性担体を含む溶液を判
定板上で混合し、揺り動かした後、凝集の有無を判定す
る。判定には、単に肉眼で判定する以外に、ビデオカメ
ラで撮影し画像処理を施すことによって判定することも
できる。
【００２７】本発明により測定できる抗原又は抗体は、
梅毒トレポネーマ抗体に限らず、一般に抗原抗体反応を
利用して測定できる抗原又は抗体はいずれも測定可能で
ある。上記抗原又は抗体としては、蛋白質や脂質等が挙
げられ、例えば、各種抗原、抗体、レセプター、酵素な
どが挙げられる。具体的には、例えば、ヒト免疫不全ウ
イルス（ＨＩＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢ）、Ｃ型肝
炎ウイルス（ＨＣ）等の病原菌及び病原ウイルスの抗原
及び抗体、さらにＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、繊維素分解
産物（ＦＤＰ）、癌胎児性抗原（ＡＦＰ）等の血中蛋白
質などが挙げられる。
梅毒トレポネーマ抗体に限らず、一般に抗原抗体反応を
利用して測定できる抗原又は抗体はいずれも測定可能で
ある。上記抗原又は抗体としては、蛋白質や脂質等が挙
げられ、例えば、各種抗原、抗体、レセプター、酵素な
どが挙げられる。具体的には、例えば、ヒト免疫不全ウ
イルス（ＨＩＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢ）、Ｃ型肝
炎ウイルス（ＨＣ）等の病原菌及び病原ウイルスの抗原
及び抗体、さらにＣ反応性蛋白（ＣＲＰ）、繊維素分解
産物（ＦＤＰ）、癌胎児性抗原（ＡＦＰ）等の血中蛋白
質などが挙げられる。
【００２８】
【発明の実施の形態】本発明を実施例につき説明する。 （実施例１） 〔梅毒トレポネーマ抗原担持ラテックス液の調製〕梅毒
トレポネーマ抗原を蛋白濃度として１５μｇ／ｍｌで含
有する０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）４００μｌ
を平均粒径４００μｍのポリスチレンラテックス（固形
分１０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）１００μｌに
添加し、１時間攪拌した。次いでウシ血清アルブミン
（以下「ＢＳＡ」とする）を１％（ｗ／ｖ）含有する
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍｌを添加し、
１．５時間攪拌した。この液を１０℃で３０分間、１８
０００ｒｐｍで遠心分離した。得られた沈殿物にＢＳＡ
を０．２５％（ｗ／ｖ）含有する０．１Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ７．４）５ｍｌを添加し、ラテックスを懸濁さ
せ、梅毒トレポネーマ抗原担持ラテックス液を調製した
（第１試薬）。
トレポネーマ抗原を蛋白濃度として１５μｇ／ｍｌで含
有する０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）４００μｌ
を平均粒径４００μｍのポリスチレンラテックス（固形
分１０％（ｗ／ｖ）、積水化学工業社製）１００μｌに
添加し、１時間攪拌した。次いでウシ血清アルブミン
（以下「ＢＳＡ」とする）を１％（ｗ／ｖ）含有する
０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍｌを添加し、
１．５時間攪拌した。この液を１０℃で３０分間、１８
０００ｒｐｍで遠心分離した。得られた沈殿物にＢＳＡ
を０．２５％（ｗ／ｖ）含有する０．１Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ７．４）５ｍｌを添加し、ラテックスを懸濁さ
せ、梅毒トレポネーマ抗原担持ラテックス液を調製した
（第１試薬）。
【００２９】〔検体希釈液の調製〕ｐＨ７．０の０．５
Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液に、ＢＳＡを０．２５％（ｗ／
ｖ）、ポリエチレングリコール６０００（ＰＥＧ６００
０、平均分子量７５００、ナカライテスク社製）を２．
５％（ｗ／ｖ）となるように溶解し、検体希釈液を調製
した（第２試薬）。 〔抗梅毒トレポネーマ抗体測定試薬〕本実施例の抗梅毒
トレポネーマ抗体測定試薬は、上記梅毒トレポネーマ抗
原担持ラテックス液からなる第１試薬と、上記検体希釈
液からなる第２試薬とから構成される２液系の試薬であ
る。
Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液に、ＢＳＡを０．２５％（ｗ／
ｖ）、ポリエチレングリコール６０００（ＰＥＧ６００
０、平均分子量７５００、ナカライテスク社製）を２．
５％（ｗ／ｖ）となるように溶解し、検体希釈液を調製
した（第２試薬）。 〔抗梅毒トレポネーマ抗体測定試薬〕本実施例の抗梅毒
トレポネーマ抗体測定試薬は、上記梅毒トレポネーマ抗
原担持ラテックス液からなる第１試薬と、上記検体希釈
液からなる第２試薬とから構成される２液系の試薬であ
る。
【００３０】〔非特異反応量の測定〕生化学自動分析装
置（日立７０５０型、日立製作所社製）により、非特異
反応を示す検体（抗梅毒トレポネーマ抗体は含まない）
５種（検体１、検体２、検体３、検体４、検体５とす
る）を測定した。測定条件は温度３７℃、波長５７０ｎ
ｍとした。測定は、標準液又は検体２０μｌを分注後、
直ちに検体希釈液（第２試薬）３５０μｌの添加・混
合、次いでラテックス液（第１試薬）５０μｌの添加・
混合を行った。反応量は、ラテックス液添加後８０秒か
ら３２０秒の間の吸光度変化量から、抗体濃度既知の標
準液（標準抗梅毒トレポネーマ抗体液）の抗体濃度と吸
光度変化量の検量線により、検体中の非特異反応量を求
めた。結果を表１に示す。なお、表１に示した非特異反
応量の単位は、タイターユニット（Ｔ．Ｕ．と略す）で
あり、抗梅毒トレポネーマ抗体量が１０Ｔ．Ｕ．（タイ
ターユニット）以上の値を示す血清は梅毒陽性、１０
Ｔ．Ｕ．未満の値を示す血清は梅毒陰性と判定されるも
のである。
置（日立７０５０型、日立製作所社製）により、非特異
反応を示す検体（抗梅毒トレポネーマ抗体は含まない）
５種（検体１、検体２、検体３、検体４、検体５とす
る）を測定した。測定条件は温度３７℃、波長５７０ｎ
ｍとした。測定は、標準液又は検体２０μｌを分注後、
直ちに検体希釈液（第２試薬）３５０μｌの添加・混
合、次いでラテックス液（第１試薬）５０μｌの添加・
混合を行った。反応量は、ラテックス液添加後８０秒か
ら３２０秒の間の吸光度変化量から、抗体濃度既知の標
準液（標準抗梅毒トレポネーマ抗体液）の抗体濃度と吸
光度変化量の検量線により、検体中の非特異反応量を求
めた。結果を表１に示す。なお、表１に示した非特異反
応量の単位は、タイターユニット（Ｔ．Ｕ．と略す）で
あり、抗梅毒トレポネーマ抗体量が１０Ｔ．Ｕ．（タイ
ターユニット）以上の値を示す血清は梅毒陽性、１０
Ｔ．Ｕ．未満の値を示す血清は梅毒陰性と判定されるも
のである。
【００３１】（実施例２）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりに、ｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＰＩＰＥＳ緩衝液を用いたこと以外は、実
施例１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。 （実施例３）検体希釈液としてｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりに、ｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＭＯＰＳ緩衝液を用いたこと以外は、実施例１と同様に
して測定を行った。結果を表１に示す。 （実施例４）検体希釈液のポリエチレングリコールのか
わりに、ポリグリコシルエチルメタクリレート（ｐＧＥ
ＭＡ、平均分子量１１４万、日本精化社製）を用いたこ
と以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を
表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりに、ｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＰＩＰＥＳ緩衝液を用いたこと以外は、実
施例１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。 （実施例３）検体希釈液としてｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりに、ｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＭＯＰＳ緩衝液を用いたこと以外は、実施例１と同様に
して測定を行った。結果を表１に示す。 （実施例４）検体希釈液のポリエチレングリコールのか
わりに、ポリグリコシルエチルメタクリレート（ｐＧＥ
ＭＡ、平均分子量１１４万、日本精化社製）を用いたこ
と以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を
表１に示す。
【００３２】（実施例５）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．５Ｍ−ＰＩＰＥＳ緩衝液を用い、さらにポリエチレ
ングリコールのかわりに、ポリグリコシルエチルメタク
リレートを用いたこと以外は、実施例１と同様にして測
定を行った。結果を表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．５Ｍ−ＰＩＰＥＳ緩衝液を用い、さらにポリエチレ
ングリコールのかわりに、ポリグリコシルエチルメタク
リレートを用いたこと以外は、実施例１と同様にして測
定を行った。結果を表１に示す。
【００３３】（実施例６）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．５Ｍ−ＭＯＰＳ緩衝液を用い、さらにポリエチレン
グリコールのかわりに、ポリビニルピロリドン（コリド
ンＫ−９０、平均分子量１２万、ＢＡＳＦ社製）を用い
たこと以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結
果を表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．５Ｍ−ＭＯＰＳ緩衝液を用い、さらにポリエチレン
グリコールのかわりに、ポリビニルピロリドン（コリド
ンＫ−９０、平均分子量１２万、ＢＡＳＦ社製）を用い
たこと以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結
果を表１に示す。
【００３４】（実施例７）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．１Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液を用い、さらに２．５％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコールを用いたこと以外
は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を表１に
示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．１Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液を用い、さらに２．５％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコールを用いたこと以外
は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を表１に
示す。
【００３５】（実施例８）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．１Ｍ−ＭＯＰＳ緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ
／ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％（ｗ／
ｖ）ポリビニルピロリドン（コリドンＫ−９０、平均分
子量１２万、ＢＡＳＦ社製）を用いたこと以外は、実施
例１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．１Ｍ−ＭＯＰＳ緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ
／ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％（ｗ／
ｖ）ポリビニルピロリドン（コリドンＫ−９０、平均分
子量１２万、ＢＡＳＦ社製）を用いたこと以外は、実施
例１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。
【００３６】（実施例９）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．１Ｍ−ＰＩＰＥＳ緩衝液を用い、さらに２．５％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％
（ｗ／ｖ）ポリグリコシルエチルメタクリレートを用い
たこと以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結
果を表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ７．０の
０．１Ｍ−ＰＩＰＥＳ緩衝液を用い、さらに２．５％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％
（ｗ／ｖ）ポリグリコシルエチルメタクリレートを用い
たこと以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結
果を表１に示す。
【００３７】（比較例１）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりに、ｐＨ６．５
の０．１Ｍリン酸緩衝液を用いたこと以外は、実施例１
と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。 （比較例２）検体希釈液としてｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の０．１Ｍリン
酸緩衝液を用い、さらにポリエチレングリコールのかわ
りに、ポリグリコシルエチルメタクリレートを用いたこ
と以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を
表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりに、ｐＨ６．５
の０．１Ｍリン酸緩衝液を用いたこと以外は、実施例１
と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。 （比較例２）検体希釈液としてｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の０．１Ｍリン
酸緩衝液を用い、さらにポリエチレングリコールのかわ
りに、ポリグリコシルエチルメタクリレートを用いたこ
と以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を
表１に示す。
【００３８】（比較例３）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の
０．１Ｍリン酸緩衝液を用い、さらにポリエチレングリ
コールのかわりに、ポリビニルピロリドンを用いたこと
以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を表
１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の
０．１Ｍリン酸緩衝液を用い、さらにポリエチレングリ
コールのかわりに、ポリビニルピロリドンを用いたこと
以外は、実施例１と同様にして測定を行った。結果を表
１に示す。
【００３９】（比較例４）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の
０．１Ｍリン酸緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ／
ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％（ｗ／
ｖ）ポリエチレングリコールを用いたこと以外は、実施
例１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。 （比較例５）検体希釈液としてｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の０．１Ｍリン
酸緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ／ｖ）ポリエチレ
ングリコールのかわりに、１％（ｗ／ｖ）ポリグリコシ
ルエチルメタクリレートを用いたこと以外は、実施例１
と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の
０．１Ｍリン酸緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ／
ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％（ｗ／
ｖ）ポリエチレングリコールを用いたこと以外は、実施
例１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。 （比較例５）検体希釈液としてｐＨ７．０の０．５Ｍ−
ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の０．１Ｍリン
酸緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ／ｖ）ポリエチレ
ングリコールのかわりに、１％（ｗ／ｖ）ポリグリコシ
ルエチルメタクリレートを用いたこと以外は、実施例１
と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。
【００４０】（比較例６）検体希釈液としてｐＨ７．０
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の
０．１Ｍリン酸緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ／
ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％（ｗ／
ｖ）ポリビニルピロリドンを用いたこと以外は、実施例
１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。
の０．５Ｍ−ＨＥＰＥＳ緩衝液のかわりにｐＨ６．５の
０．１Ｍリン酸緩衝液を用い、さらに２．５％（ｗ／
ｖ）ポリエチレングリコールのかわりに、１％（ｗ／
ｖ）ポリビニルピロリドンを用いたこと以外は、実施例
１と同様にして測定を行った。結果を表１に示す。
【００４１】
【表１】
【００４２】表１から明らかなように、比較例１〜６で
は見かけ上、抗梅毒トレポネーマ抗体が検出されたよう
な非特異反応が認められたが、本発明の実施例では非特
異反応は認められなかった。
は見かけ上、抗梅毒トレポネーマ抗体が検出されたよう
な非特異反応が認められたが、本発明の実施例では非特
異反応は認められなかった。
【００４３】
【発明の効果】本発明の免疫測定法は上述の通りであ
り、抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤並びに、アミ
ノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロパンスルホン
酸誘導体の少なくとも一種を０．００１〜３．０Ｍの濃
度で存在させることにより、汎用性が高く非特異反応が
少ない免疫測定法を提供できる。本発明は、例えばラテ
ックス、赤血球等の担体を使用し、抗原抗体反応を利用
したラテックス凝集法や血球凝集法による免疫測定法と
して利用でき、該免疫測定法は種々の病気の診断及び治
療のために臨床検査等の分野に広く利用できる。
り、抗原抗体反応の測定系に、凝集促進剤並びに、アミ
ノエタンスルホン酸誘導体及びアミノプロパンスルホン
酸誘導体の少なくとも一種を０．００１〜３．０Ｍの濃
度で存在させることにより、汎用性が高く非特異反応が
少ない免疫測定法を提供できる。本発明は、例えばラテ
ックス、赤血球等の担体を使用し、抗原抗体反応を利用
したラテックス凝集法や血球凝集法による免疫測定法と
して利用でき、該免疫測定法は種々の病気の診断及び治
療のために臨床検査等の分野に広く利用できる。
【００４４】本発明２の抗梅毒トレポネーマ抗体を検出
する免疫測定法は上述の通りであり、不溶性担体を用い
凝集の度合いを検出することにより前記抗体を測定する
免疫測定法において、上記抗原抗体反応の測定系に、凝
集促進剤並びに、アミノエタンスルホン酸誘導体及びア
ミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくとも一種を０．
００１〜３．０Ｍの濃度で存在させることにより、汎用
性が高く非特異反応が少ない抗梅毒トレポネーマ抗体の
測定法を提供できる。本発明２は、例えばラテックス、
赤血球等の担体を使用し、抗原抗体反応を利用したラテ
ックス凝集法や血球凝集法による免疫測定法として利用
でき、該免疫測定法は梅毒の診断及び治療のために臨床
検査等の分野に広く利用できる。
する免疫測定法は上述の通りであり、不溶性担体を用い
凝集の度合いを検出することにより前記抗体を測定する
免疫測定法において、上記抗原抗体反応の測定系に、凝
集促進剤並びに、アミノエタンスルホン酸誘導体及びア
ミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくとも一種を０．
００１〜３．０Ｍの濃度で存在させることにより、汎用
性が高く非特異反応が少ない抗梅毒トレポネーマ抗体の
測定法を提供できる。本発明２は、例えばラテックス、
赤血球等の担体を使用し、抗原抗体反応を利用したラテ
ックス凝集法や血球凝集法による免疫測定法として利用
でき、該免疫測定法は梅毒の診断及び治療のために臨床
検査等の分野に広く利用できる。
【００４５】本発明３は、請求項１又は２記載の発明に
おいて、凝集促進剤が、ポリエチレングリコール、ポリ
グリコシルエチルメタクリレート又はポリビニルピロリ
ドンに限定されているので、請求項１又は２記載の発明
の上記の効果が特に発揮される。本発明４は、請求項１
ないし３のいずれか１項に記載の発明において、上記ア
ミノエタンスルホン酸誘導体がピペラジン−Ｎ，Ｎ’−
ビス（２−エタンスルホン酸）及び２−〔４−（２−ハ
イドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホ
ン酸の少なくとも一種に限定され、アミノプロパンスル
ホン酸誘導体が３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホ
ン酸に限定されているので、請求項１ないし３のいずれ
か１項に記載の発明の上記の効果が特に発揮される。
おいて、凝集促進剤が、ポリエチレングリコール、ポリ
グリコシルエチルメタクリレート又はポリビニルピロリ
ドンに限定されているので、請求項１又は２記載の発明
の上記の効果が特に発揮される。本発明４は、請求項１
ないし３のいずれか１項に記載の発明において、上記ア
ミノエタンスルホン酸誘導体がピペラジン−Ｎ，Ｎ’−
ビス（２−エタンスルホン酸）及び２−〔４−（２−ハ
イドロキシエチル）−１−ピペラジニル〕エタンスルホ
ン酸の少なくとも一種に限定され、アミノプロパンスル
ホン酸誘導体が３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホ
ン酸に限定されているので、請求項１ないし３のいずれ
か１項に記載の発明の上記の効果が特に発揮される。
Claims (4)
- 【請求項１】 抗原抗体反応により抗原又は抗体を測定
する免疫測定法において、上記抗原抗体反応の測定系
に、凝集促進剤並びに、アミノエタンスルホン酸誘導体
及びアミノプロパンスルホン酸誘導体の少なくとも一種
を０．００１〜３．０Ｍの濃度で存在させることを特徴
とする免疫測定法。 - 【請求項２】 抗原抗体反応により抗原又は抗体を測定
する免疫測定法が、梅毒トレポネーマ抗原を不溶性担体
に担持させ、抗梅毒トレポネーマ抗体との抗原抗体反応
により生じた不溶性担体の凝集の度合いを検出すること
により前記抗体を測定する免疫測定法である請求項１記
載の免疫測定法。 - 【請求項３】 上記凝集促進剤が、ポリエチレングリコ
ール、ポリグリコシルエチルメタクリレート又はポリビ
ニルピロリドンである請求項１又は２記載の免疫測定
法。 - 【請求項４】 上記アミノエタンスルホン酸誘導体がピ
ペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）及
び２−〔４−（２−ハイドロキシエチル）−１−ピペラ
ジニル〕エタンスルホン酸の少なくとも一種であり、ア
ミノプロパンスルホン酸誘導体が３−（Ｎ−モルホリ
ノ）プロパンスルホン酸である請求項１ないし３のいず
れか１項に記載の免疫測定法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24142595A JPH08278308A (ja) | 1995-02-08 | 1995-09-20 | 免疫測定法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7-20260 | 1995-02-08 | ||
| JP2026095 | 1995-02-08 | ||
| JP24142595A JPH08278308A (ja) | 1995-02-08 | 1995-09-20 | 免疫測定法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08278308A true JPH08278308A (ja) | 1996-10-22 |
Family
ID=26357166
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24142595A Pending JPH08278308A (ja) | 1995-02-08 | 1995-09-20 | 免疫測定法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08278308A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2019319A2 (en) | 2007-07-25 | 2009-01-28 | JSR Corporation | Reagent for latex aggregation reaction and method for detecting target substance |
| US11493506B2 (en) | 2016-02-12 | 2022-11-08 | Jsr Corporation | Additive, surface treatment agent, surface-modified latex particles, method for producing surface-modified latex particles, reagent for latex agglutination reaction, kit, and method for detecting target substance |
-
1995
- 1995-09-20 JP JP24142595A patent/JPH08278308A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2019319A2 (en) | 2007-07-25 | 2009-01-28 | JSR Corporation | Reagent for latex aggregation reaction and method for detecting target substance |
| EP2019319A3 (en) * | 2007-07-25 | 2009-09-02 | JSR Corporation | Reagent for latex aggregation reaction and method for detecting target substance |
| US11493506B2 (en) | 2016-02-12 | 2022-11-08 | Jsr Corporation | Additive, surface treatment agent, surface-modified latex particles, method for producing surface-modified latex particles, reagent for latex agglutination reaction, kit, and method for detecting target substance |
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