JP6877449B2

JP6877449B2 - ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン化合物を調製するための方法、及びそれらの中間体

Info

Publication number: JP6877449B2
Application number: JP2018540720A
Authority: JP
Inventors: ディン，ツァオジョン; スン，フェイ; フゥー，インフゥー; シュウ，イーロン; ジャオ，ルイ; ヤン，リン
Original assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2016-02-05
Filing date: 2017-02-04
Publication date: 2021-05-26
Anticipated expiration: 2037-02-04
Also published as: AR107549A1; KR102371500B1; EP3412673A1; WO2017133686A1; US20190040072A1; HUE053455T2; US20200239484A1; PT3412673T; PL3412673T3; UA124100C2; MX2018009502A; CN108602832A; HRP20210103T1; MY190551A; JP2019505531A; BR112018015879A2; BR112018015879B1; AU2017214134A1; CA3013520C; NZ744885A

Description

本発明は、医薬化学の分野に関し、そして、具体的にはピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン化合物を調製するためのプロセス及びその中間体に関する。

背景
Ｔｏｌｌ様受容体は、種々の免疫細胞により発現され、高度に保存された構造モチーフ：微生物病原体により発現される病原体関連分子パターン（Pathogen Associated Molecular Pattern）（ＰＡＭＰ）又は死細胞により放出される損傷関連分子パターン（Damage Associated Molecular Patterns）（ＤＡＭＰ）を認識する。ＰＡＭＰ又はＤＡＭＰは、Ｔｏｌｌ様受容体を刺激して、ＡＰ−１、ＮＦ−κＢ及びインターフェロン調節因子のような転写因子の活性化を誘導するシグナルカスケードを誘発する（パルス応答機能）。これが、インターフェロン類、炎症促進性サイトカイン類及びエフェクターサイトカイン類の産生を含む種々の細胞応答をもたらし、それにより、免疫反応が生じる。これまでに、１３種類のＴｏｌｌ様受容体が哺乳動物において発見されている。Ｔｏｌｌ様受容体１、２、４、５及び６は、主として細胞表面上で発現され、一方、Ｔｏｌｌ様受容体３、７、８及び９は、エンドソームにおいて発現される。異なるＴｏｌｌ様受容体は、異なる病原体由来のリガンドを認識する。Ｔｏｌｌ様受容体７（ＴＬＲ７）は、主として形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）により発現され、リガンドを介して認識されて、インターフェロンα（ＩＦＮ−α）の分泌を誘導する。Ｔｏｌｌ様受容体７（ＴＬＲ７）及びＴｏｌｌ様受容体８（ＴＬＲ８）は、高度に相同性があり、よって、ＴＬＲ７のリガンドは、多くの場合ＴＬＲ８のリガンドでもある。ＴＬＲ８刺激は、主として腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）のようなサイトカイン類及びケモアトラクタントの産生を誘導する。インターフェロンαは、慢性Ｂ型肝炎又はＣ型肝炎を処置するための医薬のうちの１つであり、一方、ＴＮＦ−αは、炎症促進性サイトカインであり、その過剰分泌は重度の副作用をもたらす。イミキモド（imiquimod）（非特許文献１）、レシキモド（resiquimod）（非特許文献２）、ＧＳ−９６２０（非特許文献３）のような、幾つかのＴＬＲ７アゴニストが報告されている。それにもかかわらず、より良好な選択性、活性及び安全性を有する新規なＴＬＲ７アゴニストを手にすることが望ましい。

British Journal of Dermatology, 2003; 149 (Suppl. 66): 5-8 Antiviral Research, 64, (2004), 79-83 Gastroenterology, (2013), 144(7), 1508-1517

中国特許出願第２０１４１０４０５１３６．０号明細書（その全体が参照により本明細書中に援用される）は、ＴＬＲ７アゴニストとして一連のピロロピリミジン化合物を開示している。

要約
ある態様において、式Ｉ：

で示される化合物を調製するためのプロセスが提供され、該プロセスは、式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること：

［式中、
Ｒ_１及びＲ_２は、Ｃ_１−４アルキルからなる群より独立して選択されるか、又は
Ｒ_１及びＲ_２は、これらに結合しているＮ原子と一緒になって、４〜８員ヘテロシクロアルキルを形成する（ここで、ヘテロシクロアルキルは、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル及びＣ_１−４アルコキシからなる群より独立して選択される１個以上の置換基で場合により置換されている）］
を含む。

詳細な説明
定義
別段の記載がない限り、本明細書中に使用される用語及び語句は、以下の意味を有する。具体的な用語又は語句が明確に定義されていない場合、それを不明確又は定義されていないと考慮すべきではない。それは、一般的な意味で理解されるべきである。本明細書中に使用される商品名は、対応する製品又は活性成分を指す。

そうではないと具体的に定義されない限り、割合（百分率を含む）又は部分は、本明細書中の重量に基づいて計算される。

可変数値と共に使用される場合、「およそ」又は「約」という用語は、通常、変数の値、及び実験誤差内（例えば、平均の９５％信頼区間内）若しくは具体的な値の±１０％内の、又はそれより広い範囲の変数の全ての値を指す。

「含む（comprise）」又はその同義語である「含有する（contain）」、「含有する（include）」、「有する」などという表現は、非限定的（open-ended）なものであり、記載のない任意の要素、工程又は成分を除外するものではない。「〜からなる（consist of）」という表現は、記載のない任意の要素、工程又は成分を除外する。「実質的に〜からなる」という表現は、クレームされる主題の基本的かつ新規な特徴に実質的に影響を与えない、オプションの要素、工程又は構成要素と一緒になった、所与の範囲内の具体的な要素、工程又は成分を指す。当然のことながら、「含む」という表現は、「実質的に〜からなる」及び「〜からなる」という表現を包含する。

「オプションの」又は「場合により」という用語は、その後に記載される事象が起こってもよいし、起こらなくてもよいことを意味する。この用語は、事象が起こる場合と起こらない場合を包含する。

本明細書中で使用されるＣ_ｍ−ｎという表現は、それがｍ〜ｎ個の炭素原子を有することを意味する。例えば、「Ｃ_１−４アルキル」は、該アルキルが１〜４個の炭素原子を有することを意味する。

本明細書中の数値範囲は、その中の各整数、及び整数によって形成される部分範囲のことを指す。例えば、「Ｃ_１−４」は、該基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子又は４個の炭素原子を有し得ることを意味する。したがって、「Ｃ_１−４アルキル」は、「Ｃ_２−３アルキル」、「Ｃ_１−３アルキル」、「Ｃ_２−４アルキル」、並びにＣ_１アルキル、Ｃ_２アルキル、Ｃ_３アルキル、Ｃ_４アルキルなどを包含する。

「置換されている」という用語は、特定の原子の原子価が正常であり、かつ置換後の化合物が安定である限り、所与の原子上の１個以上の水素原子が置換基により置き換えられていることを意味する。

別段の記載がない限り、「ヘテロ」という用語は、ヘテロ原子又はヘテロ基（即ち、ヘテロ原子を含有する基）、即ち、炭素原子及び水素原子以外の原子、又はそのような原子を含有する基を意味する。好ましくは、ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、Ｓなどからなる群より独立して選択される。２個以上のヘテロ原子が関与する実施態様において、２個以上のヘテロ原子が同じであってもよいし、２個以上のヘテロ原子の一部若しくは全部が異なっていてもよい。

「アルキル」という用語は、単結合を介して分子の残りに結合している、炭素原子及び水素原子からなる直鎖又は分岐鎖の飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。Ｃ_１−４アルキルの非限定的な例は、限定されるものではないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチルなどを含む。

「Ｃ_１−４アルコキシ」という用語は、「−Ｏ−」を介して分子の残りに結合している「Ｃ_１−４アルキル」を指し、ここで、「Ｃ_１−４アルキル」は上記に定義されるとおりである。

「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩを指す。

「ヒドロキシル」という用語は、−ＯＨ基を指す。

「Ｒ_１及びＲ_２は、これらに結合しているＮ原子と一緒になって」という表現中のＮ原子は、式中の下記：

の部分におけるＮ原子を指す。

「ヘテロシクロアルキル」という用語は、環原子の一部がＮ、Ｏ、Ｓからなる群より選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子がＣである、飽和の単環又は多環系基を指す。したがって、「４〜８員ヘテロシクロアルキル」という用語は、１個以上の環原子がＮ、Ｏ、Ｓからなる群より選択されるヘテロ原子である、系中に４〜８個の環原子を含むヘテロシクロアルキルを指す。「４〜８員ヘテロシクロアルキル」は、「４〜７員」、「４〜６員」、「５〜７員」ヘテロシクロアルキル（例えば、限定されるものではないが、４、５、６、７、８員ヘテロシクロアルキル）を包含する。４員ヘテロシクロアルキルの例は、限定されるものではないが、アゼチジニルを含み；５員ヘテロシクロアルキルの例は、限定されるものではないが、ピロリジニル、イソオキサゾリジニル、オキサゾリジニル、イソチアゾリジニル、チアゾリジニル、イミダゾリジニルを含み；６員ヘテロシクロアルキルの例は、限定されるものではないが、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニルを含み；そして、７員ヘテロシクロアルキルの例は、限定されるものではないが、アザシクロヘプタニル、オキサアザビシクロ［２．２．１］ヘプチルなどを含む。

「１個以上」という用語は、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、又はそれ以上を指す。

本明細書中において、以下の略語を使用する：ＳＥＭ：２−（トリメチルシリル）エトキシメチル；ＳＥＭ−Ｃｌ：２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド；ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ｎ−ＢｕＯＨ：ｎ−ブタノール。

式Ｉで示される化合物を調製するためのプロセス
ある態様において、式Ｉで示される化合物を調製するためのプロセスが提供され、該プロセスは、式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること：

ある実施態様において、本発明による式Ｉで示される化合物を調製するためのプロセスは、以下の工程：
（ａ）塩基の存在下、式ＩＩで示される化合物を式ＩＩＩで示される化合物と反応させて、式ＩＶで示される化合物を得ること、

（ｂ）還元剤の存在下、式ＩＶで示される化合物を式Ｖで示される化合物と反応させて、式ＶＩで示される化合物を得ること、

（ｃ）式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること：

ある実施態様において、塩基は、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、リン酸カリウム、重炭酸カリウム、炭酸セシウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化バリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムｔ−ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、及びそれらの任意の組合せ（好ましくは、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、及びそれらの任意の組合せ、最も好ましくは、炭酸カリウム）からなる群より選択される。

ある実施態様において、工程（ａ）は、溶媒中で行われる。好ましい実施態様において、溶媒は、イソプロパノール、又はイソプロパノールと水との混合物である。

ある実施態様において、式ＩＩで示される化合物対塩基のモル比は、１．０：１．０〜３．０、好ましくは１．０：１．０〜１．５、より好ましくは１．０：１．２である。

ある実施態様において、式ＩＩで示される化合物対式ＩＩＩで示される化合物のモル比は、１．０：１．０〜３．０、好ましくは１．０：１．０〜１．５、より好ましくは１．０：１．２〜１．５である。

ある実施態様において、工程（ｂ）は、酸の存在下で行われる。別の実施態様において、酸は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、コハク酸、サリチル酸、マレイン酸、トリフルオロ酢酸、及びそれらの任意の組合せ（好ましくは、酢酸）からなる群より選択される。

ある実施態様において、工程（ｂ）で、式ＩＶで示される化合物対酸のモル比は、１．０：１．０〜３．０、好ましくは１．０：１．２〜２．０、より好ましくは１．０：１．５である。

ある実施態様において、工程（ｂ）は、溶媒中で行われる。好ましい実施態様において、溶媒は、イソプロパノール、又はイソプロパノールと水との混合物である。

ある実施態様において、還元剤は、ＢＨ_３、ＮａＢＨ_４、ＮａＢＨ_３ＣＮ、ＮａＢＨ（ＡｃＯ）_３、及びそれらの任意の組合せ（好ましくは、ＮａＢＨ（ＡｃＯ）_３）からなる群より選択される。

ある実施態様において、式ＩＶで示される化合物対還元剤のモル比は、１．０：１．０〜３．０、好ましくは１．０：１．２〜２．０、より好ましくは１．０：１．５である。

好ましい実施態様において、脱ヒドロキシル化は、トリエチルシラン及びトリフルオロ酢酸の存在下で行われる。

別の好ましい実施態様において、式ＶＩで示される化合物対トリエチルシランのモル比は、１：１〜１０、好ましくは１：２〜８、より好ましくは１：５である。

別の好ましい実施態様において、式ＶＩで示される化合物対トリフルオロ酢酸のモル比は、１：２〜２０、好ましくは１：５〜１５、より好ましくは１：１０〜１２である。

ある実施態様において、工程（ｃ）は、溶媒中で行われる。好ましい実施態様において、溶媒は、ジクロロメタンである。

別の実施態様において、本発明による式Ｉで示される化合物を調製するためのプロセスは、以下の工程：
（ａ’）塩基の存在下、式ＩＩで示される化合物を式ＩＩＩ’で示される化合物と反応させて、式ＶＩで示される化合物を得ること、

（ｂ’）式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること：

ある実施態様において、工程（ａ’）は、溶媒中で行われる。好ましい実施態様において、溶媒は、メタノール、又はメタノールと水との混合物である。

ある実施態様において、式ＩＩで示される化合物対式ＩＩＩ’で示される化合物のモル比は、１．０：１．０〜３．０、好ましくは１．０：１．０〜１．５、より好ましくは１．０：１．２〜１．５である。

ある実施態様において、工程（ｂ’）は、溶媒中で行われる。好ましい実施態様において、溶媒は、ジクロロメタンである。

ある実施態様において、式Ｖで示される化合物は、下記：

から選択される。

好ましい実施態様において、式Ｉで示される化合物は、下記：

で番号付けされた化合物から選択される。

中間体化合物及び調製
中間体として、式ＩＩで示される化合物及び式ＶＩで示される化合物：

［式中、
Ｒ_１及びＲ_２は、Ｃ_１−４アルキルからなる群より独立して選択されるか、又は
Ｒ_１及びＲ_２は、これらに結合しているＮ原子と一緒になって、４〜８員ヘテロシクロアルキルを形成する（ここで、ヘテロシクロアルキルは、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル及びＣ_１−４アルコキシからなる群より独立して選択される１個以上の置換基で場合により置換されている）］
が提供される。

ある実施態様において、式ＶＩで示される化合物は、下記：

から選択される。

本発明による式ＩＩで示される化合物は、以下のプロセス：

を通して調製され得、ここで、
式ＶＩＩで示される化合物をＳＥＭ−Ｃｌと反応させて、式ＶＩＩＩで示される化合物（好ましくは、ＤＭＦ中）を得；
式ＶＩＩＩで示される化合物をアンモニア水と反応させて、式ＩＸで示される化合物（好ましくは、イソプロパノール中）を得；
式ＩＸで示される化合物をナトリウムｎ−ブトキシドとの置換反応に付して、式Ｘで示される化合物（好ましくは、ｎ−ＢｕＯＨ中）を形成し；そして
ＴＦＡの作用の下、式Ｘで示される化合物からＳＥＭを脱離して、式ＩＩで示される化合物（好ましくは、ＴＦＡ中）を得る。

有益な効果
本発明による調製プロセスは、穏やかな反応条件を有しており、例えば、この反応は、大気圧（例えば、約１気圧）下で行ってもよく、そして、反応温度についての要求は、通常である。本発明による調製プロセスはまた、高いコスト及び高いリスクを有する試薬の使用を回避することができ、工業的生産に特に好適である。

本発明をよりよく理解するために、以下の実施例を参照して、更なる説明が以下に与えられよう。しかし、具体例は、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。

調製例１
式Ｉで示される化合物の調製例：
２−ブトキシ−７−（４−（ピロリジン−１−イルメチル）ベンジル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（１番の式Ｉで示される化合物）の調製

４−（（４−アミノ−２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−ヒドロキシメチル）ベンズアルデヒド（式ＩＶで示される化合物）の調製

３口フラスコに、テレフタルアルデヒド（７９０．６４mg、５．８２mmol）及びイソプロパノール（１０mL）を添加し、続いて、２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（１．００ｇ、４．８５mmol）を撹拌しながら添加した。系を０℃まで冷却した後、１０分間撹拌を行った。精製水（１０mL）及び炭酸カリウム（８０４．１７mg、５．８２mmol）を添加して、ＬＣＭＳによるモニターをしながら、原料が枯渇するまで２５℃で１６時間反応を行った。反応完了後、固体が析出した。濾過を行い、固体を精製水（２０ml）及び（酢酸エチル／ｎ−ヘプタン＝１／２０）（３０ml）で連続的にスラリー化した。濾過を行い、乾燥を行って、黄色固体として標題化合物（１．５０ｇ、４．４１mmol、収率９０．９％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, メタノール-d₄) δ 9.94 (s, 1 H), 7.86 (d, J = 8.16 Hz, 2 H), 7.72 (d, J = 8.16 Hz, 2 H), 7.12 - 7.17 (m, 1 H), 6.19 (s, 1 H), 4.28 (t, J=6.53 Hz, 2 H), 1.68 - 1.77 (m, 2 H), 1.44 - 1.54 (m, 2 H), 0.97 (t, J=7.34 Hz, 3 H).

（４−アミノ−２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）（４−（ピロリジン−１−イルメチル）フェニル）メタノール（式ＶＩ−１で示される化合物）の調製

３０Ｌクレーブに、上で得られた式ＩＶで示される化合物である４−（（４−アミノ−２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）−ヒドロキシメチル）ベンズアルデヒド（４５０．０ｇ、１．３２mol）及びイソプロパノール（４．５Ｌ）を添加した。５分間撹拌した後、氷酢酸（１１９．０ｇ、１．９８mol）を添加した。系が０〜１０℃まで冷却されるまで、系を撹拌した。ピロリジン（１１２．４ｇ、１．５８mol）を滴下し、その間、系の温度を１０℃未満に保持した。添加後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ（ＡｃＯ）_３）（４２０．０ｇ、１．９８mol）を何回かに分けて添加した。液体クロマトグラフィーによるモニターをしながら、原料が枯渇するまで１０〜２０℃で３時間反応を行った。反応完了後、精製水（５Ｌ）を添加し、溶液の温度を約−１０℃まで下げた。１５％アンモニア水（１２Ｌ）を添加し、その間、溶液の温度を０℃未満に保持した。撹拌下で固体が析出した。濾過を行い、固体を水（２Ｌ）及び酢酸エチル（２Ｌ×２）で連続的にスラリー化した。濾過を行い、４０℃、減圧下で１２時間乾燥を行い、黄色固体として標題化合物（４６５．０ｇ、１．１８mol、収率８９．４％、水分０．９％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, メタノール-d₄) δ 7.46 (d, J=7.91 Hz, 1 H), 7.29 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.09 (s, 1 H), 6.12 (s, 1 H), 4.29 (t, J = 6.53 Hz, 2 H), 3.60 (s, 2 H), 2.52 (br. s., 4 H), 1.66 - 1.83 (m, 6 H), 1.49 (d, J = 7.53 Hz, 2 H), 0.98 (t, J = 7.40 Hz, 3 H).

式ＶＩ−１で示される化合物はまた、以下のプロセスにより調製することができる：

２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（３．００ｇ、１４．５５mmol）、４−（ピロリジン−１−イルメチル）ベンズアルデヒド（４．１３ｇ、２１．８２mmol）、メタノール（３０mL）及び水（３０mL）の混合物に、撹拌しながら炭酸カリウム（２．４１ｇ、１７．４６mmol）を添加した。次に、薄層クロマトグラフィーによるモニターをしながら、２５℃で１２時間撹拌を行い、原料を枯渇させた。反応完了後に固体が析出した。水（３０mL）を添加して、固体を濾過し、乾燥して、白色固体として標題化合物（３．５０ｇ、８．８５mmol、収率：６０．８２％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, メタノール-d₄) δ 7.46 (d, J=7.91 Hz, 1 H), 7.29 (d, J = 8.03 Hz, 1 H), 7.09 (s, 1 H), 6.12 (s, 1 H), 4.29 (t, J = 6.53 Hz, 2 H), 3.60 (s, 2 H), 2.52 (br. s., 4 H), 1.66 - 1.83 (m, 6 H), 1.49 (d, J = 7.53 Hz, 2 H), 0.98 (t, J = 7.40 Hz, 3 H).

２−ブトキシ−７−（４−（ピロリジン−１−イルメチル）ベンジル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（１番の式Ｉで示される化合物）の調製

２０Ｌクレーブに、上で得られた式ＶＩ−１で示される化合物である（４−アミノ−２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−７−イル）（４−（ピロリジン−１−イルメチル）フェニル）メタノール（４４０．０ｇ、１．１１mol）及びジクロロメタン（７．０Ｌ）を添加した。系が−１５℃未満まで冷却されるまで、系を撹拌した。トリエチルシラン（８８０mL、５．５５mol）を滴下し、続いて、トリフルオロ酢酸（８８０mL、１１．８４mol）を滴下し、その間、系の温度を−１０℃未満に保持した。添加後、液体クロマトグラフィーによるモニターをしながら、０℃で２時間、原料点（raw material point）が消失するまで反応を行った。反応完了後、反応液を濃縮乾固し、酢酸エチル（２．２Ｌ）を添加し、撹拌しながら系を０℃未満まで冷却した。飽和炭酸ナトリウム溶液を添加してｐＨを９〜１０に調整し、その間、温度を１０℃未満に保持した。濾過を行い、得られた濾滓（filter cake）を水（２．２Ｌ）でスラリー化した。減圧下で乾燥を行い、白色固体として２−ブトキシ−７−（４−（ピロリジン−１−イルメチル）ベンジル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（標題化合物のトリフルオロ酢酸塩）（５５０ｇ）を得た。得られた白色固体をアルカリ条件下で脱塩して、標題化合物を得たが、これは、例えば、従来のプロセスにより実施してもよい。
¹H NMR (400 MHz, メタノール-d₄) δ 7.27 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.04 (s, 1H), 4.32 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.99 (s, 2H), 3.60 (s, 2H), 2.55 - 2.52 (m, 4H), 1.85 - 1.71 (m, 6H), 1.55-1.48 (m, 2H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

調製例２：式ＩＩで示される化合物２，４−ジクロロ−５−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン

ＤＭＦ（２０．００Ｌ）中に２，４−ジクロロ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン（４．００kg、２１．２８mol）を溶解し、ＤＩＰＥＡ（２．５８kg、２０．００mol）を室温（２５℃）で何回かに分けて添加し、続いて、３０分間撹拌を行った。反応液を氷浴で０℃まで冷却した。次に、ＳＥＭ−Ｃｌ（４．００kg、２４．００mol）を５時間かけて１〜２滴／秒の速度でゆっくり滴下した。添加後、撹拌しながら０℃で４時間反応を行い、反応が完了するまで、反応をＨＰＬＣによりモニターした。反応液をクエンチして、水（７０Ｌ）で希釈し、酢酸エチル（１５Ｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を１M 塩酸水溶液（５Ｌ×２）及び飽和したブライン（７Ｌ×２）で連続して洗浄した。減圧下、蒸留により溶媒を留去して、標題化合物（６．４０kg、２０．１１mol、収率９４．５０％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.24 - 8.35 (m, 1 H),6.70 - 6.85 (m, 1 H),5.77 (s, 2 H),3.45 - 3.57 (m, 2 H),0.74 - 0.86 (m, 2 H),0.00 (s, 9 H).

２−クロロ−５−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン

１０Ｌオートクレーブ内で、イソプロパノール（１．６０Ｌ）中に２，４−ジクロロ−５−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン（１．６０kg、５．０３mol）を溶解した。アンモニア水（４Ｌ）を室温（２５℃）で一度に添加した。反応混合物を９５℃で７時間撹拌し、反応が完了するまでＨＰＬＣによりモニターした。反応液を室温まで放冷させ、ブフナー漏斗を通して濾過して、暗褐色固体を得た。固体を酢酸エチル／ｎ−ヘプタン（１／１、５Ｌ×２）及び酢酸エチル（４Ｌ）で連続的にスラリー化して、褐色固体として標題化合物（１．２５kg、４．１８mol、収率８３．１％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.61 - 7.77 (m, 1 H), 6.97 - 7.19 (m, 2 H),6.28 - 6.38 (m, 1 H),5.54 - 5.67 (m, 2 H),3.43 - 3.53 (m, 2 H),0.76 - 0.91 (m, 2 H),0.07 (s, 9 H).

２−ブトキシ−５−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン

ｎ−ＢｕＯＨ（１７．０Ｌ）に、窒素雰囲気下で金属ナトリウム（５２５．０５ｇ、２２．８４mol）を何回かに分けてゆっくりと添加した。添加後、系を６０℃まで加熱し、金属ナトリウムが完全に溶解するまで、該温度で撹拌し続けた。系を２５℃まで冷却して、２−クロロ−５−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（１．９５kg、６．５３mol）を何回かに分けて添加した。撹拌しながら均質混合した後、反応物を９０℃で８時間撹拌し、反応が完了するまでＨＰＬＣによりモニターした。反応液を２５℃まで放冷させ、飽和塩化アンモニウム水溶液（３０Ｌ）にゆっくりと注ぎ入れ、酢酸エチル（１５Ｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を飽和したブライン（２０Ｌ×２）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。濾過後、減圧下、蒸留により溶媒を留去し、残渣をｎ−ヘプタン（４Ｌ）中でスラリー化した。濾過を行い、固体を得た。次に、固体を酢酸エチル（５Ｌ）でスラリー化して、黄白色固体として標題化合物（１．５３kg、４．５５mol、６９．７％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.49 - 7.54 (m, 1 H),6.54 - 6.62 (m, 2 H),6.15 - 6.20 (m, 1 H),5.54 (s, 2 H),4.10 - 4.22 (m, 2 H),3.42 - 3.55 (m, 2 H),1.58 - 1.73 (m, 2 H),1.35 - 1.47 (m, 2 H),0.90 - 0.96 (m, 3 H),0.83 - 0.89 (m, 2 H),0.05 (s, 9 H).

２−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン

ＴＦＡ（５．５０Ｌ）中に２−ブトキシ−５−（（２−（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）−５Ｈ−ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−アミン（１．１０kg、３．２７mol）を溶解した。反応液を２５℃で１６時間撹拌し、反応が完了するまでＨＰＬＣによりモニターした。減圧下、蒸留によりＴＦＡを留去した。残渣をメタノール（１．２Ｌ）及び氷水（１．２Ｌ）中に溶解し、一定撹拌下、濃アンモニア水を用いてｐＨを１２に調整し、そして、２時間撹拌を行った。沈殿物を溶液から連続的に析出させた。濾過後、濾滓は白色固体であり、これを１５％アンモニア水（１．２Ｌ×３）及び酢酸エチル（４Ｌ）で連続的にスラリー化して、白色固体として標題化合物（５５０．００ｇ、２．６７mol、８１．７％）を得た。
¹H NMR (400 MHz, メタノール-d₄) δ 7.37 (d, J=2.89 Hz, 1 H),6.29 (d, J=3.01 Hz, 1 H),4.27 (t, J=6.53 Hz, 2 H),1.75 (d, J=7.91 Hz, 2 H),1.44 - 1.61 (m, 2 H),1.00 (t, J=7.40 Hz, 3 H).

医薬活性の実施例
効能実施例１：Ｔｏｌｌ様受容体７及びＴｏｌｌ様受容体８のインビトロ受容体結合活性スクリーニング

試薬：
ＨＥＫ−ＢｌｕｅｈＴＬＲ７細胞及びＨＥＫ−ＢｌｕｅｈＴＬＲ８細胞（InvivoGenから入手可能）
ＤＭＥＭ培地
熱非働化ウシ胎児血清
抗マイコプラズマ試薬Ｎｏｒｍｏｃｉｎ（商標）
ブレオマイシン
ブラストサイジン

使用されたＧＳ−９６２０及びＲ８４８の構造は以下のとおりであるが、ＧＳ−９６２０の調製は、米国特許出願公開第２０１０／０１４３３０１号明細書に開示されたプロセスを参照することができ；Ｒ８４８は、ＡＢＧＥＮＴ（ＩＭＧ−２２０８、仕様：０．５mg）から市販されていた。

スキーム：
１．９６ウェル化合物プレートの調製：
１０mmol/Lの濃度で開始して、液体ワークステーションＰＯＤを用いて化合物をＤＭＳＯで３倍に勾配希釈し、１０点希釈した（第２カラム〜第１１カラム、各点はデュプリケイト）。第１２カラムでは、５mg/mL 陽性化合物Ｒ８４８（１μL）を陽性対照として添加した；そして、第１カラムでは、ＤＭＳＯ（１μL）を陰性対照として添加した。各ウェルは、ＤＭＳＯ（１μL）を含有していた。
２．培養フラスコ中の細胞を収集し、細胞密度を２５０，０００細胞／mLに希釈した。
３．調製した化合物プレートに細胞懸濁液（５０，０００細胞／ウェル）（２００μL）を添加し、各ウェル中のＤＭＳＯの最終濃度を０．５％とした。
４．細胞及び化合物を含有する培養プレートを、ＣＯ_２インキュベーター中、３７℃、５％ＣＯ_２で２４時間インキュベートした。
５．２４時間のインキュベーション後、上清（２０μL）を各ウェルから９６ウェル透明アッセイプレートへと取り出した。アッセイプレートの各ウェルにＱｕａｎｔｉ−Ｂｌｕｅ試薬（１８０μL）を添加して、プレートをインキュベーター中、３７℃、５％ＣＯ_２で１時間インキュベートした。
６．１時間後、ＭｉｃｒｏｐｌａｔｅＲｅａｄｅｒＯＤ６５０を用いて上清（２０μL）中のアルカリホスファターゼの含量を測定した。
７．Ｐｒｉｓｍソフトウェアを用いて各化合物のＥＣ_５０を得た。
結果を表１に示した：

化合物１及び対照試料のＴｏｌｌ様受容体７アゴニストであるＧＳ−９６２０の結果を表２に示した。

本発明による化合物は、対照（Ｔｏｌｌ様受容体７アゴニストＧＳ−９６２０）よりも高いＴｏｌｌ様受容体７に対するインビトロ受容体結合活性、及び対照（Ｔｏｌｌ様受容体７アゴニストＧＳ−９６２０）よりも低いＴｏｌｌ様受容体８に対するインビトロ受容体結合活性を示した。本発明の化合物は、様々な受容体に関して選択性の明白な差を有しており、その効果は先行技術より優れている。

Claims

式Ｉで示される化合物を調製するためのプロセスであって、式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること

［式中、
Ｒ_１及びＲ_２は、Ｃ_１−４アルキルからなる群より独立して選択されるか、又は
Ｒ_１及びＲ_２は、これらに結合しているＮ原子と一緒になって、４〜８員ヘテロシクロアルキルを形成する（ここで、ヘテロシクロアルキルは、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル及びＣ_１−４アルコキシからなる群より独立して選択される１個以上の置換基で場合により置換されている）］
を含む、プロセス。
請求項１に記載のプロセスであって、以下の工程：
（ａ）塩基の存在下、式ＩＩで示される化合物を式ＩＩＩで示される化合物と反応させて、式ＩＶで示される化合物を得ること、

（ｂ）還元剤の存在下、式ＩＶで示される化合物を式Ｖで示される化合物と反応させて、式ＶＩで示される化合物を得ること、

（ｃ）式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること、

を含む、プロセス。
請求項２に記載のプロセスであって、工程（ａ）における塩基が、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、リン酸カリウム、重炭酸カリウム、炭酸セシウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化バリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムｔ−ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、及びそれらの任意の組合せからなる群より選択される、プロセス。
請求項３に記載のプロセスであって、工程（ａ）における塩基が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、及びそれらの任意の組合せからなる群より選択される、プロセス。
請求項４に記載のプロセスであって、工程（ａ）における塩基が炭酸カリウムである、プロセス。
請求項２〜５のいずれか一項に記載のプロセスであって、工程（ｂ）が酸の存在下で行われる、プロセス。
請求項６に記載のプロセスであって、酸が、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、クエン酸、フマル酸、リンゴ酸、コハク酸、サリチル酸、マレイン酸、トリフルオロ酢酸、及びそれらの任意の組合せからなる群より選択される、プロセス。
請求項７に記載のプロセスであって、酸が酢酸である、プロセス。
請求項２〜８のいずれか一項に記載のプロセスであって、工程（ｂ）における還元剤が、ＢＨ_３、ＮａＢＨ_４、ＮａＢＨ_３ＣＮ、ＮａＢＨ（ＡｃＯ）_３、及びそれらの任意の組合せからなる群より選択される、プロセス。
請求項９に記載のプロセスであって、工程（ｂ）における還元剤がＮａＢＨ（ＡｃＯ） _３である、プロセス。
請求項２〜１０のいずれか一項に記載のプロセスであって、式Ｖで示される化合物が、下記：

から選択される、プロセス。
請求項１１に記載のプロセスであって、式Ｖで示される化合物が、下記：

である、プロセス。
請求項１に記載のプロセスであって、以下の工程：
（ａ’）塩基の存在下、式ＩＩで示される化合物を式ＩＩＩ’で示される化合物と反応させて、式ＶＩで示される化合物を得ること、

（ｂ’）式ＶＩで示される化合物を脱ヒドロキシル化して、式Ｉで示される化合物を得ること、

を含む、プロセス。
請求項１３に記載のプロセスであって、工程（ａ’）における塩基が、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、リン酸カリウム、重炭酸カリウム、炭酸セシウム、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化バリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウムｔ−ブトキシド、カリウムｔ−ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、及びそれらの任意の組合せからなる群より選択される、プロセス。
請求項１４に記載のプロセスであって、工程（ａ’）における塩基が、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、及びそれらの任意の組合せからなる群より選択される、プロセス。
請求項１５に記載のプロセスであって、工程（ａ’）における塩基が炭酸カリウムである、プロセス。
脱ヒドロキシル化が、トリエチルシラン及びトリフルオロ酢酸の存在下で行われる、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のプロセス。
式ＶＩで示される化合物対トリエチルシランのモル比が１：１〜１０であり；
式ＶＩで示される化合物対トリフルオロ酢酸のモル比が１：２〜２０である、請求項１７に記載のプロセス。
式ＶＩで示される化合物対トリエチルシランのモル比が１：２〜８であり；
式ＶＩで示される化合物対トリフルオロ酢酸のモル比が１：５〜１５である、請求項１８に記載のプロセス。
式ＶＩで示される化合物対トリエチルシランのモル比が１：５であり；
式ＶＩで示される化合物対トリフルオロ酢酸のモル比が１：１０〜１２である、請求項１９に記載のプロセス。
式Ｉで示される化合物が、下記：

から選択される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載のプロセス。
式ＶＩ：

［式中、
Ｒ_１及びＲ_２は、Ｃ_１−４アルキルからなる群より独立して選択されるか、又は
Ｒ_１及びＲ_２は、これらに結合しているＮ原子と一緒になって、４〜８員ヘテロシクロアルキルを形成する（ここで、ヘテロシクロアルキルは、ヒドロキシル、ハロゲン、Ｃ_１−４アルキル及びＣ_１−４アルコキシから独立して選択される１個以上の置換基で場合により置換されている）］
で示される化合物。
下記：

から選択される、請求項２２に記載の式ＶＩで示される化合物。