JP2020055858A5 - - Google Patents
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Description
したがって、好適な実施形態において、負電荷を帯びた「Eコイル」が、二重特異性ダイアボディを形成するために用いられるポリペプチドの一方に付加され、正電荷を帯びた「Kコイル」が、ダイアボディの第二のポリペプチドに付加される(図1B)。特に好適なEコイルは、配列:(EVAALEK)4[すなわち(配列番号39)EVAALEKEVAALEKEVAALEKEVAALEK]を有するだろう。特に好適なKコイルは、配列:(KVAALKE)4[すなわち(配列番号40)KVAALKEKVAALKEKVAALKEKVAALKE]を有するだろう。
好適な実施形態において、負電荷を帯びた「Eコイル」が、二重特異性ダイアボディを形成するのに用いられるポリペプチドのうちの1本に付加され、正電荷を帯びた「Kコイル」が、ダイアボディの第二のポリペプチドに付加されるだろう。
好適な実施形態において、負電荷を帯びた「Eコイル」が、二重特異性ダイアボディを形成するのに用いられるポリペプチドのうちの1本に付加され、正電荷を帯びた「Kコイル」が、ダイアボディの第二のポリペプチドに付加されるだろう。
好適な実施形態において、負電荷を帯びた「Eコイル」が、二重特異性ダイアボディを形成するのに用いられるポリペプチドのうちの1本に付加され、正電荷を帯びた「Kコイル」が、ダイアボディの第二のポリペプチドに付加されるだろう。
好適な実施形態において、負電荷を帯びた「Eコイル」が、二重特異性ダイアボディを形成するのに用いられるポリペプチドのうちの1本に付加され、正電荷を帯びた「Kコイル」が、ダイアボディの第二のポリペプチドに付加されるだろう。
好適な実施形態において、負電荷を帯びた「Eコイル」が、二重特異性ダイアボディを形成するのに用いられるポリペプチドのうちの1本に付加され、正電荷を帯びた「Kコイル」が、ダイアボディの第二のポリペプチドに付加されるだろう。
Claims (21)
- 免疫エフェクター細胞の活性化受容体のエピトープ及びウイルス感染した細胞が発現する抗原のエピトープと結合する二重特異性ダイアボディ分子であって、前記二重特異性ダイアボディ分子は少なくとも二本のポリペプチド鎖を含む共有結合性複合体であり、
(A)前記免疫エフェクター細胞の活性化受容体のエピトープと免疫特異的に結合することができる第一エピトープ結合ドメインであり、前記免疫エフェクター細胞はT細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、顆粒球、または樹状細胞である、第一エピトープ結合ドメイン、及び
(B)前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原のエピトープと免疫特異的に結合することができる第二エピトープ結合ドメインであり、前記ウイルスは、EBV、HSV、CMV、HIV、HBV、HCV、HPV、またはインフルエンザウイルスであり、前記抗原は、前記ウイルス上で前記二重特異性ダイアボディ分子により検出される前記抗原のレベルよりも高いレベルで、前記ウイルス感染した前記細胞上に検出可能に存在する、第二エピトープ結合ドメイン
を含む、二重特異性ダイアボディ分子。 - 前記細胞は、前記ウイルスに潜在的に感染している、請求項1に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- 前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、LMP−1、LMP−2、インフルエンザウイルスM2タンパク質、HIVenvタンパク質、HPVE6、及びHPVE7からなる群より選択される、請求項1または2に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- 前記免疫エフェクター細胞の前記エピトープは、CD3エピトープ、CD4エピトープ、CD8エピトープ、CD2エピトープ、CD16エピトープ、TCRエピトープまたはNKG2Dエピトープである、請求項1乃至3の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- 前記第一エピトープ結合ドメインは、CD3抗体、CD4抗体、CD8抗体、CD2抗体、CD16抗体、TCR抗体またはNKG2D抗体からのエピトープ結合ドメインである、請求項1乃至4の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- 前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、前記感染した細胞に前記二重特異性ダイアボディ分子により検出可能に存在するが、前記ウイルス上で前記二重特異性ダイアボディ分子により検出されない、請求項1乃至5の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- (1)前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、前記ウイルス上で前記二重特異性ダイアボディ分子により検出される前記抗原のレベルよりも少なくとも2倍高いレベルで、前記細胞上に検出可能に存在する;又は、
(2)前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、前記ウイルス上で前記二重特異性ダイアボディ分子により検出される前記抗原のレベルよりも少なくとも5倍高いレベルで、前記細胞上に検出可能に存在する;又は、
(3)前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、前記ウイルス上で前記二重特異性ダイアボディ分子により検出される前記抗原のレベルよりも少なくとも10倍高いレベルで、前記細胞上に検出可能に存在する;又は、
(4)前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、前記ウイルス上で前記二重特異性ダイアボディ分子により検出される前記抗原のレベルよりも少なくとも100倍高いレベルで、前記細胞上に検出可能に存在する、
請求項1乃至6の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。 - 前記ウイルス感染した前記細胞が発現する前記抗原は、前記感染した細胞に前記二重特異性ダイアボディ分子により検出可能に存在するが、前記ウイルスに感染していない細胞では前記二重特異性ダイアボディ分子により検出されない、請求項1乃至7の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- 前記分子はFcドメインまたはその一部分を含む、請求項1乃至8の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。
- 前記分子は三本のポリペプチド鎖を含み、
(A)第1のポリペプチド鎖は、N末端からC末端方向に、
(i)エピトープ(1)に特異的な第一免疫グロブリンの軽鎖可変ドメインの結合領域(VL1)を含むドメイン(A);
(ii)エピトープ(2)に特異的な第二免疫グロブリンの重鎖可変ドメインの結合領域(VH2)を含むドメイン(B);および
(iii)システイン残基とEコイル又はKコイルとを含むドメイン(C);
を含み、
(B)第2のポリペプチド鎖は、N末端からC末端方向に、
(i)エピトープ(2)に特異的な第二免疫グロブリンの軽鎖可変ドメインの結合領域(VL2)を含むドメイン(D);
(ii)エピトープ(1)に特異的な第一免疫グロブリンの重鎖可変ドメインの結合領域(VH1)を含むドメイン(E);
(iii)システイン残基と、前記第1のポリペプチド鎖がEコイルを有する場合はKコイル、前記第1のポリペプチド鎖がKコイルを有する場合はEコイルとを含むドメイン(F);および
(iv)FC領域のCH2−CH3領域
を含み、
(C)第3のポリペプチド鎖は、FC領域のCH2−CH3領域を含み、
(D)(i)前記ドメイン(A)及び(B)は互いに会合してエピトープ結合ドメインを形成することはなく、
(ii)前記ドメイン(D)及び(E)は互いに会合してエピトープ結合ドメインを形成することはなく、
(iii)前記ドメイン(A)及び(E)は会合して前記エピトープ(1)と結合するエピトープ結合ドメインを形成し、前記ドメイン(B)及び(D)は会合して前記エピトープ(2)と結合するエピトープ結合ドメインを形成し、
(a)前記エピトープ(1)は免疫エフェクター細胞の活性化受容体のエピトープであり、前記エピトープ(2)はウイルス感染した細胞が発現する抗原のエピトープであり、又は
(b)前記エピトープ(1)はウイルス感染した細胞が発現する抗原のエピトープであり、前記エピトープ(2)は免疫エフェクター細胞の活性化受容体のエピトープであり、
(iv)前記ドメイン(C)及び(F)はジスルフィド結合によって共有結合で会合する、請求項1乃至9の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。 - (A)前記活性化受容体はCD3であり、前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原はEBV LMP−1である、または、
(B)前記活性化受容体はTCRであり、前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原はEBV LMP−2である、または、
(C)前記活性化受容体はCD3であり、前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原はMHCクラスIに関するHPV E6である、または、
(D)前記活性化受容体はCD16であり、前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原はHIVenvである、または、
(E)前記活性化受容体はCD3であり、前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原はHIVgp120である、または、
(F)前記活性化受容体はCD3であり、前記ウイルス感染した細胞が発現する抗原はHIVenvである、
請求項1乃至10のいずれか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。 - 第1及び第2のポリペプチド鎖を含む二重特異性ダイアボディ分子であって、
I 前記第1のポリペプチド鎖は、N末端からC末端方向に、
(i)HIVエピトープに特異的な第一免疫グロブリンの軽鎖可変ドメインの結合領域(VL1)を含むドメイン(A);
(ii)CD3エピトープに特異的な第二免疫グロブリンの重鎖可変ドメインの結合領域(VH2)を含むドメイン(B);及び
(iii)ドメイン(C);
を含み、
II 前記第2のポリペプチド鎖は、N末端からC末端方向に、
(i)前記CD3エピトープに特異的な第二免疫グロブリンの軽鎖可変ドメインの結合領域(VL2)を含むドメイン(D);
(ii)前記HIVエピトープに特異的な第一免疫グロブリンの重鎖可変ドメインの結合領域(VH1)を含むドメイン(E);
(iii)ドメイン(F);及び
(iv)FC領域のCH2−CH3領域;
を含み、
(1)前記ドメイン(A)及び(B)は互いに会合してエピトープ結合ドメインを形成することはなく;
(2)前記ドメイン(D)及び(E)は互いに会合してエピトープ結合ドメインを形成することはなく;
(3)前記ドメイン(A)及び(E)は会合して前記HIVエピトープと結合するエピトープ結合ドメインを形成し、前記ドメイン(B)及び(D)は会合して前記CD3エピトープと結合するエピトープ結合ドメインを形成し、
(4)前記ドメイン(C)及び(F)は共有結合で会合し、
(5)(i)前記VL1は抗HIV抗体A32の軽鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含み;
(ii)前記VH1は抗HIV抗体A32の重鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含み;
(iii)前記VL2はヒト化抗CD3抗体2の軽鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含み;及び
(iv)前記VH2は前記ヒト化抗CD3抗体2の重鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含む;
、二重特異性ダイアボディ分子。 - (i)抗HIV抗体A32の軽鎖可変ドメイン(配列番号46の残基1−110);及び
(ii)前記抗HIV抗体A32の重鎖可変ドメイン(配列番号47の残基119−241);及び
(iii)ヒト化抗CD3抗体2の軽鎖可変ドメイン(配列番号47の残基1−110);及び
(iv)前記ヒト化抗CD3抗体2の重鎖可変ドメイン(配列番号46の残基119−243);
を含む、請求項12に記載の二重特異性ダイアボディ分子。 - 第1及び第2のポリペプチド鎖を含む二重特異性ダイアボディ分子であって、
I 前記第1のポリペプチド鎖は、N末端からC末端方向に、
(i)HIVエピトープに特異的な第一免疫グロブリンの軽鎖可変ドメインの結合領域(VL1)を含むドメイン(A);
(ii)CD3エピトープに特異的な第二免疫グロブリンの重鎖可変ドメインの結合領域(VH2)を含むドメイン(B);及び
(iii)ドメイン(C);
を含み、
II 前記第2のポリペプチド鎖は、N末端からC末端方向に、
(i)前記CD3エピトープに特異的な第二免疫グロブリンの軽鎖可変ドメインの結合領域(VL2)を含むドメイン(D);
(ii)前記HIVエピトープに特異的な第一免疫グロブリンの重鎖可変ドメインの結合領域(VH1)を含むドメイン(E);
(iii)ドメイン(F);及び
(iv)FC領域のCH2−CH3領域;
を含み、
(1)前記ドメイン(A)及び(B)は互いに会合してエピトープ結合ドメインを形成することはなく;
(2)前記ドメイン(D)及び(E)は互いに会合してエピトープ結合ドメインを形成することはなく;
(3)前記ドメイン(A)及び(E)は会合して前記HIVエピトープと結合するエピトープ結合ドメインを形成し、前記ドメイン(B)及び(D)は会合して前記CD3エピトープと結合するエピトープ結合ドメインを形成し、
(4)前記ドメイン(C)及び(F)は共有結合で会合し、
(5)(i)前記VL1は抗HIV抗体7B2の軽鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含み;
(ii)前記VH1は抗HIV抗体7B2の重鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含み;
(iii)前記VL2はヒト化抗CD3抗体2の軽鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含み;及び
(iv)前記VH2は前記ヒト化抗CD3抗体2の重鎖可変ドメインのCDR1、CDR2及びCDR3を含む;
、二重特異性ダイアボディ分子。 - (i)抗HIV抗体7B2の軽鎖可変ドメイン(配列番号48の残基1−113);
(ii)前記抗HIV抗体7B2の重鎖可変ドメイン(配列番号49の残基119−244);
(iii)ヒト化抗CD3抗体2の軽鎖可変ドメイン(配列番号49の残基1−110);及び
(iv)前記ヒト化抗CD3抗体2の重鎖可変ドメイン(配列番号48の残基122−246);
を含む、請求項14に記載の二重特異性ダイアボディ分子。 - (i)前記ドメイン(C)はシステイン残基とEコイル又はKコイルとを含む;及び
(ii)前記ドメイン(F)はシステイン残基とKコイル(前記第1のポリペプチド鎖がEコイルを有する場合)又はEコイル(前記第1のポリペプチド鎖がKコイルを有する場合)を含む;
、請求項12乃至15の何れか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子。 - 請求項1乃至16のいずれか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子および薬学的に許容可能なキャリアを含む薬学的組成物。
- 潜在性ウイルス感染症、持続性ウイルス感染症又は不活性ウイルス感染症の治療のための薬剤の製造における、請求項1乃至16のいずれか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子、又は請求項17に記載の薬学的組成物の使用。
- ウイルスゲノムを保有する細胞又はウイルスタンパク質を発現する細胞を死滅させるための薬剤の製造における、請求項1乃至16のいずれか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子、又は請求項17に記載の薬学的組成物の使用。
- 潜在性ウイルス感染症、持続性ウイルス感染症又は不活性ウイルス感染症の治療に使用される請求項1乃至16のいずれか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子を含む組成物。
- ウイルスゲノムを保有する細胞又はウイルスタンパク質を発現する細胞の死滅に使用される請求項1乃至16のいずれか1項に記載の二重特異性ダイアボディ分子を含む組成物。
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