JP6219444B2 - プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 - Google Patents
プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6219444B2 JP6219444B2 JP2016090380A JP2016090380A JP6219444B2 JP 6219444 B2 JP6219444 B2 JP 6219444B2 JP 2016090380 A JP2016090380 A JP 2016090380A JP 2016090380 A JP2016090380 A JP 2016090380A JP 6219444 B2 JP6219444 B2 JP 6219444B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- pullulan
- mass
- containing powder
- content
- powder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
- C12P19/10—Pullulan
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0018—Pullulan, i.e. (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-glucan; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
- A61K8/0216—Solid or semisolid forms
- A61K8/022—Powders; Compacted Powders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
- A61K8/73—Polysaccharides
- A61K8/732—Starch; Amylose; Amylopectin; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
- C08L5/02—Dextran; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/10—General cosmetic use
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Birds (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Artificial Filaments (AREA)
Description
<S−2株及び変異株MA446株の培養性状>
ポテトデキストロース寒天培地(ポテト浸出液末4.0g、ブドウ糖20.0g、寒天15.0g、精製水1,000ml、pH5.6)上で27℃で好気的に生育し、暗黒色の色素を産生する。変形して移動する様子や子実体の形成は認められない。有性生殖は観察されず、菌糸に隔壁が認められる。生育約4日以降に、単性房状出芽型の分生子を形成し、直鎖状の菌糸先端もしくは中間から出芽型分生子を生じる。成熟した分生子は単胞として存在し、無色、滑面。
オーレオバシディウム・プルランス S−2株の分生子に紫外線照射による突然変異処理を施したものを、ポテトデキストロース寒天平板に播種し、27℃で培養して生育したコロニーを変異株として分離した。分離した変異株及び親株であるS−2株を、それぞれ、酸糖化水飴(DE48、無水物換算でグルコースを約27%、マルトースを約17%含有、株式会社林原商事販売)を固形分として10.0質量/容積%、リン酸水素2カリウム0.2質量/容積%、ペプトン0.2質量/容積%、塩化ナトリウム0.2質量/容積%、硫酸マグネシウム7水和物0.04質量/容積%、及び硫酸第一鉄7水和物0.001質量/容積%を含有する液体選択培地(pH7.0)に植菌し、27℃で3日間振盪培養した。それぞれの培養物から遠心分離にて菌体を除去して得た培養上清を水で10倍希釈した。それぞれの一部をとり、それらに3倍量のメタノール(試薬特級、和光純薬工業株式会社製)を加えて75容積%水性メタノールとし、よく混和することによりプルランを沈殿させた後、遠心分離して得た上清をさらに水で10倍希釈したものを夾雑糖質測定用の試験液とした。なお、該試験液は、培養上清が400倍に希釈されたものである。別途、濃度0.01質量/容積%のグルコース水溶液を標準液として用意し、水をブランク対照として、各試験液について、『食品添加物公定書』(第8版)、日本食品添加物協会発行、2007年、572−573頁(『プルラン』の項)に記載の方法に準じてアントロン−硫酸法に基づく呈色反応を起こさせ、分光光度計を用いて波長620nmにおける吸光度を測定し、下記の式1により、培養上清における夾雑糖質濃度(%)を求めた。また、上記の培養上清の10倍希釈液をさらに水で100倍希釈したものを全糖質測定用の試験液とし、上記と同様にアントロン−硫酸法に基づく呈色反応を起こさせ、波長620nmにおける吸光度を測定して、下記の式2により、培養上清における全糖質濃度(%)を求めた。下記の式3により、全糖質濃度から夾雑糖質濃度を減じることによりプルラン濃度(%)を求めた。
夾雑糖質濃度(%)
=[{(Ak−Ao)×400}/{(As−Ao)×100}]×100
ただし、Ak:夾雑糖質測定用の試験液の吸光度、As:標準液の吸光度、Ao:水(対照)の吸光度。
全糖質濃度(%)
=[{(Az−Ao)×1000}/{(As−Ao)×100}]×100
ただし、Az:全糖質測定用の試験液の吸光度、As、Aoは式1におけると同じ。
プルラン濃度(%)=全糖質濃度(%)−夾雑糖質濃度(%)
夾雑糖質率(%)
={夾雑糖質濃度(%)/培地の炭素源濃度(%)}×100
プルラン対糖収率(%)
={プルラン濃度(%)/培地の炭素源濃度(%)}×100
<実験2−1:プルラン産生培地に用いる炭素源の検討>
MA446株を、DEの異なる炭素源を用いた培地1乃至5でそれぞれ培養してプルラン含有粉末を製造し、その性質を調べた。培地1乃至5で用いた炭素源はそれぞれ以下のとおりである。なお、用いた酸糖化水飴には、無水物換算でグルコースが約25質量%、マルトースが約16質量%含まれている。
・培地1:「水飴」(酸糖化水飴、株式会社林原商事販売、DE約42)
・培地2:グルコース(試薬特級、和光純薬工業株式会社製)(以下、培地3乃至5において同じ)、マルトース(「マルトースHHH」、純度99%以上、林原生物化学研究所製)(以下、培地3乃至4において同じ)、及び水飴(酵素糖化水飴『マルトラップ』、株式会社林原商事販売、DE47を固形分の質量比1:1:3で混合したもの(混合物のDEは約58)
・培地3:グルコース、マルトース、及び水飴(酵素糖化水飴『マルトラップ』、株式会社林原商事販売、DE47)を固形分の質量比1:1:1で混合したもの(混合物のDEは約66)
・培地4:グルコース、マルトース、及び水飴(酵素糖化水飴『マルトラップ』、株式会社林原商事販売、DE47)を固形分の質量比4:1:1で混合したもの(混合物のDE約83)
・培地5:グルコースのみ(DE約100)
ポテトデキストロース寒天スラント上で27℃で培養したMA446株を、スクロース10.0質量/容積%、リン酸水素2カリウム0.2質量/容積%、ペプトン0.2質量/容積%、塩化ナトリウム0.2質量/容積%、硫酸マグネシウム7水和物0.04質量/容積%、及び硫酸第一鉄7水和物0.001質量/容積%を含有する液体培地(pH7.0)で27℃、230rpmで48時間回転振盪培養したものを種培養液とした。
上記培地1乃至5を用いて製造したプルラン含有粉末、及び対照のプルラン含有粉末のそれぞれについて、前述した『食品添加物公定書(第8版)』、日本添加物協会発行、2007年、572−573頁(『プルラン』の項)に記載の純度試験に準じた下記の方法により、夾雑糖質含量及び、プルラン含量を求めた。すなわち、各プルラン含有粉末0.8gを水100mlに溶解し、試料原液とした。各試料原液1mlに水を加えて50mlとしたものを標準原液とした(試料原液は50倍に希釈されている)。また、各試料原液1mlに塩化カリウム飽和溶液0.1mlを添加した後、メタノール3mlを添加してよく混和し、4℃で15,700g×10分間遠心分離して得られた上清を試料液とした(試料原液は4.1倍に希釈されている)。上記のようにして調製した標準原液、試料液、及び対照の水についてアントロン−硫酸法による反応を起こさせ、620nmにおけるそれぞれの吸光度(それぞれ、At、As及びAоとする)を測定し、下記式により、夾雑糖質含量、すなわち、75容積%水性メタノールに可溶である夾雑糖質画分中に含まれアントロン−硫酸法に基づいて求められる夾雑糖質含量、及びプルラン含量を求めた。測定結果を表2に示した。なお、本実験においては、夾雑糖質含量及びプルラン含量は、各試料液と各標準原液の吸光度の比に基づいて求められたものであり、D−グルコースを標準物質として用いることによりD−グルコース換算量として求められたものではないが、D−グルコース換算量として求められた値と一致するので、それぞれの含量を質量%で表記した。
夾雑糖質含量(%)
=[{(At−Ao)×4.1}/{(As−Aо)×50}]×100
={(At−Ao)/(As−Aо)}×8.2
ただし、At:試料液の吸光度、As:標準原液の吸光度、Ao:水(対照)の吸光度。
プルラン含量(%)=100(%)−夾雑糖質含量(%)
実験2−2で得られた各プルラン含有粉末及び対照のプルラン含有粉末を、それぞれ脱イオン水に溶解して20質量/容積%の水溶液とし、62.5℃にて静置し、脱泡した。これら脱泡した各水溶液を、それぞれ適量、塩化ビニル製の平板上に滴下して流延させ、25℃にて相対湿度30%の雰囲気で一夜乾燥させて、厚さ約100μmのフィルムを成形した。成形したフィルムを上記平板から剥離し、直径19mmの円形に切り取り、これを被験試料とし、室温で相対湿度22%の条件下で5日間置いて調湿したのち、突刺し強度試験に供した。
実験2−3において、MA446株を培養したときにプルラン含量が比較的高いプルラン含有粉末が得られた培地である培地2、3、4を用い、親株であるS−2株、及び公知の菌株であるオーレオバシディウム・プルランス IFO6353株を実験2−3におけると同様に培養し、同様に培養物を処理して、プルラン含有粉末を製造した。製造された各プルラン含有粉末におけるプルラン含量及び夾雑糖質含量を実験2−3と同様にして測定するとともに、実験2−4におけると同様にして、各プルラン含有粉末を成形して得たフィルムについて、その突刺し破断強度及びひび割れ発生率を求めた。結果を表4に示した。なお、表4におけるMA446株についての値は、表2及び表3の対応する欄から転記したものである。
実験2−4において、突刺し破断強度が最も高いフィルムが得られたプルラン含有粉末、すなわち、MA446株を培地3で培養して得た培養物から製造されたプルラン含有粉末を被験粉末とし、この被験粉末について、GPCによる分子量分布の測定を行なった。また、被験粉末について、その75容積%水性メタノールに可溶の夾雑糖質を調製し、そのGPC分析を行なった。さらに、被験粉末に含まれるマンニトールの含量をHPLCにより測定した。併せて、市販されている汎用のプルラン含有粉末である『食品添加物プルラン』(株式会社林原商事販売)を対照粉末とし、この対照粉末について同様の測定及び分析を行った。なお、対照粉末については、プルラン含量及び夾雑糖質含量を上記実験2−3におけると同様にアントロン−硫酸法で測定し、その結果を表5に示した。表5中、被験粉末についてのプルラン含量及び夾雑糖質含量は、表2の対応する欄から転記したものである。各測定の詳細は以下のとおりである。
被験粉末及び対照粉末を、それぞれ、2質量/容積%の水溶液とし、等量の20mMリン酸緩衝液pH7.0を加え、メンブランフィルターにて濾過したものを、GPC分析に供した。GPC分析は、カラムにTSK−GEL α−M(内径7.8mmφ×長さ300mm、東ソー株式会社製)を2本直列に繋いだもの、溶離液に10mMリン酸緩衝液pH7.0、検出器に示差屈折計を用いて、温度40℃、流速0.3ml/分にて行なった。GPC溶出パターンからプルランの質量平均分子量及び数平均分子量を算出した。分子量と溶出時間との関係は、グルコース、マルトトリオース、及び分子量測定用プルラン標準品P−2、P−3、P−5、P−10、P−20、P−50、P−100、P−200、P−400、P−800、P−1600、及びP−2500(昭和電工株式会社販売)を用いて求めた。被験粉末及び対照粉末のGPC溶出パターンを、それぞれ、図1及び図2に示した。また、質量平均分子量およびMw/Mnの値を表5に示した。
各粉末について、75容積%水性メタノールに可溶の夾雑糖質画分は以下のようにして調製した。すなわち、被験粉末及び対照粉末を、それぞれ10質量/容積%の水溶液とし、それに3倍量のメタノールを加えて直ちによく撹拌し、4℃で15,700g×10分間の条件で遠心分離した。上清をエバポレータで乾固したのち、精製水を加えて溶解し乾固する操作を2回繰り返してメタノールを除去した後、再度精製水に溶解し、0.45μmのメンブランフィルターにて濾過したものを、75容積%水性メタノール可溶の夾雑糖質画分として得た。得られた夾雑糖質画分を適宜希釈し、上記分子量分布の分析と同じ条件でGPC分析を行なった。被験粉末及び対照粉末の夾雑糖質画分のGPC溶出パターンを、それぞれ図3及び図4に示す。
なお、前述のとおりマンニトールはアントロン−硫酸法により測定されないため夾雑糖質には含まれないが、夾雑糖質画分のGPC分析においては保持時間約71分に認められるピークとして表れる。よって、図3及び図4において得られた溶出区分全体の面積からマンニトールに相当するピークの面積を除いたものを、アントロン−硫酸法により測定される夾雑糖質の面積とし、この面積に対するグルコース重合度3乃至90の糖質に相当するピークの面積の割合を求め、アントロン−硫酸法により測定される夾雑糖質中のグルコース重合度3乃至90の糖質の含量(「夾雑糖質中のDP3−90の糖質含量(%)」)として、表5に示した。さらに、この「夾雑糖質中のDP3−90の糖質含量(%)」に、別途、アントロン−硫酸法で求められた粉末全体に含まれる全糖質含量に対する夾雑糖質含量(%)を乗じて、「プルラン含有粉末中のDP3−90の糖質含量(%)」とし、併せて、表5に示した。すなわち、表5における「プルラン含有粉末中のDP3−90の糖質含量(%)」の値は、表5に示すGPC分析によって得られた「夾雑糖質中のDP3−90の糖質含量(%)」の値に、同じく表5に示すアントロン−硫酸法によって得られた夾雑糖質含量(%)の値を乗じることによって計算で求められた数値である。
被験粉末及び対照粉末を、HPLCにより分析し、プルラン含有粉末中のマンニトールの含量を求めた。HPLC分析は、カラムにMCI GEL CK08EC(内径8mmφ×長さ300mm、三菱化学株式会社製)、溶離液に精製水、検出器に示差屈折計を用いて、温度75℃、溶離液の流速0.6ml/分の条件にて行ない、濃度既知のマンニトールを標準とし、ピーク面積からプルラン含有粉末中のマンニトール含量を、無水物換算で求めた。結果を、表5に示す。
実験4で使用した被験粉末と対照粉末とを、表6に示す割合で混合することにより、夾雑糖質含量の異なる被験試料1乃至10を調製した。各被験試料におけるプルラン含量、夾雑糖質含量及びグルコース重合度3乃至90の糖質の含量を、表6に示した。各被験試料を用いてフィルムを成形し、その強度を比較した。フィルムの成形、並びに突刺し破断強度の測定は、実験2−4におけると同様の方法で行なった。結果を表7に示す。
MA446株を実験2に記載の方法で培地3を用いて培養して得たプルラン含有粉末2gを、18gの脱イオン水で加熱溶解し、それを平板上に流延し、30℃で乾燥し、さらに相対湿度22%の雰囲気下で24時間調湿して、厚さが約500μmのフィルムを成形した。得られたフィルムを、シンクロトロン放射光を線源に用いたX線小角散乱(SAXS)分析を行なった。測定は、大型放射光施設「SPring−8」(兵庫県佐用郡佐用町光都1−1−1)内の「兵庫県ビームライン(BL08B2)」を用い、下記の条件で行なった。特に、散乱角が0.1°以下の散乱を観測するため、カメラ長を長くした条件でも測定した(下記の<SAXS(Long)>)。
<SAXS(Long)>
波長:1.50Å
カメラ長:6114mm
検出器:イメージングプレート
画素サイズ:200μm
測定角度:0.001乃至0.1°
露光時間:300秒
標準試料:コラーゲン
データ処理装置:Rigaku R−AXIS
<SAXS(Short)>
波長:1.00Å
カメラ長:1342mm
検出器:イメージングプレート
画素サイズ:200μm
測定角度:0.01乃至2°
露光時間:300秒
標準試料:ベヘン酸銀
データ処理装置:Rigaku R−AXIS
MA446株を実験2に記載の方法で培地3を用いて培養して得たプルラン含有粉末、及び実験4で用いた対照のプルラン含有粉末を、それぞれ10質量/容積%の水溶液とし、それに3倍量のメタノールを加え直ちによく撹拌し、4℃で15,700g×10分間遠心分離した。沈殿を再度水に溶解した後、上記操作を再度行なった。得られた沈殿を乾燥後、1質量/容積%となるように20mM酢酸緩衝液pH5.0に溶解したものに、プルラナーゼ『アマノ 3』(アマノエンザイム製)をプルラン含有粉末1g当たり5単位添加し、53℃で48時間反応させた。反応液を脱塩後適宜希釈し、HPLC分析により、マルトトリオース及びマルトテトラオースの生成量を求めた。HPLC分析は、カラムにMCI GEL CK04SS(内径8mmφ×長さ300mm、三菱化学株式会社製)、溶離液に精製水、検出器に示差屈折計を用いて、温度75℃、流速0.6ml/分の条件にて行ない、得られたクロマトグラムにおけるマルトトリオース及びマルトテトラオースそれぞれのピーク面積からそれぞれの含量を算出し、その値からモル比を求めた。結果を表8に示した。
炭素源としてグルコース50質量部、マルトース50質量部、水飴(酵素糖化水飴『マルトラップ』、固形分80%、DE約47、株式会社林原商事販売)50質量部を含み(炭素源としてのDE約67)、リン酸水素2カリウム2質量部、ペプトン2質量部、塩化ナトリウム2質量部、硫酸マグネシウム7水和物0.4質量部、及び硫酸第一鉄7水和物0.01質量部及び水を加えて計1,000質量部とした培地(pH7.0)に、同培地にて27℃で48時間種培養したオーレオバシディウム・プルランス MA446株菌体を接種し、通気・撹拌しながら27℃で72時間培養した。炭素源として用いた糖質に対するプルラン対糖収率は72.1質量%であった。得られた培養物から遠心分離により菌体を除去後、活性炭を用いた脱色濾過、イオン交換樹脂による脱塩により精製し、濃縮、乾燥及び粉末化を行い、白色で粉末としての流動性に優れたプルラン含有粉末を得た。
炭素源として、グルコース20質量部、マルトース20質量部、及び水飴(酸糖化水飴、固形分75%、DE約42、株式会社林原商事販売)100質量部(炭素源としてのDE約54)を用いた以外は、実施例1と同様にして、プルラン含有粉末を得た。炭素源として用いた糖質に対するプルラン対糖収率は70.4質量%であった。得られた培養物から遠心分離により菌体を除去後、活性炭を用いた脱色濾過、イオン交換樹脂による脱塩により精製し、濃縮、乾燥及び粉末化を行い、白色で粉末としての流動性に優れたプルラン含有粉末を得た。
脱イオン水750質量部に、実施例1で調製したプルラン含有粉末を250質量部、剥離剤として界面活性剤(ショ糖モノラウレート)を0.5質量部溶解してプルランフィルム原料水溶液を作製し、減圧脱泡した。この原料水溶液を合成プラスチックフィルム上に流延し、温度35℃、相対湿度33%の環境下で乾燥させ、厚さ50μmのプルランフィルムを得た。得られたプルランフィルムは、3.5質量%の水分を含有していた。
常法にしたがって、脱イオン水69.25質量部に、実施例1の方法で調製したプルラン含有粉末22質量部、カラギーナン1質量部、キサンタンガム0.15質量部、ローカストビーンガム0.15質量部、マルチトール0.8質量部、糖転移ヘスペリジン(林原生物化学研究所株式会社販売、商品名「αGヘスペリジン」)3質量部、乳化ミントオイル2.6質量部、プロポリスエキス0.5質量部、スクラロース0.3質量部、及びクエン酸0.25質量部を加え、90℃で3時間撹拌して溶解し、2×10mのステンレス板上に均質に流延し、60℃で4時間乾燥して、厚さ約200μm、幅約200cm、長さ10m、水分含量約8%、100cm2当たりの質量が約2.2gのフィルム状成形物を得た。このフィルムを1×2cmに裁断して、20枚ずつ携帯用の容器に充填して、口中清涼フィルムを調製した。
実施例2で調製したプルラン含有粉末を300質量部、カルボキシメチールセルロースを30質量部、L−アスコルビン酸2−グルコシドを10質量部、感光素401号を0.1質量部、α−グルコシルルチンを3質量部、1,2−ペンタンジオールを5質量部、N−ヤシ油脂肪酸アシル−L−グルタミン酸ナトリウムを2.5質量部、水酸化カリウムを1質量部、エデト酸三ナトリウムを0.3質量部、クエン酸三ナトリウムを0.3質量部、クエン酸を0.2質量部、イオン交換水1000質量部を含むプルランシート原料水溶液を調製し、起泡した。この原料水溶液を合成プラスチックフィルム上に連続して流延し、50℃の熱風中を通して乾燥し、厚さ100μmのプルランシートを調製した。
実施例1の方法で製造したプルラン含有粉末1質量部及びアラビアガム0.2質量部を水100質量部に溶解した水溶液を調製した。このプルラン含有水溶液に産卵後10時間以内の新鮮な鶏卵を30秒間浸漬した後、取り出して、30℃の温度で2時間乾燥して卵殻表面上にプルランの被覆膜を形成させた。
質量150mgの素錠を芯剤とし、これに結晶マルチトール50質量部、実施例2の方法で製造したプルラン含有粉末を濃度10w/w%水溶液としたもの20質量部、水15質量部、タルク25質量部および酸化チタン3質量部からなる下掛け液を用いて錠剤質量が約230mgになるまで糖衣し、次いで、同じ結晶マルチトール65質量部、同じ10w/w%濃度のプルラン水溶液10質量部および水25質量部からなる上掛け液を用いて、糖衣し、更に、ロウ液で艶出しして光沢のある外観の優れた糖衣錠を得た。
実施例1の方法で調製したプルラン含有粉末5質量部、プロポリスエキス粉末30質量部、ラクトスクロース含有粉末(商品名『乳果オリゴ』LS−55P 株式会社林原商事販売)20質量部、乳酸カルシウム10質量部、L−アスコルビン酸5質量部、α−グリコシルルチン1質量部、第三リン酸カルシウム1質量部、ショ糖脂肪酸エステル1質量部及び適量の粉末香料を均一に混合した後、直径6mmの杵を装着した打錠機により打錠して錠剤(約300mg/錠)を得た。
常法に従って、マルトース68質量部、α,α−トレハロース15質量部、実施例2の方法により調製したプルラン含有粉末5質量部、パルミチン酸レチノール5質量部、エルゴカルシフェロール5質量部、塩酸フルスルチアミン10質量部、リボフラビン5質量部、塩酸ピリドキシン10質量部、酢酸トコフェロール10質量部、ニコチン酸アミド30質量部、シアノコバラミン0.01質量部、パントテン酸カルシウム40質量、アスコルビン酸2−グルコシド(商品名『AA2G』 株式会社林原生物化学研究所販売)60質量部、香料1質量部、及びモノフルオロリン酸ナトリウム1質量部を均一に混合した後、混合物を打錠して錠剤(200mg/1錠)を得た。
常法により、エテンザミド450質量部、アセトアミノフェン300質量部、カフェイン50質量部、マルチトール25質量部、α,α−トレハロース25質量部、スクロース200質量部、キシリトール400質量部、コーンスターチ500質量部、ポリエチレングリコール20質量部、実施例1の方法で調製したプルラン含有粉末6質量部、アラビアガム6質量部、α−グルコシルステビオシド(商品名「αG−スイート」 東洋精糖株式会社販売)1質量部を混合した後、水を40ml加えて混練し、打錠機により打錠して錠剤(約300mg/錠)を得た。
ラクトスクロース含有糖質(商品名「LS−90P」 塩水港精糖株式会社販売。固形物換算でラクトスクロース約90質量%含有)1質量部、実施例2の方法で調製したプルラン含有粉末0.1質量部、糖転移ヘスペリジン(商品名「αGヘスペリジン」 林原生物化学研究所株式会社販売)0.5質量部、α−グルコシルステビオシド(商品名「αG−スイート」 東洋精糖株式会社販売)0.2質量部を均一に混合し、顆粒成形機にかけて、顆粒状の散剤を得た。
実施例1の方法で製造したプルラン含有粉末を水に溶解して濃度40w/w%とし、これに固形物当り1.5w/w%のアルギン酸及び0.02w/w%のローカストビーンガムを溶解して紡糸原液とし、これを液温60℃に調整して、直径0.3mm、長さ1mmの円筒状ノズルより圧力3kg/cm2をかけて室温の空気中にストランドを押し出し、水分を蒸散乾燥させつつ、巻取機にて巻き取った。
Claims (6)
- 水;及び水溶液の20質量%以上25質量%以下のプルラン含有粉末を含むことを特徴とする、成形物の製造のためのプルラン含有水溶液であって、ここで前記プルラン含有粉末が、75容積%水性メタノールに不溶のプルラン画分と可溶の夾雑糖質画分とからなり、アントロン−硫酸法に基づいて求められる全糖質含量に対し、99質量%以上のプルランと1質量%以下の夾雑糖質を含み、さらに、マンニトールを含有するプルラン含有粉末である、プルラン含有水溶液。
- 前記プルラン含有粉末に含まれるマンニトールの含量が、無水物換算で、粉末全体の0.04質量%以上であることを特徴とする請求項1記載のプルラン含有水溶液。
- 前記プルラン含有粉末に含まれるプルランの質量平均分子量が、50,000乃至1,000,000ダルトンであることを特徴とする請求項1又は2記載のプルラン含有水溶液。
- さらに、カラギーナン、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース、及びアラビアガムから選ばれる1種又は2種以上の多糖類を含むことを特徴とする請求項1乃至3のいずれかに記載のプルラン含有水溶液。
- さらに、水酸化カリウムを含むことを特徴とする請求項1乃至4のいずれかに記載のプルラン含有水溶液。
- さらに、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、硫酸カルシウム、亜硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、又は塩基性炭酸マグネシウムを含むことを特徴とする請求項1乃至5のいずれかに記載のプルラン含有水溶液。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2010138793 | 2010-06-17 | ||
JP2010138793 | 2010-06-17 | ||
JP2010154206 | 2010-07-06 | ||
JP2010154206 | 2010-07-06 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014253416A Division JP5932955B2 (ja) | 2010-06-17 | 2014-12-15 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016145248A JP2016145248A (ja) | 2016-08-12 |
JP6219444B2 true JP6219444B2 (ja) | 2017-10-25 |
Family
ID=45348328
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012520508A Active JP5669838B2 (ja) | 2010-06-17 | 2011-06-17 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
JP2014253416A Active JP5932955B2 (ja) | 2010-06-17 | 2014-12-15 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
JP2016090380A Active JP6219444B2 (ja) | 2010-06-17 | 2016-04-28 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2012520508A Active JP5669838B2 (ja) | 2010-06-17 | 2011-06-17 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
JP2014253416A Active JP5932955B2 (ja) | 2010-06-17 | 2014-12-15 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20130195941A1 (ja) |
EP (2) | EP2583982B1 (ja) |
JP (3) | JP5669838B2 (ja) |
KR (4) | KR20170001712A (ja) |
CN (1) | CN103140503B (ja) |
ES (1) | ES2897489T3 (ja) |
IL (1) | IL223623A (ja) |
WO (1) | WO2011158936A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5860480B2 (ja) | 2011-01-11 | 2016-02-16 | キャプシュゲル・ベルジウム・エヌ・ヴィ | プルランを含む新しい硬カプセル |
CN102621269A (zh) * | 2012-04-06 | 2012-08-01 | 华远医药研究院有限公司 | 一种普鲁兰多糖的检测方法 |
KR102058368B1 (ko) * | 2013-01-21 | 2019-12-24 | 엘지전자 주식회사 | 이동 단말기 및 그것의 제어방법 |
KR101520375B1 (ko) | 2013-05-31 | 2015-05-15 | 주식회사 제닉 | 저분자량의 풀루란을 포함하는 수용성 필름 조성물 |
WO2015066819A1 (en) | 2013-11-08 | 2015-05-14 | Carlos Filipe | Method of stabilizing molecules without refrigeration using water soluble polymers and applications thereof in performing chemical reactions |
CN105467060B (zh) * | 2015-11-30 | 2019-01-11 | 山东省药学科学院 | 一种普鲁兰多糖含量的快速检测方法 |
CN105483020B (zh) * | 2015-12-23 | 2019-01-01 | 广西大学 | 越南槐内生真菌trxy-34-1在防治三七根腐病中的应用 |
US11576870B2 (en) | 2017-04-14 | 2023-02-14 | Capsugel Belgium Nv | Pullulan capsules |
EP3610028A1 (en) | 2017-04-14 | 2020-02-19 | Capsugel Belgium NV | Process for making pullulan |
US11708613B2 (en) | 2017-05-03 | 2023-07-25 | The United States of America, as Represened by the Secretary, Department of Health and Human Services | Rapid detection of Zika virus by reverse transcription loop-mediated isothermal amplification |
US10894971B1 (en) * | 2019-06-26 | 2021-01-19 | Lefan Capsule International Inc | Method for the production of pullulan soft capsules |
CN110623964B (zh) * | 2019-08-12 | 2023-09-29 | 浙江中医药大学 | 麦角甾醇联合吉非替尼复方脂质体冻干粉的制备方法、脂质体及用途 |
KR102468317B1 (ko) * | 2020-09-16 | 2022-11-17 | 주식회사 엘지생활건강 | 신규한 아우레오바시디움 풀루란스 균주 및 이의 용도 |
CN115011328B (zh) * | 2022-04-20 | 2024-01-23 | 中国科学院理化技术研究所 | 基于糖类隔氧基质的发光材料,制备及应用 |
Family Cites Families (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5414678B2 (ja) * | 1974-02-23 | 1979-06-08 | ||
JPS5136360A (ja) | 1974-09-20 | 1976-03-27 | Hisao Yoshioka | Deriboodo |
JPS5142199A (en) | 1974-10-08 | 1976-04-09 | Murayama Hamono Kk | Naifu hochotono seizohoho |
JPS526346A (en) | 1975-07-05 | 1977-01-18 | Fuji Satsushi Kogyo Kk | Process for generating colored coating on aluminum or its alloy |
DE2834847A1 (de) | 1978-08-09 | 1980-02-21 | Metallgesellschaft Ag | Staubabscheider mit druckentlastungsoeffnung |
JPS5542635A (en) | 1978-09-21 | 1980-03-26 | Kohkoku Chem Ind | Water bed bag and production |
JPS57155975A (en) | 1981-03-24 | 1982-09-27 | Osaka Kagaku Gokin Kk | Film for food packaging and method for packaging |
JPS5821739A (ja) | 1981-07-31 | 1983-02-08 | Toshiba Corp | フオトマスクの製造方法 |
JPS5850665A (ja) | 1981-09-18 | 1983-03-25 | Toshiba Corp | デイスクロ−デイング機構 |
JPS58223797A (ja) | 1982-06-23 | 1983-12-26 | 日本原子力事業株式会社 | 放射性物質を含む濃厚塩廃液の処理方法 |
JPS594291A (ja) | 1982-06-29 | 1984-01-11 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 利得制御装置 |
JPS59111817A (ja) | 1982-12-11 | 1984-06-28 | Hayashibara Biochem Lab Inc | プルラン自己支持フイルムの製造方法 |
JPS6049164A (ja) | 1983-08-27 | 1985-03-18 | Toshiba Corp | ピストンリング |
JPS6016217A (ja) | 1984-05-31 | 1985-01-28 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | バ−ナ制御装置 |
DE3539180A1 (de) * | 1985-11-05 | 1987-05-07 | Consortium Elektrochem Ind | Aureobasidium-pullulans-stamm, herstellungsverfahren und verwendung |
JPH03232488A (ja) | 1990-02-09 | 1991-10-16 | Yakult Honsha Co Ltd | β―ガラクトシダーゼの安定化法 |
US5268460A (en) * | 1991-10-16 | 1993-12-07 | Shin-Estu Bio, Inc. | High molecular weight pullulan |
JP3350823B2 (ja) | 1992-03-04 | 2002-11-25 | 株式会社林原生物化学研究所 | 結着剤とその用途 |
JP3232488B2 (ja) * | 1992-08-20 | 2001-11-26 | 株式会社林原生物化学研究所 | プルラン高含有物とその製造方法並びに用途 |
JPH05285969A (ja) | 1992-04-10 | 1993-11-02 | Osaka Kagaku Gokin Kk | 水溶性皮膜の製膜方法 |
JPH07553A (ja) | 1993-06-01 | 1995-01-06 | Litton Syst Inc | 内蔵型呼吸装置用調整器 |
TWI304424B (ja) | 2001-04-26 | 2008-12-21 | Hayashibara Biochem Lab | |
JP4132767B2 (ja) | 2001-07-19 | 2008-08-13 | 株式会社林原生物化学研究所 | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 |
PL209763B1 (pl) * | 2001-08-22 | 2011-10-31 | Supramol Parenteral Colloids Gmbh | Nadrozgałęziona amylopektyna i jej nadrozgałęzione pochodne |
JP2004261132A (ja) | 2003-03-04 | 2004-09-24 | Hayashibara Biochem Lab Inc | プルラン分解酵素とその製造方法並びに用途 |
JP2005021124A (ja) | 2003-07-02 | 2005-01-27 | Kyukyu Yakuhin Kogyo Kk | 口腔用フィルム製剤 |
DE10349465B4 (de) * | 2003-10-23 | 2014-04-03 | Südzucker Aktiengesellschaft Mannheim/Ochsenfurt | Gelatinefreie, Isomaltulose-haltige Weichkaramelle |
BE1016178A3 (fr) | 2004-09-06 | 2006-04-04 | Debailleul Gerard | Procede et installation pour fabriquer du carburant vert economiquement. |
EP1954798B1 (en) * | 2005-09-30 | 2010-02-24 | Dong Energy Generation A/S | Non-pressurised pre-treatment, enzymatic hydrolysis and fermentation of waste fractions |
KR20090034882A (ko) | 2006-06-16 | 2009-04-08 | 테이트 앤 라일 인그리디언츠 아메리카스, 인코포레이티드 | 풀룰란 필름 및 식용 포장에서의 이들의 용도 |
WO2009003167A1 (en) * | 2007-06-27 | 2008-12-31 | Novozymes A/S | Methods for producing fermentation products |
DE102009009985A1 (de) * | 2009-02-23 | 2010-08-26 | Envio Biogas Beteiligungs Gmbh | Verfahren zur Aufkonzentration von Mikroorganismen in wässrigen Substraten |
-
2011
- 2011-06-17 US US13/704,814 patent/US20130195941A1/en not_active Abandoned
- 2011-06-17 KR KR1020167035918A patent/KR20170001712A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-06-17 EP EP11795838.9A patent/EP2583982B1/en active Active
- 2011-06-17 JP JP2012520508A patent/JP5669838B2/ja active Active
- 2011-06-17 ES ES11795838T patent/ES2897489T3/es active Active
- 2011-06-17 KR KR1020137000817A patent/KR20130114077A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-06-17 EP EP21192842.9A patent/EP3950721A1/en active Pending
- 2011-06-17 KR KR1020197014649A patent/KR20190064653A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-06-17 KR KR1020187015449A patent/KR101983568B1/ko active IP Right Grant
- 2011-06-17 CN CN201180034815.6A patent/CN103140503B/zh active Active
- 2011-06-17 WO PCT/JP2011/063922 patent/WO2011158936A1/ja active Application Filing
-
2012
- 2012-12-13 IL IL223623A patent/IL223623A/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-12-15 JP JP2014253416A patent/JP5932955B2/ja active Active
-
2016
- 2016-04-28 JP JP2016090380A patent/JP6219444B2/ja active Active
-
2018
- 2018-09-17 US US16/132,746 patent/US20190085367A1/en active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20130114077A (ko) | 2013-10-16 |
JPWO2011158936A1 (ja) | 2013-08-19 |
CN103140503B (zh) | 2016-05-18 |
KR20190064653A (ko) | 2019-06-10 |
ES2897489T3 (es) | 2022-03-01 |
KR20170001712A (ko) | 2017-01-04 |
US20190085367A1 (en) | 2019-03-21 |
EP3950721A1 (en) | 2022-02-09 |
EP2583982A1 (en) | 2013-04-24 |
JP2015052129A (ja) | 2015-03-19 |
JP5932955B2 (ja) | 2016-06-08 |
JP5669838B2 (ja) | 2015-02-18 |
US20130195941A1 (en) | 2013-08-01 |
JP2016145248A (ja) | 2016-08-12 |
IL223623A (en) | 2016-08-31 |
KR20180067698A (ko) | 2018-06-20 |
CN106008740A (zh) | 2016-10-12 |
WO2011158936A1 (ja) | 2011-12-22 |
CN103140503A (zh) | 2013-06-05 |
KR101983568B1 (ko) | 2019-05-29 |
EP2583982B1 (en) | 2021-10-06 |
EP2583982A4 (en) | 2015-10-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6219444B2 (ja) | プルラン含有粉末とその製造方法並びに用途 | |
Singh et al. | Pullulan: microbial sources, production and applications | |
RU2553354C2 (ru) | Противоаллергическое средство | |
EP1873254B1 (en) | Branched starch, process for production thereof, and use thereof | |
TW293036B (ja) | ||
EP2671565B1 (en) | External preparation for skin | |
DE60219438T2 (de) | Dentalmaterial gegen karies | |
KR100946828B1 (ko) | 풀룰란 함유 분말과 그 제조 방법 및 용도 | |
Heperkan et al. | Structural analysis and properties of dextran produced by Weissella confusa and the effect of different cereals on its rheological characteristics | |
TWI754623B (zh) | α-葡聚醣混合物與其製造方法、以及用途 | |
JP2006075084A (ja) | セロリから得られる発酵物 | |
WO2020262381A1 (ja) | 水溶性ヒアルロン酸ゲル及びその製造方法 | |
JPH04122701A (ja) | β−グルカン及びその製造方法 | |
EP1460123A1 (en) | Method of sustaining aroma and use thereof | |
JP6218915B1 (ja) | 美容組成物 | |
JP6330119B2 (ja) | 美容組成物 | |
CN106008740B (zh) | 含有支链淀粉的粉末及其制备方法以及用途 | |
WO2004065426A1 (de) | Verfahren zur herstellung eines exopolymers aus sphingomonas adhaesiva und dessen verwendungen |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160526 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170525 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170724 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170829 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170927 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6219444 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |