JP6246894B2 - L−イソロイシンを生産する微生物及びこれを用いたl−イソロイシン製造方法 - Google Patents
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Description
本発明の他の目的は、前記変異株を用いてL−イソロイシンを製造する方法を提供することである。
好ましくは、L−イソロイシン製造方法は、前記変異株を培養した培養液からL−イソロイシンを回収する工程をさらに含むことができる。
好ましくは、前記変異株は突然変異方法を行ってなされる。
本発明の変異株の製造方法は、L−イソロイシン誘導体及びL−スレオニン誘導体が同時に耐性を有する変異株を選別し、既存の菌株より高収率のコリネバクテリウムグルタミカム変異株を選別することができる。
[発明を実施するための形態]
以下、本発明を下記実施例により詳しく説明する。ただし、下記実施例は本発明を例示するためのものに過ぎず、本発明の内容が下記実施例により限定されるものではない。
L−イソロイシンの生産能が向上した微生物変異株を得るために、下記の方法を用いて微生物の変異を誘導した。
<活性化培地>
肉汁1%、ポリペプトン1%、ソディウムクロライド0.5%、酵母抽出物1%、寒天2%、pH7.2
<種培地>
ブドウ糖5%、バクトペプトン1%、ソディウムクロライド0.25%、酵母抽出物1%、尿素0.4%、pH7.2
<最小培地>
ブドウ糖1.0%、硫酸アンモニウム0.4%、硫酸マグネシウム0.04%、リン酸第1カリウム0.1%、尿素0.1%、サイアミン0.001%、ビオチン200μg/L、寒天2%、pH7.2
実施例2:L−イソロイシン生産用変異株のL−イソロイシンの生産性の調査
前記実施例1で得られた高濃度のthiaile、ileHx及びAHVの共通耐性変異株であるコリネバクテリウムグルタミカムKCJI−38(KCCM11248P)のL−イソロイシン生産性を確認するために、下記のような方法で培養した。
<生産培地>
ブドウ糖10%、酵母抽出物0.2%、硫酸アンモニウム1.6%、第1リン酸カリウム0.1%、0.1%、硫酸鉄7水塩10mg/l、硫酸マンガン1水塩10mg/l、ビオチン200μg/l、pH7.2
培養終了後、液体高速クロマトグラフィを用いてL−イソロイシンの生産量を測定し、実験した各菌株に対する培養液中のL−イソロイシン濃度は下記表1に示した。
Claims (5)
- L−イソロイシン生産用コリネバクテリウムグルタミカム(Corynebacterium glutamicum)変異株KCCM11248P。
- 前記変異株が、4−チアイソロイシン(4−thiaisoleucine,thiaile)、イソロイシン−ヒドロキサメート(isoleucine−hydroxamate,ileHx)、およびα−アミノ−β−ヒドロキシノルバリン(α−amino−β−hydroxynorvaline,AHV)に対して耐性を有する、請求項1に記載の変異株KCCM11248P。
- 請求項1または2に記載の変異株KCCM11248Pを培養する工程を含むL−イソロイシン製造方法。
- 前記変異株KCCM11248Pの培養液からL−イソロイシンを回収する工程を含む、請求項3に記載の製造方法。
- 培養温度が、20〜45℃、好気の条件下で10〜160時間培養される、請求項3に記載の製造方法。
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