JP7366908B2 - Pd-1に対する単一ドメイン抗体及びその変異体 - Google Patents
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Description
本出願は、2018年1月15日に出願された国際特許出願第PCT/CN2018/072589号の利益を主張し、この内容は、その全体を参照することによって本明細書に組み込まれる。
ASCIIテキストファイル上の以下の提出物の内容、すなわち、コンピューターで読取り可能な形態(CRF)の配列表(ファイル名:761422000840SEQLIST.txt、記録日:2018年1月14日、サイズ:271KB)は、その全体を参照することによって本明細書に組み込まれる。
(1)配列番号37のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号109のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号181のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(2)配列番号38のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号110のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号182のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(3)配列番号39のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号111のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号183のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(4)配列番号40のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号112のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号184のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(5)配列番号41のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号113のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号185のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(6)配列番号42のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号114のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号186のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(7)配列番号43のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号115のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号187のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(8)配列番号44のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号116のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号188のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(9)配列番号45のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号117のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号189のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(10)配列番号46のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号118のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号190のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(11)配列番号47のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号119のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号191のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(12)配列番号48のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号120のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号192のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(13)配列番号49のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号121のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号193のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(14)配列番号50のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号122のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号194のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(15)配列番号51のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号123のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号195のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(16)配列番号52のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号124のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号196のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(17)配列番号53のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号125のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号197のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(18)配列番号54のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号126のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号198のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(19)配列番号55のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号127のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号199のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(20)配列番号56のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号128のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号200のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(21)配列番号57のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号129のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号201のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(22)配列番号58のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号130のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号202のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(23)配列番号59のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号131のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号203のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(24)配列番号60のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号132のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号204のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(25)配列番号61のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号133のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号205のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(26)配列番号62のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号134のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号206のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(27)配列番号63のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号135のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号207のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(28)配列番号64のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号136のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号208のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(29)配列番号65のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号137のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号209のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(30)配列番号66のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号138のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号210のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(31)配列番号67のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号139のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号211のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(32)配列番号68のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号140のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号212のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(33)配列番号69のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号141のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号213のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(34)配列番号70のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号142のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号214のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(35)配列番号71のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号143のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号215のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;または
(35)配列番号72のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号144のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号216のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体。
(1)配列番号37のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号109のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号181のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(2)配列番号38のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号110のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号182のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(3)配列番号39のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号111のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号183のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(4)配列番号40のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号112のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号184のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(5)配列番号41のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号113のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号185のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(6)配列番号42のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号114のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号186のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(7)配列番号43のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号115のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号187のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(8)配列番号44のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号116のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号188のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(9)配列番号45のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号117のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号189のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(10)配列番号46のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号118のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号190のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(11)配列番号47のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号119のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号191のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(12)配列番号48のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号120のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号192のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(13)配列番号49のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号121のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号193のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(14)配列番号50のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号122のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号194のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(15)配列番号51のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号123のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号195のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(16)配列番号52のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号124のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号196のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(17)配列番号53のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号125のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号197のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(18)配列番号54のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号126のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号198のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(19)配列番号55のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号127のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号199のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(20)配列番号56のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号128のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号200のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(21)配列番号57のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号129のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号201のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(22)配列番号58のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号130のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号202のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(23)配列番号59のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号131のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号203のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(24)配列番号60のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号132のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号204のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(25)配列番号61のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号133のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号205のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(26)配列番号62のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号134のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号206のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(27)配列番号63のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号135のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号207のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(28)配列番号64のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号136のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号208のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(29)配列番号65のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号137のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号209のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(30)配列番号66のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号138のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号210のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(31)配列番号67のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号139のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号211のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(32)配列番号68のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号140のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号212のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(33)配列番号69のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号141のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号213のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(34)配列番号70のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号142のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号214のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;
(35)配列番号71のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号143のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号215のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体;または
(36)配列番号72のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号144のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号216のアミノ酸配列を含むCDR3;またはCDR領域において最大で約3つ(例えば、約1、2、または3のいずれか)のアミノ酸置換を含むその変異体。
結合部位を形成し、ポリペプチド鎖(3)及び(4)のVH及びVLは、第2のエピトープ(例えば、TIGIT、LAG-3、TIM-3、CTLA-4、PD-1(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ))の第2のコピーに特異的に結合する抗原結合部位を形成し、及び各抗PD-1 sdAbは、PD-1のコピーに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、単離抗PD-1構築物は、以下のようなN末端からC末端までの構造:VL-VH-抗PD-1 sdAb-CH2-CH3を各々が有する2つのポリペプチド鎖からなり、各ポリペプチド鎖のVH及びVLは、第2のエピトープ第2のエピトープ(例えば、TIGIT、LAG-3、TIM-3、CTLA-4、PD-1(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ))のコピーに特異的に結合するscFVドメインを形成し、及び各抗PD-1 sdAbは、PD-1のコピーに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、単離抗PD-1構築物は、以下のようなN末端からC末端までの構造を有する4つのポリペプチド鎖:(1)VL-CL-抗PD-1 sdAb-CL;(2)VH-CH1-抗PD-1 sdAb-CH1-CH2-CH3;(3)VH-CH1-抗PD-1 sdAb-CH1-CH2-CH3;及び(4)VL-CL-抗PD-1 sdAb-CLからなり、ポリペプチド鎖(1)及び(2)のVH及びVLは、第2のエピトープ(例えば、TIGIT、LAG-3、TIM-3、CTLA-4、PD-1(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ))の第1のコピーに特異的に結合する抗原結合部位を形成し、ポリペプチド鎖(3)及び(4)のVH及びVLは、第2のエピトープ(例えば、TIGIT、LAG-3、TIM-3、CTLA-4、PD-1(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ))の第2のコピーに特異的に結合する抗原結合部位を形成し、及び各抗PD-1 sdAbは、PD-1のコピーに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、単離抗PD-1構築物は、以下のようなN末端からC末端までの構造を有する4つのポリペプチド鎖:(1)抗PD-1 sdAb-CL;(2)VL-VH-抗PD-1 sdAb-CH1-CH2-CH3;(3)VL-VH-抗PD-1 sdAb-CH1-CH2-CH3;及び(4)抗PD-1 sdAb-CLからなり、ポリペプチド鎖(2)及び(3)のVH及びVLの各々は、第2のエピトープ(例えば、TIGIT、LAG-3、TIM-3、CTLA-4、PD-1(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ))のコピーに特異的に結合するscFVを形成し、及び各抗PD-1 sdAbは、PD-1のコピーに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、TIGITを特異的に認識する。いくつかの実施形態では、抗TIGIT完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、配列番号377のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3を含むVH、及び配列番号378のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含むVLを含む。いくつかの実施形態では、抗TIGIT完全長抗体は、配列番号377のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号378のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、TIGITを特異的に認識する完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、tiragolumab由来である。いくつかの実施形態では、完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、LAG-3を特異的に認識する。いくつかの実施形態では、抗LAG-3完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、配列番号379のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3を含むVH、及び配列番号380のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含むVLを含む。いくつかの実施形態では、抗LAG-3完全長抗体は、配列番号379のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号380のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、LAG-3を特異的に認識する完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、relatlimab由来である。いくつかの実施形態では、完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、TIM-3を特異的に認識する。いくつかの実施形態では、抗TIM-3完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、配列番号381のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3を含むVH、及び配列番号382のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含むVLを含む。いくつかの実施形態では、抗TIM-3完全長抗体は、配列番号381のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号382のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、TIM-3を特異的に認識する完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、MBG453由来である。いくつかの実施形態では、完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、CTLA-4を特異的に認識する。いくつかの実施形態では、抗CTLA-4完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3を含むVH、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含むVLを含む。いくつかの実施形態では、抗CTLA-4完全長抗体は、配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)CTLA-4を特異的に認識するは、イピリムマブ(例えば、ヤーボイ(登録商標))由来である。いくつかの実施形態では、完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、PD-1(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ)を特異的に認識する。いくつかの実施形態では、抗PD-1完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3を含むVH、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含むVLを含む。いくつかの実施形態では、抗PD-1完全長抗体は、配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、PD-1を特異的に認識する完全長抗体(またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、ペンブロリズマブ(例えば、キイトルーダ(登録商標))またはニボルマブ(例えば、オプジーボ(登録商標))由来である。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目1)
PD-1を特異的に認識する単一ドメイン抗体(sdAb)部分を含む単離抗PD-1構築物であって、前記sdAb部分が、配列番号37~72のいずれか1つのアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号109~144のいずれか1つのアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号181~216のいずれか1つのアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体を含む、前記単離抗PD-1構築物。
(項目2)
前記sdAb部分が、配列番号37~72のいずれか1つのアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号109~144のいずれか1つのアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号181~216のいずれか1つのアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において、最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体を含む、項目1に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目3)
前記sdAb部分が、以下:
(1)配列番号37のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号109のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号181のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(2)配列番号38のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号110のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号182のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(3)配列番号39のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号111のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号183のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(4)配列番号40のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号112のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号184のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(5)配列番号41のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号113のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号185のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(6)配列番号42のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号114のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号186のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(7)配列番号43のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号115のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号187のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(8)配列番号44のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号116のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号188のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(9)配列番号45のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号117のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号189のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(10)配列番号46のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号118のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号190のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(11)配列番号47のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号119のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号191のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(12)配列番号48のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号120のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号192のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(13)配列番号49のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号121のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号193のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(14)配列番号50のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号122のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号194のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(15)配列番号51のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号123のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号195のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(16)配列番号52のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号124のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号196のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(17)配列番号53のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号125のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号197のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(18)配列番号54のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号126のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号198のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(19)配列番号55のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号127のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号199のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(20)配列番号56のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号128のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号200のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(21)配列番号57のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号129のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号201のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(22)配列番号58のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号130のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号202のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(23)配列番号59のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号131のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号203のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(24)配列番号60のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号132のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号204のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(25)配列番号61のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号133のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号205のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(26)配列番号62のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号134のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号206のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(27)配列番号63のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号135のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号207のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(28)配列番号64のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号136のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号208のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(29)配列番号65のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号137のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号209のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(30)配列番号66のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号138のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号210のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(31)配列番号67のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号139のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号211のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(32)配列番号68のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号140のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号212のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(33)配列番号69のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号141のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号213のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(34)配列番号70のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号142のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号214のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(35)配列番号71のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号143のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号215のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;または
(36)配列番号72のアミノ酸配列を含むCDR1、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;配列番号144のアミノ酸配列を含むCDR2、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;及び配列番号216のアミノ酸配列を含むCDR3、または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体
のいずれか1つを含む、項目1または2に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目4)
前記sdAb部分が、以下:
(1)配列番号37のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号109のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号181のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(2)配列番号38のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号110のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号182のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(3)配列番号39のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号111のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号183のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(4)配列番号40のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号112のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号184のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(5)配列番号41のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号113のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号185のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(6)配列番号42のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号114のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号186のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(7)配列番号43のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号115のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号187のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(8)配列番号44のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号116のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号188のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(9)配列番号45のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号117のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号189のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(10)配列番号46のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号118のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号190のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(11)配列番号47のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号119のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号191のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(12)配列番号48のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号120のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号192のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(13)配列番号49のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号121のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号193のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(14)配列番号50のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号122のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号194のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(15)配列番号51のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号123のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号195のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(16)配列番号52のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号124のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号196のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(17)配列番号53のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号125のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号197のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(18)配列番号54のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号126のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号198のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(19)配列番号55のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号127のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号199のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(20)配列番号56のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号128のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号200のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(21)配列番号57のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号129のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号201のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(22)配列番号58のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号130のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号202のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(23)配列番号59のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号131のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号203のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(24)配列番号60のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号132のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号204のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(25)配列番号61のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号133のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号205のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(26)配列番号62のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号134のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号206のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(27)配列番号63のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号135のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号207のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(28)配列番号64のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号136のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号208のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(29)配列番号65のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号137のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号209のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(30)配列番号66のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号138のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号210のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(31)配列番号67のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号139のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号211のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(32)配列番号68のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号140のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号212のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(33)配列番号69のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号141のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号213のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(34)配列番号70のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号142のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号214のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;
(35)配列番号71のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号143のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号215のアミノ酸配列を含むCDR3;または前記CDR領域において最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体;または
(36)配列番号72のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号144のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号216のアミノ酸配列を含むCDR3;または最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体
のいずれか1つを含む、項目1~3のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目5)
前記sdAb部分が、以下:
a-1)37位のアミノ酸残基が、F、Y、L、I、及びVからなる群から選択され;
a-2)44位のアミノ酸残基が、A、G、E、D、G、Q、R、S、及びLからなる群から選択され;
a-3)45位のアミノ酸残基が、L、R、及びCからなる群から選択され;
a-4)103位のアミノ酸残基が、W、R、G、及びSからなる群から選択され;及び
a-5)108位のアミノ酸残基が、Qであり;または
b-1)37位のアミノ酸残基が、F、Y、L、I、及びVからなる群から選択され;
b-2)44位のアミノ酸残基が、E、Q、及びGからなる群から選択され;
b-3)45位のアミノ酸残基が、Rであり;
b-4)103位のアミノ酸残基が、W、R、及びSからなる群から選択され;及び
b-5)108位のアミノ酸残基が、Q及びLからなる群から選択され;
のいずれか1つのアミノ酸配列を含むV H Hドメインを含み、
アミノ酸位置が、Kabat番号付けに従っており、108位がQである場合、108位が、Lに適宜ヒト化することができる、項目1~4のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目6)
前記sdAb部分が、配列番号289~324のいずれか1つのアミノ酸配列を含むV H Hドメイン、または配列番号289~324のいずれか1つに対して少なくとも約80%の配列同一性を有するその変異体を含む、項目1~5のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目7)
前記sdAb部分が、配列番号289~324のいずれか1つのアミノ酸配列を含むV H Hドメイン、または前記V H Hドメインにおいて最大で約3つのアミノ酸置換を含むその変異体を含む、項目6に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目8)
前記sdAb部分と前記PD-1の間の結合のK d が、約10 -5 M~約10 -12 Mである、項目1~7のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目9)
前記sdAb部分と前記PD-1の間の結合のK d が、約10 -7 M~約10 -12 Mである、項目8に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目10)
PD-1を特異的に認識する前記sdAb部分が、ラクダ、キメラ、ヒト、部分ヒト化、または完全ヒト化である、項目1~9のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目11)
前記単離抗PD-1構築物が、適宜リンカーを介してFc断片に融合したPD-1を特異的に認識する前記sdAb部分を含む重鎖のみ抗体(HCAb)である、項目1~10のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目12)
前記HCAbが、単量体または二量体である、項目11に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目13)
前記Fc断片が、ヒトIgG1(hIgG1)Fc、エフェクターレス(不活性)hIgG1 Fc、hIgG4 Fc、またはhIgG4 Fc(S228P)である、項目11または12に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目14)
前記適宜リンカーが、配列番号367~376のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、項目11~13のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目15)
前記HCAbが、配列番号325~360のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、項目11~14のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目16)
前記単離抗PD-1構築物が、第2のエピトープを特異的に認識する第2の抗体部分をさらに含む、項目1~10のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目17)
前記第2の抗体部分が、完全長抗体、Fab、Fab’、(Fab’) 2 、Fv、一本鎖Fv(scFv)、scFv-scFv、ミニボディ、ダイアボディ、またはsdAbである、項目16に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目18)
前記抗PD-1構築物が、多重特異性である、項目16または17に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目19)
PD-1を特異的に認識する前記sdAb部分、及び前記第2の抗体部分が、ペプチドリンカーによって適宜連結される、項目16~18のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目20)
前記ペプチドリンカーが、配列番号367~376のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、項目19に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目21)
前記第2の抗体部分が、PD-1またはCTLA-4を特異的に認識する第2のsdAbである、項目16~20のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目22)
前記第2の抗体部分が、2本の重鎖及び2本の軽鎖からなる完全長抗体である、項目16~20のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目23)
前記重鎖のFc断片が、ヒトIgG1(hIgG1)Fc、エフェクターレス(不活性)hIgG1 Fc、hIgG4 Fc、またはhIgG4 Fc(S228P)である、項目22に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目24)
PD-1を特異的に認識する前記sdAb部分のN末端が、前記完全長抗体の重鎖の少なくとも1本のC末端に融合される、項目22または23に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目25)
PD-1を特異的に認識する前記sdAb部分のC末端が、前記完全長抗体の重鎖の少なくとも1本のN末端に融合される、項目22または23に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目26)
PD-1を特異的に認識する前記sdAb部分のN末端が、前記完全長抗体の軽鎖の少なくとも1本のC末端に融合される、項目22または23に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目27)
PD-1を特異的に認識する前記sdAb部分のC末端が、前記完全長抗体の軽鎖の少なくとも1本のN末端に融合される、項目22または23に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目28)
前記完全長抗体が、TIGITを特異的に認識する、項目22~27のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目29)
前記完全長抗体が、配列番号377のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び、配列番号378のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含む、項目28に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目30)
前記完全長抗体が、配列番号377のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号378のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目28または29に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目31)
前記完全長抗体が、LAG-3を特異的に認識する、項目22~27のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目32)
前記完全長抗体が、配列番号379のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号380のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含む、項目31に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目33)
前記完全長抗体が、配列番号379のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号380のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目31または32に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目34)
前記完全長抗体が、TIM-3を特異的に認識する、項目22~27のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目35)
前記完全長抗体が、配列番号381のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号382のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含む、項目34に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目36)
前記完全長抗体が、配列番号381のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号382のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目34または35に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目37)
前記完全長抗体が、CTLA-4を特異的に認識する、項目22~27のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目38)
前記完全長抗体が、配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含む、項目37に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目39)
前記完全長抗体が、配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目37または38に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目40)
前記完全長抗体が、PD-1を特異的に認識する、項目22~27のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目41)
前記完全長抗体が、配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含む、項目40に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目42)
前記完全長抗体が、配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、項目40または41に記載の単離抗PD-1構築物。
(項目43)
PD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む単離抗PD-1構築物であって、前記sdAb部分が、配列番号289~324のうちのいずれか1つのCDR1、CDR2、及びCDR3を含む、前記単離抗PD-1構築物。
(項目44)
項目1~43のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物と競合的にPD-1に特異的に結合する、単離抗PD-1構築物。
(項目45)
項目1~44のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物、及び適宜、医薬的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
(項目46)
PD-1関連疾患を有する個体の治療方法であって、前記個体に有効量の項目45に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
(項目47)
前記PD-1関連疾患が、がんである、項目46に記載の方法。
(項目48)
前記がんが、固形腫瘍である、項目47に記載の方法。
(項目49)
前記がんが、大腸がんである、項目48に記載の方法。
(項目50)
前記個体に追加療法を投与することをさらに含む、項目46~49のいずれか1項に記載の方法。
(項目51)
前記個体が、ヒトである、項目46~50のいずれか1項に記載の方法。
(項目52)
項目1~44のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物をコードする、単離核酸。
(項目53)
項目52に記載の単離核酸を含む、ベクター。
(項目54)
項目52に記載の単離核酸、または項目53に記載のベクターを含む、単離宿主細胞。
(項目55)
項目1~44のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物、項目52に記載の単離核酸、項目53に記載のベクター、または項目54に記載の単離宿主細胞を含む、キット。
(項目56)
抗PD-1構築物の産生方法であって、
(a)コードされた抗PD-1構築物を発現するのに効果的な条件下で、項目52に記載の単離核酸または項目53に記載のベクターを含む宿主細胞、または項目54に記載の単離宿主細胞を培養すること;及び
(b)前記宿主細胞から発現した抗PD-1構築物を得ること
を含む、前記方法。
(項目57)
工程(a)が、項目52に記載の単離核酸または項目53に記載のベクターを含む宿主細胞を産生することをさらに含む、項目56に記載の方法。
「エピトープ」という用語は、抗体に特異的に結合することができるタンパク質決定基を意味する。エピトープは、通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面基からなり、エピトープは、通常、特異的な三次元構造特徴、ならびに特異的な電荷特性を有する。立体構造的エピトープ及び非立体構造的エピトープは、後者でなく前者に対する結合が変性溶媒の存在下で失われるという点で区別される。
(I)抗PD-1単一ドメイン抗体部分
本明細書に記載の単離抗PD-1構築物は、PD-1(または「抗PD-1 sdAb」)を特異的に認識する単一ドメイン抗体(sdAb)部分を含む。いくつかの実施形態では、単離抗PD-1構築物は、抗PD-1 sdAbである。
例示的なsdAbとしては、重鎖のみ抗体に由来する重鎖可変ドメイン(例えば、ラクダ科におけるVHH(重鎖抗体の重鎖の可変ドメイン)または軟骨魚類におけるVNAR(サメ新抗原受容体の可変ドメイン))、軽鎖を天然に欠く結合分子、慣用の4本鎖抗体に由来する単一ドメイン(例えば、VHまたはVL)、ヒト化重鎖のみ抗体、ヒト重鎖セグメントを発現するトランスジェニックマウスまたはラットにより産生されたヒト単一ドメイン抗体、及び抗体に由来するもの以外の操作されたドメイン及び単一ドメイン足場が挙げられるが、これらに限定されない。sdAbは、マウス、ラット、ヒト、ラクダ、ラマ、ヤツメウナギ、サカナ、サメ、ヤギ、ウサギ、及びウシを含むが、これらに限定されない任意の種由来であってもよい。本明細書で検討されるsdAbは、ラクダ科及びサメ以外の種に由来する天然に生じるsdAb分子も含む。
「プログラム細胞死タンパク質1」、「PD-1」、「PD-1抗原」、「PD-1エピトープ」、及び「プログラム死1」という用語は、交換可能に使用され、ヒトPD-1の変異体、アイソフォーム、種ホモログ、及びPD-1と少なくとも1つの共通エピトープを有するアナログが含まれる。
抗体または抗原結合ドメインの結合特異性は、当該技術分野で公知の方法によって実験的に決定することができる。そのような方法は、ウェスタンブロット、ELISA-、RIA-、ECL-、IRMA-、EIA-、BIAcore試験及びペプチドスキャンを含むが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗PD-1 sdAb部分は、キメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第4,816,567号、及びMorrison et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984))に記載されている。一例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域(例えば、ラクダ科の種、例えば、ラマに由来する可変領域)及びヒト定常領域を含む。さらなる例では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のものから変更された「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗PD-1 sdAb部分は、ヒト抗体(ヒトドメイン抗体、またはヒトDabとして知られる)である。ヒト抗体は、当該技術分野で公知の様々な技術を用いて生産することができる。ヒト抗体は、一般的に、van Dijk and van de Winkel,Curr.Opin.Pharmacol.5:368-74(2001),Lonberg,Curr.Opin.Immunol.20:450-459(2008),and Chen,Mol.Immunol.47(4):912-21(2010)に記載されている。完全ヒト単一ドメイン抗体(またはDAb)を産生することができるトランスジェニックマウスまたはラットは、当該技術分野で公知である。例えば、US20090307787A1、米国特許第8,754,287号、US20150289489A1、US20100122358A1、及びWO2004049794を参照されたい。
本出願の抗体は、所望の活性(1種または複数)を有する抗体について、コンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることにより単離することができる。例えば、ファージディスプレイライブラリーを作製し、かつ所望の結合特性を保持する抗体についてそのようなライブラリーをスクリーニングするための、種々の方法が当技術分野で公知である。そのような方法は、例えば、Hoogenboom et al.,Methods in Molecular Biology 178:1-37(O’Brien et al.,ed.,Human Press,Totowa,NJ,2001)に総説され、かつ、例えば、McCafferty et al.,Nature 348:552-554;Clackson et al.,Nature 352:624-628(1991);Marks et al.J.Mol.Biol.222:581-597(1992);Marks and Bradbury,Methods in Molecular Biology 248:161-175,Lo,ed.,Human Press,Totowa,NJ,(2003);Sidhu et al.,J.Mol.Biol.338(2):299-310(2004);Lee et al.,J.Mol.Biol.340(5):1073-1093(2004);Fellouse,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101(34):12467-12472(2004);及びLee et al.,J.Immunol.Methods 284(1-2):119-132(2004)にさらに記載されている。単一ドメイン抗体ライブラリーを構築する方法は、例えば、米国特許第7371849号に記載されている。
本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分の生物学的活性は、その標的に結合する抗体の効力の尺度であるその50%有効濃度(EC50)、または、特異的な生物学的または生化学的機能を阻害する(例えば、PD-1及びPD-L1/PD-L2の間の結合を阻害する)抗体の効力の尺度であるその50%阻害濃度(IC50)を測定することで決定することができる。例えば、ここで、EC50は、細胞表面上に50%のPD-1が結合するのに必要な抗PD-1 sdAbの有効濃度を示すために使用することができ、IC50は、PD-1生物活性の50%をインビトロで中和するのに必要な抗PD-1 sdAbの有効濃度を示すために使用することができる。EC50は、最大効果の50%をインビボで得るのに必要な血漿濃度も表す。EC50またはIC50は、当該技術分野で公知のアッセイ、例えば、FACS結合分析、FACS分析(競合結合アッセイ)によるリガンド結合の阻害、細胞に基づくサイトカイン放出アッセイ、または増幅発光近接均質アッセイ(AlphaLISA)などのバイオアッセイによって測定することができる。
抗PD-1 sdAb部分を含む抗PD-1構築物は、任意の可能な形式のものであり得る。
いくつかの実施形態では、単離抗PD-1構築物は、本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分を含む重鎖のみ抗体(HCAb)である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分は、リンカー配列を適宜介して、1つ以上の(好ましくは、ヒト)CH2及び/またはCH3ドメイン、例えば、Fc断片に連結して、その半減期をインビボで増加させることができる。
いくつかの実施形態では、単離抗PD-1構築物は、1つ以上の他の抗体部分または抗原結合部分(例えば、別のエピトープを特異的に認識する抗体部分)に融合した本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分を含む。1つ以上の他の抗体部分は、任意の抗体または抗体断片形式、例えば、完全長抗体、Fab、Fab’、(Fab’)2、Fv、scFv、scFv-scFv、ミニボディ、ダイアボディ、またはsdAbであり得る。いくつかの実施形態では、1つ以上の抗体部分(または抗原結合部分)は、重鎖可変ドメイン(VH)及び軽鎖可変ドメイン(VL)を含む。ある特定の抗体断片の概説については、Hudson et al.Nat.Med.9:129-134(2003)を参照されたい。scFv断片の概説については、例えば、Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies,vol.113,Rosenburg and Moore eds.,(Springer-Verlag,New York),pp.269-315(1994)を参照されたい;WO93/16185;ならびに米国特許第5,571,894号及び同第5,587,458号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、インビボ半減期が長くなっているFab断片及びF(ab’)2断片の考察については、米国特許第5,869,046号を参照されたい。多重特異性抗体の概説については、Weidle et al.,Cancer Genomics Proteomics,10(1):1-18,2013;Geering and Fussenegger,Trends Biotechnol.,33(2):65-79,2015;Stamova et al.,Antibodies,1(2):172-198,2012を参照されたい。ダイアボディは、二価または二重特異的であり得る、2つの抗原結合性部位を含む抗体断片である。例えば、EP 404,097;WO1993/01161;Hudson et al.,Nat.Med.9:129-134(2003);及びHollinger et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90: 6444-6448(1993)を参照されたい。トリアボディ及びテトラボディについても、Hudson et al.,Nat.Med.9:129-134(2003)に記載されている。抗体断片は、種々の技術で作成することができ、限定されないが、本明細書に記載されるように、無傷抗体の分解、ならびに組み換え宿主細胞(例えば、E.coliまたはファージ)による産生を含む。
いくつかの実施形態では、抗PD-1構築物内の抗PD-1 sdAb及び他の1つ以上の抗体部分(例えば、完全長抗体、sdAb、またはVH及びVLを含む抗原結合部分)は、ペプチドリンカーによって適宜連結することができる。抗PD-1構築物で使用されるペプチドリンカー(複数可)の長さ、柔軟性の程度、及び/または他の特性は、1つ以上の特定の抗原またはエピトープに対する親和性、特異性、またはアビディティを含むが、これらに限定されない特性にいくらかの影響を与え得る。例えば、2つの隣接するドメインが互いに立体的に干渉しないことを確実にするために、より長いペプチドリンカーが選択され得る。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、隣接するドメインが互いに自由に動くように、可動性残基(例えば、グリシン及びセリン)を含む。例えば、グリシン-セリンダブレットは、適当なペプチドリンカーであり得る。
いくつかの実施形態では、抗PD-1構築物は、第2の抗体部分に融合した本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分を含み、第2の抗体部分は、2本の重鎖及び2本の軽鎖からなる完全長抗体(例えば、TIGIT、LAG-3、TIM-3、CTLA-4、またはPD-1を特異的に認識する完全長抗体(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープ))である。いくつかの実施形態では、抗PD-1 sdAb部分及び完全長抗体は、適宜リンカー、例えば、ペプチドリンカーを介して連結される。
配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗CTLA-4抗体は、イピリムマブ(例えば、ヤーボイ(登録商標))である。いくつかの実施形態では、完全長抗体は、(例えば、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープを特異的に認識する)抗PD-1抗体である。いくつかの実施形態では、抗PD-1完全長抗体は、配列番号385のアミノ酸配列のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3を含むVH、及び配列番号386のアミノ酸配列のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3を含むVLを含む。いくつかの実施形態では、抗PD-1完全長抗体は、配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗PD-1完全長抗体は、ペンブロリズマブ(例えば、キイトルーダ(登録商標))またはニボルマブ(例えば、オプジーボ(登録商標))である。いくつかの実施形態では、抗PD-1 sdAb部分及び完全長抗体は、ペプチドリンカーによって適宜連結される。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーは、配列番号367~376のいずれか1つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗PD-1 sdAb部分とPD-1の間の結合のKdは、約10-5M~約10-12M(例えば、約10-7M~約10-12M、または約10-8M~約10-12M)である。いくつかの実施形態では、抗PD-1 sdAb部分は、ラクダ、キメラ、ヒト、部分ヒト化、または完全ヒト化である。
Ig及びITIMドメインを有するT細胞免疫受容体(TIGIT:Vstm3またはWUCAMとしても知られる)は、CD28ファミリーに属する免疫受容体である。TIGITは、いくつかの機序を介してその阻害性免疫チェックポイント機能を発揮する。第1に、その主要リガンドCD155(PVR)に結合する際に、そのITIMドメインにおけるTIGITのその後のリン酸化は、阻害シグナルを変換して、NF-κB経路を介してT細胞及びNK細胞中のIFN-γ発現を下方調節する。第2に、TIGITが、CD226とよりもPVRと高親和性で相互作用する際に、TIGITは、CD226と競合し、CD226によって変換された刺激性シグナルを減衰させる。第3に、PVRが樹状細胞上でTIGITに結合することで、IL-10発現の上方調節及びIL-12発現の下方調節をもたらすため、樹状細胞の抗腫瘍免疫応答を損ない得る。最後に、TIGITが、シスでCD226に直接結合して、T細胞活性化に必要なCD226二量体化を阻害することができることが、最近の研究により示された。したがって、TIGITは、感染及びがんにおける免疫応答の重要な負の調節因子として作用し、TIGITシグナル伝達の遮断は、がん治療用のT細胞及びNK細胞免疫を強化するためのアプローチとして提案されている。本出願に適応することができる例示の抗TIGIT抗体としては、tiragolumabが挙げられるが、これらに限定されない。
LAG-3(リンパ球活性化遺伝子3、CD223)は、Tregに対する作用、ならびにCD8+T細胞に対する直接的な効果によって免疫応答を抑制するように働く(Huang et al.,2004,Immunity.21(4):503-13;Grosso et al.,2007,J Clin Invest.117(11):3383-92)。本出願に適応することができる例示の抗LAG-3抗体としては、relatlimab(BMS-986016)が挙げられるが、これらに限定されない。
T細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン含有3(TIM3)は、A型肝炎ウイルス細胞受容体2(HAVCR2)としても知られる。それは、リンパ球活性の阻害、及び場合によってはリンパ球アネルギーの誘導に関連している免疫チェックポイント分子である(Pardoll D.Nature Reviews 2012 April Vol.12: 252)。TIM-3は、ガレクチン9(GAL9)の受容体であり、乳がんを含む様々な種類のがんで上方制御される。TIM-3は、消耗CD8+T細胞によって発現される別の重要な阻害性受容体として同定されている。がんのマウスモデルでは、最も機能不全な腫瘍浸潤CD8+T細胞が、PD-1及びΤIΜ-3と実際に同時発現することが示された。本出願に適応することができる例示の抗TIM-3抗体としては、MBG453が挙げられるが、これらに限定されない。
細胞傷害性Tリンパ球関連タンパク質4(CTLA-4、またはCD152)は、CD28のホモログであり、活性化T細胞上で上方調節される阻害性免疫チェックポイント分子として知られる。CTLA-4は、B7-1及びB7-2にも結合するが、CD28よりも親和性が大きい。B7とCTLA-4の間の相互作用は、T細胞活性化を弱め、これは、腫瘍免疫逃避の重要な機序を構成する。抗CTLA-4抗体療法は、黒色腫などの多くのがんに有望であることが示された。本出願に適応することができる例示の抗CTLA-4抗体としては、イピリムマブ(例えば、ヤーボイ(登録商標))が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、第2の抗体部分は、本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分によって認識されるPD-1エピトープと異なる、PD-1の別のエピトープを特異的に認識する、2本の重鎖及び2本の軽鎖からなる完全長抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分を、異なるPD-1エピトープを特異的に認識する抗PD-1完全長抗体と融合することで、抗体の効力を増加させる。本発明に適用することができる例示の抗PD-1抗体としては、ペムブロリズマブ(例えば、キイトルーダ(登録商標))及びニボルマブ(例えば、オプジーボ(登録商標))が挙げられるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、完全長抗体またはVH及びVLを含む抗原結合断片に融合した本明細書に記載の抗PD-1 sdAb部分を含む単離抗PD-1構築物であって、抗PD-1構築物は、多重特異性である(以下、「多重特異性抗PD-1構築物」または「抗PD-1多重特異性抗原結合タンパク質(MABP)」と呼ぶ)、単離抗PD-1構築物を提供する。いくつかの実施形態では、抗PD-1 MABPは、二重特異性(以下、「二重特異性抗PD-1構築物」または「抗PD-1二重特異性抗原結合タンパク質(BABP)」と呼ぶ)である。抗PD-1 sdAb部分は、完全長抗体またはVH及びVLを含む抗原結合断片により認識される標的(複数可)とは異なるPD-1に特異的に結合することで、より広範な標的化能力を与える。sdAbの小さいサイズのため、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗PD-1 MABP(例えば、抗PD-1 BABP)は、完全長抗体または抗原結合断片成分のものと比較して、同様の分子量及び薬物動態特性を有し得る。例えば、抗PD-1 MABPは、臨床効果及び安全性が証明されたモノクローナル抗体に1つ以上の抗PD-1 sdAb部分を融合させることで設計し、多重特異性構築物の発現性を妨げることなく臨床的有用性の増加及び望ましい薬物動態特性を提供することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の1つ以上の抗PD-1 sdAb部分は、適宜ペプチドリンカーによって完全長抗体または抗原結合断片に融合される。本明細書に記載の抗PD-1 MABP(例えば、抗PD-1 BABP)は、PD-1を加えた種々の疾患関連エピトープまたは抗原の組み合わせ、例えば、免疫チェックポイント分子、細胞表面抗原(例えば、腫瘍抗原)、または炎症促進性分子との組み合わせによるPD-1を標的にするように適用し、種々の疾患及び状態、例えば、がん、炎症、及び自己免疫疾患の治療に有用な薬剤を提供することができる。抗PD-1 MABP(例えば、抗PD-1 BABP)は、PCT/CN2017/093644に開示されるものなど任意の形式であってもよく、その全体を参照することによって本明細書に組み込まれる。
いくつかの実施形態では、抗PD-1 MABP(例えば、BABP)は、(a)本明細書に記載のPD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む第1の抗原結合部分、及び(b)VH及びVLを含む第2の抗原結合部分を含み、VH及びVLは、PD-1に特異的に結合する抗原結合部位を一緒に形成し、第1の抗原結合部分及び第2の抗原結合部分は、互いに融合される(以下、「PD-1×TIGIT MABP」または「PD-1×TIGIT BABP」で呼ばれる)。いくつかの実施形態では、抗PD-1 MABP(例えば、BABP)は、(a)本明細書に記載のPD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む第1の抗原結合部分、及び(b)VH及びVLを含む第2の抗原結合部分を含み、VH及びVLは、LAG-3に特異的に結合する抗原結合部位を一緒に形成し、第1の抗原結合部分及び第2の抗原結合部分は、互いに融合される(以下、「PD-1×LAG-3 MABP」または「PD-1×LAG-3 BABP」と呼ばれる)。いくつかの実施形態では、抗PD-1 MABP(例えば、BABP)は、(a)本明細書に記載のPD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む第1の抗原結合部分、及び(b)VH及びVLを含む第2の抗原結合部分を含み、VH及びVLは、TIM-3に特異的に結合する抗原結合部位を一緒に形成し、第1の抗原結合部分及び第2の抗原結合部分は、互いに融合される(以下、「PD-1×TIM-3 MABP」または「PD-1×TIM-3 BABP」と呼ばれる)。いくつかの実施形態では、抗PD-1 MABP(例えば、BABP)は、(a)本明細書に記載のPD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む第1の抗原結合部分、及び(b)VH及びVLを含む第2の抗原結合部分を含み、VH及びVLは、CTLA-4に特異的に結合する抗原結合部位を一緒に形成し、第1の抗原結合部分及び第2の抗原結合部分は、互いに融合される(以下、「PD-1×CTLA-4 MABP」または「PD-1×CTLA-4 BABP」と呼ばれる)。いくつかの実施形態では、抗PD-1 MABP(例えば、BABP)は、(a)本明細書に記載のPD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む第1の抗原結合部分、及び(b)VH及びVLを含む第2の抗原結合部分を含み、VH及びVLは、本明細書に記載される抗PD-1 sdAb部分によって認識されるものとは異なる第2のPD-1エピトープに特異的に結合する抗原結合部位を一緒に形成し、第1の抗原結合部分及び第2の抗原結合部分は、互いに融合される(以下、「PD-1×PD-1 MABP」または「PD-1×PD-1 BABP」と呼ばれる)。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗PD-1構築物(例えば、抗PD-1 sdAb部分、抗PD-1 sdAb-Fc融合タンパク質(例えば、HCAb)、抗PD-1 MABP/BABP)のアミノ酸配列変異体が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び/または他の生物学的特性を改善することが望ましい場合がある。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードする核酸配列に適切な改変を導入するか、またはペプチド合成によって調製し得る。そのような改変には、例えば、抗体のアミノ酸配列内における残基の欠失、及び/または挿入、及び/または置換が含まれる。最終構築物が所望の特徴(例えば、抗原結合)を有する限り、最終構築物に到達するために、欠失、挿入及び置換のいかなる組み合わせも行うことができる。
いくつかの実施形態では、1つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異体を提供する。置換突然変異誘発のための目的の部位には、HVR(またはCDR)及びFRが含まれる。保存的置換は、「好ましい置換」という見出しの下で表2に示す。より実質的な変化は、「例示的な置換」という見出しの下で表2に提供し、これは、アミノ酸側鎖クラスに関連して以下にさらに記載する通りである。アミノ酸置換を目的の抗体に導入し、生成物を所望の活性、例えば、保持/改善された抗原結合、低減した免疫原性、または改善されたADCCもしくはCDCについて、スクリーニングすることができる。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗PD-1構築物を変化させて、構築物がグリコシル化される程度を増加または減少させる。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、1つ以上のグリコシル化部位が作出または除去されるようにアミノ酸配列を変化させることによって、簡便に達成することができる。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗PD-1構築物(例えば、抗PD-1 sdAb-Fc融合タンパク質(例えば、HCAb)、PD-1×TIGIT MABP、PD-1×LAG-3 MABP、PD-1×TIM-3 MABP、PD-1×CTLA-4 MABP、またはPD-1×PD-1 MABP)のFc領域に1つ以上のアミノ酸改変を導入することにより、Fc領域変異体を生成させてもよい。Fc領域変異体は、1つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸改変(例えば、置換)を含むヒトFc領域配列(例えば、ヒトIgG1、IgG2、IgG3またはIgG4Fc領域)を含み得る。
いくつかの実施形態では、抗体の1つ以上の残基がシステイン残基で置換されている、システイン改変抗PD-1構築物、例えば、「チオMAb」を作成することが望まれ得る。特定の実施形態では、置換された残基は、抗体のアクセス可能な部位で起きる。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基は、それによって抗体のアクセス可能な部位に配置され、本明細書中でさらに記載されるように、イムノコンジュゲートを作成するために、例えば、薬物部分またはリンカー-薬剤部分などの他の部分に抗体をコンジュゲートするために使用することができる。いくつかの実施形態では、以下の残基のいずれか1つ以上がシステインで置換され得る:重鎖のA118(EU番号付け);及び重鎖Fc領域のS400(EU番号付け)。システイン改変抗PD-1構築物は、例えば、米国特許第7,521,541号に記載されるように生成され得る。
本明細書に記載されるようにPD-1を特異的に認識するsdAbを含む抗PD-1構築物のいずれか1つ(例えば、抗PD-1 sdAb、抗PD-1 sdAb-Fc融合タンパク質(例えば、HCAb)、抗PD-1/TIGIT二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIGIT BABP)、抗PD-1/LAG-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×LAG-3 BABP)、抗PD-1/TIM-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIM-3 BABP)、抗PD-1/CTLA-4二重特異性抗体(例えば、PD-1×CTLA-4 BABP)、または抗PD-1/PD-1二重特異性抗体(例えば、PD-1×PD-1 BABP))、及び適宜、薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物が本発明でさらに提供される。医薬組成物は、所望の純度を有する本明細書に記載の抗PD-1構築物を、薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または安定剤と適宜混合することにより(Remington’s Pharmaceutical Sciences 16th edition,Osol,A.Ed.(1980))、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製することができる。
本明細書に記載されるようにPD-1を特異的に認識するsdAb部分を含む抗PD-1構築物(例えば、抗PD-1 sdAb、抗PD-1 sdAb-Fc融合タンパク質(例えば、HCAb)、抗PD-1/TIGIT二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIGIT BABP)、抗PD-1/LAG-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×LAG-3 BABP)、抗PD-1/TIM-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIM-3 BABP)、抗PD-1/CTLA-4二重特異性抗体(例えば、PD-1×CTLA-4 BABP)、または抗PD-1/PD-1二重特異性抗体(例えば、PD-1×PD-1 BABP))、及びその組成物(例えば、医薬組成物)は、種々の用途、例えば、診断、分子アッセイ、及び治療において有用である。
本明細書に記載の抗PD-1構築物(例えば、抗PD-1 sdAb、抗PD-1 sdAb-Fc融合タンパク質(例えば、HCAb)、抗PD-1/TIGIT二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIGIT BABP)、抗PD-1/LAG-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×LAG-3 BABP)、抗PD-1/TIM-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIM-3 BABP)、抗PD-1/CTLA-4二重特異性抗体(例えば、PD-1×CTLA-4 BABP)、または抗PD-1/PD-1二重特異性抗体(例えば、PD-1×PD-1 BABP)は、当該技術分野で公知の任意の方法を用いて、または本明細書に記載されるように調製され得る。実施例1~3も参照されたい。いくつかの実施形態では、(a)コードされた抗PD-1構築物の発現に効果的な条件下で本明細書に記載の抗PD-1構築物をコードする単離核酸またはベクターを含むの宿主細胞を培養すること;及び発現された抗PD-1構築物を前記宿主細胞から得ることを含む、抗PD-1構築物の産生方法を提供する。いくつかの実施形態では、方法は、(a)本明細書に記載の抗PD-1構築物をコードする単離核酸またはベクターを含む宿主細胞を産生する工程をさらに含む。
真核生物での発現のために、ベクター成分は、一般的に、限定はされないが、以下:シグナル配列、複製起点、1つ以上のマーカー遺伝子、ならびにエンハンサーエレメント、プロモーター、及び転写終結配列の1つ以上を含む。
真核生物宿主における使用のためのベクターはまた、成熟タンパク質またはポリペプチドのN末端に特定の切断部位を有するシグナル配列または他のポリペプチドをコードするインサートを含んでもよい。選択される異種シグナル配列は、宿主細胞により認識され、処理される(すなわち、シグナルペプチダーゼにより切断される)ものである。哺乳動物細胞での発現において、哺乳動物シグナル配列ならびにウイルス分泌リーダー、例えば、単純ヘルペスgDシグナルを利用可能である。
一般的に、複製起点成分は、哺乳動物発現ベクターのために必要とされない(初期プロモーターを含むという理由だけでSV40起点を典型的に使用してもよい)。
発現ベクター及びクローニングベクターは、選択遺伝子(選択可能マーカーとも呼ばれる)を含んでもよい。典型的な選択遺伝子は、(a)抗生物質または他の毒素(例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、またはテトラサイクリン)に対して耐性を付与する、(b)栄養要求性欠損を補完する、または(c)複雑な培地から利用可能ではない決定的な栄養分を供給するタンパク質をコードする(例えば、バシラス属についてのDアラニンラセマーゼをコードする遺伝子)。
発現ベクター及びクローニングベクターは、通常、宿主生物により認識され、所望のポリペプチド配列をコードする核酸に機能的に連結されたプロモーターを含む。事実上、全ての真核生物遺伝子が、転写が開始される部位から約25~30塩基上流に位置付けられるATリッチ領域を有する。多くの遺伝子の転写の開始から70~80塩基上流に見出される別の配列は、CNCAAT領域であり、そこでNは任意のヌクレオチドであり得る。大半の真核生物の3’末端は、AATAAA配列であり、それはコード配列の3’末端へのポリAテールの付加のためのシグナルであり得る。これらの配列の全てを、真核生物発現ベクター中に挿入してもよい。
より高い真核生物による本出願の抗体をコードするDNAの転写は、しばしば、ベクター中にエンハンサー配列を挿入することにより増加される。多くのエンハンサー配列が、現在、哺乳動物遺伝子から公知である(グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α-フェトプロテイン、及びインスリン)。典型的には、しかしながら、真核細胞ウイルスからのエンハンサーが使用され得る。例としては、複製開始点の後期側のSV40エンハンサー(100~270bp)、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製開始点の後期側のポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。真核プロモーターの活性化のためのエンハンサーエレメントについては、Yaniv,Nature 297:17-18(1982)も参照されたい。エンハンサーは、抗体コード配列に対する位置5’または3’でベクター中にスプライシングされ得るが、しかし、好ましくはプロモーターから部位5’に位置付けられる。
真核生物宿主細胞(酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物からの有核細胞)において使用される発現ベクターは、転写の終結のために及びmRNAを安定化させるために必要な配列も含み得る。そのような配列は、一般的に、真核生物またはウイルスのDNAまたはcDNAの5’及び、時には3’の非翻訳領域から利用可能である。これらの領域は、ポリペプチドをコードするmRNAの非翻訳部分におけるポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含む。1つの有用な転写終結成分は、ウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。WO94/11026及びその中で開示される発現ベクターを参照されたい。
本明細書におけるベクター中でDNAをクローン化または発現するための適した宿主細胞は、本明細書に記載のより高い真核細胞(脊椎動物宿主細胞を含む)を含む。培養(組織培養)における脊椎動物細胞の増殖は、通常の手順になっている。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、以下:SV40により形質転換されたサル腎臓CV1株(COS-7,ATCC CRL 1651);ヒト胚腎臓株(293細胞または浮遊培養中での増殖のためにサブクローン化された293細胞、Graham et al.,J.Gen Virol.36:59(1977));仔ハムスター腎細胞(BHK,ATCC CCL 10);チャイニーズハムスター卵巣細胞/-DHFR(CHO,Urlaub et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:4216(1980));マウスセルトリ細胞(TM4,Mather,Biol.Reprod.23:243-251(1980));サル腎臓細胞(CV1 ATCC CCL 70);アフリカミドリザル腎臓細胞(VERO-76,ATCC CRL-1587);ヒト子宮頚癌細胞(HELA,ATCC CCL 2);イヌ腎臓細胞(MDCK,ATCC CCL 34);バッファローラット肝細胞(BRL 3A,ATCC CRL 1442);ヒト肺細胞(W138,ATCC CCL 75);ヒト肝細胞(Hep G2,HB 8065);マウス乳癌(MMT 060562,ATCC CCL51);TRI細胞(Mather et al.,Annals N.Y.Acad.Sci.383:44-68(1982));MRC5細胞;FS4細胞;及びヒト肝細胞癌株(Hep G2)である。
本出願の抗体を産生するために使用される宿主細胞を、種々の培地中で培養してもよい。商業的に利用可能な培地、例えば、Ham’s F10(Sigma)、最小必須培地((MEM)、(Sigma)、RPMI-1640(Sigma)、及びダルベッコ改変イーグル培地((DMEM)、Sigma)などが、宿主細胞を培養するために適する。また、Ham et al.,Meth.Enz.58:44(1979)、Barnes et al.,Anal.Biochem.102:255(1980)、米国特許第4,767,704号;同第4,657,866号;同第4,927,762号;同第4,560,655号;または同第5,122,469号;WO90/03430;WO87/00195;または米国特許Re.30,985に記載される培地のいずれかを宿主細胞用の培養液として使用してもよい。これらの培地のいずれかに、必要に応じて、以下を補給してもよい:ホルモン及び/または他の増殖因子(例えば、インスリン、トランスフェリン、または上皮増殖因子など)、塩(例えば、塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸)、緩衝剤(例えば、HEPES)、ヌクレオチド(例えば、アデノシン及びチミジン)、抗生物質(例えば、GENTAMYCIN(商標)薬物)、微量元素(通常マイクロモル範囲の最終濃度で存在する無機化合物と定義される)、及びグルコースまたは等価のエネルギー供給源。任意の他の必要な補給剤を、また、当業者に公知であり得る適切な濃度で含めてもよい。培養条件、例えば、温度、pHなどは、発現のために選択された宿主細胞と共に以前に使用されたものであり、当業者に明らかであろう。
組み換え技術を使用する場合、抗体は、細胞内に、ペリプラズム間隙中に産生され得る、または培地中に直接的に分泌され得る。抗体が細胞内に産生される場合、最初の工程として、微粒子細片、宿主細胞または溶解断片のいずれかを、例えば、遠心分離または限外ろ過により除去する。Carter et al.,Bio/Technology 10:163-167(1992)には、E.coliのペリプラズム間隙に分泌される抗体を単離するための手順が記載される。簡単に説明すると、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム(pH3.5)、EDTA、及びフェニルメチルスルホニルフルオリド(PMSF)の存在において約30分にわたり溶解させる。細胞片を遠心分離により除去することができる。抗体が培地中に分泌される場合、そのような発現系からの上清を、一般的に、商業的に利用可能なタンパク質濃縮フィルター、例えば、AmiconまたはMillipore Pellicon限外ろ過ユニットを使用して最初に濃縮する。プロテアーゼ阻害剤、例えば、PMSFなどを、先の工程のいずれかに含め、タンパク質分解を阻害してもよく、抗生物質を含め、外来性混入菌の増殖を予防してもよい。
ポリクローナル抗体は、一般的に、関連抗原及びアジュバントの複数回の皮下(s.c.)または腹腔内(i.p.)注射により動物において産生される。関連抗原を、免疫化される種において免疫原性であるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン(KLH)、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、または大豆トリプシン阻害剤に、二機能性薬剤または誘導体化薬剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル(システイン残基を通じた抱合)、Nヒドロキシスクシンイミド(リジン残基を通じて)、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、SOCl2、またはR1N=C=NR(式中、R及びR1は、非依存的により低いアルキル基である)を使用して抱合することが有用であり得る。用いてもよいアジュバントの例としては、フロイント完全アジュバント及びMPL-TDMアジュバント(モノホスホリル脂質A、合成トレハロースジコリノミコラート)が挙げられる。免疫化プロトコルは、過度の実験なしに当業者により選択され得る。
単離抗PD-1構築物(例えば、抗PD-1 sdAb、抗PD-1 sdAb-Fc融合タンパク質(例えば、HCAb)、抗PD-1/TIGIT二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIGIT BABP)、抗PD-1/LAG-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×LAG-3 BABP)、抗PD-1/TIM-3二重特異性抗体(例えば、PD-1×TIM-3 BABP)、抗PD-1/CTLA-4二重特異性抗体(例えば、PD-1×CTLA-4 BABP)、または抗PD-1/PD-1二重特異性抗体(例えば、PD-1×PD-1 BABP))、単離核酸またはそれをコードするベクター、または本明細書に記載の抗PD-1構築物をコードする単離核酸またはベクターを含む単離宿主細胞のいずれかを含むキット及び製造品がさらに提供される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物のいずれか1つを含むキットが提供され、好ましくは、その使用のための説明書を提供する。
免疫化
最新の動物保護規制に全て従い、PD-1細胞外ドメイン(ECD)タンパク質(受託番号NP_005009.2、配列番号362)により2匹のラクダを免疫化した。免疫化用に、抗原をCFA(一次免疫化)またはIFA(ブースト免疫化)による乳剤として製剤化した。抗原は、首の筋肉内にダブルスポット注射で投与した。各動物に、100μgのPD-1 ECDを含む乳剤を2本注射し、続いて50μgの抗原を含む4本の注射を1週間間隔でした。免疫化の間の異なった時点で、動物から10mlの血液試料を回収し、血清を調製した。抗原特異的体液免疫応答の誘導は、固定化したPD-1 ECDタンパク質を用いたELISAに基づく実験で血清試料を用いて確認した(図1A~1B及び図2A~2B)。最後の免疫化から5日後、200mlの血液試料を回収した。末梢血リンパ球(PBL)を、ラクダ重鎖免疫グロブリン(HCAb)の遺伝源として、血液試料200mlからFicoll-Paque勾配(Amersham Biosciences)を用いて単離し、5×108個のPBLを得た。抗体の最大多様性は、サンプリングしたBリンパ球の数、すなわちPBLの数の約20%に等しいことが予想される(1×108個)。ラクダにおける重鎖抗体の割合は、Bリンパ球の数の最大で20%である。従って、血液試料200ml中のHCAbの最大多様性は、2×107個の異なる分子として計算する。
PBL及びリンパ節から抽出したRNAを、RT-PCRの出発物質として使用して、sdAbをコードする遺伝子断片を増幅した。これらの断片を社内プラスミドベクターにクローニングした。ベクターは、sdAbコード配列とインフレームで、C末端His6タグをコードする。ライブラリーサイズは、1×109個を超える。ライブラリーファージは、標準プロトコルに従って調製し、滅菌ろ過の後、さらなる使用のために4℃で保管した。
選択されたHis6標識sdAbは、AKTAによるペリプラズム抽出液から精製した。NTA樹脂は、製造者の指示に従って処理した。調製したペリプラズム抽出液を、回転子上で室温にて30分間、樹脂でインキュベートした。樹脂をPBSで洗浄し、カラムに移した。充填した樹脂を15mMイミダゾールで洗浄した。150mMイミダゾールを用いて、sdAbをカラムから溶出した。溶出した画分を、Hybond Membraneにスポットすることで分析し、Ponceauで可視化した。タンパク質を含む画分をプールし、PBSで透析した。透析したタンパク質を回収し、ろ過滅菌し、濃度を測定し、-20℃で保存した。
sdAbの結合動態をBIAcore T200機器(GE Healthcare)上のSPRによって決定した。簡単に言えば、PD-1 ECDを約50RUの密度でCM5センサーチップにアミンカップリングさせた。sdAbを3倍段階希釈による5つの濃度で(2nMから開始して、162nMまで)、被覆したセンサーチップに注入した。流速は、全ての実験で30μl/分であった。会合相は、5分であり、解離相は、5分、10分、または15分であった。チップをグリシン/HCl(pH1.5)を用いて再生させた。異なる濃度のsdAbでの結合曲線を1:1ラングミュア結合モデルに適合させて、動態パラメーターkon、koff、及びKDを算出した(sdAb親和性データについて、図3A~3Fを参照されたい)。センサーグラム処理及びデータ分析をBiacore T200評価ソフトウェア(GE Healthcare)で行った。親和性パラメーターを図3Gにまとめた。
sdAbの、CHO細胞上で発現したPD-1への結合は、蛍光活性化セルソーティング(FACS)に基づくアッセイを用いて決定した。ヒトPD-1を発現するCHO細胞を接着培養フラスコから解離して、種々の濃度の抗体と混合した(両方とも、96ウェルプレート中で)。混合物を室温で30分間平衡化し、FACS緩衝液(1%BSAを含有するPBS)で3回洗浄した。その後、二次抗体フルオレセインイソチオシアネート(FITC)共役抗ヒトカッパ抗体(Jackson ImmunoResearch)を添加し、室温で15分間インキュベートした。細胞をFACS緩衝液で再び洗浄し、フローサイトメトリーで分析した。非線形回帰を用いて、Prism(GraphPad Software,San Diego,CA)でデータを分析し、EC50値を算出した。図4A~4Bから分かるように、A31543、AS06962、及びAS07424 sdAbが、低濃度(1~10μg/ml)でPD-1に結合できることが、FACS結合アッセイにより実証された。
リガンド結合の遮断は、フローサイトメトリーを用いて試験した。抗PD-1 sdAbを評価するため、ヒトPD-1を発現するCHO細胞を接着培養フラスコから解離して、種々の濃度の抗体、及び一定濃度のビオチン標識ヒトPD-L1/FcまたはヒトPD-L2/Fcタンパク質と混合した(両方とも、96ウェルプレート中で)。キイトルーダ(登録商標)は、抗PD-1抗体陽性対照として使用した。混合物を室温で30分間平衡化し、FACS緩衝液(1%BSAを含有するPBS)で3回洗浄した。その後、PE/Cy5ストレプトアビジン二次抗体を添加し、室温で15分間インキュベートした。細胞をFACS緩衝液で再び洗浄し、フローサイトメトリーで分析した(図5A)。非線形回帰を用いて、Prism(GraphPad Software,San Diego,CA)でデータを分析し、IC50値を算出した。
上記の研究から機能的活性及び遅いオフレートを有するsdAbを選択して、HCAb構築及び産生をした。選択されたsdAbのDNA配列をヒトIgG4 Fc(S228P)のDNA配列と融合させて、HCAb構築物を作製した。HCAb構築物をCHO細胞にトランスフェクトして、HCAbを発現させた。条件培地中の分泌HCAbをプロテインAカラムによって精製した。精製データを図29にまとめた。
抗PD-1ラクダHCAbの結合動態をSPRバイオセンサー、Biacore T200(GE Healthcare)を用いて決定した。約50RUの密度でFc捕捉法を介してセンサーチップ上に抗体を固定化した。ヒトPD-1-His抗原を3倍段階希釈による5つの濃度で(3nMから開始して、243nMまで)、被覆したセンサーチップに注入した。流速は、全ての実験で30μl/分であった。チップをグリシン/HCl(pH1.5)を用いて再生させた。異なる濃度のPD-1-His抗原での結合曲線を1:1ラングミュア結合モデルに適合させて、動態パラメーターkon、koff、及びKDを算出した(HCAb親和性データについて、図6B~6Kを参照されたい)。キイトルーダ(登録商標)は、実験対照として使用した(図6L)。センサーグラム処理及びデータ分析をBiacore T200評価ソフトウェア(GE Healthcare)で行った。親和性パラメーターを図6Aにまとめた。
22個の精製抗PD-1 HCAbを、上述のように、CHO細胞上で発現されたPD-1に結合する能力について試験した(図7A~7V)。キイトルーダ(登録商標)は、実験対照として使用した(図7W)。EC50を図7Xにまとめた。図7A~7Xから分かるように、22個全てのHCAbが細胞表面上のPD-1に良好な結合を呈したことが、FACS結合アッセイにより実証された。
22個の精製抗PD-1 HCAbを、上記と同様に、FACS分析によってPD-1及びPD-L1結合を阻害する能力について試験した(図8A~8V)。キイトルーダ(登録商標)は、実験対照として使用した(図8W)。IC50を図8Xにまとめた。図8A~8Xから分かるように、低濃度(1~10μg/ml)でPD-1/PD-L1相互作用を効果的に阻害する抗PD-1 HCAbの能力が競合アッセイにより実証された。FACSデータのIC50によれば、22個全てのHCAbは、リガンド競合活性を示した。
PD-L1を安定して発現するCHO-K1細胞、及びジャーカットエフェクター細胞を使用して、PD-1遮断を評価して、抗PD-1 HCAbを評価した。エフェクター細胞は、PD-1/PD-L1受容体-リガンド相互作用を破壊する際に、例えば、PD-L1発現細胞を、PD-1を発現するエフェクター細胞と混合する際に誘導されるルシフェラーゼ構築物を含む。従って、抗PD-1 HCAbによるCHO-K1安定細胞上のPD-L1の、エフェクター細胞上のPD-1との相互作用を阻害する有効性は、ルシフェラーゼレポーター活性を測定することによって評価することができる。アッセイは、以下のように行う。
抗PD-1 sdAbのヒト化
AS15193 sdAbのタンパク質配列を、最も高い相同性を共有している3つの最も近いヒト生殖細胞系列配列と並べた。最良のヒト生殖細胞系列配列をヒトアクセプターとして選択した。ホモロジーモデルを作製した。モデル分析データに従って、抗原結合または抗体足場形成のために潜在的に重要な残基を放置した一方、ヒト対応物に変換するために残りを選択した。3つの配列最適化変異体のパネルを生成し、結合、安定性、及び機能的活性データに基づいて選択した。4つの変異体(AS15193VH8、AS15193VH8M1、AS15193VH18及びAS15193VH18M1)を結合及びオフレートランキングデータに基づいて選択した。ラクダ親sdAb、ヒト化変異体、及びヒトアクセプター配列を図11で並べた。ヒト化sdAbは、それらの名称において「VH」で示される。
実施例2(データ不図示)でBIAcore T200を用いた上記のオフレートランキング試験から機能的活性及び遅いオフレートを有する4つのsdAb(AS15193VH8、AS15193VH8M1、AS15193VH18、及びAS15193VH18M1)を選択して、HCAb構築及び産生をした。選択されたsdAbのDNA配列をヒトIgG4 Fc(S228P)のDNA配列と融合させて、ヒト化HCAb構築物を作製した。HCAb構築物をCHO細胞にトランスフェクトして、HCAbを発現させた。条件培地中の分泌HCAbをプロテインAカラムによって精製した。
抗PD-1ヒト化HCAbの結合動態は、SPRバイオセンサー、Biacore T200(GE Healthcare)を用いて決定した。抗体は、実施例1で述べたように、Fc捕獲方法を介してセンサーチップ上に固定化した。抗原PD-1-Hisタンパク質は、分析物として使用した(3倍段階希釈(1nMから開始して、27nMまで)による4つの濃度のヒトPD-1-His抗原)。解離(kd)及び会合(ka)速度定数は、Biacore T200評価ソフトウェアを用いて得た。見かけの平衡解離定数(KD)は、kd/kaの比から算出した。データを図12Fにまとめた。データによれば、ヒト化HCAb(AS15193VH8_HCAb、AS15193VH8M1_HCAb、AS15193VH18_HCAb、及びAS15193VH18M1_HCAb)の結合親和性は、その親HCAb(AS15193_HCAb)に近く、抗体親和性がヒト化後に維持されたことを示唆している。
精製ヒト化抗PD-1 HCAbを、実施例1に記載されているように、CHO細胞上で発現されたPD-1に結合するそれらの能力について試験した。図13A~13Eから分かるように、種々のヒト化HCAbが親AS15193_HCAbに匹敵する結合能力を呈したことがFACS結合アッセイにより実証された。FACS結合EC50データを図13Fにまとめた。上記の結合親和性結果と一致して、ヒト化HCAb(AS15193VH8_HCAb、AS15193VH8M1_HCAb、AS15193VH18_HCAb、及びAS15193VH18M1_HCAb)は、その親AS15193_HCAbに匹敵する結合能力も示した。
精製ヒト化抗PD-1 HCAbを、実施例1に記載されているように、FACS分析によってPD-1/PD-L1結合を阻害するそれらの能力について試験した。図14A~14Eから分かるように、低濃度(1~10μg/ml)でPD-1/PD-L1相互作用を効果的に阻害するヒト化抗PD-1 HCAbの能力が、競合アッセイ結果により実証された。FACSデータ(図14F)のIC50によれば、4つのヒト化HCAbは、それらの親AS15193_HCAbに匹敵するリガンド遮断活性を示した。
4つのヒト化HCAbによるPD-1阻害は、実施例1に記載されるように、IL-2に基づくルシフェラーゼレポーターアッセイによって試験した。IL-2レポーターの抗体濃度依存的活性化を使用して、ヒト化抗PD-1 HCAbの抗PD-1活性のEC50値を抽出し、親AS15193_HCAbのEC50値と比較した(図15A~15E)。FACSに基づくリガンド競合アッセイ結果と一致して、4つのヒト化HCAbの機能的活性は、それらの親AS15193_HCAbに匹敵した。データを図15Fにまとめた。
ここで提示される試験では、ネズミ腫瘍モデルに対するPD-1ヒト化HCAb遮断の有効性を調査した。PD-1/PD-L1相互作用の阻害は、抗腫瘍CD8+T細胞応答を回復することで治療効果を発揮することが提案されるため、宿主の免疫系が完全に無傷である同系ネズミ腫瘍モデルで臨床前有効性試験を実施した。ヒトPD-1トランスジェニックマウスを使用した。
表3.抗PD-1 sdAb配列番号
配列番号253(A31543 sdAb核酸配列)
CAGGTACAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCAAGGTGCAGCCTGGGGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAGGCACTTTGGATTATTATGCCATAGGCTGGTTCCGCCAGGCCCCAGGGAAGGAGCGCGAGGCCGTGTCATGTATTAGTAGTAGCGATGGTAGCACATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATGCCAAGAACACGGTGTATCTTCAAATGAACAGCCTGAAACCTGGGGACACGGCCGTTTATCACTGTGCGACAGATCGGGCGTGCGGTAGTAGCTGGTTAGGGGCCGAATCATGGGCCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号254(AS06962 sdAb核酸配列)
CAGGTGCACCTGGTGGATTCTGGGGGAGGCTTGGTGCAGCCTGGGGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAAGCATCACCAGTAGAAATACCATGGGCTGGTACCGGCAGGTTCCAGGGAAGCAGCGCGAATTGGTCGCGCTAATTGCGACTTTTGTCACACATTATGCGGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGATAACGCCAGGAAGATGGTGTTTCTAGAGATGAACAGCCTGCAACCTGAGGACACGGGCGCGTATTATTGTTATGTCGATGTCTCGCCCTATTGGGGCCGGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号255(AS15090 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATACACCTATATTCCCAACTGCATGGCCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCACACTTATTTTTACTGGTGATGGTACCTCAACCTATGTCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAACGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCCGAGGACACTGCCTTGTACTACTGTGCGGCAGCCGAACGTTGTAGTGGTTCAAACGACAGAATATCCTTTTGGGGAATTAGCTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号256(AS15140 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGGGGGTCTTTGAGACTCTCCTGTACAGCCTCTGCATACACCTACAGTAACATCTGTTTGGGCTGGCTCCGCCAGGCTCCAGGGGGGGGGCTCGAGGCTGTCGCAACGATTTATATTGCGGATCAGACATCATACTATGCCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCCGCATCTCTAAAGACGCCGCCAAGAACGCGGTGTATCTGCAAATGAGCAGCCTGAGACCTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGTCCCGGTACGGTAGTACCTGCGGCGAATATTTAGCTGACTATACCTCCCGGGCCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号257(AS15152 sdAb核酸配列)
CAGATGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCTTGTGCAGTCTCTGGATACATCTACAATCGCAACTTCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCCGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCGGCTATTTATACTGGTGGCCCATACACATACTATACCGACTCCGTGCAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAACACCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGAGGACACTGCCATGTATTACTGTGTGTCAGATCTTTCGGACGGTACTTGGGACCAGGGCCGATGGAACTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号258(AS15156 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGCGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATACATTTACAATCGTAACTTCATGGGCTGGTTCCGCCAGGTTCCAGGAAAGGTGCGCGAGGGGGTCGCAGCAATTTATACTGGTACTGAACGCACGTACTATGCCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAACGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAGATGAATAGTCTGAAACCTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGTGGCGGATTTGCGGGATGGTACTTGGGATACGGGCGTATGGAACACCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号259(AS15193 sdAb核酸配列)
CAGATTCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGCGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGTAGTCTCTGGAAACATCTACAATCGTAACTTCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGTGCGCGAGGGGGTCGCAGCAATTTATACTGGTACTAGTCGCACGTACTATGCCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAACGCCAAGAATACGGTGTATCTGCAAATGAATAGTCTGAAACCTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGGCGGATTTGCGGGATGGTTTCTGGGATACGGGCGTATGGAACACCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号260(AS15872 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTGCAGCCTGGGGGGTCTCTGACACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACGTTCAGTACCGCCGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGTTCCAGAGGAGGGACTCGAGTGGGTCGCATCTATTGATAGTAGTGGTAGTCGCACATACTATGCGGGCTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACACGCTGTATTTGCAATTGAACAGCCTGAAAGCTGAGGACACGGCCATGTATTACTGTGCAAAAGATCACATGAGCTGGTTGCCGCGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号261(AS15881 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGATCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCGACAGTTCGTACTGCGGGGCCTGGTTTCGCCAGGTTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCGATTATCGATAGATATGGTGGGACAATGTACAAAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAAAGACACTGCCAAGAATATTCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACTTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGGCAGCCGAATATCGAGGCTCTTCGTGTGACGCGGAGAGTGGCTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号262(AS15883 sdAb核酸配列)
CAGGTGCACCTGATGGAGTCTGGGGGAGGTTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCCCTGACTCTCTCCTGTGCAGCCTCTGTATTCACCGACAGTAACTACTGCATGGCCTGGTTCCGCCAGGTTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATCGATAGATATGGTGGTACGATGTACAAAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAAAGACACTGCCAAGAATATTCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACTTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGGCAGCCGGGTATCGAGGCTCTTCGTGTGACGCGGATAGTGGCTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号263(AS15892 sdAb核酸配列)
CAGATTCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGATCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCGACAGTTCGTACTGCGGGGCCTGGTTTCGCCAGGTTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCGATTATCGATAGATATGGTGGGACAATGTACAAAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAAAGACACTGCCAAGAATATTCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACTTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGGCAGCCGAATATCGAGGCTCTTCGTGTGACGCGGAGAGTGGCTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号264(AS15899 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATACACCGCCGGTAGCCTCTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAGCTATTTATACTGGTGGTGGTAGCACATACTATGCCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAACGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGAGGACACTGCCCAGTACTACTGCGGGGCGGGTAGTAGGGAAGACTACTGCGACAGGGGTTACATCTATGATCACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号265(AS17049 sdAb核酸配列)
CAGGTGAAGTTAGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTACCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGAGACACCAACAACTTGAACTTCAGGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAGTTATCACTCACTCTGGTAGCACATACTATGCCGAATCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACCTCGCCAAGAACACGATGTATCTGCAAATGAACAGTCTGAAACCTGAGGACACTGCTATGTACTACTGTGCGGCAGCAGATGTGTGGCGTATTAGCTGGTCCTTTGTTCCGGAACTCTTTAGTTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号266(AS17118 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCTTGTGCAGGCTCTGGATTTACCTTCAATAACTACGCCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGAATCGCGGGAATTTGGACTGGTGGTGGTAGTACATACTATGCCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCGAAGACGTCGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGGACAGCCTGAAACCTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGGCCGAGCGCTGGGACTATAGCGACTGGCGACGCCTAAAGAGGGGGGACTATAACTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号267(AS24984 sdAb核酸配列)
CAGGTGCACCTGATGGAGTCTGGGGGAGGGTCGGTGCCGTCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATCTGGATACAGCTATAGTCGCGGCTGCTTCGCATGGTTCCAGCAGCGTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATTAATATGGATGGGCACACAAGATACTCAGACTCCGTGCAGGGCCGATTCATCATCTCCCAAGACAAGGCCAAGAACACACTACATCTGCAAATGAACACCCTGAGACCTGACGACACGGCCATGTATTACTGTGCGTACGATCGCAGTCAGTGTTACGTGCTAAGCGACCGCTTACGCCTCCCAGGTACCTTTAGTGACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号268(AS25037 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAACTGGCGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAAACTCTCCTGTTTAGCCTCGCAATGGATCAGTAGTGATTGCGGAATGGCCTGGTACCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGCGCGAATTGGTCTCACGCATTAGTAGTGATGATACCACAACCTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAGTGCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAAGCTGAAAACTGAAGACACGGGCGTGTATTATTGTGCGGCAGAAGCCAAGAGCACTATAACGAGCCTGTGCTACCCCTTGAACTACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号269(AS25064 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCCGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCACCTGTGCAGCCACTGGATACTCTTGGAGACCCGACTGCATGGGCTGGTACCGCCAGGCTGCAGAGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAGTTATTGATGCTGATGGTATCACAAGCTACGCAGACGCCGCGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCGAGACAACAACAAGATCACTCTATATCTGCAAATGCTGAAACCTGACGACACTGGCATGTACGTCTGTGTGGTAGGATGGAGAGTAAGCAGTGGTGGTAACTGCCAATTCAATGACTACTGGGGTCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号270(AS25067 sdAb核酸配列)
CAGGTGCACCTGATGGAGTCTGGGGGAGGCGCGGTGCAGACCGGAGGGTCTCTGAGGCTCTCCTGTGCAGTATCGGGAATCTCCATCAGTCCAGACTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGAAGCGCGAGGCGGTCACGACAATTTTTGCTAATACTGGTAGCGCGCGCTATGGCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCAGCTCCCAAGGCAACGCCAAGAATACGCTGTATCTGCAAATGGACAGCGTGAAACTTGATGACACTGGCACGTACTACTGTGCGGCACGGTTTACGGGGGGTGACTGCTTTGATCATCAGCCATTGGCGTGGCGCTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号271(AS25071 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAACTGGCGGAGTCTGGGGGAGGGTCGGTGCAGTCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATCTGGATACAGCTATAGTCGCGGCTGCTTCGCGTGGTTCCAGCAGCGTCCAGGAAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATTAATAGTGATGGGCACACAGCATACTCAGACTCCGTGCAGGGCCGATTCATCATCTCCCAAGACAAGGCCAAGAACACACTATATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGACGACACGGCCATGTATTACTGTGCGTACGATCGCAGTCAGTGTTACGTGCTTCGCGACCGCTTACGCCTCCCAGATACCTTTACTGACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号272(AS25115 sdAb核酸配列)
CAGGTGCACCTGGTGGAGTCTGGGGGAGCCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCACTGCGTACACCGCCAGTAATTATTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGTCTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGCAGTCGCAAGTATTAATGATGACGGCGTCACAAGCTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCAAGACAGCGCCAAGAAGACTCTGTATCTCCAAATGAACCGCCTGAAACCTGAGGACACTGCCATGTACTACTGTGCGGCCACCCCGGATGGTTACTGCTACGCCGAGAGACTTTCCCGGTGGAGATATGAGTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号273(AS25117 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGCGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGGCTCTCCTGTGTAATATCAGGAACCTCCATCAGTCCAGACTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGAAGCGCGAGGCAGTCATGAGTATTTTTACAAATACTGGTAGCACGCGCTATGGCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCAGCTCCCAAGGCAACGCCAAGAATACGCTGTATCTGCAAATGGACAGCTTGAAACTTGATGACACTGCCACGTACTACTGTGCGGCCCGGTATACGGGGGGTGACTGCTTTAATCTTGAACCATTGGCGTGGCGCTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号274(AS25119 sdAb核酸配列)
CAGGTTCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCCGTGCAGGCTGGAGGGCCTCTGAGACTCACCTGTGCAGCCACTGGATACTCTTGGAGACCCGACTGCATGGGCTGGTACCGCCAGGCTGCAGAGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAGTTATTGATGCTGATGGTATCACAAGTTACGCAGACGCCGCGAAGGGCCGATTCACCATCTCCCGAGACAACAACAACATCACTCTATATCTGCAAATGCTGAAACCTGACGACACTGGCATGTACGTCTGTGTGATAGGATGGAGAGTAAGCAGTGGTGGTAACTGCCAATTCAATGACTACTGGGGTCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号275(AS25149 sdAb核酸配列)
CAGGTTCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGGTCGGTGCAGTCTGGAGGGTCTCTGAAACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATCTGGATACAGCTATAGTCGCGGCTGCTTCGCATGGTTCCAACAGCGTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATTAATAGCGATGGACACACAAGATACTCAGACTCCGTGCAGGGCCGATTCATCATCTCCCAAGACAAGGCCAAGAACACACTATATCTCCAAATGAACAGCCTGAAACCTGACGACGCGGCCATGTATTACTGTGCGTACGATCGCAATCAGTGTTACGTTCTTCTCGACCGCTTACGCCTCCCAGGTACCTTTAGTGACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号276(AS25164 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGGTCGGTGCAGTCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATCTGGATACAGCTATAATCGCGGCTGCTTCGCGTGGTTCCAGCAGCGTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATTAATAGCGATGGGCACACAACGTACGGAGACTCCGTGCAGGGCCGATTCATCATCTCCCAAGACAAGGCCAAGAACACACTAGATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGACGACACGGCCATGTATTACTGTGCGTACGATCGCAATCAGTGTTACGTGCTTCGCGACCGCTTACGCCTCCCAGATACCTTTACTGACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号277(AS25170 sdAb核酸配列)
CAGGTGAAGTTGGTGGAGTCTGGGGGAGGGTTGGTGCAGTCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATCTGGATACAGCTATAGTCGCGGCTGCTTCGCATGGTTCCAGCAGCGTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATTAATATGGATGGGCACACAATGTACTCAGACTTGGCGCAGGGCCGATTCATCATCTCCCAAGACAAGGCCAAGAACACACTATATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGACGACACGGCCATGTATTACTGTGCGTACGATCGCGATCAGTGTTACGTACTTCGGGACCGCTTACGCCTCCCAGATACCTTTAATGACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号278(AS25222 sdAb核酸配列)
CAGATTCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGGCTCTCCTGTGCAGTGACAGGAATCTCCATCAGTCCAGACTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGAAGCGCGAGGCAGTCGCGACTATTTTTACTAATACTGCGAGCACGCGCTATGGCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCAGCTCCCAAGGGAACGGCAAGAATACGCTGTATCTGCAAATGGACAGCTTGAACGTTGATGACACTGCCACGTACTACTGTGCGGCCCGCTATACGGGGGGTAACTGCTTTAATCTTGAGCCATTGGCGTGGCACTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号279(AS25396 sdAb核酸配列)
CAGGTGCACCTGATGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGGCTCTCCTGTGTAGTATCAGGAATCTCCATCAGTCCAGACTGTATGGGGTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGAAGCGCGAGGCAGTCGCGACTATTTTTACTAATACTCGTAGGACGCGCTATGGCGACTCCGTGAAGGGCCGAGTCACCAGCTCCCAAGGCAACGCCAAGAATACGCTGTATCTAAAAATGGACAACTTGAGGCACGATGACACTGCCACGTACTACTGTGCGGCCCGGTATACGGGGGGTGACTGCTTTAATCTTGACCCATTGTCCTGGCGCTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号280(AS25457 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGGCTCTCCTGTGCAGTATCAGGAATCTCCATCAGTCCAGACTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGAAGCGCGAGGCAGTCGCGACTATTTTTACTAATACTCGTAGCACGCGCTATGGCGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCAGCTCCCAAGGCAACGCCAAGAATACGCTGTATCTGCAAATGGACAGCTTGAAACTTGATGACACTGCCACGTACTACTGTGCGGCCCGGTATACGGGGGGTGACTGCTTTAATCTTGAGCCTGTGGCGTGGCGCTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号281(AS25487 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTGCAGCCTGGGGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGCTTCACCTTCAGTGTTTGGTCGATGTCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGACTCGAGTGGGTCTCAACTATCACTGGGAGTGGCGCACAAACATATTATGCAAGCTCAGTGAGGGGCCGATTCACCACCTCCAGAGACAACGCCAAGAACACGGTATATCTGCAAATGAACAGCCTGAAATCTGACGACACGGCCGTGTATTATTGTGAGAGAGGAAATGGTCAGACTGCTATGGAGGCTCTCATTAACCCGCCCGAGCGTCCGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号282(AS25095 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGATGCAGCCTGGGGGGTCTTTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTACTGGATGTACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTTGAGTGGGTCTCGGTTATTAATAGAGCTGGTGATTCCGCCTGGTATGCAGACTCAGTGACGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACACGGTGTATCTGCAAATGGACAGCCTGAAACCTGAGGACACGGCCATGTACTACTGTGCGGCAGACTCGAGGGGGTACGGTGGTGACTGGTACAAGCTCCTCTCAGACTTTAATTATTGCGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号283(AS25435 sdAb核酸配列)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTCGGTGCAGGCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCACTGCGTACACCGCCAGTTTCTACTGCATGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGAGCGCGAGGCGGTCGCAAGTATTAATGATGACGGCGTCACAATGTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCAATTCACCATCTCCCAAGACAGCGCCACGAAGACTCTGTATCTGCAAATGAACCGCCTGAAACCTGAGGACACCGCCATGTACTACTGTGCGGCCACCCCGGAAGGTTACTGCTACGCCGAGAGACTTTCCACGTGGAGATATACGTTCTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号284(AS25156 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGGTCGGTGCAGTCTGGAGGGTCTCTGAGACTCTCCTGTGCAGTCTCTGGATCTGGATACAGCTATAGTCGCGGCTGCTTCGCGTGGTTCCAGCAGCGTCCAGGAAAGGAGCGCGAGGGGGTCGCAATTATTAATAGCGATGGGCACACAAGATACTCAGACTCCGTGCAGGGCCGATTCATCATCTCCCAAGACAAGGCCAAGAACACACTATATCTGCAAATGAACAGCCTGAAACCTGACGACACGGCCATGTATTACTGTGCGTACGATTGCAGTCAGTGTTACGTGCTTCGCGACCGCTTACGCCTCCCAGATACCTTTACTGACTGGGGCCAGGGGACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
配列番号285(AS15193VH8 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGAGCGGAGGAGGACTGGTGCAGCCAGGAGGCTCTCTGAGACTGTCCTGCGCCGTGAGCGGCAACATCTACAACAGAAATTTCATGGGATGGTTTAGGCAGGCTCCTGGCAAGGGACTGGAGGGCGTGTCCGCCATCTATACCGGCACATCTCGCACCTACTATGCTGACTCCGTGAAGGGCAGGTTCACCATCTCTCGGGATAACTCCAAGAATACAGTGTACCTGCAGATGAACTCTCTGAGGGCCGAGGACACAGCCGTGTACTATTGTGCCGCTGACCTGCGGGATGGCTTTTGGGATACCGGCGTGTGGAATACATGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCAGC
配列番号286(AS15193VH8M1 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGAGCGGAGGAGGACTGGTGCAGCCAGGAGGCTCTCTGAGACTGTCCTGCGCCGTGAGCGGCAACATCTACAACAGAAATTTCATGGGATGGTTTAGGCAGGCTCCTGGCAAGGGACTGGAGGGCGTGTCCGCCATCTATACCGGCACATCTCGCACCTACTATGCTGACTCCGTGAAGGGCAGGTTCACCATCTCTCGGGATAACTCCAAGAATACAGTGTACCTGCAGATGAACTCTCTGAGGGCCGAGGACACAGCCGTGTACTATTGTGCCGCTGACCTGCGGGAGGGCTTTTGGGATACCGGCGTGTGGAATACATGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCAGC
配列番号287(AS15193VH18 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGAGGAGGACTGGTGCAGCCAGGAGGCTCTCTGAGGCTGTCCTGCGCCGTGAGCGGAAACATCTACAACAGAAATTTCATGGGATGGTTTAGGCAGGCTCCTGGCAAGGGAAGGGAGGGCGTGTCTGCTATCTATACCGGCACATCCAGGACCTACTATGCCGACAGCGTGAAGGGCAGGTTCACCATCTCTCGGGATAACGCTAAGAATACAGTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGCCAGAGGACACAGCCGTGTACTATTGTGCCGCTGACCTGAGAGATGGCTTTTGGGATACCGGCGTGTGGAATACATGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCAGC
配列番号288(AS15193VH18M1 sdAb核酸配列)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCCGGAGGAGGACTGGTGCAGCCAGGAGGCTCTCTGAGGCTGTCCTGCGCCGTGAGCGGAAACATCTACAACAGAAATTTCATGGGATGGTTTAGGCAGGCTCCTGGCAAGGGAAGGGAGGGCGTGTCTGCTATCTATACCGGCACATCCAGGACCTACTATGCCGACAGCGTGAAGGGCAGGTTCACCATCTCTCGGGATAACGCTAAGAATACAGTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGCCAGAGGACACAGCCGTGTACTATTGTGCCGCTGACCTGAGAGAGGGCTTTTGGGATACCGGCGTGTGGAATACATGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCAGC
配列番号289(A31543 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGKVQPGGSLRLSCAASGGTLDYYAIGWFRQAPGKEREAVSCISSSDGSTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPGDTAVYHCATDRACGSSWLGAESWAQGTQVTVSS
配列番号290(AS06962 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVHLVDSGGGLVQPGGSLRLSCAASGSITSRNTMGWYRQVPGKQRELVALIATFVTHYADSVKGRFTISRDNARKMVFLEMNSLQPEDTGAYYCYVDVSPYWGRGTQVTVSS
配列番号291(AS15090 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGYTYIPNCMAWFRQAPGKEREGVTLIFTGDGTSTYVDSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTALYYCAAAERCSGSNDRISFWGISYWGQGTQVTVSS
配列番号292(AS15140 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCTASAYTYSNICLGWLRQAPGGGLEAVATIYIADQTSYYADSVKGRFRISKDAAKNAVYLQMSSLRPEDTAMYYCASRYGSTCGEYLADYTSRAQGTQVTVSS
配列番号293(AS15152 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QMQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAVSGYIYNRNFMGWFRQAPGKEREGVAAIYTGGPYTYYTDSVQGRFTISQDNTKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCVSDLSDGTWDQGRWNYWGQGTQVTVSS
配列番号294(AS15156 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSAQAGGSLRLSCAVSGYIYNRNFMGWFRQVPGKVREGVAAIYTGTERTYYADSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCVADLRDGTWDTGVWNTWGQGTQVTVSS
配列番号295(AS15193 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QIQLVESGGGSAQAGGSLRLSCVVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKVREGVAAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCAADLRDGFWDTGVWNTWGQGTQVTVSS
配列番号296(AS15872 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGLVQPGGSLTLSCAASGFTFSTAAMSWVRQVPEEGLEWVASIDSSGSRTYYAGSVKGRFTISRDNAKNTLYLQLNSLKAEDTAMYYCAKDHMSWLPRGQGTQVTVSS
配列番号297(AS15881 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFTDSSYCGAWFRQVPGKEREGVAIIDRYGGTMYKDSVKGRFTISKDTAKNILYLQMNSLKLEDTAMYYCAAAEYRGSSCDAESGYWGQGTQVTVSS
配列番号298(AS15883 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVHLMESGGGSVQAGGSLTLSCAASVFTDSNYCMAWFRQVPGKEREGVAIIDRYGGTMYKDSVKGRFTISKDTAKNILYLQMNSLKLEDTAMYYCAAAGYRGSSCDADSGYWGQGTQVTVSS
配列番号299(AS15892 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QIQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFTDSSYCGAWFRQVPGKEREGVAIIDRYGGTMYKDSVKGRFTISKDTAKNILYLQMNSLKLEDTAMYYCAAAEYRGSSCDAESGYWGQGTQVTVSS
配列番号300(AS15899 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGYTAGSLCMGWFRQAPGKEREGVAAIYTGGGSTYYADSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAQYYCGAGSREDYCDRGYIYDHWGQGTQVTVSS
配列番号301(AS17049 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVKLVESGGGSVQAGGYLRLSCAASGDTNNLNFRGWFRQAPGKEREGVAVITHSGSTYYAESVKGRFTISQDLAKNTMYLQMNSLKPEDTAMYYCAAADVWRISWSFVPELFSYWGQGTQVTVSS
配列番号302(AS17118 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAGSGFTFNNYAMGWFRQAPGKEREGIAGIWTGGGSTYYADSVKGRFTISEDVAKNTVYLQMDSLKPEDTAMYYCAAERWDYSDWRRLKRGDYNYWGQGTQVTVSS
配列番号303(AS24984 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVHLMESGGGSVPSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINMDGHTRYSDSVQGRFIISQDKAKNTLHLQMNTLRPDDTAMYYCAYDRSQCYVLSDRLRLPGTFSDWGQGTQVTVSS
配列番号304(AS25037 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLAESGGGSVQAGGSLKLSCLASQWISSDCGMAWYRQAPGKERELVSRISSDDTTTYADSVKGRFTISQDSAKNTLYLQMNKLKTEDTGVYYCAAEAKSTITSLCYPLNYWGQGTQVTVSS
配列番号305(AS25064 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLTCAATGYSWRPDCMGWYRQAAEKEREGVAVIDADGITSYADAAKGRFTISRDNNKITLYLQMLKPDDTGMYVCVVGWRVSSGGNCQFNDYWGQGTQVTVSS
配列番号306(AS25067 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVHLMESGGGAVQTGGSLRLSCAVSGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVTTIFANTGSARYGDSVKGRFTSSQGNAKNTLYLQMDSVKLDDTGTYYCAARFTGGDCFDHQPLAWRFWGQGTQVTVSS
配列番号307(AS25071 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLAESGGGSVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTAYSDSVQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDTAMYYCAYDRSQCYVLRDRLRLPDTFTDWGQGTQVTVSS
配列番号308(AS25115 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVHLVESGGASVQAGGSLRLSCAATAYTASNYCMGWFRQSPGKEREAVASINDDGVTSYADSVKGRFTISQDSAKKTLYLQMNRLKPEDTAMYYCAATPDGYCYAERLSRWRYEFWGQGTQVTVSS
配列番号309(AS25117 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLAESGGGSVQAGGSLRLSCVISGTSISPDCMGWFRQAPGKKREAVMSIFTNTGSTRYGDSVKGRFTSSQGNAKNTLYLQMDSLKLDDTATYYCAARYTGGDCFNLEPLAWRFWGQGTQVTVSS
配列番号310(AS25119 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGPLRLTCAATGYSWRPDCMGWYRQAAEKEREGVAVIDADGITSYADAAKGRFTISRDNNNITLYLQMLKPDDTGMYVCVIGWRVSSGGNCQFNDYWGQGTQVTVSS
配列番号311(AS25149 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQSGGSLKLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTRYSDSVQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDAAMYYCAYDRNQCYVLLDRLRLPGTFSDWGQGTQVTVSS
配列番号312(AS25156 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGSVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTRYSDSVQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDTAMYYCAYDCSQCYVLRDRLRLPDTFTDWGQGTQVTVSS
配列番号313(AS25164 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGSVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYNRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTTYGDSVQGRFIISQDKAKNTLDLQMNSLKPDDTAMYYCAYDRNQCYVLRDRLRLPDTFTDWGQGTQVTVSS
配列番号314(AS25170 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVKLVESGGGLVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINMDGHTMYSDLAQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDTAMYYCAYDRDQCYVLRDRLRLPDTFNDWGQGTQVTVSS
配列番号315(AS25222 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QIQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAVTGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVATIFTNTASTRYGDSVKGRFTSSQGNGKNTLYLQMDSLNVDDTATYYCAARYTGGNCFNLEPLAWHFWGQGTQVTVSS
配列番号316(AS25396 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVHLMESGGGSVQAGGSLRLSCVVSGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVATIFTNTRRTRYGDSVKGRVTSSQGNAKNTLYLKMDNLRHDDTATYYCAARYTGGDCFNLDPLSWRFWGQGTQVTVSS
配列番号317(AS25457 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAVSGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVATIFTNTRSTRYGDSVKGRFTSSQGNAKNTLYLQMDSLKLDDTATYYCAARYTGGDCFNLEPVAWRFWGQGTQVTVSS
配列番号318(AS25487 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSVWSMSWVRQAPGEGLEWVSTITGSGAQTYYASSVRGRFTTSRDNAKNTVYLQMNSLKSDDTAVYYCERGNGQTAMEALINPPERPGTQVTVSS
配列番号319(AS25095 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGLMQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQAPGKGLEWVSVINRAGDSAWYADSVTGRFTISRDNAKNTVYLQMDSLKPEDTAMYYCAADSRGYGGDWYKLLSDFNYCGQGTQVTVSS
配列番号320(AS25435 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAATAYTASFYCMGWFRQAPGKEREAVASINDDGVTMYADSVKGQFTISQDSATKTLYLQMNRLKPEDTAMYYCAATPEGYCYAERLSTWRYTFWGQGTQVTVSS
配列番号321(AS15193VH8 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGLEGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCAADLRDGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSS
配列番号322(AS15193VH8M1 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGLEGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCAADLREGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSS
配列番号323(AS15193VH18 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGREGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLRPEDTAVYYCAADLRDGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSS
配列番号324(AS15193VH18M1 sdAbアミノ酸配列;CDRは下線付き)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGREGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLRPEDTAVYYCAADLREGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSS
配列番号325(A31543 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGKVQPGGSLRLSCAASGGTLDYYAIGWFRQAPGKEREAVSCISSSDGSTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLKPGDTAVYHCATDRACGSSWLGAESWAQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号326(AS06962 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVHLVDSGGGLVQPGGSLRLSCAASGSITSRNTMGWYRQVPGKQRELVALIATFVTHYADSVKGRFTISRDNARKMVFLEMNSLQPEDTGAYYCYVDVSPYWGRGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号327(AS15090 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGYTYIPNCMAWFRQAPGKEREGVTLIFTGDGTSTYVDSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTALYYCAAAERCSGSNDRISFWGISYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号328(AS15140 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCTASAYTYSNICLGWLRQAPGGGLEAVATIYIADQTSYYADSVKGRFRISKDAAKNAVYLQMSSLRPEDTAMYYCASRYGSTCGEYLADYTSRAQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号329(AS15152 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QMQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAVSGYIYNRNFMGWFRQAPGKEREGVAAIYTGGPYTYYTDSVQGRFTISQDNTKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCVSDLSDGTWDQGRWNYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号330(AS15156 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSAQAGGSLRLSCAVSGYIYNRNFMGWFRQVPGKVREGVAAIYTGTERTYYADSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCVADLRDGTWDTGVWNTWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号331(AS15193 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QIQLVESGGGSAQAGGSLRLSCVVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKVREGVAAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAMYYCAADLRDGFWDTGVWNTWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号332(AS15872 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGLVQPGGSLTLSCAASGFTFSTAAMSWVRQVPEEGLEWVASIDSSGSRTYYAGSVKGRFTISRDNAKNTLYLQLNSLKAEDTAMYYCAKDHMSWLPRGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号333(AS15881 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFTDSSYCGAWFRQVPGKEREGVAIIDRYGGTMYKDSVKGRFTISKDTAKNILYLQMNSLKLEDTAMYYCAAAEYRGSSCDAESGYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号334(AS15883 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVHLMESGGGSVQAGGSLTLSCAASVFTDSNYCMAWFRQVPGKEREGVAIIDRYGGTMYKDSVKGRFTISKDTAKNILYLQMNSLKLEDTAMYYCAAAGYRGSSCDADSGYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号335(AS15892 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QIQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGFTDSSYCGAWFRQVPGKEREGVAIIDRYGGTMYKDSVKGRFTISKDTAKNILYLQMNSLKLEDTAMYYCAAAEYRGSSCDAESGYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号336(AS15899 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAASGYTAGSLCMGWFRQAPGKEREGVAAIYTGGGSTYYADSVKGRFTISQDNAKNTVYLQMNSLKPEDTAQYYCGAGSREDYCDRGYIYDHWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号337(AS17049 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVKLVESGGGSVQAGGYLRLSCAASGDTNNLNFRGWFRQAPGKEREGVAVITHSGSTYYAESVKGRFTISQDLAKNTMYLQMNSLKPEDTAMYYCAAADVWRISWSFVPELFSYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号338(AS17118 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAGSGFTFNNYAMGWFRQAPGKEREGIAGIWTGGGSTYYADSVKGRFTISEDVAKNTVYLQMDSLKPEDTAMYYCAAERWDYSDWRRLKRGDYNYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号339(AS24984 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVHLMESGGGSVPSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINMDGHTRYSDSVQGRFIISQDKAKNTLHLQMNTLRPDDTAMYYCAYDRSQCYVLSDRLRLPGTFSDWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号340(AS25037 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLAESGGGSVQAGGSLKLSCLASQWISSDCGMAWYRQAPGKERELVSRISSDDTTTYADSVKGRFTISQDSAKNTLYLQMNKLKTEDTGVYYCAAEAKSTITSLCYPLNYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号341(AS25064 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLTCAATGYSWRPDCMGWYRQAAEKEREGVAVIDADGITSYADAAKGRFTISRDNNKITLYLQMLKPDDTGMYVCVVGWRVSSGGNCQFNDYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号342(AS25067 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVHLMESGGGAVQTGGSLRLSCAVSGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVTTIFANTGSARYGDSVKGRFTSSQGNAKNTLYLQMDSVKLDDTGTYYCAARFTGGDCFDHQPLAWRFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号343(AS25071 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLAESGGGSVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTAYSDSVQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDTAMYYCAYDRSQCYVLRDRLRLPDTFTDWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号344(AS25115 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVHLVESGGASVQAGGSLRLSCAATAYTASNYCMGWFRQSPGKEREAVASINDDGVTSYADSVKGRFTISQDSAKKTLYLQMNRLKPEDTAMYYCAATPDGYCYAERLSRWRYEFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号345(AS25117 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLAESGGGSVQAGGSLRLSCVISGTSISPDCMGWFRQAPGKKREAVMSIFTNTGSTRYGDSVKGRFTSSQGNAKNTLYLQMDSLKLDDTATYYCAARYTGGDCFNLEPLAWRFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号346(AS25119 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGPLRLTCAATGYSWRPDCMGWYRQAAEKEREGVAVIDADGITSYADAAKGRFTISRDNNNITLYLQMLKPDDTGMYVCVIGWRVSSGGNCQFNDYWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号347(AS25149 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQSGGSLKLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTRYSDSVQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDAAMYYCAYDRNQCYVLLDRLRLPGTFSDWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号348(AS25156 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGSVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTRYSDSVQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDTAMYYCAYDCSQCYVLRDRLRLPDTFTDWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号349(AS25164 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGSVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYNRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINSDGHTTYGDSVQGRFIISQDKAKNTLDLQMNSLKPDDTAMYYCAYDRNQCYVLRDRLRLPDTFTDWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号350(AS25170 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVKLVESGGGLVQSGGSLRLSCAVSGSGYSYSRGCFAWFQQRPGKEREGVAIINMDGHTMYSDLAQGRFIISQDKAKNTLYLQMNSLKPDDTAMYYCAYDRDQCYVLRDRLRLPDTFNDWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号351(AS25222 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QIQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAVTGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVATIFTNTASTRYGDSVKGRFTSSQGNGKNTLYLQMDSLNVDDTATYYCAARYTGGNCFNLEPLAWHFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号352(AS25396 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVHLMESGGGSVQAGGSLRLSCVVSGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVATIFTNTRRTRYGDSVKGRVTSSQGNAKNTLYLKMDNLRHDDTATYYCAARYTGGDCFNLDPLSWRFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号353(AS25457 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAVSGISISPDCMGWFRQAPGKKREAVATIFTNTRSTRYGDSVKGRFTSSQGNAKNTLYLQMDSLKLDDTATYYCAARYTGGDCFNLEPVAWRFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号354(AS25487 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSVWSMSWVRQAPGEGLEWVSTITGSGAQTYYASSVRGRFTTSRDNAKNTVYLQMNSLKSDDTAVYYCERGNGQTAMEALINPPERPGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号355(AS25095 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGLMQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMYWVRQAPGKGLEWVSVINRAGDSAWYADSVTGRFTISRDNAKNTVYLQMDSLKPEDTAMYYCAADSRGYGGDWYKLLSDFNYCGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号356(AS25435 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
QVQLVESGGGSVQAGGSLRLSCAATAYTASFYCMGWFRQAPGKEREAVASINDDGVTMYADSVKGQFTISQDSATKTLYLQMNRLKPEDTAMYYCAATPEGYCYAERLSTWRYTFWGQGTQVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号357(AS15193VH8 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGLEGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCAADLRDGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号358(AS15193VH8M1 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGLEGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNSKNTVYLQMNSLRAEDTAVYYCAADLREGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号359(AS15193VH18 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGREGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLRPEDTAVYYCAADLRDGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号360(AS15193VH18M1 HCAbアミノ酸配列;CDRは下線付き、リンカーは太字)
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAVSGNIYNRNFMGWFRQAPGKGREGVSAIYTGTSRTYYADSVKGRFTISRDNAKNTVYLQMNSLRPEDTAVYYCAADLREGFWDTGVWNTWGQGTLVTVSSESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号361(ヒトPD-1アミノ酸配列、リーダーペプチドを除く)
PGWFLDSPDRPWNPPTFSPALLVVTEGDNATFTCSFSNTSESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGTYLCGAISLAPKAQIKESLRAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLVVGVVGGLLGSLVLLVWVLAVICSRAARGTIGARRTGQPLKEDPSAVPVFSVDYGELDFQWREKTPEPPVPCVPEQTEYATIVFPSGMGTSSPARRGSADGPRSAQPLRPEDGHCSWPL
配列番号362(ヒトPD-1アミノ酸配列の細胞外ドメイン)
PGWFLDSPDRPWNPPTFSPALLVVTEGDNATFTCSFSNTSESFVLNWYRMSPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARRNDSGTYLCGAISLAPKAQIKESLRAELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLV
配列番号363(IgG4 Fcアミノ酸配列)
APEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号364(IgG1不活性Fcアミノ酸配列)
APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
配列番号365(IgG1 Fcアミノ酸配列)
APELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
配列番号366(ヒトアクセプターアミノ酸配列)
QVQLVESGGGVVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVSVIYSGGSSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAK
配列番号367(ヒトIgG4(hIgG4)ヒンジアミノ酸配列)
ESKYGPPCPPCP
配列番号368(変異型ヒトIgG1(hIgG1)ヒンジアミノ酸配列)
EPKSSDKTHTSPPSP
配列番号369(ヒトIgG1(hIgG1)ヒンジアミノ酸配列)
EPKSCDKTHTCPPCP
配列番号370(リンカーペプチド(9GS)アミノ酸配列)
GGGGSGGGS
配列番号371(リンカーペプチドアミノ酸配列)
GGGGSGGGGSGGGGS
配列番号372(リンカーペプチドアミノ酸配列、nは少なくとも1つの整数)
(G)n
配列番号373(リンカーペプチドアミノ酸配列、nは少なくとも1つの整数)
(GS)n
配列番号374(リンカーペプチドアミノ酸配列、nは少なくとも1つの整数)
(GSGGS)n
配列番号375(リンカーペプチドアミノ酸配列、nは少なくとも1つの整数)
(GGGS)n
配列番号376(リンカーペプチドアミノ酸配列、nは少なくとも1つの整数)
(GGGGS)n
配列番号377(抗TIGIT mAb tiragolumab重鎖アミノ酸配列)
EVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGKTYYRFKWYSDYAVSVKGRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPEDTAVFYCTRESTTYDLLAGPFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
配列番号378(抗TIGIT mAb tiragolumab軽鎖アミノ酸配列)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYSSNNKKYLAWYQQKPGQPPNLLIYWASTRESGVPDRESGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPFTFGPGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号379(抗LAG-3 mAb relatlimab重鎖アミノ酸配列)
QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVYYCAFGYSDYEYNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG
配列番号380(抗LAG-3 mAb relatlimab軽鎖アミノ酸配列)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTNLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号381(抗TIM-3 mAb MBG453重鎖アミノ酸配列)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRATMTADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号382(抗TIM-3 mAb MBG453軽鎖アミノ酸配列)
DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号383(抗CTLA-4 mAbイピリムマブ重鎖アミノ酸配列)
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYTMHWVRQAPGKGLEWVTFISYDGNNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAIYYCARTGWLGPFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
配列番号384(抗CTLA-4 mAbイピリムマブ軽鎖アミノ酸配列)
EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVGSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGAFSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号385(抗PD-1 mAbペンブロリズマブ(IgG4 S228P)重鎖アミノ酸配列)
QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号386(抗PD-1 mAbペンブロリズマブ(IgG4 S228P)軽鎖アミノ酸配列)
EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Claims (30)
- PD-1を特異的に認識する単一ドメイン抗体(sdAb)部分(抗PD-1sdAb部分)を含む単離抗PD-1構築物であって、前記抗PD-1sdAb部分が、以下:
(1)配列番号70のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号142のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号214のアミノ酸配列を含むCDR3;あるいは
(2)配列番号43のアミノ酸配列を含むCDR1;配列番号115のアミノ酸配列を含むCDR2;及び配列番号187のアミノ酸配列を含むCDR3;
のいずれか1つを含む、単離抗PD-1構築物。 - 前記抗PD-1sdAb部分が、以下:
(I)
a-1)37位のアミノ酸残基が、F、Y、L、I、及びVからなる群から選択され;
a-2)44位のアミノ酸残基が、A、G、E、D、G、Q、R、S、及びLからなる群から選択され;
a-3)45位のアミノ酸残基が、L、R、及びCからなる群から選択され;
a-4)103位のアミノ酸残基が、W、R、G、及びSからなる群から選択され;及び
a-5)108位のアミノ酸残基が、Qであり;または
(II)
b-1)37位のアミノ酸残基が、F、Y、L、I、及びVからなる群から選択され;
b-2)44位のアミノ酸残基が、E、Q、及びGからなる群から選択され;
b-3)45位のアミノ酸残基が、Rであり;
b-4)103位のアミノ酸残基が、W、R、及びSからなる群から選択され;及び
b-5)108位のアミノ酸残基が、Q及びLからなる群から選択される;
のいずれか1つのアミノ酸配列を含むVHHドメインを含み、
アミノ酸位置が、Kabat番号付けに従っている、請求項1に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗PD-1sdAb部分が、
(i)配列番号295、321~324のいずれか1つのアミノ酸配列を含むVHHドメイン、
(ii)配列番号295、321~324のいずれか1つに対して少なくとも80%の配列同一性を有するVHHドメイン、または
(iii)配列番号295、321~324のいずれか1つに対して最大で3つのアミノ酸置換を含むVHHドメイン
を含む、請求項1または2に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗PD-1sdAb部分が、ラクダ、キメラ、部分ヒト化、または完全ヒト化である、請求項1~3のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記単離抗PD-1構築物が、適宜リンカーを介してFc断片に融合した前記抗PD-1sdAb部分を含む重鎖のみ抗体(HCAb)である、請求項1~4のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
- (i)前記HCAbが、二量体である、および/または
(ii)前記Fc断片が、ヒトIgG1(hIgG1)Fc、エフェクターレス(不活性)hIgG1 Fc、hIgG4 Fc、もしくはhIgG4 Fc(S228P)である、および/または
(iii)前記リンカーが、配列番号367~376のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、
請求項5に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記HCAbが、配列番号331、357~360のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、請求項5または6に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記単離抗PD-1構築物が、第2のエピトープを特異的に認識する第2の抗体部分をさらに含む、請求項1~4のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記第2の抗体部分が、完全長抗体、Fab、Fab’、(Fab’)2、Fv、一本鎖Fv(scFv)、scFv-scFv、ミニボディ、ダイアボディ、またはsdAbである、請求項8に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記抗PD-1sdAb部分、及び前記第2の抗体部分が、リンカーによって適宜連結される、請求項8または9に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記リンカーが、配列番号367~376のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、請求項10に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記第2の抗体部分が、PD-1またはCTLA-4を特異的に認識する第2のsdAbである、請求項8~11のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記第2の抗体部分が、2本の重鎖及び2本の軽鎖からなる完全長抗体である、請求項8~11のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記重鎖のFc断片が、hIgG1Fc、エフェクターレス(不活性)hIgG1 Fc、hIgG4 Fc、またはhIgG4 Fc(S228P)である、請求項13に記載の単離抗PD-1構築物。
- 前記単離抗PD-1構築物が、
(i)前記抗PD-1sdAb部分のN末端が、前記完全長抗体の重鎖の少なくとも1本のC末端に融合される、
(ii)前記抗PD-1sdAb部分のC末端が、前記完全長抗体の重鎖の少なくとも1本のN末端に融合される、
(iii)前記抗PD-1sdAb部分のN末端が、前記完全長抗体の軽鎖の少なくとも1本のC末端に融合される、
(iv)前記抗PD-1sdAb部分のC末端が、前記完全長抗体の軽鎖の少なくとも1本のN末端に融合される、
(v)前記単離抗PD-1構築物が、4個の抗PD-1sdAb部分を含み、各抗PD-1sdAb部分の前記C末端が、前記完全長抗体の各鎖の前記N末端に融合される、および
(vi)前記単離抗PD-1構築物が、4個の抗PD-1sdAb部分を含み、前記4個の抗PD-1sdAb部分のうちの2個が互いに融合し、前記完全長抗体の各重鎖の前記N末端にさらに融合される
からなる群から選択される構成を含む、請求項13または14に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記完全長抗体が、
(1)TIGITを特異的に認識する(抗TIGIT完全長抗体)、
(2)LAG-3を特異的に認識する(抗LAG-3完全長抗体)、
(3)TIM-3を特異的に認識する(抗TIM-3完全長抗体)、
(4)CTLA-4を特異的に認識する(抗CTLA-4完全長抗体)、または
(5)PD-1を特異的に認識する(抗PD-1完全長抗体)、
請求項13~15のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗TIGIT完全長抗体が、
(i)配列番号377のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び、配列番号378のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3、ならびに/または
(ii)配列番号377のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号378のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項16に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗LAG-3完全長抗体が、
(i)配列番号379のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号380のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3、ならびに/または
(ii)配列番号379のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号380のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項16に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗TIM-3完全長抗体が、
(i)配列番号381のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号382のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3、ならびに/または
(ii)配列番号381のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号382のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項16に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗CTLA-4完全長抗体が、
(i)配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3、ならびに/または
(ii)配列番号383のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号384のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項16に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記抗PD-1完全長抗体が、
(i)配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖のHC-CDR1、HC-CDR2、及びHC-CDR3、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖のLC-CDR1、LC-CDR2、及びLC-CDR3、ならびに/または
(ii)配列番号385のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号386のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項16に記載の単離抗PD-1構築物。 - 前記単離抗PD-1構築物が、
(a)前記単離抗PD-1構築物が、N末端からC末端に4個のポリペプチド(i)VL-CL、(ii)VH-CH1-適宜ペプチドリンカー-第1の抗PD-1sdAb部分-CH2-CH3、(iii)VH-CH1-適宜ペプチドリンカー-第2の抗PD-1sdAb部分-CH2-CH3、および(iv)VL-CLを含み、ポリペプチド(i)のVL-CLおよびポリペプチド(ii)のVH-CH1が第2のエピトープを特異的に認識する第2の抗体部分を形成し、ポリペプチド(iv)のVL-CLおよびポリペプチド(iii)のVH-CH1が第3のエピトープを特異的に認識する第3の抗体部分を形成する、
(b)前記単離抗PD-1構築物が、N末端からC末端に2個のポリペプチド(i)第2のエピトープを特異的に認識する第1のscFv-適宜ペプチドリンカー-第1の抗PD-1sdAb部分-CH2-CH3および(ii)第3のエピトープを特異的に認識する第2のscFv-適宜ペプチドリンカー-第2の抗PD-1sdAb部分-CH2-CH3を含む、
(c)前記単離抗PD-1構築物が、N末端からC末端に4個のポリペプチド(i)VL-CL-適宜ペプチドリンカー-第1の抗PD-1sdAb部分-CL、(ii)VH-CH1-適宜ペプチドリンカー-第2の抗PD-1sdAb部分-CH1-CH2-CH3、(iii)VH-CH1-適宜ペプチドリンカー-第3の抗PD-1sdAb部分-CH1-CH2-CH3、および(iv)VL-CL-適宜ペプチドリンカー-第4の抗PD-1sdAb部分-CLを含み、ポリペプチド(i)のVL-CLおよびポリペプチド(ii)のVH-CH1が第2のエピトープを特異的に認識する第2の抗体部分を形成し、ポリペプチド(iv)のVL-CLおよびポリペプチド(iii)のVH-CH1が第3のエピトープを特異的に認識する第3の抗体部分を形成する、
(d)前記単離抗PD-1構築物が、N末端からC末端に4個のポリペプチド(i)第1の抗PD-1sdAb部分-CL、(ii)第2のエピトープを特異的に認識する第1のscFv-適宜ペプチドリンカー-第2の抗PD-1sdAb部分-CH1-CH2-CH3、(iii)第3のエピトープを特異的に認識する第2のscFv-適宜ペプチドリンカー-第3の抗PD-1sdAb部分-CH1-CH2-CH3および(iv)第4の抗PD-1sdAb部分-CLを含む、
からなる群から選択される構成を含む、請求項8~11のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物。 - 請求項1~22のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物、及び適宜、医薬的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。
- 個体においてPD-1関連疾患を治療するための医薬であって、請求項1~22のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物または請求項23に記載の医薬組成物を、前記PD-1関連疾患の治療に有効な量で含む、医薬。
- 前記PD-1関連疾患が、がん、病原性感染または免疫関連疾患である、請求項24に記載の医薬。
- (i)前記がんが、固形腫瘍である、または
(ii)前記病原性感染がウイルス感染である、または
(iii)前記免疫関連疾患がT細胞機能不全障害と関連する、
請求項25に記載の医薬。 - (i)前記固形腫瘍が、大腸がんである、または
(ii)前記T細胞機能不全障害が、T細胞アネルギー、サイトカイン分泌能力の低下、増殖能力の低下、細胞溶解活性実行能力の低下もしくはT細胞消耗によって特徴付けられる、
請求項26に記載の医薬。 - 請求項1~22のいずれか1項に記載の単離抗PD-1構築物をコードする、単離核酸。
- 請求項28に記載の単離核酸を含む、ベクター。
- 請求項28に記載の単離核酸、または請求項29に記載のベクターを含む、単離宿主細胞。
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