JP6469081B2 - 安定化された可溶性融合前rsvfポリペプチド - Google Patents
安定化された可溶性融合前rsvfポリペプチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP6469081B2 JP6469081B2 JP2016509467A JP2016509467A JP6469081B2 JP 6469081 B2 JP6469081 B2 JP 6469081B2 JP 2016509467 A JP2016509467 A JP 2016509467A JP 2016509467 A JP2016509467 A JP 2016509467A JP 6469081 B2 JP6469081 B2 JP 6469081B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mutation
- amino acid
- rsv
- acid residue
- fusion
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000004927 fusion Effects 0.000 title claims description 251
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 211
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 201
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims description 200
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 319
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 claims description 309
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 216
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 claims description 92
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 58
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 58
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 56
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 56
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 39
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 38
- 238000005829 trimerization reaction Methods 0.000 claims description 38
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 34
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 29
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 26
- 239000013638 trimer Substances 0.000 claims description 21
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 20
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 17
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 16
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 14
- 206010061603 Respiratory syncytial virus infection Diseases 0.000 claims description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 108010058860 P.polypeptide Proteins 0.000 claims 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 57
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 57
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 57
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 52
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 45
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 43
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 42
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 38
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 33
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 18
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 17
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 15
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 14
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 12
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 10
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 10
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 9
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 8
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 8
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 8
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 7
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 description 6
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 5
- 101100107610 Arabidopsis thaliana ABCF4 gene Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 101100068078 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) GCN4 gene Proteins 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003331 infrared imaging Methods 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 2
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102400001093 PAK-2p27 Human genes 0.000 description 2
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 2
- 241000144282 Sigmodon Species 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000003097 anti-respiratory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 238000012575 bio-layer interferometry Methods 0.000 description 2
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 230000008642 heat stress Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 2
- 229960001521 motavizumab Drugs 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 102200094096 rs28941785 Human genes 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 241000710929 Alphavirus Species 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 206010006448 Bronchiolitis Diseases 0.000 description 1
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150029010 Edc3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101710160621 Fusion glycoprotein F0 Proteins 0.000 description 1
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010053070 Glutathione Disulfide Proteins 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000746373 Homo sapiens Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 241000711920 Human orthopneumovirus Species 0.000 description 1
- 108700002232 Immediate-Early Genes Proteins 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000055008 Matrilin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010072582 Matrilin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000711504 Paramyxoviridae Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000711902 Pneumovirus Species 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000724205 Rice stripe tenuivirus Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000144290 Sigmodon hispidus Species 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NTGGOTYRTOXKMQ-UHFFFAOYSA-K aluminum;potassium;phosphate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O NTGGOTYRTOXKMQ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 229940121357 antivirals Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000006664 bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 210000005220 cytoplasmic tail Anatomy 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000005860 defense response to virus Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000000368 destabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 238000003366 endpoint assay Methods 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012537 formulation buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N glutathione disulfide Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CSSC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O YPZRWBKMTBYPTK-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000030500 lower respiratory tract disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 230000034217 membrane fusion Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000030788 protein refolding Effects 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 229940036185 synagis Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 239000000277 virosome Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
- C07K14/08—RNA viruses
- C07K14/115—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
- C07K14/135—Respiratory syncytial virus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
- C07K2319/73—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing coiled-coiled motif (leucine zippers)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
- C12N2760/18522—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
- C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(a)位置46のアミノ酸残基の突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基の突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基の突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基の突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基の突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基の突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基の突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基の突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基の突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基の突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基の突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基の突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基の突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基の突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基の突然変異
からなる群から選択される、1つまたは複数のさらなる突然変異(野生型のRSV Fタンパク質に対して)を含む。
(a)位置46のアミノ酸残基SのGへの突然変異(S46G);
(b)位置77のアミノ酸残基KのEへの突然変異(K77E);
(c)位置80のアミノ酸残基KのEへの突然変異(K80E);
(d)位置92のアミノ酸残基EのDへの突然変異(E92D);
(e)位置175のアミノ酸残基NのPへの突然変異(N175P);
(f)位置184のアミノ酸残基GのNへの突然変異(G184N);
(g)位置185のアミノ酸残基VのNへの突然変異(V185N);
(h)位置201のアミノ酸残基KのQへの突然変異(K201Q);
(i)位置209のアミノ酸残基KのQへの突然変異(K209Q);
(j)位置421のアミノ酸残基KのNへの突然変異(K421N);
(k)位置426のアミノ酸残基NのSへの突然変異(N426S);
(l)位置465のアミノ酸残基KのEへの突然変異Q(K465Q);
(m)位置486のアミノ酸残基DのNへの突然変異(D486N);
(n)位置487のアミノ酸残基EのQ,N、またはIへの突然変異(E487Q/N/I);および
(o)位置508のアミノ酸残基KのEへの突然変異(K508E)
からなる群から選択される。
(a)位置46のアミノ酸残基SのGへの突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基EのDへの突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基NのPへの突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基GのNへの突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基VのNへの突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基KのNへの突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基NのSへの突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基KのEまたはQへの突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基DのNへの突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基EのQ,N、またはIへの突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基KのEへの突然変異
からなる群から選択される、少なくとも1つのさらなる突然変異を含む。
(a)保存的69−212ジスルフィド架橋に隣接した領域中のHRAドメインがヒンジで動かないように固定する安定化変異であって、前記領域がアミノ酸残基66〜68および214〜216を含む安定化変異、
(b)F2ドメインのC末端のアミノ酸残基76〜98を含むヘリックス(F2ドメインのC末端にある)の突然変異;
(c)アミノ酸486、487、および489を含むHRB基部領域(HRBのN末端)の上部間の負電荷斥力を低減する突然変異;ならびに
(d)HRA領域の安定化突然変異
からなる群から選択される方法を提供する。
安定な融合前RSV Fポリペプチドの調製−リンカーおよび三量体形成ドメイン
本発明に導いた研究では、可溶性融合前Fタンパク質(sF)の安定化された変異体を、リフォールディングを惹起する2つの主要な領域を安定化することにより設計した。最初の戦略は、短いループによりF1−F2ドメインを固定しかつ連結することによって、融合ペプチドをその位置に拘束し、融合ペプチドが頭部領域から放出されるのを防止することであった。融合ペプチドの放出は、F1のN末端のF2のC末端への共有結合形成を再構築することにより防止することができる。この実施例で示すように、いくつかの異なるリンカーを試みた。具体的にはアミノ酸配列GSGSG(配列番号5)を含む、F1とF2との間への5アミノ酸ループの挿入によって最も好結果が得られた。このリンカーは、3D構造が公開されている(Yin et.al.,2006)パラインフルエンザ5型のF配列との配列アライメントに基づいてRSV−F A2型について作製した3Dホモロジーモデルで測定した距離に基づいて設計した。
融合前RSV−Fのホモロジーモデルを構築するために使用した、HRSV A型およびB型とPIV5(最上部配列)のF配列間のアライメント
コンストラクトF18は、F1ドメインのアミノ酸残基513に連結されたフィブリチン三量体形成ドメイン(配列番号4)を含んだ。
コンストラクトF19は、F1ドメインのアミノ酸残基499に連結されたフィブリチン三量体形成ドメイン(配列番号4)を含んだ。
コンストラクトF20は、F1ドメインのアミノ酸残基516に連結されたイソロイシンジッパー(L)ドメイン(配列番号8)を含み、7つ組位置の疎水性を最適化し、IZドメインとのインフレーム融合を容易にするような追加の改変を含んだ。
コンストラクトF21もまた、イソロイシンジッパー(L)ドメイン(配列番号8)を含んだが、それはF1ドメインのアミノ酸残基501に連結されたものであり、またHRB領域に追加の改変はなかった。
コンストラクトF22は、F1ドメインのアミノ酸残基495に連結されたイソロイシンジッパー(L)ドメイン(配列番号8)を含み、HRBに追加の改変を含んだ。
コンストラクトF23は、アミノ酸残基495に連結されたイソロイシンジッパー(S)ドメイン(配列番号3)を含んだ。
コンストラクトF46もまた、イソロイシンジッパー(S)ドメイン(配列番号3)を含んだが、それはより長いRSV−F外部ドメインに連結されたものであった、すなわち、F1ドメインは、アミノ酸残基513の後で短縮されたものであった。
すべてのコンストラクトはHISタグを含んだ。
安定な融合前RSV Fポリペプチドの調製−安定化突然変異
三量体含量(コンストラクトF47について)および保存安定性(コンストラクトF24について)が最適ではなかったので、発現レベル、安定性、および天然三量体構造を増大させるための点突然変異を含有するさらなる変異体を作製した。結果を表7および8に示す。
融合前コンフォメーションの高発現および良好な安定性を示すいくつかの突然変異を、他の株のRSV Fタンパク質(配列番号69および70)に適用し、またフューリン切断部位突然変異を含まないRSV A2 F変異体(F18:配列番号71)に適用して、この改変がRSV融合前Fを安定化するための汎用の解決策であるか否かを評価した(表11)。
外部ドメインに対応するRSV−Fの可溶性バージョンにおいて融合前コンフォメーションの高発現および良好な安定性を示すいくつかの突然変異を、完全長RSV−Fタンパク質に適用した。これらの突然変異を、フューリン切断部位の突然変異を含むまたは含まない完全長RSV−Fに導入した。三量体形成ドメインはこれらの変異体に融合しなかった(表12)。
位置67および215のアミノ酸残基は、融合前モデルおよび融合後結晶構造の両方の3D構造で極めて近接している。これらの残基は、ヒンジを形成するDIII領域の上部の保存的ジスルフィド架橋に近接しており、HRA領域は、このヒンジに沿って、細長く伸びたコイルドコイル伸長ヘリックス三量体にリフォールディングする。この領域の突然変異はヒンジ機能に影響を及ぼすことになり、したがって、導入された突然変異はヒンジ機能の妨害により融合前コンフォメーションを安定化する。
位置77および80のアミノ酸残基は、融合後コンフォメーションの長いコイルドコイル構造にリフォールディングする、F1のN末端にあるDIIIの二次構造のアンサンブルに密接している、F2のC末端の長いヘリックス(残基76〜98)内に位置している。これらの2つの領域は、融合前から融合後へのリフォールディング中に分離されなければならないので、この分離を妨げる、この領域のアミノ酸は融合前コンフォメーションを安定化するであろう。これらの2つの領域は、リフォールディング中に離れるべきであるので、残基の一部を最適化して相互作用を増強することができる。観察された斥力の一例として、正電荷のLys80との間がある。負電荷のGlu残基へのLys80の突然変異は、融合前Fの発現を増大させた。融合後コンフォメーションに連続的に移行するため、表10に示すように、これらの突然変異をN67IおよびS215Pのような他の安定化突然変異と組み合わせて、この安定化の有益性を十分に得ることができる。
位置92のアミノ酸残基もまた、融合後コンフォメーションの長いコイルドコイル構造にリフォールディングする、F1のN末端にあるDIIIの二次構造のアンサンブルに密接している、F2のC末端の長いヘリックス(残基76〜98)内に位置している。このヘリックスは、HRA領域から分離される場合、シナジス(Synagis)エピトープ(エピトープII)(Arbiza et al.,J.Gen.Virol.73:2225−2234,1992)を含有するDIII領域に引っ張られ、負電荷のGlu92が移動して、融合後コンフォメーションにおいて正電荷のArg282に近接する。この引っ張りを低減する突然変異は、融合前コンフォメーションを安定化することになる。Glu92の保存的Asp残基への突然変異は、AspがArg282に到達することができないので、この引っ張りを低減することになる。
融合前コンフォメーションにおいてHRBの上部にあるアミノ酸残基486、487、および489は、負電荷のパッチを形成する。Glu487のAsnまたはIleへの突然変異は、融合前F発現を増大させた。Asp486のAsnもしくはGlnへの突然変異および/またはGlu489のAsn、Ile、もしくはGlnへの突然変異には、同じ効果がある。融合後に連続的に移行するため、例えばD486Nについて表10に示すように、これらの突然変異をN67IおよびS215Pのような他の安定化突然変異と組み合わせて、この安定化の有益性を十分に得ることができる。
融合前から融合後コンフォメーションにリフォールディングするためには、残基175と193との間の領域は、ループ−βヘアピンからヘリックスに変換しなければならない。この領域は最も劇的な構造移行を示す。この領域の一部については、実際に最も高いαヘリックス予測がある。融合前モデルにおける実際のヘリックス構造を、灰色で強調して以下に示す。この領域全体は、融合後コンフォメーションにリフォールディングすると、1つの大きなヘリックスに変換される。下位配列では、Agadir(http://agadir.crg.es/)に基づいて最も高いヘリックス予測をされた残基を灰色で強調している。融合前コンフォメーションにおいてβ−ヘアピンに維持されているC末端部分(残基187〜202)がα−ヘリックスを形成する傾向が高いことが、この比較から明らかになる。
位置421および426のアミノ酸残基はDII領域のループにある。残基S46は、DIからDIIIに交差する鎖の上にある。位置426のアミノ酸残基をセリンに突然変異させ、位置46のアミノ酸残基をグリシンに突然変異させた。これらの突然変異により、安定性および融合前発現レベルが増大した。
アミノ酸残基Lys465は、大きなコンフォメーション変化を受ける別の領域に位置する。Lys465は、DII領域の上部をHRBに連結する交差ループに位置する。HRB領域が下部から上部に上昇し、HRAと複合体形成して、6ヘリックスバンドルを形成するので、交差ループも下部から上部に再配置される。したがって、DIIの分離および別の環境への移動を可能にするためには、このループは準安定でなければならない。交差ループのLys465は、DII領域のLys445に近接している。Lys465のGlnまたはGluへの突然変異は、斥力を中和し、安定性および融合前Fの発現レベルを増大させた。
融合前Fタンパク質の発現
組換え融合前RSV Fタンパク質をコードする発現プラスミドを、部位特異的突然変異誘発およびPCRを含む、当技術分野内に広く知られる標準的方法により作製した。使用した発現プラットフォームは、293Freestyle細胞(Life Technologies,Renfreshire,UK)とした。製造業者の説明書に従い、293Fectin(Life Technologies)を用いて、細胞に一過性にトランスフェクトし、37℃および10%CO2で5日間、振盪インキュベーター中で培養した。培養上清を回収し、300gで5分間遠心して、細胞および細胞デブリを除去した。次いで、0.22umの真空フィルターを用いて、遠心上清を滅菌濾過し、使用するまで4℃に保存した。
融合前RSV Fタンパク質の精製
組換えポリペプチドを、初期精製用の陽イオンイオン交換カラム、次いで残存する混入物を除去する洗練ステップ用のセファデックス200カラムを適用する2ステップ精製プロトコールによって精製した。初期イオン交換ステップのために、培養上清を2容量の50mM NaOAc、pH5.0で希釈し、5mlのHiTrap Capto Sカラムに毎分5mlで通した。次いで、カラムを、10カラム容量(CV)の20mM NaOAc、50mM NaCl、0.01%(v/v)tween20、pH5で洗浄し、2CVの20mM NaOAc、1M NaCl、0.01%(v/v)tween20、pH5で溶出した。スピン濃縮器を用いて溶出液を濃縮し、ランニング緩衝液として40mM Tris、500mM NaCl、0.01%(v/v)tween20、pH7.4を用い、セファデックス200カラムを使用してタンパク質をさらに精製した。図1Aに、ゲル濾過カラムからのクロマトグラムを示すが、主要ピークに融合前RSV Fタンパク質が含有される。このピークを含有する画分を再びプールし、OD280を用いてタンパク質濃度を測定し、使用するまで4℃に保存した。図1Bに、最終タンパク質調製物の還元SDS−PAGE分析を示すが、見てわかるように、純度は95%超であった。バンドの同一性はウエスタンブロッティングおよびタンパク質F特異的抗体を用いて確認した(図示せず)。
NativePAGE
本発明による融合前Fポリペプチドの多量体状態の初期測定のために、一過性にトランスフェクトされた細胞からの培養上清を、NativePAGE Bis−Trisゲルシステム(Life Technologies)で分析した。次いで、ゲルを、製造業者の説明書に従い、iBlot技術(Life Technologies)を用いてブロットした。RSV Fタンパク質特異的抗体CR9503(下記の表17に示す配列)を、融合前RSV Fタンパク質の検出用一次プローブとして使用し、次いでHRPコンジュゲートマウス抗ヒトIgG(Jackson ImmunoResearch,West Grove,PA)またはIRDye800CWコンジュゲート親和性精製抗ヒトIgG(ウサギ)(Rockland Immunochemicals,Gilbertsville,PA)を使用した。ブロットは、標準フィルム(Codak)またはOdyssey CLx赤外線イメージングシステムを用いて検出した。図2に、単量体F47−からの上清(レーン1)、融合後および主として三量体のRSV Fタンパク質(レーン2)、ならびに精製された融合前RSV Fタンパク質(レーン3)のNativePAGE分析を示すが、これから、精製後には、融合後三量体バンドと同様に泳動するため、三量体化学種のみが、融合前RSV Fタンパク質調製物中に存在することがわかる。これは、ゲル濾過カラムからの溶出容量によっても支持される(図1A)。
定量的ウエスタンブロッティング
融合前RSV Fタンパク質コンストラクトの定量のために、定量的ウエスタンブロッティングを使用した。培養上清の稀釈液を、4〜12%(w/v)Bis‐Tris NuPAGEゲル(Life Technology)上で還元泳動し、iBlot技術(Life Technology)を用いてブロットした。ブロットをCR9503でプローブし(上記のように)、コンジュゲートマウス抗ヒトIgG(Jackson ImmunoResearch,West Grove,PA)またはIRDye800CWコンジュゲート親和性精製抗ヒトIgG(ウサギ)(Rockland Immunochemicals,Gilbertsville,PA)で検出した。次いで、タンパク質量を、段階希釈した精製RSV標準タンパク質と、Odyssey CLx赤外線イメージングシステムまたは視覚によって評価した。図3で、全体的な発現レベルの点から、A2_F24(配列番号19)コンストラクトに相対的な効果を見ることができる。単一突然変異では、発現レベルは5倍まで増大することが示された。これらの突然変異の一部からなる二重突然変異体を作製すると、相乗効果が観察される場合があり、場合によっては、A2_F24の11倍までさらに増大した発現が観察された。
終了点安定性アッセイ
本発明による発現ポリペプチドの融合前コンフォメーションの確認は、融合前特異的抗体CR9501またはCR9502またはモタビズマブの重鎖および軽鎖可変領域を含む非コンフォメーション特異的抗体CR9503を用い、BioLayer Interferometry(Octet)技術を使用して行った。標準プロトコールにより抗体をビオチン化し、ストレプトアビジンバイオセンサー(ForteBio,Portsmouth,UK)上に固定した。手順は以下のとおり。カイネティック緩衝液(ForteBio)中で60秒間、センサーを平衡化した後、Tipssを、5ug/mlの所望の抗体を含むPBSに移した。負荷を250秒間行った。次いで、カイネティック緩衝液中で200秒間のさらなる平衡化ステップを入れた。最後に、融合前RSV Fポリペプチドを含有する発現培養上清にTipssを移し、1200秒後に結合応答(nm)を記録した。この段階は結合段階とも呼ばれる。これを、回収直後(1日目)および5日後(5日目)に行い、CR9501結合の差を、融合前コンフォメーションを安定化することができる突然変異を同定するためのスクリーニングツールとして使用した。5日目に20%未満しか結合減少が観察されなかった場合、コンストラクトは安定であると考えられ、20%超の結合減少が観察された場合、不安定と考えられた。次いで、必要に応じて、よりストリンジェントな安定性試験を安定なコンストラクトに課すこともあった。データ解析は、ForteBioデータ解析6.4ソフトウェア(ForteBio)を用いて行った。
熱安定性アッセイ
RSV Fポリペプチドに導入した形質の安定化能を、熱ストレスにより評価した。この目的のために、一過性にトランスフェクトされた細胞からの培養上清または精製されたタンパク質を一連の温度を用いて加熱した。次いで、さらなる熱誘導コンフォメーション変化を防止するために、試料を氷上で冷却し、実施例7に記載のように、octet技術プラットフォーム上でCR9501抗体を用いてプローブした。種々の温度での結合段階の終了時に得られた応答を、温度の関数としてプロットし、Prismソフトウェアを用いて、非線形回帰によりフィットさせた。これにより、抗体結合レベルが最大の50%である温度を評価し、この値を使用して、融合前熱安定性の点から、種々のコンストラクトを比較することができる。図4では、未改変外部ドメイン(配列番号13)とA2_F24 N67I+S215Pコンストラクト(配列番号21)が比較される。温度誘発ストレスの効果が、未改変外部ドメインに比較して、A2_F24 N67I+S215Pコンストラクト(配列番号21)に対して少ないことを観察することができる。したがって、本発明による、ポリペプチドに導入した安定化モチーフ、すなわち、三量体形成部位、F1−F2リンカー、および2つの点突然変異は、より安定な融合前Fタンパク質をもたらすと結論することができる。
結合段階安定性アッセイ
種々の点突然変異の安定性を評価するために、前に記載した終了点安定性アッセイ(実施例7)の変法であるoctet結合アッセイを開発した。結合段階解析は、よりストリンジェントであり、かつ発現レベルバイアスを完全に防止するので、極めて高い発現レベルを示す一部の点突然変異体のために実行した。CR9501抗体をまた使用するが、結合段階の終了時の結合応答を選択する代わりに、終了点アッセイの濃度バイアスの可能性を低減するために結合曲線全体を使用した。これは、指示されたA2_F24点突然変異体を用い、実験の結合段階全体からのデータポイントを使用して行った。データはチップ上の結合抗体の量について補正した。測定は1、5、および33日目に行い、この3日の曲線の形状を比較した。同一の曲線が得られた場合、このコンストラクトは、安定であると考えられ、そうでなければ、不安定と考えられる。図5に、4つの異なる変異体の解析を見ることができる。不安定なタンパク質融合前コンストラクトは、CR9501結合の時間依存的な減少によって同定することができるが(A2_F24、K465Q、S46G)、安定な融合前コンストラクト(N67I)はそのような低下を示さなかった。突然変異E92Dは、曲線形状にほんのわずかな変化が観察されたので、中間の安定性を有する、この2つの間のグループに入ると考えられる。図6では、選択された点突然変異を組み合わせて、二重突然変異体を作製し、それらを解析した。見てわかるように、異なる突然変異は、安定性および安定性誘導の点から異なる表現型を示した。ポリペプチドが突然変異K465QまたはS46Gを単独でまたは組み合わせて含む場合、3つ、すなわち、2つの単一突然変異体および1つの二重突然変異体はすべて不安定であり、融合前特異的抗体結合は経時的に減少する。突然変異S46Gを、単一突然変異として中間の安定性を有することが前に示されたE92Dと組み合わせた場合、安定性の変化を観察することができなかったが、これは、E92D突然変異によって不安定なタンパク質コンストラクトを補正することができないことを示す。突然変異N67IをS46GまたはE92D突然変異と組み合わせた場合、結果は完全に安定なコンストラクトを示す。これはまた、S215P突然変異をE92D突然変異と組み合わせた場合にも観察することができ、不安定な融合前コンストラクトを安定化する、これらの2つの突然変異のユニークな能力が示された。
定量的Octet
細胞培養上清中の融合前RSV Fタンパク質の濃度を測定するために、定量的Octetベースの方法を使用した。CR9501およびCR9503抗体を標準プロトコールによりビオチン化し、ストレプトアビジンバイオセンサー(ForteBio,Portsmouth,UK)上に固定した。その後、コーティングされたバイオセンサーをmock細胞培養上清でブロックした。定量的実験を以下のとおりに行った:温度30℃、振盪速度1000rpm、アッセイ時間300秒。標準曲線を用いて細胞培養上清中のタンパク質濃度を算出した。mock細胞培養上清で希釈したA2_F24_N67I+S215P(配列番号21)タンパク質を用いて、コーティング抗体それぞれについて標準曲線を作成した。測定は、上清回収日(1日目)および4℃で5日間以上の上清保存後に行った。CR9501で測定した濃度の差を、融合前コンフォメーションを安定化することができる突然変異を同定するためのスクリーニングツールとして使用した。5日目に20%未満しか測定濃度の減少が観察されなかった場合、コンストラクトは安定であると考えられた。データ解析は、ForteBioデータ解析6.4ソフトウェア(ForteBio)を用いて行った。
FACS解析および熱安定性
組換え完全長融合前RSV Fタンパク質をコードする発現プラスミドを、部位特異的突然変異誘発およびPCRを含む、当技術分野内に広く知られる標準的方法により作製した。製造業者の説明書に従い、293Fectin(Life Technologies)を用いて、HEK293−T細胞に一過性にトランスフェクトし、37℃および10%CO2で48時間培養した。FACS緩衝液(FBS中5mM EDTA、1%FBS)を用いて、細胞培養ディッシュから細胞を剥離し、同じ緩衝液で洗浄し再懸濁した。ビオチン化されたCR9501またはCR9503抗体、次いでAPC標識ストレプトアビジンにより、表面RSV Fタンパク質に対して細胞を染色した。生細胞と死細胞を識別するために、ヨウ化プロピジウムを染色手順の終わりに細胞懸濁液に加えた。当業者に周知の標準的方法に従って、FACS Canto(BD Biosciences)上で細胞を解析した。データ解析は、FlowJo 9.0ソフトウェア(Tree Star Inc.)を用いて行った。平均蛍光強度(MFI)を、APC陽性生細胞の集団について算出した。
融合前F免疫原性の前臨床評価
安定化された融合前RSV F(A2F24、N67I、S215P)(配列番号21)の免疫原性を評価するために、0週目および4週目の初回免疫−追加免疫レジメンで、0.5または5ugを用い、表14に従ってマウスを免疫した。図7に示すように、融合前Fで免疫されたマウスは、融合後RSV Fで免疫されたマウスよりも高いVNA力価を示した。
本発明は以下の態様を包含し得る。
[1] 組換え融合前呼吸器合胞体ウイルス(RSV)融合(F)ポリペプチドであって、融合前コンフォメーションFタンパク質に特異的な少なくとも1つのエピトープを含み、前記少なくとも1つのエピトープが、配列番号54の重鎖CDR1領域、配列番号55の重鎖CDR2領域、配列番号56の重鎖CDR3領域と、配列番号62の軽鎖CDR1領域、配列番号63の軽鎖CDR2領域、および配列番号64の軽鎖CDR3領域を含む融合前特異的モノクローナル抗体、ならびに/または配列番号58の重鎖CDR1領域、配列番号59の重鎖CDR2領域、配列番号60の重鎖CDR3領域と、配列番号66の軽鎖CDR1領域、配列番号67の軽鎖CDR2領域、および配列番号68の軽鎖CDR3領域を含む融合前特異的モノクローナル抗体により認識される、組換え融合前呼吸器合胞体ウイルス(RSV)融合(F)ポリペプチド。
[2] 前記ポリペプチドが三量体である、上記[1]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[3] 前記ポリペプチドが、位置67のアミノ酸残基の突然変異および/または位置215のアミノ酸残基の突然変異を含む、上記[1]または[2]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[4] 前記ポリペプチドが、F1ドメインおよびF2ドメイン、ならびに前記F1ドメインを前記F2ドメインに連結する、1〜10アミノ酸残基を含む連結配列を含む、上記[1]、[2]、または[3]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[5] 短縮されたF1ドメインおよびF2ドメイン、ならびに前記F1ドメインを前記F2ドメインに連結する、1〜10アミノ酸残基を含む連結配列を含み、ポリペプチドが、野生型RSV Fタンパク質のRSV F1および/またはF2ドメインに対して、F1および/またはF2ドメインに少なくとも1つの安定化突然変異を含み、前記少なくとも1つの安定化突然変異が、
(a)位置67のアミノ酸残基N/Tの突然変異、
(b)位置215のアミノ酸残基Sの突然変異
からなる群から選択される、上記[1]〜[4]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[6] 前記少なくとも1つの安定化突然変異が、
(a)位置67のアミノ酸残基N/TのIへの突然変異;および
(b)位置215のアミノ酸残基SのPへの突然変異
からなる群から選択される、上記[1]〜[5]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[7] 前記ポリペプチドが、前記短縮されたF1ドメインに連結された異種三量体形成ドメインを含む、上記[5]または[6]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[8] 前記ポリペプチドが少なくとも1つのさらなる突然変異を含み、前記突然変異が、
(a)位置46のアミノ酸残基の突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基の突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基の突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基の突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基の突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基の突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基の突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基の突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基の突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基の突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基の突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基の突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基の突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基の突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基の突然変異
からなる群から選択される、上記[1]〜[7]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[9] 前記少なくとも1つのさらなる突然変異が、
(a)位置46のアミノ酸残基SのGへの突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基EのDへの突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基NのPへの突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基GのNへの突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基VのNへの突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基KのNへの突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基NのSへの突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基KのEまたはQへの突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基DのNへの突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基EのQ,N、またはIへの突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基KのEへの突然変異
からなる群から選択される、上記[8]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[10] 前記ポリペプチドが少なくとも2つの突然変異を含む、上記[1]〜[9]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[11] 前記少なくとも2つの突然変異が、位置67のアミノ酸残基N/TのIへの突然変異および位置215のアミノ酸残基SのPへの突然変異を含む、上記[10]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[12] 前記ポリペプチドが、
(a)位置46のアミノ酸残基SのGへの突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基EのDへの突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基NのPへの突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基GのNへの突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基VのNへの突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基KのNへの突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基NのSへの突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基KのEまたはQへの突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基DのNへの突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基EのQ,N、またはIへの突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基KのEへの突然変異
からなる群から選択される、少なくとも1つのさらなる突然変異を含む、上記[11]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[13] 前記異種三量体形成ドメインが、アミノ酸配列EKKIEAIEKKIEAIEKKIEA(配列番号3)を含む、上記[1]〜[12]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[14] 前記三量体形成ドメインが、前記RSV Fタンパク質のアミノ酸残基495に連結している、上記[13]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[15] 前記異種三量体形成ドメインが、アミノ酸配列GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL(配列番号4)を含む、上記[1]〜[14]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[16] 前記三量体形成ドメインが、前記RSV Fタンパク質のアミノ酸残基513に連結している、上記[15]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[17] 前記F1と前記F2ドメインとの間の前記リンカーが5アミノ酸残基を含む、上記[1]〜[16]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[18] 前記リンカーがアミノ酸配列GSGSG(配列番号5)を含む、上記[17]に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[19] 前記F1ドメインおよび/または前記F2ドメインがRSV A株由来である、上記[1]〜[18]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[20] 前記F1ドメインおよび/または前記F2ドメインがRSV B株由来である、上記[1]〜[19]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[21] 前記ポリペプチドが、55℃で、好ましくは58℃で、より好ましくは60℃で、少なくとも30分間安定である、上記[1]〜[20]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[22] 前記ポリペプチドが、4℃での保存後、少なくとも30日間、好ましくは少なくとも60日間、好ましくは少なくとも6ヶ月間、一層より好ましくは少なくとも1年間安定である、上記[1]〜[21]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[23] 前記ポリペプチドが、配列番号21〜配列番号52および71〜89からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、上記[1]〜[22]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[24] 前記ポリペプチドがHISタグを含まない、上記[1]〜[23]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
[25] 上記[1]〜[24]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチドをコードする核酸分子。
[26] 前記核酸分子が、哺乳動物細胞における発現用にコドン最適化されている、上記[25]に記載の核酸分子。
[27] 上記[25]または上記[26]に記載の核酸分子を含むベクター。
[28] 上記[1]〜[24]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、上記[25]もしくは上記[26]に記載の核酸分子、および/または上記[27]に記載のベクターを含む組成物。
[29] RSV Fタンパク質に対する免疫応答の誘導に使用するための、上記[1]〜[24]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、上記[25]もしくは上記[26]に記載の核酸分子、および/または上記[27]に記載のベクター。
[30] ワクチンとして使用するための、上記[1]〜[24]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、上記[25]もしくは上記[26]に記載の核酸分子、および/または上記[27]に記載のベクター。
[31] RSV感染の予防および/または処置に使用するための、上記[1]〜[24]のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、上記[25]もしくは上記[26]に記載の核酸分子、および/または上記[27]に記載のベクター。
[32] RSV Fポリペプチドの融合前コンフォメーションを安定化するための方法であって、野生型RSV F1および/またはF2ドメインに対して、RSV F1および/またはF2ドメインに1つまたは複数の突然変異を導入することを含み、前記1つまたは複数の突然変異が、
(e)HRAドメインがヒンジで動かないように固定する、保存的69−212ジスルフィド架橋に隣接した領域中の安定化変異であって、前記領域がアミノ酸残基66〜68および214〜216を含む安定化変異、
(f)前記F2ドメインのC末端にあるアミノ酸残基76〜98を含むヘリックスの突然変異;
(g)アミノ酸486、487を含むHRB基部領域の上部間の負電荷斥力を低減する突然変異;および
(h)HRA領域の安定化突然変異
からなる群から選択される方法。
[33] HRAヒンジ領域の前記突然変異が位置67にある、上記[32]に記載の方法。
[34] HRAヒンジ領域の前記突然変異が位置215にある、上記[32]または[33]に記載の方法。
[35] HRAヒンジ領域の前記突然変異が、位置66または68にあり、かつ/または位置214または216にある、上記[32]、[33]、または[34]に記載の方法。
[36] ヘリックスの前記突然変異が位置77にある、上記[32]に記載の方法。
[37] ヘリックスの前記突然変異が位置80にある、上記[32]に記載の方法。
[38] 位置77および/または80の前記アミノ酸残基が負荷電のアミノ酸に変更される、上記[36]または[37]に記載の方法。
[39] 前記突然変異が位置92にある、上記[32]〜[38]のいずれか一項に記載の方法。
[40] 前記突然変異が、アミノ酸486、487、489を含むHRB基部領域の上部間の負電荷斥力を低減する、上記[32]に記載の方法。
[41] 前記突然変異が位置489にある、上記[40]に記載の方法。
[42] 前記突然変異が位置486にある、上記[40]に記載の方法。
[43] 前記突然変異が、アミノ酸残基175〜193間のβターンを安定化する、上記[32]に記載の方法。
[44] 前記突然変異が、位置175でターンを安定化している、上記[43]に記載の方法。
[45] 前記突然変異が、位置184〜185でターンを安定化している、上記[43]に記載の方法。
[46] 上記[32]〜[45]のいずれか一項に記載の方法により得ることができる、安定化された融合前RSV Fポリペプチド。
RSV Fタンパク質A2の完全長配列(配列番号1)
RSV Fタンパク質B1の完全長配列(配列番号2)
配列番号3
配列番号4
配列番号5
F8:RSV A2、野生型外部ドメイン(配列番号13)
F11:RSV B1、野生型外部ドメイン(配列番号14)
F47:RSV A2、リンカー安定化、IZ(S)(配列番号15)
F47−:RSV A2、リンカー安定化、IZ(S)(配列番号16)
F43:RSV B1、リンカー安定化、IZ(S)(配列番号17)
F24:RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号18)
A2_F24:RSV A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号19)
F24−:RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号20)
A2_F24 N67I+S215P:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号21)
F24−N67I+S215P:RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号22)
A2_F24 N67I+E92D:RSV A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号23)
F24− N67I+E92D RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号24)
A2_F24 N67I+K465Q RSV A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号25)
F24− N67I+K465Q RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号26)
A2_F24 N67I+S46G RSV A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号27)
F24− N67I+S46G RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号28)
A2_F24 E92D+S215P:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号29)
F24−E92D+S215P:RSV B1、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号30)
A2_F24 N67I+S215P+K508E:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号31)
A2_F24 N67I+S215P+E487I:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号32)
A2_F24 N67I+S215P+E487Q:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号33)
A2_F24 N67I+S215P+E487N:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号34)
A2_F24 N67I+S215P+D486N:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号35)
A2_F24 N67I+S215P+K465E:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号36)
A2_F24 N67I+S215P+K465Q:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号37)
A2_F24 N67I+S215P+N426S:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号38)
A2_F24 N67I+S215P+K421N:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号39)
A2_F24 N67I+S215P+K209Q:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号40)
A2_F24 N67I+S215P+K201Q:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号41)
A2_F24 N67I+S215P+V185N:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号42)
A2_F24 N67I+S215P+G184N:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号43)
A2_F24 N67I+S215P+N175P:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号44)
A2_F24 N67I+S215P+E92D:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号45)
A2_F24 N67I+S215P+K80E:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号46)
A2_F24 N67I+S215P+K77E:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号47)
A2_F24 N67I+S215P+S46G:A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号48)
A2_F24:RSV S46G A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号49)
A2_F24:RSV K465Q A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号50)
A2_F24:RSV N67I A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号51)
A2_F24:RSV E92D A2、リンカー安定化、フィブリチン(配列番号52)
RSV Fタンパク質CL57−v224完全長配列(配列番号69)
外部ドメイン、RSV CL57−v224(配列番号70)
PreF、RSV A2、フィブリチン(配列番号71)
PreF N67I S215P、RSV A2、フィブリチン(配列番号72)
PreF N67I S215P、RSV B1、フィブリチン(配列番号73)
RSV N67I S215P、RSV CL57−v224、フィブリチン(配列番号74)
PreFL N67I S215P、RSV B1、フィブリチン、ループ(配列番号22)
PreFL N67I S215P、RSV CL57−v224、フィブリチン、ループ(配列番号75)
PreF N67I S215P E487Q、RSV A2、フィブリチン(配列番号76)
PreF N67I S215P K201N、RSV A2、フィブリチン(配列番号77)
PreF N67I S215P E92D、RSV A2、フィブリチン(配列番号78)
PreF N67I S215P D486N、RSV A2、フィブリチン(配列番号79)
Fwt N67I S215P、膜結合型RSV F、A2、(配列番号80)
Fsl N67I S215P、膜結合型RSV F、A2、(配列番号81)
Fwt N67I S215P E92D、膜結合型RSV F、A2、(配列番号82)
Fsl N67I S215P E92D、膜結合型RSV F、A2、(配列番号83)
Fwt N67I S215P E487Q、膜結合型RSV F、A2、(配列番号84)
Fsl N67I S215P E487Q、膜結合型RSV F、A2、(配列番号85)
Fwt N67I S215P D486N、膜結合型RSV F、A2、(配列番号86)
Fsl N67I S215P D486N、膜結合型RSV F、A2、(配列番号87)
Fwt N67I S215P S46G、膜結合型RSV F、A2、(配列番号88)
Fsl N67I S215P S46G、膜結合型RSV F、A2、(配列番号89)
CR9501重鎖(配列番号53):
CR9501軽鎖(配列番号61):
CR9502重鎖(配列番号57):
CR9502軽鎖(配列番号65):
Claims (42)
- 融合前コンフォメーションで安定化する組換え呼吸器合胞体ウイルス(RSV)融合(F)ポリペプチドであって、融合前コンフォメーションFタンパク質に特異的な少なくとも1つのエピトープを含み、前記少なくとも1つのエピトープが、配列番号54の重鎖CDR1領域、配列番号55の重鎖CDR2領域、配列番号56の重鎖CDR3領域と、配列番号62の軽鎖CDR1領域、配列番号63の軽鎖CDR2領域、および配列番号64の軽鎖CDR3領域を含む融合前特異的モノクローナル抗体、ならびに/または配列番号58の重鎖CDR1領域、配列番号59の重鎖CDR2領域、配列番号60の重鎖CDR3領域と、配列番号66の軽鎖CDR1領域、配列番号67の軽鎖CDR2領域、および配列番号68の軽鎖CDR3領域を含む融合前特異的モノクローナル抗体により認識され、
前記ポリペプチドが、位置67のアミノ酸残基N/TのIへの突然変異、および/または位置215のアミノ酸残基SのPへの突然変異を含み、
アミノ酸位置はA2株由来のRSV Fタンパク質の配列(配列番号1)を参照して付与される、
融合前RSV Fポリペプチド。 - 前記ポリペプチドが三量体である、請求項1に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、F1ドメインおよびF2ドメイン、ならびに前記F1ドメインを前記F2ドメインに連結する、1〜10アミノ酸残基を含む連結配列を含む、請求項1または2に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 短縮されたF1ドメインおよびF2ドメイン、ならびに前記F1ドメインを前記F2ドメインに連結する、1〜10アミノ酸残基を含む連結配列を含む、請求項1〜3のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、前記短縮されたF1ドメインに連結された異種三量体形成ドメインを含む、請求項3または4に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが少なくとも1つのさらなる突然変異を含み、前記突然変異が、
(a)位置46のアミノ酸残基の突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基の突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基の突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基の突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基の突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基の突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基の突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基の突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基の突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基の突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基の突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基の突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基の突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基の突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基の突然変異
からなる群から選択される、請求項1〜5のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。 - 前記少なくとも1つのさらなる突然変異が、
(a)位置46のアミノ酸残基SのGへの突然変異;
(b)位置77のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(c)位置80のアミノ酸残基KのEへの突然変異;
(d)位置92のアミノ酸残基EのDへの突然変異;
(e)位置175のアミノ酸残基NのPへの突然変異;
(f)位置184のアミノ酸残基GのNへの突然変異;
(g)位置185のアミノ酸残基VのNへの突然変異;
(h)位置201のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(i)位置209のアミノ酸残基KのQへの突然変異;
(j)位置421のアミノ酸残基KのNへの突然変異;
(k)位置426のアミノ酸残基NのSへの突然変異;
(l)位置465のアミノ酸残基KのEまたはQへの突然変異;
(m)位置486のアミノ酸残基DのNへの突然変異;
(n)位置487のアミノ酸残基EのQ,N、またはIへの突然変異;および
(o)位置508のアミノ酸残基KのEへの突然変異
からなる群から選択される、請求項6に記載の融合前RSV Fポリペプチド。 - 前記ポリペプチドが少なくとも2つの突然変異を含む、請求項1〜7のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記少なくとも2つの突然変異が、位置67のアミノ酸残基N/TのIへの突然変異および位置215のアミノ酸残基SのPへの突然変異を含む、請求項8に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記異種三量体形成ドメインが、アミノ酸配列EKKIEAIEKKIEAIEKKIEA(配列番号3)を含む、請求項4〜9のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記三量体形成ドメインが、前記RSV Fタンパク質のアミノ酸残基495に連結している、請求項10に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記異種三量体形成ドメインが、アミノ酸配列GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL(配列番号4)を含む、請求項4〜9のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記三量体形成ドメインが、前記RSV Fタンパク質のアミノ酸残基513に連結している、請求項12に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記F1ドメインと前記F2ドメインとの間の前記リンカーが5アミノ酸残基を含む、請求項1〜13のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記リンカーがアミノ酸配列GSGSG(配列番号5)を含む、請求項14に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記F1ドメインおよび/または前記F2ドメインがRSV A株由来である、請求項1〜15のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記F1ドメインおよび/または前記F2ドメインがRSV B株由来である、請求項1〜16のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、55℃で、好ましくは58℃で、より好ましくは60℃で、少なくとも30分間安定である、請求項1〜17のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、4℃での保存後、少なくとも30日間、好ましくは少なくとも60日間、好ましくは少なくとも6ヶ月間、一層より好ましくは少なくとも1年間安定である、請求項1〜18のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドが、配列番号21〜配列番号48、配列番号51および72〜89からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項1〜19のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 前記ポリペプチドがHISタグを含まない、請求項1〜20のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド。
- 請求項1〜21のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチドをコードする核酸分子。
- 前記核酸分子が、哺乳動物細胞における発現用にコドン最適化されている、請求項22に記載の核酸分子。
- 請求項22または請求項23に記載の核酸分子を含むベクター。
- 請求項1〜21のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、請求項22もしくは請求項23に記載の核酸分子、および/または請求項24に記載のベクターを含む組成物。
- RSV Fタンパク質に対する免疫応答の誘導に使用するための、請求項1〜21のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、請求項22もしくは請求項23に記載の核酸分子、および/または請求項24に記載のベクターを含む組成物。
- ワクチンとして使用するための、請求項1〜21のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、請求項22もしくは請求項23に記載の核酸分子、および/または請求項24に記載のベクターを含む組成物。
- RSV感染の予防および/または処置に使用するための、請求項1〜21のいずれか一項に記載の融合前RSV Fポリペプチド、請求項22もしくは請求項23に記載の核酸分子、および/または請求項24に記載のベクターを含む組成物。
- RSV Fポリペプチドの融合前コンフォメーションを安定化するための方法であって、野生型RSV F1および/またはF2ドメインに対して、RSV F1および/またはF2ドメインに1つまたは複数の突然変異を導入することを含み、前記1つまたは複数の突然変異が、
位置67のアミノ酸残基N/TのIへの突然変異、および/または位置215のアミノ酸残基SのPへの突然変異を含み、
アミノ酸位置はA2株由来のRSV Fタンパク質の配列(配列番号1)を参照して付与される、方法。 - 前記ポリペプチドが少なくとも1つのさらなる突然変異を含み、前記突然変異が、
(a)HRAドメインがヒンジで動かないように固定する、保存的69−212ジスルフィド架橋に隣接した領域中の安定化突然変異であって、前記領域がアミノ酸残基66〜68および214〜216を含む安定化突然変異、
(b)前記F2ドメインのC末端にあるアミノ酸残基76〜98を含むヘリックスの突然変異;
(c)アミノ酸486、487を含むHRB基部領域の上部間の負電荷斥力を低減する突然変異;および
(d)HRA領域の安定化突然変異
からなる群から選択される、請求項29に記載の方法。 - HRAヒンジ領域の前記突然変異が、位置66または68にあり、かつ/または位置214または216にある、請求項30に記載の方法。
- ヘリックスの前記突然変異が位置77にある、請求項30に記載の方法。
- ヘリックスの前記突然変異が位置80にある、請求項30に記載の方法。
- 位置77および/または80の前記アミノ酸残基が負荷電のアミノ酸に変更される、請求項32または33に記載の方法。
- 前記突然変異が位置92にある、請求項30〜34のいずれか一項に記載の方法。
- 前記突然変異が、アミノ酸486、487、489を含むHRB基部領域の上部間の負電荷斥力を低減する、請求項30に記載の方法。
- 前記突然変異が位置489にある、請求項36に記載の方法。
- 前記突然変異が位置486にある、請求項36に記載の方法。
- 前記突然変異が、アミノ酸残基175〜193間のβターンを安定化する、請求項30に記載の方法。
- 前記突然変異が、位置175でターンを安定化している、請求項39に記載の方法。
- 前記突然変異が、位置184〜185でターンを安定化している、請求項39に記載の方法。
- 請求項29〜41のいずれか一項に記載の方法により得ることができる、安定化された融合前RSV Fポリペプチド。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP13165402.2 | 2013-04-25 | ||
EP13165402 | 2013-04-25 | ||
PCT/EP2014/058353 WO2014174018A1 (en) | 2013-04-25 | 2014-04-24 | Stabilized soluble prefusion rsv f polypeptides |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016520039A JP2016520039A (ja) | 2016-07-11 |
JP6469081B2 true JP6469081B2 (ja) | 2019-02-13 |
Family
ID=48326107
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016509467A Active JP6469081B2 (ja) | 2013-04-25 | 2014-04-24 | 安定化された可溶性融合前rsvfポリペプチド |
Country Status (33)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US10899800B2 (ja) |
EP (2) | EP2988780B1 (ja) |
JP (1) | JP6469081B2 (ja) |
KR (1) | KR102236497B1 (ja) |
CN (2) | CN105188745B (ja) |
AP (1) | AP2015008815A0 (ja) |
AR (1) | AR096113A1 (ja) |
AU (1) | AU2014259474B2 (ja) |
CA (1) | CA2910067C (ja) |
CL (1) | CL2015003124A1 (ja) |
CY (1) | CY1121600T1 (ja) |
DK (1) | DK2988780T3 (ja) |
EA (2) | EA035522B1 (ja) |
ES (1) | ES2715378T3 (ja) |
HK (1) | HK1220124A1 (ja) |
HR (1) | HRP20190175T1 (ja) |
HU (1) | HUE041659T2 (ja) |
IL (1) | IL242186B (ja) |
LT (1) | LT2988780T (ja) |
ME (1) | ME03442B (ja) |
MX (1) | MX361774B (ja) |
MY (2) | MY181066A (ja) |
PE (1) | PE20151867A1 (ja) |
PH (1) | PH12015502377A1 (ja) |
PL (1) | PL2988780T3 (ja) |
PT (1) | PT2988780T (ja) |
RS (1) | RS58436B1 (ja) |
SG (1) | SG11201508567XA (ja) |
SI (1) | SI2988780T1 (ja) |
TR (1) | TR201902513T4 (ja) |
TW (1) | TWI663175B (ja) |
WO (1) | WO2014174018A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201507912B (ja) |
Families Citing this family (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MX2011006205A (es) | 2008-12-09 | 2011-09-01 | Novavax Inc | Proteinas f del vrs modificadas y metodos de uso de las mismas. |
US11446374B2 (en) | 2008-12-09 | 2022-09-20 | Novavax, Inc. | Modified RSV F proteins and methods of their use |
WO2014160463A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Prefusion rsv f proteins and their use |
US9738689B2 (en) | 2013-03-13 | 2017-08-22 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Prefusion RSV F proteins and their use |
PL2988780T3 (pl) | 2013-04-25 | 2019-06-28 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stabilizowane rozpuszczalne prefuzyjne polipeptydy F RSV |
WO2014202570A1 (en) | 2013-06-17 | 2014-12-24 | Crucell Holland B.V. | Stabilized soluble pre-fusion rsv f polypeptides |
US10744193B2 (en) | 2015-03-30 | 2020-08-18 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Immunogenic RSV polypeptides |
KR102638978B1 (ko) | 2015-07-07 | 2024-02-22 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | Rsv에 대한 백신 |
US10457708B2 (en) * | 2015-07-07 | 2019-10-29 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stabilized soluble pre-fusion RSV F polypeptides |
CA2997181A1 (en) * | 2015-09-02 | 2017-03-09 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stabilized viral class i fusion proteins |
CN114796474A (zh) * | 2015-09-03 | 2022-07-29 | 诺瓦瓦克斯股份有限公司 | 具有改进的稳定性和免疫原性的疫苗组合物 |
RU2723039C2 (ru) | 2015-12-23 | 2020-06-08 | Пфайзер Инк. | Мутанты белка f rsv |
KR20180108598A (ko) * | 2016-02-03 | 2018-10-04 | 얀센 사이언시즈 아일랜드 유씨 | Rsv의 치료를 위한 조합 생성물 |
AU2017242020B2 (en) | 2016-03-29 | 2021-08-05 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Substitutions-modified prefusion RSV F proteins and their use |
CA3018139A1 (en) | 2016-04-05 | 2017-10-12 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Vaccine against rsv |
KR102506895B1 (ko) * | 2016-04-05 | 2023-03-08 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | 안정화된 용해성 융합-전 rsv f 단백질 |
WO2017207477A1 (en) | 2016-05-30 | 2017-12-07 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stabilized pre-fusion rsv f proteins |
KR102421049B1 (ko) * | 2016-05-30 | 2022-07-15 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | 안정화된 융합-전 rsv f 단백질 |
CN108265079A (zh) * | 2017-01-02 | 2018-07-10 | 刘昕 | 一种新型呼吸道合胞体病毒pre-F融合蛋白载体的制备方法 |
MA47787A (fr) | 2017-03-15 | 2020-01-22 | Modernatx Inc | Vaccin contre le virus respiratoire syncytial |
WO2018170347A1 (en) | 2017-03-17 | 2018-09-20 | Modernatx, Inc. | Zoonotic disease rna vaccines |
RU2019130167A (ru) | 2017-04-04 | 2021-05-05 | Юниверсити Оф Вашингтон | Самосборные белковые наноструктуры, экспонирующие f-белки парамиксовируса и/или пневмовируса, и их применение |
CA3061278A1 (en) | 2017-05-17 | 2018-11-22 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Methods and compositions for inducing protective immunity against rsv infection |
CN111148509A (zh) | 2017-07-24 | 2020-05-12 | 诺瓦瓦克斯股份有限公司 | 治疗呼吸系统疾病的方法和组合物 |
KR20200053518A (ko) | 2017-09-15 | 2020-05-18 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | Rsv에 대한 면역의 안전한 유도를 위한 방법 |
KR102700187B1 (ko) * | 2017-09-29 | 2024-08-28 | 에스케이바이오사이언스(주) | 가용성 변형 호흡기 융합세포 바이러스 (rsv) f 단백질 항원 |
WO2019148101A1 (en) | 2018-01-29 | 2019-08-01 | Modernatx, Inc. | Rsv rna vaccines |
SG11202009206QA (en) | 2018-03-19 | 2020-10-29 | Novavax Inc | Multivalent influenza nanoparticle vaccines |
WO2020092365A1 (en) * | 2018-10-29 | 2020-05-07 | Binh Ha | Rsv virus-like particles and methods of use thereof |
KR20210091749A (ko) * | 2018-11-13 | 2021-07-22 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | 안정화된 융합전 rsv f 단백질 |
CN109851678A (zh) * | 2019-03-07 | 2019-06-07 | 苏州宇之波生物科技有限公司 | 一种改良的亚稳定态牛呼吸道合胞病毒融合前体f蛋白质及编码的dna分子和其应用 |
MX2021013947A (es) | 2019-05-15 | 2021-12-14 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Tratamiento profilactico de la infeccion por virus sincitial respiratorio con una vacuna basada en adenovirus. |
EP3969044A1 (en) | 2019-05-15 | 2022-03-23 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Co-administration of seasonal influenza vaccine and an adenovirus based respiratory syncytial virus vaccine |
EP4025587A1 (en) | 2019-09-04 | 2022-07-13 | University of Washington | Self-assembling protein nanostructures displaying paramyxovirus and/or pneumovirus f proteins and their use |
CN111303245B (zh) * | 2020-02-21 | 2023-06-27 | 成都奥达生物科技有限公司 | 一种抗合胞病毒膜融合抑制剂 |
MX2022012361A (es) | 2020-04-02 | 2022-10-21 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Composiciones de vacuna estabilizadas. |
BR112022026408A2 (pt) | 2020-06-29 | 2023-01-17 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Combinação vacinal contra infecção pelo vírus sincicial respiratório |
CN112220921B (zh) * | 2020-08-25 | 2022-08-16 | 北京交通大学 | 一种针对呼吸道合胞病毒感染的组合疫苗 |
JP2022060169A (ja) | 2020-10-02 | 2022-04-14 | ファイザー・インク | Rsv fタンパク質生産のための細胞培養工程 |
WO2022175479A1 (en) | 2021-02-19 | 2022-08-25 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Vaccine combinations against respiratory syncytial virus strain a and b infections |
CN114195867B (zh) * | 2021-12-15 | 2024-05-03 | 北京交通大学 | 一种rsv融合前f蛋白、表达质粒、细胞株和rsv疫苗组合物 |
WO2023110618A1 (en) | 2021-12-16 | 2023-06-22 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stabilized pre-fusion hmpv fusion proteins |
WO2024069420A2 (en) | 2022-09-29 | 2024-04-04 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising an rsv f protein trimer |
WO2024067725A1 (zh) * | 2022-09-29 | 2024-04-04 | 北京百邑无忧科技发展有限公司 | 一种融合前构象的呼吸道合胞病毒重组融合蛋白、其制备方法及用途 |
CN116478296B (zh) * | 2022-10-17 | 2024-02-23 | 厦门大学 | 截短的呼吸道合胞病毒f蛋白及其用途 |
WO2024089634A1 (en) | 2022-10-27 | 2024-05-02 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions against influenza and rsv |
TW202424187A (zh) | 2022-10-27 | 2024-06-16 | 美商輝瑞大藥廠 | Rna分子 |
CN116284266B (zh) * | 2022-11-21 | 2024-01-19 | 怡道生物科技(苏州)有限公司 | 突变型呼吸道合胞病毒融合前f蛋白及其应用 |
US20240252612A1 (en) | 2022-12-11 | 2024-08-01 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions and uses thereof |
WO2024155561A2 (en) * | 2023-01-17 | 2024-07-25 | The Scripps Research Institute | Engineered paramyxovirus soluble fusion (f) proteins and related vaccines |
WO2024154048A1 (en) | 2023-01-18 | 2024-07-25 | Pfizer Inc. | Vaccines against respiratory diseases |
CN116785421B (zh) * | 2023-08-21 | 2024-01-09 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) | 一种牛呼吸道合胞体病毒的mRNA疫苗及其应用 |
CN117736278A (zh) * | 2023-12-25 | 2024-03-22 | 英诺特(唐山)生物技术有限公司 | 一种用于检测呼吸道合胞病毒感染的试剂盒及检测方法 |
CN117586357B (zh) * | 2024-01-19 | 2024-07-09 | 北京安百胜生物科技有限公司 | 一种具有免疫原性的呼吸道合胞病毒(rsv)多肽 |
Family Cites Families (86)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4235877A (en) | 1979-06-27 | 1980-11-25 | Merck & Co., Inc. | Liposome particle containing viral or bacterial antigenic subunit |
US4372945A (en) | 1979-11-13 | 1983-02-08 | Likhite Vilas V | Antigen compounds |
IL61904A (en) | 1981-01-13 | 1985-07-31 | Yeda Res & Dev | Synthetic vaccine against influenza virus infections comprising a synthetic peptide and process for producing same |
DE3584341D1 (de) | 1984-08-24 | 1991-11-14 | Upjohn Co | Rekombinante dna-verbindungen und expression von polypeptiden wie tpa. |
US5168062A (en) | 1985-01-30 | 1992-12-01 | University Of Iowa Research Foundation | Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence |
US5057540A (en) | 1987-05-29 | 1991-10-15 | Cambridge Biotech Corporation | Saponin adjuvant |
NZ230747A (en) | 1988-09-30 | 1992-05-26 | Bror Morein | Immunomodulating matrix comprising a complex of at least one lipid and at least one saponin; certain glycosylated triterpenoid saponins derived from quillaja saponaria molina |
HU212924B (en) | 1989-05-25 | 1996-12-30 | Chiron Corp | Adjuvant formulation comprising a submicron oil droplet emulsion |
FR2705686B1 (fr) | 1993-05-28 | 1995-08-18 | Transgene Sa | Nouveaux adénovirus défectifs et lignées de complémentation correspondantes. |
JP3816518B2 (ja) | 1994-06-10 | 2006-08-30 | ジェンベク、インコーポレイティッド | 相補的なアデノウイルスベクター系と細胞系 |
US5851806A (en) | 1994-06-10 | 1998-12-22 | Genvec, Inc. | Complementary adenoviral systems and cell lines |
US5559099A (en) | 1994-09-08 | 1996-09-24 | Genvec, Inc. | Penton base protein and methods of using same |
US5965541A (en) | 1995-11-28 | 1999-10-12 | Genvec, Inc. | Vectors and methods for gene transfer to cells |
US5846782A (en) | 1995-11-28 | 1998-12-08 | Genvec, Inc. | Targeting adenovirus with use of constrained peptide motifs |
US5786464C1 (en) | 1994-09-19 | 2012-04-24 | Gen Hospital Corp | Overexpression of mammalian and viral proteins |
AUPM873294A0 (en) | 1994-10-12 | 1994-11-03 | Csl Limited | Saponin preparations and use thereof in iscoms |
US5837520A (en) | 1995-03-07 | 1998-11-17 | Canji, Inc. | Method of purification of viral vectors |
DK0833934T4 (da) | 1995-06-15 | 2012-11-19 | Crucell Holland Bv | Pakningssystemer til human rekombinant adenovirus til anvendelse ved genterapi |
US5837511A (en) | 1995-10-02 | 1998-11-17 | Cornell Research Foundation, Inc. | Non-group C adenoviral vectors |
CA2177085C (en) | 1996-04-26 | 2007-08-14 | National Research Council Of Canada | Adenovirus e1-complementing cell lines |
AU3447097A (en) | 1996-07-01 | 1998-01-21 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Method for producing recombinant adenovirus |
FR2751343B1 (fr) | 1996-07-16 | 1998-12-18 | Transgene Sa | Procede de conservation de virus recombinants infectieux, suspension aqueuse virale et utilisation comme medicament |
WO1998010087A1 (en) | 1996-09-06 | 1998-03-12 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Chimpanzee adenovirus vectors |
US7732129B1 (en) | 1998-12-01 | 2010-06-08 | Crucell Holland B.V. | Method for the production and purification of adenoviral vectors |
ATE550429T1 (de) | 1996-11-20 | 2012-04-15 | Crucell Holland Bv | Adenovirus-zusammensetzungen erhältlich durch ein verbessertes produktions- und reinigungsverfahren |
US6261823B1 (en) | 1996-12-13 | 2001-07-17 | Schering Corporation | Methods for purifying viruses |
WO1998039411A1 (en) | 1997-03-04 | 1998-09-11 | Baxter International Inc. | Adenovirus e1-complementing cell lines |
US6020191A (en) | 1997-04-14 | 2000-02-01 | Genzyme Corporation | Adenoviral vectors capable of facilitating increased persistence of transgene expression |
US6210683B1 (en) | 1997-09-05 | 2001-04-03 | Merck & Co., Inc. | Stabilizers containing recombinant human serum albumin for live virus vaccines |
CA2320419C (en) | 1998-02-17 | 2011-02-08 | Schering Corporation | Compositions comprising viruses and methods for concentrating virus preparations |
US5981225A (en) | 1998-04-16 | 1999-11-09 | Baylor College Of Medicine | Gene transfer vector, recombinant adenovirus particles containing the same, method for producing the same and method of use of the same |
US6113913A (en) | 1998-06-26 | 2000-09-05 | Genvec, Inc. | Recombinant adenovirus |
EP1977764A1 (en) | 1998-11-16 | 2008-10-08 | Introgen Therapeutics, Inc. | Formulation of adenovirus for gene therapy |
US6225289B1 (en) | 1998-12-10 | 2001-05-01 | Genvec, Inc. | Methods and compositions for preserving adenoviral vectors |
DE60045138D1 (de) | 1999-05-17 | 2010-12-02 | Crucell Holland Bv | Rekombinantes Adenovirus des Ad26-Serotyps |
US6913922B1 (en) | 1999-05-18 | 2005-07-05 | Crucell Holland B.V. | Serotype of adenovirus and uses thereof |
US6492169B1 (en) | 1999-05-18 | 2002-12-10 | Crucell Holland, B.V. | Complementing cell lines |
DE19955558C2 (de) | 1999-11-18 | 2003-03-20 | Stefan Kochanek | Permanente Amniozyten-Zelllinie, ihre Herstellung und Verwendung zur Herstellung von Gentransfervektoren |
CA2399321C (en) | 2000-03-07 | 2013-04-30 | Robert K. Evans | Adenovirus formulations |
MXPA02011018A (es) | 2000-05-08 | 2004-08-19 | Davisco Internat Foods Inc | Tratamiento enzimatico de proteinas de suero para la produccion de peptidos de antihipertension, los productos resultantes y el tratamiento de hipertension en mamiferos. |
AUPR878401A0 (en) | 2001-11-09 | 2001-12-06 | Biota Holdings Ltd | Methods for identifying or screening anti-viral agents |
EP1453536A4 (en) | 2001-12-12 | 2009-08-26 | Mayne Pharma Int Pty Ltd | COMPOSITION FOR PRESERVING VIRUSES |
IL162404A0 (en) | 2002-01-18 | 2005-11-20 | Schering Ag | Stabilized formulations of adenovirus |
US20030180936A1 (en) | 2002-03-15 | 2003-09-25 | Memarzadeh Bahram Eric | Method for the purification, production and formulation of oncolytic adenoviruses |
AU2003271738C1 (en) | 2002-04-25 | 2008-04-17 | Crucell Holland B.V. | Stable adenoviral vectors and methods for propagation thereof |
ATE447037T1 (de) | 2002-04-25 | 2009-11-15 | Crucell Holland Bv | Mittel und verfahren zur herstellung von adenovirusvektoren |
PT1506287E (pt) | 2002-05-14 | 2007-07-17 | Merck & Co Inc | Métodos de purificação de adenovírus |
SE0202110D0 (sv) | 2002-07-05 | 2002-07-05 | Isconova Ab | Iscom preparation and use thereof |
EP1585964A4 (en) | 2002-08-28 | 2008-07-16 | Introgen Therapeutics Inc | CHROMATOGRAPHIC METHODS FOR PURIFYING ADENOVIRUSES |
SE0301998D0 (sv) | 2003-07-07 | 2003-07-07 | Isconova Ab | Quil A fraction with low toxicity and use thereof |
EP1711518B1 (en) | 2004-01-23 | 2009-11-18 | Istituto di Richerche di Biologia Molecolare P. Angeletti S.p.A. | Chimpanzee adenovirus vaccine carriers |
EP1718738A2 (en) | 2004-02-23 | 2006-11-08 | Crucell Holland B.V. | Virus purification methods |
ATE412737T1 (de) | 2005-04-11 | 2008-11-15 | Crucell Holland Bv | Virusreinigung mit ultrafiltration |
US20100143302A1 (en) | 2006-03-16 | 2010-06-10 | Crucell Holland B.V. | Recombinant Adenoviruses Based on Serotype 26 and 48, and Use Thereof |
US20090110695A1 (en) | 2006-03-27 | 2009-04-30 | Menzo Jans Emko Havenga | Compositions Comprising a Recombinant Adenovirus and an Adjuvant |
US8772256B2 (en) | 2006-11-30 | 2014-07-08 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Codon modified immunogenic compositions and methods of use |
US7901388B2 (en) | 2007-07-13 | 2011-03-08 | Bacoustics, Llc | Method of treating wounds by creating a therapeutic solution with ultrasonic waves |
EP4206231A1 (en) * | 2007-12-24 | 2023-07-05 | ID Biomedical Corporation of Quebec | Recombinant rsv antigens |
WO2010014975A2 (en) | 2008-08-01 | 2010-02-04 | Academia Sinica | Use of microrna signatures for assessing risk levels of neuroblastoma patients |
CA2742474C (en) | 2008-11-03 | 2016-05-31 | Crucell Holland B.V. | Method for the production of adenoviral vectors |
BRPI1008018A2 (pt) | 2009-02-02 | 2016-03-15 | Okairos Ag | ácidos nucleicos de adenovírus símio e sequências de aminoácidos, vetores contendo os mesmos e uso dos mesmos |
MX2012000036A (es) | 2009-06-24 | 2012-02-28 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vacuna. |
WO2010149745A1 (en) | 2009-06-24 | 2010-12-29 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Recombinant rsv antigens |
HRP20220756T1 (hr) * | 2009-07-15 | 2022-09-02 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Proteinski pripravci rsv f i postupci za izradu istih |
IN2012DN01328A (ja) | 2009-08-13 | 2015-06-05 | Crucell Holland Bv | |
MX2012004222A (es) | 2009-10-15 | 2012-06-08 | Crucell Holland Bv | Metodo para purificacion de particulas de adenovirus. |
AU2010305768B2 (en) | 2009-10-15 | 2015-05-14 | Crucell Holland B.V. | Process for adenovirus purification from high cell density cultures |
WO2011050168A2 (en) * | 2009-10-21 | 2011-04-28 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Servic | Rsv immunogens, antibodies and compositions thereof |
AU2011214262B2 (en) | 2010-02-15 | 2015-05-21 | Crucell Holland B.V. | Method for the production of Ad26 adenoviral vectors |
CN103097412B (zh) * | 2010-07-09 | 2016-08-10 | 克鲁塞尔荷兰公司 | 抗人呼吸道合胞病毒(rsv)抗体以及使用方法 |
PL2707385T3 (pl) | 2011-05-13 | 2018-03-30 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Prefuzyjne antygeny RSV F |
AU2013231423B2 (en) | 2012-03-12 | 2018-10-04 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Batches of recombinant adenovirus with altered terminal ends |
US8932607B2 (en) | 2012-03-12 | 2015-01-13 | Crucell Holland B.V. | Batches of recombinant adenovirus with altered terminal ends |
AP2014007993A0 (en) | 2012-03-22 | 2014-10-31 | Crucell Holland Bv | Vaccine against RSV |
JP2013247240A (ja) | 2012-05-25 | 2013-12-09 | Gigaphoton Inc | レーザ装置 |
WO2014005643A1 (en) | 2012-07-05 | 2014-01-09 | Okairos Ag | Novel prime-boosting regimens involving immunogenic polypeptides encoded by polynucleotides |
WO2014160463A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Prefusion rsv f proteins and their use |
US9738689B2 (en) * | 2013-03-13 | 2017-08-22 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Prefusion RSV F proteins and their use |
CA2908878C (en) | 2013-04-15 | 2021-06-29 | Crucell Holland B.V. | Human antibodies binding to rsv g protein |
EA035846B1 (ru) | 2013-04-15 | 2020-08-20 | Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. | Антитела человека, связывающиеся с g-белком rsv |
PL2988780T3 (pl) | 2013-04-25 | 2019-06-28 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stabilizowane rozpuszczalne prefuzyjne polipeptydy F RSV |
WO2014202570A1 (en) | 2013-06-17 | 2014-12-24 | Crucell Holland B.V. | Stabilized soluble pre-fusion rsv f polypeptides |
JP6685903B2 (ja) | 2013-07-25 | 2020-04-22 | アバター・メディカル・エルエルシー | 立体構造的に安定化されたrsv融合前fタンパク質 |
CA2923352C (en) | 2013-09-19 | 2022-05-03 | Crucell Holland B.V. | Stable adenovirus formulations |
CA3018139A1 (en) * | 2016-04-05 | 2017-10-12 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Vaccine against rsv |
KR102506895B1 (ko) * | 2016-04-05 | 2023-03-08 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | 안정화된 용해성 융합-전 rsv f 단백질 |
-
2014
- 2014-04-24 PL PL14719022T patent/PL2988780T3/pl unknown
- 2014-04-24 TR TR2019/02513T patent/TR201902513T4/tr unknown
- 2014-04-24 RS RS20190170A patent/RS58436B1/sr unknown
- 2014-04-24 EP EP14719022.7A patent/EP2988780B1/en active Active
- 2014-04-24 AP AP2015008815A patent/AP2015008815A0/xx unknown
- 2014-04-24 AU AU2014259474A patent/AU2014259474B2/en active Active
- 2014-04-24 LT LTEP14719022.7T patent/LT2988780T/lt unknown
- 2014-04-24 HU HUE14719022A patent/HUE041659T2/hu unknown
- 2014-04-24 ME MEP-2019-73A patent/ME03442B/me unknown
- 2014-04-24 CA CA2910067A patent/CA2910067C/en active Active
- 2014-04-24 US US14/786,955 patent/US10899800B2/en active Active
- 2014-04-24 MY MYPI2015703748A patent/MY181066A/en unknown
- 2014-04-24 SI SI201431056T patent/SI2988780T1/sl unknown
- 2014-04-24 ES ES14719022T patent/ES2715378T3/es active Active
- 2014-04-24 MX MX2015014890A patent/MX361774B/es active IP Right Grant
- 2014-04-24 EA EA201592048A patent/EA035522B1/ru unknown
- 2014-04-24 EA EA202090675A patent/EA039803B1/ru unknown
- 2014-04-24 KR KR1020157032796A patent/KR102236497B1/ko active IP Right Grant
- 2014-04-24 PT PT14719022T patent/PT2988780T/pt unknown
- 2014-04-24 CN CN201480023229.5A patent/CN105188745B/zh active Active
- 2014-04-24 JP JP2016509467A patent/JP6469081B2/ja active Active
- 2014-04-24 DK DK14719022.7T patent/DK2988780T3/en active
- 2014-04-24 PE PE2015002278A patent/PE20151867A1/es unknown
- 2014-04-24 WO PCT/EP2014/058353 patent/WO2014174018A1/en active Application Filing
- 2014-04-24 SG SG11201508567XA patent/SG11201508567XA/en unknown
- 2014-04-24 EP EP18205858.6A patent/EP3488864A1/en active Pending
- 2014-04-24 CN CN201910911639.8A patent/CN110590916A/zh active Pending
- 2014-04-25 AR ARP140101738A patent/AR096113A1/es unknown
- 2014-04-25 TW TW103115087A patent/TWI663175B/zh active
-
2015
- 2015-10-13 PH PH12015502377A patent/PH12015502377A1/en unknown
- 2015-10-20 IL IL242186A patent/IL242186B/en active IP Right Grant
- 2015-10-22 CL CL2015003124A patent/CL2015003124A1/es unknown
- 2015-10-23 ZA ZA2015/07912A patent/ZA201507912B/en unknown
-
2016
- 2016-07-13 HK HK16108218.1A patent/HK1220124A1/zh unknown
-
2018
- 2018-11-29 MY MYPI2018002243A patent/MY201791A/en unknown
-
2019
- 2019-01-28 HR HRP20190175TT patent/HRP20190175T1/hr unknown
- 2019-03-13 CY CY20191100303T patent/CY1121600T1/el unknown
-
2020
- 2020-12-18 US US17/126,128 patent/US20210101940A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-08-23 US US17/821,694 patent/US20230265127A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6469081B2 (ja) | 安定化された可溶性融合前rsvfポリペプチド | |
JP6679475B2 (ja) | 安定化された可溶性融合前rsv fポリペプチド | |
KR20180027560A (ko) | Rsv에 대한 백신 | |
BR112021008975A2 (pt) | proteínas f do rsv pré-fusão estabilizadas | |
OA17539A (en) | Stabilized soluble prefusion RSV F polypeptides. | |
NZ752808A (en) | Stabilized soluble prefusion rsv f polypeptides | |
NZ713371B2 (en) | Stabilized soluble prefusion rsv f polypeptides | |
NZ752808B2 (en) | Stabilized soluble prefusion rsv f polypeptides | |
NZ714594B2 (en) | Stabilized soluble pre-fusion rsv f polypeptides | |
OA17598A (en) | Stabilized soluble pre-fusion RSV F polypeptides | |
BR112015026610B1 (pt) | Polipeptídeo de fusão do vírus sincicial respiratório de pré-fusão recombinante, composição e método para estabilizar a conformação de pré- fusão de um polipeptídeo |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170206 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20170413 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20170516 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180130 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20180501 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180622 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180911 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181210 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20181225 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190115 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6469081 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |