JP3232488B2 - プルラン高含有物とその製造方法並びに用途 - Google Patents

プルラン高含有物とその製造方法並びに用途

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Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、プルラン高含有物
とその製造方法並びに用途に関し、さらに詳細には、プ
ルラン産生能を有する微生物を、糖質濃度１０乃至２０
ｗ／ｖ％含有する培養液に粘度３０センチポイズ未満に
維持しつつ培養して、得られる平均分子量２５万未満の
プルラン高含有物とその製造方法並びに用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】プルランは、プルラン産生能を有する微
生物を、単糖類、オリゴ糖類などの糖類を含む栄養培地
に好気的に培養して得られる粘質グルカンであって、工
業的に製造されている。
【０００３】その製造方法としては、例えば、特開昭４
９−４２８９４に開示されているように、始発ｐＨ５．
５乃至８．０に調整、とりわけ高ｐＨに調整することに
よりプルランの増収を目指す方法、特開昭５２−１３０
９９３に開示されているようにアミラーゼ活性阻害物質
共存下で、培養液の粘度低下を防止しつつ培養してプル
ランの増収を目指す方法などが提案されている。しかし
ながら、これら方法は、プルランの工業生産的見地か
ら、必ずしも満足できるものでないことが判明した。
【０００４】一方、プルラン産生能を有する微生物を培
養してプルランを製造する方法が下記の報告で開示され
ている。 （１）バルマー（Ｂｕｌｍｅｒ）等、アプライド・マイ
クロバイオロジー・アンド・バイオテクノロジー（Ａｐ
ｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｏ−ｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂ
ｉｏｔｅｅｈｎｏｌｏｇｙ）第２５巻、３６２−３６５
頁、１９８７年、 （２）（Ｂｏａ）等、バイオテクノロジー・アンド・バ
イオエンジニアリング（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
ａｎｄ Ｂｉｏ−ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）、第３０
巻、４６３−４７０頁、１９８７年、 （３）マクネイル（ＭｃＮｅｉｌ）等、バイオテクノロ
ジー・アンド・バイオエンジニアリング（Ｂｉｏｔｅｅ
ｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎ
ｇ）、第３３巻、１２１０−１２１２頁、１９８９年、 （４）マクネイル（ＭｃＮｅｉｌ）等、エンザイム・ア
ンド・マイクロビアルテクノロジー（Ｅｎｚｙｍｅ ａ
ｎｄ ＭｉｅｒｏｂｉａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、第
１２巻、５２１−５２５頁、１９９０年。
【０００５】しかしながら、これらの報告も、プルラン
産生について生物化学工学的に検討が加えられているも
のの、グルコース、スクロース、草炭加水分解物などの
糖質の濃度が２乃至５ｗ／ｖ％と低く、培養液の粘度に
ついても検討されていない。また、培養液のｐＨについ
ては、ボア（Ｂｏａ）等の文献では明らかにしておら
ず、バルマー（Ｂｕｌｍｅｒ）等の文献ではｐＨ５．５
に維持し、マクネイル（ＭｃＮｅｉｌ）等の文献では、
ｐＨ４．５が至適ｐＨであると報告している。培養液１
Ｌ、培養１時間当りのプルランの生産性（ｇＬ−１ｈ
−１）（以下、本明細書では、単にプルラン生産性とい
う。）については、最高でもボア（Ｂｏａ）等の文献に
記載されている０．４８と低い値であり、その培養の期
間についても不明である。従って、これらの報告を採用
して、工業的生産に有利なプルラン高含有物を生産する
ことは極めて困難である。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】前記の様な従来方法の
欠点を解消し、工業的に有利な新たな培養方法によるプ
ルラン高含有物の製造方法とその用途の確立が望まれて
いる。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、培養によ
るプルラン高含有物の製造方法、とりわけ、高濃度の糖
質を含有せしめた栄養培地を用いて、その培養液の粘度
とそのプルラン生産性に着目し、工業的生産に有利なプ
ルラン高含有物とその製造方法並びに用途の確立を目指
して鋭意研究を続けてきた。
【０００８】その結果、従来の技術とは全く違って、プ
ルラン産生能を有する微生物を、糖質濃度１０乃至２０
ｗ／ｖ％含有する培養液に粘度３０センチポイズ未満に
維持しつつ培養し、得られる平均分子量２５万未満のプ
ルラン高含有物は、培養によるプルラン生産性が高く、
その培養期間も長期に亙って安定することを見い出し、
加えて、その工業生産が極めて有利であることを見い出
し、その培養による製造方法、並びに、得られるプルラ
ン高含有物を含有せしめて、増粘剤、コーティング剤、
接着剤、成形物などに、また、飲食物、化粧品、医薬
品、農林水産資材、紙加工資材、鉱工業資材など多方面
に、その用途を確立して本発明を完成した。
【０００９】以下に、本発明を更に詳細に説明する。
【００１０】本発明に用いるプルラン産生能を有する微
生物、プルランを産生し得る菌株であれば何れの菌株で
も良い。例えば、オーレオバシディウム・ファーメンタ
ンス・バル・ファーメンタンス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄ
ｉｕｍｆｅｒｍｅｎｔａｎｓｖａｒ ｆｅｒｍｅｎｔａ
ｎｓ） ＩＦＯ ６４１０、オーレオバシディウム・フ
ァーメンタンス・バル・フスカ（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄ
ｉｕｍ ｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ｖａｒ ｆｕｓｃａ）
ＩＦＯ ６４０２、オーレオバシディウム・プルランス
（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）
ＩＦＯ ６３５３、または、オーレオバシディウム・プ
ルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍｐｕｌｌｕｌａ
ｎｓ）ＩＦＯ ４４６４などオーレオバシディウム属に
属する微生物、または、それらの突然変異株などが適宜
用いられる。
【００１１】栄養培地としては、炭素源、窒素源、有機
栄養源、無機物質などを適宜含有したものが使用され
る。炭素源としては、通常、例えばグルコース、マルト
ース、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、水飴、ス
クロース、フラクトース、糖化転化糖、異性化糖、糖蜜
などから選ばれる１種または２種以上の糖質が、濃度１
０乃至２０ｗ／ｖ％、より望ましくは１０乃至１８ｗ／
ｖ％の範囲で用いられる。窒素源としては、アンモニウ
ム塩、硝酸塩などの無機窒素源またはグルタミン酸塩、
ペプトン、酵母エキス、コーンスティープリカーなどの
有機窒素源などから選ばれる１種または２種以上が用い
られる。他に無機物質として燐酸塩、マグネシウム塩、
鉄塩などが適宜用いられる。
【００１２】培養は、粘度３０センチポイズ未満に維持
しつつ好気的に行う。好ましくは、ｐＨ４．０以下、よ
り好ましくは、ｐＨ２．０を越え４．０以下で、温度約
２５乃至３０℃の範囲から選ばれる条件で連続的に培養
される。
【００１３】本発明の方法において、培養中、培養液の
粘度を３０センチポイズ未満に維持するには、例えば、
間歇的または連続的に培養液を抜出しつつ追加供給する
栄養培地の供給速度により培養液の希釈速度、通常、約
０．０１乃至０．１ｈ−１の範囲に調整するか、また
は、プルランを部分的に加水分解して培養液の粘度低下
を起こすアミラーゼ、例えば、液化型α−アミラーゼ、
イソアミラーゼ等の澱粉質を部分的に加水分解する酵素
を適量添加するかして行なわれる。さらに必要ならば、
栄養培地として、予備培養したものを用いることも有利
に実施できる。
【００１４】この様にして得られたプルラン高含有培養
液は、常法に従って、除菌、濃縮して、必要に応じて脱
色、脱塩し、溶液状のプルラン高含有物、または、これ
をさらに粉末化して、粉末状のプルラン高含有物を採取
する。この様にして得られたプルラン高含有物は、プル
ランを、固形物当り、約５０ｗ／ｗ％以上望ましくは、
約５５乃至９０ｗ／ｗ％の範囲で含有し、その平均分子
量は、通常、３０万未満、望ましくは約４乃至２５万の
範囲である。更に必要ならば、分子量分画、有機溶媒沈
澱分離などによって、より高純度のプルラン高含有物に
することも随意である。
【００１５】本発明のプルラン高含有物の特性は、水溶
性、増粘性、造膜性、光沢性、透明性、ガスバリアー
性、耐油性、耐塩性、接着性、成形性、可食性、難消化
性などを有していることから、その用途としては、例え
ば、増粘剤、コーティング剤、接着剤、成形物などに有
利に利用される。
【００１６】また、例えば、ビフィズス菌増殖促進剤、
ダイエタリーファイバー食品、低カロリー食品などの飲
食物、例えば、練歯磨き、乳液、クリーム、パック、整
髪料、シャンプー、入浴剤などの化粧品、例えば、軟
膏、錠剤、カプセル剤、代用血漿などの医薬品、例え
ば、コーティング種子、造粒農薬、成形肥料、成形飼餌
料などの農林水畜産資材、例えば、糊剤、サイジング剤
などの紙加工資材、排水処理剤、熔接棒、鋳型などの鉱
工業資材など多方面の産業分野に広範に利用できる。
【００１７】これら各種用途への利用に際しては、目的
に応じて、本発明のプルラン高含有物を単独で含有せし
めることも、本発明のプルラン高含有物とともにグリセ
リン、ソルビトール、マルチトール、ラクチトールなど
の多価アルコールを含有せしめることも有利に実施でき
る。
【００１８】更に必要に応じて、その他の材料、例え
ば、プルラン以外の多糖類、可塑剤、増量剤、賦形剤、
充填剤、増粘剤、界面活性剤、発泡剤、消泡剤、ｐＨ調
壁剤、安定剤、難燃剤、離形剤、抗菌剤、着色剤、着香
剤、栄養物、嗜好物、呈味物、薬効物質、生理活性物質
などから選ばれる１種または２種以上を含有せしめるこ
とも随意である。本発明のプルラン高含有物を含有せし
めるとは、その用途製品の製造が完了するまでの工程
で、プルラン高含有物を含有せしめることができればよ
く、その方法としては、例えば、混和、混捏、溶解、浸
漬、塗布、散布、噴霧、注入などの公知の方法が適宜選
ばれる。
【００１９】具体的には、例えば、増粘剤の場合には、
特開昭５１−５１５４３、特開昭５２−４１２５２、特
開昭５８−２１３０７６などで開示される方法を、コー
ティング剤の場合には、特開昭５２−５６６０３、特開
昭５３−１９４１６、特開昭５３−１１９７４１などで
開示される方法を、接着剤の場合には、特開昭５１−１
１９３２１、特開昭５３−５４５９３、特開昭５４−１
０８８２８などで開示される方法を、成形物の場合に
は、特開昭５０−１１６５４５、特開昭５１−４２７
２、特開昭５１−１００４７０などで開示される方法
を、飲食物の場合には、特開昭５３−７９０４５、特開
昭６０−２１９２３８、特開平２−２８９５２０などで
開示される方法を、化粧品の場合には、特開昭５０−６
４４４１、特開昭６３−２８３６９などで開示される方
法を、医薬品の場合には、特開昭５３−１２４１７、特
開昭５７−６７６０２、特開昭６３−１２２７３９など
で開示される方法を採用すればよい。
【００２０】以下、本発明の粘度を制御しつつ培養する
プルラン高含有物の製造方法を実験で説明する。
【００２１】
【実験１】＜プルラン生産性に及ぼす糖質濃度と粘度制
御の影響＞
【００２２】
【実験１−Ａ】＜栄養培地の供給による粘度制御＞
【００２３】ジャーファーメンターに表１に示す栄養培
地を入れ、常法通り、１２０℃、２０分間加圧滅菌し、
約２７℃に冷却後、無菌的に植菌して、塩酸または水酸
化ナトリウムの添加により、ｐＨ３．６乃至３．８に維
持しつつ、通気攪拌培養した。
【００２４】種培養液は、同じ組成の栄養培地に菌株オ
ーレオパシディウム・プルランスＩＦＯ ６３５３を約
２７℃、２４時間好気的に培養したものを用いた。
【００２５】
【表１】
【００２６】培養液の粘度の制御方法は、培養液を間歇
的または連続的に抜出しつつ栄養培地を追加供給する希
釈速度の調整により行った。培地の供給は、培養が定常
期に達してから開始した。培養液粘度の測定は、除菌
後、回転式Ｅ型粘度計（３０℃）を用いて行った。プル
ラン生産性の測定は、培養３００乃至３２０時間の間に
採取した培養液について、培養液１Ｌ、培養１時間当り
のプルラン量（ｇ）を測定することにより求めた。ここ
でいうプルラン量とは、７５ｖ／ｖ％メタノールに不溶
性であって、プルラナーゼ（ＥＣ ３．２．１．４１）
により加水分解を受けて主にマルトトリオースを生成す
る高分子物質の量をいう。
【００２７】対照として、栄養培地の追加供給を行わ
ず、粘度制御しない培養を行った。
【００２８】結果は表２に示した。
【００２９】
【表２】
【００３０】表２の結果から明らかなように、各種濃度
の糖質を含有する培養液で、培養液を抜出しつつ、栄養
培地を追加供給してその粘度を制御しつつ培養を行った
場合、糖質濃度１０乃至２０ｗ／ｖ％、好ましくは１０
乃至１８ｗ／ｖ％の範囲で培養液の粘度を３０センチポ
イズ未満に維持した時に、０．８８ｇＬ−１ｈ−１以上
の高い生産性が得られることが判明した。
【００３１】
【実験１−Ｂ】＜イソアミラーゼ共存による粘度制御＞ 実験１−Ａの場合と同じ組成の栄養培地を用い、培養液
粘度を６０乃至９０センチポイズ未満に制御する様、培
養液を抜出しつつ栄養培地を追加供給し、さらに、イソ
アミラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）の添加
により表３に示す各種粘度範囲に維持しつつ、ｐＨ２．
６乃至３．０の範囲に維持して培養を行った。その他の
条件は実験１−Ａと同様に行った。
【００３２】結果は表３に示した。
【００３３】
【表３】
【００３４】表３の結果から明らかな様に、イソアミラ
ーゼ添加により粘度を制御しつつ培養を行った場合、糖
質濃度１０乃至２０ｗ／ｖ％、好ましくは、１０乃至１
８ｗ／ｖ％の範囲で培養液の粘度を３０センチポイズ未
満に維持した時に、０．９２ｇＬ−１ｈ−１以上の極め
て高いプルラン生産性の得られることが判明した。
【００３５】
【実験２】＜粘度制御された培養でのプルラン生産性に
及ぼすｐＨ制御の影響＞
【００３６】実験１−Ｂで行った糖質濃度１６ｗ／ｖ％
の栄養培地を用いて、実験１−Ｂと同様に、イソアミラ
ーゼ共存下で培養液を３０センチポイズ未満に維持しつ
つ、各穏ｐＨに維持しながら培養して、プルラン生産性
を調べた。
【００３７】結果は表４に示した。
【００３８】
【表４】
【００３９】表４の結果から明らかな様に、培養中の制
御ｐＨとしては、ｐＨ４．０以下、望ましくは、２．０
を越え４．０以下において、０．９２ｇＬ−１ｈ−１以
上の極めて高いプルラン生産性の得られることが判明し
た。
【００４０】以下、実施例Ａでプルラン高含有物の製造
例を、実施例Ｂでプルラン高含有物の用途例を述べる。
【００４１】
【実施例Ａ−１】＜プルラン高含有物＞ 栄養培地は、糖質として高ＤＥ水飴（株式会社林原商事
販売、登録商標サンローゼ）濃度１４ｗ／ｖ％を用いた
他は、表１と同組成の培地を用いて、オーレオバシディ
ウム・プルランス ＩＦＯ ６３５３を培養した。培養
液を抜出しつつ、これに栄養培地を０．０１乃至０．０
４ｈ−１の希釈速度で追加供給しながら粘度を３０セン
チポイズ未満に維持して、ｐＨを３．６乃至３．８の範
囲に維持し、２７℃で１ケ月間連続培養を行った。培養
開始後４日目から抜出液は、常法により除菌、脱色、濃
縮、乾燥して、粉末状のプルラン高含有物を得た。
【００４２】本品の分析結果は表５に示した。
【００４３】
【表５】
【００４４】本品は、増粘剤、コーティング剤、接着
剤、成形物などに、また、飲食物、化粧品、医薬品、農
林水産資材、紙加工資材、鉱工業資材などに有利に利用
できる。
【００４５】
【実施例Ａ−２】＜プルラン高含有物＞ 栄養培地は、実施例Ａ−１と同じものを用いて、オーレ
オバシディウム・プルランス ＩＦＯ ６３５３を培養
した。培養液を抜出しつつ、これに栄養培地を０．０１
乃至０．０２ｈ−１の希釈速度で追加供給しながら液化
型α−アミラーゼ剤［上田化学工業株式会社販売、商品
名ハイマルトシンＳ（Ｈｉ−ＭａｌｔｏｓｉｎＳ）］の
添加により、粘度を３０センチポイズ未満に維持して、
ｐＨを３．２乃至３．４に維持し、２７℃で２ケ月間連
続培養を行った。抜出液は、実施例Ａ−１と同様に処理
して、粉末状のプルラン高含有物を得た。
【００４６】本品の分析結果は表６に示した。
【００４７】
【表６】
【００４８】本品は、増粘剤、コーティング剤、接着
剤、成形物などに、また、飲食物、化粧品、医薬品、農
林水産資材、紙加工資材、鉱工業資材などに有利に利用
できる。
【００４９】
【実施例Ａ−３】＜プルラン高含有物＞ 栄養培地は、糖質としてマルトース高含有水飴（株式会
社林原商享販売、登録商標マルトラップ）を温度１１、
１２、１３、１４、１５、１６または１８ｗ／ｖ％を用
いた他は、表１と同組成の培地を用いて、オーレオバシ
ディウム・プルランス ＩＦＯ ４４６４を培養した。培
養液を抜出しつつ、これに栄養培地を０．０１乃至０．
０２ｈ−１の希釈速度で追加供給しながらイソアミラー
ゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）の添加により粘
度を３０センチポイズ未満に維持して、ｐＨを、２．
４、２．５、２．６または２．８に維持し、２７℃で２
ケ月間連続培養を行った。抜出液は、実施例Ａ−１と同
様に、除菌、濃縮して、それぞれ液状のプルラン高含有
物を得た。これら製品の分析結果は表７にまとめた。
【００５０】
【表７】
【００５１】これら製品は、増粘剤、コーティング剤、
剤、成形物などに、また、飲食物、化粧品、医薬品、農
林水産資材、紙加工資材、鉱工業資材などに有利に利用
できる。
【００５２】
【実施例Ｂ−１】＜摺動部シール剤＞ グリセリン５６重量部に、実施例Ａ−１の方法で製造し
た粉末状プルラン高含有物６重量部を加え、１１０℃に
加温しつつ攪拌混合し、均一に溶解せしめた後、グリコ
シルスクロース（株式会社林原商事販売、登録商標カッ
プリングシュガー）１３７重量部を加え、水分の蒸発を
防止しながら、脱泡、攪拌混合した。
【００５３】本組成物の粘度は、約３００センチポイズ
を示した。本組成物をガス、特に、液化ガスを推進剤と
するエアゾール容器用摺動部シール剤として、４５℃で
６カ月、−５℃で１年間放置したが、ガスバリヤー性能
に異常は認められなかった。
【００５４】また、本組成物は、人畜に無害、無害な配
合例であるので、摺動部に圧力差を有する気体や液化ガ
スが接している各種家庭用品、食料品、化粧品、医薬品
などを充填するエアゾール容器の摺動部シール剤として
有利に利用できる。
【００５５】
【実施例Ｂ−２】＜沢庵漬（新漬）＞ 大根３０ｋｇを常法に従い下漬し、サッカリン１０ｇと
ともに中漬し、続いて、麩１．７ｋｇ、サッカリン１０
ｇ、グリシン３０ｇ、グルタミン酸ソーダ２００ｇ、複
合調味料７０ｇ，ソルビトール５００ｇ、食塩３６０
ｇ、焼酎（３５度）２５０ｍｌ、および、実施例Ａ−２
の方法で製造した粉末状プルラン高含有物３４０ｇから
なる床で仕上げ漬けした。
【００５６】この製品は、製造１２日後においても粘度
の低下がほとんどなく、麩は付着しており、艶、照りと
もに良好であった。
【００５７】
【実施例Ｂ−３】＜保冷剤＞ 実施例Ａ−１の方法で製造した粉末状プルラン高含有物
１６重量部をグリセリン１６重量部および水６８重量部
に加熱溶解し、これに適量の抗菌剤を混合し、袋詰めし
て保冷剤を製造した。
【００５８】本品を冷却したものは、保冷効果が高く、
発熱時の熱さまし、青鮮物の鮮度保持などに有利に使用
できる。
【００５９】
【実施例Ｂ−４】＜被覆膜＞ 実施例Ａ−３、Ｎｏ．４の方法で製造した液状プルラン
高含有物を濃度１．０ｗ／ｗ％水溶液とし、これに産卵
後１０時間以内の新鮮卵を３０秒間浸漬し、次いで、３
０℃の温度で２時間乾燥して卵殻表面上に被覆膜を成形
させた。
【００６０】この被覆膜を形成させた卵を、室温（１５
〜２５℃）で保存して、その可食期間を対照の無処理卵
と比較した。その結果、被覆膜を形成させた卵の保存期
間は約５〜１０倍にも延長された。
【００６１】
【実施例Ｂ−５】＜抽出用包装材＞ 市販の比較的網目のあらい濾紙でできている紅茶用小包
装体に、実施例Ａ−３、Ｎｏ．６の方法で製造した液状
プルラン高含有物を濃度１０ｗ／ｗ％水溶液とし、これ
をカレンダー法でコーティングし、６０℃の熱風で乾燥
した。
【００６２】得られた小包装体に１回使用量ずつの紅茶
（レッグ・カット・ティー）を入れ、ヒートシールして
密封した。対照として、同品質の紅茶の入った市販の小
包装体を用いた。相対湿度を６０％、温度を３０℃に保
ち１ケ月間報知した後、それに熱湯を注いでその紅茶を
抽出し、得られ抽出液の優劣で包装体を比較した。
【００６３】本発明のプルラン高含有物でコーティング
したものも熱湯を注ぐと、対照と同様に容易に抽出され
た。抽出液はどちらも透明であった。しかしながら、抽
出液の香気、色、旨味のいずれの点においても、プルラ
ン高含有物でコーティグしたものの方が優れていた。
【００６４】
【実施例Ｂ−６】＜段ボール用接着糊料＞ 実施例Ａ−３、Ｎｏ．５の方法で製造した液状プルラン
高含有物を濃度３ｗ／ｗ％水溶液とし、この１００重量
部に１０ｗ／ｖ％のカセイソーダを１０重量部添加し、
２０分間撹拌を行って、キャリヤー部とする。別に、水
１００重量部にコーンスターチ４０重量部をスラリーと
し、更に、硼砂１重量部を添加したメイン部を作成し、
この中にキャリヤー部を徐々に添加混合した後、５分間
撹拌して糊料を得た。
【００６５】この糊料は、従来の澱粉糊料に比べ粘度変
化は少なく、また、両面コールゲーターを用いてＢ級ラ
イナー２４０ｇ／ｍ２とセミ中芯１２５ｇ／ｍ２を貼合
実験したところ、従来の澱粉糊料では１２０ｍ／ｍｉｎ
以上では貼合性不良を起す傾向が見られたが、本発明の
糊料使用時では１６０ｍ／ｍｉｎでも問題なく貼合が可
能であり、接着性も良好であった。
【００６６】
【実施例Ｂ−７】＜固形状接着剤＞ ジメチルスルホキシド３０重量部、水２５重量部、エル
シナン５重量部、実施例Ａ−２の方法で製造した粉末状
プルラン高含有物５重量部、および、ジベンジリデンキ
シリット２重量部の混合物を、温度９０℃にて１時間撹
拌し、溶解せしめた後、これを直径１４ｍｍ、高さ５０
ｍｍの円筒状の繰り上げ、繰り下げ可能な機構を備えた
口紅式容器に注入して室温で放冷し、固形状接着剤を製
造した。
【００６７】本接着剤をクラフト紙に塗り付けたとこ
ろ、薄く均一に塗布することができ、初期接着力も充分
であった。
【００６８】本接着剤は、温度変化に伴う硬度変化が比
較的小さく、常に良好な塗布と接着が可能であった。
【００６９】
【実施例Ｂ−８】＜フィルム＞ 実施例Ａ−３、Ｎｏ．４の方法で製造した液状プルラン
高含有物を濃度１５ｗ／ｗ％水溶液とし、これに固形物
当りカラゲナン１ｗ／ｗ％および蔗糖モノラウレート
０．１ｗ／ｗ％を溶解し、この液をポリエステルフィル
ム上に流延して、引取速度３ｍ／ｍｉｎで厚さ０．０３
ｍｍのフィルムとした後、９０℃の熱風で乾燥させて製
品とした。
【００７０】本品は、プルラン単独フィルムとは違っ
て、水系で速溶せず、徐々に溶解、崩壊する可食性フィ
ルムである。
【００７１】したがって、オブラートなどと同様に、飲
みにくい粉状医薬などの包装剤として、また、溶解、崩
壊したものが粘着性を有するため、入れ歯固定用フィル
ムなどとしても有利に用いられる。
【００７２】
【実施例Ｂ−９】＜繊維＞ 実施例Ａ−３、Ｎｏ．１の方法で製造した液状プルラン
高含有物を濃度４０ｗ／ｗ％とし、これに固形物当り２
ｗ／ｗ％のアルギン酸を溶解して紡糸原液とし、これを
６０℃にして、直径０．３ｍｍ、長さ１ｍｍの円筒状ノ
ズルより圧力３ｋｇ／ｃｍ２をかけて室温の空気中にス
トランドを押し出し、水分を蒸散乾燥させつつ、巻取機
にて巻き取った。
【００７３】得られた繊維の太さは、約２０μｍで、こ
の繊維は撚ることも、編むことも、織ることもできる。
しかも、親水性であって、無毒であり、皮膚への刺激が
ないという特徴を有しているので、例えば、脱脂綿、生
理綿、カーゼ、手術糸等に好適である。
【００７４】また、他の繊維と混紡すれば、その吸湿
性、非帯電性、染色性を活かして、肌着、その他衣料と
しても使用することができる。
【００７５】
【実施例Ｂ−１０】＜紙＞ 実施例Ｂ−９の方法で製造したプルラン高含有物の繊維
を５乃至１０ｃｍに切断したものと、その半量の木材パ
ルプとの混合物を得、この混合物の約５０倍量の１０℃
とした７５ｖ／ｖ％メタノールに、その混合物を均一に
懸濁して抄紙機にかけた。
【００７６】乾燥ロールを５０〜８０℃に調節して乾燥
した後、軽くカレンダーロールを通して紙を製造した。
【００７７】この紙は、表面は滑らかであるが、光沢が
比較的少なく、日本紙の地合に似ている。筆記用インキ
の乗りは良好で、インキのにじみはなかった。
【００７８】この紙は、熱水に易溶であるので、秘密文
書などの特殊用途に好適である。
【００７９】また、可食性であることから、医薬品の内
包装材、調味料、コーヒー、ココアなどの食品包装材と
しても好適である。
【００８０】
【実施例Ｂ−１１】＜発泡シート＞ 塩化ビニール樹脂１００重量部に対して可塑剤としてジ
オクチルフタレート６０重量部、更に、実施例Ａ−２の
方法で製造した粉末状プルラン高含有物の５０ｗ／ｗ％
水溶液を全量に対して３０ｗ／ｗ％加え、この混合物を
らい漬機にて充分練り合わせた後、アルミ板上にアプリ
ケーターを用いて、３ｍｍの厚さのシートをつくり、こ
れを１９０℃の熱風炉により１０分間熱処理したとこ
ろ、発泡倍率が約５倍の均一なセルを有する発泡シート
が得られた。
【００８１】本品は、防音材、断熱材、梱包材、緩衝材
などに好適である。また、本品を河川水に浸漬して放置
したところ、１ケ月で崩壊したが、本発明のプルラン高
含有物無添加のものは１２ケ月後でもなお原形をとどめ
ていた。
【００８２】
【実施例Ｂ−１２】＜ゴルフティー＞ 実施例Ａ−１の方法で製造した粉末状プルラン高含有物
１０重量部および酸性白土４重量部を撹拌しつつ水を噴
霧して含水率を約３０ｗ／ｗ％とし、これを射出成形機
を用いて１２０℃にてゴルフティーを成形し、シェラッ
クアルコール溶液に浸漬し、風燥して製品を得た。
【００８３】本品は、ショットにより、小塊に破壊さ
れ、雨水で徐々に崩壊し、生分解される。
【００８４】したがって、ゴルフ場の美観を損なわず、
環境も破壊しない。
【００８５】
【実施例Ｂ−１３】＜植木鉢＞ 実施例Ａ−１の方法で製造した粉末状プルラン高含有物
１００重量部とグリセリン１５重畳部およびソルビトー
ル５重量部の混合物を、射出成形機を用いて、１３５℃
にて植木鉢を成形し、溶融ワックスに浸漬し、放冷して
製品を得た。
【００８６】本品は、徐崩性、生分解性であるため、移
植用植木鉢として好適であり、鉢をはずすことなく移植
することができるので、植え痛みがない。
【００８７】
【実施例Ｂ−１４】＜カプセル＞ 実施例Ａ−１の方法で製造した粉末状プルラン高含有物
４０重量部、ゼラチン６０重量部、グリセリン３０重量
部を混合し、これに水８０重量部を加えて約７０℃で加
熱溶解し、脱気して皮膜用溶液を得、これを用いて、常
法に従って、ビタミンＥ高含有油を内容物とした軟カプ
セルを製造した。
【００８８】本品は、ゼラチン単独カプセルとは違っ
て、ガスバリヤー性が高く、ビタミンＥを安定に保持で
きるのみならず、水系で速溶性の特長を有する。
【００８９】
【実施例Ｂ−１５】＜肥料杭＞ 配合肥料（Ｎ＝１４％、Ｐ２Ｏ５＝８％、Ｋ２Ｏ＝１２
％）、実施例Ａ−１の方法で製造した粉末状プルラン高
含有物、硫酸カルシウム、水の割合を重量でそれぞれ７
０、１０、１５、５とし、充分混合した後、押出機（Ｌ
／Ｄ＝２０、圧縮比＝１．８、ダイスの口径＝３０ｍ
ｍ）で８０℃に加熱して肥料杭を製造した。
【００９０】本品は、肥料用容器が不要で取扱い容易で
あり、全層施肥に適した強度を有し、更に、配合割合を
変えることにより肥料成分の溶出速度を調節できるもの
である。また、必要ならば、この肥料杭に植物ホルモ
ン、農業用薬剤および土壌改良剤などの混合も容易であ
る。
【００９１】
【実施例Ｂ−１６】＜タバコ成形物＞ 黄色種の粉末タバコ原料５０重量部に、実施例Ａ−２の
方法で製造した粉末状プルラン高含有物の２ｗ／ｗ％水
溶液２００重量部、ラクチトール０．１重量部とを混合
して、０．２ｍｍスリットからステンレススチール製エ
ンドレスベルト上に射出し、これを赤外線乾燥して水分
１３ｗ／ｗ％のシートタバコ６５重量部を得た。
【００９２】本品は、紙巻タバコの葉組としても、葉巻
およびシガリロの中巻としても好適である。また、本品
は、タバコの各種成分の劣化を抑えるとともに、保香性
が大であり、喫煙時に異味、異臭を発生せず、香喫味は
良好であった。
【００９３】
【実施例Ｂ−１７】＜ビフィズス菌増殖促進乳酸飲料＞ 脱脂乳１０，０００重量部を８０℃で２０分間加熱殺菌
した後、４０℃に冷却し、これにスターター（乳酸菌）
３００重量部を加えて３５乃至３７℃で１０時間発酵さ
せた。次いで、これをホモゲナイズした後、異性化糖シ
ラップ４，０００重量部、砂糖２，０００重量部、実施
例Ａ−１の方法で製造した粉末状プルラン高含有物１７
０重量部を混合溶解し、７０℃に保って殺菌した。これ
を冷却した後、少量の香料を加え、ビン詰めして乳酸菌
飲料タイプのビフィズス菌増殖促進乳酸飲料を得た。
【００９４】本品は、ビフィズス菌増殖促進効果のみな
らず、食物繊維の効果も発揮でき、腸内のｐＨを下げ、
腐敗細菌の増殖を抑え、便秘を予防できる。
【００９５】
【実施例Ｂ−１８】＜低カロリーパン＞ 主材料の一部として、強力粉６重量部とアミロース１２
重量部に水を加え捏和機で混合し、これに副材料２１．
４重畳部（マーガリン６重量部、蔗糖２．５重量部、卵
６重量部、食塩０．４重量部、水６．５重量部）および
発酵源５．２重量部（ドライイースト０．８重量部、蔗
糖０．４重量部、水４重量部）を加え、適度の固さのド
ウを作り、次いで、３０℃で６０分間第一発酵を行い、
途中ガス抜きを行った。更に、主材料の残り１２重量部
（強力粉３重量部および実施例Ａ−２の方法で製造した
粉末状プルラン高含有物９重量部）を加え捏和して均一
に混合し、必要量の水を加えドウの固さを調節した。冷
蔵庫に６０分間置き第二発酵を行った。第三発酵は、３
５℃で３０分間行い、ガス抜きして成形した。更に、３
５℃で３０分間第四発酵を行った後、２１０℃のオーブ
ン中に入れ、２０分間焼いた。対照のパンは、主材料と
して強力粉３０重量部のみを用い、また、副材料の加水
を８重量部とした他は上記と同様に行った。
【００９６】パンの外相は、対照の通常パンに比べ表面
の色調はやや濃く、内相はす立よく均等な組織を示し
た。食味は、対照の通常パンとほとんど差がなく、異味
臭味のないことはいうまでもなく、多少淡白な感じがし
た。歯に対する付着は、ほとんど感ぜられず、歯切れよ
く、表皮はやや固い感じであった。
【００９７】本品は、低カロリー食品としての効果のみ
ならず、ビフィズス菌増殖促進効果、ダイェタリーファ
イバーとしての効果も発揮でき、美容、健康の維持増進
に有利に利用できる。
【００９８】
【実施例Ｂ−１９】＜練歯磨＞ 第二リン酸カルシウム４５．０重量部、実施例Ａ−３、
Ｎｏ．４の方法で製造した液状プルラン高含有物を濃度
１０ｗ／ｗ％水溶液としたもの３０．０重量部、ポリエ
チレングリコール（平均分子量１，５００）３０．０重
量部、ラウリル硫融ナトリウム１．５重量部、グリセリ
ン１７．０重量部、ポリオキシエチレン．ソルビタン．
モノラウレート０．５重量部、α−グリコシルステビオ
シド甘味料（東洋精糖株式会社製造、商品名αＧ スイ
ート）０．２重量部、防腐剤０．０５重量部を常法に従
って混合し、練歯磨を製造した。
【００９９】本品は、適度の甘味を有しており、子供用
練歯磨として好適である。また、本品は、プルラン．ポ
リエチレングリコール会合物を含有していることから、
プルラン単独使用の場合と比較して、糸洩き性、べとつ
き性のない使用し易い練歯磨である。
【０１００】
【実施例Ｂ−２０】＜パック＞ リノレン酸０．５重量部を、常法に従って、スクワラン
１．５重量部、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５
重量部、Ｌ−乳酸ナトリウム５．５重量部、グリセリン
４．０重量部、実施例Ａ−３、Ｎｏ．２の方法で製造し
た液状プルラン高含有物を濃度４０ｗ／ｗ％水溶液とし
たもの５０．０重量部、エチルアルコール１０．０重量
部および精製水３３．０重量部に均一に混合し、パック
を製造した。
【０１０１】本品は、色白剤として好適であり、シミ、
ソバカス、日焼けなどの局所性並びにアジソニスムなど
の全身性色素沈着症の治療用、予防用などの場合に有利
に利用できる。
【０１０２】
【実施例Ｂ−２１】＜シャンプー＞ 実施例Ａ−３、Ｎｏ．４の方法で製造した液状プルラン
高含有物２．５ｗ／ｗ％水溶液としたもの８０．０重量
部に、エチルアルコール１３．０重量部、グリセリン
２．０重量部、香料０．３重量部、ポリオキシエチレ
ン．ソルビタイ．モノラウレート１．５重量部を添加
し、混合溶解してシャンプーを製造した。
【０１０３】本品は、使用中の指の通りが極めて良く、
かつ、洗濯後の毛髪の手触りがしなやかで、非常に使用
感、爽快感に優れたシャンプーであった。
【０１０４】
【実施例Ｂ−２２】＜糖衣錠＞ 重量１５０ｍｇの素錠を芯剤とし、これに結晶マルチト
ール４０重量部、実施例Ａ−３、Ｎｏ．２の方法で製造
した液状プルラン高含有物を濃度１０ｗ／ｗ％水溶液と
したもの２０重量部、水１２重量部、タルク２５重量部
および酸化チタン３重量部からなる下掛け液を用いて錠
剤重量が約２３０ｍｇになるまで糖衣し、次いで、同じ
結晶マルチトール６５重量部、同じ１０ｗ／ｗ％．度の
プルラン水溶液１０重量部および水２５重量部からなる
上掛け液を用いて、糖衣し、更に、ロウ液で艶出しして
光沢のある外観の優れた糖衣錠を得た。
【０１０５】本品は、糖衣掛け時の作業性が優れている
だげでなく、耐衝撃性にも優れており、高品質を長期間
維持する。
【０１０６】
【０１０７】本品は、血漿増量剤、血流改善剤などに好
適である。
【０１０８】
【発明の効果】上記から明らかなように、本発明は、糖
質濃度１０乃至２０ｗ／ｖ％にした培養液を３０センチ
ポイズ未満に維持しつつ培養することにより、より高い
プルラン生産性の得られることを見い出し、工業的生産
に有利な分子量２５万未満のプルラン高含有物とその製
造方法並びに用途を確立するものである。
【０１０９】本発明の培養方法により得られるプルラン
高含有物の大量、安価な供給を容易にし、これを含有せ
しめて、増粘剤、コーティング剤、接着剤、成型物など
に、また、飲食物、化粧品、医薬品、更には、農林畜産
資材、紙加工資材、鉱工業資材などにその利用の道を拓
くものであり、その工業的意義は大きい。

Claims (6)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 プルラン産生能を有する微生物を、糖質
    濃度１０乃至２０ｗ／ｖ％含有する培養液を用い、培養
    液を間欠的または連続的に抜出しつつ、追加供給する培
    養液の供給速度により培養液の希釈速度を調整するか、
    または、培養液にプルランを部分的に加水分解するアミ
    ラーゼを添加するかして、培養液の粘度を３０センチポ
    イズ未満に維持しつつ培養し、培養液中にプルランを産
    生、蓄積せしめ、これを採取することを特徴とするプル
    ラン高含有物の製造方法。
  2. 【請求項２】 培養液をｐＨ４．０以下に維持しつつ培
    養することを特徴とする請求項１記載のプルラン高含有
    物の製造方法。
  3. 【請求項３】 アミラーゼが、液化型α−アミラーゼ、
    または、イソアミラーゼである請求項１または２記載の
    プルラン高含有物の製造方法。
  4. 【請求項４】 培養が連続培養である請求項１乃至３の
    いずれかに記載のプルラン高含有物の製造方法。
  5. 【請求項５】 追加供給する培養液が、微生物を予備培
    養した栄養培地である請求項１乃至４のいずれかに記載
    のプルラン高含有物の製造方法。
  6. 【請求項６】 プルラン高含有物が、平均分子量２５万
    未満のプルラン高含有物である請求項１乃至４のいずれ
    かに記載のプルラン高含有物の製造方法。
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